SK81497A3 - Pharmaceutical composition, method of producing it, its use and device for its application - Google Patents

Description

Oblasť techniky

Vynález sa týka prolipozómových práškov, najmä na inhaláciu, spôsobu výroby prolipozómových práškov, prostriedkov, ktoré obsahujú prolipozómové prášky a spôsobu ich použitia.

Doterajší stav techniky

Lipozómy sú membránovíté váčky, ktoré sa skladajú z radu koncentrických lipidových dvojvrstiev alternujúcich s hydrofilnými oddeleniami. Môžu byť tvorené z rôznych prírodných a syntetických lipidov, ako sú prírodné alebo syntetické fosfoglycerolipidy, sfingolipidy a digalaktozylglycerolipidy. Jedno z hlavných použití lipozómov bolo použitie ako nosiče na rôzne druhy farmaceutický účinných zložiek, aby zlepšili podávanie liekov a minimalizovali vedľajšie účinky niektorých liečení. Farmaceutický účinné zložky sa môžu inkorporovať do lipozómov buď enkapsuláciou do hydrofilných oddelení lipozómu (ak je účinná zložka rozpustná vo vode) alebo enkapsuláciou do lipidových dvojvrstiev, keď je účinná zložka lipofilná.

Jedným z hlavných problémov, ktoré sú spojené s farmaceutickými lipozomálnymi prostriedkami je dlhodobá stabilita. Vodné lipozómové disperzie majú obmedzenú stabilitu ako dôsledok agregácie, straty enkapsulovanej účinnej zložky do vonkajšej fázy, chemickej degradácie účinnej zložky alebo lipidového materiálu atď..

Tieto problémy sa môžu do veľkej miery prekonať, ak sa použije pevný prostriedok. Takýto pevný prostriedok môže obsahovať lipozómový prášok, t.j. vysušenú lipozómovú disperziu alebo prolipozómový prášok.

So spôsobom sušenia lipozómových disperzií je spojené riziko poškodenia lipozómových membrán. Aby sa minimalizovalo toto riziko, je nutné sušiť lipozómy v prítomnosti ochranných cukrov, ako je opísané v WO 86/01103.

US patent číslo 4,906.476 opisuje lipozómové prostriedky na aplikáciu steroidov inhaláciou. Opisuje sa možnosť aplikácie vysušených lipozómov vo forme aerosolového prášku s použitím vhodného zariadenia. Opísaná je tiež aplikácia striekaním zo samonosného rozprašovača s použitím hnacieho rozpúšťadla so suspendovanými lipozómami v prášku a striekaním vysušených častíc do pľúc pomocou hnacieho plynu.

Lipozómy ako také nie sú prítomné v prolipozómových práškoch, ale vytvoria sa, keď je prášok hydratovaný nad teplotou fázového prechodu lipidov. V porovnaní s vysušenými lipozómami majú preto prolipozómové prášky výhodu v tom, že riziko poškodenia lipozómových membrán pri dehydratácii je eliminované.

Prolipozómové prášky už boli skôr opísané.

Napríklad US patent 4,311.712 opisuje lyofilizovanú potenciálnu lipozómovú zmes získanú rozpustením amfipatickej kvapaliny vytvárajúcej lipozóm a biologicky aktívnej zlúčeniny rozpustnej v lipidoch alebo viazanej na lipidy v organickom rozpúšťadle, ktorá zostáva tuhá počas lyofilizačného postupu, a lyofilizáciou roztoku. Potenciálna lipozómová zmes sa môže skladovať a spracovať na vodný lipozómový prípravok, keď to bude žiadúce. Biologicky aktívna zlúčenina môže byť ľubovoľná zlúčenina, ktorá má biologicky zaujímavú vlastnosť.

WO 90/00389 opisuje lyofilizovanú potenciálnu lipozómovú zmes, obsahujúcu amfipatický lipid a cyklosporín alebo jeho derivát, na použitie na prípadnú lipozómovú aplikáciu cyklosporínu do buniek. Lyofilizovaná zmes sa rekonštituuje vo vodnom prostredí na lipozómy, ktoré enkapsulujú v podstate všetok cyklosporín prítomný v lyofilizovanej zmesi.

WO 92/11842 opisuje prelipozomálny prášok, ktorý tvorí suspenziu lipozómov obsahujúcu polyénové liečivo ako nystatin, keď je rekonštituovaný vodou alebo fyziologickým roztokom.

Predmetom všetkých vyššie uvedených patentov a prihlášok týkajúcich sa prolipozómových prostriedkov sú prostriedky, ktoré sa musia pred aplikáciou hydratovať.

EP 309464 opisuje prolipozómové práškové prostriedky, ktoré sa môžu inhalovať. Práškové prostriedky obsahujú pevné častice, v ktorých je biologicky účinná zložka v hrubej disperzii v lipide.

