RU2852940C2 - Модуляторы внутриклеточной концентрации хлоридов - Google Patents

Abstract

Изобретение относится к соединению формулы Ia, где R₁-R₆ указаны в формуле изобретения, к содержащей его фармацевтической композиции и их применению при лечении или предупреждении патологических состояний, связанных с деполяризующей GABA-эргической передачей сигналов, включая, например, синдром Дауна и аутизм. 4 н. и 5 з.п. ф-лы, 18 ил., 2 табл., 3 пр.

Description

ОПИСАНИЕ

Перекрестная ссылка на родственные заявки

По данной патентной заявке испрашивается приоритет в соответствии с заявкой на патент Италии №102019000004929, поданной 2 апреля 2019 года, полное раскрытие которой включено в настоящий документ посредством ссылки.

Область техники, к которой относится настоящее изобретение

Настоящее изобретение относится к соединению формулы Ia, Ib и Ic, которое ингибирует котранспортер натрия, калия и хлорида (далее в настоящем документе также называемый NKCC1).

Фармакологическое ингибирование NKCC1 может быть использовано для лечения целого ряда патофизиологических состояний, в особенности нарушений головного мозга. Производные 2-аминобензолсульфонамида представляют собой эффективные ингибиторы NKCC1 и демонстрируют многообещающую эффективность для восстановления GABA-эргической передачи сигналов и связанного с ней когнитивного поведения в моделях синдрома Дауна и аутизма на грызунах.

Предшествующий уровень техники настоящего изобретения

Синдром Дауна представляет собой наиболее распространенную генетическую форму умственной отсталости (~10 на 10000 и 14 на 10000 живорожденных в Европейских странах и Соединенных Штатах, соответственно). Синдром Дауна, также известный как трисомия 21 хромосомы, представляет собой генетическое нарушение, обусловленное наличием полной или частичной третьей копии 21 хромосомы. Наиболее яркими клиническими признаками синдрома Дауна являются умственная отсталость, характеризующаяся низким коэффициентом умственного развития (IQ), нарушение способности к обучению и нарушение памяти, в частности, в функциях, связанных с гиппокампом. Хотя педагогические методы и интегрированное обучение приводят к улучшению когнитивного развития у пациентов с синдромом Дауна, по-прежнему существуют конститутивные нарушения, которые не могут быть полностью устранены посредством упомянутых методик. Действительно, несмотря на то, что существует несколько препаратов-кандидатов для клинического лечения синдрома Дауна (а именно пирацетам, мемантин и донепезил, ривастигмин, эпигаллокатехина галлат и антиоксиданты, пентилентетразол, ACl-24), по-прежнему не существует утвержденных фармакологических лекарств для облегчения когнитивных симптомов синдрома Дауна. Таким образом, усилия по поиску лекарств для улучшения когнитивных функций у субъектов с синдромом Дауна крайне необходимы.

В последние несколько лет большой объем литературы указывает на то, что ингибирующая GABA-эргическая передача сигналов посредством Cl^--проницаемых GABAA рецепторов является дефектной при синдроме Дауна и примногих других нейроонтогенетических заболеваниях (Deidda, G. et al. Modulation of GABAergic transmission in development and neurodevelopmental disorders: investigating physiology and pathology to gain therapeutic perspectives. Front Cell NeurosCl 2014, 8, 119.3; Contestabile, A. et al. The GABAergic Hypothesis for Cognitive Disabilities in Down syndrome. Frontiers in Cellular NeurosClences 2017, 11.54). Тем не менее, опасно использовать обычные ингибиторы GABAA рецепторов для восстановления дефектной GABA-эргической передачи сигналов. Это связано с высоким риском приступов эпилепсии у пациентов.

Нарушения головного мозга, характеризующиеся измененной GABA-эргической передачей сигналов, включают в себя синдром Дауна, нейропатическую боль, инсульт, ишемию головного мозга, отек головного мозга, гидроцефалию, травматическое повреждение головного мозга, вызванное травмой головного мозга депрессивное поведение, нарушения аутического спектра (т.е., аутизм, синдромы ломкой Х-хромосомы, Ретта, Аспергера и Ди Джорджи), эпилепсию, судорожные припадки, эпилептический статус, судороги у детей, глиому, глиобластому, анапластическую астроцитому, болезнь Паркинсона, болезнь Хантингтона, шизофрению, тревожность, комплекс туберозного склероза и ассоциированные с ним проблемы поведения, синдром Драве. Котранспортеры Na⁺, K⁺, Cl^- (NKCC), кодируемые генами SLC12A2 (NKCC1) и SLC12A1 (NKCC2), принадлежат к семейству транспортеров, которые обеспечивают электронейтральный транспорт натрия, калия и хлорида через плазматическую мембрану; они перемещают каждое растворенное вещество в одном направлении и поддерживают электронейтральность посредством перемещения двух положительно заряженных растворенных веществ (натрия и калия) вместе с двумя частями отрицательно заряженного вещества (хлорида).

NKCC1 широко распространены, в особенности в экзокринных железах и головном мозге; NKCC2 обнаруживают в почках, где они служат для извлечения натрия, калия и хлорида из мочи с тем, чтобы они могли быть реабсорбированы в кровь.

В нейронах импортер Cl^- NKCC1 и экспортер Cl^- KCC2 преимущественно контролируют внутриклеточную концентрацию Cl^-.

Важно отметить, что соотношение экспрессии NKCC1/KCC2 является дефектным при синдроме Дауна и в нескольких моделях заболеваний головного мозга на животных; целевое воздействие на NKCC1 ингибиторами приводит к терапевтическим эффектам при некоторых заболеваниях, включая без ограничения синдром Дауна, нейропатическую боль, инсульт, ишемию головного мозга, отек головного мозга, гидроцефалию, травматическое повреждение головного мозга, вызванное травмой головного мозга депрессивное поведение, нарушения аутического спектра (т.е., аутизм, синдромы ломкой Х-хромосомы, Ретта, Аспергера и Ди Джорджи), эпилепсию, судорожные припадки, эпилептический статус, судороги у детей, глиому, глиобластому, анапластическую астроцитому, болезнь Паркинсона, болезнь Хантингтона, шизофрению, тревожность, комплекс туберозного склероза и ассоциированные с ним проблемы поведения, синдром Драве. В моделях на животных, ингибирование NKCC1 посредством утвержденного FDA диуретика буметанида восстанавливает нарушения поведения. Примечательно, что буметанид восстанавливал GABAAR-регулируемые токи Cl^-, синаптическую пластичность и гиппокамп-зависимую память в модели взрослого синдрома Дауна на мышах. Следовательно, было показано, что ингибиторы NKCC1 обладают терапевтической активностью в отношении заболеваний, при которых дефектна GABA-эргическая передача сигналов.

Более того, в пяти независимых клинических исследованиях (включая клинические испытания II фазы) лечение буметанидом снижало показатели по оценочной шкале детского аутизма и эмоционального восприятия.

Тем не менее, буметанид обладает диуретическим эффектом, поскольку он также ингибирует специфичный для почек транспортер Cl^- NKCC2. Этот диуретический эффект порождает ионный дисбаланс и представляет серьезную угрозу для соблюдения режима приема лекарства в течение длительного лечения.

Заболевания, при которых было показано, что буметанид обладает благоприятным эффектом, включают в себя синдром Дауна, нейропатическую боль, инсульт, ишемию головного мозга, отек головного мозга, гидроцефалию, травматическое повреждение головного мозга, вызванное травмой головного мозга депрессивное поведение, нарушения аутического спектра (т.е., аутизм, синдромы ломкой Х-хромосомы, Ретта, Аспергера и Ди Джорджи), эпилепсию, судорожные припадки, эпилептический статус, судороги у детей, глиому, глиобластому, анапластическую астроцитому, болезнь Паркинсона, болезнь Хантингтона, шизофрению, тревожность, комплекс туберозного склероза и ассоциированные с ним проблемы поведения, синдром Драве.

В документе WO 2010/085352 описано использование модуляторов NKCC1 с целью улучшения когнитивной функции у нуждающихся в этом субъектов. В нем также утверждается, что указанные соединения могут использоваться для продолжительного лечения, благодаря сниженному нежелательному диуретическому эффекту. Описано, что наиболее перспективное соединение, 3-аминосульфонил-5-N,N-дибутиламино-4-фенокси-бензойная кислота, взаимодействует с GABAA рецептором, вследствие чего она не является ингибитором ни NKCC1, ни NKCC2, и потенциально существует риск нежелательных побочных эффектов, включая приступы эпилепсии.

В документе WO 2014/076235 описаны соединения для лечения синдрома ломкой Х-хромосомы. Согласно предпочтительному варианту осуществления, модулятор хлорида представляет собой селективный ингибитор NKCC1.

В документе "Novel NKCC1 Inhibitors R₆duces Stroke Damages"; Stroke, April, 2019, Huang et al. исследована эффективность STS66, 3-(бутиламино)-2-феноксибензол-сульфонамида. Это соединение является близким аналогом и производным буметанида, а потому действует в качестве ингибитора NKCC1.

В документе 'The search for NKCC1-selective drugs for the treatment of epilepsy: Structure-function relationship of bumetanide and various bumetanide derivatives in inhibiting the human cation-chloride cotransporter NKCC1A."Epilepsy & Behavior 59 (2016) 42-49, Lykke и соавт. исследованы производные буметанида в качестве селективных ингибиторов NKCC1. Тестируемые производные были выбраны из ~5000 производных 3-амино-5-сульфамоилбензойной кислоты, которые были синтезированы в 1960-х и 1970-х годах в Leo Pharma Peter W. Feit и его коллегами в процессе скрининга соединений с высокой диуретической эффективностью, что в конечном итоге привело к открытию буметанида. Согласно авторам, ни одно из соединений не продемонстрировало значимо более высокой селективности в отношении NKCC2/NKCC1. Авторами сделан вывод, что будет сложно, если не невозможно, разработать производные буметанида с более высокой селективностью в отношении NKCC1/NKCC2, чем у буметанида.

Таким образом, существует потребность в альтернативных терапевтических подходах к синдрому Дауна и другим нарушениям головного мозга, делающим возможными восстановление дефектной GABA-эргической передачи сигналов посредством ингибирования NKCC1.

Буметанид сам по себе не представляет собой перспективную стратегию лечения, и то же самое справедливо и для описанных аналогов. По-прежнему все еще существует настоятельная потребность в альтернативных соединениях.

Краткое раскрытие настоящего изобретения

Настоящее изобретение относится к новым производным 2-аминобензол-сульфонамида, которые ингибируют котранспортер натрия, калия и хлорида (в настоящем документе также называемый NKCC1). Фармакологическое ингибирование NKCC1 может быть использовано для лечения целого ряда патофизиологических состояний, в особенности нарушений головного мозга. Модулирование NKCC1 приводит к корректировке GABA-эргической передачи сигналов, а следовательно ингибиторы NKCC1 обладают благоприятным эффектом при заболеваниях, характеризующихся дефектным соотношением экспрессии NKCC1/KCC2 и/или дефектной GABA-эргической передачей сигналов посредством Cl^--проницаемых GABAA рецепторов. Целью настоящего изобретения является лечение заболеваний с участием GABAA и/или с вовлечением гомеостаза хлоридов.

Задача настоящего изобретения

Согласно первой задаче, настоящее изобретение относится к новым производным 2-аминобензолсульфонамида, способным ингибировать котранспортер натрия, калия и хлорида (также кратко называемый NKCC1).

В настоящем изобретении также раскрыт способ получения раскрытых соединений.

Согласно второй задаче, раскрыто использование соединений согласно настоящему изобретению для лечения или профилактики патологических состояний, ассоциированных с деполяризацией GABA-эргической передачи сигналов.

Фармацевтические препараты, содержащие соединения согласно настоящему изобретению, представляют собой третью задачу настоящего изобретения.

Согласно четвертой задаче, раскрыт способ лечения или профилактики патологических состояний, ассоциированных с деполяризацией GABA-эргической передачи сигналов, включающий в себя введение соединений согласно настоящему изобретению нуждающемуся в этом пациенту.

Краткое описание чертежей

Фигура 1: Тестирование ингибиторов NKCC1 in vitro в кинетическом анализе хлорида, а) Примеры кривых, полученных в кинетическом анализе хлорида на клетках HEK293, трансфицированных YFP (имитирующий конструкт) или YFP и NKCC1. Стрелка указывает на добавление NaCl (конечная концентрация 74 мМ), использованного для индукцииметода анализа потоков. b) Количественное определение эффекта буметанида (10 мкМ и 100 мкМ) или фуросемида (10 мкМ и 100 мкМ) в кинетическом анализе хлорида на клетках HEK293, трансфицированных имитирующим конструктом или NKCC1. Данные представляют собой (среднее значение ± SEM), полученные в 5 независимых экспериментах, с) Количественное определение эффекта буметанида, фуросемида и 2 выбранных соединений (3.8, 3.17) в кинетическом анализе хлорида на клетках HEK293, трансфицированных NKCC1. Данные представляют собой (среднее значение ± SEM), полученные в 5 независимых экспериментах и представлены в % относительно контролей. *Р<0,05, **Р<0,01, ***Р<0,001 дисперсионный анализ по критерию Краскела-Уоллиса (ретроспективный анализ по критерию Дьюнна); ^###Р<0,001 непарный двусторонний t-критерий Стьюдента.

Фигура 2: Тестирование ингибиторов NKCC1 in vitro в кинетическом анализе кальция, а) Примеры кривых уровней флуоресценции после добавления GABA (100 мкМ) и KCl (90 мМ), использованного в качестве триггера вхождения кальция в клетки культуры первичных нейронов, обработанных после 3 суток инкубации в культуре (3 суток in vitro) несущей средой, буметанидом, фуросемидом и соединениями 3.8, 3.13 и 3.17 в кинетическом анализе кальция. Ь) Количественное определение среднего роста флуоресценции после добавления GABA, нормированное к росту после добавления KCl к нейронам, обработанным буметанидом, фуросемидом и 3 иллюстративными соединениями (3.8, 3.13, 3.17) (10 мкМ, 100 мкМ). Данные представляют собой (среднее значение ± SEM), полученные в 5 независимых экспериментах и представлены в % относительно контроля. *Р<0,05, **Р<0,01, ***Р<0,001 дисперсионный анализ по критерию Краскела-Уоллиса (ретроспективный анализ по критерию Дьюнна).

Фигура 3: Оценка на подобие лекарству выбранного соединения, соединения 3.17. а) Физико-химические свойства буметанида и соединения 3.17 согласно анализа методом LC-MS. b) Сравнение объема мочи у мышей дикого типа (C57BI/6N) спустя 2 часа после обработки буметанидом (0,2 мг/кг) и соединением 3.17 (0,2 мг/кг). с) Оценка объема мочи у мышей Ts65Dn в модели синдрома Дауна и у однопометных особей дикого типа спустя 2 часа после обработки соединением 3.17 (0,2 мг/кг). Число в скобках: число проанализированных животных. Данные представляют собой (среднее значение ± SEM) и представлены в % относительно контроля с несущей средой.

Фигура 4: Оценка эффективности выбранного ингибитора NKCC1 in vivo на мышах Ts65Dn. (а) Количественное определение индекса различения у мышей, обработанных несущей средой (дикий тип, n=14, Ts65Dn, n=10) или соединением 3.17 (дикий тип, n=14, Ts65Dn, n=11) ***Р<0,001; двухфакторный дисперсионный анализ, ретроспективный анализ по критерию Тьюки. (b) Количественное определение индекса различения у мышей, обработанных несущей средой (дикий тип, n=14, Ts65Dn, n=10) или соединением 3.17 (дикий тип, n=14, Ts65Dn, n=11) *Р<0,05, **Р<0,01 двухфакторный дисперсионный анализ, ретроспективный анализ по критерию Тьюки. (с) Количественное определение правильного выбора у мышей, обработанных несущей средой (дикий тип, n=14, Ts65Dn, n=10) или соединением 3.17 (дикий тип, n=14, Ts65Dn, n=11) ***Р<0,001; двухфакторный дисперсионный анализ, ретроспективный анализ по критерию Тьюки. (d) Количественное определение эффекта замирания у мышей, обработанных несущей средой (дикий тип, n=14, Ts65Dn, n=10) или соединением 3.17 (дикий тип, n=14, Ts65Dn, n=11) *Р<0,05, **Р<0,01 двухфакторный дисперсионный анализ, ретроспективный анализ по критерию Тьюки.

Фигуры 5-16: отражены схемы 1-15 методик синтеза для получения соединений согласно настоящему изобретению.

Фигура 17: отражены результаты тестирования in vitro селективных ингибиторов NKCC1 в методе анализа с таллием на трансфицированных NKCC2 клетках HEK.

Фигуры 18а - 18d: отражены результаты оценки эффективности соединения 3.17 in vivo в VPA-индуцированной модели аутизма на мышах; (а) Левая панель, количественное определение индекса контактности у мышей, обработанных несущей средой (дикий тип, n=15, VPA, n=10) или соединением 3.17 (дикий тип, n=9, VPA, n=12); двухфакторный дисперсионный анализ рангов, ретроспективный анализ по критерию Тьюки, **Р<0,01. Правая панель, количественное определение индекса новизны общения у мышей, обработанных несущей средой (дикий тип, n=15, VPA, n=10) или соединением 3.17 (дикий тип, n=9, VPA, n=12); двухфакторный дисперсионный анализ, ретроспективный анализ по критерию Тьюки, *Р<0,05, **Р<0,01. (b) Количественное определение времени общения у мышей, обработанных несущей средой (дикий тип, n=15, VPA, n=10) или соединением 3.17 (дикий тип, n=10, VPA, n=11); двухфакторный дисперсионный анализ, ретроспективный анализ по критерию Тьюки, **Р<0,01. (с) Количественное определение числа шариков, закопанных мышами, обработанными несущей средой (дикий тип, n=17, VPA, n=17) или соединением 3.17 (дикий тип, n=13, VPA, n=13); двухфакторный дисперсионный анализ, ретроспективный анализ по критерию Тьюки, *Р<0,05, **Р<0,01. (d) Количественное определение времени груминга для мышей, обработанных несущей средой (дикий тип, n=20, VPA, n=17) или соединением 3.17 (дикий тип, n=13, VPA, n=13); двухфакторный дисперсионный анализ рангов, ретроспективный анализ по критерию Тьюки, *Р<0,05, **Р<0,01.

Подробное раскрытие настоящего изобретения

Настоящее изобретение относится к производным 2-аминобензолсульфонамидов в соответствии с формулой Ia, Ib и Ic, которые являются ингибиторами NKCC1 и решают вопрос потребности в соединениях, альтернативных буметаниду, и в частности к соединениям, способным восстанавливать передачу сигналов через GABAA посредством ингибирования NKCC1.

Согласно одному аспекту, настоящее изобретение относится к соединению, характеризующемуся формулой 1а, или его фармацевтически приемлемой соли или их стереоизомерным формам, или их отдельным геометрическим изомерам, энантиомерам, диастереоизомерам, таутомерам, цвиттерионам и фармацевтически приемлемым солям:

где:

R₁ и R₂ независимо представляют собой

• водород;

• неразветвленный или разветвленный С_1-10алкил, необязательно содержащий одну или несколько ненасыщенных связей и необязательно замещенный группами, выбранными из группы, состоящей из атомов галогена, -ОН, -С_3-8циклоалкила, неароматических гетероциклов, ароматических гетероциклов, -C_1-6алкоксиалкила, -NH₂, -NO₂, амидов, карбоновых кислот, кетонов, простых эфиров, сложных эфиров, альдегидов или сульфонамидов;

• неразветвленный или разветвленный, замещенный или незамещенный С_3-8циклоалкил;

• неразветвленный или разветвленный, замещенный или незамещенный С_4-10циклоалкилалкил;

• С_3-8гетероциклоалкил;

• необязательно замещенный фенил;

• или R₁ и R₂ вместе с атомом азота, к которому они присоединены, формируют замещенный или незамещенный насыщенный гетероцикл;

R₃ и R₄ независимо представляют собой водород;

• неразветвленный или разветвленный С_1-10алкил, необязательно содержащий одну или несколько ненасыщенных связей и необязательно замещенный группами, выбранными из группы, состоящей из атомов галогена, -ОН, -С_3-8циклоалкила, неароматических гетероциклов, ароматических гетероциклов, -C_1-6алкоксиалкила, -NH₂, -NO₂, амидов, карбоновых кислот, кетонов, простых эфиров, сложных эфиров, альдегидов или сульфонамидов;

• С_1-10циклоалкил;

• С_4-10циклоалкилалкил;

• С_2-8галогеналкил;

• неразветвленный или разветвленный С_2-8гетероалкил, замещенный или незамещенный;

• необязательно замещенный фенил;

при условии, что по меньшей мере один из R₃ и R₄ отличен от водорода;

• или R₃ и R₄ вместе с атомом азота, к которому они присоединены, формируют замещенный или незамещенный насыщенный гетероцикл;

R₅ представляет собой

• водород;

• галоген;

• гидроксил;

• -O-С_1-10алкил;

• -О-С_3-10циклоалкил;

• -О-С_3-8гетероциклоалкил;

• С_1-10алкоксиалкил;

• С_3-10алкоксициклоалкил;

• необязательно замещенный феноксил;

• -NH₂;

• C_1-8алкиламин;

• С₂-С₁₆диалкиламин;

• анилин;

• -SH;

• С_1-8алкилтиоэфир;

• тиофенол;

• -NO₂;

R₆ представляет собой

• нитро;

• нитрил;

• -СН₂ОН;

• карбоновую кислоту;

• С_1-4алкиловый сложный эфир;

• С_2-8гетероалкиловый сложный эфир;

• С_3-6циклоалкиловый сложный эфир;

• фениловый сложный эфир;

• карбоксамид;

• циклический амид;

• тетразол;

при условии, что если R₆ представляет собой нитро, то одновременно удовлетворяются следующие условия:

R₁ отличен от Н,

R₂ отличен от неразветвленного или разветвленного, незамещенного С_2-6алкила,

R₃ отличен от Н,

R₄ отличен от неразветвленного незамещенного С_1-3алкила,

R₅ отличен от Н;

и при условии, что соединение формулы 1а не является одним из следующего:

Согласно одному варианту осуществления:

R₁ и R₂ независимо представляют собой

• водород;

• неразветвленный или разветвленный С_1-10алкил, необязательно содержащий одну или несколько ненасыщенных связей и необязательно замещенный группами, выбранными из группы, состоящей из атомов галогена, -ОН, -С_3-8циклоалкила, неароматических гетероциклов, ароматических гетероциклов, -C_1-6алкоксиалкила, -NH₂, -NO₂, амидов, карбоновых кислот, кетонов, простых эфиров, сложных эфиров, альдегидов или сульфонамидов;

• неразветвленный или разветвленный, замещенный или незамещенный C_3-8циклоалкил;

• неразветвленный или разветвленный, замещенный или незамещенный С_4-10циклоалкилалкил;

• необязательно замещенный фенил;

• или R₁ и R₂ вместе с атомом азота, к которому они присоединены, формируют замещенный или незамещенный насыщенный гетероцикл;

R₃ и R₄ независимо представляют собой

• водород;

• неразветвленный или разветвленный С_1-10алкил, необязательно содержащий одну или несколько ненасыщенных связей и необязательно замещенный группами, выбранными из группы, состоящей из атомов галогена, -ОН, -С_3-8циклоалкила, неароматических гетероциклов, ароматических гетероциклов, -C_1-6алкоксиалкила, -NH₂, -NO₂, амидов, карбоновых кислот, кетонов, простых эфиров, сложных эфиров, альдегидов или сульфонамидов;

• С_3-10циклоалкил;

• С_4-10циклоалкилалкил;

• C_2-8галогеналкил;

• неразветвленный или разветвленный С_2-8гетероалкил, замещенный или незамещенный;

• необязательно замещенный фенил;

при условии, что по меньшей мере один из R₃ и R₄ отличен от водорода;

• или R₃ и R₄ вместе с атомом азота, к которому они присоединены, формируют замещенный или незамещенный насыщенный гетероцикл;

R₅ представляет собой

• водород;

• галоген;

• гидроксил;

• С_1-10алкоксиалкил;

• С_3-10алкоксициклоалкил;

• необязательно замещенный феноксил;

• -NH₂;

• C_1-8алкиламин;

• С₂-С₁₆диалкиламин;

• анилин;

•-SH;

• C_1-8алкилтиоэфир;

• тиофенол;

• -NO₂;

R₆ представляет собой

• нитро;

• нитрил;

• -СН₂ОН;

• карбоновую кислоту;

• С_1-4алкиловый сложный эфир;

• С_2-8гетероалкиловый сложный эфир;

• С_3-6циклоалкиловый сложный эфир;

• фениловый сложный эфир;

• карбоксамид;

• циклический амид;

• тетразол.

