RU2038086C1 - Способ получения биологически активного продукта из личинок большой восковой моли - Google Patents
Способ получения биологически активного продукта из личинок большой восковой моли Download PDFInfo
- Publication number
- RU2038086C1 RU2038086C1 SU4938002A RU2038086C1 RU 2038086 C1 RU2038086 C1 RU 2038086C1 SU 4938002 A SU4938002 A SU 4938002A RU 2038086 C1 RU2038086 C1 RU 2038086C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- wax
- dark
- product
- moth larvae
- extract
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title abstract description 20
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 20
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims abstract description 10
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 claims description 12
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 claims description 7
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 7
- 230000003293 cardioprotective effect Effects 0.000 claims description 5
- 239000002994 raw material Substances 0.000 claims description 5
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 4
- 241000255896 Galleria mellonella Species 0.000 claims description 2
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 claims description 2
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 claims description 2
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 claims description 2
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 claims description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 claims 3
- ZEEBGORNQSEQBE-UHFFFAOYSA-N [2-(3-phenylphenoxy)-6-(trifluoromethyl)pyridin-4-yl]methanamine Chemical compound C1(=CC(=CC=C1)OC1=NC(=CC(=C1)CN)C(F)(F)F)C1=CC=CC=C1 ZEEBGORNQSEQBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 claims 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 claims 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 claims 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 claims 1
- 239000002777 nucleoside Substances 0.000 claims 1
- 125000003835 nucleoside group Chemical group 0.000 claims 1
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims 1
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 9
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 8
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 3
- 230000001764 biostimulatory effect Effects 0.000 abstract description 2
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 abstract 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 abstract 1
- 208000019622 heart disease Diseases 0.000 abstract 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 abstract 1
- 239000002689 soil Substances 0.000 abstract 1
- 239000001993 wax Substances 0.000 description 72
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 37
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 13
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 6
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 5
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 5
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 5
- 102000004882 Lipase Human genes 0.000 description 4
- 108090001060 Lipase Proteins 0.000 description 4
- 239000004367 Lipase Substances 0.000 description 4
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 4
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 4
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 4
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 4
- 244000144993 groups of animals Species 0.000 description 4
- 235000019421 lipase Nutrition 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 4
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000264877 Hippospongia communis Species 0.000 description 3
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 3
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 3
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 3
- 235000012907 honey Nutrition 0.000 description 3
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 230000004783 oxidative metabolism Effects 0.000 description 3
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 3
- 230000009182 swimming Effects 0.000 description 3
- CTNPHHZPAJYPFO-PDXBGNJTSA-N (3s,5s,8r,9s,10s,13r,14s,17r)-3-[(2r,4s,5r,6r)-5-[(2r,3s,4s,5r,6s)-3,4-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)-5-[(2s,3r,4s,5s,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxyoxan-2-yl]oxy-4-methoxy-6-methyloxan-2-yl]oxy-5,14-dihydroxy-13-methyl-17-(5-oxo-2h-furan Chemical compound C1([C@@H]2[C@@]3(C)CC[C@@H]4[C@@]5(C=O)CC[C@@H](C[C@@]5(O)CC[C@H]4[C@@]3(O)CC2)O[C@H]2C[C@@H]([C@@H]([C@@H](C)O2)O[C@@H]2[C@H]([C@H](O)[C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O3)O)[C@H](CO)O2)O)OC)=CC(=O)OC1 CTNPHHZPAJYPFO-PDXBGNJTSA-N 0.000 description 2
- 101800000112 Acidic peptide Proteins 0.000 description 2
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000257303 Hymenoptera Species 0.000 description 2
- FHIREUBIEIPPMC-UHFFFAOYSA-N K-Strophanthin-beta Natural products O1C(C)C(OC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)O)C(OC)CC1OC(CC1(O)CCC2C3(O)CC4)CCC1(C=O)C2CCC3(C)C4C1=CC(=O)OC1 FHIREUBIEIPPMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M Lactate Chemical compound CC(O)C([O-])=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 241000255777 Lepidoptera Species 0.000 description 2
- 241000186359 Mycobacterium Species 0.000 description 2
- LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-M Pyruvate Chemical compound CC(=O)C([O-])=O LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 2
- 210000000709 aorta Anatomy 0.000 description 2
- 159000000032 aromatic acids Chemical class 0.000 description 2
- 150000001491 aromatic compounds Chemical class 0.000 description 2
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 2
- 235000013871 bee wax Nutrition 0.000 description 2
