Claims (34)
1. Одноразовое устройство для использования при детектировании целевого антигена в образце жидкости, имеющем некоторое значение pH, причем устройство содержит реакционную камеру, имеющую внутреннюю поверхность, ближний край и дальний край, иммобилизованное антитело, зафиксированное внутри реакционной камеры, причем антитело способно к связыванию с целевым антигеном, репортерный комплекс, присутствующий внутри реакционной камеры и содержащий зонд, причем репортерный комплекс способен к смешиванию с образцом, камеру для детектирования, имеющую стенку, внутреннюю поверхность, дальний край и ближний край, вход для образца на дальнем краю реакционной камеры, и проход для образца между дальним краем реакционной камеры и ближним краем камеры для детектирования.1. A disposable device for use in detecting a target antigen in a liquid sample having a certain pH value, the device comprising a reaction chamber having an inner surface, a proximal edge and a distal edge, an immobilized antibody fixed within the reaction chamber, the antibody being capable of binding to the target antigen, a reporter complex present inside the reaction chamber and containing a probe, the reporter complex being capable of mixing with a sample, a detection chamber, having a wall, an inner surface, a distal edge and a proximal edge, an input for the sample at the far edge of the reaction chamber, and a passage for the sample between the far edge of the reaction chamber and the proximal edge of the detection chamber.
2. Устройство по п.1, дополнительно включающее в себя агент, содержащийся внутри реакционной камеры и способный предотвращать неспецифическое связывание белков с внутренней поверхностью реакционной камеры.2. The device according to claim 1, further comprising an agent contained within the reaction chamber and capable of preventing non-specific binding of proteins to the inner surface of the reaction chamber.
3. Устройство по п.2, где агент выбран из группы, состоящей из поверхностно-активного вещества и блокирующего белка.3. The device according to claim 2, where the agent is selected from the group consisting of a surfactant and a blocking protein.
4. Устройство по п.3, где блокирующий белок представляет собой бычий сывороточный альбумин.4. The device according to claim 3, where the blocking protein is bovine serum albumin.
5. Устройство по п.1, где репортерный комплекс дополнительно содержит второй антиген, способный конкурировать с целевым антигеном за связывание с иммобилизованным антителом, или второе антитело, способное к связыванию с целевым антигеном.5. The device according to claim 1, where the reporter complex further comprises a second antigen capable of competing with the target antigen for binding to an immobilized antibody, or a second antibody capable of binding to the target antigen.
6. Устройство по п.1, где зонд выбран из группы, состоящей из хромофоров и флуорофоров.6. The device according to claim 1, where the probe is selected from the group consisting of chromophores and fluorophores.
7. Устройство по п.1, где зонд содержит фермент.7. The device according to claim 1, where the probe contains an enzyme.
8. Устройство по п.7, где фермент содержит глюкозооксидазу.8. The device according to claim 7, where the enzyme contains glucose oxidase.
9. Устройство по п.7, где фермент содержит глюкозодегидрогеназу.9. The device according to claim 7, where the enzyme contains glucose dehydrogenase.
10. Устройство по п.7, где камера для детектирования дополнительно содержит субстрат для фермента.10. The device according to claim 7, where the camera for detection further comprises a substrate for the enzyme.
11. Устройство по п.10, где субстрат для фермента представляет собой окисляемый субстрат.11. The device according to claim 10, where the substrate for the enzyme is an oxidizable substrate.
12. Устройство по п.11, где окисляемый субстрат выбран из группы, состоящей из галактозы и уксусной кислоты.12. The device according to claim 11, where the oxidizable substrate is selected from the group consisting of galactose and acetic acid.
13. Устройство по п.11, где субстрат для фермента содержит глюкозу.13. The device according to claim 11, where the substrate for the enzyme contains glucose.
14. Устройство по п.7, где камера для детектирования дополнительно содержит медиатор.14. The device according to claim 7, where the camera for detection further comprises a mediator.
15. Устройство по п.14, где медиатор выбран из группы, состоящей из дихлорфенолиндофенола и комплексов переходных металлов и азотсодержащих гетероатомных частиц.15. The device according to 14, where the mediator is selected from the group consisting of dichlorophenolindophenol and complexes of transition metals and nitrogen-containing heteroatomic particles.
16. Устройство по п.14, где медиатор содержит феррицианид.16. The device according to 14, where the mediator contains ferricyanide.