Podstata vynálezu

Teraz sa zistilo, že je výhodné pripraviť prášky, ktoré majú len jednu fázu pre prípad, že je žiadúca ich aplikácia inhaláciou. Preto cieľom vynálezu je poskytnúť takýto prolipozómový prášok.

Vyššie uvedený cieľ vynálezu sa dosahuje prolipozómovým práškom, ktorý obsahuje v jedinej fáze diskrétne častice biologicky účinnej zložky spolu s lipidom alebo so zmesou lipidov, ktoré majú teplotu fázového prechodu (T_c) nižšiu ako 37°C.

Prášok je vhodný najmä na aplikáciu inhaláciou.

Prášok s jedinou fázou môžno tiež opísať tak, že obsahuje homogénnu molekulovú zmes biologicky účinnej zložky a lipidu alebo zmesi lipidov s teplotou fázového prechodu nižšou ako 37^eC.

Z výrazov jediná fáza a homogénna molekulová zmes je zrejmé, že v prášku podľa vynálezu nie je žiadna samostatná kryštalická fáza či už účinnej zložky alebo lipidu.

Prášok s jednou fázou sa môže inhalovať priamo a in situ, napríklad do horných alebo dolných dýchacích ciest, vytvorí lipozómy, v ktorých je účinná zložka celkom inkorporovaná.

Všeobecne sa podľa vynálezu môže použiť ľubovoľný amfipatický lipid alebo zmes lipidov, o ktorých je známe, že sú vhodné na prípravu lipozómov známymi metódami. Lipid alebo zmes lipidov musia mať teplotu fázového prechodu nižšiu ako je telesná teplota (37°C), aby produkt, ktorým je prolipozómový prášok, bol schopný hydratácie pri fyziologických podmienkach (t. j. aby bol schopný vytvoriť lipozómy v dýchacom’ústrojenstve) . Teploty fázového prechodu pre rôzne zmesi lipidov sa ľahko zistia použitím dobre známych metód, napríklad metód DSC - viď napríklad J. Suurkuusk a spol., Biochemistry, zv. 15, č. 7, str. 1393 (1976). Všeobecne je každý prírodný alebo syntetický lipid alebo zmes lipidov s teplotou fázového prechodu nižšou ako 37°C použiteľný podľa vynálezu.

Ako príklady potenciálne použiteľných lipidov sa môžu vymenovať prírodné a syntetické fosfoglycerolipidy, sfingolipidy a digalaktozylglycerolipidy. Medzi prírodnými lipidmi sa môžu vymenovať sfingolipidy (SL) ako sfingomyelín (SM), ceramid a cerebrozid, galaktozylglycerolipidy ako digalaktozyldiacylglycerol (DGalDG), fosfoglycerolipidy ako fosfatidylcholín vaječného žitka (e-PC) a fosfatidylcholín sójových bôbov (s-PC), a lecitín vaječného žĺtka (e-lecitín) a lecitín sójových bôbov (s-lecitín). Zo syntetických lipidov sa môžu vymenovať dimyristoylfosfatidylcholín (DMPC), dipalmitoylfosfatidylcholín (DPPC), distearoylfosfatidylcholín (DSPC), dilaurylfosfatidylcholín (DLPC), l-myristoyl-2-palmitoylfosfatidylcholín (MPPC), l-palmitoyl-2-myristoylfosfatidylcholín (PMPC) a dioleoylfosfatidylcholín. Zo zmesí lipidov sa môžu uviesť nasledujúce: SM/PC, SM/cholesterol, ePC/cholesterol, sPC/cholesterol, PC/PS/cholesterol, , DMPC/DPPC, DMPC/DPPC/CH, DMPC/CH, DPPC/DOPC, DPPC/DOPC/CH, DLPC/DPPC, DLPC/DPPC/CH, DLPC/DMPC, DLC/DMPC/CH, DOPC/DSPC, DPSM/DMSM, e-lecitín/cholesterol. Navyše ku každému z vyššie uvedených sa môže pridať lipid iónového charakteru, ako napríklad dimyristoylfosfatidylglycerol (DMPG), difosfapalmitoylfosfatidylglycerol (DPPG), dimyristoylfosfatidovú kyselinu (DMPA), dipalmitoylfosfatidovú kyselinu (DPPA) alebo stearylamín (SA).

Zvlášť zaujímavé lipidy podía vynálezu sú DPPC alebo/a DMPC. Prednosť sa dáva zmesi DPPC a DMPC obsahujúcej najmenej 10 % hmotnostných DMPC, napríklad 10 až 50 % DMPC. Hlavne je výhodná zmes DPPC a DMPC obsahujúca naviac najmenej jeden lipid iónového charakteru, ako je DMPG, DPPG, DMPA alebo SA, napríklad v množstve do 5 % hmotnostných. K iným výhodným zmesiam patrí DPSM a DMSM, obsahujúca prípadne najmenej jeden lipid iónového charakteru a zmesi cholesterolu buď s e-lecitínom, ktoré prípadne obsahujú najmenej jeden lipid iónového charakteru a ktoré majú T_e menšiu ako 37^eC. Iné zmesi sa môže odborník v odbore lahko vybrať s odkazom na publikáciu Gregor Cevc, Phospholipids Handbook, Marcel Dekker, New York (1993), str. 427 až 435.

