RS59782B1

RS59782B1 - Hidroksietil sulfonat od ciklina zavisnog inhibitora kinaze proteina, njegov kristalni oblik, i postupak za njegovo dobijanje

Info

Publication number: RS59782B1
Application number: RS20191639A
Authority: RS
Inventors: Guaili Wu; Xiaohui Gao; Junlei Jia
Original assignee: Jiangsu Hengrui Medicine Co
Priority date: 2015-02-03
Filing date: 2016-01-12
Publication date: 2020-02-28
Also published as: CN106661025A; TW201629060A; LT3255046T; EP3255046B1; EP3255046A4; HUE047626T2; PT3255046T; SI3255046T1; MX382058B; US20180009804A1; TWI706951B; CA2974021A1; CN106661025B; US10160759B2; JP6920993B2; US20180230147A1; US10030018B2; PL3255046T3; CY1122514T1; AU2016214897B9

Description

Opis

Predmet pronalaska

[0001] Predmetni pronalazak se odnosi na hidroksietil sulfonat od ciklina zavisnog inhibitora konaz (CDK4 i 6) kristalnog oblika i i postupak njegovog dobijanja.

Tehnički opis pronalaska

[0002] Karcinom dojke je jedan od najčešćih malignih tumora kod žena, sa velikom stopom učestalosti i invazije, ali tok razvoja je spor. „Izveštaj o istraživanju bolesti dojke u Kini“ objavljen u Pekingu 1. februara 2010. godine od strane Kineskog udruženja stanovništva, pokazao je da je stopa smrtnosti od raka dojke u kineskim gradskim sredinama porasla za 38,91%, a karcinom dojke je postao najveća pretnja zdravlju žena. Trenutno postoji najmanje 156 lekova za rak dojke u razvoju ili na tržištu, od kojih su 68% ciljni lekovi. Brojna istraživanja pokazuju da je tumor povezan sa abnormalnošću ćelijskog ciklusa, mutacijama mitotičkog signalnog proteina i defektima antititotičkog signalnog proteina u ćelijama tumora koji dovode do poremećaja proliferacije; u međuvremenu, većina tumora ima genomsku nestabilnost (GIN) i nestabilnost komplementa hromozoma (CIN), ova tri osnovna oštećenja ćelijskog ciklusa indukuju se direktno ili indirektno van kontrole CDK. Inhibitor ciklinske zavisne kinaze (CDK) postao je konstantno popularna meta.

[0003] Trenutno, postoji više CDK inhibitora prve I druge generacije. Medju bitnijim jeste lek druge generacije koji ukljucuje CDK4&6 inhibitor PD-0332991, koji se zajednički razvijan od strane Pfizera I Onyxa ( Pfizer ans Onyx). Inhibira fosforilaciju Rb inhibiranjem aktivnosti CDK4 i 6, omogućava zadržavanje E2F-Rb kompleksa u citoplazmi i blokira početak ćelijskog ciklusa. Rezultati kliničkog ispitivanja (NCT00721409) pokazali su da je preživljavanje bez progresije (PFS) pacijenata lečenih samo letrozolom bilo 7,5 meseci, dok je preživljavanje bez progresije kod pacijenata koji su bili podvrgnuti kombinovanom lečenju letrozola i PD-0332991 prošireno na 26,1 meseci. Ova izuzetna prednost dobila je široku pažnju. Početkom 2013. godine FDA je smatrao da bi mogao biti revolucionarni antikancerogeni lek, nakon pregleda srednjoročnog rezultata leka.

[0003] WO2014183520 opisuje CDK4 i 6 inhibitore, slične strukturi PD-0332991 po strukturi, sa značajnom inhibicijskom aktivnošću i velikom selektivnošću prema CDK4 i 6, sačinjavajući sledeće jedinjenje:

[0005] Ipak, ovo jedinjenje je slabo rastvorljivo, i ne može se direktno koristiti kao lek. Postoji potreba da se pronadje farmaceutski prihvatljiva forma, koja bi omogućila njegovu rastvorljivost I bioraspoloživost.

[0006] CN1835951 I CN101511829 opisuju so (1:1) 2- hidroksi- etanolsulfonske kiseline strukturološki povezanog jedinjenja:

[0007] Pomenuto jedinjenje je poznato kao so palbociklib hidroksietil sulfonat.

