SE529246C2 - Nya disubstituerade fenyl-piperidiner som modulatorer för dopaminneurotransmission - Google Patents

Description

529 246 2 disease. Neurology, 22;53:1605-6, 1999; Gefvert O. et al, (-)-OSU6162 induces a rapid onset of antipsychotic effect after a single dose. A double-blind placebo-controlled pilot study. Scandinavian Society for Psychopharmacology, 415' Annual Meeting, Copenhagen Denmark Nordic Journal of Psychiatry 54/2 93-94, April 2000: Carlsson et al, Annu. Rev.

Pharmacol. Toxicol.,41, 237, 2001; Carlsson et al. Current Medicinal Chemistry, 11, 267, 2004).

Ytterligare en dopaminerg förening, som har tillskrivits vara en stabilisator för dopamin- serotoninsystemet, samt en partiell DA D2 receptoragonist, är det nyligen lanserade antipsykotiska föreningen aripiprazole (Burris et al, Pharm. Exp. Ther, vol. 302, 381, 2002.). Vidare har föreningar som kallas dopaminerga stabilisatorer beskrivits i - WOO1l46145, WO01/46146, Pettersson et al. The development of ÅCR16. Å new class of dopaminergic stabilizers. Society for Neuroscience 32"' Annual Meeting, Abstract2002, Vol. 28 part 1 1028, Orlando USA 2002; and Nyberg et al Efficacy and tolerability of the new dopamine stabiliser ACR16 a randomised placebo-controlled add-on study in ' patients with schizophrenia 12th BlENNlAL WlNTER WORKSHOP ON i SCHIZOPHRENIA, 7-13 February 2004, Davos, Switzerland.

De typiska farmakologiska effekterna som är karakteristiska för dopaminerga stabilisatorer som beskrivs i WO01l46145, WO01/46146 and Pettersson et al. 2002 kan summeras som 1) Ökad omsättning av dopamin i terminalomràdena för de stiganda dopaminerga projektionerna i däggdjurshjärnan; 2) lngen eller endast svaga beteendeeffekter hos i övrigt obehandlade råttor; och 3) lnhibering av beteendeeffekter som inducerats av psykostimulanter elller psykotomimetiska föreningar i ràttan. l föreliggande uppfinning refereras detta som en dopaminerg stabilisatorprofil.

Det är känt att vissa farmaceutiskt aktiva föreningar som används vid behandling av neurologiska och psykiatriska störningar (speciellt antipsykotiska och antidepressiva föreningar) kan ha oönskade effekter på de kaliumkanaler i hjärtat som är involverade i den elektriska repolariseringen av hjärtceller, vanligtvis benämnda som hERG-kanaler (human eter-a-go-go relaterade genkodade spänningsberoende kaliumkanaler) eller IK, (snabbt aktiverande fördröjd likriktad kaliumström) kanaler. Läkemedel som blockerar dessa kanaler kan inducera ventrikel arrytmi (Torsade de Pointes, TdP) som kan leda till plötslig död hos annars friska individer. lndikationen att ett läkemedel skulle kunna ha oönskade effekter på hjärtrepolarisering kan ses genom förlängning av QT-intervallet i elektrokardiogramet som anses vara en surrogatmarkör för risken för TdP. Ett antal läkemedel har dragits tillbaka från marknaden på grund av oacceptabla sidoeffekter 10 15 20 25 30 35 529 246 3 relaterade till hjärtarrytmi (J. Cardiovasc. Electrophysiol. 15, 475, 2004.; Eur. J. Pharm., 450, 37, 2002.; Cardiovascular Research, 58, 32, 2003).

Denna uppfinning avser ett behandlingsomràde för däggdjur som lider av störningar I CNS, i vilka symptomen kan påverkas av dopaminerga funktioner, där behandlingen innefattar administration till nämnda däggdjur en mängd av en ny typ av förening, som har en dopaminerg stabilisatorprofil. Dessutom, uppvisar föreningarna låg affinitet för hjärtkaliumkanaler, och reducerar risken för allvarliga sidoeffekter för hjärtat.

Beskrivning av känd teknik Föreningar som tillhör klassen substituerade 4-(fenyD-Nfalkyl-piperidiner har tidigare rapporterats. Bland dessa föreningar är vissa inaktiva i CNS, vissa uppvisar serotonerga eller blandade serotonerga/dopaminerga farmakologiska profiler medan vissa är totala eller delvia agonister för dopaminreceptorer eller antagonister med hög affinitet för dopaminreceptorer.

Ett antal 4-fenylpiperidine derivat är kända. EPO369887 uppvisar substituerade 4-(meta- trifluorometylfenyD-f ,2,3,6-tetrahydropyridiner för behandling av ångest. WOOO/03713 uppvisar en metod för behandling av schizofreni och andra störningar av dopaminsystemet genom att använda substituerade 1-mety|-4-fenyl-1,2,3,6- tetrahyd ropyridiner.

Glennon et al. (US patent 6,057,371) avser en metod för att behandla störningar i CNS associerade med sigmareceptorer, innefattande administrationen av arylaminer, inklusive arylpiperidiner som antingen är osubstituerade eller monosubstituerade i arylringen.

Föreningarna uppvisar en hög bindningsaffinitet, med avseende på sigmareceptorn. WO 91/095954 säger att termen fhög affinitet" innebär en förening som uppvisar ett IC5O pà mindre än 100 nm i testet mot aH-DTG som beskrivs i Weber et al. Proc. Natl. Acad. Sci.

(USA) 83: 8784-8788). Specifikt, WO 91/095954 beskriver föreningar som avser "upptäckten att vissa fenylalkyamin-, aminotetralin-, piperazin, piperidin- och liknande derivat har stark bindning till sigmareceptorn och oväntad låg bindning för PCP och DA- receptorerna" (se sid. 11, raderna 33-36).

WO 91 /095954 och WO 93/00313, kräver båda att föreningarna har hög bindningsaffinitet till sigmareceptorn och beskriver inte att föreningarna är farmakoiogiskt aktiva i frånvaro av sigmareceptoraffinitet. Dessutom har inte kliniska studier som undersöker egenskaperna hos sigmareceptorligander i schizofrena patienter presenterat bevis för antipsykotisk aktivitet, eller aktivitet för någon av de andra störningarna i CNS.

Två av de utförligast studerade selektiva receptorantagonister, BW234U (Rimcazole) och 10 15 20 529 246 4 BMY14802, har båda misslyckats i kliniska studier i schizofrena patienter (Borison et al, 1991, Psychophamtacol Bull 27(2): 103-106; Gewirtz et al, 1994, Ne uropsychopharmaco/ogy 10:37-40).

WO97/23216 beskriver 4-substituerade piperidinanaloger med formeln: R Ar x / RS Ar1 i vilkenR5 kan väljasfrån OH, och Ar1 kan substituerasrSàdana föreningar används för att behandla CNS-trauma, Psykos och neurodegenerativa störningar, bland andra, genom selektiv blockering av undergrupper för NMDA-receptorn.

US 4485109 beskriver föreningar med formeln: Rz Ra R, N/ R4 Rs oH Ra som används som psykoterapeutiska medel, speciellt som antidepressiver.

EP 1177792 beskriver, bland andra, föreningar med strukturen: cH3 Å R Ru |/\N/\/\N N/ 3 3 \ RÄXf som har dopaminerg aktivitet- speciellt som D4 receptorligander - och är användbara i behandlingen av nyhetssökande störningar.

W098/51668 beskriver substituerade piperldinderivat med formeln: 10 15 20 25 529 246 R4 Üm i' R som innehar egenskaper som monoamina neurotransmittorer dvs dopamin-, serotonin-, noradrenalin-, återupptagningsinhibitorer. Föreningarna sägs vara till hjälp i behandlingen av Parkinsonism, depression, pseudodemens, fetma, narkolepsi, Iäkemedelsberoende, och/eller missbruk, bristande uppmärksamhetsförmåga, hyperaktivitetsstörningar, senildemens eller minnesstörningar. V Dessutom är det känt att föreningar med formeln ll (WO01/46145) och lll (WC01A/46146) innehar dopaminerga stabiliseringsegenskaper, i R1 Rl Rz /R3 x/fi x/fi K/N\ gQ/ \ R2 R4 R5 Formel l Formel ll I Formel l; är X bland annat CH, R, är vald från gruppen som består av OS02CF3, OSOzCHa, SORS, SO2R3, COR3, CN, N02, CONHRS, CF3 (förutsatt X är CH eller C) F, Cl, Br, l (där R3 är som specificeras nedan); R2 är vald från gruppen som består av C1-C4 alkyl, allyl, CH2SCH3, CH2CH2OCH3, CH2CH2CH2F, CH2CF3, 3,3,3-trifluoropropyl, 4,4,4-trifluorobutyl, eller -(CH2)-R4 (där R4 är som specificeras nedan); Ra är vald från gruppen som består av C1-C3 alkyl, CFS, eller N(R2)2; R., är vald från gruppen som består av Cs-CG cykloalkyl, 2-tetrahydrofuran, 3-tetra- hydrofuran. l Formel ll; âr X bland annat CH, R, är vald från gruppen som består av OSO2CF3, OSO2CH3, SOR7, SO2R1, COR7, CN, N02, CONHRa, CF3, F, Cl, Br, l (där Ra är som specificeras nedan), 3- tiofen, 2-tiofen, 3-furan, Z-furan; R; är vald från gruppen som består av F, Cl, Br, l, CN, CF3, CH3, OCH3, OH, NH2 Ra och R., är oberoende av varandra H eller C1-C4 alkyl 10 15 20 25 30 529 246 6 RS är vald från gruppen som består av C1-C4 alkyl, allyl, CH2SCH3, CH2CH2OCH3, CH2CH2CH2F, CHZCFS, 3,3,3-trifluoropropyl, 4,4,4-trifluorobutyl, eller '(CH2)'Re1 Ra är vald från gruppen som består av Cg-Cß cycloalkyl, Z-tetrahydrofuran, 3- tetrahydrofuran.

