RU2799006C2

RU2799006C2 - СРЕДСТВО, УСИЛИВАЮЩЕЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВОЕ ДЕЙСТВИЕ С ПРИМЕНЕНИЕМ СОЕДИНЕНИЯ ПИРАЗОЛО[3,4-d]ПИРИМИДИНА

Info

Publication number: RU2799006C2
Application number: RU2019130388A
Authority: RU
Inventors: Хироки ИРИЕ; Кей ОГУТИ; Яйои ФУДЗИОКА
Original assignee: Тайхо Фармасьютикал Ко., Лтд.
Priority date: 2017-02-28
Filing date: 2018-02-27
Publication date: 2023-06-30

Abstract

Изобретение относится к противоопухолевому средству и комбинации, действующим в отношении злокачественной опухоли, включающее (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-2,3-диметилфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамид или его фармацевтически приемлемую соль и другое противоопухолевое средство, применению (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-2,3-диметилфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли для усиления другого противоопухолевого средства в лечении злокачественной опухоли, или для лечения такой опухоли у пациента, которому вводят другое противоопухолевое средство, или путем комбинированного введения с другим противоопухолевым средством, применению (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-2,3-диметилфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли в комбинации с другим противоопухолевым средством для получения противоопухолевого средства, действующего в отношении злокачественной опухоли, применению (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-2,3-диметилфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли для получения средства, усиливающего противоопухолевое действие другого противоопухолевого средства, или для получения противоопухолевого средства для лечения пациента со злокачественной опухолью, которому вводят другое противоопухолевое средство, применению (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-2,3-диметилфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли для получения противоопухолевого средства, действующего в отношении злокачественной опухоли, включающего другое противоопухолевое средство, способу лечения злокачественной опухоли, включающему комбинированное введение (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-2,3-диметилфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли и другого противоопухолевого средства, способу усиления противоопухолевого действия другого противоопухолевого средства в лечении злокачественной опухоли, где злокачественная опухоль связана с активностью HER2 и другое противоопухолевое средство выбрано из группы, состоящей из 5-фторурацила (5-ФУ), 5-фтор-2'-дезоксиуридина (FdUrd), трифлуридина, гемцитабина, капецитабина, трастузумаба, трастузумаба эмтанзина, AZD8055, эверолимуса, дактолизиба, бупарлизиба, таселизиба, палбоциклиба, цисплатина и паклитаксела, и где (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-2,3-диметилфенил)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамид или его фармацевтически приемлемая соль содержится в количестве от 0,001 до 100 моль на 1 моль другого противоопухолевого средства. Технический результат - лечение злокачественной опухоли, связанной с активностью HER2, с применением соединения (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-2,3-диметилфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли в комбинации с другими противоопухолевыми средствами, указанными выше. 11 н.п. ф-лы, 4 ил., 34 табл., 4 пр.

Description

Область техники, к которой относится изобретение

[0001]

Настоящее изобретение относится к противоопухолевому средству, включающему соединение пиразоло[3,4-d]пиримидина или его соль и другое противоопухолевое средство(а) в комбинации, и средство, усиливающее противоопухолевое действие другого противоопухолевого средства (средств).

Уровень техники

[0002]

HER2 (также называемый ErbB2) является тирозинкиназой рецепторного типа, которая принадлежит к семейству ErbB.

HER2 считают геном, ответственным за рак (Непатентный источник 1), при этом амплификация, мутация, повышенная экспрессия и т.п. гена HER2 были отмечены на различных злокачественных опухолях (Непатентный источник 2). Сообщали, что выживаемость, сигналы роста и т.д. раковых клеток увеличиваются при активации передачи сигнала HER2 и его нижестоящего пути в раковых клетках, имеющих такое нарушение гена HER2 или его повышенную экспрессию (Непатентные источники 3 и 4).

Таким образом, ингибитор, способный контролировать киназную активностью HER2, по-видимому, проявляет противоопухолевое действие, ингибируя передачу сигнала HER2 и его нижестоящий путь в раковых клетках, и поэтому считается полезным как терапевтическое средство для лечения рака.

[0003]

Имеется большое количество сообщений о противоопухолевом действии, вызванном комбинациями ингибиторов HER2 и других противоопухолевых средств. Например, сообщали о комбинированном применении трастузумаба с паклитакселом (Непатентный источник 5), паклитаксела/соединения платины (Непатентный источник 6) и т.п. Также сообщали о комбинированном применении лапатиниба с капецитабином (Непатентный источник 7), 5-ФУ (Непатентный источник 8), S-1 (Непатентный источник 9) и т.п. Однако, например, известно, что лапатиниб проявляет высокую ингибирующую активность в отношении EGFR (рецептора эпидермального фактора роста) помимо HER2, и, таким образом, может вызывать нежелательные эффекты из-за ингибирования сигнального пути EGFR.

[0004]

Между тем, настоящий заявитель ранее подал заявку на патент, обнаружив, что соединение, содержащее в качестве основной структуры пиразоло[3,4-d]пиримидин, обладает превосходной ингибирующей активностью в отношении HER2 и киназной селективностью в отношении HER2.

Список источников

Непатентные источники

[0005]

Непатентный источник 1: Oncogene, 26, p. 6469-6487 (2007)

Непатентный источник 2: Cancer Treat. Rev., 40, p. 770-780 (2014)

Непатентный источник 3: Genes Cancer, 4, p. 187-195 (2013)

Непатентный источник 4: Oncogene, 19, p. 1647-1656 (2000)

Непатентный источник 5: N. Engl. J. Med., 344, p. 783-792 (2001)

Непатентный источник 6: J. Natl. Cancer Inst., 96, p. 759-769 (2004)

Непатентный источник 7: Breast Cancer, 21, p. 677-683 (2014)

Непатентный источник 8: Oncol. Rep., 27, p. 1639-1645 (2012)

Непатентный источник 9: Mol. Cancer Ther., 9, 1198-1207 (2010)

Сущность изобретения

Задачи, решаемые изобретением

[0006]

Цель настоящего изобретения состоит в предоставлении способа лечения рака с применением соединения пиразоло[3,4-d]пиримидина или его соли, которые демонстрируют превосходное противоопухолевое действие с предотвращением развития нежелательных эффектов.

Способы решения задачи

[0007]

Авторы настоящего изобретения провели тщательные исследования, чтобы достигнуть цели, и, следовательно, выполнили настоящее изобретение, обнаружив, что комбинированное применение соединения формулы (I), представленной ниже, содержащего пиразоло[3,4-d]пиримидин в качестве основной структуры, или его соли с другими соединениями, обладающими противоопухолевым действием (другими противоопухолевыми средствами), усиливает противоопухолевое действие больше, чем в случае применения каждого из этих соединений по отдельности, но не услиливает токсическое действие.

[0008]

В настоящем изобретении предложено следующее [1]-[36]:

[1] Противоопухолевое средство, где соединение пиразоло[3,4-d]пиримидина следующей формулы (I) или его соль и другое противоопухолевое средство(а) вводят в комбинации:

[0009]

[0010]

где X представляет собой необязательно замещенную 4-10-членную азотсодержащую насыщенную гетероциклическую группу;

Y представляет собой -C(R₄)=C(R₅)(R₆);

Z₁, Z₂, Z₃ и Z₄ являются одинаковыми или отличаются друг от друга, при этом каждый представляет собой атом водорода, атом галогена, цианогруппу, C2-C6 алкенильную группу, необязательно замещенную C1-C6 алкоксигруппу, необязательно замещенную C1-C6 алкильную группу, необязательно замещенную аминогруппу, необязательно замещенную C3-C7 циклоалкильную группу, C6-C14 ароматическую углеводородную группу или 4-14-членную ненасыщенную гетероциклическую группу, или Z₁ и Z₂, или Z₃ и Z₄ необязательно образуют, вместе с соответствующими атомами углерода, связанными с ними, бензольное кольцо или 5-7-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо;

W представляет собой -CH₂-, атом кислорода или -NH-;

n представляет собой целое число от 0 до 2;

R₁ представляет собой необязательно замещенную аминогруппу;

R₂ и R₃ являются одинаковыми или отличаются друг от друга, при этом каждый представляет собой атом водорода, необязательно замещенную C1-C6 алкоксигруппу, необязательно замещенную C1-C6 алкильную группу или необязательно замещенную C6-C14 ароматическую углеводородную группу, или R₂ и R₃ необязательно образуют, вместе с атомом азота, связанным с ними, необязательно замещенную 4-8-членную азотсодержащую насыщенную гетероциклическую группу; и

R₄, R₅ и R₆ являются одинаковыми или отличаются друг от друга, при этом каждый представляет собой атом водорода или необязательно замещенную C1-C6 алкильную группу.

[2] Противоопухолевое средство согласно [1], где соединение пиразоло[3,4-d]пиримидина является соединением, в котором, в формуле (I),

X является 4-8-членной азотсодержащей насыщенной гетероциклической группой, необязательно содержащей в качестве заместителя атом галогена или C1-C6 алкильную группу;

Y является -C(R₄)=C(R₅)(R₆);

Z₁, Z₂, Z₃ и Z₄ являются одинаковыми или отличаются друг от друга, при этом каждый представляет собой атом водорода, атом галогена, цианогруппу, C2-C6 алкенильную группу, необязательно замещенную атомом галогена C1-C6 алкоксигруппу, C1-C6 алкильную группу, необязательно замещенную C1-C6 алкильной группой аминогруппу, C3-C7 циклоалкильную группу или моноциклическую 4-6-членную ненасыщенную гетероциклическую группу, содержащую один атом кислорода, или Z₁ и Z₂, или Z₃ и Z₄ необязательно образуют, вместе с соответствующими атомами углерода, связанными с ними, бензольное кольцо или 5-7-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо;

W является -CH₂-, атомом кислорода или -NH-;

n является 0;

R₁ является аминогруппой;

R₂ и R₃ являются одинаковыми или отличаются друг от друга, при этом каждый представляет собой атом водорода, C1-C6 алкоксигруппу, C1-C6 алкильную группу или C6-C14 ароматическую углеводородную группу, или R₂ и R₃ необязательно образуют, вместе с атомом азота, связанным с ними, необязательно замещенную гидроксильной группой 4-8-членную азотсодержащую насыщенную гетероциклическую группу; и

R₄, R₅ и R₆ являются одинаковыми или отличаются друг от друга, при этом каждый представляет собой атом водорода или необязательно замещенную ди(C1-C6 алкил)аминогруппой C1-C6 алкильную группу.

[3] Противоопухолевое средство согласно [1] или [2], где соединение пиразоло[3,4-d]пиримидина является соединением, в котором, в формуле (I),

X является пирролидинильной группой, метилпирролидинильной группой, пиперидинильной группой или фторпиперидинильной группой;

Y является

[0011]

или

[0012]

Z₁, Z₂, Z₃ и Z₄ являются одинаковыми или отличаются друг от друга, при этом каждый представляет собой атом водорода, атом фтора, атом хлора, атом брома, цианогруппу, винильную группу, метоксигруппу, фторметоксигруппу, дифторметоксигруппу, метильную группу, этильную группу, диметиламиногруппу, циклопропильную группу или фурильную группу, или Z₁ и Z₂, или Z₃ и Z₄ необязательно образуют, вместе с соответствующими атомами углерода, связанными с ними, бензольное кольцо, пиридиновое кольцо или диоксолановое кольцо;

W является -CH₂-, атомом кислорода или -NH-;

n является 0;

R₁ является аминогруппой; и

R₂ и R₃ являются одинаковыми или отличаются друг от друга, при этом каждый представляет собой метоксигруппу, метильную группу или фенильную группу, или R₂ и R₃ необязательно образуют, вместе с атомом азота, связанным с ними, гидроксиазетидинильную группу, пирролидинильную группу или пиперидинильную группу.

[4] Противоопухолевое средство согласно любому из [1]-[3], где соединение пиразоло[3,4-d]пиримидина является соединением, выбранным из группы, состоящей из следующих соединений (1)-(20):

(1) (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(5-бром-4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-2-метилфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамид,

(2) (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(2-хлор-4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-5-метилфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамид,

(3) (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(2-хлор-4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-3-метилфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамид,

(4) (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-2-метилфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамид,

(5) (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)нафталин-1-ил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамид,

(6) (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(2-хлор-4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)фенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамид,

(7) (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-2-метоксифенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамид,

(8) (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(3-хлор-4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)фенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамид,

(9) (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(5-хлор-4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-2-метоксифенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамид,

(10) (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-5-фтор-2-метилфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамид,

(11) (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(3-хлор-4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-2-метоксифенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамид,

(12) (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-3-фтор-2-метилфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамид,

(13) (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-2,3-диметилфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамид,

(14) (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-3-фтор-2-метоксифенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамид,

(15) (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(2-(дифторметокси)-4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)фенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамид,

(16) (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-2-(фторметокси)фенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамид,

(17) (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(2-бром-4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)фенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамид,

(18) (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(2-хлор-4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-5-фторфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамид,

(19) (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(5-хлор-4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-2-метилфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамид и

(20) (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(2,5-дихлор-4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)фенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамид.

[5] Противоопухолевое средство согласно любому из [1]-[4], где другое противоопухолевое средство(а) является по меньшей мере одним средством, выбранным из группы, состоящей из антиметаболита, молекулярно-направленного лекарственного средства, лекарственного средства на основе платины и лекарственного средства на основе алкалоида.

[6] Противоопухолевое средство согласно любому из [1]-[5], где другое противоопухолевое средство(а) является по меньшей мере одним средством, выбранным из группы, состоящей из 5-фтороурацила (5-ФУ), 5-фтор-2'-дезоксиуридина (FdUrd), трифлуридина, гемцитабина, капецитабина, трастузумаба, трастузумаба эмтанзина, AZD8055, эверолимуса, дактолизиба, бупарлизиба, таселизиба, палбоциклиба, цисплатина и паклитаксела.

[7] Средство, усиливающее противоопухолевое действие другого противоопухолевого средства (средств), включающее соединение пиразоло[3,4-d]пиримидина следующей формулы (I) или его соль в качестве действующего вещества:

[0013]

[0014]

Y представляет собой -C(R₄)=C(R₅)(R₆);

n представляет собой целое число от 0 до 2;

[8] Противоопухолевое средство для лечения онкологического больного, которому вводят другое противоопухолевое средство(а), где противоопухолевое средство включает соединение пиразоло[3,4-d]пиримидина или его соль, где

соединение пиразоло[3,4-d]пиримидина является соединением следующей формулы (I):

[0015]

[0016]

Y представляет собой -C(R₄)=C(R₅)(R₆);

n представляет собой целое число от 0 до 2;

[9] Противоопухолевое средство, включающее соединение пиразоло[3,4-d]пиримидина или его соль и другое противоопухолевое средство(а) в комбинации, где

[0017]

[0018]

Y представляет собой -C(R₄)=C(R₅)(R₆);

n представляет собой целое число от 0 до 2;

[10] Соединение пиразоло[3,4-d]пиримидина следующей формулы (I) или его соль для применения при лечении опухоли путем комбинированного введения с другим противоопухолевым средством(ами):

[0019]

[0020]

Y представляет собой -C(R₄)=C(R₅)(R₆);

n представляет собой целое число от 0 до 2;

[11] Соединение пиразоло[3,4-d]пиримидина согласно [10] или его соль, где соединение пиразоло[3,4-d]пиримидина является соединением формулы (I), где

X является 4-8-членной азотсодержащей насыщенной гетероциклической группой, необязательно содержащей атом галогена или C1-C6 алкильную группу в качестве заместителя;

Y является -C(R₄)=C(R₅)(R₆);

W является -CH₂-, атомом кислорода или -NH-;

n является 0;

R₁ является аминогруппой;

[12] Соединение пиразоло[3,4-d]пиримидина согласно [10] или [11] или его соль, где соединение пиразоло[3,4-d]пиримидина является соединением формулы (I), где

Y является

[0021]

или

[0022]

W является -CH₂-, атомом кислорода или -NH-;

n является 0;

R₁ является аминогруппой; и

[13] Соединение пиразоло[3,4-d]пиримидина согласно любому из [10]-[12] или его соль, где соединение пиразоло[3,4-d]пиримидина является соединением, выбранным из группы, состоящей из следующих соединений (1)-(20):

[14] Соединение пиразоло[3,4-d]пиримидина согласно любому из [10]-[13] или его соль, где другое противоопухолевое средство(а) является по меньшей мере одним средством, выбранным из группы, состоящей из антиметаболита, молекулярно-направленного лекарственного средства, лекарственного средства на основе платины и лекарственного средства на основе алкалоида.

[15] Соединение пиразоло[3,4-d]пиримидина согласно любому из [10]-[14] или его соль, где другое противоопухолевое средство(а) является по меньшей мере одним средством, выбранным из группы, состоящей из 5-фтороурацила (5-ФУ), 5-фтор-2'-дезоксиуридина (FdUrd), трифлуридина, гемцитабина, капецитабина, трастузумаба, трастузумаба эмтанзина, AZD8055, эверолимуса, дактолизиба, бупарлизиба, таселизиба, палбоциклиба, цисплатина и паклитаксела.

[16] Соединение пиразоло[3,4-d]пиримидина следующей формулы (I) или его соль для применения в усилении противоопухолевого действия другого противоопухолевого средства (средств):

[0023]

[0024]

Y представляет собой -C(R₄)=C(R₅)(R₆);

n представляет собой целое число от 0 до 2;

[17] Соединение пиразоло[3,4-d]пиримидина следующей формулы (I) или его соль для применения при лечении опухоли у онкологического больного, которому вводят другое противоопухолевое средство(а):

[0025]

[0026]

Y представляет собой -C(R₄)=C(R₅)(R₆);

n представляет собой целое число от 0 до 2;

[18] Комбинация соединения пиразоло[3,4-d]пиримидина следующей формулы (I) или его соли и другого противоопухолевого средства (средств) для применения при лечении опухоли

[0027]

[0028]

Y представляет собой -C(R₄)=C(R₅)(R₆);

n представляет собой целое число от 0 до 2;

[19] Применение соединения пиразоло[3,4-d]пиримидина следующей формулы (I) или его соли для получения противоопухолевого средства для комбинированного введения с другим противоопухолевым средством(ами):

[0029]

[0030]

Y представляет собой -C(R₄)=C(R₅)(R₆);

n представляет собой целое число от 0 до 2;

[20] Применение согласно [19], где соединение пиразоло[3,4-d]пиримидина является соединением формулы (I), где

Y является -C(R₄)=C(R₅)(R₆);

W является -CH₂-, атомом кислорода или -NH-;

n является 0;

R₁ является аминогруппой;

[21] Применение согласно [19] или [20], где соединение пиразоло[3,4-d]пиримидина является соединением формулы (I), где

Y является

[0031]

или

[0032]

W является -CH₂-, атомом кислорода или -NH-;

n является 0;

R₁ является аминогруппой; и

[22] Применение согласно любому из [19]-[21], где соединение пиразоло[3,4-d]пиримидина является соединением, выбранным из группы, состоящей из следующих соединений (1)-(20):

(19) (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(5-хлор-4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-2-метилфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамид, и

[23] Применение согласно любому из [19]-[22], где другое противоопухолевое средство(а) является по меньшей мере одним средством, выбранным из группы, состоящей из антиметаболита, молекулярно-направленного лекарственного средства, лекарственного средства на основе платины и лекарственного средства на основе алкалоида.

[24] Применение согласно любому из [19]-[23], где другое противоопухолевое средство(а) является по меньшей мере одним средством, выбранным из группы, состоящей из 5-фтороурацила (5-ФУ), 5-фтор-2'-дезоксиуридина (FdUrd), трифлуридина, гемцитабина, капецитабина, трастузумаба, трастузумаба эмтанзина, AZD8055, эверолимуса, дактолизиба, бупарлизиба, таселизиба, палбоциклиба, цисплатина и паклитаксела.

[25] Применение соединения пиразоло[3,4-d]пиримидина следующей формулы (I) или его соли для получения средства, усиливающего противоопухолевое действие другого противоопухолевого средства (средств):

[0033]

[0034]

Y представляет собой -C(R₄)=C(R₅)(R₆);

n представляет собой целое число от 0 до 2;

[26] Применение соединения пиразоло[3,4-d]пиримидина следующей формулы (I) или его соли для получения противоопухолевого средства для лечения онкологического больного, которому вводят другое противоопухолевое средство(а):

[0035]

[0036]

Y представляет собой -C(R₄)=C(R₅)(R₆);

n представляет собой целое число от 0 до 2;

[27] Применение соединения пиразоло[3,4-d]пиримидина следующей формулы (I) или его соли для получения противоопухолевого средства, включающего другое противоопухолевое средство(а) в комбинации с ним:

[0037]

[0038]

Y представляет собой -C(R₄)=C(R₅)(R₆);

n представляет собой целое число от 0 до 2;

[28] Способ лечения опухоли, включающий выполнение комбинированного введения соединения пиразоло[3,4-d]пиримидина следующей формулы (I) или его соли и другого противоопухолевого средства (средств) нуждающемуся в этом субъекту:

[0039]

[0040]

Y представляет собой -C(R₄)=C(R₅)(R₆);

n представляет собой целое число от 0 до 2;

[29] Способ лечения согласно [28], где соединение пиразоло[3,4-d]пиримидина является соединением формулы (I), где

Y является -C(R₄)=C(R₅)(R₆);

W является -CH₂-, атомом кислорода или -NH-;

n является 0;

R₁ является аминогруппой;

[30] Способ лечения согласно [28] или [29], где соединение пиразоло[3,4-d]пиримидина является соединением формулы (I), где

Y является

[0041]

или

[0042]

W является -CH₂-, атомом кислорода или -NH-;

n является 0;

R₁ является аминогруппой; и

[31] Способ лечения согласно любому из [28]-[30], где соединение пиразоло[3,4-d]пиримидина является соединением, выбранным из группы, состоящей из следующих соединений (1)-(20):

[32] Способ лечения согласно любому из [28]-[31], где другое противоопухолевое средство(а) является по меньшей мере одним средством, выбранным из группы, состоящей из антиметаболита, молекулярно-направленного лекарственного средства, лекарственного средства на основе платины и лекарственного средства на основе алкалоида.

[33] Способ лечения согласно любому из [28]-[32], где другое противоопухолевое средство(а) является по меньшей мере одним средством, выбранным из группы, состоящей из 5-фтороурацила (5-ФУ), 5-фтор-2'-дезоксиуридина (FdUrd), трифлуридина, гемцитабина, капецитабина, трастузумаба, трастузумаба эмтанзина, AZD8055, эверолимуса, дактолизиба, бупарлизиба, таселизиба, палбоциклиба, цисплатина и паклитаксела.

[34] Способ усиления противоопухолевого действия другого противоопухолевого средства (средств), включающий введение соединения пиразоло[3,4-d]пиримидина следующей формулы (I) или его соли нуждающемуся в этом субъекту:

[0043]

[0044]

Y представляет собой -C(R₄)=C(R₅)(R₆);

n представляет собой целое число от 0 до 2;

[35] Способ лечения опухоли у онкологического больного, которому вводят другое противоопухолевое средство(а), включающий введение соединения пиразоло[3,4-d]пиримидина следующей формулы (I) или его соли нуждающемуся в этом субъекту:

[0045]

[0046]

Y представляет собой -C(R₄)=C(R₅)(R₆);

n представляет собой целое число от 0 до 2;

[36] Способ лечения опухоли, включающий введение комбинации соединения пиразоло[3,4-d]пиримидина следующей формулы (I) или его соли и другого противоопухолевого средства (средств) нуждающемуся в этом субъекту:

[0047]

[0048]

Y представляет собой -C(R₄)=C(R₅)(R₆);

n представляет собой целое число от 0 до 2;

Эффекты изобретения

[0049]

Настоящее изобретение обеспечивает возможность лечения рака, которое оказывает превосходное противоопухолевое действие, предотвращая нежелательные эффекты.

Краткое описание чертежей

[0050]

[Фигура 1] Фигура 1 является диаграммой, на которой показан результат комбинированного применения трастузумаба и Соединения 1.

[Фигура 2] Фигура 2 является диаграммой, на которой показан результат комбинированного применения трастузумаба эмтанзина и Соединения 1.

[Фигура 3] Фигура 3 является диаграммой, на которой показан результат комбинированного применения капецитабина (359 мг/кг/день) и Соединения 1.

[Фигура 4] Фигура 4 является диаграммой, на которой показан результат комбинированного применения капецитабина (809 мг/кг/день) и Соединения 1.

Подробное описание изобретения

[0051]

В настоящем изобретении ингибитор HER2, который оказывает превосходное синергетическое действие с другим противоопухолевым средством(ами), является соединением пиразоло[3,4-d]пиримидина следующей формулы (I) или его солью:

[0052]

[0053]

где X, Y, Z₁ к Z₄, W, n и R₁-R₃ имеют определенное выше значение.

[0054]

В настоящем описании примеры "заместителя" включают атом галогена, гидроксильную группу, цианогруппу, нитрогруппу, алкильную группу, галогеналкильную группу, циклоалкильную группу, циклоалкил-алкильную группу, аралкильную группу, алкенильную группу, алкинильную группу, алкоксигруппу, галогеналкоксигруппу, циклоалкоксигруппу, циклоалкил-алкоксигруппу, аралкилоксигруппу, алкилтиогруппу, циклоалкил-алкилтиогруппу, аминогруппу, моно- или ди-алкиламиногруппу, циклоалкил-алкиламиногруппу, ацильную группу, ацилоксигруппу, оксогруппу, карбоксильную группу, алкоксикарбонильную группу, аралкилоксикарбонильную группу, карбамоильную группу, насыщенную или ненасыщенную гетероциклическую группу, ароматическую углеводородную группу и насыщенную гетероциклилоксигруппу. Если заместитель присутствует, его количество, как правило, составляет 1, 2 или 3.

[0055]

В настоящем описании примеры "атома галогена" включают атом фтора, атом хлора, атом брома и атом иода.

[0056]

В настоящем описании "алкильная группа" может быть линейной или разветвленной. Соответствующие примеры включают C1-C6 алкильные группы, такие как метильную группу, этильную группу, н-пропильную группу, изопропильную группу, н-бутильную группу, изобутильную группу, втор-бутильную группу, трет-бутильную группу, н-пентильную группу, изопентильную группу и гексильную группу.

[0057]

В настоящем описании "галогеналкил группа" представляет собой линейную или разветвленную алкильную группу, содержащую 1-6 атомов углерода и содержащую 1-13 атомов галогена (галоген-C1-C6 алкильная группа). Соответствующие примеры включают галоген-C1-C6 алкильные группы, такие как фторметильную группу, дифторметильную группу, трифторметильную группу, трихлорметильную группу, фторэтильную группу, 1,1,1-трифторэтильную группу, монофтор-н-пропильную группу, перфтор-н-пропильную группу и перфторизопропильную группу, и предпочтительно включают галоген-C1-C4 алкильные группы.

[0058]

В настоящем описании конкретные примеры "циклоалкильной группы" включают C3-C7 циклоалкильные группы, такие как циклопропильную группу, циклобутильную группу, циклопентильную группу, циклогексильную группу и циклогептильную группу.

[0059]

В настоящем описании примеры "циклоалкил-алкильной группы" включают C3-C7 циклоалкил-замещенные C1-C4 алкильные группы, такие как циклопропилметильную группу, циклобутилметильную группу, циклопентилметильную группу, циклогексилметильную группу и циклогептилметильную группу.

[0060]

В настоящем описании примеры "аралкильной группы" включают C7-C13 аралкильные группы, такие как бензильную группу, фенэтильную группу, нафтилметильную группу и флуоренилметильную группу.

[0061]

В настоящем описании "алкенильная группа" может быть линейной, разветвленной или циклической и означает ненасыщенную углеводородную группу, содержащую по меньшей мере одну двойную связь. Соответствующие примеры включают C2-C6 алкенильные группы, такие как винильную группу, аллильную группу, 1-пропенильную группу, 2-метил-2-пропенильную группу, изопропенильную группу, 1-, 2- или 3-бутенильную группу, 2-, 3-, или 4-пентенильную группу, 2-метил-2-бутенильную группу, 3-метил-2-бутенильную группу, 5-гексенильную группу, 1-циклопентенильную группу, 1-циклогексенильную группу и 3-метил-3-бутенильную группу.

[0062]

В настоящем описании "алкинильная группа" может быть линейной, разветвленной или циклической и означает ненасыщенную углеводородную группу, содержащую по меньшей мере одну тройную связь. Соответствующие примеры включают C2-C6 алкинильные группы, такие как этинильную группу, 1- или 2-пропинильную группу, 1-, 2- или 3-бутинильную группу и 1-метил-2-пропинильную группу.

[0063]

В настоящем описании "алкоксигруппа" может быть линейной или разветвленной. Соответствующие примеры включают C1-C6 алкоксигруппы, такие как метоксигруппу, этоксигруппу, н-пропоксигруппу, изопропоксигруппу, н-бутоксигруппу, изобутоксигруппу, втор-бутоксигруппу, трет-бутоксигруппу, пентилоксигруппу, изопентилоксигруппу и гексилоксигруппу.

[0064]

В настоящем описании "галогеналкоксигруппа" представляет собой линейную или разветвленную алкоксигруппу, содержащую 1-6 атомов углерода и содержащую 1-13 атомов галогена (галоген-C1-C6 алкоксигруппа). Соответствующие примеры включают галоген-C1-C6 алкоксигруппы, такие как фторметоксигруппу, дифторметоксигруппу, трифторметоксигруппу, трихлорметоксигруппу, фторэтоксигруппу, 1,1,1-трифторэтоксигруппу, монофтор-н-пропоксигруппу, перфтор-н-пропоксигруппу и перфтор-изопропоксигруппу, и предпочтительно включают галоген-C1-C4 алкоксигруппы.

[0065]

В настоящем описании примеры "циклоалкоксигруппы" включают C3-C7 циклоалкоксигруппы, такие как циклопропоксигруппу, циклобутоксигруппу, циклопентилоксигруппу, циклогексилоксигруппу и циклогептилоксигруппу.

[0066]

В настоящем описании примеры "циклоалкил-алкоксигруппы" включают C3-C7 циклоалкил-замещенные C1-C4 алкоксигруппы, такие как циклопропилметоксигруппу, циклобутилметоксигруппу, циклопентилметоксигруппу, циклогексилметоксигруппу и циклогептилметоксигруппу.

[0067]

В настоящем описании примеры "аралкилоксигруппа" включают C7-C13 аралкилоксигруппы, такие как бензилоксигруппу, фенэтилоксигруппу, нафтилметилоксигруппу и флуоренилметилоксигруппу.

[0068]

В настоящем описании, "алкилтиогруппа" может быть линейной или разветвленной. Соответствующие примеры включают C1-C6 алкилтиогруппы, такие как метилтио группу, этилтиогруппу, н-пропилтиогруппу, изопропилтиогруппу, н-бутилтиогруппу, изобутилтиогруппу, трет-бутилтиогруппу, н-пентилтиогруппу, изопентилтиогруппу и гексилтиогруппу.

[0069]

В настоящем описании примеры "циклоалкил-алкилтиогруппы" включают C3-C7 циклоалкил-замещенные C1-C4 алкилтиогруппы, такие как циклопропилметилтиогруппу, циклобутилметилтиогруппу, циклопентилметилтиогруппу, циклогексилметилтиогруппу и циклогептилметилтиогруппу.

[0070]

В настоящем описании примеры "моноалкиламиногруппа" включает линейные или разветвленные монозамещенные C1-C6 алкильной группой аминогруппы, такие как метиламиногруппу, этиламиногруппу, н-пропиламиногруппу, изопропиламиногруппу, н-бутиламиногруппу, изобутиламиногруппу, трет-бутиламиногруппу, н-пентиламиногруппу, изопентиламиногруппу и гексиламиногруппу.

[0071]

В настоящем описании примеры "диалкиламиногруппы" включают линейные или разветвленные дизамещенные C1-C6 алкильными группами аминогруппы, такие как диметиламиногруппу, диэтиламиногруппу, ди(н-пропил)аминогруппу, диизопропиламино-группу, ди(н-бутил)аминогруппу, диизобутиламиногруппу, ди(трет-бутил)аминогруппу, ди(н-пентил)аминогруппу, диизопентиламино-группу, дигексиламиногруппу, метилэтиламиногруппу и метилизопропиламиногруппу.

[0072]

В настоящем описании примеры "циклоалкил-алкиламиногруппы" включают C3-C7 циклоалкил-замещенные C1-C4 алкиламиногруппы, такие как циклопропилметиламиногруппу, циклобутилметиламино-группу, циклопентилметиламиногруппу, циклогексилметиламиногруппу и циклогептилметиламиногруппу.

[0073]

В настоящем описании "ацильная группа" означает алкилкарбонильную группу или арилкарбонильную группу.

[0074]

В настоящем описании примеры "алкилкарбонильной группы" включают линейные или разветвленные (C1-C6 алкил)карбонильные группы, такие как метилкарбонильную группу, этилкарбонильную группу, н-пропилкарбонильную группу, изопропилкарбонильную группу, н-бутилкарбонильную группу, изобутилкарбонильную группу, трет-бутилкарбонильную группу, н-пентилкарбонильную группу, изопентилкарбонильную группу и гексилкарбонильную группу.

[0075]

В настоящем описании примеры "арилкарбонильная группа" включает (C6-C13 арил)карбонильные группы, такие как фенилкарбонильную группу, нафтилкарбонильную группу, флуоренилкарбонильную группу, антрилкарбонильную группу, бифенилилкарбонильную группу, тетрагидронафтилкарбонильную группу, хроманилкарбонильную группу, 2,3-дигидро-1,4-диоксанафталинилкарбонильную группу, инданилкарбонильную группу и фенантрилкарбонильную группу.

[0076]

В настоящем описании "ацилоксигруппа" означает алкилкарбонилоксигруппу или арилкарбонилоксигруппу.

[0077]

В настоящем описании примеры "алкилкарбонилоксигруппы" включают линейные или разветвленные (C1-C6 алкил)карбонилоксигруппы, такие как метилкарбонилоксигруппу, этилкарбонилоксигруппу, н-пропилкарбонилоксигруппу, изопропилкарбонилоксигруппу, н-бутилкарбонилоксигруппу, изобутилкарбонилоксигруппу, трет-бутилкарбонилоксигруппу, н-пентилкарбонилоксигруппу, изопентилкарбонилоксигруппу и гексилкарбонилоксигруппу.

[0078]

В настоящем описании примеры "арилкарбонилоксигруппы" включают (C6-C13 арил)карбонилоксигруппы, такие как фенилкарбонилоксигруппу, нафтилкарбонилоксигруппу, флуоренилкарбонилоксигруппу, антрилкарбонилоксигруппу, бифенилилкарбонилоксигруппу, тетрагидронафтилкарбонилоксигруппу, хроманилкарбонилоксигруппу, 2,3-дигидро-1,4-диоксанафталинилкарбонилоксигруппу, инданилкарбонилоксигруппу и фенантрилкарбонилоксигруппу.

[0079]

В настоящем описании "алкоксикарбонильная группа" может быть линейной или разветвленной. Соответствующие примеры включают (C1-C6 алкокси)карбонильные группы, такие как метоксикарбонильную группу, этоксикарбонильную группу, пропоксикарбонильную группу, изопропоксикарбонильную группу, бутоксикарбонильную группу, изобутоксикарбонильную группу, трет-бутоксикарбонильную группу, пентилоксикарбонильную группу, изопентилоксикарбонильную группу и гексилоксикарбонильную группу.

[0080]

В настоящем описании примеры "аралкилоксикарбонильной группы" включают (C7-C13 аралкил)оксикарбонильные группы, такие как бензилоксикарбонильную группу, фенэтилоксикарбонильную группу, нафтилметилоксикарбонильную группу и флуоренилметилоксикарбонильную группу.

[0081]

В настоящем описании "насыщенная гетероциклическая группа" является насыщенной гетероциклической группой, содержащей гетероатом, выбранный из группы, состоящей из атома азота, атома кислорода и атома серы. Конкретные соответствующие примеры включают морфилоногруппу, пирролидинильную группу, пиперидинильную группу, пиперазинильную группу, 4-метил-1-пиперазинильную группу, тетрагидрофуранильную группу, тетрагидропиранильную группу, тетрагидротиофенильную группу, тиазолидинильную группу и оксазолидинильную группу.

[0082]

В настоящем описании "ненасыщенная гетероциклическая группа" является моноциклической или полициклической полностью ненасыщенной или частично ненасыщенной гетероциклической группой, содержащей гетероатом, выбранный из группы, состоящей из атома азота, атома кислорода и атома серы. Конкретные соответствующие примеры включают имидазолильную группу, тиенильную группу, фурильную группу, пирролильную группу, оксазолильную группу, изоксазолильную группу, тиазолильную группу, изотиазолильную группу, тиадиазолильную группу, пиразолильную группу, триазолильную группу, тетразолильную группу, пиридильную группу, пиразильную группу, пиримидинильную группу, пиридазинильную группу, индолильную группу, изоиндолильную группу, индазолильную группу, триазолопиридильную группу, бензимидазолильную группу, бензоксазолильную группу, бензотиазолильную группу, бензотиенильную группу, бензофуранильную группу, пуринильную группу, хинолильную группу, изохинолильную группу, хиназолинильную группу, хиноксалинильную группу, метилендиоксифенильную группу, этилендиоксифенильную группу и дигидробензофуранильную группу.

[0083]

В настоящем описании примеры "ароматической углеводородной группы" включают C6-C14 ароматические углеводородные группы, такие как фенильную группу, толуильую группу, ксилильную группу, нафтильную группу, антраценильную группу, фенантрильную группу, флуоренильную группу и тетрагидронафтильную группу.

