RU2720471C1 - Fodder additive for broiler chickens - Google Patents
Fodder additive for broiler chickens Download PDFInfo
- Publication number
- RU2720471C1 RU2720471C1 RU2019108154A RU2019108154A RU2720471C1 RU 2720471 C1 RU2720471 C1 RU 2720471C1 RU 2019108154 A RU2019108154 A RU 2019108154A RU 2019108154 A RU2019108154 A RU 2019108154A RU 2720471 C1 RU2720471 C1 RU 2720471C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- subtilis
- broiler chickens
- cereus
- aiia
- fodder additive
- Prior art date
Links
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 title claims abstract description 11
- 239000000654 additive Substances 0.000 title abstract 3
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 title abstract 3
- 241000193755 Bacillus cereus Species 0.000 claims abstract description 19
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 claims abstract description 10
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 claims abstract description 10
- 230000000529 probiotic effect Effects 0.000 claims abstract description 9
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 claims abstract description 3
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 claims description 6
- 239000003674 animal food additive Substances 0.000 claims description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 8
- 244000144977 poultry Species 0.000 abstract description 4
- 235000013594 poultry meat Nutrition 0.000 abstract description 4
- 230000037396 body weight Effects 0.000 abstract 2
- 101001056180 Homo sapiens Induced myeloid leukemia cell differentiation protein Mcl-1 Proteins 0.000 abstract 1
- 102100026539 Induced myeloid leukemia cell differentiation protein Mcl-1 Human genes 0.000 abstract 1
- 101100328105 Sus scrofa CLCA1 gene Proteins 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 235000019786 weight gain Nutrition 0.000 abstract 1
- 235000014469 Bacillus subtilis Nutrition 0.000 description 22
- 101150020252 aiiA gene Proteins 0.000 description 15
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 10
- 241001328122 Bacillus clausii Species 0.000 description 7
- 241000194108 Bacillus licheniformis Species 0.000 description 7
- ZYGHJZDHTFUPRJ-UHFFFAOYSA-N coumarin Chemical compound C1=CC=C2OC(=O)C=CC2=C1 ZYGHJZDHTFUPRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 5
- 238000000034 method Methods 0.000 description 5
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 4
- 230000018612 quorum sensing Effects 0.000 description 4
- 208000027244 Dysbiosis Diseases 0.000 description 3
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 3
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 3
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 3
- 229960000956 coumarin Drugs 0.000 description 3
- 235000001671 coumarin Nutrition 0.000 description 3
- 230000007140 dysbiosis Effects 0.000 description 3
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 3
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 2
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 244000309464 bull Species 0.000 description 2
- 229920002301 cellulose acetate Polymers 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 2
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 2
- 150000002596 lactones Chemical class 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- RODXRVNMMDRFIK-UHFFFAOYSA-N scopoletin Chemical compound C1=CC(=O)OC2=C1C=C(OC)C(O)=C2 RODXRVNMMDRFIK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 2
- 241000428352 Amma Species 0.000 description 1
- 241000271566 Aves Species 0.000 description 1
- 240000000533 Capsicum pubescens Species 0.000 description 1
- 241001660259 Cereus <cactus> Species 0.000 description 1
- XEHFSYYAGCUKEN-UHFFFAOYSA-N Dihydroscopoletin Natural products C1CC(=O)OC2=C1C=C(OC)C(O)=C2 XEHFSYYAGCUKEN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 229930182566 Gentamicin Natural products 0.000 description 1
- CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N Gentamicin Chemical compound O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N 0.000 description 1
- UKAUYVFTDYCKQA-VKHMYHEASA-N L-homoserine Chemical class OC(=O)[C@@H](N)CCO UKAUYVFTDYCKQA-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 239000006142 Luria-Bertani Agar Substances 0.000 description 1
- 239000006137 Luria-Bertani broth Substances 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 108010090121 N-acyl homoserine lactonase Proteins 0.000 description 1
- 241000831652 Salinivibrio sharmensis Species 0.000 description 1
