RS66854B1 - Pemafibrat u kombinaciji sa inhibitorom sglt2 za profilaktički ili terapeutski tretman bolesti jetre, nealkoholne bolesti masne jetre - Google Patents

Description

Opis

Oblast tehnike

[0001] Predmetni pronalazak se odnosi na profilaktičko i/ili terapeutsko sredstvo za nealkoholnu bolest masne jetre.

Stanje tehnike

[0002] Nealkoholna bolest masne jetre (NAFLD) je poremećaj masne jetre koji nije povezan sa alkoholnim hepatitisom ili virusnim hepatitisom. Procenjuje se da NAFLD pogađa oko 30% opšte populacije. NAFLD je generički termin za niz stanja, od jednostavne steatoze do nealkoholnog steatohepatitisa (NASH). Jednostavna steatoza je nakupljanje masti u hepatocitima i ima relativno dobru prognozu. NASH uključuje i masnu jetru i upalu jetre i može dovesti do relativno teškog stanja kao što su fibroza tkiva jetre, ciroza jetre ili hepatocelularni karcinom. Lečenje virusnog hepatitisa, kao što je hepatitis C, nedavno je brzo napredovalo i stoga se očekuje da će se broj pacijenata sa kancerom jetre izazvanim virusom smanjiti u budućnosti. Nasuprot tome, očekuje se da će se broj pacijenata sa kancerom jetre na bazi NASH povećati (nepatentni dokumenti 1, 2 i 3).

[0003] Smatra se da se NAFLD razvija široko poznatim mehanizmom „teorije dva udarca“ u kojoj NAFLD napreduje od faze akumulacije masti u hepatocitima do faze upale/fibroze jetre (Nepatentni dokument 4). Pored toga, nedavno je predložena „teorija višestrukih paralelnih udaraca“, u kojoj različiti faktori učestvuju u progresiji NAFLD paralelno (Nepatentni dokument 5). U dijagnozi NAFLD, ključni faktori su baloniranje hepatocita, Mallory-Denkova tela i fibroza. Kliničke smernice za NAFLD/NASH Japanskog društva za gastroenterologiju definišu patološki dijagnostički kriterijum za NASH kao „NAFLD sa balonskom degeneracijom hepatocita sa upalom pored makrovezikularnih masnih promena“.

[0004] Matteoni et al. su klasifikovali pacijente sa NAFLD u četiri stadijuma na osnovu patoloških nalaza u svetlu njihove prognoze i definisali tipove 3 i 4 kao NASH (nepatentni dokumenti 3 i 6). Uvećanje hepatocita i balonska degeneracija su patološki nalazi koji ukazuju da nakupljanje masti uzrokuje degeneraciju citoskeleta. Ovi nalazi su ključni kriterijumi za dijagnozu NASH.

[0005] Lečenje NAFLD se uglavnom zasniva na brizi o gojaznosti, dijabetesu, dislipidemiji i hipertenziji kroz poboljšanje načina života, kao što su dijetetska terapija i terapija vežbanjem. Pored poboljšanja načina života, u kliničkoj praksi se sprovode i lekovi za lečenje. Lekovi za lečenje ciljaju insulinsku rezistenciju, poremećaj metabolizma lipida, hipertenziju ili oksidativni stres. Lekovi koji se koriste za insulinsku rezistenciju uključuju lekove koji pojačavaju osetljivost na insulin, kao što su derivati na bazi tiazolidina (pioglitazon, rosiglitazon, itd.) koji su ligandi za nuklearni receptor PPARγ koji učestvuje u povećanju insulinske osetljivosti, ili lekovi na bazi biguanida (metformin itd.). Lekovi koji se koriste za poremećaje metabolizma lipida uključuju lekove na bazi fibrata (fenofibrat, bezafibrat, itd.) koji su agonisti PPARα, preparati na bazi statina ili inhibitori reapsorpcije holesterola u crevima (ezetimib itd.). Lekovi koji se koriste za hipertenziju uključuju antagoniste receptora angiotenzina II tipa 1 (ARB) (nepatentni dokumenti 1 i 3).

[0006] Pored toga, za oksidativni stres, lekovi koji se koriste kao antioksidans uključuju vitamin E.

[0007] Odgovarajući režim lečenja za pacijenta može se izabrati u zavisnosti od osnovne bolesti iz ovih tretmana lekovima. Međutim, svaki tretman lekovima zahteva dalja ispitivanja. Nažalost, za NAFLD trenutno nema dostupan utvrđeni tretman lekovima.

[0008] Što se tiče lekova na bazi fibrata, objavljeno je da je fenofibrat ispitivan zbog efekta na NAFLD u kliničkim ispitivanjima (Nepatentni dokument 7). Pored toga, Patentni dokument 1 otkriva da (R)-2-[3-[[N-(benzoksazol-2-il)-N-3-(4-metoksifenoksi)propil]aminometil]fenoksi] buterna kiselina ili njena so, ili njihov solvat, ima selektivni efekat aktiviranja PPARα, a patentni dokument 2 otkriva da je jedinjenje korisno za prevenciju i lečenje nealkoholne bolesti masne jetre. U međuvremenu, što se tiče inhibitora natrijum-glukoznog kotransportera 2 (SGLT2), sprovedeno je kliničko ispitivanje remogurifurojina i objavljeno je da ima lekoviti efekat na NASH (Nepatentni dokument 8). Uz porast broja pacijenata sa metaboličkim sindromom širom sveta, predviđa se i povećanje broja pacijenata sa NASH. Pošto se smatra da je NASH uzrok nevirusnog hepatocelularnog karcinoma, koji je glavni faktor smrti povezane sa kancerom (Nepatentni dokument 9), poželjno je uspostaviti efikasniji tretman.