R; är vald frän gruppen som består av Cj-Cg alkyl, CF3 eller N(R,,)2 Emellertid beskriver varken WO01/46145 (Formel I) eller WOO1/46146 (Formel ll) farmakologiska data för 3,5-disubstitutionen i fenylringen som beskrivs i föreliggande uppfinning. Följande struktur är känd som ett synte-sexempel iWOO1/46146 (Exempel 44 4-[3-fluoro-5Ä(trifluorometyl)fenyl-]1-propylpiperidinj i I Exempel 44 i WO1 1146146 Dessutom finns där ingen vägledning varken iWO01/46145 (Formel I) ellerí WOO1/46146 (Formel ll) om hur verksamma dopaminerga stabilisatorer skall erhållas.

Det återstår ett behov av nya farmaceutiskt aktiva föreningar, speciellt sådana som är användbara vid behandling av störningar i centrala nervsystemet som har en ökad verkan som dopaminega stabilisatorer. Det är också önskvärt att sådana farmaceutiskt aktiva föreningar har en minskad benägenhet för sidoeffekter, speciellt vad gäller hjärtarytmi.

SAMMANFATTNING AV UPPFINNINGEN Målet med föreliggande uppfinning är att ge nya farmaceutiskt aktiva föreningar, speciellt användbara i behandlingen av störningari det centrala nervsystemet, som har en ökad verkan som dopaminerga stabilisatorer (se Tabell 1, kolumn 1) med en låg benägenhet att blockera hERG-kanalen (se Tabell 1, kolumn 2). Dessa föreningar har speciella fördelar med avseende på reducerade sidoeffekter, speciellt sidoeffekter för hjärtat. 3,5-disubstitionen i föreliggande uppfinning förbättrar helt överraskande verkan och effektiviteten jämfört alternativa substitionsmönster ( l ex 3,4-disubstitutíon i vilken 4- positionen är en halogen) eller monosubstituerad (3-position). Dessutom uppvisar 10 15 20 25 30 529 246 7 föreningarna i föreliggande uppfinning lägre affinitet för hERG-kanalen jämfört föreningar i känd teknik.

Substansen enligt föreliggande uppfinning har testats biologiskt i råtta där de setts fungera företrädesvis på dopaminerga system i hjärnan. De har effekter på biokemiska index i hjärnan med de kännetecknande egenskaperna för dopaminantagonister.

Emellertid uppvisar inte substanserna enligt uppfinningen några inhiberande effekter på spontan rörlighet över ett brett dosomràde. Vidare kan substanserna enligt uppfinningen inducera en svag beteendeaktivering, speciellt när baslinjen för rörelsaktiviteten är låg.

Emellertid, inhiberar substanserna i föreliggande uppfinning beteendeaktiviteten som induceras av psykostimulanter och psykotomimetika. i Substanserna enligt föreliggande uppfinning uppvisar låg verkan för att inhibera hERG- kanalen, som mäts av |C5O i en Rapid lCE-assay (för detaljerse den experimentella delen), som indikerar en låg risk för QT-intervallförlängning och arytmi i människa.

Detaljerad Beskrivning av uppfinningen Föreliggande uppfinning avser nya piperidiner i form av fria baser eller farmaceutiskt acceptabla salter av dessa, farmaceutiska kompositioner innehållande nämnda föreningar och användning av nämnda föreningar vid tillverkning av läkemedel som är dopaminneurotransmittanter och terapi.

Mer specifikt avser föreliggande uppfinning piperidinföreningar med Formeln 1: sozcria (1) i vilken R är vald från gruppen som består av 61-03 alkyls and allyl; och farmaceutiskt acceptabla salter av dessa. l speciella utföringsforrner väljs R från gruppen som består av n-propyl och etyl.

Ytterligare en aspekt av uppfinningen avser en metod för att behandla störningar i det centrala nervsystemet genom att administrera en terapeutiskt aktiv mängd av föreningarna med formeln 1 eller ett farmaceutiskt acceptabelt salt av dessa till ett däggdjur, inklusive människa, som lider av en stöming i centrala nervsystemet. Dessutom 10 529 246 8 avser föreliggande uppfinning en metod för att behandla de stömingar som nämns häri, genom att administrera en terapeutiskt aktiv mängd av föreningarna med formeln 1 eller ett farmaceutiskt acceptabelt salt av dessa till ett däggdjur, inklusive människa som lider av nämnda störning. inkluderande av tvâ substituenter på arylringen på sådana föreningar- en i 3-positionen (meta-1) och den andra i 5-positionen (meta-2) -förstärker deras verkan att modulera dopamin neurotransmission. Den hittills okända ökningen av verkan hos dessa 3,5- disubstituerade föreningarjämfört med de monosubstituerade, eller BA-disubstituerade föreningarna illustreras i Tabell 1. i ' Dessutom har det upptäckts att 3,5-disubstitutionen i föreliggande uppfinning minskar sidoeffekterna som är relaterade till hjärtarytmi, när effekten hos dessa föreningar pà hERG-kaliumkanalen (Rapid Ice) mäts. Den nya reduktionen av sidoeffekterna för sådana substituerade föreningar illustreras i Tabell 1. 529 246 9 Tabell 1: Effekter av föreningar i föreliggande uppfinning på reduktionen av amfetamininducerad hyperrörelse (uppskattade ED50 värden) och affinitet för hERG- jonkanalen (ICSO-värden).

ED50 amf* Rapid ICE pmollkg (lC50, nM) Jämförande exempel ©©1 52 Exempel 6 fràn WOO1/46145 Ej testad FF F 34 0 N§\_ 610 Exempel 9 från WOO1/46146 F F F Jšïwfl M F Exempel 44 från WO01/46146 Exempel Oès/ ° NI 12 saoo F Exempel 1 0, / då _/ 28 å:>"<::> 21670 F Exempel 2 1 500 * Effekter av föreningar i föreliggande uppfinning på reduktionen av amfetamininducerad hyperrörelse. Jämförande exempel fràn känd teknik är också inkluderade. För metoder och statistiska beräkningar se bifogade tester. 10 15 20 25 30 35 529 246 10 En viktig observation är att närvaron av substituenterna F och SO2CH3 i meta 1 och meta 2 positionerna i fenylringen förbättrar effektiviteten och verkan hos den dopaminerga stabilisatorn jämfört med mono- eller ßA-disubstitutioen (t ex Exempel 6 iWOO1/46145 och Exempel 9 i WOO1/46146), men reducerar också affiniteten för hERG-kanalen. Ett sådant resultat skulle generellt inte ha förväntats.

Ett mål med föreliggande uppfinning är att ge nya föreningar som kan användas för terapeutiska ändamål och mer specifikt, föreningar som kan modulera dopaminerga system i däggdjurshjärnan, inklusive den mänskliga hjärnan. Företrädesvis har sådana föreningar minskade sidoeffekter när det gäller inhibition av hjärtats kaliumkanaler.

Ytterligare ett syfte med föreliggande uppfinning är att ge nya föreningar för terapeutisk användning, och speciellt föreningar för modulering av dopaminerga system i däggdjurshjärnan, inklusive den mänskliga hjärnan. Företrädesvis har dessa föreningar minskade sidoeffekter när det gäller inhibitionen av hjärtats kaliumkanaler.

Ytterliggare ett syfte med uppfinningen är att ge föreningar som har terapeutiska effekter efter oral administration.

De föredragna substituerade strukturerna är: 1-etyl-4-[3-fluor-5-(metylsulfonyl)fenyl]piperidin 4-[3-fluor-5-(metylsu|fonyl)fenyl]-1-propylpiperidin 1-alIyl-4-[3-fluor-5-(metylsulfony|)fenyl]piperidin Föreningarna och kompositionerna enligt föreliggande uppfinning innehar dopaminmodulerande egenskaper och är användbara för behandling av ett antal störningar i centrala nervsystemet. Speciellt föreningarna och deras farmaceutiska kompositioner kan användas i behandlingen av störningar i CNS då det dopaminerga systemet är dysfunktionellt på grund av direkta eller indirekta orsaker.