- 101000693619 Starmerella bombicola Lactone esterase Proteins 0.000 description 1
- 229960004821 amikacin Drugs 0.000 description 1
- LKCWBDHBTVXHDL-RMDFUYIESA-N amikacin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](N)C[C@H]([C@@H]([C@H]1O)O[C@@H]1[C@@H]([C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)NC(=O)[C@@H](O)CCN)[C@H]1O[C@H](CN)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O LKCWBDHBTVXHDL-RMDFUYIESA-N 0.000 description 1
- 229940126575 aminoglycoside Drugs 0.000 description 1
- 230000003042 antagnostic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 230000029918 bioluminescence Effects 0.000 description 1
- 238000005415 bioluminescence Methods 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 230000007515 enzymatic degradation Effects 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 229960002518 gentamicin Drugs 0.000 description 1
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 1
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 229960000318 kanamycin Drugs 0.000 description 1
- 229930027917 kanamycin Natural products 0.000 description 1
- SBUJHOSQTJFQJX-NOAMYHISSA-N kanamycin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CN)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N SBUJHOSQTJFQJX-NOAMYHISSA-N 0.000 description 1
- 229930182823 kanamycin A Natural products 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 239000006916 nutrient agar Substances 0.000 description 1
- 244000039328 opportunistic pathogen Species 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- FWYIBGHGBOVPNL-UHFFFAOYSA-N scopoletin Natural products COC=1C=C2C=CC(OC2=C(C1)O)=O FWYIBGHGBOVPNL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K10/00—Animal feeding-stuffs
- A23K10/10—Animal feeding-stuffs obtained by microbiological or biochemical processes
- A23K10/16—Addition of microorganisms or extracts thereof, e.g. single-cell proteins, to feeding-stuff compositions
- A23K10/18—Addition of microorganisms or extracts thereof, e.g. single-cell proteins, to feeding-stuff compositions of live microorganisms
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K50/00—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals
- A23K50/70—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals for birds
- A23K50/75—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals for birds for poultry
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Animal Husbandry (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Birds (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Physiology (AREA)
- Fodder In General (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к отрасли сельского хозяйства и может быть использовано в кормлении сельскохозяйственной птицы, в частности цыплят-бройлеров.The invention relates to the agricultural industry and can be used in feeding agricultural poultry, in particular broiler chickens.
Известно изобретение относящееся к фармацевтике, а именно к молекулам растительного происхождения (кумарина или скополетина) в качестве ингибитора системы кворум сенсинга LuxI/LuxR типа у бактерий [1].Known invention related to pharmaceuticals, namely to molecules of plant origin (coumarin or scopoletin) as an inhibitor of the LuxI / LuxR type quorum sensing system in bacteria [1].
В данном изобретении изучалась возможность усиления анти-кворум эффекта кумарина и его производных при их сочетании с антибиотиками из группы аминогликозидов (канамицином, гентамицином, амикацином и др.). При этом данное усиление идет за счет синергетического действия антибиотика, при котором нарушается образование регуляторных молекул (АГЛ).The present invention examined the possibility of enhancing the anti-quorum effect of coumarin and its derivatives when combined with antibiotics from the aminoglycoside group (kanamycin, gentamicin, amikacin, etc.). Moreover, this increase is due to the synergistic effect of the antibiotic, in which the formation of regulatory molecules (AHL) is impaired.
Известен способ индивидуальной оценки эффективности эубиотиков, основным действующим началом которых является штамм BACILLUS CEREUS IP 5832 (АТСС 14893), в отношении условно-патогенных микроорганизмов, выделенных от пациентов при исследовании на дисбактериоз кишечника [2].There is a method of individual assessment of the effectiveness of eubiotics, the main active principle of which is the BACILLUS CEREUS IP 5832 strain (ATCC 14893), in relation to opportunistic microorganisms isolated from patients during the study for intestinal dysbiosis [2].
