SI9720013A - Uravnavanje ekspresije citokinov TH1/TH2 z ribavirinom in z analogi ribavirina v aktiviranih T-limfocitih - Google Patents
Uravnavanje ekspresije citokinov TH1/TH2 z ribavirinom in z analogi ribavirina v aktiviranih T-limfocitih Download PDFInfo
- Publication number
- SI9720013A SI9720013A SI9720013A SI9720013A SI9720013A SI 9720013 A SI9720013 A SI 9720013A SI 9720013 A SI9720013 A SI 9720013A SI 9720013 A SI9720013 A SI 9720013A SI 9720013 A SI9720013 A SI 9720013A
- Authority
- SI
- Slovenia
- Prior art keywords
- ribavirin
- response
- activated
- cells
- lymphocytes
- Prior art date
Links
- IWUCXVSUMQZMFG-AFCXAGJDSA-N Ribavirin Chemical compound N1=C(C(=O)N)N=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 IWUCXVSUMQZMFG-AFCXAGJDSA-N 0.000 title claims abstract description 82
- 229960000329 ribavirin Drugs 0.000 title claims abstract description 66
- HZCAHMRRMINHDJ-DBRKOABJSA-N ribavirin Natural products O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1N=CN=C1 HZCAHMRRMINHDJ-DBRKOABJSA-N 0.000 title claims abstract description 65
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 title claims abstract description 48
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 title claims description 28
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 title claims description 28
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 23
- 102000006992 Interferon-alpha Human genes 0.000 claims description 20
- 108010047761 Interferon-alpha Proteins 0.000 claims description 20
- 230000004044 response Effects 0.000 claims description 20
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 18
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 16
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 15
- 230000007423 decrease Effects 0.000 claims description 9
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 7
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 7
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 7
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims description 6
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims description 5
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 claims description 4
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 claims description 4
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims description 4
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 claims description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 3
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 claims description 3
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 claims description 2
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 claims description 2
- 230000007815 allergy Effects 0.000 claims description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 claims description 2
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 2
- 210000000605 viral structure Anatomy 0.000 claims 4
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims 3
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 claims 2
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 claims 2
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 claims 1
- 241000711549 Hepacivirus C Species 0.000 claims 1
- 241000725303 Human immunodeficiency virus Species 0.000 claims 1
- 241000222722 Leishmania <genus> Species 0.000 claims 1
- 208000014837 parasitic helminthiasis infectious disease Diseases 0.000 claims 1
- 230000005867 T cell response Effects 0.000 abstract description 7
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 abstract 3
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 description 52
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 52
- PHEDXBVPIONUQT-UHFFFAOYSA-N Cocarcinogen A1 Natural products CCCCCCCCCCCCCC(=O)OC1C(C)C2(O)C3C=C(C)C(=O)C3(O)CC(CO)=CC2C2C1(OC(C)=O)C2(C)C PHEDXBVPIONUQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 48
- PHEDXBVPIONUQT-RGYGYFBISA-N phorbol 13-acetate 12-myristate Chemical compound C([C@]1(O)C(=O)C(C)=C[C@H]1[C@@]1(O)[C@H](C)[C@H]2OC(=O)CCCCCCCCCCCCC)C(CO)=C[C@H]1[C@H]1[C@]2(OC(C)=O)C1(C)C PHEDXBVPIONUQT-RGYGYFBISA-N 0.000 description 48
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 37
- 108040006852 interleukin-4 receptor activity proteins Proteins 0.000 description 30
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 23
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 17
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 17
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 16
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 14
- PGHMRUGBZOYCAA-ADZNBVRBSA-N ionomycin Chemical compound O1[C@H](C[C@H](O)[C@H](C)[C@H](O)[C@H](C)/C=C/C[C@@H](C)C[C@@H](C)C(/O)=C/C(=O)[C@@H](C)C[C@@H](C)C[C@@H](CCC(O)=O)C)CC[C@@]1(C)[C@@H]1O[C@](C)([C@@H](C)O)CC1 PGHMRUGBZOYCAA-ADZNBVRBSA-N 0.000 description 13
- PGHMRUGBZOYCAA-UHFFFAOYSA-N ionomycin Natural products O1C(CC(O)C(C)C(O)C(C)C=CCC(C)CC(C)C(O)=CC(=O)C(C)CC(C)CC(CCC(O)=O)C)CCC1(C)C1OC(C)(C(C)O)CC1 PGHMRUGBZOYCAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 11
- 102000008072 Lymphokines Human genes 0.000 description 10
- 108010074338 Lymphokines Proteins 0.000 description 10
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 10
- 229950000038 interferon alfa Drugs 0.000 description 10
- 108010038453 Interleukin-2 Receptors Proteins 0.000 description 8
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 8
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 8
- 208000024908 graft versus host disease Diseases 0.000 description 7
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 7
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 6
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 description 6
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 6
- 239000002777 nucleoside Substances 0.000 description 6
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 6
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 5
- 102000010789 Interleukin-2 Receptors Human genes 0.000 description 5
- 108010002616 Interleukin-5 Proteins 0.000 description 5
- 102000000743 Interleukin-5 Human genes 0.000 description 5
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 5
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 5
- 238000011161 development Methods 0.000 description 5
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 5
- 102000010787 Interleukin-4 Receptors Human genes 0.000 description 4
- 108010038486 Interleukin-4 Receptors Proteins 0.000 description 4
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 125000001160 methoxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])OC(*)=O 0.000 description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 4
- 125000003835 nucleoside group Chemical group 0.000 description 4
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 4
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 4
- 238000011160 research Methods 0.000 description 4
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 4
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 4
- -1 CSNH 2 Chemical group 0.000 description 3
- 101001057504 Homo sapiens Interferon-stimulated gene 20 kDa protein Proteins 0.000 description 3
- 101001055144 Homo sapiens Interleukin-2 receptor subunit alpha Proteins 0.000 description 3
- 101000914514 Homo sapiens T-cell-specific surface glycoprotein CD28 Proteins 0.000 description 3
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 3
- 102000008070 Interferon-gamma Human genes 0.000 description 3
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 3
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 3
- 102000003814 Interleukin-10 Human genes 0.000 description 3
- 108090000174 Interleukin-10 Proteins 0.000 description 3
- 102100026878 Interleukin-2 receptor subunit alpha Human genes 0.000 description 3
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 102100027213 T-cell-specific surface glycoprotein CD28 Human genes 0.000 description 3
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 3
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 3
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 description 3
- 102000003675 cytokine receptors Human genes 0.000 description 3
- 108010057085 cytokine receptors Proteins 0.000 description 3
- RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N imidazole Natural products C1=CNC=N1 RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000010185 immunofluorescence analysis Methods 0.000 description 3
- 239000012073 inactive phase Substances 0.000 description 3
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 3
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 description 3
- 229960003130 interferon gamma Drugs 0.000 description 3
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 3
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 3
- 238000001308 synthesis method Methods 0.000 description 3
- HBOMLICNUCNMMY-XLPZGREQSA-N zidovudine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](N=[N+]=[N-])C1 HBOMLICNUCNMMY-XLPZGREQSA-N 0.000 description 3
- 208000030507 AIDS Diseases 0.000 description 2
- 108010036941 Cyclosporins Proteins 0.000 description 2
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 2
- 239000003155 DNA primer Substances 0.000 description 2
- 206010012438 Dermatitis atopic Diseases 0.000 description 2
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000012413 Fluorescence activated cell sorting analysis Methods 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- 208000005176 Hepatitis C Diseases 0.000 description 2
- NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N Histamine Chemical compound NCCC1=CN=CN1 NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 2
- 102100034343 Integrase Human genes 0.000 description 2
- 102000004388 Interleukin-4 Human genes 0.000 description 2
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 description 2
- 102000004890 Interleukin-8 Human genes 0.000 description 2
- 108090001007 Interleukin-8 Proteins 0.000 description 2
- 108010092799 RNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 2
- PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N Sodium azide Chemical compound [Na+].[N-]=[N+]=[N-] PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000006044 T cell activation Effects 0.000 description 2
- 206010067584 Type 1 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 2
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 2
- 230000000172 allergic effect Effects 0.000 description 2
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 2
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 2
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 2
- 201000008937 atopic dermatitis Diseases 0.000 description 2
- 208000010668 atopic eczema Diseases 0.000 description 2
- 125000006297 carbonyl amino group Chemical group [H]N([*:2])C([*:1])=O 0.000 description 2
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 2
- 229930182912 cyclosporin Natural products 0.000 description 2
- 230000016396 cytokine production Effects 0.000 description 2
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 230000001605 fetal effect Effects 0.000 description 2
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 125000000623 heterocyclic group Chemical group 0.000 description 2
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 2
- 229940028885 interleukin-4 Drugs 0.000 description 2
- XKTZWUACRZHVAN-VADRZIEHSA-N interleukin-8 Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@@H](NC(C)=O)CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N1[C@H](CCC1)C(=O)N1[C@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@H](CO)C(=O)N1[C@H](CCC1)C(N)=O)C1=CC=CC=C1 XKTZWUACRZHVAN-VADRZIEHSA-N 0.000 description 2
- 229940096397 interleukin-8 Drugs 0.000 description 2
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 2
- 150000003833 nucleoside derivatives Chemical class 0.000 description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000008823 permeabilization Effects 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 239000013615 primer Substances 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- XJMOSONTPMZWPB-UHFFFAOYSA-M propidium iodide Chemical compound [I-].[I-].C12=CC(N)=CC=C2C2=CC=C(N)C=C2[N+](CCC[N+](C)(CC)CC)=C1C1=CC=CC=C1 XJMOSONTPMZWPB-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 2
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 2
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 2
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 2
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 102000003390 tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 2
