RU2018107363A

RU2018107363A - НОВАЯ СУБПОПУЛЯЦИЯ CD8+CD45RClow КЛЕТОК TREG И ЕЕ ПРИМЕНЕНИЯ

Info

Publication number: RU2018107363A
Application number: RU2018107363A
Authority: RU
Inventors: Кароль ГИЛОННО; Игнасио АНЕГОН; Северин БЕЗИ
Original assignee: Инсерм (Институт Насиональ Де Ля Сан Э Де Ля Решерш Медикаль); Университе Де Нант; Сентр Госпиталье Университэр Де Нант
Priority date: 2015-09-07
Filing date: 2016-09-06
Publication date: 2019-10-09
Also published as: IL257891B; RU2018107363A3; JP2021183631A; JP7254128B2; JP2018527932A; CN108291203A; MX2018002849A; ES2890818T3; AU2016318762A1; MX390494B; KR102768442B1; CA2997646A1; BR112018004454A2; NZ740225A; CA2997646C; RU2766691C2; KR20180054663A; AU2016318762B2; EP3347452A1; EP3347452B1

Claims

1. Выделенная популяция CD8⁺CD45RC^low регуляторных Т-клеток (Treg) человека, секретирующих IFNγ⁺IL-10⁺IL-34⁺, причем

указанные клетки Treg представляют собой клетки GITR⁺ и/или Foxp3⁺.

2. Выделенная популяция по п. 1, характеризующаяся тем, что указанные клетки Treg являются генетически модифицированными клетками Treg, содержащими химерный рецептор антигена (CAR).

3. Способ детектирования и/или выделения CD8⁺CD45RC^low клеток Treg человека, секретирующих IFNγ⁺IL-10⁺IL-34⁺, из биологического образца, содержащего мононуклеарные клетки периферической крови (МКПК) или лимфоциты человека, причем указанные клетки Treg необязательно представляют собой клетки GITR⁺ и/или Foxp3⁺, включающий следующие этапы: (а) приведение указанной популяции клеток МКПК или лимфоцитов человека в контакт со средствами, подходящими для выделения популяции CD8⁺CD45RC^low клеток Treg человека, необязательно со средствами, подходящими для выделения популяции GITR⁺ и/или Foxp3⁺ CD8⁺CD45RC^low клеток Treg; (b) приведение указанной выделенной популяции CD8⁺CD45RC^low клеток Treg человека, полученной на этапе (а), в контакт со средствами, подходящими для выделения CD8⁺CD45RC^low клеток Treg человека, секретирующих IFNγ⁺IL-10⁺IL-34⁺.

4. Способ по п. 3, характеризующийся тем, что средства, подходящие для выделения популяции CD8⁺CD45RC^low клеток Treg человека, представляют собой комбинацию по меньшей мере трех антител, состоящую из моноклонального антитела к CD3 человека, моноклонального антитела к CD8 человека и моноклонального антитела к CD45RC человека, необязательно дополнительно содержащую антитело к GITR человека, и при этом

средства, подходящие для выделения CD8⁺CD45RC^low клеток Treg человека, секретирующих IFNγ⁺IL-10⁺IL-34⁺, представляют собой комбинацию по меньшей мере двух биспецифических антител, выбранных из группы, состоящей из биспецифического антитела, которое связывается с IFNγ и с молекулой на поверхности клетки, специфичной для Т-клеток (например, CD3, CD8, CD45), биспецифического антитела, которое связывается с IL-10 и с молекулой на поверхности клетки, специфичной для Т-клеток (например, CD3, CD8, CD45), и биспецифического антитела, которое связывается с IL-34 и с молекулой на поверхности клетки, специфичной для Т-клеток (например, CD3, CD8, CD45).

5. Способ размножения CD8⁺CD45RC^low клеток Treg человека, секретирующих IFNγ⁺IL-10⁺IL-34⁺, причем указанные клетки Treg необязательно представляют собой клетки GITR⁺ и/или Foxp3⁺, включающий этап приведения выделенной популяции CD8⁺CD45RC^low клеток Treg человека, секретирующих IFNγ⁺IL-10⁺IL-34⁺, в контакт с культуральной средой, подходящей для размножения клеток Treg.