Согласно предпочтительному варианту осуществления, R₁ и R₂ независимо представляют собой Н, -СН₃, циклопентан, циклогексан, 4-тетрагидропиран, или вместе с атомом азота, к которому они присоединены, представляют собой морфолин, пиперидин, необязательно замещенный по меньшей мере одним атомом галогена, пирролидин.

Еще более предпочтительно, R₁ и R₂ независимо представляют собой -СН₃, -С₂Н₅, -С₃Н₇, -С₄Н₉. Согласно предпочтительному варианту осуществления, R₁ и R₂ оба представляют собой -СН₃.

Согласно предпочтительному варианту осуществления, R₃ и R₄ независимо представляют собой водород, неразветвленный или разветвленный -C_1-валкил, необязательно замещенный по меньшей мере одним C_1-6алкоксиалкилом, -С_2-8галогеналкил, или R₃ и R₄ вместе с атомом азота, к которому они присоединены, представляют собой замещенный или незамещенный гетероцикл. Еще более предпочтительно, R₃ и R₄ независимо представляют собой Н, -С₄Н₉, -С₆Н₁₃, -C₈H₁₇, -С₂Н₄С(СН₃)₃, -C₇H₁₄CF₃, -C₃H₆CF₃, -C₅H₁₀CF₃, -С₂Н₄ОСН₃, -С₄Н₃ОСН₃, -С₆Н₁₂ОСН₃, или вместе с атомом азота, к которому они присоединены, представляют собой пиперазин, предпочтительно замещенный пиперазин, еще более предпочтительно -N(C₄H₈CF₃)пиперазин.

Еще более предпочтительно, R₃ и R₄ независимо представляют собой -СН₃, -С₂Н₅, -С₃Н₇, -С₄Н₉, -С₅Н₁₁, -С₆Н₁₃, -С₇Н₁₅, -C₈H₁₇ или -C_1-8галогеналкил. Согласно предпочтительному варианту осуществления, R₃ представляет собой Н, и R₄ представляет собой -C₇H₁₄CF₃.

В контексте настоящего изобретения, один или несколько атомов водорода подробно описанных выше соединений могут быть замещены дейтерием.

Согласно предпочтительному варианту осуществления, R₅ представляет собой водород, галоген или гидроксил, более предпочтительно представляет собой водород.

Согласно предпочтительному варианту осуществления, R₆ представляет собой карбоновую кислоту, С_1-4алкиловый сложный эфир, нитро или нитрил, более предпочтительно представляет собой карбоновую кислоту.

Согласно варианту осуществления, заявленное соединение представляет собой соединение 3.17, характеризующееся приведенной ниже формулой.

Определения

Если в настоящем описании не указано иное, то следует понимать, что использованные в настоящем документе термины характеризуются следующими значениями.

Используемый в настоящем документе термин «алкил», в качестве отдельного заместителя или как часть большего заместителя, относится к насыщенным, одновалентным или двухвалентным углеводородным фрагментам, содержащим неразветвленные или разветвленные фрагменты или их комбинации и содержащим от 1 до 10, предпочтительно от 1 до 8 атомов углерода, и еще более предпочтительно от 1 до 4 атомов углерода. Подходящие примеры включают в себя метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, втор-бутил, трет-бутил, н-пентил, изопентил, 2-метилбутил, неопентил, 1-этилпропил, н-гексил, изогексил, 4-метилпентил, 3-метилпентил, 2-метилпентил, 1-метилпентил, 3,3-диметилбутил, 2,2-диметилбутил, 1,1-диметилбутил, 1,2-диметилбутил, 1,3-диметилбутил, 2,3-диметилбутил, 2-этилбутил, 1-метил-2-метилпропил, и т.п. Атомы водорода на алкильных группах могут быть заменены группами, включающими без ограничения: дейтерий, атомы галогена, -ОН, -C_3-8циклоалкил, неароматические гетероциклы, ароматические гетероциклы, -C_1-6алкоксиалкил, -NH₂, -NO₂, амиды, карбоновые кислоты, кетоны, простые эфиры, сложные эфиры, альдегиды или сульфонамиды.

В контексте настоящего изобретения, алкильный заместитель может содержать одну или несколько ненасыщенных связей.

Используемый в настоящем документе термин «циклоалкил» относится к одновалентному или двухвалентному кольцу, содержащему от 3 до 10 атомов углерода или от 3 до 8 атомов углерода, полученному из насыщенного циклического углеводорода. циклоалкильные группы могут быть моноциклическими или полициклическими. циклоалкил может быть замещен группами, включающими без ограничения: атомы галогена, -ОН, -C_3-8циклоалкил, неароматические гетероциклы, ароматические гетероциклы, -C_1-6алкоксиалкил, -NH₂, -NO₂, амиды, простые эфиры, сложные эфиры, карбоновые кислоты, альдегиды, кетоны, сульфонамиды.

Примеры циклоалкилалкильных групп включают в себя циклобутилэтильную группу, циклобутилпропильную группу, циклопентилметильную группу, циклопентилэтильную группу, циклопентилпропильную группу, циклогексилметильную группу, циклогексилэтильную группу, циклогексилпропильную группу, циклогептилметильную группу и циклогептилэтильную группу.

Используемый в настоящем документе термин «галогеналкил» относится к алкильной группе, частично или полностью замещенной атомами галогена, которые могут быть одинаковыми или разными. Примеры «галогеноалкила» включают в себя -CH₂CF₃ и -CCl₂CF₃.

В контексте настоящего изобретения, «алкокси» включает в себя, например, упомянутую выше алкил-О-группу, и например могут быть упомянуты метокси, этокси, н-пропокси, изопропокси, н-бутокси и т.п., и «алкоксиалкил» представляет собой, например, метоксиметил и т.п., и «аминоалкил» представляет собой, например, 2-аминоэтил и т.п.

В контексте настоящего изобретения, «галоген» относится к элементу группы галогенов, которые представляют собой, например, фтор, хлор, бром или йод.

Используемый в настоящем документе термин «гетероцикл» относится к 3-8-членному кольцу, которое может быть ароматическим или неароматическим, содержащему по меньшей мере один гетероатом, выбранный из О или N или S, или из комбинаций по меньшей мере двух из них, прерывающими структуру карбоциклического кольца. Гетероциклическое кольцо может содержать С=O; гетероатом S может быть окислен. Гетероциклы могут быть моноциклическими или полициклическими. Гетероциклические кольцевые фрагменты могут быть замещены группами, включающими без ограничения: атомы галогена, -ОН, -С_1-10алкил, -С_3-8циклоалкил, неароматические гетероциклы, ароматические гетероциклы, -C_1-6алкоксиалкил, -NH₂, -NO₂, амиды, простые эфиры, сложные эфиры, альдегиды, карбоновые кислоты, кетоны, сульфонамиды. Предпочтительные гетероциклы представляют собой азиридин, азетидин, пирролидин, имидазолин, пиразолин, пиперидин, пиперазин, морфолин, тиоморфолин, азепан, азокан.

Используемый в настоящем документе термин «замещенный гетероцикл» относится к гетероциклам, необязательно замещенным атомами галогена, -С_1-5алкилом, -С_1-5алкенилом, -С_1-5галогеналкилом.

Используемый в настоящем документе термин «алкенил» относится к одновалентному или двухвалентному углеводородному радикалу, содержащему от 2 до 6 атомов углерода, полученному из насыщенного алкила, содержащему по меньшей мере одну двойную связь. -C_1-6алкенил может находиться в Е- или Z-конфигурации. Алкенильные группы могут быть замещены -C_1-6алкилом.

Используемые в настоящем документе термины «замещенный фенил» или «замещенный феноксил» относятся к фенильному радикалу, замещенному заместителем, выбранным из группы, состоящей из C_1-8алкила, предпочтительно метила, С_1-8алкокси, предпочтительно метокси, гидроксила, трифторметила, нитро, амина, галогена.

Термин «фармацевтически приемлемые соли» относится к солям или комплексам, которые сохраняют требуемую биологическую активность указанных выше соединений и обладают минимальными нежелательными токсикологическими эффектами или не имеют их. «Фармацевтически приемлемые соли» согласно настоящему изобретению включают в себя терапевтически активные нетоксичные основные или кислые солевые формы, которые способны формировать соединения формулы I.

Соединения формулы Ia и их соли могут находиться в форме сольвата, который включен в объем настоящего изобретения. Такие сольваты включают в себя, например, гидраты, алкоголяты, и т.п.

Применительно к настоящему изобретению предполагается, что ссылка на соединение или соединения охватывает такое соединение в любой из его возможных изомерных форм и их смеси, если только на конкретную изомерную форму не приведена более определенная ссылка.

Соединения согласно настоящему изобретению могут существовать в различных полиморфных формах; предполагается, что такие формы, даже не будучи указанными в явном виде в представленной выше формуле, охватываются объемом настоящего изобретения.

Согласно варианту осуществления, соединения формулы Ia выбраны из группы, состоящей из:

1.6 2-(бутиламино)-5-нитробензолсульфонамида,

1.7 2-(гексиламино)-5-нитробензолсульфонамида,

1.8 5-нитро-2-(октиламино)бензолсульфонамида,

1.9 2-(3,3-диметилбутиламино)-5-нитробензолсульфонамида,

1.10 2-(бутиламино)-N-метил-5-нитробензолсульфонамида,

1.11 2- (гексиламино)-N-метил-5-нитробензолсульфонамида,

1.12 N-метил-5-нитро-2-(октиламино)бензолсульфонамида,

1.13 2-(3,3-диметилбутиламино)-N-метил-5-нитробензолсульфонамида,

1.14 2-(бутиламино)-N,N-диметил-5-нитробензолсульфонамида,

1.15 2-(гексиламино)-N,N-диметил-5-нитробензолсульфонамида,

1.16 N,N-диметил-5-нитро-2-(октиламино)бензолсульфонамида,

1.17 2- (3,3-диметилбутиламино)-N,N-диметил-5-нитробензолсульфонамида,

2.2 4-(бутиламино)-2-хлор-5-сульфамоилбензойной кислоты,

2.3 2-хлор-4-(гексиламино)-5-сульфамоилбензойной кислоты,

2.4 2-хлор-4-(октиламино)-5-сульфамоилбензойной кислоты,

2.5 2-хлор-4-(3,3-диметилбутиламино)-5-сульфамоилбензойной кислоты,

2.6 4-(бутиламино)-3-сульфамоилбензойной кислоты,

2.7 4-(гексиламино)-3-сульфамоилбензойной кислоты,

2.8 4-(октиламино)-3-сульфамоилбензойной кислоты,

2.9 4-(3,3-диметилбутиламино)-3-сульфамоилбензойной кислоты,

3.6 4-(бутиламино)-3-(метилсульфамоил)бензойной кислоты,

3.7 4-(гексиламино)-3-(метилсульфамоил)бензойной кислоты,

3.8 3-(метилсульфамоил)-4-(октиламино)бензойной кислоты,

3.9 4-(3,3-диметилбутиламино)-3-(метилсульфамоил)бензойной кислоты,

3.10 3-(метилсульфамоил)-4-(8,8,8-трифтороктиламино)бензойной кислоты,

3.11 4-(бутиламино)-3-(диметилсульфамоил)бензойной кислоты,

3.12 3-(диметилсульфамоил)-4-(гексиламино)бензойной кислоты,

3.13 3-(диметилсульфамоил)-4-(октиламино)бензойной кислоты,

3.14 4-(3,3-диметилбутиламино)-3-(диметилсульфамоил)бензойной кислоты,

3.15 3-(диметилсульфамоил)-4-(4,4,4-трифторбутиламино)бензойной кислоты,

3.16 3-(диметилсульфамоил)-4-(6,6,6-трифторгексиламино)бензойной кислоты,

3.17 3-(диметилсульфамоил)-4-(8,8,8-трифтороктиламино)бензойной кислоты,

3.18 3-(диметилсульфамоил)-4-(2-метоксиэтиламино)бензойной кислоты,

3.19 3-(диметилсульфамоил)-4-(4-метоксибутиламино)бензойной кислоты,

3.20 3-(диметилсульфамоил)-4-(б-метоксигексиламино)бензойной кислоты,

3.21 3-(циклопентилсульфамоил)-4-(8,8,8-трифтороктиламино)бензойной кислоты,

3.22 3-(циклогексилсульфамоил)-4-(8,8,8-трифтороктиламино)бензойной кислоты,

5.5 3-пиррол идин-1-илсульфонил-4-(8,8,8-трифтороктиламино)бензойной кислоты,

5.6 3-(1-пиперидилсульфонил)-4-(8,8,8-трифтороктиламино)бензойной кислоты,

5.7 3-морфолиносульфонил-4-(8,8,8-трифтороктиламино)бензойной кислоты,

6.3 5-циано-N,N-диметил-2-(8,8,8-трифтороктиламино)бензолсульфонамида,

7.4 2-гидрокси-5-сульфамоил-4-(8,8,8-трифтороктиламино)бензойной кислоты,

9.1 3- (диметилсульфамоил)-4-[4-(5,5,5-трифторпентил)пиперазин-1-ил]бензойной кислоты,

10.1 N,N-диметил-5-(1Н-тетразол-5-ил)-2-(8,8,8-трифтороктиламино)бензолсульфонамида,

12.3 метил-5-(N,N-диметилсульфамоил)-2-метокси-4-((8,8,8-трифтороктил)амино)бензоата,

12.4 метил-5-(N,N-диметилсульфамоил)-2-гидрокси-4-((8,8,8-трифтороктил)амино)бензоата,

12.5 метил-5-(N,N-диметилсульфамоил)-2-этокси-4-((8,8,8-трифтороктил)амино)бензоата,

12.6 метил-2-(циклопентилокси)-5-(N,N-диметилсульфамоил)-4-((8,8,8-трифтороктил)амино)бензоата,

12.7 5-(N,N-диметилсульфамоил)-2-этокси-4-((8,8,8-трифтороктил)амино)бензойной кислоты,

12.8 2-(циклопентилокси)-5-(N,N-диметилсульфамоил)-4-((8,8,8-трифтороктил)амино)бензойной кислоты,

13.1 5-(N,N-диметилсульфамоил)-2-метокси-4-((8,8,8-трифтороктил)амино)бензойной кислоты,

14.3 3-морфолиносульфонил-4-((8,8,8-трифтороктил)амино)бензойной кислоты,

14.4 3-((4,4-дифторпиперидин-1-ил)сульфонил)-4-((8,8,8-трифтороктил)амино)бензойной кислоты,

15.1 3-(диметилсульфамоил)-4-(гепт-6-ениламино)бензойной кислоты,

15.2 метил-3-(N,N-диметилсульфамоил)-4-(гепт-6-ен-1-иламино)бензоата,

15.3 метил-4-((8-бром-8,8-дифтороктил)амино)-3-(N,N-диметилсульфамоил)бензоата,

15.4 4-[(8-бром-8,8-дифтороктил)амино]-3-(диметилсульфамоил)бензойной кислоты,

16.1 5-(диметилсульфамоил)-2-изопропокси-4-(8,8,8-трифтороктиламино)бензойной кислоты,

16.2 2-(циклогексокси)-5-(диметилсульфамоил)-4-(8,8,8-трифтороктиламино)бензойной кислоты,

16.3 5-(диметилсульфамоил)-2-тетрагидропиран-4-илокси-4-(8,8,8-трифтороктиламино)бензойной кислоты,

16.4 2-(циклобутокси)-5-(диметилсульфамоил)-4-(8,8,8-трифтороктиламино)бензойной кислоты,

16.5 5-(диметилсульфамоил)-2-(оксетан-3-илокси)-4-(8,8,8-трифтороктиламино)бензойной кислоты,

16.6 5-(диметилсульфамоил)-2-(4-пиперидилокси)-4-(8,8,8-трифтороктиламино)бензойной кислоты,

16.7 5-(диметилсульфамоил)-2-фенокси-4-(8,8,8-трифтороктиламино)бензойной кислоты.

Предпочтительно, соединения формулы 1а выбраны из группы, состоящей из:

1.7 2-(гексиламино)-5-нитробензолсульфонамида,

1.17 2-(3,3-диметилбутиламино)-N,N-диметил-5-нитробензолсульфонамида,

2.2 4-(бутиламино)-2-хлор-5-сульфамоилбензойной кислоты,

2.6 4-(бутиламино)-3-сульфамоилбензойной кислоты,

2.7 4-(гексиламино)-3-сульфамоилбензойной кислоты,

2.8 4-(октиламино)-3-сульфамоилбензойной кислоты,

2.9 4-(3,3-диметилбутиламино)-3-сульфамоилбензойной кислоты,

3.6 4-(бутиламино)-3-(метилсульфамоил)бензойной кислоты,

3.7 4-(гексиламино)-3-(метилсульфамоил)бензойной кислоты,

3.8 3-(метилсульфамоил)-4-(октиламино)бензойной кислоты,

3.9 4- (3,3-диметилбутиламино)-3-(метилсульфамоил)бензой ной кислоты,

3.10 3-(метилсульфамоил)-4-(8,8,8-трифтороктиламино)бензойной кислоты,

3.11 4-(бутиламино)-3-(диметилсульфамоил)бензойной кислоты,

3.12 3-(диметилсульфамоил)-4-(гексиламино)бензойной кислоты,

3.13 3-(диметилсульфамоил)-4-(октиламино)бензойной кислоты,

3.14 4-(3,3-диметилбутиламино)-3-(диметилсульфамоил)бензойной кислоты,

3.17 3-(диметилсульфамоил)-4-(8,8,8-трифтороктиламино)бензойной кислоты,

3.20 3-(диметилсульфамоил)-4-(6-метоксигексиламино)бензойной кислоты,

3.21 3-(циклопентилсульфамоил)-4-(8,8,8-трифтороктиламино)бензойной кислоты,

3.22 3-(циклогексилсульфамоил)-4-(8,8,8-трифтороктиламино)бензойной кислоты,

5.5 3-пиррол идин-1-илсульфонил-4-(8,8,8-трифтороктиламино)бензойной кислоты,

5.6 3-(1-пиперидилсульфонил)-4-(8,8,8-трифтороктиламино)бензойной кислоты,

5.7 3-морфолиносульфонил-4-(8,8,8-трифтороктиламино)бензойной кислоты,

13.1 5-(N,N-диметилсульфамоил)-2-метокси-4-((8,8,8-трифтороктил)амино)бензойной кислоты,

14.4 3-((4,4-дифторпиперидин-1-ил)сульфонил)-4-((8,8,8-трифтороктил)амино)бензойной кислоты,

15.1 3-(диметилсульфамоил)-4-(гепт-6-ениламино)бензойной кислоты.

Согласно дополнительному варианту осуществления, соединения формулы Ia выбраны из группы, состоящей из:

1.7 2-(гексиламино)-5-нитробензолсульфонамида,

1.15 2-(гексиламино)-N,N-диметил-5-нитробензолсульфонамида,

2.2 4-(бутиламино)-2-хлор-5-сульфамоилбензойной кислоты,

2.6 4-(бутиламино)-3-сульфамоилбензойной кислоты,

2.7 4-(гексиламино)-3-сульфамоилбензойной кислоты,

2.8 4-(октиламино)-3-сульфамоилбензойной кислоты,

3.8 3-(метилсульфамоил)-4-(октиламино)бензойной кислоты,

3.13 3-(диметилсульфамоил)-4-(октиламино)бензойной кислоты,

3.14 4-(3,3-диметилбутиламино)-3-(диметилсульфамоил)бензойной кислоты и

3.17 3-(диметилсульфамоил)-4-(8,8,8-трифтороктиламино)бензойной кислоты.

Согласно второму аспекту настоящего изобретения, оно относится к соединению формулы Ib или его фармацевтически приемлемой соли или их стереоизомерным формам, или их отдельным геометрическим изомерам, энантиомерам, диастереоизомерам, таутомерам, цвиттерионам и фармацевтически приемлемым солям:

где:

R₁ и R₂ независимо представляют собой

• водород;

• неразветвленный или разветвленный, незамещенный или замещенный C_1-10алкил, необязательно содержащий одну или несколько ненасыщенных связей;

• неразветвленный или разветвленный, замещенный или незамещенный С_3-8циклоалкил;

• неразветвленный или разветвленный, замещенный или незамещенный С_4-10циклоалкилалкил;

• С_3-8гетероциклоалкил;

• необязательно замещенный фенил;

• или R₁ и R₂ вместе с атомом азота, к которому они присоединены, формируют замещенный или незамещенный насыщенный гетероцикл;

R₃ и R₄ независимо представляют собой водород;

• незамещенный или замещенный C_1-10алкил, необязательно содержащий одну или несколько ненасыщенных связей;

• С_3-10циклоалкил;

• С_4-10циклоалкилалкил;

• С₂-₈галогеналкил;

• неразветвленный или разветвленный С_2-8гетероалкил, замещенный или незамещенный;

• необязательно замещенный фенил;

при условии, что по меньшей мере один из R₃ и R₄ отличен от водорода;

• или R₃ и R₄ вместе с атомом азота, к которому они присоединены, формируют замещенный или незамещенный насыщенный гетероцикл;

R₅ представляет собой

• водород;

• галоген;

• гидроксил;

• -O-С_1-10алкил;

• -О-С_3-10циклоалкил;

• -О-С_3-8гетероциклоал кил;

• C_1-10алкоксиалкил;

• С_3-10алкоксициклоалкил;

• необязательно замещенный феноксил;

• -NH₂;

• C_1-8алкиламин;

• С₂-С₁₆диалкиламин;

• анилин;

• -SH;

• С_1-8алкилтиоэфир;

• тиофенол;

• -NO₂;

R₆ представляет собой

• нитро;

• нитрил;

• -СН₂ОН;

• карбоновую кислоту;

• С_1-4алкиловый сложный эфир;

• С_2-8гетероалкиловый сложный эфир;

• С_3-6циклоалкиловый сложный эфир;

• фениловый сложный эфир;

• карбоксамид;

• С_1-4алкиламид;

• С_2-8диалкиламид;

• циклоалкиламид;

• циклический амид;

• тетразол;

для применения в качестве лекарственного средства.

