[go: up one dir, main page]

RU2007134371A - Лентивирусные векторы и их применение - Google Patents

Лентивирусные векторы и их применение Download PDF

Info

Publication number
RU2007134371A
RU2007134371A RU2007134371/13A RU2007134371A RU2007134371A RU 2007134371 A RU2007134371 A RU 2007134371A RU 2007134371/13 A RU2007134371/13 A RU 2007134371/13A RU 2007134371 A RU2007134371 A RU 2007134371A RU 2007134371 A RU2007134371 A RU 2007134371A
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
lentiviral
heterologous
sequence
vector
ltr
Prior art date
Application number
RU2007134371/13A
Other languages
English (en)
Inventor
Боро ДРОПУЛИК (US)
Боро ДРОПУЛИК
Юн Ниэнь ЧАН (US)
Юн Ниэнь ЧАН
Original Assignee
Лентиджен Корпорейшн (Us)
Лентиджен Корпорейшн
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Лентиджен Корпорейшн (Us), Лентиджен Корпорейшн filed Critical Лентиджен Корпорейшн (Us)
Publication of RU2007134371A publication Critical patent/RU2007134371A/ru

Links

Landscapes

  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Claims (44)

1. Лентивирусная хелперная плазмида, включающая в себя
а) лентивирусную 5'LTR, содержащую функциональный нативный промотор, функционально присоединенный к полинуклеотидной последовательности, кодирующей лентивирусные gag и pol, и гетерологичному полиА-сигналу, который является эффективным для терминации транскрипции, управляемой указанным нативным промотором;
b) гетерологичный промотор, функционально присоединенный к последовательности, кодирующей оболочку, и гетерологичному полиА-сигналу, который является эффективным для терминации транскрипции, управляемой указанным гетерологичным промотором,
в которой указанные нативный и гетерологичный промоторы присутствуют в указанной плазмиде в противоположных транскрипционных ориентациях, и указанная плазмида не имеет функциональной упаковочной последовательности.
2. Лентивирусная хелперная плазмида по п.1, которая включает в себя TAR-элемент, который получен от других, в отличие от 5'LTR, видов лентивируса, и включает в себя RRE-элемент, который получен от других, в отличие от 5'LTR, видов лентивируса.
3. Лентивирусная хелперная плазмида по п.1, в которой указанная 5'LTR является нативной.
4. Лентивирусная хелперная плазмида по п.1, которая дополнительно включает в себя экспрессируемую полинуклеотидную последовательность, кодирующую Tat-полипептид или Rev-полипептид, который функционально присоединен к промотору.
5. Лентивирусная хелперная плазмида по п.1, в которой указанная 5'LTR представляет собой ВИЧ-1 или ВИЧ-2.
6. Лентивирусная хелперная плазмида по п.1, в которой указанная полинуклеотидная последовательность, кодирующая лентивирусные gag и pol, представляет собой gag и pol ВИЧ-1 или gag и pol ВИЧ-2.
7. Лентивирусная хелперная плазмида по п.1, в которой полинуклеотидная последовательность, кодирующая gag и pol, включает в себя по меньшей мере один не встречающийся в природе кодон для улучшения трансляции указанной кодирующей последовательности при экспрессии в совместимом хозяине.
8. Лентивирусная хелперная плазмида по п.1, в которой полинуклеотидная последовательность находится между последовательностью pol и кодирующей оболочку последовательностью, которая представляет собой терминирующий кодон или р7 KETWETWWTE кодирующую последовательность.
9. Лентивирусная хелперная плазмида по п.1, в которой указанная кодирующая оболочку последовательность кодирует оболочку VSV-G или оболочку филовируса.
10. Лентивирусная хелперная плазмида по п.1, которая дополнительно включает в себя антисмысловой полинуклеотид, который является эффективным для ингибирования трансляции указанной кодирующей оболочку последовательности.
11. Лентивирусный вектор переноса, включающий в себя
а) лентивирусную 5'LTR;
b) лентивирусную упаковочную последовательность, расположенную на расстоянии от указанной 5'LTR;
с) модифицированную лентивирусную 3'LTR, которая включает в себя бокс-последовательность ТАТА, но не содержит 3' U3 последовательностей 5' для указанных бокс-последовательностей ТАТА, в которой указанная 3'LTR обладает сниженной транскрипционной активностью.
12. Лентивирусный вектор переноса по п.11, дополнительно включающий в себя d) гетерологичный промотор, функционально присоединенный к гетерологичной полинуклеотидной последовательности.
13. Лентивирусный вектор переноса по п.11, в котором отсутствующие 3' U3 последовательности являются 5' с точностью до 20 нуклеотидов в бокс-последовательностях ТАТА.
14. Лентивирусный вектор переноса по п.11, в котором 3'LTR дополнительно включает в себя второй гетерологичный промотор, функционально присоединенный ко второй гетерологичной полинуклеотидной последовательности, где указанный промотор и гетерологичная полинуклеотидная последовательность инсерцированы в 3'LTR в положении, которое является эффективным для снижения транскрипционной активности указанной 3'LTR.
15. Лентивирусный вектор переноса по п.11, дополнительно включающий в себя второй гетерологичный промотор, функционально присоединенный к гетерологичной последовательности, кодирующей второй интересующий ген.
16. Лентивирусный вектор переноса по п.15, в котором указанные первая и вторая гетерологичные кодирующие последовательности разделены внутренним сайтом входа рибосом.
17. Лентивирусный вектор переноса по п.15, в котором каждая из указанных гетерологичных кодирующих последовательностей дополнительно включает в себя гетерологичный полиА-сигнал, который является эффективным для терминации транскрипции, управляемой указанными промоторами.
18. Лентивирусная упаковочная система для получения лентивирусного трансдуцирующего вектора, включающая в себя
а) лентивирусную хелперную плазмиду по п.1,
b) лентивирусный вектор переноса по п.11, и
с) плазмиду, включающую в себя кодирующую rev-полипептид последовательность, функционально присоединенную к гетерологичному промотору, и кодирующую tat-полипептид последовательность, функционально присоединенную к гетерологичному промотору.
