[go: up one dir, main page]

RU2099083C1 - Способ получения вакцины против стрептококкоза и пастереллеза нутрий - Google Patents

Способ получения вакцины против стрептококкоза и пастереллеза нутрий Download PDF

Info

Publication number
RU2099083C1
RU2099083C1 RU94036646A RU94036646A RU2099083C1 RU 2099083 C1 RU2099083 C1 RU 2099083C1 RU 94036646 A RU94036646 A RU 94036646A RU 94036646 A RU94036646 A RU 94036646A RU 2099083 C1 RU2099083 C1 RU 2099083C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
vaccine
vgnki
nutria
streptococcosis
added
Prior art date
Application number
RU94036646A
Other languages
English (en)
Other versions
RU94036646A (ru
Inventor
Виктор Арсеньтьевич Есепенок
Анатолий Акимович Конопаткин
Александр Николаевич Панин
Людмила Ивановна Нецепляева
Хелена Станиславовна Горбатова
Original Assignee
Виктор Арсеньтьевич Есепенок
Анатолий Акимович Конопаткин
Александр Николаевич Панин
Людмила Ивановна Нецепляева
Хелена Станиславовна Горбатова
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Виктор Арсеньтьевич Есепенок, Анатолий Акимович Конопаткин, Александр Николаевич Панин, Людмила Ивановна Нецепляева, Хелена Станиславовна Горбатова filed Critical Виктор Арсеньтьевич Есепенок
Priority to RU94036646A priority Critical patent/RU2099083C1/ru
Publication of RU94036646A publication Critical patent/RU94036646A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2099083C1 publication Critical patent/RU2099083C1/ru

Links

Images

Landscapes

  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)

Abstract

Использование: ветеринарная микробиология, биотехнология, вакцина, профилактика стрептококкоза и пастереллеза нутрий. Сущность изобретения: для изготовления вакцины против стрептококкоза и пастереллеза нутрий раздельно выращивают штаммы Str. Zeoepiolemicus ВГНКИ N К-ДЕП, P. multociola ВГНКИ N 6011, 2394, 1015. Выращенные культуры стрептококков и пастерелл объединяют в соотношении 1:1 и подвергают замораживанию-оттаиванию, отделяют жидкие фракции, инактивируют 0,3 - 0,4%-ным раствором формалина. По истечении срока инактивации и получения требуемых результатов контроля чистоты роста в бактериальную массу вносят адьювант 3%-ный раствор гидроокиси алюминия из расчета 15% к объему культуры. Второй адъювант сапонин добавляют из расчета 100 мг на 1 л биомассы. Адъюванты вносят при непрерывном взбалтывании. Получаемая сапонин-формолгидроокисьалюминиевая вакцина обеспечивает формирование иммунитета через 3 - 5 дней после вакцинации, который сохраняется не менее 12 месяцев. Эпизоотологическая эффективность составляет 95% и более от всех вакцинированных животных. 1 табл.

