RU2266913C2 - Пентасахаридный конъюгат, способ его получения и фармацевтическая композиция на его основе - Google Patents
Пентасахаридный конъюгат, способ его получения и фармацевтическая композиция на его основе Download PDFInfo
- Publication number
- RU2266913C2 RU2266913C2 RU2002118117/04A RU2002118117A RU2266913C2 RU 2266913 C2 RU2266913 C2 RU 2266913C2 RU 2002118117/04 A RU2002118117/04 A RU 2002118117/04A RU 2002118117 A RU2002118117 A RU 2002118117A RU 2266913 C2 RU2266913 C2 RU 2266913C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- compound
- pentasaccharide
- mmol
- formula
- compounds
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 25
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims abstract description 4
- 108090000190 Thrombin Proteins 0.000 claims abstract description 15
- 229960004072 thrombin Drugs 0.000 claims abstract description 15
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims abstract description 6
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims abstract description 6
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 claims abstract description 5
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L sulfate group Chemical group S(=O)(=O)([O-])[O-] QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims abstract description 4
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims abstract description 4
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 77
- 150000001409 amidines Chemical group 0.000 claims description 5
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 5
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 claims description 3
- 150000007942 carboxylates Chemical group 0.000 claims description 3
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 claims description 3
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 17
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 7
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 abstract description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 3
- 230000007721 medicinal effect Effects 0.000 abstract 1
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 54
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 48
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 47
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 43
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 39
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 25
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 23
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 23
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 22
- WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N Acetic anhydride Chemical compound CC(=O)OC(C)=O WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 20
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 16
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- -1 hydrochloric Chemical class 0.000 description 13
- UAOMVDZJSHZZME-UHFFFAOYSA-N diisopropylamine Chemical compound CC(C)NC(C)C UAOMVDZJSHZZME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- DKGAVHZHDRPRBM-UHFFFAOYSA-N Tert-Butanol Chemical compound CC(C)(C)O DKGAVHZHDRPRBM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 10
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 9
- FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N Butyric acid Chemical compound CCCC(O)=O FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N N-Heptane Chemical compound CCCCCCC IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 8
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 8
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 8
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 8
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 8
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 8
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 230000001858 anti-Xa Effects 0.000 description 7
- 125000001584 benzyloxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC1=CC=CC=C1)* 0.000 description 7
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 7
- GQHTUMJGOHRCHB-UHFFFAOYSA-N 2,3,4,6,7,8,9,10-octahydropyrimido[1,2-a]azepine Chemical compound C1CCCCN2CCCN=C21 GQHTUMJGOHRCHB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 6
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 6
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 6
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 6
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 6
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 6
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 6
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 6
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N trifluoroacetic acid Substances OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000012317 TBTU Substances 0.000 description 5
- CLZISMQKJZCZDN-UHFFFAOYSA-N [benzotriazol-1-yloxy(dimethylamino)methylidene]-dimethylazanium Chemical compound C1=CC=C2N(OC(N(C)C)=[N+](C)C)N=NC2=C1 CLZISMQKJZCZDN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000004019 antithrombin Substances 0.000 description 5
- PXXJHWLDUBFPOL-UHFFFAOYSA-N benzamidine Chemical group NC(=N)C1=CC=CC=C1 PXXJHWLDUBFPOL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 5
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 5
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 5
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 5
- AOSZTAHDEDLTLQ-AZKQZHLXSA-N (1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-6-[(3-chlorophenyl)methyl]-12,19-difluoro-11-hydroxy-8-(2-hydroxyacetyl)-9,13-dimethyl-6-azapentacyclo[10.8.0.02,9.04,8.013,18]icosa-14,17-dien-16-one Chemical compound C([C@@H]1C[C@H]2[C@H]3[C@]([C@]4(C=CC(=O)C=C4[C@@H](F)C3)C)(F)[C@@H](O)C[C@@]2([C@@]1(C1)C(=O)CO)C)N1CC1=CC=CC(Cl)=C1 AOSZTAHDEDLTLQ-AZKQZHLXSA-N 0.000 description 4
- KQZLRWGGWXJPOS-NLFPWZOASA-N 1-[(1R)-1-(2,4-dichlorophenyl)ethyl]-6-[(4S,5R)-4-[(2S)-2-(hydroxymethyl)pyrrolidin-1-yl]-5-methylcyclohexen-1-yl]pyrazolo[3,4-b]pyrazine-3-carbonitrile Chemical compound ClC1=C(C=CC(=C1)Cl)[C@@H](C)N1N=C(C=2C1=NC(=CN=2)C1=CC[C@@H]([C@@H](C1)C)N1[C@@H](CCC1)CO)C#N KQZLRWGGWXJPOS-NLFPWZOASA-N 0.000 description 4
- 108090000935 Antithrombin III Proteins 0.000 description 4
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229940126657 Compound 17 Drugs 0.000 description 4
- YNAVUWVOSKDBBP-UHFFFAOYSA-N Morpholine Chemical compound C1COCCN1 YNAVUWVOSKDBBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 4
- 229960004676 antithrombotic agent Drugs 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 4
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 4
- 229940125877 compound 31 Drugs 0.000 description 4
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 4
- 229940043279 diisopropylamine Drugs 0.000 description 4
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 4
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 4
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 4
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 4
- UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N phenylmethyl ester of formic acid Natural products O=COCC1=CC=CC=C1 UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 4
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 4
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- UAOUIVVJBYDFKD-XKCDOFEDSA-N (1R,9R,10S,11R,12R,15S,18S,21R)-10,11,21-trihydroxy-8,8-dimethyl-14-methylidene-4-(prop-2-enylamino)-20-oxa-5-thia-3-azahexacyclo[9.7.2.112,15.01,9.02,6.012,18]henicosa-2(6),3-dien-13-one Chemical compound C([C@@H]1[C@@H](O)[C@@]23C(C1=C)=O)C[C@H]2[C@]12C(N=C(NCC=C)S4)=C4CC(C)(C)[C@H]1[C@H](O)[C@]3(O)OC2 UAOUIVVJBYDFKD-XKCDOFEDSA-N 0.000 description 3
- GHYOCDFICYLMRF-UTIIJYGPSA-N (2S,3R)-N-[(2S)-3-(cyclopenten-1-yl)-1-[(2R)-2-methyloxiran-2-yl]-1-oxopropan-2-yl]-3-hydroxy-3-(4-methoxyphenyl)-2-[[(2S)-2-[(2-morpholin-4-ylacetyl)amino]propanoyl]amino]propanamide Chemical compound C1(=CCCC1)C[C@@H](C(=O)[C@@]1(OC1)C)NC([C@H]([C@@H](C1=CC=C(C=C1)OC)O)NC([C@H](C)NC(CN1CCOCC1)=O)=O)=O GHYOCDFICYLMRF-UTIIJYGPSA-N 0.000 description 3
- WWTBZEKOSBFBEM-SPWPXUSOSA-N (2s)-2-[[2-benzyl-3-[hydroxy-[(1r)-2-phenyl-1-(phenylmethoxycarbonylamino)ethyl]phosphoryl]propanoyl]amino]-3-(1h-indol-3-yl)propanoic acid Chemical compound N([C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)O)C(=O)C(CP(O)(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)OCC=1C=CC=CC=1)CC1=CC=CC=C1 WWTBZEKOSBFBEM-SPWPXUSOSA-N 0.000 description 3
- WZZBNLYBHUDSHF-DHLKQENFSA-N 1-[(3s,4s)-4-[8-(2-chloro-4-pyrimidin-2-yloxyphenyl)-7-fluoro-2-methylimidazo[4,5-c]quinolin-1-yl]-3-fluoropiperidin-1-yl]-2-hydroxyethanone Chemical compound CC1=NC2=CN=C3C=C(F)C(C=4C(=CC(OC=5N=CC=CN=5)=CC=4)Cl)=CC3=C2N1[C@H]1CCN(C(=O)CO)C[C@@H]1F WZZBNLYBHUDSHF-DHLKQENFSA-N 0.000 description 3
- ONBQEOIKXPHGMB-VBSBHUPXSA-N 1-[2-[(2s,3r,4s,5r)-3,4-dihydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]oxy-4,6-dihydroxyphenyl]-3-(4-hydroxyphenyl)propan-1-one Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CC(O)=CC(O)=C1C(=O)CCC1=CC=C(O)C=C1 ONBQEOIKXPHGMB-VBSBHUPXSA-N 0.000 description 3
- YSUIQYOGTINQIN-UZFYAQMZSA-N 2-amino-9-[(1S,6R,8R,9S,10R,15R,17R,18R)-8-(6-aminopurin-9-yl)-9,18-difluoro-3,12-dihydroxy-3,12-bis(sulfanylidene)-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3lambda5,12lambda5-diphosphatricyclo[13.2.1.06,10]octadecan-17-yl]-1H-purin-6-one Chemical compound NC1=NC2=C(N=CN2[C@@H]2O[C@@H]3COP(S)(=O)O[C@@H]4[C@@H](COP(S)(=O)O[C@@H]2[C@@H]3F)O[C@H]([C@H]4F)N2C=NC3=C2N=CN=C3N)C(=O)N1 YSUIQYOGTINQIN-UZFYAQMZSA-N 0.000 description 3
- TVTJUIAKQFIXCE-HUKYDQBMSA-N 2-amino-9-[(2R,3S,4S,5R)-4-fluoro-3-hydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-7-prop-2-ynyl-1H-purine-6,8-dione Chemical compound NC=1NC(C=2N(C(N(C=2N=1)[C@@H]1O[C@@H]([C@H]([C@H]1O)F)CO)=O)CC#C)=O TVTJUIAKQFIXCE-HUKYDQBMSA-N 0.000 description 3
- QBWKPGNFQQJGFY-QLFBSQMISA-N 3-[(1r)-1-[(2r,6s)-2,6-dimethylmorpholin-4-yl]ethyl]-n-[6-methyl-3-(1h-pyrazol-4-yl)imidazo[1,2-a]pyrazin-8-yl]-1,2-thiazol-5-amine Chemical compound N1([C@H](C)C2=NSC(NC=3C4=NC=C(N4C=C(C)N=3)C3=CNN=C3)=C2)C[C@H](C)O[C@H](C)C1 QBWKPGNFQQJGFY-QLFBSQMISA-N 0.000 description 3
- 102100022977 Antithrombin-III Human genes 0.000 description 3
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010074860 Factor Xa Proteins 0.000 description 3
- NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N N-Hydroxysuccinimide Chemical compound ON1C(=O)CCC1=O NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000007079 Peptide Fragments Human genes 0.000 description 3
- 108010033276 Peptide Fragments Proteins 0.000 description 3
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N Propanedioic acid Natural products OC(=O)CC(O)=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- LJOOWESTVASNOG-UFJKPHDISA-N [(1s,3r,4ar,7s,8s,8as)-3-hydroxy-8-[2-[(4r)-4-hydroxy-6-oxooxan-2-yl]ethyl]-7-methyl-1,2,3,4,4a,7,8,8a-octahydronaphthalen-1-yl] (2s)-2-methylbutanoate Chemical compound C([C@H]1[C@@H](C)C=C[C@H]2C[C@@H](O)C[C@@H]([C@H]12)OC(=O)[C@@H](C)CC)CC1C[C@@H](O)CC(=O)O1 LJOOWESTVASNOG-UFJKPHDISA-N 0.000 description 3