- 239000012166 beeswax Substances 0.000 description 2
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 2
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 2
- 244000144987 brood Species 0.000 description 2
- 230000000747 cardiac effect Effects 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 description 2
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 2
- 229930003935 flavonoid Natural products 0.000 description 2
- 150000002215 flavonoids Chemical class 0.000 description 2
- 235000017173 flavonoids Nutrition 0.000 description 2
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 2
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 2
- 210000002216 heart Anatomy 0.000 description 2
- XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N methyl 1-acetylthieno[3,2-c]pyrazole-5-carboxylate Chemical compound CC(=O)N1N=CC2=C1C=C(C(=O)OC)S2 XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000004165 myocardium Anatomy 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 2
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 2
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 101710184263 Alkaline serine protease Proteins 0.000 description 1
- 241000269350 Anura Species 0.000 description 1
- HGCIXCUEYOPUTN-UHFFFAOYSA-N C1CC=CCC1 Chemical compound C1CC=CCC1 HGCIXCUEYOPUTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 241000221931 Hypomyces rosellus Species 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000255893 Pyralidae Species 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 1
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- 241000209140 Triticum Species 0.000 description 1
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000607479 Yersinia pestis Species 0.000 description 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 1
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 229940009098 aspartate Drugs 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 238000002306 biochemical method Methods 0.000 description 1
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 102000038379 digestive enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108091007734 digestive enzymes Proteins 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 238000000921 elemental analysis Methods 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 230000001804 emulsifying effect Effects 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 230000035558 fertility Effects 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 235000013373 food additive Nutrition 0.000 description 1
- 239000002778 food additive Substances 0.000 description 1
- 238000004817 gas chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 229930195712 glutamate Natural products 0.000 description 1
- 239000005337 ground glass Substances 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000011031 large-scale manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 230000001418 larval effect Effects 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 1
- QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N nitrogen group Chemical group [N] QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000008935 nutritious Nutrition 0.000 description 1
- 230000017448 oviposition Effects 0.000 description 1
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 description 1
- 244000045947 parasite Species 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 230000019617 pupation Effects 0.000 description 1
- 150000003222 pyridines Chemical class 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 229940109850 royal jelly Drugs 0.000 description 1
- 238000004611 spectroscopical analysis Methods 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 1
- 238000009423 ventilation Methods 0.000 description 1
- 230000003313 weakening effect Effects 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Feed For Specific Animals (AREA)
Abstract
Изобретение относится к биологии и фармакологии. Цель изобретения - получение из личинок большой восковой моли стандартизованного биологически активного продукта, обладающего биостимулирующим, адаптогенным и кардиозащитным действием на основе малоактивных продуктов пчелиной семьи. Для этого экстракцию биологически активного продукта проводят 40%-ным этанолом из личинок моли последнего возраста массой 150 мг и более, выращенных вне улья на темной восковой суши, при 20 - 25°С, в темноте , в течение 20 суток до полной экстракции продукта. 3 ил., 6 табл.
Description
Изобретение относится к биологии и фармакологии и может быть использовано для получения биологически активного продукта из личинок большой восковой моли.
Большая восковая моль Galleria mellonella L. (Lepidoptera, Pyralidae, далее восковая моль) является повсеместно распространенным паразитом пчелиной семьи. Восковую моль разводят и используют для различных целей: в качестве лабораторного хозяина при выращивании насекомых энтомофагов, применяемых для биологической защиты растений в сельском хозяйстве; в качестве тест-объекта для оценки активности и качества бактериальных препаратов; а также в качестве объекта биохимических и физиологических исследований в энтомологии.
Для выращивания восковой моли в лабораторных условиях в качестве корма используют пчелиные соты, цветочную пыльцу, пыльцу с добавками пчелиного воска, а также искусственные питательные среды различного состава. Наиболее удобной и широкоиспользуемой при массовом выращивании насекомого является искусственная среда с добавками пчелиного воска и меда, разработанная Марстоном с соавторами и модифицированная Ю.И.Кузнецовой. В лабораторных условиях восковую моль выращивают в чашках Петри, стеклянных банках, снабженных крышками с мелкоячеистой впаянной сеткой. Для массового разведения насекомого используют специальные контейнеры.