Отличительным признаком этого способа является то, что осуществляют совместную инкубацию штамма Bacillus cereus штамм IP 5832 (АТСС 14893) с каждым из штаммов условно-патогенных микроорганизмов в физиологическом растворе с последующим высевом по Gold на питательный агар с пенициллином в концентрации 0,01 ЕД/мл и без него, и при выявлении снижения количества условнопатогенных микроорганизмов на среде с пенициллином по сравнению с количеством условно-патогенных микроорганизмов на среде без пенициллина определяют наличие антагонистической активности штамма Bacillus cereus IP 5832 (АТСС 14893) в отношении штамма условно-патогенного микроорганизма, при этом эубиотик оценивают как эффективный в отношении штамма условно-патогенного микроорганизма, выделенного от данного пациента при исследовании на дисбактериоз кишечника.A distinctive feature of this method is that they carry out a joint incubation of the Bacillus cereus strain strain IP 5832 (ATCC 14893) with each of the opportunistic microorganism strains in physiological saline followed by Gold inoculation on nutrient agar with penicillin at a concentration of 0.01 IU / ml and without it, and when detecting a decrease in the number of opportunistic microorganisms in a medium with penicillin compared with the number of opportunistic microorganisms in a medium without penicillin, the presence of antagonistic activity of amma Bacillus cereus IP 5832 (ATCC 14893) strain against opportunistic pathogen, with eubiotic evaluated as effective against opportunistic pathogenic strain microorganism isolated from the patient in the study on the intestinal dysbiosis.
Для подтверждения эффективности заявляемого изобретения проведено исследование возможности связывания и ферментативной деградации сигнальных молекул системы «кворум сенсинга» пробиотическими микроорганизмами рода Bacillus. При выполнении данного фрагмента исследования тестированы восемь штаммов рода Bacillus (В. subtilis 7048, В. subtilis 534, В. clausii, В. subtilis 12 В, В. subtilis 7092, В. licheniformis, В. cereus АТСС 14893, В. subtilis 5020), являющихся активным началом ветеринарных и медицинских пробиотических препаратов. Анти-кворум активность внеклеточных продуктов микроорганизмов рода Bacillus оценена остаточными количествами автоиндукторов системы «кворум сенсинга» (ацилированных гомосерин лактонов; АГЛ), количественно тестированными в тестах индукции биолюминесценции E. coli pAL103 и биосинтеза пигмента виолацеина C. violaceum CV026 (фиг. 1). При этом минимальный анти-кворум эффект выявлен при тестировании клеточной биомассы В. licheniformis и В. clausii, а максимальный - у В. cereus АТСС 14893.To confirm the effectiveness of the claimed invention, a study was made of the possibility of binding and enzymatic degradation of signal molecules of the quorum sensing system by probiotic microorganisms of the genus Bacillus. When performing this fragment of the study, eight strains of the genus Bacillus were tested (B. subtilis 7048, B. subtilis 534, B. clausii, B. subtilis 12B, B. subtilis 7092, B. licheniformis, B. cereus ATCC 14893, B. subtilis 5020 ), which are the active principle of veterinary and medical probiotic preparations. The anti-quorum activity of the extracellular products of microorganisms of the genus Bacillus was evaluated by residual amounts of autoinductors of the quorum sensing system (acylated homoserine of lactones; AHL), quantitatively tested in the tests for the bioluminescence induction of E. coli pAL103 and pigment biosynthesis of C. violaceum 0. In this case, the minimum anti-quorum effect was detected when testing the cell biomass of B. licheniformis and B. clausii, and the maximum - in B. cereus ATCC 14893.
Проведена идентификация генетических и молекулярных детерминант, определяющих анти-кворум активность пробиотиков.The identification of genetic and molecular determinants that determine the anti-quorum activity of probiotics.