[0008] Sa druge strane, stručnjacima je poznato da kristalna struktura farmaceutski aktivnih sastojaka često utiče na hemijsku stabilnost leka. Različiti uslovi kristalizacije i uslovi skladištenja mogu dovesti do promena u kristalnoj strukturi jedinjenja, a ponekad i prateće proizvodnje drugih oblika kristalnog oblika. Generalno, amorfni lek nema pravilnu kristalnu strukturu i često ima druge nedostatke kao što su loša stabilnost proizvoda, manju veličinu čestica, teško filtriranje, laku aglomeracija i lošu tečnost. Stoga je potrebno poboljšati različita svojstva gore navedenog proizvoda. Potrebno je pretražiti novi kristalni oblik sa visokom čistoćom i dobrom hemijskom stabilnošću.

Sažetak pronalaska

[0009] Predmetni pronalazak obezbeđuje 6-acetil-8-ciklopentil-5-metil-2 - ((5- (piperidin-4-il) piridin-2-il) amino) piri-do [2,3-d] pirimidin-7 (8H) -on hidroksietil sulfonat (kao što je prikazano u formuli (I)).

[0010] Jedinjenje formule (I) može se dobiti reakcijom terc-butil 4- (6 - ((6-acetil-8-ciklopentil-5-metil-7-okso-7,8-dihidropirido [2,3-d] pirimidin-2-il) a mino) piridin-3-il) piperidin-1-formati sa hidroksietil sulfonskom kiselinom.

[0011] Rastvorljivost jedinjenja formule (I) je značajno poboljšana u poređenju sa 6-acetil-8-ciklopentil-5-metil-2 - ((5- (piperidin-4-il) piridin-2-il) amino) pirido [2,3-d] pirimidin-7 (8H) -on. Njegova rastvorljivost u vodi dostiže 8,33 mg/ml.

[0012] U jednom aspektu, predmetni pronalazak obezbedjuje kristalnu formu I jedinjenja formule (I).

[0013] Dobijen je niz kristalnih produkata jedinjenja formule (I) pod različitim uslovima kristalizacije i merenje rendgenske difrakcije i merenja diferencijalne skenirajuće kalorimetrije (DSC) na kristalnim proizvodima. Otkriveno je da se stabilan kristalni oblik jedinjenja formule (I), koji se naziva kristalni oblik I, može dobiti u normalnim uslovima kristalizacije. DSC spektar kristalnog oblika I ove aplikacije pokazuje topljeni endotermički vrh na oko 324 ° C. Rendgenski spektar difrakcije praška, koji je dobijen korišćenjem Cu-Ka zračenja i predstavljen uglom od 20 stepeni i interplanarnom rastojanjem (d vrednost), prikazan je na slici 1, na kojoj su karakteristični vrhovi na 4.17 (21.17), 8.26 ( 10.69), 9.04 (9.77), 10.78 (8.20), 12.38 (7.14), 14.01 (6.32), 18.50 (4.79), 18.89 (4.70), 20.69 (4.29), 21.58 (4.11), 23.87 (3.73) i 28.15 ( 3.17).

[0014] Predmetni pronalazak takođe obezbeđuje postupak za dobijanje kristalnog oblika I 6-acetil-8-ciklopentil-5-metil-2 - ((5- (piperidin-4-il) piridin-2-il) amino) pirido [2, 3-d] pirimidin-7 (8H) -on hidroksietil sulfonat. Metoda sadrži sledeće korake:

1) rastvaranje terc-butil 4- (6 - ((6-acetil-8-ciklopentil-5-metil-7-okso-7,8-dihidropirido [2,3-d] pirimidin-2-il) a mi- ne) piridin-3-il) piperidin-1-format i hidroksietil sulfonska kiselina, ili bilo koji kristalni oblik ili amorfan oblik jedinjenja formule (I) u rastvarač za kristalizaciju da se istaloži kristal; ili taloženje kristala posle dodavanja anti-rastvarača, pri čemu je rastvarač za kristalizaciju izabran između vode, organskog rastvarača ili mešanog rastvarača vode i organskog rastvarača; organski rastvarač je izabran od bilo kojeg jednog ili više alkohola, ketona i nitrila sa 3 ili manje atoma ugljenika, ili mešanog rastvarača jednog ili više prethodno pomenutih rastvarača i halohidrokarbona sa 3 ili manje atoma ugljenika; anti-rastvarač je izabrano od bilo kojeg jednog ili više alkohola, ketona i nitrila sa 3 ili manje atoma ugljenika; 2) filtriranje kristala, zatim ispiranje i sušenje istog.

