RU2495688C1 - Method of treating cerebral ischemia in experiment - Google Patents
Method of treating cerebral ischemia in experiment Download PDFInfo
- Publication number
- RU2495688C1 RU2495688C1 RU2012112092/14A RU2012112092A RU2495688C1 RU 2495688 C1 RU2495688 C1 RU 2495688C1 RU 2012112092/14 A RU2012112092/14 A RU 2012112092/14A RU 2012112092 A RU2012112092 A RU 2012112092A RU 2495688 C1 RU2495688 C1 RU 2495688C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- cerebral ischemia
- hours
- erythropoietin
- dose
- experiment
- Prior art date
Links
- 201000006474 Brain Ischemia Diseases 0.000 title claims abstract description 19
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 19
- 206010008120 Cerebral ischaemia Diseases 0.000 title claims abstract description 17
- 206010008118 cerebral infarction Diseases 0.000 title claims abstract description 17
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 title claims description 20
- 102000003951 Erythropoietin Human genes 0.000 claims abstract description 11
- 108090000394 Erythropoietin Proteins 0.000 claims abstract description 11
- 229940105423 erythropoietin Drugs 0.000 claims abstract description 11
- OXCMYAYHXIHQOA-UHFFFAOYSA-N potassium;[2-butyl-5-chloro-3-[[4-[2-(1,2,4-triaza-3-azanidacyclopenta-1,4-dien-5-yl)phenyl]phenyl]methyl]imidazol-4-yl]methanol Chemical compound [K+].CCCCC1=NC(Cl)=C(CO)N1CC1=CC=C(C=2C(=CC=CC=2)C2=N[N-]N=N2)C=C1 OXCMYAYHXIHQOA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 11
- 230000009471 action Effects 0.000 claims abstract description 8
- 230000000302 ischemic effect Effects 0.000 claims abstract description 7
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 6
- 101000987586 Homo sapiens Eosinophil peroxidase Proteins 0.000 claims description 18
- 101000920686 Homo sapiens Erythropoietin Proteins 0.000 claims description 18
- 102000044890 human EPO Human genes 0.000 claims description 18
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 claims description 14
- 230000005855 radiation Effects 0.000 claims description 8
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 3
- 241000700159 Rattus Species 0.000 abstract description 16
- 239000007924 injection Substances 0.000 abstract description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 abstract description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract description 3
- 238000013459 approach Methods 0.000 abstract description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 2
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 abstract 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 20
- 208000028867 ischemia Diseases 0.000 description 15
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 14
- 231100000241 scar Toxicity 0.000 description 14
- 208000031513 cyst Diseases 0.000 description 7
- 206010029113 Neovascularisation Diseases 0.000 description 5
- 238000011161 development Methods 0.000 description 5
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 5
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 5
- 210000001168 carotid artery common Anatomy 0.000 description 4
- 208000030886 Traumatic Brain injury Diseases 0.000 description 3
- 210000001367 artery Anatomy 0.000 description 3
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 3
- 230000009529 traumatic brain injury Effects 0.000 description 3
- 206010011732 Cyst Diseases 0.000 description 2
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N Haematoxylin Chemical compound C12=CC(O)=C(O)C=C2CC2(O)C1C1=CC=C(O)C(O)=C1OC2 WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 2
- 230000036770 blood supply Effects 0.000 description 2
- 210000001715 carotid artery Anatomy 0.000 description 2
- 210000001652 frontal lobe Anatomy 0.000 description 2
- 230000003779 hair growth Effects 0.000 description 2
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 2
- 238000004088 simulation Methods 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 206010069729 Collateral circulation Diseases 0.000 description 1
- 102000006386 Myelin Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010083674 Myelin Proteins Proteins 0.000 description 1
- 206010028851 Necrosis Diseases 0.000 description 1
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 1
- 230000003872 anastomosis Effects 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 208000026106 cerebrovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 210000004720 cerebrum Anatomy 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 210000000275 circle of willis Anatomy 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000002845 discoloration Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 238000004043 dyeing Methods 0.000 description 1
- YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N eosin Chemical compound [Na+].OC(=O)C1=CC=CC=C1C1=C2C=C(Br)C(=O)C(Br)=C2OC2=C(Br)C(O)=C(Br)C=C21 YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 210000004013 groin Anatomy 0.000 description 1
- 230000000423 heterosexual effect Effects 0.000 description 1
- 210000003090 iliac artery Anatomy 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 208000023589 ischemic disease Diseases 0.000 description 1
- 238000002647 laser therapy Methods 0.000 description 1
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 1
- 210000001595 mastoid Anatomy 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 210000001767 medulla oblongata Anatomy 0.000 description 1
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004660 morphological change Effects 0.000 description 1
- 210000005012 myelin Anatomy 0.000 description 1
- 208000010125 myocardial infarction Diseases 0.000 description 1
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 1
- 238000010606 normalization Methods 0.000 description 1
- -1 polyethylene Polymers 0.000 description 1
- 229920000573 polyethylene Polymers 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000010349 pulsation Effects 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 1
- 210000003625 skull Anatomy 0.000 description 1
- 230000002123 temporal effect Effects 0.000 description 1
- 210000003478 temporal lobe Anatomy 0.000 description 1
- 238000011287 therapeutic dose Methods 0.000 description 1
- 210000000115 thoracic cavity Anatomy 0.000 description 1
- 210000003437 trachea Anatomy 0.000 description 1
- 230000001457 vasomotor Effects 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано для лечения смоделированной ишемии головного мозга биологического объекта.The invention relates to experimental medicine and can be used to treat a simulated brain ischemia of a biological object.