Föreningarna och kompositionerna enligt uppfinningen kan användas för att förbättra alla former av psykos, inklusive schizofreni och schizofreniliknande störningar liksom läkemedelsinducerade psykotiska störningar och bipolära störningar. De kan även användas vid tillstànd som är valda från en grupp som bestàr av iatrogena och icke- iatrogena psykoser och hallucinoser. i i Humör- och ångeststörningar, inklusive depression och tvångsmässiga sjukdomar kan också behandlas med föreningar och kompositioner enligt uppfinningen.

Föreningar med modulerande effekter på dopaminerga system kan också användas för att förbättra kognitiva funktioner och i behandlingen av emotionella störningar som hör ihop med åldrande, neurodegenerativa (t ex demens och àldersrelaterade kognitiva 10 15 20 25 30 35 529 246 11 försvagningar) och utvecklande (så som autistiska störningar, ADHD, cerebral pares, Tourettes syndrom) störningar liksom efter hjärnskador. Denna hjärnskada skulle kunna ha orsakats av traumatiska, inflammatoriska, infektiösa, neoplastiska, vaskulära, syrebrist eller metabola orsaker eller av toxiska reaktioner mot exogena kemikalier, där de exogena i kemikalierna valts från gruppen som består av missbrukar substanser, farmaceutiska föreningar och miljötoxiner. Föreningarna och deras farmaceutiska sammansättning är användbara vid behandling av tillstànd valda från gruppen som består av sömnstörningar, sexuella störningar, ätstörningar, fetma och huvudvärk och andra smärtor vid tillstånd som kännetecknas av ökad muskelspänning. De kan också användas vid behandling av Alzheimers sjukdom eller besläktade demensstörningar.

Föreningarna och kompositionerna enligt uppfinningen kan också användas vid beteendestörningar som oftast först diagnostiserats i barndomen, eller ungdomstiden liksom för impulskontroll störningar.

De kan också användas för att behandla missbruksstörningar liksom störningar som kännetecknas av matmissbruk.

Neurologiska indikationer inkluderar användningen av dessa föreningar och deras kompositioner för att förbättra mentala och motoriska funktioneri Parkinsons sjukdom, dyskinesi (inklusive L-DOPA-inducerad dyskinesi) och vid besläktade Parkinsons syndrom. De kan också användas för att förbättra nervösa ryckningar och skakningar med olika ursprung. Dessutom kan de användas för att lindra smärta vid tillstånd som kännetecknas av ökad muskelspänning.

De kan också användas i behandlingen av Huntingtons sjukdom och andra rörelsestörningar liksom vid rörelsestörningar som inducerats av läkemedel. Myror i benen och liknande störningar liksom narkolepsi kan också behandlas med föreningar enligt uppfinningen.

Föreliggande uppfinning avser också användningen av Formel 1 som visas ovan där R väljs från gruppen som består av Cj-Ca alkyler och allyler, eller ett farmaceutiska acceptabelt salt av dessa för tillverkning av farmaceutiskt aktiva beredningar för behandling av en störning i det centrala nervsystemet. Störningen i det centrala nervsystemet kan vara en eller flera av störningarna som beskrivs ovan. l speciella utföringsformer för användning, väljs R från gruppen som består av n-propyl och etyl.

Föreningarna enligt föreliggande uppfinning har visat en dopaminerg stabiliseringsprofil med ökad verkan (Tabell 1). De har effekter på biokemiska index i hjäman med de kännetecknande egenskaperna hos dopaminantagonister, t ex producera ökningar i koncentrationerna av dopamlnmetaboliter. l ràttexempel 1 ökar 3,4 10 15 20 25 30 529 246 12 dihydroxyfenylättikssyra (DOPAC) i striatum till 318 % jämfört med kontrollen vid 100 Clmol/kg s.c.. Exempel 2 ökar DOPAC till 292 % vid 100 iZlmol/kg s.c.

Föreningarna i denna uppfinning visar inga effekter pá spontan rörelse över ett brett doseringsomràde på (1-100 Dmol/kg s.c).

I vissa fall, speciellt då baslinjeaktiviteten är låg, kan de inducera en svag beteendeaktivering. Beteendeaktiveringen är begränsad, och nàr inte de starka aktivitetsökningarna som induceras av direkta eller indirekta dopaminerga agonister. A andra sidan reducerar de föredragna substanserna aktivitetsökningarna som inducerats av direkta eller indirekta dopaminerga agonister, tex d-amfetamin eller besläktade ämnen (Tabeuiy " _ ' _ Således visar föreningarna i denna uppfinning en dopaminerg stabiliseringsprofil med ökad eller bibehållen verkan(Tabell 1) jämfört med föreningar med formlema l och ll.

Dessutom, sänkte det specifika substitutionsmönstret verkan för inhibering av HERG- kanalen. , Givet inblandningen av dopamin i ett stort antal CNS-funktioner och de kliniska » i tillkortakommanden hos de nu tillgängliga läkemedel som verkar i dopaminsystem, kan den nya klassen av dopaminerga modulatorer som presenteras i denna uppfinning visa sig överlägsna de nu kända dopaminerga föreningarna vid behandling av flera störningar som är relaterade till dysfunktioner i CNS, när det gäller effektivitet och reducerade sidoeffekter.

Föreningarna i föreliggande uppfinning har också visat sig uppvisa hög metabolisk stabilitet i mikrosomerna hos råttlever när omsättningen mäts under 15 minuter (Exempel 1: 5 %, Exempel 2: 0 %), och hög biotillgänglighet i rätta, som exemplifieras av Exempel 2 (runt 85 %).

Dessa föreningar är således lämpade för beredningen av oralt administrerade läkemedel.

Det finns ingen vägledning i känd teknik om hur man skall få föreningar med denna effekt pá beteende och dopaminsystem i hjäman.

Farmakologi Det finns tecken på att dopaminerg neurotransmission i CNS är störd i psykiatriska och neurologiska sjukdomar. l många fall, till exempel schizofreni, Parkinsons sjukdom, Huntingtons sjukdom, bipolära störningar och vid demens är farmakoterapl baserad på antagonism eller agonism hos dopaminreceptorer användbar, men inte optimal. På senare år har det lagts mycket kraft pà att hitta nya och selektiva föreningar för 10 15 20 25 30 529 246 13 undergrupper av dopaminreceptorer (D1, D2, DS, D4, D5) med målet att öka effektiviteten och reducera sidoeffekterna.

Föreliggande uppfinning erbjuder en annan princip för ny terapi baserad på interaktioner med dopaminsystemet. Uppfinningen erbjuder föreningar som har stabiliserande effekter på det dopaminerga systemet i hjärnan som sin huvudsakliga egenskap.

Beskrivning av djurmodellerna som används i uppfinningen Föreningarna enligt uppfinningen har effekter på hjärnans neurokemi liknande de hos antagonister hos dopamin-DZ-receptorer (dvs dosberoende ökningar av dopamin metaboliten DOPAC, i hjärnbarken, 'striatala och limbala regionerna av hjärnan).

Föreningarna enligt uppfinningen visar ingen eller endast begränsade inhiberande effekter på spontana rörelser. Under vissa förhållanden kan de inducera enbeteendeaktivering.

Beteendeaktiveringen är begränsad, och när inte de stora aktivitetsökningarna som induceras av direkta eller indirekta agonister för dopaminreceptorer. Emellertid, kan de föredragna substanserna reducera ökningarna i aktivitet som induceras av den indirekta dopaminerga agonisten d-amfetamin. Ökningen i aktivitet efter behandling med d- amfetamin är en standardmodell för hyperdopaminergia (Tabell 1). I denna modell, ökas dopaminerg neurotransmission av systemisk administration av d-amfetamin i en dos som är tillräckligt hög för att producera en stor ökning i rörelseaktivitet. Förmågan hos en förening att antagonisera denna hyperaktivitet reflekterar anti-dopaminerga egenskaper, som är del av den dopaminerga stabiliseringsprofilen. Vidare, antagonism hos den d- amfetamininducerade hyperaktiviteten används allmänt som ett standardtest för antipsykotisk aktivitet (se Psychopharmacology 4th Generation of progress Kapitel 68, p 793-795).