[0009] WO 2016/046311 A1 otkriva postupak za lečenje NAFLD i/ili NASH i ovde su opisane odgovarajuće kompozicije za izvođenje postupka.

[0010] HAMEED, B. et al.: "Emerging Therapies for Nonalcoholic Fatty Liver Disease", Clinics in Liver Disease., vol. 20, no. 2, 2016, pages 365-385, otkrivaju nove terapije za nealkoholnu bolest masne jetre.

[0011] WO 2015/005365 A1 pruža jedinjenje korisno u prevenciji i lečenju nealkoholne bolesti masne jetre. Odnosi se na lek za prevenciju i/ili lečenje nealkoholne bolesti masne jetre, pri čemu lek kao aktivni sastojak ima<®>-2-[3-[[N-(5-enzoksazol-2-il)-N-3-(4-metoksifenoksi)propil]aminometil]fenoksi]buternu kiselinu, njenu so ili njihov solvat.

[0012] WO 2006/009149 A1 odnosi se na farmaceutsku kompoziciju koja je efikasna kao inhibitor progresije bolesti koje se pripisuju abnormalnom nakupljanju masti u jetri. Posebno, obezbeđena je farmaceutska kompozicija koju karakteriše inhibitor kotransportera 2 natrijuma/glukoze kao aktivni sastojak.

[0013] SUZUKI, M. et al.: "Tofogliflozin, a sodium/glucose cotransporter 2 inhibitor, attenuates body weight gain and fat accumulation in diabetic and obese animal models", Nutrition & Diabetes, vol. 4, no.7, July 2014, pages 1-9, otkriva da su mehanizmi delovanja tofogliflozina na smanjenje telesne težine detaljno ispitani na životinjskim modelima sa gojaznošću i dijabetesom.

[0014] HONDA, Y. et al.: "The Selective SGLT2 Inhibitor Ipragliflozin Has a Therapeutic Effect on Nonalcoholic Steatohepatitis in Mice", PLoS ONE, vol. 11, no. 1, 5 January 2016, pages 1-13, opisuju miševe sa amilinskim modelom NASH jetre (AMLN) koji su pokazali steatozu, upalu i fibrozu u jetri, kao i gojaznost i insulinsku rezistenciju, karakteristike koje su prepoznate kod humanog NASH, ipragliflozin je poboljšao insulinsku rezistenciju i oštećenje jetre, ipragliflozin je smanjio nivoe slobodnih masnih kiselina u serumu, sadržaj hepatičnih lipida, broj apoptotskih ćelija i područja fibroze.

[0015] DOSSI, C. G. et al.: "Reversal of high-fat diet-induced hepatic steatosis by n-3 LCPUFA: role of PPAR-alpha and SREBP-Ic", The Journal of Nutritional Biochemistry, vol.

25, no.9, 2 June 2014, pages 977-984, opisuju da je nealkoholna bolest masne jetre (NAFLD) najvažniji uzrok hronične bolesti jetre koju karakteriše abnormalna akumulacija triacilglicerida (TG) u jetri u odsustvu značajne konzumacije alkohola (>20 g/dan).

[0016] Zúñiga, J. et al.: "N-3 PUFA Supplementation Triggers PPAR-alpha Activation and PPAR-alpha/NF-kappaB Interaction: Anti-Inflammatory Implications in Liver Ischemia-Reperfusion Injury", PLoS ONE, vol. 6, no. 12, December 2011, pages 1-9, otkrivaju da dijetetska suplementacija sa n-3 polinezasićenim masnim kiselinama (n-3 PUFA) ejkozapentaenskom kiselinom (EPA) i dokozaheksaenskom kiselinom (DHA) kod pacova prethodno priprema jetru za oštećenje izazvano ishemijom-reperfuzijom (IR), sa smanjenjem poboljšane funkcionalnosti jedarnog faktora-κB (NF-κB) koje se javlja u ranoj fazi IR oštećenja i oporavkom proinflamatornog citokinskog odgovora izazvanog IR.

[0017] SVEGLIATI-BARONI, G. et al.: "A Model of Insulin Resistance and Nonalcoholic Steatohepatitis in Rats: Role of Peroxisome Proliferator-Activated Receptor-alpha and n-3 Polyunsaturated Fatty Acid Treatment on Liver Injury", The American Journal of Pathology, vol. 169, no. 3, September 2006, pages 846-860, otkrivaju da insulinska rezistencija izaziva nealkoholnu bolest masne jetre i nealkoholni steatohepatitis (NASH). Stoga se koristi čvrsta ishrana sa visokim sadržajem masti i visokim sadržajem kalorija (HFD) da bi se stvorio model insulinske rezistencije i NASH kod pacova koji nisu genetski modifikovani i da bi se proučila veza između visceralnog adipoznog tkiva i jetre.

[0018] JEAN-CHARLES FRUCHART: "Selective peroxisome proliferator-activated receptor[alpha] modulators (SPPARM[alpha]): The next generation of peroxisome proliferatoractivated receptor", CARDIOVASC DIABETOLOGY, BIOMED CENTRAL, LONDON, GB, vol. 12, no. 1, 31 May 2013, page 82, otkriva da je dislipidemija glavni faktor rizika za kardiovaskularne (CV) bolesti - primarni uzrok smrti širom sveta. Iako smanjenje nivoa lipoproteina-holesterola niske gustine može značajno smanjiti rizik od CV, visok nivo rezidualnog rizika i dalje postoji, posebno kod ljudi sa stanjima povezanim sa gojaznošću, kao što su metabolički sindrom i dijabetes melitus tipa 2. Razvija se nova generacija visoko potentnih i selektivnih PPARα-modulatora (SPPARMα) koji odvajaju koristi agonista PPARα od njihovih neželjenih sporednih efekata.