Цереброваскулярные заболевания ишемического генеза имеют тенденцию к росту, омоложению, сопряжены с тяжелым клиническим течением, высокими показателями инвалидности и смертности. Поиск новых подходов к терапии ишемии головного мозга является одной из актуальных проблем экспериментальной и клинической неврологии.Cerebrovascular diseases of ischemic origin tend to grow, rejuvenate, are associated with a severe clinical course, high rates of disability and mortality. The search for new approaches to the treatment of cerebral ischemia is one of the urgent problems of experimental and clinical neurology.
Решению медико-социальных проблем, возникающих в связи с распространенностью ишемических заболеваний головного мозга, способствует изучение механизмов лечения заболевания на различных экспериментальных моделях.The study of medical and social problems associated with the prevalence of ischemic diseases of the brain contributes to the study of the mechanisms of treatment of the disease in various experimental models.
Известен способ магнитолазерной терапии черепно-мозговой травмы, осуществляемый лазерными лучами с длиной волны 0,63 мкм и 0,89 мкм путем воздействия на лобную и височную доли с различными по глубине и площади проникновения лазерных лучей, далее на сонные артерии, паравертебрально на шейный отдел позвоночника, при этом лазерными лучами с длиной волны 0,89 мкм на частоте 80-1500 Гц, последовательно дважды изменяя глубину, используя сначала немагнитные зеркальные насадки с глубиной проникновения 2-4 см, а затем магнитные аксиальные насадки с глубиной проникновения 6-8 см и соответственно уменьшая площадь проникновения лучен контактно сканируют лобную долю, начиная от надбровных дуг до границы роста волос в течение 30-60 с, перемещают лучи и сканируют передневисочные области над скуловой костью вдоль границы роста волос и до ушных раковин в течение 30-60 с, с переходом лазерными лучами на точки пульсации сонных артерий на шее с двух сторон одновременно, удерживая контактно лазерные лучи с радиальными магнитными насадками с глубиной проникновения 4-6 см в этих точках в течение 2-4 мин, затем перемещают лазерные лучи с аксиальными магнитными насадками и паравертебрально сканируют в контактном режиме шейный отдел позвоночника на уровне С1-С7 позвонков в течение 2-4 мин, с последующим воздействием лазерными лучами с зеркальными насадками на область сосцевидных отростков с двух сторон одновременно контактно в течение 2-4 мин (см. патент RU №2156149, А61 N5/067, опубл. 20.09.2000 г.)A known method of magnetic laser therapy of traumatic brain injury, carried out by laser beams with a wavelength of 0.63 microns and 0.89 microns by exposure to the frontal and temporal lobes with different depths and areas of penetration of laser beams, then on the carotid arteries, paravertebral to the cervical spine, with laser beams with a wavelength of 0.89 microns at a frequency of 80-1500 Hz, successively changing the depth twice, using first non-magnetic mirror nozzles with a penetration depth of 2-4 cm, and then magnetic axial nozzles from depths penetration of 6-8 cm and, correspondingly, reducing the area of penetration, contact the frontal lobe, starting from the superciliary arches to the border of hair growth for 30-60 s, move the rays and scan the anterior temporal region above the zygomatic bone along the border of hair growth and to the auricles in for 30-60 s, with the laser beams moving to the pulsation points of the carotid arteries on the neck from two sides simultaneously, holding contact laser beams with radial magnetic nozzles with a penetration depth of 4-6 cm at these points for 2-4 minutes, then laser beams with axial magnetic nozzles are moved and the cervical spine is contact-paravertebrally scanned at the level of C1-C7 vertebrae for 2-4 minutes, followed by laser beams with specular nozzles on the area of the mastoid processes on both sides simultaneously contact for 2- 4 min (see RU patent No. 2156149, A61 N5 / 067, publ. September 20, 2000)
Задача, на решение которой направлен известный способ, является восстановление нормализации жизнедеятельности человека, утерянной в результате черепно-мозговой травмы, в максимально короткие сроки, снижение доз лекарственных препаратов, возможности широкого применения при лечении разной степени тяжести черепно-мозговой травмы в раннем периоде в условиях стационара, а также широкое использования метода в условиях поликлиники.The task to which the known method is directed is to restore normalization of human life, lost as a result of traumatic brain injury, as soon as possible, lower doses of drugs, the possibility of widespread use in the treatment of varying severity of traumatic brain injury in the early period under conditions hospital, as well as the widespread use of the method in a clinic.