[0084]

В настоящем описании "насыщенная гетероциклилоксигруппа" является насыщенной гетероциклилоксигруппой, содержащей гетероатом, выбранный из группы, состоящей из атома азота, атома кислорода и атома серы. Конкретные соответствующие примеры включают морфолинилоксигруппу, 1-пирролидинилоксигруппу, пиперидиноксигруппу, пиперазинилоксигруппу, 4-метил-1-пиперазинилоксигруппу, тетрагидрофуранилоксигруппу, тетрагидропиранилоксигруппу, тетрагидротиофенилоксигруппу, тиазолидинилоксигруппу и оксазолидинилоксигруппу.

[0085]

Термин "CA-CB" при описании группы в настоящем документе относится к группе, содержащей A-B атомов углерода. Например, "C1-C6 алкильная группа" относится к алкильной группе, содержащей 1-6 атомов углерода, а "C6-C14 ароматическая углеводородная оксигруппа" относится к оксигруппе, связанной с ароматической углеводородной группе, содержащей 6-14 атомов углерода. Термин "A-B-членный" означает, что количество атомов, составляющих кольцо (количество членов кольца), составляет A-B. Например, "4-10-членная насыщенная гетероциклическая группа" означают насыщенную гетероциклическую группу, в которой количество членов кольца составляет 4-10.

[0086]

В соединении пиразоло[3,4-d]пиримидина формулы (I) настоящего изобретения, X представляет собой необязательно замещенную 4-10-членную азотсодержащую насыщенную гетероциклическую группу. В этом отношении "4-10-членная азотсодержащая насыщенная гетероциклическая группа" представляет собой 4-10-членную насыщенную гетероциклическую группу, содержащую по меньшей мере один атом азота в кольце, и дополнительно содержащую от 0 до 2 идентичных или разных гетероатома, выбранных из группы, состоящей из атома кислорода и атома серы, в кольце. Соответствующие примеры включают азетидинильную группу, пирролидинильную группу, пиперидинильную группу, пиперазинильную группу, морфолинильную группу, октагидрохинолиниленовую группу и октагидроиндолиленовую группу.

Предпочтительно 4-10-членная азотсодержащая насыщенная гетероциклическая группа является 4-8-членной насыщенной гетероциклической группой, содержащей один атом азота в кольце, более предпочтительно пирролидинильной группой или пиперидинильной группой, еще более предпочтительно 1,3-пирролидинильной группой или 1,3-пиперидинильной группой, наиболее предпочтительно 1,3-пиперидинильной группой.

Примеры "заместителя", который может быть присоединен к 4-10-членной азотсодержащей насыщенной гетероциклической группе, включают заместитель, как описано выше. Заместителем предпочтительно является атом галогена, гидроксильная группа, цианогруппа, C1-C6 алкильная группа или аминогруппа, более предпочтительно атом галогена или C1-C6 алкильная группа, еще более предпочтительно атом фтора или метильная группа, наиболее предпочтительно атом фтора.

Необязательно замещенная атомом галогена или C1-C6 алкильной группой 4-10-членная азотсодержащая насыщенная гетероциклическая группа предпочтительно представляет собой необязательно замещенную атомом галогена или C1-C6 алкильной группой пирролидинильную группу, или необязательно замещенную атомом галогена или C1-C6 алкильной группой пиперидинильную группу, более предпочтительно необязательно замещенную C1-C6 алкильной группой пирролидинильную группу, или необязательно замещенную атомом фтора пиперидинильную группу, еще более предпочтительно пирролидинильную группу, метилпирролидинильную группу, пиперидинильную группу или фторпиперидинильную группу, наиболее предпочтительно пиперидинильную группу или фторпиперидинильную группу.

[0087]

В соединении пиразоло[3,4-d]пиримидина формулы (I), X предпочтительно является необязательно замещенной 4-10-членной азотсодержащей насыщенной гетероциклической группой, более предпочтительно 4-10-членной азотсодержащей насыщенной гетероциклической группой, необязательно содержащей атом галогена, гидроксильную группу, цианогруппу, C1-C6 алкильную группу или аминогруппу в качестве заместителя, еще более предпочтительно 4-8-членной азотсодержащей насыщенной гетероциклической группой, необязательно содержащей атом галогена или C1-C6 алкильную группу в качестве заместителя, более предпочтительно пирролидинильной группой, необязательно содержащей атом галогена или C1-C6 алкильную группу в качестве заместителя, или пиперидинильной группой, необязательно содержащей атом галогена или C1-C6 алкильную группу в качестве заместителя, еще более предпочтительно пирролидинильной группой, необязательно содержащей C1-C6 алкильную группу в качестве заместителя, или пиперидинильной группой, необязательно содержащей атом галогена в качестве заместителя, еще более предпочтительно пирролидинильной группой, необязательно содержащей метильную группу в качестве заместителя, или пиперидинильной группой, необязательно содержащей атом фтора в качестве заместителя, еще более предпочтительно пиперидинильной группой, необязательно содержащей атом фтора в качестве заместителя, еще более предпочтительно пиперидинильной группой.

[0088]

Атом азота в 4-10-членной азотсодержащей насыщенной гетероциклической группе, представленной X, предпочтительно связан с карбонильной группой в -COY в формуле (I).

[0089]

В соединении пиразоло[3,4-d]пиримидина формулы (I) настоящего изобретения, Y представляет собой -C(R₄)=C(R₅)(R₆). R₄, R₅ и R₆ будут указаны далее.

[0090]

В соединении пиразоло[3,4-d]пиримидина формулы (I) настоящего изобретения, Z₁, Z₂, Z₃ и Z₄ являются одинаковыми или отличаются друг от друга, при этом каждый представляет собой атом водорода, атом галогена, цианогруппу, C2-C6 алкенильную группу, необязательно замещенную C1-C6 алкоксигруппу, необязательно замещенную C1-C6 алкильную группу, необязательно замещенную аминогруппу, необязательно замещенную C3-C7 циклоалкильную группу, C6-C14 ароматическую углеводородную группу или 4-14-членную ненасыщенную гетероциклическую группу, или Z₁ и Z₂, или Z₃ и Z₄ необязательно образуют, вместе с соответствующими атомами углерода, связанными с ними, бензольное кольцо или 5-7-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо.

[0091]

"C2-C6 алкенильная группа", представленная Z₁, Z₂, Z₃ или Z₄, предпочтительно является винильной группой, пропенильной группой, бутенильной группой, пентенильной группой, гексенильной группой, циклопропенильной группой, циклобутенильной группой, циклопентенильной группой или циклогексенильной группой, более предпочтительно винильной группой, пропенильной группой, бутенильной группой, циклопропенильной группой или циклобутенильной группой, еще более предпочтительно винильной группой, 1-пропенильной группой, 2-пропенильной группой или изопропенильной группой, наиболее предпочтительно винильной группой.

[0092]

"C1-C6 алкоксигруппа" в "необязательно замещенной C1-C6 алкокси группе", представленной Z₁, Z₂, Z₃ или Z₄, предпочтительно является метоксигруппой, этоксигруппой, пропоксигруппой, бутоксигруппой, пентилоксигруппой или гексилоксигруппой, более предпочтительно метоксигруппой, этоксигруппой, пропоксигруппой или бутоксигруппой, еще более предпочтительно метоксигруппой, этоксигруппой, н-пропоксигруппой, изопропоксигруппой, н-бутоксигруппой, втор-бутоксигруппой или трет-бутоксигруппой, наиболее предпочтительно метоксигруппой.

Примеры "заместителя" для "необязательно замещенной C1-C6 алкоксигруппы", представленной Z₁, Z₂, Z₃ или Z₄, включают заместитель, как описано выше. Заместителем предпочтительно является атом галогена, более предпочтительно атом фтора.

"Необязательно замещенная C1-C6 алкоксигруппа", представленная Z₁, Z₂, Z₃ или Z₄, предпочтительно является необязательно замещенной атомом галогена C1-C6 алкоксигруппой, более предпочтительно необязательно замещенной атомом фтора C1-C6 алкоксигруппой, еще более предпочтительно необязательно замещенной атомом фтора метоксигруппой, необязательно замещенной атомом фтора этокси группой, необязательно замещенной атомом фтора пропоксигруппой, необязательно замещенной атомом фтора бутоксигруппой, необязательно замещенной атомом фтора пентилоксигруппой или необязательно замещенной атомом фтора гексилоксигруппой, более предпочтительно необязательно замещенной атомом фтора метоксигруппой, необязательно замещенной атомом фтора этоксигруппой, необязательно замещенной атомом фтора пропоксигруппой или необязательно замещенной атомом фтора бутоксигруппой, еще более предпочтительно необязательно замещенной атомом фтора метоксигруппой, необязательно замещенной атомом фтора этоксигруппой, необязательно замещенной атомом фтора н-пропоксигруппой, необязательно замещенной атомом фтора изопропоксигруппой, необязательно замещенной атомом фтора н-бутоксигруппой, необязательно замещенной атомом фтора втор-бутоксигруппой или необязательно замещенной атомом фтора трет-бутоксигруппой, еще более предпочтительно метоксигруппой, которая необязательно замещена 1 или 2 атомами фтора, этоксигруппой, которая необязательно замещена 1 или 2 атомами фтора, н-пропоксигруппой, которая необязательно замещена 1 или 2 атомами фтора, изопропоксигруппой, которая необязательно замещена 1 или 2 атомами фтора, н-бутоксигруппой, необязательно которая необязательно замещена 1 или 2 атомами фтора, втор-бутоксигруппой, которая необязательно замещена 1 или 2 атомами фтора, или трет-бутоксигруппой, которая необязательно замещена 1 или 2 атомами фтора, наиболее предпочтительно метоксигруппой, фторметоксигруппой или дифторметоксигруппой.

[0093]

"C1-C6 алкильная группа" в "необязательно замещенной алкильной группе C1-C6", представленной Z₁, Z₂, Z₃ или Z₄, предпочтительно является метильной группой, этильной группой, пропильной группой, бутильной группой, пентильной группой или гексильной группой, более предпочтительно метильной группой, этильной группой, н-пропильной группой, изопропильной группой, н-бутильной группой, изобутильной группой, втор-бутильной группой или трет-бутильной группой, наиболее предпочтительно метильной группой или этильной группой.

Примеры "заместителя" для " необязательно замещенной C1-C6 алкильной группы", представленной Z₁, Z₂, Z₃ или Z₄, включают заместитель, как описано выше.

"Необязательно замещенная C1-C6 алкильная группа", представленная Z₁, Z₂, Z₃ или Z₄, предпочтительно является незамещенной C1-C6 алкильной группой, более предпочтительно метильной группой, этильной группой, пропильной группой, бутильной группой, пентильной группой или гексильной группой, более предпочтительно метильной группой, этильной группой, н-пропильной группой, изопропильной группой, н-бутильной группой, изобутильной группой, втор-бутильной группой или трет-бутильной группой, наиболее предпочтительно метильной группой или этильной группой.

[0094]

Примеры "заместителя" для "необязательно замещенной аминогруппы", представленной Z₁, Z₂, Z₃ или Z₄, включают заместитель, как описано выше. Заместителем предпочтительно является алкильная группа, более предпочтительно C1-C6 алкильная группа, еще более предпочтительно метильная группа, этильная группа, пропильная группа, бутильная группа, пентильная группа или гексильная группа, более предпочтительно метильная группа, этильная группа, н-пропильная группа, изопропильная группа, н-бутильная группа, изобутильная группа, втор-бутильная группа или трет-бутильная группа, наиболее предпочтительно метильная группа.

Необязательно замещенная аминогруппа, представленная Z₁, Z₂, Z₃ или Z₄, предпочтительно является моно- или ди-алкиламиногруппой, более предпочтительно моно- или ди(C1-C6 алкил)аминогруппой, еще более предпочтительно ди(C1-C6 алкил)аминогруппой, более предпочтительно ди(C1-C4 алкил)аминогруппой, еще более предпочтительно диметиламиногруппой.

[0095]

"C3-C7 циклоалкильная группа" в "необязательно замещенной C3-C7 циклоалкильной группе", представленной Z₁, Z₂, Z₃ или Z₄, предпочтительно является циклопропильной группой, циклобутильной группой, циклопентильной группой, циклогексильной группой или циклогептильной группой, более предпочтительно циклопропильной группой, циклобутильной группой, циклопентильной группой или циклогексильной группой, наиболее предпочтительно циклопропильной группой.

Примеры "заместителя" для "необязательно замещенной C3-C7 циклоалкильной группы", представленной Z₁, Z₂, Z₃ или Z₄, включают заместитель, как описано выше.

"Необязательно замещенная C3-C7 циклоалкильная группа", представленная Z₁, Z₂, Z₃ или Z₄, предпочтительно является незамещенной C3-C7 циклоалкильной группой, более предпочтительно циклопропильной группой, циклобутильной группой, циклопентильной группой, циклогексильной группой или циклогептильной группой, более предпочтительно циклопропильной группой, циклобутильной группой, циклопентильной группой или циклогексильной группой, наиболее предпочтительно циклопропильной группой.

[0096]

"C6-C14 ароматическая углеводородная группа", представленная Z₁, Z₂, Z₃ или Z₄, предпочтительно является фенильной группой или нафтильной группой, более предпочтительно фенильной группой.

[0097]

"Ненасыщенная гетероциклическая группа", представленная Z₁, Z₂, Z₃ или Z₄, является моноциклической или полициклической полностью ненасыщенной или частично ненасыщенной гетероциклической группой, содержащей гетероатом, выбранный из группы, состоящей из атома азота, атома кислорода и атома серы. Соответствующие примеры включают имидазолильную группу, тиенильную группу, фурильную группу, пирролильную группу, оксазолильную группу, изоксазолильную группу, тиазолильную группу, изотиазолильную группу, тиадиазолильную группу, пиразолильную группу, триазолильную группу, тетразолильную группу, пиридильную группу, пиразильную группу, пиримидинильную группу, пиридазинильную группу, индолильную группу, изоиндолильную группу, индазолильную группу, триазолопиридильную группу, бензимидазолильную группу, бензоксазолильную группу, бензотиазолильную группу, бензотиенильную группу, бензофуранильную группу, пуринильную группу, хинолильную группу, изохинолильную группу, хиназолинильную группу, хиноксалинильную группу, метилендиоксифенильную группу, этилендиоксифенильную группу и дигидробензофуранильную группу. Ненасыщенная гетероциклическая группа предпочтительно является моноциклической или бициклической 4-14-членной ненасыщенной гетероциклической группой, содержащей один гетероатом, выбранный из группы, состоящей из атома азота, атома кислорода и атома серы, более предпочтительно моноциклической 4-6-членной полностью ненасыщенной гетероциклической группой, содержащей один гетероатом, выбранный из группы, состоящей из атома азота, атома кислорода и атома серы, еще более предпочтительно моноциклической 4-6-членной полностью ненасыщенной гетероциклической группой, содержащей один атом кислорода, наболее предпочтительно фурильной группой.

[0098]

"5-7-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо", образованное Z₁ и Z₂, или Z₃ и Z₄, вместе с атомами углерода, связанными с ними, является 5-7-членным насыщенным, полностью ненасыщенным или частично ненасыщенным гетероциклическим кольцом, содержащим гетероатом, выбранный из группы, состоящей из атома азота, атома кислорода и атома серы.

Количество гетероатомов в кольце предпочтительно составляет от 0 до 2, более предпочтительно от 1 или 2. Гетероатом предпочтительно является атомом азота и/или атомом кислорода.

5-7-членное насыщенное гетероциклическое кольцо или ненасыщенное гетероциклическое кольцо предпочтительно является пиррольным кольцом, пиразольным кольцом, имидазольным кольцом, пиридиновым кольцом, пиразиновым кольцом, пиримидиновым кольцом или диоксолановым кольцом, более предпочтительно пиридиновым кольцом или диоксолановым кольцом.

Кольцо, образованное Z₁ и Z₂, или Z₃ и Z₄, вместе с соответствующими атомами углерода, связанными с ними, также предпочтительно является бензольным кольцом.

[0099]

В соединении пиразоло[3,4-d]пиримидина формулы (I), Z₁, Z₂, Z₃ и Z₄ предпочтительно являются одинаковыми или отличаются друг от друга, при этом каждый представляет собой атом водорода, атом галогена, цианогруппу, C2-C6 алкенильную группу, необязательно замещенную C1-C6 алкоксигруппу, необязательно замещенную C1-C6 алкильную группу, необязательно замещенную аминогруппу, необязательно замещенную C3-C7 циклоалкильную группу, C6-C14 ароматическую углеводородную группу или моноциклическую или бициклическую 4-14-членную ненасыщенную гетероциклическую группу, или Z₁ и Z₂, или Z₃ и Z₄ необязательно образуют, вместе с соответствующими атомами углерода, связанными с ними, бензольное кольцо или 5-7-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо, более предпочтительно они являются одинаковыми или отличаются друг от друга, при этом каждый представляет собой атом водорода, атом галогена, цианогруппу, C2-C6 алкенильную группу, необязательно замещенную C1-C6 алкоксигруппу, необязательно замещенную C1-C6 алкильную группу, необязательно замещенную аминогруппу, необязательно замещенную C3-C7 циклоалкильную группу или моноциклическую или бициклическую 4-14-членную ненасыщенную гетероциклическую группу, или Z₁ и Z₂, или Z₃ и Z₄ необязательно образуют, вместе с соответствующими атомами углерода, связанными с ними, бензольное кольцо или 5-7-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо, еще более предпочтительно они являются одинаковыми или отличаются друг от друга, при этом каждый представляет собой атом водорода, атом галогена, цианогруппу, C2-C6 алкенильную группу, необязательно замещенную C1-C6 алкоксигруппу, C1-C6 алкильную группу, необязательно замещенную аминогруппу, C3-C7 циклоалкильную группу или моноциклическую 4-6-членную ненасыщенную гетероциклическую группу, содержащую один гетероатом, выбранный из группы, состоящей из атома азота, атома кислорода и атома серы, или Z₁ и Z₂, или Z₃ и Z₄ необязательно образуют, вместе с соответствующими атомами углерода, связанными с ними, бензольное кольцо или 5-7-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо, более предпочтительно они являются одинаковыми или отличаются друг от друга, при этом каждый представляет собой атом водорода, атом галогена, цианогруппу, C2-C6 алкенильную группу, необязательно замещенную атомом галогена C1-C6 алкоксигруппу, C1-C6 алкильную группу, необязательно замещенную C1-C6 алкильной группой аминогруппу, C3-C7 циклоалкильную группу или моноциклическую 4-6-членную ненасыщенную гетероциклическую группу, содержащую один гетероатом, выбранный из группы, состоящей из атома азота, атома кислорода и атома серы, или Z₁ и Z₂, или Z₃ и Z₄ необязательно образуют, вместе с соответствующими атомами углерода, связанными с ними, бензольное кольцо или 5-7-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо, еще более предпочтительно они являются одинаковыми или отличаются друг от друга, при этом каждый представляет собой атом водорода, атом фтора, атом хлора, атом брома, цианогруппу, C2-C6 алкенильную группу, необязательно замещенную атомом фтора C1-C6 алкоксигруппу, C1-C6 алкильную группу, моно- или ди(C1-C6 алкил)аминогруппу, C3-C7 циклоалкильную группу или моноциклическую 4-6-членную ненасыщенную гетероциклическую группу, содержащую один атом кислорода, или Z₁ и Z₂, или Z₃ и Z₄ необязательно, образуют, вместе с соответствующими атомами углерода, связанными с ними, бензольное кольцо или 5-7-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо, еще более предпочтительно они являются одинаковыми или отличаются друг от друга, при этом каждый представляет собой атом водорода, атом фтора, атом хлора, атом брома, цианогруппу, C2-C6 алкенильную группу, необязательно замещенную 1 или 2 атомами фтора C1-C6 алкоксигруппу, C1-C6 алкильную группу, ди(C1-C6 алкил)аминогруппу, C3-C7 циклоалкильную группу или моноциклическую 4-6-членную ненасыщенную гетероциклическую группу, содержащую один атом кислорода, или Z₁ и Z₂, или Z₃ и Z₄ необязательно образуют, вместе с соответствующими атомами углерода, связанными с ними, бензольное кольцо или 5-7-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо, еще более предпочтительно они являются одинаковыми или отличаются друг от друга, при этом каждый представляет собой атом водорода, атом фтора, атом хлора, атом брома, цианогруппу, винильную группу, метоксигруппу, фторметоксигруппу, дифторметоксигруппу, метильную группу, этильную группу, диметиламиногруппу, циклопропильную группу или фурильную группу, или Z₁ и Z₂, или Z₃ и Z₄ необязательно образуют, вместе с соответствующими атомами углерода, связанными с ними, бензольное кольцо, пиридиновое кольцо или диоксолановое кольцо, еще более предпочтительно они являются одинаковыми или отличаются друг от друга, при этом каждый представляет собой атом водорода, атом фтора, атом хлора, атом брома, метоксигруппу, фторметоксигруппу, дифторметоксигруппу или метильную группу, или Z₁ и Z₂, или Z₃ и Z₄ необязательно образуют, вместе с соответствующими атомами углерода, связанными с ними, бензольное кольцо.

[0100]

В соединении пиразоло[3,4-d]пиримидина формулы (I) настоящего изобретения, W представляет собой -CH₂-, атом кислорода или -NH-. W предпочтительно является -CH₂- или атомом кислорода, более предпочтительно -CH₂-.

[0101]

В соединении пиразоло[3,4-d]пиримидина формулы (I) настоящего изобретения, n представляет собой целое число от 0 до 2. n предпочтительно является 0 или 1, более предпочтительно 0.

[0102]

В соединении пиразоло[3,4-d]пиримидина формулы (I) настоящего изобретения R₁ представляет собой необязательно замещенную аминогруппу. В этом отношении примеры "заместителя", который может быть присоединен к аминогруппе, включают заместитель, как описано выше.

Необязательно замещенная аминогруппа, представленная R₁, предпочтительно является незамещенной аминогруппой.

[0103]

В соединении пиразоло[3,4-d]пиримидина формулы (I) настоящего изобретения, R₂ и R₃ являются одинаковыми или отличаются друг от друга, при этом каждый представляет собой атом водорода, необязательно замещенную C1-C6 алкоксигруппу, необязательно замещенную C1-C6 алкильную группу или необязательно замещенную C6-C14 ароматическую углеводородную группу, или R₂ и R₃ необязательно образуют, вместе с атомом азота, связанным с ними, необязательно замещенную 4-8-членную азотсодержащую насыщенную гетероциклическую группу.

[0104]

"C1-C6 алкоксигруппа" в "необязательно замещенной C1-C6 алкоксигруппе", представленной R₂ или R₃, является предпочтительно метоксигруппой, этоксигруппой, н-пропоксигруппой, изопропоксигруппой, н-бутоксигруппой, изобутоксигруппой, втор-бутоксигруппой, трет-бутоксигруппой, пентилоксигруппой или гексилоксигруппой, более предпочтительно метоксигруппой, этоксигруппой, н-пропоксигруппой, изопропоксигруппой, н-бутоксигруппой, изобутоксигруппой, втор-бутоксигруппой или трет-бутоксигруппой, наиболее предпочтительно метоксигруппой.

Примеры "заместителя" для необязательно замещенной C1-C6 алкоксигруппы, представленной R₂ или R₃, включают заместитель, как описано выше.

"Необязательно замещенная C1-C6 алкоксигруппа", представленная R₂ или R₃, предпочтительно является незамещенной C1-C6 алкоксигруппой, более предпочтительно метоксигруппой, этоксигруппой, н-пропоксигруппой, изопропоксигруппой, н-бутоксигруппой, изобутоксигруппой, втор-бутоксигруппой, трет-бутоксигруппой, пентилоксигруппой или гексилоксигруппой, еще более предпочтительно метоксигруппой, этоксигруппой, н-пропоксигруппой, изопропоксигруппой, н-бутоксигруппой, изобутоксигруппой, втор-бутоксигруппой или трет-бутоксигруппой, наиболее предпочтительно метоксигруппой.

[0105]

"C1-C6 алкильная группа" в "необязательно замещенной C1-C6 алкильной группе", представленной R₂ или R₃, предпочтительно является метильной группой, этильной группой, н-пропильной группой, изопропильной группой, н-бутильной группой, изобутильной группой, втор-бутильной группой, трет-бутильной группой, пентильной группой или гексильной группой, более предпочтительно метильной группой, этильной группой, н-пропильной группой, изопропильной группой, н-бутильной группой, изобутильной группой, втор-бутильной группой или трет-бутильной группой, наиболее предпочтительно метильной группой.

Примеры "заместителя" для "необязательно замещенной C1-C6 алкильной группы", представленной R₂ или R₃, включают заместитель, как описано выше. Заместителем предпочтительно является C1-C6 алкоксигруппа, предпочтительно метоксигруппа, этоксигруппа, н-пропоксигруппа, изопропоксигруппа, н-бутоксигруппа, изобутоксигруппа, втор-бутоксигруппа, трет-бутоксигруппа, пентилоксигруппа или гексилоксигруппа, более предпочтительно метоксигруппа, этоксигруппа, н-пропоксигруппа, изопропоксигруппа, н-бутоксигруппа, изобутоксигруппа, втор-бутоксигруппа или трет-бутоксигруппа, наиболее предпочтительно метоксигруппа или этоксигруппа.

"Необязательно замещенная C1-C6 алкильная группа", представленная R₂ или R₃, предпочтительно представляет собой незамещенную C1-C6 алкильную группу или замещенную C1-C6 алкокси группой C1-C6 алкильную группу, более предпочтительно незамещенную C1-C6 алкильную группу, еще более предпочтительно метильную группу, этильную группу, н-пропильную группу, изопропильную группу, н-бутильную группу, изобутильную группу, втор-бутильную группу, трет-бутильную группу, пентильную группу или гексильную группу.

В случае присутствия заместителя количество заместителя специально не ограничено. Если заместителем является C1-C6 алкоксигруппа, его количество предпочтительно составляет 1.

[0106]

"C6-C14 ароматическая углеводородная группа" в "необязательно замещенной C6-C14 ароматической углеводородной группе", представленной R₂ или R₃, предпочтительно является фенильной группой или нафтильной группой, более предпочтительно фенильной группой.

Примеры "заместителя" для "необязательно замещенной C6-C14 ароматической углеводородной группы", представленной R₂ или R₃, включают заместитель, как описано выше. Заместителем предпочтительно является атом галогена. Необязательно замещенная атомом галогена C6-C14 ароматическая углеводородная группа предпочтительно является необязательно замещенной атомом фтора или замещенной атомом хлора фенильной группой, более предпочтительно фенильной группой, фторфенильной группой, дифторфенильной группой, трифторфенильной группой, хлорфенильной группой, дихлорфенильной группой или трихлорфенильной группой, еще более предпочтительно фенильной группой.

[0107]

"4-8-членная азотсодержащая насыщенная гетероциклическая группа" в "необязательно замещенной 4-8-членной азотсодержащей насыщенной гетероциклической группе", образованной R₂ и R₃, вместе с атомом азота, связанном с ними, является 4-8-членной насыщенной гетероциклической группой, содержащей по меньшей мере один атом азота в кольце и дополнительно содержащей от 0 до 2 идентичных или разных гетероатома, выбранных из группы, состоящей из атома кислорода и атома серы, в кольце.

4-8-членная азотсодержащая насыщенная гетероциклическая группа предпочтительно является 4-8-членной насыщенной гетероциклической группой, содержащей один атом азота, более предпочтительно азетидинильной группой, пирролидинильной группой или пиперидинильной группой.

Примеры "заместителя" для "необязательно замещенной 4-8-членной азотсодержащей насыщенной гетероциклической группы", включают заместитель, как описано выше. Заместителем предпочтительно является гидроксильная группа.

Необязательно замещенная 4-8-членная азотсодержащая насыщенная гетероциклическая группа предпочтительно представляет собой необязательно замещенную гидроксильной группой 4-8-членную азотсодержащую насыщенную гетероциклическую группу, более предпочтительно азетидинильную группу, пирролидинильную группу, пиперидинильную группу, гидроксиазетидинильную группу, гидроксипирролидинильную группу или гидроксипиперидинильную группу, еще более предпочтительно пирролидинильную группу, пиперидинильную группу или гидроксиазетидинильную группу.

[0108]

В соединении пиразоло[3,4-d]пиримидина формулы (I), R₂ и R₃ предпочтительно являются одинаковыми или отличаются друг от друга, при этом каждый представляет собой атом водорода, необязательно замещенную C1-C6 алкоксигруппу, необязательно замещенную C1-C6 алкильную группу или необязательно замещенную C6-C14 ароматическую углеводородную группу, или R₂ и R₃ необязательно образуют, вместе с атомом азота, связанным с ними, необязательно замещенную 4-8-членную азотсодержащую насыщенную гетероциклическую группу, более предпочтительно они являются одинаковыми или отличаются друг от друга, при этом каждый представляет собой атом водорода, C1-C6 алкоксигруппу, C1-C6 алкильную группу, которая необязательно содержит C1-C6 алкоксигруппу в качестве заместителя, или C6-C14 ароматическую углеводородную группу, которая необязательно содержит атом галогена в качестве заместителя, или R₂ и R₃ необязательно образуют, вместе с атомом азота, связанным с ними, необязательно замещенную 4-8-членную азотсодержащую насыщенную гетероциклическую группу, еще более предпочтительно они являются одинаковыми или отличаются друг от друга, при этом каждый представляет собой атом водорода, C1-C6 алкоксигруппу, C1-C6 алкильную группу или C6-C14 ароматическую углеводородную группу, или R₂ и R₃ необязательно образуют, вместе с атомом азота, связанным с ними, 4-8-членную азотсодержащую насыщенную гетероциклическую группу, которая необязательно содержит гидроксильную группу в качестве заместителя, более предпочтительно они являются одинаковыми или отличаются друг от друга, при этом каждый представляет собой C1-C6 алкоксигруппу, C1-C6 алкильную группу или C6-C14 ароматическую углеводородную группу, или R₂ и R₃ необязательно образуют, вместе с атомом азота, связанным с ними, 4-8-членную азотсодержащую насыщенную гетероциклическую группу, которая необязательно содержит гидроксильную группу в качестве заместителя, еще более предпочтительно они являются одинаковыми или отличаются друг от друга, при этом каждый представляет собой метоксигруппу, метильную группу или фенильную группу, или R₂ и R₃ необязательно образуют, вместе с атомом азота, связанным с ними, азетидинильную группу, которая необязательно содержит гидроксильную группу в качестве заместителя, пирролидинильную группу или пиперидинильную группу, еще более предпочтительно они являются одинаковыми или отличаются друг от друга, при этом каждый представляет собой метоксигруппу, метильную группу или фенильную группу, или R₂ и R₃ необязательно образуют, вместе с атомом азота, связанным с ними, гидроксиазетидинильную группу, пирролидинильную группу или пиперидинильную группу, еще более предпочтительно каждый является метильной группой.

[0109]

В соединении пиразоло[3,4-d]пиримидина формулы (I) настоящего изобретения, R₄, R₅ и R₆ являются одинаковыми или отличаются друг от друга, при этом каждый представляет собой атом водорода или необязательно замещенную C1-C6 алкильную группу.

"C1-C6 алкильная группа" в "необязательно замещенной C1-C6 алкильной группе", представленной R₄, R₅ или R₆, предпочтительно является метильной группой, этильной группой, н-пропильной группой, изопропильной группой, н-бутильной группой, изобутильной группой, втор-бутильной группой, трет-бутильной группой, пентильной группой или гексильной группой, более предпочтительно метильной группой, этильной группой, н-пропильной группой, изопропильной группой, н-бутильной группой, изобутильной группой, втор-бутильной группой или трет-бутильной группой, еще более предпочтительно метильной группой, этильной группой, н-пропильной группой или изопропильной группой, наиболее предпочтительно метильной группой.

Примеры "заместителя" для "необязательно замещенной C1-C6 алкильной группы", представленной R₄, R₅ или R₆, включают заместитель, как описано выше. Заместителем предпочтительно является диалкиламиногруппа или насыщенная гетероциклическая группа, более предпочтительно ди(C1-C6 алкил)аминогруппа или 4-8-членная насыщенная гетероциклическая группа, содержащая атом азота, еще более предпочтительно ди(C1-C4 алкил)аминогруппа или 4-8-членная насыщенная гетероциклическая группа, содержащая атом азота, более предпочтительно диметиламиногруппа, метилэтиламиногруппа, диэтиламиногруппа, метилизопропиламино-группа, 1-пиперидинильная группа или 1-пирролидинильная группа, наиболее предпочтительно диметиламиногруппа.

Количество заместителей специально не ограничено и предпочтительно составляет 1.

"Необязательно замещенная C1-C6 алкильная группа", представленная R₄, R₅ или R₆, предпочтительно является C1-C6 алкильной группой, необязательно содержащей в качестве заместителя ди(C1-C6 алкил)аминогруппу или 4-8-членную насыщенную гетероциклическую группу, содержащую атом азота, более предпочтительно C1-C4 алкильной группой, необязательно содержащей в качестве заместителя ди(C1-C4 алкил)аминогруппу или 4-8-членную насыщенную гетероциклическую группу, содержащую атом азота, еще более предпочтительно метильной группой, этильной группой, н-пропильной группой, изопропильной группой, н-бутильной группой, изобутильной группой, втор-бутильной группой, трет-бутильной группой, диметиламинометильной группой, метилэтиламинометильной группой, диэтиламинометильной группой, метилизопропиламинометильной группой, диметиламиноэтильной группой, диэтиламиноэтильной группой, 1-пиперидинилметильной группой или 1-пирролидинилметильной группой, более предпочтительно метильной группой, этильной группой, н-пропильной группой, изопропильной группой, н-бутильной группой, изобутильной группой, втор-бутильной группой, трет-бутильной группой, диметиламинометильной группой, метилэтиламинометильной группой, диэтиламинометильной группой, метилизопропиламинометильной группой, диметиламиноэтильной группой или диэтиламиноэтильной группой, еще более предпочтительно метильной группой, диметиламинометильной группой, метилэтиламинометильной группой, диэтиламинометильной группой или метилизопропиламинометильной группой, наиболее предпочтительно диметиламинометильной группой.

[0110]

В соединении пиразоло[3,4-d]пиримидина формулы (I), R₄, R₅ и R₆ являются одинаковыми или отличаются друг от друга, при этом каждый предпочтительно является атомом водорода или необязательно замещенной C1-C6 алкильной группой, более предпочтительно атомом водорода или C1-C6 алкильной группой, необязательно содержащей в качестве заместителя ди(C1-C6 алкил)аминогруппу или 4-8-членную насыщенную гетероциклическую группу, содержащую атом азота, еще более предпочтительно атомом водорода или C1-C4 алкильной группой, необязательно содержащей в качестве заместителя ди(C1-C4 алкил)аминогруппу или 4-8-членную насыщенную гетероциклическую группу, содержащую атом азота, более предпочтительно атомом водорода, метильной группой, этильной группой, н-пропильной группой, изопропильной группой, н-бутильной группой, изобутильной группой, втор-бутильной группой, трет-бутильной группой, диметиламинометильной группой, метилэтиламинометильной группой, диэтиламинометильной группой, метилизопропиламинометильной группой, диметиламиноэтильной группой, диэтиламиноэтильной группой, 1-пиперидинилметильной группой или 1-пирролидинилметильной группой, еще более предпочтительно атомом водорода, метильной группой, этильной группой, н-пропильной группой, изопропильной группой, н-бутильной группой, изобутильной группой, втор-бутильной группой, трет-бутильной группой, диметиламинометильной группой, метилэтиламинометильной группой, диэтиламинометильной группой, метилизопропиламинометильной группой, диметиламиноэтильной группой или диэтиламиноэтильной группой, еще более предпочтительно атомом водорода, метильной группой, диметиламинометильной группой, метилэтиламинометильной группой, диэтиламинометильной группой или метилизопропиламинометильной группой, наиболее предпочтительно атомом водорода или диметиламинометильной группой.

[0111]

В соединении пиразоло[3,4-d]пиримидина формулы (I), -C(R₄)=C(R₅)(R₆), представленный Y, предпочтительно является

[0112]

,

или

,

[0113]

особенно предпочтительно

[0114]

или

[0115]

[0116]

Соединение, предпочтительное в качестве соединения пиразоло[3,4-d]пиримидина формулы (I), является соединением или его солью, в которых

X является необязательно замещенной 4-10-членной азотсодержащей насыщенной гетероциклической группой;

Y является -C(R₄)=C(R₅)(R₆);

W является -CH₂-, атомом кислорода или -NH-;

n является целым числом от 0 до 2;

R₁ является необязательно замещенной аминогруппой;

R₂ и R₃ являются одинаковыми или отличаются друг от друга, при этом каждый представляет собой атом водорода, необязательно замещенную C1-C6 алкоксигруппу, необязательно замещенную C1-C6 алкильную группу или необязательно замещенную C6-C14 ароматическую углеводородную группу, или R₂ и R₃ необязательно образуют, вместе с атомом азота, связанным с ними, 4-8-членную азотсодержащую насыщенную гетероциклическую группу, необязательно содержащую гидроксильную группу в качестве заместителя; и

[0117]

Соединение, более предпочтительное в качестве соединения пиразоло[3,4-d]пиримидина формулы (I), является соединением или его солью, в которых

X является 4-10-членной азотсодержащей насыщенной гетероциклической группой, необязательно содержащей атом галогена, гидроксильную группу, цианогруппу, C1-C6 алкильную группу или аминогруппу в качестве заместителя;

Y является -C(R₄)=C(R₅)(R₆);

Z₁, Z₂, Z₃ и Z₄ являются одинаковыми или отличаются друг от друга, при этом каждый представляет собой атом водорода, атом галогена, цианогруппу, C2-C6 алкенильную группу, необязательно замещенную C1-C6 алкоксигруппу, необязательно замещенную C1-C6 алкильную группу, необязательно замещенную аминогруппу, необязательно замещенную C3-C7 циклоалкильную группу или 4-14-членную ненасыщенную гетероциклическую группу, или Z₁ и Z₂, или Z₃ и Z₄ необязательно образуют, вместе с соответствующими атомами углерода, связанными с ними, бензольное кольцо или 5-7-членное насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо;

W является -CH₂-, атомом кислорода или -NH-;

n является 0;

R₁ является аминогруппой;

[0118]

Y является -C(R₄)=C(R₅)(R₆);

W является -CH₂-, атомом кислорода или -NH-;

n является 0;

R₁ является аминогруппой;

[0119]

X является пирролидинильной группой, необязательно содержащей C1-C6 алкильную группу в качестве заместителя, или пиперидинильной группой, необязательно содержащей атом галогена в качестве заместителя;

Y является -C(R₄)=C(R₅)(R₆);

W является -CH₂-, атомом кислорода или -NH-;

n является 0;

R₁ является аминогруппой;

R₄, R₅ и R₆ являются одинаковыми или отличаются друг от друга, при этом каждый представляет собой атом водорода или диметиламинометильную группу.