Description

Изобретение относится к ветеринарной микробиологии, а именно, к конструированию бактериальных вакцин для профилактики стрептококкоза и пастереллеза нутрий.
Стрептококкоз, пастереллез и сальмонеллез наносят огромный ущерб нутриеводческим хозяйствам, регистрируются как в отдельности так и в ассоциации: погибает молодняк после отсадки (до 80%), самки абортируют во второй половине беременности (до 80%). При этом большие затраты дополняются нарушением технологии выращивания животных, а также за счет проведения ветеринарно-санитарных мероприятий при ликвидации этих болезней.
Сальмонеллез, стрептококкоз и пастереллез нутрий являются факторными болезнями этих животных. В связи с этим специфическая профилактика выше названных болезней необходима.
С целью профилактики сальмонеллеза применяется поливалентная вакцина против сальмонеллеза и колибактериоза пушных зверей. Биопрепарат вводят подкожно в области внутренней поверхности бедра щенкам нутрий с 30-45 дневного возраста 3-кратно в дозах 0,5, 1.0 и 1,5 см3 с интервалом в 8-10 дней.
Через 14 дней после курса профилактики сальмонеллеза, нутрий вакцинирую против стрептококкоза. Вводят внутримышечно формолгидрооксильалюминиевую вакцину против стрептококкоза нутрий двухкратно в области бедра в дозах 1,0 и 1,5 см3 с интервалом 6 дней не зависимо от возраста.
Через 14 дней после последнего введения биопрепарата против стрептококкоза нутрий, вакцинируют против пастереллеза. С этой целью применяют сапонин-формолвакцину строго внутримышечно, с внутренней поверхности бедра, двукратно в дозах 0,5 см3 и 1,0 см3 с интервалом 10-12 дней.
Курс специфической профилактики особоопасных инфекционных болезней для нутрий при применении моновакцин длительный (более 3-х месяцев) и поэтому, несмотря на их высокую специфическую активность, падеж зверей отмечается от заболеваний, которые профилактируют в последнюю очередь.
Поэтому целью настоящего изобретения является конструирование иммуногенной ассоциированной вакцины против стрептококкоза и пастереллеза нутрий, чтобы существующую систему профилактических и оздоровительных мероприятий дополнить вакцинацией поголовья и добиться более эффективного эпизоотологического контроля стрептококкоза и пастереллеза нутрий.
Вакцину для профилактики стрептококкоза и пастереллеза нутрий готовили на основе штаммов стрептококков серогруппы C К-ДЕП и пастерелл N 6011, 2394, 1015, которые выделены нами от павших нутрий и депонированы в коллекции штаммов микроорганизмов Всероссийского Государственного научно-исследовательского института контроля, стандартизации и сертификации ветеринарных препаратов.
Пример. Для изготовления второй серии вакцины против стрептококкоза и пастереллеза нутрий использовали отдельные ампулы с лиофилизированной культурой стрептококка серологической группы C штамма N "К"-ДЕП и пастерелл N 6011, 2394, 1015.
Содержимое ампул в отдельности высевали на МПА с 1% глюкозы в 3-4 чашки Петри по следующей методике: 0,1-0,2 мл суспензии культуры штамма вносят на поверхность агара и стеклянным стерильным шпателем распределяли ее по поверхности агара. Этим же шпателем проводят по поверхности агара последовательно еще трех чашек. Посевы на МПА инкубируют 48 часов при +37-37,5oC. Одновременно делают высевы на МПБ, МППБ под вазелиновым маслом и среду Сабуро по две пробирки с каждой средой и инкубируют при тех же температурных режимах (на среде Сабуро при +20-24oC) посевы на МППБ и на среде Сабуро 10 суток, а на МПБ 3 суток.
По истечении срока инкубации культуры в каждой питательной среде в отдельности проверяют на чистоту и характер роста визуальным просмотром, а также просмотром мазков, окрашенных по Граму. Рост культур на питательных средах должен быть характерным для возбудителя стрептококкоза и пастереллеза в отдельности.
Из культур, выросших на чашках Петри, отбирают 2-3 колонии стрептококков и пастерелл в отдельности и высевают в МПБ с добавлением 1% глюкозы и инкубируют при температуре +37-37,5oC 18-22 часа. Проверяют чистоту роста просмотром мазков, окрашенных по Граму и высевают на МПБ с глюкозой (1%) во флаконы в соотношении 1:100.
Для приготовления маточной раскладки из флаконов или колб суточные бульонные культуры стрептококков и пастерелл в отдельности пересевают в подогретый до температуры +37-37,5oC МПБ с глюкозой (1%) в 2,5-литровых баллонах из расчета 80-100 мл на 10 литров. Посевы культивируют при температуре +37-37,5oC в течение 18-24 часов.
При удовлетворительных показателях чистоты, pH и оптической концентрации, производственную культуру в баллонах замораживают при температуре минус 20oC в течение двух суток. Затем культуру оттаивают при комнатной температуре (+16-18oC). При расслоении твердой и жидкой фазы в отношении 1:1 ледяную массу удаляют. К жидкому концентрату разрушенных бактерий вносят 0,3% коммерческого формалина. Инактивацию культур проводят в течение 48-ми часов при температуре +16-18oC, подвергая взбалтыванию каждый баллон до 3-4 раз в течение 2 минут.