Объектом поиска явился ген aiiA, кодирующий N-ацил-гомосерин лактоназу (ЕС: 3.1.1.81), отщепляющую от исходной молекулы АГЛ лактонное кольцо. С использованием двух пар модифицированных (вырожденных) праймеров aiiA1 и aiiA2 проведена амплификация целевого участка геномов восьми исследуемых микроорганизмов рода Bacillus. Положительный результат амплификации зарегистрирован только для В. cereus АТСС 14893, клеточная биомасса которого проявляет наиболее выраженную способность к инактивации АГЛ (фиг. 2). На фигуре 2 изображено: Ряд №1: 1 - B. subtilis 7092 (ВТ1/ВТ2); 2 - В. clausii (aiiA1/aiiA2); 3 - В. clausii (aiiAF/aiiAR); 4 - В. clausii (aiiA 240B1-F/aiiA 240B1-R); 5 - B. clausii (AI96-up/AI96-down); 6 - B. clausii (BT1/BT2); 7 - B. subtilis 7048 (aiiA1/aiiA2); 8 - B. subtilis 7048 (aiiAF/aiiAR); 9 - B. subtilis 7048 (aiiA 240B1-F/aiiA 240B1-R); 10 - B. subtilis 7048 (AI96-up/AI96-down); 11 - B. subtilis 7048, (BT1/BT2); 12 - B. licheniformis (aiiA1/aiiA2); 13 - B. licheniformis (aiiAF/aiiAR); 14 - B. licheniformis (aiiA 240B1-F /aiiA 240B1-R); 15 - B. licheniformis (AI96-up/AI96-down); 16 - B. licheniformis (BT1/BT2).The object of the search was the aiiA gene encoding N-acyl-homoserin lactonase (EC: 3.1.1.81), which cleaves the lactone ring from the original AHL molecule. Using two pairs of modified (degenerate) primers aiiA1 and aiiA2, amplification of the target region of the genomes of eight studied microorganisms of the genus Bacillus was performed. A positive amplification result was recorded only for B. cereus ATCC 14893, the cell biomass of which shows the most pronounced ability to inactivate AHL (Fig. 2). The figure 2 shows: Row No. 1: 1 - B. subtilis 7092 (BT1 / VT2); 2 - B. clausii (aiiA1 / aiiA2); 3 - B. clausii (aiiAF / aiiAR); 4 - B. clausii (aiiA 240B1-F / aiiA 240B1-R); 5 - B. clausii (AI96-up / AI96-down); 6 - B. clausii (BT1 / BT2); 7 - B. subtilis 7048 (aiiA1 / aiiA2); 8 - B. subtilis 7048 (aiiAF / aiiAR); 9 - B. subtilis 7048 (aiiA 240B1-F / aiiA 240B1-R); 10 - B. subtilis 7048 (AI96-up / AI96-down); 11 - B. subtilis 7048, (BT1 / BT2); 12 - B. licheniformis (aiiA1 / aiiA2); 13 - B. licheniformis (aiiAF / aiiAR); 14 - B. licheniformis (aiiA 240B1-F / aiiA 240B1-R); 15 - B. licheniformis (AI96-up / AI96-down); 16 - B. licheniformis (BT1 / BT2).
Ряд №2: 1 - B. subtilis 12B (AI96-up/AI96-down); 2 - B. subtilis 12B (BT1/BT2); 3 - B. cereus (aiiA1/aiiA2); 4 - B. cereus (aiiAF/aiiAR); 5 - B. cereus (aiiA 240B1-F /aiiA 240B1-R); 6 - B. cereus (AI96-up/AI96-down); 7 - B. cereus (BT1/BT2); 8 - B. subtilis 5020 (aiiA1/aiiA2); 9 - B. subtilis 5020 (aiiAF/aiiAR); 10 - B. subtilis 5020 (aiiA 240B1-F /aiiA 240B1-R); 11 - B. subtilis 5020 (AI96-up/A196-down); 12 - B. subtilis 5020 (BT1/BT2); 13 - B. subtilis 7092 (aiiA1/aiiA2); 14 - B. subtilis 7092 (aiiAF/aiiAR); 15 - B. subtilis 7092 (aiiA 240B1-F/aiiA 240B1-R); 16 - B. subtilis 7092(AI96-up/AI96-down).Row No. 2: 1 - B. subtilis 12B (AI96-up / AI96-down); 2 - B. subtilis 12B (BT1 / BT2); 3 - B. cereus (aiiA1 / aiiA2); 4 - B. cereus (aiiAF / aiiAR); 5 - B. cereus (aiiA 240B1-F / aiiA 240B1-R); 6 - B. cereus (AI96-up / AI96-down); 7 - B. cereus (BT1 / BT2); 8 - B. subtilis 5020 (aiiA1 / aiiA2); 9 - B. subtilis 5020 (aiiAF / aiiAR); 10 - B. subtilis 5020 (aiiA 240B1-F / aiiA 240B1-R); 11 - B. subtilis 5020 (AI96-up / A196-down); 12 - B. subtilis 5020 (BT1 / BT2); 13 - B. subtilis 7092 (aiiA1 / aiiA2); 14 - B. subtilis 7092 (aiiAF / aiiAR); 15 - B. subtilis 7092 (aiiA 240B1-F / aiiA 240B1-R); 16 - B. subtilis 7092 (AI96-up / AI96-down).
