[go: up one dir, main page]

RU2377990C1 - Antithrombotic agent affecting regulation of thrombocyte capacity - Google Patents

Antithrombotic agent affecting regulation of thrombocyte capacity Download PDF

Info

Publication number
RU2377990C1
RU2377990C1 RU2008129909/15A RU2008129909A RU2377990C1 RU 2377990 C1 RU2377990 C1 RU 2377990C1 RU 2008129909/15 A RU2008129909/15 A RU 2008129909/15A RU 2008129909 A RU2008129909 A RU 2008129909A RU 2377990 C1 RU2377990 C1 RU 2377990C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
ticlopidine
compound
antithrombotic
thrombocyte
capacity
Prior art date
Application number
RU2008129909/15A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Александр Алексеевич Спасов (RU)
Александр Алексеевич Спасов
Владимир Иванович Петров (RU)
Владимир Иванович Петров
Вера Алексеевна Анисимова (RU)
Вера Алексеевна Анисимова
Владимир Исаакович Минкин (RU)
Владимир Исаакович Минкин
Максим Валентинович Черников (RU)
Максим Валентинович Черников
Original Assignee
Федеральное Государственное Образовательное Учреждение Высшего Профессионального Образования "Южный Федеральный Университет"
Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Волгоградский государственный медицинский университет" (ГОУ ВПО ВолГМУ)
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Федеральное Государственное Образовательное Учреждение Высшего Профессионального Образования "Южный Федеральный Университет", Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Волгоградский государственный медицинский университет" (ГОУ ВПО ВолГМУ) filed Critical Федеральное Государственное Образовательное Учреждение Высшего Профессионального Образования "Южный Федеральный Университет"
Priority to RU2008129909/15A priority Critical patent/RU2377990C1/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2377990C1 publication Critical patent/RU2377990C1/en

Links

Landscapes

  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

FIELD: medicine.
SUBSTANCE: invention refers to chemical-pharmaceutical industry and concerns an agent expressing antithrombotic activity and containing an antagonist of purine R2U1-receptors, namely 2-(4-methoxyphenyl)-(9-morpholinoethyl)imidazo[1,2-a]benzimidazole dihydrochloride of formula
Figure 00000005
.
EFFECT: there is described antithrombotic agent affecting regulation of thrombocyte capacity.
3 tbl

Description

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и касается создания антитромботического средства, влияющего на регуляцию функциональной активности тромбоцитов.The invention relates to the pharmaceutical industry and the creation of an antithrombotic agent that affects the regulation of the functional activity of platelets.

Повышение функциональной активности тромбоцитов ведет к увеличению тромбогенного потенциала крови и может быть причиной тромбоэмболии сосудов головного мозга, легких, почек (Духанин А.С., Губаева Ф.Р. Фармакологическая регуляция активности тромбоцитов. Экспериментальная и клиническая фармакология, 1998, №4, с.66-71).An increase in the functional activity of platelets leads to an increase in the thrombogenic potential of the blood and can cause thromboembolism of the vessels of the brain, lungs, and kidneys (Dukhanin A.S., Gubaeva F.R. Pharmacological regulation of platelet activity. Experimental and Clinical Pharmacology, 1998, No. 4, p. .66-71).

Показано участие тромбоцитарного звена в патогенезе заболеваний, сопровождающихся диссеминированным внутрисосудистым свертыванием крови и атеросклерозом (Панченко Е.П. Концепция атеротромбоза - основа патогенеза сердечно-сосудистых заболеваний. Основные направления антитромботической терапии. Русский медицинский. журнал, 2005, том 13, №7, с.433-438; Ишемическая болезнь сердца, Лупанов В.П. Применение ацетилсалициловой кислоты с целью вторичной профилактики коронарной болезни сердца. Русский медицинский журнал, 2005, том 13, №15, с.1053-1056, диабетической ангиопатией, Балаболкин М.И. Диабетология, М., 2000, с.672.The participation of platelet link in the pathogenesis of diseases accompanied by disseminated intravascular coagulation and atherosclerosis (Panchenko E.P. The concept of atherothrombosis is the basis of the pathogenesis of cardiovascular diseases. The main directions of antithrombotic therapy. Russian medical journal, 2005, volume 13, No. 7, p. .433-438; Coronary heart disease, V. Lupanov. Use of acetylsalicylic acid for the secondary prevention of coronary heart disease. Russian Medical Journal, 2005, Volume 13, No. 15, pp. 1053-1056, diabetic eskoy angiopathy, Balabolkin M.I. Diabetology, M., 2000, p.672.

Исследованиями установлено, что на мембране тромбоцитов имеются три подтипа пуринорецепторов: P2X1, P2Y1 и P2Y12. P2Y1 - рецепторы играют ключевую роль в тромбообразовании и представляют собой мишень для создания препаратов для терапии ряда заболеваний, сопровождающихся увеличением тромбогенного потенцииала крови, Kunapuli S.P., Multiple P2 receptor subtypes on platelets: A new interpritation of their function. Trends Pharmacol. Sci., 1998, V.19, p 391-394.Studies have shown that there are three subtypes of purinoreceptors on the platelet membrane: P2X 1 , P2Y 1 and P2Y 12 . P2Y 1 receptors play a key role in thrombosis and represent a target for the development of drugs for the treatment of a number of diseases accompanied by an increase in blood thrombogenic potential, Kunapuli SP, Multiple P2 receptor subtypes on platelets: A new interpritation of their function. Trends Pharmacol. Sci., 1998, V.19, p 391-394.