Однако, известный способ достаточно сложен.However, the known method is quite complicated.
Известен способ лечения ишемии, в том числе и на экспериментальных объектах, выбранный в качестве ближайшего аналога, заключающийся во введении биологическому объекту терапевтической дозы эффективного количества эритропоэтина, где первую дозу эритропоэтина вводят после 6 часов после наступления случая ишемии, последующую вторую дозу эритропоэтина вводят в течение от 8 до 24 часов после первой дозы, третью дозу вводят в течение 20-60 часов после наступления случая ишемии и, где каждую вводимую дозу эритропоэтина выбирают из диапазона от 2500 до 5000 МЕ/кг (см. патент №2341284, М.кл. А61К 38/18; А61Р 9/10, опубл. 20.12.2008 г.).A known method of treating ischemia, including at experimental sites, selected as the closest analogue, which consists in administering to the biological subject a therapeutic dose of an effective amount of erythropoietin, where the first dose of erythropoietin is administered after 6 hours after the onset of ischemia, the subsequent second dose of erythropoietin is administered during from 8 to 24 hours after the first dose, the third dose is administered within 20-60 hours after the onset of ischemia, and where each administered dose of erythropoietin is selected from a range of 2500 about 5000 IU / kg (see patent №2341284, M.kl. A61K 38/18;. A61R 9/10, published on 20.12.2008.).
В известном способе используются разнообразные пути введения эритропоэтина, в частности, внутривенно, подкожно, внутримышечно или интраперитонеально.In the known method uses a variety of routes of administration of erythropoietin, in particular, intravenously, subcutaneously, intramuscularly or intraperitoneally.
Однако, как указывают сами создатели известного способа, ни время введения первой дозы рекомбинантного эритропоэтина человека - через 6 часов после наступления случая ишемии, ни его доза в количестве 5000 МЕ/кг, не способствует значительному уменьшению размера инфаркта и не приводят к увеличению функциональной оценки процесса восстановления субъекта после случая ишемии, данная оценка для указанной выше дозы и времени составляет 46%, что свидетельствует о недостаточной эффективности известного способа лечения.However, as the creators of the known method themselves indicate, neither the time of administration of the first dose of recombinant human erythropoietin - 6 hours after the onset of ischemia, nor its dose in the amount of 5000 IU / kg, does not significantly reduce the size of the heart attack and does not lead to an increase in the functional evaluation of the process recovery of the subject after a case of ischemia, this estimate for the above dose and time is 46%, which indicates the lack of effectiveness of the known method of treatment.
Таким образом, техническим результатом, на решение которого направлено заявляемое изобретение, является значительное повышение эффективности способа лечения ишемии головного мозга в эксперименте.Thus, the technical result, the solution of which the claimed invention is directed, is a significant increase in the effectiveness of the method of treating cerebral ischemia in the experiment.
Указанный технический результат достигается тем, что в способе лечения ишемии головного мозга в эксперименте, включающем трехкратное введение внутрибрюшинно рекомбинантного эритропоэтина, при котором второе и третье его введение осуществляют соответственно через 24 и 48 часов после действия, приведшего к возникновению ишемии головного мозга, при этом количество однократно вводимого рекомбинантного эритропоэтина человека составляет 5000 МЕ/кг, согласно изобретению, дополнительно, первую дозу данного препарата вводят через 3 часа после действия, приведшего к возникновению ишемии головного мозга и, дополнительно, через 30-60 минут после введения первой дозы рекомбинантного эритропоэтина человека осуществляют диффузное чрескожное облучение проекции головного мозга биологического объекта, в области локализации ишемии, инфракрасным лазерным излучением с длиной волны 970 нм мощностью 1 Вт, в течение 2-х минут с расстояния 2-3 см от поверхности.The specified technical result is achieved by the fact that in the method of treating cerebral ischemia in an experiment involving three times the intraperitoneal administration of recombinant erythropoietin, in which the second and third administration thereof is carried out 24 and 48 hours after the action that led to the occurrence of cerebral ischemia, once a single recombinant human erythropoietin is 5000 IU / kg, according to the invention, in addition, the first dose of this drug is administered 3 hours after d The action that led to the occurrence of cerebral ischemia and, additionally, 30-60 minutes after the first dose of recombinant human erythropoietin is administered, diffuse percutaneous irradiation of the brain projection of the biological object is carried out in the area of ischemia localization with infrared laser radiation with a wavelength of 970 nm and a power of 1 W , within 2 minutes from a distance of 2-3 cm from the surface.