19. Изолированная клетка, содержащая хелперный вектор по п.1.
20. Изолированная клетка, содержащая вектор переноса по п.11.
21. Изолированная клетка, содержащая лентивирусную упаковочную систему по п.18.
22. Способ получения лентивирусного трансдуцирующего вектора, включающий в себя
совместную экспрессию плазмид, включающих в себя упаковочную систему по п.18, в клетке-хозяине в условиях, эффективных для продукции трансдуцирующего вектора.
23. Способ производства представляющего интерес полипептида в клетке-хозяине, включающий в себя трансдукцию клетки-хозяина лентивирусным трансдуцирующим вектором с получением трансдуцированной клетки-хозяина, где указанный вектор включает в себя экспрессируемый гетерологичный полинуклеотид, кодирующий секретируемый гетерологичный полипептид, представляющий интерес.
24. Способ по п.23, в котором указанная клетка-хозяин представляет собой клетку СНО или 293.
25. Способ по п.23, дополнительно включающий в себя культивирование указанной трансдуцированной клетки-хозяина в условиях, эффективных для продукции указанного представляющего интерес полипептида.
26. Способ по п.23, в котором указанную клетку-хозяина трансдуцируют множеством лентивирусных трансдуцирующих векторов, в котором каждый вектор включает в себя отличающийся от других гетерологичный полинуклеотид, кодирующий отличающийся от других полипептид.
27. Способ по п.26, в котором каждый из указанных гетерологичных полинуклеотидов кодирует по меньшей мере один капсидный полипептид вирусного капсида, который при экспрессии в указанной клетке-хозяине осуществляет самосборку в указанный вирусный капсид.
28. Способ по п.27, в котором по меньшей мере один полинуклеотид кодирует полипептид гемагглютинина или нейраминидазы вируса гриппа.
29. Способ по п.23, в котором указанную клетку-хозяина трансдуцируют полинуклеотидами, кодирующими полипептиды гемагглютинина, нейраминидазы и матрикса (М1).
30. Способ по п.29, в котором каждый полинуклеотид присутствует в отдельном вирусном трансдуцирующем векторе.
31. Продукт, полученный способом по п.29.
32. Способ идентификации полипептидов или генов, которые улучшают производство полипептидов в клетках-хозяевах, включающий в себя получение множества трансдуцированных клеток-хозяев, каждая из которых трансдуцирована по меньшей мере двумя различными лентивирусными трансдуцирующими векторами, включающими в себя экспрессируемые полинуклеотиды, которые отличаются друг от друга своей последовательностью, и скрининг указанных клеток-хозяев на предмет функциональной активности, связанной с гетерологичной последовательностью.
33. Способ по п.32, в котором указанная гетерологичная последовательность представляет собой РНКи-последовательность, кодирующую полипептид последовательность или антисмысловую последовательность для представляющего интерес гена.
34. Способ лечения реакции «трансплантат против хозяина» (GVHD), связанной с трансплантацией донорских лимфоцитов хозяину, включающий в себя трансдукцию донорских лимфоцитов лентивирусным трансдуцирующим вектором, включающим в себя экспрессируемую или селективно экспрессируемую полинуклеотидную последовательность, которая кодирует цитостатический или цитотоксический элемент, необязательно, трансдукцию клеток в присутствии полипептидов или клеток реципиента, и инфузию указанных трансдуцированных лимфоцитов указанному хозяину.
35. Способ по п.34, в котором указанный селективно экспрессируемый ген функционкально присоединен к индуцибельному промотору или промотору, который активируется в присутствии экзогенно вводимого химического агента.
36. Способ по п.34, в котором указанный селективно экспрессируемый ген кодирует РНКи или проапоптотический полипептид.
37. Способ по п.34, в котором указанный цитотоксический элемент представляет собой последовательность, кодирующую тимидин-киназу герпеса или ген мультисубстратной киназы.
38. Способ по п.37, дополнительно включающий в себя введение эффективного количества ганцикловира, AZT, flurada® или ацикловира, в котором указанное количество является эффективным для того, чтобы привести указанную трансдуцированную клетку-хозяина к гибели.
39. Способ по п.34, дополнительно включающий в себя контактирование указанных донорских клеток с эффективным количеством аутоантигена хозяина одновременно с трансдукцией или до трансдукции указанных донорских клеток.
40. Экспрессирующий вектор, включающий в себя
а) лентивирусную 5'LTR, содержащую функциональный нативный промотор, функционально присоединенный к полинуклеотидной последовательности, кодирующей нативные лентивирусные gag и pol, и гетерологичному полиА-сигналу, который является эффективным для терминации транскрипции, управляемой указанным нативным промотором, где сигнал терминации трансляции находится ниже по отношению к началу gag-pol-последовательности, b) акцепторный сайт сплайсинга, расположенный ниже по отношению к gag-pol-последовательностям, и с) гетерологичную полинуклеотидную последовательность, расположенную ниже по отношению к gag-pol-последовательности, которая функционально присоединена к промотору 5'LTR.
41. Лентивирусный трансдуцирующий вектор, включающий в себя рецептор Т-клеток и цитотоксический элемент.
42. Упаковывающая лентивирусный вектор или продуцирующая клеточная линия, которая экспрессирует ингибирующую индуцибельный ген или молчащую последовательность, имеющую своей мишенью VSV-G.
43. Способ трансдукции популяции лимфоцитов периферической крови лентивирусным вектором, в котором популяция лимфоцитов не очищена до субпопуляций перед трансдукцией лентивирусным вектором.
44. Способ лечения рака с использованием лентивирусных векторов, в котором стволовые клетки обрабатывают лентивирусным вектором, экспрессирующим цитотоксический элемент, который функционально присоединен к промотору, специфичному для эндотелиальных клеток, и в котором производят инфузию стволовых клеток пациенту.
RU2007134371/13A 2005-02-16 2006-02-16 Лентивирусные векторы и их применение RU2007134371A (ru)