В настоящее время в клинической практике отсутствуют препараты, действующие на P2Y1-рецепторы, однако однако используются блокаторы Р2У12-рецепторов, например тиклопидин, Регистр лекарственных средств, России, РЛС, Энциклопедия лекарств. Выпуск 15, Издательство: РЛС-2007, 2006, с.1488.Currently, there are no drugs in clinical practice that act on P2Y 1 receptors, but nevertheless, P2U 12 receptor blockers are used, for example ticlopidine, the Register of Medicines, Russia, the radar station, and the Encyclopedia of drugs. Issue 15, Publisher: RLS-2007, 2006, p.1488.

Тиклопидин имеет ряд побочных эффектов, а именно тромбо-цитопеническую пурпуру, лейкоцитоз, агранулоцитоз, Quinn M.J., Fitzgerald D.J. Ticlopidine and clopidogrel, Circulation, 1999, V.100, p.1667-1672; Matsuda N, Yoshihara A, Nishikata R, Matsuda T, Endo K, Yamamoto T.A, Case of ticlopidine-associated thrombotic thrombocytopenic purpura: special emphasis on diffusion weighted MRI, Rinsho Shinkeigaku, 2006, V.46, №10, Р.693-698, а это требует обязательного лабораторного контроля, поскольку указанные выше побочные эффекты представляют потенциальную угрозу для жизни больного.Ticlopidine has a number of side effects, namely thrombocytopenic purpura, leukocytosis, agranulocytosis, Quinn M.J., Fitzgerald D.J. Ticlopidine and clopidogrel, Circulation, 1999, V.100, p.1667-1672; Matsuda N, Yoshihara A, Nishikata R, Matsuda T, Endo K, Yamamoto TA, Case of ticlopidine-associated thrombotic thrombocytopenic purpura: special emphasis on diffusion weighted MRI, Rinsho Shinkeigaku, 2006, V.46, No. 10, P.693- 698, and this requires mandatory laboratory monitoring, since the above side effects pose a potential threat to the patient's life.

Кроме того, возможны желудочно-кишечные кровотечения, кожная сыпь, диарея, диспептические расстройства, тошнота, гастрит, нарушения функции печени, Yim H.B., Lieu P.K., Choo P.W. Ticlopidine induced cholestatic jaundice, Singapure Med. J., 1997, V.38, p.132-133; Skurnik Y.D. et al. Ticlopidine-induced cholestatic hepatitis, Ann. Pharmacother., 2003, V.37, p.371-375.In addition, gastrointestinal bleeding, skin rash, diarrhea, dyspeptic disorders, nausea, gastritis, liver dysfunction, Yim H.B., Lieu P.K., Choo P.W. are possible. Ticlopidine induced cholestatic jaundice, Singapure Med. J., 1997, V.38, p. 132-133; Skurnik Y.D. et al. Ticlopidine-induced cholestatic hepatitis, Ann. Pharmacother., 2003, V.37, p. 371-375.

Слабым местом препарата является также его фармакокинетика, а именно достаточно позднее развитие основного антитромбоцитарного действия, что связано с биотрансформацией исходного вещества в печени с участием цитохрома С450 до активных метаболитов, Yoneda К, Iwamura R, Kishi H, Mizukami Y, Mogami К, Kobayashi S., Identification of the active metabolite of ticlopidine from rat in vitro me-tabolites, Br. J. Pharmacol, 2004, V.142, №3, p.551-557.The weak point of the drug is its pharmacokinetics, namely, the rather late development of the main antiplatelet effect, which is associated with the biotransformation of the starting substance in the liver with the participation of cytochrome C450 to active metabolites, Yoneda K, Iwamura R, Kishi H, Mizukami Y, Mogami K, Kobayashi S ., Identification of the active metabolite of ticlopidine from rat in vitro me-tabolites, Br. J. Pharmacol, 2004, V.142, No. 3, p. 511-557.

Задачей изобретения является получение антитромботического средства, влияющего на регуляцию функциональной активности тромбоцитов, лишенных недостатков используемых в настоящее время препаратов.The objective of the invention is to obtain an antithrombotic agent that affects the regulation of the functional activity of platelets, devoid of the disadvantages of the currently used drugs.

Поставленная задача достигается тем, что антитромботическое средство, влияющее на регуляцию функциональной активности тромбоцитов, содержит антагонист пуриновых P2Y1 рецепторов в виде дигидрохлорида 2-(4-метоксифенил)-(9-морфолиноэтил)имидазо[1,2-а]бензимидазола формулы I:This object is achieved in that the antithrombotic agent that affects the regulation of the functional activity of platelets contains an antagonist of purine P2Y 1 receptors in the form of 2- (4-methoxyphenyl) - (9-morpholinoethyl) imidazo [1,2-a] benzimidazole dihydrochloride of formula I:

Figure 00000001
Figure 00000001

обладающий антитромботической активностью.possessing antithrombotic activity.

Вышеупомянутый антагонист пуриновых P2Y1 - рецепторов является представителем ряда соединений 2,9-дизамещенных имида-зо[1,2-а]бензимидазола, у которого была выявлена способность ингибировать ФДЭ ЦАМФ и снижать возбудимость предсердий, В.А.Анисимова, А.А.Спасов, В.А.Косолапов, А.Ф.Кучерявенко, О.В.Островский, Н.П.Ларионов, Р.Е. Либинзон. Фармакологическая активность, 2-метоксифенилзамещенных-9-диалкиламиноэтил-имидазо[1,2-а]-бензимидазолов, Химико - фарм. журнал, 2005, т.39, №9, с.26-32.The aforementioned purine P2Y 1 receptor antagonist is a representative of a number of compounds of 2,9-disubstituted imidazo [1,2-a] benzimidazole, which has been shown to inhibit PDE-CAMP and reduce the excitability of atria, V.A. Anisimova, A.A. .Spasov, V.A. Kosolapov, A.F. Kucheryavenko, O.V. Ostrovsky, N.P. Larionov, R.E. Libinson Pharmacological activity, 2-methoxyphenyl-substituted-9-dialkylaminoethyl-imidazo [1,2-a] benzimidazoles, Chemical and Pharm. Journal, 2005, vol. 39, No. 9, p. 26-32.