[0120]

Y является

[0121]

или

;

[0122]

Z₁, Z₂, Z₃ и Z₄ являются одинаковыми или отличаются друг от друга, при этом каждый представляет собой атом водорода, атом фтора, атом хлора, атом брома, цианогруппу, винильную группу, метоксигруппу, необязательно содержащую атом фтора в качестве заместителя, метильную группу, этильную группу, диметиламиногруппу, циклопропильную группу или фурильную группу, или Z₁ и Z₂, или Z₃ и Z₄ необязательно образуют, вместе с соответствующими атомами углерода, связанными с ними, бензольное кольцо, пиридиновое кольцо или диоксолановое кольцо;

W является -CH₂-, атомом кислорода или -NH-;

n является 0;

R₁ является аминогруппой; и

R₂ и R₃ являются одинаковыми или отличаются друг от друга, при этом каждый представляет собой атом водорода, метоксигруппу, метильную группу или фенильную группу, или R₂ и R₃ необязательно образуют, вместе с атомом азота, связанным с ними, азетидинильную группу, необязательно содержащую гидроксильную группу в качестве заместителя, пирролидинильную группу или пиперидинильную группу.

[0123]

Y является

[0124]

или

;

[0125]

W является -CH₂-, атомом кислорода или -NH-;

n является 0;

R₁ является аминогруппой; и

[0126]

Y является

[0127]

или

;

[0128]

W является -CH₂- или атомом кислорода;

n является 0;

R₁ является аминогруппой; и

[0129]

Y является

[0130]

или

;

[0131]

W является -CH₂- или атомом кислорода;

n является 0;

R₁ является аминогруппой; и

каждый из R₂ и R₃ является метильной группой.

[0132]

X является пиперидинильной группой или фторпиперидинильной группой;

Y является

[0133]

;

[0134]

W является -CH₂- или атомом кислорода;

n является 0;

R₁ является аминогруппой; и

[0135]

X является пиперидинильной группой;

Y является

[0136]

;

[0137]

Z₁, Z₂, Z₃ и Z₄ являются одинаковыми или отличаются друг от друга, при этом каждый представляет собой атом водорода, атом фтора, атом хлора, атом брома, метоксигруппу, фторметоксигруппу, дифторметоксигруппу или метильную группу, или Z₁ и Z₂, или Z₃ и Z₄ необязательно образуют, вместе с соответствующими атомами углерода, связанными с ними, бензольное кольцо;

W является -CH₂-;

n является 0;

R₁ является аминогруппой; и

[0138]

Конкретные примеры соединения пиразоло[3,4-d]пиримидина согласно настоящему изобретению могут включать, без ограничения, соединения из Примеров синтеза 1-79, полученные в Примерах Синтеза, указанных ниже.

Из них предпочтительные примеры соединения пиразоло[3,4-d]пиримидина могут включать следующие соединения:

[0139]

Соединением пиразоло[3,4-d]пиримидина наиболее предпочтительно является (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-2,3-диметилфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамид.

[0140]

Далее будет описан способ получения соединения пиразоло[3,4-d]пиримидина.

Соединение пиразоло[3,4-d]пиримидина формулы (I) может быть получено, например, с помощью способа получения, приведенного ниже, или способа, показанного в Примерах синтеза. Однако способ получения соединения пиразоло[3,4-d]пиримидина формулы (I) не ограничен этими примерами реакций.

[0141]

(Способ получения 1)

[0142]

где L₁ и L₂ являются одинаковыми или отличаются друг от друга, при этом каждый представляет собой уходящую группу; P₁ представляет собой защитную группу для аминогруппы, содержащейся в X; и X, Y и n имеют определенное выше значение.

[0143]

(1-я стадия)

Эта стадия является стадией получения соединения формулы (IV) с использованием соединений формулы (II) и формулы (III).

В формуле (II) уходящая группа, представленная L₁, предпочтительно является атомом брома или атомом иода. Это соединение доступно в продаже или может быть получено согласно способу, известному в уровне техники.

В формуле (III) примеры уходящей группы L₂ включают атом хлора, атом брома, атом иода, метансульфонат, и п-толуолсульфонат. Это соединение доступно в продаже или может быть получено согласно способу, известному в уровне техники.

Соединение формулы (III) может использоваться в количестве от 1 до 10 молей, предпочтительно от 1 до 5 молей, на 1 моль соединения формулы (II).

Если соединение формулы (III) используется в качестве алкилирующего реагента, эта стадия может быть проведена в присутствии основания.

[0144]

Примеры основания включают: неорганические основания, такие как бикарбонат натрия, карбонат натрия, карбонат калия, карбонат цезия, гидроксид цезия, гидрид натрия и гидрид калия; и органические амины, такие как триметиламин, триэтиламин, трипропиламин, диизопропилэтиламин, N-метилморфолин, пиридин, 4-(N,N-диметиламино)пиридин, лутидин и коллидин. Карбонат калия является предпочтительным.

Количество используемого основания может составлять от 1 до 100 молей, предпочтительно от 2 до 10 молей, на 1 моль соединения формулы (II).

[0145]

Примеры растворителя включают: апротонные полярные растворители, такие как N,N-диметилформамид, N,N-диметилацетамид, диметилсульфоксид и N-метилпирролидин-2-он; эфиры, такие как тетрагидрофуран и 1,4-диоксан; и нитрилы, такие как ацетонитрил. Эти растворители могут использоваться отдельно или в виде смеси. N,N-диметилацетамид является предпочтительным.

[0146]

Продолжительность реакции предпочтительно составляет от 0,1 до 100 часов, более предпочтительно от 0,5 до 24 часов. Температура реакции предпочтительно составляет от 0°C до температуры кипения растворителя, более предпочтительно от 0 до 100°C.

Таким образом, полученное соединение формулы (IV) может быть выделено и очищено с помощью метода разделения и очистки, известного в уровне техники, указанного ниже, или может быть подвергнуто следующей стадии без выделения и очистки.

[0147]

(2-я стадия)

Эта стадия является стадией получения соединения формулы (V) путем реакции соединения формулы (IV), например, с переходным металлом и, при необходимости, основанием, в растворителе, который не дает побочной реакции в присутствии спирта в атмосфере монооксида углерода.

В этой стадии давление монооксида углерода обычно составляет от 1 атм до 10 атм, предпочтительно от 1 атм до 5 атм.

Количество используемого спиртового соединения может составлять от 1 до 10 молей, предпочтительно от 1 до 5 молей, на 1 моль соединения формулы (IV). Примеры спиртового соединения включают метанол, этанол, пропанол, изопропиловый спирт, диэтиламиноэтанол, изобутанол, 4-(2-гидроксиэтил)морфолин, 3-морфолинопропанол и диэтиламинопропанол.

[0148]

Переходный металл, который может использоваться в этой стадии, является, например, палладиевым катализатором (например, ацетатом палладия, трис(дибензилиденацетон)дипалладием, дихлоридом бис(трифенилфосфин)палладия (II), комплексом дихлорида 1,1'-бис(дифенилфосфин)ферроцен-палладия (II) в дихлорметане). При необходимости добавляют лиганд (например, трифенилфосфин, xantphos, три-трет-бутилфосфин).

Количество используемого переходного металла отличается в зависимости от типа катализатора и обычно составляет от 0,0001 до 1 моля, предпочтительно от 0,001 до 0,5 моля, относительно 1 моля соединения формулы (IV). Количество используемого лиганда обычно составляет от 0,0001 до 4 молей, предпочтительно от 0,01 до 2 молей, на 1 моль соединения формулы (IV).

[0149]

Для реакции при необходимости может быть добавлено основание. Примеры основания включают: органические основания, такие как триэтиламин, диизопропилэтиламин, пиридин, лутидин, коллидин, 4-диметиламинопиридин, N-метилморфолин, трет-бутират калия, трет-бутират натрия, метилат натрия, этилат натрия, гексаметилдисилазид лития, гексаметилдисилазид натрия, гексаметилдисилазид калия и бутиллитий; и неорганические основания, такие как бикарбонат натрия, карбонат натрия, карбонат калия, карбонат цезия, гидроксид натрия и гидрид натрия.

Количество используемого основания обычно составляет от 0,1 до 50 молей, предпочтительно от 1 до 20 молей, на 1 моль соединения формулы (IV).

[0150]

Реакционный растворитель специально не ограничен при условии, что растворитель не препятствует реакции. Соответствующие примеры включают углеводороды (например, бензол, толуол, ксилол), нитрилы (например, ацетонитрил), эфиры (например, диметоксиэтан, тетрагидрофуран, 1,4-диоксан), спирты (например, метанол, этанол), апротонные полярные растворители (например, диметилформамид, диметилацетамид, N-метилпирролидинон, диметилсульфоксид, гексаметилфосфорамид), воду и их смеси.

[0151]

Продолжительность реакции предпочтительно составляет от 0,1 до 100 часов, более предпочтительно от 0,5 до 24 часов.

Температура реакции составляет от 0°C до температуры кипения растворителя, предпочтительно от 0 до 150°C.

[0152]

После этой реакции образуется сложноэфирная смесь, соответствующая соединению карбоновой кислоты (V) и используемого спирта. В результате эта сложноэфирная смесь превращается в соединение формулы (V) в реакции гидролиза.

Реакцию гидролиза проводят с использованием основания. Примеры основания включают: органические ос основания новы, такие как диэтиламин, диизопропиламин, трет-бутират калия, трет-бутират натрия, метилат натрия, этилат натрия, гексаметилдисилазид лития, гексаметилдисилазид натрия, гексаметилдисилазид калия и бутиллитий; и неорганические основания, такие как бикарбонат натрия, карбонат натрия, карбонат калия, карбонат цезия и гидроксид натрия.

[0153]

Реакционный растворитель специально не ограничен при условии, что растворитель не препятствует реакции гидролиза. Соответствующие примеры включают углеводороды (например, бензол, толуол, ксилол), нитрилы (например, ацетонитрил), эфиры (например, диметоксиэтан, тетрагидрофуран, 1,4-диоксан), спирты (например, метанол и этанол), апротонные полярные растворители (например, диметилформамид, диметилацетамид, N-метилпирролидинон, диметилсульфоксид, гексаметилфосфорамид), воду и их смеси.

[0154]

Продолжительность реакции гидролиза предпочтительно составляет от 0,1 до 100 часов, более предпочтительно от 0,5 до 24 часов.

[0155]

Температура реакции гидролиза составляет от 0°C до температуры кипения растворителя, предпочтительно от 0 до 150°C.

Таким образом, полученное соединение формулы (V) может быть выделено и очищено с помощью способа разделения и очистки, известного в уровне техники, указанного ниже, или может быть подвергнуто следующей стадии без выделения и очистки.

[0156]

(3-я стадия)

Эта стадия является стадией получения соединения формулы (VI) при снятии защиты с защищенной аминогруппы в соединении формулы (V).

Способ снятия защиты может быть проведен с помощью обычного способа, известного в уровне техники, например, способа, описанного в Protective Groups in Organic Synthesis, T.W. Greene, John Wiley & Sons, Inc. (1981), или эквивалентного способа. Примеры защитной группы включают трет-бутилоксикарбонил.

В случае использования трет-бутилоксикарбонильной группы в качестве защитной группы, снятие защиты предпочтительно проводят при кислых условиях. Примеры кислоты включают соляную кислоту, уксусную кислоту, трифторуксусную кислоту, серную кислоту, метансульфоновую кислоту и тозиловую кислоту. В альтернативе также предпочтительно снятие защиты с использованием кислоты Льюиса. Соответствующие примеры включают триметилсилилиодид и комплекс трифторида бора-диэтилового эфира.

Количество используемой кислоты предпочтительно составляет от 1 до 100 молей на 1 моль соединения формулы (V).

[0157]

Реакционный растворитель специально не ограничен при условии, что растворитель не препятствует реакции. Примеры используемого растворителя включают спирты (например, метанол), углеводороды (например, бензол, толуол, ксилол), галогенированные углеводороды (например, метиленхлорид, хлороформ, 1,2-дихлорэтан), нитрилы (например, ацетонитрил), эфиры (например, диметоксиэтан, тетрагидрофуран), апротонные полярные растворители (например, N,N-диметилформамид, диметилсульфоксид, гексаметилфосфорамид) и их смеси.

[0158]

Температура реакции составляет от 0 до 120°C, предпочтительно от 0 до 90°C.

Полученное таким образом соединение формулы (VI) может быть выделено и очищено с помощью метода разделения и очистки, известного в уровне техники, указанного ниже, или может быть подвергнуто следующей стадии без выделения и очистки.

[0159]

(4-я стадия)

Эта стадия является стадией получения соединения формулы (VII) посредством реакции конденсации соединения формулы (VI) с карбоновой кислотой, представленной Y-COOH, или галогенангидридом, представленным Y-C(=O)-L (L представляет собой атом хлора или атом брома).

В случае использования карбоновой кислоты, представленной Y-COOH, в качестве реагента, реакцию проводят при использовании от 0,5 до 10 молей, предпочтительно от 1 до 3 молей карбоновой кислоты, на 1 моль соединения формулы (VI) в присутствии подходящего конденсирующего агента.

Такая карбоновая кислота доступна в продаже или может быть получена согласно способу, известному в уровне техники.

[0160]

Реакционный растворитель специально не ограничен при условии, что растворитель не препятствует реакции. Предпочтительные соответствующие примеры включают: спирты, такие как изопропанол и трет-бутиловый спирт; углеводороды, такие как толуол и бензол; галогенированные углеводороды, такие как метиленхлорид и хлороформ; эфиры, такие как тетрагидрофуран и 1,4-диоксан; апротонные полярные растворители, такие как диметилформамид, диметилацетамид, N-метилпирролидинон и диметилсульфоксид; и смеси таких растворителей.

[0161]

Температура реакции обычно составляет от -78 до 200°C, предпочтительно от 0 до 50°C.

Продложительность реакции обычно составляет от 5 минут до 3 дней, предпочтительно от 5 минут до 10 часов.

[0162]

Примеры конденсирующего агента включают дифенилфосфорилазид, N,N'-дициклогексилкарбодиимид, соль бензотриазол-1-илокси-трисдиметиламинофосфония, хлорид 4-(4,6-диметокси-1,3,5-триазин-2-ил)-4-метилморфолиния, 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимид, комбинацию 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимида и 1-гидроксибензотриазола, хлорид 2-хлор-1,3-диметилимидазолиния и гексафторфосфат O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N,N,N',N'-тетраметилгексаурония.

[0163]

Для реакции при необходимости может быть добавлено основание. Примеры основания включают: органические основания, такие как триэтиламин, диизопропилэтиламин, пиридин, лутидин, коллидин, 4-диметиламинопиридин, трет-бутират калия, трет-бутират натрия, метилат натрия, этилат натрия, гексаметилдисилазид лития, гексаметилдисилазид натрия, гексаметилдисилазид калия и бутиллитий; и неорганические основания, такие как бикарбонат натрия, карбонат натрия, карбонат калия, карбонат цезия, гидроксид натрия и гидрид натрия.

Количество используемого основания предпочтительно составляет от 1 до 100 молей, более предпочтительно от 1 до 10 молей на 1 моль соединения формулы (VI).

[0164]

В случае использования галогенангидрида, представленного Y-C(=O)-L (L представляет собой атом хлора или атом брома), в качестве реагента, реакцию проводят при использовании от 0,5 до 5 молей, предпочтительно от 0,9 до 1,1 молей, галогенангидрида на 1 моль соединения формулы (VI).

Такой галогенангидрид доступен в продаже или может быть получен согласно способу, известному в уровне техники.

[0165]

Реакционный растворитель специально не ограничен при условии, что растворитель не препятствует реакции. Предпочтительные соответствующие примеры включают: воду; углеводороды, такие как толуол и бензол; галогенированные углеводороды, такие как метиленхлорид и хлороформ; эфиры, такие как тетрагидрофуран и 1,4-диоксан; нитрилы, такие как ацетонитрил; апротонные полярные растворители, такие как диметилформамид, диметилацетамид, и N-метилпирролидинон; и смеси таких растворителей.

[0166]

Температура реакции обычно составляет от -78 до 200°C, предпочтительно от -20 до 50°C.

Продолжительность реакции обычно составляет от 5 минут до 3 дней, предпочтительно от 5 минут до 10 часов.

[0167]

Полученное таким образом соединение формулы (VII) может быть выделено и очищено с помощью метода разделения и очистки, известного в уровне техники, указанного ниже.

[0168]

(Способ получения 2)

[0169]

где L₃ представляет собой уходящую группу; и X, Y, Z₁, Z₂, Z₃, Z₄, W, n, R₁, R₂ и R₃ имеют определенное выше значение.

[0170]

(5-я стадия)

Эта стадия является стадией получения соединения формулы (IX) посредством реакции конденсации соединения формулы (VII) с соединением формулы (VIII).

Реакцию проводят при использовании от 0,5 до 10 молей, предпочтительно от 1 до 3 молей, соединения формулы (VIII) на 1 моль соединения формулы (VII), в присутствии подходящего конденсирующего агента в качестве реагента. Такое анилиновое соединение доступно в продаже или может быть получено согласно способу, известному в уровне техники.

[0171]

Реакционный растворитель специально не ограничен при условии, что растворитель не препятствует реакции. Предпочтительные соответствующие примеры включают изопропанол, трет-бутиловый спирт, толуол, бензол, метиленхлорид, хлороформ, тетрагидрофуран, 1,4-диоксан, диметилформамид, диметилацетамид, N-метилпирролидинон, диметилсульфоксид и смеси таких растворителей.

[0172]

Продолжительность реакции обычно составляет 5 минут до 3 дней, предпочтительно от 5 минут до 10 часов.

[0173]

Примеры конденсирующего агента включают дифенилфосфорилазид, N,N'-дициклогексилкарбодиимид, соль бензотриазол-1-илокси-трисдиметиламинофосфония, хлорид 4-(4,6-диметокси-1,3,5-триазин-2-ил)-4-метилморфолиния, 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимид, комбинацию 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимид и 1-гидроксибензотриазола, хлорид 2-хлор-1,3-диметилимидазолиния и гексафторфосфат O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N,N,N',N'-тетраметилгексаурония.

[0174]

Количество используемого основания составляет от 1 до 100 молей, предпочтительно от 1 до 10 молей, на 1 моль соединения формулы (VII).

Полученное таким образом соединение формулы (IX) может быть выделено и очищено с помощью метода разделения и очистки, известного в уровне техники, указанного ниже, или может быть подвергнуто следующей стадии без выделения и очистки.

[0175]

(6-я стадия)

Эта стадия является стадией получения соединения пиразоло[3,4-d]пиримидина формулы (I) из соединения формулы (IX) и соединения формулы (X).

В формуле (X) уходящая группа, представленная L₃, предпочтительно является хлором, бромом, иодом, сложным эфиром метансульфоновой кислоты или сложным эфиром п-толуолсульфоновой кислоты. Соединение формулы (X) доступно в продаже или может быть получено согласно способу, известному в уровне техники.

Соединение формулы (X) может использоваться в количестве от 1 до 10 молей, предпочтительно от 1 до 5 молей, на 1 моль соединения формулы (IX).

[0176]

Для реакции при необходимости может быть добавлено основание. Примеры основания включают: неорганические основания, такие как бикарбонат натрия, карбонат натрия, карбонат калия, карбонат цезия, гидроксид цезия, гидрид натрия и гидрид калия; и органические амины, такие как триметиламин, триэтиламин, трипропиламин, диизопропилэтиламин, N-метилморфолин, пиридин, 4-(N,N-диметиламино)пиридин, лутидин и коллидин.

Количество используемого основания может составлять от 1 до 100 молей, предпочтительно от 2 до 10 молей, на 1 моль соединения формулы (IX).

[0177]

Примеры растворителя, который может использоваться, включают N,N-диметилформамид, N,N-диметилацетамид, диметилсульфоксид, тетрагидрофуран, 1,4-диоксан, N метилпирролидин-2-он, ацетонитрил и смеси таких растворителей.

[0178]

Температура реакции составляет от 0°C до температуры кипения растворителя, предпочтительно от 0 до 100°C.

Полученное таким образом соединение пиразоло[3,4-d]пиримидина формулы (I) может быть выделено и очищено с помощью метода разделения и очистки, известного в уровне техники, указанного ниже.

[0179]

Кроме того, соединение пиразоло[3,4-d]пиримидина (I) может быть получено, например, следующим способом получения:

[0180]

(Способ получения 3)

[0181]

где Z₁, Z₂, Z₃, Z₄, W, R₂ и R₃ имеют определенное выше значение.

[0182]

(7-я стадия)

Эта стадия является стадией получения соединения формулы (XIII) посредством реакции конденсации соединения формулы (XI) с соединением формулы (XII).

Реакцию проводят при использовании от 0,5 до 10 молей, предпочтительно от 1 до 3 молей, соединения формулы (XII) на 1 моль соединения формулы (XI) в присутствии адекватного конденсирующего агента в качестве реагента. Этот амин (XII) доступен в продаже или может быть получен согласно способу, известному в уровне техники.

[0183]

[0184]

[0185]

Примеры конденсирующего агента включают дифенилфосфорил-азид, N,N'-дициклогексилкарбодиимид, соль бензотриазол-1-илокси-трисдиметиламинофосфония, хлорид 4-(4,6-диметокси-1,3,5-триазин-2-ил)-4-метилморфолиния, 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)-карбодиимид, комбинацию 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)-карбодиимида и 1-гидроксибензотриазола, хлорид 2-хлор-1,3-диметилимидазолиния и гексафторфосфат O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N,N,N',N'-тетраметилгексаурония.

[0186]

Количество используемого основания составляет от 1 до 100 молей, предпочтительно от 1 до 10 молей, на 1 моль соединения формулы (XI).

Полученное таким образом соединение формулы (XIII) может быть выделено и очищено с помощью метода разделения и очистки, известного в уровне техники, указанного ниже, или может быть подвергнуто следующей стадии без выделения и очистки.

[0187]

(8-я стадия)

Эта стадия является стадией получения соединения формулы (XIV) посредством реакции восстановления соединения формулы (XIII) с использованием катализатора на основе металла.

Катализатором на основе металла для применения в этой стадии является реактив железа, реактив палладия, реактив никеля и т.п. В качестве восстановителя могут использовать водород, муравьиную кислоту и т.п.

Реакционный растворитель специально не ограничен при условии, что растворитель не препятствует реакции. Соответствующие примеры включают спирты (например, метанол, этанол), эфиры (например, тетрагидрофуран, 1,4-диоксан), апротонные полярные растворители (например, диметилформамид, диметилацетамид, N-метилпирролидинон, диметилсульфоксид, гексаметилфосфорамид), воду и их смеси.

[0188]

Полученное таким образом соединение формулы (XIV) может быть выделено и очищено с помощью методов разделения и очистки, известных в уровне техники, указанных ниже.

[0189]

(Способ получения 4)

[0190]

где L₃ представляет собой уходящую группу; и Z₁, Z₂, Z₃, Z₄, W, R₂ и R₃ имеют определенное выше значение.

[0191]

(9-я стадия)

Эта стадия является стадией получения соединения формулы (XIII) из соединения формулы (XV) и соединения формулы (X).

Соединение формулы (X) может использоваться в количестве от 1 до 10 молей, предпочтительно от 1 до 5 молей, на 1 моль соединения формулы (XV).

[0192]

Примеры реагента для использования в реакции включают диалкилкарбамоилхлорид, S-метил-диалкилкарбамоилэфир и хлорид дихлорметилендиалкилиминия. Эти реагенты доступны в продаже или могут быть получены согласно способу, известному в уровне техники.

Реагент может использоваться в количестве от 1 до 100 молей, предпочтительно от 2 до 10 молей, на 1 моль соединения формулы (XV).

[0193]

Количество используемого основания может составлять от 1 до 100 молей, предпочтительно от 2 до 10 молей, на 1 моль соединения формулы (XV).

[0194]

Примеры реакционного растворителя, который может использоваться, включают N,N-диметилформамид, N,N-диметилацетамид, диметилсульфоксид, тетрагидрофуран, 1,4-диоксан, N-метилпирролидин-2-он, ацетонитрил и смеси таких растворителей.

[0195]

Полученное таким образом соединение формулы (XIII) может быть выделено и очищено с помощью метода разделения и очистки, известного в уровне техники, указанного ниже или может быть подвергнуто следующей стадии без выделения и очистки.

[0196]

(10-я стадия)

Эта стадия является стадией получения соединения формулы (XIV) посредством реакции восстановления из соединения формулы (XIII). Это соединение может быть получено таким же способом получения, как в 8-й стадии, описанной выше.

[0197]

(Способ получения 5)

[0198]

где X, Z₁, Z₂, Z₃, Z₄, W, n, R₁, R₂ и R₃ имеют определенное выше значение.

[0199]

(11-я стадия)

Эта стадия является стадией получения соединения пиразоло[3,4-d]пиримидина формулы (I) посредством реакции конденсации соединения формулы (VII) с соединением формулы (XIV).

Реакцию проводят при использовании от 0,5 до 10 молей, предпочтительно от 1 до 3 молей, соединения формулы (XIV) на 1 моль соединения формулы (VII) в присутствии подходящего конденсирующего агента в качестве реагента.

[0200]

[0201]

[0202]

[0203]

[00204]

В Способах получения 1-5, описанных выше, когда идет речь об аминогруппе, иминогруппе, гидроксигруппе, карбоксильной группе, карбонильной группе и амидной группе, а также функциональной группе, имеющей активный протон, такой как индол, реагент, защищенный в подходящей стадии, может использоваться в каждом способе получения, или его защитная группа может быть введена в функциональную группу обычным способом, а затем защитная группа может быть удалена.

"Защитная группа для аминогруппы или иминогруппы" специально не ограничена при условии, что защитная группа имеет функцию. Соответствующие примеры включают: аралкильные группы, такие как бензильную группу, п-метоксибензильную группу, 3,4-диметоксибензильную группу, о-нитробензильную группу, п-нитробензильную группу, бензгидрильную группу, тритильную группу и кумильную группу; низшие алканоильные группы, такие как формильную группу, ацетильную группу, пропионильную группу, бутирильную группу, пивалоильную группу, трифторацетильную группу и трихлорацетильную группу; бензоильную группу; арилалканоильные группы, такие как фенилацетильную группу и феноксиацетильную группу; низшие алкоксикарбонильные группы, такие как метоксикарбонильную группу, этоксикарбонильную группу, пропилоксикарбонильную группу и трет-бутоксикарбонильную группу; аралкилоксикарбонильные группы, такие как п-нитробензилоксикарбонильную группу и фенэтилоксикарбонильную группу; низшие алкилсилильные группы, такие как триметилсилильную группу и трет-бутилдиметилсилильную группу; тетрагидропиранильную группу; триметилсилилэтоксиметильную группу; низшие алкилсульфонильные группы, такие как метилсульфонильную группу, этилсульфонильную группу и трет-бутилсульфонильную группу; низшие алкилсульфинильные группы, такие как трет-бутилсульфинильную группу; арилсульфонильные группы, такие как бензолсульфонильную группу и толуолсульфонильную группу; и имидные группы, такие как фталимидную группу. В частности, предпочтительными являются трифторацетильная группа, ацетильная группа, трет-бутоксикарбонильная группа, бензилоксикарбонильная группа, триметилсилилэтоксиметильная группа или кумильная группа.

[0205]

"Защитная группа для гидроксигруппы" специально не ограничена при условии, что защитная группа имеет функцию. Соответствующие примеры включают: низшие алкильные группы, такие как метильную группу, этильную группу, пропильную группу, изопропильную группу и трет-бутильную группу; низшие алкилсилильные группы, такие как триметилсилильную группу и трет-бутилдиметилсилильную группу; низшие алкоксиметильные группы, такие как метоксиметильную группу и 2-метоксиэтоксиметильную группу; тетрагидропиранильную группу; триметилсилилэтоксиметильную группу; аралкильные группы, такие как бензильную группу, п-метоксибензильную группу, 2,3-диметоксибензильную группу, о-нитробензильную группу, п-нитробензильную группу и тритильную группу; и ацильные группы, такие как формильную группу, ацетильную группу и трифторацетильную группу. В частности, предпочтельными являются метильная группа, метоксиметильная группа, тетрагидропиранильная группа, триметилсилилэтоксиметильная группа, трет-бутилдиметилсилильная группа или ацетильная группа.

[0206]

"Защитная группа для карбоновой группы" специально не ограничена при условии, что защитная группа имеет функцию. Соответствующие примеры включают: низшие алкильные группы, такие как метильную группу, этильную группу, пропильную группу, изопропильную группу и трет-бутильную группу; галогенированные низшие алкильные группы, такие как 2,2,2-трихлорэтильную группу; низшие алкенильные группы, такие как аллильную группу; триметилсилилэтоксиметильную группу; и аралкильные группы, такие как бензильную группу, п-метоксибензильную группу, п-нитробензильную группу, бензгидрильную группу и тритильную группу. В частности, предпочтельными являются метильная группа, этильная группа, трет-бутильная группа, аллильная группа, бензильная группа, п-метоксибензильная группа или триметилсилилэтоксиметильная группа.

[0207]

"Защитная группа для карбонильной группы" специально не ограничена при условии, что защитная группа имеет функцию. Соответствующие примеры включают кетали и ацетали, такие как этиленкеталь, триметиленкеталь, диметилкеталь, этиленацеталь, триметиленацеталь и диметилацеталь.

[0208]

"Защитная группа для амидной группы или функциональной группы, имеющей активный протон, такой как индол" специально не ограничена при условии, что защитная группа имеет функцию. Соответствующие примеры включают: низшие алкильные группы, такие как метильную группу, этильную группу, пропила группу, изопропильную группу и трет-бутильную группу; низшие алкилсилильные группы, такие как триметилсилильную группу и трет-бутилдиметилсилильную группу; низшие алкоксиметильные группы, такие как метоксиметильную группу и 2-метоксиэтоксиметильную группу; тетрагидропиранильную группу; триметилсилилэтоксиметильную группу; аралкильные группы, такие как бензильную группу, п-метоксибензильную группу, 2,3-диметоксибензильную группу, о-нитробензильную группу, п-нитробензильную группу и тритильную группу; и ацильные группы, такие как формильную группу, ацетильную группу и трифторацетильную группу. В частности, предпочтельными являются метильная группа, метоксиметильная группа, тетрагидропиранильная группа, триметилсилилэтоксиметильная группа, трет-бутилдиметилсилильная группа или ацетильная группа.

[0209]

Способ удаления защитной группы отличается в зависимости от типа защитной группы, стабильности представляющего интерес соединения и т.д., и осуществляется в соответствии, например, со способом, описанным в литературе (см. Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd edition, T.W. Greene, John Wiley & Sons, Inc., 1999), или эквивалентным ему способом, например, сольволизом с использованием кислоты или основания, то есть способом, позволяющим воздействие, например, от 0,01 моль до большого избытка кислоты, предпочтительно трифторуксусной кислоты, муравьиной кислоты или соляной кислоты, или от эквимолярного количества до большого избытка основания, предпочтительно гидроксида калия или гидроксида кальция; химическое восстановление с использованием комплекса галогенида металла или т.п.; или каталитическое восстановление с использованием палладий-угольного катализатора, никелевого катализатора Ренея или т.п.

[0210]

Соединение пиразоло[3,4-d]пиримидина формулы (I) и промежуточные соединения могут быть легко выделены и очищены с помощью метода разделения и очистки, известного в уровне техники. Примеры такого метода могут включать выпаривание, выпаривание при пониженном давлении, экстракцию растворителем, перекристаллизацию, переосаждение, препаративную обращенно-фазовую высокоэффективную жидкостную хроматографию, колоночную хроматографию и препаративную тонкослойную хроматографию.

[0211]

Когда соединение пиразоло[3,4-d]пиримидина формулы (I) имеет оптические изомеры, стереоизомеры, таутомеры или вращательные изомеры, любой из этих изомеров и их смеси также включены в соединение. Рацемат соединения пиразоло[3,4-d]пиримидина или оптически активные формы, выделенные из рацемата, также включены в соединение. Каждый из этих изомеров может быть получен в виде отдельного соединения с помощью метода синтеза и метода разделения (выпаривание, экстракция растворителем, колоночная хроматография, перекристаллизация и т.д.), по существу известных в уровне техники.

[0212]

Соединение пиразоло[3,4-d]пиримидина формулы (I) или его соль могут быть кристаллическими. Монокристаллическая форма или полиморфная смесь также включены в соединение или его соль. Кристаллы могут быть получены при кристаллизации с использованием способа кристаллизации, по существу известного в уровне техники. Соединение пиразоло[3,4-d]пиримидина или его соль могут быть сольватом (например, гидратом) или могут не быть сольватом. Они также включены в соединение или его соль. Соединение, меченное изотопом (например, ³H, ¹⁴C, ³⁵S, ¹²⁵I) и т.п., также включено в соединение пиразоло[3,4-d]пиримидина или его соль.

[0213]

Пролекарство соединения пиразоло[3,4-d]пиримидина формулы (I) или его соли также охвачено соединением или его солью. Пролекарство относится к соединению, которое превращается в соединение пиразоло[3,4-d]пиримидина или его соль в результате реакции с ферментом, желудочным соком и т.п. при физиологических условиях in vivo, т.е. соединению, которое превращается в соединение пиразоло[3,4-d]пиримидина или его соль при ферментативном окислении, восстановлении, гидролизе и т.д., или соединению, которое превращается в соединение пиразоло[3,4-d]пиримидина или его соль при гидролизе, и т.д., желудочным соком и т.п. В альтернативе пролекарство соединения пиразоло[3,4-d]пиримидина или его соль может быть превращено в соединение пиразоло[3,4-d]пиримидина или его соль при физиологических условиях, как описано в Hirokawa-Shoten Ltd. (1990) "Iyakuhin no Kaihatsu (Development of drugs in English)", Vol. 7, Molecular Design, p. 163-198.

[0214]

Соль соединения пиразоло[3,4-d]пиримидина формулы (I) специально не ограничена при условии, что соль является фармацевтически приемлемой. Соль соединения настоящего изобретения означает соль, обычно используемую в области органической химии. Соответствующие примеры могут включать соли, включающие следующее: когда соединение имеет карбоксильную группу, соль присоединения основания карбоксильной группы; и когда соединение имеет аминогруппу или основную гетероциклическую группу, соль присоединения кислоты аминогруппы или основной гетероциклической группы.

Примеры соли присоединения основания включают: соли щелочных металлов, такие как натриевую соль и калиевую соль; соли щелочноземельных металлов, такие как кальциевую соль и магниевую соль; соли аммония; и соли органических аминов, такие как соль триметиламина, соль триэтиламина, соль дициклогексиламина, соль этаноламина, соль диэтаноламина, соль триэтаноламина, соль прокаина и соль N,N'-дибензилэтилендиамина.

Примеры соли присоединения кислоты включают: соли неорганических кислот, такие как гидрохлорид, сульфат, нитрат, фосфат и перхлорат; соли органических кислот, такие как ацетат, формиат, малеат, фумарат, тартрат, цитрат, аскорбат и трифторацетат; и сульфонаты, такие как метансульфонат, изетионат, бензолсульфонат и п-толуолсульфонат.

[0215]

Как показано в Примерах, представленных ниже, комбинированное применение соединения пиразоло[3,4-d]пиримидина формулы (I) или его соли с другим противоопухолевым средством(ами) усиливает противоопухолевое действие. С другой стороны, предотвращаются нежелательные эффекты, такие как токсическое действие.

[0216]

Таким образом, в одном варианте осуществления настоящего изобретения предложено противоопухолевое средство, включающее соединение пиразоло[3,4-d]пиримидина формулы (I) или его соль и другое противоопухолевое средство(а) в комбинации. В другом варианте осуществления настоящего изобретения предложено средство, усиливающее противоопухолевое действие другого противоопухолевого средства (средств), включающее соединение пиразоло[3,4-d]пиримидина формулы (I) или его соль в качестве действующего вещества. В настоящем изобретении также предложено средство, усиливающее противоопухолевое действие соединения пиразоло[3,4-d]пиримидина формулы (I) или его соли, включающее другое противоопухолевое средство(а) в качестве действующего вещества.

[0217]

Примеры другого противоопухолевого средства (средств) включают, без конкретного ограничения, антиметаболиты, молекулярно-направленные лекарственные средства, лекарственные средства на основе платины и лекарственные средства на основе алкалоида.

[0218]

Примеры антиметаболита включают 5-фтороурацил (5-ФУ), 5-фтор-2'-дезоксиуридин (FdUrd), тегафур, тегафур-урацил (например, UFT), тегафур-гимерацил-отерацил (например, TS-1), трифлуридин, трифлуридин-типирацила гидрохлорид (например, Lonsurf), гемцитабин, капецитабин и цитарабин. Антиметаболитом предпочтительно является 5-фтороурацил (5-ФУ), 5-фтор-2'-дезоксиуридин (FdUrd), трифлуридин, гемцитабин или капецитабин.

[0219]

Примеры молекулярно-направленного лекарственного средства включают ингибиторы семейства ErbB (EGFR, Her2, Her3 и Her4), ингибиторы PI3K/AKT/mTOR и ингибиторы CDK4/6.

