[go: up one dir, main page]

SK83895A3 - Oligonucleotides for inhibition of expression of izoprenyl-proteineous transferases - Google Patents

Oligonucleotides for inhibition of expression of izoprenyl-proteineous transferases Download PDF

Info

Publication number
SK83895A3
SK83895A3 SK838-95A SK83895A SK83895A3 SK 83895 A3 SK83895 A3 SK 83895A3 SK 83895 A SK83895 A SK 83895A SK 83895 A3 SK83895 A3 SK 83895A3
Authority
SK
Slovakia
Prior art keywords
seq
oligonucleotide
antisense
oligonucleotides
nucleotide
Prior art date
Application number
SK838-95A
Other languages
English (en)
Inventor
Soudhir Colote
Eduardo Pirotzky
Original Assignee
Scras
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Scras filed Critical Scras
Publication of SK83895A3 publication Critical patent/SK83895A3/sk

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7088—Compounds having three or more nucleosides or nucleotides
    • A61K31/713—Double-stranded nucleic acids or oligonucleotides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • C12N15/113—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing
    • C12N15/1137—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing against enzymes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y205/00—Transferases transferring alkyl or aryl groups, other than methyl groups (2.5)
    • C12Y205/01—Transferases transferring alkyl or aryl groups, other than methyl groups (2.5) transferring alkyl or aryl groups, other than methyl groups (2.5.1)
    • C12Y205/01029—Geranylgeranyl diphosphate synthase (2.5.1.29)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Description