Синтез вышеупомянутого антагониста пуриновых P2Y1 рецепторов заключается во взаимодействии 1-морфолиноэтил-2-аминобензимидазола с 4-метоксифенацилбромидом и дальнейшей термической циклизации образующегося при этом бромида 1-морфолиноэтил-2-амино-3-(4-метоксифенацил)бензимидазолия в трициклическое основание I, которое переводят обычными способами в дигидрохлорид IThe synthesis of the aforementioned purine P2Y 1 receptor antagonist consists in the reaction of 1-morpholinoethyl-2-aminobenzimidazole with 4-methoxyphenacyl bromide and further thermal cyclization of the resulting 1-morpholinoethyl-2-amino-3- (4-methoxyphenacyl) benzimidazole bromide which is converted by conventional means into dihydrochloride I

Figure 00000002
Figure 00000002

МЕТОДИКА СИНТЕЗА СОЕДИНЕНИЯ I:COMPOUND SYNTHESIS METHOD I:

Дигидрохлорид-2-(4-метоксифенил)-9-морфолино-этилимидазо[1,2-а]-бензимидазола (I). В раствор 2,46 г (10 ммоль) 1-морфоли-ноэтил-2-аминобензимидазола в 140 мл ацетона, приготовленный при нагревании до кипения, вносят 2,3 г (~10 ммоль) 4-метоксифенацилбромида, полученного бромированием 4-метоксиа-цетофенона бромом в ЕtOН или 2-РrOН, Хим.-фарм. журнал, 2005, т.39. №9, с.27.Dihydrochloride-2- (4-methoxyphenyl) -9-morpholino-ethylimidazo [1,2-a] benzimidazole (I). To a solution of 2.46 g (10 mmol) of 1-morpholinoethyl-2-aminobenzimidazole in 140 ml of acetone prepared by heating to boiling, 2.3 g (~ 10 mmol) of 4-methoxyphenacyl bromide obtained by bromination of 4-methoxy cetophenone bromine in EtOH or 2-PrON, Chemical Pharm. Journal 2005, vol. 39. No. 9, p.27.

Смесь тщательно перемешивают, полученный раствор нагревают до кипения и реакционную массу оставляют стоять при комнатной температуре на 3-4 часа или кипятят при перемешивании 1 час. Выпавший осадок бромида 1-морфолиноэтил-2-амино-3-(4-метокси-The mixture is thoroughly mixed, the resulting solution is heated to boiling and the reaction mass is left to stand at room temperature for 3-4 hours or boiled with stirring for 1 hour. Precipitated precipitate of 1-morpholinoethyl-2-amino-3- (4-methoxy-

менацил)бензимидазолия отфильтровывают, промывают ацетоном, сушат на воздухе и вводят в реакцию циклизации без дополнительной очистки. Выход 4,5-4,6 г (94,3-96,8%). Т.пл. 199-200°С (разложение).menacyl) benzimidazolium is filtered off, washed with acetone, dried in air and introduced into the cyclization reaction without further purification. Yield 4.5-4.6 g (94.3-96.8%). Mp 199-200 ° C (decomposition).

Найдено, %: С 55,5; Н 5,8; Вг 16,5; N 12,0.Found,%: C 55.5; H 5.8; Wh 16.5; N, 12.0.

[C22H27N4O3]+Br-.[C 22 H 27 N 4 O 3 ] + Br - .

Вычислено, %: С 55,6; Н 5,7; Вг 16,8; N 11,8.Calculated,%: C 55.6; H 5.7; Br 16.8; N, 11.8.

ИК-спектр, λmах, см-1 1660 (C=N), 1680 (C=O), 3205,3340 (NH2).IR spectrum, λ max , cm -1 1660 (C = N), 1680 (C = O), 3205.3340 (NH 2 ).

Кипятят 4,76 г (10 ммоль) полученной четвертичной соли в 120 мл воды до полного протекания реакции (2-3 часа, контроль - ТСХ). Раствор охлаждают, подщелачивают 22%-ным водным раствором аммиака и выделившееся трициклическое основание - 2-(4-метоксифенил)-9-морфолиноэтил)имидазо [1,2-а] бензимидазол экстрагируют хлороформом. Экстракт упаривают до небольшого объема (-15 мл) и пропускают через слой Аl2О3, элюируя продукт циклизации хлороформом. В остатке после испарения последнего из элюата получают белые кристаллы с т.пл 110°С. Их далее используют для получения соли, но в случае необходимости перекристаллизовывают из СН3СN. Выход 92,8-94,5%.4.76 g (10 mmol) of the obtained quaternary salt are boiled in 120 ml of water until the reaction is complete (2-3 hours, control by TLC). The solution was cooled, alkalized with 22% aqueous ammonia and the liberated tricyclic base - 2- (4-methoxyphenyl) -9-morpholinoethyl) imidazo [1,2-a] benzimidazole was extracted with chloroform. The extract was evaporated to a small volume (-15 ml) and passed through an Al 2 O 3 layer, eluting with the chloroform cyclization product. In the residue after evaporation of the latter from the eluate, white crystals are obtained with a melting point of 110 ° C. They are then used to obtain salt, but, if necessary, recrystallized from CH 3 CN. Yield 92.8-94.5%.

Найдено, %: С 70,0; Н 6,4; N 15,0.Found,%: C 70.0; H 6.4; N, 15.0.

C22H24N4O2.C 22 H 24 N 4 O 2 .

Вычислено, %: С 70,2; Н 6,4; N14,9.Calculated,%: C 70.2; H 6.4; N14.9.

