[go: up one dir, main page]

RS59662B1 - Kompozicije koje sadrže bakterijske sojeve - Google Patents

Kompozicije koje sadrže bakterijske sojeve

Info

Publication number
RS59662B1
RS59662B1 RS20191610A RSP20191610A RS59662B1 RS 59662 B1 RS59662 B1 RS 59662B1 RS 20191610 A RS20191610 A RS 20191610A RS P20191610 A RSP20191610 A RS P20191610A RS 59662 B1 RS59662 B1 RS 59662B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
treatment
composition
asthma
compositions
cancer
Prior art date
Application number
RS20191610A
Other languages
English (en)
Inventor
George Grant
Angela Margaret Patterson
Imke Mulder
Seanin Mccluskey
Emma Raftis
Original Assignee
4D Pharma Res Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from GBGB1510467.2A external-priority patent/GB201510467D0/en
Priority claimed from GBGB1520501.6A external-priority patent/GB201520501D0/en
Application filed by 4D Pharma Res Ltd filed Critical 4D Pharma Res Ltd
Publication of RS59662B1 publication Critical patent/RS59662B1/sr

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; PREPARATION OR TREATMENT THEREOF
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/135—Bacteria or derivatives thereof, e.g. probiotics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74—Bacteria
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74—Bacteria
    • A61K35/741—Probiotics
    • A61K35/744—Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
    • A61K35/745—Bifidobacteria
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/02—Bacterial antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0053—Mouth and digestive tract, i.e. intraoral and peroral administration
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/19—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles lyophilised, i.e. freeze-dried, solutions or dispersions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/02—Stomatological preparations, e.g. drugs for caries, aphtae, periodontitis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/02—Nasal agents, e.g. decongestants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/08—Bronchodilators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/04—Antipruritics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/08—Antiepileptics; Anticonvulsants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/10—Antioedematous agents; Diuretics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/14—Vasoprotectives; Antihaemorrhoidals; Drugs for varicose therapy; Capillary stabilisers
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205—Bacterial isolates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Physiology (AREA)