- 229960002555 zidovudine Drugs 0.000 description 2
- DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N β‐Mercaptoethanol Chemical compound OCCS DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YRSNDNVRKGEOHF-SOOFDHNKSA-N (3r,4s,5r)-5-(hydroxymethyl)thiolane-2,3,4-triol Chemical compound OC[C@H]1SC(O)[C@H](O)[C@@H]1O YRSNDNVRKGEOHF-SOOFDHNKSA-N 0.000 description 1
- ZBNZAJFNDPPMDT-UHFFFAOYSA-N 1h-imidazole-5-carboxamide Chemical compound NC(=O)C1=CNC=N1 ZBNZAJFNDPPMDT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UOGZUEWEVBJVOO-VPENINKCSA-N 5-[(2S,3R,5S)-3-hydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-1H-1,2,4-triazole-3-carboxamide Chemical compound [C@@H]1([C@H](O)C[C@H](O1)CO)C1=NC(=NN1)C(=O)N UOGZUEWEVBJVOO-VPENINKCSA-N 0.000 description 1
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 1
- 208000012657 Atopic disease Diseases 0.000 description 1
- 206010003645 Atopy Diseases 0.000 description 1
- 208000030767 Autoimmune encephalitis Diseases 0.000 description 1
- 229910014033 C-OH Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910014570 C—OH Inorganic materials 0.000 description 1
- 241000450599 DNA viruses Species 0.000 description 1
- 206010012442 Dermatitis contact Diseases 0.000 description 1
- 238000012286 ELISA Assay Methods 0.000 description 1
- 238000008157 ELISA kit Methods 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101000959820 Homo sapiens Interferon alpha-1/13 Proteins 0.000 description 1
- 101001076386 Homo sapiens Interleukin-1 family member 10 Proteins 0.000 description 1
- 206010061598 Immunodeficiency Diseases 0.000 description 1
- 102100040019 Interferon alpha-1/13 Human genes 0.000 description 1
- 102100026015 Interleukin-1 family member 10 Human genes 0.000 description 1
- 102000003816 Interleukin-13 Human genes 0.000 description 1
- 108090000176 Interleukin-13 Proteins 0.000 description 1
- 102000004889 Interleukin-6 Human genes 0.000 description 1
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 1
- 102000000585 Interleukin-9 Human genes 0.000 description 1
- 108010002335 Interleukin-9 Proteins 0.000 description 1
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 1
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 1
- 208000009388 Job Syndrome Diseases 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 description 1
- 241000222732 Leishmania major Species 0.000 description 1
- 206010067125 Liver injury Diseases 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 208000000291 Nematode infections Diseases 0.000 description 1
- 229930040373 Paraformaldehyde Natural products 0.000 description 1
- 208000030852 Parasitic disease Diseases 0.000 description 1
- 208000007542 Paresis Diseases 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000031951 Primary immunodeficiency Diseases 0.000 description 1
- XESARGFCSKSFID-UHFFFAOYSA-N Pyrazofurin Natural products OC1=C(C(=O)N)NN=C1C1C(O)C(O)C(CO)O1 XESARGFCSKSFID-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 208000025747 Rheumatic disease Diseases 0.000 description 1
- 108020001027 Ribosomal DNA Proteins 0.000 description 1
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 1
- 206010054979 Secondary immunodeficiency Diseases 0.000 description 1
- 210000000662 T-lymphocyte subset Anatomy 0.000 description 1
- 108010006785 Taq Polymerase Proteins 0.000 description 1
- 210000004241 Th2 cell Anatomy 0.000 description 1
- FZWLAAWBMGSTSO-UHFFFAOYSA-N Thiazole Chemical compound C1=CSC=N1 FZWLAAWBMGSTSO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- NECRWEDLGBJLQV-TXICZTDVSA-N [(2r,3s,4r,5s)-5-(3-carbamoyl-1h-1,2,4-triazol-5-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methyl sulfamate Chemical compound NC(=O)C1=NNC([C@H]2[C@@H]([C@H](O)[C@@H](COS(N)(=O)=O)O2)O)=N1 NECRWEDLGBJLQV-TXICZTDVSA-N 0.000 description 1
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000001464 adherent effect Effects 0.000 description 1
- 239000013566 allergen Substances 0.000 description 1
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000000843 anti-fungal effect Effects 0.000 description 1
- 230000036436 anti-hiv Effects 0.000 description 1
- 229940121375 antifungal agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 239000003443 antiviral agent Substances 0.000 description 1
- 230000005784 autoimmunity Effects 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 238000007664 blowing Methods 0.000 description 1
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 1
- KQNZDYYTLMIZCT-KQPMLPITSA-N brefeldin A Chemical compound O[C@@H]1\C=C\C(=O)O[C@@H](C)CCC\C=C\[C@@H]2C[C@H](O)C[C@H]21 KQNZDYYTLMIZCT-KQPMLPITSA-N 0.000 description 1
- JUMGSHROWPPKFX-UHFFFAOYSA-N brefeldin-A Natural products CC1CCCC=CC2(C)CC(O)CC2(C)C(O)C=CC(=O)O1 JUMGSHROWPPKFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010804 cDNA synthesis Methods 0.000 description 1
- 125000002837 carbocyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000003915 cell function Effects 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 238000004891 communication Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 1
- 208000010247 contact dermatitis Diseases 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 238000004163 cytometry Methods 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 1
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 1
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 239000002612 dispersion medium Substances 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 241001493065 dsRNA viruses Species 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYSA-N ethidium bromide Chemical compound [Br-].C12=CC(N)=CC=C2C2=CC=C(N)C=C2[N+](CC)=C1C1=CC=CC=C1 ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960005542 ethidium bromide Drugs 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 239000003862 glucocorticoid Substances 0.000 description 1
- ZJYYHGLJYGJLLN-UHFFFAOYSA-N guanidinium thiocyanate Chemical compound SC#N.NC(N)=N ZJYYHGLJYGJLLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000002443 helper t lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 1
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 1
- 231100000234 hepatic damage Toxicity 0.000 description 1
- 210000003494 hepatocyte Anatomy 0.000 description 1
- 150000002391 heterocyclic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 229960001340 histamine Drugs 0.000 description 1
- 230000003054 hormonal effect Effects 0.000 description 1
- 230000028996 humoral immune response Effects 0.000 description 1
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 1
- 206010051040 hyper-IgE syndrome Diseases 0.000 description 1
- 230000008086 immune related sensitivity Effects 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 238000010166 immunofluorescence Methods 0.000 description 1
- 230000002134 immunopathologic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002650 immunosuppressive therapy Methods 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 229940047122 interleukins Drugs 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 230000008818 liver damage Effects 0.000 description 1
- 230000000527 lymphocytic effect Effects 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 102000006240 membrane receptors Human genes 0.000 description 1
- 108020004084 membrane receptors Proteins 0.000 description 1
- 239000003226 mitogen Substances 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 229920002866 paraformaldehyde Polymers 0.000 description 1
- 244000045947 parasite Species 0.000 description 1
- 230000036281 parasite infection Effects 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 210000005105 peripheral blood lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 1
- XESARGFCSKSFID-FLLFQEBCSA-N pirazofurin Chemical compound OC1=C(C(=O)N)NN=C1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 XESARGFCSKSFID-FLLFQEBCSA-N 0.000 description 1
- 239000000902 placebo Substances 0.000 description 1
- 229940068196 placebo Drugs 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 239000001397 quillaja saponaria molina bark Substances 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 1
- 230000002207 retinal effect Effects 0.000 description 1
- 230000000552 rheumatic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003161 ribonuclease inhibitor Substances 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 description 1
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 229910052711 selenium Inorganic materials 0.000 description 1
- 208000017520 skin disease Diseases 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 230000009469 supplementation Effects 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 229940037128 systemic glucocorticoids Drugs 0.000 description 1
- 229910052714 tellurium Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 1
- 150000003573 thiols Chemical class 0.000 description 1
- 229940104230 thymidine Drugs 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000002103 transcriptional effect Effects 0.000 description 1
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GPRLSGONYQIRFK-MNYXATJNSA-N triton Chemical compound [3H+] GPRLSGONYQIRFK-MNYXATJNSA-N 0.000 description 1
- 208000035408 type 1 diabetes mellitus 1 Diseases 0.000 description 1
- 241001430294 unidentified retrovirus Species 0.000 description 1
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
- A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
- A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
- A61K31/52—Purines, e.g. adenine
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
- C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
- C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
- C07H19/16—Purine radicals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
- A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
- A61K31/7056—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing five-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- A61K38/21—Interferons [IFN]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
- A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P33/00—Antiparasitic agents
- A61P33/10—Anthelmintics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
- C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
- C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
- C07H19/052—Imidazole radicals
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
- C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
- C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
- C07H19/056—Triazole or tetrazole radicals
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
- C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
- C07H19/24—Heterocyclic radicals containing oxygen or sulfur as ring hetero atom
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Public Health (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
Abstract
Ribavirin je predpisan pacientu v količinah, ki učinkovito uravnavajo ekspresijo limfokinov v aktiviranih T-celicah. Predvsem je Ribavirin uporabljen za zavrtje Th2 uravnavanega odziva T celic in za povečanje Th1 uravnavanega odziva T celic. Nadalje, eden ali več analogov Ribavirina je predpisanih pacientu v količini, ki je učinkovita za uravnavanje ekspresije limfokinov v aktiviranih T celicah. Analogi Ribavirina so lahko uporabljeni za zavrtje ali promocijo Th1 ali Th2 uravnavanega odziva T celic.ŕ
Description
URAVNAVANJE EKSPRESIJE CIT0KIN0VTH1/TH2 Z RIBAVIRINOM IN Z ANALOGI RIBAVIRINA V AKTIVIRANIH T-LIMFOCITIH
PODROČJE TEHNIKE
Področje izuma je imunologija.
PRIKAZ PROBLEMA
Limfokini so skupina polipeptidov, ki pripadajo družini citokinov, hormonom podobnim molekulam, ki lahko vplivajo na različne celične funkcije celic in omogočajo komunikacijo med različnimi celicami. Najnovejše raziskave so pripomogle k razjasnitvi vloge citokinov pri imunološkem odzivu. Sinteza limfokinov pri CD4+ (in tudi pri CD8+) T celicah pomagalkah pogosto pripada enemu od dveh fenotipov, Th1 in Th2, v človeškem sistemu in sistemu glodalcev (Romagnani, 1991, Immunol Today 12: 256-257; Mosmann, 1989, Annu Rev Immunol 7: 145-173). Celice sintetizirajo interleukin 2 (IL-2), tumorski nekrozni faktor (TNFa) in interferon gama (IFNv). Ti so prednostno odgovorni za imunološki odziv celice, kot je zakasnela povečana imunska občutljivosti. Fenotip Th2 celic producira interleukine IL-4, IL-5, IL-6, IL-9, IL-10 in IL-13 in so primarno vključene v zagotavljanje optimalne pomoči pri imunskem odzivu človeka, kot so izotipna zamenjava IgE in lgG4 protiteles (Mosmann, 1989, Annu Rev Immunol7:l 45-173).