ИК-спектр, λmах, см-1:1510, 1605 (С=С), 1615 (C=N).IR spectrum, λ max , cm -1 : 1510, 1605 (С = С), 1615 (C = N).

Раствор трициклического основания в ацетоне подкисляют конц. НСl или насыщенным раствором НСl в 2-РrОН до рН 2-3. Выпавшие белоснежные или слегка розоватые кристаллы дигидрохлорида I через час отфильтровывают, промывают ацетоном, перекристаллизовывают из 90%-ного водного этанола и сушат при 105-110°С. Т.пл. 260-261°С (разложение).A solution of the tricyclic base in acetone is acidified with conc. HCl or a saturated solution of Hcl in 2-PrON to pH 2-3. Precipitated white or slightly pinkish crystals of dihydrochloride I are filtered off after an hour, washed with acetone, recrystallized from 90% aqueous ethanol and dried at 105-110 ° C. Mp 260-261 ° C (decomposition).

Найдено, %: С 58,9; Н 6,0; С1 15,5; N 12,7.Found,%: C 58.9; H 6.0; C1 15.5; N, 12.7.

C22H24N4O2·2 НС1.C 22 H 24 N 4 O 2 · 2 HC1.

Вычислено, %: С 58,8; Н 5,8; С1 15,8; N12,6.Calculated,%: C 58.8; H 5.8; C1 15.8; N12.6.

ИК-спектр, λmах, см-1: 1660 (C=N), 2360-2650 (широкая полоса N+TH).IR spectrum, λ max , cm -1 : 1660 (C = N), 2360-2650 (wide band N + TH).

Спектр 1H-ЯMP(HMCO-d6 - CCl4), δ, м.д.: 3,46 (ушир.с, 4Н, N(CH2)2), 3,72 (т, 2Н, CH2N), 3,85 (с, 3Н, ОСН3), 3,94 (т, 4Н, (СН2)2O), 5,23 (т, 2Н, NCH2), 7,02 (д, 2Н, 2′,6′-Н), 7,40-7,57 (дт, 2Н, 6,7-Н), 7,95 (м, 3Н, 3′,5′-Н, 5-Н), 8,13 (д, 1Н, 8-Н), 8,44 (с, 1Н, 3-Н), H+ в обмене.Spectrum 1 H-NMR (HMCO-d 6 - CCl 4 ), δ, ppm: 3.46 (br s, 4H, N (CH 2 ) 2 ), 3.72 (t, 2H, CH 2 N), 3.85 (s, 3H, OCH 3 ), 3.94 (t, 4H, (CH 2 ) 2 O), 5.23 (t, 2H, NCH 2 ), 7.02 (d, 2H , 2 ′, 6′-H), 7.40-7.57 (dt, 2H, 6.7-H), 7.95 (m, 3H, 3 ′, 5′-H, 5-H), 8.13 (d, 1H, 8-H), 8.44 (s, 1H, 3-H), H + in exchange.

Синтез соединения I можно проводить без выделения продукта взаимодействия 1-морфолиноэтил-2-аминобензимидазола с 4-метокси-фенацилбромидом. Для этого после протекания реакции кватернизации ацетон из реакционной массы упаривают досуха, к остатку приливают воду, кипятят смесь до полной циклизации бромида в производное имидазо[1,2-а]бензимидазола и дальше выделение искомого соединения I проводят, как описано выше.The synthesis of compound I can be carried out without isolating the product of the interaction of 1-morpholinoethyl-2-aminobenzimidazole with 4-methoxy-phenacyl bromide. For this, after the quaternization reaction proceeds, acetone from the reaction mass is evaporated to dryness, water is added to the residue, the mixture is boiled until the bromide is completely cyclized to the imidazo [1,2-a] benzimidazole derivative, and the further isolation of the desired compound I is carried out as described above.

ФАРМАКОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА СОЕДИНЕНИЯ I.PHARMACOLOGICAL PROPERTIES OF COMPOUND I.

А. Р2Y1-Антагонистическая активность соединения I на тромбоцитах in vitro.A. P2Y 1 - Antagonistic activity of compound I on platelets in vitro.

Влияние соединения I на пуриновые рецепторы тромбоцитов изучали с использованием метода малоуглового светорассеяния, Сакаев М.Р., Миндукшев И.В., Лесиовская Е.Е. и др. Оценка эффективности действия пуриновых нуклеотидов на Р2-рецепторы тромбоцитов методом малоуглового светорассеяния, Экспериментальная и клиническая фармакология, 2000, №.3, С.65-69.The effect of compound I on purine platelet receptors was studied using the small-angle light scattering method, Sakaev MR, Mindukshev IV, Lesiovskaya E.E. et al. Evaluation of the effectiveness of the action of purine nucleotides on platelet P2 receptors by small angle light scattering, Experimental and Clinical Pharmacology, 2000, No. 3, P.65-69.