Ytterligare en djurmodell för antipsykotisk aktivitet baseras på administration av glutamatantagonisten MK-801. Glutamatantagonister (dvs. NMDA antagonister), kan inducera psykoser hos människa (se Psychopharmacology, 4th Generation of progress, Kapitel 101, s. 1205 and 1207) och inducera beteendeavvikelser hos djur. Således, kan förmågan hos ett läkemedel att påverka schizofreni och psykotiska tillstånd kan mätas med hjälp av beteendemodeller baserade på experimentellt inducerade hypoglutamaterga tillstånd. I denna studie användes NMDA-antagonisten MK-801 (0.7 mg/kg i.p.) för att skapa ett hypoglutamatergiskt tillstånd där råttorna uppvisar onormalt, hyperaktivt beteende. Föreningar i föreliggande uppfinning reverserar på ett dosberoende sätt beteendestörningen som inducerats av MK-801 (se Tabell 2). '10 15 20 25 529 246 14 Det är känt att de dopaminerga systemen hos hjärnan interagerar starkt med andra överföringssystem (se Psychopharmacology, 4th Generation of progress, Kapitel 101, sidorna 1208-1209). Sådana interaktioner kan förklara de starka effekterna hos dopaminerga stabilisatorer på beteendeavvikelserna som inducerats av glutamatantagonisten MK-801, även om dessa avvikelser inte i första hand baseras på eller orsakas av förändringar i den dopaminega överföringen.

Tabell 2. Effekter hos föreningar från föreliggande uppfinning på rörelseaktivitet i MK-801 förbehandlade råttor (0.7 mg/kg i.p. 90 minuter före testföreningen). Djuren placerades rörelsemätare* omedelbart efter administrationen av testföreningen och rörelseaktiviteten mättes mellan 30 och 60 minuter efter administrationen (antal/30 minuter +/- SEM) Kontrollgrupp MK-801 MK + exempel 0.7 mglkg i.p. 100 pmollkg 0%; 47 i 12 ssesoi 9344 20855 i 4638 Q-CNX (P=o.o1) F Exempel 1 0%; 31 i 9.6 58753 i 24012 i 5511 QQNW ioasz (P=o.o3) ' F Exempel 2 Terapeutisk användning av dopaminerga stabilisatorer Föreliggande uppfinning erbjuder föreningar som har stabiliserande effekter på det dopaminerga systemet i hjärnan som huvudsaklig egenskap. Dessa föreningar är användbara för att behandla störningar i CNS där symptomen kan påverkas av dopaminerga funktioner. Som stöd för detta påstående, var god se följande referenser: *Som stöd för schizofreni och psykos, hänvisar sökande till Psychopharmacology 4th Generation of progress Kapitel 26, s. 295-301); *Parkinsons sjukdom(Psychopharmacology 4th Generation of progress Kapitel 26, s 295, Kapitel 1479-1482); , *Ångeststörningar (Psychopharmacology 4th Generation of progress Kapitel 21, s. 227 och 237, Kapitel 111, s. 1317-1318 and 1320); * Humörstörningar (Psychopharmacology 4th Generation of progress Kapitel 80, s. 921- 928; och 10 15 20 25 30 529 246 15 * Missbruk (Psychopharmacology 4th Generation of progress Kapitel 25, s. 283 och 292, Kapitel 66, s. 759-760, Kapitel 147, s. 1725 (se också Nisell et al, "Systemic Nicotine-Induced Dopamine Release in the Rat Nucleus Accumbens is Regulated by Nicotinic receptors in the Ventral Tegmental Area; Synapse (1994) 16: 36-44). Kapitel 149, s. 1745-1747 och 1751-1752). Drugs abused by humans preferentially increase synaptic dopamine concentrations in the mesolimbic system of freely moving rats Di Chiara et al Proc Natl Acad Sci USA 85, 5274, 1988. Drug addiction as a disorder of associative learning. Role of nucleus accumbens shell/extended amygdala dopamine Ann N. Y. Acad Sci 877, 461, 1999. _ _ ' Som visas i dessa referenser erkänns föreliggande tillstànd inom området som sjukdomar som avser dopaminerg neurotransmission.

Vidare, den farmakologiska interaktionen med dopaminerg neurotransmission anses allmänt vara användbart i behandlingen av flera störningar i CNS, som inte allmänt anses vara direkt orsakade av avbrott i dopaminerg neurotransmission. Till exempel, kan symtomen på Huntingtons sjukdom och andra rörelsestörningar behandlas med dopaminerga medel på grund av inblandningen av dopamin i motoriska funktioner (se Psychopharmacology 4th Generation of progress, Kapitel 26, s. 295-301). På samma sätt är det känt att kognitiva störningar (se Psychopharmacology 4th Generation of progress Kapitel 25, s. 292, Kapitel 120, s. 1417 och 1420, Kapitel 123, s. 1447 och 1452 och 1455-1457) autism (se Psychopharmacology 4th Generation of progress Kapitel 142, s. 1653 och 1661), uppmärksamhet-brist på hyperaktivitetsstörningar (se Psychopharmacology 4th Generation of progress Kapitel 141, s. 1643 och 1649-1650), sexuella störningar (se Psychopharmacology 4th Generation of progress Kapitlen 65, s. 743-746 och Kapitel 22, s. 245 och 254) och Ätstörningar (se Psychopharmacology 4th Generation of progress Kapitlen 137, s. 1600, Kapitel 138, s. 1609-1610 och 1612) Kan behandlas med medel som stärker den dopaminerga överföringen. Således, stödjer ovanstående referenser argumentet att föreningarna i uppfinningen skulle kunna vara användbara i behandlingen av sådana sjukdomar.

Det är allmänt känt att inhibitionen av HERG-kanalen kan inducera allvarliga sidoeffekter för hjärtat inklusive dödlig arytmi (J. Cardiovasc. Electrophysiol. 15, 475, 2004.; Eur. J.

Pharm., 450, 37, 2002.; Cardiovascular Research, 58, 32, 2003). Således i utvecklingen av nya läkemedel för CNS, söks föreningar som har minimal affinitet för HERG-kanalen och leder till en bred säkerhetsmarginal. 529 246 Beredningsmetoder Föreningarna i uppfinningen kan beredas som visas nedan i Reaktionsförlopp 1.

Emellertid begränsas inte uppfinningen till dessa metoder. Dessa föreningar kan också framställas som beskrivs för strukturellt besläktade föreningari känd teknik. Reaktionerna 5 kan utföras enligt standardförfarande" eller som beskriv i arbetsexemplen.

Utgàngsmaterialen för processen som beskrivs i föreliggande ansökan är kända eller kan enkelt framställas med konventionella metoder från kommersiellt tillgängliga kemikalier.

Fackmannen inom området känner till att för att erhålla föreningar i uppfinningen på ett alternativt och i vissa fall, mer bekvämt sätt kan de individuella processtegen som nämnts 10 här ovan utföras i en annan ordning, och/eller de individuella reaktionerna kanvutföras iett annat steg av processen (dvs. kemiska omvandlingar kan utföras på andra intermediärer än de som associeras till en speciell reaktion här ovan). i Reaktionsförlopp 1 S/ F s/ NHSMB 1. BuLi F Br F Br 2. 1-boc-4-piperidone F O N - \boc Case/O Ossšo Naioyreucr, ppA PWC- H2 ________ F ___..

O N F | \boc N (ksšo Ošsšo alkylering F _ F N N~R 15 Referenser. 1. Comprehensive Organic Transformations: A Guide to Functional Group Preparations _ Richard C. Larock, 22 October, 1999 Wiley-VCH 20 ISBN: 0471190314 2. March's Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, and Structure, 5th Edition.

Michael B. Smith, Jerry March, January 15, 2001 Wiley-lnterscience ISBN: 0471585890 10 15 20 25 30 529 246 17 När det används här, innebär termen "C1-C3 alkyl" en alkyl innehållande 1-3 kolatomeri någon isomer form. De olika kolresterna är som följer: Alkyl innebär ett alifatiskt kolväte och inkluderar ogrenade former så som metyl, etyl, n-propyl. Termen allyl innebär gruppen -CH2-CH=CH2.

Termen "patient" när den används här innebär en individ i behov av behandlingen enligt uppfinningen.

Termen "behandling" som används här avser både behandling för att läka eller lindra en sjukdom eller ett tillstånd och behandling för att förhindra utvecklandet av en sjukdom eller ett tillstånd. Behandlingen kan utföras vid ett akut eller-kroniskt tillstånd.

Både organiska och oorganiska syror kan användas för att bilda icke-toxiska farmaceutiska acceptabla sura tillsatssalter av föreningarna enligt uppfinningen. Lämpliga sura tillsatssalter av föreningarna i föreliggande uppfinning, inkluderar de som bildas med farmaceutiskt acceptabla salter så som toluensulfonat, metansulfonat, fumarat, väteklorid, vätebromide, vätejodid, nitrat, acetat, laktat, citrat, citratsyra, tartrat, bitartrat, alifatisk, alicyklisk, aromatisk eller heterocyklisk karboxylat, bärnstenssyra, imalat, fumarat, glukonat, glykolat, sackarat, askorbat, acetat, propionat, benzoat, pyruvat, pamoat [dvs. 1 ,1'-metylen-bis-(2-hydroxy-3-naftat)], fosfat, fosfatsyra, sulfat eller bisulfatsalter. Dessa salter kan enkelt framställas med välkända metoder inom teknikomràdet. Det är också underförstått att föreningarna i föreliggande uppfinning kan existera i upplösta lika väl som i oupplösta former så som t ex hydrerade former.