Oblasť techniky
Tento vynález sa týka ktoré sú vhodné na inhibíciu oligonukleotidov a ich derivátov, expresie izopropenyl-proteín transferáz , terapeutických prostriedkov, obsahujúcich takéto zlúčeniny, a použitia takýchto prostriedkov z oligonukleotidov na ošetrovanie alebo terapiu chorôb ľudského alebo zvieracieho teľa, vyvolaných abnormálnou a/alebo nekontrolovanou proliferáciou buniek.
Doterajší stav techniky
Akýkoľvek živý organizmus, či už jednobunečný alebo viacbunečný, je charakterizovaný svojou schopnosťou rozmnožovať sa, javom vyžadujúcim replikáciu z dedičných materiálov (DNA a podobne) a tiež distribúciu replikovanej DNA medzi dve dcérske bunky. Existuje vysoký počet veľmi rôznorodých molekúl s mitogénnymi aktivitami, ktoré pôsobia spôsobom špecifickým pre bUnku. Signálne molekuly, alebo rastové faktory sú polypeptidového typu, ktoré sa vo veľmi nízkom množstve a po interakcii s cieľovými bunkami, môžu vyvolať kaskádu udalostí, ktoré skončia v replikácii DNA a mitóze.
Rastové faktory nepôsobia priamo na bunečný cyklus, ale interakciou a aktiváciou umiestnených na plazmovej mechanizmus spúšťa reťazovú radu transmembránových receptorov membráne cieľových buniek. Tento reakciu v bunkách, ktorá vedie k mitóze. Tieto aktivované intracelulárne prípady sa môžu meniť od jedného bunkového typu k druhému pre rovnaký receptor.
Jedným z prvých stupňov viazania rastového faktora ku svojmu
I receptoru je aktivácia proteínu kinázy a fosforylácia proteínov.
Jedným z proteínov vytvárajúcich túto signálnu prevádzajúcu (transdukujúcu) väzbu je proteín ras, 21-kDa, proteín modifikovaný prenylačným mechanizmom. Ako prenylácia sa označuje post-translačná modifikácia, ktorá zahŕňa kovalentnú väzbu izoprenylových zoskupení k cysteínu z radu proteínov. Tak izoprenylácia sa môže prenášať z farnezylových zoskupení alebo geranylgeranylových zoskupení na cielové proteíny. Táto modifikácia dovoľuje určitým proteínom, aby sa sami viazali na akčnej strane membrány. Jedným z dôsledkov inhibície tejto prenylácie je zabránenie transdukcie mimobunečných signálov na jadrá, a preto bunečnej proliferácii.
Teraz sú charakterizované tri typy enzýmov, ktoré katalyzujú túto modifikáciu : farnezyl-proteín transferáza, geranylgeranyl-proteín transferáza typu 1 a geranylgeranyl-proteín transferáza typu 2. Všetky enzýmy sa nachádzajú súhlasne v sekvenciách umiestnených na konci proteínu zakončenom karboxyskupinou.
Jedným z dôsledkov blokovania syntézy týchto enzýmov je blokácia hlavných signálnych prenosových ciest, ktorá vedie k proliferácii buniek.
Väčšina klasických aktívnych zložiek sa zúčastní interakcie s proteínmi translačným produktom genetickej informácie, a inhibuje ich funkcie. Tento vynález je zameraný na moderný terapeutický prístup, na antimediátorovú (antisenze) stratégiu. Tento prístup je určený pre selektívnu moduláciu expresie génu selektívnym spojením nukleotidového reťazca (oligonukletidov) s komplementárnou sekvenciou na mediátorové alebo premediátorové RNA alebo DNA, a preto inhybuje syntézu zodpovedajúceho proteínu. Použité molekuly podliehajú interakcii priamo na genetickej informačnej kaskáde.
Komplementárne oligonukleotidy k transkripčným produktom sú označené a/alebo sa vzťahujú k antimediátorovým oligonukleotidom. Oligonukleotidy, ktoré majú rovnaké sekvencie ako transkripčné produkty sa označujú ako mediátorové oligonukleotidy. Pôvodne boli tieto zlúčeniny racionálne určené na inhibiciu tvorby génových produktov odstránením zodpovedajúcej mediátorovéj
RNA cestou RNAzy H sprostredkovanou mechanizmom hydrolýzy. Skoro vyšlo na povrch, že mechanizmus účinku týchto antimediátorových oligonukleotidov nie je tak jednoduchý. Tieto oligonukleotidy by podliehali interakcii z rozdielnym počtom nenukleových kyselín v cieľových bunkách. Tieto oligonukleotidy by tiež podliehali interakcii s génom, pri vzniku trojnásobne dvojskrutkovej štruktúry a inhibovali by tvorbu transkripčných produktov. Oligonukleotidy by podliehali interakcii s intron-exonovými spojeniami premediátorovej RNA a tak boli na prekážku správnemu strihu transkripčného produktu. Oligonukleotidy by mohli hybridizovat s mRNA v cytoplazme za tvorby duplexu RNA-DNA, ktorý sa rýchlo degraduje enzýmom RNAzou H alebo chráneným ribosomovým komplexom z prechádzania mRNA a tak sa blokuje translácia. Oligonukleotidy, obzvlášť modifikované oligonukleotidy by podliehali interakcii s radom bunečných zložiek, ako sú proteíny. Tieto interakcie by boli sekvenčne špecifické (napríklad transkripčné faktory). Alebi by boli nesekvenčne špecifické (napríklad rastové faktory). Tak oligonukleotidy (SEQ ID č. 1-36) by privodili zastavenie proliferácie cez ľubovolný z vyššie uvedených mechanizmov alebo ich kombinácií.
Podstata vynálezu
Tento vynález je zameraný obzvlášť na použitie antimediátorových oligonukleotidov na blokovanie syntézy enzýmov, ako je uvedené vyššie. Je navrhnuté ich použitie ako antiproliferačných prostriedkov pri kardiovaskulárnych chorobách, v oblasti rakoviny, dermatológie, určitých vírusových infekcií a iných patologických stavov, ktoré zahrňujú proliferáciu buniek.
Pri antimediátorovej metodológii sa môžu používať antimediátorové oligonuleotidy alebo antimediátorová RNA. Antimediátorová oligonukleotidová metodológia je odlišná od antimediátorovej RNA metodológie. V tomto poslednom prípade sa DNA segment génu zavádza do vektorovej DNA s obrátenou orientáciou k normálnemu zmyslu a tak v priebehu trankripcie tohto vektora sa jeden z reťazcov DNA replikuje v RNA. Inzercia reverzného fragmentu génu vedie k syntéze in situ RNA, ktorá je komplementárna k normálnej mRNA syntéze samotnou bunkou. Táto RNA, označovaná ako antimediátorová RNA, môže hybridizovať na normálne expresívne mRNA a tak inhiboať transláciu cieľového proteínu. Takúto metódu použil Prendergast a kol.(Celí Growth and Differenciation 4, 707-713 /september 1993/), k ohodnoteniu úlohy farnezyl-proteín transferázy. cDNA pre β podjednotku tejto farnezyl-proteín transferázy bola klonovaná a čistená, pričom cieľové bunky pomocou génového inžinierstva viedli k expresii antimetiátorových molekúl RNA.
Prístup k antimediátorovej RNA je zvlášť vhodný ako mechanistický prostriedok na objasnenie úlohy proteínu v bunke a nakoniec ako terapeutického prostriedku, za použitia dokumentov o terapii vysoko kultivovaným génom, zatiaľ čo antimediátorové oligonukleotidy sú omnoho príťažlivejšie ako farmaceutické prostriedky a sú pokladané úradnými orgánmi za klasické chemické entity. Okrem toho sa oligonukleotidy môžu ľahko syntetizovať v hmote podľa metód klasickej chémie, zatiaľ čo antimediátorové molekuly RNA sa produkujú v biologickom systéme a vyskytuje sa mnoho prekážok pre ich výrobu v priemyselnom merítku.
Spôsob dávkovania farnezyl-proteín transferáz sa dá zistiť v európskom patentovom spise č. 456 180 a zvlášť týmto spôsobom sa dá merať aktivita potenciálneho inhibítora farnezyl-proteín transferáz. V žiadnom prípade však takáto metóda neumožňuje definovať štruktúru nového potenciálneho inhibítora farnezyl-proteín tranferáz, ani tento patentový spis nepopisuje nejakú molekulu, ktorá by bola príbuzná tomuto vználezu.