Ингибитор семейства ErbB (EGFR, Her2, Her3 и Her4) предпочтительно является ингибитором Her2, более предпочтительно антителом против Her2, таким как трастузумаб, пертузумаб или трастузумаб эмтанзин, еще более предпочтительно трастузумаб или трастузумаб эмтанзин и т.д.

Ингибитор PI3K/AKT/mTOR является соединением, ингибирующим сигнальный путь PI3K/AKT/mTOR. Соответствующие примеры включают AZD5363, AZD8055, эверолимус, дактолизиб, бупарлизиб, таселизиб, MK2206 и транс-3-амино-1-метил-3-[4-(3-фенил-5H-имидазо[1,2-c]пиридо[3,4-e][1,3]оксазин-2-ил)фенил]-циклобутанол. Ингибитором PI3K/AKT/mTOR предпочтительно является AZD8055, эверолимус, дактолизиб, бупарлизиб или таселизиб.

Примеры ингибитора CDK4/6 включают палбоциклиб и абемациклиб. Ингибитором CDK4/6 предпочтительно является палбоциклиб.

[0220]

Примеры лекарственного средства на основе платины включают оксалиплатин, карбоплатин, цисплатин и недаплатин. Лекарственным средством на основе платины предпочтительно является цисплатин.

[0221]

Примеры лекарственного средства на основе растительного алкалоида включают ингибиторы микротрубочек, такие как паклитаксел, доцетаксел, винбластин, винкристин, виндезин, винорелбин и эрибулин, и ингибиторы топоизомеразы, такие как иринотекан, ногитекан и этопозид. Лекарственное средство на основе растительного алкалоида предпочтительно является ингибитором микротрубочек, таким как паклитаксел, доцетаксел, винбластин, винкристин, виндезин, винорелбин или эрибулин, более предпочтительно ингибитором микротрубочек на основе таксана, таким как паклитаксел или доцетаксел, еще более предпочтительно паклитакселом или доцетакселом, более предпочтительно паклитакселом.

[0222]

Другим противоопухолевым средством(ами) предпочтительно является антиметаболит, молекулярно-направленное лекарственное средство, лекарственное средство на основе платины или лекарственное средство на основе растительного алкалоида, более предпочтительно антиметаболит, ингибитор семейства ErbB (EGFR, Her2, Her3 и Her4), ингибитор PI3K/AKT/mTOR, ингибитор CDK4/6, лекарственное средство на основе платины или лекарственное средство на основе растительного алкалоида, еще более предпочтительно антиметаболит, ингибитор Her2, ингибитор PI3K/AKT/mTOR, ингибитор CDK4/6, лекарственное средство на основе платины или лекарственное средство на основе растительного алкалоида, более предпочтительно антиметаболит, ингибитор Her2, ингибитор PI3K/AKT/mTOR, ингибитор CDK4/6, лекарственное средство на основе платины или ингибитор микротрубочек, еще более предпочтительно антиметаболит, ингибитор Her2, ингибитор PI3K/AKT/mTOR, ингибитор CDK4/6, лекарственное средство на основе платины или ингибитор микротрубочек на основе таксана, еще больше предпочтительно 5-фтороурацил (5-ФУ), 5-фтор-2'-дезоксиуридин (FdUrd), тегафуром, тегафур-урацил (например. UFT), тегафур-гимерацил-отерацил (например, TS-1), трифлуридин, трифлуридин-типирацила гидрохлорид (например, Lonsurf), гемцитабин, капецитабин, цитарабин, трастузумаб, пертузумаб, трастузумаб эмтанзин, AZD5363, AZD8055, эверолимус, дактолизиб, бупарлизиб, таселизиб, MK2206, транс-3-амино-1-метил-3-[4-(3-фенил-5H-имидазо[1,2-c]пиридо[3,4-e][1,3]оксазин-2-ил)фенил]-циклобутанол, палбоциклиб, абемациклиб, оксалиплатин, карбоплатин, цисплатин, недаплатин, паклитаксел или доцетаксел, еще более предпочтительно 5-фтороурацил (5-ФУ), 5-фтор-2'-дезоксиуридин (FdUrd), трифлуридин, гемцитабин, капецитабин, трастузумаб, трастузумаб эмтанзин, AZD8055, эверолимус, дактолизиб, бупарлизиб, таселизиб, палбоциклиб, цисплатин или паклитаксел, наиболее предпочтительно капецитабин, трастузумаб или трастузумаб эмтанзин.

Другое противоопухолевое средство(а) также включает препараты DDS таких противоопухолевых средств. Примеры препаратов DDS "паклитаксела" включают альбумин-связанный паклитаксел (например, абраксан) и мицеллы паклитаксела (например, NK105). Примеры препарата DDS "цисплатина" включают мицеллы цисплатина (например, NC-6004).

[0223]

В данном контексте, в настоящем описании, термин "HER2" включает HER2 человека или не относящего к человеку млекопитающего и предпочтительно является человеческим HER2. Термин "HER2" также включает изоформы.

Рак, являющийся мишенью согласно настоящему изобретению, конкретно не ограничен диапазоном, который вызывает усиление противоопухолевого действия, и предпочтительно является раком, в отношении которого соединение пиразоло[3,4-d]пиримидина формулы (I) или его соль оказывает противоопухолевое действие, более предпочтительно злокачественной опухолью, включающей активность HER2. В этом контексте примеры "злокачественной опухоли, включающей активность HER2", включают злокачественную опухоль, в которой функциональная делеция, супрессия и/или ингибирование HER2 приводят к снижению частоты, ремиссии симптомов, облегчению и/или полному излечению.

Примерами такой злокачественной опухоли предпочтительно является злокачественная опухоль с повышенной экспрессией HER2, амплификацией гена HER2 или мутацией HER2. Примеры "злокачественной опухоли", являющейся мишенью, включают, без конкретного ограничения перечисленным, рак головы и шеи, рак пищевода, рак желудка, рак толстой кишки, рак прямой кишки, рак печени, рак желчного пузыря или желчных протоков, рак желчевыводящей системы, рак поджелудочной железы, рак легкого, рак молочной железы, рак яичника, рак шейки матки, рак тела матки, рак почки, рак мочевого пузыря, рак предстательной железы, опухоль яичка, саркому кости или мягких тканей, гемобластоз, множественную миелому, рак кожи, опухоль головного мозга и мезотелиому. Злокачественной опухолью предпочтительно является рак молочной железы, рак желудка, рак пищевода, рак яичника, рак легкого, рак желчного пузыря или желчных протоков, рак желчевыводящей системы, рак мочевого пузыря или рак толстой кишки, более предпочтительно рак молочной железы, рак желудка, рак пищевода, рак желчевыводящей системы, рак яичника или рак легкого, еще более предпочтительно рак молочной железы или рак желудка.

[0224]

Для применения соединения пиразоло[3,4-d]пиримидина формулы (I) или его соли и другого противоопухолевого средства (средств) в качестве лекарственного средства, различные лекарственные формы, при необходимости содержащие фармацевтические носители, могут применяться в соответствии с профилактическими или терапевтическими целями. Форма может быть, например, любой из пероральных средств, инъекций, суппозиториев, мазей и трансдермальных пластырей. Каждая из этих лекарственных форм может быть получена с помощью стандартного метода производства лекарственной формы, известного специалистам в данной области.

[0225]

Схему применения соединения пиразоло[3,4-d]пиримидина формулы (I) или его соли и другого противоопухолевого средства (средств) соответствующим образом подбирают в диапазоне, в котором каждое действующее вещество оказывает противоопухолевое действие. Эти действующие вещества вводят параллельно или отдельно с интервалами. В случае отдельного введения этих действующих веществ любое из действующих веществ могут вводить первым.

[0226]

Соединение пиразоло[3,4-d]пиримидина формулы (I) или его соль и другое противоопухолевое средство(а) могут изготавливать в виде разных композиций, соответственно включающих действующие вещества, или могут изготавливать вместе в одной композиции, в зависимости от лекарственной формы каждого включающих действующего вещества или схемы применения. Кроме того, соответствующие препараты могут производить и распространять вместе в одной упаковке, подходящей для комбинированного применения, или могут производить и распространять в отдельных упаковках.

[0227]

Различные органические или неорганические вещества носители, обычно используемые в качестве фармацевтических материалов, используются в качестве фармацевтических носителей. Твердый препарат содержит вспомогательное вещество, связующее вещество, разрыхлитель, смазывающее вещество, вещество для получения покрытия и т.п., и жидкий препарат содержит растворитель, солюбилизатор, суспендирующее вещество, регулятор тоничности, регулятор pH или буфер, успокаивающее вещество и т.п. В случае необходимости также могут использоваться фармацевтические добавки, такие как антисептик, антиоксидант, краситель, корригенти стабилизатор.

[0228]

Примеры вспомогательного вещества включают лактозу, сахарозу, D-маннит, крахмал, кристаллическую целлюлозу и силикат кальция.

Примеры связующего вещества включают гидроксипропилцеллюлозу, метилцеллюлозу, поливинилпирролидон, порошок мальтозного сиропа и гипромеллозу.

Примеры разрыхлителя включают крахмал гликолят натрия, кармеллозу кальция, кроскармеллозу натрия, кросповидон, низкозамещенную гидроксипропилцеллюлозу и частично прежелатинизированный крахмал.

Примеры смазывающего вещества включают тальк, стеарат магния, сложный эфир сахарозы и жирной кислоты, стеариновую кислоту и стеарилфумарат натрия.

Примеры вещества для получения покрытия включают этилцеллюлозу, аминоалкилметакрилатный сополимер RS, гипромеллозу и сахарозу.

Примеры растворителя включают воду, пропиленгликоль и раствор хлорида натрия.

Примеры солюбилизатора включают полиэтиленгликоль, этанол, α-циклодекстрин, макрогол 400 и полисорбат 80.

Примеры суспендирующего вещества включают каррагинан, кристаллическую натрий целлюлозу-кармеллозу и полиоксиэтилен гидрогенизированное касторовое масло.

Примеры регулятора тоничности включают хлорид натрия, глицерин и хлорид калия.

Примеры регулятора pH или буфера включают цитрат натрия, соляную кислоту, молочную кислоту, фосфорную кислоту и дигидрофосфат натрия.

Примеры успокаивающего средства включают прокаина гидрохлорид и лидокаин.

Примеры антисептика включают этил-п-гидроксибензоат, крезол и хлорид бензалкония.

Примеры антиоксиданта включают сульфит натрия, аскорбиновую кислоту и натуральный витамин E.

Примеры красителя включают оксид титана, оксид железа (III), пищевой синий 1 и медный комплекс хлорофилла.

Примеры корригента включают аспартам, сахарин, сукралозу, l-ментол и мятный ароматизатор.

Примеры стабилизатора включают пиросульфит натрия, эдетат натрия, эриторбовую кислоту, оксид магния и дибутилгидрокситолуол.

[0229]

Твердый препарат для приема внутрь может быть изготовлен с использованием вспомогательного вещества, связующего вещества, разрыхлителя, смазывающего вещества, красителя, корригента и т.п., с получением таблеток, таблеток, покрытых оболочкой, гранул, порошков, капсул и т.п. при использовании стандартного способа.

[0230]

Препарат для инъекций может быть изготовлен с использованием регулятора pH, буфера, стабилизатора, регулятора тоничности, местного анестетика и т.п., с получением препарата для подкожного, внутримышечного и внутривенного введения при использовании стандартного способа.

[0231]

Количество соединения пиразоло[3,4-d]пиримидина или его соли, содержащееся в каждой единичной лекарственной форме, описанной выше, изменяется в зависимости от симптомов пациента, получающего ее, или от лекарственной формы, и т.д., и обычно, предпочтительно, составляет от 0,05 до 1000 мг для пероральных средств, от 0,01 до 500 мг для инъекций или от 1 до 1000 мг для суппозиториев, на единичную лекарственную форму.

[0232]

Соотношение между соединением пиразоло[3,4-d]пиримидина или его солью и другим противоопухолевым средством конкретно не ограничено в пределах диапазона, в котором проявляется эффект усиления противоопухолевого действия. Соединение пиразоло[3,4-d]пиримидина или его соль могут применяться в количестве от 0,001 до 100 молей на 1 моль другого противоопухолевого средства.

[0233]

Суточная доза соединения пиразоло[3,4-d]пиримидина или его соли, имеющих лекарственную форму, отличается в зависимости от симптомов, массы тела, возраста, пола, и т.д., пациента и не может быть обобщена. Суточная доза обычно может составлять от 0,05 до 5000 мг, предпочтительно от 0,1 до 1000 мг, соединения пиразоло[3,4-d]пиримидина для взрослого (масса тела: 50 кг), и эту дозу предпочтительно вводят один раз в день или приблизительно в двух или трех дробных частях в день.

[0234]

Суточная доза другого противоопухолевого средства (средств), имеющего лекарственную форму, отличается в зависимости от типа используемого противоопухолевого средства, его композиции, симптомов, массы тела, возраста, пола, и т.д., пациента и не может быть обобщена. Суточная доза обычно может составлять, например, от 0,05 до 5000 мг, предпочтительно от 0,1 до 1000 мг, соединения для взрослого (масса тела: 50 кг), и эту дозу предпочтительно могут вводить один раз в день или приблизительно в двух или трех дробных частях в день.

[0235]

В альтернативе суточная доза другого противоопухолевого средства (средств), имеющего лекарственную форму, может быть, например, дозой, составляющей от 10 до 100%, предпочтительно от 50 до 100%, более предпочтительно 100%, рекомендованной дозы другого противоопухолевого средства (средств), вводимого отдельно.

В настоящем изобретении "рекомендованная доза" определена в клинических исследованиях и т.п. и является дозой, которая вызывает максимальный терапевтический эффект в диапазоне, безопасном для применения без развития тяжелых нежелательных эффектов. Конкретные соответствующие примеры включают дозы, одобренные или рекомендованные государственными учреждениями, такими как Агентство лекарственных средств и медицинских устройств Японии (PMDA), Управление по контролю качества продуктов питания и лекарственных средств (FDA) и Европейское агентство лекарственных средств (EMA), и описанные в листках-вкладышах в упаковку, опросниках, руководствах по лечению и т.п. Предпочтительной является доза, одобренная любым из таких государственных учреждений, как PMDA, FDA и EMA.

[0236]

Настоящее изобретение также относится к набору препаратов, содержащему соединение пиразоло[3,4-d]пиримидина согласно настоящему изобретению или его соли, и инструкции по применению, в которой указано, что соединение пиразоло[3,4-d]пиримидина согласно настоящему изобретению или его соль применяются в комбинированном введении с другим противоопухолевым средством(ами) онкологическому больному. В данном контексте "инструкция по применению" может быть любой инструкцией по применению, в которой указана доза, и предпочтительно рекомендована доза, независимо от наличия или отсутствия юридической обязательности. Соответствущие конкретные примеры включают вкладыши в упаковку и информационные листки. Набор препаратов, содержащий инструкцию по применению, может быть набором препаратов с инструкцией по применению, напечатанной на упаковке или прикрепленной к упаковке, или может быть набором препаратов с инструкцией по применению, включенной вместе с противоопухолевым средством в упаковку.

Примеры

[0237]

Далее настоящее изобретение будет описано более конкретно со ссылкой на Примеры синтеза и Примеры. Однако настоящее изобретение не должно быть ограничено этими Примерами каким-либо образом.

[0238]

[Пример синтеза]

В Примерах синтеза использовались различные типы реактивов, которые были доступны в продаже, если не определено иное. В колоночной хроматографии на силикагеле использовали Purif-Pack(R) SI производства Moritex Corp., набитую силикагелем колонку KP-Sil(R) производства Biotage Japan Ltd. или набитую силикагелем колонку HP-Sil(R) производства Biotage Japan Ltd.

В основной колоночной хроматографии на силикагеле использовали Purif-Pack(R) NH производства Moritex Corp. или набитую колонку KP-NH(R) производства Biotage Japan Ltd.,.

В препаративной тонкослойной хроматографии использовали Kieselgel(TM) 60F254 арт. 5744 производства Merck KGaA или пластину с NH2 силикагелем 60F254 производства Wako Pure Chemical Industries, Ltd.

Спектры ЯМР измеряли при использовании AL400 (400 МГц; JEOL Ltd.), спектрометра Mercury 400 (400 МГц; Agilent Technologies, Inc.) или спектрометра Inova 400 (400 МГц; Agilent Technologies, Inc.), оборудованного детектором OMNMR (Protasis Corp.), и с использованием тетраметилсилана в качестве внутреннего стандарта в случае содержания тетраметилсилана в дейтерированном растворителе и растворителя ЯМР в качестве внутреннего стандарта в остальных случаях. Общие значения δ указаны в м.д.

Микроволновую реакцию проводили при использовании реактора Discover S class производства CEM Corp.

[0239]

Спектры ЖХМС измеряли при использовании ACQUITY SQD (квадрупольного типа) производства Waters Corp. при следующих условиях:

Колонка: YMC-Triart C18 производства YMC Co., Ltd., 2,0×50 мм, 1,9 мкм

МС-детектирование: ЭРИ положительных ионов

УФ-детектирование: 254 и 210 нм

Скорость потока колонки: 0,5 мл/мин

Подвижная фаза: вода/ацетонитрил (0,1% муравьиной кислоты)

Объем вводимой пробы: 1 мкл

Градиент (таблица 1)

Время (мин)	Вода	Ацетонитрил
0	95	5
0,1	95	5
2,1	5	95
3,0	СТОП

[0240]

Очистку с помощью обращенно-фазовой препаративной ВЭЖХ проводили при использовании препаративной системы производства Waters Corp. при следующих условиях:

Колонка: YMC-Actus Triart C18 производства YMC Co., Ltd., 20×50 мм, 5 мкм и YMC-Actus Triart C18 производства YMC Co., Ltd., 20×10 мм, 5 мкм, подсоединенные для использования

УФ-детектирование: 254 нм

МС-детектирование: ЭРИ положительных ионов

Скорость потока колонки: 25 мл/мин

Объем вводимой пробы: 0,1-0,5 мл

[0241]

Сокращения имеют следующие значения:

с: синглет

д: дублет

т: триплет

к: квартет

дд: двойной дублет

дт: двойной триплет

тд: тройной дублет

тт: тройной триплет

ддд: двойной двойной дублет

ддт: двойной двойной триплет

дтд: двойной тройной дублет

тдд: тройной двойной дублет

м: мультиплет

ш: широкий

шс: широкий синглет

ДМСО-d₆: дейтерированный диметилсульфоксид

CDCl₃: дейтерированный хлороформ

CD₃OD: дейтерированный метанол

ТГФ: тетрагидрофуран

ДМФА: N,N-диметилформамид

ДМА: N,N-диметилацетамид

NMP: 1-метил-2-пирролидинон

DME: диметиловый эфир этиленгликоля

ДМСО: диметилсульфоксид

ТФУ: трифторуксусная кислота

WSC: гидрохлорид 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида

HATU: гексафторфосфат (диметиламино)-N,N-диметил(3H-[1,2,3]триазоло[4,5-b]пиридин-3-илокси)метанаминия

DIPEA: диизопропилэтиламин

Boc: трет-бутоксикарбонильная группа

dppf: 1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен

[0242]

Справочный пример 1 Синтез (R)-трет-бутил-3-(4-амино-3-иод-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)пиперидин-1-карбоксилата

[0243]

[0244]

(Стадия 1) Синтез (S)-трет-бутил-3-(метилсульфонилокси)-пиперидин-1-карбоксилата

(S)-N-Boc-3-пиперидинол (20 г) растворяли в толуоле (100 мл). К раствору при 0°C добавляли триэтиламин (21 мл) и метансульфонилхлорид (9,2 мл). Смесь перемешивали при охлаждении льдом в течение 1 часа, и затем к смеси добавляли этилацетат и воду с отделением органического слоя. Органический слой промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия, насыщенным водным раствором хлорида аммония и водой, а затем сушили над безводным сульфатом натрия и отгоняли растворитель при пониженном давлении с получением 26,8 г указанного в заголовке соединения в виде бесцветного твердого вещества.

[0245]

(Стадия 2) Синтез (R)-трет-бутил-3-(4-амино-3-иод-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)пиперидин-1-карбоксилата

3-Иод-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-4-амин (14,6 г), синтезированный способом, описанным в бюллетене Международной публикации WO 2007/126841, (S)-трет-бутил-3-(метилсульфонилокси)пиперидин-1-карбоксилат (25 г), полученный в (Стадии 1), и карбонат калия (69 г) суспендировали в ДМА (150 мл), суспензию нагревали до 100°C и перемешивали в течение 10 часов. После охлаждения смеси до комнатной температуры добавляли воду (300 мл) и образовавшийся осадок собирали с помощью фильтрования, промывали водой, а затем сушили с получением 26,9 г указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества.

Значение физического показателя: m/z [M+H]+ 446,2

[0246]

Справочный пример 2 Синтез (R)-4-амино-1-(1-(трет-бутилоксикарбонил)пиперидин-3-ил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновой кислоты

[0247]

[0248]

(R)-трет-бутил-3-(4-амино-3-иод-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)пиперидин-1-карбоксилат (2 г), полученный в Справочном примере 1, 2-диэтиламиноэтанол (3 мл), и Pd(PPh₃)₂Cl₂ (158 мг) растворяли в NMP (20 мл). После продувки системы монооксидом углерода раствор нагревали до 120°C. Раствор перемешивали в течение 1 часа и затем охлаждали до комнатной температуры. К раствору добавляли метанол (10 мл), затем добавляли раствор 5Н водный раствор гидроксида натрия (6 мл) и перемешивали смесь в течение 10 минут. После добавления воды водный слой промывали этилацетатом, доводили до pH 4 соляной кислотой и образовавшийся осадок собирали с помощью фильтрования, промывали водой и затем сушили с получением 1,26 г указанного в заголовке соединения в виде бледно-желтого твердого вещества.

Значение физического показателя: m/z [M+H]+ 363,1

[0249]

Справочный пример 3 Синтез (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновой кислоты

[0250]

[0251]

К (R)-4-амино-1-(1-(трет-бутилоксикарбонил)пиперидин-3-ил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновой кислоте (10 г), полученной в Справочном примере 2, добавляли 4Н хлороводородную кислоту/1,4-диоксан (50 мл) и перемешивали смесь в течение 1 часа. Затем растворитель удаляли с помощью испарителя. К остатку добавляли хлороформ (140 мл) и триэтиламин (25 мл) и охлаждали смесь во льду с последующим добавлением акрилоилхлорида (2,23 мл). Смесь перемешивали в течение 1,5 часа, а затем удаляли растворитель с помощью испарителя. К остатку добавляли муравьиную кислоту до pH 3,0 и перемешивали смесь в течение 2 часов. Затем образовавшийся осадок собирали с помощью фильтрования и сушили при пониженном давлении с получением 8,93 г указанного в заголовке соединения в виде бело-коричневого твердого вещества.

Значение физического показателя: m/z [M+H]+ 317,3

[0252]

Справочный пример 4 Синтез (R)-4-амино-1-(1-(трет-бутилоксикарбонил)пирролидин-3-ил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновой кислоты

[0253]

[0254]

(Стадия 1) Синтез (S)-трет-бутил-3-(метилсульфонилокси)-пирролидин-1-карбоксилата

(S)-(-)-N-Boc-3-пирролидинол (935 мг) растворяли в хлороформе (15 мл). К раствору при охлаждении льдом добавляли триэтиламин (1,04 мл) и метансульфонилхлорид (467 мкл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1,5 часа, затем к смеси добавляли этилацетат и воду с отделением органического слоя. Органический слой промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия, насыщенным водным раствором хлорида аммония и водой, затем сушили над безводным сульфатом натрия и отгоняли растворитель при пониженном давлении с получением 1,3 г указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла.

Значение физического показателя: m/z [M+H]+ 266,1

[0255]

(Стадия 2) Синтез (R)-трет-бутил-3-(4-амино-3-иод-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)пирролидин-1-карбоксилата

3-иод-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-4-амин (20,0 г), синтезированный способом, описанным в бюллетене Международной публикации WO 2007/126841, (S)-трет-бутил-3-(метилсульфонилокси)пирролидин-1-карбоксилат (23 г), полученный в (Стадии 1), и карбонат калия (32 г) суспендировали в ДМА (200 мл), суспензию нагревали до 85°C и перемешивали в течение 3 часов. После охлаждения смеси до комнатной температуры к смеси добавляли воду (400 мл) и собирали образовавшийся осадок с помощью фильтрования, промывали водой, а затем сушили с получением 23,5 г указанного в заголовке соединения в виде бледно-желтого твердого вещества.

Значение физического показателя: m/z [M+H]+ 431,0

[0256]

(Стадия 3) Синтез (R)-4-амино-1-(1-(трет-бутилоксикарбонил)пирролидин-3-ил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновой кислоты

(R)-трет-бутил-3-(4-амино-3-иод-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)пирролидин-1-карбоксилат (2,0 г), полученный в (Стадии 2), 2-диэтиламиноэтанол (3,1 мл) и Pd(PPh₃)₂Cl₂ (163 мг) растворяли в NMP (20 мл). После продувки системы монооксидом углерода раствор нагревали до 120°C. Раствор перемешивали в течение 1 часа и затем охлаждали до комнатной температуры. К раствору добавляли метанол (10 мл), затем добавляли 5Н водный раствор гидроксида натрия (6 мл) и перемешивали смесь в течение 10 минут. После добавления воды водный слой промывали хлороформом, доводили до pH 4 соляной кислотой и собирали образовавшийся осадок с помощью фильтрования, промывали водой и затем сушили с получением 1,35 г указанного в заголовке соединения в виде бледно-желтого твердого вещества.

Значение физического показателя: m/z [M+H]+ 349,1

[0257]

Справочный пример 5 Синтез (R)-1-(1-акрилоилпирролидин-3-ил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновой кислоты

[0258]

[0259]

К (R)-4-амино-1-(1-(трет-бутилоксикарбонил)пирролидин-3-ил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновой кислоте (1,0 г), полученной в Справочном примере 4, добавляли 4Н хлороводородную кислоту/1,4-диоксан (5 мл) и перемешивали смесь в течение 1 часа. Затем растворитель удаляли с помощью испарителя. К остатку добавляли хлороформ (28 мл) и триэтиламин (1,5 мл) и охлаждали смесь во льду с последующим добавлением акрилоилхлорида (0,21 мл). Смесь перемешивали в течение 1,5 часов и затем удаляли растворитель с помощью испарителя. К остатку добавляли муравьиную кислоту до pH 3,0 и перемешивали смесь в течение 2 часов. Затем образовавшийся осадок собирали с помощью фильтрования и сушили при пониженном давлении с получением 0,859 г указанного в заголовке соединения в виде бело-коричневого твердого вещества.

Значение физического показателя: m/z [M+H]+ 303,3

[0260]

Пример синтеза 1 Синтез (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(5-бром-4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-2-метилфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида

[0261]

(Стадия 1) Синтез 2-(2-бром-5-метил-4-нитрофенил)уксусной кислоты

[0262]

Согласно способу, описанному в бюллетене Международной публикации WO 2012/058134, NMP (10 мл) добавляли к диэтилмалонату (2,4 г). Затем раствор охлаждали в ледяной бане и добавляли гидрид натрия (960 мг). Смесь перемешивали при 0°C в течение 30 минут и затем добавляли 1-бром-2-фтор-4-метил-5-нитробензол (2,34 г). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа и затем добавляли этилацетат и воду с отделением органического слоя. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида аммония, затем сушили над безводным сульфатом натрия и отгоняли растворитель при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (гексан/этилацетат) с получением 3,13 г бесцветного масла. Затем к полученному маслу добавляли метанол (30 мл) и 5 М водный раствор гидроксида натрия (7,5 мл) и нагревали смесь с обратным холодильником в течение 5 часов. После охлаждения раствора до комнатной температуры растворитель отгоняли при пониженном давлении и к остатку добавляли 2 М водный раствор соляной кислоты. Образовавшийся осадок собирали с помощью фильтрования и сушили с получением 1,18 г указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества.

[0263]

(Стадия 2) Синтез 2-(2-бром-5-метил-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида

[0264]

2-(2-бром-5-метил-4-нитрофенил)уксусную кислоту (1,15 г), полученную в (Стадии 1), растворяли в дихлорметане (20 мл). В раствор добавляли оксалилхлорид (0,426 мл) и ДМФА (0,0653 мл) при охлаждении льдом и затем перемешивали смесь при комнатной температуре в течение 2 часов. После выпаривания раствора к остатку добавляли толуол и снова выпаривали смесь. Полученное светло-коричневое масло растворяли в хлороформе (30 мл). К раствору добавляли 2,0 М раствор диметиламина в ТГФ (10,5 мл) и перемешивали смесь в течение 1 часа. Раствор выпаривали, а остаток растворяли в хлороформе и промывали водой. Полученный органический слой сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и выпаривали, а остаток затем очищали с помощью хроматографии на силикагеле (элюент: гексан-этилацетат) с получением указанного в заголовке соединения (1,15 г) в виде желтого твердого вещества.

[0265]

(Стадия 3) Синтез 2-(4-амино-2-бром-5-метилфенил)-N,N-диметилацетамида

[0266]

К 2-(2-бром-5-метил-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамиду (300 мг), полученном в (Стадии 2), добавляли этанол (3 мл) и воду (3 мл), а затем добавляли хлорид аммония (300 мг) и порошок железа (300 мг). Раствор нагревали до 70°C, перемешивали в течение 2 часов, затем охлаждали до комнатной температуры и фильтровали через целит для удаления железа. К фильтрату добавляли этилацетат для экстракции. Экстракт сушили над безводным сульфатом натрия и отгоняли растворитель при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле (гексан/этилацетат) с получением 200 мг указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества.

[0267]

(Стадия 4) Синтез соединения Примера синтеза 1

[0268]

(R)-1-(1-Акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновую кислоту (50 мг), полученную в Справочном примере 3, и 2-(4-амино-2-бром-5-метилфенил)-N,N-диметилацетамид (64 мг), полученный в (Стадии 3), растворяли при добавлении ДМФА (1 мл) и DIPEA (0,055 мл). Затем в раствор добавляли HATU (90 мг). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа, затем очищали с помощью обращенно-фазовой препаративной ВЭЖХ (вода/ацетонитрил (0,1% муравьиной кислоты)) и выпаривали, а затем остаток растворяли в хлороформе, промывали насыщенным водным раствором карбоната натрия, сушили с использованием безводного сульфата натрия и выпаривали. Затем полученный остаток суспендировали в этилацетате-гексане и фильтровали суспензию с получением 58 мг указанного в заголовке соединения в виде почти белого твердого вещества.

[0269]

Пример синтеза 2 Синтез (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(2-хлор-4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-5-метилфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида

[0270]

(Стадия 1) Синтез 2-(5-хлор-2-метил-4-нитрофенил)уксусной кислоты

[0271]

Согласно (Стадии 1) Примера синтеза 1, 952 мг указанного в заголовке соединения получали в виде бледно-желтого твердого вещества при использовании 1-хлор-5-фтор-4-метил-2-нитробензола (1,00 г) вместо 1-бром-2-фтор-4-метил-5-нитробензола.

[0272]

(Стадия 2) Синтез 2-(5-хлор-2-метил-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида

[0273]

Согласно (Стадии 2) Примера синтеза 1, 1,03 г указанного в заголовке соединения получали в виде бледно-желтого твердого вещества при использовании 2-(5-хлор-2-метил-4-нитрофенил)уксусной кислоты (922 мг), полученной в (Стадии 1), вместо 2-(2-бром-5-метил-4-нитрофенил)уксусной кислоты.

[0274]

(Стадия 3) Синтез 2-(4-амино-5-хлор-2-метилфенил)-N,N-диметилацетамида

[0275]

Согласно (Стадии 3) Примера синтеза 1, 720 мг указанного в заголовке соединения получали в виде бледно-желтого твердого вещества при использовании 2-(5-хлор-2-метил-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида (1,03 г), полученного в (Стадии 2), вместо 2-(2-бром-5-метил-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида.

[0276]

(Стадия 4) Синтез соединения Примера синтеза 2

[0277]

Согласно (Стадии 4) Примера синтеза 1, (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновую кислоту (66,5 мг) и 2-(4-амино-5-хлор-2-метилфенил)-N,N-диметилацетамид (95,3 мг), полученный в (Стадии 3), растворяли при добавлении ДМСО (0,665 мл) и DIPEA (73.2 мкл). Затем в раствор добавляли HATU (240 мг) с получением 56,2 мг указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества.

[0278]

Пример синтеза 3 Синтез (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(2-хлор-4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-3-метилфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида

[0279]

(Стадия 1) Синтез 2-(3-хлор-2-метил-4-нитрофенил)уксусной кислоты

[0280]

Согласно (Стадии 1) Примера синтеза 1, 1,23 г указанного в заголовке соединения получали в виде бледно-желтого твердого вещества при использовании 2-хлор-4-фтор-3-метил-1-нитробензола (1,00 г) вместо 1-бром-2-фтор-4-метил-5-нитробензола.

[0281]

(Стадия 2) Синтез 2-(3-хлор-2-метил-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида

[0282]

Согласно (Стадии 2) Примера синтеза 1, 900 мг указанного в заголовке соединения получали в виде бледно-желтого твердого вещества при использовании 2-(3-хлор-2-метил-4-нитрофенил)-уксусной кислоты (1,23 г), полученной в (Стадии 1), вместо 2-(2-бром-5-метил-4-нитрофенил)уксусной кислоты.

[0283]

(Стадия 3) Синтез 2-(4-амино-3-хлор-2-метилфенил)-N,N-диметилацетамида

[0284]

Согласно (Стадии 3) Примера синтеза 1, 590 мг указанного в заголовке соединения получали в виде белого твердого вещества при использовании 2-(3-хлор-2-метил-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида (900 мг), полученного в (Стадии 2), вместо 2-(2-бром-5-метил-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида.

[0285]

(Стадия 4) Синтез соединения Примера синтеза 3

[0286]

Согласно (Стадии 4) Примера синтеза 1, (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновую кислоту (66,5 мг) и 2-(4-амино-3-хлор-2-метилфенил)-N,N-диметилацетамид (95,3 мг), полученный в (Стадии 3), растворяли при добавлении ДМСО (0,665 мл) и DIPEA (73,2 мкл). Затем в раствор добавляли HATU (240 мг) с получением 78,2 мг указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества.

[0287]

Пример синтеза 4 Синтез (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-2-метилфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида

[0288]

(Стадия 1) Синтез N,N-диметил-2-(3-метил-4-нитрофенил)-ацетамида

[0289]

3-Метил-4-нитрофенилуксусную кислоту (50 мг) растворяли при добавлении ДМФА (1,3 мл), DIEPA (0,13 мл) и 2,0 М раствора диметиламина в ТГФ (0,38 мл). Затем в раствор добавляли HATU (145 мг). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов, и затем добавляли этилацетат и воду с отделением органического слоя. Органический слой промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия, насыщенным водным раствором хлорида аммония и водой, а затем сушили над безводным сульфатом натрия и отгоняли растворитель при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле (гексан/этилацетат) с получением 50 мг указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла.

[0290]

(Стадия 2) Синтез 2-(4-амино-3-метилфенил)-N,N-диметилацетамида

[0291]

N,N-Диметил-2-(3-метил-4-нитрофенил)ацетамид (50 мг), полученный в (Стадии 1), растворяли в метаноле (2,2 мл). Затем в раствор добавляли 10% Pd на угле (5 мг). Смесь перемешивали в течение ночи в атмосфере водорода и затем фильтровали через целит для удаления Pd на угле. Растворитель отгоняли при пониженном давлении с получением 40 мг указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла.

[0292]

(Стадия 3) Синтез соединения Примера синтеза 4

[0293]

(R)-1-(1-Акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновую кислоту (10 мг), полученную в Справочном примере 3, и 2-(4-амино-3-метилфенил)-N,N-диметилацетамид (9,2 мг), полученный в (Стадии 2), растворяли при добавлении ДМФА (0,2 мл) и DIPEA (20 мкл). К раствору затем добавляли HATU (18 мг). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Затем добавляли ДМСО (1 мл) и очищали смесь с помощью обращенно-фазовой препаративной ВЭЖХ (вода/ацетонитрил (0,1% муравьиной кислоты)) с получением 3,4 мг указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества.

[0294]

Пример синтеза 5 Синтез (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)нафталин-1-ил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида

[0295]

(Стадия 1) Синтез N,N-диметил-2-(4-нитронафталин-1-ил)ацетамида

[0296]

1-Нафтилуксусную кислоту (500 мг) растворяли в ДМФА. Затем в раствор добавляли 2,0 М раствор диэтиламина в ТГФ (2,7 мл), DIPEA (1,4 мл) и HATU (1,3 г). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов и затем добавляли этилацетат и воду с отделением органического слоя. Органический слой промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и водой, а затем сушили над безводным сульфатом натрия и отгоняли растворитель при пониженном давлении. К полученному остатку добавляли серную кислоту (5 мл) и охлаждали раствор до 0°C. Затем к раствору по каплям добавляли дымящую азотную кислоту (1 мл). Смесь перемешивали при 0°C в течение 30 минут, и затем раствор добавляли к водному раствору бикарбоната натрия и нейтрализовали с последующей экстракцией этилацетатом. Экстракт сушили над безводным сульфатом натрия и отгоняли растворитель при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле (гексан/этилацетат) с получением 310 мг указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества.

[0297]

(Стадия 2) Синтез 2-(4-аминонафталин-1-ил)-N,N-диметилацетамида

[0298]

Согласно (Стадии 2) Примера синтеза 4, 18 мг указанного в заголовке соединения получали в виде бесцветного масла при использовании N,N-диметил-2-(4-нитронафталин-1-ил)ацетамида (20 мг).

[0299]

(Стадия 3) Синтез соединения Примера синтеза 5

[0300]

Согласно (Стадии 3) Примера синтеза 4, 8,9 мг указанного в заголовке соединения получали в виде белого твердого вещества при использовании (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновой кислоты (10 мг) и 2-(4-аминонафталин-1-ил)-N,N-диметилацетамида (11 мг), полученного в (Стадии 2).

