Claims (42)
1. Последовательность нуклеиновой кислоты, отличающаяся тем, что она содержит по меньшей мере 11 последовательных нуклеотидов в положениях 1-642 SEQ ID NO: 3 или комплементарной ей последовательности и по меньшей мере 11 последовательных нуклеотидов в положениях 643-1524 SEQ ID NO: 3 или комплементарной ей последовательности; и/или по меньшей мере 11 последовательных нуклеотидов в положениях 1-347 SEQ ID NO: 4 или комплементарной ей последовательности и по меньшей мере 11 последовательных нуклеотидов в положениях 348-656 SEQ ID NO: 4 или комплементарной ей последовательности;1. A nucleic acid sequence, characterized in that it contains at least 11 consecutive nucleotides at positions 1-642 of SEQ ID NO: 3 or a sequence complementary thereto and at least 11 consecutive nucleotides at positions 643-1524 of SEQ ID NO: 3 or its complementary sequence; and/or at least 11 consecutive nucleotides at positions 1-347 of SEQ ID NO: 4 or its complementary sequence and at least 11 consecutive nucleotides at positions 348-656 of SEQ ID NO: 4 or its complementary sequence;
предпочтительно, последовательность нуклеиновой кислоты содержит 22-25 последовательных нуклеотидов в положениях 1-642 SEQ ID NO: 3 или комплементарной ей последовательности, и 22-25 последовательных нуклеотидов в положениях 643-1524 SEQ ID NO: 3 или комплементарной ей последовательности; и/или 22-25 последовательных нуклеотидов в положениях 1-347 SEQ ID NO: 4 или комплементарной ей последовательности и 22-25 последовательных нуклеотидов в положениях 348-656 SEQ ID NO: 4 или комплементарной ей последовательности;preferably, the nucleic acid sequence contains 22-25 consecutive nucleotides at positions 1-642 of SEQ ID NO: 3 or its complementary sequence, and 22-25 consecutive nucleotides at positions 643-1524 of SEQ ID NO: 3 or its complementary sequence; and/or 22-25 consecutive nucleotides at positions 1-347 of SEQ ID NO: 4 or its complementary sequence and 22-25 consecutive nucleotides at positions 348-656 of SEQ ID NO: 4 or its complementary sequence;
предпочтительно, последовательность нуклеиновой кислоты содержит SEQ ID NO: 1 или комплементарную ей последовательность и/или SEQ ID NO: 2 или комплементарную ей последовательность;preferably, the nucleic acid sequence comprises SEQ ID NO: 1 or its complementary sequence and/or SEQ ID NO: 2 or its complementary sequence;
предпочтительно, последовательность нуклеиновой кислоты содержит SEQ ID NO: 3 или комплементарную ей последовательность и/или SEQ ID NO: 4 или комплементарную ей последовательность.preferably, the nucleic acid sequence comprises SEQ ID NO: 3 or its complementary sequence and/or SEQ ID NO: 4 or its complementary sequence.
2. Последовательность нуклеиновой кислоты по п. 1, отличающаяся тем, что указанная последовательность нуклеиновой кислоты содержит SEQ ID NO: 5 или комплементарную ей последовательность.2. The nucleic acid sequence according to claim 1, characterized in that said nucleic acid sequence contains SEQ ID NO: 5 or a sequence complementary thereto.