Vynález sa týka oligonukleotidov (čintimediátora alebo mediátora), ktoré selektívne hybridizujú s génom alebo transkripčnými produktami pre podjednotky izoprenyl-proteín transferáz a výhodne pre podjednotky a a/alebo β izoprenyl-proteín transferáz. Oligonukleotid môže obsahovať od 2 do 50 jednotiek a výhodne od 8 do 35 jednotiek. Zvlášť výhodne oligonukleotid obsahuje od 10 do 25 jednotiek.
Oligonukleotidy podľa tohto vynálezu sa môžu syntetizovať niektorým zo známych chemických spôsobov syntézy oligonukleotidov. Oligonukleotidy sa najvýhodnejšie vyrábajú za použitia niektorého z priemyselne dostupných automatizovaných syntetizátorov nukleových kyselín. Jedným zo spôsobov syntézy oligonukleotidov je β-kyanetylfosforamidátová metóda, ktorú opísal S.L.Beaucage a kol. (Tet. Let. 22, 1859-1862 /1981/).
Vynález tiež poskytuje deriváty takých oligonukleotidov, to znamená oligonukleotidy, v ktorých kostra je modifikovaná na celej dĺžke oligonukleotidu alebo v jednej alebo v obidvoch z polôh 5'a 3'. V skutočnosti oligonukleotidy sú citlivé k enzýmom, nukleázam, ktoré ich hydrolyzujú na nukleotidy. Oligonukleotidy sa stávajú rezistentnými k nukleázam modifikáciou napríklad chemickej povahy svojho cukru alebo internukleotidovými väzbami fosfát-cukor. Fosfodiesterový reťazec tak môže byť nahradený napríklad fosfortioátovým, fosforditioátovým, metylfosfonátovým, fosforamidátovým, fosfoetyltriesterovým, butylamidátovým, piperazidátovým alebo morofidátovým reťazcom. Iné typy modifikácií sa môžu vykonávať po celej dĺžke oligonukleotidu alebo v polohách 5' a/alebo 3' oligonukleotidov na dosiahnutie väčšej rezistencie oligonukleotidov v biologickom okolí. Taktiež fosfátové väzby medzi nukleotidmi sa môžu nahradiť amidovými väzbami (peptidové nukleové kyseliny). Taktiež transmembránový priechod oligonukleotidu môže byť podporovaný na dosiahnutie neskoršej väčšej hydrofóbnosti. To sa dá dosiahnuť napríklad pripojením hydrofóbnych substituentov, ako cholesterôvého alebo aromatického zoskupenia mohli byť zavedené oligonukleotidu. Taktiež alebo polyméru. Modifikované bázy by čiastočne alebo po celej dĺžke konformačné modifikované nukleotidy (napríklad oligonukleotidy s α-anomérovou konformáciou) rezistentné k nukleáze alebo so zvýšenými hybridizačnými alebo intracelulárnymi absorpčnými vlastnosťami by sa mohli zaviesť čiastočne alebo po celej dĺžke oligonukleotidu. Výraz derivát
J zahrňuje nukleotid modifikovaný jedným zo spôsobov opísaných vyššie alebo niektorým iným spôsobom, ktorý je dobre známi odborníkovi v odbore.
Výhodné oligonukleotidy podľa tohto vynálezu sú oligonukleotidy so sekvenciami SEQ ID č. 1 až SEQ ID č. 36. Tieto kompelementárne sekvencie alebo mediátorové oligonukleotidy podľa tohto vynálezu sa taktiež môžu používať.
Tento vynález ďalej poskytuje oligonukleotidy, ktoré zahrňujú aspoň časť jednej zo sekvencií vybraných zo SEQ ID č. 1 až SEQ ID č. 36.
Vynález ďalej zahrňuje farmaceutické prostriedky, ktoré obsahujú ako účinnú látku aspoň jeden antimediátorový oligonukleotid podľa tohto vynálezu v zmesi s farmaceutický prijateľným riedidlom a/alebo nosnou látkou vhodnou pre zvolený spôsob podania.
Využiteľnosť
Farmaceutické prostriedky sa môžu podávať topickým, systémovým alebo lokálnym ošetrením a môžu mať formu kvapaliny pre injekcie, lipozómu, prostriedku s protrahovaným účinkom, gélu, masti pre lokálne použitie alebo inú prijateľnú formu pre zvolený spôsob podávania.
Konečne vynález poskytuje použitie prostriedku podľa tohto vynálezu pri spôsobe ošetrovania alebo terapii ľudského alebo zvieracieho tela, pri ktorom je proliferácia buniek abnormálna a/alebo nekontrolovaná.
Príklady uskutočnenia vynálezu
Ďalej uvedené príklady ilustrujú tento vynález.
Príklad 1
I
Účinok antimediácie na proliferáciu hladkého svalstva u krysy
Bunky hladkého svalstva z aorty samičích krýs kmeňa Wistar sa izolujú enzymatickým digerovanim (kolagenáza a elastáza) a kultivujú sa v prítomnosti prostredia DMEM, 10 % fetálneho telacieho séra (FCS), 2 mmol glutamínu, 50 jedn./ml penicilínu a 50 μg/ml streptomycínu. Bunky hladkého svalstva sa používajú medzi 3. a 7. pasážou v doskách s 24 jamkami.
Po 3 dňoch kultivácie sa bunky izolujú v sére za 72 hodín. Bunky sa potom stimulujú (alebo nestimulujú) 1 % sérom alebo 5 ng/ml bFGF (základný fibroplastový rastový faktor) alebo sa spracujú súčasne s látkami podlá tohto vynálezu v koncentrácii 10-5 mol alebo bez nich v priebehu 24 hodín. Štyri hodiny pred koncom inkubácie sa bunky označia tritiovaným tymidínom (s aktivitou 3,7.10-4 s-1.ml-1). Inkorporácia sa zastaví pridaním 5% TCA za 10 minút a bunky sa potom spracujú do homogénneho stavu s 500 μΐ 5-normálneho roztoku hydroxidu sodného. Alikvóty o objeme 400 ml sa odoberú a rozdelia do scintilačných nádob, ktoré obsahujú 400 μΐ O,5-normálnej kyseliny chlorovodíkovej a 10 ml Instagelu.
Aktivity oligonukleotidov sa stanovujú meraním proliferácie buniek a vyjadrujú sa v percentách. Získané výsledky sú uvedené v nasledujúcej tabulke.
% proliferácie bunky nestimulované bFGF
Kontrolné ! stanovenie 100 100
SEQ ID č. 1 38 37
SEQ ID č. 2 35 40
SEQ ID č. 3 75 90
SEQ ID č. 4 114 100
SEQ ID č. 5 24 13
SEQ ID č. 6 49 70
SEQ ID č. 7 40 40
SEQ ID č. 8 119 70
SEQ ID č. 21 88 100
Pokračovanie tabuľky:
% proliferácie bunky bFGF _______________________nestimulované__ Kontrolné stanovenie
SEQ ID č. 22 89 86
SEQ ID Č. 23 58 59
SEQ ID č. 30 121 225
SEQ ID č. 31 103 111
SEQ ID č. 32 111 204
SEQ ID č. 33 9 2
SEQ ID č. 34 10 2
SEQ ID č. 35 13 2
SEO ID č. 36 12 2
Príklad 2
Štúdia dávky a odozvy na určenie účinnosti antimediátora na proliferáciu hladkého svalstva u krysy
Experimentálny pracovný postup je identický ako je opísaný v príklade 1. Bunky sa spracujú so zlúčeninami podľa tohto vynálezu v koncentráciách 10-9 mol, 10-8 mol, 10-7 mol, 10-6 mol a 10-5 mol.
Koncentrácia 0 % proliferácie
10 9mol 10-8mol 10-7mol 10 6mol 10_5mol
SEQ ID č.l 100 99 108 107 64 25
SEQ ID č.2 100 86 81 90 50 14
SEQ ID Č.5 100 95 80 100 66 20
SEQ ID č.6 100 87 69 84 48 20
SEQ ID Č.7 100 102 98 96 59 28
Príklad 3
Veľkosť účinku na biologickú aktivitu antimediátorových oligonukleotidov in vitro
Experimentálny pracovný postup je idetický ako je opísaný v príklade 1. Bunky sa spracujú so .zlúčeninami podľa tohto vynálezu.
% inhibície
Koncentrácia bunky (μπιοί) nestimulované bFGF
Kontrolné stanovenie - 0 0
SEQ ID č. 5 10 76 87
SEQ ID č.30 10 -21 -125
SEQ ID Č.31 10 -3 -11
SEQ ID č.32 10 -11 -104
SEQ ID č. 2 1 33 4
SEQ ID č.33 1 87 85
SEQ ID č.34 1 83 89
SEQ ID č.35 1 81 89
SEQ ID č.36 1 85 89
Príklad 4
Antiproliferačná štúdia antimediátorových oligonukleotidov in vivo na angioplastickom modele (krysa alebo králik)
Samčie normotenzívne krysy kmeňa Wistar alebo samčí normotenzívny králičí kmeňa New-Zealand sa anestetizujú a narežú, aby sa odokryla iliacká artéria. Artéria sa očistí od obklopujúceho spojovacieho takniva a zavedie sa kanyla pomocou /