Согласно дополнительному варианту осуществления, настоящее изобретение относится к соединению формулы Ic или его фармацевтически приемлемой соли или их стереоизомерным формам, или их отдельным геометрическим изомерам, энантиомерам, диастереоизомерам, таутомерам, цвиттерионам и фармацевтически приемлемым солям:

где:

R₁ и R₂ независимо представляют собой водород;

• неразветвленный или разветвленный, незамещенный или замещенный C_1-10алкил, необязательно содержащий одну или несколько ненасыщенных связей;

• неразветвленный или разветвленный, замещенный или незамещенный С₃-вциклоалкил;

• неразветвленный или разветвленный, замещенный или незамещенный С_4-10циклоалкилалкил;

• необязательно замещенный фенил;

• или R₁ и R₂ вместе с атомом азота, к которому они присоединены, формируют замещенный или незамещенный насыщенный гетероцикл;

R₃ и R₄ независимо представляют собой водород;

• замещенный или незамещенный C_1-10алкил, необязательно содержащий одну или несколько ненасыщенных связей;

• С_3-10циклоалкил;

• С_4-10циклоалкилалкил;

• С_2-8галогеналкил;

• неразветвленный или разветвленный С₂-₈гетероалкил, замещенный или незамещенный;

• необязательно замещенный фенил;

при условии, что по меньшей мере один из R₃ и R₄ отличен от водорода;

• или R₃ и R₄ вместе с атомом азота, к которому они присоединены, формируют замещенный или незамещенный насыщенный гетероцикл;

R₅ представляет собой

• водород;

• галоген;

• гидроксил;

• C_1-10алкоксиалкил;

• С_3-10алкоксициклоалкил;

• необязательно замещенный феноксил;

• -NH₂;

• C_1-8алкиламин;

• С₂-С₁₆диалкиламин;

• анилин;

• -SH;

• C_1-8алкилтиоэфир;

• тиофенол;

• -NO₂;

R₆ представляет собой

• нитро;

• нитрил;

• -СН₂ОН;

• карбоновую кислоту;

• С_1-4алкиловый сложный эфир;

• С_2-8гетероалкиловый сложный эфир;

• С_3-6циклоалкиловый сложный эфир;

• фениловый сложный эфир;

• карбоксамид;

• С_1-4алкиламид;

• С_2-8диалкиламид;

• циклоалкиламид;

• циклический амид;

• тетразол;

для применения в качестве лекарственного средства.

Соединения формул Ib и Ic показаны для использования при лечении или профилактике состояний, при которых по-видимому присутствует компонент, ассоциированный с деполяризующей GABA-эргической передачей сигналов вследствие повышенного уровня экспрессии или функции NKCC1 или пониженного уровня экспрессии или функции КСС2.

Согласно варианту осуществления настоящего изобретения, предложены фармацевтические композиции, содержащие по меньшей мере одно соединение формул Ib или Ic в фармацевтически приемлемом носителе.

Согласно дополнительному варианту осуществления, предложены способы лечения нарушений, ассоциированных с деполяризующей GABA-эргической передачей сигналов вследствие повышенного уровня экспрессии или функции NKCC1 или пониженного уровня экспрессии или функции KCC2; такие способы могут быть осуществлены, например, путем введения нуждающемуся в этом субъекту фармацевтической композиции, содержащей терапевтически эффективное количество по меньшей мере одного соединения формул Ib или Ic.

Предпочтительно, что упомянутый способ продемонстрировалотсутствие побочного диуретического эффекта.

Указанные соединения применимы для лечения млекопитающих, включая людей.

Конкретное количество соединения, подлежащее введению, в каждом конкретном случае будет определяться лечащим врачом с учетом значимых обстоятельств, таких как тяжесть состояния, возраст и масса пациента, общее физическое состояние пациента, причина состояния и путь введения.

Кроме того, могут быть разработаны составы для обеспечения замедленного высвобождения активного соединения в течение заданного периода времени или для точного контроля количества лекарства, высвобождаемого в заданное время в течение курса терапии.

С учетом химической структуры соединений согласно настоящему изобретению, может быть приготовлен подходящий состав, позволяющий эффективному количеству лекарства проходить через гематоэнцефалический барьер, в качестве примера могут быть приготовлены наносоставы.

Поскольку у отдельных субъектов может быть представлен широкий диапазон различий по тяжести симптомов, и каждое лекарство имеет собственные уникальные терапевтические характеристики, определенный способ введения и используемая для каждого субъекта дозировка оставлены на усмотрение практикующего врача.

Было показано, что производные 2-аминобензолсульфонамида являются мощными ингибиторами транспортера NKCC1, показывая в клеточных методах анализа хороший процент ингибирования при 10 микромолярной и 100 микромолярной концентрации. В дополнение, соединения продемонстрировали впечатляющую активность в моделях синдрома Дауна у мышей (мыши Ts65Dn), восстанавливая в дозировке 0,2 мг/кг гиппокампзависимое когнитивное поведение. Примечательно, что при сравнении с животными, получавшими несущую среду, лечение указанными соединениями in vivo не давало статистически значимого диуретического эффекта в дозе 0,2 мг/кг у мышей C57Bl6N, мышей Ts65Dn и диких однопометных особей. Кроме того, указанные соединения продемонстрировали впечатляющую эффективность при восстановлении контактности в модели лекарственно-индуцированного аутизма у грызунов.

Согласно второму аспекту, настоящее изобретение относится к соединениям формулы Ib или Ic для использования при лечении заболеваний или нарушений, ассоциированных с деполяризующей GABA-эргической передачей сигналов вследствие повышенного уровня экспрессии или функции NKCC1 или пониженного уровня экспрессии или функции КСС2 (в сравнении с физиологическими или желательными). В частности, описанные в настоящем документе соединения предназначены для использования при лечении синдрома Дауна, нейропатической боли, инсульта, ишемии головного мозга, отека головного мозга, гидроцефалии, травматического повреждения головного мозга, вызванного травмой головного мозга депрессивного поведения, нарушения аутического спектра (т.е., аутизма, синдромов ломкой Х-хромосомы, Ретта, Аспергера и Ди Джорджи), эпилепсии, судорожных припадков, эпилептического статуса, синдрома Веста, глиомы, глиобластомы, анапластической астроцитомы, болезни Паркинсона, болезни Хантингтона, шизофрении, тревожности, комплекса туберозного склероза и ассоциированных с ним проблем поведения, синдрома Драве.

Настоящее изобретение может быть применимо как в качестве монотерапии, так и в комбинации с другими психоактивными лекарственными средствами, включая без ограничения флуоксетин, мемантин, донепезил, DAPT, противовоспалительные лекарственные средства, включая без ограничения ацетаминофен и другие ингибиторы СОХ, антиоксиданты и психоактивные пищевые добавки, включая без ограничения мелатонин, EGCG, ресвератрол, омега-3, фолиниевую кислоту, селен, цинк, витамин А, Е и С. Кроме того, настоящее изобретение может быть применимо в сочетании с

коррекционной педагогикой.

Согласно предпочтительному варианту осуществления, описанные в настоящем документе соединения характеризуются аминозаместителем в орто-положении бензолсульфонамидного каркаса, карбоксикислотным заместителем в мета-положении бензолсульфонамидного каркаса, наличием аминогруппы по меньшей мере с одним отличным от водорода заместителем, отсутствием ароматических заместителей на бензолсульфонамидном каркасе.

Неожиданно, описанные в настоящем документе соединения продемонстрировали эффективное ингибирование NKCC1 при сравнении с буметанидом.

В качестве дополнительного преимущества, соединения согласно настоящему изобретению продемонстрировали особую селективность в отношении NKCC1/NKCC2, что сделало их высоко пригодными.

Кроме того, соединения согласно настоящему изобретению характеризуются отсутствием диуретического эффекта.

В качестве еще одного дополнительного преимущества, соединения согласно настоящему изобретению продемонстрировали селективность в отношении NKCC1/NKCC2, которая не сопровождается диуретическим эффектом.

В частности, соединение 3.17 согласно настоящему изобретению, раскрытое ниже, продемонстрировало наиболее высокую селективность в отношении NKCC1/NKCC2.

Примеры

Пример 1: Химический синтез и определение характеристик Все коммерчески доступные реагенты и растворители использовали в полученном от поставщиков виде без дополнительной очистки. Безводные растворители приобретали у Sigma-Aldrich. Очистку посредством автоматизированной колоночной хроматографии проводили с использованием аппарата Teledyne ISCO (CombiFlash® Rf) на колонках различного размера (от 4 г до 120 г), предварительно заполненных силикагелем или щелочным оксидом алюминия, и смесей циклогексана и этилацетата (EtOAc), циклогексана и трет-бутилметилового эфира (ТВМЕ) или дихлорметана (DCM) иметанола (МеОН) с увеличивающейся полярностью. ЯМР-исследования проводили на системе Bruker Avance III 400 (400,13 МГц для ¹Н, и 100,62 МГц для ¹³С), оснащенной датчиком с функцией широкополосной инверсии и Z-градиентами. Спектры регистрировали при 300 К с использованием дейтерированного диметилсульфоксида (DMSO-d₆) или дейтерированного хлороформа (CDCl₃) в качестве растворителей. Применительно к ¹Н-ЯМР, данные приводили следующим образом: химический сдвиг, мультиплетность (с = синглет, д = дублет, дд = дублет дублетов, т = триплет, кв = квартет, м = мультиплет), константы связывания (Гц) и интегральная интенсивность. Анализ методом UPLC/MS проводили на UPLC/MS-системе Waters ACQUITY, состоящей из масс-спектрометра с одноквадрупольным детектором (SQD), оснащенным интерфейсом для ионизации электрораспылением и фотодиодным матричным детектором. Диапазон фотодиодной матрицы составлял 210-400 нм. Анализ проводили на колонке ACQUITY UPLC БЕН С18 (100×2,1 мм внутр. диам., размер частиц 1,7 мкм) с предколонкой VanGuard ВЕН С18 (5×2,1 мм внутр. диам., размер частиц 1,7 мкм). Подвижные фазы представляли собой 10 мМ NH₄OAc в Н₂О при рН 5 с корректировкой добавлением СН₃СООН (А) и 10 мМ NH₄OAc в CH₃CN-H₂O (95:5) при рН 5,0. В зависимости от анализа, использовали три типа градиентов: градиент 1 (5% - 100% подвижной фазы В в течение 3 мин), градиент 2 (5% - 50% подвижной фазы В в течение 3 мин) или градиент 3 (50% - 100% подвижной фазы В в течение 3 мин). Использовали ионизацию электрораспылением в режиме детекции положительно заряженных и отрицательно заряженных ионов. Для всех протестированных соединений была определена чистота ≥90% согласно анализу методами ЯМР и UPLC/MS.

Схемы и методики синтеза для получения некоторых их соединений согласно настоящему изобретению изображены на фигурах 5A-5D.

Синтез:

2-хлор-5-нитробензолсульфонилхлорид (соединение 1.2, схема 1).

1- Хлор-4-нитробензол 1.1 (500 мг, 3,14 ммоль) перемешивали в хлорсульфоновой кислоте (1,05 мл, 15,71 ммоль) при 120°С в течение 16 ч. После завершения реакции, смесь медленно выливали на холодную воду со льдом (30 мл), и дважды экстрагировали DCM (2×30 мл). Объединенные органические слои сушили над Na₂SO₄ и концентрировали досуха в условиях низкого давления с получением 374,1 мг (выход 46%) указанного в заголовке соединения. Определение характеристик: Rt = 2,14 мин; MS (ESI) m/z: 253,7 [М-Н]^-, [М-Н]^- рассчитано: 254,9. ¹Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 8,61 (д, J=2,9 Гц, 1Н), 8,16 (дд, J=8,7, 2,9 Гц, 1Н), 7,70 (д, J=8,6 Гц, 1Н).

2- хлор-5-нитробензолсульфонамид (соединение 1.3, схема 1).

К ледяному раствору 5 мл тетрагидрофурана и 4 мл 20% водного NH₄OH добавляли соединение 1.2 (374,1, 1,47 ммоль), растворенное в THF, и перемешивали реакционную смесь при комнатной температуре в течение 1 часа. Неочищенный реакционный остаток затем упаривали досуха в условиях низкого давления, остаток суспендировали в воде (20 мл) и дважды экстрагировали EtOAc (2×20 мл). Объединенные органические слои сушили над Na₂SO₄ и концентрировали досуха в условиях низкого давления. После очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (циклогексан/EtOAc от 90:10 до 70:30) получали чистое указанное в заголовке соединение (166,2 г, выход 48%). Определение характеристик: Rt = 1,42 мин; MS (ESI) m/z: 235,3 [М-Н]^-, [М-Н]^- рассчитано: 236. ¹H-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 8,68 (д, J=2,7 Гц, 1Н), 8,42 (дд, J=8,7, 2,8 Гц, 1Н), 7,98 (с, 2Н), 7,96 (м, J=8,7 Гц, 1Н).

Общая методика С для синтеза сульфонамидов 1.4-1.5 (реакция С, схема 1).

К ледяному раствору гидрохлорида соответствующего амина (1,0 ммоль) и триэтиламина (2 ммоль) в DCM (1,0 мл) добавляли соединение 1.2 (1 ммоль), растворенное в DCM (1,5 мл), и перемешивали реакционную смесь при комнатной температуре в течение 1 часа. Неочищенный реакционный остаток разбавляли DCM (20 мл) и промывали насыщенным раствором NH₄Cl (20 мл), и дважды экстрагировали водный слой DCM (2×20 мл). Объединенные органические слои сушили над Na₂SO₄ и концентрировали досуха в условиях низкого давления. После очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле в результате получали чистые указанные в заголовке соединения.

2-хлор-N-метил-5-нитробензолсульфонамид (соединение 1.4, схема 1).

Указанное в заголовке соединение синтезировали, следуя ранее описанной общей методике С, с использованием промежуточного соединения 1.2 (347 мг, 1,46 ммоль) и гидрохлорида метиламина (100,7 мг, 1,46 ммоль). После очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (циклогексан/ТВМЕ 95:05) получали чистое указанное в заголовке соединение (204,9 мг, выход 56%). Определение характеристик: Rt = 1,62 мин; MS (ESI) m/z: 249,3 [М-Н]^-. [М-Н]^- рассчитано: 250. ¹Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 8,61 (д, J=2,7 Гц, 1Н), 8,45 (дд, J=8,7, 2,8 Гц, 1Н), 8,11 (кв, J=4,4 Гц, 1Н), 2,53 (д, J=4,7 Гц, 3Н).

2-хлор-N,N-диметил-5-нитробензолсульфонамид (соединение 1.5, схема 1)

Указанное в заголовке соединение синтезировали, следуя ранее описанной общей методике С, с использованием промежуточного соединения 1.2 (190,3 мг, 0,8 ммоль) и гидрохлорида диметиламина (163,7 мг, 1,60 ммоль). После очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (циклогексан/EtOAc 80:20) получали чистое указанное в заголовке соединение (156,32 мг, выход 74%). Определение характеристик: Rt = 1,98 мин; MS (ESI) m/z: 265,3 [М-Н]⁺. [М-Н]^- рассчитано: 264. ¹H-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 8,59 (д, J=2,7 Гц, 1Н), 8,46 (дд, J=8,7, 2,8 Гц, 1Н), 8,01 (д, J=8,7 Гц, 1Н), 2,87 (с, 6Н).

Общая методика D для синтеза соединений 1.6-1.17 (реакция D, схема 1).

Суспензию промежуточного соединения 1.3, 1.4 или 1.5 (1 ммоль) и соответствующего амина (5 ммоль) в безводном толуоле (0,7 мл) перемешивали в атмосфере аргона при 100°С в течение 1 часа. После завершения реакции, смесь упаривали досуха в условиях низкого давления, остаток обрабатывали водой (10 мл) и экстрагировали EtOAc (10 мл). Органический слой сушили над Na₂SO₄ и концентрировали досуха в условиях низкого давления. После очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле в результате получали чистые указанные в заголовке соединения.

2-(бутиламино)-5-нитробензолсульфонамид (соединение 1.6, схема 1).

Указанное в заголовке соединение синтезировали, следуя ранее описанной общей методике D, с использованием промежуточного соединения 1.3 (50 мг, 0,21 ммоль) и бутиламина (0,1 мл, 1,05 ммоль). Соединение получали чистым без очистки на силикагеле (55,96 мг, выход 97%). Определение характеристик: Rt = 2,03 мин; MS (ESI) m/z: 274,4 [М-Н]⁺. [М-Н]^- рассчитано: 273,1; ¹Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 8,48 (д, J=2,7 Гц, 1Н), 8,19 (дд, J=9,4, 2,7 Гц, 1Н), 6,95 (д, J=9,4 Гц, 1Н), 3,35 (м, 2Н), 1,65-1,55 (м, 2Н), 1,44-1,32 (м, 2Н), 0,92 (т, J=7,3 Гц, 3H).

2-(гексиламино)-5-нитробензолсульфонамид (соединение 1.7, схема 1).

Указанное в заголовке соединение синтезировали, следуя ранее описанной общей методике D, с использованием промежуточного соединения 1.3 (50 мг, 0,21 ммоль) и гексиламина (0,14 мл, 1,05 ммоль). После очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (циклогексан/EtOAc от 90:10 до 70:30) получали чистое указанное в заголовке соединение (59,81 мг, выход 94%). Определение характеристик: Rt = 2,34 мин; MS (ESI) m/z: 302,5 [М-Н]⁺. [М-Н]^- рассчитано: 301,1; ¹Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 8,49 (д, J=2,7 Гц, 1Н), 8,19 (ддд, J=9,4, 2,8, 0,5 Гц, 1Н), 7,72 (с, 2Н), 6,95 (д, J=9,4 Гц, 1Н), 6,85 (т, J=5,6 Гц, 1Н), 3,37-3,28 (м, 2Н), 1,66-1,56 (м, 2Н), 1,41-1,25 (м, 6Н), 0,90-0,83 (м, 3H).

5-нитро-2-(октиламино)бензолсульфонамид (соединение 1.8, схема 1).

Указанное в заголовке соединение синтезировали, следуя ранее описанной общей методике D, с использованием промежуточного соединения 1.3 (50 мг, 0,21 ммоль) и октиламин (0,175 мл, 1,05 ммоль). После очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (циклогексан/EtOAc 80:20) получали чистое указанное в заголовке соединение (64,27 мг, выход 93%). Определение характеристик: Rt = 2,61 мин; MS (ESI) m/z: 330,5 [М-Н]⁺. [М-Н]^- рассчитано: 329,1; ¹Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 8,49 (д, J=2,8 Гц, 1Н), 8,20 (дд, J=9,4, 2,8 Гц, 1Н), 7,73 (с, 2Н), 6,95 (д, J=9,4 Гц, 1Н), 6,86 (с, 1Н), 3,34-3,29 (м, 2Н), 1,62 (п, J=7,2 Гц, 2Н), 1,41-1,20 (м, 10Н), 0,90-0,81 (м, 3H).

2-(3,3-диметилбутиламино)-5-нитробензолсульфонамид (соединение 1.9, схема 1).

Указанное в заголовке соединение синтезировали, следуя ранее описанной общей методике D, с использованием промежуточного соединения 1.3 (50 мг, 0,21 ммоль) и 3,3-диметилбутан-1-амина (0,148 мл, 1,05 ммоль). После очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (циклогексан/EtOAc от 95:05 до 75:25) получали чистое указанное в заголовке соединение (55,6 мг, выход 88%). Определение характеристик: Rt = 2,29 мин; MS (ESI) m/z: 265,3 [М-Н]⁺. [М-Н]^- рассчитано: 264; ¹Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 8,48 (д, J=2,7 Гц, 1Н), 8,21 (дд, J=9,4, 2,8 Гц, 1Н), 7,70 (с, 2Н), 6,93 (д, J=9,4 Гц, 1Н), 6,78 (т, J=4,7 Гц, 1Н), 3,38-3,30 (м, 2Н), 1,59-1,51 (м, 2Н), 0,96 (с, 9Н).

2- (бутиламино)-N-метил-5-нитробензолсульфонамид (соединение 1.10, схема 1).

Указанное в заголовке соединение синтезировали, следуя ранее описанной общей методике D, с использованием промежуточного соединения 1.4 (40 мг, 0,16 ммоль) и бутиламина (80 мкл, 0,79 ммоль). После очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (циклогексан/EtOAc 80:20) получали чистое указанное в заголовке соединение (38,65 мг, выход 84%). Определение характеристик: Rt = 2,27 мин; MS (ESI) m/z: 288,4 [М-Н]⁺. [М-Н]^- рассчитано: 287,1; ¹Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 8,40 (д, J=2,8 Гц, 1Н), 8,21 (дд, J=9,4,

2.7 Гц, 1Н), 7,89 (с, 1Н), 6,98 (д, J=9,4 Гц, 1Н), 6,88 (т, J=5,6 Гц, 1Н), 3,38-3,33 (м, 2Н), 2,44 (с, 3H), 1,66-1,54 (м, 2Н), 1,43-1,32 (м, 2Н), 0,92 (т, J=7,4 Гц, 3H).

2-(гексиламино)-N-метил-5- нитробензолсульфонамид (соединение 1.11, схема 1).

Указанное в заголовке соединение синтезировали, следуя ранее описанной общей методике D, с использованием промежуточного соединения 1.4 (40 мг, 0,16 ммоль) и гексиламина (0,1 мл, 0,79 ммоль). После очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (циклогексан/EtOAc 80:20) получали чистое указанное в заголовке соединение (40,38 мг, выход 80%). Определение характеристик: Rt = 2,56 мин; MS (ESI) m/z: 316,4 [М-Н]⁺. [М-Н]^- рассчитано: 315,1; ¹Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 8,40 (д, J=2,8 Гц, 1Н), 8,21 (дд, J=9,4, 2.8 Гц, 1Н), 7,88 (с, 1Н), 6,97 (д, J=9,5 Гц, 1Н), 6,92 (т, J=5,6 Гц, 1Н), 3,38-3,27 (м, 2Н), 2,44 (с, 3H), 1,66-1,54 (м, 2Н), 1,40-1,24 (м, 6Н), 0,90-0,82 (м, 3H).

N-метил-5- нитро-2-(октиламино)бензолсульфонамид (соединение 1.12, схема 1).