Эксперименты проводили на лазерном анализаторе малоуглового светорассеяния «Лайт-скан» («Люмекс ЛТД», Россия) в солевой среде, содержащей 140 мМ NaCl; 10 мМ трис-HCl буфера; 5 мМ ЭДТА (рН 7, 8), с разбавлением плазмы, обогащенной тромбоцитами (концентрация тромбоцитов не превышала 107 клеток/мл). Для экспериментов взята плазма 6 кроликов породы «Шиншилла» массой 4-4,5 кг. В качестве индукторов активации тромбоцитов использовали динатриевую соль аденозин-5-дифосфорной кислоты (АДФ) («Реанал», Венгрия) в концентрации 70 нМ и селективный агонист P2Y1-рецепторов 2-метилтио-АТФ («Sigma», США) в концентрации 3 нМ. В качестве препарата сравнения использовали тиклопидин (Тиклид, "Sanofi-syntelabo", Франция).The experiments were performed on a Light-Scan small-angle light scattering laser analyzer (Lumex LTD, Russia) in a salt medium containing 140 mM NaCl; 10 mM Tris-HCl buffer; 5 mM EDTA (pH 7, 8), with dilution of platelet-rich plasma (platelet concentration did not exceed 10 7 cells / ml). For experiments, the plasma of 6 rabbits of the Chinchilla breed weighing 4-4.5 kg was taken. Platelet activation inducers were adenosine 5-diphosphoric acid disodium salt (ADP) (Reanal, Hungary) at a concentration of 70 nM and a selective 2-methylthio-ATP P2Y 1 receptor agonist (Sigma, USA) at a concentration of 3 nM. As a comparison drug used ticlopidine (Tiklid, "Sanofi-syntelabo", France).

Статистическую обработку результатов экспериментов производили в пакете прикладных программ «Statistika 6.0» с использованием парного критерия Стьюдента при предварительной проверке выборки на нормальность распределения.Statistical processing of the experimental results was performed in the Statistika 6.0 application package using the paired Student criterion during preliminary testing of the sample for normal distribution.

Соединение I в концентрации 10-6 М достоверно подавляло АДФ-индуцированную активацию тромбоцитов в безкальциевой среде на -29,4±2,6%, в то время как тиклопидин не продемонстрировал ингибирующей активности.Compound I at a concentration of 10 -6 M significantly inhibited ADP-induced platelet activation in calcium-free medium by -29.4 ± 2.6%, while ticlopidine did not show inhibitory activity.

При использовании в качестве индуктора активации тромбоцитов селективного P2Y1-агониста 2-метилтио-АТФ соединение I в концентрациях 10-4-10-5 М выражено подавляло активацию тромбоцитов (табл.1) в отличие от тиклопидина, показавшего статистически не значимый эффект.When using the selective P2Y 1 agonist 2-methylthio-ATP as a platelet activation inducer, compound I at concentrations of 10 -4 -10 -5 M markedly suppressed platelet activation (Table 1), in contrast to ticlopidine, which showed a statistically insignificant effect.

Б. Антитромботические свойства соединения I.B. Antithrombotic properties of compound I.

Антитромботическую активность соединения на модели артериального тромбоза, индуцированного поверхностной аппликацией 50% раствора хлорида железа (III), Kurz K.D., Main B.W., Sandusky G.E. Rat model of arterial thrombosis induced by ferric chloride. Thromb. Res., 1990, V.15, P.269-280, оценивали по времени, необходимом для достижения 50%-ного уровня кровотока, времени полной окклюзии сонной артерии, а также по средней объемной и средней линейной скорости артериального кровотока.Antithrombotic activity of a compound in a model of arterial thrombosis induced by surface application of a 50% solution of iron (III) chloride, Kurz K.D., Main B.W., Sandusky G.E. Rat model of arterial thrombosis induced by ferric chloride. Thromb. Res., 1990, V.15, P.269-280, was evaluated by the time required to achieve a 50% blood flow level, the time of complete occlusion of the carotid artery, and also by the average volumetric and average linear velocity of arterial blood flow.

Эффективность соединений на модели артериального тромбоза, индуцированного постоянным электрическим током (12В, 50 мА), uglielmi G. et al. Electrothrombosis of saccular aneurysms via endovascular approach. Part 1: Electrochemical basis, technique, and experimental results. J. Neurosurg., 1991, V.75, P.1-7), оценивали по интервалу времени от момента начала стимуляции до полной окклюзии каротидной артерии.The efficacy of compounds in a model of arterial thrombosis induced by direct electric current (12V, 50 mA), uglielmi G. et al. Electrothrombosis of saccular aneurysms via endovascular approach. Part 1: Electrochemical basis, technique, and experimental results. J. Neurosurg., 1991, V.75, P.1-7), was evaluated by the time interval from the moment of initiation of stimulation to complete occlusion of the carotid artery.

Моделирование генерализованного тромбоза (DiMinno G., Silver M.J.Mouse antithrombotic assay: a simple method for the evaluation of antithrombotic agents in vivo. Potentiation of antithrombotic activity by ethyl alcohol, J. Pharmacol. Exp.Ther., 1983, V.225, P.57-60) проводили введением смеси растворов коллагена и адреналина (0,5 мг/кг и 0,06 мг/кг, соответственно) в хвостовую вену мышей. Критерием эффективности исследуемых соединений служило количество выживших животных по сравнению с контрольной группой и наличие тромбов в сосудах легких.Modeling Generalized Thrombosis (DiMinno G., Silver MJMouse antithrombotic assay: a simple method for the evaluation of antithrombotic agents in vivo. Potentiation of antithrombotic activity by ethyl alcohol, J. Pharmacol. Exp. Ter., 1983, V.225, P .57-60) was carried out by introducing a mixture of collagen and adrenaline solutions (0.5 mg / kg and 0.06 mg / kg, respectively) into the tail vein of mice. The criterion for the effectiveness of the studied compounds was the number of surviving animals compared with the control group and the presence of blood clots in the lung vessels.

Исследуемое соединение I и препарат сравнения тиклопидин (Тиклид, "Sanofi-syntelabo", Франция) вводили перорально в дозе, эквимоляльной 6 мг/кг тиклопидина, за 2 часа до моделирования тромбоза. Воспроизведение моделей артериальных тромбозов проводили под нембуталовым (35 мг/кг) наркозом с регистрацией уровня кровотока с помощью ультразвукового доплерографа «Минимакс-Доплер-К» («СП Минимакс», С.-Петербург, Россия).Test compound I and the ticlopidine reference drug (Ticlid, Sanofi-syntelabo, France) were administered orally at a dose equimolar to 6 mg / kg of ticlopidine 2 hours before thrombosis modeling. Reproduction of models of arterial thrombosis was performed under nembutal (35 mg / kg) anesthesia with the registration of blood flow using an ultrasound dopplerograph “Minimax-Doppler-K” (“SP Minimaks”, St. Petersburg, Russia).