Таким образом, результаты проведенного исследования позволили объяснить высокий уровень анти-кворум активности биомассы пробиотического штамма В. cereus АТСС 14893 присутствием внеклеточного фермента N-ацил-гомосерин лактоназы, синтезируемой под контролем гена aiiA. Одновременно полученный результат сформировал основу для решения поставленой задачи, связанной с переносом генов (фрагментов ДНК), ответственных за анти-кворум активность пробиотических штаммов рода Bacillus, в широкий круг грамположительных и грамотрицательных хозяев (фиг. 3). На фигуре 3 изображено: 1 ряд - В. cereus IP5832; 2 ряд - клонированные клетки Е. coli XL1-Blue; 3 ряд - CV 026 с ГСЛ; слева - направо: концентрация ГСЛ.Thus, the results of the study made it possible to explain the high level of anti-quorum activity of the biomass of the probiotic strain B. cereus ATCC 14893 by the presence of the extracellular enzyme N-acyl-homoserine lactonase synthesized under the control of the aiiA gene. At the same time, the result formed the basis for solving the problem associated with the transfer of genes (DNA fragments) responsible for the anti-quorum activity of probiotic strains of the genus Bacillus to a wide range of gram-positive and gram-negative hosts (Fig. 3). The figure 3 shows: 1 row - B. cereus IP5832; 2 row - cloned E. coli XL1-Blue cells; 3 row - CV 026 with GSL; left to right: GSL concentration.
Клонирование гена aiiA из В. cereus АТСС 14893 в клетках Е. coli создает основу для эффективного переноса анти-кворум активности представителям нормобиоценоза сельскохозяйственных животных и человека.Cloning of the aiiA gene from B. cereus ATCC 14893 in E. coli cells forms the basis for the effective transfer of anti-quorum activity to representatives of normobiocenosis of farm animals and humans.
При проведении работ использован штамм Bacillus cereus IP 5832 (АТСС 14893), входящий в состав пробиотических препаратов. Первичное выделение микроорганизмов осуществляли на LB-агар (Sigma-Aldrich, США), дальнейшее культивирование проводили в LB-бульоне при температуре 37±1°C с динамическим мониторингом роста при 545 нм (ОП545). После 72 часов бактериальную биомассу отделяли центрифугированием в течение 10 минут при 12000 g (MiniSpin, Eppendorf, Германия), а полученные супернатанты стерилизовали через стерильную шприцевую фильтрующую насадку, СА (ацетат целлюлозы), (Membrane Solutions, США) с диаметром пор 0,22 мкм.During the work used the strain Bacillus cereus IP 5832 (ATCC 14893), which is part of the probiotic preparations. The primary isolation of microorganisms was carried out on LB agar (Sigma-Aldrich, USA), further cultivation was carried out in LB broth at a temperature of 37 ± 1 ° C with dynamic monitoring of growth at 545 nm (OD545). After 72 hours, the bacterial biomass was separated by centrifugation for 10 minutes at 12,000 g (MiniSpin, Eppendorf, Germany), and the resulting supernatants were sterilized through a sterile syringe filter head, CA (cellulose acetate), (Membrane Solutions, USA) with a pore diameter of 0.22 microns.
В дальнейшем с целью апробации препарата с изучаемым штаммом был проведен опыт на цыплятах-бройлерах кросса Арбор Айкрес в условиях вивария ФГБНУ «Федеральный научный центр биологических систем и агротехнологий Российской академии наук». Для эксперимента было отобрано 18 голов 9-дневных цыплят-бройлеров, которых методом аналогов, как по возрастным, так и по весовым признакам разделили на 2 группы (n=9) со средней живой массой 214 г. Во время эксперимента вся подопытная птица находилась в одинаковых условиях содержания. Микроклимат в помещении соответствовал требованиям ВНИТИП.In the future, in order to test the drug with the studied strain, an experiment was conducted on broilers of the cross Arbor Aykres in the vivarium of the Federal Research Center for Biological Systems and Agricultural Technologies of the Russian Academy of Sciences. For the experiment, 18 heads of 9-day-old broiler chickens were selected, which were divided into 2 groups (n = 9) with an average live weight of 214 by the analogue method, both by age and weight. During the experiment, the entire experimental bird was in identical conditions of detention. The microclimate in the room met the requirements of VNITIP.