Description

Opis
OBLAST TEHNIKE
[0001] Ovaj pronalazak pripada oblasti kompozicija koje obuhvataju bakterijske sojeve koji su izolovani iz sisarskog digestivnog trakta i upotrebi takvih kompozicija u lečenju bolesti.
STANJE TEHNIKE PRONALASKA
[0002] Smatra se da je humano crevo sterilno in utero, ali je odmah nakon rođenja izloženo velikom broju majčinih i mikrobima iz spoljašnje sredine. Nakon toga, dešava se dinamičan period mikrobne kolonizacije i sukcesije, koji je pod uticajem faktora kao što su način isporuke, okruženje, ishrana i genotip domaćina, od kojih svi imaju uticaj na kompoziciju mikrobioma iz creva, posebno ranom tokom života. Zatim, mikrobiom se stabilizuje i postaje sličan adultnom [1]. Mikrobiom iz humanog creva sadrži više od 500-1000 različitih filotipova koji u suštini pripadaju dva velika razdela, Bacteroidetes i Firmicutes [2]. Uspešni simbiotski odnosi koji proizilaze iz bakterijske kolonizacije humanog creva su doveli do široke raznolikosti metaboličkih, strukturnih, zaštitnih i drugih korisnih funkcija. Pojačane metaboličke aktivnosti kolonizovanog creva osiguravaju da na drugi način nesvarljive komponente hrane mogu da se degradiraju sa oslobađanjem sporednih proizvoda koji obezbeđuju važan izvor nutrijenta za domaćina. Slično tome, imunološki značaj mikrobiota iz creva je dobro prepoznat i predstavljen je primerima kod životinja koje se gaje u sterilnom okruženju koje imaju narušeni imunski sistem koji se funkcionalno rekonstituiše nakon uvođenja komensalnih bakterija [3-5].
[0003] Dramatične promene u kompoziciji mikrobiote su dokumentovane u gastrointestinalnim poremećajima kao što je zapaljenska bolest creva (IBD). Na primer, nivoi Clostridium cluster XIVa bakterija su redukovani kod IBD pacijenata dok su brojevi E. coli povećani, što ukazuje na pomak u ravnoteži patobionata u crevima [6-9]. Zanimljivo, ova mikrobna disbioza je takođe povezana sa neravnotežom u populacijama T efektorskih ćelja.
[0004] U prepozavanju potencijalnog pozitivnog efekta koji određeni bakterijski sojevi mogu da imaju na životinjsko crevo, predloženi su različiti sojevi za upotrebu u lečenju raznih bolesti (videti, na primer, [10-13]). Takođe, određeni sojevi, uključujući uglavnom Lactobacillus i Bifidobacterium sojeve, su predloženi za upotrebu u različitih inflamatornih i autoimunskih bolesti koje nisu direktno povezane sa crevima (videti [14] i [15] za preglede). Međutim, veza između različitih bolesti i različitih bakterijskih sojeva, i tačni efekti određenih bakterijskih sojeva na crevo i na sistemski nivo i na bilo koje određene tipove bolesti, su slabo okarakterisani.
[0005] WO2011/110918 i WO2011/149335 opisuju klinička ispitivanja u kojima se koriste probiotici u lečenju atopičnog dermatititisa i alergija. WO2009/072889 opisuje klinička ispitivanja u kojima se koriste probiotici u lečenju alergijske astme .
[0006] U oblasti tehnike postoji potreba za novim postupcima za lečenje inflamatornih i autoimunskih bolesti. Takođe postoji potreba za karakterizacijom potencijalnih efekata bakterija iz creva kako bi mogle da se razviju nove terapije upotrebom bakterija iz creva.
SUŠTINA PRONALASKA
[0007] Pronalazak obezbeđuje kompoziciju koja sadrži bakteriju koja je deponovana pod pristupnim brojem NCIMB 42380 ili bakteriju koja ima 16s rRNK sekvencu koja je najmanje 98% identična sa SEQ ID NO:1, za upotrebu u postupku lečenja ili prevencije neutrofilne astme.
[0008] Pronalazači su razvili nove terapije za lečenje i prevenciju inflamatornih i autoimunskih bolesti. Posebno, pronalazači su razvili nove terapije za lečenje i prevenciju bolesti i stanja koja su posredovana sa IL-17 ili sa Th17 putem. Posebno, pronalazači su identifikovali novi bakterijski soj koji je efikasan za smanjenje Th17 inflamatornog odgovora. Kako je opisano u primerima, oralno davanje kompozicija koje obuhvataju bakteriju deponovanu pod pristupnim brojem NCIMB 42380 može da smanji ozbiljnost inflamatornog odgovora, uključujući Th17 inflamatorni odgovor, u mišjim modelima astme, reumatoidnog artritisa i multiple skleroze. Kao što je takođe opisano u primerima, oralno davanje kompozicija koje sadrže bakteriju koja je deponovana pod pristupnim brojem NCIMB 42380 može da smanji veličinu tumora u mišjim modelima kancera koji mogu da budu povezani sa Th17 inflamatornim odgovorom.
[0009] Pronalazači su identifikovali sa lečenje sa takvim bakterijskim sojevima može da smanji nivoe citokina koji su deo Th17 puta, uključujući IL-17, mogu da ublaže Th17 inflamatorni odgovor i mogu da obezbede kliničke benefite u mišjim modelima inflamatornih i autoimunskih bolesti koje su posredovane sa IL-17 i Th17 putem.
[0010] U određenim slučajevima, opis obezbeđuje kompoziciju koja obuhvata bakteriju koja je deponovana pod pristupnim brojem NCIMB 42380 ili njen biotip, za upotrebu u postupku lečenja ili prevenciji bolesti ili stanja koji su izabrane iz grupe koja obuhvata: multiple sklerozu; artritis, kao što je reumatoidni artritis, osteoartritis, psorijazni artritis, ili juvenilini idiopatski artritis; neuromijelitis oka (Devikova bolest); ankilozirajući spondilitis; spondiloartritis; psorijazu; sistemski lupus eritematozus; inflamatornu bolest creva, kao što je Kronova bolest ili ulcerativni kolitis; celijakiju; astmu, kao što je alergijska astma ili neutrofilna astma; hroničnu opstruktivnu bolest pluća (COPD); kancer, kao što je kancer grudi, kancer debelog creva, kancer pluća ili kancer ovarijuma; uveitis; skleritis; vaskulitis; Behetovu bolest; aterosklerozu; atopični dermatitis; emfizem; periodontitis; alergijski rinitis; i odbacivanje alografta. Efekat koji je prikazan za bakteriju deponovanu pod pristupnim brojem NCIMB 42380 i na Th17 inflamatorni odgovor mogu da obezbede terapeutske efekte za bolesti i stanja koja su posredovana sa IL-17 i Th17 putem, kao što su one koje se gore navode.
[0011] Kako je gore navedeno, pronalazak obezbeđuje kompoziciju koja obuhvata bakteriju deponovanu pod pristupnim brojem NCIMB 42380 ili bakteriju koja ima 16s rRNK sekvencu koja je bar 98% identična sa SEQ ID NO:1, za upotrebu u postupku za lečenje ili prevenciju neutrofilne astme . Pronalazači su identifikovali da lečenje sa bakterijom koja je deponovana pod pristupnim brojem NCIMB 42380 može da smanji regrutovanje neutrofila i eozinofila u pluća, što može da pomogne lečenju ili prevenciji astme. Osim toga, pronalazači su ispitali i pokazali efikasnost bakterije koja je deponovana pod pristupnim brojem NCIMB 42380 na mišjim modelima astme. Ovde prikazani efekat kompozicija prema pronalasku na neutrofilima i eozinofilima označava da mogu da budu posebno efikasni za lečenje ili prevenciju neutrofilne astme i eozinofilne astme. Zaista, u određenim izvođenjima, ovde prikazana kompozicija je za upotrebu u postupku smanjenja neutrofilnog inflamatornog odgovora u lečenju ili prevenciji neutrofilne i eozinofilne astme, ili je kompozicija za upotrebu u postupku smanjenja eozinofilnog inflamatornog odgovora u lečenju ili prevenciji neutrofilne astme. Pokazano je da bakterija koja je deponovana pod pristupnim brojem NCIMB 42380 ima posebno izražen efekat na neutrofilima u modelima astme i lečenje sa ovom bakterijem može da bude posebno efikasno za lečenje neutrofilne astme.
[0012] U daljim poželjnim izvođenjima, prikaz obezbeđuje kompoziciju koja obuhvata bakteriju koja je deponovana pod pristupnim brojem NCIMB 42380 ili njen biotip, za upotrebu u postupku lečenja ili prevencije reumatoidnog artritisa. Pronalazači su identifikovali da lečenje sa bakterijom koja je deponovana pod pristupnim brojem NCIMB 42380 može da obezbedi kliničke benefite u mišjem modelu reumatoidnog artritisa i može da smanji oticanje zglobova. U poželjnim izvođenjima, prikaz obezbeđuje kompoziciju koja obuhvata bakteriju koja je deponovana pod pristupnim brojem NCIMB 42380 ili njen biotip, za upotrebu u lečenju reumatoidnog artritisa. Kompozicije koje koriste bakteriju koja je deponovana pod pristupnim brojem NCIMB 42380 mogu posebno da budu efikasne za lečenje reumatoidnog artritisa.
[0013] Opis obezbeđuje kompoziciju koja obuhvata bakteriju deponovanu pod pristupnim brojem NCIMB 42380 ili njen biotip, za upotrebu u postupku lečenja ili prevenciji multiple skleroze. Pronalazači su identifikovali da lečenje sa bakterijom koja je deponovana pod pristupnim brojem NCIMB 42380 može da smanji pojavu bolesti i ozbiljnost bolesti u mišjem modelu multiple skleroze. U poželjnim izvođenjima, opis obezbeđuje kompoziciju koja obuhvata bakteriju deponovanu pod pristupnim brojem NCIMB 42380 ili njen biotip, za upotrebu u lečenju multiple skleroze. Kompozicije koje koriste bakteriju koja je deponovana pod pristupnim brojem NCIMB 42380 može posebno da bude efikasna za lečenje multiple skleroze.
[0014] Opis obezbeđuje kompoziciju koja obuhvata bakteriju deponovanu pod pristupnim brojem NCIMB 42380 ili njen biotip, za upotrebu u postupku lečenja ili prevencije kancera, kao što je kancer grudi, pluća ili jetre. Pronalazači su identifikovali da tretman sa bakterijom deponovanom pod pristupnim brojem NCIMB 42380 može da smanji tumorski rast u mišjim modelima kancera grudi, pluća i jetre. U određenim izvođenjima, kompozicija je za upotrebu u postupku smanjenja veličine tumora ili prevencije tumorskog rasta kod lečenja kancera.
[0015] U određenim izvođenjima, kompozicije iz prikaza su za upotrebu u postupku smanjenja proizvodnje IL-17 ili smanjenja Th17 ćelijske diferencijacije u lečenju ili prevenciji bolesti ili stanja koje je posredovano sa IL-17 ili Th17 putem. Posebno, kompozicije iz prikaza mogu da se koriste u smanjenju proizvodnje IL-17 ili smanjenju Th17 ćelijske diferencijacije u lečenju ili prevenciji astme, reumatoidnog artritisa ili multiple skleroze ili astme, reumatoidnog artritisa, multiple skleroze, kancera ili uveitisa. Poželjno, prikaz obezbeđuje kompozicije koje obuhvataju bakteriju koja je deponovana pod pristupnim brojem NCIMB 42380 ili njen biotip, za upotrebu u smanjenju IL-17 proizvodnje ili smanjenju Th17 ćelijske diferencijacije u lečenju ili prevenciji astme, reumatodnog artritisa ili multiple skleroze. Prikaz takođe obezbeđuje kompozicije koje obuhvataju bakteriju deponovanu pod NCIMB 42380 ili njen biotip, za upotrebu u smanjenju proizvodnje IL-17 ili smanjenju Th17 ćelijske diferencijacije u lečenju ili prevenciji kancera.
[0016] U određenim izvođenjima, kompozicija je za upotrebu kod pacijenta sa povećanim nivoima IL-17 ili Th17 ćelija. Efekat na inflamatorni odgovor Th17 koji je prikazan za bakteriju koja je deponovana pod pristupnim brojem NCIMB 42380 može da bude od posebne koristi kod takvih pacijenata.
[0017] U poželjnim izvođenjima iz pronalaska, bakterijski soj u kompoziciji je bakterija koja je deponovana pod pristupnim brojem NCIMB 42380. Takođe može da se koristi biotip bakterijskih sojeva, kao što su bakterijski sojevi koji imaju 16s rRNK sekvencu koja je najmanje 98%, 99% 99.5% ili 99.9% identična sa SEQ ID NO:1. Poželjno, bakterijski soj za upotrebu u pronalasku ima 16s rRNK sekvencu koja je predstavljena sa SEQ ID NO:1.
[0018] U određenim izvođenjima, kompozicija iz pronalaska je za oralno davanje. Oralno davanje ovde prikazanih sojeva može da bude efikasno za lečenje IL-17-ili bolesti koje su poredovane sa Th17 putem i stanjima. Takođe, oralno davanje je pogodno za pacijente i praktičare i omogućava isporuku u i / ili parcijalnu ili ukupnu kolonizaciju creva.
[0019] U određenim izvođenjima, komozicija iz pronalaska obuhvata jedan ili više farmaceutski prihvatljivih ekscipijenata ili nosača.
[0020] U određenim izvođenjima, kompozicija iz pronalaska obuhvata bakterijski soj koji je bio liofilizovan. Liofilizacija je efikasan i pogodan postupak za pripremu stabilnih kompozicija koje omogućavaju isporuku bakterija.
[0021] U određenim izvođenjima, pronalazak obezbeđuje hranljivi proizvod koji obuhvata kompoziciju kao što je opisano gore u tekstu.
[0022] U određenim izvođenjima, pronalazak obezbeđuje kompoziciju vakcine koja obuhvata kompoziciju kao što je opisano gore u tekstu.
[0023] U izradi gore navedenog pronalaska, pronalazači su identifikovali i karakerisali bakterijski soj koji je posebno koristan u terapiji. Pokazano je da je bakterija koja je deponovana pod pristupnim brojem NCIMB 42380 efikasna za lečenje ovde opisanih bolesti, kao što je artritis, astma i multiple skleroza. Prema tome, u drugom aspektu, opis obezbeđuje ćeliju bakterije koja je deponovana pod pristupnim brojem NCIMB 42380. Opis takođe obezbeđuje kompozicije koje obuhvataju takve ćelije, ili biološki čiste kulture takvih ćelija. Opis takođe obezbeđuje ćeliju bakterije koja je deponovana pod pristupnim brojem NCIMB 42380 ili njen derivat za upotrebu u terapiji, posebno za ovde opisane bolesti. Takođe je pokazano da je bakterija koja je deponovana pod pristupnim brojem NCIMB 42380 efikasna za lečenje kancera.
KRATAK OPIS NACRTA
[0024]
Slika 1: Mišji model astme koja je indukovana grinjom iz kućne prašine - Ukupni brojevi ćelija iz BAL tečnosti.
Slika 2: Mišji model astme koja je indukovana grinjom iz kućne prašine - Ukupan broj eozinofila u BALF.
Slika 3: Mišji model astme koja je indukovana grinjom iz kućne prašine – Proporcija eozinofila u BALF.
Slika 4: Mišji model astme koja je indukovana grinjom iz kućne prašine – Ukupan broj makrofaga u BALF.
Slika 5: Mišji model astme koja je indukovana grinjom iz kućne prašine – Proporcija makrofaga u BALF.
Slika 6: Mišji model astme koja je indukovana grinjom iz kućne prašine – Ukupan broj neutrofila u BALF.
Slika 7: Mišji model astme koja je indukovana grinjom iz kućne prašine – Proporcija neutrofila u BALF.
Slika 8: Mišji model astme koja je indukovana grinjom iz kućne prašine – Ukupan broj limfocita u BALF.
Slika 9: Mišji model astme koja je indukovana grinjom iz kućne prašine – Proporcija limfocita u BALF.
Slika 10: Mišji model ozbiljne neutrofilne astme - Ukupni brojevi ćelija iz BAL tečnosti.
Slika 11: Mišji model ozbiljne neutrofilne astme - Ukupan broj eozinofila u BALF.
Slika 12: Mišji model ozbiljne neutrofilne astme - Proporcija eozinofila u BALF.
Slika 13: Mišji model ozbiljne neutrofilne astme - Ukupan broj makrofaga u BALF.
Slika 14: Mišji model ozbiljne neutrofilne astme - Proporcija makrofaga u BALF.
Slika 15: Mišji model ozbiljne neutrofilne astme - Ukupan broj neutrofila u BALF.
Slika 16: Mišji model ozbiljne neutrofilne astme - Proporcija neutrofila u BALF.
Slika 17: Mišji model ozbiljne neutrofilne astme - Ukupan broj limfocita u BALF.
Slika 18: Mišji model ozbiljne neutrofilne astme - Proporcija limfocita u BALF.
Slika 19: Mišji model reumatoidnog artritisa – Telesne težine, dani -14 do 0. Podaci su predstavljeni kao srednja vrednost ± SEM procenata početnih (Dan -14) telesnih težina. Statistički značaj: p < 0.05 i p < 0.0001 u poređenju sa grupom koja je tretirana sa nosačem.
Slika 20: Mišji model reumatoidnog artritisa - Telesne težine, dani 0 do 42. Podaci su predstavljeni kao srednja vrednost ± SEM procenata početnih (Dan 0) telesnih težina. p < 0.05, ♦ p < 0.05, p < 0.001, •••• p < 0.0001 u poređenju sa grupom koja je tretirana sa nosačem.
Slika 21: Mišji model reumatoidnog artritisa – Klinički rezultati. odaci su predstavljeni kao srednja vrednost ± SEM. **** p < 0.0001 kada se poredi sa Danom 21 u grupi koja je tretirana sa nosačem. ♦, O p < 0.05 kada se poredi sa grupom koja je tretirana sa nosačem u datom danu.
Slika 22: Mišji model reumatoidnog artritisa – Poliferativni odgovor splenocita na kolagen II. Osnovno stanje medjuma je oduzeto [CII-stimulisano –osnovno stanje medijuma] brojanja po minuti na osnovu uključivanja 3H-TdR. Svi podaci su predstavljeni kao srednja vrednost ± SEM. ** p < 0.01 u poređenju sa grupom koja obuhvata nosač.
Slika 23: Mišji model reumatoidnog artritisa - Nivoi IFNγ u supernatantima kultura tkiva. Linije predstavljaju srednje vrednosti grupe.
Slika 24: Mišji model reumatoidnog artritisa - Nivoi IL-17A u supernatantima kulture tkiva. Linije predstavljaju srednje vrednosti grupe.
Slika 25: Mišji model reumatoidnog artritisa-Nivoi IL-10 u supernatantima kulture tkiva. Linije predstavljaju srednje vrednosti grupe.
Slika 26: Mišji model reumatoidnog artritisa-Nivoi IL-6 u supernatantima kulture tkiva. Linije predstavljaju srednje vrednosti grupe.
Slika 27: Histopatološki sistem bodovanja.
Slika 28: Mišji model astme koja je indukovana grinjom iz kućne prašine - Ukupni IgE u serumu Slika 29: Mišji model astme koja je indukovana grinjom iz kućne prašine-HDM specifični IgG1 u serumu Slika 30: Mišji model astme koja je indukovana grinjom iz kućne prašine - Ukupni IgE u BALF Slika 31: Mišji model astme koja je indukovana grinjom iz kućne prašine-HDM specifični IgG1 u BALF Slika 32: Mišji model astme koja je indukovana grinjom iz kućne prašine - Histološka analiza - Srednja vrednost rezultata peribronhijalne infiltracije
Slika 33: Mišji model astme koja je indukovana grinjom iz kućne prašine - Histološka analiza - Srednja vrednost rezultata perivaskularne infiltracije
Slika 34: Mišji model astme koja je indukovana grinjom iz kućne prašine - Histološka analiza- Srednja vrednost rezultata inflamacije (Srednja vrednost oba rezultata peribronhiolarne i perivaskularne infiltracije)
Slika 35: Mišji model astme koja je indukovana grinjom iz kućne prašine - Histološka analiza – Rezultat mukusa
Slika 36: Mišji model astme koja je indukovana grinjom iz kućne prašine – nivo IL-9 u plućnom tkivu Slika 37: Mišji model astme koja je indukovana grinjom iz kućne prašine – nivo IL-1a u plućnom tkivu Slika 38: Mišji model astme koja je indukovana grinjom iz kućne prašine – nivo IFNg u plućnom tkivu Slika 39: Mišji model astme koja je indukovana grinjom iz kućne prašine – nivo IL-17A u plućnom tkivu Slika 40: Mišji model astme koja je indukovana grinjom iz kućne prašine – nivo IL-4 u plućnom tkivu Slika 41: Mišji model astme koja je indukovana grinjom iz kućne prašine – nivo IL-5 u plućnom tkivu Slika 42: Mišji model astme koja je indukovana grinjom iz kućne prašine – nivo IL-1b u plućnom tkivu Slika 43: Mišji model astme koja je indukovana grinjom iz kućne prašine – nivo RANTES u plućnom tkivu Slika 44: Mišji model astme koja je indukovana grinjom iz kućne prašine – nivo MIP-1a u plućnom tkivu Slika 45: Mišji model astme koja je indukovana grinjom iz kućne prašine – nivo KC u plućnom tkivu Slika 46: Mišji model astme koja je indukovana grinjom iz kućne prašine – nivo MIP-2 u plućnom tkivu Slika 47: Mišji model ozbiljne neutrofilne astme-HDM specifično IgG1 u serumu
Slika 48: Mišji model ozbiljne neutrofilne astme-HDM specifično IgG2a u serumu
Slika 49: Mišji model ozbiljne neutrofilne astme-HDM specifično IgG1 u BALF
Slika 50: Mišji model ozbiljne neutrofilne astme-HDM specifično IgG2a u BALF
Slika 51: Mišji model ozbiljne neutrofilne astme - Histološka analiza - Srednja vrednost rezultata peribronhijalne infiltracije
Slika 52: Mišji model ozbiljne neutrofilne astme-Histološka analiza - Srednja vrednost rezultata perivakularne infiltracije
Slika 53: Mišji model ozbiljne neutrofilne astme - Histološka analiza- Srednja vrednost rezultata inflamacije (Srednja vrednost oba rezultata peribronhiolarne i perivaskularne infiltracije)
Slika 54: Mišji model ozbiljne neutrofilne astme – nivo TNFa u plućnom tkivu
Slika 55: Mišji model ozbiljne neutrofilne astme – nivo IL-1a u plućnom tkivu
Slika 56: Mišji model ozbiljne neutrofilne astme – nivo IFNg u plućnom tkivu
Slika 57: Mišji model ozbiljne neutrofilne astme – nivo IL-17F u plućnom tkivu
Slika 58: Mišji model ozbiljne neutrofilne astme – nivo IL-1b u plućnom tkivu
Slika 59: Mišji model ozbiljne neutrofilne astme – nivo RANTES u plućnom tkivu
Slika 60: Mišji model ozbiljne neutrofilne astme – nivo MIP-2 u plućnom tkivu
Slika 61: Mišji model ozbiljne neutrofilne astme – nivo KC u plućnom tkivu
Slika 62: Mišji model ozbiljne neutrofilne astme – nivo IL-17A u plućnom tkivu
Slika 63: Mišji model ozbiljne neutrofilne astme – nivo MIP-1a u plućnom tkivu
Slika 64: Mišji model ozbiljne neutrofilne astme - Srednja vrednost rezultata inflamacije (Srednja vrednost oba rezultata peribronhiolarne i perivaskularne infiltracije) IL-33 u plućnom tkivu
Slika 65: Mišji model reumatoidnog artritisa – Vizuelna matrica za histopatološko bodovanje. Primeri slika pokazuju kompozitne rezultate iz mišjih tarzalnih zglobova u studiji artritisa koji je indukovan kolagenom.
Slika 66: Mišji model reumatoidnog artritisa - Histopatologija: Rezultati inflamacije. Podaci su predstavljeni kao srednja vrednost ± SEM. ** p < 0.01 kada se poredi sa grupom koja je tretirana sa nosačem.
Slika 67: Mišji model reumatoidnog artritisa - Histopatologija: Rezultati hrskavice. Podaci su predstavljeni kao srednja vrednost ± SEM. *** p < 0.001 kada se poredi sa grupom koja je tretirana sa nosačem.
Slika 68: Mišji model reumatoidnog artritisa-Histopatologija: Bone Scores. Podaci su predstavljeni kao srednja vrednost ±SEM. *** p < 0.001 kada se poredi sa grupom koja je tretirana sa nosačem.
Slika 69: Mišji model reumatoidnog artritisa - Histopatologija: Ukupni rezultati. Podaci su predstavljeni kao srednja vrednost ± SEM. * p < 0.05, *** p < 0.001 kada se poredi sa grupom koja je tretirana sa nosačem.
Slika 70: Mišji model reumatoidnog artritisa - Histopatologija: Reprezentativne slike. Životinja ID (#n.n) i ekstremitet (R za desno, L za levo) su naznačeni između zagrada. Gornja leva slika (nosač): veliko oštećenje zglobova i kostiju sa inflamacijom i fibrozom koji se protežu do peri-artikularnih mekih tkiva.
Slika 71: Mišji model multiple skleroze – klinički rezultat.
Slika 72: Mišji model multiple skleroze – učestalost bolesti.
Slika 73: Mišji model kancera grudi – zapremina tumora.
Slika 74: Mišji model kancera pluća - zapremina tumora.
Slika 75: Mišji model kancera jetre – težina jetre.
Slika 76: Vezivanje MRX004 i B. breve tipa sojeva za humane ćelije.
Slika 77: Test za proizvodnju egzopolisaharida.
Slika 78: Proizvodnja vezanog i oslobođenog egzopolisaharida od MRX004.
Slika 79: Vezivanje MRX004 za Caco-2 ćelije.
Slika 80: Brzi ID 32 A profil MRX004 zasebno (A) i u poređenju sa B. breve tipom sojeva (B). Belo = negativna reakcija (bez promene boje), Na dole unakrsno izvedena = intermedijerna pozitivna reakcija (slaba promena boje) i Crna = pozitivna reakcija (jaka odgovarajuća promena boje).
Slika 81: API® 50 CH analiza MRX004. Na gore unakrsno izvedena = negativna reakcija (bez promene boje), Na dole unakrsno izvedena = intermedijerna pozitivna reakcija (slaba promena boje), Crna = pozitivna reakcija (jaka odgovarajuća promena boje) i Bela = neodređena reakcija (neočekivana promena boje).
PRIKAZ PRONALASKA
Bakterijski sojevi
[0025] Kompozicije iz pronalaska obuhvataju bakteriju koja je deponovana pod pristupnim brojem NCIMB 42380 ili bakteriju koja ima 16s rRNK sekvencu koja je najmanje 98% identična sa SEQ ID NO: 1. Primeri pokazuju da su takve bakterije korisne za lečenje ili prevenciju bolesti ili stanja koje su posredovane sa IL-17 ili Th17 putem. Primeri takođe pokazuju da su takve bakterije korisne za lečenje ili prevenciju kancera. Poželjni bakterijski soj je bakterija koja je deponovana pod pristupnim brojem NCIMB 42380.
[0026] Bakterija koja je deponovana pod pristupnim brojem NCIMB 42380 je ispitana u Primerima i ovde je takođe naznačena kao soj 751 ili MRX004. Parcijalna 16S rRNK sekvenca za 751 soj koja je ispitana je obezbeđena u SEQ ID NO:1. Soj 751 je deponovan u međunarodnoj instituciji za deponovanje NCIMB, Ltd. (Ferguson Building, Aberdeen, AB219YA, Scotland) od strane GT Biologics Ltd. (Life Sciences Innovation Building, Aberdeen, AB252ZS, Scotland) 12 marta 2015 i dodeljen mu je pristupni broj NCIMB 42380. GT Biologics Ltd. je nedavno promenio ime tako da glasi 4D Pharma Research Limited.
[0027] Genomska sekvenca za soj 751 je obezbeđena u SEQ ID NO:2 u listi sekvenci koja je objavljena u WO 2016/203223.
[0028] Takođe se očekuje da bakterijski sojevi koji su biotipovi bakterije koja je deponovana pod pristupnim brojem NCIMB 42380 budu efikasni za lečenje ili prevenciju bolesti i stanja koja su posredovana sa IL-17 ili Th17 putem. Takođe se očekuje da bakterijski sojevi koji su biotipovi bakterije koja je deponovana pod pristupnim brojem NCIMB 42380 budu efikasni za lečenje ili prevenciju kancera. Biotip je blisko povezani soj koji ima iste ili veoma slične fiziološke i biohemijske karakteristike.
[0029] U određenim izvođenjima, bakterijski soj za upotrebu u pronalasku ima 16s rRNK sekvencu koja je najmanje 98%, 99%, 99.5% ili 99.9% identična sa SEQ ID NO:1. Poželjno, bakterijski soj za upotrebu u pronalasku ima 16s rRNK sekvencu koja je predstavljena sa SEQ ID NO:1.
[0030] Alternativno, sojevi koji su biotipovi bakterije koja je deponovana pod pristupnim brojem NCIMB 42380 i koji su ovde prikazani mogu takođe da budu identifikovani sekvenciranjem drugih nukleotidnih sekvenci za bakteriju koja je deponovana pod pristupnim brojem NCIMB 42380. Na primer, u suštini može da se sekvencira ceo genom i biotip ovde prikazanog soja može da bude najmanje 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 99.5% ili 99.9% identičan u sekvenci kroz najmanje 80% njegovog celog genoma (npr. kroz najmanje 85%, 90%, 95% ili 99%, ili kroz njegov celi genom). Druge pogodne sekvence za upotrebu u identifikovanju biotipova sojeva mogu da uključe hsp60 ili sekvence koje se ponavljaju kao što su BOX, ERIC, (GTG)s, ili REP ili [16]. Biotipovi sojeva mogu da imaju sekvence koje su najmanje 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 99.5% ili 99.9% identične u sekvenci sa odgovarajućom sekvencom bakterije koja je deponovana pod pristupnim brojem NCIMB 42380.
[0031] U određenim slučajevima, bakterijski soj za upotrebu u pronalasku ima genom koji je identičan u sekvenci sa SEQ ID NO:2 od WO 2016/203223. U poželjnim slučajevima, bakterijski soj za upotrebu u pronalasku ima genom koji je najmanje 90% identičan u sekvenci (npr. najmanje 92%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% ili 100% identičan u sekvenci) sa SEQ ID NO:2 od WO 2016/203223 kroz najmanje 60% (npr. najmanje 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% ili 100%) od SEQ ID NO:2 od WO 2016/203223. Na primer, bakterijski soj za upotrebu u pronalasku može da ima genom koji je najmanje 90% identičan u sekvenci sa SEQ ID NO:2 od WO 2016/203223 kroz 70% od SEQ ID NO:2 od WO 2016/203223, ili najmanje 90% idnetičan u sekvenci sa SEQ ID NO:2 od WO 2016/203223 kroz 80% od SEQ ID NO:2 od WO 2016/203223, ili najmanje 90% identičan u sekvenci sa SEQ ID NO:2 od WO 2016/203223 kroz 90% od SEQ ID NO:2 od WO 2016/203223, ili najmanje 90% identičan u sekvenci sa SEQ ID NO:2 od WO 2016/203223 kroz 100% od SEQ ID NO:2 od WO 2016/203223, ili najmanje 95% identičan u sekvenci sa SEQ ID NO:2 od WO 2016/203223 kroz 70% od SEQ ID NO:2 od WO 2016/203223, ili najmanje 95% identičan u sekvenci sa SEQ ID NO:2 od WO 2016/203223 kroz 80% od SEQ ID NO:2 od WO 2016/203223, ili najmanje 95% identičan u sekvenci sa SEQ ID NO:2 od WO 2016/203223 kroz 90% od SEQ ID NO:2 od WO 2016/203223, ili najmanje 95% identičan u sekvenci sa SEQ ID NO:2 od WO 2016/203223 kroz 100% od SEQ ID NO:2 od WO 2016/203223, ili najmanje 98% identičan u sekvenci sa SEQ ID NO:2 od WO 2016/203223 kroz 70% od SEQ ID NO:2 od WO 2016/203223, ili najmanje 98% identičan u sekvenci sa SEQ ID NO:2 od WO 2016/203223 kroz 80% od SEQ ID NO:2 od WO 2016/203223, ili najmanje 98% identičan u sekvenci sa SEQ ID NO:2 od WO 2016/203223 kroz 90% od SEQ ID NO:2 od WO 2016/203223, ili najmanje 98% identičan u sekvenci sa SEQ ID NO:2 od WO 2016/203223 kroz 100% od SEQ ID NO:2 od WO 2016/203223.
[0032] Alternativno, sojevi koji su biotipovi bakterije koja je deponovana pod pristupnim brojem NCIMB 42380 i koji su pogodni za upotrebu u pronalasku mogu da se identifikuju upotrebom pristupnog broja NCIMB 42380 depozita i analizom restrikcionog fragmenta i/ili PCR analizom, na primer upotrebom polimorfizma u dužini fluorscentnog umnoženog fragmenta (FAFLP) i PCR otiskivanjem DNK elementa koji se ponavlja (rep), ili proteinskim profilisanjem, ili parcijalnim sekvenciranjem 16S ili 23s rDNK. U poželjnim izvođenjima, takvi postupci mogu da se koriste da bi se identifikovali sojevi iz istih vrsta kao bakterija koja je deponovana pod pristupnim brojem NCIMB 42380.
[0033] U određenim izvođenjima, sojevi koji su biotipovi bakterije koja je deponovana pod pristupnim brojem NCIMB 42380 i koji su pogodni za upotrebu u pronalasku su sojevi koji obezbeđuju isti obrazac kao bakterija koja je deponovana pod pristupnim brojem NCIMB 42380 kada je analizirana restrikcionom analizom umnožene ribozomalne DNK (ARDRA), na primer kada se koristi Sau3AI restrikcioni enzim (za primere postupaka i uputstva videti, na primer,[17]). Alternativno, biotip sojeva koji su identifikovani kao sojevi koji imaju iste obrasce fermentacije ugljenih hidrata kao bakterija koja je deponovana pod pristupnim brojem NCIMB 42380.
[0034] Bakterijski sojevi koji su biotipovi bakterije koja je deponovana pod pristupnim brojem NCIMB 42380 i koji su korisni u kompozicijama i postupcima iz pronalaska mogu da se identifikuju upotrebom bilo kog pogodnog postupka ili strategije, uključujući testove opisane u primerima. Na primer, biotipovi za upotrebu u pronalasku mogu da se identifikuju gajenjem u anaerobnom YCFA u kulturi i/ili ordiniranjem bakterija u mišjem modelu artritisa indukovanog kolagenom tipa II i nakon toga ispitivanjem nivoa citokina. Posebno, bakterijski sojevi koji imaju slične obrace rasta, metabolički tip i/ili površinske antigene sa bakterijom koja je deponovana pod pristupnim brojem NCIMB 42380 mogu da budu korisni u pronalasku. Biotip soja će imati uporedivu imunsku modulatornu aktivnost sa NCIMB 42380 sojem. Posebno, biotip soja će pokrenuti uporedive efekte na astmu, artritis, multiple sklerozu i modele bolesti kancera i uporedive efekte na nivoe citokina sa efektima koji su prikazani u Primerima, koji mogu da se identifikuju upotrebom protokola za gajenje u kulturi i ordiniranje koji su opisani u Primerima.
[0035] Posebno poželjni soj iz pronalaska je bakterija koja je deponovana pod pristupnim brojem NCIMB 42380. Ovo je primer soja 751 koji je ispitan u primerima i pokazano je da je efikasan za lečenje
1
bolesti. Opis obezbeđuje ćeliju, kao što je izolovana ćelija, bakterije koja je deponovana pod pristupnim brojem NCIMB 42380 ili njen derivat. Opis takođe obezbeđuje kompoziciju koja obuhvata ćeliju bakterije koja je deponovana pod pristupnim brojem NCIMB 42380 ili njen derivat. Opis takođe obezbeđuje biološki čistu kulturu bakterije koja je deponovana pod pristupnim brojem NCIMB 42380. Opis takođe obezbeđuje ćeliju bakterije koja je deponovana pod pristupnim brojem NCIMB 42380 ili njen derivat za upotrebu u terapiji, posebno za ovde opisane bolesti.
[0036] Derivat bakterije koja je deponovana pod pristupnim brojem NCIMB 42380 može da bude ćerka ćelija (potomstvo) ili soj koji se gaji u kulturi (koji je podkloniran) od originala. Derivat soja iz pronalaska može da bude modifikovan, na primer na genetičkom nivou, bez ablacije biološke aktivnosti. Posebno, derivat soja iz pronalaska je terapeutski aktivan. Derivat soja će imati uporedivu imunski modulatornu aktivnost sa NCIMB 42380 sojem. Posebno, derivat soja će pokrenuti uporedive efekte na astmi, artritisu, multiple sklerozi i modelima bolesti kancera i iste uporedive efekte na nivoe citokina sa efektima prikazanim u Primerima, koji mogu da se identifikuju upotrebom protokola za gajenje u kulturi i ordiniranje koji su opisani u Primerima. Derivat NCIMB 42380 soja će generalno biti biotip soja NCIMB 42380.
[0037] Pozivanja na ćelije bakterije koja je deponovana pod pristupnim brojem NCIMB 42380 obuhvataju bilo koje ćelije koje imaju iste karakteristike bezbednosti i terapeutske efikasnosti kao soj koji je deponovan pod pristupnim brojem NCIMB 42380, i takve ćelije su obuhvaćene pronalaskom.
[0038] U poželjnim izvođenjima, bakterijski sojevi u kompozicijama iz pronalaska su vijabilni i sposobni su da parcijalno ili u potpunosti kolonizuju crevo.
[0039] U određenim izvođenjima, bakterijski soj za upotrebu u pronalasku ima nisku sposobnost vezivanja za humane intestinalne epitelne ćelije, posebno Caco-2 ćelije. U poželjnom izvođenju, bakterijski soj za upotrebu u pronalasku ima nisku sposobnost vezivanja za humane intestinalne epitelne ćelije, posebno Caco-2 ćelije, u YCFA poređenju sa Bifidobacteria, posebno B. breve. U određenim izvođenjima, bakterijski soj za upotrebu u pronalasku ispoljava vezivanje manje od 1% ukupne kulture, kao što je poželjno manje od 0.5% ili manje od 0.3%, kada se ispituje pod uslovima koji su opisani u Primeru 12.
[0040] U određenim izvođenjima, bakterijski soj za upotrebu u pronalasku proizvodi egzopolisaharide, na primer pr čemu su egzopolisaharidi vezani za ekstraćelijsku površinu bakterijskog soja. U određenim izvođenjima, proizvodnja vezanih egzopolisaharida povećava adheziju bakterijskog soja za upotrebu u pronalasku za mukus ili za površinu epitelnih ćelija, na primer humanih intestinalnih epitelnih ćelija. U poželjnom izvođenju, bakterijski soj za upotrebu u pronalasku proizvodi više vezanih površinskih egzopolisaharida u poređenju sa Bifidobacteria, posebno B. breve.
[0041] U poželjnom izvođenju, bakterijski soj za upotrebu u pronalasku ima i nisko vezivanje za humane intestinalne epitelne ćelije, posebno Caco-2 ćelije, u YCFA u poređenju sa Bifidobacteria, posebno B. breve (kao što je vezivanje koje je manje od 1% ukupne kulture, kao što je poželjno manje od 0.5% ili manje od 0.3%, kada se ispituje pod uslovima koji su opisani u Primeru 12), i proizvodi više vezanih površinskih egzopolisaharida u poređenju sa Bifidobacteria, posebno B. breve.
[0042] U određenim poželjnim izvođenjima, bakterijski soj za upotrebu u pronalasku je sposoban da fermentiše polisaharid rafinozu, na primer kada se gaji u kulturi u odgovarajućem medijumu u suspenziji (kao što je API medijumu suspenzije) na 37°C tokom 4 sata.
[0043] U određenim izvođenjima, bakterijski soj za upotrebu u pronalasku ima smanjenu sposobnost da fermentiše α-glukozidazu i/ili β-glukozidazu u poređenju sa Bifidobacteria, posebno B. breve, na primer kada se gaji u kulturi sa odgovarajućim medijumom za suspenziju (kao što je API medijumu za suspenziju) na 37°C tokom 4 časova.
[0044] U određenim izvođenjima, bakterijski soj za upotrebu prema pronalasku obuhvata jedan ili više od gena koji su navedeni u Tabeli 1, kao što su 5, 10, 20, 50 ili svi od gena u Tabeli 1. U određenim izvođenjima, bakterijski soj za upotrebu prema pronalasku obuhvata jedan ili više od gena koji su istaknuti u Tabeli 1 koji su naznačeni sa jednim povlačenjem, kao što je Transmembranska komponenta BL0694 energetskog modula predviđenog ECF transportera i/ili Duplicirane ATPazne komponente BL0693 energetskog modula predviđenog ECF transportera. U određenim izvođenjima, bakterijski soj za upotrebu prema pronalasku obuhvata jedan ili više od gena navedenih u Tabeli 1 koji su naznačeni sa duplim podvlačenjem i masnim brojevima, kao što su 1, 2, 3, 4 ili 5 geni izabrani od: maltodekstrin glukozidaze (EC 3.2.1.20), pretpostavljene galaktozidaze, celulozne sintaze (koja obrazuje UDP) (EC 2.4.1.12), hitinaze (EC 3.2.1.14) i familije proteina senzornog boksa/GGDEF. U određenim izvođenjima, bakterijski soj za upotrebu prema pronalasku obuhvata jedan ili više od gena koji su navedeni u Tabeli 1 koji su naznačeni sa kosim brojevima, kao što su 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 ili 9 geni izabrani od: podjedinice PfaA sintaze omega-3 polinezasićene masne kiseline, Tipa I poliketidne sintaze, pretpostavljene glikozil hidrolaze nepoznate funkcije (DUF1680), ATPazne komponente BioM energetskog modula biotin ECF transportera, familije katjon-transportujuće ATPaze E1-E2, Riboza ABC transport sistem permeaza proteina RbsC (TC 3.A.1.2.1), Riboza ABC transportni sistem ATP-vezujućeg proteina RbsA (TC 3.A.1.2.1), 3’-do-5’ oligoribonukleaza (orn), membranskog proteina koji je povezan sa Actinobacillus proteinom (1944168).
[0045] U poželjnim izvođenjima, bakterijski soj za upotrebu prema pronalasku obuhvata jedan ili više (kao što je 5, 10, 15, 20, 25, 30, 40, 45, 50 ili sve) gena izabranih od: sintaza 2-sukcinil-5-enolpiruvil-6-hidroksi-3-cikloheksen-1-karboksilne kiseline (EC 2.2.1.9); 3’-do-5’ oligoribonukleaza (orn); Alfagalaktozidaza (EC 3.2.1.22); ATPazna komponenta opšteg energetskog modela ECF transportera; ATPazna komponenta STY3233 energetskog modula hieuozin-regulisanog ECF transportera; ATP-zavisna DNK helikaza recG (EC 3.6.1.-); Beta-glukozidaza (EC 3.2.1.21); Celulozna sintaza (koja obrazuje UDP) (EC 2.4.1.12); Hitinaza (EC 3.2.1.14); COG1309: Transkripcioni regulator; D-alanil-D-alanin karboksipeptidaza (EC 3.4.16.4); Duplicirana ATPazna komponenta BL0693 energetskog modela predviđenog ECF transportera; Fruktokinaza (EC 2.7.1.4); Glukoza/manoza:H+ simporter GlcP; Glikoziltransferaza (EC 2.4.1.-); GMP sintaza [glutamin-hidrolizujuća] (EC 6.3.5.2); Hipotetička kinaza šećera u klasteru sa indigoidin sintazom indA , PfkB familija kinaza; nukleozidna hidrolaza koja preferira inozin-uridin (EC 3.2.2.1); LSU ribozomalni protein L31p @ LSU ribozomalni protein L31p, cinknezavisni; LSU ribozomalni protein L33p @ LSU ribozomalni protein L33p, cink-nezavisni; Maltodekstrin glukozidaza (EC 3.2.1.20); Membranski protein, koji je povezan sa Actinobacillus proteinom (1944168); Membranski-vezani litički prekursor murein transglikozilaze D (EC 3.2.1.-); Metiltransferaza (EC 2.1.1.-); NADH-zavisna butanol dehidrogenaza A (EC 1.1.1.-); Fosfoglikolatna fosfataza (EC 3.1.3.18); Fosforibozilantranilat izomeraza (EC 5.3.1.24); Pretpostavljena glikozil hidrolaza nepoznate funkcije (DUF1680); Ramnoza- permeaza za translokaciju koja sadrži polisaharid ramnozu; Ribokinaza (EC 2.7.1.15); Riboza ABC transportni sistem, ATP-vezujući protein RbsA (TC 3.A.1.2.1); Riboza ABC transportni sistem, ATP-vezujući protein RbsA (TC 3.A.1.2.1); Riboza ABC transportni sistem, visoko afinitetna permeaza RbsD (TC 3.A.1.2.1); Riboza ABC transportni sistem, periplazmatski riboza-vezujući protein RbsB (TC 3.A.1.2.1); Riboza ABC transportni sistem, permeazni protein RbsC (TC 3.A.1.2.1); Riboza ABC transportni sistem, permeazni protein RbsC (TC 3.A.1.2.1); Sorbitol dehidrogenaza (EC 1.1.1.14); SSU ribozomalni protein S14p (S29e) @ SSU ribozomalni protein S14p (S29e), cink-nezavisni; Substrat-specifična komponenta STY3230 od hieuozin-regulisanog ECF transportera; Saharoza-6-fosfat hidrolaza (EC 3.2.1.B3); ATP-vezujući protein TagH eksporta teihoinske kiseline (EC 3.6.3.40); Transmembranska komponenta BL0694 energetskog modula predviđenog ECF transportera; Transmembranska komponenta STY3231 energetskog modula hieuozin-regulisanog ECF transportera; Dvo-komponentni regulator odgovora kolokalizovan sa HrtAB transporterom; Tip I sistema za restrikciju-modifikaciju, DNK-metiltransferazna podjedinica M (EC 2.1.1.72); Tip I sistema za restrikciju-modifkaciju, restrikciona podjedinica R (EC 3.1.21.3); Tip I sistema za restrikcijumodifikaciju, podjedinica S za specifičnost (EC 3.1.21.3); Tip I sistema za restrikciju-modifikaciju, podjedinica S za specifičnost (EC 3.1.21.3); Tip I sistema za restrikciju-modifikaciju, podjedinica S za specifičnost (EC 3.1.21.3); Ksilitol dehidrogenaza (EC 1.1.1.9); i Ksiloza ABC transporter, periplazmatski ksiloza-vezujući protein XylF. U poželjnim izvođenjima, bakterijski soj za upotrebu prema pronalasku obuhvata jedan ili više (kao što je 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35 ili sve) gena koji su navedeni u prethodnoj rečenici i koji nisu naznačeni u Tabeli 1.
Terapeutske upotrebe
[0046] Kao što je prikazano u Primerima, bakterijske kompozicije iz pronalaska su efikasne za smanjenje Th17 inflamatornog odgovora. Posebno, tretmanom sa kompozicijama iz pronalaska se postiže smanjenje u nivoima IL-17A i drugim citokinima Th17 puta, i klinička poboljšanja u životinjskim modelima stanja koja su posredovana sa IL-17 i Th17 putem. Prema tome, ovde prikazane kompozicije mogu da budu korisne za lečenje ili prevenciju inflamatornih i autoimunskih bolesti, i posebno bolesti ili stanja koja su posredovana sa IL-17. Posebno, ovde prikazane kompozicije mogu da budu korisne za smanjenje ili sprečavanje povećanja IL-17 inflamatornog odgovora.
[0047] Th17 ćelije su podset T pomoćničkih ćelija koje proizvode, na primer, IL-17A, IL17-F, IL-21 i IL-22. Th17 ćelijska diferencijacija i ekspresija IL-17 može da bude pokrenuta sa IL-23. Ovi citokini i drugi obrazuju važne delove Th17 puta, koji je dobro uspostavljeni inflamatorni put signalizacije koji doprinosi i nalazi se u osnovi brojnih inflamatornih i autoimunskih bolesti (kao što je opisano u, na primer, [18-23]). Bolesti u kojima je Th17 put aktiviran su bolesti koje su posredovane sa Th17 putem. Bolesti koje su posredovane sa Th17 putem mogu da budu ublažene ili umanjene represijom Th17 puta, koji može da bude kroz smanjenje u diferencijaciji Th17 ćelija ili smanjenje u njihovoj aktivnosti ili smanjenje u nivou citokina Th17 puta. Bolesti koje su posredovane sa Th17 putem mogu da se karakterišu povećanim nivoima citokina koji su proizvedeni od strane Th17 ćelija, kao što su IL-17A, IL-17F, IL-21, IL-22, IL-26, IL9 (videti pregled u [24]). Bolesti koje su posredovane sa Th17 putem mogu da se karakterišu povećanom ekspresijom Th-17povezanih gena, kao što su Stat3 ili IL-23R. Bolesti koje su posredovane sa Th17 putem mogu da budu povezane sa povećanim nivoima Th17 ćelija.
[0048] IL-17 je proinflamatoni citokin koji doprinosi patogenezi nekoliko inflamatornih i autoimunskih bolesti i stanja. IL-17 kao što se ovde koristi može da se odnosi na bilo koji član IL-17 familije, uključujući IL-17A, IL17B, IL-17C, IL-17D, IL-17E, i IL-17F. Bolesti koje su posredovane sa IL-17 i stanja se karakterišu visokom ekspresijom IL-17 i/ili nakupljanjem ili prisustvom IL-17-pozitivnih ćelija u tkivu koje je pogođeno sa bolesti ili stanjem. Slično tome, bolesti koje su posredovane sa IL-17 i stanja su bolesti i stanja koja su pogoršana visokim nivoima IL-17 ili povećanjem u nivoima IL-17, i koja su ublažena niskim nivoima IL-17 ili smanjenjem u nivoima IL-17. IL-17 inflamatorni odgovor može da bude lokalni ili sistemski.
[0049] Primeri bolesti i stanja koje mogu da budu posredovane sa IL-17 ili Th17 putem uključuju multiple sklerozu; artritis, kao što je reumatoidni artritis, osteoartritis, psorijazni artritis, ili juvenilni idiopatski artritis; neuromijelitis oka (Devikova bolest); ankilozirajući spondilitis; spondiloartritis; psorijazu; sistemski lupus eritematozus; inflamatornu bolest creva, kao što je Kronova bolest ili ulcerativni kolitis; celijakiju; astmu, kao što je alergijska astma ili neutrofilna astma; hroničnu opstruktivnu bolest pluća (COPD); kancer, kao što je kancer grudi, kancer debelog creva, kancer pluća ili kancer ovarijuma; uveitis; skleritis; vaskulitis; Behetovu bolest; aterosklerozu; atopični dermatitis;
1
emfizem; periodontitis; alergijski rinitis; i odbacivanje alografta. U poželjnim izvođenjima, ovde prikazane kompozicije se koriste za lečenje ili prevenciju jedne ili više od ovih bolesti ili stanja. U daljim poželjnim izvođenjima iz prikaza, ova stanja ili bolesti su posredovane sa IL-17 ili sa Th17 putem.