Указанное в заголовке соединение синтезировали, следуя ранее описанной общей методике D, с использованием промежуточного соединения 1.4 (40 мг, 0,16 ммоль) и октиламина (0,13 мл, 0,79 ммоль). После очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (циклогексан/EtOAc 80:20) получали чистое указанное в заголовке соединение (39,56 мг, выход 72%). Определение характеристик: Rt = 1,99 мин; MS (ESI) m/z: 344,4 [М-Н]⁺. [М-Н]^- рассчитано: 343,1; ¹Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 8,41 (д, J=2,8 Гц, 1Н), 8,22 (дд, J=9,4, 2,8 Гц, 1Н), 7,89 (с, 1Н), 6,98 (д, J=9,4 Гц, 1Н), 6,89 (т, J=5,5 Гц, 1Н), 3,36-3,30 (м, 2Н), 2,45 (с, 3H), 1,65-1,56 (м, 2Н), 1,40-1,20 (м, 10Н), 0,89-0,82 (м, 3H).

2-(3,3-диметилбутиламино)-N-метил-5- нитробензолсульфонамид (соединение 1.13, схема 1).

Указанное в заголовке соединение синтезировали, следуя ранее описанной общей методике D, с использованием промежуточного соединения 1.4 (40 мг, 0,16 ммоль) и 3,3-диметилбутан-1-амина (0,11 мл, 0,79 ммоль). После очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (циклогексан/EtOAc 80:20) получали чистое указанное в заголовке соединение (42,26 мг, выход 84%). Определение характеристик: Rt = 2,15 мин; MS (ESI) m/z: 316,4 [М-Н]⁺. [М-Н]^- рассчитано: 315,1; ¹Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 8,40 (д, J=2,7 Гц, 1Н), 8,23 (дд, J=9,3, 2,8 Гц, 1Н), 6,96 (д, J=9,4 Гц, 1Н), 6,81 (т, J=5,4 Гц, 1Н), 3,36-3,30 (м, 2Н), 2,43 (с, 3H), 1,57-1,51 (м, 2Н), 0,96 (с, 9Н).

2-(бутиламино)-N,N-диметил-5- нитробензолсульфонамид (соединение 1.14, схема 1).

Указанное в заголовке соединение синтезировали, следуя ранее описанной общей методике D, с использованием промежуточного соединения 1.5 (50 мг, 0,19 ммоль) и бутиламина (93 мкл, 0,94 ммоль). После очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (циклогексан/EtOAc 75:25) получали чистое указанное в заголовке соединение (41,45 мг, выход 72%). Определение характеристик: Rt = 2,47 мин; MS (ESI) m/z: 302,4 [М-Н]⁺. [М-Н]^- рассчитано: 301,1; ¹Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 8,29 (д, J=2,8 Гц, 1Н), 8,25 (ддд, J=9,4, 2,7, 0,6 Гц, 1Н), 7,21 (т, J=5,6 Гц, 1Н), 7,03 (д, J=9,5 Гц, 1Н), 3,38-3,32 (м, 2Н), 2,72 (с, 6Н), 1,63-1,53 (м, 2Н), 1,42-1,32 (м, 2Н), 0,93 (т, J=7,3 Гц, 3H).

2-(гексиламино)-N,N-диметил-5-нитробензолсульфонамид (соединение 1.15, схема 1).

Указанное в заголовке соединение синтезировали, следуя ранее описанной общей методике D, с использованием промежуточного соединения 1.5 (65 мг, 0,24 ммоль) и гексиламина (0,16 мл, 1,21 ммоль). После очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (циклогексан/EtOAc 80:20) получали чистое указанное в заголовке соединение (68,42 мг, выход 87%). Определение характеристик: Rt = 1,80 мин; MS (ESI) m/z: 328,5 [М-Н]^-. [М-Н]^- рассчитано: 329,1; ¹Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 8,28 (д, J=2,7 Гц, 1Н), 8,24 (ддд, J=9,4, 2,8, 0,6 Гц, 1Н), 7,21 (т, J=5,6 Гц, 1Н), 7,01 (д, J=9,4 Гц, 1Н), 3,36-3,30 (м, 2Н), 2,71 (с, 6Н), 1,62-1,53 (м, 2Н), 1,38-1,24 (м, 6Н), 0,90-0,82 (м, 3H).

N,N-диметил-5-нитро-2-(октиламино)бензолсульфонамид (соединение 1.16, схема 1).

Указанное в заголовке соединение синтезировали, следуя ранее описанной общей методике D, с использованием промежуточного соединения 1.5 (50 мг, 0,19 ммоль) и октиламина (0,15 мл, 0,94 ммоль). После очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (циклогексан/EtOAc 85:15) получали чистое указанное в заголовке соединение (57,52 мг, выход 85%). Определение характеристик: Rt = 2,30 мин; MS (ESI) m/z: 358,4 [М-Н]⁺. [М-Н]^- рассчитано: 357,2; ¹Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 8,28 (д, J=2,8 Гц, 1Н), 8,23 (ддд, J=9,4, 2,8, 0,6 Гц, 1Н), 7,20 (т, J=5,6 Гц, 1Н), 7,01 (д, J=9,5 Гц, 1Н), 3,38-3,31 (м, 2Н), 2,71 (с, 6Н), 1,62-1,53 (м, 2Н), 1,37-1,20 (м, 10Н), 0,87-0,82 (м, 3H).

2-(3,3-диметилбутиламино)- N,N-диметил-5- нитробензолсульфонамид (соединение 1.17, схема 1).

Указанное в заголовке соединение синтезировали, следуя ранее описанной общей методике D, с использованием промежуточного соединения 1.5 (50 мг, 0,19 ммоль) и 3,3-диметилбутан-1-амина (0,13 мл, 0,94 ммоль). После очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (циклогексан/EtOAc 85:15) получали чистое указанное в заголовке соединение (51,11 мг, выход 82%). Определение характеристик: Rt = 2,70 мин; MS (ESI) m/z: 330,4 [М-Н]⁺. [М-Н]^- рассчитано: 329,1; ¹Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 8,28 (д, J=2,7 Гц, 1Н), 8,25 (ддд, J=9,3, 2,8, 0,6 Гц, 1Н), 7,16 (т, J=5,6 Гц, 1Н), 6,98 (д, J=9,3 Гц, 1Н), 3,38-3,32 (м, 2Н), 2,71 (с, 6Н), 1,52-1,47 (м, 2Н), 0,95 (с, 9Н).

Общая методика Е для синтеза соединений 2.2-2.5 (схема 2).

Суспензию коммерческой 2-хлор-4-фтор-5-сульфамоилбензойной кислоты 2.1 (1 ммоль) и соответствующего амина (5 ммоль) в безводном толуоле (0,7 мл) перемешивали в атмосфере аргона при 100°С в течение 1 часа. После завершения реакции, смесь упаривали досуха в условиях низкого давления, остаток обрабатывали насыщенным водным раствором NH₄Cl (15 мл) и экстрагировали EtOAc (15 мл). Объединенные органические слои сушили над Na₂SO₄ и концентрировали досуха в условиях низкого давления. После растирания в циклогексане в результате получали указанные в заголовке соединения.

4-(бутиламино)-2-хлор-5-сульфамоилбензойная кислота (соединение 2.2, схема 2).

Указанное в заголовке соединение синтезировали, следуя ранее описанной общей методике Е, с использованием промежуточного соединения 2.1 (70 мг, 0,26 ммоль) и бутиламина (0,13 мл, 1,32 ммоль). После растирания с циклогексаном (1 мл) получали чистое указанное в заголовке соединение (40,84 мг, выход 51%). Определение характеристик: Rt = 1,52 мин; MS (ESI) m/z: 305,3 [М-Н]^-. [М-Н]^- рассчитано: 306,04; ¹Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 12,80 (ушир. с,1Н), 8,26 (с, 1Н), 7,57 (с, 2Н), 6,84 (с, 1Н), 6,39 (т, J=5,3 Гц, 1Н), 3,31-3,21 (м, 2Н), 1,64-1,53 (м, 2Н), 1,44-1,33 (м, 2Н), 0,93 (т, J=7,3 Гц, 3H).

2-хлор-4-(гексиламино)-5-сульфамоилбензойная кислота (соединение 2.3, схема 2).

Указанное в заголовке соединение синтезировали, следуя ранее описанной общей методике Е, с использованием промежуточного соединения 2.1 (50 мг, 0,19 ммоль) и гексиламина (0,12 мл, 0,95 ммоль). После растирания с циклогексаном (1 мл) получали чистое указанное в заголовке соединение (52,82 мг, выход 83%). Определение характеристик: Rt = 1,78 мин; MS (ESI) m/z: 333,4 [М-Н]^-. [М-Н]^- рассчитано: 334,1; ¹Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 12,77 (ушир. с, 1Н), 8,25 (с, 1Н), 7,55 (с, 2Н), 6,83 (с, 1Н), 6,39 (т, J=5,4 Гц, 1Н), 3,27-3,20 (м, 2Н), 1,59 (п, J=7,1 Гц, 2Н), 1,41-1,24 (м, 6Н), 0,90-0,84 (м, 3H).

2-хлор-4-(октиламино)-5-сульфамоилбензойная кислота (соединение 2.4, схема 2).

Указанное в заголовке соединение синтезировали, следуя ранее описанной общей методике Е, с использованием промежуточного соединения 2.1 (50 мг, 0,19 ммоль) и октиламина (0,16 мл, 0,95 ммоль). После растирания с циклогексаном (1 мл) получали чистое указанное в заголовке соединение (48,89 мг, выход 71%). Определение характеристик: Rt = 2,01 мин; MS (ESI) m/z: 361,4 [М-Н]^-. [М-Н]^- рассчитано: 362,1; ¹Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 12,78 (ушир. с, 1Н), 8,26 (с, 1Н), 7,56 (с, 2Н), 6,84 (с, 1Н), 6,40 (т, J=5,3 Гц, 1Н), 3,28-3,21 (м, 2Н), 1,65-1,55 (м, 2Н), 1,41-1,20 (м, 10Н), 0,90-0,83 (м, 3H).

2-хлор-4-(3,3-диметилбутиламино)-5-сульфамоилбензойная кислота (соединение 2.5, схема 2).

Указанное в заголовке соединение синтезировали, следуя ранее описанной общей методике Е, с использованием промежуточного соединения 2.1 (50 мг, 0,19 ммоль) и 3,3-диметилбутан-1-амина (0,13 мл, 0,95 ммоль). После растирания с циклогексаном (1 мл) получали чистое указанное в заголовке соединение 52,82 мг, выход 83%). Определение характеристик: Rt = 1,66 мин; MS (ESI) m/z: 333,4 [М-Н]^-. [М-Н]^- рассчитано: 334,1; ¹Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 8,25 (с, 1Н), 7,54 (с, 2Н), 6,83 (с, 1Н), 6,29 (т, J=5,1 Гц, 1Н), 3,27-3,20 (м, 2Н), 1,56-1,50 (м, 2Н), 0,96 (с, 9Н).

Общая методика F для синтеза соединений 2.6-2.9 (реакция F, схема 2).

В атмосфере аргона, к суспензии соответствующих производных 4-амино-2-хлор-5-сульфамоилбензойной кислоты 2.2-2.5 (1 ммоль) и гидроксида палладия на угле (20 масс. %) в безводном метаноле (20 мл) добавляли формиат аммония (4 ммоль), и перемешивали реакционную смесь при температуре кипения растворителя в течение 1 часа. После завершения реакции, неочищенный остаток фильтровали через крупное пятно Celite, и концентрировали фильтрат досуха в условиях низкого давления. Сухой остаток разбавляли EtOAc (10 мл) и промывали насыщенным раствором NH₄Cl (10 мл). Органический слой сушили над Na₂SO₄ и концентрировали досуха в условиях низкого давления. После растирания в циклогексане в результате получали указанные в заголовке соединения.

4-(бутиламино)-3-сульфамоилбензойная кислота (соединение 2.6, схема 2).

Указанное в заголовке соединение синтезировали, следуя ранее описанной общей методике F, с использованием промежуточного соединения 2.2 (30 мг, 0,1 ммоль). После растирания с циклогексаном (1 мл) получали чистое указанное в заголовке соединение (11,71 мг, выход 43%). Определение характеристик: Rt = 1,53 мин; MS (ESI) m/z: 273,4 [М-Н]⁺. [М-Н]^- рассчитано: 272,1; ¹Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 8,23 (д, J=2,1 Гц, 1Н), 7,87 (дд, J=8,8, 2,2 Гц, 1Н), 7,46 (с, 2Н), 6,83 (д, J=8,9 Гц, 1Н), 6,37 (т, J=5,4 Гц, 1Н), 3,28-3,21 (м, 2Н), 1,64-1,55 (м, 2Н), 1,44-1,34 (м, 2Н), 0,92 (т, J=7,3 Гц, 3H).

4-(гексиламино)-3-сульфамоилбензойная кислота (соединение 2.7, схема 2).

Указанное в заголовке соединение синтезировали, следуя ранее описанной общей методике F, с использованием промежуточного соединения 2.3 (30,7 мг, 0,09 ммоль). После растирания с циклогексаном (1 мл) получали чистое указанное в заголовке соединение (11,71 мг, выход 43%). Определение характеристик: Rt = 1,81 мин; MS (ESI) m/z: 301,4 [М-Н]⁺. [М-Н]^- рассчитано: 300,1; ¹Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 12,45 (ушир. с,1Н), 8,23 (д, J=2,1 Гц, 1Н), 7,87 (дд, J=8,8, 2,2 Гц, 1Н), 7,46 (с, 2Н), 6,82 (д, J=8,9 Гц, 1Н), 6,38 (т, J=5,4 Гц, 1Н), 3,27-3,20 (м, 2Н), 1,60 (г, J=6,6 Гц, 2Н), 1,42-1,25 (м, 8Н), 0,92-0,80 (м, 3H).

4-(октиламино)-3-сульфамоилбензойная кислота (соединение 2.8, схема 2).

Указанное в заголовке соединение синтезировали, следуя ранее описанной общей методике F, с использованием промежуточного соединения 2.4 (35,7 мг, 0,1 ммоль). После растирания с циклогексаном (1 мл) получали чистое указанное в заголовке соединение (9,68 мг, выход 36%). Определение характеристик: Rt = 2,16 мин; MS (ESI) m/z: 329,4 [М-Н]⁺. [М-Н]^- рассчитано:328,1; ¹Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 12,43 (ушир. с,1Н), 8,23 (д, J=2,1 Гц, 1Н), 7,86 (дд, J=8,7, 2,1 Гц, 1Н), 7,46 (с, 2Н), 6,82 (д, J=8,9 Гц, 1Н), 6,38 (т, J=5,3 Гц, 1Н), 3,27-3,19 (м, 2Н), 1,65-1,56 (м, 2Н), 1,42-1,15 (м, 12Н), 0,92-0,80 (м, 3H).

4-(3,3-диметилбутиламино)-3-сульфамоилбензойная кислота (соединение 2.9, схема 2).

Указанное в заголовке соединение синтезировали, следуя ранее описанной общей методике F, с использованием промежуточного соединения 2.5 (29,6 мг, 0,09 ммоль). После растирания с циклогексаном (1 мл) получали чистое указанное в заголовке соединение (15,13 мг, выход 56%). Определение характеристик: Rt = 1,80 мин; MS (ESI) m/z: 301,4 [М-Н]⁺. [М-Н]^- рассчитано: 300,1; ¹Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 12,48 (ушир. с,1Н), 8,24 (д, J=2,1 Гц, 1Н), 7,89 (дд, J=8,8, 2,1 Гц, 1Н), 7,46 (с, 2Н), 6,83 (д, J=8,9 Гц, 1Н), 3,28-3,21 (м, 2Н), 1,59-1,52 (м, 2Н), 0,97 (с, 9Н).

Общая методика G для синтеза соединений 3.2-3.3 (реакция G, схема 3).

4-Фтор-3-хлорсульфонилбензойную кислоту 3.1 (1 ммоль), растворенную в 1,5 мл THF, по каплям добавляли к 3 мл ледяного 2 М раствора соответствующего амина в THF, и перемешивали в течение 1 ч при к.т.(комнатной температуре). После завершения реакции, реакционную смесь упаривали досуха, и обрабатывали остаток водой и HCl. Выпавший в осадок продукт фильтровали и промывали водой с получением чистых указанных в заголовке соединений.

4-фтор-3-(метилсульфамоил)бензойная кислота (соединение 3.2, схема 3).

Указанное в заголовке соединение синтезировали, следуя ранее описанной общей методике G, с использованием промежуточного соединения 3.1 (500 мг, 2,07 ммоль) и 2 М раствора метиламина в THF (2,07 мл, 4,15 ммоль). После описанного выделения продукта реакции получали чистое указанное в заголовке соединение (313,8 мг, выход 64%). Определение характеристик: Rt = 1,26 мин; MS (ESI) m/z: 232,3 [М-Н]^-. [М-Н]^- рассчитано: 233,02 ЧН-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 8,30 (дд, J=7,0, 2,2 Гц, 1Н), 8,25-8,19 (м, 1Н), 7,89 (кв, J=4,8 Гц, 1Н), 7,62-7,54 (м, 1Н), 2,52 (д, J=4,8 Гц, 3H).

3-(диметилсульфамоил)-4-фторбензойная кислота (соединение 3.3, схема 3).

Указанное в заголовке соединение синтезировали, следуя ранее описанной общей методике G, с использованием промежуточного соединения 3.1 (1 г, 4,15 ммоль) и 2 М раствора диметиламина в THF (4,15 мл, 8,30 ммоль). После описанного выделения продукта реакции получали чистое указанное в заголовке соединение (749 мг, выход 73%). Определение характеристик: Rt = 1,11 мин; MS (ESI) m/z: 246,3 [М-Н]^-. [М-Н]^- рассчитано: 247,03. ¹Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 8,29-8,24 (м, 2Н), 7,67-7,58 (м, 1Н), 2,75 (д, J=1,9 Гц, 6Н).

3-(циклопентилсульфамоил)-4-фторбензойная кислота (соединение 3.4, схема 3).

Указанное в заголовке соединение синтезировали, следуя ранее описанной общей методике G, с использованием промежуточного соединения 3.1 (250 мг, 1,04 ммоль) и циклопентиламина (0,21 мл, 2,07 ммоль) в THF (8,5 мл). После описанного выделения продукта реакции получали чистое указанное в заголовке соединение (261,4 мг, выход 88%). Определение характеристик: Rt = 1,25 мин; MS (ESI) m/z: 286,4 [М-Н]^-. [М-Н]^- рассчитано: 287,06. ¹H-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 8,33 (дд, J=7,1, 2,3 Гц, 1Н), 8,21 (ддд, J=8,6, 4,7, 2,3 Гц, 1Н), 8,12 (д, J=7,6 Гц, 1Н), 7,56 (дд, J=10,0, 8,6 Гц, 1Н), 3,58-3,48 (м, 1Н), 1,68-1,48 (м, 4Н), 1,45-1,28 (м, 4Н).

3-(циклогексилсульфамоил)-4-фторбензойная кислота (соединение 3.5, схема 3).

Указанное в заголовке соединение синтезировали, следуя ранее описанной общей методике G, с использованием промежуточного соединения 3.1 (250 мг, 1,04 ммоль) и циклогексиламина (0,24 мл, 2,07 ммоль) в THF (8,5 мл). После описанного выделения продукта реакции и растирания со смесью циклогексан/этилацетат (9/1, 2 мл) получали чистое указанное в заголовке соединение (185,6 мг, выход 59%). Определение характеристик: Rt = 1,37 мин; MS (ESI) m/z: 286,4 [М-Н]^-. [М-Н]^- рассчитано: 287,06. ¹Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 8,33 (дд, J=7,1, 2,3 Гц, 1Н), 8,21 (ддд, J=8,6, 4,7, 2,3 Гц, 1Н), 8,12 (д, J=7,6 Гц, 1Н), 7,56 (дд, J=10,0, 8,6 Гц, 1Н), 3,58-3,48 (м, 1Н), 1,68-1,48 (м, 4Н), 1,45-1,28 (м, 4Н).

Общая методика Н для синтеза соединений 3.6-3.22, 5.5-5.7, 6.3, 7.4 (реакция Н, схема 3, 5, 6, 7).

Суспензию соответствующего промежуточного соединения (1 ммоль) и соответствующего амина (2 ммоль) в безводном 1,4-диоксане (3 мл) перемешивали в атмосфере аргона при 100°С в течение 4 часов. После завершения реакции, смесь упаривали досуха в условиях низкого давления, остаток обрабатывали насыщенным водным раствором NH₄Cl (15 мл) и дважды экстрагировали EtOAc (2×15 мл). Объединенные органические слои сушили над Na₂SO₄ и концентрировали досуха в условиях низкого давления. После растирания в циклогексане в результате получали указанные в заголовке соединения.

4-(бутиламино)-3-(метилсульфамоил)бензойная кислота (соединение 3.6, схема 3).

Указанное в заголовке соединение синтезировали, следуя ранее описанной общей методике Н, с использованием промежуточного соединения 3.2 (50 мг, 0,21 ммоль) и бутиламина (42 мкл, 0,42 ммоль) в безводном 1,4-диоксане (0,7 мл). После растирания с циклогексаном (1 мл) получали чистое указанное в заголовке соединение (47,10 мг, выход 78%). Определение характеристик: Rt = 1,66 мин; MS (ESI) m/z: 285,4 [М-Н]^-. [М-Н]^- рассчитано: 286,1. ¹Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 8,15 (д, J=2,1 Гц, 1Н), 7,90 (дд, J=8,8, 2,1 Гц, 1Н), 7,66 (с, 1Н), 6,86 (д, J=8,9 Гц, 1Н), 6,44 (т, J=5,4 Гц, 1Н), 3,24 (кв, J=6,6 Гц, 2Н), 2,39 (с, 3H), 1,58 (п, J=7,2 Гц, 2Н), 1,43-1,32 (м, 2Н), 0,92 (т, J=7,3 Гц, 3H).

4- (гексиламино)-3-(метилсульфамоил)бензойная кислота (соединение 3.7, схема 3).

Указанное в заголовке соединение синтезировали, следуя ранее описанной общей методике Н, с использованием промежуточного соединения 3.2 (50 мг, 0,21 ммоль) и гексиламина (57 мкл, 0,42 ммоль) в безводном 1,4-диоксане (0,7 мл). После растирания с циклогексаном (1 мл) получали чистое указанное в заголовке соединение (51,69 мг, выход 78%). Определение характеристик: Rt = 2,00 мин; MS (ESI) m/z: 313,4 [М-Н]^-. [М-Н]^- рассчитано: 314,1. ¹Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 12,53 (ушир. с,1Н), 8,15 (д, J=2,1 Гц, 1Н), 7,90 (дд, J=8,8, 2,1 Гц, 1Н), 7,63 (кв, J=5,0 Гц, 1Н), 6,86 (д, J=8,9 Гц, 1Н), 6,44 (т, J=5,3 Гц, 1Н), 3,23 (кв, J=6,6 Гц, 2Н), 1,60 (п, J=7,1 Гц, 2Н), 1,40-1,25 (м, 6Н), 0,90-0,83 (м, 3H).

