RU2355755C1 - ШТАММ АКТИНОМИЦЕТА Streptomyces lucensis - ПРОДУЦЕНТ ИНГИБИТОРА ГЛИКОЗИДАЗ - Google Patents
ШТАММ АКТИНОМИЦЕТА Streptomyces lucensis - ПРОДУЦЕНТ ИНГИБИТОРА ГЛИКОЗИДАЗ Download PDFInfo
- Publication number
- RU2355755C1 RU2355755C1 RU2008101164/13A RU2008101164A RU2355755C1 RU 2355755 C1 RU2355755 C1 RU 2355755C1 RU 2008101164/13 A RU2008101164/13 A RU 2008101164/13A RU 2008101164 A RU2008101164 A RU 2008101164A RU 2355755 C1 RU2355755 C1 RU 2355755C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- amylase
- strain
- medium
- streptomyces
- glucoamylase
- Prior art date
Links
- 241001446247 uncultured actinomycete Species 0.000 title claims abstract description 14
- 241000946892 Streptomyces lucensis Species 0.000 title claims abstract description 13
- 229940122069 Glycosidase inhibitor Drugs 0.000 title claims description 7
- 239000003316 glycosidase inhibitor Substances 0.000 title claims description 7
- 108090000637 alpha-Amylases Proteins 0.000 abstract description 35
- 102000004139 alpha-Amylases Human genes 0.000 abstract description 35
- 229940024171 alpha-amylase Drugs 0.000 abstract description 34
- 108010073178 Glucan 1,4-alpha-Glucosidase Proteins 0.000 abstract description 10
- 102100022624 Glucoamylase Human genes 0.000 abstract description 10
- 108010028144 alpha-Glucosidases Proteins 0.000 abstract description 10
- 102000016679 alpha-Glucosidases Human genes 0.000 abstract description 10
- GXCLVBGFBYZDAG-UHFFFAOYSA-N N-[2-(1H-indol-3-yl)ethyl]-N-methylprop-2-en-1-amine Chemical compound CN(CCC1=CNC2=C1C=CC=C2)CC=C GXCLVBGFBYZDAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 9
- 241000228245 Aspergillus niger Species 0.000 abstract description 8
- 244000063299 Bacillus subtilis Species 0.000 abstract description 8
- 235000014469 Bacillus subtilis Nutrition 0.000 abstract description 8
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 abstract description 7
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 abstract description 7
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 abstract description 7
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 5
- 102000005744 Glycoside Hydrolases Human genes 0.000 abstract description 4
- 108010031186 Glycoside Hydrolases Proteins 0.000 abstract description 4
- 244000005700 microbiome Species 0.000 abstract description 3
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 abstract 2
- 241001513093 Aspergillus awamori Species 0.000 abstract 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 abstract 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 41
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 11
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 11
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 11
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 10
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 10
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 10
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K tripotassium phosphate Chemical compound [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 10
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 9
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 8
- 101000961203 Aspergillus awamori Glucoamylase Proteins 0.000 description 6
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 6
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 5
- 241000187747 Streptomyces Species 0.000 description 5
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 5
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 5
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 5
- 229910000160 potassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 5
- 235000011009 potassium phosphates Nutrition 0.000 description 5
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 5
- 241000186361 Actinobacteria <class> Species 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 4
- 235000015277 pork Nutrition 0.000 description 4
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 4
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 4
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 3
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 3
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 3
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 3
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 3
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 2
- 101900315840 Bacillus subtilis Alpha-amylase Proteins 0.000 description 2
- 240000005979 Hordeum vulgare Species 0.000 description 2