Den farmaceutiska kompositionen innehållande en förening enligt uppfinningen kan också innefatta substanser som används för att underlätta produktionen av den farmaceutiska beredningen eller administrationen av beredningarna. Sådana substanser är välkända för fackmannen inom området och kan till exempel var farmaceutiskt acceptabla adjuvanter, bärarsubstanser och konserveringsmedel.

I kliniskt utförande administreras föreningarna som används enligt uppfinningen normalt oralt, rektalt, nasalt eller genom injektion i formen av farrnaceutiska beredningar, innefattande den aktiva ingrediensen antingen som fri bas eller som ett farmaceutiskt acceptabelt icke-toxiskt surt tillsatssalt, såsom saltsyra-, laktat-, acetat- eller sulfamatsaltet, i association med en farmaceutiskt acceptabel bärarsubstans.

Bärarsubstansen kan vara en fast, halvfast eller flytande beredning. Vanligtvis kommer den aktiva substansen att utgöra mellan 0,1 och 99 % av beredningens vikt, mer specifikt mellan 0,5 och 20 % av vikten för beredningar som är avsedda att injiceras och mellan 0,2 och 50 % av vikten för beredningar som är lämpade för oral administration. 10 15 20 25 30 35 529 246 18 För att producera farmaceutiska beredningar innehållande föreningen enligt uppfinningen i form av doseringsenheter för oral tillämpning, kan den utvalda föreningen blandas med en fast konstituens, tex laktos, sackaros, sorbitol, mannitol, stärkelser så som potatisstärkelse, majsstärkelse eller amylopektin, cellulosaderivat, ett bindemedel som gelatin eller polyvinyl-pyrrolidin, och ett smörjmedel såsom magnesiumstearat, kalciumstearat, polyetylenglycol, vaxer, paraffin och liknande och sen komprimeras till tabletter. Om belagda tabletter krävs, kan kärnan som framställts som beskrivs ovan beläggas med en koncentrerad sockerlösning som kan innehålla t ex gummi arabicum, gelatin, talk, titandioxid och liknande. Alternativt, kan tabletten beläggas med en polymer känd för fackmannen, upplöst i ett lättflyktigt organiskt lösningsmedel eller en blandning av organiska lösningsmedel. Färg medel kan tillsättas till dessa beläggningar för att lätt urskilja mellan tabletter innehållande olika aktiva 'substanser eller olika mängder av den aktiva föreningen.

För framställningen av mjuka gelatinkapslar, an den aktiva substansen blandas med t ex en vegetabilisk olja eller polyetylenglykol. Hàrda gelatinkapslar kan innehålla granulat av den aktiva substansen med hjälp av antingen de nämnda konstituenserna för tablettert ex laktos, sackaros, sorbitol, mannitol, stärkelser (t ex potatisstärkelse, majsstärkelse eller amylopektin), cellulosaderivat eller gelatin. Även vätskor eller halvfasta ämnen av läkemedlet kan fyllas i hårda gelatinkapslar. Exempel på tablett- och kapselberedningar som är lämpade för oral administration: Tablett l mgltablett Förening 100 Laktos Ph.Eur 182.75 Kroskarmellosa natrium 12.0 Majsstärkelsepasta (5% w/v pasta) 2.25 Magnesiumstearat 3.0 Tablet ll mg/tablett Förening 50 ' Laktos Ph.Eur 223.75 Kroskarmellosa natrium 6.0 Majsstärkelse 15.0 Polyvinylpyrrolidon (5% w/v pasta) 2.25 Magnesiumstearat 3.0 10 15 20 25 30 529 246 19 Tablett lll mgltablett Förening 1.0 Laktos Ph.Eur 93.25 Kroskarmellos natrium 4.0 Majsstärkelsepasta (5% w/v pasta) 0.75 Magnesiumstearat 1.0 Kapsel mglkapsel Förening 10 Laktos Ph.Eur 488.5 Magnesium 1.5 Doseringsenheter för rektal applicering kan vara lösningar eller suspensioner eller kan framställas i form av suppositorier innefattande den aktiva substansen utblanclat med vegetabilisk olja eller paraffinolja. Flytande beredningar för oral tillämpning kan vara i formen av sirap eller suspensioner, till exempel lösningar innehållande från runt 0,2 % till runt 20 % av vikten för den aktiva substansen som beskriv här, där det övriga är socker och blandning av etanol, vatten, glycerol och propylenglykol. Enligt val kan sådana flytande beredningar innehålla färgämnen, smakämnen, sackarin och karboxymetylcellulosa som förtjockningsmedel eller andra konstituenser kända för fackmannen inom omrâdet.

Lösningar för parenterala tillämpningar kan beredas i en vatteninnehàllande lösning av ett vattenlösligt farmaceutiskt acceptabelt salt av den aktiva substansen, företrädesvis i en koncentration från 0,5 % till runt 10 % av vikten. Dessa lösningar kan också innehålla stabiliseringsmedel och/eller buffertsubstanser och kan bekvämt ges i ampuller med olika dosenheter. Användningen och administrationen till en patient som skall behandlas i kliniken är uppenbart för fackmannen inom området.

För intranasal administration eller administration genom inhalation kan föreningarna i föreliggande uppfinning levereras iform av en lösning, torrt pulver eller suspension.

Administration kan ske via en spraypumpbehållare som kramas eller pumpas av patienten eller genom en aerosolsprayanordning fràn en trycksatt behållare eller nebulisator, med användning av ett lämpligt drivmedel, tex diklordifluormetan, triklorfluormetan, diklortetrafluoretan, koldioxid eller annan lämplig gas. 10 15 20 25 30 35 529 246 20 Föreningarna enligt uppfinningen kan också administreras via en inhalator för torrt pulver, antingen som ett finfördelat pulver i kombination med en bärarsubstans (t ex en sackarid) eller som mikrosfärer. lnhalatorn, spraypumpen eller aerosolsprayen kan vara enkel eller multidos, doseringen kan kontrolleras genom et munstycke som levererar en uppmätt mängd av det aktiva ämnet.

Föreningarna i uppfinningen kan också administreras i en kontrollerad frisläppningsberedning. Föreningarna frisläpps med den önskade hastigheten för att bibehålla konstant farmakologisk aktivitet under en önskad tidsperiod. Sådana dosformer ger ett tillflöde av ett läkemedel till kroppen under en förutbestämd tidsperiod och bibehåller således läkemedelsniváer. i det terapeutiska omrâdet under längre tidsperioder än konventionella icke-kontrollerade beredningar. Föreningarna kan också beredas i kontrollerade frisläppningsberedningar i vilka frisläppandet av den aktiva föreningen kontrolleras. Till exempel, kan frisläppandet av föreningen begränsas till en specifik region av matsmältningssystemet genom pH-känsligheten för beredningen . Sådana beredningar är väl kända för fackmannen inom området. I Beroende på störningen och patienten som skall behandlas och administrationsvägen, kan kompositionerna administreras l varierande doser. Doseringen kommer också att bero på relationen mellan styrkan och absorbtiviteten och frekvensen och administrationsvägen. Dessa doser kan administreras en, två eller tre eller flera gånger dagligen. Föreningarna i denna uppfinning kan administreras till patienteri doser som sträcker sig från 0,01 mg till 500 mg per kg kroppsvikt per dag, även om variationer nödvändigtvis kommer att uppstå beroende på vikt, kön och tillstånd hos patienten som behandlas, sjukdomstillstàndet som behandlas och den speciella administrationsvägen som valts. Emellertid är en doseringsnivà som är i området från 0,1 mg till 10 mg per kg kroppsvikt per dag, i enkla eller delade doser för människa mest önskvärt att använda vid behandlingen av sjukdomar. Alternativt är doseringsnivån sådan att serumkoncentrationen på mellan 0,1 nM till 10 uM av föreningen erhålls.

För varje kemisk formel eller namn som anges här inkluderas alla stereo och optiska isomerer och racemat och blandningar av dessa i alla olika förhållande. De olika isomererna kan erhållas med hjälp av standardmetoder som är väl kända för fackmannen, tex via kromatografi eller fraktionerande kristallisation, Till exempel kan cis/transblandningar separeras l individuella stereolsomerer genom stereoselektiv syntes.

Eantiomerer eller diastereomerer kan isoleras genom separation av deras blandningar, till exempel genom fraktionerad kristallisation, upplösning eller HPLC. Alternativt kan separation utföras genom derivatisering med ett kiralt reagens. Stereoisomerer kan 10 15 20 25 30 529 246 21 tillverkas med stereoselektiv syntes från stereokemiskt rena startmaterial under förhållande som inte orsakar förlust av stereokemisk integritet. Alla stereoisomerer inkluderas inom uppfinningens ram.