- WREOTYWODABZMH-DTZQCDIJSA-N [[(2r,3s,4r,5r)-3,4-dihydroxy-5-[2-oxo-4-(2-phenylethoxyamino)pyrimidin-1-yl]oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] phosphono hydrogen phosphate Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)O[C@H]1N(C=C\1)C(=O)NC/1=N\OCCC1=CC=CC=C1 WREOTYWODABZMH-DTZQCDIJSA-N 0.000 description 3
- 239000000370 acceptor Substances 0.000 description 3
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 3
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 3
- 239000003708 ampul Substances 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 3
- XRWSZZJLZRKHHD-WVWIJVSJSA-N asunaprevir Chemical compound O=C([C@@H]1C[C@H](CN1C(=O)[C@@H](NC(=O)OC(C)(C)C)C(C)(C)C)OC1=NC=C(C2=CC=C(Cl)C=C21)OC)N[C@]1(C(=O)NS(=O)(=O)C2CC2)C[C@H]1C=C XRWSZZJLZRKHHD-WVWIJVSJSA-N 0.000 description 3
- KGNDCEVUMONOKF-UGPLYTSKSA-N benzyl n-[(2r)-1-[(2s,4r)-2-[[(2s)-6-amino-1-(1,3-benzoxazol-2-yl)-1,1-dihydroxyhexan-2-yl]carbamoyl]-4-[(4-methylphenyl)methoxy]pyrrolidin-1-yl]-1-oxo-4-phenylbutan-2-yl]carbamate Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1CO[C@H]1CN(C(=O)[C@@H](CCC=2C=CC=CC=2)NC(=O)OCC=2C=CC=CC=2)[C@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)(O)C=2OC3=CC=CC=C3N=2)C1 KGNDCEVUMONOKF-UGPLYTSKSA-N 0.000 description 3
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229940125797 compound 12 Drugs 0.000 description 3
- 229940125758 compound 15 Drugs 0.000 description 3
- 229940126142 compound 16 Drugs 0.000 description 3
- 229940126208 compound 22 Drugs 0.000 description 3
- 229940125833 compound 23 Drugs 0.000 description 3
- 229940125961 compound 24 Drugs 0.000 description 3
- 229940125846 compound 25 Drugs 0.000 description 3
- 229940125851 compound 27 Drugs 0.000 description 3
- 229940127204 compound 29 Drugs 0.000 description 3
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 3
- XEKSTYNIJLDDAZ-JASSWCPGSA-D decasodium;(2s,3s,4r,5r,6r)-6-[(2r,3r,4r,5r,6r)-6-[(2r,3s,4s,5r,6r)-2-carboxylato-4-hydroxy-6-[(2r,3s,4r,5r,6s)-4-hydroxy-6-methoxy-5-(sulfonatoamino)-2-(sulfonatooxymethyl)oxan-3-yl]oxy-5-sulfonatooxyoxan-3-yl]oxy-5-(sulfonatoamino)-4-sulfonatooxy-2-(sul Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].O[C@@H]1[C@@H](NS([O-])(=O)=O)[C@@H](OC)O[C@H](COS([O-])(=O)=O)[C@H]1O[C@H]1[C@H](OS([O-])(=O)=O)[C@@H](O)[C@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](OS([O-])(=O)=O)[C@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O[C@@H]4[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](COS([O-])(=O)=O)O4)NS([O-])(=O)=O)[C@H](O3)C([O-])=O)O)[C@@H](COS([O-])(=O)=O)O2)NS([O-])(=O)=O)[C@H](C([O-])=O)O1 XEKSTYNIJLDDAZ-JASSWCPGSA-D 0.000 description 3
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 3
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 3
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- JFHLJPZWYARSIE-UHFFFAOYSA-N n'-phenylmethoxybenzenecarboximidamide Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(/N)=N\OCC1=CC=CC=C1 JFHLJPZWYARSIE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 3
- 125000000587 piperidin-1-yl group Chemical group [H]C1([H])N(*)C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 description 3
- 229940093429 polyethylene glycol 6000 Drugs 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 3
- 125000000472 sulfonyl group Chemical group *S(*)(=O)=O 0.000 description 3
- SZUVGFMDDVSKSI-WIFOCOSTSA-N (1s,2s,3s,5r)-1-(carboxymethyl)-3,5-bis[(4-phenoxyphenyl)methyl-propylcarbamoyl]cyclopentane-1,2-dicarboxylic acid Chemical compound O=C([C@@H]1[C@@H]([C@](CC(O)=O)([C@H](C(=O)N(CCC)CC=2C=CC(OC=3C=CC=CC=3)=CC=2)C1)C(O)=O)C(O)=O)N(CCC)CC(C=C1)=CC=C1OC1=CC=CC=C1 SZUVGFMDDVSKSI-WIFOCOSTSA-N 0.000 description 2
- IWZSHWBGHQBIML-ZGGLMWTQSA-N (3S,8S,10R,13S,14S,17S)-17-isoquinolin-7-yl-N,N,10,13-tetramethyl-2,3,4,7,8,9,11,12,14,15,16,17-dodecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthren-3-amine Chemical compound CN(C)[C@H]1CC[C@]2(C)C3CC[C@@]4(C)[C@@H](CC[C@@H]4c4ccc5ccncc5c4)[C@@H]3CC=C2C1 IWZSHWBGHQBIML-ZGGLMWTQSA-N 0.000 description 2
- ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 1-Hydroxybenzotriazole Chemical compound C1=CC=C2N(O)N=NC2=C1 ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PCJFEVUKVKQSSL-UHFFFAOYSA-N 2h-1,2,4-oxadiazol-5-one Chemical group O=C1N=CNO1 PCJFEVUKVKQSSL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 8-[3-(1-cyclopropylpyrazol-4-yl)-1H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-5-yl]-3-methyl-3,8-diazabicyclo[3.2.1]octan-2-one Chemical class C1(CC1)N1N=CC(=C1)C1=NNC2=C1N=C(N=C2)N1C2C(N(CC1CC2)C)=O HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- ZAFNJMIOTHYJRJ-UHFFFAOYSA-N Diisopropyl ether Chemical compound CC(C)OC(C)C ZAFNJMIOTHYJRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000005189 Embolism Diseases 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 2
- AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N Glycolic acid Chemical compound OCC(O)=O AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N Methanesulfonic acid Chemical compound CS(O)(=O)=O AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OPFJDXRVMFKJJO-ZHHKINOHSA-N N-{[3-(2-benzamido-4-methyl-1,3-thiazol-5-yl)-pyrazol-5-yl]carbonyl}-G-dR-G-dD-dD-dD-NH2 Chemical compound S1C(C=2NN=C(C=2)C(=O)NCC(=O)N[C@H](CCCN=C(N)N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(N)=O)=C(C)N=C1NC(=O)C1=CC=CC=C1 OPFJDXRVMFKJJO-ZHHKINOHSA-N 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N Piperidine Chemical compound C1CCNCC1 NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010022999 Serine Proteases Proteins 0.000 description 2
- 102000012479 Serine Proteases Human genes 0.000 description 2
- 229910004298 SiO 2 Inorganic materials 0.000 description 2
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 description 2
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 2
- LNUFLCYMSVYYNW-ZPJMAFJPSA-N [(2r,3r,4s,5r,6r)-2-[(2r,3r,4s,5r,6r)-6-[(2r,3r,4s,5r,6r)-6-[(2r,3r,4s,5r,6r)-6-[[(3s,5s,8r,9s,10s,13r,14s,17r)-10,13-dimethyl-17-[(2r)-6-methylheptan-2-yl]-2,3,4,5,6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-tetradecahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-3-yl]oxy]-4,5-disulfo Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](COS(O)(=O)=O)O[C@@H]([C@@H]([C@H]1OS(O)(=O)=O)OS(O)(=O)=O)O[C@@H]1[C@@H](COS(O)(=O)=O)O[C@@H]([C@@H]([C@H]1OS(O)(=O)=O)OS(O)(=O)=O)O[C@@H]1[C@@H](COS(O)(=O)=O)O[C@H]([C@@H]([C@H]1OS(O)(=O)=O)OS(O)(=O)=O)O[C@@H]1C[C@@H]2CC[C@H]3[C@@H]4CC[C@@H]([C@]4(CC[C@@H]3[C@@]2(C)CC1)C)[C@H](C)CCCC(C)C)[C@H]1O[C@H](COS(O)(=O)=O)[C@@H](OS(O)(=O)=O)[C@H](OS(O)(=O)=O)[C@H]1OS(O)(=O)=O LNUFLCYMSVYYNW-ZPJMAFJPSA-N 0.000 description 2
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 2
- 150000008064 anhydrides Chemical class 0.000 description 2
- 230000002785 anti-thrombosis Effects 0.000 description 2
- 210000001367 artery Anatomy 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 description 2
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 2
- 244000309464 bull Species 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 229940126543 compound 14 Drugs 0.000 description 2
- 229940126086 compound 21 Drugs 0.000 description 2
- 229940126214 compound 3 Drugs 0.000 description 2
- 229940125898 compound 5 Drugs 0.000 description 2
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N dimethylselenoniopropionate Natural products CCC(O)=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 2
- DNJIEGIFACGWOD-UHFFFAOYSA-N ethanethiol Chemical compound CCS DNJIEGIFACGWOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012458 free base Substances 0.000 description 2
- 238000005984 hydrogenation reaction Methods 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- XYEOALKITRFCJJ-UHFFFAOYSA-N o-benzylhydroxylamine Chemical compound NOCC1=CC=CC=C1 XYEOALKITRFCJJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 2
- 229920001467 poly(styrenesulfonates) Polymers 0.000 description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 2
- 239000000651 prodrug Substances 0.000 description 2
- 229940002612 prodrug Drugs 0.000 description 2
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000012552 review Methods 0.000 description 2
- URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N sodium aluminosilicate Chemical class [Na+].[Al+3].[O-][Si]([O-])=O.[O-][Si]([O-])=O URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 239000012453 solvate Substances 0.000 description 2
- 238000002798 spectrophotometry method Methods 0.000 description 2
- 239000012086 standard solution Substances 0.000 description 2
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960000281 trometamol Drugs 0.000 description 2
- YDMBNDUHUNWWRP-VJBWXMMDSA-N (2s)-1-[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]-n-[(2s)-5-(diaminomethylideneamino)-1-(4-nitroanilino)-1-oxopentan-2-yl]piperidine-2-carboxamide Chemical compound C([C@@H](N)C(=O)N1[C@@H](CCCC1)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)NC=1C=CC(=CC=1)[N+]([O-])=O)C1=CC=CC=C1 YDMBNDUHUNWWRP-VJBWXMMDSA-N 0.000 description 1
- KQJTXYQXRHCWKW-PJSBSAQXSA-N (4s)-4-[[(2s,3s)-2-benzamido-3-methylpentanoyl]amino]-5-[[2-[[(2s)-5-(diaminomethylideneamino)-1-(4-nitroanilino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-2-oxoethyl]amino]-5-oxopentanoic acid;hydrochloride Chemical compound Cl.N([C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)NC=1C=CC(=CC=1)[N+]([O-])=O)C(=O)C1=CC=CC=C1 KQJTXYQXRHCWKW-PJSBSAQXSA-N 0.000 description 1
- 125000003088 (fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl group Chemical group 0.000 description 1
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XBNGYFFABRKICK-UHFFFAOYSA-N 2,3,4,5,6-pentafluorophenol Chemical compound OC1=C(F)C(F)=C(F)C(F)=C1F XBNGYFFABRKICK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JCYHZRBLVYAJOY-UHFFFAOYSA-N 4-amino-2-benzylbutanoic acid;benzenesulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)C1=CC=CC=C1.NCCC(C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 JCYHZRBLVYAJOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004801 4-cyanophenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(C#N)=C([H])C([H])=C1* 0.000 description 1
- HVCNXQOWACZAFN-UHFFFAOYSA-N 4-ethylmorpholine Chemical compound CCN1CCOCC1 HVCNXQOWACZAFN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DWLYVEYCCPEHLX-UHFFFAOYSA-N 4-methoxy-2,3,6-trimethylbenzenesulfonyl chloride Chemical compound COC1=CC(C)=C(S(Cl)(=O)=O)C(C)=C1C DWLYVEYCCPEHLX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N Acetaminophen Chemical class CC(=O)NC1=CC=C(O)C=C1 RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004411 Antithrombin III Human genes 0.000 description 1
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 1