Заявителем экспериментально установлено, что именно более ранний срок начала введения первой дозы рекомбинантного эритропоэтина человека, осуществление диффузного чрезкожного облучения очага ишемии в области его проекции на головном мозге крысы инфракрасным лазерным излучением позволяет в значительной степени повысить эффективность лечения ишемии головного мозга.The applicant has experimentally established that it is the earlier start date for the introduction of the first dose of recombinant human erythropoietin, the diffuse percutaneous irradiation of the ischemia focus in the area of its projection on the rat brain with infrared laser radiation, which can significantly increase the effectiveness of the treatment of brain ischemia.
При этом, заявителем экспериментально установлено, что наиболее предпочтительным сроком введения первой дозы рекомбинантного эритропоэтина человека являются срок через 3 часа после действия, приведшего к возникновению ишемии, а наиболее предпочтительными параметрами лазерного излучения при этом являются использование инфракрасного лазерного излучения с длиной волны 970 нм мощностью 1 Вт, и осуществление воздействия в течение 2-х минут с расстояния 2-3 см от поверхности.Moreover, the applicant experimentally established that the most preferred time for the introduction of the first dose of recombinant human erythropoietin is 3 hours after the action that led to the occurrence of ischemia, and the most preferred laser radiation parameters are the use of infrared laser radiation with a wavelength of 970 nm with a power of 1 W, and exposure for 2 minutes from a distance of 2-3 cm from the surface.
Способ осуществляется следующим образом.The method is as follows.
Эксперимент проводился на 75 беспородных разнополых половозрелых крысах весом 200 грамм. Животных содержали в условиях смешанного освещения, постоянного доступа к стандартному комбинированному корму и воде в индивидуальных клетках.The experiment was conducted on 75 purebred heterosexual sexually mature rats weighing 200 grams. Animals were kept under conditions of mixed lighting, constant access to standard combined feed and water in individual cages.
Моделирование ишемии головного мозга осуществляли по методике, которая заключается в следующем. Для получения ишемии в полушариях головного мозга одновременно производят воздействия двух родов: с одной стороны, выключают обе общие сонные артерии, а с другой - искусственно понижают общее артериальное давление до такого низкого уровня, когда сохраняется лишь минимальное кровоснабжение продолговатого мозга для поддержания деятельности вазомоторного и дыхательного центров, при этом коллатеральное кровообращение в мозге восстановиться не может. Операцию производят следующим образом. На шее разрез кожи делают по сагиттальной линии. В трахею вводят трахеотомическую трубку. Под обе общие сонные артерии подводят толстые шелковые нити, позволяющие в дальнейшем осуществлять их выключение. Для понижения общего артериального давления какая-либо крупная артерия должна быть соединена с системой компенсатора (Г.И. Мчедишвилли, 1968). С этой целью стеклянную или полиэтиленовую канюлю вводят в одну из общих сонных артерий в торакальном направлении после ее перевязки. Предварительное выключение одной из общих сонных артерий обычно не нарушает кровоснабжения мозга благодаря наличию широких анастомозов в области виллизиева круга. Канюля может быть введена и в одну из подвздошных артерий. Кожный разрез делают в области паха по ходу артерии с таким расчетом, чтобы все манипуляции на артерии были проведены экстраперитонеально.The simulation of cerebral ischemia was carried out according to the method, which consists in the following. In order to obtain ischemia in the cerebral hemispheres, two kinds of effects are simultaneously performed: on the one hand, they turn off both common carotid arteries, and on the other hand, they artificially lower the total blood pressure to such a low level that only minimal blood supply to the medulla oblongata is maintained to maintain vasomotor and respiratory activity centers, while collateral circulation in the brain cannot be restored. The operation is as follows. On the neck, a skin incision is made along the sagittal line. A tracheotomy tube is inserted into the trachea. Under both common carotid arteries, thick silk threads are brought in, allowing them to be turned off in the future. To lower the total blood pressure, any large artery must be connected to the compensator system (G.I. Mchedishvilli, 1968). For this purpose, a glass or polyethylene cannula is inserted into one of the common carotid arteries in the thoracic direction after its ligation. Preliminary shutdown of one of the common carotid arteries usually does not violate the blood supply to the brain due to the presence of wide anastomoses in the Willis circle. A cannula can also be inserted into one of the iliac arteries. A skin incision is made in the groin along the artery in such a way that all manipulations on the arteries are carried out extraperitoneally.