После инактивации отбирают пробы культур из каждого баллона в отдельности для контроля полноты инактивации и определения концентрации микробных клеток. Для этого проводят посевы в пробирки на МПА, МПБ, МППБ под вазелиновым маслом. Посевы не должны иметь роста в течение 10 дней наблюдения. Концентрацию микробных клеток определяют по оптическому стандарту мутности, и которая должна быть 3±0,1 млрд микробных клеток в 1 мл, а несвязанного формалина должно быть не более 0,095%
По истечении срока инактивации и получения требуемых результатов контроля чистоты (полноты инактивации) биомассы стрептококков и пастерелл сливали в 20 литровые бутыли в соотношении 1:1 и в общую бактериальную массу вносили стерильный адъювант 3% -ный раствор гидроокиси алюминия (ГОСТ 1828-81) из расчета 15% к объему культуры. Второй адъювант сапанин добавляли из расчета 100 мг на 1 литр. Адъюванты вносят при непрерывном помешивании культуры.
Примечание: 3% раствор гидроокиси алюминия на физиологическом растворе стерилизуют в автоклаве при температуре 120oC в течение 30 минут.
Через трое суток после внесения адъюванта формируют серию вакцины, pH готовой вакцины должен быть в пределах 7,0-7,2.
Расфасовку вакцины производят по 20, 100, 200 мл в стерильные флаконы, которые закрывают резиновыми пробками и закатывают алюминиевыми колпачками, обеспечивая герметичность упаковки содержимого флаконов.
Полученная вакцина имеет следующий состав (об.).
а) свободный антиген стрептококков и пастерелл, выращенных в течение 18-22 часов, в концентрации (5-6)•109 микробных клеток/см3 83,7
б) глюкоза 1,0
в) формалин 0,3
г) гидроокисьалюминия до 100
Для определения качества сапонин-формолгидроокисьалюминиевой вакцины государственный контролер делает выборку из разных мест серии в количестве 10 флаконов, из которых 5 используют для проведения испытаний, а 5 флаконов хранят в архиве государственного контролера в течение 18 месяцев.
Для определения внешнего вида, цвета, наличия посторонней примеси, хлопьев, плесени, неразбивающегося осадка, флаконы с вакциной тщательно встряхивают и просматривают визуально в проходящем свете. Одновременно флаконы проверяют на герметичность укупорки и правильность этикетирования.
Концентрацию водородных ионов определяют электрометрическим методом, используя потенциометр марки ЛПУ-01 или другой прибор того же класса точности. Для испытания используют 3 флакона с вакциной. Содержимое каждого флакона испытывают отдельно. Определение pH вакцины проводят по инструкции, приложенной к потенциометру. Вакцина должна иметь pH в пределах 7,0-7,2.
Для проведения испытания на стерильность используют 5 флаконов с вакциной. Посевы проводят из каждого флакона в две пробирки с МПА, МПБ, МППБ и среду Сабуро. Посевы проводят в объеме 0,2-0,3 мл вакцины. Питательные среды с посевами выдерживают в течение 10 дней, роста микрофлоры быть не должно.
Безвредность вакцины проверяют на морских свинках массой 300-350 г и на белых мышах 16-18 г. Три флакона с вакциной встряхивают и из каждого флакона с вакциной с соблюдением стерильности отбирают 20-30 мл препарата, переносят в стерильный флакон, общую пробу используют для определения безвредности и иммуногенности.
Для определения безвредности содержимое флакона тщательно встряхивают и вводят пяти морским свинкам подкожно в области спины в объеме 2 мл и 10-ти белым мышам подкожно в области спины в объеме 0,5 мл. Вакцина не должна вызывать заболевания и гибели морских свинок и белых мышей в течение 10-ти дневного срока наблюдения.
Для определения иммуногенной активности общую пробу вакцины во флаконе встряхивают и вводят 40-ти белым мышам массой 16-18 г подкожно с наружной стороны бедра в дозе 0,2 мл. Через 14 дней после иммунизации 40 вакцинированных и 40 контрольных белых мышей аналогичной массы заражают подкожно в области бедра подтитрованной десятикратной смертельной дозой вакцинных штаммов стрептококков и пастерелл в отдельности /по 20 мышей/. Срок наблюдения 10 дней.
Вакцину считают иммуногенной, если она предохраняет от заболевания и гибели не менее 18 иммунизированных мышей в каждой опытной группе, при заболевании всех и гибели не менее 38 белых мышей в контрольных группах в течение 10 дней.
Полученные нами две серии вакцин против стрептококкоза нутрий и известную вакцину против диплококковой септицемии телят, ягнят и поросят мы испытали в производственных условиях (см. таблица N 1). Анализ полученных данных, представленных в таблице N 1, достоверно доказывает эффективность вакцины серии N 2, по сравнению с известной вакциной и вакциной серии N 1. Вакцины вводили внутримышечно в области бедра с внутренней стороны 1,0 и 1,5 см3 с интервалом 7-10 дней. Вакцина серии N 2 безвредна, не вызывает осложнений у вакцинированных нутрий, обладает высокой активностью и профилактирует развитие клинических признаков стрептококкоза и гибель животных от болезни до 98,4%