[0050] U određenim izvođenjima, ovde prikazane kompozicije su za upotrebu u postupku smanjenja proizvodnje IL-17 ili smanjenja Th17 ćelijske diferencijacije u lečenju ili prevenciji bolesti ili stanja koja u posredovana sa IL-17 ii sa Th17 putem. U određenim izvođenjima, ovde prikazane kompozicije su za upotrebu u lečenju ili prevenciji inflamaorne ili autoimunske bolesti, pri čemu pomenuti tretman ili prevencija se postiže smanjenjem ili prevencijom povećanja Th17 inflamatornog odgovora. U određenim izvođenjima, ovde prikazane kompozicije su za upotrebu u lečenju pacijenta sa inflamatornom ili autoimunskom bolesti, pri čemu pacijent ima povećane nivoe IL-17 ili povećane Th17 ćelije ili ispoljava Th17 inflamatorni odgovor. U određenim izvođenjima, pacijentu kome je postavljena dijagnoza hronične inflamatorne ili autoimunske bolesti ili stanja, ili ovde prikazane kompozicije mogu da budu za upotrebu u inflamatornoj ili autoimunskoj bolesti ili stanju koje se razvija u hronično inflamatornu ili autoimunsku bolest ili stanje. U određenim izvođenjima, bolest ili stanje mogu da ne odgovaraju na tretman sa inhibitorima TNF-α. Upotrebe ovde prikazanih kompozicija mogu da se primene na bilo koji specifičnu bolest ili stanje koje je navedeno u prethodnom pasusu.
[0051] IL-17 i Th17 put su često udruženi sa hroničnim inflamatornim i autoimunskim bolestima, tako da ovde prikazane kompozicije mogu posebno da budu korisne za lečenje ili prevenciju hroničnih bolesti ili stanja kao što je gore navedeno. U određenim izvođenjima, kompozicije su za upotrebu kod pacijenata sa hroničnom bolesti. U određenim izvođenjima, kompozicije su za upotrebu u prevenciji razvoja hronične bolesti.
[0052] Ovde prikazane kompozicije mogu da budu korisne za lečenje bolesti i stanja koji su posredovani sa IL-17 ili Th17 putem i za rešavanje Th17 inflamatornog odgovora, tako da ovde prikazane kompozicije mogu da budu posebno korisne za lečenje ili prevenciju hronične bolesti, lečenje ili prevenciju bolesti kod pacijenata koji nisu odgovorili na druge terapije (kao što je tretman sa inhibitorima TNF-α), i/ili lečenje ili prevenciju tkivnog oštećenja i simptoma koji su povezani sa IL-17 i Th17 ćelijama. Na primer, poznato je da IL-17 aktivira uništenje matriksa u hrskavici i koštanom tkivu i IL-17 ima inhibitorni efekat na proizvodnju matriksa u hondrocitima i osteoblastima, tako da ovde prikazane kompozicije mogu da budu korisne za lečenje ili prevenciju erozije kostiju ili oštećenje hrskavice.
[0053] U određenim izvođenjima, tretman sa kompozicijama iz pronalaska obezbeđuje smanjenje ili sprečava povećanje u nivoima IL-17, posebno u nivoima IL-17A. U određenim izvođenjima, tretman sa kompozicijama iz pronalaska obezbeđuje smanjenje ili sprečava povećanje u nivoima IFN-γ, IL-1β, RANTES, MIP-1α, IL-8 ili IL-6. Takvo smanjenje ili prevencija povećanih nivoa ovih citokina može da bude korisno za lečenje ili za prevenciju inflamatornih i autoimunskih bolesti i stanja, posebno onih koji su posredovani sa IL-17 ili sa Th17 putem.
[0054] U određenim izvođenjima, tretman sa kompozicijama iz pronalaska obezbeđuje blok za vezivanje za ili invaziju na humane ćelije, na primer humane epitelne ćelije od strane patogenih ćelija, na primer E. coli i/ili S. enteritidis.
[0055] U određenim izvođenjima, tretman sa kompozicijama iz pronalaska smanjuje ili sprečava vezivanje patogenih ćelija, na primer E. coli i/ili S. enteritidis, za humane epitelne ćelije, na primer humane intestinalne epitelne ćelije.
[0056] U određenim izvođenjima, proizvodnja i oslobađanje egzopolisaharida od bakterijskih sojeva kompozicija iz pronalaska može da ima zaštitne efekte u odnosu na patogene vrste, na primer E. coli i/ili S. enteritidis. U određenim izvođenjima, proizvodnja i oslobađanje egzopolisaharida od strane bakterijskih sojeva kompozicija iz pronalaska mogu da posreduju efektu bakterija na IL-17 ili Th17 put i mogu da utiču na imunski odgovor kod domaćina. U određenim izvođenjima, kompozicije iz pronalaska su za upotrebu u proizvodnji egzopolisaharida u lečenju inflamatornih i autoimunskih bolesti, i posebno bolesti ili stanja koja su posredovana sa IL-17.
[0057] U određenim izvođenjima, nisko vezivanje za humane intestinalne epitelne ćelije, posebno Caco-2 ćelije, bakterijskih sojeva kompozicija iz pronalaska mogu da povećaju korisni efekat kompozicija iz pronalaska na IL-17 ili Th17 put i na bolesti koje su poredovane sa IL-17 ili Th17 putem.
[0058] U određenim izvođenjima, tretman sa kompozicijama iz pronalaska obezbeđuje povećanu fermentaciju rafinoze u crevima. Primeri pokazuju da bakterijski sojevi kompozicija iz pronalaska fermentišu polisaharid rafinozu, i fermentacija rafinoze može da pokazuje efekte u domaćinu kao što je povećani butirat u cekumu i povećana gastrointestinalna proliferacija. U određenim izvođenjima, kompozicije iz pronalaska su za upotrebu u povećanju fermentacije rafinoze u crevu u lečenju inflamatornih i autoimunskih bolesti, i posebno bolesti ili stanja koja su posredovana sa IL-17.
Astma
[0059] Kompozicije prema pronalaskusu za upotrebu u lečenju ili prevenciji neutrofilne astme. Primeri pokazuju da kompozicije prema pronalasku postižu smanjenje u regrutovanju neutrofila i/ili eozinofila u disajnim putevima koje prati senzibilizacija i izazov sa ekstraktom grinje iz kućne prašine i tako da oni mogu da budu korisni u lečenju ili prevenciji astme. Astma je hronična bolest koja se karakteriše inflamacijom i restrikcijom disajnih puteva. Inflamacija u astmi može da bude posredovana sa IL-17 i/ili Th17 ćelijama, tako da ovde prikazane kompozicije mogu da budu posebno efikasne za prevenciju ii lečenje astme. Inflamacija u astmi može da bude posredovana eozinofilima i/ili neutrofilima.
[0060] U određenim izvođenjima opisa, astma je eozinofilna ili alergijska astma. Eozinofilna i alergijska astma se karakterišu povećanim brojevima eozinofila u perifernoj krvi i sekretima disajnih puteva i patološki je povezana sa zadebljanjem zone bazalne membrane i farmakološki sa reakcijom na kortikosteroide [25]. Kompozicije koje smanjuju ili inhibiraju regrutovanje eozinofila ili aktivaciju mogu da budu korisne za lečenje ili prevenciju eozinofilne i alergijske astme.
[0061] Kompozicije prema pronalasku su za upotrebu u lečenju ili prevenciji neutrofilne astme (ili neeozinofilne astme). Visoki brojevi neutrofila su povezani sa astmom sa ozbiljnim simptomima koja može da ne odgovara na treman sa kortikosteroidom. Kompozicije koje smanjuju ili inhibiraju regrutovanje neutrofila ili aktivaciju mogu da budu korisni za lečenje ili prevenciju neutrofilne astme.
[0062] Eozinofilna i neutrofilna astma nisu stanja koja se međusobno isključuju i tretmani koji pomažu rešavanje ili odgovora u kojima dominiraju eozinofili i neutrofili, mogu uopšteno da budu korisni za lečenje astme.
[0063] Povećani nivoi IL-17 i aktivacija Th17 puta su povezani sa astmom koja ima ozbiljne simptome, tako da ovde prikazane kompozicije mogu da budu korisne za prevenciju razvoja astme sa ozbiljnim simptomima ili za lečenje astme sa ozbiljnim simptomima.
[0064] U određenim izvođenjima, ovde prikazane kompozicije su za upotrebu u postupcima smanjenja inflamatornog odgovora u kome dominiraju eozinofili u lečenju ili prevenciji astme, ili za upotrebu u postupcima smanjenja inflamatornog odgovora u kome dominiraju neutrofili u lečenju ili prevenciji astme. Kao što je gore naznačeno, visoki nivoi eozinofila u astmi su patološki povezani sa zadebljanjem zone bazalne membrane, tako da smanjenje inflamatornog odgovora u kome dominiraju eozinofili u lečenju ili prevenciji astme možda može specifično da reši karakteristiku ove bolesti. Takođe, povećani
1
neutrofili, ili kombinovano sa povećanim neutrofilima ili u njihovom odsustvu, su u vezi sa astmom sa ozbiljnim simptomima i hroničnim sužavanjem disajnih puteva. Prema tome, smanjenje neutrofilnog inflamatornog odgovora može da bude posebno korisno za rešavanje astme sa ozbiljnim simptomima.
[0065] U određenim izvođenjima, ovde prikazane kompozicije smanjuju peribronhiolarnu infiltraciju u alergijskoj astmi, ili u namenjene za upotrebu peribronhiolarne infiltracije u lečenju alergijske astme. U određenim izvođenjima, kompozicije prema pronalasku smanjuju peribronhiolarnu i/ili perivaskularnu infiltraciju u neurofilnoj astmi, ili su za upotrebu u peribronhiolarnoj i/ili perivaskularnoj infiltraciji u tretmanu alergijske neutrofilne astme.
[0066] U određenim izvođenjima, tretman sa kompozicijama prema pronalasku obezbeđuje smanjenje ili sprečava povećanje u nivoima II,-1β, IFNγ, RANTES, MIP-1α ili IL-8.
[0067] U određenim izvođenjima, kompozicije prema pronalasku su za upotrebu u postupku lečenja neutrofilne astme koja ima za rezultat smanjenje eozinofilnog i/ili neutrofilnog inflamatornog odgovora. U određenim izvođenjima, pacijent koji treba da se leči ima, ili je prethodno identifikovano da ima, povećane nivoe neutrofila ili eozinofila, na primer kako je identifikovano uzimanjem uzoraka iz krvi ili analizom sputuma.
[0068] Ovde prikazane kompozicije mogu da budu korisne za prevenciju razvoja astme kod novorođenčadi kada se ordinira novorođenčadima, ili trudnim ženama. Kompozicije mogu da budu korisne za prevenciju razvoja astme kod dece. Kompozicije prema pronalasku mogu da budu korisne za lečenje ili prevenciju početka neutrofilne astme kod odraslih. Kompozicije prema pronalasku mogu da budu korisne za kontrolu ili ublažavanje neutrofilne astme. Ovde prikazane kompozicije mogu da budu posebno korisne za smanjenje simptoma koji su povezani sa astmom koja je pogoršana alergenima, kao što su grinje iz kućne prašine.
[0069] Tretman ili prevencija astme, na primer, ublažavanje ozbiljnosti simptoma ili smanjenje u učestalosti egzacerbacija ili opsega pokretača koji predstavljaju problem za pacijenta.
[0070] U određenim izvođenjima, tretman sa kompozicijama prema pronalasku obezbeđuje smanjenje u koncentracijma fenilalanina i/ili histidina, na primer u crevima ili u plazmi. Primeri pokazuju da u bakterijski sojevi iz ovde prikazanih kompozicija testirani pozitivni za fermentaciju aminokiselina, uključujući fenilalanin i histidin, i povećane koncentracije fenilalanina i histidina u plazmi su prijavljene da se nalaze u vezi sa neželjnim dejstvima kod astme. U određenim izvođenjima, kompozicije prema pronalasku su za upotrebu u smanjenju koncentracija fenilalanina i/ili histidina u plazmi u lečenju neutrofilne astme, i posebno u lečenju proizvodnje histamina ili preosetljivosti disajnih puteva koja je povezana sa neutrofilnom astmom.
[0071] U određenim izvođenjima, tretman sa kompozicijama prema pronalasku obezbeđuje smanjenje u koncentracijama galaktoze i/ili fruktoze, na primer u crevima. Primeri pokazuju da bakterijski sojevi kompozicija iz pronalaska fermentišu ugljenohidratne supstrate uključujući galaktozu i fruktozu, i galaktoza α-1,3galaktoza koja je izvedena iz izvora mesa je poznati alergen i agens koji uzrokuje anafilaksu, i nivoi unosa hranljive fruktoze se nalaze u korelaciji sa ozbiljnim simptomima kod astme. U određenim izvođenjima, kompozicije prema pronalsku su za upotrebu u smanjenju koncentracija galaktoze i/ili fruktoze u lečenju astme, i posebno u lečenju neutrofilne astme sa ozbiljnim simptomima.
Artritis
[0072] U poželjnim izvođenjima, ovde prikazane kompozicije su za upotrebu u lečenju ili prevenciji reumatoidnog artritisa (RA). Primeri pokazuju da ovde prikazane kompozicije postižu smanjenje u
1
kliničkim znakovima RA u mišjem modelu, smanjuju oštećenje hrskavice i kostiju, i smanjuju IL-17 inflamatorni odgovor, i tako da mogu ga budu korisni u lečenju ili prevenciji RA. RA je sistemski inflamatorni poremećaj koji primarno pogađa zglobove. RA je povezan sa inflamatornim odgovorom koji rezultuje oticanjem zglobova, sinovijalnom hiperplazijom, i uništenjem hrskavice i kostiju. IL-17 i Th17 ćelije mogu da imaju ključnu ulogu u RA, na primer zbog toga što IL-17 inhibira proizvodnju matriksa u hondrocitima i osteoblastima i aktivira proizvodnju i funkciju matriksnih metaloproteinaza i zbog toga što je aktivnost RA bolesti u korelaciji sa IL-17 nivoima i Th-17 ćelijski brojevima [26,27], tako da ovde prikazane kompozicije mogu posebno da budu efikasne za prevenciju ili lečenje RA.
[0073] U određenim izvođenjima, ovde prikazane kompozicije su za upotrebu u snižavanju IL-17 nivoa ili sprečavanju povećanja IL-17 nivoa u lečenju ili prevenciji RA. U određenim izvođenjima, tretman sa ovde prikazanim kompozicijama obezbeđuje smanjenje ili sprečava povećanje u IL-17 nivoima, posebno IL-17A nivoima. U određenim izvođenjima, tretman sa ovde prikazanim kompozicijama obezbeđuje smanjenje ili sprečava povećanje u nivoima IFN-γ ili IL-6.
[0074] U određenim izvođenjima, tretman sa ovde prikazanim kompozicijama dovodi do smanjenja u oticanju zglobova. U određenim izvođenjima, ovde prikazane kompozicije su za upotrebu kod pacijenata sa otečenim zglobovima ili kod pacijenata koji su identifikovani da se nalaze u riziku da imaju otečene zglobove. U određenim izvođenjima, ovde prikazane kompozicije su za upotrebu u postupku smanjenja oticanja zglobova u RA.
[0075] U određenim izvođenjima, tretman sa ovde prikazanim kompozicijama dovodi do smanjenja u oštećenju hrskavice ili oštećenju kosti. U određenim izvođenjima, ovde prikazane kompozicije su za upotrebu u smanjenju ili prevenciji oštećenja hrskavice ili kosti u lečenju RA. U određenim izvođenjima, kompozicije su za upotrebu u lečenju pacijenta sa ozbiljnim RA koji se nalaze u riziku od oštećenja hrskavice ili kosti.
[0076] Povećani nivoi IL-17 i Th17 brojeva ćelija su povezani sa oštećenjem hrskavice i kosti u RA [26,27]. Pokazano je da IL-17 aktivira destrukciju matriksa u tkivu hrskavice i kosti i IL-17 ima inhibitorni efekat na proizvodnju matriksa u hondorcitima i osteoblastima. Prema tome, u određenim izvođenjima, ovde prikazane kompozicije su za upotrebu u prevenciji erozije kostiju ili oštećenja hrskavice u lečenju RA. U određenim izvođenjima, kompozicije su za upotrebu u lečenju pacijenata koji ispoljavaju eroziju kostiju ili oštećenje hrskavice ili kod pacijenata kojji imaju rizik od razvijanja erozije kostiju ili oštećenje hrskavice.
[0077] TNF-α je takođe povezan sa RA, ali TNF-α nije uključen u patogenezu kasnijih stadijuma bolesti. Suprotno tome, IL-17 ima ulogu kroz sve stupnjeve hronične bolesti [28]. Prema tome, u određenim izvođenjima ovde prikazane kompozicije su za lečenje hroničnog RA ili kasnijeg stadijuma RA, kao što je bolest koja uključuje destrukciju zgloba i gubitak hrskavice. U određenim izvođenjima, ovde prikazane kompozicije su za lečenje pacijenata koji su prethodno primili anti-TNF-a terapiju. U određenim izvođenjima, pacijenti koji trebaju da se leče ne odgovoraju ili više ne odgovaraju na anti-TNF-α terapiju.
[0078] Ovd prikazane kompozicije mogu da budu korisne za modulaciju imunskog sistema pacijenta, ako da u određenim izvođenjima ovde prikazane kompozicije su za upotrebu u prevenciji RA kod pacijenta koji je identifikovan da se nalazi u riziku razvijanja RA, ili kome je postavljena dijagnoza RA u ranom stadijumu. Ovde prikazane kompozicije mogu da budu korisne za prevenciju razvijanja RA.
[0079] Ovde prikazane kompozicije mogu da budu korisne u kontrolisanju ili ublažavanju RA. Ovde prikazane kompozicije mogu posebno da budu korisne za smanjenje simptoma koji su povezani sa oticanjem zgloba ili destrukcijom kosti. Tretman ili prevencija RA može da se odnosi na, na primer,
1
ublažavanje ozbiljnosti simptoma ili na smanjenje učetalosti egzacerbacija u opsegu okidača koji su problem za pacijenta.
Multiple skleroza
[0080] U poželjnim izvođenjima, ovde prikazane kompozicije su za upotrebu u lečenju ili prevenciji multiple skleroze. Primeri pokazuju da ovde prikazane kompozicije postižu smanjenje u pojavljivanju bolesti i ozbiljnosti bolesti u mišjem modelu muliple skleroze (EAE model), i tako da one mogu da budu korisne u lečenju ili prevenciji multiple skleroze. Multiple skleroza je inflamatorni poremećaj koji je povezan sa oštećenjem mijelinskih omotača neurona, posebno u mozgu i kičmenoj moždini. Multiple skleroza je hronična bolest, koja progresivno onesposobljava i evoluira u epizodama. IL-17 i Th17 ćelije mogu da imaju ključnu ulogu u multiple sklerozi, na primer zbog toga što nivoi IL-17 mogu da se nalaze u korelaciji sa oštećenjima u multiple sklerozi, IL-17 može da naruši krvno moždanu barijeru tesnih veza endotelnih ćelija, i Th17 ćelije mogu da migriraju u cenralni nervni sistem i uzrokuju gubitak neurona [29,30]. Prema tome, ovde prikazane kompozicije mogu posebno da budu efikasne za prevenciju ili lečenje multiple skleroze.
[0081] U određenim izvođenjima, tretman sa ovde prikazanim kompozicijama dovodi do smanjenja u pojavljivanju bolesti ili ozbiljnosti simptoma bolesti. U određenim izvođenjima, ovde prikazane kompozicije su za upotrebu u smanjenju pojavljivanja bolesti ili ozbiljnosti simptoma bolesti. U određenim izvođenjima, tretman sa ovde prikazanim kompozicijama sprečava pad u motornoj funkciji ili dovodi do poboljšane motorne funkcije. U određenim izvođenjima, ovde prikazane kompozicije su za upotrebu u sprečavanju pada u motornoj funkciji ili za upotrebu u poboljšanju motorne funkcije. U određenim izvođenjima, tretman sa ovde prikazanim kompozicijama sprečava razvijanje paralize. U određenim izvođenjima, ovde prikazane kompozicije su za upotrebu u sprečavanju paralize u lečenju multiple skleroze.
[0082] Ovde prikazane kompozicije mogu da budu korisne za modulaciju imunskog sistema pacijenta, tako da u određenim izvođenjima ovde prikazane kompozicije su za upotrebu u prevenciji multiple skleroze kod pacijenta koji je identifikovan da se nalazi u riziku za dobijanje multiple skleroze, ili kome je postavljena dijagnoza ranog stadijuma multiple skleroze ili multiple skleroze tipa multiple skleroze sa "relapsomodloženim pojavljivanjem". Ovde prikazane kompozicije mogu da budu korisne za prevenciju razvijanja skleroze. Zaista, primeri pokazuju da je ordiniranje ovde prikazanih kompozicija sprečilo razvijanje bolesti kod mnogih miševa.
[0083] Ovde prikazane kompozicije mogu da budu korisne za održavanje ili ublažavanje multiple skleroze. Ovde prikazane kompozicije mogu da budu posebno korisne za smanjenje simptoma koji su povezani sa multiple sklerozom. Lečenje ili prevencija muliple skleroze može da se odnosi na, na primer, ublažavanje ozbiljnosti simptoma ili na smanjenje u učestalosti egzacerbacija ili opsega okidača koji su problem za pacijenta.
Lečenje kancera
[0084] U poželjnim izvođenjima, ovde opisane kompozicije su za upotrebu u lečenju ili prevenciji kancera. Primeri pokazuju da ordiniranje ovde opisanih kompozicija može da dovede do smanjenja u tumorskom rastu u brojnim modelima tumora.
[0085] U određenim izvođenjima, tretman sa ovde opisanim kompozicijama dovodi do smanjenja u veličini tumora ili smanjenja u rastu tumora. U određenim izvođenjima, ovde opisane kompozicije su za upotrebu u smanjenju veličine tumora ili smanjenju tumorksog rasta. Primeri pokazuju da ovde opisane kompozicije mogu da budu efikasne za smanjenje veličine tumora ili rasta. U određenim
1
izvođenjima, ovde opisane kompozicije su za upotrebu kod pacijenata koji imaju čvrste tumore. U određenim izvođenjima, ovde opisane kompozicije su za upotrebu u smanjivanju ili prevenciji angiogeneze u lečenju kancera. IL-17 i Th17 ćelije imaju centralne uloge u angiogenezi. U određenim izvođenjima, ovde opisane kompozicije su za upotrebu u prevenciji metastaza.
[0086] U određenim izvođenjima, ovde opisane kompozicije su za upotrebu u lečenju ili prevenciji kancera grudi. Primeri pokazuju da ovde opisane kompozicije mogu da budu efikasne za lečenje kancera grudi. U određenim izvođenjima, ovde opisane kompozicije su za upotrebu u smanjivanju veličine tumora, smanjivanju tumorskog rasta, ili smanjivanju angiogeneze u lečenju kancera grudi. U poželjnim izvođenjima kancer je karcinom dojke. U poželjnim izvođenjima, kancer je kancer grudi u IV stadijumu.
[0087] U određenim izvođenjima, ovde opisane kompozicije su za upotrebu u lečenju ili prevenciji kancera pluća. Primeri pokazuju da ovde opisane kompozicije mogu da budu efikasne za lečenje kancera pluća. U određenim izvođenjima, ovde opisane kompozicije su za upotrebu u smanjenju veličine tumora, smanjenju tumorskog rasta, ili smanjenju angiogeneze u lečenju kancera pluća. U poželjnim izvođenjima kancer je karcinom pluća.
[0088] U određenim izvođenjima, ovde opisane kompozicije su za upotrebu u lečenju ili prevenciji kancera jetre. Primeri pokazuju da ovde opisane kompozicije mogu da budu efikasne za lečenje kancera jetre. U određenim izvođenjima, ovde opisane kompozicije su za upotrebu u smanjenju veličine tumora, smanjenju tumorskog rasta, ili smanjenju angiogeneze u lečenju kancera jetre. U poželjnim izvođenjima kancer je hepatom (hepatocelularni karcinom).
[0089] U određenim izvođenjima, ovde opisane kompozicije su za upotrebu u lečenju ili prevenciji karcinoma. Primeri pokazuju da ovde opisane kompozicije mogu da budu efikasne za lečenje brojnih tipova karcinoma. U određenim izvođenjima, ovde opisane kompozicije su za upotrebu u lečenju ili prevenciji ne-imunogenog kancera. Primeri pokazuju da ovde opisane kompozicije mogu da budu efikasne za lečenje ne-imunogenih kancera.
[0090] IL-17 i Th17 put imaju centralne uloge u razvijanju kancera i progresiji, iako uloge IL-17 i Th17 ćelija u kanceru nisu u potpunosti jasne, poznati su brojni pro-tumorski efekti IL-17 i Th17 ćelija. Na primer, Th17 ćelije i IL-17 može da promoviše angiogenezu, povećanu proliferaciju i preživljavanje tumorskih ćelija i aktivira tumor-promovišuće transkripcione faktore [39-41]. Prema tome, ovde opisane kompozicije mogu da budu korisne za lečenje ili prevenciju kancera. Osim toga, primeri pokazuju da su ovde opisane kompozicije efikasne za smanjenje zapremine tumora u grudima, plućima i kanceru jetre, i IL-17 i Th17 ćelije imaju važne uloge u ovim specifičnim tipovima kancera [42-44].
[0091] Terapeutski efekti ovde opisanih kompozicija na kancer mogu da budu posredovani sa proinflamatornim mehanizmom. Inflamacija može da ima supresivni efekat na kancer [45] i proinflamatorni citokini kao što je TNFα e ispituju kao terapije za kancer [46]. Ovde opisane kompozicije mogu da budu korisne za lečenje kancera pomoću sličnog mehanizma. Na primer, ovde opisane kompozicije mogu da pokrenu odgovor tipa IFNγ. IFNγ je potentni faktor koji aktivira makrofage koji može da stimuliše tumoricidnu aktivnost [47], i CXCL9 i CXCL10, na primer, takođe imaju antikancerogene efekte [48-50]. Prema tome, u određenim izvođenjima, ovde opisane kompozicije za upotrebu u promovisanju inflamacije u lečenju kancera. U poželjnim izvođenjima, ovde opisane kompozicije su za upotrebu u promovisanju inflamacije posredovane sa Th1 u lečenju kancera. Th1 ćelije proizvode IFNγ i imaju potentne anti-kancerogene efekte [45]. U određenim izvođenjima, ovde opisane kompozicije u lečenju ranog stadijuma kancera, kao što je kancer koji nije metastazirao, ili stadijuma 0 ili stadijuma 1 kancera. Promovisanje inflamacije može da bude efektivnije prema
1
kancerima u ranijim stadijima [45]. U određenim izvođenjima, kompozicije iz pronalaska su za upotrebu u promovisanju inflamacije da bi se pojačao efekat anti-kancerogenog sredstva.
[0092] U daljim izvođenjima, ovde opsane kompozicije su za upotrebu u lečenju ili prevenciji akutne limfoblastične leukemije (ALL), akutne mijeloidne leukemije, adrenokortikalnog karcinoma, karcinoma, kancera žučnih pueva, kancera bešike, kancera kostiju, osteosarkoma/malignog fibroznog histiocitoma, glioma moždanog stabla, tumora mozga, cerebelarnog astrocitoma, cerebralnog astrocitoma/malignog glioma, ependimoma, meduloblastoma, supratentorijalnih primitivnih neuroektodermalnih tumora, kancera grudi, bronhijalnih adenoma/karcinoida, Burkitovog limfoma, karcinoidnog tumora, cervikalnog kancera, hronične limfocitne leukemije, hronične mijelogene leukemije, hroničnih mijelogenih leukemija, kancera debelog creva, kutanog T-ćelijskog limfoma, kancera endometrijuma, ependimoma, kancera ezofagusa, Evingovog sarkoma, intraokularnog melanoma, retinoblastoma, kancera žučne kese, kancera želuca, gastrointestinalnog karcinoidnog tumora, gastrointestinalog stromalnog tumora (GIST), tumora germinativnih ćelija, glioma, dečjeg vizuelnog puta i hipotalamusnog, Hočkinovog limfoma, melanoma, karcinoma ćelija ostrvaca, Kapošijevog sarkoma, kancera ćelija bubrega, kancera larinksa, leukemija, limfoma, mezotelioma, neuroblastoma, ne-Hočkinovog limfoma, orofaringealnog kancera, osteosarkoma, kancera ovarijuma, kancera pankreasa, kancera paratiroidee, kancera ždrela, adenoma hipofize, neoplazmi plazma ćelija, kancera prostate, karcinoma bubrežnih ćelija, retinoblastoma, sarkoma, kancera testisa, kancera tiroidee, ili kancera uterusa.
[0093] Ovde opisane kompozicije mogu posebo da budu efikasne kada se koriste kombinovano sa drugim terapeutskim sredstvima. Imunski modulatorni efekti ovde opisanih kompozicija mogu da budu efikasni kada se kombinuju sa direktnijim anti-kancerogenim sredstvima. Prema tome, u određenim izvođenjima, opisana je kompoziciju koja obuhvata bakteriju koja je deponovana pod pristupnim brojem NCIMB 42380 ili njen biotip i antikancerogeno sredstvo. U poželjnim izvođenjima antikancerogeno sredstvo je imunski inibitor tačke provere, ciljana imunoterapija antitelom, CAR-T ćelijska terapija, onkolitički virus, ili citostatički lek. U poželjnim izvođenjima, kompozicija obuhvata anti-kancerogeno sredstvo koje je izabrano iz grupe koja obuhvata: Yervoy (ipilimumab, BMS); Keytruda (pembrolizumab, Merck); Opdivo (nivolumab, BMS); MEDI4736 (AZ/MedImmune); MPDL3280A (Roche/Genentech); Tremelimumab (AZ/MedImmune); CT-011 (pidilizumab, CureTech); BMS-986015 (lirilumab, BMS); MEDI0680 (AZ/MedImmune); MSB-0010718C (Merck); PF-05082566 (Pfizer); MEDI6469 (AZ/MedImmune); BMS-986016 (BMS); BMS-663513 (urelumab, BMS); IMP321 (Prima Biomed); LAG525 (Novartis); ARGX-110 (arGEN-X); PF-05082466 (Pfizer); CDX-1127 (varlilumab; CellDex Therapeutics); TRX-518 (GITR Inc.); MK-4166 (Merck); JTX-2011 (Jounce Therapeutics); ARGX-115 (arGEN-X); NLG-9189 (indoksimod, NewLink Genetics); INCB024360 (Incyte); IPH2201 (Innate Immotherapeutics/AZ); NLG-919 (NewLink Genetics); anti-VISTA (JnJ); Epacadostat (INCB24360, Incyte); F001287 (Flexus/BMS); CP 870893 (University of Pennsylvania); MGA271 (Macrogenix); Emactuzumab (Roche/Genentech); Galunisertib (Eli Lilly); Ulokuplumab (BMS); BKT140/BL8040 (Biokine Therapeutics); Bavituksimab (Peregrine Pharmaceuticals); CC 90002 (Celgene); 852A (Pfizer); VTX-2337 (VentiRx Pharmaceuticals); IMO-2055 (Hybridon, Idera Pharmaceuticals); LY2157299 (Eli Lilly); EW-7197 (Ewha Women’s University, Korea); Vemurafenib (Plexxikon); Dabrafenib (Genentech/GSK); BMS-777607 (BMS); BLZ945 (Memorial Sloan-Kettering Cancer Centre); Unituxin (dinutuksimab, United Therapeutics Corporation); Blincyto (blinatumomab, Amgen); Cyramza (ramucirumab, Eli Lilly); Gazyva (obinutuzumab, Roche/Biogen); Kadcyla (ado-trastuzumab emtansin, Roche/Genentech); Perjeta (pertuzumab, Roche/Genentech); Adcetris (brentuximab vedotin, Takeda/Millennium); Arzerra (ofatumumab, GSK); Vectibix (panitumumab, Amgen); Avastin (bevacizumab, Roche/Genentech); Erbituks (cetuximab, BMS/Merck); Bexxar (tositumomab-I131, GSK); Zevalin (ibritumomab tiuksetan, Biogen); Campath (alemtuzumab, Bayer); Mylotarg
2
(gemtuzumab ozogamicin, Pfizer); Herceptin (trastuzumab, Roche/Genentech); Rituksan (rituksimab, Genentech/Biogen); volociksimab (Abbvie); Enavatuzumab (Abbvie); ABT-414 (Abbvie); Elotuzumab (Abbvie/BMS); ALX-0141 (Ablynx); Ozaralizumab (Ablynx); Aktimab-C (Actinium); Aktimab-P (Actinium); Milatuzumabdoks (Actinium); Emab-SN-38 (Actinium); Naptumonmab estafenatoks (Active Biotech); AFM13 (Affimed); AFM11 (Affimed); AGS-16C3F (Agensys); AGS-16M8F (Agensys); AGS-22ME (Agensys); AGS-15ME (Agensys); GS-67E (Agensys); ALXN6000 (samalizumab, Alexion); ALT-836 (Altor Bioscience); ALT-801 (Altor Bioscience); ALT-803 (Altor Bioscience); AMG780 (Amgen); AMG 228 (Amgen); AMG820 (Amgen); AMG172 (Amgen); AMG595 (Amgen); AMG110 (Amgen); AMG232 (adekatumumab, Amgen); AMG211 (Amgen/MedImmune); BAY20-10112 (Amgen/Bayer); Rilotumumab (Amgen); Denosumab (Amgen); AMP-514 (Amgen); MEDI575 (AZ/MedImmune); MEDI3617 (AZ/MedImmune); MEDI6383 (AZ/MedImmune); MEDI551 (AZ/MedImmune); Moksetumomab pasudotoks (AZ/MedImmune); MEDI565 (AZ/MedImmune); MEDI0639 (AZ/MedImmune); MEDI0680 (AZ/MedImmune); MEDI562 (AZ/MedImmune); AV-380 (AVEO); AV203 (AVEO); AV299 (AVEO); BAY79-4620 (Bayer); Anetumab ravtansin (Bayer); vantictumab (Bayer); BAY94-9343 (Bayer); Sibrotuzumab (Boehringer Ingleheim); BI-836845 (Boehringer Ingleheim); B-701 (BioClin); BIIB015 (Biogen); Obinutuzumab (Biogen/Genentech); BI-505 (Bioinvent); BI-1206 (Bioinvent); TB-403 (Bioinvent); BT062 (Biotest) BIL-010t (Biosceptre); MDX-1203 (BMS); MDX-1204 (BMS); Necitumumab (BMS); CAN-4 (Cantargia AB); CDX-011 (Celldex); CDX1401 (Celldex); CDX301 (Celldex); U3-1565 (Daiichi Sankyo); patritumab (Daiichi Sankyo); tigatuzumab (Daiichi Sankyo); nimotuzumab (Daiichi Sankyo); DS-8895 (Daiichi Sankyo); DS-8873 (Daiichi Sankyo); DS-5573 (Daiichi Sankyo); MORab-004 (Eisai); MORab-009 (Eisai); MORab-003 (Eisai); MORab-066 (Eisai); LY3012207 (Eli Lilly); LY2875358 (Eli Lilly); LY2812176 (Eli Lilly); LY3012217(Eli Lilly); LY2495655 (Eli Lilly); LY3012212 (Eli Lilly); LY3012211 (Eli Lilly); LY3009806 (Eli Lilly); ciksutumumab (Eli Lilly); Flanvotumab (Eli Lilly); IMC-TR1 (Eli Lilly); Ramucirumab (Eli Lilly); Tabalumab (Eli Lilly); Zanolimumab (Emergent Biosolution); FG-3019 (FibroGen); FPA008 (Five Prime Therapeutics); FP-1039 (Five Prime Therapeutics); FPA144 (Five Prime Therapeutics); katumaksomab (Fresenius Biotech); IMAB362 (Ganymed); IMAB027 (Ganymed); HuMax-CD74 (Genmab); HuMax-TFADC (Genmab); GS-5745 (Gilead); GS-6624 (Gilead); OMP-21M18 (demcizumab, GSK); mapatumumab (GSK); IMGN289 (ImmunoGen); IMGN901 (ImmunoGen); IMGN853 (ImmunoGen); IMGN529 (ImmunoGen); IMMU-130 (Immunomedics); milatuzumabdoks (Immunomedics); IMMU-115 (Immunomedics); IMMU-132 (Immunomedics); IMMU-106 (Immunomedics); IMMU102 (Immunomedics); Epratuzumab (Immunomedics); Clivatuzumab (Immunomedics); IPH41 (Innate Immunotherapeutics); Daratumumab (Janssen/Genmab); CNTO-95 (Intetumumab, Janssen); CNTO-328 (siltuksimab, Janssen); KB004 (KaloBios); mogamulizumab (Kyowa Hakko Kirrin); KW-2871 (ecromeksimab, Life Science); Sonepcizumab (Lpath); Margetuksimab (Macrogenics); Enoblituzumab (Macrogenics); MGD006 (Macrogenics); MGF007 (Macrogenics); MK0646 (dalotuzumab, Merck); MK-3475 (Merck); Sym004 (Symphogen/Merck Serono); DI17E6 (Merck Serono); MOR208 (Morphosys); MOR202 (Morphosys); Xmab5574 (Morphosys); BPC-1C (ensituksimab, Precision Biologics); TAS266 (Novartis); LFA102 (Novartis); BHQ880 (Novartis/Morphosys); QGE031 (Novartis); HCD122 (lucatumumab, Novartis); LJM716 (Novartis); AT355 (Novartis); OMP-21M18 (Demcizumab, OncoMed); OMP52M51 (Oncomed/GSK); OMP59R5 (Oncomed/GSK); vantictumab (Oncomed/Bayer); CMC-544 (inotuzumab ozogamicin, Pfizer); PF-03446962 (Pfizer); PF-04856884 (Pfizer); PSMA-ADC (Progenics); REGN1400 (Regeneron); REGN910 (nesvacumab, Regeneron/Sanofi); REGN421 (enoticumab, Regeneron/Sanofi); RG7221, RG7356, RG7155, RG7444, RG7116, RG7458, RG7598, RG7599, RG7600, RG7636, RG7450, RG7593, RG7596, DCDS3410A, RG7414 (parsatuzumab), RG7160 (imgatuzumab), RG7159 (obintuzumab), RG7686, RG3638 (onartuzumab), RG7597 (Roche/Genentech); SAR307746 (Sanofi); SAR566658 (Sanofi); SAR650984 (Sanofi); SAR153192 (Sanofi); SAR3419 (Sanofi); SAR256212 (Sanofi), SGN-LIV1A (lintuzumab, Seattle Genetics); SGN-CD33A (Seattle Genetics); SGN-75 (vorsetuzumab mafodotin, Seattle Genetics); SGN-19A (Seattle Genetics) SGN-CD70A (Seattle Genetics); SEA-CD40 (Seattle Genetics); ibritumomab tiuksetan (Spectrum); MLN0264 (Takeda); ganitumab (Takeda/Amgen); CEP-37250 (Teva); TB-403 (Thrombogenic); VB4-845 (Viventia); Xmab2512 (Xencor); Xmab5574 (Xencor); nimotuzumab (YM Biosciences); Carlumab (Janssen); NY-ESO TCR (Adaptimmune); MAGE-A-10 TCR (Adaptimmune); CTL019 (Novartis); JCAR015 (Juno Therapeutics); KTE-C19 CAR (Kite Pharma); UCART19 (Cellectis); BPX-401 (Bellicum Pharmaceuticals); BPX-601 (Bellicum Pharmaceuticals); ATTCK20 (Unum Therapeutics); CAR-NKG2D (Celyad); Onyx-015 (Onyx Pharmaceuticals); H101 (Shanghai Sunwaybio); DNX-2401 (DNAtrix); VCN-01 (VCN Biosciences); Colo-Adl (PsiOxus Therapeutics); ProstAtak (Advantagene); Oncos-102 (Oncos Therapeutics); CG0070 (Cold Genesys); Pexavac (JX-594, Jennerex Biotherapeutics); GL-ONC1 (Genelux); T-VEC (Amgen); G207 (Medigene); HF10 (Takara Bio); SEPREHVIR (HSV1716, Virttu Biologics); OrienX010 (OrienGene Biotechnology); Reolysin (Oncolytics Biotech); SVV-001 (Neotropix); Cacatak (CVA21, Viralytics); Alimta (Eli Lilly), cisplatin, oksaliplatin, irinotekan, folinska kiselina, metotreksat, ciklofosfamid, 5-fluorouracil, Zykadia (Novartis), Tafinlar (GSK), Xalkori (Pfizer), Iressa (AZ), Gilotrif (Boehringer Ingelheim), Tarceva (Astellas Pharma), Halaven (Eisai Pharma), Veliparib (Abbvie), AZD9291 (AZ), Alectinib (Chugai), LDK378 (Novartis), Genetespib (Synta Pharma), Tergenpumatucel-L (NewLink Genetics), GV1001 (Kael-GemVax), Tivantinib (ArQule); Cytoxan (BMS); Oncovin (Eli Lilly); Adriamycin (Pfizer); Gemzar (Eli Lilly); Xeloda (Roche); Ixempra (BMS); Abraxane (Celgene); Trelstar (Debiopharm); Taxotere (Sanofi); Nexavar (Bayer); IMMU-132 (Immunomedics); E7449 (Eisai); Thermodox (Celsion); Cometriq (Exellxis); Lonsurf (Taiho Pharmaceuticals); Camptosar (Pfizer); UFT (Taiho Pharmaceuticals); i TS-1 (Taiho Pharmaceuticals).
Načini ordiniranja
[0094] Poželjno, kompozicije iz pronalaska su namenjene za ordinirnaje u gastrontestinalnom traktu da bi se omogućila isporuka u i / ili parcijalna ili ukupna kolonizacija creva sa bakterijskim sojem iz pronalaska. Generalno, kompozicije iz pronalaska su za oralno ordiniranje, ali mogu da se ordiniraju rektalno, intranazalno, ili bukalnim ili podjezičnim načinima za davanje.
[0095] U određenim izvođenjima, kompozicije iz pronalaska mogu da se ordiniraju u obliku pene, kao sprej ili gel.
[0096] U određenim izvođenjima, kompozicije iz pronalaska mogu da se ordiniraju kao supozitorija, kao rektalna supozitorija, na primer u obliku „theobroma“ ulja (kakao buter), sintetičkih čvrstih masti (npr. „suppocire, witepsol“), glicero-želatina, polietilen glikola, ili kompozicija glicerina sapuna.
[0097] U određenim izvođenjima, kompozicija iz pronalaska je ordiniranje u gatroinestinalnom traktu preko cevi, kao što je nazogastrična cev, orogastrična cev, gastrična cev, jejunostomska cev (J cev), perkutana endoskopska gastrostomija (PEG), ili ulaz, kao što je ulaz kroz grudni zid koji omogućava pristup stomaku, jejunumu i drugi odgovarajući pristupni ulazi.
[0098] Kompozicije iz pronalaska mogu jednom da se ordiniraju, ili mogu sekvencijalno da se ordiniraju kao deo režima tretmana. U određenim izvođenjima, kompozicije su namenjene za dnevno ordiniranje.
[0099] U određenim izvođenjima iz pronalaska, lečenje prema pronalasku prati procena mikrobiote u crevima kod pacijenta. Tretman može da se ponovi ukoliko isporuka i / ili parcijalna ili ukupna kolonizacija sa sojem iz pronalaska nije postignuta tako da se efikasnost ne može uočiti, ili tretman može da se prekine ukoliko isporuka i / ili parcijalna ili ukupna kolonizacija je uspešna i efikasnost može da se uoči.
[0100] U određenim izvođenjima, kompozicija iz pronalaska može da se ordinira gravidnoj životinji, na primer sisaru kao što je čovek da bi se sprečilo razvijanje inflamatorne ili autoimunske bolesti i njenom detetu in utero i / ili posle njegovog rođenja.
[0101] Kompozicije i pronalaska mogu da se ordiniraju pacijentu kome je postavljena dijagnoza ili stanje koje je posredovano sa IL-17 ili sa Th17 putem, ili koji je identifikovan da se nalazi u riziku od dobijanja bolesti ili stanja koje je posredovano sa IL-17 ili sa Th17 putem. Kompozicije takođe mogu da se ordiniraju kao profilaktička mera da bi se sprečilo razvijanje bolesti ili stanja koja su posredovana sa IL-17 ili Th17 putem kod zdravog pacijenta.
[0102] Kompozicije iz pronalaska mogu da se ordiniraju pacijentu koji je idenifikovan da ima abnormalni mikrobiom u crevima. Na primer, pacijent može da ima smanjenu ili odsutnu kolonizaciju bakterije koja je deponovana pod pristupnim brojem NCIMB 42380.
[0103] Kompozicije iz pronalaska mogu da se ordinirjau kao hranljivi proizvod, kao što je nutritivni suplement.
[0104] Generalno, kompozicije iz pronalaska su za lečenje ljudi, iako one mogu da se koriste za lečenje životinja uključujući monogastrične sisare kao što je živina, svinje, mačke, psi, konji ili zečevi. Kompozicije iz pronalaska mogu da budu korisne za pojačnje rasta i performansi životinja. Ukoliko se ordiniraju životinjama, može da se koristi oralna gavaža.
Kompozicije
[0105] Generalno, kompozicija iz pronalaska obuhvata bakterije. U poželjnim izvođenjima iz pronalaska, kompozicija je formulisana u obliku koji je osušen zamrzavanjem. Na primer, kompozicija iz pronalaska može da obuhvati granule ili želatinske kapsule, na primer tvrde želatinske kapsule, koje obuhvataju bakterijski soj iz pronalaska.
[0106] Poželjno, kompozicija iz pronalaska obuhvata liofilizovane bakterije. Liofilizacija bakterija je dobro uspostavljeni postupak i relevantne smernice su dostupne u, na primer, referencama [51-53].
[0107] Alternativno, kompozicija iz pronalaska može da obuhvati živu, aktivnu bakterijsku kulturu.
[0108] U poželjnim izvođenjima, kompozicija iz pronalaska je inkapsulirana da bi se omogućila isporuka bakterijskog soja u crevo. Inkapsulacija štiti kompoziciju od degradacije sve do isporuke na ciljnom mestu preko, na primer, obrazovanja ruptura sa hemijskim ili fizičkim simulusima kao što je pritisak, enzimska aktivnost, ili fizička dezintegracija, koja može da bude pokrenuta sa promenama u pH. Može da se koristi bilo koji pogodni postupak za inkapsulaciju. Primeri postupaka za inkapsulaciju uključuju hvatanje u poroznom matriksu, vezivanje ili adsorpciju na čvrstim površinama nosača, samo nakupljanje flokulacijom ili sa sredstvima za unakrsno vezivanje, i mehaničko zadržavanje iza mikroporozne membrane ili mikrokapsule. Smernice za inkapsulaciju koje mogu da budu korisne za pripremu kompozicija iz pronalaska su dosupne u, na primer, referencama [54] i [55].
[0109] Kompozicija može da se ordinira oralno i može da bude u obliku tablete, kapsule ili praha. Inkapsulirani proizvodi su poželjni zbog toga što bakterija koja je deponovana pod pristupnim brojem NCIMB 42380 može da bude anaerob. Drugi sastojci (kao što je vitamin C, na primer), mogu da budu uključeni kao čistači kiseonika i probiotski supstrati da unaprede isporuku i / ili parcijalnu ili ukupnu kolonizaciju i preživljavanje in vivo. Alternativno, probiotska kompozicija i pronalaska može da se ordinira oralno kao hranljivi ili nutritivni proizvod, kao što je fermentisani mlečni proizvod koji je zasnovan na mleku ili surutci, ili kao farmaceutski proizvod.
[0110] Kompozicija može da bude formulisana kao probiotik.
2
[0111] Kompozicija iz pronalaska uključuje terapeutski efikasnu količinu bakerijskog soja iz pronalaska. Terapeutski efikasna količina bakterijskog soja je dovoljna da ispolji korisni efekat kod pacijenta. Terapeutski efikasna količina bakterijskog soja može da bude dovoljna da dovede do isporuke u i / ili parcijalne ili ukupne kolonizacije creva pacijenta.
[0112] Pogodna dnevna doza bakterija, na primer za odraslog čoveka, može da bude od oko 1 x 10<3>do oko 1 x 10<11>jedinica koje obrazuju kolonije (CFU); na primer, od oko 1 x 10<7>do oko 1 x 10<10>CFU; u drugom primeru od oko 1 x 10<6>do oko 1 x 10<10>CFU.
[0113] U određenim izvođenjima, kompozicija obuhvata bakterijski soj u količini od oko 1 x 10<6>do oko 1 x 10<11>CFU/g, u odnosu na masu kompozicije; na primer, od oko 1 x 10<8>do oko 1 x 10<10>CFU/g. Doza može da bude, na primer, 1 g, 3g, 5g, i 10g.
[0114] Obično, probiotik, kao što je kompozicija iz pronalaska, je opciono kombinovana sa najmanje jednim pogodnim probiotskim jedinjenjem. Probiotsko jedinjenje je obično ne-svarljivi ugljeni hidrat kao što je oligo ili polisaharid, ili šećerni alkohol, koji nije degradiran ili apsorbovan u gornjem digestivnom traktu. Poznati probiotici uključuju komercijalne proizvode kao što je inulin i transgalaktooligosaharide.
[0115] U određenim izvođenjima, probiotska kompozicija iz predmetnog pronalaska uključuje probiotsko jedinjenje u količini od oko 1 do oko 30 mas % u odnosu na masu, u odnosu na ukupnu masu kompozicije, (npr. od 5 do 20% u odnosu na masu). Ugljeni hidrati mogu da budu izabrani iz grupe koja se sastoji iz: frukto-oligosaharida (ili FOS), frukto-oligosaharida kratkog lanca, inulina, izomaltoligosaharida, pektina, ksilo-oligosaharida (ili XOS), hitozan-oligosaharida (ili COS), beta-glukana, modifikovane arabika gume i rezistentnih skrobova, polidekstroze, D-tagatoze, akacija vlakana, rogača ovasa, i citrusnih vlakana. U jednom aspektu, probiotici su frukto-oligosaharidi kratkog lanca (radi jednostavnosti ovde ispod su prikazani pod imenom FOSs-c.c); pomenuti FOSs-c.c. nisu svarljivi ugljeni hidrati, generalno se dobijaju konverzijom šećera iz šećere repe i uključuju i molekul saharoze za kog su vezana tri molekula glukoze.
[0116] Kompozicije iz pronalaska mogu da obuhvataju farmaceutski prihvatljive ekscipijente ili nosače. Primeri takvih pogodnih ekscipijenata mogu da se pronađu u referenci [56]. Prihvatljivi nosači ili razblaživači za terapeutsku upotrebu su dobro poznati u farmaceutskoj oblasti tehnike i opisani su, na primer, u referenci [57]. Primeri pogodnih nosača uključuju laktozu, skrob, glukozu, metil celulozu, magnezijum stearat, manitol, sorbitol i slično. Primeri pogodnih razblaživača uključuju etanol, glicerol i vodu. Izbor farmaceutskog nosača, ekscipijenta ili razblaživača može da se napravi u odnosu na namenjeni način ordiniranja i standardnu farmaceutsku praksu. Farmaceutske kompozicije mogu da obuhvataju, ili da kao dodatak imaju, nosač, ekscipijent ili rablaživač bilo kog pogodnog sredstvo(a) za vezivanje, lubrikan(a)ta, sredstvo(a) za suspenziju, sredstva(va) za oblaganje, sredstva(va) za solubilizaciju. Primeri pogodnih sredstava za povezivanje uključuju skrob, želatin, prirodne šećere kao što je glukoza, anhidrovana laktoza, laktoza u slobodnom obliku, beta-lakoza, kukuruzni zaslađivači, prirodne i sintetičke gume, kao što je akacija, tragakant ili natrijum alginat, karboksimetil celuloza i polietilen glikol. Primeri odgovarajućih lubrikanata uključuju natrijum oleat, natrijum stearat, magnezijum stearat, natrijum benzoat, natrijum acetat, natrijum hlorid i slično. Konzervansi, stabilizatori, boje i čak sredstva za davanje ukusa mogu da budu obezbeđeni u farmaceutskoj kompoziciji. Primeri konzervanasa uključuju natrijum benzoat, sorbinsku kiselinu i estre phidroksibenzoeve kiseline. Takođe mogu da se koriste antioksidansi i sredstva za suspenziju.