3-(метилсульфамоил)-4-(октиламино)бензойная кислота (соединение 3.8, схема 3).

Указанное в заголовке соединение синтезировали, следуя ранее описанной общей методике Н, с использованием промежуточного соединения 3.2 (50 мг, 0,21 ммоль) и октиламина (71 мкл, 0,42 ммоль) в безводном 1,4-диоксане (0,7 мл). После растирания с циклогексаном (1 мл) получали чистое указанное в заголовке соединение (69,51 мг, выход 97%). Определение характеристик: Rt = 2,28 мин; MS (ESI) m/z: 341,4 [М-Н]^-. [М-Н]^- рассчитано: 342,2. ¹Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 8,15 (д, J=2,1 Гц, 1Н), 7,89 (дд, J=8,8, 2,1 Гц, 1Н), 6,86 (д, J=8,9 Гц, 1Н), 6,44 (т, J=5,4 Гц, 1Н), 3,23 (кв, J=6,6 Гц, 2Н), 2,38 (с, 3H), 1,59 (п, J=7,1 Гц, 2Н), 1,40-1,20 (м, 9Н), 0,89-0,82 (м, 3H).

4-(3,3-диметилбутиламино)-3-(метилсульфамоил)бензойная кислота (соединение 3.9, схема 3).

Указанное в заголовке соединение синтезировали, следуя ранее описанной общей методике Н, с использованием промежуточного соединения 3.2 (50 мг, 0,21 ммоль) и 3,3-диметилбутан-1-амина (60 мкл, 0,42 ммоль) в безводном 1,4-диоксане (0,7 мл). После растирания с циклогексаном (1 мл) получали чистое указанное в заголовке соединение (50,56 мг, выход 84%). Определение характеристик: Rt = 1,93 мин; MS (ESI) m/z: 313,4 [М-Н]^-. [М-Н]^- рассчитано: 314,1. ¹Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 12,52 (с, 1Н), 8,15 (д, J=2,1 Гц, 1Н), 7,91 (дд, J=8,8, 2,1 Гц, 1Н), 7,62 (кв, J=5,0 Гц, 1Н), 6,86 (д, J=8,9 Гц, 1Н), 6,35 (т, J=5,2 Гц, 1Н), 3,27-3,20 (м, 2Н), 2,38 (д, J=5,0 Гц, 3H), 1,57-1,50 (м, 2Н), 0,96 (с, 9Н).

3-(метилсульфамоил)-4-(8,8,8-трифтороктиламино)бензойная кислота (соединение 3.10, схема 3).

Указанное в заголовке соединение синтезировали, следуя ранее описанной общей методике Н, с использованием промежуточного соединения 3.2 (100 мг, 0,42 ммоль) и промежуточного соединения 4.5 (86,4 мг, 0,47 ммоль) в безводном 1,4-диоксане (1,4 мл). После растирания с циклогексаном (2 мл) получали чистое указанное в заголовке соединение (111,5 мг, выход 67%). Определение характеристик: Rt = 2,11 мин; MS (ESI) m/z: 395,2 [М-Н]^-. [М-Н]^- рассчитано: 396,1. ¹Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 8,15 (д, J=2,1 Гц, 1Н), 7,90 (дд, J=8,8, 2,1 Гц, 1Н), 7,63 (кв, J=5,0 Гц, 1Н), 6,86 (д, J=8,9 Гц, 1Н), 6,44 (т, J=5,4 Гц, 1Н), 3,24 (кв, J=6,7 Гц, 2Н), 2,39 (д, J=4,8 Гц, 3H), 2,28-2,15 (м, 2Н), 1,64-1,55 (м, 2Н), 1,51-1,42 (м, 2Н), 1,39-1,30 (м, 6Н).

4-(бутиламино)-3-(диметилсульфамоил)бензойная кислота (соединение 3.11, схема 3).

Указанное в заголовке соединение синтезировали, следуя ранее описанной общей методике Н, с использованием промежуточного соединения 3.3 (50 мг, 0,20 ммоль) и бутиламина (40 мкл, 0,40 ммоль) в безводном 1,4-диоксане (0,7 мл). После растирания с циклогексаном (1 мл) получали чистое указанное в заголовке соединение (41,45 мг, выход 69%). Определение характеристик: Rt = 1.90 мин; MS (ESI) m/z: 299,4 [М-Н]^-. [М-Н]^- рассчитано: 300,1. ¹Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 12,62 (с, 1Н), 8,05 (д, J=2,1 Гц, 1Н), 7,93 (дд, J=8,9, 2,1 Гц, 1Н), 6.91 (д, J=9,0 Гц, 1Н), 6,74 (т, J=5,4 Гц, 1Н), 3,29-3,19 (м, 2Н), 2,66 (с, 6Н), 1,61-1,52 (м, 2Н), 1,42-1,31 (м, 2Н), 0,92 (т, J=7,3 Гц, 3H).

3-(диметилсульфамоил)-4-(гексиламино)бензойная кислота (соединение 3.12, схема 3).

Указанное в заголовке соединение синтезировали, следуя ранее описанной общей методике Н, с использованием промежуточного соединения 3.3 (50 мг, 0,20 ммоль) и гексиламина (53 мкл, 0,40 ммоль) в безводном 1,4-диоксане (0,7 мл). После растирания с циклогексаном (1 мл) получали чистое указанное в заголовке соединение (53,20 мг, выход 81%). Определение характеристик: Rt = 2,17 мин; MS (ESI) m/z: 327,4 [М-Н]^-. [М-Н]^- рассчитано: 328,1. ¹Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 12,63 (с, 1Н), 8,04 (д, J=2,1 Гц, 1Н), 7,93 (дд, J=8,8, 2,1 Гц, 1Н), 6,90 (д, J=9,0 Гц, 1Н), 6,74 (т, J=5,4 Гц, 1Н), 3,28-3,18 (м, 2Н), 2,65 (с, 6Н), 1,57 (п, J=7,0 Гц, 2Н), 1,39-1,24 (м, 6Н), 0,89-0,84 (м, 3H).

3-(диметилсульфамоил)-4-(октиламино)бензойная кислота (соединение 3.13, схема 3).

Указанное в заголовке соединение синтезировали, следуя ранее описанной общей методике Н, с использованием промежуточного соединения 3.3 (50 мг, 0,20 ммоль) и октиламина (67 мкл, 0,40 ммоль) в безводном 1,4-диоксане (0,7 мл). После растирания с циклогексаном (1 мл) получали чистое указанное в заголовке соединение (59,9 мг, выход 84%). Определение характеристик: Rt = 2,44 мин; MS (ESI) m/z: 355,4 [М-Н]^-. [М-Н]^- рассчитано: 356,2. ¹Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 12,62 (с, 1H), 8,04 (д, J=2,1 Гц, 1H), 7,93 (дд, J=8,9, 2,1 Гц, 1H), 6,91 (д, J=9,0 Гц, 1H), 6,75 (т, J=5,4 Гц, 1H), 3,23 (кв, J=6,6 Гц, 2H), 2,65 (с, 6Н), 1,57 (п, J=6,9 Гц, 2Н), 1,39-1,19 (м, 10Н), 0,90-0,80 (м, 3H).

4-(3,3-диметилбутиламино)-3-(диметилсульфамоил)бензойная кислота (соединение 3.14, схема 3).

Указанное в заголовке соединение синтезировали, следуя ранее описанной общей методике Н, с использованием промежуточного соединения 3.3 (50 мг, 0,20 ммоль) и 3,3-диметилбутан-1-амина (57 мкл, 0,40 ммоль) в безводном 1,4-диоксане (0,7 мл). После растирания с циклогексаном (1 мл) получали чистое указанное в заголовке соединение (42 мг, выход 63%). Определение характеристик: Rt = 2,13 мин; MS (ESI) m/z: 327,4 [М-Н]^-. [М-Н]^- рассчитано: 328,1. ¹Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 12,63 (с, 1Н), 8,05 (д, J=2,0 Гц, 1Н), 7,95 (дд, J=8,9, 2,1 Гц, 1Н), 6,90 (д, J=8,9 Гц, 1Н), 6,69 (т, J=5,3 Гц, 1Н), 3,29-3,22 (м, 2Н), 2,66 (с, 6Н), 1,54-1,46 (м, 2Н), 0,96 (с, 9Н).

3-(диметилсульфамоил)-4-(4,4,4-трифторбутиламино)бензойная кислота (соединение 3.15, схема 3).

Указанное в заголовке соединение синтезировали, следуя ранее описанной общей методике Н, с использованием промежуточного соединения 3.3 (50 мг, 0,20 ммоль) и 4,4,4-трифторбутиламина (48 мкл, 0,40 ммоль) в безводном 1,4-диоксане (0,7 мл). После растирания с циклогексаном (1 мл) получали чистое указанное в заголовке соединение (40,13 мг, выход 57%). Определение характеристик: Rt = 1,78 мин; MS (ESI) m/z: 353,4 [М-Н]^-. [М-Н]^- рассчитано: 354,1. ¹Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 12,64 (ушир. с,1Н), 8,07 (д, J=2,1 Гц, 1Н), 7,95 (дд, J=8,8, 2,1 Гц, 1Н), 6,98 (д, J=9,0 Гц, 1Н), 6,88 (т, J=5,9 Гц, 1Н), 3,38 (кв, J=6,8 Гц, 2Н), 2,67 (с, 6Н), 2,40-2,25 (м, 2Н), 1,83-1,73 (м, 2Н).

3-(диметилсульфамоил)-4-(6,6,6-трифторгексиламино)бензойная кислота (соединение 3.16, схема 3).

Указанное в заголовке соединение синтезировали, следуя ранее описанной общей методике Н, с использованием промежуточного соединения 3.3 (50 мг, 0,20 ммоль) и 6,6,6-трифторгексиламина (60 мкл, 0,40 ммоль) в безводном 1,4-диоксане (0,7 мл). После растирания с циклогексаном (1 мл) получали чистое указанное в заголовке соединение (57,32 мг, выход 75%). Определение характеристик: Rt = 2,02 мин; MS (ESI) m/z: 381,4 [М-Н]^-. [М-Н]^- рассчитано: 382,1. ¹Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 12,64 (ушир. с,1Н), 8,05 (д, J=2,1 Гц, 1Н), 7,94 (дд, J=8,8, 2,1 Гц, 1Н), 6,93 (д, J=9,0 Гц, 1Н), 6,77 (т, J=5,4 Гц, 1Н), 3,26 (кв, J=6,8 Гц, 2H), 2,66 (с, 6Н), 2,32-2,18 (м, 2Н), 1,62 (п, J=7,4 Гц, 3H), 1,58-1,48 (м, 2Н), 1,47-1,37 (м, 2Н).

3-(диметилсульфамоил)-4-(8,8,8-трифтороктиламино)бензойная кислота (соединение 3.17, схема 3).

Указанное в заголовке соединение синтезировали, следуя ранее описанной общей методике Н, с использованием промежуточного соединения 3.3 (50 мг, 0,20 ммоль) и промежуточного соединения 4.5 (89 мг, 0,40 ммоль) в безводном 1,4-диоксане (0,7 мл). После растирания с циклогексаном (1 мл) получали чистое указанное в заголовке соединение (44,34 мг, выход 54%). Определение характеристик: Rt = 2,28 мин; MS (ESI) m/z: 409,4 [М-Н]^-. [М-Н]^- рассчитано: 410,1. ¹Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 12,62 (с, 1Н), 8,05 (д, J=2,1 Гц, 1Н), 7,93 (дд, J=8,8, 2,1 Гц, 1Н), 6,91 (д, J=9,0 Гц, 1Н), 6,75 (т, J=5,4 Гц, 1Н), 3,24 (кв, J=6,6 Гц, 2Н), 2,29-2,14 (м, 2Н), 1,64-1,52 (м, 2Н), 1,52-1,39 (м, 2Н), 1,40-1,25 (м, 6Н).

3-(диметилсульфамоил)-4-(2-метоксиэтиламино)бензойная кислота (соединение 3.18, схема 3).

Указанное в заголовке соединение синтезировали, следуя ранее описанной общей методике Н, с использованием промежуточного соединения 3.3 (50 мг, 0,20 ммоль) и 2-метоксиэтиламина (36 мкл, 0,40 ммоль) в безводном 1,4-диоксане (0,7 мл). После растирания с циклогексаном (1 мл) получали чистое указанное в заголовке соединение (53,96 мг, выход 89%). Определение характеристик: Rt = 1,40 мин; MS (ESI) m/z: 301,4 [М-Н]^-. [М-Н]^- рассчитано: 302,1. ¹Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 8,05 (д, J=2,1 Гц, 1Н), 7,93 (дд, J=8,8, 2,1 Гц, 1Н), 6,95 (д, J=9,0 Гц, 1Н), 6,89 (т, J=5,3 Гц, 1Н), 3,55 (т, J=5,2 Гц, 2Н), 3,40 (кв, J=5,3 Гц, 2Н), 3,29 (с, 3H), 2,65 (с, 6Н).

3-(диметилсульфамоил)-4-(4-метоксибутиламино)бензойная кислота (соединение 3.19, схема 3).

Указанное в заголовке соединение синтезировали, следуя ранее описанной общей методике Н, с использованием промежуточного соединения 3.3 (50 мг, 0,20 ммоль) и 4-метоксибутан-1-амина (51 мкл, 0,40 ммоль) в безводном 1,4-диоксане (0,7 мл). После растирания с циклогексаном (1 мл) получали чистое указанное в заголовке соединение (56,08 мг, выход 85%). Определение характеристик: Rt = 1,59 мин; MS (ESI) m/z: 329,4 [М-Н]^-. [М-Н]^- рассчитано: 330,1. ¹Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 12,63 (с, 1Н), 8,05 (д, J=2,1 Гц, 1Н), 7,93 (дд, J=8,8, 2,1 Гц, 1Н), 6,91 (д, J=8,9 Гц, 1Н), 6,77 (т, J=5,5 Гц, 1Н), 3,38-3,32 (м, 2Н), 3,26 (кв, J=6,5 Гц, 2Н), 3,22 (с, 3H), 2,65 (с, 6Н), 1,65-1,51 (м, 4Н).

3-(диметилсульфамоил)-4-(6- метоксигексиламино)бензойная кислота (соединение 3.20, схема 3).

Указанное в заголовке соединение синтезировали, следуя ранее описанной общей методике Н, с использованием промежуточного соединения 3.3 (50 мг, 0,20 ммоль) и промежуточного соединения 4.4 (53,1, 0,40 ммоль) в безводном 1,4-диоксане (0,7 мл). После растирания с циклогексаном (1 мл) получали чистое указанное в заголовке соединение (23,17 мг, выход 32%). Определение характеристик: Rt = 1,84 мин; MS (ESI) m/z: 357,5 [М-Н]^-. [М-Н]^- рассчитано: 358,2. ¹Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 8,04 (д, J=2,1 Гц, 1Н), 7,93 (дд, J=8,8, 2,1 Гц, 1Н), 6,90 (д, J=8,9 Гц, 1Н), 6,73 (т, J=5,3 Гц, 1Н), 3,31-3,26 (м, 2Н), 3,26-3,21 (м, 2Н), 3,20 (с, 3H), 1,62-1,53 (м, 2Н), 1,52-1,43 (м, 2Н), 1,39-1,27 (м, 4Н).

3-(циклопентилсульфамоил)-4-(8,8,8-трифтороктиламино)бензойная кислота (соединение 3.21, схема 3).

Указанное в заголовке соединение синтезировали, следуя ранее описанной общей методике Н, с использованием промежуточного соединения 3.4 (50 мг, 0,17 ммоль) и промежуточного соединения 4.5 (35,1 мг, 0,19 ммоль) в безводном 1,4-диоксане (0,6 мл). После растирания с диэтиловым эфиром (1 мл) получали чистое указанное в заголовке соединение (31,7 мг, выход 41%). Определение характеристик: Rt = 2,33 мин; MS (ESI) m/z: 449,5 [М-Н]^-. [М-Н]^- рассчитано: 450,2. ¹Н-ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 8,49 (д, J=2,1 Гц, 1Н), 8,08 (дд, J=8,8, 2,1 Гц, 1Н), 6,75 (д, J=8,9 Гц, 1Н), 6,53 (с, 1Н), 4,63-4,51 (м, 1Н), 3,63-3,53 (м, 1Н), 3,25 (т, J=7,1 Гц, 2Н), 2,14-2,00 (м, 2Н), 1,85-1,75 (м, 2Н), 1,74-1,65 (м, 2Н), 1,65-1,54 (м, 4Н), 1,53-1,47 (м, 2Н), 1,46-1,36 (м, 6Н), 1,36-1,27 (м, 2Н).

3-(циклогексилсульфамоил)-4-(8,8,8-трифтороктиламино)бензойная кислота (соединение 3.22, схема 3).

Указанное в заголовке соединение синтезировали, следуя ранее описанной общей методике Н, с использованием промежуточного соединения 3.5 (50 мг, 0,16 ммоль) и промежуточного соединения 4.5 (33,4 мг, 0,18 ммоль) в безводном 1,4-диоксане (0,55 мл). После растирания с диэтиловым эфиром (1 мл) получали чистое указанное в заголовке соединение (25,3 мг, выход 34%). Определение характеристик: Rt = 2,40 мин; MS (ESI) m/z: 463,5 [М-Н]^-. [М-Н]^- рассчитано: 464,2. ¹Н-ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 8,49 (д, J=2,1 Гц, 1Н), 8,07 (дд, J=8,8, 2,1 Гц, 1Н), 6,74 (д, J=8,9 Гц, 1Н), 6,50 (с, 1Н), 4,49 (д, J=7,9 Гц, 1Н), 3,25 (т, J=7,1 Гц, 2Н), 3,18-3,07 (м, 1Н), 2,14-2,00 (м, 2Н), 1,79-1,66 (м, 4Н), 1,66-1,49 (м, 6Н), 1,48-1,34 (м, 6Н), 1,30-1,19 (м, 3H), 1,18-1,07 (м, 2Н).

Общая методика I для синтеза промежуточных соединений 4.2-4.3 (реакция I, схема 3).

Суспензию фталимида калия 4.1 (1 ммоль) и соответствующего алкилбромида (1,2 ммоль) в безводном N,N-диметилформамиде (3,5 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов. После завершения реакции, смесь разбавляли водой (35 мл) и EtOAc (35 мл). Органический слой сушили над Na₂SO₄ и концентрировали досуха в условиях низкого давления. После очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле в результате получали чистые указанные в заголовке соединения.

2-(6-метоксигексил)изоиндолин-1,3-дион (соединение 4.2, схема 4).

Указанное в заголовке соединение синтезировали, следуя ранее описанной общей методике I, с использованием фталимида калия 4.1 (300 мг, 1,60 ммоль) и 1-бром-6-метоксигексана (0,36 мл, 2,08 ммоль) в безводном N,N-диметилформамиде (5,5 мл). После очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (циклогексан/EtOAc 70:30) получали чистое указанное в заголовке соединение (355,72 мг, выход 84%). Определение характеристик: Rt = 2,23 мин; MS (ESI) m/z: 262,5 [М-Н]⁺. [М-Н]^- рассчитано: 261,1. ¹Н-ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 7,86-7,79(м, 2Н), 7,73-7,66 (м, 2Н), 3,67 (т, J=7,4 Гц, 2Н), 3,34 (т, J=6,5 Гц, 2Н), 3,30 (с, 3H), 1,68 (п, J=6,1, 5,6 Гц, 2Н), 1,56 (п, J=6,6 Гц, 2Н), 1,43-1,31 (м, 4Н).

2-(8,8,8-трифтороктил)изоиндолин-1,3-дион (соединение 4.3, схема 4).

Указанное в заголовке соединение синтезировали, следуя ранее описанной общей методике I, с использованием фталимида калия 4.1 (300 мг, 1,60 ммоль) и промежуточного 8-бром-1,1,1-трифтороктана (0,4 мл, 2,08 ммоль) в безводном N,N-диметилформамиде (5,5 мл). После очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (циклогексан/EtOAc 85:15) получали чистое указанное в заголовке соединение (392,63 мг, выход 75%). Определение характеристик: Rt = 1,76 мин; MS (ESI) m/z: 314,4 [М-Н]⁺. [М-Н]^- рассчитано: 313,1. ¹Н-ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 7,86-7,81 (м, 2Н), 7,73-7,67 (м, 2Н), 3,70-3,65 (м, 2Н), 2,11-1,97 (м, 2Н), 1,68 (п, J=7,2 Гц, 2Н), 1,58-1,47 (м, 2Н), 1,39-1,30 (м, 6Н).

Общая методика J для синтеза соединений 4.4-4.5 (реакция J, схема 4).

Соответствующее промежуточное соединение 4.2 или 4.3 (1 ммоль) нагревали с обратным холодильником в абсолютном этаноле (1,2 ммоль) с гидразингидратом (1,5 ммоль) в течение 4 часов. После завершения реакции, смесь охлаждали при комнатной температуре, и фильтровали полученное выпавшее в осадок твердое вещество. Твердое вещество промывали этанолом и концентрировали досуха в условиях низкого давления. После очистки методом флэш-хроматографии на щелочном оксиде алюминия в результате получали чистые указанные в заголовке амины.

б-метоксигексан-1-амин (соединение 4.4, схема 4).

Указанное в заголовке соединение синтезировали, следуя ранее описанной общей методике J, с использованием промежуточного соединения 4.2 (356 мг, 1,35 ммоль) и гидразингидрата (0,15 мл, 2,02 ммоль) в абсолютном этаноле (5,5 мл). После очистки методом флэш-хроматографии на щелочном оксиде алюминия (дихлорметан/метанол 90:10) получали чистое указанное в заголовке соединение (127,55 мг, выход 7%). Определение характеристик: Rt = 1,00 мин; MS (ESI) m/z: 132,4 [М-Н]⁺. [М-Н]^- рассчитано: 131,1. ¹Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 3,29 (т, J=6,5 Гц, 2Н), 3,20 (с, 3H), 1,51-1,43 (м, 2Н), 2,68 (п, J=6,2 Гц, 2Н), 1,37-1,21 (м, 6Н)

8,8,8-трифтороктан-1-амин (соединение 4.5, схема 4).

Указанное в заголовке соединение синтезировали, следуя ранее описанной общей методике J, с использованием промежуточного соединения 4.3 (393 мг, 1,24 ммоль) и гидразингидрата (0,14 мл, 1,86 ммоль) в абсолютном этаноле (5,5 мл). После очистки методом флэш-хроматографии на щелочном оксиде алюминия (дихлорметан/метанол 95:5) получали чистое указанное в заголовке соединение (136,31 мг, выход 60%). Определение характеристик: Rt = 1,59 мин; MS (ESI) m/z: 184,4 [М-Н]⁺. [М-Н]^- рассчитано: 183,1. ¹Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 2,78-2,68 (м, 2Н), 2,30-2,15 (м, 2Н), 1,61-1,41 (м, 4Н), 1,38-1,21 (м, 6Н).

Общая методика К для синтеза соединений 5.2-5.4 (схема 5).