- 239000005711 Benzoic acid Substances 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M Bicarbonate Chemical compound OC([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- KXDHJXZQYSOELW-UHFFFAOYSA-N Carbamic acid Chemical group NC(O)=O KXDHJXZQYSOELW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010051055 Deep vein thrombosis Diseases 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 1
- IYXGSMUGOJNHAZ-UHFFFAOYSA-N Ethyl malonate Chemical compound CCOC(=O)CC(=O)OCC IYXGSMUGOJNHAZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010029144 Factor IIa Proteins 0.000 description 1
- 102000009123 Fibrin Human genes 0.000 description 1
- 108010073385 Fibrin Proteins 0.000 description 1
- BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N Fibrin monomer Chemical compound CNC(=O)CNC(=O)CN BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010049003 Fibrinogen Proteins 0.000 description 1
- 102000008946 Fibrinogen Human genes 0.000 description 1
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 101000757319 Homo sapiens Antithrombin-III Proteins 0.000 description 1
- AVXURJPOCDRRFD-UHFFFAOYSA-N Hydroxylamine Chemical compound ON AVXURJPOCDRRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010022998 Irritability Diseases 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 239000012901 Milli-Q water Substances 0.000 description 1
- WLHBRQYVZLNQFE-UHFFFAOYSA-N O[S+]1C2=CC=CC=C2N=C1 Chemical compound O[S+]1C2=CC=CC=C2N=C1 WLHBRQYVZLNQFE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 206010050902 Postoperative thrombosis Diseases 0.000 description 1
- 108010094028 Prothrombin Proteins 0.000 description 1
- 102100027378 Prothrombin Human genes 0.000 description 1
- 208000010378 Pulmonary Embolism Diseases 0.000 description 1
- 239000012614 Q-Sepharose Substances 0.000 description 1
- 108010039286 S 2238 Proteins 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N Sodium Chemical compound [Na] KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Chemical class 0.000 description 1
- 208000006011 Stroke Diseases 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N Succinic acid Natural products OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Natural products [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DRUIESSIVFYOMK-UHFFFAOYSA-N Trichloroacetonitrile Chemical compound ClC(Cl)(Cl)C#N DRUIESSIVFYOMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010047249 Venous thrombosis Diseases 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 description 1
- 125000004453 alkoxycarbonyl group Chemical group 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000002399 angioplasty Methods 0.000 description 1
- 229960005348 antithrombin iii Drugs 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 150000001540 azides Chemical class 0.000 description 1
- 235000010233 benzoic acid Nutrition 0.000 description 1
- 108010031969 benzoyl-Ile-Glu-Gly-Arg-p-nitroanilide Proteins 0.000 description 1
- MJSHDCCLFGOEIK-UHFFFAOYSA-N benzyl (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) carbonate Chemical compound O=C1CCC(=O)N1OC(=O)OCC1=CC=CC=C1 MJSHDCCLFGOEIK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000051 benzyloxy group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])O* 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 208000034158 bleeding Diseases 0.000 description 1
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 1
- 230000023555 blood coagulation Effects 0.000 description 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N butanedioic acid Chemical compound O[14C](=O)CC[14C](O)=O KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 150000004657 carbamic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 150000001718 carbodiimides Chemical class 0.000 description 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 1
- 230000000747 cardiac effect Effects 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Chemical class 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Chemical class 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 235000015165 citric acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940125904 compound 1 Drugs 0.000 description 1
- 229940125782 compound 2 Drugs 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 230000009260 cross reactivity Effects 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 1
- VRLDVERQJMEPIF-UHFFFAOYSA-N dbdmh Chemical compound CC1(C)N(Br)C(=O)N(Br)C1=O VRLDVERQJMEPIF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- AQEFLFZSWDEAIP-UHFFFAOYSA-N di-tert-butyl ether Chemical compound CC(C)(C)OC(C)(C)C AQEFLFZSWDEAIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 1
- RIFGWPKJUGCATF-UHFFFAOYSA-N ethyl chloroformate Chemical compound CCOC(Cl)=O RIFGWPKJUGCATF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 229950003499 fibrin Drugs 0.000 description 1
- 229940012952 fibrinogen Drugs 0.000 description 1
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 1
- 239000001530 fumaric acid Substances 0.000 description 1
- 235000011087 fumaric acid Nutrition 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 150000003278 haem Chemical class 0.000 description 1
- 230000023597 hemostasis Effects 0.000 description 1
- 150000004677 hydrates Chemical class 0.000 description 1
- 125000004356 hydroxy functional group Chemical group O* 0.000 description 1
- NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N hydroxybenzotriazole Substances O=C1C=CC=C2NNN=C12 NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 1
- 239000011976 maleic acid Substances 0.000 description 1
- 229940098779 methanesulfonic acid Drugs 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 1
- 208000010125 myocardial infarction Diseases 0.000 description 1
- 239000007922 nasal spray Substances 0.000 description 1
- 229940097496 nasal spray Drugs 0.000 description 1
- 230000004770 neurodegeneration Effects 0.000 description 1
- 208000015122 neurodegenerative disease Diseases 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012299 nitrogen atmosphere Substances 0.000 description 1
- 239000012038 nucleophile Substances 0.000 description 1
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- IZUPBVBPLAPZRR-UHFFFAOYSA-N pentachloro-phenol Natural products OC1=C(Cl)C(Cl)=C(Cl)C(Cl)=C1Cl IZUPBVBPLAPZRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 125000000612 phthaloyl group Chemical group C(C=1C(C(=O)*)=CC=CC1)(=O)* 0.000 description 1
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 238000011533 pre-incubation Methods 0.000 description 1
- 238000002953 preparative HPLC Methods 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 1
- 235000019260 propionic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940039716 prothrombin Drugs 0.000 description 1
- 230000003331 prothrombotic effect Effects 0.000 description 1
- IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N quinbolone Chemical compound O([C@H]1CC[C@H]2[C@H]3[C@@H]([C@]4(C=CC(=O)C=C4CC3)C)CC[C@@]21C)C1=CCCC1 IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N 0.000 description 1
- 230000006340 racemization Effects 0.000 description 1
- 239000012429 reaction media Substances 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 208000037803 restenosis Diseases 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 239000003001 serine protease inhibitor Substances 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012312 sodium hydride Substances 0.000 description 1
- 229910000104 sodium hydride Inorganic materials 0.000 description 1
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 1
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L sodium thiosulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=S AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000019345 sodium thiosulphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000007909 solid dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 208000010110 spontaneous platelet aggregation Diseases 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 239000008107 starch Chemical class 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- UDYFLDICVHJSOY-UHFFFAOYSA-N sulfur trioxide pyridine complex Chemical compound O=S(=O)=O.C1=CC=NC=C1 UDYFLDICVHJSOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 239000011975 tartaric acid Substances 0.000 description 1
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 description 1
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 125000005931 tert-butyloxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(OC(*)=O)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 229960003766 thrombin (human) Drugs 0.000 description 1
- 230000002537 thrombolytic effect Effects 0.000 description 1
- 201000005060 thrombophlebitis Diseases 0.000 description 1
- 230000001732 thrombotic effect Effects 0.000 description 1
- YOIAWAIKYVEKMF-UHFFFAOYSA-N trifluoromethanesulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)C(F)(F)F.OS(=O)(=O)C(F)(F)F YOIAWAIKYVEKMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FTVLMFQEYACZNP-UHFFFAOYSA-N trimethylsilyl trifluoromethanesulfonate Chemical compound C[Si](C)(C)OS(=O)(=O)C(F)(F)F FTVLMFQEYACZNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910021642 ultra pure water Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012498 ultrapure water Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H3/00—Compounds containing only hydrogen atoms and saccharide radicals having only carbon, hydrogen, and oxygen atoms
- C07H3/06—Oligosaccharides, i.e. having three to five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
- A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
- A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H1/00—Processes for the preparation of sugar derivatives
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
- C07H15/26—Acyclic or carbocyclic radicals, substituted by hetero rings
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K9/00—Peptides having up to 20 amino acids, containing saccharide radicals and having a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K9/001—Peptides having up to 20 amino acids, containing saccharide radicals and having a fully defined sequence; Derivatives thereof the peptide sequence having less than 12 amino acids and not being part of a ring structure
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Hematology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Abstract
Описывается новый пентасахаридный конъюгат формулы (I);
в которой R независимо представляет собой SO3 - или СН3; вставка представляет гибкую вставку длиной 13-25 атомов; заряд пентасахаридного остатка уравновешен положительно заряженными противоионами; и общее количество сульфатных групп в пентасахаридном остатке составляет 4, 5 или 6. Способ его получения и фармацевтическая композиция на его основе для лечения заболеваний, опосредованных или связанных с тромбином. 3 н. и 6 з.п. ф-лы.
Description
Изобретение относится к новому антитромботическому соединению, фармацевтической композиции, содержащей соединение в качестве активного ингредиента, а также к применению названного соединения для производства лекарственных средств.