Кормление и поение птицы осуществлялось групповым методом. Основной рацион (ОР) для подопытной птицы в ходе исследований составлялся с учетом рекомендаций ВНИТИП [3]. Кормление подопытной птицы проводилось 2 раза в сутки, учет поедаемости - ежесуточно. Поение осуществлялось вволю.Feeding and watering the birds was carried out by the group method. The main diet (RR) for the experimental bird during the research was compiled taking into account the recommendations of VNITIP [3]. Experimental poultry was fed 2 times a day; daily consumption was taken into account. Watering was carried out ad libitum.
Контрольная группа - ОР; опытная - ОР + штамм пробиотических препаратов Bacillus cereus IP 5832 в дозировке 4 мл/кг ж.м./сут (с уровнем микробных клеток в 1 мкл - 1*109 ед.).The control group - OR; experimental - OR + strain of probiotic preparations Bacillus cereus IP 5832 at a dosage of 4 ml / kg g.m. / day (with a level of microbial cells in 1 μl - 1 * 10 9 units).
В ходе исследований было установлено преимущество по живой массе опытных бройлеров над контролем (табл. 1). Так на третью неделю эксперимента опытная группа характеризовалась преобладанием живой массы на 34,37 г (4,86%) в сравнении с контролем, на четвертую неделю на 129,08 г (P≤0,05) или на 7,3% и на пятую неделю на 217,96 г (Р≤0,05) или на 9,13% соответственно.In the course of research, an advantage was found in the live weight of the experimental broilers over the control (Table 1). So in the third week of the experiment, the experimental group was characterized by a predominance of live weight by 34.37 g (4.86%) in comparison with the control, by 129.08 g (P≤0.05) or 7.3% by the fourth week and the fifth week at 217.96 g (P≤0.05) or 9.13%, respectively.
Аналогичная ситуация наблюдалась и по приростам живой массы (табл. 2). Бройлеры из опытной группы превосходили аналогов из контрольной по абсолютному приросту на 217,96 г (10%), среднесуточному на 6,23 г (10,03%).A similar situation was observed for the growth of live weight (table. 2). Broilers from the experimental group exceeded the analogues from the control in absolute growth by 217.96 g (10%), daily average by 6.23 g (10.03%).
За весь период эксперимента бройлеры опытной группы поедали корма больше на 0,23 г или 6,55%, однако расход корма на 1 кг живой массы у них был меньше на 0,04 г (2,46%) по сравнению с контролем (табл. 3).Over the entire period of the experiment, the broilers of the experimental group ate 0.23 g or 6.55% more feed, but their feed consumption per 1 kg of live weight was less than 0.04 g (2.46%) compared with the control (table . 3).
Таким образом, применение кормовой добавки состоящей из штамма Bacillus cereus IP 5832 способствует повышению продуктивности птицы и его резистентности.Thus, the use of a feed additive consisting of a strain of Bacillus cereus IP 5832 helps to increase the productivity of the bird and its resistance.
Источники информацииSources of information
1. Патент на изобретение RU №2616237 Применение кумарина и его производных в качестве ингибиторов системы "кворум сенсинга" LuxI/ LuxR типа у бактерий / Д.Г. Дерябин, А.А. Толмачёва, К.С. Инчагова; опубл. 13.04.2017, Бюл. №111. Patent for invention RU No. 2616237 Use of coumarin and its derivatives as inhibitors of the LuxI / LuxR type quorum sensing system in bacteria / D.G. Deryabin, A.A. Tolmacheva, K.S. Inchagova; publ. 04/13/2017, Bull.