4-фтор-3-хлорсульфонилбензойную кислоту 3.1 (1 ммоль), растворенную в 2 мл THF, по каплям добавляли к 8 мл ледяного раствора соответствующего циклического амина (3 ммоль) в THF, и перемешивали в течение 1 ч при к.т. После завершения реакции, реакционную смесь упаривали досуха, и обрабатывали остаток водой и HCl. Выпавший в осадок продукт фильтровали и промывали водой с получением чистых указанных в заголовке соединений.

4-фтор-3-пирролидин-1-илсульфонилбензойная кислота (соединение 5.2, схема 5).

Указанное в заголовке соединение синтезировали, следуя ранее описанной общей методике К, с использованием промежуточного соединения 3.1 (250 мг, 1,04 ммоль) и пирролидина (0,26 мл, 3,11 ммоль) в THF (8 мл). После описанного выделения продукта реакции получали чистое указанное в заголовке соединение (243,2 мг, выход 85%). Определение характеристик: Rt = 1,17 мин; MS (ESI) m/z: 272,4 [М-Н]^-. [М-Н]^- рассчитано: 273,05. ¹Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 8,30 (дд, J=6,8, 2,3 Гц, 1Н), 8,25 (ддд, J=8,6, 4,8, 2,3 Гц, 1Н), 7,62 (дд, J=10,1, 8,6 Гц, 1Н), 3,28-3,21 (м, 4Н), 1,81-1,73 (м, 4Н).

4-фтор-3-(1-пиперидилсульфонил)бензойная кислота (соединение 5.3, схема 5).

Указанное в заголовке соединение синтезировали, следуя ранее описанной общей методике К, с использованием промежуточного соединения 3.1 (250 мг, 1,04 ммоль) и пиперидина (0,31 мл, 3,11 ммоль) в THF (8 мл). После описанного выделения продукта реакции получали чистое указанное в заголовке соединение (257,3 мг, выход 86%). Определение характеристик: Rt = 1,34 мин; MS (ESI) m/z: 286,4 [М-Н]^-. [М-Н]^- рассчитано: 287,06. ¹Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 8,28-8,23 (м, 2Н), 7,65-7,58 (м, 1Н), 3,08 (т, J=5,4 Гц, 4Н), 1,58-1,49 (м, 4Н), 1,46-1,39 (м, 2Н).

4-фтор-3-морфолиносульфонилбензойная кислота (соединение 5.4, схема 5).

Указанное в заголовке соединение синтезировали, следуя ранее описанной общей методике К, с использованием промежуточного соединения 3.1 (250 мг, 1,04 ммоль) иморфолина (0,27 мл, 3,11 ммоль) в THF (8 мл). После описанного выделения продукта реакции получали чистое указанное в заголовке соединение (248,1 мг, выход 83%). Определение характеристик: Rt = 1,03 мин; MS (ESI) m/z: 288,4 [М-Н]^-. [М-Н]^- рассчитано: 289,04. ¹Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 8,32-8,24 (м, 2Н), 7,64 (дд, J=10,1, 8,5 Гц, 1Н), 3,67-3,60 (м, 4Н), 3,10-3,04 (м, 4Н).

3-пирролидин-1-илсульфонил-4-(8,8,8-трифтороктиламино)бензойная кислота (соединение 5.5, схема 5).

Указанное в заголовке соединение синтезировали, следуя ранее описанной общей методике Н, с использованием промежуточного соединения 5.2 (50 мг, 0,17 ммоль) и промежуточного соединения 4.5 (34,8 мг, 0,19 ммоль) в безводном 1,4-диоксане (0,55 мл). После растирания с диэтиловым эфиром (1 мл) получали чистое указанное в заголовке соединение (17,3 мг, выход 23%). Определение характеристик: Rt = 2,30 мин; MS (ESI) m/z: 435,5 [М-Н]^-. [М-Н]^- рассчитано: 436,2. ¹Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 8,11 (д, J=2,1 Гц, 1Н), 7,92 (дд, J=8,8, 2,1 Гц, 1Н), 6,89 (д, J=8,9 Гц, 1Н), 6,74 (т, J=5,3 Гц, 1Н), 3,24 (кв, J=6,7 Гц, 2Н), 3,18-3,11 (м, 4Н), 2,29-2,14 (м, 2Н), 1,79-1,68 (м, 4Н), 1,57 (м, 2Н), 1,46 (m=, 2Н), 1,33 (с, 6Н).

3-(1-пиперидилсульфонил)-4-(8,8,8-трифтороктиламино)бензойная кислота (соединение 5.6, схема 5).

Указанное в заголовке соединение синтезировали, следуя ранее описанной общей методике Н, с использованием промежуточного соединения 5.3 (50 мг, 0,17 ммоль) и промежуточного соединения 4.5 (34,8 мг, 0,19 ммоль) в безводном 1,4-диоксане (0,55 мл). После растирания с диэтиловым эфиром (1 мл) получали чистое указанное в заголовке соединение (13 мг, выход 17%). Определение характеристик: Rt = 2,40 мин; MS (ESI) m/z: 449,5 [М-Н]^-. [М-Н]^- рассчитано: 450,2. ¹Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 8,04 (д, J=2,1 Гц, 1Н), 7,92 (дд, J=8,8, 2,1 Гц, 1Н), 6,89 (д, J=9,0 Гц, 1Н), 6,69 (т, J=5,4 Гц, 1Н), 3,24 (кв, J=6,7 Гц, 2Н), 2,98 (т, J=5,4 Гц, 4Н), 2,29-2,15 (м, 2Н), 1,62-1,55 (м, 2Н), 1,55-1,43 (м, 6Н), 1,42-1,37 (м, 2Н), 1,37-1,30 (м, 6Н).

3-морфолиносульфонил-4-(8,8,8-трифтороктиламино)бензойная кислота (соединение 5.7, схема 5).

Указанное в заголовке соединение синтезировали, следуя ранее описанной общей методике Н, с использованием промежуточного соединения 5.4 (50 мг, 0,17 ммоль) и промежуточного соединения 4.5 (34,8 мг, 0,19 ммоль) в безводном 1,4-диоксане (0,55 мл). После растирания с диэтиловым эфиром (1 мл) получали чистое указанное в заголовке соединение (28,4 мг, выход 37%). Определение характеристик: Rt = 2,21 мин; MS (ESI) m/z: 451,2 [М-Н]^-. [М-Н]^- рассчитано: 452,16. ¹Н-ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 8,33 (д, J=2,1 Гц, 1Н), 8,07 (дд, J=8,9, 2,1 Гц, 1Н), 6,87 (т, J=5,0 Гц, 1Н), 6,74 (д, J=9,0 Гц, 1Н), 3,77-3,70 (м, 4Н), 3,21 (кв, J=7,0 Гц, 2Н), 3,12-3,06 (м, 4Н), 2,14-1,99 (м, 2Н), 1,73-1,63 (м, 2Н), 1,61-1,50 (м, 2Н), 1,48-1,32 (м, 6Н).

5-циано-2-фтор-N,N-диметилбензолсульфонамид (соединение 6.2, реакция L, схема 6).

5-Циано-2-фторбензол-1-сульфонилхлорид 6.1 (300 мг, 1,35 ммоль), растворенный в 3,5 мл THF, по каплям добавляли к ледяному раствору 2 М диметиламина в THF (0,74 мл, 1,49 ммоль) и N,N-диизопропилэтиламина (0,48 мл, 2,70 ммоль) в 10 мл THF, а затем перемешивали в течение 30 минут при к.т. После завершения реакции, реакционную смесь упаривали досуха, и остаток распределяли между этилацетатом (50 мл) и водой (50 мл), и разделяли слои. Органический слой сушили над Na₂SO₄ и концентрировали досуха в условиях низкого давления. После очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (циклогексан/DCM+1% EtOAc от 70:30 до 30:70) получали чистое указанное в заголовке соединение (194,2 мг, выход 63%). Определение характеристик: ¹Н-ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 8,20 (дд, J=6,2, 2,2 Гц, 1Н), 7,87 (ддд, J=8,6, 4,4, 2,2 Гц, 1Н), 7,36 (т, J=8,9 Гц, 1Н), 2,89 (д, J=1,9 Гц, 6Н).

5-циано-N,N-диметил-2-(8,8,8-трифтороктиламино)бензолсульфонамид (соединение 6.3, схема 6).

Указанное в заголовке соединение синтезировали, следуя ранее описанной общей методике Н, с использованием промежуточного соединения 6.2 (194 мг, 0,84 ммоль) и промежуточного соединения 4.5 (311,5 мг, 1,64 ммоль) в безводном 1,4-диоксане (4,2 мл). После растирания с диэтиловым эфиром (3 мл) получали чистое указанное в заголовке соединение (317,2 мг, выход 97%). Определение характеристик: Rt = 1,82 мин; MS (ESI) m/z: 390,3 [М-Н]^-. [М-Н]^- рассчитано: 391,15. ¹Н-ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 7,87 (д, J=2,0 Гц, 1Н), 7,57 (дд, J=8,8, 2,1 Гц, 1Н), 6,85 (с, 1Н), 6,72 (д, J=8,8 Гц, 1Н), 3,23-3,13 (м, 2Н), 2,77 (с, 6Н), 2,14-1,98 (м, 2Н), 1,73-1,61 (м, 2Н), 1,60-1,48 (м, 4Н), 1,46-1,33 (м, 6Н).

4-фтор-2-гидрокси-5-сульфамоилбензойная кислота (соединение 7.3, реакция М, схема 7)

4-Фтор-2-гидроксибензойную кислоту 7.1 (2 г, 12,81 ммоль) перемешивали в хлорсульфоновой кислоте (4,30 мл, 64,06 ммоль) при 120°С в течение 4 ч. После завершения реакции, смесь медленно вливали на холодную воду со льдом (50 мл), и собирали полученное выпавшее в осадок твердое вещество путем фильтрования с получением промежуточного соединения 7.2. Это промежуточное соединение (1,12 г, 4,35 ммоль) быстро растворяли в 10 мл THF и добавляли к ледяному раствору 0,83 мл 20% водного NH₄OH (4,35 ммоль) и триметиламина (0,61 мл, 4,34 ммоль) в 30 мл тетрагидрофурана. Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 8 часов. После завершения реакции, смесь упаривали досуха в условиях низкого давления, остаток обрабатывали насыщенным водным раствором NH₄Cl (50 мл) и дважды экстрагировали EtOAc (2×50 мл). Объединенные органические слои сушили над Na₂SO₄ и концентрировали досуха в условиях низкого давления с получением чистого указанного в заголовке соединения (915,9 мг, выход 30% после двух стадий). Определение характеристик: Rt = 1,15 мин; MS (ESI) m/z: 234,3 [М-Н]^-. [М-Н]^- рассчитано: 235. ¹Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 8,21 (д, J=8,5 Гц, 1Н), 7,61 (с, 2Н), 7,03 (д, J=11,7 Гц, 1Н).

2-гидрокси-5-сульфамоил-4-(8,8,8-трифтороктиламино)бензойная кислота (соединение 7.4, схема 7).

Указанное в заголовке соединение синтезировали, следуя ранее описанной общей методике Н, с использованием промежуточного соединения 7.3 (250 мг, 1,02 ммоль) и промежуточного соединения 4.5 (377,7 мг, 2,04 ммоль) в безводном 1,4-диоксане (3,4 мл). После растирания с циклогексаном (3 мл) получали чистое указанное в заголовке соединение (286 мг, выход 69%). Определение характеристик: Rt = 1,81 мин; MS (ESI) m/z: 397,3 [М-Н]^-. [М-Н]^- рассчитано: 398,1. ¹H-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 8,10 (с, 1Н), 7,32 (с, 2Н), 6,36 (т, J=5,3 Гц, 1Н), 6,12 (с, 1Н), 3,18 (кв, J=6,8 Гц, 2Н), 2,29-2,15 (м, 2Н), 1,64-1,54 (м, 2Н), 1,52-1,42 (м, 2Н), 1,41-1,29 (м, 6Н).

трет-бутил-4-(5,5,5-трифторпентил)пиперазин-1-карбоксилат (соединение 8.2, реакция N, схема 8).

К раствору 1-boc-пиперазина 8.1 (400 мг, 2,15 ммоль) в ацетонитриле (5 мл), охлажденному при 0°С, добавляли 5-йод-1,1,1-трифторпентан (0,25 мл, 3,22 ммоль) и N,N-диизопропилэтиламин (0,57 мл, 3,22 ммоль), и перемешивали реакционную смесь при комнатной температуре в течение 24 часов. После завершения реакции, неочищенную реакционную смесь концентрировали досуха в условиях низкого давления. Остаток растворяли в EtOAc (25 мл) и промывали водой (25 мл) и солевым раствором (25 мл). Органический слой сушили над Na₂SO₄ и концентрировали досуха в условиях низкого давления. После очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (дихлорметан/метанол 98:2) получали чистое указанное в заголовке соединение (378,9 мг, выход 92%). Определение характеристик: Rt = 2,02; MS (ESI) m/z: 311,5 [M-H]⁺. [М-Н]^- рассчитано: 310,2. ¹Н-ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 3,42 (т, J=4,7 Гц, 4Н), 2,41-2,31 (м, 6Н), 2,16-2,02 (м, 2Н), 1,63-1,50 (м, 4Н), 1,45 (с, 9Н).

1-(5,5,5-трифторпентил)пиперазина дитрифторацетат (соединение 8.3, реакция О, схема 8)

Промежуточное соединение 8.2 (378,9 мг, 2,01 ммоль) перемешивали в чистой трифторуксусной кислоте (1,5 мл) при комнатной температуре в течение 1,5 часов. После завершения реакции, неочищенную реакционную смесь разбавляли DCM и концентрировали досуха в условиях низкого давления трижды (3×10 мл) и одни раз МеОН (10 мл) с получением чистого указанного в заголовке соединения (717,5 мг, выход 81%). Определение характеристик: ¹Н-ЯМР (400 МГц, метанол-d₄) δ 3,59-3,48 (м, 8Н), 3,31-3,28 (м, 2Н), 3,22-3,15 (м, 2Н), 2,30-2,17 (м, 2Н), 1,87-1,78 (м, 2Н), 1,68-1,59 (м, 2Н).

3-(диметилсульфамоил)-4-[4-(5,5,5-трифторпент ил) пиперазин-1-ил]бензойная кислота (соединение 9.1, реакция Р, схема 9)

В атмосфере аргона, к раствору промежуточного соединения 8.3 (106,4 мг, 0,24 ммоль) и триэтиламина (0,14 мл, 1,00 ммоль) в безводном 1,4-диоксане (1 мл) добавляли промежуточное соединение 3.3 (50 мг, 0,20 ммоль), растворенное в 1,4-диоксане (1 мл), и перемешивали реакционную смесь при 100°С в течение 24 часов. После завершения реакции, неочищенную реакционную смесь распределяли между этилацетатом (25 мл) и насыщенным раствором NH₄Cl (25 мл), и корректировали до рН 3 добавлением концентрированной HCl. Слои разделяли, и промывали водный слой диэтиловым эфиром (25 мл). Водный слой затем нейтрализовали до рН 7 и экстрагировали этилацетатом (3×25 мл) и DCM (25 мл). Объединенные органические слои сушили над Na₂SO₄ и концентрировали досуха в условиях низкого давления. После растирания с диэтиловым эфиром (2 мл) получали чистое указанное в заголовке соединение (26,7 мг, выход 30%). Определение характеристик: Rt = 1,31; MS (ESI) m/z: 436,5 [М-Н]^-. [М-Н]^- рассчитано: 437,2. ¹Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 8,33 (д, J=2,1 Гц, 1Н), 8,12 (дд, J=8,3, 2,2 Гц, 1Н), 7,56 (д, J=8,4 Гц, 1Н), 3,08-2,99 (м, 4Н), 2,67 (с, 6Н), 2,57-2,53 (м, 4Н), 2,40-2,34 (м, 2Н), 2,34-2,18 (м, 2Н), 1,58-1,46 (м, 4Н).

N,N-диметил-5-(1Н-тетразол-5-ил)-2-(8,8,8-трифтороктиламино)-бензолсульфонамид (соединение 10.1, схема 10, фигура 12).

Смесь промежуточного соединения 6.3 (317,2 мг, 0,8 ммоль), азида натрия (63,2 мг, 0,96 ммоль) и хлорида цинка (132,6 мг, 0,96 ммоль) перемешивали в 4 мл н-бутанола при 110°С в течение 10 часов. После завершения реакции, реакционную смесь упаривали досуха в условиях низкого давления. Затем, добавляли 5% NaOH (20 мл), и перемешивали смесь в течение 20 мин. Полученную суспензию фильтровали, и промывали твердое вещество 5% NaOH (10 мл). Фильтрат корректировали до рН 1,0 добавлением концентрированной HCl и трижды экстрагировали EtOAc (3×25 мл). Объединенные органические слои сушили над Na₂SO₄ и концентрировали досуха в условиях низкого давления. После очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (дихлорметан/метанол 98:2) в результате получали чистое указанное в заголовке соединение (110,93 мг, выход 32%). Определение характеристик: Rt = 0,77; MS (ESI) m/z: 433,3 [M-H]^-. [М-Н]^- рассчитано: 434,2. ¹Н-ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 8,25 (д, J=2,1 Гц, 1Н), 8,19 (дд, J=8,8, 2,2 Гц, 1Н), 6,85 (д, J=8,9 Гц, 1Н), 6,61 (с, 1Н), 3,19 (т, J=7,1 Гц, 2Н), 2,76 (с, 6Н), 2,14-1,98 (м, 2Н), 1,73-1,62 (м, 2Н), 1,61-1,49 (м, 2Н), 1,49-1,30 (м, 6Н).

5-(N,N-диметилсульфамоил)-4-фтор-2-гидроксибензойная кислота (соединение 12.1, схема 12).

4-Фтор-2-гидроксибензойную кислоту 7.1 (2 г, 12,81 ммоль) перемешивали в хлорсульфоновой кислоте (4,30 мл, 64,06 ммоль) при 120°С в течение 4 ч. После завершения реакции, смесь медленно вливали на холодную воду со льдом (50 мл), и собирали полученное выпавшее в осадок твердое вещество путем фильтрования. Собранное твердое вещество (1,141 г) растворяли в 10 мл THF и по каплям добавляли к ледяному раствору 2 М диметиламина в THF (3 мл) и DIPEA (3 мл) в 35 мл тетрагидрофурана. Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 8 часов. После завершения реакции, смесь упаривали досуха в условиях низкого давления, остаток обрабатывали насыщенным водным раствором NH₄Cl (50 мл) и дважды экстрагировали EtOAc (2×50 мл). Объединенные органические слои сушили над Na₂SO₄ и концентрировали досуха в условиях низкого давления с получением чистого указанного в заголовке соединения (823,9 мг, выход 70%). UPLC/MS: Rt = 1,19 мин (градиент 1); MS (ESI) m/z: 262,0 [М-Н]^-. [М-Н]^- рассчитано: 262,0. ¹Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 8,15 (д, J=8,2 Гц, 1Н), 7,13-7,03 (м, 1Н), 2,71 (д, J=1,7 Гц, 6Н).

метил-5-(N,N-диметилсульфамоил)-4-фтор-2-метоксибензоат (соединение 12.2, схема 12).

К ледяному раствору промежуточного соединения 12.1 (200 мг, 0,75 ммоль) в смеси DCM/MeOH (8:2, 9 мл) осторожно добавляли триметилсилилдиазометан (2Mb гексанах, 1,13 мл, 2,26 ммоль), и перемешивали реакционную смесь при комнатной температуре в течение 2 часов. После завершения реакции, реакционную смесь гасили добавлением 2 мл 1 М раствора уксусной кислоты в метаноле и упаривали досуха. Сухой остаток суспендировали в насыщенном водном растворе NaHCO₃ (15 мл) и дважды экстрагировали EtOAc (2×15 мл). После очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (циклогексан/EtOAc от 85:15 до 70:30) получали чистое указанное в заголовке соединение (201 мг, выход 92%) в виде белого твердого вещества. UPLC/MS: Rt = 1,75 мин (градиент 1); MS (ESI) m/z: 292,1 [М+Н]⁺. [М+Н]⁺ рассчитано: 292,0. ¹Н-ЯМР (600 МГц, хлороформ-d) δ 8,35 (д, 3=5,0 Гц, 1Н), 6,94 (д, 3=8,0 Гц, 1Н), 3,85 (с, 3H), 3,79 (с, 3H), 2,72 (с, 6Н).

метил-5-(N,N-диметилсульфамоил)-2-метокси-4-((8,8,8-трифтороктил)амино)-бензоат (соединение 12.3, схема 12).

Соединение 12.3 синтезировали, следуя ранее описанной общей методике

H, с использованием промежуточного соединения 12.2 (50 мг, 0,17 ммоль) и промежуточного соединения 4.5 (75,4 мг, 0,34 ммоль) в безводном 1,4-диоксане (0,85 мл). После очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (циклогексан/EtOAc от 80:15 до 75:25) получали чистое указанное в заголовке соединение (64,9 мг, выход 84%) в виде белого твердого вещества. UPLC/MS: Rt = 2,65 мин (градиент 1); MS (ESI) m/z: 455,3 [М+Н]⁺. [М+Н]⁺ рассчитано: 455,2. ¹Н-ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 8,23 (с, 1Н), 6,77 (т, 3=4,8 Гц, 1Н), 6,10 (с, 1Н), 3,97 (с, 3H), 3,84 (с, 3H), 3,22-3,16 (м, 2Н), 2,75 (с, 6Н), 2,14-2,04 (м, 2Н),

I, 72 (п, 3=7,1 Гц, 2Н), 1,60-1,55 (м, 4Н), 1,45 (дд, 3=5,0, 2,0 Гц, 2Н), 1,41 (дд, 3=3,9, 2,6 Гц, 4Н).

метил-5-(N,N-диметилсульфамоил)-2-гидрокси-4-((8,8,8-трифтороктил)амино)-бензоат (соединение 12.4, схема 12).

В атмосфере аргона, к ледяному раствору промежуточного соединения 12.3 (50 мг, 0,11 ммоль), растворенного в DCM (1,2 мл), по каплям добавляли BBr₃ (1 Mb DCM, 0,55 мл, 0,55 ммоль), и перемешивали смесь при комнатной температуре в течение 6 часов. После завершения реакции, реакционную смесь охлаждали до 0°С, гасили добавлением 2 мл метанола и упаривали досуха. Неочищенный сухой остаток затем распределяли между EtOAc (10 мл) и насыщенным раствором NH₄Cl (10 мл), и разделяли слои. Органический слой сушили над Na₂SO₄ и концентрировали досуха в условиях низкого давления. После очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (циклогексан/EtOAc 95:05) получали чистое указанное в заголовке соединение (40,2 мг, выход 83%) в виде белого твердого вещества. UPLC/MS: Rt = 2,10 мин (градиент 1); MS (ESI) m/z: 441,3 [М-Н]⁺. [М+Н]⁺ рассчитано: 441,1. ¹Н-ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 11,26 (с, 1Н), 8,17 (с, 1Н), 6,73 (т, 3=4,6 Гц, 1Н), 6,16 (с, 1Н), 3,92 (с, 3H), 3,16 (кв, 3=7,1, 5,0 Гц, 2Н), 2,75 (с, 6Н), 2,15-1,99 (м, 2Н), 1,74-1,63 (м, 2Н), 1,62-1,54 (м, 2Н), 1,48-1,35 (м, 6Н).