French Fogarty Catheter. Balónik sa nafúkne vzduchom na rozšírenie artérie a pohybuje sa ním trikrát hore a dole, na vyvolanie deendotelializujúceho poškodenia.
Oligonukleotid rozpustený v 25% pluronového gélu sa aplikuje bezprostredne na okolie vystavené oblasti artérie.Otvorené rany sa uzatvoria a zvieratá sa usmrtia po 21 dni. Vykoná sa histomorfometrická analýza časti deendotelializovanej artérie a zmerajú sa intimálne a mediálne oblasti.
Percento proliferácie sa stano.vi ako pomer intimálnej oblasti k súčtu inimálnej a mediálnej oblasti.
Tabulka 1
Angioplastický model na králikovi Koncentrácia ^g) % proliferácie
Kontrolné stanovenie 33,6 ± 8,8
Placebo (plurónový gel F127) 31,7 + 5,9
SEQ ID č. 2 200
+ +
SEQ ID č. 5 200 16,5 + 4,8
Tabulka 2
Angioplastický model na kryse
Koncentrácia (p.g) % preoliferácie
Kontrolné stanovenie 46,71 + 4,35
Placebo • (plurónový gel F127) 45,20 + 3,99
SEQ ID č. 2 200 28,63 + 4,51
SEQ ID č. 2 (mediátor) 200 26,92 + 3,40
SEQ ID č. 5 200 34,99 + 3,06
SEQ ID č. 2 (mediátor) 200 38,37 + 2,54
Ako je obvyklé v celom popise, výraz SEQ ID (mediátor) označuje koplementárnu oligonukleotidovú sekvenciu z
I oligonukleotidovej sekvencie SEQ ID.
Príklad 5
a) Účinok in vitro mediátorových a antimediátorových oligonukleotidov pre farnezyl-transferázu na C6 krysích bunkách gliómu
Bunky sa vysejú pri hustote 5000 buniek na misku a inkubujú sa v prostredí doplnenom 5 % konského séra a 2,5 % fetálneho teľacieho séra. 0 24 hodín neskôr sa prostredie nahradí jedným jednoduchým sérom s lipofektínom a rozdielnymi oligonukleotidmi o koncentrácii 5 μπιοί na vykonávanú transfekciu. Po 5 hodinách inkubácie sa prostredie nahradí normálnym prostredím, ktoré obsahuje 5 % konského séra a 2,5 % fetálneho teľacieho séra. V inkubácii sa potom pokračuje počas 72 hodín pri teplote 37. °C. Proliferácia buniek sa hodnotí spočítaním buniek po tripsinizácii monovrstvy za použitia počítača Coulter Counter model ZM.
Deň 1
Deň 2
Kontrolné stanovenie 267 000 ± 9 900 2 080 000 + 28 700
SEQ ID Č. 5 138 000 ± 4 500 1 090 000 + 10 400
SEQ ID č · 5 (mediátor) 288 500 ±43 700 2 040 000 + 25 200
SEQ ID č. 2 220 000 ±12 600 1 990 000 + 17 500
SEQ ID č. 2 (mediátor) 157 300 ±11 400 1 150 000 + 57 500
b) Časový priebeh účinku antimediátorového oligonukleotidu na α-podjednotku farnezyl-transferázy
Bunky sa spracujú ako je uvedené vyššie a spočítanie buniek sa vykoná na súbežných vzorkách kontrolnej misky a misky ošetrenej oligonukleotidmi v dňoch 3, 7 a 14. Hodnota p je menšia ako 0,05 % vo všetkých 3 dňoch prebiehajúceho experimentu.
Deň Kontrolné stanovenie SEQ ID č. 5 (5 μιηοΐ) (Počet buniek) (Počet buniek)
0 5 000 5 000
3 950 000 350 000
7 2 100 000 600 000
14 3 750 000 1 350 000
Príklad 6
Antiproliferačné štúdie na glioblastóme u krysy
a) Účinok ex vivo antimediátorových oligonukleotidov na schopnosť tvoriť nádory na C6 gliómových bunkách
Bunky sa ošetria ako je opísané vyššie. Za 24 hodín po transfekcii s 5 μιηοΐ oligonukleotidov α-podjednotky pre farnezyl-transferázu sa neošetrené a ošetrené bunky intracerebrálne naočkujú samičím krysám kmeňa Sprague-Dawley, starým 7 až 8 týždňov, o hmotnosti približne 180 až 200 g. Zieratá sa anestetizujú i.p. injekciou 1,5 mg/kg telesnej hmotnosti xylazinom a potom i.p. injekciou 5 mg/kg ketamínu, po 10 minútach. l,5xl05 buniek v 3 ml fyziologického roztoku pufrovaného fosfátom, kde bunky boli predtým získané trypsinizáciou, sa zavedie zvieratám stereotaxicky injekciou do lavej vazálnej ganglie 3 mm od stredovej čiary a do hĺbky 5 mm za použitia Hamiltonovej mikroinjekčnej striekačky o objeme 10 μΐ. Skôr sa pozorovalo na krysách, ktoré boli usmrtené po rade dní nasledujúcich po implantácii nádorov, že stredná doba prežitia krysy predstavovala 24 dní. Histologická analýza mozgov získaných od všetkých prežívajúcich zvierat ukazuje, že implantácia nádoru je úspešná zo 100 %. 2 hodiny pred usmrtením všetých zvierat sa inejkčne zavedie 40 mg BrdU. Zvieratá sa usmrcujú oddelením
J hlavy. Mozgy sa vyberú zo všetkých zvierat a fixujú preplachovaním 70 % etanolom počas 2 dní pri teplote 4 °C. Nádor sa stanovuje pomocou biparametrickej DNA (BrdU) cytofluorimetrickej
BrdU znamená index analýzy obidvoch mozgových hemisfér.
Kontrolné stanovenie 4,7 ± 1,9
SEQ ID č. 2 (5 μιηοΐ) 2,3 ± 0,7
SEQ ID č. 5 (1 μπιοί) 2,4 ± 0,5
b) Účinok in vivo oligonukleotidov na schopnosť tvoriť nádory na C6 gliómových bunkách
Neošetrené C6 gliómové bunky sa zachytia z kultrúry pestovanej počas 48 hodín na Petriho miskách a zavedú sa stereotaxickou injekciou do lávej hemisféry mozgu krysy, ako je opísané vyššie. Bezprostredne po injekcii buniek sa do chrbtovej oblasti umiestni Alzetovo čerpadlo, ktoré obsahuje bud expicient alebo mediálny alebo antimediálny oligonukleotid (v dostatočnom množstve pre podanie oligonukleotidu o koncentrácii 5 μιηοΐ za deň). Dodávajú sa rozdielne prostriedky do buniek v mieste injekcie, pomocou trubičky o priemere 0,5 mm. Všetky štatistické analýzy sa vykonávajú za použitia post-hoc Dunkanovho testu.
BrdU znamená index
Kontrolné stanovenie
SEQ ID č. 5 (mediátor)
SEQ ID č. 5
8,02 ± 0,24
6,82 ± 0,26
4,94 ± 0,3
Prehlad sekvencií l
(2) Informácia pre SEQ ID č. 1 (i) Sekvemčné charakteristiky :
(A) Dĺžka : 12 základných párov (B) Typ : nukleotid (C) Tvar reťazca : jednoduchý (D) Topológia : lineárna (iv) Antimediátor : ano (xi) Popis sekvencie : SEQ ID č. 1
AGAAGCCATG AT (2) Informácia pre SEQ ID č. 2 (i) Sekvemčné charakteristiky :
(A) Dĺžka : 12 základných párov (B) Typ : nukleotid (C) Tvar reťazca : jednoduchý (D) Topológia : lineárna (iv) Antimediátor : ano (xi) Popis sekvencie : SEQ ID č. 2
GGACGTGACT GT (2) Informácia pre SEQ ID č. 3 (i) Sekvemčné charakteristiky :
(A) Dĺžka : 12 základných párov (B) Typ : nukleotid (C) Tvar reťazca : jednoduchý (D) Topológia : lineárna (iv) Antimediátor : ano (xi) Popis sekvencie : SEQ ID č. 3
AAGGAGTAGC AG
I (2) Informácia pre SEQ ID č. 4 (i) Sekvemčné charakteristiky :
(A) Dĺžka : 12 základných párov (B) Typ : nukleotid (C) Tvar reťazca : jednoduchý (D) Topológia : lineárna (iv) Antimediátor : ano (xi) Popis sekvencie : SEQ ID č. 4
CAGGCAGTAG CA (2) Informácia pre SEQ ID č. 5 (i) Sekvemčné charakteristiky :
(A) Dĺžka : 12 základných párov (B) Typ : nukleotid (C) Tvar reťazca : jednoduchý (D) Topológia : lineárna (iv) Antimediátor : ano (xi) Popis sekvencie : SEQ ID č. 5
CCCGTCGTCC AT (2) Informácia pre SEQ ID č. 6 (i) Sekvemčné charakteristiky :
(A) Dĺžka : 12 základných párov (B) Typ : nukleotid (C) Tvar reťazca : jednoduchý (D) Topológia : lineárna (iv) Antimediátor : ano (xi) Popis sekvencie : SEQ ID č. 6
CTGTCCCTGT AT /
(2) Informácia pre SEQ ID č. 7
Sekvemčné charakteristiky :
(A) Dĺžka : 12 základných párov (B) Typ : nukleotid (C) Tvar reťazca : jednoduchý (D) Topológia : lineárna
Antimediátor : ano
Popis sekvencie : SEQ ID č. 7
ACTTCTCTCT CC (2) (2) (i) (iv) (xi)
Informácia pre SEQ ID č. 8 (i) Sekvemčné charakteristiky :
(A) Dĺžka : 12 základných párov (B) Typ : nukleotid (C) Tvar reťazca : jednoduchý (D) Topológia : lineárna (iv) Antimediátor : ano (xi) Popis sekvencie : SEQ ID č. 8