Spisak citata

Patentni dokument

[0019]

Patentni dokument 1: WO 2005/023777

Patentni dokument 2: WO 2015/005365

Nepatentni dokument

[0020]

Nepatentni dokument 1: Chalasani N. et al. Hepatology, 55, 2005-23 (2012)

Nepatentni dokument 2: Musso G. et al. Nat. Rev. Drug Discov.15 (4), 249-74 (2016.1) Nepatentni dokument 3: NAFLD/NASH Clinical Practice Guideline, 2014 of the Japanese Society of Gastroenterology

Nepatentni dokument 4: Day CP. et al, Gastroenterology, 114 (4), 842-5 (1998)

Nepatentni dokument 5: Tilg H. et al. Hepatology, 52, 1836-46 (2010)

Nepatentni dokument 6: Matteoni CA. et al. Gastroenterology, 116, 1413-9 (1999)

Nepatentni dokument 7: Fernandez-Miranda C. et al. Dig. Liver Dis., 40, 200-5 (2008)

Nepatentni dokument 8: Wilkison W. et al. Abstract O047. International Liver Congress; April 22-26, 2015

Nepatentni dokument 9: Fujii M. et al. Med. Mol. Morphol, 46, 141-52 (2013)

Kratak opis pronalaska

Tehnički problem

[0021] Cilj ovog pronalaska je da se obezbedi farmaceutska kompozicija i/ili kombinacija lekova koji imaju preventivni i/ili poboljšavajući efekat na uvećanje lipidnih kapljica u hepatocitima i/ili baloniranje hepatocita i stoga su sposobni da spreče i/ili leče NAFLD i NASH.

Rešenje problema

[0022] Imajući u vidu gore pomenute probleme, kako bi pronašli sredstvo korisno za prevenciju i/ili lečenje nealkoholne bolesti masne jetre (NAFLD), posebno teškog nealkoholnog steatohepatitisa (NASH), sadašnji pronalazači su sproveli intenzivne studije koristeći NASH-HCC model miša. Otkrili smo da kombinacija (R)-2-[3-[[N-(benzoksazol-2-il)-N-3-(4-metoksifenoksi)propil]aminometil]fenoksi]buterne kiseline (u daljem tekstu, takođe nazvana Jedinjenje 1) koja je agonist PPARα sa inhibitorom SGLT2, koji je otkriven u Expert Opin. Investig. Drugs (2013) 22(4): 463-486 itd., ima snažne efekte na smanjenje veličine lipidne kapljice u hepatocitima i/ili na suzbijanje baloniranja hepatocita, i kao rezultat toga, na sprečavanje i/ili lečenje NAFLD i NASH. Predmetni pronalazak je ostvaren na osnovu ovih nalaza.

[0023] Predmetni pronalazak se odnosi na sledeće stavke [1] do [6].

[1] Profilaktičko i/ili terapeutsko sredstvo za upotrebu u profilaksi i/ili lečenju bolesti jetre, koje sadrži kombinaciju agonista PPARα sa inhibitorom SGLT2, pri čemu agonist PPARα je (R)-2-[3-[[N-(benzoksazol-2-il)-N-3-(4-metoksifenoksi)propil]aminometil] fenoksi]buterna kiselina ili njena so, ili njihov solvat.

[2] Profilaktičko i/ili terapeutsko sredstvo za upotrebu prema stavci [1], pri čemu, bolest jetre je nealkoholna bolest masne jetre.

[3] Profilaktičko i/ili terapeutsko sredstvo za upotrebu prema stavci [2], pri čemu, nealkoholna bolest masne jetre je nealkoholni steatohepatitis.

[4] Profilaktičko i/ili terapeutsko sredstvo za upotrebu prema stavci [1], pri čemu, bolest jetre je ciroza jetre ili hepatocelularni karcinom.

[5] Profilaktičko i/ili terapeutsko sredstvo za upotrebu prema bilo kojoj od stavki [1] do [4], pri čemu je inhibitor SGLT2 izabran od dapagliflozina, kanagliflozina, ipragliflozina, empagliflozina, luseogliflozina, tofogliflozina, ertugliflozina, sotagliflozina, beksagliflozina ili remogliflozina.

[6] Profilaktičko i/ili terapeutsko sredstvo za upotrebu prema bilo kojoj od stavki [1] do [6], koje je komplet.

[0024] Sledeće stavke su poželjni primeri izvođenja koje nisu deo patentnih zahteva:

[10] Lek za upotrebu u prevenciji i/ili lečenju bolesti jetre, uključujući kombinaciju agonista PPARα sa inhibitorom SGLT2.

[11] Lek prema stavci [10], pri čemu, bolest jetre je nealkoholna bolest masne jetre.

[12] Lek prema stavci [11], pri čemu, nealkoholna bolest masne jetre je nealkoholni steatohepatitis.

[13] Lek prema stavci [11], koji ima efekat suzbijanja baloniranja hepatocita kod osobe sa nealkoholnom bolešću masne jetre.

[14] Lek prema stavci [10], pri čemu, bolest jetre je ciroza jetre ili hepatocelularni karcinom.