[0301]

Пример синтеза 6 Синтез (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(2-хлор-4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)фенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида

[0302]

(Стадия 1) Синтез 2-(3-хлор-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида

[0303]

Согласно (Стадии 1) Примера синтеза 4, 890 мг указанного в заголовке соединения получали в виде коричневого масла при использовании 2-(3-хлор-4-нитрофенил)уксусной кислоты (980 мг) вместо 3-метил-4-нитрофенилуксусной кислоты.

[0304]

(Стадия 2) Синтез 2-(4-амино-3-хлорфенил)-N,N-диметилацетамида

[0305]

К 2-(3-хлор-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамиду (1,4 г), полученному в (Стадии 1), добавляли этанол (14 мл) и воду (14 мл), а затем добавляли хлорид аммония (1,4 г) и порошок железа (1,4 г). Раствор нагревали до 70°C, перемешивали в течение 2 часов, затем охлаждали до комнатной температуры и фильтровали через целит для удаления железа. К фильтрату добавляли этилацетат для экстракции. Экстракт сушили над безводным сульфатом натрия и отгоняли растворитель при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле (гексан/этилацетат) с получением 1,1 г указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества.

[0306]

(Стадия 3) Синтез соединения Примера синтеза 6

[0307]

Согласно (Стадии 3) Примера синтеза 4, 6,0 мг указанного в заголовке соединения получали в виде белого твердого вещества при использовании (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновой кислоты (25 мг) и 2-(4-амино-3-хлорфенил)-N,N-диметилацетамида (25 мг), полученного в (Стадии 2).

[0308]

Пример синтеза 7 Синтез (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-2-метоксифенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида

[0309]

(Стадия 1) Синтез 2-(3-метокси-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида

[0310]

Согласно способу синтеза, описанному в European Journal of Medicinal Chemistry, 46 (1), 285-296; 2010, 480 мг указанного в заголовке соединения получали в виде желтого масла при использовании 3-метокси-4-нитробензальдегида (510 мг) вместо 4-нитробензальдегида.

[0311]

(Стадия 2) Синтез 2-(4-амино-3-метоксифенил)-N,N-диметилацетамида

[0312]

Согласно (Стадии 2) Примера синтеза 6, 450 мг указанного в заголовке соединения получали в виде желтого масла при использовании 2-(3-метокси-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида (480 мг) вместо 2-(3-хлор-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида.

[0313]

(Стадия 3) Синтез соединения Примера синтеза 7

[0314]

Согласно (Стадии 3) Примера синтеза 4, 18 мг указанного в заголовке соединения получали в виде белого твердого вещества при использовании (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновой кислоты (30 мг) и 2-(4-амино-3-метоксифенил)-N,N-диметилацетамида (29 мг), полученного в (Стадии 2).

[0315]

Пример синтеза 8 Синтез (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(3-хлор-4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)фенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида

[0316]

(Стадия 1) Синтез 2-(2-хлор-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида

[0317]

Согласно (Стадии 1) Примера синтеза 4, 220 мг указанного в заголовке соединения получали в виде желтого твердого вещества при использовании 2-(2-хлор-4-нитрофенил)уксусной кислоты (220 мг) вместо 3-метил-4-нитрофенилуксусной кислоты.

[0318]

(Стадия 2) Синтез 2-(4-амино-2-хлорфенил)-N,N-диметилацетамида

[0319]

Согласно (Стадии 2) Примера синтеза 6, 180 мг указанного в заголовке соединения получали в виде желтого масла при использовании 2-(2-хлор-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида (220 мг) вместо 2-(3-хлор-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида.

[0320]

(Стадия 3) Синтез соединения Примера синтеза 8

[0321]

Согласно (Стадии 3) Примера синтеза 4, 13,5 мг указанного в заголовке соединения получали в виде белого твердого вещества при использовании (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновой кислоты (10 мг) и 2-(4-амино-2-хлорфенил)-N,N-диметилацетамида (10 мг), полученного в (Стадии 2).

[0322]

Пример синтеза 9 Синтез (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(5-хлор-4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-2-метоксифенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида

[0323]

(Стадия 1) Синтез 2-(2-хлор-5-метокси-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида

[0324]

Согласно (Стадии 1) Примера синтеза 4, 388 мг указанного в заголовке соединения получали в виде желтого твердого вещества при использовании 2-(2-хлор-5-метокси-4-нитрофенил)уксусной кислоты (350 мг) вместо 3-метил-4-нитрофенилуксусной кислоты.

[0325]

(Стадия 2) Синтез 2-(4-амино-2-хлор-5-метоксифенил)-N,N-диметилацетамида

[0326]

Согласно (Стадии 2) Примера синтеза 6, 340 мг указанного в заголовке соединения получали в виде желтого масла при использовании 2-(2-хлор-5-метокси-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида (388 мг) вместо 2-(3-хлор-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида.

[0327]

(Стадия 3) Синтез соединения Примера синтеза 9

[0328]

Согласно (Стадии 3) Примера синтеза 4, 17,5 мг указанного в заголовке соединения получали в виде белого твердого вещества при использовании (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновой кислоты (10 мг) и 2-(4-амино-2-хлор-5-метоксифенил)-N,N-диметилацетамида (10 мг), полученного в (Стадии 2).

[0329]

Пример синтеза 10 Синтез (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-5-фтор-2-метилфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида

[0330]

(Стадия 1) Синтез 2-(2-фтор-5-метил-4-нитрофенил)уксусной кислоты

[0331]

Согласно способу, описанному в бюллетене Международной публикации WO 2012/058134, NMP (30 мл) добавляли к диэтилмалонату (1,0 г). Затем раствор охлаждали в бане со льдом и добавляли гидрид натрия (380 мг). Смесь перемешивали при 0°C в течение 30 минут, а затем добавляли 1,2-дифтор-4-метил-5-нитробензол (690 мг). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа, а затем добавляли этилацетат и воду с отделением органического слоя. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида аммония, затем сушили над безводным сульфатом натрия и отгоняли растворитель при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле (гексан/этилацетат) с получением 1,20 г бесцветного масла. Затем к полученному маслу добавляли метанол (10 мл) и 5 М водный раствор гидроксида натрия (2,5 мл) и нагревали смесь с обратным холодильником в течение 5 часов. После охлаждения раствора до комнатной температуры растворитель отгоняли при пониженном давлении и к остатку добавляли 2 М водный раствор соляной кислоты. Образовавшийся осадок собирали с помощью фильтрования и сушили с получением 610 мг указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества.

[0332]

(Стадия 2) Синтез 2-(2-фтор-5-метил-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида

[0333]

Согласно (Стадии 1) Примера синтеза 4, 600 мг указанного в заголовке соединения получали в виде желтого масла при использовании 2-(2-фтор-5-метил-4-нитрофенил)уксусной кислоты (610 мг) вместо 3-метил-4-нитрофенилуксусной кислоты.

[0334]

(Стадия 3) Синтез 2-(4-амино-2-фтор-5-метилфенил)-N,N-диметилацетамида

[0335]

Согласно (Стадии 2) Примера синтеза 6, 540 мг указанного в заголовке соединения получали в виде желтого масла при использовании 2-(2-фтор-5-метил-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида (600 мг) вместо 2-(3-хлор-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида.

[0336]

(Стадия 4) Синтез соединения Примера синтеза 10

[0337]

Согласно (Стадии 3) Примера синтеза 4, 7,3 мг указанного в заголовке соединения получали в виде белого твердого вещества при использовании (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновой кислоты (10 мг) и 2-(4-амино-2-фтор-5-метилфенил)-N,N-диметилацетамида (10 мг), полученного в (Стадии 3).

[0338]

Пример синтеза 11 Синтез (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(3-хлор-4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-2-метоксифенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида

[0339]

(Стадия 1) Синтез 2-(2-хлор-3-метокси-4-нитрофенил)уксусной кислоты

[0340]

Согласно (Стадии 1) Примера синтеза 10, 710 мг указанного в заголовке соединения получали в виде желтого твердого вещества при использовании 2-хлор-1-фтор-3-метокси-4-нитробензола (800 мг) вместо 1,2-дифтор-4-метил-5-нитробензола.

[0341]

(Стадия 2) Синтез 2-(2-хлор-3-метокси-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида

[0342]

Согласно (Стадии 1) Примера синтеза 4, 110 мг указанного в заголовке соединения получали в виде желтого масла при использовании 2-(2-хлор-3-метокси-4-нитрофенил)уксусной кислоты (100 мг), полученной в (Стадии 1), вместо 3-метил-4-нитрофенилуксусной кислоты.

[0343]

(Стадия 3) Синтез 2-(4-амино-2-хлор-3-метоксифенил)-N,N-диметилацетамида

[0344]

Согласно (Стадии 2) Примера синтеза 6, 95 мг указанного в заголовке соединения получали в виде желтого масла при использовании 2-(2-хлор-3-метокси-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида (110 мг), полученного в (Стадии 2), вместо 2-(3-хлор-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида.

[0345]

(Стадия 4) Синтез соединения Примера синтеза 11

[0346]

Согласно (Стадии 3) Примера синтеза 4, 6,9 мг указанного в заголовке соединения получали в виде белого твердого вещества при использовании (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновой кислоты (10 мг) и 2-(4-амино-2-хлор-3-метоксифенил)-N,N-диметилацетамида (10 мг), полученного в (Стадии 3).

[0347]

Пример синтеза 12 Синтез (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-3-фтор-2-метилфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида

[0348]

(Стадия 1) Синтез 2-(2-фтор-3-метил-4-нитрофенил)уксусная кислота

[0349]

Согласно (Стадии 1) Примера синтеза 10, 800 мг указанного в заголовке соединения получали в виде желтого твердого вещества при использовании 1,2-дифтор-3-метил-4-нитробензола (560 мг) вместо 1,2-дифтор-4-метил-5-нитробензола.

[0350]

(Стадия 2) Синтез 2-(2-фтор-3-метил-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида

[0351]

Согласно (Стадии 1) Примера синтеза 4, 290 мг указанного в заголовке соединения получали в виде желтого масла при использовании 2-(2-фтор-3-метил-4-нитрофенил)уксусной кислоты (260 мг), полученной в (Стадии 1), вместо 3-метил-4-нитрофенилуксусной кислоты.

[0352]

(Стадия 3) Синтез 2-(4-амино-2-фтор-3-метилфенил)-N,N-диметилацетамида

[0353]

Согласно (Стадии 2) Примера синтеза 6, 230 мг указанного в заголовке соединения получали в виде желтого масла при использовании 2-(2-фтор-3-метил-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида (290 мг), полученного в (Стадии 2), вместо 2-(3-хлор-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида.

[0354]

(Стадия 4) Синтез соединения Примера синтеза 12

[0355]

Согласно (Стадии 3) Примера синтеза 4, 8,2 мг указанного в заголовке соединения получали в виде белого твердого вещества при использовании (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновой кислоты (10 мг) и 2-(4-амино-2-фтор-3-метилфенил)-N,N-диметилацетамида (10 мг), полученного в (Стадии 3).

[0356]

Пример синтеза 13 Синтез (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-2,3-диметилфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида

[0357]

(Стадия 1) Синтез 2-(2,3-диметил-4-нитрофенил)уксусной кислоты

[0358]

Согласно (Стадии 1) Примера синтеза 10, 1,12 г указанного в заголовке соединения получали в виде желтого твердого вещества при использовании 1-фтор-2,3-диметил-4-нитробензола (1,2 г) вместо 1,2-дифтор-4-метил-5-нитробензола.

[0359]

(Стадия 2) Синтез 2-(2,3-диметил-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида

[0360]

Согласно (Стадии 1) Примера синтеза 4, 1,30 г указанного в заголовке соединения получали в виде желтого масла при использовании 2-(2,3-диметил-4-нитрофенил)уксусной кислоты (1,12 г), полученной в (Стадии 1), вместо 3-метил-4-нитрофенилуксусной кислоты.

[0361]

(Стадия 3) Синтез 2-(4-амино-2,3-диметилфенил)-N,N-диметилацетамида

[0362]

Согласно (Стадии 2) Примера синтеза 6, 1,03 г указанного в заголовке соединения получали в виде желтого масла при использовании 2-(2,3-диметил-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида (1,26 г), полученного в (Стадии 2), вместо 2-(3-хлор-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида.

[0363]

(Стадия 4) Синтез соединения Примера синтеза 13

[0364]

Согласно (Стадии 3) Примера синтеза 4, 48 мг указанного в заголовке соединения получали в виде белого твердого вещества при использовании (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновой кислоты (40 мг) и 2-(2,3-диметил-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида (31 мг), полученного в (Стадии 3).

[0365]

Пример синтеза 14 Синтез (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-3-фтор-2-метоксифенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида

[0366]

(Стадия 1) Синтез 2-(2-фтор-3-метокси-4-нитрофенил)уксусной кислоты

[0367]

Согласно (Стадии 1) Примера синтеза 10, 1,10 г указанного в заголовке соединения получали в виде желтого твердого вещества при использовании 1,2-дифтор-3-метокси-4-нитробензола (1,0 г) вместо 1,2-дифтор-4-метил-5-нитробензола.

[0368]

(Стадия 2) Синтез 2-(2-фтор-3-метокси-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида

[0369]

Согласно (Стадии 1) Примера синтеза 4, 120 мг указанного в заголовке соединения получали в виде желтого масла при использовании 2-(2-фтор-3-метокси-4-нитрофенил)уксусной кислоты (100 мг), полученной в (Стадии 1), вместо 3-метил-4-нитрофенилуксусной кислоты.

[0370]

(Стадия 3) Синтез 2-(4-амино-2-фтор-3-метоксифенил)-N,N-диметилацетамида

[0371]

Согласно (Стадии 2) Примера синтеза 6, 100 мг указанного в заголовке соединения получали в виде желтого масла при использовании 2-(2-фтор-3-метокси-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида (120 мг), полученного в (Стадии 2), вместо 2-(3-хлор-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида.

[0372]

(Стадия 4) Синтез соединения Примера синтеза 14

[0373]

Согласно (Стадии 3) Примера синтеза 4, 4,9 мг указанного в заголовке соединения получали в виде желтого твердого вещества при использовании (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновой кислоты (10 мг) и 2-(4-амино-2-фтор-3-метоксифенил)-N,N-диметилацетамида (10 мг), полученного в (Стадии 3).

[0374]

Пример синтеза 15 Синтез (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(2-(дифторметокси)-4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)фенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида

[0375]

(Стадия 1) Синтез 2-(3-(дифторметокси)-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида

[0376]

Согласно (Стадии 1) Примера синтеза 4, 450 мг 2-(3-гидрокси-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида получали в виде желтого масла при использовании 2-(3-гидрокси-4-нитрофенил)уксусной кислоты (420 мг) вместо 3-метил-4-нитрофенилуксусной кислоты. Затем к полученному 2-(3-гидрокси-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамиду (200 мг) добавляли ДМФА (4,5 мл) и карбонат калия (250 мг) и к суспензии добавляли 2-хлор-2,2-дифторацетат натрия (270 мг). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа, а затем добавляли этилацетат и воду с отделением органического слоя. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида аммония, затем сушили над безводным сульфатом натрия и отгоняли растворитель при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле (гексан/этилацетат) с получением 155 мг указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества.

[0377]

(Стадия 2) Синтез 2-(4-амино-3-(дифторметокси)фенил)-N,N-диметилацетамида

[0378]

Согласно (Стадии 2) Примера синтеза 6, 120 мг указанного в заголовке соединения получали в виде желтого масла при использовании 2-(3-(дифторметокси)-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида (155 мг), полученного в (Стадии 1), вместо 2-(3-хлор-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида.

[0379]

(Стадия 3) Синтез соединения Примера синтеза 15

[0380]

Согласно (Стадии 3) Примера синтеза 4, 13,5 мг указанного в заголовке соединения получали в виде желтого твердого вещества при использовании (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновой кислоты (10 мг) и 2-(4-амино-3-(дифторметокси)фенил)-N,N-диметилацетамида (10 мг), полученного в (Стадии 2).

[0381]

Пример синтеза 16 Синтез (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-2-(фторметокси)-фенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида

[0382]

(Стадия 1) Синтез 2-(3-(фторметокси)-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида

[0383]

Согласно (Стадии 1) Примера синтеза 4, 450 мг 2-(3-гидрокси-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида получали в виде желтого масла при использовании 2-(3-гидрокси-4-нитрофенил)уксусной кислоты (420 мг) вместо 3-метил-4-нитрофенилуксусной кислоты. Затем к полученному 2-(3-гидрокси-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамиду (200 мг) добавляли ДМФА (4,5 мл) и карбонат калия (370 мг), и к суспензии добавляли бромфторметан (200 мг). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа, а затем добавляли этилацетат и воду с отделением органического слоя. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида аммония, затем сушили над безводным сульфатом натрия и отгоняли растворитель при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле (гексан/этилацетат) с получением 145 мг указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества.

[0384]

(Стадия 2) Синтез 2-(4-амино-3-(фторметокси)фенил)-N,N-диметилацетамида

[0385]

Согласно (Стадии 2) Примера синтеза 6, 110 мг указанного в заголовке соединения получали в виде желтого масла при использовании 2-(3-(фторметокси)-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида (145 мг), полученного в (Стадии 1), вместо 2-(3-хлор-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида.

[0386]

(Стадия 3) Синтез соединения Примера синтеза 16

[0387]

Согласно (Стадии 3) Примера синтеза 4, 14,5 мг указанного в заголовке соединения получали в виде желтого твердого вещества при использовании (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновой кислоты (10 мг) и 2-(4-амино-3-(фторметокси)фенил)-N,N-диметилацетамида (10 мг), полученного в (Стадии 2).

[0388]

Пример синтеза 17 Синтез (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(2-бром-4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)фенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида

[0389]

(Стадия 1) Синтез 2-(3-бром-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида

[0390]

Согласно (Стадии 1) Примера синтеза 4, 440 мг указанного в заголовке соединения получали в виде желтого масла при использовании 2-(3-бром-4-нитрофенил)уксусной кислоты (430 мг) вместо 3-метил-4-нитрофенилуксусной кислоты.

[0391]

(Стадия 2) Синтез 2-(4-амино-3-бромфенил)-N,N-диметилацетамида

[0392]

Согласно (Стадии 2) Примера синтеза 6, 80 мг указанного в заголовке соединения получали в виде желтого масла при использовании 2-(3-бром-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида (100 мг), полученного в (Стадии 1), вместо 2-(3-хлор-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида.

[0393]

(Стадия 3) Синтез соединения Примера синтеза 17

[0394]

Согласно (Стадии 3) Примера синтеза 4, 2,10 мг указанного в заголовке соединения получали в виде белого твердого вещества при использовании (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновой кислоты (10 мг) и 2-(4-амино-3-бромфенил)-N,N-диметилацетамида (10 мг), полученного в (Стадии 2).

[0395]

Пример синтеза 18 Синтез (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(2-хлор-4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-5-фторфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида

[0396]

(Стадия 1) Синтез 2-(5-хлор-2-фтор-4-нитрофенил)уксусной кислоты

[0397]

Согласно (Стадии 1) Примера синтеза 10, 275 мг указанного в заголовке соединения получали в виде желтого твердого вещества при использовании 1-хлор-4,5-дифтор-2-нитробензола (500 мг) вместо 1,2-дифтор-4-метил-5-нитробензола.

[0398]

(Стадия 2) Синтез 2-(5-хлор-2-фтор-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида

[0399]

Согласно (Стадии 1) Примера синтеза 4, 205 мг указанного в заголовке соединения получали в виде желтого масла при использовании 2-(5-хлор-2-фтор-4-нитрофенил)уксусной кислоты (234 мг), полученной в (Стадии 1), вместо 3-метил-4-нитрофенилуксусной кислоты.

[0400]

(Стадия 3) Синтез 2-(4-амино-5-хлор-2-фторфенил)-N,N-диметилацетамида

[0401]

Согласно (Стадии 2) Примера синтеза 6, 150 мг указанного в заголовке соединения получали в виде желтого твердого вещества при использовании 2-(5-хлор-2-фтор-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида (205 мг), полученного в (Стадии 2), вместо 2-(3-хлор-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида.

[0402]

(Стадия 4) Синтез соединения Примера синтеза 18

[0403]

Согласно (Стадии 3) Примера синтеза 4, (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновую кислоту (10 мг) и 2-(4-амино-5-хлор-2-фторфенил)-N,N-диметилацетамид (20 мг), полученный в (Стадии 3), растворяли при добавлении ДМСО (0,2 мл) и DIPEA (20 мкл). В раствор затем добавляли HATU (50 мг) с получением 2,34 мг указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества.

[0404]

Пример синтеза 19 Синтез (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(5-хлор-4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-2-метилфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида

[0405]

(Стадия 1) Синтез 1-хлор-2-фтор-4-метил-5-нитробензола

[0406]

1-Хлор-2-фтор-4-метилбензол (1,00 г) растворяли в ТФУ (10 мл). Раствор охлаждали до 0°C, и затем по каплям добавляли дымящую азотную кислоту (5,0 мл). Смесь перемешивали при 0°C в течение 30 минут, и затем раствор добавляли к водному раствору бикарбоната натрия и нейтрализовали с последующей экстракцией хлороформом. Экстракт сушили над безводным сульфатом натрия и отгоняли растворитель при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле (гексан/этилацетат) с получением 1,31 г указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества.

[0407]

(Стадия 2) Синтез 2-(2-хлор-5-метил-4-нитрофенил)уксусной кислоты

[0408]

Согласно (Стадии 1) Примера синтеза 1, 440 мг указанного в заголовке соединения получали в виде желтого твердого вещества при использовании 1-хлор-2-фтор-4-метил-5-нитробензола (500 мг), полученного в (Стадии 1) вместо 1-бром-2-фтор-4-метил-5-нитробензола.

[0409]

(Стадия 3) Синтез 2-(2-хлор-5-метил-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида

[0410]

Согласно (Стадии 2) Примера синтеза 1, 149 мг указанного в заголовке соединения получали в виде бледно-желтого твердого вещества при использовании 2-(2-хлор-5-метил-4-нитрофенил)уксусной кислоты (230 мг), полученной в (Стадии 2), вместо 2-(2-бром-5-метил-4-нитрофенил)уксусной кислоты.

[0411]

(Стадия 4) Синтез 2-(4-амино-2-хлор-5-метилфенил)-N,N-диметилацетамида

[0412]

Согласно (Стадии 3) Примера синтеза 1, 170 мг указанного в заголовке соединения получали в виде белого твердого вещества при использовании 2-(2-хлор-5-метил-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида (149 мг), полученного в (Стадии 3), вместо 2-(2-бром-5-метил-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида.

[0413]

(Стадия 5) Синтез соединения Примера синтеза 19

[0414]

Согласно (Стадии 4) Примера синтеза 1, (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновую кислоту (10 мг) и 2-(4-амино-2-хлор-5-метилфенил)-N,N-диметилацетамид (20 мг), полученный в (Стадии 4), растворяли при добавлении ДМСО (0,2 мл) и DIPEA (20 мкл). В раствор затем добавляли HATU (50 мг) с получением 3,39 мг указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества.

[0415]

Пример синтеза 20 Синтез (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(2,5-дихлор-4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)фенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида

[0416]

(Стадия 1) Синтез 1,4-дихлор-2-фтор-5-нитробензола

[0417]

Согласно (Стадии 1) Примера синтеза 19, 1,4-дихлор-2-фторбензол (1,00 г) растворяли вместо 1-хлор-2-фтор-4-метилбензола в ТФУ (10 мл). В раствор по каплям добавляли дымящую азотную кислоту (5,0 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов, и затем раствор добавляли к водному раствору для бикарбоната натрия. Образовавшийся осадок собирали с помощью фильтрования и сушили с получением 1,30 г указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества.

[0418]

(Стадия 2) Синтез 2-(2,5-дихлор-4-нитрофенил)уксусной кислоты

[0419]

Согласно (Стадии 1) Примера синтеза 1, 423 мг указанного в заголовке соединения получали в виде желтого твердого вещества при использовании 1,4-дихлор-2-фтор-5-нитробензола (500 мг), полученного в (Стадии 1), вместо 1-бром-2-фтор-4-метил-5-нитробензола.

[0420]

(Стадия 3) Синтез 2-(2,5-дихлор-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида

[0421]

Согласно (Стадии 2) Примера синтеза 1, 150 мг указанного в заголовке соединения получали в виде бледно-желтого твердого вещества при использовании 2-(2,5-дихлор-4-нитрофенил)уксусной кислоты (250 мг), полученной в (Стадии 2), вместо 2-(2-бром-5-метил-4-нитрофенил)уксусной кислоты.

[0422]

(Стадия 4) Синтез 2-(4-амино-2,5-дихлорфенил)-N,N-диметилацетамида

[0423]

Согласно (Стадии 3) Примера синтеза 1, 160 мг указанного в заголовке соединения получали в виде белого твердого вещества при использовании 2-(2,5-дихлор-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида (150 мг), полученного в (Стадии 3), вместо 2-(2-бром-5-метил-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида.

[0424]

(Стадия 5) Синтез соединения Примера синтеза 20

[0425]

Согласно (Стадии 4) Примера синтеза 1, (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновую кислоту (10 мг) и 2-(4-амино-2,5-дихлорфенил)-N,N-диметилацетамид (20 мг), полученный в (Стадии 4), растворяли при добавлении ДМСО (0,2 мл) и DIPEA (20 мкл). В раствор затем добавляли HATU (50 мг) с получением 0,89 мг указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества.

[0426]

Пример синтеза 21 Синтез (R)-4-(1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамидо)-фенилдиметилкарбамата

[0427]

(Стадия 1) Синтез (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-гидроксифенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида

[0428]

(R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновую кислоту (30 мг), синтезированную в Справочном примере 3, растворяли при добавлении ДМФА (4,5 мл), 4-аминофенола (17 мг) и DIPEA (50 мкл). В раствор затем добавляли HATU (55 мг). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа, а затем добавляли этилацетат и воду с отделением органического слоя. Органический слой сушили над безводным сульфатом натрия и отгоняли растворитель при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле (хлороформ/метанол) с получением 25 мг указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла.

[0429]

(Стадия 2) Синтез соединения Примера синтеза 21

[0430]

К (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-гидроксифенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамиду (10 мг), полученному в (Стадии 1), добавляли карбонат калия (10 мг) и ацетонитрил (250 мкл) с получением суспензии. Затем к суспензии добавляли N,N-диметилкарбамоилхлорид (8 мг). Смесь перемешивали при 60°C в течение 3 часов, а затем добавляли хлороформ и воду с отделением органического слоя. Органический слой сушили над безводным сульфатом натрия и отгоняли растворитель при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью обращенно-фазовой препаративной ВЭЖХ (вода/ацетонитрил (0,1% муравьиной кислоты)) с получением 2,62 мг указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества.

[0431]

Пример синтеза 22 Синтез (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(2-циклопропил-4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)фенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида

[0432]

(Стадия 1) Синтез 2-циклопропил-4-фтор-1-нитробензола

[0433]

2-Бром-4-фтор-1-нитробензол (1,22 г), фосфат калия (4,12 г) и циклопропилбороновую кислоту суспендировали в толуоле (15 мл). К суспензии добавляли воду (0,75 мл), ацетат палладия (0,062 мг) и трициклогексилфосфин (155 мг), нагревали смесь с обратным холодильником в атмосфере азота и перемешивали в течение 4 часов. Смеси позволяли охладиться и затем добавляли воду с последующей экстракцией этилацетатом. Полученный органический слой промывали водой и затем промывали насыщенным солевым раствором. Полученный органический слой сушили с использованием безводного сульфата натрия, фильтровали и выпаривали, а затем остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле с получением указанного в заголовке соединения (895 мг) в виде светло-коричневого масла.

[0434]

(Стадия 2) Синтез 2-(3-циклопропил-4-нитрофенил)уксусной кислоты

[0435]

Указанное в заголовке соединение (845 мг) получали в виде светло-оранжевого твердого вещества таким же способом, как в методе (Стадии 1) Примера синтеза 10, при использовании 2-циклопропил-4-фтор-1-нитробензола (895 мг) вместо 1,2-дифтор-4-метил-5-нитробензола в качестве исходного соединения.

[0436]

(Стадия 3) Синтез 2-(3-циклопропил-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида

[0437]

Согласно (Стадии 1) Примера синтеза 4, указанное в заголовке соединение (445 мг) получали при использовании 2-(3-циклопропил-4-нитрофенил)уксусной кислоты (895 мг) вместо 3-метил-4-нитрофенилуксусной кислоты.

[0438]

(Стадия 4) Синтез 2-(4-амино-3-циклопропилфенил)-N,N-диметилацетамида

[0439]

Согласно (Стадии 2) Примера синтеза 6, указанное в заголовке соединение (225 мг) получали в виде светло-коричневого масла при использовании 2-(3-циклопропил-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида (445 мг) вместо 2-(3-хлор-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида.

[0440]

(Стадия 5) Синтез соединения Примера синтеза 22

[0441]

Согласно (Стадии 4) Примера синтеза 1, (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновую кислоту (50 мг), полученную в Справочном примере 3, и 2-(4-амино-3-циклопропилфенил)-N,N-диметилацетамид (51 мг), полученный в (Стадии 4), растворяли при добавлении ДМФА (1 мл) и DIPEA (0,055 мл). В раствор затем добавляли HATU (90 мг) с получением 52 мг указанного в заголовке соединения в виде бесцветного твердого вещества.

[0442]

Пример синтеза 23 Синтез (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(2-циано-4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)фенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида

[0443]

(Стадия 1) Синтез 2-(4-амино-3-бромфенил)-N,N-диметилацетамида

[0444]

2-(4-Аминофенил)уксусную кислоту (1,03 г) суспендировали в ТГФ (40 мл). Затем к суспензии при комнатной температуре добавляли N-бромсукцинимид (1,27 г) и перемешивали смесь в течение 1 часа. Раствор выпаривали. К остатку добавляли 2,0 М раствор диметиламина в ТГФ (17 мл) и затем при комнатной температуре добавляли HATU (3,89 г). Смесь перемешивали при комнатной температуре. Затем раствор выпаривали, а остаток разбавляли этилацетатом. Раствор в этилацетате промывали водой, затем промывали 1Н водным растворм гидроксида натрия, и после этого промывали насыщенным солевым раствором. Полученный органический слой сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и выпаривали, а остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле (элюент: гексан-этилацетат) с получением указанного в заголовке соединения (1,07 г) в виде бледно-желтого масла.

[0445]

(Стадия 2) Синтез 2-(4-амино-3-цианофенил)-N,N-диметилацетамида

[0446]

2-(4-Амино-3-бромфенил)-N,N-диметилацетамид (1,07 г), полученный в (Стадии 1), растворяли в ДМФА (10 мл). После барботирования азотом в раствор добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладий (481 мг) и цианид цинка (977 мг) и перемешивали смесь при 120°C в течение 16 часов. Смеси позволили охладиться до комнатной температуры, а затем разбавляли этилацетатом. К раствору добавляли 28% водный аммиачный раствор и перемешивали смесь в течение 10 минут. После экстракции этилацетатом экстракт снова промывали 28% водным аммиачным раствором, затем промывали водой и промывали насыщенным солевым раствором. Полученный органический слой сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и выпаривали, а остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле (элюент: гексан-этилацетат) с получением указанного в заголовке соединения (360 мг) в виде бледно-желтого твердого вещества.

[0447]

(Стадия 3) Синтез соединения Примера синтеза 23

[0448]

Согласно (Стадии 4) Примера синтеза 1, (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновую кислоту (50 мг), полученную в Справочном примере 3, и 2-(4-амино-3-цианофенил)-N,N-диметилацетамид (48 мг), полученный в (Стадии 2), растворяли при добавлении ДМФА (1 мл) и DIPEA (0,055 мл). Затем в раствор добавляли HATU (90 мг) с получением 12 мг указанного в заголовке соединения в виде бесцветного твердого вещества.

[0449]

Пример синтеза 24 Синтез (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(5-циано-4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-2-метилфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида

[0450]

(Стадия 1) Синтез 2-(2-циано-5-метил-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида

[0451]

2-(2-Бром-5-метил-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамид (500 мг), полученный в (Стадии 2) Примера синтеза 1, растворяли в ДМФА (5 мл). После барботирования азотом в раствор добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладий (191 мг) и цианид цинка (390 мг) и перемешивали смесь при 120°C в течение 16 часов. Смеси позволили охладиться до комнатной температуры, а затем разбавляли этилацетатом. К раствору добавляли 28% водный аммиачный раствор и перемешивали смесь в течение 10 минут. После экстракции этилацетатом экстракт снова промывали 28% водным аммиачным раствором, затем промывали водой и промывали насыщенным солевым раствором. Полученный органический слой сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и выпаривали, а остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле (элюент: гексан-этилацетат) с получением указанного в заголовке соединения (209 мг) в виде бледно-желтого твердого вещества.

[0452]

(Стадия 2) Синтез 2-(4-амино-2-циано-5-метилфенил)-N,N-диметилацетамида

[0453]

Согласно (Стадии 2) Примера синтеза 4, указанное в заголовке соединение (143 мг) получали в виде бесцветного твердого вещества при использовании 2-(2-циано-5-метил-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида (200 мг) вместо N,N-диметил-2-(3-метил-4-нитрофенил)ацетамида.

[0454]

(Стадия 3) Синтез соединения Примера синтеза 24

[0455]

Согласно (Стадии 4) Примера синтеза 1, (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновую кислоту (50 мг), полученную в Справочном примере 3, и 2-(4-амино-2-циано-5-метилфенил)-N,N-диметилацетамид (51 мг), полученный в (Стадии 2), растворяли при добавлении ДМФА (1 мл) и DIPEA (0,055 мл). Затем в раствор добавляли HATU (90 мг) с получением 57 мг указанного в заголовке соединения в виде почти белого твердого вещества.

[0456]

Пример синтеза 25 Синтез (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-2-фторфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида

[0457]

(Стадия 1) Синтез 2-(4-амино-3-фторфенил)-N,N-диметилацетамида

[0458]

2-(4-Амино-3-фторфенил)уксусную кислоту (400 мг) суспендировали в 2,0 М растворе диметиламина в ТГФ (7 мл). Затем к суспензии при комнатной температуре добавляли WSC (0,58 г) и перемешивали смесь при комнатной температуре в течение 1 часа. К смеси добавляли 2,0 М раствор диметиламина в ТГФ (7 мл), затем добавляли HATU (1,16 г) и перемешивали смесь в течение 30 минут. После выпаривания раствора остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле (элюент: гексан-этилацетат) с получением указанного в заголовке соединения (300 мг) в виде светло-коричневого масла.

[0459]

(Стадия 2) Синтез соединения Примера синтеза 25

[0460]

Согласно (Стадии 4) Примера синтеза 1, (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновую кислоту (50 мг), полученную в Справочном примере 3, и 2-(4-амино-3-фторфенил)-N,N-диметилацетамид (46 мг), полученный в (Стадии 1), растворяли при добавлении ДМФА (1 мл) и DIPEA (0,055 мл). Затем в раствор добавляли HATU (90 мг) с получением 8,1 мг указанного в заголовке соединения в виде бесцветного твердого вещества.

[0461]

Пример синтеза 26 Синтез (R)-4-(1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамидо)-3-метилфенил-диметилкарбамата

[0462]

(Стадия 1) Синтез (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-гидрокси-2-метилфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида

[0463]

(R)-1-(1-Акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновую кислоту (30 мг), синтезированную в Справочном примере 3, растворяли при добавлении ДМФА (4,5 мл), 4-амино-3-метилфенола (17 мг) и DIPEA (50 мкл). Затем в раствор добавляли HATU (55 мг). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа, а затем добавляли этилацетат и воду с отделением органического слоя. Органический слой сушили над безводным сульфатом натрия и отгоняли растворитель при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле (хлороформ/метанол) с получением 25 мг указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла.

[0464]

(Стадия 2) Синтез соединения Примера синтеза 26

[0465]

К (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-гидрокси-2-метилфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамиду (10 мг), полученному в (Стадии 1), добавляли карбонат калия (10 мг) и ацетонитрил (250 мкл) с получением суспензии. Затем к суспензии добавляли N,N-диметилкарбамоилхлорид (8 мг). Смесь перемешивали при 60°C в течение 3 часов, а затем добавляли хлороформ и воду с отделением органического слоя. Органический слой сушили над безводным сульфатом натрия и отгоняли растворитель при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью обращенно-фазовой препаративной ВЭЖХ (вода/ацетонитрил (0,1% муравьиной кислоты)) с получением 2,62 мг указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества.

[0466]

Пример синтеза 27 Синтез (R)-4-(1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамидо)-3-хлорфенил-диметилкарбамата

[0467]

(Стадия 1) Синтез (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(2-хлор-4-гидроксифенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида

[0468]

Согласно (Стадии 1) Примера синтеза 26, 41 мг указанного в заголовке соединения получали в виде белого твердого вещества при использовании (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновой кислоты (30 мг) и 4-амино-3-хлорфенола (25 мг).

[0469]

(Стадия 2) Синтез соединения Примера синтеза 27

[0470]

Согласно (Стадии 2) Примера синтеза 26, 8,1 мг указанного в заголовке соединения получали в виде белого твердого вещества при использовании (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(2-хлор-4-гидроксифенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида (10 мг), полученного в (Стадии 1), вместо (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-гидрокси-2-метилфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида.