метил-5-(N,N-диметилсульфамоил)-2-этокси-4-((8,8,8-трифтороктил)амино)бензоат (соединение 12.5, схема 12).

К раствору промежуточного соединения 12.4 (31,8 мг, 0,07 ммоль) в ацетонитриле (0,7 мл) добавляли этилйодид (10 мкл, 0,11 ммоль) и карбонат калия (15 мг, 0,11 ммоль), и перемешивали реакционную смесь при 80°С в течение 10 часов. После завершения реакции, неочищенную смесь распределяли между EtOAc (10 мл) и водой (10 мл), и разделяли слои. Органический слой сушили над Na₂SO₄ и концентрировали досуха в условиях низкого давления. После очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (циклогексан/EtOAc от 100:00 до 80:20) получали чистое указанное в заголовке соединение (25,6 мг, выход 78%) в виде белого твердого вещества. UPLC/MS: Rt = 1,85 мин (градиент 1); MS (ESI) m/z: 469,3 [М+Н]⁺. [М+Н]⁺ рассчитано: 469,2. ¹Н-ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 8,20 (с, 1Н), 6,71 (т, J=4,8 Гц, 1Н), 6,07 (с, 1Н), 4,14 (кв, J=7,0 Гц, 2Н), 3,82 (с, 3H), 3,18-3,11 (м, 2Н), 2,72 (с, 6Н), 2,13-1,99 (м, 2Н), 1,73-1,64 (м, 2Н), 1,61-1,53 (м, 2Н), 1,51 (т, J=6,9 Гц, 3H), 1,48-1,35 (м, 6Н).

5- (N,N-диметилсульфамоил)-2-этокси-4- ((8,8,8-трифтороктил)амино)бензойная кислота (соединение 12.7, схема 12).

К раствору соединения 12.5 (25,6 мг, 0,05 ммоль) в тетрагидрофуране (0,5 мл) добавляли 1 М водный раствор LiOH (0,27 мл, 0,27 ммоль), и перемешивали реакционную смесь при комнатной температуре в течение 16 ч. После завершения реакции, неочищенную смесь распределяли между EtOAc (10 мл) и насыщенным раствором NH₄Cl (10 мл), и разделяли слои. Органический слой сушили над Na₂SO₄ и концентрировали досуха в условиях низкого давления. После растирания с циклогексаном получали чистое указанное в заголовке соединение (19,54 мг, выход 86%) в виде белого твердого вещества. UPLC/MS: Rt = 1,32 мин (градиент 1); MS (ESI) m/z: 453,3 [М-Н]^-. [М-Н]^- рассчитано: 453,2. ¹H-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 7,95 (с, 1Н), 6,62 (т, J=5,2 Гц, 1Н), 6,23 (с, 1Н), 4,15 (кв, J=6,9 Гц, 2Н), 3,23 (кв, J=6,5 Гц, 2Н), 2,60 (с, 6Н), 2,29-2,14 (м, 2Н), 1,63-1,52 (м, 2Н), 1,51-1,42 (м, 2Н), 1,40-1,25 (м, 9Н).

метил-2-(циклопентилокси)-5-(N,N-диметилсульфамоил)-4-((8,8,8-трифтороктил)-амино)бензоат (соединение 12.6, схема 12).

К раствору промежуточного соединения 12.4 (30,0 мг, 0,07 ммоль) в ацетонитриле (0,7 мл) добавляли циклопентилбромид (15 мкл, 0,13 ммоль) и карбонат калия (28,3 мг, 0,20 ммоль), и перемешивали реакционную смесь при 80°С в течение 4 часов. После завершения реакции, неочищенную смесь распределяли между EtOAc (10 мл) и водой (10 мл), и разделяли слои. Органический слой сушили над Na₂SO₄ и концентрировали досуха в условиях низкого давления. После очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (циклогексан/EtOAc от 100:00 до 90:10) получали чистое указанное в заголовке соединение (25,6 мг, выход 72%) в виде белого твердого вещества. UPLC/MS: Rt = 2,30 мин (градиент 2); MS (ESI) m/z: 509,2 [М+Н]⁺. [М+Н]⁺ рассчитано: 509,6. ¹Н-ЯМР (400 МГц, хлороформ-с/) δ 8,19 (с, 1Н), 6,69 (т, J=4,8 Гц, 1Н), 6,07 (с, 1Н), 4,88-4,81 (м, 1Н), 3,80 (с, 3H), 3,19-3,10 (м, 2Н), 2,72 (с, 6Н), 2,13-1,99 (м, 2Н), 1,99-1,92 (м, 4Н), 1,91-1,81 (м, 2Н), 1,73-1,62 (м, 2Н), 1,61-1,51 (м, 2Н), 1,49-1,34 (м, 6Н).

2-0(циклопентилокси)-5-(N,N-диметилсульфамоил)-4-((8,8,8-трифтороктил)амино)бензойная кислота (соединение 12.8, схема 12).

К раствору промежуточного соединения 12.6 (25,6 мг, 0,05 ммоль), растворенного в тетрагидрофуране (0,25 мл), добавляли 1 М водный раствор LiOH (0,5 мл, 0,25 ммоль), и перемешивали смесь при комнатной температуре в течение 16 часов. После завершения реакции, неочищенную смесь распределяли между EtOAc (10 мл) и насыщенным раствором NH4Cl (10 мл), и разделяли слои. Органический слой сушили над Na₂SO₄ и концентрировали досуха в условиях низкого давления. После растирания с циклогексаном получали чистое указанное в заголовке соединение (16,3 мг, выход 66%) в виде белого твердого вещества. UPLC/MS: Rt = 1,80 мин (градиент 1); MS (ESI) m/z: 493,3 [М-Н]^-. [М-Н]^- рассчитано: 493,2. ¹Н-ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 8,40 (с, 1Н), 6,94 (с, 1Н), 6,12 (с, 1Н), 5,09-5,03 (м, 1Н), 3,20-3,13 (м, 2Н), 2,75 (с, 6Н), 2,14-1,97 (м, 5Н), 1,93-1,81 (м, 2Н), 1,81-1,65 (м, 4Н), 1,61-1,51 (м, 4Н), 1,50-1,33 (м, 6Н).

5-(N,N-диметилсульфамоил)-2-метокси-4-((8,8,8-трифтороктил)амино)бензойная кислота (соединение 13.1, схема 13).

К раствору промежуточного соединения 12.3 (59 мг, 0,13 ммоль), растворенного в тетрагидрофуране (1,3 мл), добавляли 1 М водный раствор LiOH (0,26 мл, 0,26 ммоль), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов. После завершения реакции, неочищенную смесь распределяли между EtOAc (10 мл) и насыщенным раствором NH₄Cl (10 мл), и разделяли слои. Органический слой сушили над Na₂SO₄ и концентрировали досуха в условиях низкого давления. После растирания с циклогексаном получали чистое указанное в заголовке соединение (41,2 мг, выход 72%) в виде белого твердого вещества. UPLC/MS: Rt = 1,16 мин (градиент 1); MS (ESI) m/z: 439,5 [М-Н]^-. [М-Н]^- рассчитано: 439,2. ¹Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 7,98 (с, 1Н), 6,65 (т, J=5,2 Гц, 1Н), 6,26 (с, 1Н), 3,88 (с, 3H), 3,29-3,22 (м, 2Н), 2,61 (с, 6Н), 1,65-1,55 (м, 2Н), 1,52-1,42 (м, 4Н), 1,39-1,29 (м, 6Н).

4-фтор-3-(N-(тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)сульфамоил)бензойная кислота (соединение 14.1, схема 14).

Указанное в заголовке соединение синтезировали, следуя ранее описанной общей методике G, с использованием промежуточного соединения 3.1 (250 мг, 1,04 ммоль) и тетрагидро-2Н-пиран-4-амина (0,32 мл, 2,07 ммоль) в THF (8,5 мл). После описанного выделения продукта реакции получали чистое указанное в заголовке соединение (160,9 мг, выход 51%) в виде белого твердого вещества. UPLC/MS: Rt = 0,93 мин (градиент 1); MS (ESI) m/z: 302,1 [М-Н]^-. [М-Н]^- рассчитано: 302,06. ¹Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 8,34 (дд, J=7,1, 2,3 Гц, 1Н), 8,27 (д, J=7,8 Гц, 1Н), 8,24-8,18 (м, 1Н), 7,57 (т, J=9,3 Гц, 1Н), 3,77-3,68 (м, 2Н), 3,27-3,19 (м, 3H), 1,58-1,49 (м, 2Н), 1,49-1,37 (м, 2Н).

3-((4,4-дифторпиперидин-1-ил)сульфонил)-4-фторбензойная кислота (соединение 14.2, схема 14).

Указанное в заголовке соединение синтезировали, следуя ранее описанной общей методике К, с использованием промежуточного соединения 3.1 (150 мг, 0,62 ммоль), гидрохлорида 4,4-дифторпиперидина (198,1 мг, 1,24 ммоль) и DIPEA (0,33 мл, 1,87 ммоль) в THF (5,0 мл). После завершения реакции, реакционную смесь упаривали досуха. После описанного выделения продукта реакции получали чистое указанное в заголовке соединение (176,4 мг, выход 88%) в виде белого твердого вещества. UPLC/MS: Rt = 1,38 мин (градиент 1); MS (ESI) m/z: 322,0 [М-Н]^-. [М-Н]^- рассчитано: 322,04. ¹Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 8,31-8,25 (м, 2Н), 7,67-7,60 (м, 1Н), 3,29 (т, J=5,8 Гц, 4Н), 2,07 (ддд, J=19,7, 13,7, 5,8 Гц, 4Н).

3-морфолиносульфонил-4-((8,8,8-трифтороктил)амино)бензойная кислота (соединение 14.3, схема 14).

Указанное в заголовке соединение синтезировали, следуя ранее описанной общей методике Н, с использованием промежуточного соединения 14.2 (50 мг, 0,17 ммоль) и промежуточного соединения 4.5 (34,8 мг, 0,19 ммоль) в безводном 1,4-диоксане (0,55 мл). После очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (CH₂Cl₂/МеОН от 100:0 до 98:02) и последующего растирания с диэтиловым эфиром (1 мл) получали чистое указанное в заголовке соединение (28,4 мг, выход 37%) в виде белого твердого вещества. UPLC/MS: Rt = 2,21 мин (градиент 1); MS (ESI) m/z: 451,2 [М-Н]^-. [М-Н]^- рассчитано: 451,2. ¹Н-ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) 5 8,33 (д, J=2,1 Гц, 1Н), 8,07 (дд, J=8,9, 2,1 Гц, 1Н), 6,87 (т, J=5,0 Гц, 1Н), 6,74 (д, J=9,0 Гц, 1Н), 3,77-3,70 (м, 4Н), 3,21 (кв, J=7,0 Гц, 2H), 3,12-3,06 (м, 4Н), 2,14-1,99 (м, 2Н), 1,73-1,63 (м, 2Н), 1,61-1,50 (м, 2Н), 1,48-1,32 (м, 6Н).

3-((4,4-дифторпиперидин-1-ил)сульфонил)-4-((8,8,8-трифтороктил)амино)-бензойная кислота (соединение 14.4, схема 14).

Указанное в заголовке соединение синтезировали, следуя ранее описанной общей методике Н, с использованием промежуточного соединения 14.1 (50 мг, 0,15 ммоль) и промежуточного соединения 4.5 (34,8 мг, 0,19 ммоль) в безводном 1,4-диоксане (0,55 мл). После очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (CH₂Cl₂/МеОН от 100:0 до 98:02) и последующего растирания с петролейным эфиром (1 мл) получали чистое указанное в заголовке соединение (22,6 мг, выход 31%) в виде белого твердого вещества. UPLC/MS: Rt = 2,39 мин (градиент 1); MS (ESI) m/z: 485,2 [М-Н]^-. [М-Н]^- рассчитано: 485,2. ¹Н-ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 8,35 (д, J=2,0 Гц, 1Н), 8,08 (дд, J=8,9, 2,1 Гц, 1Н), 6,78 (т, J=5,0 Гц, 1Н), 6,74 (д, J=9,0 Гц, 1Н), 3,31 (т, J=5,8 Гц, 4Н), 3,25-3,18 (м, 2Н), 2,14-2,00 (м, 6Н), 1,69 (п, J=7,0 Гц, 2Н), 1,62-1,52 (м, 2Н), 1,49-1,35 (м, 6Н).

3-(диметилсульфамоил)-4-(гепт-6-ениламино)бензойная кислота (соединение 15.1, схема 15).

Указанное в заголовке соединение синтезировали, следуя ранее описанной общей методике Н, с использованием промежуточного соединения 3.3 (420 мг, 1,68 ммоль) и гепт-6-ен-1-амина гидрохлорида (335,6 мг, 1,68 ммоль) в безводном 1,4-диоксане (16,5 мл). После очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (CH₂Cl₂/МеОН от 100:0 до 98:02) и последующего растирания с диэтиловым эфиром (3 мл) получали чистое указанное в заголовке соединение (409,6 мг, выход 72%) в виде белого твердого вещества. UPLC/MS: Rt = 2,13 мин (градиент 1); MS (ESI) m/z: 439,2 [М-Н]^-. [М-Н]^- рассчитано: 339,1. ¹Н-ЯМР (400 МГц, хлороформ-с/) δ 8,34 (д, J=2,0 Гц, 1Н), 8,06 (дд, J=8,9, 2,1 Гц, 1Н), 6,91 (т, J=5,0 Гц, 1Н), 6,72 (д, J=9,0 Гц, 1Н), 5,80 (ддт, J=16,9, 10,2, 6,7 Гц, 1Н), 5,04-4,91 (м, 2Н), 3,24-3,18 (м, 2Н), 2,77 (с, 6Н), 2,13-2,02 (м, 2Н), 1,69 (п, J=7,0 Гц, 2Н), 1,49-1,39 (м, 4Н).

метил-3-(N,N-диметилсульфамоил)-4-(гепт-6-ен-1-иламино)бензоат (соединение 15.2, схема 12).

К ледяному раствору промежуточного соединения 15.1 (220 мг, 0,64 ммоль) в смеси DCM/MeOH (8:2, 8 мл) осторожно добавляли триметилсилилдиазометан (2 M в гексанах, 0,48 мл, 0,96 ммоль), и перемешивали реакционную смесь при комнатной температуре в течение 2 часов. После завершения реакции, реакционную смесь гасили добавлением 2 мл 1 М раствора уксусной кислоты в метаноле и упаривали досуха. Сухой остаток суспендировали в насыщенном водном растворе NaHCO₃ (15 мл) и дважды экстрагировали EtOAc (2×15 мл). После очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (циклогексан/EtOAc от 100:00 до 90:10) получали чистое указанное в заголовке соединение (213,2 мг, выход 94%) в виде белого твердого вещества. UPLC/MS: Rt = 1,81 мин (градиент 1); MS (ESI) m/z: 355,2 [М+Н]⁺. [М+Н]⁺рассчитано: 355,2. ¹Н-ЯМР (600 МГц, хлороформ-d) ¹Н-ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 8,28 (д, J=2,1 Гц, 1Н), 8,01 (дд, 3=8,9, 2,1 Гц, 1Н), 6,83-6,74 (м, 1Н), 6,70 (д, J=8,9 Гц, 1Н), 5,79 (ддт, J=16,9, 10,2, 6,7 Гц, 1Н), 5,04-4,92 (м, 2Н), 3,87 (с, 3H), 3,23-3,15 (м, 2Н), 2,75 (с, 6Н), 2,12-2,03 (м, 2Н), 1,74-1,63 (м, 2Н), 1,49-1,38 (м, 4Н).

метил-4-((8-бром-8,8-дифтороктил)амино)-3-(N,N-диметилсульфамоил)бензоат (соединение 15.3, схема 15).

В герметизированной стеклянной пробирке, к раствору промежуточного соединения 15.2 (213,2 мг, 0,62 ммоль) в THF (6,2 мл) добавляли бикарбонат калия (62,7 мг, 0,62 ммоль), эозиновую соль (23,8 мг 0,03 ммоль) и дибромдифторметан (0,12 мл, 1,24 ммоль). Реакционную смесь затем перемешивали при комнатной температуре в условиях облучения светом голубых LED (λ=460-470 нм) в течение 16 часов. После завершения реакции, реакционную смесь упаривали досуха. Сухой остаток суспендировали в воде (25 мл) и дважды экстрагировали EtOAc (2x25 мл). После очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (петролейный эфир/ТВМЕ от 100:00 до 80:20) получали чистое указанное в заголовке соединение (144,5 мг, выход 48%) в виде белого твердого вещества,15). UPLC/MS: Rt = 2,13 мин (градиент 2); MS (ESI) m/z: 485,0 [М+Н]⁺. [М+Н]⁺рассчитано: 485,08 ¹Н-ЯМР (600 МГц, хлороформ-d) δ 8,27 (д, J=2,1 Гц, 1Н), 8,02 (дд, J=8,9, 2,1 Гц, 1Н), 6,79 (т, J=5,0 Гц, 1Н), 6,70 (д, J=8,9 Гц, 1Н), 3,87 (с, 3H), 3,23-3,16 (м, 2Н), 2,76 (с, 6Н), 2,40-2,26 (м, 2Н), 1,72-1,55 (м, 6Н), 1,48-1,35 (м, 6Н).

4-[(8-бром-8,8-дифтороктил)амино]-3-(диметилсульфамоил)бензойная кислота (соединение 15.4, схема 15).

К раствору промежуточного соединения 15.3 (50 мг, 0,10 ммоль), растворенного в тетрагидрофуране (1,0 мл), добавляли 1 М водный раствор LiOH (0,42 мл, 0,2 ммоль), и перемешивали смесь при комнатной температуре в течение 16 часов. После завершения реакции, неочищенную смесь распределяли между EtOAc (10 мл) и насыщенным раствором NH₄Cl (10 мл), и разделяли слои. Органический слой сушили над Na₂SO₄ и концентрировали досуха в условиях низкого давления. После растирания с циклогексаном получали чистое указанное в заголовке соединение (40,1 мг, выход 85%) в виде белого твердого вещества. UPLC/MS: Rt = 1,22 мин (градиент 2); MS (ESI) m/z: 469,1 [М-Н]^-. [М-Н]^- рассчитано: 469,1. ¹Н-ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 8,29 (д, J=2,1 Гц, 1Н), 8,05 (дд, J=8,9, 2,1 Гц, 1Н), 6,83 (т, J=5,0 Гц, 1Н), 6,70 (д, J=8,9 Гц, 1Н), 3,25-3,18 (м, 2Н), 2,77 (с, 6Н), 2,42-2,28 (м, 2Н), 1,76-1,59 (м, 6Н), 1,51-1,38 (м, 6Н).

Пример 2: Данные по активности

Полученные данные приведены ниже в таблице 1.

В соответствии с одним вариантом осуществления настоящего изобретения, наиболее активными соединениями являются: соединения 1.7, 1.17, 2.2, 2.6, 2.7, 2.8, 2.9, 3.6, 3.7, 3.8, 3.9, 3.10, 3.11, 3.12, 3.13, 3.14, 3.17, 3.20, 3.21, 3.22, 5.5, 5.6, 5.7, 13.1, 14.4, 15.1.

Кинетический анализ хлорида

Для скрининга эффективности блокирования NKCC1 соединениями in vitro проводили функциональный анализ транспортера NKCC1 посредством измерения изменений концентраций ионов Cl^- в клетке с помощью чувствительно к Cl^- мембраны, меченой желтым флуоресцентным белком (mbYFPQS, Addgene). Флуоресценция mbYFPQS обратно зависит от концентрации Cl^- внутри клетки, позволяя тем самым проведение косвенной оценки активности транспортера Cl^-. В частности, клетки HEK293 трансфицировали NKCC1 или имитационным конструктом (контроль) вместе с Cl^--чувствительным YFP. Спустя 2 суток in vitro, клетки обрабатывали буметанидом и фуросемидом (в качестве положительных контролей) или каждым из тестируемых соединений согласно настоящему изобретению в среде без Cl^-. Спустя 30 минут, тестировали ингибирующую активность соединений путем мониторинга флуоресценции после добавления NaCl (Фиг. 1а). Транспортируемый NKCC1 Cl связывается с YFP, что приводит к снижению флуоресценции. По сравнению с клетками, трансфицированными имитационным конструктом, в клетках, трансфицированных NKCCl, обнаруживали сильное снижение уровней флуоресценции после добавления NaCl (Фиг. Ib). Предварительная инкубация с буметанидом в концентрации 10 мкМ и 100 мкМ значительно снижало этот эффект, тогда как предварительная инкубация с фуросемидом была эффективна лишь в концентрации 100 мкМ (Фиг. Ib). Более того, данные снова нормализовались вследствие снижения флуоресценции, наблюдаемой в клетках, трансфицированных имитационным конструктом, после добавления буметанида или фуросемида. С помощью кинетического анализа Cl была протестирована ингибирующую активность выбранных соединений в отношении NKCC1 (Фиг. Ic). Примечательно, что в концентрации 100 мкМ соединение 3.17 ингибировало NKCC1 лучше, чем буметанид и фуросемид.

Кинетический анализ кальция

Затем, соединения согласно настоящему изобретению были протестированы на их способность восстанавливать деполяризующий GABA-эргический путь передачи сигналов в незрелых нейронах. Этот эффект измеряли опосредованно по притоку кальция в клетки с помощью кинетического анализа кальция in vitro в первичных культурах нейронов гиппокампа. Кинетическим анализом кальция исследуют физиологическую, эндогенную, высокую экспрессию NKCC1 в незрелых нейронах, что вызывает деполяризующие эффекты GABA и может активировать потенциал-зависимые Са²⁺ каналы. Таким образом, считается, что в незрелых нейронах соединение, которое блокирует NKCC1, будет ингибировать Са²⁺-ответы после добавления GABA. Незрелые нейроны культивировали в течение 3 суток in vitro (3DIV), и на 15 минут вносили кальций-чувствительный краситель (Fluo4). Затем, нейроны обрабатывали буметанидом и фуросемидом (в качестве положительных контролей) или каждым из выбранных соединений в течение 15 минут. В качестве функционального индикатора, отслеживали уровень флуоресценции в этих культурах до и после добавления GABA (100 мкМ, в течение 20 с). Для тестирования жизнеспособности нейронов, в конце эксперимента добавляли KCl (90 мМ, в течение 40 с), который сильно деполяризует нейроны, вызывая мощную активацию потенциал-зависимых Са²⁺ каналов в живых клетках. Для количественной оценки ингибирующего влияния буметанида, фуросемида и выбранных соединений на NKCC1, значения флуоресценции после введения GABA нормировали к уровням флуоресценции после добавления KCl в обрабатываемых нейронах. Буметанид, фуросемид и каждое из выбранных соединений значительно снижали рост флуоресценции после добавления GABA по сравнению с контролями, обработанными несущей средой (DMSO). Они не влияли на уровни флуоресценции после добавления KCl (Фиг. 2а). Согласно кинетическому анализу хлорида (с YFP), выбранные соединения продемонстрировали оптимальную способность ингибировать Са²⁺-ответ после воздействия GABA (Фиг. 2b) со значениями флуоресценции, сравнимыми с буметанидом в концентрации 10 мкМ и даже превосходящими буметанид в концентрации 100 мкМ.