После моделирования ишемии головного мозга 70 животным (крысам) через 3 часа внутрибрюшинно вводили рекомбинантный эритропоэтин человека (ЭПОКРИН 2000 ME) из расчета 5000 ME на 1 кг животного по международному протоколу. Через 30-60 минут после первого введения рекомбинантного эритропоэтина человека проведено диффузное чрезкожное облучение очага ишемии в области его проекции на головном мозге крысы (область операции) инфракрасным лазером с длиной волны 970 нм, мощностью 1 Вт. Время экспозиции 2 минуты с расстояния 2-3 см от поверхности головы.After simulation of cerebral ischemia, 70 animals (rats) were injected intraperitoneally with recombinant human erythropoietin (EPOCRIN 2000 ME) 3 hours later at the rate of 5000 ME per 1 kg of animal according to the international protocol. 30-60 minutes after the first injection of recombinant human erythropoietin, diffuse percutaneous irradiation of the ischemic focus was performed in the area of its projection on the rat brain (operation area) with an infrared laser with a wavelength of 970 nm and a power of 1 W. The exposure time is 2 minutes from a distance of 2-3 cm from the surface of the head.
Введение рекомбинантного эритропоэтина человека проводили трехкратно каждому животному внутрибрюшинно через 3 часа, 24 часа и 48 часов после действия, приведшего к возникновению ишемии головного мозга (после моделирования ишемии в полушарии). Количество однократно вводимого рекомбинантного эритропоэтина человека составляет 5000 МЕ/кг.The introduction of recombinant human erythropoietin was performed three times intraperitoneally to each animal 3 hours, 24 hours and 48 hours after the action that led to the occurrence of cerebral ischemia (after modeling of hemisphere ischemia). The amount of recombinant human erythropoietin once administered is 5000 IU / kg.
Контрольную группу животных составляли животные, которым осуществлялось только трехкратное введение рекомбинаторного эритропоэтина по 1000 ME каждому животному внутрибрюшинно через 2-4 часа, 24 часа и 48 часов. Контрольной группе животных не осуществляли диффузное чрезкожное облучение очага ишемии в области его проекции на головном мозге крысы.The control group of animals consisted of animals that were administered only three times with the recombinant erythropoietin 1000 IU to each animal intraperitoneally after 2-4 hours, 24 hours and 48 hours. The control group of animals did not carry out diffuse percutaneous irradiation of the ischemic focus in the area of its projection on the rat brain.
Выведение животных из эксперимента осуществляли на 7-е, 14-е и 30-е сутки.The animals were removed from the experiment on the 7th, 14th and 30th days.
У животных, выведенных из эксперимента, вскрывалась полость черепа, головной мозг извлекался полностью. Выборка материалов осуществлялась с тщательным осмотром препаратов, проводился дополнительный контроль соответствия трепанационного отверстия в черепе относительно области воздействия на головной мозг, регистрировались изменение окраски, консистенция головного мозга, размеры его и очагов воздействия. Препараты маркировались и фиксировались в 10% растворе формалина.In animals withdrawn from the experiment, the cranial cavity was opened, the brain was completely removed. The selection of materials was carried out with a thorough examination of the preparations, an additional control of the correspondence of the trepanation hole in the skull with respect to the area of influence on the brain was carried out, discoloration, the consistency of the brain, its dimensions and foci of exposure were recorded. The preparations were labeled and fixed in a 10% formalin solution.
При макроскопическом исследовании делались параллельные фронтальные срезы головного мозга с последующей заливкой в парафин. С парафиновых блоков приготавливались серийные срезы, которые окрашивали гематоксилином и эозином для обзорной микроскопии. Для оценки изменения миелиновых волокон использовалась окраска по методу Бильшовского.A macroscopic examination made parallel frontal sections of the brain, followed by pouring it into paraffin. Serial sections were prepared from paraffin blocks, which were stained with hematoxylin and eosin for panoramic microscopy. To assess the change in myelin fibers, we used dyeing according to the Bilshovsky method.
Исследования проводились на микроскопе «Leica DMRXA» (Германия).The studies were carried out using a Leica DMRXA microscope (Germany).
Морфологическое исследование проводилось с помощью компьютерной программы анализа изображения «ДиаМорф Cito-W», Россия, Москва.The morphological study was carried out using the DiaMorf Cito-W image analysis software, Russia, Moscow.
Для объективизации параметров морфологических изменений, кроме описательных, использовались следующие счетные признаки:To objectify the parameters of morphological changes, in addition to descriptive ones, the following counting signs were used:
- размеры очага поражения (в мкм с пересчетом в мм);- the size of the lesion (in microns, in terms of mm);
- площадь очага в зоне воздействия (в мм2).- area of the focus in the affected area (in mm 2 ).