Известен способ выделения из восковой моли препарата липаз, являющихся пищеварительными ферментами насекомого, которые обладают антимикробным действием по отношению к Mycobacterium fuberсulosis. Для этого личинок восковой моли, собранных в пчелином улье, растирают и высушивают методом Виллштаттера, затем проводят экстракцию липаз из полученного порошка эмульгирующей смесью, содержащей 50% глицерина и 1,5% карбокселя, затем липазы осаждают ацетоном и подвергают лиофилизации.
Недостатком данного способа является ограниченность спектра биологической активности получаемого препарата.
Известен способ получения из восковой моли экстракта, оказывающего ростстимулирующее влияние на лимфобластоидные клетки линии Raji в культуре. Согласно способу, личинок восковой моли, собранных в пчелином улье, подвергают экстракции 40%-ным этанолом при 20-25оС в темноте в течение 20 суток.
Недостатком способа является невозможность получения значительных количеств препарата ввиду экономической нецелесообразности разведения личинок восковой моли в пчелином улье, что приводит к ослаблению и гибели пчелиной семьи. Кроме того, способ не обеспечивает получения воспроизводимого по биологической активности продукта вследствие неконтролируемости условий выращивания личинок и поглощаемого ими корма.
Другие способы получения биологически активных препаратов из личинок восковой моли из литературы не известны.
Цель настоящего изобретения повышение выхода и стабилизации биологической активности продукта, а также обладающего адаптогенным, кардиозащитным действием.
Для этого способ, включающий экстрагирование личинок восковой моли, предусматривает выращивание личинок вне улья, а в качестве корма использование темной восковой суши, содержащей продукты многолетней жизнедеятельности пчелиной семьи.
Изобретение основывается на впервые обнаруженных и изученных биологических свойствах темной восковой суши, которая является продуктом многолетней активности пчелиной семьи. Темная восковая сушь образуется из пчелиных сот после выращивания в последних нескольких поколений расплода пчел в течение 3-4 лет. По химическому составу она существенно отличается от пчелиных сот, светлой восковой сушки и очищенного воска, традиционно используемых для выращивания восковой моли. Темная восковая сушь содержит меньшее по сравнению со светлой сушью количество воска (40-55% вместо 70% при влажности 2,2-3,8% вместо 01,-0,5%). Установлено, что, помимо воска, она содержит продукты жизнедеятельности пчел (остатки маточного молочка, личиночные оболочки, покровы пчелиного расплода, углеводы, пептиды, азотсодержащие вещества, серотонин подобные соединения), а также флавоноиды и ароматические кислоты растительного происхождения. Присутствие этих компонентов делает темную восковую сушь полноценной питательной средой для личинок восковой моли и позволяет обходиться без использования цветочной пыльцы, меда и других дорогостоящих пищевых добавок. Установлено также, что темная восковая сушь, не обладающая сама по себе существенной биологической активностью, подвергается метаболической трансформации личинками восковой моли и превращается в биологически активный продукт, обладающий широким спектром действия.
Продукт, полученный предлагаемым способом, содержит несколько биологически активных компонентов. Его химический состав отличается от состава экстракта, получаемого аналогичным способом из личинок восковой моли, выращенных на искусственном корме, а также от состава экстракта темной восковой суши.
Исследования, проведенные на различных биологических моделях, показали, что экстракт личинок восковой моли, полученный предлагаемым способом, обладает широким спектром биологической активности, адаптогенным, ростстимулирующим и кардиозащитным действием, а также стимулирует окислительный метаболизм сердечной и сосудистой тканей.
Вместе с тем экстракт, получаемый из личинок восковой моли, выращенных на искусственном корме, а также экстракт темной восковой суши не проявляют биологической активности.
В отличие от известного препарата липаз из личинок восковой моли (аналог) продукт, получаемый предлагаемым способом не обладает антимикробным действием по отношению к Mycobacterium tubereulasis и другим микроорганизмам.
Ниже приведен конкретный пример осуществления предлагаемого способа. Биологический материал для разведения восковой моли (кладки яиц, личинки, коконы, бабочки) собирали на пасеках в летний период. Определение насекомого проводили по справочнику болезней и вредителей пчел. В дальнейшем постоянное культивирование восковой моли проводили в лабораторно-производственных условиях.