[0471]

Пример синтеза 28 Синтез (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)фенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида

[0472]

(Стадия 1) Синтез N,N-диметил-2-(4-нитрофенил)ацетамида

[0473]

Согласно (Стадии 1) Примера синтеза 4, 60 мг указанного в заголовке соединения получали в виде желтого масла при использовании 2-(4-нитрофенил)уксусных кислот (50 мг) вместо 3-метил-4-нитрофенилуксусной кислоты.

[0474]

(Стадия 2) Синтез 2-(4-аминофенил)-N,N-диметилацетамид

[0475]

Согласно (Стадии 2) Примера синтеза 6, 50 мг указанного в заголовке соединения получали в виде желтого масла при использовании N,N-диметил-2-(4-нитрофенил)ацетамида (60 мг), полученного в (Стадии 1), вместо 2-(3-хлор-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида.

[0476]

(Стадия 3) Синтез соединения Примера синтеза 28

[0477]

Согласно (Стадии 3) Примера синтеза 4, 5,22 мг указанного в заголовке соединения получали в виде белого твердого вещества при использовании (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновой кислоты (7,5 мг) и 2-(4-аминофенил)-N,N-диметилацетамида (7,5 мг), полученного в (Стадии 2).

[0478]

Пример синтеза 29 Синтез (R)-4-(1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамидо)-2-хлорфенил-диметилкарбамата

[0479]

(Стадия 1) Синтез 2-хлор-4-нитрофенил-диметилкарбамата

[0480]

К 2-хлор-4-нитрофенолу (100 мг) добавляли карбонат калия (160 мг) и ацетонитрил (3,0 мл), и к суспензии добавляли N,N-диметилкарбамоилхлорид (100 мг). Смесь перемешивали при 60°C в течение 2 часов, а затем добавляли этилацетат и воду с отделением органического слоя. Органический слой сушили над безводным сульфатом натрия и отгоняли растворитель при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле (гексан/этилацетат) с получением 120 мг указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла.

[0481]

(Стадия 2) Синтез 4-амино-2-хлорфенил-диметилкарбамата

[0482]

Согласно (Стадии 2) Примера синтеза 6, 95 мг указанного в заголовке соединения получали в виде желтого масла при использовании 2-хлор-4-нитрофенил-диметилкарбамата (120 мг), полученного в (Стадии 1), вместо 2-(3-хлор-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида.

[0483]

(Стадия 3) Синтез соединения Примера синтеза 29

[0484]

Согласно (Стадии 3) Примера синтеза 4, 4,27 мг указанного в заголовке соединения получали в виде белого твердого вещества при использовании (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновой кислоты (10 мг) и 4-амино-2-хлорфенил-диметилкарбамата (10 мг), полученного в (Стадии 2).

[0485]

Пример синтеза 30 Синтез (R)-4-(1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамидо)-2-метилфенил-диметилкарбамата

[0486]

(Стадия 1) Синтез соединения Примера синтеза 30

[0487]

(R)-1-(1-Акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновую кислоту (10 мг), синтезированную в Справочном примере 3, растворяли при добавлении ДМФА (0,2 мл), 4-амино-2-метилфенола (7 мг) и DIPEA (20 мкл). Затем в раствор добавляли HATU (18 мг). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа, а затем раствор очищали с помощью хроматографии на силикагеле (хлороформ/метанол) с получением 10 мг белого твердого соединения. Затем к полученному соединению (10 мг) добавляли карбонат калия (10 мг) и ацетонитрил (250 мкл) с получением суспензии. Затем к суспензии добавляли N,N-диметилкарбамоилхлорид (12 мг). Смесь перемешивали при 60°C в течение 3 часов, а затем добавляли хлороформ и воду с отделением органического слоя. Органический слой сушили над безводным сульфатом натрия и отгоняли растворитель при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью обращенно-фазовой препаративной ВЭЖХ (вода/ацетонитрил (0,1% муравьиной кислоты)) с получением 3,27 мг указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества.

[0488]

Пример синтеза 31 Синтез (R)-4-(1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамидо)-3-фторфенил-диметилкарбамата

[0489]

(Стадия 1) Синтез соединения Примера синтеза 31

[0940]

Согласно Примеру синтеза 30, 2,47 мг указанного в заголовке соединения получали в виде белого твердого вещества при использовании (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновой кислоты (10 мг) и 4-амино-3-фторфенола (7 мг).

[0491]

Пример синтеза 32 Синтез (R)-4-(1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамидо)-2,3-диметилфенил-диметилкарбамата

[0492]

(Стадия 1) Синтез соединения Примера синтеза 32

[0493]

Согласно Примеру синтеза 30, 2,67 мг указанного в заголовке соединения получали в виде белого твердого вещества при использовании (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновой кислоты (10 мг) и 4-амино-2,3-диметилфенола (7 мг).

[0494]

Пример синтеза 33 Синтез (R)-4-(1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамидо)нафталин-1-ил-диметилкарбамата

[0495]

(Стадия 1) Синтез соединения Примера синтеза 33

[0496]

Согласно Примеру синтеза 30, 2,60 мг указанного в заголовке соединения получали в виде белого твердого вещества при использовании (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновой кислоты (10 мг) и 4-аминонафтола (10 мг).

[0497]

Пример синтеза 34 Синтез (R)-4-(1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамидо)-2-фторфенил-диметилкарбамата

[0498]

(Стадия 1) Синтез соединения Примера синтеза 34

[0499]

Согласно Примеру синтеза 30, 1,92 мг указанного в заголовке соединения получали в виде белого твердого вещества при использовании (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновой кислоты (10 мг) и 4-амино-2-фторфенола (7 мг).

[0500]

Пример синтеза 35 Синтез (R)-4-(1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамидо)-2,3-дифторфенил-диметилкарбамата

[0501]

(Стадия 1) Синтез соединения Примера синтеза 35

[0502]

Согласно Примеру синтеза 30, 1,10 мг указанного в заголовке соединения получали в виде белого твердого вещества при использовании (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновой кислоты (10 мг) и 4-амино-2,3-дифторфенола (7 мг).

[0503]

Пример синтеза 36 Синтез (R)-4-(1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамидо)-3-метоксифенил-диметилкарбамата

[0504]

(Стадия 1) Синтез соединения Примера синтеза 36

[0505]

Согласно Примеру синтеза 30, 10,8 мг указанного в заголовке соединения получали в виде белого твердого вещества при использовании (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновой кислоты (25 мг) и 4-амино-3-метоксифенола (17 мг).

[0506]

Пример синтеза 37 Синтез (R)-8-(1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамидо)хинолин-5-ил-диметилкарбамата

[0507]

(Стадия 1) Синтез 8-нитрохинолин-5-илдиметилкарбамата

[0508]

К 8-нитрохинолин-5-олу (100 мг) добавляли карбонат калия (220 мг) и ацетонитрил (2,6 мл), и к суспензии добавляли N,N-диметилкарбамоилхлорид (113 мг). Смесь перемешивали при 60°C в течение 2 часов, а затем добавляли этилацетат и воду с отделением органического слоя. Органический слой сушили над безводным сульфатом натрия и отгоняли растворитель при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле (гексан/этилацетат) с получением 110 мг указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества.

[0509]

(Стадия 2) Синтез 8 аминохинолин-5-илдиметилкарбамата

[0510]

Согласно (Стадии 2) Примера синтеза 6, 90 мг указанного в заголовке соединения получали в виде желтого масла при использовании 8-нитрохинолин-5-илдиметилкарбамата (110 мг), полученного в (Стадии 1), вместо 2-(3-хлор-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида.

[0511]

(Стадия 3) Синтез соединения Примера синтеза 37

[0512]

Согласно (Стадии 3) Примера синтеза 4, 5,37 мг указанного в заголовке соединения получали в виде белого твердого вещества при использовании (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновой кислоты (10 мг) и 8-аминохинолин-5-илдиметилкарбамата (10 мг), полученного в (Стадии 2).

[0513]

Пример синтеза 38 Синтез (R)-4-(1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамидо)-2,5-диметилфенил-диметилкарбамата

[0514]

(Стадия 1) Синтез соединения Примера синтеза 38

[0515]

Согласно Примеру синтеза 30, 8,01 мг указанного в заголовке соединения получали в виде белого твердого вещества при использовании (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновой кислоты (10 мг) и 4-амино-2,5-диметилфенола (10 мг).

[0516]

Пример синтеза 39 Синтез (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-2,5-диметилфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида

[0517]

(Стадия 1) Синтез 2-(2,5-диметил-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида

[0518]

Согласно (Стадии 1) Примера синтеза 4, 110 мг указанного в заголовке соединения получали в виде желтого масла при использовании 2-(2,5-диметил-4-нитрофенил)уксусной кислоты (100 мг) вместо 3-метил-4-нитрофенилуксусной кислоты.

[0519]

(Стадия 2) Синтез 2-(4-амино-2,5-диметилфенил)-N,N-диметилацетамида

[0520]

Согласно (Стадии 2) Примера синтеза 6, 90 мг указанного в заголовке соединения получали в виде желтого масла при использовании 2-(2,5-диметил-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида (110 мг), полученного в (Стадии 1), вместо 2-(3-хлор-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида.

[0521]

(Стадия 3) Синтез соединения Примера синтеза 39

[0522]

Согласно (Стадии 3) Примера синтеза 4, 4,50 мг указанного в заголовке соединения получали в виде белого твердого вещества при использовании (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновой кислоты (10 мг) и 2-(4-амино-2,5-диметилфенил)-N,N-диметилацетамида (10 мг), полученного в (Стадии 2).

[0523]

Пример синтеза 40 Синтез (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-3-метоксифенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида

[0524]

(Стадия 1) Синтез 2-(2-метокси-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида

[0525]

Согласно методу синтеза, описанному в European Journal of Medicinal Chemistry, 46 (1), 285-296; 2010, 250 мг указанного в заголовке соединения получали в виде желтого масла при использовании 2-метокси-4-нитробензальдегида (300 мг) вместо 4-нитробензальдегида.

[0526]

(Стадия 2) Синтез 2-(4-амино-2-метоксифенил)-N,N-диметилацетамида

[0527]

Согласно (Стадии 2) Примера синтеза 6, 185 мг указанного в заголовке соединения получали в виде желтого масла при использовании 2-(2-метокси-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида (250 мг), полученного в (Стадии 1), вместо 2-(3-хлор-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида.

[0528]

(Стадия 3) Синтез соединения Примера синтеза 40

[0529]

Согласно (Стадии 3) Примера синтеза 4, 8,22 мг указанного в заголовке соединения получали в виде белого твердого вещества при использовании (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновой кислоты (10 мг) и 2-(4-амино-2-метоксифенил)-N,N-диметилацетамида (10 мг), полученного в (Стадии 2).

[0530]

Пример синтеза 41 Синтез (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)хинолин-8-ил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида

[0531]

(Стадия 1) Синтез N,N-диметил-2-(8-нитрохинолин-5-ил)ацетамида

[0532]

Согласно (Стадии 1) Примера синтеза 5, 150 мг указанного в заголовке соединения получали в виде желтого твердого вещества при использовании 2-(хинолин-5-ил)уксусной кислоты (220 мг) вместо 1-нафтилуксусной кислоты.

[0533]

(Стадия 2) Синтез 2-(8-аминохинолин-5-ил)-N,N-диметилацетамида

[0534]

Согласно (Стадии 2) Примера синтеза 6, 110 мг указанного в заголовке соединения получали в виде желтого масла при использовании N,N-диметил-2-(8-нитрохинолин-5-ил)ацетамида (150 мг), полученного в (Стадии 1), вместо 2-(3-хлор-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида.

[0535]

(Стадия 3) Синтез соединения Примера синтеза 41

[0536]

Согласно (Стадии 3) Примера синтеза 4, 12,8 мг указанного в заголовке соединения получали в виде белого твердого вещества при использовании (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновой кислоты (10 мг) и 2-(8-аминохинолин-5-ил)-N,N-диметилацетамида (10 мг), полученного в (Стадии 2).

[0537]

Пример синтеза 42 Синтез (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-3-фторфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида

[0538]

(Стадия 1) Синтез 2-(2-фтор-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида

[0539]

Согласно методу синтеза, описанному в European Journal of Medicinal Chemistry, 46 (1), 285-296; 2010, 420 мг указанного в заголовке соединения получали в виде желтого масла при использовании 2-фтор-4-нитробензальдегида (550 мг) вместо 4-нитробензальдегида.

[0540]

(Стадия 2) Синтез 2-(4-амино-2-фторфенил)-N,N-диметилацетамида

[0541]

Согласно (Стадии 2) Примера синтеза 6, 320 мг указанного в заголовке соединения получали в виде желтого масла при использовании 2-(2-фтор-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида (420 мг), полученного в (Стадии 1), вместо 2-(3-хлор-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида.

[0542]

(Стадия 3) Синтез соединения Примера синтеза 42

[0543]

Согласно (Стадии 3) Примера синтеза 4, 8,3 мг указанного в заголовке соединения получали в виде белого твердого вещества при использовании (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновой кислоты (10 мг) и 2-(4-амино-2-фторфенил)-N,N-диметилацетамида (10 мг), полученного в (Стадии 2).

[0544]

Пример синтеза 43 Синтез (R)-4-(1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамидо)-2,6-дифторфенил-диметилкарбамата

[0545]

(Стадия 1) Синтез 2,6-дифтор-4-нитрофенил-диметилкарбамата

[0546]

Согласно (Стадии 1) Примера синтеза 29, 260 мг указанного в заголовке соединения получали в виде желтого масла при использовании 2,6-дифтор-4-нитрофенола (200 мг) вместо 2-хлор-4-нитрофенола.

[0547]

(Стадия 2) Синтез 4-амино-2,6-дифторфенил-диметилкарбамата

[0548]

Согласно (Стадии 2) Примера синтеза 6, 220 мг указанного в заголовке соединения получали в виде желтого масла при использовании 2,6-дифтор-4-нитрофенил-диметилкарбамата (260 мг), полученного в (Стадии 1), вместо 2-(3-хлор-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида.

[0549]

(Стадия 3) Синтез соединения Примера синтеза 43

[0550]

Согласно (Стадии 3) Примера синтеза 4, 7,47 мг указанного в заголовке соединения получали в виде коричневого твердого вещества при использовании (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновой кислоты (10 мг) и 4-амино-2,6-дифторфенил-диметилкарбамата (10 мг), полученного в (Стадии 2).

[0551]

Пример синтеза 44 Синтез (R)-4-(1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамидо)-3,5-диметилфенил-диметилкарбамата

(Стадия 1) Синтез (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-гидрокси-2,6-диметилфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида

[0552]

Согласно (Стадии 1) Примера синтеза 26, 30 мг указанного в заголовке соединения получали в виде белого твердого вещества при использовании (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновой кислоты (30 мг) и 4-амино-3,5-диметилфенола (25 мг).

[0553]

(Стадия 2) Синтез соединения Примера синтеза 44

[0554]

Согласно (Стадии 2) Примера синтеза 26, 12 мг указанного в заголовке соединения получали в виде белого твердого вещества при использовании (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-гидрокси-2,6-диметилфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида (10 мг), полученного в (Стадии 1), вместо (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-гидрокси-2-метилфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида.

[0555]

Пример синтеза 45 Синтез (R)-4-(1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамидо)-2,6-дихлорфенил-диметилкарбамата

[0556]

(Стадия 1) Синтез (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(3,5-дихлор-4-гидроксифенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида

[0557]

Согласно (Стадии 1) Примера синтеза 26, 20 мг указанного в заголовке соединения получали в виде белого твердого вещества при использовании (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновой кислоты (30 мг) и 4-амино-2,6-дихлорфенола (25 мг).

[0558]

(Стадия 2) Синтез соединения Примера синтеза 45

[0559]

Согласно (Стадии 2) Примера синтеза 26, 7,5 мг указанного в заголовке соединения получали в виде белого твердого вещества при использовании (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(3,5-дихлор-4-гидроксифенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида (10 мг), полученного в (Стадии 1), вместо (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-гидрокси-2-метилфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида.

[0560]

Пример синтеза 46 Синтез (R)-4-(1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамидо)-2,6-диметилфенил-диметилкарбамата

[0561]

(Стадия 1) Синтез 2,6-диметил-4-нитрофенил-диметилкарбамата

[0562]

Согласно (Стадии 1) Примера синтеза 29, 260 мг указанного в заголовке соединения получали в виде желтого масла при использовании 2,6-диметил-4-нитрофенола (200 мг) вместо 2-хлор-4-нитрофенола.

[0563]

(Стадия 2) Синтез 4-амино-2,6-диметилфенил-диметилкарбамата

[0564]

Согласно (Стадии 2) Примера синтеза 6, 210 мг указанного в заголовке соединения получали в виде желтого масла при использовании 2,6-диметил-4-нитрофенил-диметилкарбамата (260 мг), полученного в (Стадии 1), вместо 2-(3-хлор-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида.

[0565]

(Стадия 3) Синтез соединения Примера синтеза 46

[0566]

Согласно (Стадии 3) Примера синтеза 4, 13,2 мг указанного в заголовке соединения получали в виде белого твердого вещества при использовании (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновой кислоты (10 мг) и 4-амино-2,6-диметилфенил-диметилкарбамата (10 мг), полученного в (Стадии 2).

[0567]

Пример синтеза 47 Синтез (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(2-(диметиламино)-4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-фенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида

[0568]

(Стадия 1) Синтез 2-(3-фтор-4-нитрофенил)-N,N-диметил-2-ацетамида

[0569]

Согласно методу синтеза, описанному в European Journal of Medicinal Chemistry, 46 (1), 285-296; 2010, 300 мг указанного в заголовке соединения получали в виде желтого масла при использовании 3-фтор-4-нитробензальдегида (500 мг) вместо 4-нитробензальдегида.

[0570]

(Стадия 2) Синтез 2-(4-амино-3-фторфенил)-N,N-диметилацетамида

[0571]

Согласно (Стадии 2) Примера синтеза 6, 240 мг указанного в заголовке соединения получали в виде желтого масла при использовании 2-(3 фтор-4-нитрофенил)-N,N-диметил-2-ацетамида (300 мг), полученного в (Стадии 1), вместо 2-(3-хлор-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида.

[0572]

(Стадия 3) Синтез соединения Примера синтеза 47

[0573]

Согласно (Стадии 3) Примера синтеза 4, 10,2 мг указанного в заголовке соединения получали в виде белого твердого вещества при использовании (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновой кислоты (10 мг) и 2-(4-амино-3-фторфенил)-N,N-диметилацетамида (10 мг), полученного в (Стадии 2).

[0574]

Пример синтеза 48 Синтез (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-2-винилфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида

[0575]

(Стадия 1) Синтез N,N-диметил-2-(4-нитро-3-винилфенил)-ацетамида

[0576]

К 2-(3-бром-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамиду (330 мг), полученному в (Стадии 1) Примера синтеза 17, добавляли винилтрифторборат калия (330 мг), комплекс Pd-dppf (93 мг), DME (5,7 мл) и 2 М водный раствор карбоната натрия (2,9 мл). Смесь перемешивали при 80°C в течение 12 часов, а затем добавляли этилацетат и воду с отделением органического слоя. Органический слой сушили над безводным сульфатом натрия и отгоняли растворитель при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле (гексан/этилацетат) с получением 270 мг указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества.

[0577]

(Стадия 2) Синтез 2-(4-амино-3-винилфенил)-N,N-диметилацетамида

[0578]

Согласно (Стадии 2) Примера синтеза 6, 80 мг указанного в заголовке соединения получали в виде желтого масла при использовании N,N-диметил-2-(4-нитро-3-винилфенил)ацетамида (100 мг), полученного в (Стадии 1), вместо 2-(3-хлор-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида.

[0579]

(Стадия 3) Синтез соединения Примера синтеза 48

[0580]

Согласно (Стадии 3) Примера синтеза 4, 8,16 мг указанного в заголовке соединения получали в виде зеленого твердого вещества при использовании (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновой кислоты (10 мг) и 2-(4-амино-3-винилфенил)-N,N-диметилацетамида (10 мг), полученного в (Стадии 2).

[0581]

Пример синтеза 49 Синтез (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-2-этилфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида

[0582]

(Стадия 1) Синтез 2-(4-амино-3-этилфенил)-N,N-диметилацетамида

[0583]

Согласно (Стадии 2) Примера синтеза 4, 80 мг указанного в заголовке соединения получали в виде желтого масла при использовании N,N-диметил-2-(4-нитро-3-винилфенил)ацетамида (100 мг), полученного в (Стадии 1) Примера синтеза 48, вместо 2-(3-метил-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида.

[0584]

(Стадия 2) Синтез соединения Примера синтеза 49

[0585]

Согласно (Стадии 3) Примера синтеза 4, 11,0 мг указанного в заголовке соединения получали в виде желтого твердого вещества при использовании (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновой кислоты (10 мг) и 2-(4-амино-3-этилфенил)-N,N-диметилацетамида (10 мг), полученного в (Стадии 1).

[0586]

Пример синтеза 50 Синтез (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(2-хлор-4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-3-фторфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида

[0587]

(Стадия 1) Синтез 2-(3-хлор-2-фтор-4-нитрофенил)уксусной кислоты

[0588]

К диэтилмалонату (621 мг) при комнатной температуре добавляли NMP (5,0 мл), гидрид натрия (248 мг) и 2-хлор-3,4-дифтор-1-нитробензол (500 мг) в этом порядке. Раствор нагревали до 100°C, перемешивали в течение 10 минут, а затем охлаждали до комнатной температуры и добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор хлорида аммония с отделением органического слоя. Органический слой промывали водой и насыщенным солевым раствором, а затем сушили над безводным сульфатом натрия и отгоняли растворитель при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле (гексан/этилацетат) с получением 1,00 г желтого масла. Затем к полученному маслу добавляли метанол (5,0 мл) и 5 М водный раствор гидроксида натрия (2,5 мл) и нагревали смесь до 70°C и перемешивали в течение 1,5 часов. Раствор охлаждали до комнатной температуры, отгоняли растворитель при пониженном давлении и к остатку добавляли 5 М водный раствор соляной кислоты. Образовавшийся осадок собирали с помощью фильтрования и сушили с получением 366 мг указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества.

[0589]

(Стадия 2) Синтез 2-(3-хлор-2-фтор-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида

[0590]

2-(3-Хлор-2-фтор-4-нитрофенил)уксусную кислоту (366 мг), полученную в (Стадии 1), растворяли при добавлении ДМФА (7,85 мл), DIPEA (3,14 мл) и 2,0 М раствора диметиламина в ТГФ (3,14 мл). Затем в раствор добавляли HATU (895 мг). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа, а затем добавляли этилацетат и воду с отделением органического слоя. Органический слой промывали водой и насыщенным солевым раствором, а затем сушили над безводным сульфатом натрия и отгоняли растворитель при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле (гексан/этилацетат) с получением 366 мг указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества.

[0591]

(Стадия 3) Синтез 2-(4-амино-3-хлор-2-фторфенил)-N,N-диметилацетамида

[0592]

К 2-(3-хлор-2-фтор-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамиду (150 мг), полученному в (Стадии 2), добавляли ТГФ (1,5 мл) и воду (1,5 мл), а затем добавляли хлорид аммония (150 мг) и порошок железа (150 мг). Раствор нагревали до 70°C, перемешивали в течение 2 часов, затем охлаждали до комнатной температуры и фильтровали через целит для удаления железа. Растворитель в фильтрате отгоняли при пониженном давлении и очищали полученный остаток с помощью хроматографии на силикагеле (ацетат/метанол этила) с получением 120 мг указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества.

[0593]

(Стадия 4) Синтез соединения Примера синтеза 50

[0594]

(R)-1-(1-Акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновую кислоту (10 мг), полученную в Справочном примере 3, и 2-(4-амино-3-хлор-2-фторфенил)-N,N-диметилацетамид (30 мг), полученный в (Стадии 3), растворяли при добавлении ДМСО (0,2 мл) и DIPEA (10 мкл). Затем в раствор добавляли HATU (50 мг). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Затем добавляли ДМСО (1 мл) и очищали смесь с помощью обращенно-фазовой препаративной ВЭЖХ (вода/ацетонитрил (0,1% муравьиной кислоты)) с получением 6,7 мг указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества.

[0595]

Пример синтеза 51 Синтез (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-2-(фуран-2-ил)фенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида

[0596]

(Стадия 1) Синтез 2-(3-(фуран-2-ил)-4-нитрофенил)N,N-диметил-ацетамида

[0597]

К 2-(3-бром-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамиду (50 мг) полученному в (Стадии 1) Примера синтеза 17, добавляли 2-фурилбороновую кислоту (30 мг), комплекс Pd-dppf (14 мг), DME (0,9 мл) и 2 М водный раствор карбоната натрия (0,45 мл). Смесь перемешивали при 80°C в течение 12 часов, а затем добавляли этилацетат и воду с отделением органического слоя. Органический слой сушили над безводным сульфатом натрия и отгоняли растворитель при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле (гексан/этилацетат) с получением 45 мг указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества.

[0598]

(Стадия 2) Синтез 2-(4-амино-3-(фуран-2-ил)фенил)-N,N-диметилацетамида

[05999]

Согласно (Стадии 2) Примера синтеза 6, 30 мг указанного в заголовке соединения получали в виде желтого масла при использовании 2-(3-(фуран-2-ил)-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида (45 мг), полученного в (Стадии 1), вместо 2-(3-хлор-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида.

[0600]

(Стадия 3) Синтез соединения Примера синтеза 51

[0601]

Согласно (Стадии 3) Примера синтеза 4, 8,09 мг указанного в заголовке соединения получали в виде коричневого твердого вещества при использовании (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновой кислоты (10 мг) и 2-(4-амино-3-(фуран-2-ил)фенил)-N,N-диметилацетамида (10 мг), полученного в (Стадии 2).

[0602]

Пример синтеза 52 Синтез (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-2-(фуран-3-ил)фенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида

[0603]

(Стадия 1) Синтез 2-(3-(фуран-3-ил)-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида

[0604]

Согласно (Стадии 1) Примера синтеза 51, 45 мг указанного в заголовке соединения получали в виде желтого масла при использовании 3-фурилбороновой кислоты (30 мг) вместо 2-фурилбороновой кислоты.

[0605]

(Стадия 2) Синтез 2-(4-амино-3-(фуран-3-ил)фенил)-N,N-диметилацетамида

[0606]

Согласно (Стадии 2) Примера синтеза 6, 30 мг указанного в заголовке соединения получали в виде желтого масла при использовании 2-(3-(фуран-3-ил)-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида (45 мг), полученного в (Стадии 1), вместо 2-(3-хлор-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида.

[0607]

(Стадия 3) Синтез соединения Примера синтеза 52

[0608]

Согласно (Стадии 3) Примера синтеза 4, 4,23 мг указанного в заголовке соединения получали в виде белого твердого вещества при использовании (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновой кислоты (10 мг) и 2-(4-амино-3-(фуран-3-ил)фенил)-N,N-диметилацетамида (10 мг), полученного в (Стадии 2).

[0609]

Пример синтеза 53 Синтез (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(7-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)бензо[d][1,3]диоксол-4-ил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида

[0610]

(Стадия 1) Синтез N,N-диметил-2-(7-нитробензо[d][1,3]диоксол-4-ил)ацетамида

[0611]

К 7-нитробензо[d][1,3]диоксол-4-карбальдегиду (180 мг) добавляли дихлорметан (4,6 мл), тетрабромид углерода (1,06 г) и трифенилфосфин (1,55 г) и перемешивали смесь при комнатной температуре. Затем растворитель удаляли с помощью испарителя. Остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле (гексан/этилацетат) с получением желтого масла. Затем к полученному маслу добавляли 50% водный раствор диметиламина (5,0 мл), нагревали смесь до 50°C и перемешивали в течение ночи.

После охлаждения раствора до комнатной температуры добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор хлорида аммония с отделением органического слоя. Органический слой промывали водой и насыщенным солевым раствором, а затем сушили над безводным сульфатом натрия и отгоняли растворитель при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле (гексан/этилацетат) с получением 120 мг указанного в заголовке соединения в виде желтого масла.

[0612]

(Стадия 2) Синтез 2-(7-аминобензо[d][1,3]диоксол-4-ил)-N,N-диметилацетамида

[0613]

Согласно (Стадии 3) Примера синтеза 1, 100 мг указанного в заголовке соединения получали в виде желтого масла при использовании N,N-диметил-2-(7-нитробензо[d][1,3]диоксол-4-ил)ацетамида (120 мг), полученного в (Стадии 1), вместо 2-(2-бром-5-метил-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида.

[0614]

(Стадия 3) Синтез соединения Примера синтеза 53

[0615]

Согласно (Стадии 4) Примера синтеза 1, (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновую кислоту (10 мг) и 2-(7-аминобензо[d][1,3]диоксол-4-ил)-N,N-диметилацетамид (20 мг), полученный в (Стадии 2), растворяли при добавлении ДМСО (0,2 мл) и DIPEA (20 мкл). Затем в раствор добавляли HATU (50 мг) с получением 6,38 мг указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества.

[0616]

Пример синтеза 54 Синтез (R)-1-(1-акрилоилпирролидин-3-ил)-4-амино-N-(2-хлор-4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)фенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида

[0617]

(Стадия 1) Синтез соединения Примера синтеза 54

[0618]

(R)-1-(1-Акрилоилпирролидин-3-ил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновую кислоту (10 мг), синтезированную в Справочном примере 5, растворяли при добавлении 2-(4-амино-3-хлорфенил)-N,N-диметилацетамида (10 мг), полученного в (Стадии 2) Примера синтеза 6, ДМФА (0,2 мл) и DIPEA (20 мкл). Затем в раствор добавляли HATU (18 мг). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Затем добавляли ДМСО (1 мл) и очищали смесь с помощью обращенно-фазовой препаративной ВЭЖХ (вода/ацетонитрил (0,1% муравьиной кислоты)) с получением 2,8 мг указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества.

[0619]

Пример синтеза 55 Синтез (R)-1-(1-акрилоилпирролидин-3-ил)-4-амино-N-(3-хлор-4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-2-метоксифенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида

[0620]

(Стадия 1) Синтез соединения Примера синтеза 55

[0621]

Согласно (Стадии 1) Примера синтеза 54, 3,33 мг указанного в заголовке соединения получали в виде белого твердого вещества при использовании (R)-1-(1-акрилоилпирролидин-3-ил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновой кислоты (5 мг) и 2-(4-амино-2-хлор-3-метоксифенил)-N,N-диметилацетамида (5 мг), синтезированного в (Стадии 3) Примера синтеза 11.

[0622]

Пример синтеза 56 Синтез (R)-1-(1-акрилоилпирролидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-3-фтор-2-метилфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида

[0623]

(Стадия 1) Синтез соединения Примера синтеза 56

[0624]

Согласно (Стадии 1) Примера синтеза 54, 2,19 мг указанного в заголовке соединения получали в виде белого твердого вещества при использовании (R)-1-(1-акрилоилпирролидин-3-ил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновой кислоты (5 мг) и 2-(4-амино-2-фтор-3-метилфенил)-N,N-диметилацетамида (5 мг), синтезированного в (Стадии 3) Примера синтеза 12.

[0625]

Пример синтеза 57 Синтез (R)-1-(1-акрилоилпирролидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-3-фтор-2-метоксифенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида

[0626]

(Стадия 1) Синтез соединения Примера синтеза 57

[0627]

Согласно (Стадии 1) Примера синтеза 54, 4,25 мг указанного в заголовке соединения получали в виде коричневого твердого вещества при использовании (R)-1-(1-акрилоилпирролидин-3-ил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновой кислоты (5 мг) и 2-(4-амино-2-фтор-3-метоксифенил)-N,N-диметилацетамида (5 мг), синтезированного в (Стадии 3) Примера синтеза 14.

[0628]

Пример синтеза 58 Синтез (R)-4-(1-(1-акрилоилпирролидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамидо)нафталин-1-ил-диметилкарбамата

[0629]

(Стадия 1) Синтез 4-нитронафталин-1-ил-диметилкарбамата

[0630]

Согласно (Стадии 1) Примера синтеза 29, указанное в заголовке соединение получали в виде желтого твердого вещества при использовании 4-нитронафтола вместо 2-хлор-4-нитрофенола.

[0631]

(Стадия 2) Синтез 4-аминонафталин-1-ил-диметилкарбамата

[0632]

Согласно (Стадии 2) Примера синтеза 6, указанное в заголовке соединение получали в виде желтого масла при использовании 4-нитронафталин-1-ил-диметилкарбамата, полученного в (Стадии 1), вместо 2-(3-хлор-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида.

[0633]

(Стадия 3) Синтез соединения Примера синтеза 58

[0634]

Согласно (Стадии 1) Примера синтеза 54, 3,59 мг указанного в заголовке соединения получали в виде белого твердого вещества при использовании (R)-1-(1-акрилоилпирролидин-3-ил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновой кислоты (7 мг) и 4-аминонафталин-1-ил-диметилкарбамата (7 мг), синтезированного в (Стадии 2) Примера синтеза 58.

[0635]

Пример синтеза 59 Синтез (R)-1-(1-акрилоилпирролидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-2,3-диметилфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида

[0636]

(Стадия 1) Синтез соединения Примера синтеза 59

[0637]

Согласно (Стадии 1) Примера синтеза 54, 1,23 мг указанного в заголовке соединения получали в виде белого твердого вещества при использовании (R)-1-(1-акрилоилпирролидин-3-ил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновой кислоты (5 мг) и 2-(4-амино-2,3-диметилфенил)-N,N-диметилацетамида (5 мг), синтезированного в (Стадии 3) Примера синтеза 13.

[0638]

Пример синтеза 60 Синтез (R)-1-(1-акрилоилпирролидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-2-винилфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида

[0639]

(Стадия 1) Синтез соединения Примера синтеза 60

[0640]

Согласно (Стадии 1) Примера синтеза 54, 2,82 мг указанного в заголовке соединения получали в виде коричневого твердого вещества при использовании (R)-1-(1-акрилоилпирролидин-3-ил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновой кислоты (5 мг) и 2-(4-амино-3-винилфенил)-N,N-диметилацетамида (5 мг), синтезированного в (Стадии 2) Примера синтеза 48.

[0641]

Пример синтеза 61 Синтез (R)-1-(1-акрилоилпирролидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)нафталин-1-ил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида

[0642]

(Стадия 1) Синтез соединения Примера синтеза 61

[0643]

Согласно (Стадии 1) Примера синтеза 54, 5,3 мг указанного в заголовке соединения получали в виде желтого твердого вещества при использовании (R)-1-(1-акрилоилпирролидин-3-ил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновой кислоты (5 мг) и 2-(4 аминонафталин 1-ил)-N,N-диметилацетамида (5 мг), синтезированного в (Стадии 2) Примера синтеза 5.

[0644]

Пример синтеза 62 Синтез (R)-1-(1-акрилоилпирролидин-3-ил)-4-амино-N-(2-бром-4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)фенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида

[0645]

(Стадия 1) Синтез соединения Примера синтеза 62

[0646]

Согласно (Стадии 1) Примера синтеза 54, 0,90 мг указанного в заголовке соединения получали в виде коричневого твердого вещества при использовании (R)-1-(1-акрилоилпирролидин-3-ил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновой кислоты (5 мг) и 2-(4-амино-3-бромфенил)-N,N-диметилацетамида (5 мг), синтезированного в (Стадии 2) Примера синтеза 17.

[0647]

Пример синтеза 63 Синтез (R)-4-(1-(1-акрилоилпирролидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамидо)-3-метилфенил-диметилкарбамата

[0648]

(Стадия 1) Синтез (R)-1-(1-акрилоилпирролидин-3-ил)-4-амино-N-(4-гидрокси-2-метилфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида

[0649]

(R)-1-(1-акрилоилпирролидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновую кислоту (10 мг), синтезированную в Справочном примере 5, растворяли при добавлении ДМФА (0,2 мл), 4-амино-3-метилфенола (5,8 мг) и DIPEA (20 мкл). Затем в раствор добавляли HATU (17 мг). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа, а затем добавляли этилацетат и воду с отделением органического слоя. Органический слой сушили над безводным сульфатом натрия и отгоняли растворитель при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле (хлороформ/метанол) с получением 13 мг указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла.

[0650]

(Стадия 2) Синтез соединения Примера синтеза 63

[0651]

К (R)-1-(1-акрилоилпирролидин-3-ил)-4-амино-N-(4-гидрокси-2-метилфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамиду (13 мг), полученному в (Стадии 1), добавляли карбонат калия (10 мг) и ацетонитрил (250 мкл) с получением суспензии. Затем к суспензии добавляли N,N-диметилкарбамоилхлорид (8 мг). Смесь перемешивали при 60°C в течение 3 часов, а затем добавляли хлороформ и воду с отделением органического слоя. Органический слой сушили над безводным сульфатом натрия и отгоняли растворитель при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью обращенно-фазовой препаративной ВЭЖХ (вода/ацетонитрил (0,1% муравьиной кислоты)) с получением 6,10 мг указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества.

[0652]

Пример синтеза 64 Синтез (R)-4-(1-(1-акрилоилпирролидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамидо)-2,3-диметилфенил-диметилкарбамата

[0653]

(Стадия 1) Синтез (R)-1-(1-акрилоилпирролидин-3-ил)-4-амино-N-(4-гидрокси-2,3-диметилфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида

[0654]

Согласно (Стадии 1) Примера синтеза 63, 10 мг указанного в заголовке соединения получали в виде белого твердого вещества при использовании 4-амино-2,3-диметилфенола вместо 4-амино-3 метилфенола.

[0655]

(Стадия 2) Синтез соединения Примера синтеза 64

[0656]

Согласно (Стадии 2) Примера синтеза 63, 6,70 мг указанного в заголовке соединения получали в виде белого твердого вещества при использовании (R)-1-(1-акрилоилпирролидин-3-ил)-4-амино-N-(4-гидрокси-2,3-диметилфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида (10 мг), полученного в (Стадии 1), вместо (R)-1-(1-акрилоилпирролидин-3-ил)-4-амино-N-(4-гидрокси-2-метилфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида.