Сериновые протеазы являются ферментами, которые играют важную роль в каскаде свертывания крови. Важной сериновой протеазой является фактор Ха, который катализирует превращение протромбина в тромбин. Тромбин является конечным сериновым протеолитическим ферментом в каскаде свертывания. Основная функция тромбина заключается в расщеплении фибриногена с образованием фибриновых мономеров, которые поперечно сшиваются, формируя нерастворимый гель. Кроме того, тромбин регулирует свою собственную продукцию посредством активации факторов V и VIII на более ранней стадии каскада. Тромбин также осуществляет важные функции на клеточном уровне, где он воздействует на специфические рецепторы, чтобы вызвать агрегацию тромбоцитов, активацию эндотелиальных клеток и пролиферацию фибробластов. Таким образом, тромбин осуществляет центральную регуляторную роль в гемостазе и образовании тромба.
Недавно при разработке синтетических ингибиторов сериновых протеаз синтетический NAPAP-пентасахаридный конъюгат был описан как антитромботический агент, оказывающий двойное действие - как непосредственно антитромбиновую активность, так и ATIII-опосредованную анти-Ха активность (ATIII: антитромбин III) (Bioorg. Med. Chem. Lett. 1999, 9 (14), 2013-8). Хотя описанное антитромботическое средство может представлять интерес вследствие высокого сульфатного содержания в пентасахаридном остатке, с этим соединением связаны HIT-перекрестная реакционная способность и нейтрализация PF4 (Thromb. Haem. Suppl. 1997, p.363, PD1485).
В настоящее время установлено, что соединения формулы (I) являются антитромботическими агентами, характеризующимися превосходным и благоприятным двойным профилем. Соединения формулы (I) имеют фармакологически удобный период полувыведения, допускающий прием лекарства один раз в день, и они с трудом нейтрализуются PF4. Кроме того, снижается риск кровотечения. В целом, соединения формулы (I) характеризуются привлекательным сочетанием фармакологических свойств.
Соединение формулы (I):
в которой R независимо означает SO3 - или СН3;
вставка представляет собой гибкую вставку длиной 13-25 атомов, предпочтительно 16-22 и наиболее предпочтительно 19 атомов;
заряд пентасахаридного остатка уравновешивается положительно заряженными противоионами; а общее количество сульфатных групп в пентасахаридном остатке составляет 4, 5 или 6;
или его фармацевтически подходящая соль, пролекарство или сольват.
Соединения данного изобретения используются для лечения и профилактики заболеваний, опосредованных тромбином и связанных с тромбином. Заболевания включают в себя ряд тромботических и протромботических состояний, при которых активируется каскад свертывания, которые включают тромбоз глубоких вен, эмболию легких, тромбофлебиты, закупорку артерии в результате тромбоза или эмболии, повторную закупорку артерии во время или после ангиопластики или тромболизиса, рестеноз после повреждения артерии или инвазивных кардиологических процедур, послеоперационный тромбоз или эмболию вен, острый или хронический атеросклероз, инсульт, инфаркт миокарда, злокачественные опухоли и метастазы и нейродегенеративные заболевания, не ограничиваясь вышеперечисленным. Соединения изобретения также можно использовать как антикоагулянты в экстракорпоральном кровообращении, что необходимо при диализе и оперативном вмешательстве. Соединения изобретения также можно использовать как антикоагулянты in vitro.
В частности, соединения формулы (I) используются как антитромботические средства по артериальным показаниям.
Согласно данному изобретению, предпочтительными соединениями являются соединения, в которых пентасахаридный остаток имеет структуру:
Химическая природа вставки имеет второстепенное значение для антитромботической активности соединений изобретения. Однако вставка соединений изобретения является гибкой, что означает, что вставка не содержит жестких элементов, таких как ненасыщенные связи или циклические структуры. Подходящие вставки легко могут быть сконструированы специалистами в данной области. Предпочтительные вставки содержат по крайней мере один -(CH2CH2O)- элемент. Более предпочтительные вставки содержат три -(CH2CH2O)- элемента. Наиболее предпочтительной вставкой является *-(CH2CH2O)3-(CH2)2-NH-C(О)-(CH2)3-NH-C(О)-СН2-, конец, обозначенный *, присоединяется к пентасахаридному остатку.
Предпочтительные соединения формулы (I) представляют собой соединения формулы (Ia), в которой р означает 1-5, n равно 1-5, и m равно 1 или 2. Наиболее предпочтительным соединением является соединение формулы (Ia), в которой р равно 3, n равно 3, и m равно 1.
Термин «положительно заряженный противоион» означает H+, Na+, K+, Ca2+ и тому подобное. Предпочтительно соединения формулы (I) находятся в форме их натриевой соли.
Термин «пролекарство» подразумевает соединение изобретения, в котором аминогруппа амино-фрагмента защищена, например, гидрокси или (1-6С)алкоксикарбонильной группой. Согласно данному изобретению сольваты включают в себя гидраты.
Соединения изобретения, которые находятся в форме свободного основания, могут быть выделены из реакционной смеси в форме фармацевтически приемлемой соли. Фармацевтически приемлемые соли также можно получать в результате обработки свободного основания формулы (I) органической или неорганической кислотой, такой как хлористоводородная, бромистоводородная, йодистоводородная кислота, серная кислота, фосфорная кислота, уксусная кислота, пропионовая кислота, гликолевая кислота, малеиновая кислота, малоновая кислота, метансульфоновая кислота, фумаровая кислота, янтарная кислота, винная кислота, лимонная кислота, бензойная кислота, аскорбиновая кислота и тому подобные.
Соединения данного изобретения содержат хиральные атомы углерода и, поэтому могут быть получены в виде чистого энантиомера или в виде смеси энантиомеров, или в виде смеси, содержащей диастереомеры. Способы получения чистых энантиомеров хорошо известны в данной области, например кристаллизация солей, которые получены из оптически активных кислот и рацемической смеси, или хроматография с использованием хиральных колонок. Для диастереомеров можно применять колонки с прямой или обращенной фазой.
Соединения данного изобретения можно получать посредством сначала активации карбоксилатной группы аналога NAPAP формулы II, а впоследствии присоединения остатка пентасахарид-вставка, содержащего группу амина (формула III), возможно, с последующим снятием защиты с амидинового фрагмента.
Карбоксилатная группа в соединениях формулы II может быть активирована как смешанный ангидрид или, более предпочтительно, как активированный сложный эфир N-гидроксисукцинимида, пентафторфенол или 1-гидроксибензотриазол. На стадии связывания группа бензамидина в формуле II может быть незащищенной (R'=R''=H) или, возможно, может быть защищена с использованием группы карбамата, предпочтительно аллилоксикарбонила (R' и/или R'' соответствуют Н2С=СН-СН-С(О)О) или бензилоксикарбонила (R' и/или R'' соответствуют PhCH2-С(О)О). Аллилоксикарбонильная и бензилоксикарбонильная защитные группы могут быть удалены при относительно мягких условиях. Аллилоксикарбонильную группу можно удалить, используя Pd в присутствии слабого нуклеофила, такого как морфолин или малоновый эфир. Бензилоксикарбонильная группа может быть удалена при таких условиях, как водород / Pd(C). Альтернативно, можно применять синтетические предшественники бензамидина, такие как N-алкоксибензамидин или N-бензилоксибензамидин (R'=Н, R''=алкокси или бензилокси). Упомянутые синтетические предшественники могут быть превращены в бензамидин, используя восстанавливающие условия, такие как гидрирование (например, Fujii, Т et al., Chem. Pharm. Bull, 39, 301, 1991 и Fujii, T et al., Chem. Pharm. Bull, 42, 1231, 1994).
Предпочтительным предшественником бензамидина является 1,2,4-оксадиазолин-5-он (-R'-R''-=-С(О)О-). Указанный предшественник может быть превращен в бензамидин гидрированием (Bolton, R.E. et al. Tetrahedron Letters, vol 36, № 25, 1995, рр. 4471-4474).
Соединения формулы II могут быть получены различными путями при использовании способов, известных в данной области. Способ получения соединений формулы II, в которой R'=R''=Н; n равно 3 и m равно 1, описан в ЕР 0513543. Соединения формулы II, в которых амидин защищен, например, аллилоксикарбонильной или бензилоксикарбонильной группой, могут быть пролучены из соединений формулы IV, в которой амидин защищен аллилоксикарбонильной или бензилоксикарбонильной группой при использовании общеизвестных в данной области способов связывания пептидных фрагментов. Карбаматы формулы IV могут быть получены, например, из соответствующего амидина (формула IV, R'=R''=Н) как описано в литературе, например Weller, Т et al., J. Med. Chem. 39, 3119, 1996).
Соединения N-алкоксибензамидина и N-бензилоксибензамидина формулы II можно получить из соединения V (описано в ЕР 0513543) в результате обработки этого циано-соединения O-алкилгидроксиамином или O-бензилоксиамином с последующим удалением трет-бутилового эфира при кислых условиях.
Альтернативно, соединения N-алкоксибензамидина и N-бензилоксибензамидина формулы II могут быть получены посредством сначала удаления трет-бутилового эфира соединения V, используя кислые условия, чтобы получить соединение VI, и впоследствии реакции полученного циано-соединения с O-алкилгидроксиамином или O-бензилоксиамином.
Соединения формулы II, в которых -R'-R''-=-С(O)O-(группа 1,2,4-оксадиазолин-5-она) могут быть получены из соединений формулы IV, в которых -R'-R''-=-С(O)O-, используя способы связывания пептидных фрагментов, известные в данной области.
Синтез остатков амино-олигосахарид-вставка формулы III может быть осуществлен с использованием способов, описанных в ЕР 0649854. Сахаридные остатки соединений данного изобретения можно получать в соответствии со способами, известными в данной области, например из WO 99/25720.
Пептидное связывание, технологическая стадия вышеописанного способа получения соединений изобретения, может быть осуществлено посредством известных в данной области способов связывания или конденсации пептидных фрагментов, таких как азидный способ, способ смешанных ангидридов, способ активированных сложных эфиров или, предпочтительно, посредством карбодиимидного способа, особенно с присоединением каталитических или подавляющих рацемизацию соединений, подобных N-гидроксисукцинимиду и N-гидроксибензотриазолу. Обзор представлен в The Peptides, Analysis, Synthesis, Biology, vol 3, E. Gross and J. Meienhofer, eds. (Academic Press, New York, 1981) и Bodanszky, M.; Principles of peptide synthesis, Springer-Verlag, 1984.
Функциональные аминогруппы, присутствующие в соединениях, можно защитить N-защитной группой, которая подразумевает общеизвестную в пептидной химии группу для защиты α-амино-группы, подобную трет-бутилоксикарбонильной (Вое) группе, бензилоксикарбонильной (Z) группе, 9-фторенилметилокси-карбонильной (Fmoc) группе или группе фталоила (Phth). Удаление защитных групп может быть осуществлено различными способами в зависимости от природы этих защитных групп. Обычно снятие защиты происходит в кислых условиях и в присутствии акцепторов уходящих групп. Обзор защитных групп для аминогрупп соединений и способов их удаления представлен в вышеупомянутом The Peptides, Analysis, Synthesis, Biology, vol 3, и, кроме того, описано Greene, T.W. and Wuts, P.G.M. в Protective groups in organic synthesis, John Wiley & Sons Inc., 1991.