[15] Lek prema bilo kojoj od stavki [10] do [14], pri čemu, agonist PPARα je (R)-2-[3-[[N-(benzoksazol-2-il)-N-3-(4-metoksifenoksi)propil]aminometil]fenoksi]buterna kiselina ili njena so, ili njihov solvat.

[16] Lek prema bilo kojoj od stavki [10] do [15], pri čemu, inhibitor SGLT2 je izabran od dapagliflozina, kanagliflozina, ipragliflozina, empagliflozina, luseogliflozina, tofogliflozina, ertugliflozina, sotagliflozina, beksagliflozina ili remogliflozina.

[17] Lek prema bilo kojoj od stavki [10] do [16], koji je kombinovani lek.

[18] Lek prema bilo kojoj od stavki [10] do [16], koji je komplet.

[19] Farmaceutska kompozicija za sprečavanje i/ili lečenje bolesti jetre, koja uključuje agonist PPARα, inhibitor SGLT2 i farmaceutski prihvatljiv nosač.

[20] Farmaceutska kompozicija prema stavci [19], pri čemu, bolest jetre je nealkoholna bolest masne jetre.

[21] Farmaceutska kompozicija prema stavci [20], pri čemu, nealkoholna bolest masne jetre je nealkoholni steatohepatitis.

[22] Farmaceutska kompozicija prema stavci [20], koja ima efekat suzbijanja baloniranja hepatocita kod subjekta sa nealkoholnom bolešću masne jetre.

[23] Farmaceutska kompozicija prema stavci [19], pri čemu, bolest jetre je ciroza jetre ili hepatocelularni karcinom.

[24] Farmaceutska kompozicija prema bilo kojoj od stavki [19] do [23], pri čemu, agonist PPARα je (R)-2-[3-[[N-(benzoksazol-2-il)-N-3-(4-metoksifenoksi)propil] aminometil]fenoksi]buterna kiselina ili njena so, ili njihov solvat.

[25] Farmaceutska kompozicija prema bilo kojoj od stavki [19] do [24], pri čemu, inhibitor SGLT2 je izabran od dapagliflozina, kanagliflozina, ipragliflozina, empagliflozina, luseogliflozina, tofogliflozina, ertugliflozina, sotagliflozina, beksagliflozina ili remogliflozina.

[26] Postupak za sprečavanje i/ili lečenje bolesti jetre, uključujući postupak primene na subjekta kome je potrebno lečenje efikasne količine agonista PPARα i postupak primene na subjekta efikasne količine inhibitora SGLT2.

[27] Postupak za sprečavanje i/ili lečenje prema stavci [26], pri čemu, bolest jetre je nealkoholna bolest masne jetre.

[28] Postupak za sprečavanje i/ili lečenje prema stavci [27], pri čemu, nealkoholna bolest masne jetre je nealkoholni steatohepatitis.

[29] Postupak prevencije i/ili lečenja prema stavci [27], za suzbijanje baloniranja hepatocita kod subjekta sa nealkoholnom bolešću masne jetre.

[30] Postupak za sprečavanje i/ili lečenje prema stavci [26], pri čemu, bolest jetre je ciroza jetre ili hepatocelularni karcinom.

[31] Postupak prevencije i/ili lečenja prema bilo kojoj od stavki [26] do [30], pri čemu, agonist PPARα je (R)-2-[3-[[N-(benzoksazol-2-il)-N-3-(4-metoksifenoksi)propil] aminometil]fenoksi]buterna kiselina ili njena so, ili njihov solvat.

[32] Postupak sprečavanja i/ili lečenja prema bilo kojoj od stavki [26] do [31], pri čemu je inhibitor SGLT2 izabran od dapagliflozina, kanagliflozina, ipragliflozina, empagliflozina, luseogliflozina, tofogliflozina, ertugliflozina, sotagliflozina, beksagliflozina ili remogliflozina.

[33] Postupak prevencije i/ili lečenja prema bilo kojoj od stavki [26] do [32], pri čemu se agonist PPARα i inhibitor SGLT2 primenjuju istovremeno.

[34] Postupak prevencije i/ili lečenja prema bilo kojoj od stavki [26] do [32], pri čemu se agonist PPARα i inhibitor SGLT2 primenjuju odvojeno u intervalima.

[35] Upotreba agonista PPARα i inhibitora SGLT2 za proizvodnju profilaktičkog i/ili terapeutskog sredstva za bolest jetre.

[36] Upotreba prema stavci [35], pri čemu, bolest jetre je nealkoholna bolest masne jetre.

[37] Upotreba prema stavci [36], pri čemu, nealkoholna bolest masne jetre je nealkoholni steatohepatitis.

[38] Upotreba prema stavci [36], pri čemu, sredstvo ima efekat suzbijanja baloniranja hepatocita kod subjekta sa nealkoholnom bolešću masne jetre.

[39] Upotreba prema stavci [35], pri čemu, bolest jetre je ciroza jetre ili hepatocelularni karcinom.

[40] Upotreba prema bilo kojoj od stavki [35] do [39], pri čemu, agonist PPARα je (R)-2-[3-[[N-(benzoksazol-2-il)-N-3-(4-metoksifenoksi)propil]aminometil]fenoksi]buterna kiselina ili njena so, ili njihov solvat.

[41] Upotreba prema bilo kojoj od stavki [35] do [40], pri čemu, inhibitor SGLT2 je izabran od dapagliflozina, kanagliflozina, ipragliflozina, empagliflozina, luseogliflozina, tofogliflozina, ertugliflozina, sotagliflozina, beksagliflozina ili remogliflozina.