17. Устройство по п.7, причем устройство дополнительно содержит буфер, способный к установлению значения pH образца.17. The device according to claim 7, wherein the device further comprises a buffer capable of setting the pH value of the sample.
18. Устройство по п.17, где буфер представляет собой вещество, выбранное из группы, состоящей из фосфата и цитрата.18. The device according to 17, where the buffer is a substance selected from the group consisting of phosphate and citrate.
19. Устройство по п.1, где камера для детектирования содержит по меньшей мере два электрода.19. The device according to claim 1, where the camera for detection contains at least two electrodes.
20. Устройство по п.19, где электроды содержат материал, выбранный из группы, состоящей из палладия, платины, золота, иридия, углерода, смешанного со связующим углерода, оксида индия, оксида олова и их смесей.20. The device according to claim 19, where the electrodes contain a material selected from the group consisting of palladium, platinum, gold, iridium, carbon mixed with a binder of carbon, indium oxide, tin oxide and mixtures thereof.
21. Устройство по п.1, где стенка камеры для детектирования является прозрачной для излучения, испускаемого или поглощаемого зондом, причем излучение указывает на присутствие или отсутствие репортерного комплекса в камере для детектирования.21. The device according to claim 1, where the wall of the detection chamber is transparent to radiation emitted or absorbed by the probe, the radiation indicating the presence or absence of a reporter complex in the detection chamber.
22. Устройство по п.1, дополнительно содержащее детектор, способный детектировать состояние, в котором реакционная камера является по существу заполненной.22. The device according to claim 1, further comprising a detector capable of detecting a state in which the reaction chamber is substantially full.
23. Устройство по п.1, дополнительно содержащее прокалывающее средство, способное к формированию вентиляционного выхода камеры для детектирования на дальнем краю камеры для детектирования.23. The device according to claim 1, additionally containing piercing means capable of forming a ventilation output of the detection chamber at the far edge of the detection chamber.
24. Устройство по п.1, дополнительно содержащее вентиляционный выход реакционной камеры на дальнем краю реакционной камеры.24. The device according to claim 1, additionally containing a ventilation outlet of the reaction chamber at the far edge of the reaction chamber.
25. Способ изготовления одноразового устройства для использования при детектировании целевого антигена в образце жидкости, имеющем некоторое значение pH, причем способ содержит стадии формирования первого отверстия, простирающегося сквозь первый лист материала, имеющий ближний край и дальний край, причем первое отверстие определяет боковую стенку реакционной камеры, боковую стенку камеры для детектирования и первый проход для образца между дальним краем реакционной камеры и ближним краем камеры для детектирования; прикрепления первого слоя к первой стороне первого листа и простирание поверх отверстия для определения первой торцевой стенки реакционной камеры и первой торцевой стенки камеры для детектирования; прикрепления второго слоя ко второй стороне первого листа и простирание поверх отверстия для определения второй торцевой стенки реакционной камеры и второй торцевой стенки камеры для детектирования с существенным совмещением с первым слоем при наложении, при этом лист и слои формируют полоску, имеющую множество внешних поверхностей; формирования второго прохода, простирающегося сквозь внешнюю поверхность полоски в реакционную камеру, на дальнем краю реакционной камеры, причем второй проход определяет вентиляционный выход из реакционной камеры; формирования третьего прохода, простирающегося сквозь внешнюю поверхность полоски в реакционную камеру, на ближнем краю реакционной камеры, причем третий проход определяет вход для образца; иммобилизации антитела внутри реакционной камеры; и размещения репортерного комплекса в реакционной камере, причем комплекс содержит зонд.25. A method of manufacturing a disposable device for use in detecting a target antigen in a liquid sample having a certain pH value, the method comprising the steps of forming a first hole extending through a first sheet of material having a proximal edge and a distal edge, the first hole defining a side wall of the reaction chamber a side wall of the detection chamber and a first passage for the sample between the distal edge of the reaction chamber and the proximal edge of the detection chamber; attaching the first layer to the first side of the first sheet and extending over the hole to define the first end wall of the reaction chamber and the first end wall of the detection chamber; attaching the second layer to the second side of the first sheet and extending over the hole to define the second end wall of the reaction chamber and the second end wall of the detection chamber with substantial alignment with the first layer when applied, the sheet and layers forming a strip having many external surfaces; the formation of the second passage extending through the outer surface of the strip into the reaction chamber, at the far edge of the reaction chamber, the second passage determining the ventilation exit from the reaction chamber; the formation of the third passage extending through the outer surface of the strip into the reaction chamber, at the proximal edge of the reaction chamber, the third passage determining the entrance for the sample; immobilization of the antibody inside the reaction chamber; and placing the reporter complex in the reaction chamber, the complex containing a probe.