Соединения изобретения можно вводить энтерально или парентерально. Точная доза и схема приема названных соединений и их композиций обязательно будет зависеть от потребности индивидуального субъекта, которому вводится лекарственное средство, тяжести болезни или необходимости и заключения практикующего врача. Обычно, парентеральное применение требует более низких доз, чем другие способы введения, которые в большей степени зависят от всасывания. Однако для человека ежедневные дозы предпочтительно составляют 0,001-100 мг на кг массы тела, более предпочтительно 0,01-10 мг на кг массы тела.
Лекарства, приготовленные с соединениями данного изобретения, также можно использовать как адъювант в острой антикоагулянтной терапии. В таком случае, лекарственное средство вводят с другими соединениями, эффективными при лечении таких патологических состояний.
Смешанные с фармацевтически приемлемыми вспомогательными веществами, например как описано в стандартной рекомендации Gennaro et al., Remington's Pharmaceutical Sciences (18th ed., Mack Publishing Company, 1990, смотри особенно Part 8: Pharmaceutical Preparations and Their Manufacture) соединения могут быть спрессованы в твердые дозированные формы, такие как пилюли, таблетки, или приготовлены в виде капсул или суппозиторий. Вместе с фармацевтически приемлемыми жидкостями соединения также можно применять в виде раствора, суспензии, эмульсии, например для применения в виде инъекционного препарата или в виде спрея, например для использования в качестве назального спрея.
Для создания дозированных стандартных форм, например таблеток, предполагается использование общепринятых добавок, таких как наполнители, пигменты, полимерные связующие вещества и тому подобное. Вообще может быть использована любая фармацевтически приемлемая добавка, которая не препятствует действию активных соединений.
Приемлемые носители, с которыми могут быть введены композиции, включают в себя лактозу, крахмал, производные целлюлозы и тому подобное, или их смеси, используемые в соответствующих количествах.
Далее изобретение проиллюстрировано следующими примерами.
ПРИМЕР 1
Используемые сокращения:
Ас = ацетил
Bn = бензил
DBU = 1,8-диазабицикло[5.4.0]ундец-7-ен
DCC = дициклогексилкарбодиимид
DMF = N,N-диметилформамид
Su = сукцинимидил
Me = метил
TBTU = тетрафторборат 2-(1Н-бензотиазол-1-ил)-1,1,3,3-тетраметилурония
TEA = триэтиламин
TFA = трифторуксусная кислота
Z = бензилоксикарбонил
Ряд соединений относится к соединениям, представленным в схемах 1-7.
Соединение 3
К перемешиваемому раствору соединения 1 (53,6 г, 143,6 ммоль) (R. Roy; W.K.C. Park; Q. Wu; S-N. Wang, Tetrahedron Lett., 1995, 36(25), 4377-80) и соединения 2 (27,9 г, 89,3 ммоль) (S.J.Danishefsky; M.P.DeNinno; G.B.Philips; R.E.Zeile, Tetrahedron, EN, 1986, 42, 11, 2809-2819) в 930 мл DMF добавляли гидрид натрия (7,7 г 60%-дисперсии, 192,2 ммоль) при 50°С. Через 1 час реакционную смесь нагревали до 120°С. После смешивания в течение 5 минут реакционную смесь охлаждали до 40°С и разбавляли водой и экстрагировали три раза дихлорметаном. Объединенные органические слои промывали водой и концентрировали в вакууме, получая неочищенный продукт 3 (54 г). TLC: Rf (фактор удержания)=0,23, простой эфир 100%.
Соединение 4
К перемешиваемому раствору соединения 3 (89,3 ммоль) в 800 мл сухого толуола и 800 мл уксусного ангидрида по каплям добавляли 361,5 мл охлажденного раствора серной кислоты в уксусном ангидриде (16,5 мл концентрированной серной кислоты и 345,0 мл уксусного ангидрида) при -30°С. Через 2 час реакционную смесь гасили 240 мл TEA и перемешивали при комнатной температуре. К раствору добавляли водный бикарбонат натрия (5%) и водный слой экстрагировали три раза этилацетатом. Объединенные органические слои дважды промывали водой и концентрировали в вакууме. Описанную процедуру повторяли, получая неочищенное соединение 4 (53 г). TCL: Rf=0,29, простой эфир 100%.
Соединение 5
К перемешиваемому раствору соединения 4 (89,3 ммоль) и этантиола (11,1 мл, 150,3 ммоль) в 370 мл сухого толуола по каплям добавляли раствор BF3-эфирата в толуоле (23,9 мл BF3-эфирата и 190 мл толуола) при 0°С. После перемешивания в течение 16 часов при комнатной температуре реакционную смесь гасили TEA и водным бикарбонатом натрия и три раза экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические слои промывали водой и концентрировали в вакууме. Грубый продукт очищали методом колоночной хроматографии (толуол/этилацетат=1/1 до 0/1 об./об.), получая соединение 5 (21,4 г). TLC: Rf=0,31, толуол/этилацетат=4/6, об./об.
Соединение 7
Раствор донора 5 (15,0 г, 30,3 ммоль) и акцептора 6 (23,0 г, 30,3 ммоль) (WO 99/25720) в смеси сухой простой эфир/дихлорметан (232 мл, 3/1, об./об.) перемешивали в течение 30 минут в потоке азота в присутствии активированных молекулярных сит 4А (7,6 г). Затем к реакционной смеси по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (5,5 г, 19,1 ммоль) и трифторметансульфокислоты (triflic acid) (0,49 мл, 5,6 ммоль) в смеси диоксан/дихлорметан (69,8 мл, 1/1, об./об.) в течение 75 минут при -20°С. Через 30 минут, TEA (5 мл) добавляли к реакционной смеси, которую перемешивали в течение 10 минут, а потом фильтровали. Фильтрат промывали водным тиосульфатом натрия (10%) и водным бикарбонатом (10%) и концентрировали в вакууме. Продукт очищали колоночной хроматографией (0 до 5% ацетона в дихлорметане), получая соединение 7 (19,6 г). TLC: Rf=0,1, простой эфир/гептан=8 /2, об./об.
Соединение 8
К перемешиваемому раствору соединения 7 (19,5 г, 16,4 ммоль) в смеси сухой толуол/уксусный ангидрид (442 мл, 1/1, об./об.) по каплям добавляли 131,5 мл охлажденного раствора серной кислоты в уксусном ангидриде (11,5 мл концентрированной серной кислоты и 120 мл уксусного ангидрида) при -26°С. Через 75 минут добавляли TEA (73,5 мл) при -20°С. Уксусный ангидрид разлагали, постепенно добавляя 330 мл воды, поддерживая температуру между 25°С и 30°С. После перемешивания в течение 16 часов смесь вливали в 800 мл воды и дважды экстрагировали толуолом. Объединенные органические слои промывали водой и концентрировали в вакууме. Грубый продукт очищали колоночной хроматографией (толуол/этилацетат/этанол=96/2/2, об./об./об.), получая соединение 8 в виде белой пены (13,2 г).
TLC: Rf=0,29, толуол/этанол=9/1, об./об.
Соединение 9
К раствору соединения 8 (13,2 г, 11,7 ммоль) в сухом толуоле (66 мл) добавляли морфолин (4,1 мл, 46,9 ммоль) при 32°С. После перемешивания в течение 42 час при 32°С реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и добавляли водную хлористоводородную кислоту (17,6 мл, 4 N). Смесь разбавляли водой и дважды экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические слои дважды промывали водой, высушивали над сульфатом натрия и концентрировали в вакууме, получая неочищенное соединение 9 (12,6 г).
TLC: Rf=0,32, толуол/ацетон=7/3, об./об.
Соединение 12
К раствору соединения 9 (12,6 г, 11,6 ммоль) в дихлорметане (114 мл) добавляли трихлорацетонитрил (3,5 мл, 34,9 ммоль) и DBU (52,2 мкп, 0,35 ммоль). После перемешивания в течение 2 час при комнатной температуре к реакционной смеси добавляли активированные молекулярные сита 4А (24 г) и акцептор 11 (8,9 г, 13,0 ммоль) (WO 99/25720) в дихлорметане (45 мл). После перемешивания в течение 30 минут при комнатной температуре, смесь охлаждали до -20°С и по каплям добавляли раствор триметилсилилтрифторметансульфоната (405 мкл, 2,1 ммоль) в дихлорметане (100 мл). После перемешивания в течение 30 минут -20°С добавляли бикарбонат натрия и реакционную смесь фильтровали. Фильтрат вливали в водный бикарбонат натрия и три раза экстрагировали дихлорметаном. Объединенные органические слои дважды промывали водой и концентрировали в вакууме. Продукт очищали посредством колоночной хроматографии (1: SiO2: 0-10% ацетон в простом эфире; 2: SiO2: толуол/ацетон=85/15 до 80/20, об./об.; 3: RP-18: вода/ацетонитрил=2/8 до 0/10, об./об.), получая чистое соединение 12 (8,9 г). TLC: Rf=0,37, толуол/ацетон=7/3, об./об.
Соединение 14
Суспензию соединения 12 (8,9 г, 5,1 ммоль) и 10% Pd/C (8,9 г) в 312 мл DMF и 45 мл воды перемешивали в непрерывном потоке водорода. Через 4,5 час катализатор Pd/C удаляли фильтрованием. Фильтрат концентрировали до объема 400 мл и обрабатывали 10% Pd/C (1,5 г) в непрерывном потоке водорода в течение 5,5 час. Катализатор удаляли фильтрованием. К фильтрату (900 мл) добавляли водную гидроокись натрия (32 мл, 4 N). После перемешивания в течение 4 час при комнатной температуре смесь подкисляли до рН 6,6 1 N хлористоводородной кислотой, а затем концентрировали в вакууме. Неочищенный продукт обессоливали на колонке с сефадексом G-25, который уравновешивали водой. Соответствующие фракции объединяли и лиофилизировали, получая соединение 14 (4,0 г).
Соединение 15
Пентасахарид 14 (700 мг, 0,61 ммоль) растворяли в воде (13,2 мл) и DMF (3,3 мл) и обрабатывали N-(бензилоксикарбонилокси)сукцинимидом (224 мг, 0,90 ммоль) и N-этилморфолином (233 мкл, 1,83 ммоль). После перемешивания в течение 15 минут реакционную смесь непосредственно наносили на колонку RP-18 и элюировали смесью вода/ацетонитрил 10/0 до 7/3. Соответствующие фракции объединяли и концентрировали до небольшого объема и наносили на ионообменную колонку с Dowex 50 WX4-H+ в воде. Элюат концентрировали в вакууме, чтобы получить чистое соединение 15 (482 мг).