Föreningarna i föreliggande uppfinning kan isoleras till vilken renhetsnivà som helst med hjälp av standardmetoder och rening kan uppnås med hjälp av konventionella medel som är välkända för fackmannen inom området, så som destillation, återkristallisation och kromatografi.

Uppfinningen illustreras vidare i exemplen nedan, vilka inte på något sätt är avsedda att begränsa uppfinningens omfattning.

.Exempel 1 4-[3-FLUOR-5-(METYLSULFONYL)FENYL]-1-PROPYLPIPERIDIN Till en lösning av 4-[3-fluorèö-(metylsulfonyl)fenyl]piperidin (0.5 g, 1.94 mmol) i acetonitril (5 ml) tillsattes kaliumkarbonat (0.53 g, 3.83 mmol) och 1-jodpropan (0.189 ml, 1.94 mmol) och blandningen värmdes med mikrovågsstrålning under 20 min vid 150°C, Blandningen kyldes till omgivande temperatur och vatten (50 ml) tillsattes. Den vatteninnehållande återstoden extraherades med ethylacetat (3x50 ml) och de kombinerade organiska faserna torkades, koncentrerades och renades med "flash" pelarkromatografi (etylacetat/metanol, 1:1) för att ge avsedd förening (0.27 g, 46%). Aminen omvandlades till vätekloridsaltet och omkrlstalliserades från etanot/dietyl eter: M.p. 187-189 °C. MS m/z (relativ intensitet, 70 eV) 299 (M+, 3), 271 (15), 270 (kokpunkt), 147 (5) 133 (5).

Exempel 2: 1-ETYL-4-[3-FLUOR-5-(METYLSULFONYL)FENYL]PlPERlDlN Framställning enligt Exempel 1: 4-[3-fluor-5-(metylsulfonyl)fenyl]piperidin (0.4 g, 1.55 mmol), acetonitril (5 ml), kaliumkarbonat (0.42 g, 3.0 mmol)_1-jodetan (0.147 ml, 1.55 mmol). Utbyte: 0.28 g (63 %). Aminen konverterades till vätekloridsaltet och omkristalliserades från etanol/dietyl eter: Smältpunkt 176-178°C. MS rn/z (relativ intensitet, 70 eV) 285 (M+, 15), 284 (16), 271 (16), 270 (kokpunkt), 84 (15).

Syntes av mellanprodukter som används i ovanstående Exempel beskrivs i beredningarna nedan.

Beredning 1: 1 -BROM-3-FLUOR-5-(METYLTlO)BENZEN 10 15 20 25 30 529 246 22 Till en lösning med 1-brom-3,5-difluorbenzen (5.0 g, 25.9 mmol) i dimetylformamíd (40 ml) tillsattes natriumtiometylat (1.81 g, 25.9 mmol), och blandningen värmdes till 150°C under 10 min. Reaktionsblandningen bringades till omgivande temperatur, quenchades med mättad vatteninnehållande ammoniumklorid (100 mi) och extraherades med etylacetat (3x100 mi). De kombinerade organiska faserna torkades och koncentrerades med vakuum för att erhålla avsedda förening (3.84 g). MS m/z (rel. intensitet, 70 eV) 222 (M+, 100), 220 (M+, 100), 189 (49), 187 (50), 126 (75).

Beredning 2: (_ i , _! _ TERT-BUTYL 4-[3-FLUOR-5-(METYLTIO)FENYL]-4=HYDROXYPlPERIDIN-1- " KARBOXYLAT Till en lösning med 1-brom-3-fluor-5-(metyltio)benzen (317 g, 16.7 mmol) i torkad dietyleter (100 ml), i kväve, vid -78 °C tillsattes droppvis n-butyl litium (2.5 M i hexan, 6.7 ml, 16.7 mmol). Blandningen omrördes under 30 min vid -78 °C och bringades sen till -20 °C under 2 min och kyldes igen till -78 °C. Till resulterande blandning vid -78 °C, tillsattes droppvis en lösning av 4-Boc-1-piperidon (3.3 g, 16.7 mmol) i torkad dietyleter (50 ml).

Blandningen omrördes vid -78°C under 10 min och bringades sen till omgivande temperatur. Reaktionsblandningen quenchades med mättad vatteninnehållande ammoniumklorid (100 ml) och extraherades med etylacetat (3x100 ml). De kombinerade organiska faserna torkades, koncentrerades och renades med hjälp av "flash" kromatografi (isooktan/etylacetat 2:1) för att ge avsedd förening (3.76 g). MS m/z (rel. intensitet, 70 eV) 341 (M+, 7), 285 (11), 241 (11), 196 (4), 57 (bp).

Beredning 3: TERT-BUTYL-4-[3-FLUOR-5-(METYLSULFONYL)FENYL]-4-HYDROXYPIPERlDlN-1- KARBOXYLAT Till en lösning av tert-butyl 4-[3-fluoro5-(metyltio)fenyl]-4-hydroxypiperidin-1-karboxylat (3.66 g, 10.6 mmol) i koltetraklorid (13 ml), acetonitril (13 ml) och vatten_(26 ml), tillsattesnatrium periodat (6.8 g, 31.8 mmol) och .rutenium triklorid (3 mg, 0,05 mol%) och blandningen omrördes under 20 min. vid omgivande temperatur. Vatten tillsattes och produkten extraherades med etylacetat (3x100 ml). De kombinerade organiska faserna torkades och koncentrerades l vakkum för att erhålla den rena avsedda föreningen (33 g). MS m/z (rel. intensitet, 70 eV) 373 (M+, 0), 273 (25), 255 (74), 133 (28), 56 (kokpunkt). 529 246 23 Beredning 4: 4-[3-FLUOR-5-(METYLSULFONYL)FENYL]-1,2,3,6-TETRAHYDROPYR|DlN En blandning av tert-butyl 4-[3-fluor-5-(metylsulfonyl)fenylj-4-hydroxypiperidin-1~ karboxylat (3.3 g, 8.8 mmol) och polyfosforsyra (20 ml) värmdes vid 120°C under 3 h.

Blandningen hälldes på is och gjordes basisk med 5 M natriumhydroxid. Blandningen extraherades med etylacetat (3x100 ml) och de kombinerade organiska faserna torkades _ (MgSO4), indunstades och renades med "flash" kromatografi (metanol /etylacetat 1:1)för 10 15 20 25 30 35 att ge ovan avsedda förening (2.02 g). MS m/z (rel. intensitet, 70 eV) 255 (M+, kokpunkt), 254 (50), 251 (87), 172 (87), 146 (53).

Beredning 5: 4-[3-FLUOR-5-(METYLSULFONYL)FENYL]PlPERlD|N En blandning av 4-[3-fluor-S-(metylsulfonyl)fenyl]-1,2,3,6-tetrahydropyridin (2.02 g, 7.9 mmol), palladium på kol (0.56 g) och myrsyra (1,9 ml) i isopropylalkohol (60 ml). i hydrogenerades vid 50 psi under 24 h över väte. Reaktionsblandningen filtrerades genom en bädd av celit och filtratet koncentrerades och indunstades till torrhet för att ge 1.66 g ràprodukt. MS m/z (relativ intensitet, 70 eV) 257 (M+, kokpunkt), 256 (80), 133 (21), 69 (25) 56 (99).

Följande tester användes för att utvärdera föreningarna enligt uppfinningen. ln vivo test: Beteende i _ Beteendeaktivitet mättes med hjälp av åtta Digiscanaktivitets monitorer (RXYZM (16) TAO, Omnitech Electronics, Columbus, OH, USA), kopplade till en Omnitech Digiscan analyzer och en Apple Macintosh dator utrustad med en digital interface board (NB DIO- 24, National lnstruments, USA). Varje aktivitetsmonitor bestod av en fyrkantig metallram (WxL 40x40 cm) utrustad med fotostrålningssensorer. Under mätningarna av beteendeaktívitet sattes en råtta i en genomskinlig bur av akryl (WxLxH, 40x40x3O cm) som i sin tur placerades i aktivitetsmonitorn. Varje aktivitetsmonitor var utrustad med tre rader av infraröda fotostràlesensorer, där varje rad består av 16 sensorer. Tvà rader. placerades längs fronten och sidan pà golvet av buren i en 90° vinkel, och den tredje raden placerades 10 cm ovanför golvet för att mäta vertikal aktivitet. Fotostrålesensorer placerades 2,5 cm från varandra. Varje aktivitetsmonitor var utrustad placerades i en identisk ljud- och ljusdämpande làda innehållande ett svagt ljus och en fläkt.