[0117] Kompozicije iz pronalaska mogu da budu formulisane kao hranljivi proizvod. Na primer, hranljivi proizvod može da obezbedi nutritivni benefit pored terapeutskog efekta pronalaska, kao što je u nutritivnom suplementu. Slično, hranljivi proizvod može da bude formulisan da bi se pojačao ukus kompozicije iz pronalaska ili da bi se kompozicija načinila atraktivnijom za konzumiranje ime što će biti sličnija uobičajenom prehrambenom proizvodu, pre nego farmaceutskoj kompoziciji. U određenim izvođenjima, kompozicija iz pronalaska je formulisana kao proizvod koji je zasnovan na mleku. Termin "proizvod koji je zasnovan na mleku" označava bilo koji tečni ili polu-tvrdi proizvod koji je zasnovan na mleku ili surutci koji ima sadržaj masti koji se razlikuje. Proizvod koji je zasnovan na mleku može da bude, npr., kravlje mleko, koje mleko, ovčje mleko, obrano mleko, punomasno mleko, mleko rekombinovano iz mleka u prahu i surutka bez bilo kog obrađivanja, ili obrađeni proizvod, kao što je jogurt, kiselo mleko, surutka, kiselo mleko, kiselo punomasno mleko, mlaćenica i drugi proizvodi od kiselog mleka. Druga važna grupa uključuje napitke od mleka, kao šo su napici od surutke, fermentisana mleka, kondenzovana mleka, mleka za odojčad ili bebe; mleka sa ukusom, sladoled; hrana koja sadrži mleko kao što su slatkiši.
[0118] U određenim izvođenjima, kompozicije iz pronalaska sadrže jedan bakterijski soj ili vrste i ne sadrže bilo koje druge bakterijske sojeve ili vrste. Takve kompozicije mogu da obuhvataju samo de minimis ili biološki irelevantne količine drugih bakterijskih sojeva ili vrsta. Takve kompozicije mogu da budu kultura koja je u suštini oslobođena od drugih vrsta organizama.
[0119] Kompozicije za upotrebu u skladu sa pronalaskom mogu ili ne moraju da zahtevaju odobrenje za stavljanje u promet.
[0120] U nekim slučajevima, liofilizovani bakterijski soj je rekonstituisan pre ordiniranja. U nekim slučajevima, rekonstitucija se odvija upotrebom ovde opisanog razblaživača.
[0121] Kompozicije iz pronalaska mogu da obuhvataju farmaceutski prihvatljive ekscipijente, razblaživače ili nosače.
[0122] U određenim izvođenjima, pronalazak obezbeđuje farmaceutsku kompoziciju koja obuhvata: bakterijski soj iz pronalaska; i farmaceutski prihvatljivi ekscipijent, nosač ili razblaživač; pri čemu je bakterijski soj u količini koja je dovoljna za lečenje poremećaja kada se ordinira subjektu kome je to potrebno; i pri čemu je poremećaj izabran iz grupe koja obuhvata astmu, alergijsku astmu, neutrofilnu astmu, osteoartritis, psorijazni artritis, juvenilni idiopatski artritis, neuromijelitis oka (Devikovu bolest), ankilozirajući spondilitis, spondiloartritis, sistemski lupus eritematozus, celijakiju, hroničnu opstruktivnu bolest pluća (COPD), kancer, kancer grudi, kancer debelog creva, kancer pluća, kancer ovarijuma, uveitis, skleritis, vaskulitis, Behetovu bolest, aterosklerozu, atopični dermatitis, emfizem, periodontitis, alergijski rinitis, i odbacivanje alografta.
[0123] U određenim izvođenjima, pronalazak obezbeđuje farmaceutsku kompoziciju koja obuhvata: bakterijski soj iz pronalaska; i farmaceutski prihvatljivi ekscipijent, nosač ili razblaživač; pri čemu je bakterijski soj u količini koja je dovoljna za lečenje ili prevenciju bolesti ili stanja koje je posredovano sa IL-17 ili sa Th17 putem. U poželjnim izvođenjima, pomenuta bolest ili stanje je izabrana iz grupe koja se sastoji iz reumatioidnog artritisa, multiple skleroze, psorijaze, inflamatorne bolesti creva, Kronove bolesti, ulcerativnog kolitisa, celijakije, astme, alergijke astme, neutrofilne astme, osteoartritisa, psorijaznog artritisa, juvenilnog idiopatskog artritisa, neuromijelitisa oka (Devikove bolesti), ankilozirajućeg spondilitisa, spondiloartriisa, sistemskog lupusa eritmatozusa, hronične opstruktivne bolesti pluća (COPD), kancera, kancera grudi, kancera debelog creva, kancera pluća, kancera ovarijuma, uveitisa, skleritisa, vaskulitisa, Behetove bolesti, ateroskleroze, atopičnog dermatitisa, emfizema, periodontitisa, alergijskog rinitisa, i odbacivanja alografta.
[0124] U određenim izvođenjima, pronalazak obezbeđuje gore navedenu farmaceutsku kompoziciju, pri čemu je količina bakterijskog soja od oko 1 X 10<3>do oko 1 X 10<11>jedinica koje obrazuju kolonije po gramu u odnosu na masu kompozicije.
2
[0125] U određenim izvođenjima, pronalazak obezbeđuje gore navedenu farmaceutsku kompoziciju, pri čemu se kompozicija ordinira u dozi od 1 g, 3 g, 5 g ili 10 g.
[0126] U određenim izvođenjima, pronalazak obezbeđuje gore navedenu farmaceutsku kompoziciju, pri čemu se kompozicija ordinira postupkom koji je izabran iz grupe koja obuhvata oralni, rektalni, subkutani, nazalni, bukalni, i podjezični.
[0127] U određenim izvođenjima, pronalazak obezbeđuje gore navedenu farmaceutsku kompoziciju, koja obuhvata nosač izabran iz grupe koja obuhvata laktozu, skrob, glukozu, metili celulozu, magnezijum sterarat, manitol i sorbitol.
[0128] U određenim izvođenjima, pronalazak obezbeđuje gore navedenu farmaceutsku kompoziciju, koja obuhvata rastvarač koji je izabran iz grupe koja obuhvata etanol, glicerol i vodu.
[0129] U određenim izvođenjima, pronalazak obezbeđuje gore navedenu farmaceutsku kompoziciju, koja obuhvata ekscipijent koji je izabran iz grupe koja se sastoji iz skroba, želatina, glukoze, anhidrovane laktoze, laktoze u slobodnom obliku, beta-laktoze, kukurznog zaslađivača, akacije, tragakanta, natrijum alginata, karboksimetil celuloze, polietilen glikola, natrijum oleata, natrijum stearata, magnezijum stearata, natrijum benzoata, natrijum acetata i natrijum hlorida.
[0130] U određenim izvođenjima, pronalazak obezbeđuje gore navedenu farmaceutsku kompoziciju, koja dalje obuhvata najmanje jedan konzervans, antioksidans i stabilizator.
[0131] U određenim izvođenjima, pronalazak obezbeđuje gore navedenu farmaceutsku kompoziciju, koja obuhvata konzervans koji je izabran iz grupe koja obuhvata natrijum benzoat, sorbinsku kiselinu i estre p-hidroksibenzoeve kiseline.
[0132] U određenim izvođenjima, pronalazak obezbeđuje gore navedenu farmaceutsku kompoziciju, pri čemu je pomenuti bakterijski soj liofilizovan.
[0133] U određenim izvođenjima, pronalazak obezbeđuje gore navedenu farmaceutsku kompoziciju, pri čemu kada se kompozicija skladišti u zatvorenom kontejneru na oko 4°C ili oko 25°C i kontejner je postavljen u amosferi koja ima 50% relativnu vlažnost, najmanje 80% bakterijskog soja kao što je mereno u jedinicama koje obrazuju kolonije, ostaje posle perioda od najmanje oko: 1 meseca, 3 meseca, 6 meseci, 1 godine, 1.5 godine, 2 godine 2.5 godine ili 3 godine.
Postupci gajenja u kulturi
[0134] Bakterijski sojevi za upotrebu u predmetnom pronalasku mogu da se gaje u kulturi upotrebom standardnih mikrobioloških postupaka kao što je detaljno prikazano u, na primer, referencama [58-60].
[0135] Čvrsti ili tečni medijum koji se koristi za kulturu može da bude YCFA agar ili YCFA medijum. YCFA medijum može da uključi (pp 100ml, približne vrednosti): Kasiton (1.0 g), ekstrakt kvasca (0.25 g), NaHCO3(0.4 g), cistein (0.1 g), K2HPO4(0.045 g), KH2PO4(0.045 g), NaCl (0.09 g), (NH4)2SO4(0.09 g), MgSO4·7H2O (0.009 g), CaCl2(0.009 g), resazurin (0.1 mg), hemin (1 mg), biotin (1 µg), kobalamin (1 µg), p-aminobenzoevu kiselinu (3 µg), folnu kiselinu (5 µg), i piridoksamin (15 µg).
Bakterijski sojevi za upotrebu u kompozicijama za vakcije
[0136] Pronalazači su identifikovali da su ovde prikazani bakterijski sojevi korisni za lečenje ili prevenciju bolesti ili stanja koja su posredovana sa IL-17 ili sa Th17 putem. Ovo je verovatno rezultat efekta koji bakerijski sojevi iz pronalaska imaju na imunski sistem domaćina. Prema tome, ovde prikazane kompozicije mogu takođe da budu korisne za prevenciju bolesti ili stanja koja su
2
posredovana sa IL-17 ili sa Th17 putem, kada se ordiniraju kao kompozicije vakcina. U takvim određenim realizacijama, bakterijski sojevi iz pronalaska mogu da budu ubijeni, inaktivisani ili atenuisani. U određenim takvim izvođenjima, kompozicije mogu da obuhvate adjuvans vakcine. U određenim izvođenjima, kompozicije su za ordiniranje preko ubrizgavanja, kao što je pomoću subkutane injekcije.
Opšte
[0137] Praksa iz predmetog pronalaska će koristiti, osim ukoliko nije drugačije naznačeno, konvencionalne postupke iz hemije, biohemije, molekularne biologije, imunologije i farmakologije, u oblasti tehnike. Takvi postupci su detaljno objašnjeni u literaturi. Videti, npr., reference [61] i [62-68], itd.
[0138] Termin "koji obuhvata" obuhvata "uključujući" kao i "koji se sastoji" npr. kompozicija "koja obuhvata" X može isključivo da se sastoji iz X ili može da uključi nešto dodatno npr. X Y.
[0139] Termin "oko" u odnosu na numeričku vrednost x je opcioni i označava, na primer, x±10%.
[0140] Reč "u suštini" ne isključuje "u potpunosti" npr. kompoziciju koja je "u sušini slobodna" od Y može da bude u potpunosti slobodna od Y. Gde je potrebno, reč "u suštini" može da bude izostavljena iz definicije pronalaska.
[0141] Reference za procenat identičnosti sekvence između dve nukleotidne sekvence označava da, kada se poravnaju, da je procenat nukleotida isti u poređenju dve sekvence. Ovo poravnanje i procenat homologije ili identičnosi u sekvenci može da se odredi korišćenjem softverskih programa koji su poznati u oblasti tehnike, na primer onih koji se opisuju u odeljku 7.7.18 ref. [69]. Poželjno poravnanje se određuje Smit-Vatermanovim algoritmom za pretraživanje homologije pomoću „affine gap search“ sa „gap open penalty“ od 12 i „gap extension penalty“ od 2, BLOSUM matricom od 62. Smit-Vatermanov algoritam za pretraživanje homologije je prikazan u ref. [70].
[0142] Osim ukoliko nije specifičn navedeno, proces ili postupak koji obuhvata brojne korake može da obuhvati dodatne korake na početku ili na kraju postupka, ili može da obuhvati dodatne među korake. Takođe, koraci mogu da se kombinuju, izostave ili da se izvedu na alternativnom načinu, ako je potrebno.
[0143] Ovde su opisana različita izvođenja iz pronalaska. Podrazumeva se da karakteristike koje su navedene u svakom izvođenju mogu da se kombinuju sa drugim specifičnim karakteristikama, da bi se dalje obezbedila izvođenja. Posebno, ovde naznačena izvođenja kao pogodna, tipična ili poželjna mogu jedna sa drugim da se kombinuju (izuzev onda kada su međusobno isključiva).
PRIMERI
Primer 1 –Efikasnost bakterijskog inokuluma u mišjem modelu astme koja je indukovana grinjama iz kuće prašine
Suština
[0144] Miševima su ordinirane kompozicije koje obuhvataju bakterijske sojeve prema pronalasku i nakon toga su izazvani sa ekstraktom grinje iz kućne prašine (HDM) da bi se pokrenuo alergijski inflamatorni odgovor. Inflamatori odgovor na HDM uključuje eozinofilne i neutrofilne komponente, i posredovan je da IL-17 i Th17 putem, i model je za astmu. Veličina i karakteristike inflamatornog odgovora koje su ispoljene od strane miševa koji su tretirani sa kompozicijama iz pronalaska su upoređeni sa kontrolnim grupama. Pronađeno je da kompozicije iz pronalaska ublažavaju inflamatorni
2
odgovor, i da smanjuju regrutovanje eozinofila i neutrofila, što ukazuje da one mogu da budu korisne za stanja koja su posredovana sa IL-17 kao što je eozinofilija, neutrofilija i astma.
Soj
[0145] 751: bakterije koje su deponovane pod pristupnim brojem NCIMB 42380
Dizajn studije
Grupe:
[0146]
1. Negativna kontrolna grupa. Tretman sa kontrolom nosača (oralno).
4. Tretman sa terapeutskim sojem 751 bakterijskog inokuluma 751 (oralno).
7. Pozitivna kontrolna grupa. Tretman sa Deksametazonom (i.p.).
8. Netretirana kontrolna grupa
Broj miševa po grupi = 5
[0147] Dan -14 do dana 13: Dnevno ordiniranje kontrole nosača po oralnom (Grupa 1).
[0148] Dan -14 do dana 13: Dnevno ordiniranje terapeutskog inokuluma bakterija po oralnom (Grupa 2-6).
[0149] Dan 0, 2, 4, 7, 9, 11 Ordiniranje 15µg HDM (ekstrakta grinje iz kućne prašine –Kataloški broj: XPB70D3A25, Broj serije: 231897, Greer Laboratories, Lenoir, NC, USA) u zapremini od 30µl PBS nazalno (Grupa 1-8).
[0150] Dan 0, 2, 4, 7, 9, 11 Ordiniranje Deksametazona (i.p., 3mg/kg, Sigma-Aldrich, Kataloški broj D1159) (Grupa 7).
[0151] Dan 14 Žrtvovanje svih životnja za analizu.
[0152] Ukupan broj miševa = 40.
Krajnje tačke i analiza
[0153] U danu 14 životinje su žrtvovane letalnom intraperitonealnom injekcijom sa pentabarbitolom (Streuli Pharma AG, Uznach, Cat: 1170139A) odmah nakon bronoalveolarne lavaže (BAL).
[0154] Ćelije su izolovane iz BAL (bronhoalveolarna lavaža) tečnosti određen je različiti broj ćelija (200 brojeva ćelija/ uzorcima).
Materijal i postupci
[0155] Miševi. Ženke 7 nedelja starosti BALB/c miševa su kupljene od Charles River Laboratories i slučajno raspoređene u kaveze sa ukupno 5 miševa po kavezu (Kavezi sa ventilacijom potiču od Indulab AG, Gams, Switzerland Cage type: "The SealsafeTM -IVC cage. Product number 1248L). Kavezi su obeleženi sa brojem za ispitivanje, brojem za grupu i datumom početka eksperimenta. Miševi su nedeljno praćeni i aklimatizovani na objekat tokom 7 dana pre početka ispitivanja (Dan ispitivanja -14). Životinje su 8 nedelja starosti bile u Danu ispitivanja -14. Voda za piće i hrana su bili dostupni ad libitum. Obogaćivanje kaveza je bilo prisutno. Dnevna briga za životinje je sprovedena u skladu sa lokalnim brojem odobrenja licence 2283.1 (izdatim i odobrenim od strane: Service de la consommation et des affaires vétérinaires du Canton de Vaud). Voda za piće i hrana su bili dostupni ad libitum i dopunjeni su jednom dnevno. Obogaćivanje kaveza je bilo prisutno. Odredbe za dobrobit životinja su navedene od strane zvaničnih vlasti Švajcarske pod naredbom 455.163 od FVO (Federalnog veterinarskog ureda)
2
na uzgoju laboratorijskih životinja, proizvodnji genetičkih modifikovanih životinja, i postupaka za izvođenje eksperimenata na životinjama.
[0156] Gajenje inokuluma bakterija u kulturi. U sterilnom radnom prostoru, krio-bočica bakterija je otopljena zagrevanjem u ruci sa rukavicom i ∼0.7 ml sadržaja je ubrizgano u Hungatovoj epruveti (Kat Broj, 1020471, Glasgerätebau Ochs, Bovenden-Lenglern, Germany), koja sadrži 8 ml anaerobnog YCFA. Obično su pripremljene dve epruvete po soju. Hungatove epruvete su nakon toga otopljene (statički) na 37°C tokom 16h (soj 751).
[0157] Gajenje kontrole nosača u kulturi. Hungatova epruveta koja sadrži 8 ml anaerobog YCFA je inkubirana (statički) na 37°C tokom 16h.
[0158] Ordiniranje inokuluma bakterija ili kontrole nosača. 400µl bakterijskog inokuluma gajenog u kulturi ili kontroli nosača su ordinirani po danu po oralnoj gavaži.
[0159] Intranazalna senzibilizacija. Miševi su anestezirani sa i.p. injekcijom sa 9.75 mg ksilazola i 48.75 mg ketazola po kg (Dr. E. Graeub AG, Bern, Switzerland) i ordinirani sa 15µg HDM (Kataloški broj: XPB70D3A25, Broj serije: 231897, Greer Laboratories, Lenoir, NC, USA) u zapremini od 30µl PBS nazalno.
[0160] Priprema i ordiniranje pozitivne kontrole jedinjenja Deksametazona. Dinatrijumova so deksametazon 21-fosfata (Sigma-Aldrich, Kataloški broj D1159, Lot N° SLBD.1030V) je rastvorena u H2O i ordinirana je životinjama u dozi od 3mg/kg u zapremini od 200µl po oralu u danima koji su naznačeni u gore navedenom protokolu za ispitivanje.
[0161] Terminalni postupak. U danu 14 životinja je žrtvovano letalnom i.p. injekcijom sa fenobarbitolom (Streuli Pharma AG, Uznach, Cat: 1170139A) nakon čega odmah sledi bronoalveolarna lavaža (BAL) u 500 µl slanog rastvora.
[0162] Merenja ćelijskih infiltrata u BAL. Ćelije su izolovane iz BAL tečnosti i različiti ćelijski brojevi su izvedeni na osnovu standarnog morfološkog i citohemijskog kriterijuma.
[0163] Grafici i statistička analiza. Svi grafici su dobijeni sa Graphpad Prism Verzijom 6 i primenjena je ANOVA jednog smera. Rezultati iz statističke analize su obezbeđeni sa zasebnim tebelama podataka. Stubovi greške predstavljaju Standardnu grešku srednje vrednosti (SEM).
Rezultati i analiza
[0164] Rezultati eksperimenata su prikazani na Slikama 1-9.
[0165] Nije zabeležen morbiditet ili mortalitet kod miševa koji su tretirani sa bakterijom ili nosačem. Dve kontrole, tretman nosačem (negativna kontrola) i tretman deksametazonom (pozitivna kontrola) su se ponašali kao što je očekivano, sa primećenom oslabljenom eozinofilijom i neutrofilijom posle tretmana sa deksametazonom.
[0166] Najvažniji rezultati ovog eksperimenta su prikazani na Slikama 6 i 7, koji prijavljuju ukupan broj i procenat neutrofila koji su detektovani u bronhiolarnoj lavaži posle izazova sa HDM. Soj 751 smanjuje ukupne neutrofile i udeo neutrofila u BAL u odnosu na kontrolu koja sadrži samo nosač.
Primer 2 –Efikasnost bakterijskog inokuluma u mišjem modelu neutrofilne astme sa ozbiljnim simptomima
Suština
2
[0167] Miševima su ordinirane kompozicijama koje obuhvataju bakterijske sojeve prema pronalasku i nakon toga su senzibilisani sa subkutanim ordiniranjima ekstrakta grinje iz kućne prašine (HDM) i izazvani su sa intranazalnim ordiniranjem sa HDM da se dobije model inflamatornog odgovora neutrofilne astme sa ozbiljnim simptomima. Veličina i karakteristike inflamatornog odgovora koji je ispoljen od strane miševa koji su tretirani sa kompozicijama iz pronalaska su upoređene sa kontrolnim grupama. Pronađeno je da kompozicije iz pronalaska ublažavaju inflamatorni odgovor, i posebno da smanjuju regrutovanje neutrofila, na način koji može da se uporedi sa pozitivnom kontrolom koji obuhvata ordiniranja anti-IL-17 antitela. Podaci prema tome ukazuju na to da kompozicije iz pronalaska mogu da budu korisne za lečenje stanja koja su posredovana sa IL-17-i Th17 kao što je neutrofilija i astma.
Soj
[0168] 751: bakterija koja je deponovana pod pristupnim brojem NCIMB 42380
Dizajn studije
Grupe:
[0169]
1. Negativna kontrolna grupa. Tretman sa kontrolom nosača (po oralu).
4. Tretman sa terapeutskim sojem 751 bakterijskog inokuluma (po oralu).
7. Pozitivna kontrolna grupa. Tretman sa anti-IL-17 (i.p.).
8. Netretirana kontrolna grupa.
9: Zdravi miševi (osnovi nivo).
Broj miševa po grupi (Grupa 1-8) = 5
[0170] Dan -14 do dana 17: Dnevno ordiniranje kontrole nosača po oralu (Grupa 1).
[0171] Dan -14 do dana 17: Dnevno ordiniranje terapeutskog bakterijskog inokuluma po oralu (Grupa 2-6).
[0172] Dan 0: Senzibilizacija sa HDM u CFA (s.c.) (Grupa 1-8).
[0173] Dan 7: Senzibilizacija sa HDM u CFA (s.c.) (Grupa 1-8).
[0174] Dan 13, 15, 17: Ordiniranje anti IL-17 neutralizujućeg antitela po i.p. (Grupa 7).
[0175] Dan 14, 15, 16, 17: Izazov sa HDM u 30µl PBS nazalno (Grupa 1-8).
[0176] Dan 18: Žrtvovanje svih životinja za analizu
Krajnje tačke i analiza:
[0177] U danu 14 životinje su žrtvovane letalnom intraperitonealnom injekcijom sa pentabarbitolom (Streuli PharmaAG, Uznach, Cat: 1170139A) nakon čega odmah sledi bronhoalveolarna lavaža (BAL). Ćelije su izolovane iz BAL tečnosti i sprovedeno je različito brojenje ćelija (200 ćelijskih brojeva/ uzorcima).
Matrijali i postupci.
[0178] Miševi. Ženke 7 nedelja starosti C57BL/6 miševa su kupljene od Charles River Laboratories i slučajno su raspoređene u kaveze ukupno 5 miševa po kavezu ( Kavezi sa ventilacijom potiču od Indulab AG, Gams, Switzerland Cage type: "The SealsafeTM -IVC cage. Product number 1248L). Kavezi su obeleženi sa brojem za ispitivanje, brojem za grupu i datumom početka eksperimenta. Miševi su nedeljno praćeni i aklimatizovani su na objekat 7 dana pre početka ispitivanja (Dan ispitivanja -14).
Životinje su bile 8 nedelja starosti u danu ispitivanja -14. Voda za piće i hrana su bili dostupni ad libitum. Obogaćivanje kaveza je bilo prisutno. Dnevna briga za životinje je sprovedena u skladu sa lokalnim brojem odobrenja licence 2283.1 (izdatim i odobrenim od strane: Service de la consommation et des affaires vétérinaires du Canton de Vaud). Voda za piće i hrana su bili dostupni ad libitum i dopunjeni su jednom dnevno. Obogaćivanje kaveza je bilo prisutno. Odredbe o dobrobiti životinja su navedene od strane zvaničnih vlasti Švajcarske pod naredbom 455.163 od FVO (Federalnog veterinarskog ureda) na uzgoju laboratorijskih životinja, proizvodnji genetičkih modifikovanih životinja, i postupaka za izvođenje eksperimenata na životinjama.
[0179] Gajenje inokuluma bakterija u kulturi. U sterilnom radnom prostoru, krio-bočica bakterija je otopljena zagrevanjem u ruci sa rukavicom i ∼0.7 ml sadržaja je ubrizgano u Hungatovoj epruveti (Kat Broj, 1020471, Glasgerätebau Ochs, Bovenden-Lenglern, Germany), koja sadrži 8 ml anaerobnog YCFA. Obično su pripremljene dve epruvete po soju. Hungatove epruvete su nakon toga otopljene (statički) na 37°C tokom 16h (soj 751).
[0180] Gajenje u kulturi kontrole nosača. Hungatova epruveta koja sadrži 8 ml anaerobog YCFA je inkubirana (statički) na 37°C tokom 16h.
[0181] Ordiniranje inokuluma bakterija ili kontrole nosača. 400µl bakterijskog inokuluma gajenog u kulturi ili kontroli nosača su ordinirani po danu po oralnoj gavaži.
[0182] HDM senzibilizacija.50 µg od HDM (Kataloški broj: XPB70D3A25, Broj serije: 231897, Greer Laboratories, Lenoir, NC, USA) u PBS je emulgovan u jednakoj zapremini kompletnog Frojndovog adjuvansa (CFA Chondrex Inc. Washington, USA) i subkutano ordiniran u zapremini od 200 µl, dva puta tokom dve nedelje na suprotnim bokovima. Nedelju dana posle druge imunizacije, miševi su anestezirani pomoću i.p. injekcije sa 9.75 mg ksilazola i 48.75 mg ketazola po kg (Dr. E. Graeub AG, Bern, Switzerland) i posle toga su intranazalno izazvani sa 15 µg od HDM u zapremini od 30µl PBS tokom 4 uzastopnih dana. Analiza je sprovedena jedan dan posle konačnog izazova.
[0183] Priprema i ordiniranje jedinjenja pozitivne kontrole anti mišjeg IL-17 antitela. Anti-IL-17 neutrališuće antitelo je nabavljeno od Bio X Cell i skladišteno je na 4°C (Klon 17F3, Kat. broj BE0173, Bio X Cell) i ordiniran je po i.p. u dozi od 12.5 mg/kg u danima koji su gore naznačeni u protokolu ispitivanja.
[0184] Terminalni postupak. U danu 18 životinje su žrtvovane letalnom i.p. injekcijom sa pentabarbitolom (Streuli Pharma AG, Uznach, Cat: 1170139A) posle čega odmah sledi bronhoalveolarna lavaža (BAL) u 500 µl slanog rastvora.
[0185] Merenja ćelijskih infiltrata u BAL. Ćelije su izolovane iz BAL tečnosti i različiti ćelijski brojevi su izvedeni na osnovu standarnog morfološkog i citohemijskog kriterijuma.
[0186] Grafici i statistička analiza. Svi grafici su dobijeni sa Graphpad Prism Verzijom 6 i primenjena je ANOVA jednog smera. Rezultati iz statističke analize su obezbeđeni sa zasebnim tebelama podataka. Stubovi greške predstavljaju Standardnu grešku srednje vrednosti (SEM).
Rezultati i analiza
[0187] Rezultati iz eksperimentata su prikazani na Slikama 10-18.
[0188] Nije zabeležen morbiditet ili mortalitet kod miševa koji su tretirani sa bakterijom ili nosačem. Kao što je prikazano na Slikama 15 i 16, soj 751 je bio visoko efikasan u ublažavanju veličine neutrofilnog inflamatornog odgovora. Zaista, tretman sa sojem 751 pokazuje uporedive rezultate sa
1
tretmanom sa anti-IL-17 antitelima. Dodatno, soj 751 smanjuje brojeve eozinofila u odnosu na kontrolu, kao što je prikazano na Slikama 11 i 12.
Primer 3 –Efikasnost bakterijskog inokuluma za lečenje artritisa u mišjem modelu artritisa indukovanog kolagenom tipa II
Materijali i postupci
Sojevi
[0189] 751: bakterija koja je deponovana pod pristupnim brojem NCIMB 42380
Bakterijske kulture
[0190] Bakterijske kulture su uzgajane za ordiniranje u anaerobnom radnom prostoru (Don Whitley Scientific).
[0191] Bakterijski soj #751 je gajen upotrebom štoka glicerola. Štokovi glicerola su skladišteni na -80°C. Tri puta nedeljno, giceroli iz štoka su otapani na sobnoj temperaturi i zasejani su na YCFA pločama. Svaki put je korišćena nova alikvota glicerola. Bakterijama je dozvoljeno da rastu na datoj ploči do 72 časova.
[0192] Rastvori koji trebaju da se ordiniraju životinjama su pripremljeni dva puta dnevno u osmočasovnom intervalu za jutarnje (AM) i popodnevne (PM) tretmane. Kolonija bakterija je odabrana sa zasejane ploče i preneta je u epruvetu koja sadrži YCFA medijum. Bakterijskom soju #751 je omogućen rast 16 časova pre AM ordiniranja. Bakterije su gajene u pod-kulturama na 1% u YCFA medijumu tokom PM ordiniranja. OD vredosti su snimljene za svaki soj posle jutarnjih i popodnevnih tretmana preparatima.
Mišji model artritisa indukovan sa kolagenom Tipa II
[0193] Odrasli mužjaci DBA/1 miševa su slučajno raspoređeni u eksperimentalne grupe i omogućena im je aklimatizacija tokom dve nedelje. U danu 0, životinjama je subkutano ordinirana injekcija sa 100 mikrolitara emulzije koja sadrži 100 mikrograma kolagena tipa II (CII) u nekompletnom Frojndovom adjuvansu koji je dopunjen sa 4 mg/ml Mycobacterium tuberculosis H37Ra. U Danu 21, životinjama je ordinirana subkutana injekcija sa dodatnom emulzijom koja obuhvata 100 µg kolagena tipa II u nekompletnom Frojndovom adjuvansu.
[0194] Tretmani su davani u skladu sa dole prikazanim rasporedom dobijanja. Od Dana -14 sve do kraja eksperimenta u Danu 45, životinje su merene tri puta nedeljno. Od Dana 21 sve do kraja eksperimenta, životinje su beležene tri puta nedeljno za kliničke znakove artritisa da se uključi oticanje zadnjih-i prednjih šapa, radio-karpalnih (zglob) zglobova i tibio-tarzalni (članak) zglobovi.
[0195] U danu 45 miševi su odabrani i terminalni uzorci krvi su uzeti za analizu citokina.
[0196] U danu -14, danu 0 i danu 45, fekalni uzorci su sakupljeni za mikrobiološke analize, odmah su zamrznuti i skladišteni na -80°C.
[0197] Mišji model artritisa koji je indukovan kolagenom (CIA) je dobro uspostavljeni mišji model za reumatoidni artritis [71]. Imunizacija sa CII uzrokuje patogenezu koja uključuje nekoliko važnih patoloških karakteristika reumatoidnog artritisa, uključujući sinovijalnu hiperplaziju, infiltraciju mononuklearnih ćelija i degradaciju hrskavice. Značajno, razvijanje CIA je posredovano sa Th17 ćelijama preko sekrecije IL-17A [72]. Imunski odgovor koji se nalazi u osnovi modela artritisa je pojačan upotrebom Frojndovog adjuvansa koji je dopunjen sa Mycobacterium tuberculosis.
2
[0198] U danu 21, slezine su sakupljene iz tri satelitske životinje u svakoj grupi. Ćelije su gajene u kulturi 72 časa u prisustvu ili odsustvu kolagena tipa II. Citokini, uključujući TNF-α, IL-6, IFN-γ, IL-4, IL-10 i IL-17, su kvantifikovani u supernatantima kulture i u terminalnom sermumu Luminex. Ćelijska proliferacija je kvantifikovana upotrebom postupka uključivanja timidina koji sadrži tricijum.
Grupe tretmana i doze
[0199] Sve grupe su n=15 (n=12 za glavnu grupu ispitivanja i n=3 za satelitne grupe)
[0200] Nosač koji je korišćen za bioterapeutike je bio medijum estrakta kvasca-kasiton-masne kiseline (YCFA).
Telesne težine
[0201] Od dana -14 do kraja eksperimenta, životinje su merene tri puta nedeljno. Podaci su predstavljeni grafikom (Srednja vrednost ± SEM).
Ne-specifična klinička opažanja
[0202] Od dana -14 do kraja eksperimenta, životinje su dnevno kontrolisane za ne-specifične kliničke znakove koji uključuju abnormalni položaj (pogrbljenost), abnormalno stanje krzna (piloerekciju) i abnormalne nivoe aktivnosti (smanjenu ili povećanu aktivnost).
Klinička opažanja
[0203] Od dana 21 do kraja eksperimenta u danu 45, životinje su bodovane tri puta nedeljno za kliničke znakove artritisa koji uključuju oticanje zadnjih i prednjih šapa, radio-karpalnih (zglob) zglobova i tibiotarzalnim (čanak) zglobovima. Svaki ekstremitet je bodovan korišćenjem sledeće skale: (0) normalno, (1) blago oticanje, (2) lako oticanje, (3) umereno oticanje i (4) ozbiljno oticanje. Klinički rezultat je izračunat dodavanjem rezultata svakog ekstremiteta. Maksimalni mogući klinički rezultat za životinju je bio (16). Životinje čiji je rezultat bio jednak (12) dva uzastopna puta i životinje čiji je rezultat bio veći od (12) u bilo kom slučaju su odabrane. Podaci su predstavljeni grafikom (Srednja vrednost ± SEM).
Analiza ćelijske proliferacije
[0204] U danu 21, tri životinje sateliti po grupi su odabrane i izvršena je disekcija slezina. Ćelije slezine su gajene u kulturi 72 časova u prisustvu ili odsustvu kolagena tipa II. Posle 72 časova, ćelije su pulsirane preko noći u prisustvu timidina sa tricijumom. Proliferacija ćelija je kvantifikovana merenjem uključivanjem timidina. Podaci su predstavljeni grafikom (Srednja vrednost ± SEM). Supernatanti su uzeti i ispitani su za prisustvo ključnih citokina.
Analiza citokina
[0205] Terminalni supernatanti iz kultura ćelija slezine su ispitani da bi se kvantifikovali TNF-α, IL-6, IFN-γ, IL4, IL-10 i IL-17 od strane Luminex. Podaci su prikazani grafikom (Srednja vrednost ± SEM). Mikrobiološka analiza
[0206] U danu -14, danu 0 i danu 45, sakupljeni su uzroci fecesa iz svake životinje, brzo zamrznuti, i skladišteni na -80°C. Cekum (uključujući) su brzo zamrznuti i skladišteni na -80°C. Test za identifikaciju bakterija je sproveden dnevno pomoću zasejavanja bakterija.
Histopatologija
[0207] Na kraju eksperimenta, zadnje šape su skladištene u sredstvu za fiksiranje tkiva. Uzorci su preneti u dekalcifikovani rastvor. Uzorci tkiva su obrađeni, isečeni i obojeni sa Hematoksilinom & Eozinom. Preseci su bodovani od strane kvalifikovnog histopatologa, slepi za eksperimentali dizajn, za znakove artritisa da uključe inflamaciju, oštećenje zglobne hrskavice i oštećenje osnovne metafizne kosti. Korišćen je detaljni sistem bodovanja (videti ispod). Podaci su predstavljeni grafikom (Srednja vrednost ± SEM). Neobrađeni i analizirani podaci su obezbeđeni kao i reprezentativne slike.
Rezultati i analize
4
Preživljavanje i ne-specifična klinička opažanja
[0208] Neke životinje su odabrane pre organizovanog kraja ispitivanja zbog ozbiljnosti kliničkih znakova artritisa ili zbog ozbiljnosti ne-specifičnih kliničkih opažanja.
[0209] Tri životinje su povučene ili su pronađene mrtve ili su povučene tokom perioda pre-tretmana (Dan -14 do Dan 0): jedna životinja u Grupi 1 (tretirana nosačem, životinja koje je dobijena od dobavljača sa polomljenom nogom je povučena) i dve životinje u Grupi 2 (tretirane sa bioterapeutikom #751, moguće doziranje u plućima u prvom danu pre-tretmana, i klinički znakovi posle doziranja u drugom danu pre tretmana).
[0210] Osam životinja je povučeno zbog ozbiljnosti kliničkih znakova of artritisa: pet životinja u Grupi 1 (tretirani sa nosačem) i tri životinje u Grupi 2 (tretirane sa bioterapeutikom #751).
[0211] Četiri životinje su povučene zbog ozbiljnosti ne-specifičnih kliničkih znakova uključujući abnormalno držanje (savijen), abnormalno stanje krzna (piloerekcija), nivoi abnormalne aktivnosti (smanjena aktivnost): tri životinje u Grupi 1 (tretirane sa nosačem) i jedna životinja u Grupi 2 (tretirana sa bioterapeutikom #751).
Telesne težine
[0212] Podaci telesne težine su beleženi od Dana -14 do Dana 0 i izraženi su kao procent početnih (Dan -14) telesne težine su analizirane dvosmernom ANOVA nakon čega sledi Dunetov post-test za višestruka poređenja sa Danom -14 nakon toga za višestruka poređenja sa grupom koja je tretirana sa nosačem. Podaci su prikazani na Slici 19. Podaci iz životinja koje su odabrane pre rasporeda kraja eksperimenta su isključeni iz analize.
[0213] Kada se uporedi sa Danom -14, ordiniranja dva puta u toku dana oralnom gavažom indukuje značajan gubitak u telesnoj težini u grupi koja je tretirana nosačem u Danu -9 i Danu -7.
[0214] Telesne težine su merene između Dana -14 i Dana -1 u grupama koje su tretirane sa bioterapeutikom nisu se razlikovale od telesnih težina koje su merene u grupi je tretirana sa nosačem u bilo kom navedenom danu.
[0215] Podaci telesne težine koji su beleženi od Dana 0 do Dana 28 i izraženi kao procenat početnih (Day 0) telesnih težina su analizirani dvosmernom ANOVA koju prati Dunetov post-test za višestruka poređenja sa Danom 0 u grupi koja sadrži nosač zatim za višestruka poređenja sa grupom koja je tretirana sa nosačem. Podaci su prikazani na Slici 20. Podaci iz životinja koje su izabrane pre raspoređenog kraja eksperimenta i životinje sateliti su isključene iz analiza. Podaci iz Dana 28, Dana 35 i Dana 42 su dalje analizirani jednosmernom ANOVA zatim sa Dunetovim post-testom za višestruka porešenja sa grupom koja je tretirana sa nosačem.
[0216] Početak razvoja kliničkih znakova artritisa je povezan sa značajnim gubitkom u telesnoj težini u Danu 26 i Danu 28 (p < 0.0001) kada se uporedi sa Danom 0 u grupi koja je tretirana sa nosačem.
[0217] Nije uočena značajna razlika između eksperimentalnih grupa u Danu 35 ili Danu 42.
Klinička opažanja
[0218] Podaci kliničkih rezultata su analizirani dvosmernom ANOVA zatim sa Dunetovim post-testom za višetruka poređenja između dana u grupi koja je tretirana nosačem zatim za višestruka poređenja između eksperimentalnih grupa i grupe koja je tretirana sa nosačem svakog dana. Podaci su prikazani na Slici 21. Podaci koji su zabeleženi iz životinja koje su odabrane pre kraja eksperimenta su isključeni iz analize. Kada su životinje odabrane zbog ozbiljnosti kliničkih znakova artritisa, poslednji zabeleženi rezultat je prijavljen za sledeće dane i korišćen je u statističkim analizama.
[0219] Značajno povećanje kliničkih rezultata je uočeno u grupi koja je tretirana sa nosačem od Dana 28 do Dana 45 (p < 0.0001) kada se poredi sa Danom 21.
[0220] Bioterapeutik #751 je indukovao smanjenje u kliničkim znakovima kada se poredi sa grupom koja je tretirana sa nosačem iz Dana 31 do Dana 45, iako razlika nije bila značajna.
Analiza ćelijske proliferacije
[0221] Da bi se test potvrdio, splenociti su gajeni u kulturi u prisustvu rastvorljivih anti-CD3 i anti-CD28 (antiCD3/CD28) kao stimulusi pozitivne kontrole da bi se potvrdio proliferativni potencijal ćelija.
[0222] Snažni proliferativni odgovori prema anti-CD3/CD28 su uočeni u svim eksperimentalnim grupama, koji su pokazali da su ćelije zdrave, vijabilne i sposobne su da odgovore na signale aktivacije.
[0223] Da bi se ispitao proliferativni odgovor u prisustvu Kolagena II (CII), splenociti su gajeni u kulturi u prisustvu CII na 50 mg/ml. Proliferativni odgovori splenocita prema CII su analizirani dvosmernom ANOVA zatim sa Sidakovim post-testom za višestruka poređenja između nestimulisanih i CII-stimulisanih splenocita i jednosmerna ANOVA koju prati Dunetov post-test za poređenje odgovora stimulisanog sa CII u različitim eksperimentalnim grupama sa grupom koja je tretirana sa nosačem. Podaci su prikazani na Slici 22.
[0224] CII je indukovao visoko značajno povećanje inkorporacije<3>H-timidina (cpm) kada se poredi sa nestimulisanim splenocitima u grupi koja je tretirana sa nosačem (p < 0.0001).
[0225] Grupe koje su tretirane sa bioterapeutikom #751 su pokazale značajno niže nivoe CII-indukovane proliferacije splenocita u odnosu na grupu koja je tretirana sa nosačem.
Nivoi citokina u supernatantima tkivnih kultura
[0226] Nivoi svakog citokina su izmereni u supernatantima tkivnih kultura koji su izvedeni od anti-CD3/CD28 stimulisanih kultura pomoću lumineks analize. Oni su pokazali snažne odgovore za sve izmerene citokine (srednji nivoi vrednosti u grupi koja obuhvata nosač su bili prema sledećem: IL-4 = 6,406 pg/ml; IL-6 = 306 pg/ml; IL-10 = 10,987 pg/ml; IL-17A = 11,447 pg/ml; IFN-γ = 15,581 pg/ml; TNF-α = 76 pg/ml).
[0227] Sledeći odeljci predstavljaju pregled podataka koji su dobijeni od kultura koje su stimulisane sa Kolagenom II. Gde mogu da se primene, statističke analize razlike između nivoa citokina u supernatantima nestimulisanih i splenocita koji su stimulisani sa CII su sprovedene upotrebom dvosmerene ANOVA koju prati Sidakov post-test za višestruka poređenja, dok jednosmernu ANOVA koji prati Dunetov post-test je korišćen za poređenje odgovora koji je stimulisan sa CII u grupama koje su tretirane sa bioterapeutikom sa grupom koja je tretirana sa nosačem. Nije postojala značajna razlika u nivoima citokina između grupa u oba slučaja. Ovo je verovatno zbog male veličine korišćenog uzorka (n=3).
[0228] Da bi se preciznije prikazala distribucija podataka za citokine sa značajnim širenjem podataka, oni su prikazani u obliku grafika raspršenja.
[0229] Srednje vrednosti IL-4 grupe u supernatantima kulture tkiva posle stimulacije sa CII su < 5pg/ml. Oni se ne smatraju biološki značajnim i nisu ovde uključeni. Srednje vrednosti grupe TNF-α u supernatantima kulture tkiva posle stimulacije sa kolagenom su ispod granice za kvantitativno određivanje.
Nivoi IFN-γ u supernatantu (Slika 23)
[0230] Zajedno sa IL-17, IFN-γ je glavni citokin koji pokreće bolest u CIA modelu. Grafik raspršenja na Slici 23 pokazuje nivoe IFN-γ posle stimulacije sa CII, pri čemu je srednja vrednost grupe veća od grupe koja je tretirana sa nosačem u poređenju sa bioterapeutikom. Rezulatat koji je anomalija iz iste grupe 2 subjekta je odgovoran za veću medijanu u ovoj grupi za IFN-γ i IL-10.
Nivoi IL-17A u supernatantu (Slika 24)
[0231] Nivoi IL-17A su bili 50pg/ml u kulturama koje su stimulisane sa CII za grupu koja je tretirana sa nosačem. Nivoi ovog citokina izgledaju niži u bioterapeutskoj grupi u poređenju sa grupom koja je tretirana sa nosačem.
Nivoi IL-10 u supernatantima (Slika 25)
[0232] Nivoi IL-10 u grupi koja je tretirana sa nosačem su bili 13 pg/ml i 2.1 pg/ml za redom kulture koje su stimulisane sa CII, i kontrolne kulture koje sadrže medijum. Viši nivoi IL-10 (koji je antiinflamatorni citokin) za grupu koja je tretirana sa nosačem mogu da budu očekivani zbog toga što inflamacija i indukcija pro-inflamatornog citokina može da se postigne sa anti-inflamatornim povratnim mehanizmom.
Nivoi IL-6 u supernatantu (Slika 26)
[0233] Inflamatorni citokini kao što su IL-6 i TNF-α se uobičajeno ne proizvode na visokim nivoima u anti-CII kulturama. Međutim, njihovi nivoi mogu da budu izmenjeni kao rezultat imunske modulacije. Nivoi IL-6 u CII-stimulisanim kulturama su umereni, pri čemu dostižu 10pg/ml. Iako veći nego u kontrolnim kulturama koje sadrže medijum, ove razlike su bile previše male da bi obezbedile razlog za obavljanje statističkih analiza.
Mikrobiološka analiza
[0234] Bakterijski rast je potvrđen merenjem optičke gustine na 600 nm upotrebom spektofotometra. Bakterijski identitet je potvrđen poređenjem trakastih slika ploče sa referentnim slikama.
[0235] Nakon unapređenog postupka za bakterijsku pripremu, dosledno visoke doze bakterijskog soja su ordinirane od Dana -2 i Dana -3 kao što je naznačeno sa visokim izmerenim OD vrednostima.
[0236] Fekalni uzorci su sakupljeni i brzo su zamrznuti u Danu -14, Danu 0 i na kraju.
Histopatologija
[0237] Histopatološki rezultati su prikazani na Slikama 66-70. Kao što je očekivano za ovaj model, intraindividualna i inter-individualna varijabilnost je uočena u terminima prisustva/odsustva artritisa ili ozbiljnosti prisutnih promena.
[0238] Priroda patologije je kao što je očekivano za ovaj modela, sa intenzivnom pomešanom hroničnom-aktivnom inflamacijom sinovije i burse koji se proširuju da uključe peri-artikularna meka tkiva (mišić, adipozno tkivo, dermalni kolagen). U najteže pogođenim zglobovima postoji degeneracija zglobne hrskavice i gubitak sa intra-artikulatnim debrisom i inflamacijom i narušavanjem strukture zgloba i kosti sa fibrozom i inflamacijom.
[0239] Učestalost histopatoloških promena je bila: nosač -80% (16/20); Bioterapeutik #751 -45% (9/20). Tretman sa bioterapeutikom #751 je smanjio učestalost histopatoloških rezultata u zadnjim ekstremitetima kod miša kada se poredi sa grupom koja je tretirana sa nosačem (videti Slike 66-69). Histopatološki rezultati su analizirani jednosmernom ANOVA za ne-parametrijske podatke (KruskalWallis-ov test) zatim sa Dunovim post-testom za višestruka poređenja sa grupom koja je tretirana sa nosačem. Bioterapeutik #751 je indukovao značajno smanjenje rezultata inflamacije zgloba koji se uočavaju u histopatologiji kada se porede sa grupom koja je tretirana sa nosačem (p < 0.01). Bioterapeutik #751 je indukovao značajno smanjenje u rezultatima oštećenja hrskavice koji se uočavaju u histopatologiji kada se porede sa grupom koja je tretirana sa nosačem (p < 0.001). Bioterapeutik #751 je indukovao značajno smanjenje u rezultatima oštećenja kosti koje se uočavaju u histopatologiji kada se porede sa grupom koja je tretirana sa nosačem (p < 0.001). Bioterapeutik #751 je indukovao značajno smanjenje ukupnih histopatoloških rezultata kada se poredi sa grupom koja je tretirana sa nosačem (p < 0.01).
Pregled
[0240] Povećani klinički rezultati su uočeni od Dana 28 posle prvog ordiniranja tipa II kolagena, kao što je očekivano u ovom modelu artritisa kod DBA/1 miševa. Pokazano je da je bioterapeutik #751 efikasan u lečenju artritisa u ovom modelu i bioteraputik #751 je efikasan za smanjenje ozbiljnosti kliničkih rezultata. Bioterapeutik #751 je takođe bio efikasan za smanjenje patološke bolesti u zglobovima, kao što je pokazano u histopatološkoj analizi.
[0241] Podsetnik proliferativnih odgovora na kolagen II su uočeni u kulturama splenocita iz svih eksperimentalnih grupa. Kolagen-specifični odogovor je značajno smanjen nakon tretmana sa bioterapeutikom #751 (Grupa 2).
[0242] Većina od ispitanih citokina T ćelija su pokazali detektabilna povećanja između stimulisanih sa kolagenom II i kontrolama sa medijumom u grupi koja sadrži nosač. Ova povećana nisu bila tako očigledna u grupi koja je tretirana sa bioterapeutikom. Ovo široko podržava podsećanje poliferativnih odgovora na Kolagen II koji su gore opisani.
[0243] Postoji dokaz za supresiju Th1/Th17 ose, koji je patogeni odgovor u ovom modelu i u humanom RA. Korelaciija smanjenih nivoa citokina sa smanjenom proliferacijom ukazuje na imunsku modulaciju. Ne postoji dokaz da ova modulacija nastaje ili iz povećanih nivoa Th2 povezanog IL-4 ili sa povećanjem u citokinu koji vrši imunsku modulaciju, IL-10.
Primer 4 -Dalja analiza efekta bakterijskog inokuluma u mišjem modelu astme koja je indukovana sa grinjom iz kućne prašine
[0244] Miševi koji su ispitani u Primeru 1 su podvrgnuti daljim analizama da bi se dalje karakterisao efekat kompozicija iz pronalaska inflamatorni odgovor u alergijskoj astmi.
Materijali i postupci
[0245] Uzimanje krvi i priprema seruma u Danu 14. Uzorci krvi životinja su sakupljeni pomoću srčane punkcije. Serum je iz krvnog uzorka izolovan centrifugiranjem 5 min na 14000g i skladišten je na -20 °C.
[0246] Uklanjanje organa u danu 14. Sakupljanje levog režnja pluća u formalinu za histološku analizu koja će slediti. Sakupljanje desnih režnjeva pluća (svi preostali režnjevi) i uklanjanje seruma za brzo zamrzavanje i analizu koja sledi. Preostala BAL tečnost je brzo zamrznuta za analizu koja sledi.
Merenja nivoa antitela u serumu i BAL tečnosti
[0247] Proizvodnja ukupnog IgE i IgG1 antitela koje je specifično za grinju iz kućne prašine (HDM) je merena u BAL i serumu pomoću ELISA testa.
Izolacija pluća i histološka analiza
[0248] Levi plućni režnjevi su fiksirani u formalinu nakon čega su ukalupljeni u formalinu, isečeni, i obojeni sa hematoksilinom i eozinom i PAS. Naknadno histološko bodovanje je slepo izvedeno prema sledećem: Pet slučajnih polja pregleda po uzorku su bodovani za inflamaciju (peribronhijalna infiltracija i perivaskularna infiltracija) i proizvodnja mukusa. Inflamatorna infiltracija je bodovana prema sledećem sistemu ocenjivanja:
0 -normalno
1 – slabi inflamatorni infiltrati
2 –umereni inflamatorni infiltrati
3 –značajni inflamatorni infiltrati
4 –ozbiljni inflamatorni infiltrati
5 – veoma ozbiljni inflamatorni infiltrati
[0249] U svakom vidnom polju, disajni putevi su izmereni prema veličini i broj mukusnih ćelija je kvantifikovan u / um.
Merenja inflamatonih medijatora u plućnom tkivu