Соединение 16
К раствору соединения 15 (471 мг, 0,37 ммоль) в DMF (4,7 мл) добавляли комплекс трехокись серы-пиридин (1,1 г, 6,6 ммоль) и смесь перемешивали в течение 16 часов при 30°С. Смесь охлаждали до комнатной температуры и по каплям добавляли к охлажденному 10% раствору бикарбоната натрия (16,7 мл, 19,9 ммоль) и перемешивали в течение 1 часа при комнатной температуре. Смесь концентрировали до небольшого объема и наносили на колонку с сефадексом G-25 и элюировали водой. Соответствующие фракции объединяли и концентрировали до небольшого объема, который впоследствии пропускали через колонку с Dowex Na+ HCRW2, элюируя водой. Элюат концентрировали и повторно растворяли в 8,3 мл 0,2 N хлористоводородной кислоты и оставляли стоять в течение 16 часов при 4°С. Реакционную смесь нейтролизовали 8 мл 0,2 N гидроокиси натрия и обессоливали на колонке с сефадексом G-25, элюируя водой. Соответствующие фракции объединяли и концентрировали в вакууме, получая чистое соединение 16 (840 мг).
Соединение 17
Суспензию соединения 16 (0,37 ммоль) и 10% Pd/C (820 мг) в трет-бутаноле (85 мл) и воде (79 мл) и в присутствии нескольких капель уксусной кислоты перемешивали в непрерывном потоке водорода. Через 3 часа катализатор Pd/C удаляли фильтрованием, а фильтрат концентрировали и лиофилизировали, получая чистое соединение 17 (675 мг).
Гидрохлорид бензилового эфира 4-[{4-[[(1R)-[[4-(аминоиминометил)фенил]метил]-2-оксо-2-(1-пиперидинил)этил]амино]-3-[[(4-метокси-2,3,6-триметилфенил)сульфонил}амино]-1,4-(S)-диоксобутил]амино]бутановой кислоты (18)
К раствору гидрохлорида 4-[[(1R)-1[{4-(аминоиминометил)фенил]метил]-2-оксо-2-(1-пиперидинил)этил]амино]-3-[[(4-метокси-2,3,6-триметилфенил)сульфонил]амино]-4-оксо-(3S)бутановой кислоты, (2,38 г, 3,96 ммоль) (Tetrahedron 51, 12047-12068, 1995) и бензил-(4-аминомасляная кислота)бензолсульфоната (1,52 г, 3,96 ммоль) (J. Am. Chem. Soc. 105, 5278-5284, 1983) в DMF (40 мл) в атмосфере азота добавляли N,N-диизопропилэтиламин (0,689 мл, 3,96 ммоль) и тетрафторборат тетраметилбензотриазолилурония (1,91 г, 5,94 ммоль). рН реакционной смеси поддерживали при 6, используя N,N-диизопропилэтиламин. Реакционную смесь перемешивали в течение 4 дней при комнатной температуре, концентрировали, растворяли в этилацетате, промывали 5% карбонатом натрия и 0,1 N хлористоводородной кислотой, высушивали над сульфатом магния и концентрировали. Остаток растворяли в сухом этаноле (5 мл), осаждали сухим диизопропиловым эфиром, фильтровали, чтобы получить 2,47 г указанного в заголовке соединения 18.
Rf=0,8, этилацетат/пиридин/уксусная кислота/вода=88/31/18/7, об./об./об./об.; Mass (ESI+): 777,4 [М+Н]+
Гидрохлорид 4-[{4-[[(1R)-1-[[4-(аминоиминометил)фенил]метил]-2-оксо-2-(1-пиперидинил)этил]амино]-3-[[(4-метокси-2,3,6-триметилфенил)сульфонил}амино]-1,4-(S)-диоксобутил]амино]бутановой кислоты (19)
Суспензию соединения 18 (2,42 г, 3,11 ммоль) и 10% Pd/C (400 мг) в смеси метанол/вода (40 мл, 3/1, об./об.) перемешивали в непрерывном потоке водорода. Через 8 часов реакционную смесь фильтровали, фильтрат концентрировали и три раза выпаривали вместе со смесью метанол/толуол (1/10, об./об.). Остаток растворяли в сухом этаноле (5 мл), осаждали сухим диэтиловым эфиром, фильтровали и высушивали. Остаток растворяли в воде и наносили непосредственно на препаративную колонку DeltaPak Rp-C18 для ВЭЖХ, используя систему градиентной элюции 20% А/60% В/20% С до 20% А/14% В/66% С в течение 60 мин при скорости течения 40 мл/мин (А: 0,5 М фосфатный буфер, рН 2,1; В: вода; С: ацетонитрил/вода=6/4). Выход 598 мг.
Rf=26,4 мин (3-10 мин: 20-43% С + 20% А; 10-50 мин: 43-66% С + 20% А), (А: фосфатный буфер, рН 2,1; В: вода; С:ацетонитрил/вода=6/4, об./об.), аналитическая колонка supelcosil LC-18-DB для ВЭЖХ; Mass (ESI+): 687,2 [M+H]+, (ESI-): 685,2 [M-H]
Соединение 21 из соединения 17 и соединения 19
К раствору соединения 19 (40 мг, 58,3 мкмоль) в DMF (800 мкл) добавляли N-гидроксисукцинимид (9,0 мг, 78,1 мкмоль), DCC (18,5 мг, 89,7 мкмоль) и 1-гидроксибензотиазол (8,8 мг, 65,1 мкмоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 40 часов при комнатной температуре. Реакционную смесь фильтровали через дикалит и дикалит четыре раза промывали DMF (284 мкл). К фильтрату добавляли 0,1 М Na2HPO4-буфер (1936 мкл, рН 7,5) и пентасахарид 17 (94,7 мг, 52,6 мкмоль). После перемешивания в течение 30 минут, смесь фильтровали через дикалит, концентрировали и наносили на колонку с сефадексом G-25 и элюировали смесью ацетонитрил/вода (1/1, об./об.). Соответствующие фракции объединяли, концентрировали и дважды обессоливали посредством колоночной хроматографии через сефадекс G-50 (вода). Соответствующие фракции объединяли и лиофилизировали, получая конъюгат 21 в виде белого твердого вещества (95,8 мг). Mass (ESI+)=2469, ВЭЖХ: Rt=8,3 мин (20-80% В в течение 15 минут; А=вода/ацетонитрил 8/2; В=2 М NaCl/ацетонитрил 8/2, об./об.), аналитическая колонка MonoQ HR 5 ВЭЖХ.
Соединение 22
Раствор (R)-N-Вос(4-цианофенил)аланина (25,0 г, 86,1 ммоль), пиперидина (21,3 мл, 215,3 ммоль) и TBTU (41,5 г, 129,2 ммоль) в сухом СН2Cl2 (500 мл) перемешивали при комнатной температуре в потоке азота в течение 2 часов. Реакционную смесь промывали последовательно 0,2 N хлористоводородной кислотой, водой, водным бикарбонатом натрия (насыщенный) и водой. Органический слой высушивали над MgSO4, фильтровали и концентрировали в вакууме. Продукт растворяли в горячем этилацетате (35 мл), осаждали гептаном (190 мл) и фильтровали, чтобы получить соединение 22 (27,75 г).
TLC: Rf=0,58, гептан/этилацетат=3/7, об./об.
Соединение 23
Раствор соединения 22 (25,6 г, 71,7 ммоль), гидроксиламин·HCl (7,1 г, 101,8 ммоль) и триэтиламина (16,8 мл, 120,5 ммоль) в абсолютном этаноле (307 мл) перемешивали при 80°С в течение 4 часов. При охлаждении смеси до комнатной температуры формировались кристаллы. Кристаллы отфильтровывали, промывали этанолом и простым эфиром и высушивали в эксикаторе, чтобы получить соединение 23 (24,5 г).
TLC: Rf=0,15, гептан/этилацетат=3/7, об./об.
Соединение 24
Раствор соединения 23 (24,5 г, 62,7 ммоль) и этилхлорформиата (7,2 мл, 75 ммоль) в сухом пиридине (245 мл) перемешивали при 115°С в течение 2 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и вливали в воду (1250 мл) и три раза экстрагировали этилацетатом (500 мл). Объединенный органический экстракт высушивали над MgSO4, фильтровали и концентрировали в вакууме, чтобы получить соединение 24 (24,3 г).
TLC: Rf=0,42, CH2Cl2/MeOH 95/5, об./об.
Соединение 25
Раствор соединения 24 (24,3 г, 58,4 ммоль) в сухом CH2Cl2 (122 мл) и TFA (122 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов и концентрировали в вакууме в присутствии толуола, чтобы получить соединение 25 (37,6 г).
TLC: Rf=0,35, CH2Cl2/MeOH 8/2, об./об.
Соединение 26
Суспензию H-Asp-(Отрет-Bu)-ОН (39 г, 206,35 ммоль), 4-метокси-2,3,6-триметилбензолсульфонилхлорида (62 г, 249,3 ммоль) и диизопропиламина (89 мл, 635 ммоль) в DMF (950 мл) и воде (450 мл) перемешивали при 0°С в течение 3 часов. Реакционную смесь вливали в смесь лед/вода (5 л) и дважды промывали диэтиловым эфиром, подкисляли водной хлористоводородной кислотой (4 N, 72 мл) и 3 раза экстрагировали этилацетатом. Объединенные этилацетатные слои высушивали над MgSO4, фильтровали и концентрировали в вакууме, чтобы получить соединение 26 (97,7 г).
TLC: Rf=0,67, CH2Cl2/MeOH 8/2, об./об.
Соединение 27
Раствор соединения 25 (33,5 г), соединения 26 (24,7 г), TBTU (36,8 г, 114,6 ммоль) и диизопропиламина (27,2 мл, 194,1 ммоль) в сухом DMF (670 мл) перемешивали в течение 2 часов и концентрировали в вакууме. Остаток растворяли в этилацетате (750 мл), промывали водным бикарбонатом натрия (5%, 1250 мл) и водной хлористоводородной кислотой (0,1 N, 1250 мл), высушивали над MgSO4, фильтровали и концентрировали в вакууме, чтобы получить соединение 27 (33,8 г).
TLC: Rf=0,88, CH2Cl2/MeOH 8/2, об./об.
Соединение 28
Раствор соединения 27 (33,8 г, 48,3 ммоль) в сухом СН2Cl2 (170 мл) и TFA (170 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов и концентрировали в вакууме в присутствии толуола, чтобы получить соединение 28 (32,3 г).
TLC: Rf=0,73, СН2Cl2/МеОН 8/2, об./об.
Соединение 29
Раствор соединения 28 (32,3 г), H-GABA-Отрет-Bu·HCl (9,5 г, 48,4 ммоль), TBTU (29,0 г, 90,5 ммоль) и диизопропиламина (25,2 мл, 179,8 ммоль) в сухом DMF (622 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов и концентрировали в вакууме. Остаток растворяли в этилацетате (840 мл), промывали водным бикарбонатом натрия (5%, 1400 мл) и водной хлористоводородной кислотой (0,1 N, 1400 мл), высушивали над MgSO4, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток растворяли в этаноле (75 мл) и медленно добавляли к перемешиваемому диизопропиловому эфиру (2990 мл), получая соединение 29 в виде не совсем белых кристаллов (32,0 г).