- 235000007340 Hordeum vulgare Nutrition 0.000 description 2
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 2
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 2
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 2
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 description 2
- PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N Sodium azide Chemical compound [Na+].[N-]=[N+]=[N-] PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 2
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 2
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 2
- 235000010419 agar Nutrition 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 2
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 2
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 2
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 2
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 2
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 2
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 2
- 238000005192 partition Methods 0.000 description 2
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 2
- VWDWKYIASSYTQR-UHFFFAOYSA-N sodium nitrate Chemical compound [Na+].[O-][N+]([O-])=O VWDWKYIASSYTQR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PWKSKIMOESPYIA-UHFFFAOYSA-N 2-acetamido-3-sulfanylpropanoic acid Chemical compound CC(=O)NC(CS)C(O)=O PWKSKIMOESPYIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QDGAVODICPCDMU-UHFFFAOYSA-N 2-amino-3-[3-[bis(2-chloroethyl)amino]phenyl]propanoic acid Chemical compound OC(=O)C(N)CC1=CC=CC(N(CCCl)CCCl)=C1 QDGAVODICPCDMU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940077274 Alpha glucosidase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 239000004382 Amylase Substances 0.000 description 1
- 229940122816 Amylase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 102000013142 Amylases Human genes 0.000 description 1
- 108010065511 Amylases Proteins 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 1
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 241000222122 Candida albicans Species 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000016938 Catalase Human genes 0.000 description 1
- 108010053835 Catalase Proteins 0.000 description 1
- 229920002261 Corn starch Polymers 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 241000206672 Gelidium Species 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- 241000192041 Micrococcus Species 0.000 description 1
- 229930193140 Neomycin Natural products 0.000 description 1
- RZPAKFUAFGMUPI-UHFFFAOYSA-N Oleandomycin Natural products O1C(C)C(O)C(OC)CC1OC1C(C)C(=O)OC(C)C(C)C(O)C(C)C(=O)C2(OC2)CC(C)C(OC2C(C(CC(C)O2)N(C)C)O)C1C RZPAKFUAFGMUPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004104 Oleandomycin Substances 0.000 description 1
- 102000001746 Pancreatic alpha-Amylases Human genes 0.000 description 1
- 108010029785 Pancreatic alpha-Amylases Proteins 0.000 description 1
- 108010019160 Pancreatin Proteins 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 1
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 1
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N Raffinose Natural products O(C[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O[C@@]2(CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O1)[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N 0.000 description 1
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 description 1
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 description 1
- 241000194017 Streptococcus Species 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N UNPD196149 Natural products OC1C(O)C(CO)OC1(CO)OC1C(O)C(O)C(O)C(COC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N Xylitol Natural products OCCC(O)C(O)C(O)CCO TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 235000019418 amylase Nutrition 0.000 description 1
- 239000003392 amylase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 235000020054 awamori Nutrition 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 229940095731 candida albicans Drugs 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000008120 corn starch Substances 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- AIUDWMLXCFRVDR-UHFFFAOYSA-N dimethyl 2-(3-ethyl-3-methylpentyl)propanedioate Chemical class CCC(C)(CC)CCC(C(=O)OC)C(=O)OC AIUDWMLXCFRVDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 1
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000006481 glucose medium Substances 0.000 description 1
- 239000001056 green pigment Substances 0.000 description 1