Для выращивания личинок восковой моли использовали контейнер размером 30х30х40 см, снабженный крышкой и вентиляционной щелью, затянутой мелкоячеистой металлической сеткой с размером отверстий менее 1 мм. В контейнер помещали 500 г темной восковой суши (темно-бурого и черного цвета, непросвечивающей в донышках, содержащей 40-55% воска при влажности 2,2-3,8%) и кладку яиц восковой моли (около 500 яиц). Выращивание личинок проводили при 20-25оС и относительной влажности 80% в течение 35 суток. Для экстракции биологически активных веществ отбирали личинок, достигших последней стадии развития перед окукливанием, массой 150 мг и более. Отобранных личинок (100 г) помещали в широкогорлый сосуд, удаляли паутину и остатки восковой суши. Затем личинок переносили в экстракционный сосуд объемом 600 мл с притертой стеклянной пробкой и добавляли 450 мл 40%-ного этилового спирта-ректификата. Экстракцию проводили при 20-25оС в темноте при периодическом перемешивании в течение 21 суток до полной экстракции продукта. Затем экстракт фильтровали через бумажный фильтр. Получили 420 мл экстракта. Полученный продукт представляет собой прозрачную жидкость красновато-желтого цвета, содержащую около 1% сухого вещества и обладающую характерной флуоресценцией (440 нм при длине волны возбуждающего света 350 нм). Экстракт хранили в темноте при 4оС, при этом биологическая активность сохранялась в течение года.
Исследование химического состава полученного продукта. Химический состав полученного продукта исследовали различными биохимическими методами с использованием тонкослойной хроматографии, газовой хроматографии, диск-электрофореза, аминокислотного и элементного анализа, ЯМР, УФ- и люминесцентной спектроскопии. Фракционирование продукта проводили на колонке с сефадексом LН-20 (фиг.1).
В составе продукта обнаружены следующие компоненты:
белки и пептиды (2% сухого вещества), в том числе кислые пептиды, содержащие связанный ароматический компонент, а также щелочная сериновая протеаза (фракция 1);
свободные аминокислоты (50-60% сухого вещества), (фракции 2-5, табл.1);
низкомолекулярный ростстимулирующий фактор (фракция 3);
низкомолекулярные ароматические соединения (фракция 7);
липиды, в том числе жирные кислоты (табл.2);
углеводы.
белки и пептиды (2% сухого вещества), в том числе кислые пептиды, содержащие связанный ароматический компонент, а также щелочная сериновая протеаза (фракция 1);
свободные аминокислоты (50-60% сухого вещества), (фракции 2-5, табл.1);
низкомолекулярный ростстимулирующий фактор (фракция 3);
низкомолекулярные ароматические соединения (фракция 7);
липиды, в том числе жирные кислоты (табл.2);
углеводы.
Одновременно тем же способом готовили экстракт личинок, выращенных на среде, разработанной Марстоном с соавторами и модифицированной Ю.И.Кузнецовой. Среда содержала следующие компоненты (г/кг): отруби 100, мука пшеничная 110, мука кукурузная 140, дрожжи 130, молоко сухое 130, глицерин 210, мед 100, воск 80. Получили продукт, представляющий собой прозрачную жидкость светло-желтого цвета, содержащую около 1% сухого вещества и не обладающую флуоресценцией. Химический состав экстракта исследовали теми же методами. Фракционирование экстракта проводили на колонке с сефадексом IH-20 (фиг.2).
В экстракте личинок восковой моли, выращенных на искусственном корме, обнаружены:
небольшие количества белка (фракция 1);
свободные аминокислоты глицин, аланин, серин, треонин, глутамат, аспартат, валин, гистидин, пролин и др. (фракции 2-5);
липиды;
углеводы.
небольшие количества белка (фракция 1);
свободные аминокислоты глицин, аланин, серин, треонин, глутамат, аспартат, валин, гистидин, пролин и др. (фракции 2-5);
липиды;
углеводы.
Готовили также экстракт темной восковой суши. Темную восковую сушь (100 г) измельчали, помещали в экстракционный сосуд и добавляли 450 мл 40%-ного этилового спирта-ректификата. Экстракцию проводили в тех же условиях в течение 21 суток, затем экстракт фильтровали через бумажный фильтр. Получили продукт, представляющий собой темно-коричневую прозрачную жидкость, содержащую 2,5% сухого вещества и обладающую характерной флуоресценцией (440-460 нм при длине волны возбуждающего света 350 нм). Химический состав экстракта исследовали теми же методами. Фракционирование экстракта проводили на колонке с сефадексом LH-20 (фиг.3).
