RU2006129295A

RU2006129295A - Эволюционирующие микроорганизмы для получения 1,2-пропандиола

Info

Publication number: RU2006129295A
Application number: RU2006129295/13A
Authority: RU
Inventors: Изабелль МЕЙНЬЯЛЬ-САЛЛЬ (FR); Изабелль МЕЙНЬЯЛЬ-САЛЛЬ; Бенжамэн ГОНЗАЛЕС (FR); Бенжамэн ГОНЗАЛЕС; Филипп СУКАЙ (FR); Филипп СУКАЙ
Original assignee: Метаболик Эксплорер (Fr); Метаболик Эксплорер
Priority date: 2004-01-12
Filing date: 2005-01-12
Publication date: 2008-02-20
Also published as: CN1910278A; ES2329914T3; CA2547695C; DK1704230T3; US8252579B2; JP4613177B2; WO2005073364A2; DE602005016073D1; EP1704230A2; PL1704230T3; WO2005073364A3; BRPI0506790B1; ATE440135T1; KR101229525B1; EP2192180A1; BRPI0506790A; ZA200605440B; CN1910278B; SI1704230T1; RU2407793C2

Claims

1. Способ получения штамма эволюционирующих микроорганизмов для продуцирования 1,2-пропандиола путем метоболизма источника простого углерода, где указанный способ включает культивирование в условиях селекционного воздействия в соответствующей культуральной среде, содержащей источник простого углерода, исходного бактериального штамма, имеющего делецию в гене tpiA и делецию по меньшей мере в одном гене, участвующем в превращении метилглиоксаль (пропаналя) в лактат, для эволюционирования в указанном исходном штамме одного или нескольких генов, участвующих в пути биосинтеза DHAP в метилглиоксаль, затем в 1,2-пропандиол, до получения эволюционирующих генов, обладающих более высокой активностью «1,2-пропандиолсинтазы», затем селекционируют и выделяют один или несколько штаммов эволюционирующих микроорганизмов, обладающих более высокой активностью «1,2-пропандиолсинтазы».

2. Способ по п.1, отличающийся тем, что ген, участвующий в превращении метилглиоксаля в лактат, выбирают из gloA, aldA и aldB.

3. Способ по п.2, отличающийся тем, что исходный штамм содержит гены gloA, aldA, aldB и tpiA.

4. Способ по п.2, отличающийся тем, что исходный штамм имеет также делецию в генах IdhA, pflA, pflB, adhE и edd.

5. Способ по п.1, отличающийся тем, что исходный штамм содержит также по меньшей мере один ген, кодирующий фермент, способствующий метаболизму пирувата в ацетат.

6. Способ по п.5, отличающийся тем, что фермент, способствующий метаболизму пирувата в ацетат, является слабочувствительным к ингибированию посредством NADH.

7. Способ по п.5, отличающийся тем, что указанный фермент способствует метаболизму пирувата до продуцирования ацетил-СоА и NADH.

8. Способ по п.5, отличающийся тем, что фермент является комплексом пируватдегидроксигеназы.

9. Способ по п.5, отличающийся тем, что фермент, способствующий метаболизму пирувата в ацетат, является эндогенным ферментом.

10. Способ по п.1, отличающийся тем, что в эволюционирующий штамм вводят один или несколько гетерологичных генов, кодирующих один или несколько ферментов, участвующих в превращении ацетил-СоА и ацетата в ацетон.

11. Способ по п.10, отличающийся тем, что один или несколько гетерологичных генов, кодирующих один или несколько ферментов, участвующих в превращении ацетил-СоА и ацетата, получают из С.acetobutylicum.

12. Способ по п.10, отличающийся тем, что культивируют в условиях селекционного давления в соответствующей культуральной среде, содержащей источник простого углерода, модифицированный эволюционирующий штамм, полученный по п.10, для эволюционирования в указанном эволюционирующем модифицированном штамме одного или нескольких генов, участвующих в превращении ацетил-СоА и ацетата в ацетон, до получения более высокой активности «ацетонсинтазы», затем селекционируют и выделяют эволюционирующие микроорганизмы второго поколения, обладающие более высокой активностью «1,2-пропандиолсинтазы» и более высокой активностью «ацетонсинтазы».

13. Способ по любому из пп.1-12, отличающийся тем, что штамм выбирают из бактерий, дрожжей и грибов.

14. Способ по п.13, отличающийся тем, что штамм выбирают из штамма Escherichia, в частности E. coli, и штамма Corynebacterium, в частности C. glutamicum.

15. Исходный штамм, такой, как описан в любом из пп.1-9.

16. Штамм по п.15, отличающийся тем, что штамм выбирают из бактерий, дрожжей и грибов.

17. Штамм по п.15, отличающийся тем, что штамм выбирают из штамма Escherichia, в частности E. coli, и штамма Corynebacterium, в частности C. glutamicum.

18. Эволюционирующий штамм, который можно получить способом по любому из пп.1-12.

19. Штамм по п.18, отличающийся тем, что штамм выбирают из бактерий, дрожжей и грибов.

20. Штамм по п.1, отличающийся тем, что штамм выбирают из штамма Escherichia, в частности E. coli, и штамма Corynebacterium, в частности C. glutamicum.

21. Штамм по п.18, в котором ген lpd несет точечную мутацию, вызывающую модифицирование аланина 55 в валин.

22. Способ получения 1,2-пропандиола, в ходе которого культивируют эволюционирующий штамм по п.18 в соответствующей культуральной среде, содержащей простой источник углерода, затем извлекают продуцированный 1,2-пропандиол.

23. Способ по п.22, отличающийся тем, что извлекают 1,2-пропандиол и ацетон.

24. Способ по п.23, отличающийся тем, что 1,2-пропандиол и ацетон очищают.