ACTTGGTCCT AA
Informácia pre SEQ ID č. 9 (i) Sekvemčné charakteristiky :
(A) Dĺžka : 12 základných párov (B) Typ : nukleotid (C) Tvar reťazca : jednoduchý (D) Topológia : lineárna (iv) Antimediátor : ano (xi) Popis sekvencie : SEQ ID č. 9
GCCATCATTC TG (
Informácia pre SEQ ID č. 10 (2) (i) Sekvemčné charakteristiky :
(A) Dĺžka : 12 základných párov (B) Typ : nukleotid (C) Tvar reťazca : jednoduchý (D) Topológia : lineárna (iv) Antimediátor : ano (xi) Popis sekvencie : SEQ ID č. 10
GATCTGGACC AC (2) Informácia pre SEQ ID č. 11 (i) Sekvemčné charakteristiky :
(A) Dĺžka : 12 základných párov (B) Typ : nukleotid (C) Tvar reťazca : jednoduchý (D) Topológia : lineárna (iv) Antimediátor : ano (xi) Popis sekvencie : SEQ ID č. 11
CTCAATAGCA TC (2) Informácia pre SEQ ID č. 12 (i) Sekvemčné charakteristiky :
(A) Dĺžka : 12 základných párov (B) Typ : nukleotid (C) Tvar reťazca : jednoduchý (D) Topológia : lineárna (iv) Antimediátor : ano (xi) Popis sekvencie : SEQ ID č. 12
GTTTTTGGGC TG í
(2) Informácia pre SEQ ID č. 13 (i) Sekvemčné charakteristiky :
(A) Dĺžka : 12 základných párov (B) Typ : nukleotid (C) Tvar reťazca : jednoduchý (D) Topológia : lineárna (iv) Antimediátor : ano (xi) Popis sekvencie : SEQ ID č. 13
TCTCACATCC TC (2) Informácia pre SEQ ID č. 14 (i) Sekvemčné charakteristiky :
(A) Dĺžka : 12 základných párov (B) Typ : nukleotid (C) Tvar reťazca : jednoduchý (D) Topológia : lineárna (iv) Antimediátor : ano (xi) Popis sekvencie : SEQ ID č. 14
TTGTAAGAAC TG (2) Informácia pre SEQ ID č. 15 (i) Sekvemčné charakteristiky :
(A) Dĺžka : 12 základných párov (B) Typ : nukleotid (C) Tvar reťazca : jednoduchý (D) Topológia : lineárna (iv) Antimediátor : ano (xi) Popis sekvencie : SEQ ID č. 15
GAAGTGCTTC TC i
(2) Informácia pre SEQ ID č. 16 (i) Sekvemčné charakteristiky :
(A) Dĺžka : 12 základných párov (B) Typ : nukleotid (C) Tvar reťazca : jednoduchý (D) Topológia : lineárna (iv) Antimediátor : ano (xi) Popis sekvencie : SEQ ID č. 16
GCCTCTTTTC AG (2) Informácia pre SEQ ID č. 17 (i) Sekvemčné charakteristiky :
(A) Dĺžka : 12 základných párov (B) Typ : nukleotid (C) Tvar reťazca : jednoduchý (D) Topológia : lineárna (iv) Antimediátor : ano (xi) Popis sekvencie : SEQ ID č. 17
GGCATCTGTC AG (2) Informácia pre SEQ ID č. 18 (i) Sekvemčné charakteristiky :
(A) Dĺžka : 12 základných párov (B) Typ : nukleotid (C) Tvar reťazca : jednoduchý (D) Topológia : lineárna (iv) Antimediátor : ano (xi) Popis sekvencie : SEQ ID č. 18
CGGCTGGCAT CC
I (2) Informácia pre SEQ ID č. 19 (i) Sekvemčné charakteristiky :
(A) Dĺžka : 12 základných párov (B) Typ : nukleotid (C) Tvar reťazca : jednoduchý (D) Topológia : lineárna (iv) Antimediátor : ano (xi) Popis sekvencie : SEQ ID č. 19
GAACTGACAC AC (2) Informácia pre SEQ ID č. 20 (i) Sekvemčné charakteristiky :
(A) Dĺžka : 12 základných párov (B) Typ : nukleotid (C) Tvar reťazca : jednoduchý (D) Topológia : lineárna (iv) Antimediátor : ano (xi) Popis sekvencie : SEQ ID č. 20
ACGATCACAT CA (2) Informácia pre SEQ ID č. 21 (i) Sekvemčné charakteristiky :
(A) Dĺžka : 12 základných párov (B) Typ : nukleotid (C) Tvar reťazca : jednoduchý (D) Topológia : lineárna (iv) Antimediátor : ano (xi) Popis sekvencie : SEQ ID č. 21
ATCAACATGC AG
I (2) Informácia pre SEQ ID č. 22 (i) Sekvemčné charakteristiky :
(A) Dĺžka : 12 základných párov (B) Typ : nukleotid (C) Tvar reťazca : jednoduchý (D) Topológia : lineárna (iv) Antimediátor : ano (xi) Popis sekvencie : SEQ ID č. 22
CTGCATATCG AC (2) Informácia pre SEQ ID č. 23 (i) Sekvemčné charakteristiky :
(A) Dĺžka : 12 základných párov (B) Typ : nukleotid (C) Tvar reťazca : jednoduchý (D) Topológia : lineárna (iv) Antimediátor : ano (xi) Popis sekvencie : SEQ ID č. 23
CAGTGCACCA GC (2) Informácia pre SEQ ID č. 24 (i) Sekvemčné charakteristiky :
(A) Dĺžka : 12 základných párov (B) Typ : nukleotid (C) Tvar reťazca : jednoduchý (D) Topológia : lineárna (iv) Antimediátor : ano (xi) Popis sekvencie : SEQ ID č.24
CTGCAGCCTC GG /
(2) Informácia pre SEQ ID č. 25 (i) Sekvemčné charakteristiky :
(A) Dĺžka : 12 základných párov (B) Typ : nukleotid (C) Tvar reťazca : jednoduchý (D) Topológia : lineárna (iv) Antimediátor : ano (xi) Popis sekvencie : SEQ ID č. 25
ACTCTCTGGA CC (2) Informácia pre SEQ ID č. 26 (i) Sekvemčné charakteristiky :
(A) Dĺžka : 12 základných párov (B) Typ : nukleotid (C) Tvar reťazca : jednoduchý (D) Topológia : lineárna (iv) Antimediátor : ano (xi) Popis sekvencie : SEQ ID č. 26
CAAGAATCCT CG (2) Informácia pre SEQ ID č. 27 (i) Sekvemčné charakteristiky :
(A) Dĺžka : 12 základných párov (B) Typ : nukleotid (C) Tvar reťazca : jednoduchý (D) Topológia : lineárna (iv) Antimediátor : ano (xi) Popis sekvencie : SEQ ID č.27
ACATCTGCTC TG
I (2) Informácia pre SEQ ID č. 28 ( i) Sekvemčné charakteristiky :
(A) Dĺžka : 12 základných párov (B) Typ : nukleotid (C) Tvar reťazca : jednoduchý (D) Topológia : lineárna (iv) Antimediátor : ano (xi) Popis sekvencie : SEQ ID č.28
TCTGTACTCG TC (2) Informácia pre SEQ ID č. 29 ( i) Sekvemčné charakteristiky :
(A) Dĺžka : 12 základných párov (B) Typ : nukleotid (C) Tvar reťazca : jednoduchý (D) Topológia : lineárna (iv) Antimediátor : ano (xi) Popis sekvencie : SEQ ID č. 29
CTACAGTACA GC (2) Informácia pre SEQ ID č. 30 ( i) Sekvemčné charakteristiky :
(A) Dĺžka : 15 základných párov (B) Typ : nukleotid (C) Tvar reťazca : jednoduchý (D) Topológia : lineárna (iv) Antimediátor : ano (xi) Popis sekvencie : SEQ ID č. 30
CCCGTCGTCC ATAGG
I (2) Informácia pre SEQ ID č. 31 (i) Sekvemčné charakteristiky :
(A) Dĺžka : 18 základných párov (B) Typ : nukleotid (C) Tvar reťazca : jednoduchý (D) Topológia : lineárna (iv) Antimediátor : ano (xi) Popis sekvencie : SEQ ID č. 31
CCCGTCGTCC ATAGGGGA (2) Informácia pre SEQ ID č. 32 (i) Sekvemčné charakteristiky :
(A) Dĺžka : 21 základných párov (B) Typ : nukleotid (C) Tvar reťazca : jednoduchý (D) Topológia : lineárna (iv) Antimediátor : ano (xi) Popis sekvencie : SEQ ID č. 32
CCCGTCGTCC ATAGGGGACG C (2) Informácia pre SEQ ID č. 33 (i) Sekvemčné charakteristiky :
(A) Dĺžka : 15 základných párov (B) Typ : nukleotid (C) Tvar reťazca : jednoduchý (D) Topológia : lineárna (iv) Antimediátor : ano (xi) Popis sekvencie : SEQ ID č. 33
GGACGTGACT GTTTC
I (2) Informácia pre SEQ ID č. 34 (i) Sekvemčné charakteristiky :
(A) Dĺžka : 18 základných párov (B) Typ : nukleotid (C) Tvar reťazca : jednoduchý (D) Topológia : lineárna (iv) Antimediátor : ano (xi) Popis sekvencie : SEQ ID č. 34 GGACGTGACT GTTTCCAC (2) Informácia pre SEQ ID č. 35 (i) Sekvemčné charakteristiky :
(A) Dĺžka : 21 základných párov (B) Typ : nukleotid (C) Tvar reťazca : jednoduchý (D) Topológia : lineárna (iv) Antimediátor : ano (xi) Popis sekvencie : SEQ ID č. 35
GGACGTGACT GTTTCCACTG A (2) Informácia pre SEQ ID č. 36 (i) Sekvemčné charakteristiky :
(A) Dĺžka : 24 základných párov (B) Typ : nukleotid (C) Tvar reťazca : jednoduchý (D) Topológia : lineárna (iv) Antimediátor : ano (xi) Popis sekvencie : SEQ ID č. 36
GGACGTGACTGTTTCCACTG AGTC

