RU2012122237A - ОЧИСТКА КАПСУЛЬНЫХ САХАРИДОВ Staphylococcus aureus ТИПА 5 И ТИПА 8 - Google Patents

Abstract

1. Способ выделения капсульных полисахаридов из клеток S.aureus типа 5 или типа 8, включающий этап обработки клеток кислотой.2. Способ по п.1, где клетки представляют собой клетки S.aureus типа 5.3. Способ по п.1, где клетки представляют собой клетки S.aureus типа 8.4. Способ по п.1, где клетки находятся в форме влажной клеточной массы или суспендированы в водной среде.5. Способ по п.1, где обработка кислотой проводят с использованием уксусной кислоты.6. Способ по п.1, где обработка кислотой приводит к получению капсульного полисахарида со степенью O-ацетилирования 60-100%.7. Способ по п.1, где способ дополнительно включает этап нейтрализации.8. Способ по п.1 или 7, где способ дополнительно включает этап центрифугирование клеток и сбора содержащего полисахариды супернатанта.9. Способ очистки капсульных полисахаридов из клеток S.aureus типа 5 или типа 8, включающий способ по любому из пп.1-8.10. Способ по п.9, где способ дополнительно включает этап обработки капсульного полисахарида ДНКазой и/или РНКазой.11. Способ по п.9, где способ дополнительно включает этап обработки капсульного полисахарида мутанолизином.12. Способ по п.9, где способ дополнительно включает этап диафильтрации.13. Способ по п.12, где диафильтрация представляет собой фильтрацию тангенциальным потоком.14. Способ по п.9, где способ дополнительно включает этап анионообменной хроматографии.15. Способ по п.9, где способ дополнительно включает этап гель-фильтрации.16. Способ по п.9, где способ дополнительно включает этап концентрирования полисахарида.17. Способ по любому из пп.9-16, где молекулярная масса очищенного полисахарида составляет 2-3500 кДа.18. Способ по п.9, где способ дополнительно включает этап �

Claims (28)

1. Способ выделения капсульных полисахаридов из клеток S.aureus типа 5 или типа 8, включающий этап обработки клеток кислотой.

2. Способ по п.1, где клетки представляют собой клетки S.aureus типа 5.

3. Способ по п.1, где клетки представляют собой клетки S.aureus типа 8.

4. Способ по п.1, где клетки находятся в форме влажной клеточной массы или суспендированы в водной среде.

5. Способ по п.1, где обработка кислотой проводят с использованием уксусной кислоты.

6. Способ по п.1, где обработка кислотой приводит к получению капсульного полисахарида со степенью O-ацетилирования 60-100%.

7. Способ по п.1, где способ дополнительно включает этап нейтрализации.

8. Способ по п.1 или 7, где способ дополнительно включает этап центрифугирование клеток и сбора содержащего полисахариды супернатанта.

9. Способ очистки капсульных полисахаридов из клеток S.aureus типа 5 или типа 8, включающий способ по любому из пп.1-8.

10. Способ по п.9, где способ дополнительно включает этап обработки капсульного полисахарида ДНКазой и/или РНКазой.

11. Способ по п.9, где способ дополнительно включает этап обработки капсульного полисахарида мутанолизином.

12. Способ по п.9, где способ дополнительно включает этап диафильтрации.

13. Способ по п.12, где диафильтрация представляет собой фильтрацию тангенциальным потоком.

14. Способ по п.9, где способ дополнительно включает этап анионообменной хроматографии.

15. Способ по п.9, где способ дополнительно включает этап гель-фильтрации.

16. Способ по п.9, где способ дополнительно включает этап концентрирования полисахарида.

17. Способ по любому из пп.9-16, где молекулярная масса очищенного полисахарида составляет 2-3500 кДа.

18. Способ по п.9, где способ дополнительно включает этап деполимеризации очищенного полисахарида с получением олигосахарида.

19. Способ по п.9, где способ дополнительно включает этап стерильной фильтрации.

20. Способ по любому из пп.9-16, 18 и 19, где способ позволяет получать композицию, содержащую полисахарид, и уровень примесей пептидогликанов, меньший 5% пептидогликана по массе относительно общей массы полисахарида.

21. Способ по п.20, где уровень примесей пептидогликанов составляет приблизительно 2%.

22. Способ по любому из пп.9-16, 18 и 19, где способ позволяет получать композицию, содержащую полисахарид, и уровень примесей белков, меньший 5% белков по массе относительно общей массы полисахарида.

23. Способ по любому из пп.9-16, 18 и 19, где способ позволяет получать композицию, содержащую полисахарид, и уровень примесей нуклеиновых кислот, меньший 1% нуклеиновых кислот по массе относительно общей массы полисахарида.

24. Способ по п.9, где способ дополнительно включает этап конъюгации с молекулой-носителем.

25. Композиция, содержащая капсульный полисахарид S.aureus типа 5 или типа 8, получаемый способом по любому из пп.9-23, или конъюгат, получаемый способом по п.24.

26. Композиция по п.25, дополнительно содержащая один или несколько белковых антигенов S.aureus, выбранных из группы, состоящей из антигена clfA; антигена clfB; антигена sdrE2; антигена sdrC; антигена sasF; антигена emp; антигена sdrD; антигена spa; антигена esaC; антигена esxA; антигена esxB; антигена sta006; антигена isdC; антигена Hla; антигена sta011; антигена isdA; антигена isdB и антигена sta073.

27. Композиция по п.26, где один или несколько белковых антигенов S.aureus выбраны из группы, состоящей из антигена esxA; антигена esxB; антигена sta006; антигена Hla; антигена sta011 и антигена sta073.

28. Композиция по п.27, где композиция содержит белковые антигены S.aureus в соответствии с одной из комбинаций от (1) до (10) ниже:

(1) антиген esxA, антиген esxB, антиген sta006 и антиген Hla;

(2) антиген esxA, антиген esxB, антиген sta006 и антиген sta011;

(3) антиген esxA, антиген esxB и антиген sta011;

(4) антиген esxA, антиген esxB, антиген Hla, антиген sta006 и антиген sta011;

(5) антиген esxA, антиген esxB и антиген Hla;

(6) антиген Hla, антиген sta006 и антиген sta011;

(7) антиген esxA и антиген esxB;

(8) антиген esxA, антиген esxB и антиген sta006;

(9) антиген esxA, антиген esxB, антиген sta011 и антиген sta073 и

(10) антиген sta006 и антиген sta011.