- 229960002885 histidine Drugs 0.000 description 1
- SURQXAFEQWPFPV-UHFFFAOYSA-L iron(2+) sulfate heptahydrate Chemical compound O.O.O.O.O.O.O.[Fe+2].[O-]S([O-])(=O)=O SURQXAFEQWPFPV-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 230000004130 lipolysis Effects 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N meso ribitol Natural products OCC(O)C(O)C(O)CO HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000034 method Methods 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 1
- 229960004927 neomycin Drugs 0.000 description 1
- 150000002823 nitrates Chemical class 0.000 description 1
- 150000002826 nitrites Chemical class 0.000 description 1
- RZPAKFUAFGMUPI-KGIGTXTPSA-N oleandomycin Chemical compound O1[C@@H](C)[C@H](O)[C@@H](OC)C[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](C)C(=O)O[C@H](C)[C@H](C)[C@H](O)[C@@H](C)C(=O)[C@]2(OC2)C[C@H](C)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@H](C[C@@H](C)O2)N(C)C)O)[C@H]1C RZPAKFUAFGMUPI-KGIGTXTPSA-N 0.000 description 1
- 229960002351 oleandomycin Drugs 0.000 description 1
- 235000019367 oleandomycin Nutrition 0.000 description 1
- 229940055695 pancreatin Drugs 0.000 description 1
- 239000001814 pectin Substances 0.000 description 1
- 229920001277 pectin Polymers 0.000 description 1
- 235000010987 pectin Nutrition 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 1
- 229940066779 peptones Drugs 0.000 description 1
- 230000019612 pigmentation Effects 0.000 description 1
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 229920001592 potato starch Polymers 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N raffinose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 235000010344 sodium nitrate Nutrition 0.000 description 1
- 239000004317 sodium nitrate Substances 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- 150000004684 trihydrates Chemical class 0.000 description 1
- 229960004295 valine Drugs 0.000 description 1
- 239000000811 xylitol Substances 0.000 description 1
- HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N xylitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N 0.000 description 1
- 229960002675 xylitol Drugs 0.000 description 1
- 235000010447 xylitol Nutrition 0.000 description 1
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Штамм актиномицета Streptomyces lucensis ВКПМ Ac-1743 выделен из штамма Streptomyces lucensis Arcamone et al. 1957 BKM Ac-1737 путем проведения ступенчатого отбора. Штамм характеризуется высокими ингибиторными активностями в отношении гликозидаз различного происхождения. Общая ингибиторная активность в отношении панкреатической свиной α-амилазы составляет 2000-3700 ИЕ/см3, α-амилазы Bacillus subtilis - 220-400 ИЕ/см3, α-амилазы солода - 40-70 ИЕ/см3, комплекса ферментов - α-амилаза, глюкоамилаза, мальтаза, декстриназа Aspergillus niger - 1000-1300 ИЕ/см3, глюкоамилазы Aspergillus awamori - 1000-1500 ИЕ/см3.
Description
Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой штамм актиномицета Streptomyces lucensis, предназначенный для использования в качестве продуцента в микробиологическом производстве ингибитора гликозидаз для пищевой и химико-фармацевтической промышленности, биотехнологии и биохимии.
Известен штамм актиномицета Actinoplanaceen S/E 50/13 - продуцент ингибитора амилазы (Патент США №3855066, 1975).
Недостатком этого штамма является то, что он продуцирует ингибитор, подавляющий активность только амилазы, требует особых условий хранения и культивирования.
Известен штамм актиномицета Streptomyces species ВКПМ Ac-1328 - продуцент ингибитора α-гликозидаз (А.с. СССР №1748444 А1, 27.05.1996).
Недостатками этого штамма являются: сложный состав питательной среды для его культивирования, недостаточно высокая продуктивность биосинтеза ингибитора гликозидаз и активность ингибитора в отношении панкреатической свиной α-амилазы и α-амилазы Bacillus subtilis. Этот штамм выбран в качестве прототипа.
Техническим результатом заявленного изобретения является создание нового штамма актиномицета, синтезирующего ингибитор в отношении гликозидаз животного, растительного и микробного происхождения (α-амилаза, глюкоамилаза, сахараза, мальтаза, декстирназа).
Сущность изобретения
В основу изобретения положена задача селекции нового штамма актиномицета рода Streptomyces, синтезирующего на среде несложного состава ингибитор, активный в отношении гликозидаз различного происхождения.
Задача изобретения решена тем, что получен новый генетически устойчивый штамм актиномицета Streptomyces lucensis ВКПМ Ac-1743 - продуцент ингибитора гликозидаз.