TLC: Rf=0,56, CH2Cl2/MeOH 9/1, об./об.
Соединение 30
Раствор соединения 29 (3,0 г, 3,82 ммоль) в сухом CH2Cl2 (15 мл) и TFA (15 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов и концентрировали в вакууме в присутствии толуола. Остаток очищали на силикагеле, используя смесь СН2Cl2/МеОН (0%-6% МеОН), получая чистое соединение 30 (1,98 г).
TLC: Rf=0,56, СН2Cl2/МеОН 8/2, об./об.
Соединение 31
Раствор соединения 30 (900 мг, 1,23 ммоль), TBTU (396 мг, 1,2 ммоль) и диизопропиламина (215 мкл, 1,53 ммоль) в DMF (45 мл) перемешивали в течение 2 часов при комнатной температуре. Добавляли соединение 17 (2,0 г, 1,11 ммоль) и после перемешивания в течение 4 часов смесь концентрировали в вакууме, получая соединение 31 (4,17 г).
Соединение 21 из соединения 31
Суспензию соединения 31 (4,17 г) и 10% Pd/C (2,8 г) в трет-бутиловом спирте (28 мл) и воде (56 мл) перемешивали в течение ночи в непрерывном потоке водорода. Катализатор Pd/C удаляли фильтрованием, а фильтрат концентрировали в вакууме. Остаток растворяли в воде и очищали на колонке с Q-сефарозой. Соответствующие фракции объединяли, концентрировали и обессоливали с помощью колоночной хроматографии через сефадекс G-25 (вода). Соответствующие фракции объединяли и лиофилизировали, чтобы получить конъюгат 21 в виде белого твердого вещества (1,74 г).
Биологические активности соединений данного изобретения определяли с помощью следующих тест-способов.
I Исследование антитромбиновой активности
Тромбин (Фактор IIa) является фактором каскада свертывания крови.
Антитромбиновую активность соединений данного изобретения оценивали посредством спектрофотометрического измерения скорости гидролиза хромогенного субстрата s-2238, расщепляемого тромбином. Описанный анализ антитромбиновой активности в буферной системе использовали, чтобы определить величину IC50 испытываемого соединения.
Исследуемая среда: Буфер - трометамин-NaCl-полиэтиленгликоль 6000 (TNP)
Стандартное соединение: 12581 (Kabi)
Наполнитель: TNP-буфер.
Растворимость может быть установлена при использовании диметилсульфоксида, метанола, этанола, ацетонитрила или трет-бутилового спирта, которые не проявляют побочных эффектов в концентрациях вплоть до 2,5% в конечной реакционной среде.
Методика:
Реагенты* 1. Трометамин-NaCl (TN) буфер; состав буфера:
Трометамин (трис) 6,057 г (50 ммоль), NaCl 5,844 г (100 ммоль), вода до 1 л. рН раствора доводили HCl до 7,4 при 37°С (10 ммоль·л-1). 2. TNP буфер: Полиэтиленгликоль 6000 растворяли в TN-буфере для получения концентрации 3 г·л-1 3. Раствор S-2238: S-2238 из одной ампулы (25 мг Chromogenix; Sweden) растворяли в 20 мл TN-буфера для получения концентрации 1,25 мг·мл-1 (2 ммоль·л-1). 4. Раствор тромбина: Тромбин человека (1000 NIH единиц/ампулу. Enzyme Res. Lab. Inc., USA) растворяли в TNP-буфере, чтобы получить исходный раствор 50 NIH единиц·мл-1. Непосредственно перед использованием приготовленный раствор разбавляли TNP-буфером до получения концентрации 30,2 NIH единиц·мл-1.
- Все использованные ингредиенты были аналитически чистыми.
- Для водных растворов использовали ультрачистую воду (качество - Milli-Q).
Приготовление растворов испытываемых и стандарных соединений
Испытываемые и стандартные соединения растворяли в Milli-Q-воде, чтобы получить исходные концентрации 10-2 моль.л-1. Каждую концентрацию ступенчато разбавляли наполнителем до получения концентраций 10-3, 10-4 и 10-5 моль·л-1. Разведения, включая исходный раствор, использовали в исследованиях (конечные концентрации в реакционной смеси: 3·10-4; 10-4; 3·10-5; 10-5; 3·10-6; 10-6; 3·10-7 и 10-7 моль·л-1, соответственно).
Способ
При комнатной температуре 0,075 мл и 0,025 мл растворов испытываемого соединения или стандартного соединения или наполнителя попеременно пипетировали в лунки титрационного микропланшета и эти растворы разбавляли 0,115 мл и 0,0165 мл TNP-буфера, соответственно. В каждую лунку добавляли аликвоты по 0,030 мл раствора S-2238 и планшет предварительно нагревали и проинкубировали, встряхивая, в термостате (Amersham) в течение 10 минут при 37°С. После преинкубации гидролиз S-2238 начинали добавлением 0,030 мл раствора тромбина в каждую лунку. Планшет инкубировали (со встряхиванием в течение 30 сек) при 37°С. Начиная после 1 минуты инкубации, измеряли оптическую плотность каждого образца при 405 нм каждые 2 минуты в течение периода 90 минут, используя кинетический микропланшетридер (Twinreder plus, Flow Laboratories).
Все данные сосредотачивали в персональном компьютере, используя программу обработки данных (Biolise). Для каждой концентрации соединения (выраженной в моль·л-1 реакционной смеси) и для контроля строили график: оптическая плотность в зависимости от времени реакции в мин.
Оценка реакций: Для каждой конечной концентрации максимальную оптическую плотность рассчитывали по графику анализа. Величину IC50 (конечная концентрация, выраженная в мкмоль·л-1, вызывающая 50% ингибирование максимальной оптической плотности контроля) рассчитывали, используя способ логарифмического преобразования согласно Hafner et al. (Arzneim.-Forsch./Drug Res. 1977; 27(II): 1871-3).
Антитромбиновая активность соединения примера 1: величина IC50: 17 нМ
II Исследование анти-фактор Ха-активности
Активированный Фактор Х (Ха) является фактором каскада свертывания крови. Анти-Ха-активность соединений данного изобретения оценивали посредством спектрофотометрического измерения скорости гидролиза хромогенного субстрата s-2222, расщепляемого Ха. Упомянутое исследование анти-Ха-активности в буферной системе использовали для определения значения IC50 испытываемого соединения.
Стандартное соединение: пентасахарид Org 31540
Наполнитель: TNP-буфер.
Растворимость может быть определена с диметилсульфоксидом, метанолом, этанолом, ацетонитрилом или трет-бутиловым спиртом, которые не вызывают побочных эффектов в концентрациях вплоть до 1% (для DMSO) и 2,5% (для других растворителей) в конечной реакционной смеси.
Методика
Реагенты* 1. Трометамин-NaCl (TN)-буфер; состав буфера: Трометамин (трис) 6,11 г (50,4 ммоль), NaCl 10,17 г (174 ммоль), полиэтиленгликоль 6000 3 г·л-1, вода до 1 л. рН раствора доводили HCl (10 ммоль·л-1) до 7,4 при 37°С. 3. Раствор S-2222: S-2222 из одной ампулы (25 мг; Chromogenix, Sweden) растворяли в воде, чтобы получить концентрацию 0,375 мг/мл-1 (0,5 ммоль·л-1). 4. Раствор Ха: Бычий фактор Ха (71 нКат/ампулу-1; Chromogenix) растворяли в 10 мл TNP-буфера, а затем далее разбавляли TNP-буфером, чтобы получить концентрацию 0,75 нКат/(1,5 Ед.)/мл-1. Разведение должно быть свежеприготовленным. 5. Раствор ATIII: ATIII человека (Chromogenix) растворяли в воде для получения концентрации 1 Ед./мл-1, после этого раствор далее разбавляли 3 объемами TNP-буфера до концентрации 0,25 Ед./мл-1. 6. Стандартный раствор: исходный раствор Org 31540 5,7 анти-Ха Ед./мл-1 разбавляли TNP-буфером до 0,05 Ед./мл-1. 7. Исследуемые образцы: Каждый препарат растворяли в воде и разбавляли TNP-буфером до концентрации 0,05 нмоль·мл-1. Для каждого препарата была приготовлена серия из 9 разведений (фактор разведения 1,5).
Определение активности Ха
Каждый исследуемый образец (0,05 мл) вносили пипеткой в лунку титрационного микропланшета при комнатной температуре. Раствор AT-III (0,05 мл) добавляли к каждому образцу и планшет встряхивали, используя Vari-вибратор. Аликвоты раствора Ха (0,05 мл) вносили пипеткой в каждую лунку через 10 минут после добавления раствора AT-III и планшет снова встряхивали. Строго через 2 мин после добавления раствора Ха 0,1 мл раствора S-2222 пипеткой вносили в каждую лунку и планшет снова встряхивали. Для всех добавлений использовали 12-канальную пипетку. Оставшееся количество Ха катализировало гидролиз S-2222, скорость которого измеряли фотометрически после периодов инкубации 2 и 22 минуты, соответственно, при комнатной температуре. Оптическую плотность каждого образца измеряли при 405 нм, используя аппарат для считывания Microelisa, модель 310С (Organon Teknika, Oss, The Netherlands) и рассчитывали увеличение в оптической плотности (ΔOD). Для каждого исследуемого образца дублировали определение. В серию из каждых 10 образцов включали контроль (0,05 мл TNP-буфер).
Калибровочная кривая
Из аликвоты стандартного раствора калибровочного образца готовили ряд разведений (фактор разведения 1,4 для образцов Org 31540). Полученные стандартные образцы (приблизительно 12 образцов) должны содержать 0,01-0,05 анти-Ха Ед./мл. В пределах каждой серии по 0,05 мл каждого стандартного образца тестировали по крайней мере 3 раза, как описано "Determination of Xa activity". Калибровочная кривая получена посредством построения прямой линии к log среднее ΔOD (контроль) - среднее ΔOD (стандартный образец) против log анти-Ха среднее ΔOD (стандартный образец) величинам Ед./мл, используя метод наименьших квадратов.
Оценка реакций: Для каждого образца определяли среднюю анти-Ха-активность в Ед./мл, используя калибровочную кривую.
Анти-фактор Ха-активность соединения примера 1: 1012 Ед./мкмоль.
Claims (9)
1. Пентасахаридный конъюгат формулы (I)
в которой R независимо представляет собой SO3 - или СН3;
вставка представляет собой гибкую вставку длиной 13-25 атомов;
заряд пентасахаридного остатка уравновешен положительно заряженными противоионами
и общее количество сульфатных групп в пентасахаридном остатке составляет 4, 5 или 6,
или его фармацевтически приемлемая соль.
2. Пентасахаридный конъюгат по п.1, в котором пентасахаридный остаток имеет структуру
3. Пентасахаридный конъюгат по п.1 или 2, в котором вставка имеет длину 16-22 атома.