[0657]

Пример синтеза 65 Синтез (R)-1-(1-акрилоилпирролидин-3-ил)-4-амино-N-(2-хлор-4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-3-фторфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида

[0605]

(Стадия 1) Синтез соединения Примера синтеза 65

[0659]

(R)-1-(1-акрилоилпирролидин-3-ил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновую кислоту (5,0 мг), полученную в Справочном примере 5, и 2-(4-амино-3-хлор-2-фторфенил)-N,N-диметилацетамид (10 мг), полученный в (Стадии 3) Примера синтеза 50, растворяли при добавлении ДМСО (0,1 мл) и DIPEA (5 мкл). Затем в раствор добавляли HATU (25 мг). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Затем добавляли ДМСО (1 мл) и очищали смесь с помощью обращенно-фазовой препаративной ВЭЖХ (вода/ацетонитрил (0,1% муравьиной кислоты)) с получением 3,41 мг указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества.

[0660]

Пример синтеза 66 Синтез (R,E)-4-(4-амино-1-(1-(4-диметиламино)бут-2-еноил)пиперидин-3-ил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамидо)нафталин-1-ил-диметилкарбамата

[0661]

(Стадия 1) Синтез (R)-трет-бутил-3-(4-амино-3-((4-((диметилкарбамоил)окси)нафталин-1-ил)карбамоил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)пиперидин-1-карбоксилата

[0662]

(R)-4-Амино-1-(1-(трет-бутилоксикарбонил)пиперидин-3-ил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновую кислоту (20 мг), синтезированную в Справочном примере 2, растворяли при добавлении 4-аминонафталин-1-илдиметилкарбамата (20 мг), синтезированного в (Стадии 2) Примера синтеза 58, ДМФА (0,2 мл) и DIPEA (35 мкл). Затем в раствор добавляли HATU (32 мг) и перемешивали смесь при комнатной температуре в течение 1 часа. Добавляли этилацетат и воду с отделением органического слоя. Органический слой сушили над безводным сульфатом натрия и отгоняли растворитель при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле (хлороформ/метанол) с получением 20 мг указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла.

[0663]

(Стадия 2) Синтез соединения Примера синтеза 66

[0664]

К (R)-трет-бутил-3-(4-амино-3-((4-((диметилкарбамоил)окси)-нафталин-1-ил)карбамоил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)пиперидин-1-карбоксилату (20 мг), полученному в (Стадии 1), добавляли 4 М раствор хлороводородной кислоты в 1,4-диоксане (0,3 мл) и перемешивали смесь при комнатной температуре в течение 1 часа. Органический растворитель отгоняли при пониженном давлении, а остаток затем растворяли при добавлении транс-4-диметиламинокротоновой кислоты (5 мг), ДМФА (0,2 мл) и DIPEA (20 мкл). Затем в раствор добавляли HATU (15 мг) и перемешивали смесь при комнатной температуре в течение 1 часа. Затем к смеси добавляли ДМСО (1,0 мл) и очищали смесь с помощью обращенно-фазовой препаративной ВЭЖХ (вода/ацетонитрил (0,1% муравьиной кислоты)) с получением 12,7 мг указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества.

[0665]

Пример синтеза 67 Синтез (R)-1-(1-акрилоилпирролидин-3-ил)-4-амино-N-(5-хлор-4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-2-метилфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамид

[0666]

(R)-1-(1-Акрилоилпирролидин-3-ил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновую кислоту (5,0 мг), полученную в Справочном примере 5, и 2-(4-амино-2-хлор-5-метилфенил)-N,N-диметилацетамид (10 мг), полученный в (Стадии 4) Примера синтеза 19, растворяли при добавлении ДМСО (0,1 мл) и DIPEA (5 мкл). Затем в раствор добавляли HATU (25 мг). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Затем к смеси добавляли ДМСО (1 мл) и очищали смесь с помощью обращенно-фазовой препаративной ВЭЖХ (вода/ацетонитрил (0,1% муравьиной кислоты)) с получением 5,08 мг указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества.

[0667]

Пример синтеза 68 Синтез (R)-4-(1-(1-акрилоилпиримидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамидо)-3-метилфенил-метил(фенил)карбамата

[0668]

(Стадия 1) Синтез 3-метил-4-нитрофенил-метил(фенил)карбамата

[0669]

Согласно (Стадии 1) Примера синтеза 29, 80 мг указанного в заголовке соединения получали в виде желтого твердого вещества при использовании 3-метил-4-нитрофенола (50 мг) вместо 2-хлор-4-нитрофенола и при использовании N-метил-N-фенилкарбамоилхлорида вместо N,N-диметилкарбамоилхлорида.

[0670]

(Стадия 2) Синтез 4-амино-3-метилфенил-метил(фенил)карбамата

[0671]

Согласно (Стадии 2) Примера синтеза 6, 50 мг указанного в заголовке соединения получали в виде желтого масла при использовании 3-метил-4-нитрофенил-метил(фенил)карбамата (80 мг), полученного в (Стадии 1), вместо 2-(3-хлор-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида.

[0672]

(Стадия 3) Синтез соединения Примера синтеза 68

[0673]

Согласно (Стадии 3) Примера синтеза 4, 3,58 мг указанного в заголовке соединения получали в виде белого твердого вещества при использовании (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновой кислоты (7,5 мг) и 4-амино-3-метилфенил-метил(фенил)карбамата (7,5 мг), полученного в (Стадии 2).

[0674]

Пример синтеза 69 Синтез (R)-4-(1-(1-акрилоилпиримидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамидо)-3-метилфенил-пирролидин-1-карбоксилата

[0675]

(Стадия 1) Синтез 3-метил-4-нитрофенил-пирролидин-1-карбоксилата

[0676]

Согласно (Стадии 1) Примера синтеза 29, 80 мг указанного в заголовке соединения получали в виде желтого твердого вещества при использовании 3-метил-4-нитрофенола (50 мг) вместо 2-хлор-4-нитрофенола и при использовании хлорангидрида 1-пирролидинкарбоновой кислоты вместо N,N-диметилкарбамоилхлорида.

[0677]

(Стадия 2) Синтез 4-амино-3-метилфенил-пирролидин-1-карбоксилата

[0678]

Согласно (Стадии 2) Примера синтеза 6, 50 мг указанного в заголовке соединения получали в виде желтого масла при использовании 3-метил-4-нитрофенил-пирролидин-1-карбоксилата (80 мг), полученного в (Стадии 1), вместо 2-(3-хлор-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида.

[0679]

(Стадия 3) Синтез соединения Примера синтеза 69

[0680]

Согласно (Стадии 3) Примера синтеза 4, 3,66 мг указанного в заголовке соединения получали в виде белого твердого вещества при использовании (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновой кислоты (7,5 мг) и 4-амино-3-метилфенил-пирролидин-1-карбоксилата (7,5 мг), полученного в (Стадии 2).

[0681]

Пример синтеза 70 Синтез (R)-4-(1-(1-акрилоилпиримидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамидо)-3-метилфенил-пиперидин-1-карбоксилата

[0682]

(Стадия 1) Синтез 3-метил-4-нитрофенил-пиперидин-1-карбоксилата

[0683]

Согласно (Стадии 1) Примера синтеза 29, 70 мг указанного в заголовке соединения получали в виде желтого твердого вещества при использовании 3-метил-4-нитрофенола (50 мг) вместо 2-хлор-4-нитрофенола и при использовании хлорангидрида 1-пиперидинкарбоновой кислоты вместо N,N-диметилкарбамоилхлорида.

[0684]

[0685]

Согласно (Стадии 2) Примера синтеза 6, 50 мг указанного в заголовке соединения получали в виде желтого масла при использовании 3-метил-4-нитрофенил-пиперидин-1-карбоксилата (70 мг), полученного в (Стадии 1), вместо 2-(3-хлор-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида.

[0686]

(Стадия 3) Синтез соединения Примера синтеза 70

[0687]

Согласно (Стадии 3) Примера синтеза 4, 4,05 мг указанного в заголовке соединения получали в виде белого твердого вещества при использовании (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновой кислоты (7,5 мг) и 4-амино-3-метилфенил-пирролидин-1-карбоксилата (7,5 мг), полученного в (Стадии 2).

[0688]

Пример синтеза 71 Синтез (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(2-метил-4-(2-оксо-2-(пирролидин-1-ил)этил)фенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида

[0689]

(Стадия 1) Синтез 2-(3-метил-4-нитрофенил)-1-(пирролидин-1-ил)этанона

[0690]

Согласно (Стадии 1) Примера синтеза 4, 55 мг указанного в заголовке соединения получали в виде желтого масла при использовании пирролидина вместо 2,0 М раствора диметиламина в ТГФ.

[0691]

(Стадия 2) Синтез 2-(4-амино-3-метилфенил)-1-(пирролидин-1-ил)этанона

[0692]

Согласно (Стадии 2) Примера синтеза 6, 50 мг указанного в заголовке соединения получали в виде желтого масла при использовании 2-(3-метил-4-нитрофенил)-1-(пирролидин-1-ил)этанона (55 мг), полученного в (Стадии 1), вместо 2-(3-хлор-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида.

[0693]

(Стадия 3) Синтез соединения Примера синтеза 71

[0694]

Согласно (Стадии 3) Примера синтеза 4, 3,49 мг указанного в заголовке соединения получали в виде белого твердого вещества при использовании (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновой кислоты (10 мг) и 2-(4-амино-3-метилфенил)-1-(пирролидин-1-ил)этанона (10 мг), полученного в (Стадии 2).

[0695]

Пример синтеза 72 Синтез (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(2-метокси(метил)амино-2-оксоэтил)-2-метилфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида

[0696]

(Стадия 1) Синтез N-метокси-N-метил-2-(3-метил-4-нитрофенил)ацетамида

[0697]

Согласно (Стадии 1) Примера синтеза 4, 55 мг указанного в заголовке соединения получали в виде желтого масла при использовании N метокси N метиламин вместо раствора на 2,0 М диметиламин в ТГФ.

[0698]

(Стадия 2) Синтез 2-(4-амино-3-метилфенил)-N-метокси-N-метилацетамида

[0699]

Согласно (Стадии 2) Примера синтеза 6, 50 мг указанного в заголовке соединения получали в виде желтого масла при использовании N-метокси-N-метил-2-(3-метил-4-нитрофенил)-ацетамида (55 мг), полученного в (Стадии 1), вместо 2-(3-хлор-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида.

[0700]

(Стадия 3) Синтез соединения Примера синтеза 72

[0701]

Согласно (Стадии 3) Примера синтеза 4, 4,43 мг указанного в заголовке соединения получали в виде белого твердого вещества при использовании (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновой кислоты (10 мг) и 2-(4-амино-3-метилфенил)-N-метокси-N-метилацетамида (10 мг), полученного в (Стадии 2).

[0702]

Пример синтеза 73 Синтез (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(2-(3-гидроксиазетидин-1-ил)-2-оксоэтил)-2-метилфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида

[0703]

(Стадия 1) Синтез 1-(3-гидроксиазетидин-1-ил)-2-(3-метил-4-нитрофенил)этанона

[0704]

Согласно (Стадии 1) Примера синтеза 4, 55 мг указанного в заголовке соединения получали в виде желтого масла при использовании 3-гидроксиазетидина вместо 2,0 М раствора диметиламина в ТГФ.

[0705]

(Стадия 2) Синтез 2-(4-амино-3-метилфенил)-1-(3-гидроксиазетидин-1-ил)этанона

[0706]

Согласно (Стадии 2) Примера синтеза 6, 50 мг указанного в заголовке соединения получали в виде желтого масла при использовании 1-(3-гидроксиазетидин-1-ил)-2-(3-метил-4-нитрофенил)этанона (55 мг), полученного в (Стадии 1), вместо 2-(3-хлор-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида.

[0707]

(Стадия 3) Синтез соединения Примера синтеза 73

[0708]

Согласно (Стадии 3) Примера синтеза 4, 8,14 мг указанного в заголовке соединения получали в виде коричневого твердого вещества при использовании (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновой кислоты (10 мг) и 2-(4-амино-3-метилфенил)-1-(3-гидроксиазетидин-1-ил)этанона (10 мг), полученного в (Стадии 2).

[0709]

Пример синтеза 74 Синтез (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(3,3-диметилуреидо)-2-метилфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида

[0710]

(Стадия 1) Синтез 1,1-диметил-3-(3-метил-4-нитрофенил)-мочевины

[0711]

3-Метил-4-нитроанилин (100 мг) растворяли при добавлении ДМФА (3,3 мл) и DIPEA (170 мкл). Затем в раствор добавляли хлорид дихлорметилен-метилиминия (125 мг). Смесь перемешивали при 50°C в течение 3 часов, а затем добавляли этилацетат и воду с отделением органического слоя. Органический слой сушили над безводным сульфатом натрия и отгоняли растворитель при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле (хлороформ/метанол) с получением 140 мг указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла.

[0712]

(Стадия 2) Синтез 3-(4-амино-3-метилфенил)-1,1-диметилмочевины

[0713]

Согласно (Стадии 2) Примера синтеза 6, 120 мг указанного в заголовке соединения получали в виде желтого масла при использовании 1,1-диметил-3-(3-метил-4-нитрофенил)мочевины (140 мг), полученной в (Стадии 1), вместо 2-(3-хлор-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида.

[0714]

(Стадия 3) Синтез соединения Примера синтеза 74

[0715]

Согласно (Стадии 3) Примера синтеза 4, 6,50 мг указанного в заголовке соединения получали в виде коричневого твердого вещества при использовании (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновой кислоты (10 мг) и 3-(4-амино-3-метилфенил)-1,1-диметилмочевины (10 мг), полученной в (Стадии 2).

[0716]

Пример синтеза 75 Синтез (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(2-метил-4-(пирролидин-1-карбоксамидо)фенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида

[0717]

(Стадия 1) Синтез N-(3-метил-4-нитрофенил)пирролидин-1-карбоксамида

[0718]

3-Метил-4-нитроанилин (30 мг) растворяли при добавлении ДМФА (2,0 мл) и гидрида натрия (60%) (12 мг). Затем в раствор добавляли хлорангидрид 1-пирролидинкарбоновой кислоты (25 мкл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут, а затем добавляли этилацетат и воду с отделением органического слоя. Органический слой сушили над безводным сульфатом натрия и отгоняли растворитель при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле (хлороформ/метанол) с получением 30 мг указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла.

[0719]

(Стадия 2) Синтез N-(4-амино-3-метилфенил)пирролидин-1-карбоксамида

[0720]

Согласно (Стадии 2) Примера синтеза 6, 25 мг указанного в заголовке соединения получали в виде желтого масла при использовании N-(3-метил-4-нитрофенил)пирролидин-1-карбоксамида (30 мг), полученного в (Стадии 1), вместо 2-(3-хлор-4-нитрофенил)-N,N-диметилацетамида.

[0721]

(Стадия 3) Синтез соединения Примера синтеза 75

[0722]

Согласно (Стадии 3) Примера синтеза 4, 6,53 мг указанного в заголовке соединения получали в виде белого твердого вещества при использовании (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновой кислоты (10 мг) и N-(4-амино-3-метилфенил)пирролидин-1-карбоксамида (10 мг), полученного в (Стадии 2).

[0723]

Пример синтеза 76 Синтез 1-((3R)-1-акрилоил-5-фторпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(2-хлор-4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)фенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида

[0724]

(Стадия 1) Синтез (2S,4R)-метил-1-бензил-4-(бензилокси)-пирролидин-2-карбоксилата

[0725]

В диэтиловый эфир (400 мл) добавляли гидрохлорид (2S,4R)-метил-4-(бензилокси)пирролидин-2-карбоксилата (4,57 г), а затем при охлаждении льдом добавляли триэтиламин (2,98 г). Смесь перемешивали в течение 30 минут при охлаждении льдом. Затем к смеси добавляли бензилбромид (5,04 г) и триэтиламин (2,98 г) и перемешивали смесь в течение ночи при комнатной температуре. Полученную суспензию фильтровали, фильтрат промывали водой и насыщенным солевым раствором, а затем сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. После выпаривания полученный остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле (гексан/этилацетат) с получением 4,57 г указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла.

[0726]

(Стадия 2) Синтез ((2S,4R)-метил-1-бензил-4-(бензилокси)пирролидин-2-ил)метанола

[0727]

Алюмогидрид лития (1,99 г) суспендировали в ТГФ (100 мл). К суспензии добавляли раствор (2S,4R)-метил-1-бензил-4-(бензилокси)пирролидин-2-карбоксилата (11,4 г) в ТГФ (65 мл) при охлаждении льдом. Смесь оставляли с перемешиванием при охлаждении льдом на 1 час, а затем добавляли декагидрат сульфата натрия (20 г). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. Затем к смеси добавляли безводный декагидрат сульфата натрия (20 г) и перемешивали смесь в течение ночи при комнатной температуре. Затем к смеси добавляли безводный сульфат натрия (20 г) и перемешивали смесь в течение 30 минут, затем фильтровали через целит и выпаривали с получением остатка в виде желтого масла. Этот остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле (гексан/этилацетат) с получением 9,16 г указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла.

[0728]

(Стадия 3) Синтез (3R)-1-бензил-3-(бензилокси)-5-фторпиперидина

[0729]

К раствору ((2S,4R)-метил-1-бензил-4-(бензилокси)-пирролидин-2-ил)метанола (9,16 г) в THR добавляли трифторид бис(2-метоксиэтил)аминосеры (6,95 г) при охлаждении льдом, после чего смесь оставляли с перемешиванием на 1 час. Затем смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1,5 часов. К смеси добавляли насыщенный водный раствор бикарбоната натрия с последующей экстракцией этилацетатом. Затем экстракт промывали насыщенным солевым раствором, сушили с использованием безводного сульфата натрия, фильтровали и выпаривали. Полученный остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле (гексан/этилацетат) с получением 6,08 г указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла.

[0730]

(Стадия 4) Синтез (5R)-трет-бутил-3-фтор-5-гидроксипиперидин-1-карбоксилата

[0731]

(3R)-1-Бензил-3-(бензилокси)-5-фторпиперидин (6,08 г) и ди-трет-бутилдикарбонат (4,88 г) растворяли в этаноле (120 мл). Затем в раствор добавляли гидроксид палладия на активированном угле (900 мг) и перемешивали смесь в течение 2 дней в атмосфере водорода. Суспензию фильтровали через целит, затем выпаривали, а остаток суспендировали и промывали при использовании гексана с получением 3,98 г указанного в заголовке соединения в виде бесцветного твердого вещества.

[0732]

(Стадия 5) Синтез (5S)-трет-бутил-3-фтор-5-((4-нитробензоил)окси)пиперидин-1-карбоксилата

[0733]

(5R)-трет-Бутил-3-фтор-5-гидроксипиперидин-1-карбоксилат (1,0 г), 4-нитробензойную кислоту (1,14 г) и трифенилфосфин (1,79 г) растворяли в толуоле (100 мл). Затем в раствор добавляли бис(2-метоксиэтил)азодикарбоксилат (1,60 г) при охлаждении льдом. Раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 3 дней, затем промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и насыщенным солевым раствором, затем сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и выпаривали. Полученный остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле (гексан/этилацетат) с получением 1,26 г указанного в заголовке соединения в виде бесцветного твердого вещества.

[0734]

(Стадия 6) Синтез (5S)-трет-бутил-3-фтор-5-гидроксипиперидин-1-карбоксилата

[0735]

(5S)-трет-Бутил-3-фтор-5-((4-нитробензоил)окси)пиперидин-1-карбоксилат (1,26 г) растворяли в смешанном растворе ТГФ (7 мл) и метанола (7 мл). К раствору добавляли 5Н водный раствор гидроксида натрия (1,4 мл).

Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1,5 часов, а затем органический растворитель отгоняли при пониженном давлении. Остаток разбавляли диэтиловым эфиром, затем промывали водой, насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и выпаривали с получением указанного в заголовке соединения (0,69 г) в виде бесцветного твердого вещества.

[0736]

(Стадия 7) Синтез (3R)-трет-бутил-3-(4-амино-3-иод-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)-5-фторпиперидин-1-карбоксилата

[0737]

Указанное в заголовке соединение (0,33 г) получали в виде светло-коричневого соединения при использовании (5S)-трет-бутил-3-фтор-5-гидроксипиперидин-1-карбоксилата (0,69 г) вместо (S)-N-Boc-3-пиперидинола в (Стадии 1) и (Стадии 2) Справочного примера 1.

[0738]

(Стадия 8) Синтез 4-амино-1-((3R)-1-(трет-бутоксикарбонил)-5-фторпиперидин-3-ил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновой кислоты

[0739]

(3R)-трет-Бутил-3-(4-амино-3-иод-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)-5-фторпиперидин-1-карбоксилат (0,300 г), триэтиламин (0,32 г) и комплекс 1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен-палладия (II) дихлорида-дихлорметана (0,052 г) добавляли в метанол (5 мл) и перемешивали смесь при 100°C в течение 1 часа при 4,5 атм в монооксиде углерода, а затем выпаривали. Полученный остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле (гексан/этилацетат). Полученное твердое вещество растворяли в метаноле (5 мл). К раствору добавляли 5Н водный раствор гидроксида натрия (0,64 мл), после чего смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 часов. Затем к смеси добавляли 5Н водный раствор соляной кислоты (0,65 мл) с последующей экстракцией хлороформом. Затем экстракт сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и выпаривали с получением указанного в заголовке соединения (0,21 г) в виде бесцветного твердого вещества.

[0740]

(Стадия 9) Синтез соединения Примера синтеза 76

[0741]

4-Амино-1-((3R)-1-(трет-бутоксикарбонил)-5-фторпиперидин-3-ил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновую кислоту (35 мг), 2-(4-амино-3-хлорфенил)-N,N-диметилацетамид (23 мг), полученный в (Стадии 2) Примера синтеза 6, и диизопропилэтиламин (23 мг) растворяли в ДМФА (1 мл). В раствор добавляли HATU (52 мг) и перемешивали смесь в течение 2 дней. После выпаривания остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле, а затем очищали с помощью обращенно-фазовой препаративной ВЭЖХ (вода/ацетонитрил (0,1% муравьиной кислоты)). Полученное бесцветное масло растворяли в метаноле (2 мл). К раствору добавляли раствор 4Н хлороводородной кислоты в диоксане (2 мл) и перемешивали смесь при комнатной температуре в течение 2 часов. После выпаривания полученное желтое твердое вещество и диизопропилэтиламин (0,039 г) растворяли в хлороформе (5 мл). К раствору добавляли раствор акрилоилхлорида (5 мг) в хлороформе при охлаждении льдом и перемешивали смесь в течение 10 минут. Раствор очищали с помощью хроматографии на силикагеле, выпаривали, а затем суспендировали в гексане/этилацетате, после чего суспензию фильтровали и сушили при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (25 мг) в виде бесцветного твердого вещества.

[0742]

Пример синтеза 77 Синтез 1-((3R)-1-акрилоил-5-фторпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-2,3-диметилфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида

[0743]

Согласно (Стадии 9) Примера синтеза 76, указанное в заголовке соединение (21 мг) получали в виде бесцветного твердого вещества при использовании 2-(4-амино-2,3-диметилфенил)-N,N-диметилацетамида (22 мг), синтезированного в (Стадии 3) Примера синтеза 13, вместо 2-(4-амино-3-хлорфенил)-N,N-диметилацетамида.

[0744]

Пример синтеза 78 Синтез 1-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-N-(2-хлор-4-(2-диметиламино)-2-оксоэтил)фенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида

[0745]

(Стадия 1) Синтез (2S,4R)-трет-бутил-4-(3-иод-4-((трифенилфосфоранилиден)амино)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)-2-метилпирролидин-1-карбоксилата

[0746]

трет-Бутил-(2S,4S)-4-гидрокси-2-метил-пирролидин-1-карбоксилат (0,30 г), трифенилфосфин и 3-иод-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-4-амин растворяли в ТГФ (7 мл). К раствору при охлаждении льдом добавляли диизопропилазодикарбоксилат (0,443 мл). Раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов, после чего в раствор добавляли ТГФ (10 мл). После перемешивания в течение ночи, к раствору добавляли трифенилфосфин (0,117 г) и диизопропилазодикарбоксилат (0,089 мл) и перемешивали смесь еще в течение 1 часа. После выпаривания раствора остаток суспендировали в этилацетате и удаляли нерастворимое твердое вещество. Затем фильтрат выпаривали, а остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле (гексан/этилацетат) с получением указанного в заголовке соединения (0,387 г) в виде бесцветной аморфной массы.

[0747]

(Стадия 2) Синтез (2S,4R)-трет-бутил-4-(3-иод-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)-2-метилпирролидин-1-карбоксилата

[0748]

(2S,4R)-Трет-бутил-4-(3-иод-4-((трифенилфосфоранилиден)-амино)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)-2-метилпирролидин-1-карбоксилат (0,37 г), синтезированный в (Стадии 1), растворяли в трифторуксусной кислоте (5 мл) и перемешивали раствор в течение ночи. После выпаривания к остатку добавляли хлороформ и воду, после чего смесь подщелачивали 5Н гидроксидом натрия с последующей экстракцией хлороформом/метанолом. Полученный органический слой сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и выпаривали. Полученное бесцветное твердое вещество растворяли в хлороформе (5 мл). В раствор добавляли ди-трет-бутилдикарбонат (0,126 г) и перемешивали смесь при комнатной температуре в течение 2 часов. После выпаривания остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле (хлороформ/метанол) с получением указанного в заголовке соединения (0,23 г) в виде бесцветного твердого вещества.

[0749]

(Стадия 3) Синтез 4-амино-1-((3R,5S)-1-(трет-бутоксикарбонил)-5-метилпирролидин-3-ил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновой кислоты

[0750]

Согласно (Стадии 8) Примера синтеза 76, указанное в заголовке соединение (0,138 г) получали в виде коричневого твердого вещества при использовании (2S,4R)-трет-бутил 4-(3-иод-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)-2-метилпирролидин-1-карбоксилата (0,23 г), полученного в (Стадии 2), вместо (3R)-трет-бутил-3-(4-амино-3-иод-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)-5-фторпиперидин-1-карбоксилата.

[0751]

(Стадия 4) Синтез соединения Примера синтеза 78

[0752]

Согласно (Стадии 9) Примера синтеза 76, указанное в заголовке соединение (23 мг) получали в виде бесцветного твердого вещества при использовании 4-амино-1-((3R, 5S)-1-(трет-бутоксикарбонил)-5-метилпирролидин-3-ил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновой кислоты (35 мг) и 2-(4-амино-3-хлорфенил)-N,N-диметилацетамида (24 мг), полученного в (Стадии 2) Примера синтеза 6, вместо 4-амино-1-(3R)-1-(трет-бутоксикарбонил)-5-фторпиперидин-3-ил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновой кислоты.

[0753]

Пример синтеза 79 Синтез 1-((3R, 5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(2-диметиламино)-2-оксоэтил)-2,3-диметилфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида

[0754]

Согласно (Стадии 9) Примера синтеза 76, указанное в заголовке соединение (36 мг) получали в виде бесцветного твердого вещества при использовании 4-амино-1-((3R, 5S)-1-(трет-бутоксикарбонил)-5-метилпирролидин-3-ил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновой кислоты (35 мг) и 2-(4-амино-2,3-диметилфенил)-N,N-диметилацетамида (24 мг), синтезированного в (Стадии 3) Примера синтеза 13, вместо 4-амино-1-((3R)-1-(трет-бутоксикарбонил)-5-фторпиперидин-3-ил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоновой кислоты.

[0755]

Далее показан список соединений Примеров синтеза 1-79.

[0756]

[0757]

[Таблица 1]

[0758]

[Таблица 2]

[0759]

[Таблица 3]

[0760]

[Таблица 4]

[0761]

[Таблица 5]

[0762]

[Таблица 6]

[0763]

[Таблица 7]

[0764]

[Таблица 8]

[0765]

[Таблица 9]

[0766]

[Таблица 10]

[0767]

Тестовый пример 1 Измерение ингибирующего действия в отношении HER2-фосфорилирующей активности (in vitro)

Для определения условий для способа измерения ингибирующей активности in vitro соединения против HER2-фосфорилирующей активности, в качестве субстрата использовали ProfilerPro Peptide 22 производства PerkinElmer Inc. на основе сообщения (PLoS One, 6(7), e21487, 2011), в отношении реакции киназы HER2 при использовании в качестве субстрата пептида, имеющего такую же последовательность (5-FAM-EEPLYWSFPAKKK-CONH2), что и у пептида ProfilerPro Peptide 22. Очищенный рекомбинантный HER2 человека, использованный в тесте, был приобретен в Carna Biosciences, Inc.

Для измерения ингибирующей активности каждого соединения соединение примера синтеза сначала последовательно разводили в диметилсульфоксиде (ДМСО). Затем белок HER2, пептид-субстрат (конечная концентрация: 0,5 мкМ), хлорид марганца (конечная концентрация: 10 мМ), АТФ (конечная концентрация: 6 мкМ) и раствор соединения примера синтеза в ДМСО (конечная концентрация ДМСО: 5%) добавляли в буферный раствор для киназной реакции (15 мМ Трис (рН 7,5), 2 мМ дитиотреитола и 0,01% Tween 20) и инкубировали смесь при 25°C в течение 40 минут для киназной реакции. Реакцию останавливали добавлением ЭДТА (конечная концентрация: 30 мМ). Наконец, нефосфорилированный субстратный пептид (S) и фосфорилированный пептид (P) разделяли и детектировали с помощью микрокапиллярного электрофореза при использовании анализатора LabChip(R) EZ Reader II (PerkinElmer Inc.). Количественный показатель реакции фосфорилирования определяли по соответствующей высоте пиков S и P. Концентрацию соединения, которая может подавить реакцию фосфорилирования на 50%, определяли как значение IC50 (нМ).

Результаты показаны в таблице, представленной ниже.

[0768]

[Таблица 11]

[0769]

Результаты этого анализа продемонстрировали, что соединение пиразоло[3,4-d]пиримидина формулы (I) обладает HER2-ингибирующей активностью in vitro.

[0770]

Тестовый пример 2 Тест на измерение (in vitro) цитостатической активности против HER2-экспрессирующей клеточной линии (NCI-N87) и EGFR-экспрессирующей клеточной линии (A431), и сравнение селективности

Клетки клеточной линии рака желудка человека NCI-N87 с оверэкспрессией HER2 суспендировали в среде RPMI1640 (производства Life Technologies Corp.), содержащей 10% эмбриональной бычьей сыворотки. В это же время клетки сильно активированной линию эпителиоидных раковых клеток человека A431 с оверэкспрессией EGFR суспендировали в среде DMEM с высоким содержанием глюкозы (производства Life Technologies Corp.), содержащей 10% эмбриональной бычьей сыворотки. Затем каждую суспензию клеток инокулировали в каждую лунку 384-луночного планшета с плоскодонными лунками и культивировали при 37°C в течение 1 дня в инкубаторе, содержащем 5% диоксида углерода. Соединение примера синтеза растворяли в ДМСО, и тестируемое соединение разводили в 500-кратной, относительно конечной, концентрации с использованием ДМСО. Раствор тестируемого соединения в ДМСО разбавляли средой, используемой в суспензии каждой линии клеток, и этот раствор добавляли при конечной концентрации ДМСО 0,2% в каждую лунку планшета с культурой клеток, с последующим культивированием при 37°C в течение 3 дней в инкубаторе, содержащем 5% диоксида углерода. Количество клеток после 3-дневного культивирования в присутствии соединения подсчитывали при использовании CellTiter-Glo (производства Promega Corp.) на основе методики, рекомендованной Promega Corp. Процент ингибирования роста вычисляли в соответствии с уравнением, приведенным ниже, для определения концентрация, при которой тестируемое соединение ингибировало рост клеток на 50% (IC50 (нМ)).

Процент ингибирования роста (%)=(C-T)/(C)×100

T: Интенсивность люминесценции лунки, содержащей тестируемое соединение

C: Интенсивность люминесценции лунки, не содержащей тестируемое соединение

[0771]

[Таблица 12]

Пример синтеза	Значение IC50 ингибирующей рост клеток NC1-N87 активности (нМ)	Значение IC50 ингибирующей рост клеток A431 активности (нМ)	Пример синтеза	Значение IC50 ингибирующей рост клеток NC1-N87 активности (нМ)	Значение IC50 ингибирующей рост клеток A431 активности (нМ)
1	19	2319	32	7	1921
2	45	2666	33	3	263
3	27	3373	34	32	2206
4	12	2607	36	8	2607
5	6	1233	38	8	1040
6	7	1289	39	12	1799
7	12	2805	48	4	314
8	8	956	50	4	277
9	13	2446	53	11	1669
10	6	1414	56	31	2513
11	4	961	57	44	3389
12	3	340	58	8	681
13	5	1211	60	50	5255
14	4	486	61	10	1099
15	20	2270	66	50	6040
16	27	3456	71	26	2115
17	5	910	72	5	1172
18	12	1058	74	18	8075
19	12	1261	76	8	2074
26	5	984	77	19	2455
27	5	1508	78	41	5450
29	46	2223	79	21	6942
30	23	2349

[0772]

Результаты тестов продемонстрировали, что соединение пиразоло[3,4-d]пиримидина формулы (I) показало превосходную цитостатическую активность против линии клеток NCI-N87 с оверэкспрессией HER2, и что соединение пиразоло[3,4-d]пиримидина формулы (I) не только ингибирует киназу HER2, но и обладает превосходной цитостатической активностью против клеток.

Кроме того, результаты также продемонстрировали, что соединение пиразоло[3,4-d]пиримидина формулы (I) также обладает превосходной селективностью при ингибировании киназы HER2 по сравнению с киназой EGFR.

[0773]

Тестовый пример 3 Тест на измерение (in vitro) цитостатической активности против HER2-экспрессирующей клеточной линии (SK-BR-3)

Клетки клеточной линии SK-BR-3 рака молочной железы человека с оверэкспрессией HER2 суспендировали в среде МакКоя 5a (производства Life Technologies Corp.), содержащей 10% эмбриональной бычьей сыворотки. Суспензию клеток инокулировали в каждую лунку 384-луночного микропланшета с плоскодонными лунками и культивировали при 37°C 1 день в инкубаторе, содержащем 5% диоксида углерода. Соединение Примера синтеза растворяли в ДМСО, и тестируемое соединение разбавляли до 500-кратной концентрации относительно конечной концентрации с использованием ДМСО. Раствор тестируемого соединения в ДМСО разбавляли средой, используемой в суспензии каждой клеточной линии, и этот раствор добавляли в конечной концентрации ДМСО 0,2% в каждую лунку планшета для культивирования клеток с последующим дополнительным культивированием при 37°C в течение 3 дней в инкубаторе, содержащем 5% диоксида углерода. Количество клеток после 3-дневного культивирования в присутствии соединения подсчитывали с использованием CellTiter-Glo (производства Promega Corp.) на основе методики, рекомендованной Promega Corp. Процент ингибирования роста вычисляли в соответствии с приведенным выше уравнением, для определения концентрации, при которой тестируемое соединение ингибировало рост клеток на 50% (IC50 (нМ)).

[0774]

[Таблица 13]

[0775]

Результаты этого анализа продемонстрировали, что соединение пиразоло[3,4-d]пиримидина формулы (I) также обладает превосходной цитостатической активностью против клеточной линии рака молочной железы человека с оверэкспрессией HER2.

[0776]

[Примеры]

В Примерах ниже Соединение 1 представляет собой (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-2,3-диметилфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамид, который является соединением Примера синтеза 13.

[0777]

Пример 1 Комбинация Соединения 1 и трастузумаба (in vivo)

Клетки рака желудка человека 4-1st были получены в виде фрагмента опухоли из Центрального института подопытных животных (CIEA). Опухоль вырезали приблизительно через месяц после подкожной трансплантации и пассажа у голой мыши (BALB/cAJcl-nu/nu, CLEA Japan, Inc.) и получали фрагмент размером примерно 2 мм². Иглу для трансплантации заполняли одним фрагментом и вводили подкожно в области правого дистального ребра голой мыши. После введения справа в области спины шток толкали, чтобы вытолкнуть и пересадить опухоль. Электронный штангенциркуль использовали при измерении опухоли, при этом большую ось и малую ось опухоли у каждой мыши измеряли путем помещения опухоли между измерительными поверхностями электронного штангенциркуля (дни 0, 4, 8, 11 и 15). Объем опухоли (TV) вычисляли по большой оси и малой оси. Относительный объем опухоли (RTV) и процентное изменение относительного объема опухоли (T/C) вычисляли на основе вычисленного объема опухоли. TV, RTV и T/C вычисляли в соответствии со следующими уравнениями.

Объем опухоли TV (мм³) = (Большая ось, мм)×(Малая ось, мм)×(Малая ось, мм)/2

Относительный объем опухоли RTV = (TV в день измерения)/(TV в день распределения в группы)

Процентное изменение относительного объема опухоли T/C (%) = (Средний RTV в группе введения)/(Средний RTV в контрольной группе)×100

Электронные весы для животных использовали при измерении массы тела. Процентное изменение массы тела в день n (BWCn) вычисляли по массе тела в день n (BWn) согласно следующему уравнению.

Процентное изменение массы тела BWCn (%) = (BWn-BW0)/BW0×100

Были отобраны голые мыши, у которых TV достигло 100–300 мм³, и шесть животных распределяли в каждую группу методом равных чисел (MiSTAT (версия 2.0)), чтобы среднее значение TV в группах было выровнено. Трастузумаб (Герцептин, Roche) вводили внутривенно в хвостовую вену один раз в день, в дни 1 и 8. Соединение 1 вводили внутрь один раз в день последовательно со дня 1 до дня 14.