26. Способ по п.25, где первый лист, первый слой и второй слой содержат материал с большим электрическим сопротивлением, первый слой содержит первый электрод, причем первый электрод обращен к первой стороне первого листа, а второй слой содержит второй электрод, причем второй электрод обращен ко второй стороне листа.26. The method according A.25, where the first sheet, the first layer and the second layer contain material with high electrical resistance, the first layer contains the first electrode, the first electrode facing the first side of the first sheet, and the second layer contains the second electrode, the second electrode facing the second side of the sheet.
27. Способ по п.26, где второй электрод прикреплен напротив и на расстоянии, меньшем, чем примерно 500 мкм, от первого электрода.27. The method according to p, where the second electrode is attached opposite and at a distance less than about 500 microns from the first electrode.
28. Способ по п.26, где второй электрод прикреплен напротив и на расстоянии, меньшем, чем примерно 150 мкм, от первого электрода.28. The method according to p, where the second electrode is attached opposite and at a distance less than about 150 microns from the first electrode.
29. Способ по п.26, где второй электрод прикреплен напротив и на расстоянии, меньшем, чем примерно 150 мкм, и большем, чем примерно 50 мкм, от первого электрода.29. The method according to p. 26, where the second electrode is attached opposite and at a distance less than about 150 microns, and greater than about 50 microns, from the first electrode.
30. Способ по п.25, где по меньшей мере один из слоев является прозрачным для длин волн излучения, выбранного из группы, состоящей из инфракрасного излучения, видимого света и ультрафиолетового излучения.30. The method according A.25, where at least one of the layers is transparent to wavelengths of radiation selected from the group consisting of infrared radiation, visible light and ultraviolet radiation.
31. Способ по п.25, дополнительно содержащий стадию обеспечения наличия субстрата для фермента и медиатора, причем субстрат для фермента и медиатор содержатся внутри камеры для детектирования, зонд представляет собой фермент, а медиатор способен к опосредованию реакции между ферментом и электродом для указания на протекание электрохимической реакции.31. The method of claim 25, further comprising the step of providing a substrate for the enzyme and the mediator, the substrate for the enzyme and the mediator being contained within the detection chamber, the probe is an enzyme, and the mediator is capable of mediating a reaction between the enzyme and the electrode to indicate the course electrochemical reaction.
32. Способ изготовления одноразового устройства для использования при детектировании целевого антигена в образце жидкости, имеющем некоторое значение pH, причем способ содержит формирование первого отверстия, простирающегося сквозь первый лист материала с большим электрическим сопротивлением, имеющий ближний край и дальний край, причем первое отверстие имеет часть первого отверстия с реакционной камерой и часть первого отверстия с камерой для детектирования, и определяет первый участок боковой стенки реакционной камеры, боковую стенку камеры для детектирования и проход для образца между дальним краем реакционной камеры и ближним краем камеры для детектирования; формирование второго отверстия, простирающегося сквозь второй лист материала с большим электрическим сопротивлением, имеющий ближний край и дальний край, причем второе отверстие определяет второй участок боковой стенки реакционной камеры; формирование третьего отверстия, простирающегося сквозь третий лист материала с большим электрическим сопротивлением, имеющий ближний край и дальний край, причем третье отверстие определяет третий участок боковой стенки реакционной камеры; прикрепление первой стороны второго листа к первой стороне первого листа, причем второй лист простирается поверх части первого отверстия с камерой для детектирования для определения тем самым первой торцевой стенки камеры для детектирования, второго участка боковой стенки реакционной камеры с существенным совмещением с первым участком боковой стенки реакционной камеры; прикрепление первой стороны третьего листа ко второй стороне первого листа, причем третий лист простирается поверх части первого отверстия с камерой для детектирования для определения тем самым второй торцевой стенки камеры для детектирования, третьего участка боковой стенки реакционной камеры с существенным совмещением с первым участком боковой стенки реакционной камеры; прикрепление первого слоя ко второй стороне второго листа и простирание поверх второго отверстия для определения первой торцевой стенки реакционной камеры; прикрепление второго слоя ко второй стороне третьего листа и простирание поверх третьего отверстия для определения второй торцевой стенки реакционной камеры с существенным совмещением с первым тонким слоем при наложении, при этом листы и слои формируют полоску, имеющую множество внешних поверхностей; формирование второго прохода, простирающегося снаружи полоски внутрь реакционной камеры, на дальнем краю реакционной камеры, причем второй проход определяет вентиляционный выход из реакционной камеры; формирование третьего прохода, простирающегося снаружи полоски внутрь реакционной камеры, на ближнем краю реакционной камеры, причем