Штамм актиномицета Streptomyces lucensis ВКПМ Ac-1743 получен в лаборатории ГУ ВНИИПАКК селекционным путем (ступенчатый отбор) из штамма Streptomyces lucensis Arcamone et al. 1957 BKM Ac-1737.
Отбор актиномицетов проводили по качеству колоний и уровню ингибиторной активности в нативном растворе, полученном в результате их культивирования на среде, содержащей крахмал, и последующего отделения биомассы. Генетической устойчивости отбираемых штаммов достигали путем их неоднократных пересевов на плотные питательные среды. Выросшие на них колонии пересевали на питательную среду Чапека с крахмалом (для актиномицетов). В результате получен новый генетически устойчивый штамм актиномицетов рода Streptomyces.
Идентификацию микроорганизма проводили в соответствии с определителем «Определитель бактерий Берджи»: пер. с англ. В 2 т. / Р.Беркли, Э.Бок, Д.Буп и др. // Под ред. Дж.Хоулта и др., 9-е изд. (США) - М.: Мир, 1997.
Штамм Streptomyces lucensis ВКПМ Ac-1743 имеет следующие культурально-морфологические и физиолого-биохимические признаки.
Культурально-морфологические признаки. Двухсуточная культура штамма имеет обильно разветвленный субстратный мицелий, образуемый вегетативными гифами размером d=0,2-2,0 мкн в поперечнике, нити без перегородок, длинные, ветвление нечастое. Характерно формирование цепочек спор. Споры овальные. Спороносные ветви глубинного мицелия на углеводсодержащей среде прямые или волнистые.
В зависимости от состава среды проявляются различия в морфологических признаках штамма. Штамм ВКПМ Ас-1743 имеет разветвленный субстратный мицелий, образуемый вегетативными гифами размером d=0,2-1,0 мкн в поперечнике, нити с перегородками, длинные, ветвление частое. Характерно формирование цепочек спор на воздушном мицелии. Споры овальные. Спороносные ветви глубинного мицелия на углеводсодержащей среде прямые или волнистые. Рост колоний на среде Чапека с крахмалом - обильный; субстратный мицелий отсутствует; колонии матового серого цвета, круглые, холмистые, лишайникообразные, крупные, d=3-4 мм; края колоний - неровные, более светлого оттенка (белый); воздушный мицелий - слабо выраженный; пигментация и жироподобные вещества отсутствуют. На среде с крахмалом (среда Гаузе 1) рост сплошной, плотный, газообразный; субстратный мицелий матовый, слабо выраженный; колонии диаметром около 1 мм; единичные колонии (боковые на косяке) - бледные, слабовыраженные; пигмент и жироподобные вещества отсутствуют. На питательной среде с глюкозой (среда 1) рост очень обильный, сплошной; колонии круглые, морщинистые, с неровными краями, d=2-3 мм; воздушный мицелий скудный, не диффундирующий в среду; пигмент и жироподобные вещества отсутствуют. На глюкозной среде (среда Чапека) и глюкозо-аспарагиновой (среда Краинского) рост отсутствует. На кукурузной среде рост умеренный, тонким слоем; субстратный мицелий скудный; колонии точечные, выпуклые, мелкие, d=1 мм; воздушный мицелий отсутствует. На овсяном агаре рост сплошной, газонообразный, плотный, умеренный; колонии матовые, выпуклые, звездочкообразные, с игольчатыми краями, d=2 мм, или в виде столбиков; пигмент и жироподобные вещества отсутствуют.
Физиолого-биохимические признаки. Штамм Streptomyces lucensis ВКПМ Ac-1743 - аэроб, хемоорганотроф. Рост культуры при (28-37)°С в жидкой среде, содержащей продукты гидролиза крахмала (декстрины, мальтоза, глюкоза), хороший с выделением в среду желто-зеленого пигмента, при 26°С - менее интенсивный, при 45°С - отсутствует.