Účinná zložka má s výhodou molekulárnu štruktúru, ktorá môže byť inkorporovaná do lipidových dvojvrstiev, čo napomôže enkapsulácii do lipozómov počas hydratácie. Takýmto príkladom je ester mastnej kyseliny s dlhým uhľovodíkovým reťazcom umožňujúcim pôsobiť ako hydrofóbne zakončenie.

Vhodné účinné zložky môže odborník v odbore ľahko identifikovať a môžu zahŕňať napríklad protizápalové a bronchorelaxačné liečivá, ako i antihistaminiká, inhibítory cyklooxygenázy, inhibítory syntézy leukotriénu, antogonistov leukotriénu, inhibítory fosfolipázy-A-2 (PLA2), antagonistov faktoru agregácie doštičiek (PAF) a profylaktiká astmy. Antiarytmické liečivá, trankvilizéry, kardiálne glukozidy, hormóny, ant ihyperten z í vne liečivá, antidiabetiká, antiparazitárne a antikancerózne lieky, sedatíva, analgetiká, antibiotiká, antifugálne antireumatické lieky, lieky, antihypotenzívne imunoterapeutiká, lieky, vakcíny, protivírusové lieky, proteíny, peptidy a vitamíny môžu byť tiež zaujímavé.

Užitočné podľa vynálezu môžu byť tiež glukokortikosteroidy ako budesonid, dexamethason, bethamethason, fluocinolon, flumethason, triamcinoloacetonid, flunisolid, beklomethason a 16,16-acetály pregnánových derivátov a zlúčeniny od nich odvodené, a B-2 agonisti ako terbutalín, salmeterol, salbutamol, formoterol, fenoterol, klenbuterol, prokaterol, bitolterol a broxaterol. Účinnou zložkou môže byť tiež zmes farmaceutický účinných látok. Napríklad zmes glukokortikosteroidu s bronchodilatátorom ako je formoterol, salmeterol, terbutalín alebo salbutamol môže byť užitočná. Aby neboli žiadne pochybnosti o tom, na čo sa vzťahuje výraz účinná zložka, je potrebné uviesť, že tento pojem má zahŕňať tiež farmaceutický prijateľné estery, soli a hydráty uvedených zlúčenín.

Keď je steroidu.

účinná zložka steroid, je to s výhodou ester zložka je výhodne steroid, esterifikovaný v polohe 21 najmenej 8, napríklad najmenej s výhodou steroid, mastnou kyselinou alebo najmenej

Účinná ktorý je obsahujúcou atómov uhlíka. Mastná kyselina môže obsahovať napríklad až atómov uhlíka, napríklad až 20 atómov uhlíka alebo až 18 atómov uhlíka, výhodnejšie je účinná zložka steroid-21-palmitát, myristát, laurát, kaprát, kaprylát alebo sterát. Najvýhodnejšia účinná zložka podľa vynálezu je zlúčenina (22R)-16α, 17a-butylidéndioxy-6a, 9a-difluór-llB-hydroxy-21-palmitoyloxypregn-4-én-3,20-dión, rofleponidpalmitát.

Ak je účinnou zložkou ester, musí byť hydrolyzovaný na účinnú základnú látku. Prolipozómový prášok s jednou fázou podľa vynálezu umožňuje neočakávane nutnú hydrolýzu in situ, kým estery v kryštalickom stave nebudú hydrolyzované.

Ak je žiadúca aplikácia inhaláciou, malo by sa čo najväčšie množstvo prolipozômového prášku skladať z častíc s priemerom menším ako 10 mikrometrov, napríklad 0,01 až 10 mikrometrov alebo 0,1 až 6 mikrometrov, napríklad 0,1 až 5 mikrometrov, alebo z aglomerátov týchto častíc. Výhodne najmenej 50 % prášku sa skladá z častíc v požadovanom rozsahu veľkosti. Napríklad najmenej 60 %, výhodne najmenej 70 %, výhodnejšie najmenej 80 % a najvýhodnejšie 90 % prášku sa skladá buď z častíc v požadovanom rozsahu veľkosti alebo z aglomerátov uvedených častíc.