[42] Upotreba prema bilo kojoj od stavki [35] do [41], pri čemu, sredstvo je kombinovani lek.

[43] Upotreba prema bilo kojoj od stavki [35] do [41], pri čemu, sredstvo je komplet.

[44] Kombinacija agonista PPARα sa inhibitorom SGLT2 za sprečavanje i/ili lečenje bolesti jetre.

[45] Kombinacija prema stavci [44], pri čemu, bolest jetre je nealkoholna bolest masne jetre.

[46] Kombinacija prema stavci [45], pri čemu, nealkoholna bolest masne jetre je nealkoholni steatohepatitis.

[47] Kombinacija prema stavci [45], koja ima efekat suzbijanja baloniranja hepatocita kod osobe sa nealkoholnom bolešću masne jetre.

[48] Kombinacija prema stavci [44], pri čemu, bolest jetre je ciroza jetre ili hepatocelularni karcinom.

[49] Kombinacija prema bilo kojoj od stavki [44] do [48], pri čemu, agonist PPARα je (R)-2-[3-[[N-(benzoksazol-2-il)-N-3-(4-metoksifenoksi)propil]aminometil]fenoksi] buterna kiselina ili njena so, ili njihov solvat.

[50] Kombinacija prema bilo kojoj od stavki [44] do [49], pri čemu, inhibitor SGLT2 je izabran od dapagliflozina, kanagliflozina, ipragliflozina, empagliflozina, luseogliflozina, tofogliflozina, ertugliflozina, sotagliflozina, beksagliflozina ili remogliflozina.

[51] Kombinacija prema bilo kojoj od stavki [44] do [50], koja je kombinovani lek.

[52] Kombinacija prema bilo kojoj od stavki [44] do [50], koja je komplet.

Povoljni efekti pronalaska

[0025] Terapeutsko sredstvo, lek, farmaceutska kompozicija, postupak lečenja, upotreba ili kombinacija ovog pronalaska mogu suzbiti uvećanje lipidnih kapljica u hepatocitima i/ili baloniranje hepatocita kod pacijenta sa nealkoholnom bolešću masne jetre (NAFLD) ili nealkoholnim steatohepatitisom (NASH). Shodno tome, ovaj pronalazak može da obezbedi novu prevenciju i/ili lečenje NAFLD i NASH. Posebno, ovaj pronalazak može da obezbedi prevenciju i/ili lečenje veoma teškog NASH.

Kratak opis crteža

[0026]

Slika 1 prikazuje veličinu (µm<2>) kapljice lipida u hepatocitima kada se primenjuje jedinjenje 1 (0.1 mg/kg), tofogliflozin (10 mg/kg) ili kombinacija jedinjenja 1 (0.1 mg/kg) i tofogliflozina (10 mg/kg) ovog pronalaska.

Slika 2 prikazuje baloniranje hepatocita kada se primeni jedinjenje 1 (0.1 mg/kg), tofogliflozin (10 mg/kg) ili kombinacija jedinjenja 1 (0.1 mg/kg) i tofogliflozina (10 mg/kg) ovog pronalaska.

Slika 3 prikazuje baloniranje hepatocita kada se primeni jedinjenje 1 (0.1 mg/kg), ipragliflozin (3 mg/kg) ili kombinacija jedinjenja 1 (0.1 mg/kg) i ipragliflozina (3 mg/kg) ovog pronalaska.

Opis primera izvođenja

[0027] U ovom pronalasku, agonist PPARα označava generički termin za jedinjenja koja aktiviraju receptor tipa PPARα. Receptor tipa PPARα je tip receptora aktiviranih proliferatorom peroksizoma (PPAR), koji su jedna vrsta jedarnih receptora. Receptor tipa PPARα učestvuje u oksidaciji masti. Konkretno su uključeni fibrati kao što su fenofibrat, klofibrat, bezafibrat, klinofibrat, ciprofibrat, etofibrat i gemfibrozil, i WY-14643 (piriniksična kiselina), GW-7647 (2-(4-(2-(1-(1-cikloheksan butil)-3-cikloheksilureido)etil)feniltio)-2-metilpropionat) i pemafibrat. U ovom pronalasku se koristi (R)-2-[3-[[N-(benzoksazol-2-il)-N-3-(4-metoksifenoksi)propil]aminometil] fenoksi]buterna kiselina (Jedinjenje 1), koja je takođe poznata kao uobičajeni naziv pemafibrat. Može se proizvesti, na primer, prema postupku opisanom u WO 2005/023777 ili prema bilo kom javno poznatom postupku opisanom u dokumentima.

[0028] U ovom pronalasku, inhibitor SGLT2 označava generički termin za jedinjenja koja imaju inhibitorni efekat na ko-transporter natrijum-glukoze 2 (SGLT2) koji je uključen u reapsorpciju glukoze u bubregu. Konkretno su uključeni dapagliflozin, kanagliflozin, ipragliflozin (ASP1941), empagliflozin (BI 10773), luseogliflozin (TS-071), tofogliflozin (CSG452), ertugliflozin (PF-04971729), sotagliflozin (LX-4211), beksagliflozin (EGT-1442) i remogliflozin (KGT-1681). Svako od ovih jedinjenja može se koristiti kao farmaceutski prihvatljiva so i/ili solvat, po potrebi, ali ovaj pronalazak uključuje sva jedinjenja.