Статистическая обработка цифровых данных проводилась методом вариационной статистики с определением среднеквадратичного отклонения δ, средней ошибки сравниваемых величин M1, M2, коэффициента достоверности t и доверительной вероятности p с помощью программы Excel 8.0 из пакета Microsoft Office 97. Различия считали достоверными при p<0,05.Statistical processing of digital data was carried out by the method of variation statistics with the determination of the standard deviation δ, the average error of the compared values M1, M2, the confidence coefficient t and the confidence probability p using Excel 8.0 from Microsoft Office 97. The differences were considered significant at p <0.05.
В группе животных с моделью ишемии головного мозга с введением рекомбинантного эритропоэтина человека по стандартному протоколу и с накожным лазерным облучением инфракрасным лазером по протоколу отмечено образование глиомезенхимального рубца на 14 сутки с момента образования ишемии и образование кисты на 30 сутки.In a group of animals with a model of cerebral ischemia with the introduction of recombinant human erythropoietin according to the standard protocol and with cutaneous laser irradiation with an infrared laser, the formation of a gliomesenchymal scar on the 14th day after the formation of ischemia and the formation of a cyst on the 30th day were noted.
У контрольной группы животных отмечено образование глиомезенхимального рубца в области некроза на 7-е сутки с момента моделирования ишемии и образование кисты на 14 сутки.The control group of animals showed the formation of a gliomesenchymal scar in the area of necrosis on the 7th day after the modeling of ischemia and the formation of a cyst on the 14th day.
При совместном действии лазерного излучения с заявленными параметрами и введением рекомбинантного эритропоэтина человека, отмечено значительное уменьшение размера очага по сравнению с контрольной группой. Морфологически отмечено более интенсивное развитие неоангиогенеза в глиомезенхимальном рубце, несмотря на более длительное по времени формирование рубца.With the combined action of laser radiation with the declared parameters and the introduction of recombinant human erythropoietin, a significant decrease in the size of the lesion was noted compared with the control group. Morphologically, a more intensive development of neoangiogenesis in the gliomesenchymal scar was noted, despite the longer formation of the scar.
Пример 1. Биологический объект: крыса вес 210 грамм. Первую дозу рекомбинантного эритропоэтина человека в количестве 5000 МЕ/кг вводили внутрибрюшинно через 3 часа после начала моделирования ишемии. Вторую дозу вводят через 24 часа, третью - через 48 часов. Через 30 минут после первого введения рекомбинантного эритропоэтина человека осуществляли диффузное чрезкожное облучение очага ишемии в области его проекции на головного мозга крысы инфракрасным лазерным излучением. Режимы лазерного воздействия: длина волны 970 нм, мощность 1 Вт, экспозиция 2 минуты. Расстояние 2 см. Животное выведено из эксперимента через 7 суток. Образование глиомезенхимального рубца и кист не отмечено.Example 1. Biological object: rat weight 210 grams. The first dose of recombinant human erythropoietin in an amount of 5000 IU / kg was administered intraperitoneally 3 hours after the start of ischemia modeling. The second dose is administered after 24 hours, the third - after 48 hours. 30 minutes after the first administration of recombinant human erythropoietin, diffuse percutaneous irradiation of the ischemic focus was performed in the area of its projection onto the rat brain with infrared laser radiation. Laser exposure modes: wavelength 970 nm, power 1 W, exposure 2 minutes. A distance of 2 cm. The animal was removed from the experiment after 7 days. The formation of gliomesenchymal scar and cysts is not marked.
Пример 2. Биологический объект: крыса 200 гр. Описание эксперимента соответствует примеру №1. Животное выведено из эксперимента на 14 сутки. Отмечено образование рубцовой ткани.Example 2. Biological object: rat 200 gr. The description of the experiment corresponds to example No. 1. The animal was withdrawn from the experiment on day 14. The formation of scar tissue was noted.
Пример 3. Биологический объект: крыса 200 гр. Описание эксперимента соответствует примеру №1. Животное выведено из эксперимента на 30 сутки. Отмечено образование рубцовой ткани и кист.Example 3. Biological object: rat 200 gr. The description of the experiment corresponds to example No. 1. The animal was removed from the experiment on day 30. The formation of scar tissue and cysts was noted.
Отмечено уменьшение размера очага. Морфологически отмечено более интенсивное развитие неоангиогенеза в рубцовой ткани.A decrease in the size of the outbreak was noted. Morphologically noted a more intensive development of neoangiogenesis in scar tissue.