Prolipozómové prášky podľa vynálezu nemusia obsahovať žiadne iné ingrediencie. Avšak farmaceutické prostriedky obsahujúce prášky podľa vynálezu môžu obsahovať tiež iné farmaceutický prijateľné prísady ako farmaceutický prijateľné adjuvanty, riedidlá a nosiče. Tieto sa môžu pridať k prolipozómovému prostriedku po prípadnom mikromletí alebo pred prípadným mikromletím s výhradou, že bolo rozpúšťadlo dokonale odstránené. Nosič je výhodne kryštalická, hydrofilná látka. Výhodným nosičom je kryštalický monohydrát laktózy. Ako iné vhodné nosiče sa môžu uviesť glukóza, fruktóza, galaktóza, trehalóza, sacharóza maltóza, rafinóza, maltitol, melezitózu, stachyóza, laktitol, palatinit, škrob, xylitol, manitol, myoinozitol a podobne a ichhydráty a aminokyseliny, napríklad alanín, glycín a betaín.

Množstvo prísad, ktoré sú prítomné v prostriedku sa môže pohybovať v širokých medziach. V niektorých prípadoch môže byť potrebné málo prísad alebo žiadne prísady, kým je často výhodné zriediť prášok prísadou, aby sa zlepšili vlastnosti prášku na použitie v inhalátore. V tomto prípade môže prostriedok obsahovať napríklad najmenej 50 %, napríklad najmenej 70 % alebo najmenej 80 % prísad, pričom zvyšok je prolipozómový prášok. Percento prísad môže tiež závisieť na sile biologickej účinnosti zlúčeniny a na optimálnom množstve prášku na inhaláciu.

V prípade, že je prítomná prísada, napríklad nosič, môže celý prostriedok tvoriť častice častice s rozmerom v rozsahu veľkosti respirovateľných častíc. Alebo môže nosič obsahovať väčšie častice, napríklad so stredným priemerom látky väčším ako 20 mikrometrov alebo môže obsahovať aglomeráty menších častíc, pričom aglomeráty majú stredný priemer látky napríklad väščí ako 20 mikrometrov, takže v každom prípade sa vytvorí usporiadaná zmes prolipozómu a nosiča.

Ďalším predmetom je spôsob výroby prolipozómového prášku podľa vynálezu, t.j. spôsob, ktorý poskytuje prolipozómový prášok v jedinej fáze.

Vynález teda tiež poskytuje spôsob výroby prolipozómového prášku na inhaláciu, ktorý spočíva v tom, že sa rozpusti lipid alebo zmes lipidov a lipofilnej biologicky účinnej zlúčeniny v rozpôšťadle, pričom lipid alebo zmes lipidov má teplotu fázového prechodu nižšiu ako 37°C, získa sa kryštalická rozpúšťadlová základná hmota a jednofázový lipid vo svojom sklovitom stave zmrazením roztoku, pričom sa toto zmrazenie uskutočňuje pri teplote pod teplotou fázového prechodu lipidovej fázy, a odparí sa zmrazené rozpúšťadlo pri teplote fázového prechodu lipidovej fázy.

Zmrazenie roztoku rozpúšťadla sa môže uskutočniť obvyklými metódami, napríklad v obvyklom lyofilizátore. Môže sa napríklad naliať roztok lipidov a biologicky účinnej zložky na poličky lyofilizátora a znížiť teplotu, aby roztok zamrzol. Odparenie rozpúšťadla sa môže uskutočniť napríklad znížením tlaku v lyofilizačnej komore. Výsledný prášok sa môže zoškrabať z poličiek v komore a prípadne preosiať.

Lyofilizovaný prášok sa môže prípadne podrobiť ďalšiemu spracovaniu, aby sa získali častice v rozsahu veľkosti respirovateľných častíc. Napríklad sa lyofilizovaný prášok môže mikrozomlieť, napríklad s použitím tryskového mlyna, aby sa získali respirovateľné častice.

Zmrazenie roztoku biologicky účinnej zložky a lipidov sa uskutočňuje spôsobom, ktorý poskytuje jedinú lipidovú fázu v zmrzlom rozpúšťadlovom základe. Výroba jedinej lipidovej fázy sa reguluje finálnou teplotou a rýchlosťou mrznutia roztoku. Optimálna rýchlosť mrznutia ktoréhokoľvek partikulárneho roztoku bude niekde medzi časom nutným na kryštalizáciu príslušného rozpôšťadla a časom potrebným na kryštalizáciu lipidov a účinnej zložky a odborník v odbore ju môže stanoviť jednoducho metódou pokusou a omylov. Optimálna finálna teplota by mala byť 10 až 20°C pod teplotou skleného prechodu lipidovej fázy. Na monitorovanie kryštalinity sa môže použiť napríklad rontgenová metóda a na monitorovanie stupňa inkorporácie biologicky účinnej zložky do lipozómov po hydratácii sa môže použiť diferenčný skanovací kalorimeter.