Молоко пептонизирует и разжижает желатину медленно, слабо. Нитраты восстанавливает до нитритов. Активно гидролизует крахмал. Рост на среде с глюкозой, или рафинозой, или сахарозой в качестве единственного источника углерода в присутствии кальция (карбонат) хороший; в его отсутствие - роста нет. На средах в присутствии D-мелецитозы, L-рамнозы рост хороший, в присутствии D-мелибиозы, декстрана - умеренный. На клетчатке и на среде в присутствии ксилитола рост слабый.
Газообразные продукты из крахмала, глюкозы не образует.
Проявляет антибиоз против Saccharomyces cerevisiae, Aspergillus niger, Micrococcus enteus, Candida albicans, Streptococcus muinus. Устойчивость к пенициллину высокая. Рост микроорганизма в присутствии олеандомицина и неомицина частично подавляется. Штамм каталазоположительный.
Рост в присутствии хлорида натрия (7,0 мас.%), азида натрия (0,01 мас.%), фенола (0,1 об.%) соответственно неактивный, умеренный, активный.
Рост штамма на средах, содержащих L-валин, L-фенилаланин, умеренный. При использовании в среде L-цистеина, L-гистидина рост менее активный. На среде с аспарагином рост отсутствует. Липолиз умеренный. Гидролиз пектина слабый.
рН-оптимум штамма Streptomyces lucensis ВКПМ Ac-1743 соответствует 6,0-7,0.
Способ, условия и состав сред для длительного хранения штамма.
Штамм хранится на плотной среде Чапека в пробирках на скошенном слое. Плотную среду Чапека приготавливают из жидкой среды Чапека, содержащей растворимый крахмал в количестве 20 г на 1 дм3 жидкой среды, агар-агар в количестве 20 г на 1 дм3 жидкой среды, калий фосфорнокислый однозамещенный трехводный в количестве 1 г на 1 дм3 жидкой среды, натрий азотнокислый в количестве 3 г на 1 дм3 жидкой среды, калий хлористый в количестве 0,5 г на 1 дм3 жидкой среды, магний сернокислый семи водный в количестве 0,5 г на 1 дм3 жидкой среды, железо (II) сернокислое семиводное в количестве 0,015 г на 1 дм3 жидкой среды (рН среды после стерилизации 6,8-7,0). Стерильную жидкую среду Чапека разливают в пробирки по
5 см3, охлаждают в скошенном виде до полного застывания и подсушивают. Плотную среду засевают чистой культурой актиномицетов в боксе над пламенем горелки. Пробирки выдерживают в термостате при температуре 26-30°С в течение 7-8 сут, после чего направляют на хранение.
Температура хранения на плотной среде Чапека от плюс 4°С до плюс 6°С. Сроки пересевов - 1 раз в три месяца.
Спектр действия ингибитора. При глубинной ферментации культура Streptomyces lucensis ВКПМ Ac-1743 выделяет в нативный раствор ингибитор гликозидаз, а именно панкреатической свиной α-амилазы (препарат «Панкреатин»), α-амилазы Bacillus subtilis, α-амилазы ячменного солода, комплекса ферментов - α-амилаза, глюкоамилаза, мальтаза, декстриназа Aspergillus niger, сахаразы Saccharomyces cerevisiae, глюкоамилазы Aspergillus awamori при культивировании на среде, содержащей растворимый крахмал, или гидролизат крахмала (кукурузный, картофельный), или гидролизат рисовой муки. При использовании предлагаемого штамма по сравнению со штаммом Streptomyces species ВКПМ Ac-1328 ингибиторные активности в отношении панкреатической свиной α-амилазы и α-амилазы Bacillus subtilis выше в среднем соответственно в 2,0 и 2,5 раза, и ингибитор, синтезируемый предлагаемым штаммом, активен в отношении α-амилазы солода.