3. Способ выявления наличия ДНК, соответствующей трансгенному объекту - сое DBN98002 в образце, отличающийся тем, что он включает:3. A method for detecting the presence of DNA corresponding to a transgenic object - soybean DBN98002 in a sample, characterized in that it includes:
приведение образца, подлежащего выявлению, в контакт с по меньшей мере двумя праймерами для амплификации целевого продукта амплификации в реакции амплификации нуклеиновой кислоты;bringing the sample to be detected into contact with at least two primers to amplify a target amplification product in a nucleic acid amplification reaction;
проведение реакции амплификации нуклеиновой кислоты; иcarrying out a nucleic acid amplification reaction; And
выявление наличия целевого продукта амплификации;identifying the presence of the target amplification product;
где целевой продукт амплификации содержит последовательность нуклеиновой кислоты по п. 1 или п. 2; предпочтительно, целевой продукт амплификации содержит SEQ ID NO: 1 или комплементарную ей последовательность, SEQ ID NO: 2 или комплементарную ей последовательность, SEQ ID NO: 6 или комплементарную ей последовательность и/или SEQ ID NO: 7 или комплементарную ей последовательность.where the target amplification product contains the nucleic acid sequence according to claim 1 or claim 2; preferably, the target amplification product contains SEQ ID NO: 1 or its complementary sequence, SEQ ID NO: 2 or its complementary sequence, SEQ ID NO: 6 or its complementary sequence and/or SEQ ID NO: 7 or its complementary sequence.
4. Способ выявления наличия ДНК, соответствующей трансгенному объекту - сое DBN8002 в образце, по п. 3, отличающийся тем, что праймеры включают первый праймер и второй праймер, где первый праймер выбран из SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 8 и SEQ ID NO: 10; а второй праймер выбран из SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 9 и SEQ ID NO: 11.4. A method for detecting the presence of DNA corresponding to a transgenic object - soybean DBN8002 in a sample, according to claim 3, characterized in that the primers include a first primer and a second primer, where the first primer is selected from SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 8 and SEQ ID NO: 10; and the second primer is selected from SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 9 and SEQ ID NO: 11.
5. Способ выявления наличия ДНК, соответствующей трансгенному объекту - сое DBN8002 в образце, отличающийся тем, что он включает:5. A method for detecting the presence of DNA corresponding to a transgenic object - soybean DBN8002 in a sample, characterized in that it includes:
приведение образца, подлежащего выявлению, в контакт с зондом, где зонд содержит последовательность нуклеиновой кислоты по п. 1; предпочтительно зонд содержит SEQ ID NO: 1 или комплементарную ей последовательность, SEQ ID NO: 2 или комплементарную ей последовательность, SEQ ID NO: 6 или комплементарную ей последовательность и/или SEQ ID NO: 7 или комплементарную ей последовательность;bringing the sample to be detected into contact with a probe, where the probe contains the nucleic acid sequence according to claim 1; preferably the probe contains SEQ ID NO: 1 or its complementary sequence, SEQ ID NO: 2 or its complementary sequence, SEQ ID NO: 6 or its complementary sequence and/or SEQ ID NO: 7 or its complementary sequence;
подвергание образца, подлежащего выявлению, и зонда жестким условиям гибридизации; иsubjecting the sample to be detected and the probe to stringent hybridization conditions; And
выявление гибридизации образца, подлежащего выявлению, с зондом.detection of hybridization of the sample to be detected with the probe.
6. Способ выявления наличия ДНК, соответствующей трансгенному объекту - сое DBN8002 в образце, по п. 5, отличающийся тем, что по меньшей мере один зонд мечен по меньшей мере одним флуорофором.6. A method for detecting the presence of DNA corresponding to a transgenic object - soybean DBN8002 in a sample, according to claim 5, characterized in that at least one probe is labeled with at least one fluorophore.