В экстрактe темной восковой суши обнаружены:
ароматические кислоты;
флавоноиды;
углеводы;
липиды.
ароматические кислоты;
флавоноиды;
углеводы;
липиды.
Из фиг. 1-3 видно, что хроматографические профили элюции экстрактов личинок восковой моли, выращенных на темной восковой суши и искусственной питательной среде, а также экстракта темной восковой суши, были различны. Различия наблюдались как в составе, так и в относительном содержании хроматографических фракций. Результаты проведенных анализов свидетельствуют о различии химического состава исследуемых образцов. Биологически активный продукт из личинок восковой моли, выращенных на темной восковой суши, содержит активные компоненты, отсутствующие в экстракте личинок восковой моли, выращенных на искусственном корме и экстракте темной восковой суши:
кислые пептиды, содержащие связанный ароматический компонент (фракция 1);
низкомолекулярный ростстимулирующий фактор (фракция 3);
низкомолекулярные ароматические соединения (фракция 7).
кислые пептиды, содержащие связанный ароматический компонент (фракция 1);
низкомолекулярный ростстимулирующий фактор (фракция 3);
низкомолекулярные ароматические соединения (фракция 7).
Определение биологической активности
1. Исследование адаптогенных свойств. Для определения адаптогенных свойств экстрактов использовали тест на предельную продолжительность плавания. Опыты проводили на белых беспородных крысах-самцах массой 180-200 г. Две группы животных получали экстракт личинок восковой моли, выращенных на темной восковой суши и искусственной питательной среде, подкожно в дозе 0,2 мл/200 г массы тела ежедневно в течение 30 дней. Две другие группы животных получали экстракт личинок восковой моли, выращенных на темной восковой суши, перорально в дозе 0,1 мл/200 г массы тела ежедневно в течение того же периода времени. Контрольные животные получали эквивалентное количество 40%-ного этанола. На 1, 5, 10, 15, 20, 25 и 30 сутки определяли продолжительность предельного плавания крыс с грузом 20 г. Полученные результаты представлены в табл.3 и 4.
1. Исследование адаптогенных свойств. Для определения адаптогенных свойств экстрактов использовали тест на предельную продолжительность плавания. Опыты проводили на белых беспородных крысах-самцах массой 180-200 г. Две группы животных получали экстракт личинок восковой моли, выращенных на темной восковой суши и искусственной питательной среде, подкожно в дозе 0,2 мл/200 г массы тела ежедневно в течение 30 дней. Две другие группы животных получали экстракт личинок восковой моли, выращенных на темной восковой суши, перорально в дозе 0,1 мл/200 г массы тела ежедневно в течение того же периода времени. Контрольные животные получали эквивалентное количество 40%-ного этанола. На 1, 5, 10, 15, 20, 25 и 30 сутки определяли продолжительность предельного плавания крыс с грузом 20 г. Полученные результаты представлены в табл.3 и 4.
Из данных таблиц видно, что экстракт личинок восковой моли, выращенных на темной восковой суши, обладает выраженным адаптогенным действием, значительно удлиняя время предельного плавания крыс, как при подкожном, так и при пероральном введении. Экстракт личинок восковой моли, выращенных на искусственной питательной среде, а также экстракт темной восковой суши не проявляли выраженных аптогенных свойств.
2. Влияние на окислительный метаболизм тканей. Исследование биологической активности экстракта проводили на 24 белых беспородных крысах-самцах массой 180-200 г. Две группы животных получали экстракт личинок восковой моли, выращенных на темной восковой суши, перорально в течение 30 дней в дозах 0,01 и 0,1 мл/день/200 г массы тела. Контрольная группа крыс получала эквивалентное количество 40%-ного этанола. Через два часа после последнего введения экстракта определяли основные показатели окислительного обмена тканей животных содержание лактата, пирувата и отношение НАД/НАД ˙ Н (коэффициент восстановленности пиридиновых нуклеотидов).
Полученные результаты представлены в табл. 5.