Močno polarizirana Th1 in Th2 odziva ne samo, da predstavljata različni vlogi pri zaščiti, lahko tudi izzoveta različne imunopatološke reakcije. Odziv tipa Th1 je vpleten v specifično avtoimunost organov, kot so: eksperimentalno avtoimuno vaskularno mrežnično vnetje (Dubey in sod, 1991, EurCytokine Network2,147-152), eksperimentalni avtoimuni encefalitis (EAE) (Beraud in sod, 1991, Celi Immunol 133:379-389) in insulinsko odvisno sladkorno bolezen (Hahn in sod, 1987, Eur J Immunol 18:2037-2042), kontaktni dermatitis (Kapsenberg in sod, Immunol Today 12,392395) in nekatere kronične vnetne nepravilnosti. V nasprotju je odziv tipa Th2 odgovoren pri sprožitvi alergenih atopičnih motenj (proti pogostim alergenom okolja), kot so: astma (Walker in sod, 1992, Am Rev Resp Dis 148:109-115) in atopični dermatitis (van der Heijden in sod, 1991, J InvestDerm 97:389-394), prav tako mislijo, da poveča jakost infekcije s tkivnimi protozoji, kot so: paraziti (Finkelman in sod, 1991, Immunoparasitol Today12: A62-66) in Leishmania major (Caceres-Dittmar in sod. 1993, Ciin Exp Immunol 91: 500-505), ki so inducirane v nekaterih primarnih imunoloških nepravilnostih, kot sta: hiper IgE sindrom (Del Prete in sod, 1989, J Ciin InvestM: 1830-1835) in OmennOs sindrom (Schandene in sod, 1993, Eur J lmmuno/23: 56-60),
-2prav tako so asociirana z zmanjšano sposobnostjo zavrtja HIV replikacije (Barker in sod, Proč Soc Natl Acad Sci USA 92:11135-11139).
Razvidno je, da je uravnavanje vzorca limfokinov pri navedenih omenjenih bolezenskih stanjih koristno iz vidika terapije. Povečanje Th1 odziva bi po vsej verjetnosti pripeljal do zmanjšanja Th2 fenotipa in obratno. Monoklonalna protitelesa (mAb) na limfokine, limfokini samostojno in druge substance, kot so: tiolni antioksidanti (Jeannin in sod, 1995, J Exp Med 182:1785-1792), kot je bilo pokazano, spremenijo patogenezo določenih bolezni z inhibicijo bolezensko-promoviranega vzorca citokinov, Th1 ali Th2. Na primer, intracelularno infekcijo s protozoji se da omejiti s prisotnostjo IFNv, vendar pa zvečanje IL-4 poveča nevarnost infekcije, medtem ko je infekcija z nematodi kontrolirana z IL-4 in pospešena z IFNy (Heinzel in sod, 1989, J Exp Med 162: 59-72; Else in sod, 1994, J Exp Med 179:347-351). Stanje insulinsko odvisne sladkorne bolezni v NOD miših in EAE v miših in podganah se lahko izboljša z zdravljenjem z IL-4 ali z proti-IFNy mAb, če se zdravljenje prične pred razvojem bolezni (Rapoport in sod, 1993, J Exp Med 178: 87-99; Račke in sod, 1994, J Exp Med 180: 1961-1966; Campbell in sod, 1991, J Ciin Invest 87: 739-742). Dodatno avtoimuno cepljenje proti bolezni gostitelja (GVHD), ki je označena s podobnim sindromom, kot je sistemsko tuberkolozno ali revmatično obolenje kože, je povezana s produkcijo Th2 limfokinov in inhibirana s proti IL-4 protitelesi (Umland in sod, 1992, Ciin Immunol Immunopathol33:66-73). Na drugi strani so Th1 citokini sintetizirani v akutnem stanju GVHD, ob katerem donorske CD8+ T celice razvijejo CTL in uničijo gostiteljski imunski sistem. Zdravljenje z proti-IFNy ali proti-TNFa mAb izboljša stanje bolezni, zdravljenje z proti IL-2 mAb preobrne akutno GVHD v avtoimuno GVHD (Via in Finkelman, 1993, Int Immunol 5: 565-572).
Klinični poskusi nativnega in rekombinantnega IL-2 pri zdravljenju HIV okuženih pacientov se izvajajo od leta 1983 (Volberding in sod, 1987, AIDS Res Hum Retroviruses 3:115-124). Način zdravljenja je v povezavi z boleznijo, tako da je razvoj AIDS-a povezan s spreminjanjem vzorca sintetiziranih limfokinov (Clerici in Shearer, 1994, Immunol Today 15: 575-581). Po določenem času je v okuženem posamezniku, ki se mu bolezen stopnjuje, zaznati znižanje ekspresije Th1 limfokinov, kot je: IL-2 (Maggi in sod, 1987, Eur J Immunol 17:1685-1690; Gruters in sod, 1990, Eur J Immunol 20: 1039-1044; Clerici in sod, 1993, J Ciin Invest 91: 759-765), vzporedno s povečano produkcijo Th2 limfokinov, kot sta: IL-4 in IL-10 (Clerici in sod, 1994, J Ciin Invest93: 768-775; Hoffman in sod, 1985, Virology 147: 326-335). T celice, ki izhajajo iz asimptomatičnih ali dalj časa preživelih, ki so jih obdelovali z IL-2 imajo povečano proti-HIV aktivnost, medtem ko izpostavitvi le teh IL-4 in IL-10 zmanjša sposobnost zavrtja HIV pomnoževanja in sinteze IL-2 (Barker in sod, 1995, Proč Soc Natl Acad Sci USA 92:11135-11139).
-3Učinkovitost sedanjih terapevtikov, ki spreminjajo imunološko sliko (mAb in rekombinantni citokini), je prav tako omejena. Na primer ponavljajoče zdravljenje z monoklonalnimi protitelesi povzroči pri živalih razvoj protiteles proti uporabljenim monoklonalnim protitelesom, kar omejuje njihovo uporabnost. Razvili so človeška monoklonalna protitelesa, ki očitno znižajo nevarnost vnosa imunskega odziva na ta monoklonalna protitelesa. Vendar so le ta še vedno v razvoju. Njihova značilnost je, da so nova mAbs veliki proteini in zaradi tega imajo lahko probleme pri doseganju tarčnih mest. Terapevtiki na osnovi citokinov imajo prav tako omejitve. Na primer IL-2 zdravljenje GVHD vodi do razvoja akutne GVHD pri miših.
Ribavirin (1-p-D-ribofuranozil-1,2,4-triazol-3-karboksamid) je sintetični nukleozid sposoben inhibicije razmnoževanja RNA in DNA virusov (Huffman in sod, 1973, Antimicrob Agents Chemother3:235; Sidwell in sod, 1972, Science 177: 705). Potrdili smo, da ima Ribavirin poleg antivirusne aktivnosti, tudi vpliv na določen imunski odziv (povzetek Jolley in Suchil, 1984, Clinical Applications of Ribavirin; stran 93-96). Prav tako smo potrdili, da Ribavirin vpliva na proliferacijo mitogen in antigen aktiviranih T in B limfocitov (Tam in sod, 1995 (podatki niso prikazani); Peavy in sod, 1980, Infection and Immunity29; 583-589) in v primeru, ko je kombiniran s ciklosporini, Ribavirin kaže učinkovitost v daljši preživelosti transplantantov (Jolley in sod, 1988, Transplantation Proč 20:703-706).
Poleg omenjenega je naše raziskovanje opazno pospešilo raziskave z odkritjem, da Ribavirin vpliva na vzorec ekspresije citokinov pri imunskem odzivu delno s povečanjem Th1 odziva in z znižanjem Th2 odziva. Ta dognanja niso predpostavljena s predhodnimi raziskavami. Ribavirin je poznan, da inhibira oboje: funkcijsko humoralni imunološki odziv (Peavy in sod, 1981, J ImmunolteG; 861-864, Powers in sod, 1982, Antimicrob Agents Chemother22; 108-114) in IgEuravnavano spreminjanje celic sekrecije, ki se nahajajo v povezovalnem tkivu in izločajo heparin in histamin v času vnetne reakcije (Marquardt in sod, 1987, J Pharmacol Exp Therapeutics 240: 145-149) (obastaTh2 limfokin uravnavana dogodka). Nadalje Ribavirin poveča proti virusni vpliv azidotimidina (AZT) v limfocitih periferne krvi pri HIV pacientih (Vogt in sod, 1987, Science 235: 1376-1379). Ta odkritja so pomembna, ker AZT zniža količino IL-2 receptorjev (IL-2R) ne pa ekspresijo IL-2 (Viora in Catnponeschi, 1995, Celi Immunol163; 289-295). Zato je mogoče, da Ribavirin poveča AZT delovanje z modulacijo IL-2 ekspresije in dvigom nivoja IL-2R. Zdravljenje kroničnega GVHD imunokompromitiranih pacientov z Ribavirinom (Th2 uravnavana neurejenost) vodi do dramatičnega razpleta bolezni, izid, ki ga ni moč doseči ob uporabi konvencionalnih imunosupresivnih terapijah, kot sta: ciklosporini in glukokartikoidi (Cassano, 1991, Bone Marrow Transpalntation7; 247-248). Končno, zdravljenje pacientov s hepatitisom C (HCV) z Ribavirinom (eno leto) je pokazalo manj limfocitnih agregatov in mnogo manj poškodb na jetrih, kot pri kontroli
-4s placebo (Dusheiko in sod, 1994, Hepatology 20:206A). Ti rezultati so lahko odraz dejstva, da je predominantni imunski odziv na hepatitis C pod vplivom Th1 limfokinov, T celice Th0/Th2 fenotipa so lahko inficirane z HCV (Zignego in sod, 1994, nepublicirani podatki) in da ta infekcija lahko nadalje vodi do uničenja hepatocitov s protitelesi.
KRATEK OPIS SLIK
TABELA 1 predstavlja koncentracijo limfokinov IL-2, IL-4, TNF« in IFNy (pg/ml) izmerjenih po 48 urah in 72 urah v ekstracelularnem ekstraktu v neaktivni fazi in v s PMA/ionomicin aktiviranih celicah in ekspresijo membranskih IL-2 (IL-2R) in IL-4 (IL-4R) receptorjev (povprečna intenziteta fluerescence na kanal (MCF)) pri T celicah človeka.