Claims (15)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY
    1. Oligonukleotid selektívne hybridizovatelný génom alebo transkripčnými produktami pre podjednotky z izopropenyl-proteín transferáz.
  2. 2. Oligonukleotid, ktorý zahrňuje aspoň časť jednej zo sekvencií vybraných zo SEQ ID č. 1 až SEQ ID č. 36.
  3. 3. Oligonukleotid podlá nároku 1 alebo 2, ktorý je hybridizovatelný génom alebo transkripčnými produktami pre podjednotky a a/alebo β izoprenyl-proteín transferáz.
  4. 4. Oligonukleotid podlá nároku 1 alebo 3, v ktorom izoprenyl-
    -proteín transferáza je zvolený z farnezyl-proteín transferázy, geranylgeranyl-proteín transfenázy typu 1 a geranylgeranyl-proteín transferázy typu 2. -
  5. 5. Oligonukleotid podlá niektorého z predchádzajúcich nárokov, ktorý obsahuje od 2 do 50 jednotiek.
  6. 6. Oligonukleotid podlá nároku podlá nároku 5, ktorý obsahuje od 8 do 35 jednotiek.
  7. 7. Oligonukleotid podlá nároku 6, ktorý obsahuje od 10 do 25 jednotiek.
  8. 8. Oligonukleotid podlá niektorého z predchádzajúcich nárokov, ktorý má modifikovanú kostru.
    I
  9. 9. Oligonukleotid podlá nároku 8, kde aspoň jedna z nukleotidových báz je modifikovaná.
  10. 10. Oligonukleotid podlá nároku 9, kde modifikovaná nukleotidová báza má α-anomernú konformáciu.
  11. 11. Oligonukleotid podlá nároku 8, kde aspoň jedna zo skupín vytvárajúcich väzbu je modifikovaná.
  12. 12. Oligonukleotid podlá nároku 8, . kde buď jedna alebo obe polohy 5 a 3 sú modifikované.
  13. 13. Oligonukleotid podlá nároku 8, kde buď jedna alebo obe polohy 5 a 3 sú modifikované substitúciou hydrofóbnej alebo chrániacej skupiny.
  14. 14. Terapeutický prostriedok, vyznačujúci sa tým, že ako účinnú látku obsahuje aspoň jeden oligonukleotid podlá niektorého z predchádzajúcich nárokov, v zmesi s farmaceutický prijatelným riedidlom a/alebo nosnou látkou, ktoré sú vhodné pre zvolený spôsob podávania.
  15. 15. Použitie prostriedku podlá nároku 14, pri spôsobe ošetrovania alebo terapii ludského alebo zvieracieho tela, v ktorom je proliferácia buniek abnormálna a/alebo nekontrolovaná.
SK838-95A 1994-06-29 1995-06-26 Oligonucleotides for inhibition of expression of izoprenyl-proteineous transferases SK83895A3 (en)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GB9413035A GB9413035D0 (en) 1994-06-29 1994-06-29 Antisense oligonucleeotides