7. Способ выявления наличия ДНК, соответствующей трансгенному объекту - сое DBN8002, в образце, отличающийся тем, что он включает:7. A method for detecting the presence of DNA corresponding to a transgenic object - soybean DBN8002, in a sample, characterized in that it includes:
приведение образца, подлежащего выявлению, в контакт с маркерной молекулой нуклеиновой кислоты, где маркерная молекула нуклеиновой кислоты содержит последовательность нуклеиновой кислоты по п. 1; предпочтительно маркерная молекула нуклеиновой кислоты содержит по меньшей мере одну последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 1 или комплементарной ей последовательности, SEQ ID NO: 2 или комплементарной ей последовательности и/или SEQ ID NO: 6-11 или комплементарных им последовательностей;bringing the sample to be detected into contact with a marker nucleic acid molecule, wherein the marker nucleic acid molecule contains the nucleic acid sequence of claim 1; preferably the marker nucleic acid molecule contains at least one sequence selected from the group consisting of SEQ ID NO: 1 or its complementary sequence, SEQ ID NO: 2 or its complementary sequence and/or SEQ ID NO: 6-11 or its complementary sequences;
подвергание образца, подлежащего выявлению, и маркерной молекулы нуклеиновой кислоты жестким условиям гибридизации;subjecting the sample to be detected and the marker nucleic acid molecule to stringent hybridization conditions;
выявление гибридизации образца, подлежащего выявлению, с маркерной молекулой нуклеиновой кислоты и дальнейшее проведение анализа скрещивания с помощью маркера для определения того, связана ли генетически устойчивость к насекомым и/или толерантность к гербициду с маркерной молекулой нуклеиновой кислоты.detecting hybridization of the sample to be detected with a marker nucleic acid molecule; and further performing a cross assay using the marker to determine whether insect resistance and/or herbicide tolerance is genetically associated with the marker nucleic acid molecule.
8. Набор для выявления ДНК, отличающийся тем, что содержит по меньшей мере одну молекулу ДНК, где указанная молекула ДНК содержит последовательность нуклеиновой кислоты по п. 1, при этом указанная молекула ДНК может действовать в качестве ДНК праймера или зонда, специфичного в отношении трансгенного объекта - сои DBN8002 или его потомства; предпочтительно, молекула ДНК содержит SEQ ID NO: 1 или комплементарную ей последовательность, SEQ ID NO: 2 или комплементарную ей последовательность, SEQ ID NO: 6 или комплементарную ей последовательность и/или SEQ ID NO: 7 или комплементарную ей последовательность.8. A DNA detection kit, characterized in that it contains at least one DNA molecule, wherein said DNA molecule contains a nucleic acid sequence according to claim 1, wherein said DNA molecule can act as a DNA primer or probe specific for the transgenic object - soybean DBN8002 or its descendants; preferably, the DNA molecule contains SEQ ID NO: 1 or its complementary sequence, SEQ ID NO: 2 or its complementary sequence, SEQ ID NO: 6 or its complementary sequence and/or SEQ ID NO: 7 or its complementary sequence.
9. Способ защиты растения сои от нашествия насекомых, отличающийся тем, что включает предоставление по меньшей мере одной трансгенной растительной клетки сои в рацион целевого насекомого, где трансгенная растительная клетка сои содержит в своем геноме последовательность, как изложено в SEQ ID NO: 1, и/или SEQ ID NO: 2; при этом попадание внутрь трансгенной растительной клетки сои ингибирует дальнейшее питание целевого насекомого трансгенным растением сои;9. A method of protecting a soybean plant from insect attack, characterized in that it comprises providing at least one transgenic soybean plant cell in the diet of a target insect, wherein the transgenic soybean plant cell contains in its genome the sequence set forth in SEQ ID NO: 1, and /or SEQ ID NO: 2; wherein entry into the transgenic soybean plant cell inhibits further feeding of the target insect by the transgenic soybean plant;
предпочтительно, трансгенная растительная клетка сои сдержит в своем геноме последовательность, как изложено в SEQ ID NO: 3 и/или SEQ ID NO: 4;preferably, the transgenic soybean plant cell contains in its genome the sequence as set forth in SEQ ID NO: 3 and/or SEQ ID NO: 4;
предпочтительно, трансгенная растительная клетка сои последовательно содержит в своем геноме SEQ ID NO: 1, последовательность нуклеиновой кислоты в положениях 1032-6444 SEQ ID NO: 5 и SEQ ID NO: 2 или содержит последовательность, как изложено в SEQ ID NO: 5.preferably, the transgenic soybean plant cell sequentially contains in its genome SEQ ID NO: 1, the nucleic acid sequence at positions 1032-6444 of SEQ ID NO: 5 and SEQ ID NO: 2, or contains the sequence as set forth in SEQ ID NO: 5.