Datormjukvaran skrevs med hjälp av màlorienterad programmering (LabVlEW®, National instruments, Austin, TX, USA). 10 15 20 25 30 529 246 24 Beteendedata från varje aktivitetsmonitor, representerande positionen (horisontalt center för gravitet och vertikal aktivitet) hos djuret för varje gäng registrerades med en provtagningsfrekvens på 25 Hz och samlades in med hjälp av specialskriven LABViewTM tillämpning. Data från varje registreringspass sparades och analyserades med avseende på förflyttad sträcka. Varje registreringspass av beteende stäckte sig över 60 min, och startade ungefär 4 min efter injektionen av testföreningen. Liknande beteenderegistreringar tillämpades för läkemedelsnaiva och läkemedels förbehandlade råttor. Råttor som förbehandlats med d-amfetamin gavs en dos på 1.5 mg/kg i.p., 10 min före registreringspasset i aktivitetsmonitom. Råttor som förbehandlats med MK-801 gavs en dos på 0,7 mg/kg i.p."90 min före registreringspasset i aktivitetsmonitorn. Resultaten presenteras som antal/60 minutenieller antal/30 minuter, i godtyckliga längdenheter.

Statistiska jämförelser utfördes med hjälp av students t-test mot kontrollgruppen. l MK- 801- eller amfetaminförbehandlade djur, gjordes statistiska jämförelser mot MK801- respektive d-amfetaminkontroller.

EDSO värden för reduktion av amfetamin-inducerad hyperrörelseberäknas med kurvanpassning. För de flesta föreningar, baseras utvärderingen på 16 amfetaminbehandlade djur i området 0, 11, 33 and 100 pmol/kg s.c. i ett enda experiment, med komplementära doser i separata experiment. Beräkningar är baserade på avstånd under de sista 45 minutema av en timmes mätningar. Avstånden är normaliserade till amfetaminkontroll och anpassade till minsta minimering av funktionen "End-(End-Control)/(1 +(dose/ED50)S'°°°)". För att uppskatta konfidensnivåerna för parametrarna, repeteras anpassningen 100 gånger med en slumpmässigtjämt fördelad kvadrerad vikt (0 till 1) för varje mätvärde. Visade EDw-områden täcker 95 % av dessa värden. ln vivotest: neurokemi Efter beteendeaktivitetspassen, halshöggs råttorna och deras hjärnor togs snabbt ut och lades på en iskall petriskål. Den limbala främre hjärnan, striatum, främre hjärnbarken och återstående hemisfäriska delarna på varje råtta dissikerades och frystes. Varje hjårndel analyserades därefter med avseende på dess innehåll av monoaminer och dess metaboliter.

Monoamina transmittersubstanser (NA (noradrenalin), DA (dopamin), 5-HT (serotonin)) liksom deras amin (NM (normetanefrine), 3-MT (3-metoxytyramin)) och syra (DOPAC (3,4-dihydroxyfenylättikssyra), 5-HlAA (5-hydroxyindoleättikssyra), HVA 1D 15 20 25 30 35 529 246 25 (homovani|linsyra)) metaboliter kvantifieras i hjärnvävnadshomogenat med HPLC- separationer och elektrokemisk detektion.

Den analytiska metoden baseras på två kromatografiska separationer avsedda för amlner eller syror. Två kromatografiska system delar en gemensam autoinjektor med ett 10 ports munstycke och två provöglor för simultan injektion i båda systemen. Båda systemen är utrustade med en reverserad faskolonn (Luna C18(2), dp 3 pm, 50*2mm i.d., Phenomenex) och elektrokemisk detektion genomförs vid tvà potentialer på glas kolelektroder (MF-1000, Bloanalytical Systems, Inc.) Via en T-koppling passerar flödet till detektorcellen eller till avfallet. Detta utförs med hjälp av tvà solenoidmunstycken, som blockerar antingen avfalls- eller detektorutloppet. »Genom att inte tillåta den kromatograflska fronten att nå detektorn, uppnås detekltorförhållanden. Den vatteninnehållande mobila fasen (0.4 ml/min) för syrasystemet innehåller citronsyra 14 mM, natriumcitrat 10 mM, MeOH 15% (v/v) och EDTA 0.1 mM.Detektionspotentialer relativt Ag/AgCl referensen är 0.45 och 0.60V. Den vatteninnehållande jonparande mobila fasen (0.4 ml/min) för aminsystemet innehåller citronsyra 5 mM, natriumcitrat 10 mM, MeOH 9% (v/v), MeCN 10.5% (v/v), Dekansulfonsyra 0.45 mM, och EDTA 0.1 mM.

Detektionspotentialer relativt Ag/AgCl referensen är 0.45 och 0.65V. ln vivotest: Oral Biotillgänglighet Experiment utförs 24 timmar efter implantation av arteriella och venösa katetrar.

Testföreningen administreras oralt med 12.5 pmol/kg eller intravenöst med 5 pmol/kg med hjälp av de venösa katetrarna, n=3 per grupp. Arteriella blodprover tas sen under åtta timmar vid O, 3, 9, 27, 60, 120, 180, 240, 300 och 360 minuter efter administrationen av testföreningen. Den orala biotlllgängligheten beräknades som förhållandet AUC (Area under kurva) som erhållits efter oral administration över AUC erhållen efter intravenös administration för varje råtta. Parametern AUC räknades ut enligt följande: AUC: arean under plasmakoncentrationen över tidskurvan från tiden noll till den sista koncentrationen som uppmättes (Clast), beräknad med hjälp av log/linjära trapetsoidmetoden.

Nivåerna för testföreningen mäts med hjälp av vätskekromatografi-masspektroskopi (LC- MS). (HewlettPackard 110OMSD Series). Modulen inkluderar ett kvartärpumpsystem, avgassystem med vakuum, termostaterad autosampler, termostaterad pelaravdelning, diodarraydetektor och API-ES spraykammare. Datahantering utfördes med en HP ChemStation rev.A.O6.03. system. Instrument parametrar: MSD mode: Selected ion monitoring (SIM) MSD polaritet: Positiv Gas temp: 350°C Torkande gas: 13,0 I/min Nebulizer gas: 50 psig Kapillärspänning: 5000 V Fragmentspänning: 70 V 10 15 20 25 30. 35 529 246 26 Analytisk pelare: Zorbax eclipse XDB-C8 (4.6*150 mm, 5 pm) vid 20°C. Den mobila fasen var ättikssyra (0.03%) (lösningsmedel A) och acetonitril (Lösningsmedel B).

Flödeshastigheten för den mobila fasen var 0.8 ml/min. Elueringen startades vid 12 % av lösningsmedel B isokrat under 4,5 min, och ökades sen linjärt till 60 % under 4,5 min.

Extraktionsprocedur: Plasmaprover (0.25-0.5 ml) späddes ut med vatten till 1 ml och 60 pmol (100 pl) intern standard (-)-OSU6241 tillsattes. pH justerades till 11 genom tillsats av 25 pl mättad vatteninnehàllande natriumkarbonat. Efter blandning extraherades proverna med 4 ml diklormetan genom skakning under 20 min. Det organiska skiktet överflyttades efter centrifugering till ett mindre rör och indunstades till torrhet över kvävgas. Återstoden löstes sen upp i 120 pl mobilfas (ättikssyra (0.03%): acetonitril, 95:5) för LC-MS analys (10 pl injicerad). Den valda jonen (Mi-F) följdes för varje exempel, och MH* 296 för (-)-OSU6241 ((S-[S-(etylsulfonyl)fenyl]-1-propylpiperidin). _ _ _ En standardkurva i området 1-500 pmol bereds genom att tillsätta lämpliga mängder av testföreningen till blanka plasmaprover. ln vitrotest: Metabol stabilitet i rättlever mikrosomer Ràttlevermikrosomer isolerades som beskrivits av Förlin (1980) Effects of C/ophen A50, 3-methy/cholantrene, pregnenolone-16aq-carbonitriIe and Phenobarbital on the hepatic microsomal cytochrome P-450-dependent monooxygenaser system in rainbow trout, salmo garírdneri, of different age and sex. Tox Appl Pharm. 54(3) 420-430, med smärre avvikelser t ex 3 ml./g lever från en 0.1 M Na/K*PO4 buffert med 0.15 M KCI, pH 7.4, (buffert 1) tillsattes före homogenisering, homogenatet centrifugerades under 20 minuter istället för 15, supernatanten ultracentrifugerades vid 100 000 g istället för 105000 g och peileten från ultracentrifugeringen àtersuspenderades till 1 ml/g lever med 20% v/v 87% glycerol in buffert 1. 1 pL of, 0.2 eller 1 mM testsubstans utspädd l vatten och 10 pL 20 mg/mL råttlevermikrosom blandades med 149 pL 37°C buffert 1 och reaktionen startades genom tillsats av 40 pL 4.1 mg/mL NADPH. Efter 0 eller 15 minuters inkubering vid 37°C i ett värmeblock (LAB-LINE, MULTI-BLOK Heater eller lab4you, TS-100 Thermo shaker vid 700 rpm) stoppades reaktionen genom tillsats av 100 pl ren acetonitril. Proteinutfällningen I avlägsnades sen genom att kasta pelleten efter centrifugering vid 10 000 g under 10 minuter (Heraeus, Biofuge fresco) i4°C. Testföreningen analyserades med hjälp av HPLC-MS (Hewlett-Packard 1100MSD Serie) med en Zorbax SB-C18 column (2.1*150 mm, 5 pm) med hjälp av 0.03% myrsyra och acetonitril som mobil fas (gradient) eller en Zorbax Eclipse XDB-C18 (3*75 mm, 3.5pm) med hjälp av 0.03% ättikssyra och acetonitril 10 15 20 25 30 529 246 27 som mobil fas (gradient). Omsättningstiden på 15 minuter beräknades när fraktionen av testföreningen eliminerades efter 15 minuter, uttryckt i procent av O min nivåer, dvs 100*[konc testförening vid 0 min - koncentration vid 15 min] / konc vid O min.