Антитромботическую активность изучали на 40 половозрелых нелинейных белых крысах-самцах массой 330-440 г. Для моделирования генерализованного тромбоза использовали 35 белых нелинейных мышей-самцов массой 20-26 г.Antithrombotic activity was studied in 40 sexually mature non-linear white male rats weighing 330-440 g. To simulate generalized thrombosis, 35 white non-linear male mice weighing 20-26 g were used.

Статистическую обработку результатов экспериментов производили в пакете прикладных программ «Statistika 6.0» с использованием критерия Манна-Уитни, ANOVA (Newman-Keuls test) и точного критерия Фишера.Statistical processing of the experimental results was carried out in the Statistika 6.0 application package using the Mann-Whitney test, ANOVA (Newman-Keuls test) and the Fisher exact test.

Установлено, что в группе крыс, получивших соединение I, за время действия нембуталового наркоза (2,5 часа) не происходит не только полной окклюзии сосуда, но и снижения уровня кровотока до 50% по сравнению с исходными показателями (табл.2). В группе крыс, получивших тиклопидин, время достижения 50%-ного уровня кровотока составляет 29 мин, и к 42 минуте после начала воздействия повреждающего фактора наблюдается полная окклюзия (табл.2). Таким образом, соединение I проявляет выраженные антитромботические свойства и превосходит тиклопидин.It was found that in the group of rats treated with compound I, during the course of the action of nembutal anesthesia (2.5 hours), not only complete vessel occlusion does not occur, but also a decrease in blood flow to 50% compared with the initial values (Table 2). In the group of rats treated with ticlopidine, the time to reach the 50% level of blood flow is 29 minutes, and by the 42th minute after the onset of exposure to the damaging factor, complete occlusion is observed (Table 2). Thus, compound I exhibits pronounced antithrombotic properties and is superior to ticlopidine.

На модели артериального тромбоза, индуцированного электрическим током, соединение I, введенное перорально однократно в дозе, эквимоляльной 6 мг/кг тиклопидина, достоверно увеличивает время кровотока, превосходя при этом тиклопидин в 2,4 раза (табл.3).In the model of arterial thrombosis induced by electric current, compound I, administered orally once in a dose equimolar to 6 mg / kg of ticlopidine, significantly increases the blood flow time, exceeding ticlopidine by 2.4 times (Table 3).

При изучении генерализованного коллаген-адреналинового тромбоза соединение I и тиклопидин, введенные перорально за 2 часа до моделирования тромбоза, в разной степени уменьшали гибель животных. Выживаемость в контроле составляла 6,3%. Соединение I достоверно уменьшало гибель мышей по сравнению с контролем, при этом выживаемость составила 70,0%. В экспериментальной группе, получивших тиклопидин, выживаемость достоверно не отличалась от контрольной группы и составила 30,0%.When studying generalized collagen-adrenaline thrombosis, compound I and ticlopidine, administered orally 2 hours before the simulation of thrombosis, reduced the death of animals to varying degrees. Survival in the control was 6.3%. Compound I significantly reduced the death of mice compared to control, while the survival rate was 70.0%. In the experimental group receiving ticlopidine, survival did not significantly differ from the control group and amounted to 30.0%.

Таким образом, выживаемость животных в группе, получавших соединение I, в 2,3 раза превышала таковую в группе, получавших тиклопидин.Thus, the survival rate of animals in the group treated with compound I was 2.3 times higher than that in the group treated with ticlopidine.

ОСТРАЯ ТОКСИЧНОСТЬ СОЕДИНЕНИЯ I.ACUTE TOXICITY OF COMPOUND I.

Исследование острой токсичности проводили на белых нелинейных мышах-самцах массой 20-22 грамма при внутрибрюшинном введении. Гибель животных регистрировали в течение двух недель. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. Под общей редакцией члена-корреспондента РАМН, профессора Р.У.Хабриева. - 2-изд., перераб. и доп. - М.: ОАО Издательство «Медицина», 2005, с.170-204. Величину токсикологического показателя - LD50 рассчитывали по методу Личфилда-Вилкоксона. По результатам изучения острой токсичности показатель The study of acute toxicity was carried out on white nonlinear male mice weighing 20-22 grams with intraperitoneal administration. The death of animals was recorded within two weeks. Guidelines for the experimental (preclinical) study of new pharmacological substances. Under the general editorship of the corresponding member of RAMS, Professor R.U. Khabriev. - 2-ed., Revised. and add. - M.: Publishing House "Medicine", 2005, p.170-204. The value of the toxicological indicator - LD 50 was calculated according to the Lichfield-Wilcoxon method. According to the results of studying acute toxicity indicator

ЛД50 при внутрибрюшинном введении для соединения I составил 282,8 мг/кг, таким образом, оно является умеренно токсичным.The LD 50 for intraperitoneal administration for compound I was 282.8 mg / kg, so it is moderately toxic.