Publications (1)

Publication Number Publication Date
SK83895A3 true SK83895A3 (en) 1996-05-08

Family

ID=10757497

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SK838-95A SK83895A3 (en) 1994-06-29 1995-06-26 Oligonucleotides for inhibition of expression of izoprenyl-proteineous transferases

Country Status (25)

Country Link
US (1) US5856461A (sk)
EP (1) EP0692535A1 (sk)
JP (1) JPH0851985A (sk)
KR (1) KR960000914A (sk)
CN (1) CN1124142A (sk)
AU (1) AU689887B2 (sk)
BR (1) BR9503015A (sk)
CA (1) CA2152233A1 (sk)
CZ (1) CZ291496B6 (sk)
DZ (1) DZ1903A1 (sk)
FI (1) FI953170A7 (sk)
FR (2) FR2721827A1 (sk)
GB (2) GB9413035D0 (sk)
HU (1) HU219823B (sk)
IE (1) IE950477A1 (sk)
MA (1) MA23595A1 (sk)
NO (1) NO952601L (sk)
NZ (1) NZ272398A (sk)
OA (1) OA10221A (sk)
PL (1) PL309384A1 (sk)
RU (1) RU2112766C1 (sk)
SE (1) SE9502259L (sk)
SK (1) SK83895A3 (sk)
TN (1) TNSN95068A1 (sk)
ZA (1) ZA955288B (sk)