[0250] Desni režnjevi pluća (svi preostali režnjevi) izolovani za kvantifikaciju inflamatornih medijatora su brzo zamrznuti za kasnija merenja CCL11, IFN-gama, IL-1 alfa, IL-1 beta, IL-4, IL-5, IL-9, IL-17A, CXCL1, CCL3, CXCL2 i CCL5 upotrebom komercijalno dostupnog multipleks testa (Merck-Millipore). Analiza je izvedena prema uputstvima proizvođača.
Rezultati i analiza
[0251] Rezultati eksperimenata su prikazani na Slikama 28-46.
[0252] Da bi se podržali pronalasci koji su opisani u Primeru 1, analiza ćelijskih infiltrata u tkivu pluća miševa koji su tretirani sa sojem 751 pokazuju primetno i statistički značajno smanjenje u srednjoj vrednosti rezultata inflamacije (videti Slike 32 i 34).
[0253] Nivoi antitela u BAL tečnosti i serumu su analizirani (videti Slike 28-31). Nema uočenog jasnog efekta bakterijskog tretmana na nivoe antitela u serumu. Ovo može da ukaže na neuspeh eksperimenta, zbog toga što su širenje podataka i stupci greške za svaki treman veliki, izgleda da se i pozitivne i negativne kontrole ne ponašaju kao što je očekivano. Takođe, osnovni nivoi antitela u serumu bi mogli da maskiraju bilo kakve promene.
[0254] Slično tome, nije uočen jasni efekat bakterijskog tretmana na nivoe citokina u tkivu pluća (videti Slike 36-46). Ponovo, ovo može da ukaže na neuspeh eksperimenta, zbog toga što su širenje podataka i stupci greške za svaki treman veliki, izgleda da se i pozitivne i negativne kontrole ne ponašaju kao što je očekivano. Takođe je mogue da mehanizam delovanja uključuje uticaje ranijih odgovora citokina koji više ne mogu da se detektuju u danu 4 posle konačnog izazova disajnih puteva sa HDM. Potrebno je paziti na tumačenje podataka o citokinima u trenutnoj studiji, usled varijabilnosti u nivoima koji se uočavaju. Ova varijabilnost trreba delom da bude objašnjena činjenicom da je plućno tkivo odvojeno za različite analize, i prema tome jedan režanj pluća može da ne bude u potpunosti reprezentativan ili može da se poredi sa istim režnjem kod drugih miševa zbog neujednačene distribucije inflamacije. Primer 5 –Dalja analiza efekta bakterijskog inokuluma u mišjem modelu ozbiljne neutrofilne astme [0255] Miševi koji su ispitani u Primeru 2 su izloženi daljim analizama da bi se dalje karakterisao efekat kompozicije iz pronalaska na neutrofilni odgovor koji je povezan sa ozbiljnom astmom.
Materijali i postupci
[0256] Uklanjanje organa u danu 18. Sakupljanje režnja levog pluća u formalinu za histološku analizu koja sledi. Sakupljanje režnjeva denog pluća (svi preostali režnjevi) i uklanjanje seruma za brzo zamrzavanje i za analizu koja sledi. Preostala BAL tečnost je brzo zamrznuta za sledeću analizu.
[0257] Merenja inflamatornih medijatora u plućnom tkivu (analiza koja sledi). Desni plućni režnjevi (svi preostali režnjevi) koji su izolovani za kvantifikovanje inflamatornih medijatora su brzo zamrznui za naknadna merenja IFN-gama, IL-1 alfa, IL-1 beta, CXCL1, CCL3, CXCL2, CCL5, IL-17A, TNF-alfa, IL-17F, IL-23 i IL-33 upotrebom komercijalno dostupnog multipleks testa (Merck-Millipore). Analiza je sprovedena u skladu sa uputstvima proizvođača.
[0258] Merenja nivoa antitela u serumu i BAL tečnosti (za analizu koja sledi). Proizvodnja IgG1 i IgG2a antitela koja su specifična za grinje iz kune prašine je merena u BAL i serumu upotrebom ELISA testa.
[0259] Izolovanje pluća i histološka analiza (za analizu koja sledi). Levi plućni režnjevi su fiksirani u formalinu nakon čega su ukalupljeni u parafinu, isečeni na preseke, i obojeni sa hematoksilinom i eozinom i PAS. aknadno histološko bodovanje je slepo izvedeno prema sledećem: Pet slučajnih polja pregleda po uzorku su bodovani za inflamaciju (peribronhijalna infiltracija i perivaskularna infiltracija) i proizvodnja mukusa. Inflamatorna infiltracija je bodovana prema sledećem sistemu ocenjivanja 0 -normalno
1 – slabi inflamatorni infiltrati
2 –umereni inflamatorni infiltrati
3 –značajni inflamatorni infiltrati
4 –ozbiljni inflamatorni infiltrati
5 – veoma ozbiljni inflamatorni infiltrati
Rezultati i analiza
[0260] Rezultati eksperimenata su prikazani na Slikama 47-64.
[0261] Dalja analiza nivoa antitela je otkrila da se efikasnost bakterijskog soja 751 takođe reflektuje u smanjenim HDM-specifičnim IgG1 nivoima u BAL tečnosti i serumu (videti Slike 47 i 49). Čvrtsi zaključci u vezi sa efektom na nivoe IgG2a ne mogu da se podvuku. Sveukupno, podaci iz analize antitela sugerišu na smanjenje koje je povezano sa sveukupnim smanjenim inflamatornim odgovorom, nasuprot selektivnom efektu na izotipsko prekopčavanje antitela.
[0262] Histološka analiza je podržala različite brojeve ćelija iz BAL tečnosti, pri čemu pokazuje smanjeni ćelijki infiltrat kod miševa koji su tretirani sa sojem 751 (videti Slike 51-53).
[0263] U vezi sa nivoima citokina, na Primeru 4, širenje podataka i stupci greške za svaki tretman su veliki, i izgleda da pozitivne i negativne kontrole ne ponašaju kako se od njih neophodno očekuje.
4
Takođe je moguće da mehanizam delovanja uključuje uticaj ranijih odgovora citokina koji više ne mogu da se detektuju u danu 4 posle konačnog izazova disajnih puteva sa HDM. Potrebno je paziti na tumačenje podataka o citokinima u trenutnoj studiji, usled varijabilnosti u nivoima koji se uočavaju,. Ova varijabilnost može delom da se objasni činjenicom da j plućno tkivo odvojeno za različite analize, i prema tome jedan režanj pluća može da ne bude u potpunosti reprezentativan ili može da se poredi sa istim režnjem kod drugih miševa zbog neujednačene distribucije inflamacije. Uprkos ovoj varijabilnosti, jasan anti-inflamatorni efekat na nivoe citokina za soj 751 je prikazan, i pozitivno kontrolno anti-IL-17 At se generalno ponaša kao što je očekivano.
[0264] Sa gore navedenim upozirenjima, podaci na Slikama 56, 58, 59, 61 i 63 ukazuju da lečenje sa bakterijskim sojevima iz pronalaska, i posebno sojem 751 može da postigne smanjenje u nivoima IL-1b, IFNg, RANTES, MIP1a i KC (mišji ortolog humanog IL-8), koji može da bude indikator mehanizma delovanja koji je povezan sa uticajima na oslobađanje hemokina (i prema tome na regrutovanje ćelija) od stromalnih ili urođenih imunskih ćelija. Ovi citokini su deo Th17 puta. Uzimajući ovaj skup podataka zajedno, može se izvući jasan zaključak da je soj 751 visoko efikasan u zaštiti miševa od inflamacije u ovom mišjem modelu ozbiljne neutrofilne astme.
Primer 6 –Efikasnost bakterijskog inokuluma u mišjem modelu muliple skleroze
Suština
[0265] Miševima su ordinirane kompozicije koje obuhvataju bakterijske sojeve prema pronalasku i miševi su posle toga imunizovani sa mijelinskim oligodendrocitnim glikoproteinom da se indukuje eksprimentalni autoimunski encefalomijelitis (EAE). EAE je najčešće korišćeni eksperimentalni model za multple sklerozu. Pronađeno je da kompozicije iz pronalaska imaju upečatljivi efekat na pojavljivanje bolesti i ozbiljnosti simptoma bolesti.
Soj
[0266] 751: bakterija koja je deponovana pod pristupnim brojem NCIMB 42380
Dizajn studije
Grupe:
[0267]
1. Negativna kontrolna grupa. Tretman sa kontrolo koja sadrži nosač (po oralu).
4. Tretman sa terapeutskim bakterijskim inokulumom soja 751 (po oralu).
9. Poziivna kontrolna grupa. Tretman sa deksametazonom (i.p.).
10. Netretirana kontrolna grupa.
Broj miševa po grupi = 10
[0268] Dani -14 do dana 27: Dnevno ordiniranje kontrole nosača po oralu (Grupa 1).
[0269] Dani -14 do dana 27: Dnevno ordiniranje terapeutskog bakterijskog inokuluma po oralu (Grupa 4).
[0270] Dani 0-28: ordiniranje deksametazona (i.p.) tri puta nedeljno (Grupa 9)
[0271] Dan 0: MOG35-55 (mijelinski oligodendrocitni protein -2mg/ml) i CFA (2mg/ml MTB) su pomešani u odnosu 1:1 što rezultira u 1mg/ml rastvora. 100µl od smeše peptida-CFA je subkutano ubrizgano u svaku zadnju nogu. Peritonealno ordiniranje pertusis toksina (300ng).
[0272] Dan 1: Intraperitonalno ordiniranje pertusis toksina (300ng).
[0273] Dani 7-nadalje: Merenja pojavljivanja bolesti i težine tri puta nedeljno.
Krajnje tačke i analiza
[0274] Miševi su analizirani za pojavljivanje bolesti i ozbiljnosti stanja bolesti tri puta nedeljno. Bodovanje je slepo izvedeno. Ozbiljnost bolesti je ispitana upotrebom kliničkog bodovanja koje ima opseg od 0 do 5, sa 5 koje ukazuje na mrtvog miša (videti ispod sistem za kliničko bodovanje).
Praćenje
[0275] U nazačenim danima miševi su izmereni i uočeni za bodovanje akivnosti bolesti i pojavljivanja bolesti.
[0276] Rezultati zapaženja aktivnosti bolesti:
0 –Nema očiglednih promena u motornoj funkciji u poređenju sa ne-imunizovanim miševima. 0.5 –Vrh repa je opušten.
1.0 –Opušten rep.
1.5 -Opušten rep i inhibicija zadnje noge.
2.0 –Opušten rep i slabost zadnjih nogu.
-OR –Postoje uočljivi znaci nagiba glave kada se posmatra hodanje. Ravnoteža je slaba.
2.5 - Opušten rep i povlačenje zadnjih nogu.
-OR –prisutan je snažan nagib glave koji urzrokuje da miš povremeno padne na stranu.
3.0 - Opušten rep i potpuna paraliza zadnjih nogu.
3.5 - Opušten rep i potpuna paraliza zadnjih nogu.
Dodatno: Miš se kreće oko kaveza, ali kada se stavi po strani, nije u stanju da se ispravi. Zadnje noge su zajedno na jednoj strani tela.
4.0 - Opušten rep, paraliza cele zadnje noge i dela prednje noge.
-Miš se minimalno kreće oko kaveza ali deluje budno i spremno za hranjenje
4.5 –Potpuna paraliza zadnje i parcijalna paraliza prednje noge, bez kretanja oko kaveza. Miš je odmah eutanizovan i uklonjen je iz kaveza.
5.0 Miš je eutanizovan zbog ozbiljne paralize.
[0277] Kada životinja ima rezultat akivnosti bolesti koji je jednak ili veći 1, smatra se da ima pozitivan rezultat za pojavu bolesti.
Rezultati
[0278] Rezulati ispitivanja su prikazani na Slikama 71 i 72.
[0279] Indukcija bolesti u grupama negativne kontrole je bila uspešna sa visokim rezultatima koji su prikazani od kontrole sa nosačem i netretirane kontrole. Efekat tretmana sa sojem 751 je bio iznenađujući i miševi koji su tretirani sa sojem 751 su ispoljavali primetno smanjenu pojavu bolesti i ozbiljnosti simptoma bolesti. Zaista, smanjenje u pojavi bolesti i ozbiljnosti stanja bolesti može da se uporedi sa pozitivnom kontrolnom grupom. Ovi podaci ukazuju na to da soj 751 može da bude od koristi za lečenje ili prevenciju multiple skleroze.
Primer 7 –Efikasnost bakterijskog inokuluma u mišjim modelima kancera
Suština
[0280] Ova studija je ispitala efikasnost kompozicija koje obuhvataju bakterijske kompozicije prema pronalasku kod četiri modela tumora.
Materijali
[0281] Supstanca koja se ispituje – Bakterijski soj #MRX004 (soj 751).
[0282] Refrentna supstanca -Anti-CTLA-4 antitelo (klon: 9H10, katalog: BE0131, izotip: Syrian Hamster IgG1, Bioxcell).
[0283] Test i nosači referentne supstance – Medijum bakterijske kulture (Ekstrakt kvasca, Kasiton, medijum koji sadrži masne kiseline (YCFA)). Ubrizgavanje miševima svaki dan, antitelo je razblaženo sa PBS (ref: BE14-516F, Lonza, France).
[0284] Tretman doze -Bakterije: 2x10<8>u 200 µL. α-CTLA-4 je ubrizgan na 10 mg/kg/inj. Anti-CTLA-4 je ordiniran na dozi zapremine 10 mL/kg/adm (tj. za jednog miša koji ima težinu 20 g, ordinira se 200 µL supstance koja se ispituje) prema skoro izmerenoj telesnoj težini miševa.
[0285] Načini ordiniranja –Bakterijski inokulum je ordiniran oralnom gavažom (peroralno, PO) pomoću kanule. Kanule su svakog dana dekonaminirane. Anti-CTLA-4 je ubrizgan u peritonalnu šupljinu miševa (Intraperitonealno, IP).
[0286] Uslovi kulture bakerijskog soja –Uslovi kulture za bakterijski soj su bili prema sledećim:
• Pipetirati 10 mL YCFA (iz pripremljenog 10 mL E&O lab boce) u Hungatovim epruvetama
• Zatvoriti epruvete i isprati sa CO2koristeći ulazni i izlazni sistem šprica
• Autoklavirati Hungatove epruvete
• Kada se ohlade, inokulirati Hungatove epruvete sa 1 mL štoka glicerola
• Postaviti epruvete na 37°C u statični inkubator na oko 16 sati.
• Sledećeg dana, uzeti 1 mL od ove podkulture i inokulisati 10 mL od YCFA (prethodno zagrejane isprane Hungatove epruvete ponovo, sve u duplikatu)
• Postaviti ih na 37°C u statičnom inkubatoru na 5 do 6h
4
Ćelijska linija kancera i uslovi kulture
[0287] Ćelijske linije koje su korišćene su detaljno opisane u tabeli ispod:
[0288] EMT-6 ćelijska linija je uspostavljena od transplantabilnog mišjeg karcinoma grudi koji se pojavljuje kod BALB/cCRGL miša posle implantacije hiperplastičnog mlečnog alveolarnog čvora [73].
[0289] LL/2 (LLC1) ćelijska linija je uspostavljena iz pluća C57BL miša koji nosi tumor koji se razvija iz implantata primarnog Lewis-ovog karcinoma pluća [74].
[0290] Hepa 1-6 ćelijska linija je derivat BW7756 miškjeg hepatoma koji se razvija kod C57/L miša [75].
[0291] Uslovi ćelijske kulture – Sve ćelijske linije su gajene kao monosloj na 37°C u vlažnoj atmosferi (5% CO2, 95% vazduh). Medijum kulture i suplement su naznačeni u tabeli ispod:
[0292] Za eksperimentalnu upotrebu, adherentne tumorske ćelije su uklonjene iz posude u kojoj se nalazi kultura sa 5 minutnim tretmanom sa tripsin-versenom (ref: BE17-161E, Lonza), u Henkovom medijumu bez kalcijuma ili magezijuma (ref: BE10-543F, Lonza) i neutralizovane dodavanjem kompletnog medijuma za kulturu. Ćelije su izbrojane na hemocitometru i njihova vijabilnost je ispitana sa 0.25% tripan plavim ekskluzionim testom.
Upotreba životinja
[0293] Zdrave ženke Balb/C (BALB/cByJ) miševa, čije se težine i starosna dob poklapaju, su dobijene od CHARLES RIVER (L’Arbresles) za EMT6 model eksperimente.
[0294] Zdrave ženke C57BL/6 (C57BL16J) miševa, čije se težine i starosna dob poklapaju, su dobijene od CHARLES RIVER (L’Arbresles) za LL/2(LLC1) i Hepal-6 model eksperimente.
[0295] Životinje su gajene u SPF zdravstvenom statusu u skladu sa FELASA smernicama, i gajenje životinja i eksperimentalnim postupcima je izvedeno u skladu sa francuskim i evropskim regulacijama i NRC vodičem za brigu i korišćenje laboratorijskih životinja [76,77]. Životinje su gajene u sobama pod kontrolisanim uslovima iz spoljašnje sredine: Temperatura: 2262°C, Vlažnost 55610%, Fotoperiod (12h svetlo/12h mrak), HEPA filltrirani vazduh, 15 promena vazduha po satu bez recirkulacije.
Životinjskim kućištima je obezbeđen sterilan i adekvatan prostor sa materijalom za prostirku, hrana i voda, obogaćenje u spoljašnjoj i socijalnoj sredini (grupno gajenje) kao što je opisano: kavezi površine 900 cm<2>(ref: green, Tecniplast) u provetrenim stalcima, Epicea prostirka (SAFE),10 kGy ozračena hrana (A04-10, SAFE), potpuna hrana za imunski kompetentne glodare -R/M-H Ekstrudat, voda iz boce za vodu.
Eksperimentalni dizajn i tretmani
Antitumorska aktivnost, EMT6 model
[0296] Raspored tretmana - Početak prvog doziranja se smatra kao D0. U D0, miševi koji niu primili graft su slučajno raspoređeni prema njihovim individualnim telesnim težinama u grupe od po 9/8 upotrebom Vivo manager® softvera (Biosystemes, Couternon, France). U D0, miševi su primili nosač (medijum kulture) ili bakterijski soj. U D14, svi miševi u primili graft EMT-6 tumorskih ćelija kao što je opisano u tekstu ispod. U D24, miševi iz pozitivne kontrolne grupe u primili tretmane anti-CTLA-4 antitela.
[0297] Raspored tretmana je sažeto prikazan u tabeli ispod:
[0298] Praćenje životinja je spovedeno kao što je opisano u tekstu ispod.
[0299] Indukcija EMT6 tumora kod životinja - U D14, tumori su indukovani subkutanim ubrizgavanjem 1x10<6>EMT6 ćelija u 200 µL RPMI 1640 u desni bok miševa.
[0300] Eutanazija –Svaki miš je eutanizovan kada je dostigao humanu krajnju tačku kao što se opisuje u tekstu ispod, ili posle maksimuma 6 nedelja posle početka doziranja.
Antitumorska aktivnost, model LL/2 (LLC1)
[0301] Raspored tretmana –Početak prvog doziranja je smatran kao D0. U D0, miševi koji nisu primili graft su slučajno raspoređeni prema njihovim individualnim telesnim težinama u 7 grupa od 9/8 upotrebom Vivo manager® softvera (Biosystemes, Couternon, France). U D0, miševi će primiti nosač (medijum kulture) ili bakterijski soj. U D14, svi miševi su primili graft LL/2 tumorskih ćelija kao što je opisano u tekstu ispod. U D27, miševi iz pozitivne kontrolne grupe su primili tremane sa anti-CTLA4 antitelom.
[0302] Raspored tretmana je sažeto prikazan u tabeli ispod:
4
[0303] Praćenje životinja je izvedeno kao što je opisano u nastavku.
[0304] Indukcija LL/2 (LLC1) tumora u životinjama - U D14, tumori su indukovani sa subkutanim ubrizgavanjem 1x10<6>LL/2 (LLC1) ćelija u 200 µL RPMI 1640 u desni bok miša.
[0305] Eutanazija – Svaki miš je eutanizovan kada je dostigao humanu krajnju tačku kao što je opisano u tekstu ispod, ili posle maksimuma od 6 nedelja posle početka doziranja.
Antitumorska aktivnost, Hepa1-6 model
[0306] Raspored tretmana – Početkom prvog doziranja se smatra D0. U D0, miševi koji nisu primili graft su slučajno raspoređeni prema njihovim individualnim telesnim težinama u 7 grupa od 9 upotrebom Vivo manager® softvera (Biosystemes, Couternon, France). U D0, miševi su primili nosač (medijum kulture) ili bakterijski soj. On D14, svi miševi su primili graft sa Hepa 1-6 tumorskih ćelija kao što je opisano u tekstu ispod. U D16, miševi iz pozitivne kontrolne grupe su primili tretmane sa anti-CTLA-4 antitelom.
[0307] Raspored tretmana je sažeto prikazan u tabeli ispod:
[0308] Praćenje životinja je izvedeno kao što je opisano u nastavku.
[0309] Ortotopska indukcija Hepa 1-6 tumorskih ćelija u životinjam pomoću intraspleničnog ubrizgavanja - U D14, jedan milion (1x10<6>) Hepa 1-6 tumorskih ćelija u 50 µL RPMI 1640 medijuma su transplantirani preko intra-splenčnog ubrizgavanja u miševe. Ukratko, napravljen je mali rez na boku ispod rebra i slezina je izložena. Slezina je izložena na sterilnoj podlozi od gaze, i pod vidnom kontrolom je ubrizgana sa ćelijskom suspenzijom sa iglom veličine šprica 27. Posle inokulacije ćelija, slezina je isečena.
[0310] Eutanazija - Svaki miš je eutanizovan kada je dostigao humanu krajnju tačku kao što je opisano u tački ispod, ili posle maksimuma od 6 nedelja posle početka doziranja.
[0311] Procena opterećenja tumorom na eutanaziji – Na vremenu terminacije, slezine su sakupljene i izmerene.
4
Praćenje životinja
[0312] Kliničko praćenje –Dužina i širina tumora je merena dva puta nedeljno sa šublerima i zapremina tumora je procenjena pomoću sledeće formule [78]:
Zapremina tumora = širina<2>X dužina
[0313] Humane krajnje tačke [79]: Znakovi bola, patnje ili nevolje: bolno držanje, bolna maska za lice, ponašanje; Tumori koji prelaze 10% od normalne telesne težine, ali ne prelaze preko 2000 mm<3>; Tumori koji ometaju ambulaciju ili ishranu; Ulcerisani tumor ili erozija tkiva; 20% gubitak u telesnoj težini ostaje tokom 3 uzastopna dana; Slaba kondicija tela, iznurenost, kaheksija, dehidracija; Produženo odsustvo voljnih odgovora na spoljašnje stimuluse; Brzo otežano disanje, anemija, značajno krvarenje; Neurološki znakovi: kruženje, konvulzije, paraliza; odloženo smanjenje u telesnoj temperaturi; Abdominalna distenzija.
[0314] Anestezija – Anestezija gasom izofluranom se koristi za sve postupke: operaciju ili inokulaciju tumora, i.v. injekcije, sakupljanje krvi. Anestezija ketaminom i ksilazinom su korišćene za stereotaksiju hirurškog postupka.
[0315] Analgezija - Karprofen ili multimodalni protokol karprofen/buprenorfin analgezije su podešeni u skladu sa ozbiljnosti irurškog postupka. Ne-farmakološka briga je obezbeđena za sve bolne postupke. Dodatno, farmakološka briga koja nije interferirala sa ispitivanjima (lokalni tretman) je pružena po preporuci prisutnog veterinara.
[0316] Eutanazija –Eutanazija životinja je izvedena upotrebom anestezije prekomerne doze gasa (Izoflurana) nakon čega sledi cervikalna dislokacija ili iskrvarenje.
Rezultati
Antitumorska aktivnost, EMT6 model
[0317] Rezultati su prikazani na Slici 73. Tretman sa bakterijskim sojem iz pronalaska je doveo do jasnog smanjenja u zapremini tumora u odnosu na obe negativne kontrole. Pozitivn kontrola je takođe dovela do smanjenja u zapremini tumora, kao što je bilo očekivano.
Antitumorska aktivnost, LL/2 (LLC1) model
[0318] Rezultati su prikazani na Slici 74. Negativne i pozitivne kontrole ne izgledaju kao što je očekivano, zbog toga što je zapremina tumora bila veća kod miševa koji su tretirani sa pozitivnom kontrolom nego u negativnim kontrolnim grupama. Osim toga, zapremina tumora kod miševa koji su tretirani sa bakterijskim sojem iz pronalaska je bila uporediva sa pozitivnom kontrolnom grupom, što je konzistentno sa korisnim terapeutskim efektom.
Antitumorska aktivnost, Hepa1-6 model
[0319] Rezultati su prikazani na Slici 75. Netretirana negativna kontrola ne izgleda kao što je očekivano, zbog toga što je težina jetre bila niža u ovoj grupi nego u drugim grupama. Međutim, nosač negativne kontrole i pozitivnih kontrolnih grupa oba deluju kao što je očekivano, zbog toga što su miševi koji su tretirani samo sa nosačem imali veće jetre od miševa koji su tretirani sa anti-CTLA4 antitelima, što odražava veće opterećenje tumorom u nosaču negativne kontrolne grupe. Tretman sa bakterijskim sojem i pronalaska dovodi do očiglednog smanjenja u veličini jetre (i prema tome operećnju tumorom) u odnosu na miševe u negativnoj kontrolnoj grupi koja obuhvata nosač.
4
[0320] Ovi podaci ukazuju da soj 751 / MRX004 može da bude koristan za lečenje ili prevenciju kancera, i posebno za smanjenje zapremine tumora u grudima, plućima i kancerima jetre.
Primer 8 – Vezivanje za humane ćelije u YCFA medijumu
Suština
[0321] Nivo vezivanja soja 751 i broj Bifidobacterium breve sojeva prema humanim ćelijama je određen na 3 različite tačke u YCFA medijumu. Bakterije koje su vezane za humane ćelije su resuspendovane u medijumu i posle toga je analizirana optička gustina medijuma – što je veća optička gustina, broj bakterijskih ćelija je veći i prema tome, veći je nivo vezivanja bakterijskih ćelija za humane ćelije. Pronađeno je da soj 751 ispoljava smanjeno vezivanje za humane ćelije u poređenju sa Bifidobacterium breve referentnim sojevima.
Rezultati i analiza
[0322] Rezultati eksperimenta su prikazani na Slici 76.
[0323] Kao što je prikazano na Slici 76, Bifidobacterium breve sojevi pokazuju visok nivo vezivanja za humane ćelije u svim vremenskim tačkama. Sa druge strane, 751 soj je imao drastično smanjeni nivo vezivanja za humane ćelije. Prema tome, nisko vezivanje za humane ćelije soja 751 može da poveća korisni efekat kompozicija iz pronalaska na IL-17 ili na Th17 put i na bolesti koje su posredovane sa IL-17 ili sa Th17 putem.
Primer 9 –Test kojim se detektuje proizvodnja egzopolisaharida
Suština
[0324] Nivo proizvodnje egzopolisaharida (EPS) od strane bakterijskog soja (751) iz pronalaska i broj Bifidobacterium breve sojeva je analiziran na 37°C tokom 48 sati i na 30°C tokom 72 sata. EPSs su polisaharidi proizvedeni od određenih bakerija koji se vezuju za spoljašnju površinu bakterijske ćelije. Nivoi EPSs na površini bakterija može da se odredi upotrebom Congo Red testa koji se vezuje za polisaharide. Veći intenzitet Congo Red absorbancije ukazuje na veće koncentracije EPSs na površini bakterija. Pronađeno je da bakterijski soj iz pronalaska proizvodi i vezuje više EPSs u odnosu na Bifidobacterium breve sojeve.
Rezultati i analiza
[0325] Rezultati ovog eksperimenta su prikazani na Slici 77.
[0326] Kao što je prikazano na Slici 77, bakterijski soj i pronalaska pokazuje veću Congo Red absorbancu nego Bifidobacterium breve sojevi na obe temperature u vremenskim tačkama. Prema tome, soj iz pronalaska ispoljava veću proizvodnju EPS i veći nivo vanćelijskog vezivanja za EPSs. Kako EPSs omogućava bakterijama da se vežu za mukus i epitelne ćelije, bakerijski soj iz pronalaska može da bude koristan za kompeticiju sa patogenim ćelijama za mesta za vezivanje na epitelnim ćelijama i unutar mukoznih membrana. Prema tome, bakterijski soj iz pronalaska može da bude koristan za modulaciju mikrobioma i za lečenje brojnih bolesti koje su povezane sa mikrobiomom.
Primer 10 – Ispitivanje stabilnosti
[0327] Ovde opisana kompozicija koja sadrži najmanje jedan bakterijski soj koji je ovde opisan se skladišti u zatvorenom kontejneru na 25°C ili 4°C i kontejner je postavljen u atmosferu koja ima 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 75%, 80%, 90% ili 95% relativnu vlažnost. Posle 1 meseca, 2 meseca, 3 meseca, 6 meseci, 1 godine, 1.5 godine, 2 godine, 2.5 godine ili 3 godine, najmanje 50%, 60%, 70%, 80% ili 90%
4
bakterijskog soja će ostati kao što je izmereno u jedinicama koje obrazuju kolonije što je određeno standardnim protokolima.
Primer 11 –test za merenje proizvodnje MRX004 vezanog i oslobođenog egzopolisaharida
[0328] Za ekstrakciju EPS, MRX004 je gajen u kulturi u 10 ml YCFA sve dok nije dotigao eksponencijalnu fazu, kada su bakterijske ćelije i supernatanti razdvojei centrifugiranjem. Ćelije su jednom isprane sa PBS da bi se uklonio bilo koji preostali medijum. Sekretovani ili oslobođeni EPS (EPS-R) je precipitiran iz supernatanata kulture tretmanom sa ledeno hladnim 100 % etanolom (preko noći na 4°C sa nežnim mešanjem). Da bi se ekstrahovao kapsularni ili vezani EPS (EPS-B), ćelije su inkubirane sa 0.05 M EDTA (preko noći na 4 °C sa nežnim mešanjem), i supernatanti iz ovog tretmana su sakupljeni i nakon toga su tretirani sa 100 % ledeno hladnim etanolom (preko noći na 4 °C sa nežnim mešanjem) da bi se istaložio EPS-B. Istaloženi EPS-B i EPS-R su peletirani centrifugiranjem i omogućeno je da se kratko osuše ispod laminara pre nego što su reuspendovani u dovoljno sterilnoj Ultračistoj vodi da bi se dobio jednoobrazni rastvor. Da bi se uzorci dalje prečistili, oni su dijalizirani prema sterilnoj Ultračistoj vodi u odnosu od 1:100 tokom 48 sati sa 3 izmene pufera. EPS-B i EPS-R su kvantifikovani upotrebom postupka fenol-sumporne kiseline korišćenjem glukoze kao standarda. Korišćenjem ovog testa, pronađeno je da MRX004 proizvodi veću količinu EPS-R (115 µg) od EPS-B (17 µg) (Slika 78).
Primer 12 – Test vezivanja MRX004 za Caco-2 ćelije
[0329] Vezivanje MRX004 za ćelije domaćine je analizirano upotrebom in vitro testa ko-kulture sa Caco-2 intestinalnim epitelnim ćelijama. Caco-2 ćelije su zasejane na gustini od 1 x 10 Bakteria u gajene u kulturi u 10 ml YCFA sve dok nisu dostigli kasnu ekspnencijalnu fazu, kada su peletirane, isprane dva puta sa PBS, i resuspendovane u medijumu ćelijske kulture koje su oslobođene antibiotika. Bakterijka gustina je prilagođena da se dobije približna mnoštvu infekcije (MOI) od 10:1 (koja je potvrđena zasejavanjem na YCFA agru upotrebom WASP standardnog protokola), i MRX004 je istovremeno inkubiran sa Caco-2 ćelijama u anaerobnim uslovima na 37°C tokom 2 sata. Medijum je nakon toga uklonjen, i nevezane bakterije su uklonjene ispiranjem sa Caco-2 ćelijama three tri puta sa PBS. Bakterija koje su vezane za Caco-2 ćelije su lizirane i uklonjene iz posude pomoću tretmana sa 0.1 % Triton X-100, i zapremine od 50 µl razblaženog lizata su zasejane u YCFA agru upotrebom WASP. Vezivanje je izračunato brojanjem bakterija koje su se oporavile iz lizata i eksprimiranjem broja kao procenta ukupnih bakterija. Pronađeno je da MRX004 ispoljava vezivanje niskog-intenziteta (0.3 % ukupne kulture) sa Caco-2 ćelijama (Slika 79).
Primer 13 – Karakterizacija enzimske aktivnosti
[0330] Test indeksa analitičkog profila (API®) se sastoji iz traka koje sadrže minijaturne biohemijske testove kojima se ispituje enzimska aktivnost u bakterijskim vrstama. MRX004 (soj 751, bakterija koja je deponovana pod pristupnim brojem NCIMB 42380) je karakterisana upotrebom dva API test sistema: Rapid ID 32A –Ovaj sistem je dizajniran specifično za anaerobne vrste i obuhvata testove za ugljene hidrate, aminokiseline i metabolizam azota kao i aktivnost alkalne fosfataze; i API® 50 CH –Ovaj sistem ispituje fermentaciju 49 izvora ugljenih hidrata, i može da se koristi zajedno sa API® CHL medijumom za analizu anaerobnih vrsta.
[0331] Brzo testiranje ID 32A je izvedeno na bakterijskim kolonijama prema uputstvima proizvođača. Ukratko, bakterije su gajene u kulturi na YCFA agru tokom 24 časova na 37 °C u anaerobnom radnom prostoru. Kolonije su uklonjene sa ploča upotrebom sterilne inokulacione petlje zapremine 5 µl i resuspendovane su u zapremini od 2 ml ampule API® medijuma za suspenziju sve dok nije postignuta gustina koja je grubo jednaka sa McFarland-ovim standardom Br. 4. Pedeset i pet mikrolitara bakterijske suspenzije je dodato na svaku kupulu na Rapid ID 32A traci, i ureaza test je prekriven sa dve
4
kapi mineralnog ulja. Trake su pokrivene sa plastičnim poklopcem i anaerobno su inkubirane na 37 °C tokom 4 sata, nkon čega su donji redovi kupula razvijeni upotrebom sledećih reagenasa: NIT: 1 kap svakog NIT1 i NIT2; IND: 1 kap James-ovog reagensa; sve preostale kupule: 1 kap FastBlue reagensa. Trake su inkubirane na sobnoj temperaturi tokom 5 minuta, nakon čega je snimljena boja svake kupule i dodeljena je vrednost negativna, srednje pozitivna ili pozitivna.
[0332] Rezultati Rapid ID 32A analize su prikazani na Slici 80. MRX004 je pozitivno testiran za fermentaciju nekoliko izvora ugljenih hidrata, uglavnom α-galaktozidaze i β-galaktozidaze, αglukozidaza i β-glukozidaza, α-arabinza, manoza i rafinoza, kao i aminokiseline arginin, prolin, fenilalanin, leucin, tirozin, glicin i histidin. Interesantno, uloge nekih od ovih aminokiselina su prijavljene u astmi. Na primer, povećane koncentracije fenilalanina i histidina u plazmi su prijavljene da su povezane sa štetnim efektima u astmi, uključujui povećanu inflamaciju, proizvodnju histamina i hiperosetljivost disajnih puteva. Dodatno, metabolizam arginina je uključen u patogenezi astme, kao što su povećani nivoi metabolita arginina L-ornitina prijavljeni kod pedijatrijskih pacijenata, i ordiniranje arginina je ublažilo inflamaciju u in vivo modelu astme. Na osnovu ovih izveštaja, moguće je da metabolizam aminokiselina od strane MRX004 može da bude uključen u anti-astma efekte ovog soja.
[0333] Komparativna Rapid ID 32A analiza je izvedena između MRX004 i četiri sojeva B. breve tipa, koji su označeni na Slici 80B kao Bif Ref 1 (DSM 20091), Bif Ref 2 (DSM 20213), Bif Ref 6 (JCM 7017) i Bif Ref 7 (UCC2003). Ova analiza pokazuje da je MRX004 bio jedini soj koji je ispitan da fermentiše polisaharid rafinozu, koji može da bude od značaja, zbog toga šo je rafinoza uključena u proizvodnju bakterijskih komponenata kao što su egzopolisaharidi, i fermentacija rafinoze može da potvrdi efekte na domaćinu kao što je povećani butirat u cekumu, povećana gastrointestinalna proliferacija i gubitak težine.
[0334] API® 50 CH ispitivanje je izvedeno kako bi se dalje ispitao metabolizam ugljenih hidrata u MRX004. Prema uputstvima proizvođača, bakterije su gajene u kulturi u 10 ml YCFA supi tokom 16-18 časova na 37°C u anarerobnom radnom prostoru. Ova kultura je razblažena u 10 ml API® CHL Medijumu sa se postigne gustina koja je grubo jednaka sa McFarland standard No. 2, i 110 µl iz ove smeše je korišćeno za inokulaciju svake kupule na skupu API® 50 CH traka za ispitivanje. Trake za ispitivanje su inkubirnae u vlažnoj kutiji za inkubaciju na 37 °C u anaerobnom radnom prostoru na 48 hours, nakon čega je boja svake kupule zabeležena i dodeljena joj je vrednost negativne, srednje pozitivne, pozitivne ili sumnjivo.
[0335] Uporebom API® 50, MRX004 je testiran pozitivan za upotrebu sledećih izvora ugljenih hidrata: amidon (skrob), amigdalin, arbutin, celobioza, eskulin, galaktoza, gentiobioza, glukoza, glikogen, fruktoza, fukoza, laktoza, maltoza, manoza, manitol, melibioza, melezitoza, metil α-D-glukopiranozid, N-acetilglukozamin, riboza, saharoza (sukroza), salicin, sorbitol, trehaloza, turanoza i ksilitol. Ovi rezultati se nalaze u korelaciji sa onim koji su dobijeni za Rapid ID 32A ispitivanje tako da MRX004 pokazuje fermentaciju galaktoze, glukoze, manoze i rafinoze kod oba test sistema. Interesantno, neki MRX004 izvori ugljenih hidrata, uglavnom galakoza i fruktoza, mogu da budu uključeni u mehanizam delovanja ovog soja, na osnovu njihovi prijavljenih efekata u literaturi. Galaktoza α-1,3-galaktoza koja je dobijena iz izvora mesa je poznati alergen i uzročni agens anafilakse, i niovi unosa hranljive fruktoze se nalaze u korelaciji sa povećanom ozbiljnosti simptoma astme. Oba seta API® podataka koji se uzimaju zajedno za MRX004 ukazuju na to da metabolizam ovog soja može da igra ulogu u njegovim anti-astma efektima.
Primer 14 – Analiza genoma
[0336] Poređenje sadržaja genom iz soja MRX004 i referentnih sojeva B. breve, 1, 2, 6 i 7 je izvedno upotrebom blastn kao dela BLAST+ 2.3.0 paketa programa. U toku analize je korišćen maksimum E-vrednosti „cut-off“ rezultata 10E-5 je korišćen tokom analize.
[0337] Identifikovano je 333 gena (Tabela 1) koji se nalaze u genomu soja MRX004 ali su odsutni od B. breve referentnog soja 1 (DSM 20091), 2 (DSM 20213), 6 (JCM 7017) i 7 (UCC2003). Mnogi od gena koji su navedeni u Tabeli 1 se često posmatraju kao hipervarijabilni između B. breve sojeva [80]. Kao što je očekivano, regioni varijabilnosti uključuju gene koji kodiraju za proteine koji su uključeni u metabolizam i transport ugljenih hidrata, geni koji su povezani sa fagom, mobilni elementi, kao 173 gena koji su predviđeni da kodiraju proteine gena čija je funkcija nepoznata.
[0338] Geni koji us priustni u MRX004 ali su odutni od B. breve referentnih sojeva 1, 2, 6 i 7 su navedeni u Tabeli 1. Geni koji nisu istaknuti u odsutni u više od jednog od četiri referentna sojeva. Veliki broj gena koji su prisutni u MRX004 ali nisu prisutni u brojnim B. breve referennim sojevima ukazuju da se MRX004 razlikuje od i/ili može da se razlikuje od ovih poznatih B. breve sojeva. Geni koji su istaknuti sa jednim podvlačenjem su prisutni u MRX004 ali su odsutni u B. breve referentnom soju 1. Geni koji su istaknuti sa dvostrukim podvlačenjem i masnim slovima su prisutni u MRX004 ali su odsutni u B. breve referentnom soju 2. Geni koji su istaknuti sa kosim slovima su prisutni u MRX004 ali su odsutni u B. breve referentnom soju 6. Maksimum E-vrednosti „cut-off“ rezultat od 10E-5 je korišćen za blastn analizu.
Tabela 1
1
2
4
Sekvence
[0339]
SEQ ID NO:1 (konsenzusna 16S rRNK sekvenca za soj 751)
SEQ ID NO:2 (genomska sekvenca soja 751) –videti elektronsku listu sekvenci WO 2016/203223
REFERENCE
[0340]
[1] Spor et al. (2011) Nat Rev Microbiol.9(4):279-90.
[2] Eckburg et al. (2005) Science.10;308(5728):1635-8.
[3] Macpherson et al. (2001) Microbes Infect.3(12):1021-35
[4] Macpherson et al. (2002) Cell Mol Life Sci.59(12):2088-96.
[5] Mazmanian et al. (2005) Cell 15;122(1):107-18.
[6] Frank et al. (2007) PNAS 104(34):13780-5.
[7] Scanlan et al. (2006) J Clin Microbiol.44(11):3980-8.
[8] Kang et al. (2010) Inflamm Bowel Dis.16(12):2034-42.
[9] Machiels et al. (2013) Gut.63(8):1275-83.
[10] WO 2013/050792
[11] WO 03/046580
[12] WO 2013/008039
[13] WO 2014/167338
[14] Goldin and Gorbach (2008) Clin Infect Dis.46 Suppl 2:S96-100.
[15] Azad et al. (2013) BMJ.347:f6471.
[16] Masco et al. (2003) Systematic and Applied Microbiology, 26:557-563.
[17] Srutková et al. (2011) J. Microbiol. Methods, 87(1):10-6.
[18] Ye et al. (2015) PLoS One.10(1):e0117704.
[19] Fabro et al. (2015) Immunobiology.220(1):124-35.
[20] Yin et al. (2014) Immunogenetics.66(3):215-8.
[21] Cheluvappa et al. (2014) Clin Exp Immunol.175(2):316-22.
[22] Schieck et al. (2014) J Allergy Clin Immunol.133(3):888-91.
[23] Balato et al. (2014) J Eur Acad Dermatol Venereol.28(8):1016-24.
[24] Monteleone et al. (2011) BMC Medicine.2011, 9:122.
[25] Fahy (2009) Proc Am Thorac Soc 6.256-259
[26] Miossec and Kolls (2012) Nat Rev Drug Discov.11(10):763-76.
[27] Yang et al. (2014) Trends Pharmacol Sci.35(10):493-500.
[28] Koenders et al. (2006) J. Immunol.176:6262-6269.
[29] Amedei et al. (2012) Int J Mol Sci.13(10):13438-60.
[30] Shabgah et al. (2014) Postepy. Dermatol. Alergol.31(4):256-61.
[39] Numasaki et al. (2003) Blood.101:2620-2627.
[40] Zhang et al. (2008) Biochem. Biophys. Res. Commun.374: 533-537.
[41] Karin (2006) Nature.441: 431-436.
[42] Faghih et al. (2013). Iranian Journal of Immunology.10(4):193-204.
[43] Numasaki et al. (2005) J. Immunol.175: 6177-6189
[44] Hammerich and Tacke (2014) Clin Exp Gastroenterol.7:297-306.
[45] Haabeth et al. (2012) OncoImmunology 1(1):1146-1152.
[46] Lejeune et al. (2006) Cancer Immun.6:6
[47] Pace et al. (1983) PNAS.80:8782-6.
[48] Sgadari et al. (1996) PNAS.93:13791-6.
[49] Arenberg et al. (1996) J. Exp. Med.184:981-92.
[50] Sgadari et al. (1997) Blood.89:2635-43.
[51] Miyamoto-Shinohara et al. (2008) J. Gen. Appl. Microbiol., 54, 9-24.
[52] Cryopreservation and Freeze-Drying Protocols, ed. by Day and McLellan, Humana Press.
[53] Leslie et al. (1995) Appl. Environ. Microbiol.61, 3592-3597.
[54] Mitropoulou et al. (2013) JNutr Metab. (2013) 716861.
[55] Kailasapathy et al. (2002) Curr Issues Intest Microbiol.3(2):39-48.
[56] Handbook of Pharmaceutical Excipients, 2nd Edition, (1994), Edited by A Wade and PJ Weller [57] Remington’s Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Co. (A. R. Gennaro edit.1985)
[58] Handbook of Microbiological Media, Fourth Edition (2010) Ronald Atlas, CRC Press.
[59] Maintaining Cultures for Biotechnology and Industry (1996) Jennie C. Hunter-Cevera, Academic Press
[60] Strobel (2009) Methods Mol Biol.581:247-61.
[61] Gennaro (2000) Remington: The Science and Practice of Pharmacy. 20th edition, ISBN: 0683306472.
[62] Molecular Biology Techniques: An Intensive Laboratory Course, (Ream et al., eds., 1998, Academic Press).
[63] Methods In Enzymology (S. Colowick and N. Kaplan, eds., Academic Press, Inc.)
[64] Handbook of Experimental Immunology, Vols. I-IV (D.M. Weir and C.C. Blackwell, eds, 1986, Blackwell Scientific Publications)
[65] Sambrook et al. (2001) Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 3rd edition (Cold Spring Harbor Laboratory Press).
[66] Handbook of Surface and Colloidal Chemistry (Birdi, K.S. ed., CRC Press, 1997)
[67] Ausubel et al. (eds) (2002) Short protocols in molecular biology, 5th edition (Current Protocols).
[68] PCR (Introduction to Biotechniques Series), 2nd ed. (Newton & Graham eds., 1997, Springer Verlag)
[69] Current Protocols in Molecular Biology (F.M. Ausubel et al., eds., 1987) Supplement 30
[70] Smith & Waterman (1981) Adv. Appl. Math.2: 482-489.
[71] Brand et al. (2007) Nature Protocols.2(5):1269-1275
[72] Jiao et al. (2014) Immunopathology and Infectious Diseases.184(4): 1085-93.
[73] Rockwell et al., (1972) J Natl Cancer Inst.49:735-49.
[74] Bertram and Janik (1980) Cancer Lett.11:63-73.
[75] Darlington (1987) Meth Enzymol.151:19-38.
[76] Principe d’ethique de l’expérimentation animale, Directive n°2010/63 CEE 22nd September 2010, Décrêt n°2013-1181st February 2013.
[77] Guide for the Care and Use of Laboratory Animals: Eighth Edition. The National Academies Press; 2011
[78] Simpson-Herren and Lloyd (1970) Cancer Chemother Rep.54:143-74.
[79] Workman et al. (2010) Br. J. Cancer.102:1555-77.
[80] Bottacini et al (2014) BMC Genomics. 15:170, DOI: 10.1186/1471-2164-15-170, PMID: 24581150
IZOVOĐENJA PREMA OPISU
[0341]
1. Kompozicija koja sadrži bakterijski soj deponovan pod pristupnim brojem NCIMB 42380 ili njegov biotip, za upotrebu u postupku lečenja ili prevencije bolesti ili stanja posredovanih IL-17 ili Th17 putem.
2. Kompozicija prema izvođenju 1, gde je kompozicija za upotrebu u lečenju ili sprečavanju bolesti ili stanja izabranih iz grupe koju čine astma, kao što je alergijska astma ili neutrofilna astma; artritis, kao što je reumatoidni artritis, osteoartritis, psorijatički artritis, ili juvenilni idiopatski artritis; multiple skleroza; neuromijelitis oka (Devikova bolest); ankilozirajući spondilitis; spondiloartritis; psorijaza; sistemski lupus eritematozus; inflamatornu bolest creva, kao što je Kronova bolest ili ulcerativni kolitis; celijakija; hronična opstruktivna bolest pluća (COPD); kancer, kao što je kancer grudi, kancer debelog creva, kancer pluća ili kancer ovarijuma; uveitis; skleritis; vaskulitis; Behetovu bolest; aterosklerozu; atopični dermatitis; emfizem; periodontitis; alergijski rinitis; i odbacivanje alografta.
3. Kompozicija prema izvođenju 2, gde je kompozicija za upotrebu u postupku lečenja ili prevencije astme, kao što je neutrofilna astma ili alergijska astma .
4. Kompozicija prema izvođenju 3, gde je kompozicija za upotrebu u postupku smanjenja neutroflije ili eozinofilije pri lečenju astme .
5. Kompozicija prema izvođenju 2, gde je kompozicija za upotrebu u postupku lečenja ili prevencije reumatoidnog artritisa.
6. Kompozicija prema izvođenju 5, gde je kompozicija za upotrebu u postupku smanjenja oticanja zgloba kod reumatoidnog artritisa.
7. Kompozicija prema izvođenju 2, gde je kompozicija za upotrebu u postupku lečenja ili prevencije multiple skleroze.
8. Kompozicija prema izvođenju 7, gde je kompozicija za upotrebu u postupku smanjenja javljanja bolesti ili ozbiljnog stanja bolesti .
9. Kompozicija prema izvođenju 2, gde je kompozicija za upotrebu u postupku lečenja ili sprečavanja kancera, kao što je kancer pluća, kancer grudi ili kancer jetre.
10. Kompozicija prema izvođenju 9, gde je kompozicija za upotrebu u postupku smanjenja veličine tumora, smanjenje rasta tumora, sprečavanja metastaza ili sprečavanja angiogeneze.
11. Kompozicija prema izvođenju 2, gde je kompozicija za upotrebu u postupku lečenja ili sprečavanja uveitisa.
12. Kompozicija prema izvođenju 11, gde je kompozicija za upotrebu u postupku smanjenja ili sprečavanja oštećenja retine kod uveitisa .
13. Kompozicija prema bilo kom od prethodnih izvođenja, gde je kompozicija za upotrebu u postupku smanjenja proizvodnje IL-17 ili smanjenja ćelijske diferencijacije Th17 pri lečenju ili sprečavanju bolesti ili stanja u kojima posreduje IL-17 ili Th17 put.
1
14. Kompozicija prema bilo kom izvođenju, gde je kompozicija za upotrebu kod pacijenta sa povećanim IL-17 nivoima ili Th17 ćelijama.
15. Kompozicija prema bilo kom izvođenju, gde biotip ima16s rRNK sekvencu koja je bar 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 99.5% ili 99.9% identična sa 16s rRNK sekvencom bakterije deponovane pod pristupnim brojem NCIMB 42380.
16. Kompozicija prema bilo kom od izvođenja 1-14, gde biotip ima 16s rRNK sekvencu koja je bar 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 99.5% ili 99.9% identična sa SEQ ID NO: 1.
17. Kompozicija prema bilo kom izvođenju, gde je kompozicija za oralno davanje .
18. Kompozicija prema bilo kom izvođenju, gde kompozcija sadrži jedan ili više farmaceutski priihvatljivih ekscipijenata ili nosača .
19. Kompozicija prema bilo kom izvođenju, gde je bakterijski soj liofilizovan.
20. Prehrambeni proizvod koji sadrži kompoziciju prema bilo kom izvođenju, za upotrebu prema bilo kom od prethodnih izvođenja .
21. Kompozicija vakcine koja sadrži kompoziciju prema bilo kom izvođenju, za upotrebu prema bilo kom od prethodnih izvođenja.
22. Postupak lečenja ili prevencije bolesti ili stanja posredovanih sa IL-17 ili Th17 putem, koji obuhvata davanje kompozicije koja sadrži bakteriju deponovanu pod pristupnim brojem NCIMB 42380 ili njegov biotip.
23. Ćelija bakterije deponovana pod pristupnim brojem NCIMB 42380, ili njen derivat.
24. Kompozicija koja sadrži ćeliju prema izvođenju 23.
25. Kompozicija prema izvođenju 24, koja sadrži farmaceutski prihvatljiv nosač ili ekscipijent .
26. Biološki čista kultura bakterije deponovana pod pristupnim brojem NCIMB 42380, ili njen derivat.
27. Ćelija bakterije deponovane pod pristupnim brojem NCIMB 42380, ili njen derivat, za upotrebu u terapiji.
28. Ćelija prema izvođenju 27, gde ćelija je za upotrebu u postupku definisanom prema bilo kom od izvođenja 1-14.
2