6. Способ по п. 5, характеризующийся тем, что выделенную популяцию CD8⁺CD45RC^lowклеток Treg человека, секретирующих IFNγ⁺IL-10⁺IL-34⁺, замораживают и впоследствии размораживают перед приведением клеток в контакт с культуральной средой, подходящей для размножения клеток Treg.

7. Способ по п. 5 или 6, характеризующийся тем, что указанная культуральная среда, подходящая для размножения клеток Treg, содержит по меньшей мере антиген-специфический стимулирующий агент, выбранный из группы, состоящей из антигенов, клеток, полимеров ГКГС и антител.

8. Способ по любому из пп. 5-7, характеризующийся тем, что указанная культуральная среда содержит по меньшей мере один цитокин, причем предпочтительно

указанная культуральная среда содержит некоторое количество интерлейкина-2 (IL-2) и/или некоторое количество интерлейкина-15 (IL-15).

9. Способ получения популяции CD8⁺CD45RC^low клеток Treg человека, секретирующих IFNγ⁺IL-10⁺IL-34⁺, включающий:

- выделение CD8⁺GITR⁺клеток Treg из биологического образца, содержащего мононуклеарные клетки периферической крови (МКПК) или лимфоциты человека, необязательно выделение CD8⁺CD45RC^lowGITR⁺ клеток Treg из биологического образца, содержащего мононуклеарные клетки периферической крови (МКПК) или лимфоциты человека,

- необязательно замораживание и последующее размораживание выделенных клеток Treg, и

- размножение указанных клеток в культуре.

10. Выделенная популяция размноженных CD8⁺CD45RC^low клеток Treg человека, секретирующих IFNγ⁺IL-10⁺IL-34⁺, причем предпочтительно

11. Выделенная популяция по п. 10, характеризующаяся тем, что указанные клетки Treg являются антиген-специфическими.

12. Фармацевтическая композиция, содержащая выделенную популяцию CD8⁺CD45RC^lowклеток Treg человека, секретирующих IFNγ⁺IL-10⁺IL-34⁺, согласно п. 1 или 2, или выделенную популяцию размноженных CD8⁺CD45RC^low клеток Treg человека, секретирующих IFNγ⁺IL-10⁺IL-34⁺, согласно п. 10 или 11, и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый носитель.

13. Выделенная популяция CD8⁺CD45RC^low клеток Treg человека, секретирующих IFNγ⁺IL-10⁺IL-34⁺, по п. 1 или 2 или выделенная популяция размноженных CD8⁺CD45RC^low клеток Treg человека, секретирующих IFNγ⁺IL-10⁺IL-34⁺, по п. 10 или 11 для применения в качестве лекарственного средства.

14. Выделенная популяция CD8⁺CD45RC^low клеток Treg человека, секретирующих IFNγ⁺IL-10⁺IL-34⁺, по п. 1 или 2 или выделенная популяция размноженных CD8⁺CD45RC^low клеток Treg человека, секретирующих IFNγ⁺IL-10⁺IL-34⁺, согласно п. 10 или 11 для применения в способе предотвращения или лечения отторжения трансплантата, РТПХ, хронических воспалительных заболеваний, аутоиммунных заболеваний, нежелательного иммунного ответа против терапевтических белков или аллергий у нуждающегося в этом пациента.

15. Способ in vitro определения того, есть ли у пациента риск отторжения трансплантата, РТПХ, хронических воспалительный заболеваний, аутоиммунного заболевания, нежелательного иммунного ответа против терапевтических белков или аллергии, включающий этап определения присутствия CD8⁺CD45RC^low клеток Treg человека, секретирующих IFNγ⁺IL-10⁺IL-34⁺, в биологическом образце, полученном из организма указанного пациента, способом согласно п. 3 или 4, причем присутствие CD8⁺CD45RC^low клеток Treg человека, секретирующих IFNγ⁺IL-10⁺IL-34⁺, указывает на пониженный риск отторжения трансплантата, РТПХ, хронических воспалительных заболеваний, аутоиммунных заболеваний, нежелательного иммунного ответа против терапевтических белков или аллергий.