10. Способ защиты растения сои от повреждения, обусловленного гербицидом, или борьбы с сорняками в поле, в котором посажено растение сои, отличающийся тем, что включает внесение эффективного количества гербицида глюфосинат в поле, в котором посажено по меньшей мере одно трансгенное растение сои, где трансгенное растение сои содержит в своем геноме последовательность, как изложено в SEQ ID NO: 1 и/или SEQ ID NO: 2, и трансгенное растение сои обладает толерантностью к гербициду глюфосинат.10. A method of protecting a soybean plant from herbicide-induced damage or controlling weeds in a field in which the soybean plant is planted, characterized in that it includes applying an effective amount of the herbicide glufosinate to the field in which at least one transgenic soybean plant is planted, wherein the transgenic soybean plant contains in its genome the sequence as set forth in SEQ ID NO: 1 and/or SEQ ID NO: 2, and the transgenic soybean plant has tolerance to the herbicide glufosinate.
предпочтительно, трансгенное растение сои содержит в своем геноме последовательность, как изложено в SEQ ID NO: 3 и/или SEQ ID NO: 4;preferably, the transgenic soybean plant contains in its genome the sequence as set forth in SEQ ID NO: 3 and/or SEQ ID NO: 4;
предпочтительно, трансгенное растение сои последовательно содержит в своем геноме SEQ ID NO: 1, последовательность нуклеиновой кислоты в положениях 1032-6444 SEQ ID NO: 5 и SEQ ID NO: 2 или содержит последовательность, как изложено в SEQ ID NO: 5.preferably, the transgenic soybean plant sequentially contains in its genome SEQ ID NO: 1, the nucleic acid sequence at positions 1032-6444 of SEQ ID NO: 5 and SEQ ID NO: 2, or contains the sequence as set forth in SEQ ID NO: 5.
11. Способ скрещивания растения сои, устойчивого к насекомым и/или устойчивого к гербициду глюфосинат, отличающийся тем, что включает:11. A method of crossing a soybean plant that is resistant to insects and/or resistant to the herbicide glufosinate, characterized in that it includes:
посадку по меньшей мере одного семени сои, где данное семя сои содержит в своем геноме последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую белок устойчивости к насекомым Vip3Aa, и/или последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую белок толерантности к гербициду глюфосинат PAT, и последовательность нуклеиновой кислоты специфичной области, или семя сои содержит в своем геноме последовательность нуклеиновой кислоты, как изложено в SEQ ID NO: 5;planting at least one soybean seed, wherein the soybean seed contains in its genome a nucleic acid sequence encoding the Vip3Aa insect resistance protein and/or a nucleic acid sequence encoding the glufosinate PAT herbicide tolerance protein and a specific region nucleic acid sequence, or the soybean seed contains in its genome a nucleic acid sequence as set forth in SEQ ID NO: 5;
выращивание семени сои в растение сои; иgrowing a soybean seed into a soybean plant; And
поражение растения сои целевым насекомым и/или опрыскивание растения сои эффективным количеством гербицида глюфосинат и затем осуществление сбора растения с уменьшенным повреждением растения, по сравнению с другими растениями, которые не содержат последовательность нуклеиновой кислоты специфичной области;attacking the soybean plant with a target insect and/or spraying the soybean plant with an effective amount of the herbicide glufosinate and then harvesting the plant with reduced damage to the plant compared to other plants that do not contain the specific region nucleic acid sequence;
где последовательность нуклеиновой кислоты специфичной области представляет собой последовательность, как изложено в SEQ ID NO: 1 и/или SEQ ID NO: 2; предпочтительно, последовательность нуклеиновой кислоты специфичной области представляет собой последовательность, как изложено в SEQ ID NO: 3 и/или SEQ ID NO: 4.wherein the specific region nucleic acid sequence is the sequence set forth in SEQ ID NO: 1 and/or SEQ ID NO: 2; preferably, the specific region nucleic acid sequence is the sequence set forth in SEQ ID NO: 3 and/or SEQ ID NO: 4.