[0015] U poželjnoj realizaciji ovog pronalaska, rastvarač za kristalizaciju iz koraka 1) je metanol / voda, etanol / voda, izopropanol / voda, aceton / voda ili acetonitril / voda, pri čemu je najpoželjniji organski rastvarač etanol / voda, i odnos njih nije posebno ograničen. U poželjnoj realizaciji ovog pronalaska, zapreminski odnos ova dva je 3: 1. U poželjnoj realizaciji ovog pronalaska, anti-rastvarač iz koraka 1) je metanol, etanol, izopropanol, aceton ili acetonitril, gde je najpoželjnije anti-rastvarač etanol.

[0016] Predmetni pronalazak takođe obezbeđuje jedinjenje, tj. Terc-butil 4- (6 - ((6-acetil-8-ciklopentil-5-metil-7-okso-7,8-dihidropirido [2,3-d] pirimidin- 2-il) mino) piridin-3-il) piperidin-1 formati. Ovo jedinjenje je korisno u dobijanju željenog jedinjenja formule (I) i kristalnog oblika I ovog pronalaska.

[0017] Metod kristalizacije nije posebno ograničen, Iimože se izvesti i putem konvencionalnog procesa kristalizacije. Na primer, materijal tj jedinjenje formule (I), može se rastvoriti u organskom rastvorun pod grejanjem , onda se doda antirastvarač da bi se ubrzao kristal putem hladjenja. Posle završetka kristalizacije, željeni kristal se može dobiti putem filtriranja I sušenja. Tačnije, kristal koji se dobija filtriranjem se generalno suši u vakumu pod smanjenim pritiskom na temperaturi od 30~100°C, poželjnije 40~60°C, da bi se uklonio rastvarač kristalizacije.

[0018] Dobijena kristalna forma jedinjenja formule (I) je odredjena od strane DSC I rendgenskim difrakcionim spektrom. U medjuvremenu, preostali rastvarač u dobijenom kristalu je takodje determinisan.

[0019] Kristalna forma I jedinjenja formule (I) pripremljena prema metodu ovog predmetnog pronalaska, ne sadrži ili sadrži relativno malo preostalog rastvarača lekova. Time, kristal ovog pronalaska je adekvatan za korišćenje kao farmaceutski aktivni sastojak.

[0020] Rezultati istraživanja pokazuju da kristalna forma I jedinjenja formule (i) spremljena metodom ovoga pronalaska je stabilna pod uslovima osvetljenja, visoke temperature i visoke vlažnosti, kristalna forma I je takodje stabilna pod uslovima mrvljenja, pritiska i grejanja, što je u skladu sa proizvodnim, transportnim i skladišnim potrebama proizvoda. Proces preparacije je dakle stabilan, ponovljiv i kontrolisan; što je sve u skladu sa industrijskom proizvodnom.

Opis slika

[0021]

Slika 1 Rendgenski difrakcijski spektar praha kristalne forme I jedinjenja formule (I).

Slika 2 DSC spektrum kristalne forme I jedinjenja formule (I).

Detaljan opis pronalaska

[0022] Predmetni pronalazak je detaljno ilustrovan putem sledećih primera.