[0029] Ipragliflozin je uobičajeni naziv za jedinjenje (1S)-1,5-anhidro-1-C-{3-[(1-benzotiofen-2-il)metil]-4-fluorofenil}-D-glucitol. Ipragliflozin se može koristiti, na primer, kao ipragliflozin L-prolin (1:1).

[0030] Tofogliflozin je uobičajeni naziv za jedinjenje (1S,3'R,4'S,5'S,6'R)-6-[(4-etilfenil)metil]-6'-(hidroksimetil)-3',4',5',6'-tetrahidro-3H-spiro[2-benzofuran-1,2'-piran]-3',4',5'-triol. Tofogliflozin se može koristiti, na primer, kao tofogliflozin monohidrat.

[0031] Ipragliflozin se može proizvesti, na primer, prema postupku opisanom u WO 2004/080990 ili prema bilo kom javno poznatom postupku opisanom u dokumentima.

[0032] Tofogliflozin se može proizvesti, na primer, prema postupku opisanom u WO 2006/080421 ili prema bilo kom javno poznatom postupku opisanom u dokumentima.

[0033] U ovom pronalasku, bolest jetre uključuje masnu jetru, hepatitis, NAFLD, NADH, cirozu jetre i kancer jetre kao što je hepatocelularni karcinom.

[0034] „So“ ovog pronalaska nije posebno ograničena sve dok je farmaceutski prihvatljiva. Ona uključuje soli alkalnih metala kao što su natrijumova so i kalijumova so; soli zemnoalkalnih metala kao što su kalcijumova so i magnezijumova so; soli neorganskih baza soli kao što je amonijumova so; soli organskih baza kao što je trialkilaminska so; soli mineralnih kiselina kao što su hidrohloridna so i sulfatna so; i soli organskih kiselina kao što je acetatna so.

[0035] „Solvat“ ovog pronalaska uključuje hidrat i alkoholat (kao što je etanolat).

[0036] Kombinovani lek je farmaceutski proizvod koji sadrži dva ili više aktivnih sastojaka u jednom doznom obliku. U ovom pronalasku, primer kombinovanog leka može biti tableta koja sadrži agonist PPARα i inhibitor SGLT2 u efikasnoj količini.

[0037] Komplet je set od dva ili više farmaceutskih proizvoda. Svaki od farmaceutskih proizvoda može se uzimati ili primenjivati istovremeno ili odvojeno u intervalima. U ovom pronalasku, primer kompleta može biti kombinacija farmaceutskog proizvoda koji sadrži efikasnu količinu agonista PPARα sa farmaceutskim proizvodom koji sadrži efikasnu količinu inhibitora SGLT2.

[0038] NASH karakteriše baloniranje hepatocita pored uvećanja lipidnih kapljica u hepatocitima (videti nepatentna dokumenta 3 i 6). Kao što je opisano u primerima ispod, kombinovana upotreba jedinjenja 1 sa ipragliflozinom značajno je inhibirala baloniranje hepatocita kod NASH-HCC miša koji je model životinja za NASH. Pored toga, kombinovana upotreba jedinjenja 1 sa tofogliflozinom značajno je inhibirala baloniranje hepatocita kod NASH-HCC miša i inhibirala uvećanje lipidnih kapljica u hepatocitima. Shodno tome, kombinovana upotreba agonista PPARA sa inhibitorom SGLT2 ovog pronalaska je korisna kao profilaktičko i/ili terapeutsko sredstvo za NASH kod sisara, uključujući ljude.

[0039] Terapeutsko sredstvo, lek i slično dobijeno kombinovanjem agonista PPARα sa inhibitorom SGLT2 ovog pronalaska može se koristiti samostalno ili u kombinaciji sa drugim farmaceutski prihvatljivim nosačima za pripremu doznog oblika kao što su tablete, kapsule, granule, praškovi, losioni, masti, injekcije ili supozitorije. Ovi preparati se mogu proizvesti prema poznatom postupku.

[0040] Terapeutska sredstva, lekovi i slično dobijeni kombinovanjem agonista PPARα sa inhibitorom SGLT2 ovog pronalaska primenjuju se oralno ili parenteralno. Stručnjaci u ovoj oblasti mogu odgovarajuće podesiti dozu u zavisnosti od telesne težine, starosti, pola, simptoma i slično pacijenta. Kada se jedinjenje 1 kao agonist PPARα primenjuje kod odrasle osobe, dnevna doza može biti u rasponu od 0.01 do 1000 mg, poželjno od 0.01 do 10 mg, još poželjnije od 0.05 do 5 mg, i primenjuje se poželjno u 1 do 3 podeljene doze. Kada se ipragliflozin koristi kao inhibitor SGLT2, dnevna doza može biti u rasponu od 0.1 do 1000 mg, poželjno od 1 do 200 mg. Kada se tofogliflozin koristi kao inhibitor SGLT2, dnevna doza može biti u rasponu od 0.1 do 500 mg, poželjno od 1 do 100 mg. U oba slučaja, dnevna doza se primenjuje u 1 do 3 podeljene doze.

Primeri

[0041] U nastavku, ovaj pronalazak je detaljnije opisan uz pozivanje na primere.

Primer 1 Efekat jedinjenja 1 u kombinaciji sa tofogliflozinom na modelu miša sa NASH

[0042] NASH-HCC miš je model životinja koja razvija cirozu jetre usled masne jetre putem NASH kada se hrani hranom bogatom mastima, a potom razvija hepatocelularni karcinom (Nepatentni dokument 9). Efekat jedinjenja 1 u kombinaciji sa tofogliflozinom ispitan je upotrebom NASH-HCC mišjeg modela.