2. Патент на изобретение RU №2399658 Способ индивидуальной оценки эффективности эубиотиков, основным действующим началом которых является штамм BACILLUS CEREUS IP 5832 (АТСС 14893), в отношении условно-патогенных микроорганизмов, выделенных от пациентов при исследовании на дисбактериоз кишечника / Е.А. Оришак, Л.Ю. Нилова, А.Г. Бойцов; опубл. 20.09.2010 Бюл. №262. Patent for invention RU No. 2399658 A method for individual evaluation of the effectiveness of eubiotics, the main active principle of which is the strain BACILLUS CEREUS IP 5832 (ATCC 14893), in relation to opportunistic microorganisms isolated from patients in the study for intestinal dysbiosis / E.A. Orishak, L.Yu. Nilova, A.G. Fighters; publ. 09/20/2010 Bull. Number 26
3. Рекомендации по кормлению сельскохозяйственной птицы / ВНИТИП. Под общ. Ред. В.И. Фисинина. - Сергиев Посад, 2000. - 68 с.3. Recommendations for feeding poultry / VNITIP. Under the total. Ed. IN AND. Fisinina. - Sergiev Posad, 2000 .-- 68 p.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2019108154A RU2720471C1 (en) | 2019-03-21 | 2019-03-21 | Fodder additive for broiler chickens |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2019108154A RU2720471C1 (en) | 2019-03-21 | 2019-03-21 | Fodder additive for broiler chickens |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2720471C1 true RU2720471C1 (en) | 2020-04-30 |
Family
ID=70553073
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2019108154A RU2720471C1 (en) | 2019-03-21 | 2019-03-21 | Fodder additive for broiler chickens |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2720471C1 (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2758472C1 (en) * | 2020-07-22 | 2021-10-28 | Федеральное Государственное бюджетное научное учреждение "Федеральный научный центр биологических систем и агротехнологий российской академии наук" | Method for increasing productivity and essential elements in liver and pectoral muscles of broiler chickens |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2272419C2 (en) * | 1999-12-10 | 2006-03-27 | КемДжен Копэрейшн | Composition for peroral introduction in poultry and animals for treating and decreasing the risk of digestive tract infection (variants), its application (variants) and method for treating or decreasing the risk of digestive tract infection (variants) |
| RU2399658C1 (en) * | 2009-03-20 | 2010-09-20 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Санкт-Петербургская государственная медицинская академия им. И.И. Мечникова Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию" | Method of estimating individual therapeutic response eubiotics with bacillus cereus strain ip 5832 (atss 14893) as primary active principle with respect to opportunistic pathogens recovered from patient examined for intestinal dysbacteriosis |
| CN102293349A (en) * | 2011-09-09 | 2011-12-28 | 合肥工业大学 | Composite probiotic meat chicken feed additive and application thereof |
| RU2458526C1 (en) * | 2011-03-28 | 2012-08-20 | Общество с ограниченной ответственностью "Поливит" (ООО "Поливит") | Probiotic fodder additive for farm birds and fur animals |
| WO2012110777A2 (en) * | 2011-02-18 | 2012-08-23 | Dupont Nutrition Biosciences Aps | Feed additive composition |
| RU2493723C1 (en) * | 2012-06-14 | 2013-09-27 | Общество с ограниченной ответственностью "БИОТРОФ" | Biopreparation with probiotic activity for optimisation of assimilation of fodders intended for farm animals and birds |
-
2019
- 2019-03-21 RU RU2019108154A patent/RU2720471C1/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2272419C2 (en) * | 1999-12-10 | 2006-03-27 | КемДжен Копэрейшн | Composition for peroral introduction in poultry and animals for treating and decreasing the risk of digestive tract infection (variants), its application (variants) and method for treating or decreasing the risk of digestive tract infection (variants) |
| RU2399658C1 (en) * | 2009-03-20 | 2010-09-20 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Санкт-Петербургская государственная медицинская академия им. И.И. Мечникова Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию" | Method of estimating individual therapeutic response eubiotics with bacillus cereus strain ip 5832 (atss 14893) as primary active principle with respect to opportunistic pathogens recovered from patient examined for intestinal dysbacteriosis |
| WO2012110777A2 (en) * | 2011-02-18 | 2012-08-23 | Dupont Nutrition Biosciences Aps | Feed additive composition |