Контроль образования ингибитора проводили спектрофотометрическим методом по наличию ингибиторной активности, которую определяли в отношении панкреатической свиной α-амилазы, α-амилазы Bacillus subtilis, α-амилазы ячменного солода, комплекса ферментов - α-амилаза, глюкоамилаза, мальтаза, декстриназа Aspergillus niger, глюкоамилазы Aspergillus awamori согласно автореферату диссертации на соискание уч. ст. к.б.н. по специальности 03.00.04. - биохимия «Ингибиторы α-глюкозидаз из Streptomyces. Выделение и свойства» / Акулова Н.Ю. - Санкт-Петербург, 1993, с.5-6.
ПРИМЕР 1
В колбу вместимостью 750 см3 вносили 2 г растворимого крахмала, 0,5 г соевой муки, 0,3 г натрия хлористого, 0,1 г калия фосфорнокислого однозамещенного, 0,05 г магния сернокислого семиводного и воду дистиллированную до 100 см3. Среду в колбе стерилизовали при температуре 120-130°С и давлении 0,8 ати, охлаждали до температуры 30°С в течение 40 мин и вносили в колбу 10 см3 двухсуточной культуры актиномицета. Колбу термостатировали при температуре 30°С в течение 96 ч при перемешивании 180 об./мин.
Ингибиторная активность составила: в отношении панкреатической свиной α-амилазы 3000 ИЕ/см3, α-амилазы Bacillus subtilis - 220 ИЕ/см3, α-амилазы солода - 60 ИЕ/см3, комплекса ферментов - α-амилаза, глюкоамилаза, мальтаза, декстриназа Aspergillus niger - 1000 ИЕ/см3, глюкоамилазы Aspergillus awamori - 1000 ИЕ/см3.
ПРИМЕР 2
В колбу вместимостью 750 см3 вносили 2 г гидролизата кукурузного крахмала, 0,5 г соевой муки, 0,3 г натрия хлористого, 0,1 г калия фосфорнокислого однозамещенного, 0,05 г магния сернокислого семиводного и воду дистиллированную до 100 см3. Среду в колбе стерилизовали при температуре 120-130°С и давлении 0,8 ати, охлаждали до температуры 30°С в течение 40 мин и вносили в колбу 10 см3 двухсуточной культуры актиномицета. Колбу термостатировали при температуре 30°С в течение 96 ч при перемешивании 180 об./мин.
Ингибиторная активность составила: в отношении панкреатической свиной α-амилазы 3700 ИЕ/см3, α-амилазы Bacillus subtilis - 400 ИЕ/см3, α-амилазы солода - 70 ИЕ/см3, комплекса ферментов - α-амилаза, глюкоамилаза, мальтаза, декстриназа Aspergillus niger - 1200 ИЕ/см3, глюкоамилазы Aspergillus awamori - 1500 ИЕ/см3.
ПРИМЕР 3
В колбу вместимостью 750 см3 вносили 1,5 г гидролизата картофельного крахмала, 0,25 г соевой муки, 0,3 г натрия хлористого, 0,1 г калия фосфорнокислого однозамещенного, 0,05 г магния сернокислого семиводного и воду дистиллированную до 100 см3. Среду в колбе стерилизовали при температуре 120-130°С и давлении 0,8 ати, охлаждали до температуры 28°С в течение 40 мин и вносили в колбу 8 см3 двухсуточной культуры актиномицета. Колбу термостатировали при температуре 28°С в течение 96 ч при перемешивании 180 об./мин.
Ингибиторная активность составила: в отношении панкреатической свиной α-амилазы 2350 ИЕ/см3, α-амилазы Bacillus subtilis - 260 ИЕ/см, α-амилазы солода - 70 ИЕ/см3, комплекса ферментов - α-амилаза, глюкоамилаза, мальтаза, декстриназа Aspergillus niger - 1300 ИЕ/см3, глюкоамилазы Aspergillus awamori - 1400 ИЕ/см3.