[0043] U ovom ispitivanju, jedinjenje 1 je pripremljeno prema postupku opisanom u Patentnom dokumentu 1. Tofogliflozin monohidrat (Chugai Pharmaceutical Co., Ltd.) je korišćen kao konkretan primer tofogliflozina.

1) Korišćena životinja:

[0044] NASH-HCC miševi su pripremljeni u skladu sa Nepatentnim dokumentom 9 i korišćeni su za ovaj eksperiment. Konkretno, na mužjake C57BL/6J miševa je subkutano primenjeno 200 µg streptozotocina drugog dana posle rođenja. Miševi su hranjeni ad libitum hranom bogatom mastima (HFD-32, Clea Japan, Inc.) tokom 2 nedelje počevši od 4 nedelje starosti. Miševi su podeljeni u četiri grupe kao što je opisano u nastavku 2) i na njih su primenjivani lekovi od 6 do 9 nedelja starosti kao što je opisano u nastavku 3). Dnevna potrošnja hrane miševa u svakoj grupi je merena dok su primenjivani lekovi tako da su miševi svih grupa hranjeni istom količinom hrane kao i oni u kontrolnoj grupi.

2) Način grupisanja:

[0045] Miševi sa NASH-HCC su podeljeni u četiri grupe, koje su uključivale kontrolnu grupu, grupu na koju je primenjeno 0.1 mg/kg jedinjenja 1, grupu na koju je primenjeno 10 mg/kg tofogliflozina i grupu na koju je primenjena njihova kombinacija (0.1 mg/kg jedinjenja 1 i 10 mg/kg tofogliflozina) (n = 5 do 7). Miševi su razdvojeni neposredno pre početka primene leka (u starosti od 6 nedelja). Nije bilo razlike u srednjoj telesnoj težini između grupa.

3) Primena lekova:

[0046] Na kontrolnu grupu je primenjivan 3% vodeni rastvor gume arabike. Jedinjenje 1 i/ili tofogliflozin su rastvoreni u 3% vodenom rastvoru gume arabike i primenjivani grupi kojoj je primenjeno jedinjenje 1, grupi kojoj je primenjen tofogliflozin ili grupi kojoj je primenjena njihova kombinacija, respektivno. Miševima svake grupe je oralno primenjivan rastvor u dozi od 5 ml/kg telesne težine jednom dnevno. Period primene je trajao 3 nedelje počevši od 6 nedelja starosti, kao što je gore opisano.

4) Postupak posmatranja i ispitivanja:

[0047] Nakon perioda primene, jetra svakog miša je izvađena pod anestezijom i fiksirana 10% neutralnim puferovanim rastvorom formalina da bi se pripremili uzorci obojeni hematoksilineozinom. Koristeći uzorke, veličina kapljica lipida u hepatocitima je analizirana softverom za analizu slika Image J. U svakom uzorku je izmerena površina od 6000 do 10000 kapljica lipida. Medijana površine kapljica lipida je izračunata za svakog miša, a zatim su medijana i kvartil izračunati za svaku grupu na osnovu medijane za svakog miša u grupi. Ovi podaci su izraženi u dijagramu „box-and-whisker“ (Slika 1).

[0048] Baloniranje hepatocita kod svakog miša je procenjeno pod slepim uslovima prema sledećim kriterijumima (Kleiner et al., Hepatology 41, 1313-21, 2005).

Bez baloniranih ćelija: 0

Balonirana ćelija je retka (malo baloniranih ćelija): 1

Mnoge balonirane ćelije ili istaknute (baloniranje): 2

Zatim je izračunata srednja vrednost rezultata (ocena baloniranja) u svakoj grupi i vrednosti su prikazane (Slika 2).

[0049] Statistička obrada je izvršena upotrebom statističkog softvera EZR, koji proširuje funkcije R i R commander. Softver se distribuira besplatno na veb stranici Jichi Medical University Saitama Medical Center (Bone Marrow Transplantation (2013) 48, 452-458). Stilov test (N = 5 do 7) je sproveden upotrebom EZR, grupa koja je primala lek je označena znakom * na slikama kada je grupa imala značajnu razliku pri p < 0.05 u odnosu na kontrolnu grupu, a označena je znakom * kada je grupa imala značajnu razliku pri p < 0.01.

5) Rezultat

[0050] Kao što je prikazano na slici 1, medijana veličine kapljica lipida bila je 1.17 (µm<2>) u kontrolnoj grupi, 1.00 (µm<2>) u grupi kojoj je primenjeno 0.1 mg/kg jedinjenja 1 i 1.00 (µm<2>) u grupi kojoj je primenjeno 10 mg/kg tofogliflozina. Iako je postojala tendencija smanjenja veličine lipidnih kapljica u hepatocitima, nije bilo statistički značajne razlike. Za razliku od grupa koje su primale jednu dozu, medijana veličine lipidnih kapljica bila je 0.89 (µm<2>) u njihovoj grupi koja je koristila kombinovanu terapiju, a primećeno je značajno smanjenje (p = 0.037) u odnosu na kontrolnu grupu.

[0051] Pored toga, kao što je prikazano na slici 2, rezultat baloniranja bio je 1.33 u kontrolnoj grupi, 0.60 u grupi kojoj je primenjeno 0.1 mg/kg jedinjenja 1 i 0.71 u grupi kojoj je primenjeno 10 mg/kg tofogliflozina. Iako je postojala tendencija supresije baloniranja hepatocita, nije bilo statistički značajne razlike. Za razliku od grupa koje su primale jednu dozu, rezultat baloniranja bio je 0.14 u njihovoj grupi koja je koristila kombinovanu terapiju, a primećena je izražena supresija (p = 0.0089) baloniranja hepatocita u odnosu na kontrolnu grupu.