| RU2458526C1 (en) * | 2011-03-28 | 2012-08-20 | Общество с ограниченной ответственностью "Поливит" (ООО "Поливит") | Probiotic fodder additive for farm birds and fur animals |
| CN102293349A (en) * | 2011-09-09 | 2011-12-28 | 合肥工业大学 | Composite probiotic meat chicken feed additive and application thereof |
| RU2493723C1 (en) * | 2012-06-14 | 2013-09-27 | Общество с ограниченной ответственностью "БИОТРОФ" | Biopreparation with probiotic activity for optimisation of assimilation of fodders intended for farm animals and birds |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2758472C1 (en) * | 2020-07-22 | 2021-10-28 | Федеральное Государственное бюджетное научное учреждение "Федеральный научный центр биологических систем и агротехнологий российской академии наук" | Method for increasing productivity and essential elements in liver and pectoral muscles of broiler chickens |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Chen et al. | The quorum quenching bacterium Bacillus licheniformis T-1 protects zebrafish against Aeromonas hydrophila infection | |
| CN113637615B (en) | Weissella confusa, culture method and application thereof | |
| Bangera et al. | Poultry: A receptacle for non-typhoidal Salmonellae and antimicrobial resistance | |
| CN113249255B (en) | Bacillus subtilis for preventing and controlling enteritis of poultry and application thereof | |
| RU2720471C1 (en) | Fodder additive for broiler chickens | |
| KR101098946B1 (en) | Novel Lactobacillus salivarius strains and feed additive composition containing the same | |
| Ribeiro et al. | Research Note: The effects of a Lactobacillus helveticus ATCC 15009-derived postbiotic mitigating Salmonella Gallinarum colonization in commercial layer chicks | |
| CN116515671A (en) | Bacillus subtilis with chicken mycoplasma resisting function and production performance improving function and application thereof | |
| Gomaa et al. | Antimicrobial potential of myricetin-coated zinc oxide nanocomposite against drug-resistant Clostridium perfringens | |
| Okamoto et al. | Bacterial communication between Lactobacillus spp. isolated from poultry in the inhibition of Salmonella Heidelberg—proof of concept | |
| Abubakar et al. | Molecular characterization and multi-drug resistance profile of extended spectrum beta lactamase producing Escherichia coli (ESBL) in poultry from Gusau metropolis, Nigeria | |
| Lakho et al. | Efficacy of quinolones and cephalosporins against antibiogram of Escherichia coli isolated from chickens | |
| Sulikowska et al. | Antimicrobial resistance and virulence genes in staphylococci isolated from aviary capercaillies and free-living birds in south-eastern Poland | |
| RU2493723C1 (en) | Biopreparation with probiotic activity for optimisation of assimilation of fodders intended for farm animals and birds | |
| Angulo et al. | Antimicrobial effectiveness of wild-type bacillus spp vs bacillus subtilis atcc 6051 against Staphylococcus aureus and Klebsiella spp isolated from bovine mastitis | |
| Vygovska et al. | Study of antibiotic susceptibility of Salmonella spp. Isolated from food and biological material | |
| KR101659062B1 (en) | Pediococcus parvulus against pathogen of American Foulbrood microbial agent comprising the same and method for preventing pathogen using the same | |
| Bakheet et al. | Prevelence of Methicillin-Resistant Staphylococcus Aureus (MRSA) in Layer Chickens with Reference to its Ability to Form Biofilm and Enterotoxins. | |
| Choudhary et al. | Isolation and identification of Escherichia coli as secondary infection in layer birds. | |
| Nepali et al. | Evaluation of minimum inhibitory concentration and multi-drug resistance profile of Salmonella isolated from layer poultry farms in kaski district, Nepal | |
| Roy et al. | Molecular detection and antibiotyping of multi-drug resistant Enterococcus faeciumfrom healthy broiler chickens in Bangladesh | |
| Verma et al. | Prevalence and antimicrobial drug resistance of methicillin-resistant Staphylococcus aureus isolated from nasal swabs and milk samples of sheep and goats | |
| Sharma et al. | Prevalence and Antibiogram study of Enterococcus species isolated from poultry from arid regions of Rajasthan | |
| Maestro et al. | Antimicrobial Resistance Pattern of the Staphylococcus Strains Isolated from Farm Animals, Exposed and Non-Exposed Personnel | |
| Нечипуренко et al. | Colibacillosis in broiler chicks and its etiological link to the biological characteristics of Escherichia coli isolates from the breeder flock |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20210322 |