Наличие или отсутствие эффекта комбинированного применения и токсического действия определяли по размерам опухолей и массе тела в день распределения в группы (день 0) и день оценки (день 15). В течение периода введения массу тела измеряли ежедневно для расчета количества дозируемого раствора.

Результаты показаны в приведенной ниже таблице и на Фигуре 1.

[0778]

[Таблица 14]

Группа	Доза (мг/кг/день)	Схема (день)	Путь	RTV	Т/С (%)	BWC (%)
				День 15		День 15
				Среднее ±SD		Среднее
Контроль	-	1-14	п/о	13,38±1,14	100,0	3,42
Трастузумаб	20	1,8	в/в	5,42±0,46^**	40,5	5,18
Соединение 1	7,5	1-14	п/о	6,55±0,37^**	49,0	5,06
Соединение 1	15	1-14	п/о	3,77±0,32^**	28,2	0,82
Трастузумаб/Соединение 1	20/7.5	1,8/1-14	в/в/п/о	2,38±0,30^**$$##	17,8	2,10
Трастузумаб/Соединение 1	20/15	1,8/1-14	в/в/п/о	0,07±0,01^**$$##	0,5	0,50
**: p<0,01 с использованием t-критерия Аспина-Уэлча в сравнении с контрольной группой. $$: p<0,01 с использованием t-критерия Аспина-Уэлча в сравнении с группой Трастузумаба ##: p<0,01 с использованием t-критерия Аспина-Уэлча в сравнении с группой Соединения 1 SD: стандартное отклонение

[0779]

В результате анализа RTV в День 15 в каждой группе с использованием t-критерия Аспина-Уэлча было обнаружено, что RTV значительно ниже в получавшей одно лекарственное средство группе трастузумаба или группе Соединения 1, а также в группе комбинированного введения трастузумаба/Соединения 1, чем в контрольной группе. Кроме того, было обнаружено, что RTV в группе комбинированного введения трастузумаба/соединения 1 значительно ниже, чем в получавшей одно лекарственное средство группе трастузумаба или группе Соединения 1. Кроме того, среднее процентное изменение массы тела в группе комбинированного введения в день оценки не включало усиление токсического действия по сравнению с получавшей одно лекарственное средство группой трастузумаба или группой Соединения 1.

[0780]

Пример 2 Комбинация Соединения 1 и трастузумаба эмтанзина (in vivo)

Эксперимент проводили так же, как в Примере 1, за исключением того, что трастузумаб эмтанзин (Кадсила, Roche) использовали вместо трастузумаба и вводили в хвостовую вену один раз в день в День 1.

[0781]

[Таблица 15]

Группа	Доза (мг/кг/день)	Схема (день)	Путь	RTV	Т/С (%)	BWC (%)
				День 15		День 15
				Среднее ±SD		Среднее
Контроль	-	1-14	п/о	11,48±1,23	100,0	6,68
Трастузумаб эмтанзин	7,5	1	в/в	2,47±0,75^**	21,5	3,31
Соединение 1	7,5	1-14	п/о	5,92±0,38^**	51,6	7,41
Соединение 1	15	1-14	п/о	3,58±0,41^**	31,2	3,63
Трастузумаб эмтанзин/ Соединение 1	7,5/7,5	1/1-14	в/в/п/о	0,18±0,03^**$$##	1,6	2,89
Трастузумаб эмтанзин/ Соединение 1	7,5/15	1/1-14	в/в/п/о	0,05±0,01^**$$##	0,4	3,99
**: p<0,01 с использованием t-критерия Аспина-Уэлча в сравнении с контрольной группой. $$: p<0,01 с использованием t-критерия Аспина-Уэлча в сравнении с группой Трастузумаба эмтанзина ##: p<0,01 с использованием t-критерия Аспина-Уэлча в сравнении с группой Соединения 1 SD: стандартное отклонение

[0782]

В результате анализа RTV в День 15 в каждой группе с использованием t-критерия Аспина-Уэлча было обнаружено, что RTV значительно ниже в получавшей одно лекарственное средство группе трастузумаба эмтанзина или группе Соединения 1, а также в группе комбинированного введения трастузумаба эмтанзина/Соединения 1, чем в контрольной группе. Кроме того, было обнаружено, что RTV в группе комбинированного введения трастузумаба эмтанзина/Соединения 1 значительно ниже, чем в получавшей одно лекарственное средство группе трастузумаба эмтанзина или группе Соединения 1. Кроме того, среднее процентное изменение массы тела в группе комбинированного введения в день оценки не включало усиление токсического действия по сравнению с получавшей одно лекарственное средство группой трастузумаба эмтанзина или группой Соединения 1.

[0783]

Пример 3 Комбинация Соединения 1 и капецитабина (in vivo)

Клеточная линия рака желудка человека NCI-N87 была получена из Американской коллекции типовых культур (АТСС). Клеточную линию культивировали при 37°C в CO₂-инкубаторе с 5% CO₂ при использовании RPMI-1640 (содержащей 4,5 г/л глюкозы, 10 мМ HEPES и 1 мМ пирувата натрия) (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.), содержащей 10% фетальной бычьей сыворотки (FBS).

Клетки NCI-N87 ресуспендировали при концентрации 8×10⁷ клеток/мл в PBS.

Суспензию клеток подкожно трансплантировали в количестве 8×10⁶ клеток/0,1 мл в правую область груди голой мыши (BALB/cAJcl-nu/nu, CLEA Japan, Inc.) возрастом 6 недель при помощи шприца объемом 1 мл для туберкулина и инъекционной иглы 25 G.

Электронные штангенциркули использовали при измерении опухоли. Большую ось и малую ось опухоли измеряли и значения TV, RTV и T/C вычисляли согласно уравнениям, описанным выше.

Электронные весы для животных использовали при измерении массы тела. Процентное изменение массы тела в день n (BWCn) вычисляли по массе тела в день n (BWn) согласно уравнению, описанному выше.

Отбирали голых мышей, у которых TV достиг 100-300 мм³, и пять животных распределяли в каждую группу методом равных чисел (MiSTAT (версии 2.0)) таким образом, чтобы среднее значение TV в группах было выравнено. Капецитабин (Кселода, Roche) и Соединение 1 вводили внутрь один раз в день, последовательно со дня 1 до дня 14.

Результаты показаны в приведенной ниже таблице и на Фигурах 3 и 4.

[0784]

[Таблица 16]

Группа	Доза (мг/кг/день)	Схема (день)	Путь	RTV	Т/С (%)	BWC (%)
				День 15		День 15
				Среднее ±SD		Среднее
Контроль	-	1-14	п/о	4,15±0,49	100,0	8,94
Соединение 1	15	1-14	п/о	1,69±0,39^***	40,8	8,35
Соединение 1	30	1-14	п/о	0,67±0,15^***	16,3	6,43
Капецитабин	359	1-14	п/о	1,26±0,21^***	30,4	7,51
Капецитабин	809	1-14	п/о	1,12±0,18^***	27,1	-5,30
Соединение 1/капецитабин	15/359	1-14/1-14	п/о/п/о	0,63±0,08^***$$$###	15,3	2,63
Соединение 1/капецитабин	30/359	1-14/1-14	п/о/п/о	0,35±0,11^***$$$##	8,4	1,52
Соединение 1/капецитабин	15/809	1-14/1-14	п/о/п/о	0,42±0,10^***$$$###	10,2	-0,20
Соединение 1/капецитабин	30/809	1-14/1-14	п/о/п/о	0,32±0,06^***$$$###	7,8	2,43
***: p<0,001 с использованием критерия Даннета в сравнении с контрольной группой. $$$: p<0,001 с использованием критерия Даннета в сравнении с группой Капецитабина ##: p<0,01 с использованием критерия Даннета в сравнении с Соединением 1 ###: p<0,001 с использованием критерия Даннета в сравнении с Соединением 1 SD: стандартное отклонение

[0785]

В результате анализа RTV в День 15 в каждой группе с использованием критерия Даннета было обнаружено, что RTV значительно ниже в получавшей одно лекарственное средство группе капецитабина или группе Соединения 1, а также в группе комбинированного введения Соединения 1/капецитабина, чем в контрольной группе. Кроме того, было обнаружено, что RTV в группе комбинированного введения Соединения 1/капецитабина группа значительно ниже, чем в получавшей одно лекарственное средство группе капецитабина или группе Соединения 1. Кроме того, среднее процентное изменение массы тела в группе комбинированного введения в день оценки не включало усиление токсического действия по сравнению с получавшей одно лекарственное средство группой капецитабина или группой Соединения 1.

[0786]

Пример 4 Комбинации Соединения 1 и других противоопухолевых средств (in vitro)

Поставщик каждого реактива, поставщики линий опухолевых клеток, используемая среда и количество инокулированных клеток показаны в приведенных ниже таблицах.

[0787]

[Таблица 17]

Реактив	Поставщик
Фетальная бычья сыворотка (FBS)	MP Biomedicals, LLC или Bovogen Biologicals
Эпидермальный фактор роста человека (hEGF)	R&D Systems, Inc.
Среда Лейбовица L-15	Thermo Fisher Scientific, Inc.
Модифицированная по Дульбекко среда Игла (DMEM)	Wako Pure Chemical Industries, Ltd.
Среда RPMI-1640 в модификации ATCC	Wako Pure Chemical Industries, Ltd.
Среда МакКоя 5A	Thermo Fisher Scientific, Inc.
AZD8055	Cayman Chemical Company
Эверолимус	Cayman Chemical Company
Дактолизиб	Cayman Chemical Company
Бупарлизиб	Cayman Chemical Company
Таселизиб	Selleck Chemicals
Палбоциклиб	Cayman Chemical Company
5-Фторурацил	Wako Pure Chemical Industries, Ltd.
5-Фтор-2'-дезоксиуридин (FdUrd)	Wako Pure Chemical Industries, Ltd.
Паклитаксел	Wako Pure Chemical Industries, Ltd.
Цисплатин	Bristol-Myers Squibb Company
Трифлуридин (трифтортимидин)	Yuki Gosei Kogyo Co., Ltd.

[0788]

[Таблица 18]

Линия опухолевых клеток (источник)	Поставщик линии клеток	Среда	Количество клеток, инокулируемое в каждую лунку
UACC-812 (рак молочной железы человека)	ATCC	Среда Лейбовица L-15, содержащая 20% FBS и 20 нг/мл hEGF	500
MDA-MB-453 (рак молочной железы человека)	ATCC	Среда Лейбовица L-15, содержащая 10% FBS	500
KPL-4 (рак молочной железы человека)	Kawasaki Medical School (Junichi Kurebayashi)	DMEM, содержащая 10% FBS	250
NCI-N87 (рак желудка человека)	ATCC	Среда RPMI-1640 в модификации ATCC, содержащая 10% FBS	250
SK-BR-3 (рак молочной железы человека)	Sumitomo Dainippon Pharma Co., Ltd. (ранее Dainippon Seiyaku K.K.)	Среда МакКоя 5A, содержащая 10% FBS	250

[0789]

Клетки инокулировали в количестве 20 мкл/лунка в 384-луночный культуральный планшет (Corning Inc.). Планшет, инокулированный клетками, культивировали в инкубаторе при 37°C и 5% CO₂. На следующий день после инокуляции каждый из смешанных растворов Соединения 1 и каждое из противоопухолевых средств в различных комбинациях концентраций добавляли к клеткам. В частности, 8 серийных разведений (включая (0 нМ)) Соединения 1 и 10 серийных разведений (включая (0 нМ)) другого противоопухолевого средства подготавливали при использовании среды Лейбовица L-15, содержащей 10% FBS, или среды RPMI-1640 в модификации ATCC, содержащей 10% FBS. Растворы лекарственного средства, в которые были добавлены равные количества соответствующих серийных разведений соединений, смешивали в соотношении 1:1, с получением в общей сложности 80 смешанных растворов лекарственного средства, включающих каждую комбинацию. Наиболее высокую концентрацию (указанную как конечная концентрация) и общее отношение каждого лекарственного средства показано в приведенной ниже таблице. Наиболее высокую концентрацию (указанную как конечная концентрация) и общее отношение каждого лекарственного средства показано в приведенной ниже таблице. Каждый из этих смешанных растворов лекарственного средства добавляли в количестве 5 мкл/лунка (N=4) в планшет с последующим культивированием в течение 3 дней при условиях 37°C и 5% CO₂.

Через три дня реактив CellTiter-Glo(TM) 2.0 (Promega Corporation) добавляли к растворам в количестве 25 мкл/лунка и измеряли хемилюминесценцию при использовании планшетного анализатора (EnSpire(R) Multimode Plate Reader, PerkinElmer Japan Co., Ltd.).

[0790]

[Таблица 19]

Другое противоопухолевое средство	Линия опухолевых клеток	Другое противоопухолевое средство		Соединение 1
Другое противоопухолевое средство	Линия опухолевых клеток	Наибольшая концентрация (нМ)	Обычное отношение	Наибольшая концентрация (нМ)	Обычное отношение
AZD8 055	KPL-4	3000	3	3000	3
Эверолимус	MDA-MB-453	30000	10	3000	3
Дактолизиб	UACC-812	300	1,7	100	1,7
Бупарлизиб	KPL-4	3000	3	3000	3
Таселизиб	KPL-4	3000	3	3000	3
Палбоциклиб	KPL-4	15000	1,5	10000	3,4
5-Фторурацил	NCI-N87	1000000	3	100	3
FdUrd	NCI-N87	1000000	3	100	3
Паклитаксел	KPL-4	50	3	50000	3
Паклитаксел	NCI-N87	50	3	100	3
Гемцитабин	NCI-N87	1000	3	100	3
Цисплатин	SK-BR-3	167000	3	100	3
Цисплатин	NCI-N87	167000	3	100	3
Трифлуридин	NCI-N87	1000000	3	100	3

[0791]

Усиление эффекта при комбинированном применении лекарственных средств оценивали в соответствии со способом, известным в данной области (способом, описанным в Trends Pharmacol. Sci., 4, 450-454, 1983 или Pharmacol Rev., 58 (3),621-81, 2006).

На основе полученных данных вычисляли среднее значение для 4 лунок каждой комбинации и вычисляли выживаемость клеток, нормализованную по контролю с добавкой среды, содержащей растворитель. Значение Fa (долю воздействия) вычисляли путем вычитания коэффициента выживаемости клеток из 1. Для расчета CI использовали программу для анализа медианного эффекта CalcuSyn 2.0 (CalcuSyn, Inc.) для вычисления методом медианного эффекта.

Что касается комбинаций концентраций обоих лекарственных средств для вычисления CI, значение Fa, близкое к 1, предположительно означает диапазон концентраций, в котором одно из лекарственных средств оказало слишком сильное воздействие, а значение Fa, близкое к 0, предположительно означает диапазон концентраций, в котором любое из лекарственных средств оказало слишком слабое воздействие. Поскольку эти диапазоны концентраций не подходили для обсуждения синергического эффекта, комбинации, которые удовлетворяли условию 0,2≤Fa≤0,8, были выделены из комбинаций соответствующих концентраций Соединения 1 и другого противоопухолевого средства на основе вычисленного значения Fa.

Эффект комбинированного применения был определен, как показано в приведенной ниже таблице (Pharmacol Rev., 58 (3), p. 621-81, 2006).

[0792]

[Таблица 20]

Диапазон CI	Описание
0,1	Очень сильный синергический эффект
0,3	Сильный синергический эффект
0,7	Синергический эффект
0,85	Умеренный синергический эффект
0,9	Легкий синергический эффект
1,0	Почти аддитивный
1,2	Легкий антагонистический эффект
1,45	Умеренный антагонистический эффект
3,3	Антагонистический эффект
10	Сильный антагонистический эффект
>10	Очень сильный антагонистический эффект

[0793]

Результаты показаны в приведенных ниже таблицах.

[0794]

[Таблица 21]

Другое противоопухолевое средство: AZD8055, Линия клеток: KPL-4
Соединение 1 (нМ)	Другое противоопухолевое средство (нМ)	Fa	CI	Отношение комбинированного применения (Соединение 1:другое противоопухолевое средство)
4,12	37,0	0,67	0,43	1:9,0
12,3	12,3	0,54	0,70	1:1,0
12,3	37,0	0,75	0,14	1:3,0
12,3	111	0,78	0,26	1:9,0
37,0	1,37	0,44	0,34	1:0,037
37,0	4,12	0,49	0,44	1:0,11
37,0	12,3	0,67	0,14	1:0,33
37,0	37,0	0,73	0,19	1:1,0
111	4,12	0,60	0,12	1:0,037
111	12,3	0,73	0,063	1:0,11
111	37,0	0,78	0,087	1:0,33
333	12,3	0,72	0,074	1:0,037
333	37,0	0,79	0,073	1:0,11
1000	37,0	0,72	0,22	1:0,037

[0795]

[Таблица 22]

Другое противоопухолевое средство: Эверолимус, Линия клеток: MDA-MB-453
Соединение 1 (нМ)	Другое противоопухолевое средство (нМ)	Fa	CI	Отношение комбинированного применения (Соединение 1:другое противоопухолевое средство)
37,0	3,00	0,71	0,071	1:0,081
37,0	30,0	0,71	0,21	1:0,81
111	30,0	0,76	0,15	1:0,27
111	300	0,79	0,50	1:2,7
333	0,300	0,74	0,30	1:0,00090
333	3,00	0,76	0,24	1:0,0090
333	30,0	0,78	0,23	1:0,090
1000	3,00	0,76	0,70	1:0,0030
1000	30,0	0,79	0,51	1:0,030

[0796]

[Таблица 23]

Другое противоопухолевое средство: AZD8055, Линия клеток: KPL-4
Соединение 1 (нМ)	Другое противоопухолевое средство (нМ)	Fa	CI	Отношение комбинированного применения (Соединение 1:другое противоопухолевое средство)
4,14	35,9	0,26	0,79	1:8,7
7,04	61,1	0,51	0,46	1:8,7
12,0	21,1	0,31	0,70	1:1,8
12,0	35,9	0,46	0,48	1:3,0
12,0	61,1	0,55	0,46	1:5,1
12,0	104	0,68	0,39	1:8,7
20,4	21,1	0,42	0,61	1:1,0
20,4	35,9	0,51	0,53	1:1,8
20,4	61,1	0,63	0,41	1:3,0
20,4	104	0,73	0,36	1:5,1
20,4	176	0,79	0,38	1:8,7
34,6	21,1	0,51	0,66	1:0,61
34,6	35,9	0,54	0,65	1:1,0
34,6	61,1	0,65	0,51	1:1,8
34,6	104	0,75	0,41	1:3,0
58,8	61,1	0,71	0,55	1:1,0
58,8	104	0,77	0,49	1:1,8
100	61,1	0,78	0,59	1:0,61

[0797]

[Таблица 24]

Другое противоопухолевое средство: Бупарлизиб, Линия клеток: KPL-4
Соединение 1 (нМ)	Другое противоопухолевое средство (нМ)	Fa	CI	Отношение комбинированного применения (Соединение 1:другое противоопухолевое средство)
37,0	333	0,33	0,72	1:9,0
111	333	0,44	0,59	1:3,0
333	333	0,50	0,58	1:1,0
1000	333	0,53	0,66	1:0,33
3000	333	0,58	0,76	1:0,11

[0798]

[Таблица 25]

Другое противоопухолевое средство: Таселизиб, Линия клеток: KPL-4
Соединение 1 (нМ)	Другое противоопухолевое средство (нМ)	Fa	CI	Отношение комбинированного применения (Соединение 1:другое противоопухолевое средство)
4,12	37,0	0,76	0,0040	1:9,0
12,3	12,3	0,72	0,013	1:1,0
12,3	37,0	0,79	0,0010	1:3,0
37,0	12,3	0,71	0,024	1:0,33
37,0	37,0	0,79	0,0010	1:1,0
37,0	111	0,78	0,0030	1:3,0
37,0	333	0,78	0,010	1:9,0
111	12,3	0,65	0,51	1:0,11
111	37,0	0,78	0,0020	1:0,33
111	111	0,79	0,0020	1:1,0
333	333	0,79	0,0060	1:1,0
333	1000	0,77	0,058	1:3,0
333	3000	0,77	0,17	1:9,0
1000	37,0	0,75	0,016	1:0,037
1000	111	0,77	0,011	1:0,11
1000	333	0,75	0,072	1:0,33
1000	1000	0,75	0,20	1:1,0
3000	111	0,79	0,011	1:0,037
3000	333	0,77	0,034	1:0,11
3000	1000	0,76	0,12	1:0,33
3000	3000	0,77	0,19	1:1,0

[0799]

[Таблица 26]

Другое противоопухолевое средство: Палбоциклиб, Линия клеток: KPL-4
Соединение 1 (нМ)	Другое противоопухолевое средство (нМ)	Fa	CI	Отношение комбинированного применения (Соединение 1:другое противоопухолевое средство)
22,0	878	0,27	0,15	1:40
22,0	1975	0,35	0,21	1:90
74,8	878	0,50	0,062	1:12
74,8	1975	0,55	0,091	1:26
74,8	2963	0,51	0,16	1:40
254	2963	0,62	0,12	1:12
254	4444	0,62	0,16	1:17
254	6667	0,68	0,17	1:26
865	1975	0,58	0,19	1:2,3
865	2963	0,61	0,19	1:3,4
865	4444	0,58	0,27	1:5,1
2941	4444	0,64	0,39	1:1,5

[0800]

[Таблица 27]

Другое противоопухолевое средство: 5-Фторурацил, Линия клеток: NCI-N87
Соединение 1 (нМ)	Другое противоопухолевое средство (нМ)	Fa	CI	Отношение комбинированного применения (Соединение 1:другое противоопухолевое средство)
0,137	12346	0,41	0,56	1:90000
0,412	4115	0,30	0,55	1:10000
0,412	12346	0,39	0,60	1:30000
1,24	1372	0,22	0,49	1:1111
1,24	4115	0,34	0,34	1:3333
3,70	1372	0,31	0,74	1:370
3,70	4115	0,46	0,46	1:1111
3,70	12346	0,47	0,54	1:3333
3,70	37037	0,54	0,61	1:10000
3,70	111111	0,63	0,63	1:30000
3,70	333333	0174	0,38	1:90000
11,1	4115	0,63	0,63	1:370
11,1	12346	0,66	0,59	1:1111
11,1	37037	0,69	0,58	1:3333
11,1	111111	0,77	0,39	1:10000

[0801]

[Таблица 28]

Другое противоопухолевое средство: FdUrd, Линия клеток: NCI-N87
Соединение 1 (нМ)	Другое противоопухолевое средство (нМ)	Fa	CI	Отношение комбинированного применения (Соединение 1:другое противоопухолевое средство)
0,412	4115	0,25	0,39	1:10000
0,412	12346	0,30	0,46	1:30000
0,412	37037	0,41	0,63	1:90000
1,24	12346	0,33	0,58	1:10000
1,24	37037	0,39	0,70	1:30000
1,24	111111	0,54	0,39	1:90000
3,70	4115	0,39	0,82	1:1111
3,70	12346	0,47	0,58	1:3333
3,70	37037	0,56	0,41	1:10000
3,70	111111	0,57	0,60	1:30000
3,70	333333	0,62	0,47	1:90000
11,1	4115	0,61	0,79	1:370
11,1	12346	0,68	0,55	1:1111
11,1	37037	0,67	0,58	1:3333
11,1	111111	0,73	0,46	1:10000
11,1	333333	0,75	0,52	1:30000
11,1	1000000	0,79	0,31	1:90000
33,3	12346	0,80	0,76	1:370

[0802]

[Таблица 29]

Другое противоопухолевое средство: Паклитаксел, Линия клеток: KPL-4
Соединение 1 (нМ)	Другое противоопухолевое средство (нМ)	Fa	CI	Отношение комбинированного применения (Соединение 1:другое противоопухолевое средство)
68,6	0,00762	0,32	0,15	1:0,00011
68,6	0,0229	0,44	0,03	1:0,00033
206	0,617	0,33	0,50	1:0,0030
206	1,85	0,52	0,30	1:0,0090
617	1,85	0,54	0,31	1:0,0030
1852	1,85	0,55	0,36	1:0,0010
5556	1,85	0,57	0,48	1:0,00033
5556	5,56	0,78	0,44	1:0,0010
16667	1,85	0,66	0,38	1:0,00011
50000	1,85	0,86	0,13	1:0,000037

[0803]

[Таблица 30]

Другое противоопухолевое средство: Паклитаксел, Линия клеток: NCI-N87
Соединение 1 (нМ)	Другое противоопухолевое средство (нМ)	Fa	CI	Отношение комбинированного применения (Соединение 1:другое противоопухолевое средство)
1,24	5,56	0,50	0,45	1:4,5
3,70	1,85	0,41	0,84	1:0,50
3,70	5,56	0,64	0,42	1:1,5
3,70	16,7	0,71	0,55	1:4,5
11,1	0,206	0,69	0,58	1:0,019
11,1,	0,617	0,71	0,52	1:0,056
11,1	1,85	0,69	0,61	1:0,17
11,1	5,56	0,78	0,44	1:0,50

[0804]

[Таблица 31]

Другое противоопухолевое средство: Гемцитабин, Линия клеток: NCI-N87
Соединение 1 (нМ)	Другое противоопухолевое средство (нМ)	Fa	CI	Отношение комбинированного применения (Соединение 1:другое противоопухолевое средство)
0,137	1,37	0,69	0,03	1:10
0,137	4,12	0,68	0,37	1:30
0,137	12,3	0,73	0,01	1:90
0,41	4,12	0,68	0,21	1:10
0,41	12,3	0,69	0,23	1:30
0,41	37,0	0,71	0,02	1:90
1,24	1,37	0,70	0,07	1:1,1
1,24	4,12	0,71	0,06	1:3,3
1,24	12,3	0,77	0,04	1:10
1,24	37,0	0,73	0,05	1:30
1,24	111	0,72	0,05	1:90
3,70	1,37	0,75	0,15	1:0,37
3,70	4,12	0,77	0,12	1:1,1
3,70	12,3	0,80	0,10	1:3,3
3,70	37,0	0,78	0,11	1:10
3,70	111	0,78	0,11	1:30
3,70	333	0,77	0,12	1:90

[0805]

[Таблица 32]

Другое противоопухолевое средство: Цисплатин, Линия клеток: SK-BR-3
Соединение 1 (нМ)	Другое противоопухолевое средство (нМ)	Fa	CI	Отношение комбинированного применения (Соединение 1:другое противоопухолевое средство)
0,412	6185	0,50	0,86	1:15030
1,24	6185	0,55	0,84	1:5010
3,70	687	0,22	0,78	1:186
3,70	2062	0,37	0,79	1:557
3,70	6185	0,65	0,63	1:1670

[0806]

[Таблица 33]

Другое противоопухолевое средство: Цисплатин, Линия клеток: NCI-N87
Соединение 1 (нМ)	Другое противоопухолевое средство (нМ)	Fa	CI	Отношение комбинированного применения (Соединение 1:другое противоопухолевое средство)
0,137	2062	0,39	0,62	1:15030
0,412	2062	0,36	0,64	1:5010
0,412	6185	0,55	0,57	1:15030
1,24	6185	0,60	0,40	1:5010
1,24	18556	0,72	0,42	1:15030
3,70	2062	0,54	0,58	1:557
3,70	6185	0,67	0,38	1:1670
3,70	18556	0,75	0,42	1:5010
11,1	687	0,59	0,87	1:62
11,1	2062	0,64	0,71	1:186
11,1	6185	0,74	0,48	1:557
11,1	18556	0,77	0,50	1:1670
11,1	55667	0,79	0,90	1:5010
33,3	2062	0,80	0,73	1:62

[0807]

[Таблица 34]

Другое противоопухолевое средство: Трифлуридин, Линия клеток: NCI-N87
Соединение 1 (нМ)	Другое противоопухолевое средство (нМ)	Fa	CI	Отношение комбинированного применения (Соединение 1:другое противоопухолевое средство)
0,137	12346	0,43	0,137	1:90000
0,412	1372	0,26	0,412	1:3333
0,412	4115	0,26	0,412	1:10000
0,412	12346	0,41	0,412	1:30000
0,412	37037	0,54	0,412	1:90000
1,24	1372	0,24	1,24	1:1111
1,24	4115	0,31	1,24	1:3333
1,24	12346	0,48	1,24	1:10000
1,24	37037	0,55	1,24	1:30000
1,24	111111	0,59	1,24	1:90000
3,70	12346	0,57	3,70	1:3333
3,70	37037	0,61	3,70	1:10000
3,70	111111	0,67	3,70	1:30000
11,1	4115	0,69	11,1	1:370
11,1	12346	0,77	11,1	1:1111
11,1	37037	0,74	11,1	1:3333
11,1	111111	0,80	11,1	1:10000

[0808]

Эти результаты продемонстрировали, что комбинированное применение Соединения 1 с антиметаболитом 5-фтороурацилом, 5-фтор-2'-дезоксиуридином (FdUrd), гемцитабином или трифлуридином (трифтортимидином), лекарственным средством на основе платины цисплатином, лекарственным средством на основе алкалоида паклитакселом, ингибитором сигнального пути PI3K/AKT/mTOR AZD8055, эверолимусом, дактолизибом, бупарлизибом или таселизибом или ингибитором CDK4/6 палбоциклибом синергически, усиливает противоопухолевое действие.

Claims

1. Противоопухолевое средство, действующее в отношении злокачественной опухоли, связанной с активностью HER2, включающее (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-2,3-диметилфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамид или его фармацевтически приемлемую соль и другое противоопухолевое средство в комбинации, где другое противоопухолевое средство выбрано из группы, состоящей из 5-фторурацила (5-ФУ), 5-фтор-2'-дезоксиуридина (FdUrd), трифлуридина, гемцитабина, капецитабина, трастузумаба, трастузумаба эмтанзина, AZD8055, эверолимуса, дактолизиба, бупарлизиба, таселизиба, палбоциклиба, цисплатина и паклитаксела, и где (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-2,3-диметилфенил)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамид или его фармацевтически приемлемая соль содержится в количестве от 0,001 до 100 моль на 1 моль другого противоопухолевого средства.

2. Применение (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-2,3-диметилфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли для лечения злокачественной опухоли, связанной с активностью HER2, путем комбинированного введения с другим противоопухолевым средством, где другое противоопухолевое средство выбрано из группы, состоящей из 5-фторурацила (5-ФУ), 5-фтор-2'-дезоксиуридина (FdUrd), трифлуридина, гемцитабина, капецитабина, трастузумаба, трастузумаба эмтанзина, AZD8055, эверолимуса, дактолизиба, бупарлизиба, таселизиба, палбоциклиба, цисплатина и паклитаксела, и где (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-2,3-диметилфенил)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамид или его фармацевтически приемлемую соль вводят в количестве от 0,001 до 100 моль на 1 моль другого противоопухолевого средства.

3. Применение (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-2,3-диметилфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли для усиления противоопухолевого действия другого противоопухолевого средства в лечении злокачественной опухоли, связанной с активностью HER2, где другое противоопухолевое средство выбрано из группы, состоящей из 5-фторурацила (5-ФУ), 5-фтор-2'-дезоксиуридина (FdUrd), трифлуридина, гемцитабина, капецитабина, трастузумаба, трастузумаба эмтанзина, AZD8055, эверолимуса, дактолизиба, бупарлизиба, таселизиба, палбоциклиба, цисплатина и паклитаксела, и где (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(2-(диметиламино) -2-оксоэтил)-2,3-диметилфенил)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамид или его фармацевтически приемлемая соль применяется в количестве от 0,001 до 100 моль на 1 моль другого противоопухолевого средства.

4. Применение (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-2,3-диметилфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамид или его фармацевтически приемлемой соли для лечения злокачественной опухоли, связанной с активностью HER2, у пациента, которому вводят другое противоопухолевое средство, где другое противоопухолевое средство выбрано из группы, состоящей из 5-фторурацила (5-ФУ), 5-фтор-2'-дезоксиуридина (FdUrd), трифлуридина, гемцитабина, капецитабина, трастузумаба, трастузумаба эмтанзина, AZD8055, эверолимуса, дактолизиба, бупарлизиба, таселизиба, палбоциклиба, цисплатина и паклитаксела, и где (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(2-(диметиламино) -2-оксоэтил)-2,3-диметилфенил)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамид или его фармацевтически приемлемая соль применяется в количестве от 0,001 до 100 моль на 1 моль другого противоопухолевого средства.

5. Комбинация (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-2,3-диметилфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли и другого противоопухолевого средства, предназначенная для лечения злокачественной опухоли, связанной с активностью HER2, где другое противоопухолевое средство выбрано из группы, состоящей из 5-фторурацила (5-ФУ), 5-фтор-2'-дезоксиуридина (FdUrd), трифлуридина, гемцитабина, капецитабина, трастузумаба, трастузумаба эмтанзина, AZD8055, эверолимуса, дактолизиба, бупарлизиба, таселизиба, палбоциклиба, цисплатина и паклитаксела, и где (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(2-(диметиламино) -2-оксоэтил)-2,3-диметилфенил)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамид или его фармацевтически приемлемая соль применяется в количестве от 0,001 до 100 моль на 1 моль другого противоопухолевого средства.

6. Применение (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-2,3-диметилфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли в комбинации с другим противоопухолевым средством для получения противоопухолевого средства, действующего в отношении злокачественной опухоли, связанной с активностью HER2, где другое противоопухолевое средство выбрано из группы, состоящей из 5-фторурацила (5-ФУ), 5-фтор-2'-дезоксиуридина (FdUrd), трифлуридина, гемцитабина, капецитабина, трастузумаба, трастузумаба эмтанзина, AZD8055, эверолимуса, дактолизиба, бупарлизиба, таселизиба, палбоциклиба, цисплатина и паклитаксела, и где (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(2-(диметиламино) -2-оксоэтил)-2,3-диметилфенил)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамид или его фармацевтически приемлемая соль применяется в количестве от 0,001 до 100 моль на 1 моль другого противоопухолевого средства.

7. Применение (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-2,3-диметилфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли для получения средства, усиливающего противоопухолевое действие другого противоопухолевого средства в лечении злокачественной опухоли, связанной с активностью HER2, где другое противоопухолевое средство выбрано из группы, состоящей из 5-фторурацила (5-ФУ), 5-фтор-2'-дезоксиуридина (FdUrd), трифлуридина, гемцитабина, капецитабина, трастузумаба, трастузумаба эмтанзина, AZD8055, эверолимуса, дактолизиба, бупарлизиба, таселизиба, палбоциклиба, цисплатина и паклитаксела, и где (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(2-(диметиламино) -2-оксоэтил)-2,3-диметилфенил)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамид или его фармацевтически приемлемая соль применяется в количестве от 0,001 до 100 моль на 1 моль другого противоопухолевого средства.

8. Применение (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-2,3-диметилфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли для получения противоопухолевого средства для лечения пациента со злокачественной опухолью, связанной с активностью HER2, которому вводят другое противоопухолевое средство, где другое противоопухолевое средство выбрано из группы, состоящей из 5-фторурацила (5-ФУ), 5-фтор-2'-дезоксиуридина (FdUrd), трифлуридина, гемцитабина, капецитабина, трастузумаба, трастузумаба эмтанзина, AZD8055, эверолимуса, дактолизиба, бупарлизиба, таселизиба, палбоциклиба, цисплатина и паклитаксела, и где (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(2-(диметиламино) -2-оксоэтил)-2,3-диметилфенил)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамид или его фармацевтически приемлемая соль применяется в количестве от 0,001 до 100 моль на 1 моль другого противоопухолевого средства.

9. Применение (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-2,3-диметилфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли для получения противоопухолевого средства, действующего в отношении злокачественной опухоли, связанной с активностью HER2, включающего другое противоопухолевое средство в комбинации с ним, где другое противоопухолевое средство выбрано из группы, состоящей из 5-фторурацила (5-ФУ), 5-фтор-2'-дезоксиуридина (FdUrd), трифлуридина, гемцитабина, капецитабина, трастузумаба, трастузумаба эмтанзина, AZD8055, эверолимуса, дактолизиба, бупарлизиба, таселизиба, палбоциклиба, цисплатина и паклитаксела, и где (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(2-(диметиламино) -2-оксоэтил)-2,3-диметилфенил)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамид или его фармацевтически приемлемая соль применяется в количестве от 0,001 до 100 моль на 1 моль другого противоопухолевого средства.

10. Способ лечения злокачественной опухоли, связанной с активностью HER2, включающий комбинированное введение (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-2,3-диметилфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли и другого противоопухолевого средства нуждающемуся в этом субъекту, где другое противоопухолевое средство выбрано из группы, состоящей из 5-фторурацила (5-ФУ), 5-фтор-2'-дезоксиуридина (FdUrd), трифлуридина, гемцитабина, капецитабина, трастузумаба, трастузумаба эмтанзина, AZD8055, эверолимуса, дактолизиба, бупарлизиба, таселизиба, палбоциклиба, цисплатина и паклитаксела, и где (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(2-(диметиламино) -2-оксоэтил)-2,3-диметилфенил)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамид или его фармацевтически приемлемую соль вводят в количестве от 0,001 до 100 моль на 1 моль другого противоопухолевого средства.

11. Способ усиления противоопухолевого действия другого противоопухолевого средства в лечении злокачественной опухоли, связанной с активностью HER2, включающий введение (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-2,3-диметилфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли нуждающемуся в этом субъекту, где другое противоопухолевое средство выбрано из группы, состоящей из 5-фторурацила (5-ФУ), 5-фтор-2'-дезоксиуридина (FdUrd), трифлуридина, гемцитабина, капецитабина, трастузумаба, трастузумаба эмтанзина, AZD8055, эверолимуса, дактолизиба, бупарлизиба, таселизиба, палбоциклиба, цисплатина и паклитаксела, и где (R)-1-(1-акрилоилпиперидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(2-(диметиламино) -2-оксоэтил)-2,3-диметилфенил)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамид или его фармацевтически приемлемую соль вводят в количестве от 0,001 до 100 моль на 1 моль другого противоопухолевого средства.