третий проход определяет вход для образца; иммобилизацию антитела внутри реакционной камеры; и размещение репортерного комплекса в реакционной камере, причем репортерный комплекс содержит зонд.32. A method of manufacturing a disposable device for use in detecting a target antigen in a liquid sample having a certain pH value, the method comprising forming a first hole extending through a first sheet of material with high electrical resistance, having a proximal edge and a distal edge, the first hole having a portion a first opening with a reaction chamber and a portion of a first opening with a detection chamber, and defines a first portion of a side wall of the reaction chamber, a side wall at the detection chamber and the passage for the sample between the far edge of the reaction chamber and the proximal edge of the detection chamber; forming a second hole extending through the second sheet of material with high electrical resistance, having a proximal edge and a distal edge, the second hole defining a second portion of the side wall of the reaction chamber; forming a third hole extending through a third sheet of material with high electrical resistance, having a proximal edge and a distal edge, the third hole defining a third portion of the side wall of the reaction chamber; attaching the first side of the second sheet to the first side of the first sheet, the second sheet extending over part of the first opening with the detection chamber to thereby determine the first end wall of the detection chamber, the second portion of the side wall of the reaction chamber with significant alignment with the first portion of the side wall of the reaction chamber ; attaching the first side of the third sheet to the second side of the first sheet, the third sheet extending over part of the first opening with the detection chamber to thereby determine the second end wall of the detection chamber, the third portion of the side wall of the reaction chamber with significant alignment with the first portion of the side wall of the reaction chamber ; attaching the first layer to the second side of the second sheet and extending over the second hole to define the first end wall of the reaction chamber; attaching the second layer to the second side of the third sheet and stretching over the third hole to define the second end wall of the reaction chamber with significant alignment with the first thin layer when applied, while the sheets and layers form a strip having many external surfaces; the formation of a second passage extending from the outside of the strip into the reaction chamber, at the far edge of the reaction chamber, the second passage defining a ventilation outlet from the reaction chamber; the formation of the third passage, extending from the outside of the strip into the reaction chamber, at the proximal edge of the reaction chamber, the third passage determining the entrance for the sample; immobilization of the antibody inside the reaction chamber; and placing the reporter complex in the reaction chamber, the reporter complex comprising a probe.
33. Способ определения присутствия или отсутствия целевого антигена в образце жидкости, причем способ содержит обеспечение наличия устройства по п.1, где репортерный комплекс дополнительно содержит второй антиген, способный к конкурированию с целевым антигеном за связывание с иммобилизованным антителом; приведение в контакт образца жидкости со входом для образца; по существу заполнение реакционной камеры образцом жидкости путем предоставления возможности образцу для протекания от входа для образца в реакционную камеру; предоставление возможности для прохождения заранее определенного времени, причем это время является достаточным для связывания по существу всего репортерного комплекса с иммобилизованным антителом в отсутствие антигена в образце; по существу заполнение камеры для детектирования образцом жидкости путем предоставления возможности образцу для протекания из реакционной камеры через проход для образца в камеру для детектирования; детектирование присутствия или отсутствия комплекса антиген-зонд внутри камеры для детектирования, причем присутствие или отсутствие комплекса антиген-зонд указывает на присутствие или отсутствие антигена в образце.33. A method for determining the presence or absence of a target antigen in a fluid sample, the method comprising providing a device according to claim 1, wherein the reporter complex further comprises a second antigen capable of competing with the target antigen for binding to an immobilized antibody; bringing the liquid sample into contact with the sample inlet; essentially filling the reaction chamber with a fluid sample by allowing the sample to flow from the sample inlet into the reaction chamber; providing the opportunity for the passage of a predetermined time, and this time is sufficient to bind essentially the entire reporter complex with the immobilized antibody in the absence of antigen in the sample; essentially filling the detection chamber with a liquid sample by allowing the sample to flow from the reaction chamber through the passage for the sample into the detection chamber; detecting the presence or absence of the antigen-probe complex inside the detection chamber, wherein the presence or absence of the antigen-probe complex indicates the presence or absence of antigen in the sample.