Таблица 1Table 1 ВЛИЯНИЕ СОЕДИНЕНИЯ I И ТИКЛОПИДИНА НА АКТИВАЦИЮ ТРОМБОЦИТОВ В БЕЗКАЛЬЦИЕВОЙ СРЕДЕ, ИНДУЦИРОВАННУЮ СЕЛЕКТИВНЫМ P2Y1-АГОНИСТОМ 2-МЕТИЛТИО-АТФINFLUENCE OF COMPOUND I AND TICLOPIDINE ON THE ACTIVATION OF THROMBOCYTES IN A NON-CALCIUM MEDIUM INDUCED BY THE SELECTIVE P2Y 1 1 -METHYLTHIO-ATP AGONIST Вещество/ группаSubstance / Group Концентрация log С, М Concentration log C, M Подавление активации тромбоцитов, Δ% (М±m)Platelet Activation Suppression, Δ% (M ± m) Соединение ICompound I -4-four -56,1±4,6*-56.1 ± 4.6 * -5-5 -30,4±3,1*-30.4 ± 3.1 * ТиклопидинTiclopidine -4-four -13,3±1,3-13.3 ± 1.3 -5-5 -1,2±1,6-1.2 ± 1.6 *- данные достоверны по отношению к контролю (р≤0,05)* - the data are reliable in relation to the control (p≤0.05) Таблица 2table 2 ВЛИЯНИЕ СОЕДИНЕНИЯ I И ТИКЛОПИДИНА (в изоэквимоляльных дозах, per os) НА ИНТЕНСИВНОСТЬ КРОВОТОКА В СОННОЙ АРТЕРИИ ИНТАКТНЫХ КРЫС ПРИ МОДЕЛИРОВАНИИ АРТЕРИАЛЬНОГО ТРОМБОЗА, ИНДУЦИРОВАННОГО ХЛОРИДОМ ЖЕЛЕЗА (III)INFLUENCE OF COMPOUND I AND TICLOPIDINE (in isoequimolar doses, per os) on the blood flow intensity in the carotid artery of intact rats during modeling of arterial thrombosis induced by iron chloride (III) Вещество/ группаSubstance / Group Время достижения 50%-ного уровня кровотока, минTime to reach 50% blood flow, min Время полного тромбоза, минThe time of complete thrombosis, min КонтрольThe control 20twenty 24,6±0,924.6 ± 0.9 Соединение ICompound I -- Более 150,0*# More than 150.0 * # ТиклопидинTiclopidine 2929th 42,7±1,1* 42.7 ± 1.1 * * - данные достоверны по отношению к контролю (р≤0,01) # - данные достоверны по отношению к группе тиклопидина (р≤0,05)* - data are reliable in relation to the control (p≤0.01) # - data are reliable in relation to the ticlopidine group (p≤0.05)

Таблица 3Table 3 ВЛИЯНИЕ СОЕДИНЕНИЯ I И ТИКЛОПИДИНА (в изоэквимоляльных дозах, per os) НА ВРЕМЯ ПОЛНОГО ПРЕКРАЩЕНИЯ КРОВОТОКА В СОННОЙ АРТЕРИИ ИНТАКТНЫХ КРЫС ПРИ МОДЕЛИРОВАНИИ АРТЕРИАЛЬНОГО ТРОМБОЗА, ИНДУЦИРОВАННОГО ЭЛЕКТРИЧЕСКИМ ТОКОМ (М±m)INFLUENCE OF COMPOUNDS I AND TICLOPIDINE (in isoequimolar doses, per os) FOR THE TOTAL TERMINATION OF BLEEDING IN THE CAROTID ARTERY OF INACTIVE RATS IN MODELING OF ARTERIAL THROMBOSIS INDUCED BY ELECTRIC ELECTRICITY Вещество/ группаSubstance / Group Время полного тромбоза, минThe time of complete thrombosis, min КонтрольThe control 17,7±0,817.7 ± 0.8 Соединение ICompound I 55,3±2,0*# 55.3 ± 2.0 * # ТиклопидинTiclopidine 23,3±2,0* 23.3 ± 2.0 * * - данные достоверны по отношению к контролю (р≤0,05)
# -данные достоверны по отношению к группе тиклопидина (р≤0,01)
* - the data are reliable in relation to the control (p≤0.05)
# -data is reliable in relation to the ticlopidine group (p≤0.01)

Claims (1)

Антитромботическое средство, влияющее на регуляцию функциональной активности тромбоцитов, содержащее антагонист пуриновых P2Y1 рецепторов в виде дигидрохлорида 2-(4-метоксифенил)-(9-морфолиноэтил)имидазо[1,2-а]бензимидазола формулы I:
Figure 00000003

обладающего антитромботической активностью.
An antithrombotic agent that affects the regulation of the functional activity of platelets containing an antagonist of purine P2Y 1 receptors in the form of 2- (4-methoxyphenyl) - (9-morpholinoethyl) imidazo [1,2-a] benzimidazole dihydrochloride formula I:
Figure 00000003

possessing antithrombotic activity.
RU2008129909/15A 2008-07-23 2008-07-23 Antithrombotic agent affecting regulation of thrombocyte capacity RU2377990C1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2008129909/15A RU2377990C1 (en) 2008-07-23 2008-07-23 Antithrombotic agent affecting regulation of thrombocyte capacity

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2008129909/15A RU2377990C1 (en) 2008-07-23 2008-07-23 Antithrombotic agent affecting regulation of thrombocyte capacity

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2377990C1 true RU2377990C1 (en) 2010-01-10

Family

ID=41644037

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2008129909/15A RU2377990C1 (en) 2008-07-23 2008-07-23 Antithrombotic agent affecting regulation of thrombocyte capacity

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2377990C1 (en)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2440814C1 (en) * 2010-11-10 2012-01-27 Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего профессионального образования "ЮЖНЫЙ ФЕДЕРАЛЬНЫЙ УНИВЕРСИТЕТ" Medication which possesses antithrombogenic activity
RU2453312C1 (en) * 2010-11-10 2012-06-20 Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего профессионального образования "ЮЖНЫЙ ФЕДЕРАЛЬНЫЙ УНИВЕРСИТЕТ" Agent showing antiaggregant and antithrombogenic activity