SLIKA 1 je grafični prikaz vpliva Ribavirina in interferona alfa na ekspresijo ekstracelularnih IL-2, IL-4, TNFa in IFNy v PMA/ionomicin aktiviranih T limfocitih. Rezultati so izraženi kot procent povečanja ekspresije limfokinov po PMA/ionomicin obdelavi.
SLIKA 2 je grafični prikaz vpliva 2,10 in 50 μΜ Ribavirina v prisotnosti 2000 U/ml interferona alfa (slike na levi) in vpliv 500,1000 ali 2000 U/ml interferona alfa (slike na desni) v prisotnosti 10 μΜ Ribavirina na ekspresijo ekstracelularnih IL-2 (A in B) in IL-4 (C in D) v PMA/ionomicin aktiviranih T limfocitih.
SLIKA 3 je grafični prikaz vpliva Ribavirina in interferona na ekspresijo mRNA IL-2, IL-4 in IFNy v PMA/ionomicin aktiviranih T limfocitih.
SLIKA 4 je grafični prikaz vpliva Ribavirina in interferona alfa na ekspresijo membranskih receptorjev IL-2 in IL-4 v PMA/ionomicin aktiviranih T limfocitih. Rezultati so izraženi kot procent povečanja ekspresije receptorjev limfokinov po PMA/ionomicin obdelavi.
SLIKA 5 je grafični prikaz ekspresije intracelularnih IL-2 v ne obdelanih (A in E) ali v aktiviranih CD4+ (zgornja slika) ali CD8+ (spodnja slika) T celicah, ki so bile obdelane samo s PMA/ionomicinom (B in F) ali ob prisotnosti 10 μΜ Ribavirina (C in G) ali 5000 U/ml interferona alfa (D in H). Podatki iz enega eksperimenta so prikazani in predstavljeni kot procenti celic, ki kažejo dvojno pozitivno barvanje za IL-2 in CD4+ ali CD8+.
SLIKA 6 je grafični prikaz opazovanih analogov Ribavirina.
-5SLIKA 7 je zbirka grafov, ki prikazujejo rezultate različnih koncentracij analogov Ribavirina na IL-2, TNFa, IFNY, IL-4 in IL-5.
POVZETEK IZUMA
V skladu z enim od vidikov tega izuma je nukleozid Ribavirin predpisan pacientu v območju količin, ki učinkovito vplivajo na ekspresijo limfokinov pri aktiviranih T celicah. Predvsem je Ribavirin uporaben za zavrtje Th2 uravnavanega T celičnega odziva in za promocijo Th1 uravnavanega T celičnega odziva.
Tako namesto Ribavirina uporabljenega kot proti virusno zdravilo, se Ribavirin v tem primeru uporablja pri zdravljenju neuravnovešenosti v ekspresiji limfokinov. Taka neravnovesja je moč zaslediti pri spremljajočih okoliščinah alergenih atopičnih nepravilnostih, kot so: astma nastala zaradi alergije in atopični dermatitis, infekcija s paraziti in laišmhmanija in različne primarne in sekundarne imunske pomanjkljivosti, ki so lahko povezane z virusno infekcijo.
V skladu z drugimi vidiki predstavljenega izuma, je eden ali več analogov Ribavirina, predpisanih pacienu v območju količin, ki učinkovito vplivajo na ekspresijo limfokinov v aktiviranih T celicah. Analogi Ribavirina se lahko uporabljajo za zavrtje ali povečanje Th1 ali Th2 uravnavanega T celičnega odziva.
PODROBEN OPIS IZVEDBENIH PRIMEROV
Prednostno je pacientu Ribavirin predpisan peroralno v količini, ki doseže nivo krvnega seruma v povprečju od 0.25 do 12.5 μΜ, in v večini približno 2.5 μΜ. Pri povprečnem značilnem posamezniku je optimalni nivo seruma približno 4.5 mg/kg/dan telesne teže, kar pomeni, da je lahko predpisan v količini od 200 do 1200 mg. Zaželeno je, da je doza porazdeljena v več manjših doz, ki so aplicirane preko celega dne.
Ker je Ribavirin na tržišču že nekaj let, je poznanih veliko oblik doziranja in načinov aplikacije, in uporabljajo se lahko vse primerne oblike in načini doziranja. Na primer, poleg peroralnega doziranja, je lahko Ribavirin apliciran intravenozno, intramuskularno, intraperitonalno, preko kože in podobno. Farmacevtske formulacije, ki vsebujejo Ribavirin lahko vsebujejo enega ali več farmacevtsko sprejemljivih nosilcev, ki lahko vključujejo dodatke, kot so: stabilizatorji (da zagotovijo dolgoročno shranjevanje), emulgatorji, vezne substance, zgoščevalne substance, soli, perzervativi, topila, disperzijski mediji, prevleke, protibakterijske in protiglivne substance,
-6izotonične in adsorbcijske substance, ki upočasnijo delovanje in podobno. Uporaba naštetih medijev in substanc za farmacevtsko aktivno substanco je dobro poznana strokovnjakom. Razen v primeru, daje kateri od konvencionalnih medijev ali substanc nekompatibilen z Ribavirinom, se njihova omenjena uporaba v terapevtskih kompozicijah in preparatih poudari. Dodatne aktivne substance so lahko dodane v kompozicije ali preparacije.
Poleg navedenih terapevtskih uporab Ribavirina, se Ribavirin lahko uporablja kot laboratorijski pripomoček za preučevanje absorpcije, porazdeljevanja, celičnega pretoka in učinkovitosti. Odkrito je bilo, da ima nekaj analogov Virazola (predhodno poznanih in nepoznanih), ki so bili predhodno zavrnjeni, zaradi njihove minimalne aktivnosti, prav tako pomemben vpliv na citokine. V naši raziskavi smo pokazali, da je več razredov analogov Virazola, ki imajo vpliv na citokine, katerih primeri so podani pod naslovom analogi Ribavirina. Ti primeri so namenjeni označitvi mest, na katerih je Virazol lahko modificiran, da se doseže aktivno kompozicijo in to odkritje naj ne bi bilo omejeno na specifične prikazane spremembe. Nadalje je prikazano, da se te modifikacije lahko nanašajo na standardno D obliko Virazola, kot tudi na L obliko Virazola.
PRIMERI
Čiščenje celičnih linij in T celic
Enojederne celice periferne krvi (PBMCa) zdravega donorja so bile izolirane iz pufrnega plašča. 60 ml krvi je bilo nato centrifugirano v Ficoll-Hypaque gradientu. T celice so bile očiščene iz PBMCs z uporabo Lymphkwik limfocitnega izolacijskega reagenta, ki je specifičen za T celice (LK-25T, One Lambda, Canoga Park, CA). Povprečni izkoristek 40 do 60 χ 106 T celic smo nato inkubirali preko noči pri 37 °C v 20 do 30 ml RPMI-AP5 (RPMI-1640 medij (ICN, Costa Mesa, CA) vsebuje 20 mM Hepes pufer, pH 7.4, 5 % avtologne plazme, 1 % L-glutamina, 1 % penicilina/ streptamicina in 0.05 % 2-merkaptoetanola) z namenom odstranitve kontaminirajočih prilepljenih celic. V vseh eksperimentih so bile T celice sprane z RPMI-AP5 medija in prenesena na mikrotitrno ploščo (96 vzorčnih lukenj) v koncentraciji 1 χ 106 celic na ml.
Aktivacija T celic in obdelava z Ribavirinom
T celice so bile aktivirane z dodatkom 500 ng ionomicina in 10 ng forbol 12-miristata 13 acetata (PMA) (Calbiochem, La Jolla, CA), ter inkubirane pri 37 °C za 48 do 72 ur. PMA/ionomicin aktivirane T celice so bile takoj po aktivaciji obdelane z od 0.5 do 50 μΜ Ribavirina ali z od 250 do 10000 U/ml kontrolnega interferona alfa, ki je služil kot protivirusna kontrola (Accurate, Westbury, NY). Postopek obdelave je bil ponovljen po 24 urah. T celice vsake plošče so bile uporabljene za imunoflourescentno analizo in supernatant je bil uporabljen za meritve prisotnosti
-7ekstracelularnih citokinov. Po aktivaciji je bilo 900 pl celičnega supernatanta vsake mikrotitrne plošče prenesene na drugo mikrotitrno ploščo z namenom analize celične produkcije citokinov. Celice so bile nato uporabljene za imunoflourescentno analizo količine intracelularnih citokinov in ekspresije receptorjev citokinov.
Analiza ekstracelularnih citokinov
Koncentracije različnih človeških citokinov, ki jih celice producirajo, so bile določena v celičnem ekstraktu vsake mikrotitrne plošče. Sprememba koncentracije interleukina 2 (IL-2), ki je bila povzročena z aktivacijsko indukcijo, je bila določena z ELISA setom reagentov, ki je komercialno na tržišču (R & D systems Ouantikine kit, Minneapolis, MN) ali z biotestom, ki uporablja IL-2 odvisne celične linije CTLL-2 (ATCC, Rockville, MD). Aktivacijsko inducirane spremembe koncentracije interleukina 4 (IL-4), tumorskega nekroznega faktorja (TNFa), interleukina 8 (IL-8) (R & D systems, Ouantikine, Minneapolis, MN) in interferona gama (IFNy) (Endogen, Cambrige, MA) so bile določene z uporabo ELISA seta. ELISA rezultati so bili izraženi v pg/ml in CTLL-2 biotest kot število signalov na minuto, ki predstavljajo IL-2 odvisno celično vgrajevanje 3H-timidina (ICN, Costa Mesa, CA) z CTLL-2 celicami.
Direktne imunoflurescentne študije (receptorji citokinov)
Za direktno barvanje celičnih membranskih antigenov s protitelesi, ki imajo fluorescentne konjugate, so bile celice dvakrat sprane z izotonično solno raztopino, pH 7.4 (Becton Dickinson, Mansfield, MA), in ponovno suspendirane v 50 ml izotonične solne raztopine in razdeljene na dva dela. Eden od alikvotov je bil vzporedno barvan ali z PE-proti CD25/FITC-proti CD4 ali z PEpodganji proti mišji lgG+ proti-CDw124/FITC-proti CD4 mAb (monoklonalnimi protitelesi) in nespecifična fluorescenca je bila določena z barvanjem drugega alikvota z PE/FITC označenimi izotipnimi-ustreznimi monoklonalnimi protitelesi. Vsa flurescentno označena monoklonalna protitelesa so bila dobljena od Becton Dickinson (San Jose, CA), izjema so proti-CDw124, ki so bili dobljeni od Pharmingen, (San Diego, CA). Inkubacija je bila izvedena pri 4 °C v temi za 45 minut z uporabo nasičene koncentracije mAb. Nevgrajena markirana protitelesa smo odstranili s spiranjem v PBS pred analizo z FACScan pretočnim citometrom (Becton Dickinson).