Instrumenti za testiranje korišćeni u eksperimentima

1. DSC spektrum

[0023] Tip instrumenta : Mettler Toledo DSC 1 Staree System

° C. Dodato je 137.50 g dihlorometana kako bi se rastvarao ostatak, a zatim je dodato 56.25 g prečišćene vode. Reakcioni rastvor je odvojen, a vodena faza je ekstrahovana sa 68.75 g dihlormetana. Organske faze su kombinovane, osušene preko bezvodnog natrijum sulfata i filtrirane. Filterski kolač je ispran sa 23,44 g dihlorometana, a filtrat je koncentrovan da se dobije uljasta tečnost pod sniženim pritiskom na 45 ° C. Dodato je 150 g acetona, zatim je smeša mešana tokom 2 sata na sobnoj temperaturi, i mešana tokom 3 sata u ledenoj vodenoj kupelji. Smeša je filtrirana, filterski kolač je ispran hladnim acetonom (25 g 34), i osušen na sobnoj temperaturi pod sniženim pritiskom 8-10 sati da bi se dobila čvrsta supstanca (oko 14.84 g), sa prinosom 80- 92%, s čistoćom otkrivenom HPLC ne manjom od 90%. ESI / MS: [M H] = 601,43.

Korak 2: Priprema terc-butil 4- (6 - ((6-acetil-8-ciklopentil-5-metil-7-okso-7,8-dihidropirido [2,3-d] pirimidin-2-il) a mino) piridin-3-il) piperidin-1-formate

[0027]

Tert - butil

[0028] 6 - ((6- (1-butoksietenil) -8-ciklopentil-5-metil-7-okso-7,8-dihidropirido [2,3-d] pirimi din-2-il) amino) -5 Formati ', 6'-di-hidro- [3,4'-bipiridil] -1' (2'H) (14,84 g, 24,69 mmol) i 75 g sirćetne kiseline su dodani u reakcionu bocu sa tri vrata argona. Dodato je 10% Pd / C (5 g), boca je tri puta pročišćena vodonikom, reakcija hidrogeniranja izvedena je na 50-60 ° C uz mešanje i normalan pritisak tokom 30-32 h. Kada je preostala količina intermedijarnog stanja (intermedijer dobijen iz tert-butil 6 - ((6- (1-butoksietenil) -8-ciklopentil-5-metil-7-okso-7,8-dihidropirido [2, 3-d] pirimi din-2-il) amino) -5 ', 6'-dihidro- [3,4'-bipiridil] -1' (2'H) formati, pri čemu zaštitna grupa terc-butila ima uklonjena je dok se dvostruka veza još nije smanjila) <0,3% praćeno HPLC, reakcija je prekinuta. Reakcioni rastvor je ohlađen do sobne temperature, a sistem je pročišćen argonom. Zatim je reakcioni rastvor filtriran, filterski kolač je ispran sa 37,50 g dihlormetana. Filtrat je koncentrovan do suva na 65 ° C pod sniženim pritiskom. Ostatak je rastvoren u 50 g bezvodnog etanola i zagrevan do refluksa tokom 0,5 h pod argonom, smeša je prirodno ohlađena do sobne temperature uz mešanje, i mešana u ledenoj kupki oko 4 sata. Smeša je filtrirana i filterski kolač je ispran hladnim bezvodnim etanolom (12,50 g 32). Dobijeni vlažni proizvod je mešan u 31,25 g dihlorometana, a nerastvorljivi materijal je filtriran. 118,75 g izopropanola je lagano dodato filtratu uz mešanje. Smeša je mešana oko 3 h u ledenoj kupelji, filtrirana i sušena pod sniženim pritiskom 8-10 h da bi se dobila čvrsta supstanca (oko 8.75 g) sa prinosom 60-72%, pri čemu je čistoća otkrivena putem

HPLC ne manje od 98%. ESI / MS: [M H] = 547,26.

Korak 3: Priprema 6-acetil-8-ciklopentil-5-metil-2 - ((5- (piperidin-4-il) piridin-2-il) amino) pirido [2,3-d] pirimidin-7 ( 8H) -on hidroksietil sulfonat