Claims (12)

Patentni zahtevi
1. Kompozicija koja sadrži bakteriju deponovanu pod pristupnim brojem NCIMB 42380 ili bakteriju koja ima 16s rRNK sekvencu koja je bar 98% identična sa SEQ ID NO:1, za upotrebu u postupku lečenja ili prevencije neutrofilne astme.
2. Kompozicija za upotrebu prema zahtevu 1, za upotrebu u postupku lečenja ili prevencije neeozinofilne astme.
3. Kompozicija za upotrebu prema bilo kom prethodnom zahtevu, za upotrebu u postupku lečenja ili prevencije početka neutrofilne astme kod odraslih.
4. Kompozicija za upotrebu prema bilo kom prethodnom zahtevu, za upotrebu u postupku smanjenja neutrofilije u lečenju ili prevenciji neutrofilne astme.
5. Kompozicija za upotrebu prema bilo kom prethodnom zahtevu, za upotrebu u postupku smanjenja neutrofilnog inflamatornog odgovora u lečenju ili prevenciji neutrofilne astme.
6. Kompozicija za upotrebu prema bilo kom prethodnom zahtevu, za upotrebu u postupku smanjenja IL-17 proizvodnje ili smanjenja Th17 ćelijske diferencijacije u lečenju ili prevenciji neutrofilne astme.
7. Kompozicija za upotrebu prema bilo kom prethodnom zahtevu, za upotrebu kod pacijenata sa povećanim nivoima neutrofila, identifikovanim preko uzoraka krvi ili analize sputuma.
8. Kompozicija za upotrebu prema bilo kom prethodnom zahtevu, za upotrebu kod pacijenta sa povećanim IL-17 nivoima ili Thl7 ćelijama.
9. Kompozicija za upotrebu prema bilo kom prethodnom zahtevu, gde bakterija ima 16s rRNK sekvencu koja je bar 99%, 99.5% ili 99.9% identična sa SEQ ID NO:1.
10. Kompozicija za upotrebu prema bilo kom prethodnom zahtevu, gde je (i) kompozicija za oralno davanje , i/ili gde (ii) kompozicija sadrži jedno ili više farmaceutski prihvatljivih ekscipijenata ili nosača, i/ili gde je (iii) bakterijski soj liofilizovan.
11. Prehrambeni proizvod ili kompozicija vakcine koja sadrži kompoziciju prema bilo kom prethodnom zahtevu, za upotrebu prema bilo kom prethodom zahtevu .
12. Ćelija bakterije deponovane pod pristupnim brojem NCIMB 42380, za upotrebu u postupku definisanom prema bilo kom od zahteva 1-8.
4
RS20191610A 2015-06-15 2016-06-15 Kompozicije koje sadrže bakterijske sojeve RS59662B1 (sr)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GBGB1510467.2A GB201510467D0 (en) 2015-06-15 2015-06-15 Compositions comprising bacterial strains
GBGB1520501.6A GB201520501D0 (en) 2015-11-20 2015-11-20 Compositions comprising bacterial strains
EP18165143.1A EP3360559B1 (en) 2015-06-15 2016-06-15 Compositions comprising bacterial strains