Rozpúšťadlo musí mať schopnosť úplne rozpustiť lipidy a biologicky účinnú zložku, pretože je dôležité, aby všetky zložky boli v roztoku pred zmrazovaním, čím sa zabráni vyzrážaniu alebo oddeleniu fázy, čo spôsobuje vznik prášku s viac ako jednou fázou. Okrem toho, by rozpúšťadlo malo byť toxikologický prijateľné, malo by mať zodpovedajúcu teplotu mrznutia a výhodný vysoký tlak pár. Rozpúšťadlom môže byť napríklad organické rozpúčťadlo, napríklad alkohol alebo zmes vodných a organických rozpôšťadiel. Výhodným rozpúčťadlom na použitie podľa vynálezu je terciárny butanol.

Prášok môže byť prípadne aglomerovaný do malých guľôčok, aby sa regulovala súdržnosť prášku. Guľôčky by výhodne nemali byť väčšie ako 1 mm v priemere. Guľôčky väčšie ako 1 mm v priemere by sa mali odstrániť preosiatím. Všetky aglomeráty ba mali byť drobivé, aby sa ľahko deaglomerizovali napríklad v práškovom inhalátore.

Prolipozómový prášok podľa vynálezu je užitočný na lokálne alebo systémové liečenie ochorení a môže sa aplikovať napríklad cestou horného a dolného respiračného traktu vrátane nasálnej cesty. Predmetom vynálezu je tiež uvedený prolipozómový prášok na použitie v terapii, použitie prolipozómového prášku na výrobu liečiva na liečenie ochorení cestou respiračného traktu a spôsob liečenia pacienta, ktorý potrebuje liečenie, spočívajôci v tom, že sa tomuto pacientovi aplikuje terapeuticky účinné množstvo prolipozómového prášku podľa vynálezu.

Prolipozómový prášok podľa vynálezu sa môže napríklad použiť na liečenie zápalových ochorení respiračného traktu, napríklad astmy, nádchy, alveolitídy, bronchiolitídy a bronchitídy.

Aplikácia do respiračného traktu sa môže uskutočniť napríklad použitím inhalátora na suchý prášok alebo tlakového aerosolového inhalátora.

Vhodné práškové inhalátory sú dávkovacie inhalátory, napríklad inhalátory na jedinú dávku známe poď ochrannou známkou Monohaler³* a inhalátory na viac dávok, napríklad viacdávkový, dychom ovládaný inhalátor na suchý prášok známy pod ochrannou známkou Turbuhaler¹⁴.

I keď je prolipozómový prášok podľa vynálezu určený najmä na aplikáciu, múže byť tiež obsiahnutý v prostriedkoch určených na iné formy aplikácie. Napríklad sa môžu pripraviť orálne, topické a injekčné prostriedky na použitie na liečenie zápalových ochorení kĺbov, napríklad artritídy, ochorení kože a ochorení čriev.

Príklady uskutočnenia vynálezu

Účelom nasledujúcich príkladov vynálezu je ilustrovať vynáleez, avšak neobmedzovať jeho rozsah.

Prklad 1

Rofleponidpalmitát (10 dielov), DPPC (63 dielov), DMPC (24 dielov) a NaDPPG (3 diely) sa rozpustili pri 80°C v terciárnom butanole (1300) dielov. Roztok sa nalial na poličky lyofilizátora ochladeného na -35^eC. Roztok dosiahol túto teplotu asi po 30 minútach, tlak v lyofilizátore sa potom znížil, aby sa vyvolala sublimácia rozpúšťadla. Zatiaľ čo sa rýchlosť sublimácie mohla nastaviť znížením tlaku a zvýšením teploty, nenechala sa teplota počas procesu presiahnuť -10°C. V lyofilizácii sa pokračovalo, až sa všetko rpzpúšťadlo odstránilo. Výsledný prášok sa zoškrabal z poličiek lyofilizátora a preosial sa.

Tento prášok sa mikromlel v mlyne so vzduchovými dýzami na častice prášku s veľkosťou menšou ako 5μιη. Mikromletý prášok sa zmiešal s monohydrátom laktózy (20 dielov prášku : 80dielov monohydrátu laktózy) preosievacím procesom a zmes sa ďalej homogenizovala mikromletím pri nízkom tlaku v tryskovom mlyne.

Prášková zmes sa aglomerovala na guľôčky nie väčšie ako 1 mm s použitím štandartných techník. Väčšie guľôčky sa odstránili preosiatím. Aglomerovaný prášok sa naplnil do inhalátora na suchý prášok Turbuhaler**.

Príklad 2

Postup z príkladu 1 sa zopakoval s časmi mrazenia 6 hodín, 17 hodín a 24 hodín.

Porovnávací príklad

Lipidy a účinná zložka z príkladu 1 sa jednoducho vzájomne zmiešajú za sucha. Výsledný prášok je multifázový systém obsahujúci oddelené častice účinnej zložky a lipidov.