Пример 4. Биологический объект: крыса вес 212 грамм. Первую дозу рекомбинантного эритропоэтина человека в количестве 5000 МЕ/кг вводили внутрибрюшинно через 3 часа после начала моделирования ишемии. Вторую дозу вводят через 24 часа, третью - через 48 часов. Через 60 минут после первого введения рекомбинантного эритропоэтина человека осуществляли диффузное чрезкожное облучение очага ишемии в области его проекции на головном мозге крысы инфракрасным лазерным излучением. Режимы лазерного воздействия: длина волны 970 нм, мощность 1 Вт, экспозиция 2 минуты. Расстояние 3 см. Животное выведено из эксперимента через 7 сутки. Образование глиомезенхимального рубца и кист не отмечено.Example 4. Biological object: rat weight 212 grams. The first dose of recombinant human erythropoietin in an amount of 5000 IU / kg was administered intraperitoneally 3 hours after the start of ischemia modeling. The second dose is administered after 24 hours, the third - after 48 hours. 60 minutes after the first administration of recombinant human erythropoietin, diffuse percutaneous irradiation of the ischemic focus was performed in the area of its projection on the rat brain with infrared laser radiation. Laser exposure modes: wavelength 970 nm, power 1 W, exposure 2 minutes. A distance of 3 cm. The animal was removed from the experiment after 7 days. The formation of gliomesenchymal scar and cysts is not marked.
Пример 5. Биологический объект: крыса 200 гр. Описание эксперимента соответствует примеру №4. Животное выведено из эксперимента на 14 сутки. Отмечено образование глиомезенхимального рубца.Example 5. Biological object: rat 200 gr. The description of the experiment corresponds to example No. 4. The animal was withdrawn from the experiment on day 14. The formation of a gliomesenchymal scar was noted.
Пример 6. Биологический объект: крыса 200 гр. Описание эксперимента соответствует примеру №4. Животное выведено из эксперимента на 30 сутки. Отмечено образование кист. Отмечено уменьшение размера очага. Морфологически отмечено более интенсивное развитие неоангиогенеза в ткани глиомезенхимального рубца.Example 6. Biological object: rat 200 gr. The description of the experiment corresponds to example No. 4. The animal was removed from the experiment on day 30. The formation of cysts is noted. A decrease in the size of the outbreak was noted. Morphologically, a more intensive development of neoangiogenesis in the tissue of the gliomesenchymal scar was noted.
Пример 7. Контрольная группа. Биологический объект: крыса вес 210 грамм. Первую дозу рекомбинантного эритропоэтина человека в количестве 5000 МЕ/кг вводили внутрибрюшинно через 3 часа после начала моделирования ишемии. Вторую дозу вводят через 24 часа, третью - через 48 часов. Животное выведено из эксперимента 7 сутки. Отмечено образование рубцовой ткани. Размер очага по сравнению с основной группой практически не уменьшился. Морфологически отмечено слабое развитие неоангиогенеза в глиомезенхимальным рубце.Example 7. The control group. Biological object: rat weight 210 grams. The first dose of recombinant human erythropoietin in an amount of 5000 IU / kg was administered intraperitoneally 3 hours after the start of ischemia modeling. The second dose is administered after 24 hours, the third - after 48 hours. The animal was removed from the experiment for 7 days. The formation of scar tissue was noted. The size of the lesion in comparison with the main group practically did not decrease. Morphologically marked weak development of neoangiogenesis in the gliomesenchymal scar.
Пример 8. Контрольная группа. Биологический объект: крыса 200 гр. Описание эксперимента соответствует примеру №7. Животное выведено из эксперимента на 14 сутки. Отмечено образование кист. Размер очага по сравнению с основной группой уменьшился незначительно. Морфологически отмечено более слабое развитие неоангиогенеза в глиомезенхимальном рубце по сравнению с основной группой.Example 8. The control group. Biological object: rat 200 gr. The description of the experiment corresponds to example No. 7. The animal was withdrawn from the experiment on day 14. The formation of cysts is noted. The size of the focus compared with the main group decreased slightly. Morphologically noted a weaker development of neoangiogenesis in the gliomesenchymal scar compared with the main group.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2012112092/14A RU2495688C1 (en) | 2012-03-28 | 2012-03-28 | Method of treating cerebral ischemia in experiment |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2012112092/14A RU2495688C1 (en) | 2012-03-28 | 2012-03-28 | Method of treating cerebral ischemia in experiment |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2495688C1 true RU2495688C1 (en) | 2013-10-20 |
Family
ID=49357109
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2012112092/14A RU2495688C1 (en) | 2012-03-28 | 2012-03-28 | Method of treating cerebral ischemia in experiment |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2495688C1 (en) |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20050203595A1 (en) * | 1998-06-02 | 2005-09-15 | Amir Oron | Ischemia laser treatment |