Claims (1)

  1. Способ получения вакцины против стрептококкоза и пастереллеза нутрий, отличающийся тем, что раздельно выращивают в жидкой питательной среде с добавлением глюкозы штаммы Streptococcus zooepidemicus ВГНКИ N К-ДЕП, Pasteurella multocida ВГНКИ N 6011, Pasteurella multocida ВГНКИ N 2394 и Posteurella multocida ВГНКИ N 1015 в течение 18 24 ч, полученные культуральные среды подвергают замораживанию-оттаиванию, отделяют жидкие фракции, инактивируют 0,3 0,4%-ным раствором формалина, объединяют их в равных соотношениях по объему и последовательно вносят гидроокись алюминия и сапонин.
RU94036646A 1994-09-30 1994-09-30 Способ получения вакцины против стрептококкоза и пастереллеза нутрий RU2099083C1 (ru)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU94036646A RU2099083C1 (ru) 1994-09-30 1994-09-30 Способ получения вакцины против стрептококкоза и пастереллеза нутрий

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU94036646A RU2099083C1 (ru) 1994-09-30 1994-09-30 Способ получения вакцины против стрептококкоза и пастереллеза нутрий

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU94036646A RU94036646A (ru) 1996-06-27
RU2099083C1 true RU2099083C1 (ru) 1997-12-20

Family

ID=20161106

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU94036646A RU2099083C1 (ru) 1994-09-30 1994-09-30 Способ получения вакцины против стрептококкоза и пастереллеза нутрий

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2099083C1 (ru)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2292911C1 (ru) * 2005-08-02 2007-02-10 Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования Кубанский государственный аграрный университет Способ изготовления вакцины, ассоциированной против сальмонеллеза и стрептококкоза нутрий
RU2316344C1 (ru) * 2006-07-19 2008-02-10 Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования Кубанский государственный аграрный университет Вакцина ассоциированная против колибактериоза, сальмонеллеза, стрептококкоза и энтерококковой инфекции нутрий

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Ветеринарные препараты. Справочник под ред. Осидзе Д.Ф. - М.: Колос, 1981, с. 289 и 290. *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2292911C1 (ru) * 2005-08-02 2007-02-10 Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования Кубанский государственный аграрный университет Способ изготовления вакцины, ассоциированной против сальмонеллеза и стрептококкоза нутрий
RU2316344C1 (ru) * 2006-07-19 2008-02-10 Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования Кубанский государственный аграрный университет Вакцина ассоциированная против колибактериоза, сальмонеллеза, стрептококкоза и энтерококковой инфекции нутрий

Also Published As

Publication number Publication date
RU94036646A (ru) 1996-06-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2099084C1 (ru) Вакцина против стрептококкоза и пастереллеза нутрий
Rahman et al. Development of experimental oil based inactivated HS vaccine from field Isolates of Pasteurella multocida from Cattle in Bangladesh
RU2099083C1 (ru) Способ получения вакцины против стрептококкоза и пастереллеза нутрий
RU2099081C1 (ru) Способ получения вакцины для профилактики стрептококкоза нутрий
RU2159127C1 (ru) Вакцина против псевдомоноза пушных зверей
RU2754005C1 (ru) Штамм бактерий histophilus somni, предназначенный для получения моно- и поливалентных иммуногенных композиций, направленных на специфическую профилактику гистофилеза (стадного бесплодия) рогатого скота
RU2388489C1 (ru) Способ изготовления вакцины ассоциированной против псевдомоноза и энтерококковой инфекции нутрий
RU2179861C2 (ru) Вакцина против стрептококкоза крупного рогатого скота
RU2099082C1 (ru) Вакцина против стрептококкоза нутрий
RU2538158C1 (ru) Способ изготовления вакцины, ассоциированной против эшерихиоза, стрептококкоза и стафилококкоза крупного рогатого скота
US4002736A (en) Porcine bacterin
RU2831198C1 (ru) Средство специфической профилактики против клинических и субклинических маститов коров
RU2316345C1 (ru) Способ изготовления вакцины ассоциированной против колибактериоза, сальмонеллеза, стрептококкоза и энтерококковой инфекции нутрий
RU2840041C1 (ru) Вакцина против инфекционных маститов и эндометритов коров инактивированная, способ её получения
RU2108110C1 (ru) Вакцина против бруцеллеза крупного рогатого скота
RU2086259C1 (ru) Ассоциированная инактивированная вакцина против хламидиоза, кампилобактериоза, сальмонеллеза и лептоспироза мелкого рогатого скота
RU2348425C2 (ru) Способ изготовления ассоциированной вакцины против стрептококкоза и псевдомоноза песцов и лисиц
RU2026343C1 (ru) Вакцина против бруцеллеза сельскохозяйственных животных
RU2309767C1 (ru) Способ изготовления вакцины против псевдомоноза свиней
RU2853357C1 (ru) Штамм Escherichia coli "19-СД", используемый для изготовления вакцины против маститов коров
RU2799603C1 (ru) Штамм "SA-21" бактерии рода Streptococcus вида Streptococcus agalactiae для изготовления биопрепаратов для специфической профилактики мастита коров
RU2763991C1 (ru) Вакцина против инфекционного атрофического ринита и пастереллеза свиней инактивированная, способ её получения
RU2338554C2 (ru) Способ изготовления вакцины ассоциированной против колибактериоза, сальмонеллеза и энтерококковой инфекции нутрий
RU2406532C1 (ru) Способ изготовления вакцины ассоциированной против стрептококкоза и стафилококкоза крупного рогатого скота
RU2818361C1 (ru) Штамм бактерий Streptococcus dysgalactiae для изготовления биопрепаратов для специфической профилактики мастита коров