34. Способ изготовления одноразового устройства для использования при детектировании целевого антигена в образце жидкости, имеющем некоторое значение pH, где устройство имеет множество внешних поверхностей, причем способ содержит формирование первого отверстия, простирающегося сквозь первый лист материала с большим электрическим сопротивлением, причем первое отверстие имеет часть с камерой для детектирования и определяет боковую стенку камеры для детектирования, причем камера для детектирования имеет ближний край и дальний край; прикрепление первого слоя к первой стороне первого листа и простирание поверх отверстия для определения первой торцевой стенки камеры для детектирования; прикрепление второго слоя ко второй стороне первого листа и простирание поверх отверстия для определения второй торцевой стенки камеры для детектирования с существенным совмещением с первым слоем при наложении, при этом лист и слои формируют полоску; формирование второго отверстия, простирающегося сквозь полоску, причем полоска имеет ближний край и дальний край, второе отверстие имеет часть с реакционной камерой, реакционная камера имеет дальний край и ближний край, и второе отверстие определяет боковую стенку реакционной камеры и проход для образца между дальним краем реакционной камеры и ближним краем камеры для детектирования; прикрепление первой стороны третьего слоя к первой стороне полоски, причем третий слой простирается поверх части второго отверстия с реакционной камерой для определения первой торцевой стенки реакционной камеры; прикрепление первой стороны четвертого слоя ко второй стороне полоски, причем четвертый слой простирается поверх части второго отверстия с реакционной камерой для определения тем самым второй торцевой стенки реакционной камеры с существенным совмещением с первой торцевой стенкой реакционной камеры; формирование третьего отверстия, простирающегося сквозь поверхность устройства в реакционную камеру, на дальнем краю реакционной камеры, причем третье отверстие определяет вентиляционный выход реакционной камеры; формирование четвертого отверстия, простирающегося сквозь поверхность устройства в реакционную камеру, на ближнем краю реакционной камеры, причем четвертое отверстие определяет вход для образца; иммобилизацию антитела внутри реакционной камеры; и размещение репортерного комплекса в реакционной камере, причем репортерный комплекс содержит зонд.34. A method of manufacturing a disposable device for use in detecting a target antigen in a liquid sample having a certain pH value, where the device has many external surfaces, the method comprising forming a first hole extending through a first sheet of material with high electrical resistance, the first hole having a with a camera for detecting and defines a side wall of the camera for detecting, the camera for detecting having a proximal edge and a distal edge; attaching the first layer to the first side of the first sheet and extending over the hole to define the first end wall of the detection chamber; attaching the second layer to the second side of the first sheet and extending over the hole to define the second end wall of the detection chamber with significant alignment with the first layer when applied, the sheet and layers forming a strip; the formation of a second hole extending through the strip, the strip having a proximal edge and a distal edge, the second hole has a part with a reaction chamber, the reaction chamber has a distal edge and a proximal edge, and the second hole defines a side wall of the reaction chamber and a passage for the sample between the far edge of the reaction cameras and the near edge of the camera for detection; attaching the first side of the third layer to the first side of the strip, the third layer extending over part of the second hole with the reaction chamber to determine the first end wall of the reaction chamber; attaching the first side of the fourth layer to the second side of the strip, the fourth layer extending over part of the second hole with the reaction chamber to thereby determine the second end wall of the reaction chamber with significant alignment with the first end wall of the reaction chamber; the formation of a third hole extending through the surface of the device into the reaction chamber, at the far edge of the reaction chamber, the third hole determining the ventilation outlet of the reaction chamber; the formation of the fourth hole, extending through the surface of the device into the reaction chamber, at the proximal edge of the reaction chamber, the fourth hole determining the entrance for the sample; immobilization of the antibody inside the reaction chamber; and placing the reporter complex in the reaction chamber, the reporter complex comprising a probe.