Príklad 3

Postup z príkladu 1 sa zopakuje s použitím nasledujúcich lipidových zmesí s teplotou fázového prechodu pod 37°C: DPSM/DPSM e-lecitín/cholesterol s-lecitín/cholesterol

Príklad 4

Postup z príkladu 1 sa zopakuje s nasledujúcimi účinnými zložkami:

roflenid-21-myristát roflenid-21-laurát roflenid-21-kaprát roflenid-21-kaprylát roflenid-21-stearát

Analýza prášku

Rontgenový difraktogram práškovej zmesi z príkladu 1 a 2 ukázal, že v prášku nebol prítomný žiadny kryštalický stav. Prášok z porovnávacieho príkladu obsahoval účinnú zložku v kryštalickom stave.

Inkorporácia účinnej zložky do lipozómov

Prolipozómové prášky z príkladov la 2 sa hydratovali a stupeň inkorporácie účinnej zložky sa zmeral použitím metód diferenčnej skanovacej kalorimetrie (DSC). DSC ukázala, že účinná zložka je celkom inkorporovaná do lipozómov. DSC uskutočnená s práškom z porovnávacieho príkladu nepreukázala v podstate žiadnu inkorporáciu účinnej zložky do lipozómu.

Hydrolýza esteru

Skúmal sa stupeň hydrolýzy prolipozómového prášku z príkladu laz porovnávacieho príkladu na účinnú zložku. Prolipozómové prášky z príkladov 1 a 2 a z porovnávacieho príkladu (50 μΜ esteru steroidu v každom prípade) sa hydratovali vodou a zohrievali sa 15 minút na 50°C. Potom sa inkubovali pri 37°C v prítomnosti lipázy pankreasu prasaťa (2 mg/ml) v pufri (1 mM EDTA, 80 mM KC1, 10 mM HEPES, pH 7,4) a periodicky sa podrobili pôsobeniu ultrazvuku na rôzne časové dĺžky až do 120 minút. Vzorky sa analyzovali kvapalinovou chromatografiou, aby sa zistilo, koľko esteru sa hydrolyzovalo na účinnú zložku.

% prolipozómového prášku z príkladu 1 sa hydrolyzovalo na účinnú zložku v porovnaní s iba 2 % prášku z porovnávacieho príkladu.

Farmakologické štúdie

Protiedémová účinnosť sa určila použitím Sefadexového modelu na krysách, ako opísali L.Källstrom a spol. v Agens and Actions 17(3/4) 355 (1985).

Vzorky práškov z príkladu la z porovnávacieho príkladu sa suspendovali v studenom fyziologickom roztoku a aplikovali sa intratracheálnou injekciou do ľavej časti pľúc samcom krýs Sprague-Dawley. Po jednej hodine sa vyvolal zápalový proces intratracheálnym vpravením Sefadexových guľôčok (5 mg/kg) do ľavej i pravej časti pľúc. Po 20 hodinách sa kvantifikoval výsledný intersticiálny edém zistením hmotnosti pravej a ľavej časti pľúc. Za indikatívne pre farmakologický účinok prášku sa zobralo zníženie hmotnosti pľúc. Hmotnosť pľúc krýs, ktorým sa aplikoval prolipozómový prášok z príkladu 1, sa znížila 40 krát viac ako hmotnosť pľúc krýs, ktorým sa aplikoval prášok z porovnávacieho príkladu. To znamená, že účinnosť prolipozómového prášku podľa vynálezu bola 40 ku prášku z porovnávacieho príkladu.

Inhalačné štúdie

Psi rasy Beagle sa anestezovali, intubovali a vystavili pôsobeniu práškového aerosólu z prostriedku podľa príkladu 1 alebo podľa porovnávacieho príkladu. Aerosol sa vytvoril z práškovej tablety s použitím prístroja Wright Dust Feed pracujúceho s 1800 otáčkami za minútu. V priebehu inhalácie sa zaznamenali koncentrácie aerosólu (Casella 950 AMS), objem respiračného vzduchu, objem vdýchnutého respiračného vzduchu a frekvencia dychu. Stanovená inhalovaná dávka bola 25 μg roflenidpalmitátu/kg telesnej hmotnosti. Po inhalácii sa odoberali pravidelné vzorky plazmy. Biologická dostupnosť sa vypočítala s koncentráciami roflenidu v plazme po intravenóznej aplikácii. Biologická dostupnosť roflenidu po aplikácii prášku z príkladu 1 bola blízka 100 %, zatiaľ čo biologická dostupnosť roflenidu po aplikácii prášku z porovnávacieho príkladu nebola merateľná.