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS59662B1 true RS59662B1 (sr) 2020-01-31

Family

ID=56178386

Family Applications (3)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20190951A RS59038B1 (sr) 2015-06-15 2016-06-15 Kompozicije koje sadrže bakterijske sojeve
RS20191610A RS59662B1 (sr) 2015-06-15 2016-06-15 Kompozicije koje sadrže bakterijske sojeve
RS20220268A RS63089B1 (sr) 2015-06-15 2016-06-15 Kompozicije koje sadrže bakterijske sojeve

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20190951A RS59038B1 (sr) 2015-06-15 2016-06-15 Kompozicije koje sadrže bakterijske sojeve

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20220268A RS63089B1 (sr) 2015-06-15 2016-06-15 Kompozicije koje sadrže bakterijske sojeve

Country Status (34)

Country Link
US (5) US10744167B2 (sr)
EP (4) EP3650033B1 (sr)
JP (4) JP6439037B2 (sr)
KR (1) KR102616152B1 (sr)
CN (2) CN114028431A (sr)
AU (4) AU2016278072B2 (sr)
BR (1) BR112017026564B1 (sr)
CA (1) CA2988695A1 (sr)
CL (1) CL2017003142A1 (sr)
CO (1) CO2017012829A2 (sr)
CY (3) CY1122306T1 (sr)
DK (3) DK3206700T3 (sr)
EA (1) EA038405B1 (sr)
ES (3) ES2742514T3 (sr)
HR (3) HRP20191344T1 (sr)
HU (3) HUE046770T2 (sr)
IL (2) IL255662B (sr)
LT (3) LT3360559T (sr)
MA (1) MA55434B1 (sr)
MD (3) MD3360559T2 (sr)
ME (2) ME03511B (sr)
MX (2) MX378686B (sr)
NZ (2) NZ737752A (sr)
PE (1) PE20180242A1 (sr)
PL (3) PL3206700T3 (sr)
PT (3) PT3650033T (sr)
RS (3) RS59038B1 (sr)
SA (1) SA517390513B1 (sr)
SG (2) SG10201912320TA (sr)
SI (3) SI3650033T1 (sr)
SM (3) SMT201900446T1 (sr)
TW (1) TWI797058B (sr)
WO (1) WO2016203223A1 (sr)
ZA (1) ZA201707745B (sr)

Families Citing this family (42)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB201112091D0 (en) 2011-07-14 2011-08-31 Gt Biolog Ltd Bacterial strains isolated from pigs
GB201117313D0 (en) 2011-10-07 2011-11-16 Gt Biolog Ltd Bacterium for use in medicine
GB201306536D0 (en) 2013-04-10 2013-05-22 Gt Biolog Ltd Polypeptide and immune modulation
KR20170091157A (ko) 2014-12-23 2017-08-08 4디 파마 리서치 리미티드 피린 폴리펩티드 및 면역 조정
HUE035569T2 (en) 2014-12-23 2018-05-28 4D Pharma Res Ltd Bacteroides thetaiotaomicron strain and its use in reducing inflammation
MA41010B1 (fr) 2015-06-15 2020-01-31 4D Pharma Res Ltd Compositions comprenant des souches bactériennes
MA41060B1 (fr) 2015-06-15 2019-11-29 4D Pharma Res Ltd Compositions comprenant des souches bactériennes
ES2753779T3 (es) 2015-06-15 2020-04-14 4D Pharma Res Ltd Blautia stercosis y wexlerae para la utilización en el tratamiento de enfermedades inflamatorias y autoinmunes
HUE045413T2 (hu) 2015-06-15 2019-12-30 4D Pharma Res Ltd Baktériumtörzseket tartalmazó készítmények
LT3360559T (lt) 2015-06-15 2019-12-27 4D Pharma Research Limited Kompozicijos, apimančios bakterijų kamienus
CN108513545B (zh) 2015-11-20 2020-11-03 4D制药研究有限公司 包含细菌菌株的组合物
GB201520497D0 (en) 2015-11-20 2016-01-06 4D Pharma Res Ltd Compositions comprising bacterial strains
GB201520638D0 (en) 2015-11-23 2016-01-06 4D Pharma Res Ltd Compositions comprising bacterial strains
GB201520631D0 (en) 2015-11-23 2016-01-06 4D Pharma Res Ltd Compositions comprising bacterial strains
GB201612191D0 (en) 2016-07-13 2016-08-24 4D Pharma Plc Compositions comprising bacterial strains
SG11201807195VA (en) 2016-03-04 2018-09-27 4D Pharma Plc Compositions comprising bacterial blautia strains for treating visceral hypersensitivity
US9999641B2 (en) 2016-06-14 2018-06-19 Vedanta Biosciences, Inc. Treatment of clostridium difficile infection
PT3468573T (pt) 2016-06-14 2023-10-16 Vedanta Biosciences Inc Tratamento de uma infeção por clostridium difficile
TW201821093A (zh) 2016-07-13 2018-06-16 英商４Ｄ製藥有限公司 包含細菌菌株之組合物
GB201621123D0 (en) 2016-12-12 2017-01-25 4D Pharma Plc Compositions comprising bacterial strains
CA3058943C (en) 2017-04-03 2023-10-17 Gusto Global, Llc Rational design of microbial-based biotherapeutics
HUE054164T2 (hu) 2017-05-22 2021-08-30 4D Pharma Res Ltd Baktériumtörzseket tartalmazó készítmények
JP6978514B2 (ja) 2017-05-24 2021-12-08 フォーディー ファーマ リサーチ リミテッド4D Pharma Research Limited 細菌株を含む組成物
SMT202000695T1 (it) 2017-06-14 2021-01-05 4D Pharma Res Limited Composizioni comprendenti ceppi batterici
ES2855701T3 (es) 2017-06-14 2021-09-24 4D Pharma Res Ltd Composiciones que comprenden cepas bacterianas
JP2020523326A (ja) 2017-06-14 2020-08-06 フォーディー ファーマ リサーチ リミテッド４Ｄ Ｐｈａｒｍａ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｌｉｍｉｔｅｄ 細菌株を含む組成物
EP3648780A1 (en) 2017-07-05 2020-05-13 Evelo Biosciences, Inc. Compositions and methods of treating cancer using bifidobacterium animalis ssp. lactis
ES2986675T3 (es) * 2018-02-07 2024-11-12 Armata Pharmaceuticals Inc Bacteriófago para el tratamiento y la prevención de cánceres asociados a bacterias
WO2019240218A1 (ja) 2018-06-14 2019-12-19 株式会社明治 免疫チェックポイント阻害療法を促進するための組成物
BR112020025123A2 (pt) 2018-06-19 2021-03-23 4D Pharma Research Ltd forma de dosagem compreendendo um produto bioterapêutico vivo
TW202023590A (zh) 2018-08-17 2020-07-01 英商4D製藥研究有限公司 包含細菌菌株之組合物
JP7558170B2 (ja) 2018-08-17 2024-09-30 ヴェダンタ バイオサイエンシーズ インコーポレーテッド 腸内毒素症を減少させ、微生物叢を復元する方法
US11752178B2 (en) 2019-04-17 2023-09-12 Nutech Ventures Methods for the isolation of microbes with enhanced persistance and compositions with such microbes
EP3839039A1 (en) 2019-12-16 2021-06-23 4D Pharma Research Limited Providing bacterial biomass with improved storage stability
CN115397446A (zh) 2020-02-26 2022-11-25 伊夫罗生物科学公司 用于降低细胞因子表达的组合物和方法
TW202220639A (zh) 2020-08-06 2022-06-01 英商４Ｄ製藥有限公司 凍乾方法
KR102891124B1 (ko) * 2020-11-20 2025-11-25 가톨릭대학교 산학협력단 비피도박테리움 속을 유효성분으로 포함하는 피부경화증에 대한 테라그노시스용 조성물
AU2021386691A1 (en) 2020-11-26 2023-07-06 4D Pharma Leon, S.L.U. Process
JP7570216B2 (ja) * 2020-11-30 2024-10-21 株式会社ヤクルト本社 ヒト腸内に長期定着する微生物のスクリーニング方法
CN112546074B (zh) * 2020-12-24 2022-09-27 江南大学 一株能够抑制IL-23、Th17轴相关炎症因子释放的短双歧杆菌及其应用
CN117320692A (zh) * 2021-03-12 2023-12-29 奇迹生物公司 微生物组组合物、组分或代谢物用于治疗眼睛病症的方法和用途
WO2025165805A1 (en) * 2024-01-29 2025-08-07 The Regents Of The University Of California Treatment of sorbitol intolerance after antibiotic treatment with sorbitol dehydrogenase