Tert - butil

[0030] 4- (6 - ((6-acetil-8-ciklopentil-5-metil-7-okso-7,8-dihidropirido [2,3-d] pirimidin-2-il) mino) piridin-3-il) piperidin-1-formati (8,75 g, 15,94 mmol) i 56,25 g bezvodnog metanola su dodani u reaktivnu bocu sa tri vrata i dobro mešani. 80% hidroksietil sulfonske kiseline (8,81 g, 55,94 mmol) i 0,94 g vode rastvoreno je u 13,75 g bezvodnog metanola i kap po kap dodano u gornji rastvor, koji je zatim postao bistr. Nakon završetka dodavanja kap po kap, reakciona smeša je refluksirana tokom 3-3,5 h uz mešanje. Proces reakcije je praćen TLC do završetka materijala (petrolej etar: etil acetat = 1: 1, Rf materijala = 0,3, Rf proizvoda = 0), a zatim je reakcija prekinuta i filtrirana dok je bila vruća. Trietilamin (4.00 g, 39.38 mmol) je dodavan u kapima filtratu uz mešanje. Po završetku dodavanja kap po kap, smeša je mešana tokom oko 1 sata, i mešana u ledenoj kupelji oko 3 sata. Smeša je filtrirana, filterski kolač je ispran hladnim bezvodnim metanolom (7,19 g 32), osušen na 40 ° C pod sniženim pritiskom 6-8 h da bi se dobila čvrsta supstanca (oko 7,97 g) sa prinosom 82-93 %, s čistoćom otkrivenom HPLC-om ne manjom od 98%. TOF-MS: [M H] = 447.2503 (jon vrh 6-acetil-8-ciklopentil-5-metil-2 - ((5-(piperidin-4-il) piridin-2-il) amino) pirido [2,3-d] pirimidin-7 (8H) -on vezanje sa jednim vodoničnim jonom). Rendgenski difrakcijski prah kristalnog uzorka prikazan je na figuri 1, po kojoj su karakteristični vrhovi na 4.17 (21.17), 8.26 (10.69), 9.04 (9.77), 10.78 (8.20), 12.38 (7.14), 14.01 ( 6.32), 18.50 (4.79), 18.89 (4.70), 20.69 (4.29), 21.58 (4.11), 23.87 (3.73) i 28.15 (3.17). DSC spektar je prikazan nafiguri 2, koji ima toplinski toplotni vrh na oko 324 ° C. Kristalni oblik je definisan kao kristalni oblik I.

Primer 2

[0031] Jedinjenje formule I (1,0 g, 1,75 mmola) je dodato u 50 ml boce sa jednim vratom, posle čega je dodato 11 ml 75% etanola. Smeša je zagrevana do refluksa uz mešanje, dok rastvor nije čist. Smeša je filtrirana dok je bila vruća, 11 ml bezvodnog etanola je polako dodato u filtrat uz mešanje. Smeša je prirodno ohlađena do sobne temperature da bi se talog kristala istaložio uz mešanje. Smeša je filtrirana, isprana i osušena da se dobije čvrsta supstanca (860 mg, prinos: 82.1%). Proizvod je identifikovan kao kristalni oblik I nakon proučavanja i poređenja spektra rendgenske difrakcije i DSC.

Primer 3

[0032] Jedinjenje formule I (1.0 g, 1.75 mmol) je dodato u bocu od 25 ml sa jednim vratom, posle čega je dodavano 2.5 ml vode. Smeša je zagrevana do refluksa sve dok rastvor nije čist, a zatim je polako dodat 15 mL etanola. Smeša je ohlađena da se istaloži kristal uz mešanje. Sledećeg dana, smeša je filtrirana i osušena da se dobije bela čvrsta supstanca (268 mg, prinos: 53.6%). Proizvod je identifikovan kao kristalni oblik I nakon proučavanja i poređenja spektra rendgenske difrakcije i DSC.

Primer 4

[0033] Jedinjenje formule I (1,0 g, 1,75 mmola) je dodato u 25 ml boce sa jednim vratom, posle čega je dodato 2,5 ml vode. Smeša je zagrevana do refluksa sve dok rastvor nije čist, zatim je polako dodat 15 mL izopropanola. Smeša je ohlađena da se istaloži kristal uz mešanje. Sledećeg dana, smeša je filtrirana i osušena da se dobije bela čvrsta supstanca (201 mg, prinos: 40.2%). Proizvod je identifikovan kao kristalni oblik I nakon proučavanja i poređenja spektra rendgenske difrakcije i DSC.