Claims (41)

1. PATENTOVÉ NÁROKY

   1. Farmaceutický prostriedok vyznačujúci sa tým, že obsahuje prolipozómový prášok, pričom tento prášok obsahuje v jedinej fáze diskrétne častice biologicky účinnej zložky spolu s lipidom alebo v zmesi lipidov, ktoré majú teplotu fázového prechodu pod 37°C, a kryštalický a hydrofilný farmaceutický prijateľný nosič.
2. 2. Farmaceutický prostriedok podľa nároku 1, vyznačujúci sa tým, že prášok obsahuje jeden alebo niekoľko lipidov z prírodných a syntetických fosfoglycerolipidov, sfingolipidov a digalaktozylglycerolipidov.
3. 3. Farmaceutický prostriedok podľa nárokov 1 alebo 2, v y značujúci sa tým, že prášok obsahuje zmes lipidov zvolenú zo zmesí SM/PC, SM/cholesterol, ePC/cholesterol, sPC/cholesterol, PC/PS/cholesterol, DMPC/DPPC, DMPC/DPPC/CH, DMPC/CH, DPPC/DOPC, DPPC/DOPC/CH, DLPC/DPPC, DLPC/DPPC/CH, DLPC/DMPC, DLC/DMPC/CH, DOPC/DSPC.
4. 4. Farmaceutický prostriedok podľa nárokov 1 až 3, vyznačujúci sa tým, že prášok obsahuje DPPC, DMPC alebo zmes DPPC A DMPC.
5. 5. Farmaceutický prostriedok podľa nároku 4, vyznačujúci sa tým, že obsahuje najmenej 10 % DMPC.