Applications Claiming Priority (7)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US65338605P 2005-02-16 2005-02-16
US60/653,386 2005-02-16
US66031005P 2005-03-10 2005-03-10
US60/660,310 2005-03-10
US60/682,059 2005-05-18
US72376805P 2005-10-05 2005-10-05
US60/723,768 2005-10-05

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2007134371A true RU2007134371A (ru) 2009-03-27

Family

ID=40542248

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2007134371/13A RU2007134371A (ru) 2005-02-16 2006-02-16 Лентивирусные векторы и их применение

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2007134371A (ru)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EA032403B1 (ru) * 2009-07-24 2019-05-31 Иммьюн Дизайн Корп. Лентивирусные векторы, псевдотипированные гликопротеином оболочки вируса синдбис

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EA032403B1 (ru) * 2009-07-24 2019-05-31 Иммьюн Дизайн Корп. Лентивирусные векторы, псевдотипированные гликопротеином оболочки вируса синдбис

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP2008538174A5 (ru)
AU757284B2 (en) Anti-viral vectors
ES2618508T3 (es) Células que comprenden partículas lentivíricas con codones optimizados
JP2022091989A (ja) ウイルスベクター産生系
Ciminale et al. Expression and characterization of proteins produced by mRNAs spliced into the X region of the human T-cell leukemia/lymphotropic virus type II
CA2456169A1 (en) Methods and compositions relating to improved lentiviral vector production systems
Brinzevich et al. HIV-1 interacts with human endogenous retrovirus K (HML-2) envelopes derived from human primary lymphocytes
AU2018336042A1 (en) Retroviral vectors
WO1993011230A1 (en) Modified mammalian stem cell blocking viral replication
Langley et al. Nucleotide sequence analysis of puma lentivirus (PLV-14): genomic organization and relationship to other lentiviruses
Negre et al. Lentiviral vectors derived from simian immunodeficiency virus
Vahlenkamp et al. A single amino acid substitution in the transmembrane envelope glycoprotein of feline immunodeficiency virus alters cellular tropism
Pérot et al. From viruses to genes: syncytins
US7803582B2 (en) Recombinant vector and use in gene therapy
Mautino et al. Inhibition of HIV-1 replication by novel lentiviral vectors expressing transdominant Rev and HIV-1 env antisense
Bibollet-Ruche et al. Genetic diversity of simian immunodeficiency viruses from West African green monkeys: evidence of multiple genotypes within populations from the same geographical locale
RU2007134371A (ru) Лентивирусные векторы и их применение
US20240401077A1 (en) Koala retrovirus envelope gylcoproteins and uses thereof
Spirin et al. Lentiviral vectors
Gilbert et al. HIV-2 and SIV vector systems
CN102329776A (zh) 一种表达Nectin-1基因胞外区片段的PK-15细胞系及其构建方法
EP1880006B1 (en) Primate t-lymphotropic viruses
Derse et al. Transcriptional regulation of equine infectious anemia virus
US11965173B2 (en) Plasmid system
WO2015053398A1 (ja) 高力価レトロウイルスベクター