Families Citing this family (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH11509204A (ja) * 1995-07-13 1999-08-17 ユニバーシテイ・オブ・シンシナテイ 神経線維腫症の治療に有用な化合物
CN1301731A (zh) * 1999-12-24 2001-07-04 上海博德基因开发有限公司 一种新的多肽——多异戊二烯基合成酶蛋白9和编码这种多肽的多核苷酸
US20030157598A1 (en) * 2000-12-07 2003-08-21 Ramanathan Chandra S. Novel human G-protein coupled receptor, HGPRBMY23, expressed highly in kidney
RU2224524C2 (ru) * 2002-03-29 2004-02-27 Некоммерческое партнерство "АСГЛ - Исследовательские лаборатории" Олигонуклеотиды для подавления жизнедеятельности патогенных микроорганизмов и способ подавления их жизнедеятельности
US20030212017A1 (en) * 2002-05-10 2003-11-13 Isis Pharmaceuticals Inc. Antisense modulation of farnesyl transferase beta subunit expression
US7507808B2 (en) * 2002-12-12 2009-03-24 Isis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of endothelial lipase expression
ES2775525T3 (es) 2003-09-09 2020-07-27 Geron Corp Oligonucleótidos modificados para la inhibición de la telomerasa
US8785409B2 (en) 2007-01-30 2014-07-22 Geron Corporation Compounds having anti-adhesive effects on cancer cells
JOP20200257A1 (ar) 2014-05-01 2017-06-16 Geron Corp تركيبات أوليجو نوكليوتيد وطرق لتحضيرها

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4571421A (en) * 1979-11-05 1986-02-18 Genentech, Inc. Mammalian gene for microbial expression
US5004803A (en) * 1988-11-14 1991-04-02 Genetics Institute, Inc. Production of procoagulant proteins
US5420245A (en) * 1990-04-18 1995-05-30 Board Of Regents, The University Of Texas Tetrapeptide-based inhibitors of farnesyl transferase
US5185248A (en) * 1990-05-08 1993-02-09 E. R. Squibb & Sons, Inc. Farnesyl-protein transferase assay for identifying compounds that block neoplastic transformation
EP0575491B1 (en) * 1991-03-07 2003-08-13 Virogenetics Corporation Genetically engineered vaccine strain
NZ244820A (en) * 1991-10-25 1994-01-26 Isis Pharmaceuticals Inc Oligonucleotide inhibitor of epstein-barr virus.
US5348853A (en) * 1991-12-16 1994-09-20 Biotronics Corporation Method for reducing non-specific priming in DNA amplification
US5585479A (en) * 1992-07-24 1996-12-17 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Navy Antisense oligonucleotides directed against human ELAM-I RNA

Also Published As

Publication number Publication date
CZ168895A3 (en) 1996-05-15
SE9502259D0 (sv) 1995-06-21
NO952601D0 (no) 1995-06-28
CZ291496B6 (cs) 2003-03-12
FR2721827A1 (fr) 1996-01-05
GB9413035D0 (en) 1994-08-17
RU95110774A (ru) 1997-04-20
FI953170A0 (fi) 1995-06-27
HUT72133A (en) 1996-03-28
NZ272398A (en) 1996-04-26
JPH0851985A (ja) 1996-02-27
FR2721930B1 (fr) 1997-01-03
HU9501913D0 (en) 1995-08-28
EP0692535A1 (fr) 1996-01-17
GB2290791A (en) 1996-01-10
SE9502259L (sv) 1995-12-30
MA23595A1 (fr) 1995-12-31
FI953170L (fi) 1995-12-30
GB9513246D0 (en) 1995-09-06
FR2721930A1 (fr) 1996-01-05
AU689887B2 (en) 1998-04-09
DZ1903A1 (fr) 2002-02-17
RU2112766C1 (ru) 1998-06-10
CA2152233A1 (en) 1995-12-30
PL309384A1 (en) 1996-01-08
AU2329995A (en) 1996-01-11
CN1124142A (zh) 1996-06-12
IE950477A1 (en) 1996-01-10
NO952601L (no) 1996-01-02
FI953170A7 (fi) 1995-12-30
KR960000914A (ko) 1996-01-25
ZA955288B (en) 1996-01-31
HU219823B (hu) 2001-08-28
US5856461A (en) 1999-01-05
TNSN95068A1 (fr) 1996-02-06
GB2290791B (en) 1998-08-05
BR9503015A (pt) 1996-06-04
OA10221A (fr) 1997-09-19

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP3231779B2 (ja) ｒａｆ遺伝子発現のアンチセンスオリゴヌクレオチド調節
JP2023156455A (ja) 第ｘｉｉ因子の遺伝子発現を阻害するための組成物と方法
AU674158B2 (en) Hybrid oligonucleotide phosphorothioates
JP4643906B2 (ja) 遺伝子発現の標的化阻害のための合成二本鎖オリゴヌクレオチド
JP3054745B2 (ja) ｒａｆ遺伝子発現のアンチセンスオリゴヌクレオチド調節
US5892023A (en) Anti sense oligonucleotides for blocking IgE receptor synthesis
EP0736093B1 (en) ANTISENSE NUCLEIC ACIDS FOR THE PREVENTION AND TREATMENT OF DISORDERS IN WHICH EXPRESSION OF c-erbB-2 PLAYS A ROLL
EP4029941A1 (en) Compositions and methods for inhibiting gene expression of lpa
Ma et al. Synthetic oligonucleotides as therapeutics: the coming of age
CA2152672A1 (en) Oligomers having improved stability at acid ph
SK83895A3 (en) Oligonucleotides for inhibition of expression of izoprenyl-proteineous transferases
Spampinato et al. Inhibition of proopiomelanocortin expression by an oligodeoxynucleotide complementary to beta-endorphin mRNA.
ES2280098T3 (es) Oligonucleotidos antisentido contra timidilato sintasa.
EP1071764B1 (en) Antisense oligonucleotides for the inhibition of integrin alphav-subunit expression
WO1997033623A1 (en) OLIGONUCLEOTIDES TARGETED TO ANGIOTENSINOGEN mRNA
Dagle et al. Selective degradation of targeted mRNAs using partially modified oligonucleotides
US20030176384A1 (en) Antisense oligonucleotides for the inhibition of integrin alphav -subunit expression
Galderisi et al. Clinical trials of a new class of therapeutic agents: antisense oligonucleotides
WO2025190276A1 (zh) 抑制dmpk表达的多核苷酸分子及其用途
HK1259063B (en) Compositions and methods for inhibiting gene expression of lpa
AU2003271376A1 (en) Antisense Oligonucleotides for the Inhibition of Integrin alpha-Subunit Expression