Результаты экспериментов свидетельствуют о том, что введение животным экстракта вызывает значительное повышение содержания пирувата в тканях сердца, аорты и печени при одновременном снижении уровня метаболита в крови. Содержание лактата несколько уменьшалось (сердце, аорта) или оставалось близким к контролю. Отношение НАД/НАД ˙ Н изменялось в сторону повышения окисленности-аэробизации.
Полученные результаты указывают на выраженное усиление окислительного обмена и энергетических процессов в сердечной и сосудистой ткани под действием экстракта личинок восковой моли, выращенных на темной восковой суши.
3. Исследование кардиопротекторных свойств. Исследование биологической активности экстракта проводили на 34 лягушках весом 30 г. Две группы животных получали экстракт личинок восковой моли, выращенных на темной восковой суши, перорально в дозе 0,05 мл/30 г массы тела в течение 7 и 14 дней. Контрольные животные получали эквивалентное количество 40%-ного этанола. Через два часа после последнего введения экстракта определяли устойчивость сердечной мышцы лягушек к строфантину по стандартной методике. Полученные результаты представлены в табл.6.
Результаты экспериментов свидетельствуют о том, что экстракт личинок восковой моли, выращенных на темной восковой суши, обладает кардиозащитным действием, повышая устойчивость сердечной мышцы лягушки к токсическому действию строфантина.
Таким образом, приведенные примеры показывают, что предлагаемый способ позволяет получать биологически активный продукт из личинок восковой моли с использованием в качестве исходного субстрата малоактивных продуктов пчелиной семьи. Получаемый продукт обладает широким спектром биостимулирующего действия.
Предлагаемый способ в сравнении с известными имеет следующие преимущества: простота выращивания восковой моли в лабораторно-производственных условиях и ее высокая плодовитость обеспечиввают возможность получения биологически активного продукта в промышленных масштабах; способность восковой моли к круглогодичному размножению обеспечивает возможность получения биологически активного продукта вне зависимости от времени года; использование стандартного питательного сырья для выращивания личинок (темно-бурая и черная непросвечивающая в донышках восковая сушь 3-го сорта) в контролируемых лабораторно-производственных условиях позволяет получать стандартизованный продукт.
Благодаря дешевизне используемого питательного субстрата, относящегося к восковому сырью низшей категории, достигается невысокая стоимость производства продукта (около 25 руб./л).
Сырьевые потребности крупномасштабного производства продукта могут быть удовлетворены существующими объемами производства низкосортного воскового сырья. Для производства продукта не требуется разработки специального оборудования.
Claims (1)
- СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНОГО ПРОДУКТА ИЗ ЛИЧИНОК БОЛЬШОЙ ВОСКОВОЙ МОЛИ путем экстракции личинок моли Galleria mellonella L 40%-ным этиловым спиртом при 20 25oС в темноте, отличающийся тем, что, с целью повышения выхода и стабилизации биологической активности продукта, обладающего также адаптогенным и кардиозащитным действием, в качестве сырья для получения продукта используют личинки, выращенные вне улья за счет кормления темной восковой сушью при 20 25oС, при этом целевой продукт содержит свободные аминокислоты 50 60% моносахариды и дисахариды 2 4,7% нуклеотиды и нуклеозиды 1,5% высокомолекулярные соединения 1 2% жирные кислоты 0,1% минеральные вещества 7,1 9%
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU4938002 RU2038086C1 (ru) | 1991-03-26 | 1991-03-26 | Способ получения биологически активного продукта из личинок большой восковой моли |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU4938002 RU2038086C1 (ru) | 1991-03-26 | 1991-03-26 | Способ получения биологически активного продукта из личинок большой восковой моли |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2038086C1 true RU2038086C1 (ru) | 1995-06-27 |
Family
ID=21575428