Фармакодинамические исследования

Выбранный ингибитор NKCC1, соединение 3.17, оценивали на растворимость в водных буферных растворах и стабильность в плазме крови и в I фазе метаболизма in vitro (Фиг. 3а). Соединение являлось высоко растворимым (>250 мкМ в PBS, рН 7,4) и высоко устойчивым к гидролизу и I фазе метаболизма (t_1/2>120 минут в плазме крови и t_1/2>60 минут в микросомах печени). Эти данные характеризуют настоящее соединение как обладающее многообещающей растворимостью и метаболической стабильностью in vitro.

Тест на когнитивные нарушения

Эффективность соединения 3.17 по восстановлению когнитивного нарушения оценивали в четырех различных когнитивных тестах на мышах Ts65Dn (Фиг. 4). Взрослые мышей Ts65Dn и их одно пометных особей дикого типа (возраст 2 месяца) обрабатывали в течение одной недели соединением 3.17 (интраперитонеально, 0,2 мг/кг) или несущей средой. В течение последующих трех недель животных тестировали с использованием четырех различных тестов, оценивая память и когнитивные функции: а) тест на обнаружение нового объекта (Deidda, G. et al. R₆versing exciltatory GABAAR signaling restores synaptic plastiClty and memory in a mouse model of Down syndrome. Nat Med 2015, 21 (4), 318-26; Contestabile, A. et al. Lithium rescues synaptic plasticilty and memory in Down syndrome mice. J Clin Invest 2013, 123 (1), 348-61); b) тест на название нового объекта (Deidda G. 2015; Fernandez, F., Garner, С.C, Object recognition memory is conserved in TslCje, a mouse model of Down syndrome. NeurosClence letters 2007, 421, 137-141); с) тест на прохождение Т-образного лабиринта (Belichenko, N. P. et al. The "Down syndrome critical region" is sufficient in the mouse model to confer behavioral, neurophysiological, and synaptic phenotypes characteristic of Down syndrome. J Neuroscil 2009, 29 (18), 5938-48) (протоколспонтанного нарушения, 11 испытаний); и d) тест на выработку условно-рефлекторного чувства страха (Deidda G. 2015; Costa, А. С.et al. Acute injections of the NMDA receptor antagonist memantine rescue performance deficits of the Ts65Dn mouse model of Down syndrome on a fear conditioning test. Neuropsychopharmacology 2008, 33 (7), 1624-32). Как и ожидалось, получавшие несущую среду мыши Ts65Dn продемонстрировали сниженную эффективность в сравнении с особями дикого типа. Лечение соединением 3.17 улучшало когнитивную деятельность у мышей Ts65Dn (Фиг. 4).

Пример 3: Данные по селективности в отношении NKCC1 в сравнении с NKCC2

Соединения согласно настоящему изобретению были протестированы на селективность ингибирования NKCC1 в сравнении с NKCC2, что приведено ниже в таблице 2.

На основании приведенных в качестве примера данных, представленных выше в Таблице 2, некоторые соединения демонстрируют лучшую селективность NKCC1/NKCC2.

В качестве преимущества, эти соединения не обладают побочным диуретическим эффектом.

В частности, упомянутое преимущество было показано для соединений 1.7, 1.15, 2.2, 2.6, 2.7, 2.8, 3.8, 3.13, 3.14 и 3.17, которые являются наиболее предпочтительными в рамках настоящего изобретения.

Метод анализа с таллием in vitro на клетках HEK

Метод анализа с таллием представляет собой стандартный метод, используемый для измерения активности транспортеров калия, подобных NKCC2, который является котранспортером калия и хлорида.

Метод анализа включает в себя мониторирование клеток после добавления таллия (который имитирует K⁺), а затем NaCl, который при вхождении в клетки посредством NKCC2 активируется в присутствии ионов хлорида, связывается с флуоресцентным красителем, определяя тем самым усиление флуоресценции. При этом методе анализа для быстрого и легкого скрининга лекарств проводят параллельное тестирование в 96 лунках. Более конкретно, эпителиальные клетки почки (HEK293) трансфицировали транспортерами NKCC2 или имитационным конструктом (контроль). Спустя двое суток, клетки добавляли к чувствительному к таллию флуоресцентному красителю в среде без Cl^-. После 1 часа инкубирования, тестировали ингибирующую активность буметанида и фуросемида (в качестве положительных контролей) и новых соединений посредством мониторинга флуоресценции после добавления таллия (для имитации K), а затем NaCl. После вхождения в клетки посредством NKCC2 (активируемого в присутствии О), таллий связывается с флуоресцентным красителем и усиливает флуоресценцию. После добавления таллия, в NKCC2-трансфицированных клетках обнаруживали большое усиление уровней флуоресценции по сравнению с клетками с имитационным конструктом. Предварительная инкубация с буметанидом (10 мкМ) существенно снижала поток ионов и последующее усиление флуоресценции в NKCC2-трансфицированных клетках. В клетках с имитационным конструктом, обработанных буметанидом и фуросемидом, наблюдалась сниженная флуоресценция. Это указывает на то, что клетки HEK293 экспрессируют эндогенные транспортеры, которые чувствительны к буметаниду/фуросемиду. Последний результат использовали для нормирования измерений флуоресценции, полученный в данном методе анализа. В частности, значение ΔF/F_o для клеток с имитационным конструктом (как контрольных, так и обработанных) вычитали из соответствующего значения ΔF/F₀ для клеток, трансфицированных транспортерами Cl. С использованием этого метода анализа новые химические молекулы тестировали на их способность блокировать NKCC2 (результаты в Таблице 2).

На фигуре 17 представлены результаты метода анализа с таллием: а) Примеры кривых, полученных при анализе с таллием для нетрансфицированных (с имитационным конструктом) или NKCC2-трансфицированных эпителиальных клеток почки (HEK293). Стрелка указывает на добавление таллия (конечная концентрация 2 мМ) и стимуляцию NaCl (135 мМ), используемую для индукцииметода анализа потоков; b) Количественная оценка эффекта буметанида, фуросемида и 3 тестируемых соединений (3.8, 3.13, 3.17) в методе анализа с таллием на NKCC2-трансфицированных клетках HEK293. Данные представляют собой (среднее значение ± SEM), полученные в 5 независимых экспериментах, и представлены в % относительно контроля. *Р<0,05, **Р<0,01, ***Р<0,001 дисперсионный анализ по критерию Краскела-Уоллиса (ретроспективный анализ по критерию Дьюнна); *** Р<0,001 непарный двусторонний t-критерий Стьюдента.

Модель аутизма с VPA

Анализ эффективности in vivo выбранного ингибитора NKCC1 в модели аутизма, индуцированного вальпроевой кислотой (VPA), служит для оценки возможности восстановления нарушенного социального взаимодействия. Модель с VPA получали путем обработки беременных самок C57bl/6j на 12,5 сутки беременности 600 мг/кг VPA (интраперитонеально), растворенной в PBS. Обработанные VPA самки дают потомство, которое демонстрирует поведение, сходное по основным симптомам с аутизмом (Nicolini and Fahnestock, 2018). В качестве контроля использовали потомство самок C57bl/6j, получивших на 12,5 сутки беременности PBS. Для оценки эффективности соединения по восстановлению социального нарушения, молодых самцов из потомства как VPA-, так и PBS-обработанных самок, в течение семи суток обрабатывали (интраперитонеальная инъекция) 0,2 мг/кг соединения 3.17, растворенного в PBS, или 2% DMSO, растворенного в PBS, в качестве контроля. Затем, с помощью различных тестов мышей тестировали на их способность к общению и на повторяющееся поведение. Способность к общению тестировали с помощью теста трех камер (Silverman et al., 2010). В тесте трех камер мышей по отдельности помещали в коробку из трех камер с проходами между камерами. После десятиминут свободного исследования, в одной камере под стакан помещали никогда не встречавшееся ранее животного-чужака, а в другую камеру помещали пустой стакан. Индекс контактности состоит из времени, в течение которого животное исследовало никогда не встречавшегося ранее животного-чужака, относительно времени, в течение которого животное исследовало пустой стакан, и рассчитывается как: [(время, проведенное с животным-чужаком - время, проведенное с пустым стаканом)/(время, проведенное с животным-чужаком + время, проведенное с пустым стаканом), %]. Во второй фазе, под ранее пустой стакан помещали новое животное-чужака для измерения индекса новизны общения, т.е. время исследования нового животного-чужака относительно животного-чужака, уже исследованного в течение предыдущих 10 минут. Индекс новизны общения рассчитывают следующим образом: [(время, проведенное с новым животным-чужаком - время, проведенное с известным животным-чужаком)/(время, проведенное с новым животным-чужаком + время проведенное с известным животным-чужаком), %].

Как представлено на Фиг. 18А, VPA-мыши, получавшие несущую среду, обнаруживали существенно более низкие индекс контактности и индекс новизны общения по сравнению с обычными мышами, получавшими несущую среду. Обработка VPA-мышей соединением 3.17 полностью восстанавливало индекс контактности и индекс новизны общения до уровня контроля.

Затем, оценивали контактность в процессе общения самцов и самок (Drapeau et al., 2018). В этом тесте, после 5 минут привыкания, тестируемую мышь оценивали на ее сближение с самкой-чужаком, которую помещали на 5 минут в ту же клетку. Время, проведенное в общении, рассчитывали как меру социального общения самцов и самок. Как показано на Фиг. 18В, VPA-мыши, получавшие несущую среду, обнаруживали существенно более низкий индекс общения самцов и самок, чем необработанные мыши, получавшие несущую среду. Обработка VPA-мышей соединением 3.17 полностью восстанавливало общение. В завершение, двумя различными тестами оценивали повторяющееся поведение. В тесте закапывания шариков (Eissa et al., 2018) мышь помещали в клетку с 4 см опилок, на поверхность которых аккуратно помещали 15 (5×3) шариков. Повторяющееся поведение оценивали по числу шариков, закопанных в опилки. Груминг-тест включает в себя оценку груминга, т.е., лизание или чесание головы или других частей тела передними лапами, что является типичным поведением грызунов (Campolongo et al., 2018). В процессе теста мышь помещали на цилиндрическую стойку, и после 10 минут привыкания измеряли повторяющуюся груминговую активность в течение 5 минут. Как показано на Фиг. 18С и 18D, VPA-мыши, получавшие несущую среду, демонстрировали чаще повторяющееся поведение (больше закопанных шариков и больше времени, потраченного на груминг), чем необработанные мыши, получавшие несущую среду. Обработка VPA-мышей соединением 3.17 полностью восстанавливало повторяющееся поведение до уровня контроля.

Claims (136)

1. Соединение, характеризующееся формулой Ia, или его фармацевтически приемлемая соль:

где R₁ и R₂ независимо представляют собой водород;

неразветвленный или разветвленный C_1-10алкил;

неразветвленный или разветвленный незамещенный С_3-8циклоалкил;

С_3-8гетероцикл;

или R₁ и R₂ вместе с атомом азота, к которому они присоединены, формируют замещенный галогеном или незамещенный насыщенный С_5-6-гетероцикл;

R₃ и R₄ независимо выбраны из группы, состоящей из Н, -C₆H₁₃, -C₈H₁₇, -С₂Н₄С(СН₃)₃, -C₇H₁₄CF₃, -C₃H₆CF₃, -C₅H₁₀CF₃, -С₄Н₈ОСН₃, -С₆Н₁₂ОСН₃, при условии, что по меньшей мере один из R₃ и R₄ не является водородом, или вместе с атомом азота, к которому они присоединены, представляет собой пиперазин, замещенный C₄H₈CF₃;

R₅ представляет собой

водород;

галоген;

гидроксил;

-O-C_1-10алкил;

-О-С_3-10циклоалкил;

R₆ представляет собой

нитрил;

карбоновую кислоту;

и при условии, что соединение формулы Ia не является одним из следующих:

2. Соединение по п. 1, где R₁ и R₂ независимо представляют собой

водород;

неразветвленный или разветвленный C_1-10алкил;

неразветвленный или разветвленный незамещенный С_3-8циклоалкил;

или R₁ и R₂ вместе с атомом азота, к которому они присоединены, формируют замещенный галогеном или незамещенный насыщенный С_5-6-гетероцикл;

R₅ представляет собой

водород;

галоген;

гидроксил;

-O-C_1-10алкил;

-О-С_3-10циклоалкил;

R₆ представляет собой

нитрил;

карбоновую кислоту.

3. Соединение по п. 1, где R₁ и R₂ независимо представляют собой Н, -СН₃, циклопентан, циклогексан, 4-тетрагидропиран или вместе с атомом азота, к которому они присоединены, представляют собой морфолин, пиперидин, необязательно замещенный по меньшей мере одним атомом галогена, пирролидин.

4. Соединение, которое выбрано из группы, включающей в себя:

2.2 4-(бутиламино)-2-хлор-5-сульфамоилбензойную кислоту,

2.3 2-хлор-4-(гексиламино)-5-сульфамоилбензойную кислоту,

2.4 2-хлор-4-(октиламино)-5-сульфамоилбензойную кислоту,

2.5 2-хлор-4-(3,3-диметилбутиламино)-5-сульфамоилбензойную кислоту,

2.7 4-(гексиламино)-3-сульфамоилбензойную кислоту,

2.8 4-(октиламино)-3-сульфамоилбензойную кислоту,

2.9 4-(3,3-диметилбутиламино)-3-сульфамоилбензойную кислоту,

3.7 4-(гексиламино)-3-(метилсульфамоил)бензойную кислоту,

3.8 3-(метилсульфамоил)-4-(октиламино)бензойную кислоту,

3.9 4-(3,3-диметилбутиламино)-3-(метилсульфамоил)бензойную кислоту,

3.10 3-(метилсульфамоил)-4-(8,8,8-трифтороктиламино)бензойную кислоту,

3.11 4-(бутиламино)-3-(диметилсульфамоил)бензойную кислоту,

3.12 3-(диметилсульфамоил)-4-(гексиламино)бензойную кислоту,

3.13 3-(диметилсульфамоил)-4-(октиламино)бензойную кислоту,

3.14 4-(3,3-диметилбутиламино)-3-(диметилсульфамоил)бензойную кислоту,

3.15 3-(диметилсульфамоил)-4-(4,4,4-трифторбутиламино)бензойную кислоту,

3.16 3-(диметилсульфамоил)-4-(6,6,6-трифторгексиламино)бензойную кислоту,

3.17 3-(диметилсульфамоил)-4-(8,8,8-трифтороктиламино)бензойную кислоту,

3.19 3-(диметилсульфамоил)-4-(4-метоксибутиламино)бензойную кислоту,

3.20 3-(диметилсульфамоил)-4-(6-метоксигексиламино)бензойную кислоту,

3.21 3-(циклопентилсульфамоил)-4-(8,8,8-трифтороктиламино)бензойную кислоту,

3.22 3-(циклогексилсульфамоил)-4-(8,8,8-трифтороктиламино)бензойную кислоту,

5.5 3-пирролидин-1-илсульфонил-4-(8,8,8-трифтороктиламино)бензойную кислоту,

5.6 3-(1-пиперидилсульфонил)-4-(8,8,8-трифтороктиламино)бензойную кислоту,

5.7 3-морфолиносульфонил-4-(8,8,8-трифтороктиламино)бензойную кислоту,

6.3 5-циано-N,N-диметил-2-(8,8,8-трифтороктиламино)бензолсульфонамид,

7.4 2-гидрокси-5-сульфамоил-4-(8,8,8-трифтороктиламино)бензойную кислоту,

9.1 3-(диметилсульфамоил)-4-[4-(5,5,5-трифторпентил)пиперазин-1-ил]бензойную кислоту,

12.7 5-(N,N-диметилсульфамоил)-2-этокси-4-((8,8,8-трифтороктил)амино)бензойную кислоту,

12.8 2-(циклопентилокси)-5-(N,N-диметилсульфамоил)-4-((8,8,8-трифтороктил)амино)бензойную кислоту,

13.1 5-(N,N-диметилсульфамоил)-2-метокси-4-((8,8,8-трифтороктил)амино)бензойную кислоту,

14.3 3-(N-(тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)сульфамоил)-4-((8,8,8-трифтороктил)амино)бензойную кислоту,

14.4 3-((4,4-дифторпиперидин-1-ил)сульфонил)-4-((8,8,8-трифтороктил)амино)бензойную кислоту.

5. Соединение по п. 4, выбранное из группы, включающей в себя:

2.2 4-(бутиламино)-2-хлор-5-сульфамоилбензойную кислоту,

2.7 4-(гексиламино)-3-сульфамоилбензойную кислоту,

2.8 4-(октиламино)-3-сульфамоилбензойную кислоту,

2.9 4-(3,3-диметилбутиламино)-3-сульфамоилбензойную кислоту,

3.7 4-(гексиламино)-3-(метилсульфамоил)бензойную кислоту,

3.8 3-(метилсульфамоил)-4-(октиламино)бензойную кислоту,

3.9 4-(3,3-диметилбутиламино)-3-(метилсульфамоил)бензойную кислоту,

3.10 3-(метилсульфамоил)-4-(8,8,8-трифтороктиламино)бензойную кислоту,

3.11 4-(бутиламино)-3-(диметилсульфамоил)бензойную кислоту,

3.12 3-(диметилсульфамоил)-4-(гексиламино)бензойную кислоту,

3.13 3-(диметилсульфамоил)-4-(октиламино)бензойную кислоту,

3.14 4-(3,3-диметилбутиламино)-3-(диметилсульфамоил)бензойную кислоту,

3.17 3-(диметилсульфамоил)-4-(8,8,8-трифтороктиламино)бензойную кислоту,

3.20 3-(диметилсульфамоил)-4-(6-метоксигексиламино)бензойную кислоту,

3.21 3-(циклопентилсульфамоил)-4-(8,8,8-трифтороктиламино)бензойную кислоту,

3.22 3-(циклогексилсульфамоил)-4-(8,8,8-трифтороктиламино)бензойную кислоту,

5.5 3-пирролидин-1-илсульфонил-4-(8,8,8-трифтороктиламино)бензойную кислоту,

5.6 3-(1-пиперидилсульфонил)-4-(8,8,8-трифтороктиламино)бензойную кислоту,

5.7 3-морфолиносульфонил-4-(8,8,8-трифтороктиламино)бензойную кислоту,

13.1 5-(N,N-диметилсульфамоил)-2-метокси-4-((8,8,8-трифтороктил)амино)бензойную кислоту,

14.4 3-((4,4-дифторпиперидин-1-ил)сульфонил)-4-((8,8,8-трифтороктил)амино)бензойную кислоту.

6. Соединение по п. 4, выбранное из группы, включающей в себя:

2.2 4-(бутиламино)-2-хлор-5-сульфамоилбензойную кислоту,

2.7 4-(гексиламино)-3-сульфамоилбензойную кислоту,

2.8 4-(октиламино)-3-сульфамоилбензойную кислоту,

3.8 3-(метилсульфамоил)-4-(октиламино)бензойную кислоту,

3.13 3-(диметилсульфамоил)-4-(октиламино)бензойную кислоту,

3.14 4-(3,3-диметилбутиламино)-3-(диметилсульфамоил)бензойную кислоту и

3.17 3-(диметилсульфамоил)-4-(8,8,8-трифтороктиламино)бензойную кислоту.

7. Фармацевтическая композиция для лечения нарушений, связанных с деполяризующей GABA-эргической передачей сигналов, у нуждающегося в этом млекопитающего, содержащая по меньшей мере одно соединение, характеризующееся формулой Ib, или его фармацевтически приемлемую соль:

где R₁ и R₂ независимо представляют собой

водород;

неразветвленный или разветвленный или незамещенный С_1-10алкил;

неразветвленный или разветвленный незамещенный С₃-₈циклоалкил;

С_3-8 гетероцикл;

или R₁ и R₂ вместе с атомом азота, к которому они присоединены, формируют замещенный галогеном или незамещенный насыщенный С_5-6-гетероцикл;

R₃ и R₄ независимо выбраны из группы, состоящей из Н, -С₄Н₉, -С₆Н₁₃, -C₈H₁₇, -С₂Н₄С(СН₃)₃, -C₇H₁₄CF₃, -C₃H₆CF₃, -C₅H₁₀CF₃, -С₄Н₈ОСН₃, -С₆Н₁₂ОСН₃, при условии, что по меньшей мере один из R₃ и R₄ не является водородом, или вместе с атомом азота, к которому они присоединены, представляет собой пиперазин, замещенный C₄H₈CF₃;

R₅ представляет собой

водород;

галоген;

гидроксил;

-O-C_1-10алкил;

-О-С_3-10циклоалкил;

R₆ представляет собой

нитрил;

карбоновую кислоту;

и фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества.

8. Применение соединения формулы Ib или его фармацевтически приемлемой соли для лечения нарушений, связанных с деполяризующей GABA-эргической передачей сигналов, у нуждающегося в этом млекопитающего, причем упомянутое соединение формулы Ib представляет собой:

где R₁ и R₂ независимо представляют собой

водород;

неразветвленный или разветвленный незамещенный C_1-10алкил;

неразветвленный или разветвленный незамещенный С_3-8циклоалкил;

С_3-8гетероцикл;

или R₁ и R₂ вместе с атомом азота, к которому они присоединены, формируют замещенный галогеном или незамещенный насыщенный С_5-6-гетероцикл;

R₃ и R₄ независимо выбраны из группы, состоящей из Н, -С₄Н₉, -C₆H₁₃, -C₈H₁₇, -С₂Н₄С(СН₃)₃, -C₇H₁₄CF₃, -C₃H₆CF₃, -C₅H₁₀CF₃, -С₄Н₈ОСН₃, -С₆Н₁₂ОСН₃, при условии, что по меньшей мере один из R₃ и R₄ не является водородом или вместе с атомом азота, к которому они присоединены, представляет собой пиперазин, замещенный C₄H₈CF₃;

R₅ представляет собой

водород;

галоген;

гидроксил;

-O-C_1-10алкил;

-О-С_3-10циклоалкил;

R₆ представляет собой

нитрил;

карбоновую кислоту.

9. Применение по п. 8, где упомянутое патологическое состояние выбрано из группы, включающей в себя синдром Дауна, нейропатическую боль, инсульт, ишемию головного мозга, отек головного мозга, гидроцефалию, травматическое повреждение головного мозга, вызванное травмой головного мозга депрессивное поведение, нарушения аутического спектра, аутизм, синдромы ломкой Х-хромосомы, синдромы Ретта, Аспергера и Ди Джорджи, эпилепсию, судорожные припадки, эпилептический статус, синдром Веста, глиому, глиобластому, анапластическую астроцитому, болезнь Паркинсона, болезнь Хантингтона, шизофрению, тревожность, комплекс туберозного склероза и ассоциированные с ним проблемы поведения, синдром Драве.