Gostota antigenov je bila direktno določena v živih začasno prepustnih CD4+ T celicah in izražena s povprečno intenziteto fluerescence na kanal (MCF). Ekspresija specifičnih membranskih antigenov (CDw124, CD25) je bila predstavljena kot povprečni žarnih na kanal (MCS) dobljen z razliko med MCF FITC- ali PE- označenimi izotipno ustreznimi (lgG1) kontrolnimi mAb-barvanimi celicami od MCF FITC- ali PE- označenimi antigen-specifičnimi mAB barvanimi celicami. Ekspresija membranskega CD4+podseta celic barvanega z CD28 mAb je bila določena z razliko
-8med MCF CD28+ CD4+ in CD28' CD4' celic.
Kontrola preživelosti neobdelanih in Ribavirin in interferon obdelanih celic je bila določena v vsaki skupini vseh oligonukleotidov večih donorjev z barvanjem z barvo, propidium jodid (5 mg/ml končne koncentracije). Procent živih celic, ki niso inkorporirale propidium jodid, je bil določen s pretočno citometrijo in je bil več kot 90 % (območje med 90 in 99 %) po obdelavi z vsemi uporabljenimi koncentracijami.
Imunofluorescentne analize ekspresije intracelularnih citoklnov
Za analizo ekspresije intracelularnega IL-2 v podsetu CD4+ in CD8+ T celic, so bile T celice obdelane z 10 mg Brefeldin A (Gibco BRL, Gaithersburg, MD) zadnje 4 ure v obdobju aktivacije, ki je potekala od 48 do 72 ur. Obdelane so bile, da se je zmanjšalo ekstracelularno izločanje novo sintetiziranega IL-2. Po aktivaciji je bilo preneseno 900 ml celičnega supernatanta vsake mikrotitrne plošče na drugo mikrotitrno ploščo za analizo produkcije citokinov celic. Pred direktnim barvanjem (30 min, 4 °C, v temi) z FITC-konjugatnimi protitelesi na membranska antigena CD4 in CD8, so bile celice dvakrat sprane z izotonično solno raztopino, pH7.4, ki je vsebovala 1 % telečjega seruma fetusa (FCS) (Hyclone, Logan, UT) in 0.1 % natrijevega azida, in razdeljene na dva alikvota. Barvane celice so bile sprane z 1 ml pufra za barvanje in celična oborina je bila ponovno raztopljena v 100 ml fiksacijskega pufra (4 % paraformaldehida v PBS), ki ji je sledilo prepihovanje supernatanta. Fiksirane celice so bile shranjene pri 4 °C 20 minut, sprane z 1 ml pufra za barvanje in celična oborina je bila ponovno raztopljena z mešanjem v 50 ml pufra za permeabilizacijo (0.1 % saponina (ICN, Costa Mesa, CA) v PBS). Permeabilizirane celice so bile barvane z PE-označenimi IL-2 protitelesi za 30 minut pri 4 °C na temnem in sprane z 1 ml pufra za permeabilizacijo, ponovno raztopljene v 250 ml pufra za barvanje pred FACS analizo.
Analiza mRNA citokinov
Celotna RNA je bila ekstrahirana iz T celic, ki so bile neobdelane, in iz Ribavirin in interferon obdelanih aktiviranih T celic z uporabo komercialne različice gvanidin tiocianat/fenol ekstrakcijske tehnike (Trizol reagent (GIBCO/BRL)). RNA je bila sprana s 70 % etanolom in končno raztopljena v 10 μΙ DEPC-obdelani vodi:
Sinteza cDNA je bila izvedena po navodilih proizvajalca (Promega, Madison, Wl). Celokupna RNA (1 pg) je bila segreta na 65 °C za 10 minut, ohlajena na ledu pred dodatkom 2 pl pufra za reverzno transkriptazo v 10 kratni koncentraciji (100 mM Tris HCI (pH8.8), 500 mM KCI, 1 % Triton Χ-100), 5 mM MgCI2, 2 μ110 mM dNTP’s (1mM vsakega dNTP-ja), 0.5 pl RNase inhibitorja, 1 μΙ oligo (dT)15oligonukleotidnih začetnikov (0.5 pg/pg RNA) in 0.65 pl AMV reverzne transkriptaze (H.C.).
-9Reakcijska zmes je bila inkubirana pri 42 °C 1 uro, nato ji je sledila denaturacija pri 95 °C za 10 minut in ohlajevanje na ledu za 5 minut.
Za PCR reakcijo je bil uporabljen GeneAmp PCR set (Perkin-Elmer Cetus, Foster City, CA). RT reakcijski mešanici (3 pl) smo primešali 5 pl 10 x PCR pufra (500 mM KCI, 100 mM Tris HCI, pH 8.3, 15 mM MgCI2 in 0.01 % (W/v - teža/volumebn) želatine), 1 pl 10 mM dNTP-jev in 1 U Taq DNA polimeraze. Oligonukleotidni začetniki, ki so bili uporabljeni v tej reakciji, so bili: interleukin 2, interleukin 4, interferon gama (človeški) (Stratagene, La Jolla, CA) in pHE7 ribosomalni gen. Pogoji pomnoževanja so bili 45 sekund pri 94 °C, 1 minuta pri 57 °C in 2 minuti pri 72 °C 35 ciklov, ki jim je sledilo 8 minut pri 72 °C. PCR produkti so bili analizirani na 2 % agarozi, ki je vsebovala etidijev bromid. Po elektroforezi so bili PCR produkti preneseni na Haybond-N+ membrane (Amersham, Arlington Heights, IL) z 20 x SSC preko noči, za imobilizacijo smo uporabili 0.4 M NaOH. DNA vezana na trdem nosilcu je bila hibridizirana z 32Ρ-γΑΤΡ označeno oligonukleotidno lovko v Rapid-hyb pufru (Amersham) za 1 uro pri 42 °C. Vsaka mešanica oligonukleotidnih začetnikov citokinov so bile uporabljene kot radioaktivno označene lovke (po navodilih). Kontrola nanosa je bila dobljena s hibridizacijo z lovko sintetizirano z pEH7 smiselnim oligonukleotidnim začetnikom. Sprane membrane z vezano DNA so bile analizirane z uporabo sistema, ki detektira emitirajoče svetlobne signale (Phosphorlmager sistem).
Vpliv Ribavirina na koncentracijo ekstraceiuiarnih citokinov v aktiviranih T celicah Obdelava človeški T celic 48 do 72 ur z PMA/ionomicinom je povečala koncentracijo vseh citokinov, ki so bili analizirani: IL-2, IL-4, TNFa, IFNy (TABELA 1). Prva številka v vsaki celici je aritmetično povprečje in številka v oklepajih predstavlja relativno območje. N=4.
TABELA 1
| 48 ur v neaktivni fazi | 48 ur aktivirano | 72 ur v neaktivni fazi | 72 ur aktivirano | |
| IL-2 | 6,7 (5 - 9,3) | 1652 (848-2148) | 5,8 (5 - 9,3) | 1462 (918- 1866) |
| IL-4 | 7.5 (7,1 - 8,2) | 209 (81 - 363) | 8,5 (7,2 - 9,2) | 131 (121 -148) |
| TNFa | 11,5 (5-18) | 1573 (1474-1672) | 8.3 (5-12) | 1894(1240-2548) |
| IFNy | 8,9 (8,3 - 9,5) | 1285 (807 -1765) | 9,3 (9,1-9,4) | 2229 (1230 - 3228) |
| IL-2R | 50,1 (40,6 -59,7) | 163(160,9 -166,5) | 60,1 (49,6 - 70,4) | 163 (160,1 - 165,5) |
| IL-4R | 52,3 (42,6 - 59,2) | 77,7 (73,5-82,1) |
-10V reprezentativnem eksperimentu predstavljenem na sliki 1 je dodatek Ribavirina v koncentracijah od 0.5 μΜ do 50 μΜ povečal aktivirane koncentracije Th1 citokinov IL-2, maksimalno pri 5μΜ (30 %) in TNFa maksimalno pri 20 μΜ (36 %). V nasprotju je interferon alfa inhibiral ekspresijo IL-2 in TNFa na način, ki je odvisen od uporabljene količine (območje od 250 do 10000 U/ml, maksimalna inhibicija 33 % IL-2 in 38 % TNFa) v primerjavi s koncentracijami v neobdelanih aktiviranih T celicah. Ribavirin je vplival na spremljajoče znižanje koncentracije aktiviranih Th2 citokinov IL-4 (ostra inhibicija 74 % pri 2 μΜ), interferon alfa pa je maksimalno povečal ekstracelularni IL-4 za 26 % (10000 U/ml). Uporaba kombinacije Ribavirina in interferona alfa, na sliki 2 prikazuje, da konstantna koncentracija interferona alfa (2000 U/ml) zavre koncentracijsko odvisno povečanja aktivne IL-2 koncentracije (A) z Ribavirinom in preobrne inhibicijo aktivirane IL-4 koncentracije (C). Podobno konstanta 10 μΜ količina Ribavirina premakne v nasprotno smer koncentracijsko odvisno inhibitorno delovanje interferona alfa na že aktivirano IL-2 koncentracijo (B) in zavre naraščanje že aktivirane IL-4 koncentracije (D).