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2253651C2 (en) * 1999-10-30 2005-06-10 Авентис Фарма Дойчланд Гмбх N-guanidinoalkylamines, production, uses and pharmaceutical compositions containing the same
RU2005136383A (en) * 2003-04-24 2007-06-10 БЕРИНГЕР ИНГЕЛЬХАЙМ ИНТЕРНАЦИОНАЛЬ ГмбХ (DE) APPLICATION OF DIPYRIDAMOL OR MOPIDAMOL FOR TREATMENT AND PREVENTION OF THROMBOEMBOLIC DISEASES AND DISORDERS CAUSED BY REDUCED EDUCATION AND / OR HIGH LEVEL OF EXPRESSION OF TROMBRINES
WO2007137801A1 (en) * 2006-05-31 2007-12-06 Bayer Healthcare Ag Tetrahydropyrrolopyridine, tetrahydropyrazolopyridine, tetrahydro-imidazopyridine and tetrahydrotriazolopyridine derivatives and use thereof

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2253651C2 (en) * 1999-10-30 2005-06-10 Авентис Фарма Дойчланд Гмбх N-guanidinoalkylamines, production, uses and pharmaceutical compositions containing the same
RU2005136383A (en) * 2003-04-24 2007-06-10 БЕРИНГЕР ИНГЕЛЬХАЙМ ИНТЕРНАЦИОНАЛЬ ГмбХ (DE) APPLICATION OF DIPYRIDAMOL OR MOPIDAMOL FOR TREATMENT AND PREVENTION OF THROMBOEMBOLIC DISEASES AND DISORDERS CAUSED BY REDUCED EDUCATION AND / OR HIGH LEVEL OF EXPRESSION OF TROMBRINES
WO2007137801A1 (en) * 2006-05-31 2007-12-06 Bayer Healthcare Ag Tetrahydropyrrolopyridine, tetrahydropyrazolopyridine, tetrahydro-imidazopyridine and tetrahydrotriazolopyridine derivatives and use thereof

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2440814C1 (en) * 2010-11-10 2012-01-27 Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего профессионального образования "ЮЖНЫЙ ФЕДЕРАЛЬНЫЙ УНИВЕРСИТЕТ" Medication which possesses antithrombogenic activity
RU2453312C1 (en) * 2010-11-10 2012-06-20 Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего профессионального образования "ЮЖНЫЙ ФЕДЕРАЛЬНЫЙ УНИВЕРСИТЕТ" Agent showing antiaggregant and antithrombogenic activity

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Schroeter et al. MAPK signaling in neurodegeneration: influences of flavonoids and of nitric oxide
JP7515235B2 (en) Resetting biological pathways to protect against and repair deterioration associated with human aging
AU2019214858B2 (en) Nicotinamide riboside analogs, pharmaceutical compositions, and uses thereof
US4757063A (en) Process for the treatment of diseases caused by oxidative stress
KR20210117261A (en) Irreversible inhibitors of the menin-MLL interaction
ES2945834T3 (en) Fused pyrrolines that act as inhibitors of ubiquitin-specific protease 30 (USP30)
Ribeiro et al. Unravelling the cardiovascular effects induced by α‐terpineol: A role for the nitric oxide–cGMP pathway
CA2934553A1 (en) Benzodiazepine derivatives, compositions, and methods for treating cognitive impairment
BR112013024602A2 (en) compounds for the treatment of metabolic syndrome
Chung et al. The xanthine derivative KMUP‐1 inhibits models of pulmonary artery hypertension via increased NO and cGMP‐dependent inhibition of RhoA/Rho kinase
Ramis et al. A novel inhaled Syk inhibitor blocks mast cell degranulation and early asthmatic response
CN109640970A (en) Non-catalytic substrate-selective p38 α -specific MAPK inhibitors with endothelial-stabilizing and anti-inflammatory activity and methods of use thereof
RU2377990C1 (en) Antithrombotic agent affecting regulation of thrombocyte capacity
Ogasawara et al. Involvement of cholinergic and GABAergic systems in the reversal of memory disruption by NS-105, a cognition enhancer
PT2474544T (en) Therapeutic agent for anxiety disorders
RU2391345C2 (en) 1-(3-MORPHOLINOPROPYL)-2-PHENYLIMIDAZO[1,2-a]-BENZIMIDAZOLE DIHYDROCHLORIDE, HAVING PURINE P2Y1-RECEPTOR ANTAGONIST PROPERTIES, ANTIAGGREGANT AND ANTITHROMBOTIC ACTIVITY
EP2657225A2 (en) Substituted methyl amines, serotonin 5-ht6 receptor antagonists, methods for the production and use thereof
Jain et al. Synthesis and pharmacological evaluation of novel arginine analogs as potential inhibitors of acetylcholine‐induced relaxation in rat thoracic aortic rings
PT96251A (en) PROCESS FOR THE PREPARATION OF IMIDAZO {4,5-C} PYRIDINES USES AS ANTI-OSTEOPOROTIC AGENTS
CN104292226B (en) 9-hydroxy-risperidone amino acid derivatives and application thereof
CN107922448A (en) A kind of deuterated thieno piperidine derivative, preparation method and applications
EP3829579A1 (en) 1,3,8-triazaspiro compounds and their use as medicaments for the treatment of reperfusion injury
CN105636943B (en) Chromene Derivatives as Inhibitors of TCR-Nck Interaction
AU2019211931A1 (en) Crystal form of 1H-imidazo[4,5-b]pyridine-2(3H)-one compound and preparation process therefor
Lewis et al. Proceedings: The effect of sulphinpyrazone, sodium aspirin and oxprenolol on the formation of arterial platelet thrombi

Legal Events

Date Code Title Description
PD4A Correction of name of patent owner
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20180724