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SU4938002 RU2038086C1 (ru) | 1991-03-26 | 1991-03-26 | Способ получения биологически активного продукта из личинок большой восковой моли |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2038086C1 (ru) |
Cited By (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2210210C1 (ru) * | 2001-11-21 | 2003-08-20 | Всероссийский научно-исследовательский институт биологической защиты растений | Способ разведения galleria mellonella l. |
| RU2481102C1 (ru) * | 2011-12-15 | 2013-05-10 | Государственное автономное научное учреждение Республики Башкортостан "Центр аграрных исследований" | Способ комплексного лечения неспецифических воспалительных заболеваний женской половой сферы |
| MD4198C1 (ru) * | 2011-08-26 | 2013-09-30 | Вячеслав ЧУХРИЙ | Комплекс энтомологического происхождения в пропиленгликоле кератолитического действия, способ его получения, фармацевтические и косметические продукты на его основе (варианты) |
| RU2507261C1 (ru) * | 2012-06-04 | 2014-02-20 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Новосибирский национальный исследовательский государственный университет" (НГУ) | РЕКОМБИНАНТНАЯ ПЛАЗМИДНАЯ ДНК pYP2, КОДИРУЮЩАЯ ФЕРМЕНТАТИВНО-АКТИВНУЮ ЧАСТЬ ПОЛИПЕПТИДА ЛИПАЗЫ, БЕЛКА ПИЩЕВАРИТЕЛЬНОГО ТРАКТА ПЧЕЛИНОЙ ОГНЕВКИ |
| MD4296C1 (ru) * | 2012-12-28 | 2015-03-31 | Вячеслав ЧУХРИЙ | Препарат из личинок Tenebrio molitor с антиоксидантной активностью, способ его получения и фармацевтический продукт на его основе |
| RU2694198C2 (ru) * | 2017-12-27 | 2019-07-09 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Смоленская государственная сельскохозяйственная академия" | Корм (питающий субстрат) для выращивания личинок большой восковой моли |
| WO2020060382A1 (ru) * | 2018-09-19 | 2020-03-26 | Чеслав ЧУХРИЙ | Способ получения биомассы личинок galleria mellonella |
| RU2741801C2 (ru) * | 2019-04-24 | 2021-01-28 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт теоретической и экспериментальной биофизики Российской академии наук (ИТЭБ РАН) | Фармацевтическая композиция из личинок Galleria mellonella и способ её получения |
| RU2773214C2 (ru) * | 2020-07-02 | 2022-05-31 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Ижевская государственная медицинская академия" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Мыло туалетное антимикробное |
| WO2023149795A1 (ru) * | 2022-02-07 | 2023-08-10 | Чеслав ЧУХРИЙ | Способ получения энтомологического комплекса с кератолитическим действием |
-
1991
- 1991-03-26 RU SU4938002 patent/RU2038086C1/ru not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Авторское свидетельство СССР N 1284229, кл. A 61K 35/04, 1989. * |
Cited By (14)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2210210C1 (ru) * | 2001-11-21 | 2003-08-20 | Всероссийский научно-исследовательский институт биологической защиты растений | Способ разведения galleria mellonella l. |
| MD4198C1 (ru) * | 2011-08-26 | 2013-09-30 | Вячеслав ЧУХРИЙ | Комплекс энтомологического происхождения в пропиленгликоле кератолитического действия, способ его получения, фармацевтические и косметические продукты на его основе (варианты) |
| RU2481102C1 (ru) * | 2011-12-15 | 2013-05-10 | Государственное автономное научное учреждение Республики Башкортостан "Центр аграрных исследований" | Способ комплексного лечения неспецифических воспалительных заболеваний женской половой сферы |
| RU2507261C1 (ru) * | 2012-06-04 | 2014-02-20 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Новосибирский национальный исследовательский государственный университет" (НГУ) | РЕКОМБИНАНТНАЯ ПЛАЗМИДНАЯ ДНК pYP2, КОДИРУЮЩАЯ ФЕРМЕНТАТИВНО-АКТИВНУЮ ЧАСТЬ ПОЛИПЕПТИДА ЛИПАЗЫ, БЕЛКА ПИЩЕВАРИТЕЛЬНОГО ТРАКТА ПЧЕЛИНОЙ ОГНЕВКИ |
| MD4296C1 (ru) * | 2012-12-28 | 2015-03-31 | Вячеслав ЧУХРИЙ | Препарат из личинок Tenebrio molitor с антиоксидантной активностью, способ его получения и фармацевтический продукт на его основе |