Vpliv Ribavirina na količino mRNA citokinov v aktiviranih T celicah
Nasprotujoči vpliv Ribavirina in interferona alfa na koncentracije aktiviranih ekstracelularnih citokinov je bilo moč opaziti tudi na nivoju transkripcije. Slika 3 prikazuje PMA/ionomicinsko obdelavo človeških T celic in naraščanje količine mRNA IL-2, IL-4 in IFNy. Obdelava z Ribavirinom (2, 5 in 10 μΜ), ki je sledila aktivaciji T celic, je dvignila mRNA količino IL-2, znižala mRNA IL-4 in ni imela vpliva na IFNy mRNA. V nasprotju je interferon alfa v koncentraciji 1000, 2000 in 5000 U/ml znižal koncentracijo mRNA IL-2, zvišal IL-4 mRNA in znižal IFNy mRNA. Rezultate koncentracijske odvisnosti vpliva Ribavarina in interferona alfa na ekspresijo mRNA IL2, TNFa in IL-4 smo primerjali z ELISA testi. Rezultati kažejo, da Ribavirin poveča sintezo Th1 citokinov, IL-2 in TNFa, in inhibira ekspresijo Th2 citokinov, IL-4 v aktiviranih človeških T celicah.
Vpliv Ribavirina na koncentracijo IL-2 in IL-4 receptorjev v aktiviranih T celicah
Z uporabo FACS analize smo primerjali vpliv Ribavirina in interferona alfa na ekspresijo receptorjev IL-2 (CD25) in IL-4 (CDw124) v aktiviranih T celicah. PMA/ionomicin obdelava je zvišala ekspresijo CD25 in CDw124, kije bila pri neobdelanih celicah 50.16±0.45 in 62.31 ±1.46, na aktiviran nivo 162.48±2.89 in 87.53±3.98 kot sledi (n=4). V treh reprezentativnih eksperimentih, slika 4 prikazuje, da ima Ribavirin (1 -50 μΜ) zelo malo vpliva na aktiviran nivo receptorjev IL-2 in IL-4, medtem ko interferon alfa na koncentracijsko odvisni način v koncentracijskem območju od 250 do 10000 U/ml, zniža ekspresijo IL-2 receptorjev in zviša ekspresijo IL-4 receptorjev v primerjavi z količino receptorjev pri kontrolnih aktiviranih T celicah. Ti rezultati kažejo, da je vpliv Ribavirina na sintezo citokinov neodvisen od ekspresije receptorjev citokinov. V nasprotju, pa je vpliv interferona alfa na IL-2 in IL-4 receptorje primerljiv z opaženim vplivom na ekspresijo
-11aktiviranih IL-2 in lL-4.
Vpliv Ribavirina na koncentracijo intracelularnega IL-2 v CD4* in CD8+ podsetov aktiviranih T celicah
Preučili smo ali je vpliv Ribavirina na ekspresijo IL-2 specifičen na CD4+ ali CD8+ T celice. Intracelularna ekspresija IL-2 pri fiksiranih in permeabilnih aktiviranih T celicah je bila določena z dvo barvno tekočinsko citometrijo ob uporabi fluorescentno označenih protiteles na CD4 ali CD8 in na IL-2. Slika 5 prikazuje obdelavo z Ribavirinom (10 μΜ). Procent CD4+ T celic, ki ekspresirajo IL-2, je narasel od 82 % na 91 % in procent CD8+, ki ekspresirajo IL-2, je narasel od 81 % na 91 %. V nasprotju pa je procent ekspresiranega IL-2 pri CD4+ in CD8+ celicah po obdelavi z interferonom alfa (5000 U/ml) 81 % in 71 %. Rezultati kažejo, da ima Ribavirin vpliv na ekspresijo IL-2 in ne ločuje med CD4+ in GD8+ T celicami. V nasprotju pa ima obdelava z interferonom alfa zelo malo vpliva na CD4+T celice in zniža ekspresijo IL-2 pri CD8+T celicah.
Analogi Ribavirina
Predstavljenih je več razredov analogov Ribavirina, ki jih preučujejo v klinične namene glede na vpliv na Th1 in Th2 uravnavan odziv T celic. To vključuje molekule, ki pripadajo v skupino generičnih formul prikazanih na sliki 6, kjer X predstavlja O, S, CH2, CHOH ali N-CO-R^; A, B in C neodvisno predstavljajo N, P, CH, C-OH, C-CH3, C-alkil, C-alkenil, C-CH2, -CN, C-halogen, CCN, C-COOCH3, C-NH2, C-SNH2, C-SO2-NH2, C-CONH2, C-CS-NH2, C-C(NH)NH2, cpo2-nh2, ali C-heterociklični obročni sistem; D predstavlja S, Se, Te, PH, NH ali NR12; R., predstavlja H, (CH2)p(OH), halogen, CN, (CH2)pONH2, (CH2)pNH2, CH3, CH2SPH ali (CH2)-heterociklični obroč; R2 predstavlja H, OH, OCH3, SH, SCH3, halogen, CN, NH2, ONH2, NHCH3, (CH2)OH, (CH2)pNH2, CH3 ali COOMe; R3, R4, Rs, R6, R7 in Re neodvisno predstavljajo H, OH, OCH3, SH, SCH3, halogen, CN, NH2, ONH2, NHCH3, (CH2)OH, (CH2)pNH2, CH3, COOMe ali fenil; Re predstavlja
H, halogen, NH2, CH3, CONH, CSNH2, COOMe, SNH2, SO2NH2, PO2NH2, (CH2)p, (CH2)pheterociklični obročni sistem, (CH2)p-glukoza; R1o predstavlja H, halogen, NH2, CH3, CONH, CSNH2, COOMe, SNH2, SO2NH2, PO2NH2, (CH2)p, (CH2)p-heterociklični obročni sistem, (CH2)pglukoza, O-CH3, O-CH2CH3 ali amino kislina Y predstavlja O, S, NHHCI, NOH, NOCH3 ali NOCH2PH; R1o in Y v kombinaciji so heterociklični obročni sistem kot so tiazol, imidazol; Rn predstavlja CH3(CH2)pNH2, (CH2)p-heterocikli, (CH2)p-aminokisline ali (CH2)-sladkorji (glukoza in drugo); p je število med 0 in 8; in vključuje L in D nukleozide.
Te molekule so lahko sintetizirane po eni ali večih navedenih shemah, ki služijo za primer.
I. Sinteza ICN1369 (Pyrazomycin): Strategija sinteze te komponente je razložena v sledeči literaturi: (a) J. Farakas, Z. Flegelova in F. Sorm, Tetrahedron Letts. 22, 2279 (1972); (b) S. De
-12Bernardo in M. VVeghtrnan, J. Org. Chem. 41, 287 (1976); (c) J.G. Buchanan, A. Stobei in R.H. VVightrnan, J. Chem. Soc. Chem. Commun. 916 (1980); (d) N. Karagiri, K. Takashirna, T. Haneda in T. Kato, J. Chem. Soc. Perkin Trans. 1,553 (1984).
2. Sinteza ICN3438 (1 -p-D-ksilofuranozil-1,2,4-triazol-3-karboksamid): Sinteza te komponente je bila dosežena s postopkom, ki je razložen pri J.T. Witkowski, M. Fuertes, P.D. Cook in R.K. Robons, J. Carbohydr. Nucleosides. Nucleotised2 (1), 1 (1975).
3. Sinteza ICN3844 (1 (5-O-sulfamoil-p-D-ribofuranozil)-1,2,4-triazol-3-karboksamid):
Komponenta je bila pripravljena po postopku, ki so ga opisali G.D. Kini, B.M. Henry, R.K. Robins,
S.B. Larson, J.J. Marr, R.L. Berens, C.J. Bacchi, H.C. Nathan in S. Keithly, J. Med. Chem. 33, 44 (1990).
4. Sinteza ICN4625 (1 (3-deoksi-p-D-eritropentofuranosil)-1,2,4-triazol-3-karboksamid): Komponenta je bila pripravljena z uporabo sledečih metod sinteze:
OH
OH
-135. Sinteza ICN5531 (5-amino-1-p-D-ribofuranozilpirazol-4-karboksamid): Postopek sinteze so opisali: B.K. Bhattacharya, R.K. Robins in G.R. Revankar, J. Heterocyclic Chem. 21,795 (1990) in se ga uporablja za pripravo naslovljene komponente.
6. Sinteza ICN5676 (l-p-D-arabinofuranozil-IJZ.A-triazol-S-karboksamid): Komponenta je bila pripravljena po postopku, ki so ga opisali J.T. Witkowski, M. Fuefles, P.D. Cook in R.K. Robins, J. Carbohydr. Nucleosides, Nucleosides 2 (1), 1 (1975).
7. Sinteza ICN5839 (1-p-D-eritrofuranosil-1,2,4-triazol-3-karboksamid): Komponenta je bila pripravljena z uporabo sledečih metod sinteze:
-148. Sinteza ICN6242 (2-bromo-1-p-D-ribofuranosillimidazol-4-karboksamid): Komponenta je bila pripravljena z uporabo sledečih metod sinteze:
RcfP. C. Srivastava, O. A. Ivanoviči, R. J. Rousseau and R. K. Robini,
J. Org. Chem., 40,2920 (1975)
9. Sinteza ICN11808 (1-p-D-ribofuranozil-pirazol-3,4-dikarboksamid): Komponenta je bila pripravljena po postopku, ki so ga opisali Y.S. Sanghvi, B.K. Bhattacharya, G.D. Kini, S.S. Matsumoto, S.B. Larson, W.J. Jolley, R.K. Robins in G.R. Revankar, J. Med. Chem. 33, 336 (1990).
10. Sinteza ICN12204 (2-(p-D-ribofuranozil)imidazol-5-karboksamid): Komponenta je bila pripravljena po postopku, ki so ga opisali J. Igoleo, T.H. Dinh, A. Keib in C. Perreur, Chimie Therapeutigue 207 (1972).
-15Za karbociklične 4'-tiosladkorje in 4'-azasladkorje derivate analogov Ribavirina se lahko uporabljajo naslednji sladkorji skupaj s primernimi heterocikličnimi spojinami in derivatizirajo, kot je razloženo na shemah in v literaturi.
1. Karbociklični sladkorji so lahko pripravljeni po postopku, ki so ga opisali M. Yoshikawa, Y. Inoue, S. Yamaguchi in N. Murakami, Tetrahedron 50, 9961 (1994); L. Agrofoglio, E. Suhas, A. Parese, R. Condom, S.R. Challand, R.A. Earl in R. Guedj, Tetrahedron 50,10611 (1994).
2. 4-azosladkor je pripravljen po postopku, ki so ga opisali E.J. Reist, D.E. Gueffroy in L. Goodman, J. Am. Chem. Soc. 87, 677 (1965).
3. 4-tio-D-ribofuranoza je pripravljena po postopku, ki sta ga opisala M. Hobek in R.L. VVhistler, v knjigi: Methods in Carbohydrate Chemistry, vol. 1,292 (1962).