Primer 5

[0034] Jedinjenje formule I (1,0 g, 1,75 mmola) je dodato u bocu od 25 ml sa jednim vratom, posle čega je dodato 2,5 ml vode. Smeša je zagrevana do refluksa sve dok rastvor nije čist, a zatim je polako dodat 15 mL acetona. Smeša je ohlađena da se istaloži kristal uz mešanje. Sledećeg dana, smeša je filtrirana i osušena da se dobije bela čvrsta supstanca (332 mg, prinos: 66.4%). Proizvod je identifikovan kao kristalni oblik I nakon proučavanja i poređenja spektra rendgenske difrakcije i DSC.

Primer 6

[0035] Jedinjenje formule I (1.0 g, 1.75 mmol) je dodato u bocu od 25 ml sa jednim vratom, posle čega je dodavano 2.5 ml vode. Smeša je zagrevana do refluksa sve dok rastvor nije čist, a zatim je polako dodat 15 mL acetonitrila. Smeša je ohlađena da se istaloži kristal uz mešanje. Sledećeg dana, smeša je filtrirana i osušena da se dobije bela čvrsta supstanca (298 mg, prinos: 59.6%). Proizvod je identifikovan kao kristalni oblik I nakon proučavanja i poređenja spektra rendgenske difrakcije i DSC.

Primer 7

[0036] Jedinjenje formule I (1,0 g, 1,75 mmol) je dodato u jednovratnu bocu od 25 ml, posle čega je dodat 4 ml 75% etanola. Smeša je zagrevana do refluksa sve dok rastvor nije čist, zatim je polako dodat 4 mL etanola. Smeša je ohlađena da se istaloži kristal uz mešanje. Sledećeg dana, smeša je filtrirana i osušena da se dobije bela čvrsta supstanca (407 mg, prinos: 81.4%). Proizvod je identifikovan kao kristalni oblik I nakon proučavanja i poređenja spektra rendgenske difrakcije i DSC.

Primer 8

[0037] Jedinjenje formule I (1,0 g, 1,75 mmol) je dodato u jednovratnu bocu od 25 ml, posle čega je dodat 4 ml 75% etanola. Smeša je zagrevana do refluksa sve dok rastvor nije čist, zatim je polako dodat 4 mL etanola. Smeša je ohlađena da se istaloži kristal uz mešanje. Sledećeg dana, smeša je filtrirana i osušena da se dobije bela čvrsta supstanca (418 mg, prinos: 83.6%). Proizvod je identifikovan kao kristalni oblik I nakon proučavanja i poređenja spektra rendgenske difrakcije i DSC.

Primer 9

[0038] Uzorak proizvoda kristalnog oblika pripremljen u Primeru 1 pušten je ravno u vazduh, kako bi se ispitala njegova stabilnost u uslovima osvetljenja (4500 Luk), zagrevanja (40 ° C, 60 ° C) i visoke vlažnosti (RH 75%, RH 90%). Uzorkovanja su izvršena 5. i 10. dan. Čistoća kakva je otkrivena HPLC prikazana je u Tabeli 1.

Tabela 1. Poredjenje stabilnosti kristalnog oblika I jedinjenja formule (I)

[0039] Rezultati studije o stabilnosti pokazali su da kristalni oblik jedinjenja formule (I) ima dobru stabilnost kada se raširi po vazduhu u uslovima osvetljenja, visoke temperature i visoke vlažnosti.

1

Primer 10

[0040] Kristalni oblik I jedinjenja formule (I) pripremljenog u skladu sa postupkom iz Primera 1 je mleven, zagrejan i presovan. Rezultati su pokazali da je kristalna forma stabilna. Detaljni eksperimentalni podaci prikazani su u Tabeli 2 dole.

Tabela 2. Posebno istrazivanje stabilnosti kristalnog oblika I jedinjenja formule (I)