| RU2694198C2 (ru) * | 2017-12-27 | 2019-07-09 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Смоленская государственная сельскохозяйственная академия" | Корм (питающий субстрат) для выращивания личинок большой восковой моли |
| WO2020060382A1 (ru) * | 2018-09-19 | 2020-03-26 | Чеслав ЧУХРИЙ | Способ получения биомассы личинок galleria mellonella |
| EP3854209A4 (en) * | 2018-09-19 | 2023-05-24 | Ciuhrii, Ceslav | PROCESS FOR THE PRODUCTION OF BIOMASS FROM LARVAE OF GALLERIA MELLONELLA |
| RU2741801C2 (ru) * | 2019-04-24 | 2021-01-28 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт теоретической и экспериментальной биофизики Российской академии наук (ИТЭБ РАН) | Фармацевтическая композиция из личинок Galleria mellonella и способ её получения |
| RU2773214C2 (ru) * | 2020-07-02 | 2022-05-31 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Ижевская государственная медицинская академия" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Мыло туалетное антимикробное |
| WO2023149795A1 (ru) * | 2022-02-07 | 2023-08-10 | Чеслав ЧУХРИЙ | Способ получения энтомологического комплекса с кератолитическим действием |
| RU2796461C1 (ru) * | 2022-03-23 | 2023-05-24 | федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Марийский государственный университет" | Пищевой продукт на основе натурального пчелиного мёда |
| RU2811683C1 (ru) * | 2023-04-25 | 2024-01-15 | федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Волгоградский государственный аграрный университет" (ФГБОУ ВО Волгоградский ГАУ) | Корм для выращивания гусениц восковой моли, начиная с третьего возраста, и способ его получения |
| RU2841679C2 (ru) * | 2023-09-28 | 2025-06-11 | Александр Владимирович Гущин | Способ получения группы биологически активных веществ из продуктов жизнедеятельности личинок большой восковой моли |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Trench | The physiology and biochemistry of zooxanthellae symbiotic with marine coelenterates III. The effect of homogenates of host tissues on the excretion of photosynthetic products in vitro by zooxanthellae from two marine coelenterates | |
| PRIATNI et al. | Antidiabetic screening of some Indonesian marine cyanobacteria collection | |
| RU2038086C1 (ru) | Способ получения биологически активного продукта из личинок большой восковой моли | |
| Fraenkel et al. | The sterol requirements of the larva of the beetle, Dermestes vulpinus Fabr | |
| KR101836918B1 (ko) | 밀웜용 사료 조성물, 이를 이용한 사육 방법 및 이로부터 얻은 곤충 식품 조성물 | |
| CN108041353A (zh) | 一种桃蛀螟人工饲料及其制备方法和应用 | |
| McCay | The nutritional requirements of Blattela germanica | |
| JPH11504222A (ja) | 動物の病気を防ぎかつ動物の成長および発育を促進する方法 | |
| Lucas | The Fractionation of Bios and Comparison of Bios with Vitamines B and C | |
| Stephenson | A note on the differentiation of the yellow plant pigments from the fat-soluble vitamine | |
| US20250228268A1 (en) | Carotenoid-rich black soldier flies and feeding method and application thereof | |
| KR102198517B1 (ko) | 버섯활용 약용식물 배양물을 이용한 저체중 개선용 분말 제품 | |
| WHISLER | Host‐integrated development in the Amoebidiales | |
| Squibb et al. | Ramie—a high protein forage crop for tropical areas | |
| Susanto et al. | Genital reversal of betta fish by immersion using steroid extract of sea urchins | |
| CN109329645A (zh) | 一种生态养殖鸡饲料 | |
| RU2694198C2 (ru) | Корм (питающий субстрат) для выращивания личинок большой восковой моли | |
| RU2811683C1 (ru) | Корм для выращивания гусениц восковой моли, начиная с третьего возраста, и способ его получения | |
| RU2197260C2 (ru) | Кормовая добавка для животных и способ оздоровления организма животных | |
| CN109349173A (zh) | 提高石斑鱼苗种成活率的养殖方法 | |
| RU2373276C1 (ru) | Штамм гриба penicillium verrucosum, используемый для получения средства, обладающего иммуномодулирующими свойствами, и средство-иммуномодулятор на его основе | |
| JPS60196184A (ja) | ユ−グレナの培養法 | |
| CN1212777C (zh) | 生物抗菌排毒饲料添加剂及其制备方法 | |
| KR20190028236A (ko) | 누에 추출물을 유효성분으로 함유하는 갈색 지방세포의 증식 또는 지방분화 촉진용 조성물 및 이를 포함하는 사료 첨가제 | |
| JP2020022401A (ja) | ハナバチ寿命延長剤 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20080327 |