| RU2275195C2 (en) * | 2003-06-19 | 2006-04-27 | Наталья Борисовна Кармен | Method for protecting brain against hypoxic ischemic injuries |
| US7345019B1 (en) * | 1999-04-13 | 2008-03-18 | The Kenneth S. Warren Institute, Inc. | Modulation of excitable tissue function by peripherally administered erythropoietin |
| RU2341284C2 (en) * | 2003-03-27 | 2008-12-20 | Янссен Фармацевтика Нв | Erythropoietin application for postinsult rehabilitation |
| JP2011079860A (en) * | 1998-12-14 | 2011-04-21 | Hannelore Ehrenreich | Method for treatment of cerebral ischaemia and use of erythropoietin or erythropoietin derivative for treatment of cerebral ischaemia |
-
2012
- 2012-03-28 RU RU2012112092/14A patent/RU2495688C1/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20050203595A1 (en) * | 1998-06-02 | 2005-09-15 | Amir Oron | Ischemia laser treatment |
| JP2011079860A (en) * | 1998-12-14 | 2011-04-21 | Hannelore Ehrenreich | Method for treatment of cerebral ischaemia and use of erythropoietin or erythropoietin derivative for treatment of cerebral ischaemia |
| US7345019B1 (en) * | 1999-04-13 | 2008-03-18 | The Kenneth S. Warren Institute, Inc. | Modulation of excitable tissue function by peripherally administered erythropoietin |
| RU2341284C2 (en) * | 2003-03-27 | 2008-12-20 | Янссен Фармацевтика Нв | Erythropoietin application for postinsult rehabilitation |
| RU2275195C2 (en) * | 2003-06-19 | 2006-04-27 | Наталья Борисовна Кармен | Method for protecting brain against hypoxic ischemic injuries |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| LI Y, et al. Erythropoietin-induced neurovascular protection, angiogenesis, and cerebral blood flow restoration after focal ischemia in mice. J Cereb Blood Flow Metab. 2007 May; 27(5):1043-54. * |
| БОЯДЖЯН В.Г. Протекторное действие низкоэнергетического He-Ne лазера на фосфолипидный спектр головного мозга при его ишемии и реперфузии. Нейрохимия, 1997, т.14, No.2, с.187-192. * |
| БОЯДЖЯН В.Г. Протекторное действие низкоэнергетического He-Ne лазера на фосфолипидный спектр головного мозга при его ишемии и реперфузии. Нейрохимия, 1997, т.14, №2, с.187-192. LI Y, et al. Erythropoietin-induced neurovascular protection, angiogenesis, and cerebral blood flow restoration after focal ischemia in mice. J Cereb Blood Flow Metab. 2007 May; 27(5):1043-54. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP2663281B1 (en) | Corneal delivery of cross-linking agents by iontophoresis for the treatment of keratoconus and related ophthalmic compositions | |
| RU2495688C1 (en) | Method of treating cerebral ischemia in experiment | |
| US20250367182A1 (en) | Method for inducing in-situ regeneration of mammal and use thereof | |
| RU2496513C1 (en) | Method of treating spinal ischemia in experiment | |
| RU2766527C1 (en) | Method for stimulating the cleansing function of the lymphatic system of the brain | |
| CN118317811A (en) | A nanosecond pulse electric field treatment method and nanosecond pulse electric field treatment device | |
| RU2766083C1 (en) | Biologically active substance in the form of a bioregulatory composition, exhibiting a supportive and restorative effect on tissues and organs, and pharmacological composition | |
| DYSON et al. | Biological effects of therapeutic ultrasound | |
| RU2399100C1 (en) | Method for simulating partial optic atrophy | |
| RU2651767C1 (en) | Method for the treatment of trigeminal neuralgia | |
| RU2701178C1 (en) | Method of accelerating corneal healing accompanying mechanical injuries | |
| RU2706715C1 (en) | Use of methylphenoxyacetate oxyethylammonium solution | |
| TWI898161B (en) | Use of isorhoifolin derivatives on regeneration of injured neurons | |
| JP2011506413A (en) | Methods for inhibiting scarring | |
| RU2836387C1 (en) | Method of treating facial skin pigmentation | |
| RU2700941C1 (en) | Method for preventing development of corneal opacity in case of mechanical injuries | |
| Zhong et al. | Allogeneic Whole Eye Transplantation in Macaques Achieves 19-Day Graft Survival With Structural and Functional Viability | |
| RU2700589C1 (en) | Method of accelerating corneal healing accompanying mechanical injuries | |
| RU2703302C1 (en) | Use of oxyethylammonium solution of methylphenoxyacetate | |
| US20110152189A1 (en) | Methods for the inhibition of scarring | |
| RU2141294C1 (en) | Method of treatment of eye front part affections | |
| RU2553577C2 (en) | Method for experimental in vivo simulation of cortical cataract | |
| RU2637622C1 (en) | Method for access to frontal bone during treatment of isolated damage of orbit roof, upper orbit border, forehead | |
| Xiaowei | Protocol for development and temporal in vivo imaging of RVO mouse models | |
| RU2677327C1 (en) | Composition for stimulation of reparative regeneration of epithelial, nerve and bone tissues |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20140329 |