Primer 2 Efekat jedinjenja 1 u kombinaciji sa ipragliflozinom na model miša sa NASH

[0052] Efekat Jedinjenja 1 u kombinaciji sa ipragliflozinom ispitan je kod miševa sa NASH-HCC (Nepatentni dokument 9).

[0053] U ovom ispitivanju, jedinjenje 1 je pripremljeno prema postupku opisanom u Patentnom dokumentu 1. Ipragliflozin (Shanghai Haoyuan Chamexpress Co., Ltd., Shanghai, China) je korišćen kao konkretan primer ipragliflozina.

1) Korišćene životinje:

[0054] NASH-HCC miševi su pripremljeni na isti način kao u 1) Primera 1 i korišćeni su za ovaj eksperiment.

2) Način grupisanja:

[0055] Miševi sa NASH-HCC su podeljeni u četiri grupe, koje su uključivale kontrolnu grupu, grupu kojoj je primenjeno 0.1 mg/kg jedinjenja 1, grupu kojoj je primenjeno 3 mg/kg ipragliflozina i grupu kojoj je primenjena njihova kombinacija (0.1 mg/kg jedinjenja 1 i 3 mg/kg ipragliflozina) (n = 8). Miševi su razdvojeni neposredno pre početka primene leka (u starosti od 6 nedelja). Nije bilo razlike u srednjoj telesnoj težini između grupa.

3) Primena lekova:

[0056] Kontrolnoj grupi je primenjivan 3% vodeni rastvor gume arabike. Jedinjenje 1 i/ili ipragliflozin su rastvoreni u 3% vodenom rastvoru gume arabike i primenjivani su grupi kojoj je primenjeno jedinjenje 1, grupi kojoj je primenjen ipragliflozin ili grupi kojoj je primenjena njihova kombinacija, respektivno. Miševima iz svake grupe je oralno primenjivan rastvor u dozi od 5 ml/kg telesne težine jednom dnevno. Period primene je trajao 3 nedelje počev od 6 nedelja starosti.

4) Postupak posmatranja i ispitivanja:

[0057] Posmatranje i ispitivanje je sprovedeno na isti način kao u 4) primera 1.

5) Rezultat

[0058] Kao što je prikazano na slici 3, rezultat baloniranja bio je 1.50 u kontrolnoj grupi, 1.35 u grupi kojoj je primenjeno 0.1 mg/kg jedinjenja 1 i 0.88 u grupi kojoj je primenjeno 3 mg/kg ipragliflozina. Iako je postojala tendencija supresije baloniranja hepatocita, nije bilo statistički značajne razlike. Za razliku od grupe sa jednom primenom, rezultat baloniranja bio je 0.38 u njihovoj grupi sa kombinovanom upotrebom, a primećena je izražena supresija (p = 0.009) baloniranja hepatocita u odnosu na kontrolnu grupu.

[0059] Kao što je očigledno iz gore navedenih rezultata, kombinovana upotreba jedinjenja 1 sa inhibitorom SGLT2 kao što je tofogliflozin ili ipragliflozin ovog pronalaska pruža izuzetan efekat u smanjenju veličine kapljica lipida u hepatocitima i suzbijanju baloniranja hepatocita u modelu miša sa NASH. Smanjenje veličine kapljica lipida u hepatocitima i suzbijanje baloniranja hepatocita odgovaraju poboljšanju stanja NAFLD i NASH, što zauzvrat dovodi do prevencije ciroze jetre i hepatocelularnog karcinoma koji su terminalne bolesti NAFLD i NASH.

Industrijska primenljivost

[0060] Pošto kombinacija agonista PPARα i inhibitora SGLT2 pokazuje profilaktički i/ili terapeutski efekat na NAFLD i NASH, ovaj pronalazak ima industrijsku primenljivost.

Claims (6)

Patentni zahtevi

1. Profilaktičko i/ili terapeutsko sredstvo za upotrebu u profilaksi i/ili lečenju bolesti jetre, koje sadrži kombinaciju agonista PPARα sa inhibitorom SGLT2,

pri čemu, agonist PPARα je (R)-2-[3-[[N-(benzoksazol-2-il)-N-3-(4-metoksifenoksi)propil]aminometil]fenoksi]buterna kiselina ili njena so, ili njihov solvat.

2. Profilaktičko i/ili terapeutsko sredstvo za upotrebu prema patentnom zahtevu 1, pri čemu, bolest jetre je nealkoholna bolest masne jetre.

3. Profilaktičko i/ili terapeutsko sredstvo za upotrebu prema patentnom zahtevu 2, pri čemu, nealkoholna bolest masne jetre je nealkoholni steatohepatitis.

4. Profilaktičko i/ili terapeutsko sredstvo za upotrebu prema patentnom zahtevu 1, pri čemu, bolest jetre je ciroza jetre ili hepatocelularni karcinom.

5. Profilaktičko i/ili terapeutsko sredstvo za upotrebu prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 4, pri čemu je inhibitor SGLT2 izabran iz grupe koja se sastoji od dapagliflozina, kanagliflozina, ipragliflozina, empagliflozina, luseogliflozina, tofogliflozina, ertugliflozina, sotagliflozina, beksagliflozina i remogliflozina.

6. Profilaktičko i/ili terapeutsko sredstvo za upotrebu prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 5, koje je komplet.