12. Способ получения растения сои, устойчивого к насекомым и/или толерантного к гербициду глюфосинат, отличающийся тем, что включает:12. A method for producing a soybean plant that is resistant to insects and/or tolerant to the herbicide glufosinate, characterized in that it includes:
введение последовательности нуклеиновой кислоты, кодирующей белок устойчивости к насекомым Vip3Aa, и/или последовательности нуклеиновой кислоты, кодирующей белок толерантности к гербициду глюфосинат PAT, и последовательности нуклеиновой кислоты специфичной области в геноме первого растения сои или последовательности нуклеиновой кислоты, как изложено в SEQ ID NO: 5, в геноме первого растения сои во второе растение сои, получая таким образом множество растений потомства; иintroduction of a nucleic acid sequence encoding the insect resistance protein Vip3Aa and/or a nucleic acid sequence encoding the herbicide tolerance protein glufosinate PAT, and a nucleic acid sequence of a specific region in the genome of a first soybean plant or a nucleic acid sequence as set forth in SEQ ID NO: 5, in the genome of the first soybean plant into the second soybean plant, thereby obtaining many progeny plants; And
отбор растений потомства, содержащих последовательность нуклеиновой кислоты специфичной области, которые также устойчивы к насекомым и/или толерантны к гербициду глюфосинат;selecting progeny plants containing a specific region nucleic acid sequence that are also resistant to insects and/or tolerant to the herbicide glufosinate;
где последовательность нуклеиновой кислоты специфичной области представляет собой последовательность, как изложено в SEQ ID NO: 1 и/или SEQ ID NO: 2; предпочтительно, последовательность нуклеиновой кислоты специфичной области представляет собой последовательность, как изложено в SEQ ID NO: 3 и/или SEQ ID NO: 4;wherein the specific region nucleic acid sequence is the sequence set forth in SEQ ID NO: 1 and/or SEQ ID NO: 2; preferably, the specific region nucleic acid sequence is the sequence set forth in SEQ ID NO: 3 and/or SEQ ID NO: 4;
предпочтительно, указанный способ включает:preferably, said method includes:
половое скрещивание трансгенного объекта - сои DBN8002 с растением сои, которое не обладает устойчивостью к насекомым и/или устойчивостью к глюфосинату, с получением, таким образом, множества растений потомства;sexually crossing the soybean transgenic DBN8002 with a soybean plant that does not have insect resistance and/or glufosinate resistance, thereby producing a plurality of progeny plants;
отбор растений потомства, содержащих последовательность нуклеиновой кислоты специфичной области;selection of progeny plants containing a nucleic acid sequence of a specific region;
поражение растений потомства целевым насекомым и/или обработку растений потомства глюфосинатом; иattacking the progeny plants with the target insect and/or treating the progeny plants with glufosinate; And
отбор растений потомства, которые являются устойчивыми к насекомым и/или толерантными к гербициду глюфосинат.selecting progeny plants that are resistant to insects and/or tolerant to the herbicide glufosinate.
13. Сельскохозяйственный продукт или товар, полученный из трансгенного объекта - сои DBN8002, отличающийся тем, что указанный сельскохозяйственный продукт или товар представляет собой лецитин, жирные кислоты, глицерин, стерины, соевые хлопья, соевую муку, соевые белки или их концентраты, соевые масла, волокна соевых белков, продукты свертывания соевого молока или соевый творог.13. An agricultural product or product obtained from a transgenic object - soybean DBN8002, characterized in that the specified agricultural product or product is lecithin, fatty acids, glycerin, sterols, soy flakes, soy flour, soy proteins or their concentrates, soy oils, soy protein fibers, soy milk coagulation products or soybean curd.