Dokazi vpliva analogov Ribavirina pri moduliranju Th1 in Th2 citokinov so prikazani na sliki 7 in v naslednji tabeli. Testi, ki šo tukaj objavljeni, obsegajo kratek seznam 35 analogov Ribavirina, ki so bili testirani, in vsi testi so bili ponovljeni trikrat. Na splošno je moč videti, da testirane spojine lahko uvrstimo v tri glavne skupine komponent, kot so: (1) ICN 1369 in ICN3844, ki zavreta IFNY, IL-2, IL-4, IL-5 in TNFa; (2) Ribavirin, ki vspodbudi IL-2 in TNFa in zavre IL-4 in IL-5; in (3) ICN6242, ICN3839 in ICN3531, ki vspodbudijo IL-2 in IFNY in zavrejo IL-4 in IL-5. Imenovane aktivnosti so potencijalno koristile pri indikacijah, pri katerih bi modulacija citokinov primerno vplivala na imunski odziv.
-16TABELA 2
Koncentracija celic na vdolbino 2 χ 106 x 24 = 48 χ 106 v 48 ml (celotni volumen vsake vdolbine je 2 ml)
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | |
| A | medij | PMA ICN | PMA ICN | PMA ICN ΙΟμΜ 1369 | PMA ICN 5μΜ 1369 | PMA ICN 2μΜ 1369 |
| B | PMA ICN ΙΟμΜ 3438 | PMA ICN 5μΜ3438 | PMA ICN 2μΜ3438 | PMA ICN ΙΟμΜ 3844 | PMA ICN 5μΜ 3844 | PMA ICN 2μΜ 3844 |
| C | PMA ICN ΙΟμΜ 4625 | PMA ICN 5μΜ4625 | PMA ICN 2μΜ4625 | PMA ICN ΙΟμΜ 5531 | PMA ICN 5μΜ5531 | PMA ICN 2μΜ5531 |
| D | PMA ICN ΙΟμΜ 5676 | PMA ICN 5μΜ 5676 | PMA ICN 2μΜ 5676 | PMA ICN ΙΟμΜ 5839 | PMA ICN 5μΜ 5839 | PMA ICN 2μΜ 5839 |
Koncentracija celic na vdolbino 2 χ 106 x 24 = 48 χ 106 v 48 ml (celotni volumen vsake vdolbine je 2 ml)
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | |
| A | PMA | ΡΙΜΑ | PMA | PMA | PMA | PMA |
| ICN | ICN | ICN | ICN | ICN | ICN | |
| ΙΟμΜ 6242 | 5μΜ6242 | 2μΜ6242 | ΙΟμΜ 11808 | 5μΜ 11808 | 2μΜ 11808 | |
| A | PMA | PMA | PMA | PMA | PMA | PMA |
| ICN | ICN. | ICN | ICN | ICN | ICN | |
| ΙΟμΜ 12204 | 5μΜ 12204 | 2μΜ 12204 | ΙΟμΜ RIB | 5μΜΙ<ΙΒ | 2μΜΚΙΒ |
Ribavirin in analogi Ribavirina so se pokazali kot učinkoviti pri spreminjanju ekspresije limfokinov pri aktiviranih T celicah. Medtem ko so bili opisani podatki in uporabnost izuma, je strokovnjakom jasno, da so možna odstopanja in modifikacije ne da bi se oddaljili od inventivnega koncepta imenovanega tukaj. Izum naj zaradi tega ne bil omejen razen v duhu navedenih zahtdvkov.
Claims (15)
- PATENTNI ZAHTEVKI1. Metoda inverzne modulacije Thl in Th2 odziva v aktiviranih limfocitih T, ki so v sistemu, z dodakom Ribavirina limfocitom v koncentraciji, ki poveča Thl odziv in zniža Th2 odziv.
- 2. Metoda po zahtevku 1, označena s tem, da je predhodno povišan Th2 odziv zaradi antigenov, infekcije s črevesnimi glistami ali protiteles.
- 3. Metoda inhibicije virusov z gojenjem virusov v sistemu, ki vsebuje limfocite, ki producirajo odziv Thl in Th2 citokinov, dodatkom Ribavirina sistemu v koncentraciji, ki poveča Thl odziv in zniža Th2 odziv.
- 4. Metoda po zahtevku 3, označena s tem, da se med viruse prišteva hepatitis C virus.
- 5. Metoda po katerem koli zahtevku od 1 do 4, označena s tem, da količina dodanega Ribavirina zagotavlja koncentracijo od okoli 0.25 do 12.5 μΜ v mediju, ki podpira aktivirane limfocite T.
- 6. Metoda po katerem koli zahtevku od 1 do 5, označena s tem, da vključuje dodatek interferona alfa k aktiviranim limfocitom T.
- 7. Uporaba Ribavirina pri izdelavi farmacevtske kompozicije za zdravljenje človeškega obolenja, označenega s profilom citokinov, pri katerem je znižan Thl odziv in povišan Th2 odziv, in je Ribavirin uporabljen v količini, ki poveča Thl odziv in zmanjša Th2 odziv.
- 8. Uporaba po zahtevku 7, označena s tem, da je obolenje virusno.
- 9. Uporaba po zahtevku 7, označena s tem, da je obolenje nevirusno.
- 10. Uporaba po zahtevku 7, označena s tem, da obolenja vključujejo alergijo, avtoimuno bolezen, infekcijo povzročeno s črevesnimi glistami ali bolezen povzročeno s protozoji iz rodu Leishmania.
- 11. Uporaba Ribavirina po zahtevku 7, označena s tem, da obolenje vključuje virusno komponento in nevirusno komponento in je za nevirusno komponento značilno, da zniža Thl nivo in poviša Th2 nivo v aktiviranih T limfocitih, in je Ribavirin uporabljen v količini, ki poveča Thl odziv in zmanjša Th2 odziv.
- 12. Uporaba po zahtevku 11, označena s tem, da se med bolezni vključuje primarno imunološko deficienco in sekundarno imunološko deficienco.
- 13. Uporaba po zahtevku 11, označena s tem, da virusna komponenta vključuje človeški virus imunološke deficience.
- 14. Uporaba po katerem koli zahtevku od 7 do 13, označena s tem, da je Ribavirin uporabljen v količini, ki doseže pri pacientu krvni serumski nivo od 0.25 do 12.5 μΜRibavirina.
- 15. Uporaba Ribavirina po katerem koli zahtevku od 7 do 14, označena s tem, da je Ribavirin uporabljen v dozirnem območju 4.5 mg/kg pacientove telesne teže na dan.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US08/590,449 US5767097A (en) | 1996-01-23 | 1996-01-23 | Specific modulation of Th1/Th2 cytokine expression by ribavirin in activated T-lymphocytes |
| US3609497P | 1997-01-17 | 1997-01-17 | |
| PCT/US1997/000600 WO1997026883A1 (en) | 1996-01-23 | 1997-01-21 | Modulation of th1/th2 cytokine expression by ribavirin® and ribavirin® analogs in activated t-lymphocytes |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SI9720013A true SI9720013A (sl) | 1999-06-30 |
Family
ID=26712784
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SI9720013A SI9720013A (sl) | 1996-01-23 | 1997-01-21 | Uravnavanje ekspresije citokinov TH1/TH2 z ribavirinom in z analogi ribavirina v aktiviranih T-limfocitih |
Country Status (21)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0879056B1 (sl) |
| KR (1) | KR100298158B1 (sl) |
| CN (1) | CN1190198C (sl) |
| AT (1) | ATE216886T1 (sl) |
| BR (1) | BR9707154A (sl) |
| CA (1) | CA2246162C (sl) |
| CZ (1) | CZ293584B6 (sl) |
| DE (1) | DE69712316T2 (sl) |
| DK (1) | DK0879056T3 (sl) |
| ES (1) | ES2172764T3 (sl) |
| HU (1) | HU220105B (sl) |
| IL (1) | IL125088A0 (sl) |
| NO (1) | NO983372L (sl) |
| NZ (1) | NZ330784A (sl) |
| PL (1) | PL187439B1 (sl) |
| PT (1) | PT879056E (sl) |
| RU (1) | RU2186569C2 (sl) |
| SI (1) | SI9720013A (sl) |
| SK (1) | SK283342B6 (sl) |
| UA (1) | UA46815C2 (sl) |
| WO (1) | WO1997026883A1 (sl) |
Families Citing this family (24)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1132393B1 (en) * | 1996-10-16 | 2003-04-09 | ICN Pharmaceuticals, Inc. | L-Ribavirin and uses thereof |
| ES2290969T3 (es) | 1996-10-25 | 2008-02-16 | Minnesota Mining And Manufacturing Company | Compuestos modificadores de la respuesta inmune para el tratamiento de enfermedades mediadas por th2 y relacionadas. |
| SK10092001A3 (sk) * | 1999-01-29 | 2002-02-05 | Icn Pharmaceuticals, Inc. | Použitie nukleozidu ako liečiva na liečenie odpovede imunitného systému na expozíciu |
| US6455508B1 (en) * | 2000-02-15 | 2002-09-24 | Kanda S. Ramasamy | Methods for treating diseases with tirazole and pyrrolo-pyrimidine ribofuranosyl nucleosides |
| US7638496B2 (en) | 2000-02-15 | 2009-12-29 | Valeant Pharmaceuticals North America | Nucleoside analogs with carboxamidine modified monocyclic base |
| US6858590B2 (en) | 2000-08-17 | 2005-02-22 | Tripep Ab | Vaccines containing ribavirin and methods of use thereof |
| US6680059B2 (en) | 2000-08-29 | 2004-01-20 | Tripep Ab | Vaccines containing ribavirin and methods of use thereof |
| JP5175417B2 (ja) * | 2000-08-17 | 2013-04-03 | トリペップ アクチ ボラゲット | リバビリンを含むワクチンおよびその使用方法 |
| US7022830B2 (en) | 2000-08-17 | 2006-04-04 | Tripep Ab | Hepatitis C virus codon optimized non-structural NS3/4A fusion gene |
| DE60234375D1 (de) | 2001-09-14 | 2009-12-24 | Cytos Biotechnology Ag | VERPACKUNG VON IMMUNSTIMULIERENDEM CpG IN VIRUSÄHNLICHEN PARTIKELN: HERSTELLUNGSVERFAHREN UND VERWENDUNG |
| MXPA05010419A (es) * | 2003-03-28 | 2006-05-31 | Pharmasset Inc | Compuestos para el tratamiento de infecciones por flaviviridae. |