Beredningen av levermikrosomer utfördes som besk-rivs i Förlin (1980). Protokoll för inkubering med lever mikrosomer ges i Crespi & Stresser (2000), and Renwick et al (2001 ).

Crespi C L, and DM Stressser (2000). Fluorometric screening for metabolism based drug- drug interactions. J. Pharm. Tox. Meth. 44. 325-331 Förlin L. (1980) Effects of Clophen A50, 3-methylcholantrene, pregnenoIone-16aq- carbonitrile and Phenobarbital on the hepatic microsomal cytochrome P-450-dependent monooxygenaser system in rainbow trout, salmo gairdneri, of different age and sex. Tox Appl Pharm. 54(3) 420-430 ' Renwick, AB et al. (2001). Metabolism of 2,5-bis(trif|uoromethyl)-7-benzyloxy-4- trifluoromethylcoumarin by human hepatic CYP isoforms: evidence for selectivity towards CYP3A4. Xenobiotica 31 (4): 187-204 hERG-affinitet Utvärdering av hERG-afflniteten med hjälp av rapid ICET" utfördes av Quintiles Limited, Research Avenue South, Heriot-Watt University Research Park, Riccarton Edinburgh, Scotland. Rapid ICE TM (Rapid lon Channel Electrophysiology) är ett automatiserat patch-clamptest som använder sig av PatchXpress 7000A system (Axon Instruments).

Rapid ICE TM utvärderar effekten av testföreningarna pà HERGstjärtström som uppmäts från HEK293-celler som transfekterats stabilt med cDNA från HERG. Föreningar som inhiberar HERG-ström har visats sig förlänga hjärtats aktionpotential och således QT- intervallet hos människa.

HERG.T.HEK (HEK293 celler som transfekterats stabilt med HERG cDNA) erhölls fràn Universitetet i Wisconsin. Dessa celler förvaras i kryogen förvaring vid Quintiles och bibehålls också i odling. Cellerna upprätthålles kontinuerligt i och omodlas med hjälp av minimalt essentiellt medium som komplementerats med 10 % fetalt bovint serum, 1 % icke-essentiella aminosyror, 1 % natriumpyruvat och 0.4 mg/ml geneticin. För användning i Rapid lCE TM studier placeras 4 ml av cellerna i falconrör vid en densitet på 2.5 x 10 5 /ml. Falconrören förvaras i en humifierad, gasfylld (5% C02) inkubator vid 37°C och celler används inom 2,5 tim förvaring. Precis innan experimentet, centrifugeras cellerna vid 10- 15 20 25 529 246 28 1000 rpm under 1 min, och supernatanten dekanteras och cellerna àtersuspenderas i 150 pl av badlösning i ett 1.5 ml eppendorf rör.

PatchXpress systemet förbehandlas med lämpligt extracellulära (bad) och intracellulära (pipett) lösningar innan en studie utförs. En 16-brunns sealchip (Sealchip16, Aviva Biosciences Corp) laddas i systemet och förbehandlas innan cellerna prepareras I badlösningssuspensionen. Eppendorfröret med cellerna placeras i den angivna positionen och proceduren startar med tritureringen och dispersionen av celler i varje brunn (avläsningskammare) i sealchip. PatchXpress systemet följer de allmänna principerna för helcells patch-clamping: en högresistent försegling bildas mellan patchelektroden och en individuell cell, där membranet över elektrodspetsen brister och helcells patc- clampkonfigurationen etableras. Om kvaliténhos cellerna bestäms vara dålig, kan experimentet avslutas vid denna punkt och om nödvändigt kan processen repeteras på en annan sealchip.

När väl en stabil patch har uppnåtts, börjar spännings-clampavläsningen däricellen initialt startas vid -80 mV. En standardiserad spänningsprofil är som följer: steg från -80 mV till - 50 mV under 200 ms, +20 mV under 4.8 s, steg till -50 mV för 5 s sen steg till hällpotentialen pà -80 mV. Steget från -80 mV till testkommandot (+20 mV) resulterar l en utåtriktad ström (dvs. strömmen flödar ut fràn cellen) och steget fràn testkommandot (+20 mV) till -50 mV resulterar i stjärtström (stjärtströmmen representerar deaktivering av strömmen över tid). Stjärtströmsvärden extraheras . Varje värde representerar medelströmmen som mätts fràn 4 sekventiella spänningspulser. För varje cell bestäms effekterna av testsubstansen genom att beräkna återstående ström (% kontroll) jämfört med förbehandling av bärare.

Ett lC50 värde (pM), eller annan markör för styrka, uppskattas från koncentrations- svarförhållandet.

Claims (6)

1. 529 246 2°l PATENTKRAV 1. En förening med Formel 1: sozcns (1) där R är vald fràn gruppen som bestàr av Ci-Cs alkyler och allyl; och farmaceutiskt acceptabla salter av dessa.

2. En förening enligt krav 1, vari R är vald från gruppen som består av n-propyl och etyl.

3. En förening enligt något av kraven 1-2, vald frán gruppen som består av: 1 -etyl-4-[3-fluor-5-(metylsulfonyl)fenyl]piperidin 4-[3-fluor-5-(metylsulfonyl)fenyl]-1-propylpiperidin 1-a|lyl-4-[3-fluor-5-(metylsulfonyl)fenyl]piperidin

4. Användning av en förening enligt Formeln 1: SOzCHa N\R (1) _ där R är vald från gruppen som består av C1-C3 alkyler och allyl; eller ett farmaceutiskt acceptabelt salt av dessa för tillverkning av farmaceutlskt aktiva beredningar för behandling av en störning i det centrala nervsystemet. 10. 11. 12. 13. 529 246 SQ Användning enligt krav 4, där R är vald från gruppen som består av n-propyl och etyl. En farmaceutisk komposition innefattande en förening enligt något av kraven 1-3 samt en eller flera farmaceutiskt acceptabla bärare eller spädningslösningar. En farmaceutisk komposition enligt krav 6 för behandling av en störning i det centrala nervsystemet. En farmaceutisk komposition enligt krav 6, för behandling av rörelsestörningar valda från gruppen som består av Parkinsons sjukdom, Parkinsonism, dyskinesi (inklusive L-DOPA inducerad dykinesi), dystoni, nervösa ryckningar, skakningar, och Huntingtons sjukdom. En farmaceutisk komposition enligt krav 6, för behandling av ett tillstånd valt från gruppen som består av iatrogena och icke+iatrogena psykoser och hallucinoser. En farmaceutisk komposition enligt krav 6, för behandling av ett tillstånd vald från gruppen som består av schizofreni, schizofrena störningar och bipolära störningar. En farmaceutisk komposition enligt krav 6, för behandling av ett tillstånd vald från gruppen som består av humör och àngeststörningar, depression och tvångsmässiga sjukdomar. En farmaceutisk komposition enligt krav 6, för behandling av nervutvecklingstörningar valda från gruppen som består av autistiska störningar, ADHD, Cerebral pares, Gilles de la Tourettes syndrom och neurodegenerativa störningar valda från gruppen som består av demens och åldersrelaterade kognitiv försvagning. En farmaceutisk komposition enligt krav 6, för behandling av ett tillstånd vald från gruppen som består av sömnstörningar, sexuella störningar, ätstörningar, obesitas och huvudvärk och andra smärtor vid tillstånd kännetecknade av ökad muskelspänning. 529 246 3\ 14. En farmaceutisk komposition enligt krav 6, för förbättrande av motoriska funktioner, kognitiva funktioner och besläktade emotionella störningar, och efter hjärnskador som inducerats av traumatiska, inflammatoriska, infektiösa, neoplastiska, vaskulära, syrebrist eller metabola orsaker eller hjärnskador inducerade av toxiska reaktioner mot exogena kemikalier, där de exogena kemikalierna är valda fràn gruppen som består av missbrukssubstanser, farmaceutiska föreningar, miljötoxiner. 1

5. En farmaceutisk komposition enligt krav 6, för behandling av en störning relaterade till missbruk av substanser. 1

6. En farmaceutisk komposition enligt krav 6, för behandling av Alzheimers sjukdom eller besläktade demensstörningar.