ПРИМЕР 4
В колбу вместимостью 750 см3 вносили 1,5 г гидролизата рисовой муки, 0,5 г соевой муки, 0,3 г натрия хлористого, 0,1 г калия фосфорнокислого однозамещенного, 0,05 г магния сернокислого семиводного и воду дистиллированную до 100 см3 Среду в колбе стерилизовали при температуре 120-130°С и давлении 0,8 ати, охлаждали до температуры 28°С в течение 40 мин и вносили в колбу 8 см3 двухсуточной культуры актиномицета. Колбу термостатировали при температуре 28°С в течение 96 ч при перемешивании 180 об./мин.
Ингибиторная активность составила: в отношении панкреатической свиной α-амилазы 2000 ИЕ/см3, α-амилазы Bacillus subtilis - 300 ИЕ/см3, α-амилазы солода - 40 ИЕ/см3, комплекса ферментов - α-амилаза, глюкоамилаза, мальтаза, декстриназа AspergiMus niger - 1200 ИЕ/см3, глюкоамилазы Aspergillus awamori - 1200 ИЕ/см3.
Как следует из примеров, полученный штамм актиномицетов Streptomyces lucensis ВКПМ Ac-1743 - продуцент ингибитора гликозидаз - обеспечивает на среде несложного состава высокие ингибиторные активности в отношении гликозидаз различного происхождения. Общая ингибиторная активность в отношении панкреатической свиной α-амилазы составляет 2000-3700 ИЕ/см3, α-амилазы Bacillus subtilis -220-400 ИЕ/см3, α-амилазы солода - 40-70 ИЕ/см3, комплекса ферментов - α-амилаза, глюкоамилаза, мальтаза, декстриназа Aspergillus niger - 1000-1300 ИЕ/см3, глюкоамилазы Aspergillus awamori - 1000-1500 ИЕ/см3.
Claims (1)
- Штамм актиномицета Streptomyces lucensis ВКПМ Ac-1743 - продуцент ингибитора гликозидаз.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2008101164/13A RU2355755C1 (ru) | 2008-01-09 | 2008-01-09 | ШТАММ АКТИНОМИЦЕТА Streptomyces lucensis - ПРОДУЦЕНТ ИНГИБИТОРА ГЛИКОЗИДАЗ |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2008101164/13A RU2355755C1 (ru) | 2008-01-09 | 2008-01-09 | ШТАММ АКТИНОМИЦЕТА Streptomyces lucensis - ПРОДУЦЕНТ ИНГИБИТОРА ГЛИКОЗИДАЗ |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2355755C1 true RU2355755C1 (ru) | 2009-05-20 |
Family
ID=41021711
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2008101164/13A RU2355755C1 (ru) | 2008-01-09 | 2008-01-09 | ШТАММ АКТИНОМИЦЕТА Streptomyces lucensis - ПРОДУЦЕНТ ИНГИБИТОРА ГЛИКОЗИДАЗ |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2355755C1 (ru) |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3855066A (en) * | 1972-03-01 | 1974-12-17 | Bayer Ag | Process for the production of an amylase inhibitor |
| GB1496561A (en) * | 1974-03-15 | 1977-12-30 | Eisai Co Ltd | Microbial amylase-inhibitor and preparation thereof |
| US4339436A (en) * | 1977-01-19 | 1982-07-13 | Hoechst Aktiengesellschaft | α-Amylase inhibitor from a streptomycete and process for its preparation |
| SU1748444A1 (ru) * | 1990-06-18 | 1996-05-27 | Всесоюзный Научно-Исследовательский Технологический Институт Антибиотиков И Ферментов Медицинского Назначения | ШТАММ STREPTOMYCES SPECIES - ПРОДУЦЕНТ ИНГИБИТОРА α -ГЛИКОЗИДАЗ |
-
2008
- 2008-01-09 RU RU2008101164/13A patent/RU2355755C1/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3855066A (en) * | 1972-03-01 | 1974-12-17 | Bayer Ag | Process for the production of an amylase inhibitor |