| US20050182252A1 (en) | 2004-02-13 | 2005-08-18 | Reddy K. R. | Novel 2'-C-methyl nucleoside derivatives |
| JP2008531584A (ja) * | 2005-02-25 | 2008-08-14 | エフィカス・インコーポレイテッド | マタタビ属を含む組成物およびそれを用いる方法 |
| JP5484732B2 (ja) | 2005-12-14 | 2014-05-07 | サイトス バイオテクノロジー アーゲー | 過敏症の治療のための免疫賦活性核酸パッケージ粒子 |
| MX2008011360A (es) * | 2006-03-09 | 2009-03-03 | Om Pharma | Compuestos inmunodulares y tratamiento de enfermedades relacionadas con la sobreproduccion de citoquinas inflamatorias. |
| RU2476595C2 (ru) | 2006-06-12 | 2013-02-27 | Цитос Биотехнологи Аг | Способы упаковки олигонуклеотидов в вирусоподобные частицы рнк-содержащих бактериофагов |
| WO2009022236A2 (en) | 2007-08-16 | 2009-02-19 | Tripep Ab | Immunogen platform |
| UA117095C2 (uk) | 2011-12-22 | 2018-06-25 | Аліос Біофарма, Інк. | Нуклеозидна сполука або її фармацевтично прийнятна сіль |
| US9441007B2 (en) | 2012-03-21 | 2016-09-13 | Alios Biopharma, Inc. | Substituted nucleosides, nucleotides and analogs thereof |
| USRE48171E1 (en) | 2012-03-21 | 2020-08-25 | Janssen Biopharma, Inc. | Substituted nucleosides, nucleotides and analogs thereof |
| SG11201407336PA (en) | 2012-05-25 | 2015-03-30 | Janssen Sciences Ireland Uc | Uracyl spirooxetane nucleosides |
| KR102788773B1 (ko) | 2012-12-21 | 2025-03-28 | 얀센 바이오파마, 인코퍼레이트. | 치환된 뉴클레오사이드, 뉴클레오타이드 및 그것의 유사체 |
| KR102314960B1 (ko) | 2013-10-11 | 2021-10-19 | 얀센 바이오파마, 인코퍼레이트. | 치환된 뉴클레오사이드, 뉴클레오타이드 및 이의 유사체 |
| MX377275B (es) | 2014-05-16 | 2025-03-07 | Amgen Inc | Ensayo para detectar poblaciones celulares linfocitos t colaboradores 1 (th1) y linfocitos t colaboradores (th2). |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE3650505T2 (de) * | 1986-03-27 | 1996-09-19 | Gensia Inc | AICA riboside zur prophylaktischen Behandlung von Krankheiten mit einer verminderten Durchblutung. |
| NZ229453A (en) * | 1988-06-10 | 1991-08-27 | Univ Minnesota & Southern Rese | A pharmaceutical composition containing purine derivatives with nucleosides such as azt, as antiviral agents |
| ES2181673T3 (es) * | 1991-05-01 | 2003-03-01 | Jackson H M Found Military Med | Procedimiento de tratamiento de las enfermedades respiratorias infecciosas. |
| US6387365B1 (en) * | 1995-05-19 | 2002-05-14 | Schering Corporation | Combination therapy for chronic hepatitis C infection |
-
1997
- 1997-01-21 DE DE69712316T patent/DE69712316T2/de not_active Revoked
- 1997-01-21 CA CA002246162A patent/CA2246162C/en not_active Expired - Lifetime
- 1997-01-21 KR KR1019980705645A patent/KR100298158B1/ko not_active Expired - Fee Related
- 1997-01-21 PL PL97328003A patent/PL187439B1/pl not_active IP Right Cessation
- 1997-01-21 SI SI9720013A patent/SI9720013A/sl not_active IP Right Cessation
- 1997-01-21 EP EP97904765A patent/EP0879056B1/en not_active Revoked
- 1997-01-21 NZ NZ330784A patent/NZ330784A/xx unknown
- 1997-01-21 CZ CZ19982329A patent/CZ293584B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1997-01-21 HU HU9900681A patent/HU220105B/hu not_active IP Right Cessation
- 1997-01-21 WO PCT/US1997/000600 patent/WO1997026883A1/en not_active Ceased
- 1997-01-21 ES ES97904765T patent/ES2172764T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1997-01-21 SK SK1004-98A patent/SK283342B6/sk not_active IP Right Cessation
- 1997-01-21 AT AT97904765T patent/ATE216886T1/de not_active IP Right Cessation
- 1997-01-21 PT PT97904765T patent/PT879056E/pt unknown
- 1997-01-21 IL IL12508897A patent/IL125088A0/xx unknown
- 1997-01-21 DK DK97904765T patent/DK0879056T3/da active
- 1997-01-21 UA UA98073815A patent/UA46815C2/uk unknown
- 1997-01-21 BR BR9707154A patent/BR9707154A/pt not_active Application Discontinuation
- 1997-01-21 RU RU98115594/14A patent/RU2186569C2/ru active
- 1997-01-21 CN CNB971917760A patent/CN1190198C/zh not_active Expired - Fee Related
-
1998
- 1998-07-22 NO NO983372A patent/NO983372L/no not_active Application Discontinuation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| ES2172764T3 (es) | 2002-10-01 |
| NO983372D0 (no) | 1998-07-22 |
| DE69712316T2 (de) | 2003-01-02 |
| EP0879056B1 (en) | 2002-05-02 |
| PL328003A1 (en) | 1999-01-04 |
| SK283342B6 (sk) | 2003-06-03 |
| EP0879056A1 (en) | 1998-11-25 |
| CA2246162A1 (en) | 1997-07-31 |
| PT879056E (pt) | 2002-10-31 |
| RU2186569C2 (ru) | 2002-08-10 |
| HU220105B (hu) | 2001-10-28 |
| KR19990081930A (ko) | 1999-11-15 |
| HUP9900681A2 (hu) | 1999-07-28 |
| AU700642B2 (en) | 1999-01-14 |
| CZ232998A3 (cs) | 1999-04-14 |
| AU1747897A (en) | 1997-08-20 |
| CA2246162C (en) | 2000-04-04 |
| BR9707154A (pt) | 1999-05-25 |
| NZ330784A (en) | 1999-02-25 |
| CZ293584B6 (cs) | 2004-06-16 |
| SK100498A3 (en) | 2001-03-12 |
| KR100298158B1 (ko) | 2001-09-06 |
| EP0879056A4 (en) | 1999-01-13 |
| NO983372L (no) | 1998-09-21 |
| PL187439B1 (pl) | 2004-07-30 |
| IL125088A0 (en) | 1999-01-26 |
| UA46815C2 (uk) | 2002-06-17 |
| DK0879056T3 (da) | 2002-08-19 |
| HUP9900681A3 (en) | 1999-12-28 |
| DE69712316D1 (en) | 2002-06-06 |
| ATE216886T1 (de) | 2002-05-15 |
| CN1209747A (zh) | 1999-03-03 |
| WO1997026883A1 (en) | 1997-07-31 |
| CN1190198C (zh) | 2005-02-23 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| SI9720013A (sl) | Uravnavanje ekspresije citokinov TH1/TH2 z ribavirinom in z analogi ribavirina v aktiviranih T-limfocitih | |
| Seko et al. | Expression of cytokine mRNAs in murine hearts with acute myocarditis caused by coxsackievirus b3 | |
| US5767097A (en) | Specific modulation of Th1/Th2 cytokine expression by ribavirin in activated T-lymphocytes | |
| US6150337A (en) | Specific modulation of Th1/Th2 cytokine expression by Ribavirin in activated T-lymphocytes | |
| Faunce et al. | Acute ethanol exposure prior to thermal injury results in decreased T-cell responses mediated in part by increased production of IL-6 | |
| Lapenta et al. | Type I interferon is a powerful inhibitor of in vivo HIV-1 infection and preserves human CD4+ T cells from virus-induced depletion in SCID mice transplanted with human cells | |
| Longman et al. | Dendritic-cell maturation alters intracellular signaling networks, enabling differential effects of IFN-α/β on antigen cross-presentation | |
| Lehner et al. | The emerging role of innate immunity in protection against HIV-1 infection | |
| JP2008133293A (ja) | 活性化ｔリンパ球におけるリバビリン及びリバビリン類似体によるｔｈ１型／ｔｈ２型サイトカインの発現の調節 | |
| RU2105566C1 (ru) | Способ интерферонотерапии ю.а.севрука | |
| JP2000500503A (ja) | 活性化ｔリンパ球におけるリバビリン及びリバビリン類似体によるｔｈ１型／ｔｈ２型サイトカインの発現の調節 | |
| US20030212015A1 (en) | Specific modulation of Th1/Th2 cytokine expression by ribavirin in activated T-lymphocytes | |
| Turano et al. | The role of human autoantibodies against γ-interferon | |
| JP3817273B2 (ja) | 免疫抑制治療、抗ガン治療および抗ウイルス治療用の薬学的組成物 | |
| AU700642C (en) | Modulation of TH1/TH2 cytokine expression by ribavirin and ribavirin analogs in activated T-lymphocytes | |
| WO1993002692A1 (en) | Method of combatting hiv infections | |
| EP1174141A2 (en) | Modulation of TH1/TH2 cytokine expression by ribavirin and ribavirin analogs in activated t-lymphocytes | |
| Saharan | Paradigm shift in discovery & secretion of Biosimilars via path breaking innovation | |
| COOK | The Mechanism of Induction of Interferon Gamma Synthesis by Human Thymocytes | |
| HK1015265A (en) | Modulation of th1/th2 cytokine expression by ribavirin in activated t-lymphocytes | |
| HK1015265B (en) | Modulation of th1/th2 cytokine expression by ribavirin in activated t-lymphocytes | |
| Vyakarnam | Immunological Actions | |
| ARB et al. | Interferon in Lymphocyte Cultures | |
| Muthu | Studies on cytokine profile and immunoglobulin secretion in response to three novel immunomodulating agents with potential for therapeutic application | |
| Herman | A Study of Natural Killer Cells |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| IF | Valid on the event date | ||
| KO00 | Lapse of patent |
Effective date: 20080725 |