4. Пентасахаридный конъюгат по любому из пп.1-3, в котором вставка имеет длину 19 атомов.
5. Пентасахаридный конъюгат по любому из пп.1-4, в котором вставка представляет собой *-(CH2CH2O)3-(CH2)2-NH-C(O)-(CH2)3-NH-C(O)-CH2-, причем конец, обозначенный *, присоединен к пентасахаридному остатку.
6. Пентасахаридный конъюгат по п.1, имеющий структуру
7. Пентасахаридный конъюгат по любому из пп.1-6 для лечения заболеваний, опосредованных или связанных с тромбином.
8. Способ получения пентасахаридного конъюгата формулы I по п.1, предусматривающий активацию карбоксилатной группы соединения формулы (II)
где -R'-R''- представляет собой -С(O)O-, и присоединение остатка пентасахарид-вставка формулы (III)
где R имеет значение, определенное в п.1, с последующим снятием защиты с амидинового фрагмента.
9. Фармацевтическая композиция для лечения заболеваний, опосредованных или связанных с тромбином, содержащая пентасахаридный конъюгат по любому из пп.1-6 и фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP99204172.3 | 1999-12-07 | ||
| EP99204172 | 1999-12-07 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2002118117A RU2002118117A (ru) | 2003-12-20 |
| RU2266913C2 true RU2266913C2 (ru) | 2005-12-27 |
Family
ID=8240976
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2002118117/04A RU2266913C2 (ru) | 1999-12-07 | 2000-12-01 | Пентасахаридный конъюгат, способ его получения и фармацевтическая композиция на его основе |
Country Status (23)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US6875755B2 (ru) |
| EP (1) | EP1237897B1 (ru) |
| JP (1) | JP4820517B2 (ru) |
| KR (1) | KR100776607B1 (ru) |
| CN (1) | CN1195767C (ru) |
| AR (1) | AR026726A1 (ru) |
| AU (1) | AU781846B2 (ru) |
| BR (1) | BR0016217A (ru) |
| CA (1) | CA2393042C (ru) |
| CO (1) | CO5251449A1 (ru) |
| CZ (1) | CZ303385B6 (ru) |
| HK (1) | HK1047593A1 (ru) |
| HU (1) | HUP0203471A3 (ru) |
| IL (2) | IL149628A0 (ru) |
| NO (1) | NO323059B1 (ru) |
| NZ (1) | NZ519100A (ru) |
| PE (1) | PE20010935A1 (ru) |
| PL (1) | PL202840B1 (ru) |
| RU (1) | RU2266913C2 (ru) |
| SK (1) | SK287682B6 (ru) |
| TW (1) | TWI289566B (ru) |
| WO (1) | WO2001042262A2 (ru) |
| ZA (1) | ZA200203799B (ru) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2403259C2 (ru) * | 2004-12-23 | 2010-11-10 | Н.В. Органон | Двойные антитромботические ингибиторы, содержащие остаток биотина |
Families Citing this family (15)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1558911B (zh) * | 2001-09-07 | 2010-05-12 | 阿尔开密亚有限公司 | 合成肝素五糖 |
| AU2003251869A1 (en) | 2002-07-15 | 2004-02-02 | Merck & Co., Inc. | Piperidino pyrimidine dipeptidyl peptidase inhibitors for the treatment of diabetes |
| EP1554280B1 (en) | 2002-10-07 | 2007-08-15 | Merck & Co., Inc. | Antidiabetic beta-amino heterocyclic dipeptidyl peptidase inhibitors |
| WO2004043940A1 (en) | 2002-11-07 | 2004-05-27 | Merck & Co., Inc. | Phenylalanine derivatives as dipeptidyl peptidase inhibitors for the treatment or prevention of diabetes |
| WO2004064778A2 (en) | 2003-01-17 | 2004-08-05 | Merck & Co. Inc. | 3-amino-4-phenylbutanoic acid derivatives as dipeptidyl peptidase inhibitors for the treatment or prevention of diabetes |
| JP2006516573A (ja) | 2003-01-31 | 2006-07-06 | メルク エンド カムパニー インコーポレーテッド | 糖尿病の治療および予防のためのジペプチジルペプチダーゼ阻害薬としての３−アミノ−４−フェニルブタン酸誘導体 |
| AU2004240563A1 (en) | 2003-05-14 | 2004-12-02 | Merck & Co., Inc. | 3-amino-4-phenylbutanoic acid derivatives as dipeptidyl peptidase inhibitors for the treatment or prevention of diabetes |
| CN1798556A (zh) | 2003-06-06 | 2006-07-05 | 麦克公司 | 作为治疗或者预防糖尿病的二肽基肽酶抑制剂的稠合吲哚 |
| CN1809544A (zh) | 2003-06-17 | 2006-07-26 | 麦克公司 | 作为二肽基肽酶抑制剂用于治疗或预防糖尿病的环己基甘氨酸衍生物 |
| CA2533893A1 (en) | 2003-07-31 | 2005-02-10 | Merck & Co., Inc. | Hexahydrodiazepinones as dipeptidyl peptidase-iv inhibitors for the treatment or prevention of diabetes |
| EP1574516A1 (en) * | 2004-03-05 | 2005-09-14 | Sanofi-Aventis | Antithrombotic compound |
| TW200621794A (en) * | 2004-10-06 | 2006-07-01 | Akzo Nobel Nv | Pulmonary administration of an antithrombotic compound |
| TWI376234B (en) | 2005-02-01 | 2012-11-11 | Msd Oss Bv | Conjugates of a polypeptide and an oligosaccharide |
| MY145269A (en) * | 2005-10-10 | 2012-01-13 | Organon Nv | Antithrombotic dual inhibitors comprising a biotin label |
| CA2784529C (en) | 2009-12-18 | 2018-05-22 | Catalent France Beinheim Sa | Pharmaceutical oral dosage form containing a synthetic oligosaccharide |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0513543A1 (de) * | 1991-05-11 | 1992-11-19 | BEHRINGWERKE Aktiengesellschaft | Amidinophenylalaninderivate, Verfahren zu deren Herstellung, deren Verwendung und diese enthaltende Mittel als Antikoagulantien |
| RU2133752C1 (ru) * | 1993-04-22 | 1999-07-27 | Елф Санофи | Производные 3-дезоксиолигосахаридов, способ их получения (варианты), промежуточные соединения и фармацевтическая композиция |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE4206858A1 (de) * | 1992-03-05 | 1993-09-09 | Behringwerke Ag | Glycopeptid-derivate, verfahren zu ihrer herstellung und diese verbindungen enthaltende pharmazeutische mittel |
| NZ264340A (en) * | 1993-09-01 | 1995-04-27 | Akzo Nobel Nv | Bisconjugate comprising two saccharides and a spacer, use in pharmaceutical compositions |
| IL126893A (en) * | 1997-11-19 | 2003-05-29 | Akzo Nobel Nv | Sulfated pentasaccharide derivatives and pharmaceutical compositions containing them |
| ATE405580T1 (de) * | 1998-06-17 | 2008-09-15 | Organon Nv | Antithrombotische verbindungen |
-
2000
- 2000-11-21 TW TW089124693A patent/TWI289566B/zh not_active IP Right Cessation
- 2000-12-01 US US10/148,868 patent/US6875755B2/en not_active Expired - Lifetime
- 2000-12-01 JP JP2001543559A patent/JP4820517B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 2000-12-01 SK SK794-2002A patent/SK287682B6/sk not_active IP Right Cessation
- 2000-12-01 NZ NZ519100A patent/NZ519100A/en not_active IP Right Cessation
- 2000-12-01 WO PCT/EP2000/012155 patent/WO2001042262A2/en not_active Ceased
- 2000-12-01 IL IL14962800A patent/IL149628A0/xx unknown
- 2000-12-01 KR KR1020027007186A patent/KR100776607B1/ko not_active Expired - Fee Related
- 2000-12-01 CN CNB008167753A patent/CN1195767C/zh not_active Expired - Fee Related
- 2000-12-01 EP EP00983209.8A patent/EP1237897B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2000-12-01 PL PL355484A patent/PL202840B1/pl not_active IP Right Cessation
- 2000-12-01 AU AU20038/01A patent/AU781846B2/en not_active Expired
- 2000-12-01 CA CA2393042A patent/CA2393042C/en not_active Expired - Lifetime
- 2000-12-01 CZ CZ20021958A patent/CZ303385B6/cs not_active IP Right Cessation
- 2000-12-01 BR BR0016217-5A patent/BR0016217A/pt active Search and Examination
- 2000-12-01 HU HU0203471A patent/HUP0203471A3/hu unknown
- 2000-12-01 RU RU2002118117/04A patent/RU2266913C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2000-12-01 HK HK02109170.1A patent/HK1047593A1/zh unknown
- 2000-12-06 PE PE2000001308A patent/PE20010935A1/es not_active Application Discontinuation
- 2000-12-06 AR ARP000106443A patent/AR026726A1/es active IP Right Grant
- 2000-12-06 CO CO00093231A patent/CO5251449A1/es not_active Application Discontinuation
-
2002
- 2002-05-13 ZA ZA200203799A patent/ZA200203799B/xx unknown
- 2002-05-14 IL IL149628A patent/IL149628A/en not_active IP Right Cessation
- 2002-06-06 NO NO20022689A patent/NO323059B1/no not_active IP Right Cessation
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0513543A1 (de) * | 1991-05-11 | 1992-11-19 | BEHRINGWERKE Aktiengesellschaft | Amidinophenylalaninderivate, Verfahren zu deren Herstellung, deren Verwendung und diese enthaltende Mittel als Antikoagulantien |
| RU2133752C1 (ru) * | 1993-04-22 | 1999-07-27 | Елф Санофи | Производные 3-дезоксиолигосахаридов, способ их получения (варианты), промежуточные соединения и фармацевтическая композиция |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Buijsman R.C. "Design and Synthesis of a nobel synthetic NAPAP - pentasaccharide conjugate displaying a dual antithrambotic action" Bioorg. Med. Chem. ietl. 19 July 1999, V.9, N14, pp.2013-2018. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2403259C2 (ru) * | 2004-12-23 | 2010-11-10 | Н.В. Органон | Двойные антитромботические ингибиторы, содержащие остаток биотина |
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2266913C2 (ru) | Пентасахаридный конъюгат, способ его получения и фармацевтическая композиция на его основе | |
| JP4369052B2 (ja) | 抗血栓症化合物 | |
| JP4705093B2 (ja) | 抗血栓化合物 | |
| MXPA02005278A (en) | Antithrombotic compound | |
| HK1034266B (en) | Antithrombotic compounds | |
| MXPA06010046A (en) | Antithrombotic compound |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PC4A | Invention patent assignment |
Effective date: 20070416 |
|
| PC43 | Official registration of the transfer of the exclusive right without contract for inventions |
Effective date: 20120326 |
|
| PC43 | Official registration of the transfer of the exclusive right without contract for inventions |
Effective date: 20130917 |
|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20131202 |