   5. Farmaceutický prostriedok podľa nárokov 1 až 5, vyznačujúci sa tým, že prášok obsahuje dodatočne lipid iónového charakteru.
6. 7. Farmaceutický prostriedok podľa nároku 6, vyznačujúci sa tým, že lipid iónového charakteru je zvolený z DMPG, DPPG, DMPA a SA.
7. 8. Farmaceutický prostriedok podľa nárokov 1 až 7, v y značujúci sa tým, že účinná zložka je zvolená zo skupiny zahŕňajúcej protizápalové lieky, bronchorelaxačné lieky, antihistaminiká, inhibítory cyklooxygenázy, antagonistov leukotriénu, inhibítory PLA2, antagonistov PAF a profylaktiká astmy.
8. 9. Farmaceutický prostriedok podľa nárokov 1 až 8, vyznačujúci sa tým, že účinná zložka je glukokortikosteroid.
9. 10. Farmaceutický prostriedok podľa nárokov 1 až 9, v y značujúci sa tým, že účinná zložka je B-2 agonista.
10. 11. Farmaceutický prostriedok podľa nárokov 1 až 10, vyznačujúci sa tým, že účinná zložka je steroid, ktorý je esterifikovaný v polohe 21 mastnou kyselinou obsahujúcou najmenej 8 atómov uhlíka.
11. 12. Farmaceutický prostriedok podľa nárokov 1 až 11, vyznačujúci sa tým, že účinná zložka je steroid, ktorý je esterifikovaný v polohe 21 mastnou kyselinou obsahujúcou najmenej 10 atómov uhlíka.
12. 13. Farmaceutický prostriedok podľa nárokov 1 až 12, v y značujúci sa tým, že účinná zložka je steroid, ktorý je esterifikovaný v polohe 21 mastnou kyselinou obsahujúcou najmenej 12 atómov uhlíka.
13. 14. Farmaceutický prostriedok podľa nárokov 1 až 13, vyznačujúci sa tým, že že účinná zložka je steroid-21-pa1mitát.
14. 15. Farmaceutický prostriedok podľa nárokov 1 až 14, v y značujúci sa tým, že účinná zložka je roflenid16 pa1mitát.
15. 16. Farmaceutický prostriedok podľa nárokov 1 až 15, v y značujúci sa tým, že najmenej 50 % prášku obsahuje častice s priemerom menším ako 10 mikrometrov.
16. 17. Farmaceutický prostriedok podľa nárokov 1 až 16, vyznačujúci sa tým, že najmenej 60 % prášku obsahuje častice s priemerom menším ako 10 mikrometrov.
17. 18. Farmaceutický prostriedok podľa nárokov 1 až 17, vyznačujúci sa tým, že najmenej 70 % prášku obsahuje častice s priemerom menším ako 10 mikrometrov.
18. 19. Farmaceutický prostriedok podľa nárokov 1 až 18, vyznačujúci sa tým, že najmenej 80 % prášku obsahuje častice s priemerom menším ako 10 mikrometrov.
19. 20. Farmaceutický prostriedok podľa nárokov 1 až 19, v y značujúci sa tým, že najmenej 90 % prášku obsahuje častice s priemerom menším ako 10 mikrometrov.
20. 21. Farmaceutický prostriedok podľa nárokov 16 až 20, vyznačujúci sa tým, že častice majú priemer 0,01 až 10 mikrometrov.
21. 22. Farmaceutický prostriedok podľa nárokov 16 až 20, vyznačujúci sa tým, že častice majú priemer 0,1 až 6 mikrometrov.
22. 23. Farmaceutický prostriedok podľa nárokov 16 až 20, v y značujúci sa tým, že častice majú priemer 0,1 až 5 mikrometrov.
23. 24. Farmaceutický prostriedok podľa nárokov 1 až 23, v y značujúci sa tým, že obsahuje aglomerované časti ce.
24. 25. Farmaceutický prostriedok podľa nárokov 1 až 24, vyznačujúci sa tým, že nosič je kryštalický monohydrát laktózy.
25. 26. Farmaceutický prostriedok podľa nárokov 1 až 24, vyznačujúci sa tým, že nosič je zvolený zo skupiny zahŕňajúcej glukózu, fruktózu, galaktózu, trehalózu, sacharózu maltózu, rafinózu, maltitol, melezitózu, stachyózu, laktitol, palatinit, škrob, xylitol, manitol, myoinozitol a ich hydráty, a aminokyseliny.
26. 27. Farmaceutický prostriedok podľa nárokov 1 až 26, vyznačujúci sa tým, že nosič obsahuje častice so stredným priemerom hmoty väčším ako 20 mikrometrov.
27. 28. Farmaceutický prostriedok podľa nárokov 1 až 26, v y značujúci sa tým, že nosič obsahuje častice so stredným priemerom hmoty menším ako 10 mikrometrov alebo aglomeráty týchto častíc.
28. 29. Spôsob výroby prolipózomového prášku podľa nárokov 1 až 23, vyznačujúci sa tým, že sa rozpustí v rozpúšťadle lipid alebo zmes lipidov a lipofilná biologicky účinná zložka, pričom uvedený lipid alebo zmes lipidov má teplotu fázového prechodu pod 37°C, zmrazením roztoku sa získa kryštalická základná rozpúšťadlová hmota a jediná lipidová fáza vo svojom sklenom stave, pričom uvedené zmrazenie sa uskutoční pri teplote pod teplotou fázového prechodu lipidovej fázy, a zmrazené rozpúšťadlo sa odparí pri teplote pod teplotou fázového prechodu lipidovej fázy.
29. 30. Spôsob podľa nároku 29,vyznačujúci sa tým, že ďalej obsahuje stupeň mikromletia lyofilizovaného prášku, čím sa získajú častice v rozsahu respirovateľnej veľkosti častíc.
30. 31. Spôsob podľa nárokov 29 alebo 31, vyznačujúci sa tým, že zmrazovanie a odparenie rozpúšťadla sa us18 točňuje v lyofilizátore.
31. 32. Spôsob podľa nárokov 29 až 31, vyznačujúci sa tým, že rozpúšťadlo je organické rozpúšťadlo.
32. 33. Spôsob podľa nároku 32,vyznačujúci sa tým, že rozpúšťadlo je alkohol.
33. 34. Spôsob podľa nároku 33,vyznačujúci sa tým, že rozpúšťadlo je terciárny butanol.
34. 35. Spôsob výroby farmaceutického prostriedku podľa nárokov laž 28,vyznačujúci sa tým, že tento spôsob zahŕňa spôsob podľa nárokov 29 až 34, po ktorom nasleduje stupeň spočívajúci v tom, že sa k takto získanému prolipozómovému prášku pridá kryštalický a hydrofilný farmaceutický prijateľný nosič a poprípade stupeň spočívajúci v mikromletí prášku a nosiča, čím sa získajú častice v rozsahu respirovateľnej veľkosti častíc.
35. 36. Spôsob podľa nárokov 29 až 35,vyznačujúci sa tým, že obsahuje ďalej stupeň aglomerácie častíc na guľôčky s priemerom 1 mm alebo menším.
36. 37. Farmaceutický prostriedok podľa nárokov 1 až 28 na použitie v medicíne.
37. 38. Použitie farmaceutického prostriedku podľa nároku 1 až 28 na výrobu liečiva na liečenie ochorení cestou respiračného traktu.
38. 39. Spôsob liečenia pacienta, ktorý potrebuje liečenie, vyznačujúci sa tým, že sa uvedenému pacientovi aplikuje terapeuticky účinné množstvo farmaceutického prostriedku podľa nárokov 1 až 28.
39. 40. Inhalačné zariadenie na suchý prášok, vyznačujúce sa tým, že obsahuje farmaceutický prostriedok podľa nárokov 1 až 28.
40. 41. Inhalačné zariadenie na suchý prášok podľa nároku 40, vyznačujúce sa tým, že inhalátorom je inhalátor na jedinú dávku.
41. 42. Inhalačné zariadenie na suchý prášok podľa nároku 40, vyznačujúce sa tým, že inhalátorom je inhalátor na viacnásobné dávky.