| GB1496561A (en) * | 1974-03-15 | 1977-12-30 | Eisai Co Ltd | Microbial amylase-inhibitor and preparation thereof |
| US4339436A (en) * | 1977-01-19 | 1982-07-13 | Hoechst Aktiengesellschaft | α-Amylase inhibitor from a streptomycete and process for its preparation |
| SU1748444A1 (ru) * | 1990-06-18 | 1996-05-27 | Всесоюзный Научно-Исследовательский Технологический Институт Антибиотиков И Ферментов Медицинского Назначения | ШТАММ STREPTOMYCES SPECIES - ПРОДУЦЕНТ ИНГИБИТОРА α -ГЛИКОЗИДАЗ |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Park et al. | Optimization of submerged culture conditions for the mycelial growth and exo‐biopolymer production by Cordyceps militaris | |
| CN102517235B (zh) | 一种枯草芽孢杆菌 | |
| Supriyatna et al. | Screening and isolation of cellulolytic bacteria from gut of black soldier flays larvae (Hermetia illucens) feeding with rice straw | |
| CN104450561B (zh) | 一株产甲壳素酶菌株及其利用蟹壳发酵产甲壳素酶的应用 | |
| Augustine et al. | Isolation, characterization and optimization of antifungal activity of an actinomycete of soil origin | |
| US20160222367A1 (en) | Enzyme composition and process of preparation thereof | |
| Rathi et al. | Valorization of rice milled by-products (rice husk and de-oiled rice bran) into α-amylase with its process optimization, partial purification and kinetic study | |
| US20040253694A1 (en) | Process for the preparation of gallic acid by co-culture | |
| CN110964676A (zh) | 一种侧孢短芽孢杆菌的高菌量发酵液的培养方法 | |
| RU2355755C1 (ru) | ШТАММ АКТИНОМИЦЕТА Streptomyces lucensis - ПРОДУЦЕНТ ИНГИБИТОРА ГЛИКОЗИДАЗ | |
| CN115466700A (zh) | 一种新型地衣芽孢杆菌的发酵培养基配方及其培养方法 | |
| Sjofjan et al. | Extracellular amylase activity of amylolytic bacteria isolated from quail’s (Coturnix japonica) intestinal tract in corn flour medium | |
| Elmarzugi et al. | Production of α-amylase using new strain of Bacillus polymyxa isolated from sweet potato | |
| SU764617A3 (ru) | Способ получени глюкозоизомеразы | |
| RU2346042C2 (ru) | Штамм актиномицета streptomyces violaceus - продуцент ингибитора гликозидаз | |
| RU2397247C1 (ru) | Способ биосинтеза липазы | |
| CN1969653A (zh) | 家蚕抗病毒型微生物添加剂及其制备方法 | |
| RU2455352C1 (ru) | ШТАММ Bacillus amyloliquefaciens - ПРОДУЦЕНТ АЛЬФА-АМИЛАЗЫ Bacillus amyloliquefaciens | |
| CN103540577B (zh) | 一种赭色小莫勒菌发酵生产脂肪酶的培养基及方法 | |
| RU2245364C2 (ru) | Штамм мицелиального гриба aspergillus awamori - продуцент глюкоамилазы | |
| Radman et al. | Elicitor effects on reactive oxygen species in liquid cultures of Penicillium chrysogenum | |
| CN103865845B (zh) | 一种吸水链霉菌及其在制备伏格列波糖中的应用 | |
| Hauwa et al. | Production of bioenzymes with banana peels by some selected fungi isolated from poultry droppings in Sokoto, north eastern Nigeria | |
| RU2196821C2 (ru) | Штамм мицелиального гриба aspergillus awamori - продуцент глюкоамилазы | |
| Tsurikova et al. | Selection of a potent bacillus licheniformis strain producing thermostable amylase |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20170110 |