Claims

Patentni zahtevi 1. Jedinjenje formule (I).
2. Kristalni oblik I jedinjenja formule (I) prema zahtevu 1, naznačen time, da kristal ima spektar difrakcije praška rendgenskog zračenja, koji se dobija upotrebom Cu-Ka zračenja i predstavljen je pod uglom od 2 θ, kao što je prikazano na slici 1, u kojima su karakteristični vrhovi oko 4.17, 8.26, 9.04, 10.78, 12.38, 14.01, 18.50, 18.89, 20.69, 21.58, 23.87 i 28.15.
3. Kristalni oblik I prema zahtevu 2, naznačen time što kristal ima spektar difrakcije rendgenskog praha, koji se dobija upotrebom Cu-Ka zračenja i predstavljen uglom od 2 θ i međuplanarnom rastojanjem, kao što je prikazano na slici 1, gde su karakteristični vrhovi na oko 4.17 (21.17), 8.26 (10.69), 9.04 (9.77), 10.78 (8.20), 12.38 (7.14), 14.01 (6.32), 18.50 (4.79), 18.89 (4.70), 20.69 (4.29), 21,58 (4,11), 23,87 (3,73) i 28,15 (3,17).
4.Postupak za dobijanje jedinjenja formule (I) prema zahtevu 1, naznačen time što sadrži korak reakcije terc-butil 4- (6 - ((6-acetil-8-ciklopentil-5-metil-7-okso-7,8 -dihidropirido [2,3-d] pirimidin-2-il) a mino) piridin-3-il) piperidin-1-format sa hidroksietil sulfonskom kiselinom.
5. Postupak za pripremanje kristalnog oblika I jedinjenja formule (I) prema zahtevima 2 ili 3, koji sadrži sledeće korake: 1) rastvaranje tert-butil 4- (6 - ((6-acetil-8-ciklopentil-5-metil-7-okso-7,8-dihidropirido [2,3-d] pirimidin-2-il) mino) piridin-3-il) piperidin-1-format i hidroksietil sulfonske kiseline, ili bilo koji kristalni oblik ili amorfan oblik jedinjenja formule (I) u kristalizacioni rastvarač za taloženje kristala, pri čemu je rastvarač za kristalizaciju izabran iz vode, organskog rastvarača, ili mešani rastvarač vode i organskog rastvarača; organski rastvarač je izabran od bilo kojeg jednog ili više alkohola, ketona i nitrila sa 3 ili manje atoma ugljenika, ili mešanog rastvarača jednog ili više gore pomenutih rastvarača i halogeniranog ugljovodonika sa 3 ili manje atoma ugljenika; 2) filtriranje kristala, zatim ispiranje i sušenje.
6.Postupak za pripremanje kristalnog oblika I jedinjenja formule (I) prema zahtevima 2 ili 3, koji sadrži sledeće korake: 1) rastvaranje tert-butil 4- (6 - ((6-acetil-8-ciklopentil-5-metil-7-okso-7,8-dihidropirido [2,3-d] pirimidin-2-il) mino) 6. piridin-3-il) piperidin-1-format i hidroksietil sulfonska kiselina, ili bilo koji kristalni oblik ili amorfan oblik jedinjenja formule (I) u rastvaraču za kristalizaciju prema zahtevu 5, a zatim dodavanje anti-rastvarača za taloženje kristala gde je anti-rastvarač izabran od bilo kojeg jednog ili više alkohola, ketona i nitrila sa 3 ili manje atoma ugljenika; 2) filtriranje kristala, zatim ispiranje i sušenje.
7.Postupak prema zahtevu 5, naznačen time što je rastvarač za kristalizaciju poželjno mešani rastvarač etanol / voda.
8.Postupak prema zahtevu 6, naznačen time što je rastvarač za kristalizaciju poželjno mešani rastvarač etanol / voda, a anti-rastvarač etanol.
9.Tert-butil 4- (6 - ((6-acetil-8-ciklopentil-5-metil-7-okso-7,8-dihidropirido [2,3-d] pirimidin-2-il) mino) piridin-3 - il) piperidin-1 format.
10. Farmaceutsko jedinjenje, koja sadrži jedinjenje formule (I) prema zahtevu 1 ili njen kristalni oblik I prema zahtevima 2 ili 3, i farmaceutski prihvatljiv nosač.
11.Jedinjenje formule (I) u skladu sa zahtevima 1-kristalične forme, sa zahtevima za zahtevu 2 ili 3-farmaceutskog preparata prema zahtevu 10, za upotrebu u lečenju bolesti povezanih sa ciklinom zavisnom kinazom (CDK4 i 6), pri čemu je bolest poželjno, tumor, a poželjnije karcinom dojke. Izdaje i štampa: Zavod za intelektualnu svojinu, Beograd, Kneginje Ljubice 5 1