Family Cites Families (364)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
NL154598B (nl) 1970-11-10 1977-09-15 Organon Nv Werkwijze voor het aantonen en bepalen van laagmoleculire verbindingen en van eiwitten die deze verbindingen specifiek kunnen binden, alsmede testverpakking.
US3817837A (en) 1971-05-14 1974-06-18 Syva Corp Enzyme amplification assay
US3939350A (en) 1974-04-29 1976-02-17 Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Fluorescent immunoassay employing total reflection for activation
US3996345A (en) 1974-08-12 1976-12-07 Syva Company Fluorescence quenching with immunological pairs in immunoassays
US4275149A (en) 1978-11-24 1981-06-23 Syva Company Macromolecular environment control in specific receptor assays
US4277437A (en) 1978-04-05 1981-07-07 Syva Company Kit for carrying out chemically induced fluorescence immunoassay
US4366241A (en) 1980-08-07 1982-12-28 Syva Company Concentrating zone method in heterogeneous immunoassays
NL8300698A (nl) 1983-02-24 1984-09-17 Univ Leiden Werkwijze voor het inbouwen van vreemd dna in het genoom van tweezaadlobbige planten; agrobacterium tumefaciens bacterien en werkwijze voor het produceren daarvan; planten en plantecellen met gewijzigde genetische eigenschappen; werkwijze voor het bereiden van chemische en/of farmaceutische produkten.
US4816567A (en) 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
US4683202A (en) 1985-03-28 1987-07-28 Cetus Corporation Process for amplifying nucleic acid sequences
DK122686D0 (da) 1986-03-17 1986-03-17 Novo Industri As Fremstilling af proteiner
FR2613624B1 (fr) 1987-04-10 1990-11-23 Roussy Inst Gustave Composition pharmaceutique, administrable par voie orale, destinee a reduire les effets des b-lactamines
US5443826A (en) 1988-08-02 1995-08-22 Borody; Thomas J. Treatment of gastro-intestinal disorders with a fecal composition or a composition of bacteroides and E. Coli
ATE165738T1 (de) 1988-08-02 1998-05-15 Gastro Services Pty Ltd Behandlung von gastro-intestinalen krankheiten
KR100225087B1 (ko) 1990-03-23 1999-10-15 한스 발터라벤 피타아제의 식물내 발현
AU639570B2 (en) 1990-05-09 1993-07-29 Novozymes A/S A cellulase preparation comprising an endoglucanase enzyme
GB9107305D0 (en) 1991-04-08 1991-05-22 Unilever Plc Probiotic
EP0581171B1 (en) 1992-07-20 1998-02-04 Kabushiki Kaisha Yakult Honsha Species-specific oligonucleotides for bifidobacteria and a method of detection using the same
ATE219143T1 (de) 1992-12-10 2002-06-15 Dsm Nv Herstellung von heterologen proteinen in filamentösen fungi
US5741665A (en) 1994-05-10 1998-04-21 University Of Hawaii Light-regulated promoters for production of heterologous proteins in filamentous fungi
US5599795A (en) 1994-08-19 1997-02-04 Mccann; Michael Method for treatment of idiopathic inflammatory bowel disease (IIBD)
AUPM823094A0 (en) 1994-09-16 1994-10-13 Goodman Fielder Limited Probiotic compositions
AUPM864894A0 (en) 1994-10-07 1994-11-03 Borody, Thomas Julius Treatment of bowel-dependent neurological disorders
RU2078815C1 (ru) 1995-01-17 1997-05-10 Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им.Г.Н.Габричевского Штамм бактерий bifidobacterium breve, используемый для получения бактерийных лечебно-профилактических бифидосодержащих препаратов
JPH08259450A (ja) 1995-03-17 1996-10-08 Nichinichi Seiyaku Kk インターフェロン産生増強剤
US6861053B1 (en) 1999-08-11 2005-03-01 Cedars-Sinai Medical Center Methods of diagnosing or treating irritable bowel syndrome and other disorders caused by small intestinal bacterial overgrowth
AUPN698495A0 (en) 1995-12-06 1996-01-04 Pharma Pacific Pty Ltd Improved therapeutic formulation and method
SE508045C2 (sv) 1996-02-26 1998-08-17 Arla Ekonomisk Foerening Adhesionsinhibitorer, preparat innehållande desamma och förfarande för framställning därav
AUPN881396A0 (en) 1996-03-20 1996-04-18 Arnott's Biscuits Limited Enhancement of microbial colonization of the gastrointestinal tract
EP0901371B1 (en) 1996-03-20 2008-09-10 The University Of New South Wales Alteration of microbial populations in the gastrointestinal tract
AU2152897A (en) 1996-03-27 1997-10-17 Novo Nordisk A/S Alkaline protease deficient filamentous fungi
US6033864A (en) 1996-04-12 2000-03-07 The Regents Of The University Of California Diagnosis, prevention and treatment of ulcerative colitis, and clinical subtypes thereof, using microbial UC pANCA antigens
WO1998043081A1 (en) 1997-03-26 1998-10-01 Ligand Pharmaceuticals Incorporated Treatment of gastrointestinal disease with ppar modulators
SE511524C2 (sv) 1997-06-02 1999-10-11 Essum Ab Lactobacillus casei rhamnosus-stam samt farmaceutisk beredning för bekämpning av patogena tarmbakterier
US5925657A (en) 1997-06-18 1999-07-20 The General Hospital Corporation Use of PPARγ agonists for inhibition of inflammatory cytokine production
AUPO758297A0 (en) 1997-06-27 1997-07-24 Rowe, James Baber Control of acidic gut syndrome
US5951977A (en) 1997-10-14 1999-09-14 The United States Of America, As Represented By The Secretary Of Agriculture Competitive exclusion culture for swine
IT1298918B1 (it) 1998-02-20 2000-02-07 Mendes Srl Uso di batteri dotati di arginina deiminasi per indurre apoptosi e/o ridurre una reazione infiammatoria e composizioni farmaceutiche
DE19826928A1 (de) 1998-06-17 1999-12-23 Novartis Consumer Health Gmbh Arzneimittel, lebensfähige anaerobe Bakterien enthaltend, die die Sulfatreduktion sulfatreduzierender Bakterien hemmen
ID29150A (id) 1999-01-15 2001-08-02 Entpr Ireland Cs Penggunaan lactobacillus salivarius
US7090973B1 (en) 1999-04-09 2006-08-15 Oscient Pharmaceuticals Corporation Nucleic acid sequences relating to Bacteroides fragilis for diagnostics and therapeutics
DK1206457T3 (da) 1999-08-27 2004-02-16 Lilly Co Eli Biaryl-oxa(thia)zolderivater og deres anvendelse som modulatorer PPAP'ER
DK1257176T3 (da) 2000-02-08 2008-08-18 Dsm Ip Assets Bv Anvendelse af syrestabile proteaser i dyrefoder
FR2808689B1 (fr) 2000-05-11 2004-09-03 Agronomique Inst Nat Rech Utilisation de souches acetogenes hydrogenotrophes pour la prevention ou le traitement de troubles digestifs
US20020013270A1 (en) 2000-06-05 2002-01-31 Bolte Ellen R. Method for treating a mental disorder
AUPQ899700A0 (en) 2000-07-25 2000-08-17 Borody, Thomas Julius Probiotic recolonisation therapy
JP2004536557A (ja) 2000-11-27 2004-12-09 ワシントン・ユニバーシティ 哺乳動物の腸に対する共生ミクロフローラの効果を調べるための方法およびそれに基づく胃腸関連疾患の治療
DE10101793A1 (de) 2001-01-17 2002-08-01 Manfred Nilius Verwendung von SLPI zur Behandlung chronisch-entzündlicher Darmerkrankungen
EP1227152A1 (en) 2001-01-30 2002-07-31 Société des Produits Nestlé S.A. Bacterial strain and genome of bifidobacterium
KR100437497B1 (ko) 2001-03-07 2004-06-25 주식회사 프로바이오닉 로타바이러스 및 유해 미생물 억제 활성을 가지는 신규내산성 락토바실러스 루테리 프로바이오-16 및 이를함유하는 생균활성제
EP1243273A1 (en) 2001-03-22 2002-09-25 Societe Des Produits Nestle S.A. Composition comprising a prebiotic for decreasing infammatory process and abnormal activation of non-specific immune parameters
DE60141773D1 (de) 2001-04-20 2010-05-20 Inst Systems Biology Toll-ähnlichen-rezeptor-5-liganden und verwendungsverfahren
EP1260227A1 (en) 2001-05-23 2002-11-27 Societe Des Produits Nestle S.A. Lipoteichoic acid from lactic acid bacteria and its use to modulate immune responses mediated by gram-negative bacteria, potential pathogenic gram-positive bacteria
PE20030284A1 (es) 2001-07-26 2003-05-01 Alimentary Health Ltd Cepas de bifidobacterium
US20040241149A1 (en) 2001-09-05 2004-12-02 Claudio De Simone Use of unmethylatd cpg
GB0127916D0 (en) 2001-11-21 2002-01-16 Rowett Res Inst Method
AU2002346504A1 (en) 2001-11-27 2003-06-10 Astrazeneca Ab Therapeutic protein and treatments
DK1581119T3 (da) 2001-12-17 2013-05-13 Corixa Corp Sammensætninger og fremgangsmåder til terapi og diagnose af inflammatoriske tarmsygdomme
US7101565B2 (en) 2002-02-05 2006-09-05 Corpak Medsystems, Inc. Probiotic/prebiotic composition and delivery method
DE10206995B4 (de) 2002-02-19 2014-01-02 Orthomol Pharmazeutische Vertriebs Gmbh Mikronährstoffkombinationsprodukt mit Pro- und Prebiotika
JP2003261453A (ja) 2002-03-11 2003-09-16 Nippon Berumu Kk Ｅ．フェカリスからなる抗腫瘍剤及び放射線防護剤
ES2311729T5 (es) 2002-06-28 2013-02-14 Biosearch S.A. Cepas probióticas, un procedimiento para la selección de ellas, composiciones de las mismas y su uso
US20040005304A1 (en) 2002-07-08 2004-01-08 Mak Wood, Inc. Novel compositions and methods for treating neurological disorders and associated gastrointestinal conditions
GB0307026D0 (en) 2003-03-27 2003-04-30 Rowett Res Inst Bacterial supplement
EP1481681A1 (en) 2003-05-30 2004-12-01 Claudio De Simone Lactic acid bacteria combination and compositions thereof
GB0316915D0 (en) 2003-07-18 2003-08-20 Glaxo Group Ltd Compounds
AU2003247193A1 (en) 2003-07-23 2005-02-04 M.D.Lab Corp. Acid tolerant probiotic lactobacillus plantarum probio-38 that can suppress the growth of pathogenic microorganism and tge coronavirus
US7485325B2 (en) 2003-08-06 2009-02-03 Gayle Dorothy Swain Animal food supplement compositions and methods of use
JP4683881B2 (ja) 2003-08-27 2011-05-18 有限会社アーク技研 抗腫瘍活性剤
US8192733B2 (en) 2003-08-29 2012-06-05 Cobb & Associates Probiotic composition useful for dietary augmentation and/or combating disease states and adverse physiological conditions
WO2005030133A2 (en) 2003-09-22 2005-04-07 Yale University Treatment with agonists of toll-like receptors
GB0323039D0 (en) 2003-10-01 2003-11-05 Danisco Method
CA2543626C (en) 2003-10-24 2013-08-27 N.V. Nutricia Synbiotic composition for infants
US20050239706A1 (en) 2003-10-31 2005-10-27 Washington University In St. Louis Modulation of fiaf and the gastrointestinal microbiota as a means to control energy storage in a subject
WO2005058335A1 (en) 2003-12-17 2005-06-30 N.V. Nutricia Lactic acid producing bacteria and lung function
ES2235642B2 (es) 2003-12-18 2006-03-01 Gat Formulation Gmbh Proceso de multi-microencapsulacion continuo para la mejora de la estabilidad y almacenamiento de ingredientes biologicamente activos.
CA2557800A1 (en) 2004-03-22 2005-10-06 Yossef Raviv Cellular and viral inactivation
EP1755668A2 (en) 2004-05-07 2007-02-28 Hans-Gustaf Ljunggren Adjuvants
PE20060426A1 (es) 2004-06-02 2006-06-28 Schering Corp DERIVADOS DE ACIDO TARTARICO COMO INHIBIDORES DE MMPs, ADAMs, TACE Y TNF-alfa
US7638513B2 (en) 2004-06-02 2009-12-29 Schering Corporation Compounds for the treatment of inflammatory disorders
CN101022826A (zh) 2004-06-07 2007-08-22 哈罗尔·戴维·贡 用于癌症治疗的细菌组合物
PT1629850E (pt) 2004-08-24 2007-08-14 Nutricia Nv Composição nutricional que compreende a administração de oligossacarídeos indigeríveis
US20060062773A1 (en) 2004-09-21 2006-03-23 The Procter & Gamble Company Compositions for maintaining and restoring normal gastrointestinal flora
KR100468522B1 (ko) 2004-10-12 2005-01-31 주식회사 프로바이오닉 코로나바이러스와 돼지 써코바이러스 2형의 생육을 억제하는 신규한 내산성 프로바이오틱 엔테로코커스훼시움 프로바이오-63
ITRM20040505A1 (it) * 2004-10-15 2005-01-15 Cd Invest Liofilizzati di batteri lattici e bifidobatteri ad alta dispersibilita'.
US20060115465A1 (en) 2004-10-29 2006-06-01 Macfarlane George Treatment of gastrointestinal disorders
ITMI20042189A1 (it) 2004-11-16 2005-02-16 Anidral Srl Composizione a base di batteri probiotici e suo uso nella prevenzione e-o nel trattamento di patologie e-o infezioni respiratorie e nel miglioramento della funzionalita' intestinale
CN101128129A (zh) 2005-02-28 2008-02-20 纽崔西亚公司 具有益生菌的营养组合物
EP1861490A4 (en) 2005-03-23 2010-11-17 Univ St Louis USE OF ARRAYS TO MODULATE NUTRIENT CAPTURE FUNCTIONS BY THE GASTROINTESTINAL MICROBIOTE
WO2006102536A2 (en) 2005-03-23 2006-09-28 University Of Southern California Treatment of disease conditions through modulation of hydrogen sulfide produced by small intestinal bacterial overgrowth
JP2006265212A (ja) 2005-03-25 2006-10-05 Institute Of Physical & Chemical Research Ｉｌ−２１産生誘導剤
US20100233312A9 (en) 2005-04-11 2010-09-16 The Procter & Gamble Company Compositions comprising probiotic and sweetener components
EP1714660A1 (en) 2005-04-21 2006-10-25 N.V. Nutricia Uronic acid and probiotics
WO2006114778A1 (en) 2005-04-26 2006-11-02 Teagasc- The Agriculture And Food Development Authority Probiotic composition suitable for animals
PL2161336T5 (pl) 2005-05-09 2017-10-31 Ono Pharmaceutical Co Ludzkie przeciwciała monoklonalne przeciwko białku Programmed Death 1 (PD-1) oraz sposoby leczenia raka z zastosowaniem samych przeciwciał anty-PD-1 lub w połączeniu z innymi środkami immunoterapeutycznymi
US7572474B2 (en) 2005-06-01 2009-08-11 Mead Johnson Nutrition Company Method for simulating the functional attributes of human milk oligosaccharides in formula-fed infants
US8075934B2 (en) 2008-10-24 2011-12-13 Mead Johnson Nutrition Company Nutritional composition with improved digestibility
JP2007084533A (ja) 2005-08-24 2007-04-05 Prima Meat Packers Ltd 免疫応答調節組成物及び該組成物を有効成分とする食品
US7625704B2 (en) 2005-08-31 2009-12-01 Fred Hutchinson Cancer Research Center Methods and compositions for identifying bacteria associated with bacteria vaginosis
PL1933869T3 (pl) 2005-09-01 2010-06-30 Merck Sharp & Dohme Zastosowanie antagonistów IL-23 i IL-17 do leczenia autoimmunologicznej zapalnej choroby oczu
WO2007035057A1 (en) 2005-09-23 2007-03-29 Gwangju Institute Of Science And Technology Composition for preventing or treating artritis comprising lactic acid bacteria and collangen as active ingredients
EP1931364B1 (en) 2005-10-06 2010-07-21 Nestec S.A. Probiotic enterococci for improved immunity
EP1776877A1 (en) 2005-10-21 2007-04-25 N.V. Nutricia Method for stimulating the intestinal flora
DK1940243T3 (da) 2005-10-24 2011-11-14 Nestec Sa Kostfiberformulering og fremgangsmåde til indgivelse
JP2007116991A (ja) 2005-10-28 2007-05-17 Eternal Light General Institute Inc 機能性食品
US7767420B2 (en) 2005-11-03 2010-08-03 Momenta Pharmaceuticals, Inc. Heparan sulfate glycosaminoglycan lyase and uses thereof
AU2006320604A1 (en) 2005-12-01 2007-06-07 Schering Corporation Compounds for the treatment of inflammatory disorders and microbial diseases
US8889149B2 (en) 2006-02-16 2014-11-18 Wayne State University Use of flagellin to prevent and treat gram negative bacterial infection
US20080260898A1 (en) 2006-03-17 2008-10-23 Marko Stojanovic Compositions comprising probiotic and sweetener components
JP5031249B2 (ja) 2006-03-22 2012-09-19 学校法人北里研究所 炎症抑制作用のある菌体含有組成物
WO2007126990A2 (en) 2006-03-29 2007-11-08 Nestec S.A. Dietary supplements containing probiotics
CA2652559A1 (en) 2006-05-18 2007-11-29 Biobalance Llc Biotherapeutic compositions and uses thereof
BRPI0712087A2 (pt) 2006-05-26 2012-07-17 Nestec Ag métodos de uso e composições nutricionais de extrato de rouchi
WO2007140613A1 (en) 2006-06-06 2007-12-13 Mcgill University Fermented milk product and use thereof
TW200819540A (en) 2006-07-11 2008-05-01 Genelux Corp Methods and compositions for detection of microorganisms and cells and treatment of diseases and disorders
WO2008015374A2 (en) 2006-08-04 2008-02-07 Shs International Ltd Protein free formula
WO2008031438A2 (en) 2006-09-13 2008-03-20 Region Hovedstaden V/Gentofte Hospital Treatment of asthma, eczema and/or allergy using non-pathogenic organisms
US20080069861A1 (en) 2006-09-19 2008-03-20 National Starch And Chemical Investment Holding Corporation Probiotic/Non-Probiotic Combinations
EP3954715A3 (en) 2006-10-27 2022-05-04 Capsugel Belgium NV Hydroxypropyl methyl cellulose hard capsules and process of manufacture
US20080118473A1 (en) 2006-11-01 2008-05-22 The Procter & Gamble Company Methods of treating a respiratory condition comprising probiotic treatment
EP1920782A1 (en) 2006-11-10 2008-05-14 Glycotope Gmbh Carboyhdrate specific cellular immunity inducing microorganisms and fractions thereof
WO2008064489A1 (en) 2006-12-01 2008-06-05 Mcmaster University Probiotics to inhibit inflammation
EP2102350A4 (en) 2006-12-18 2012-08-08 Univ St Louis DARMMICROBIOMA AS A BIOMARKER AND THERAPEUTIC OBJECT FOR THE TREATMENT OF ADIPOSITAS OR ADIPOSITASCONDUCTIVE DISEASES
DE102006062250A1 (de) 2006-12-22 2008-06-26 Roland Saur-Brosch Verwendung einer Zusammensetzung aus Mineralstoffen und/oder Vitaminen und gegebenenfalls acetogenen und/oder butyrogenen Bakterien zur oralen oder rektalen Verabreichung für die Behandlung und Vorbeugung von abdominalen Beschwerden
WO2008083157A2 (en) 2006-12-29 2008-07-10 Washington University In St. Louis Altering pgc-1alapha, ampk, fiaf, or the gastrointestinal microbiota as a means to modulate body fat and/or weight loss in a subject
JP2008195635A (ja) 2007-02-09 2008-08-28 Crossfield Bio Inc 馬用乳酸菌製剤
ES2381232T3 (es) 2007-02-28 2012-05-24 Mead Johnson Nutrition Company Procedimiento para el tratamiento o la prevención de la inflamación sistémica
CA2682242A1 (en) 2007-03-28 2008-10-02 Alimentary Health Limited Probiotic bifidobacterium longum strain
WO2008117267A2 (en) 2007-03-28 2008-10-02 Alimentary Health Limited Probiotic bifidobacterium strains
AU2008245685B2 (en) 2007-04-24 2013-06-27 Kemin Industries, Inc. Broad-spectrum antibacterial and antifungal activity of Lactobacillus johnsonii D115
EP1997499A1 (en) 2007-05-31 2008-12-03 Puleva Biotech, S.A. Mammalian milk microorganisms, compositions containing them and their use for the treatment of mastitis
EP1997905A1 (en) 2007-06-01 2008-12-03 Friesland Brands B.V. Nucleic acid amplification
EP1997906A1 (en) 2007-06-01 2008-12-03 Friesland Brands B.V. Lactobacillus
EP1997907A1 (en) 2007-06-01 2008-12-03 Friesland Brands B.V. Bifidobacteria
WO2008153377A1 (en) 2007-06-15 2008-12-18 N.V. Nutricia Nutrition with non-viable bifidobacterium and non-digestible oligosaccharide
WO2009000899A1 (en) 2007-06-27 2008-12-31 Laboratorios Ordesa, S.L. A novel strain of bifidobacterium and active peptides against rotavirus infections
US20110027348A1 (en) 2007-08-27 2011-02-03 Janos Feher Composition and method inhibiting inflammation
WO2009030254A1 (en) 2007-09-04 2009-03-12 Curevac Gmbh Complexes of rna and cationic peptides for transfection and for immunostimulation
EP2192909A2 (en) 2007-10-01 2010-06-09 University College Cork-National University of Ireland, Cork Modulation of tissue fatty acid composition of a host by human gut bacteria
US8658153B2 (en) 2007-10-20 2014-02-25 Universite De Liege Bifidobacterial species
CA2740434C (en) 2007-10-26 2017-11-07 Brenda E. Moore Probiotic compositions and methods for inducing and supporting weight loss
WO2009059284A2 (en) 2007-11-02 2009-05-07 Momenta Pharmaceuticals, Inc. Non-anticoagulant polysaccharide compositions
EP2065048A1 (en) * 2007-11-30 2009-06-03 Institut Pasteur Use of a L. casei strain, for the preparation of a composition for inhibiting mast cell activation
EP2356992B1 (en) 2007-12-07 2017-08-16 N.V. Nutricia Bifidobactrium for dust mite allergy
US20100330190A1 (en) 2007-12-17 2010-12-30 Compans Richard W Immunogenic compositions and methods of use thereof
ES2343499B1 (es) 2007-12-24 2011-06-10 Consejo Superior De Investigaciones Cientificas Microorganismos para mejorar el estado de salud de individuos con desordenes relacionados con la ingesta de gluten.
US20090196921A1 (en) 2008-02-06 2009-08-06 The Procter & Gamble Company Compositions Methods and Kits For Enhancing Immune Response To A Respiratory Condition
EP2103226A1 (en) 2008-03-18 2009-09-23 Friesland Brands B.V. Long-life probiotic food product
EP2280991B1 (en) 2008-04-18 2016-06-22 VaxInnate Corporation Deletion mutants of flagellin and methods of use
EP2291086A1 (en) 2008-05-13 2011-03-09 Glycotope GmbH Fermentation process
MX2008006546A (es) 2008-05-21 2009-11-23 Sigma Alimentos Sa De Cv Bifidobacteria productora de ácido fólico, composición alimenticia y uso de la bifidobacteria.
CN102940652B (zh) 2008-05-28 2015-03-25 青岛东海药业有限公司 两形真杆菌制剂及其应用
CN101590081A (zh) 2008-05-28 2009-12-02 青岛东海药业有限公司 凸腹真杆菌和两形真杆菌制剂及其应用
WO2009149149A1 (en) 2008-06-04 2009-12-10 Trustees Of Dartmouth College Prevention or treatment of immune-relevant disease by modification of microfloral populations
EP2133088A3 (en) 2008-06-09 2010-01-27 Nestec S.A. Rooibos and inflammation
WO2009151315A1 (en) 2008-06-13 2009-12-17 N.V. Nutricia Nutritional composition for infants delivered via caesarean section
WO2009154463A2 (en) 2008-06-20 2009-12-23 Stichting Top Institute Food And Nutrition Butyrate as a medicament to improve visceral perception in humans
EP2138186A1 (en) 2008-06-24 2009-12-30 Nestec S.A. Probiotics, secretory IgA and inflammation
WO2010002241A1 (en) 2008-06-30 2010-01-07 N.V. Nutricia Nutritional composition for infants delivered via caesarean section
KR101017448B1 (ko) 2008-09-18 2011-02-23 주식회사한국야쿠르트 대장의 건강 증진 효능을 갖는 비피도박테리움 롱검 에이취와이8004 및 이를 유효성분으로 함유하는 제품
US20100074870A1 (en) 2008-09-19 2010-03-25 Bristol-Myers Squibb Company Probiotic infant products
US8137718B2 (en) 2008-09-19 2012-03-20 Mead Johnson Nutrition Company Probiotic infant products
KR101057357B1 (ko) 2008-09-22 2011-08-17 광주과학기술원 유산균 및 콜라겐을 유효성분으로 포함하는 관절염 예방 또는 치료용 약제학적 조성물 및 식품 조성물
US9603876B2 (en) 2008-09-25 2017-03-28 New York University Compositions and methods for restoring gastrointestinal microbiota following antibiotic treatment
WO2010037408A1 (en) 2008-09-30 2010-04-08 Curevac Gmbh Composition comprising a complexed (m)rna and a naked mrna for providing or enhancing an immunostimulatory response in a mammal and uses thereof
US10369204B2 (en) 2008-10-02 2019-08-06 Dako Denmark A/S Molecular vaccines for infectious disease
WO2010063601A1 (en) 2008-12-05 2010-06-10 Nestec S.A. Compositions for use in low-birth weight infants
CA2746805A1 (en) 2008-12-19 2010-06-24 Nestec S.A. Prevention and treatment of rotavirus diarrhoea
IT1392672B1 (it) 2009-01-12 2012-03-16 Wyeth Consumer Healthcare S P A Composizioni comprendenti componenti probiotici e prebiotici e sali minerali, con lactoferrina
EP2403531A4 (en) 2009-03-05 2013-02-27 Abbott Lab IL-17 BINDING PROTEINS
JP5710876B2 (ja) * 2009-03-26 2015-04-30 クロスフィールドバイオ株式会社 新規ビフィドバクテリウム属微生物およびその利用
AU2010245761B2 (en) 2009-05-07 2014-10-02 Tate & Lyle Ingredients France SAS Compositions and methods for making alpha-(1,2)-branched alpha-(1,6) oligodextrans
EP2251022A1 (en) 2009-05-11 2010-11-17 Nestec S.A. Non-replicating micro-organisms and their immune boosting effect
EP2251020A1 (en) 2009-05-11 2010-11-17 Nestec S.A. Short-time high temperature treatment generates microbial preparations with anti-inflammatory profiles
RU2556124C2 (ru) 2009-05-11 2015-07-10 Нестек С.А. Lactobacillus johnsonii La1 NСС533 (CNCM 1-1225) И ИММУННЫЕ НАРУШЕНИЯ
KR20100128168A (ko) * 2009-05-27 2010-12-07 중앙대학교 산학협력단 공액 리놀레산 생산능이 우수한 신규한 균주
US20100311686A1 (en) 2009-06-03 2010-12-09 Kasper Lloyd H Nutraceutical composition and methods for preventing or treating multiple sclerosis
WO2010143940A1 (en) 2009-06-12 2010-12-16 N.V. Nutricia Synergistic mixture of beta-galacto-oligosaccharides with beta-1,3 and beta-1,4/1,6 linkages
WO2010147714A1 (en) 2009-06-16 2010-12-23 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Autism-associated biomarkers and uses thereof
WO2011005756A1 (en) 2009-07-06 2011-01-13 Puretech Ventures, Llc Delivery of agents targeted to microbiota niches
WO2011011094A1 (en) 2009-07-24 2011-01-27 Dowd Scot E Universal microbial diagnosis, detection, quantification, and specimen-targeted therapy
JP2011032170A (ja) * 2009-07-29 2011-02-17 Morinaga Milk Ind Co Ltd ヒト細胞ｉｌ−１７産生抑制剤
EP2467032B1 (en) 2009-08-18 2018-02-21 Nestec S.A. A nutritional composition comprising bifidobacterium longum strains and reducing food allergy symptoms, especially in infants and children
US20110053829A1 (en) 2009-09-03 2011-03-03 Curevac Gmbh Disulfide-linked polyethyleneglycol/peptide conjugates for the transfection of nucleic acids
AU2010299552A1 (en) 2009-09-23 2012-04-05 Thomas Julius Borody Therapy for enteric infections
EP2308498A1 (en) 2009-09-30 2011-04-13 Nestec S.A. Administration of Bifidobacterium breve during infancy to prevent inflammation later in life
US20120238468A1 (en) 2009-10-05 2012-09-20 Aak Patent B.V. Methods for diagnosing irritable bowel syndrome
EP3144004A1 (en) 2009-10-06 2017-03-22 Scott Dorfner Antibiotic formulations providing reduced gastrointestinal side effects and clostridium difficile infection relapse, and related methods
PL2498789T3 (pl) 2009-11-11 2017-01-31 Alimentary Health Limited Probiotyczny szczep bifidobacterium
JP2013514085A (ja) 2009-12-18 2013-04-25 ヒルズ・ペット・ニュートリシャン・インコーポレーテッド プロバイオティックを含むペットフード組成物ならびにそれを調製および使用する方法
US20150104418A1 (en) 2014-12-18 2015-04-16 Microbios, Inc. Bacterial composition
FR2955774A1 (fr) 2010-02-02 2011-08-05 Aragan Preparation destinee a traiter l'exces ponderal et les desordres associes et applications de ladite preparation
NL2004200C2 (en) 2010-02-05 2011-08-08 Friesland Brands Bv Use of sialyl oligosaccharides in weight management.
NL2004201C2 (en) 2010-02-05 2011-08-08 Friesland Brands Bv Use of sialyl oligosaccharides to modulate the immune system.
IT1398553B1 (it) * 2010-03-08 2013-03-01 Probiotical Spa Composizione comprendente batteri probiotici per il trattamento di patologie associate con le alterazioni del sistema immunitario.
JP5737646B2 (ja) * 2010-03-24 2015-06-17 森下仁丹株式会社 抗アレルギー剤
EP2552464B1 (en) 2010-03-30 2018-02-28 Assistance Publique - Hôpitaux de Paris Use of bifidobacteria for preventing allergy in breastfed infants
US8951512B2 (en) 2010-05-04 2015-02-10 New York University Methods for treating bone disorders by characterizing and restoring mammalian bacterial microbiota
WO2011149335A1 (en) * 2010-05-25 2011-12-01 N.V. Nutricia Immune imprinting nutritional composition
CN102947441A (zh) 2010-06-01 2013-02-27 穆尔研究企业有限责任公司 来自拟杆菌属的细胞组分、其组合物和使用拟杆菌或其细胞组分的治疗方法
WO2011151941A1 (ja) 2010-06-04 2011-12-08 国立大学法人東京大学 制御性ｔ細胞の増殖または集積を誘導する作用を有する組成物
TWI417054B (zh) 2010-06-15 2013-12-01 Jen Shine Biotechnology Co Ltd 新穎糞腸球菌ｌｊｓ－０１及其益生用途
EP2397145A1 (en) 2010-06-18 2011-12-21 Nestec S.A. L. johnsonii La1, B. longum NCC2705 and immune disorders
FR2962045B1 (fr) 2010-07-05 2012-08-17 Bifinove Complexe macromoleculaire d'origine bacterienne et utilisation dudit complexe moleculaire pour prevenir et traiter les rhumatismes inflammatoires
TWI401086B (zh) 2010-07-20 2013-07-11 Univ China Medical 胚芽乳酸桿菌及其用途
KR102157718B1 (ko) 2010-07-26 2020-09-18 큐 바이올로직스 인코포레이티드 면역원성 소염 조성물
NZ618935A (en) 2010-08-04 2014-03-28 Karma Medical Prod Co Ltd Compositions for fecal floral transplantation and methods for making and using them and devices for delivering them
US9386793B2 (en) 2010-08-20 2016-07-12 New York University Compositions and methods for treating obesity and related disorders by characterizing and restoring mammalian bacterial microbiota
KR101250463B1 (ko) 2010-10-12 2013-04-15 대한민국 신생아 분변에서 분리한 내산소성 비피도박테리움 롱검 비피더스 유산균 및 이를 이용한 프로바이오틱 조성물
JP2013544507A (ja) 2010-10-27 2013-12-19 カンティバクト・アクティーゼルスカブ インターカレータ分子を含むプローブによる標的ｄｎａ及びｒｎａの捕捉
CN102031235B (zh) 2010-11-09 2012-07-25 中国农业大学 一种粪肠球菌anse228及其应用
EP2455092A1 (en) 2010-11-11 2012-05-23 Nestec S.A. Non-replicating probiotic micro-organisms protect against upper respiratory tract infections
US20120128644A1 (en) 2010-11-24 2012-05-24 Oragenics, Inc. Use of Bacteria to Treat and Prevent Respiratory Infections
CN102093967B (zh) 2010-12-02 2013-01-30 中国农业科学院特产研究所 一株水貂源屎肠球菌及其应用
ES2389547B1 (es) 2010-12-07 2013-08-08 Consejo Superior De Investigaciones Científicas (Csic) Bifidobacterium cect 7765 y su uso en la prevención y/o tratamiento del sobrepeso, la obesidad y patologías asociadas.
SG191830A1 (en) 2011-01-10 2013-08-30 Cleveland Biolabs Inc Use of toll-like receptor agonist for treating cancer
ES2610908T3 (es) 2011-01-31 2017-05-04 Synformulas Gmbh Cepas de bifidobacterium bifidum para su aplicación en enfermedades gastrointestinales
JP5840368B2 (ja) 2011-02-02 2016-01-06 カルピス株式会社 関節炎予防改善用物質
US8927252B2 (en) 2011-02-09 2015-01-06 Lavivo Ab Synbiotic compositions for restoration and reconstitution of gut microbiota
SG193348A1 (en) 2011-03-09 2013-10-30 Univ Minnesota Compositions and methods for transplantation of colon microbiota
BRPI1100857A2 (pt) 2011-03-18 2013-05-21 Alexandre Eduardo Nowill agente imunomodulador e suas combinaÇÕes, seu uso e mÉtodo imunoterÁpico para a recontextualizaÇço, reprogramaÇço e reconduÇço do sistema imune em tempo real
WO2012140636A1 (en) 2011-04-11 2012-10-18 Alimentary Health Limited A probiotic formulation
WO2012142605A1 (en) 2011-04-15 2012-10-18 Samaritan Health Services Rapid recolonization deployment agent
MX2013012165A (es) 2011-04-20 2014-06-11 Mico Bio Inc Composicion y metodo para mejorar una respuesta inmune.
JP6129821B2 (ja) 2011-05-13 2017-05-17 グリコシン リミテッド ライアビリティー カンパニー プレバイオティクスとしての、精製された２’−フコシルラクトース、３−フコシルラクトース、およびラクトジフコテトラオースの使用
KR101918792B1 (ko) * 2011-05-16 2018-11-14 오르가노발란스 메디컬 아게 박테리아성 감기에 대한 신규 락트산 박테리아 및 그를 함유하는 조성물
KR20120133133A (ko) 2011-05-30 2012-12-10 한국 한의학 연구원 생약 추출물 또는 이의 유산균 발효물을 포함하는 호흡기 질환의 예방 또는 치료용 조성물
WO2012170478A2 (en) 2011-06-06 2012-12-13 The University Of North Carolina At Chapel Hill Methods and kits for detecting adenomas, colorectal cancer, and uses thereof
GB201110095D0 (en) 2011-06-15 2011-07-27 Danisco Method of treatment
JP2013005759A (ja) 2011-06-24 2013-01-10 Kyodo Milk Industry Co Ltd マウス腸内菌叢の推測方法
US20140128585A1 (en) 2011-07-07 2014-05-08 Nagaoka Perfumery Co., Ltd. Fructose absorption inhibitor
WO2013008102A2 (en) 2011-07-14 2013-01-17 R.E.D. Laboratories N.V../ S.A. Methods and compositions for evaluating and/or treating chronic immune diseases
GB201112091D0 (en) 2011-07-14 2011-08-31 Gt Biolog Ltd Bacterial strains isolated from pigs
US20130022575A1 (en) 2011-07-19 2013-01-24 Microbial Rx Systems and methods of replacing intestinal flora
CN102304483A (zh) 2011-08-12 2012-01-04 北京金泰得生物科技股份有限公司 一株饲用屎肠球菌及其应用
KR101261872B1 (ko) 2011-08-23 2013-05-14 대한민국 (식품의약품안전처장) 장내 미생물 효소복합체 및 이의 제조방법
WO2013037067A1 (en) 2011-09-14 2013-03-21 University Of Guelph Media supplements and methods to culture human gastrointestinal anaerobic microorganisms
GB201117313D0 (en) 2011-10-07 2011-11-16 Gt Biolog Ltd Bacterium for use in medicine
ES2582284T3 (es) 2011-10-11 2016-09-12 Achim Biotherapeutics Ab Composición que comprende microbiota intestinal humana anaeróbicamente cultivada
CN103082292B (zh) 2011-11-02 2015-03-04 深圳华大基因研究院 罗斯氏菌(Roseburia)在治疗和预防肥胖相关疾病中的应用
CN102373172B (zh) 2011-11-03 2013-03-20 北京龙科方舟生物工程技术有限公司 一株屎肠球菌及其应用
DK3569690T3 (da) 2011-12-01 2024-11-11 Univ Tokyo Human-afledte bakterier som inducerer proliferation eller akkumulation af regulatoriske t-celler
ES2408279B1 (es) 2011-12-15 2014-09-09 Universidad De Las Palmas De Gran Canaria Bacteria acido láctica probiótica
ITBG20120010A1 (it) 2012-02-24 2013-08-25 Milano Politecnico Dispositivo per l'addestramento chirurgico
ITMI20120471A1 (it) 2012-03-26 2013-09-27 Giovanni Mogna Composizione a base di ceppi di batteri bifidobacterium longum in grado di aiutare il prolungamento della vita
JP5792105B2 (ja) 2012-03-27 2015-10-07 森永乳業株式会社 ラクト−ｎ−ビオースｉの製造方法
EP2832859B1 (en) 2012-03-30 2018-07-25 Ajinomoto Co., Inc. Diabetes-inducible bacterium
US20130280724A1 (en) 2012-04-11 2013-10-24 Nestec Sa Methods for diagnosing impending diarrhea
GB201206599D0 (en) 2012-04-13 2012-05-30 Univ Manchester Probiotic bacteria
WO2013154725A1 (en) 2012-04-13 2013-10-17 Trustees Of Boston College Prebiotic compositions and methods of use
WO2013171515A1 (en) 2012-05-18 2013-11-21 Genome Research Limited Methods and groups
ES2436251B1 (es) 2012-05-25 2014-10-08 Consejo Superior De Investigaciones Científicas (Csic) Bacteroides cect 7771 y su uso en la prevención y tratamiento de sobrepeso, obesidad y alteraciones metabólicas e inmunológicas.
AU2013271336B2 (en) 2012-06-04 2017-11-30 Centre For Digestive Diseases Compositions and methods for treating Crohn's Disease and related conditions and infections
CN106620189B (zh) 2012-06-06 2021-11-19 上海交通大学 改善肠道菌群结构的方法及应用
EP2864355B1 (en) 2012-06-25 2016-10-12 Orega Biotech Il-17 antagonist antibodies
CN104582506B (zh) 2012-07-31 2016-10-19 雀巢产品技术援助有限公司 用于促进患有炎症性肠病(ibd)的患者的肌肉骨骼健康的营养组合物
US20150211053A1 (en) 2012-08-01 2015-07-30 Bgi-Shenzhen Biomarkers for diabetes and usages thereof
US10874701B2 (en) 2012-08-16 2020-12-29 University-Industry Cooperation Group Of Kyung Hee University Lactic acid bacteria capable of preventing and/or treating senescence and dementia
HK1212222A1 (en) 2012-08-29 2016-06-10 Salix Pharmaceuticals, Inc. Laxative compositions and methods for treating constipation and related gastrointestinal diseases and conditions
WO2014036182A2 (en) 2012-08-29 2014-03-06 California Institute Of Technology Diagnosis and treatment of autism spectrum disorder
EP2894985A4 (en) 2012-09-13 2016-09-28 Massachusetts Inst Technology PROGRAMMABLE ACTIVE COMPOUND PROFILES OF TUMORED BACTERIA
KR101473058B1 (ko) 2012-09-19 2014-12-16 주식회사 쎌바이오텍 과민성 대장 증후군 예방 또는 치료용 조성물
CN103652322B (zh) 2012-09-21 2016-02-10 临沂思科生物科技有限公司 一种含乳酸菌的复合益生菌饲料添加剂的制备方法
EP3401396A1 (en) 2012-10-03 2018-11-14 Metabogen AB Treating or preventing atherosclerosis or associated diseases by beta-carotene
FR2997091B1 (fr) 2012-10-22 2016-05-06 Fond Mediterranee Infection Utilisation d'un compose antioxydant pour la culture de bacteries sensibles a la tension en oxygene
EP2914275A1 (en) 2012-10-30 2015-09-09 Nestec S.A. Compositions comprising microparticles and probiotics to deliver a synergistic immune effect
WO2014070225A1 (en) 2012-10-30 2014-05-08 Deerland Enzymes, Inc. Prebiotic compositions comprising one or more types of bacteriophage
JP2015535280A (ja) 2012-11-01 2015-12-10 レイクスユニフェルシテイト フローニンゲン 胃腸管において有益な細菌を刺激する方法及び組成物
WO2014075745A1 (en) 2012-11-19 2014-05-22 Université Catholique de Louvain Use of akkermansia for treating metabolic disorders
PT3628161T (pt) 2012-11-23 2023-05-15 Seres Therapeutics Inc Composições bacterianas sinergísticas e métodos de produção e utilização das mesmas
US8906668B2 (en) 2012-11-23 2014-12-09 Seres Health, Inc. Synergistic bacterial compositions and methods of production and use thereof
JP2016501852A (ja) 2012-11-26 2016-01-21 トーマス・ジュリアス・ボロディ 糞便微生物叢の回復のための組成物、ならびにそれらを作製および使用する方法
WO2014093655A2 (en) 2012-12-12 2014-06-19 The Broad Institute, Inc. Engineering and optimization of systems, methods and compositions for sequence manipulation with functional domains
KR20150105634A (ko) 2012-12-12 2015-09-17 더 브로드 인스티튜트, 인코퍼레이티드 서열 조작을 위한 개선된 시스템, 방법 및 효소 조성물의 유전자 조작 및 최적화
SG10201707569YA (en) 2012-12-12 2017-10-30 Broad Inst Inc Delivery, Engineering and Optimization of Systems, Methods and Compositions for Sequence Manipulation and Therapeutic Applications
US20140193464A1 (en) 2013-01-08 2014-07-10 Imagilin Technology, Llc Effects of probiotics on humans and animals under environmental or biological changes
WO2014121304A1 (en) 2013-02-04 2014-08-07 Seres Health, Inc. Compositions and methods
JP6479685B2 (ja) 2013-02-04 2019-03-06 セレス セラピューティクス インコーポレイテッド 病原性細菌生育の抑制のための組成物および方法
WO2014130540A1 (en) 2013-02-22 2014-08-28 The Regents Of The University Of California Compositions and methods for promoting growth of beneficial microbes to treat or prevent disease or prolong life
CN105228635A (zh) 2013-03-05 2016-01-06 格罗宁根大学 Faecalibacterium prausnitzii HTF-F（DSM 26943）在抑制炎症中的应用
HK1220495A1 (zh) 2013-03-14 2017-05-05 Seres Therapeutics, Inc. 从材料和组合物中检测和富集病原体的方法
CA3013541C (en) 2013-03-14 2021-01-19 Therabiome, Llc Targeted gastrointestinal tract delivery of probiotic organisms and/or therapeutic agents
US9669059B2 (en) 2013-03-15 2017-06-06 University Of Florida Research Foundation, Incorporated Butyrogenic bacteria as probiotics to treat clostridium difficile
US10076546B2 (en) 2013-03-15 2018-09-18 Seres Therapeutics, Inc. Network-based microbial compositions and methods
CN103156888A (zh) 2013-03-18 2013-06-19 广州知光生物科技有限公司 脆弱拟杆菌在制备治疗炎症性肠病组合物中的应用
CN103142656A (zh) 2013-03-18 2013-06-12 广州知光生物科技有限公司 脆弱拟杆菌在制备防治结肠癌组合物中的应用
CN103146620A (zh) 2013-03-25 2013-06-12 广州知光生物科技有限公司 具有益生菌特性的脆弱拟杆菌
JP2014196260A (ja) 2013-03-29 2014-10-16 公立大学法人奈良県立医科大学 慢性閉塞性肺疾患の予防又は治療用組成物
GB201306536D0 (en) 2013-04-10 2013-05-22 Gt Biolog Ltd Polypeptide and immune modulation
JP2016521284A (ja) 2013-05-10 2016-07-21 カリフォルニア インスティチュート オブ テクノロジー 大腸ガンのプロバイオティクスによる防止および処置
EP4234011A3 (en) 2013-06-05 2023-09-20 Rebiotix, Inc. Microbiota restoration therapy (mrt), compositions and methods of manufacture
US9511099B2 (en) 2013-06-05 2016-12-06 Rebiotix, Inc. Microbiota restoration therapy (MRT), compositions and methods of manufacture
WO2014201037A2 (en) 2013-06-10 2014-12-18 New York University Methods for manipulating immune responses by altering microbiota
WO2014200334A1 (en) 2013-06-14 2014-12-18 N.V. Nutricia Synbiotic composition for treatment of infections in allergic patients
WO2015003001A1 (en) 2013-07-01 2015-01-08 The Washington University Methods for identifying supplements that increase gut colonization by an isolated bacterial species, and compositions derived therefrom
WO2015003305A1 (zh) 2013-07-08 2015-01-15 吉瑞高新科技股份有限公司 电子烟盒
EP3019181A4 (en) 2013-07-09 2016-09-21 Puretech Ventures Llc COMPOSITIONS WITH COMBINATIONS OF BIOACTIVE MOLECULARS DERIVED FROM MICROBOTS FOR TREATING DISEASES
JP6637885B2 (ja) * 2013-07-21 2020-01-29 ペンデュラム セラピューティクス， インコーポレイテッド マイクロバイオームの特性解明、モニタリング、および処置のための方法およびシステム
WO2015017625A1 (en) 2013-07-31 2015-02-05 Wikifoods, Inc. Encapsulated functional food compositions
CN105658226B (zh) * 2013-08-16 2019-05-14 港大科桥有限公司 使用益生菌治疗癌症的方法和组合物
CN103509741B (zh) 2013-08-22 2015-02-18 河北农业大学 布劳特菌auh-jld56及其在牛蒡苷元转化中的应用
ITMI20131467A1 (it) 2013-09-06 2015-03-07 Sofar Spa Uso di una composizione comprendente microrganismi per aumentare la produzione intestinale di acido butirrico, di acido folico o di niacina e/o per diminuire la produzione intestinale di acido succinico
WO2015038731A1 (en) 2013-09-12 2015-03-19 The Johns Hopkins University Biofilm formation to define risk for colon cancer
WO2015057151A1 (en) 2013-10-18 2015-04-23 Innovafood Ab A nutritionally balanced composite meal for infants and small children and a method of producing said meal
PL229020B1 (pl) 2013-11-13 2018-05-30 Inst Biotechnologii Surowic I Szczepionek Biomed Spolka Akcyjna Nowy szczep Bifidobacterium breve
ES3017865T3 (en) 2013-11-25 2025-05-13 Nestle Sa Synergistic bacterial compositions and methods of production and use thereof
EP3082431A4 (en) 2013-12-16 2017-11-15 Seres Therapeutics, Inc. Bacterial compositions and methods of use thereof for treatment of immune system disorders
US20160334383A1 (en) 2013-12-20 2016-11-17 Uster Technologies, Ag Balling and Weighing Yarn
CN103981117B (zh) 2013-12-24 2018-10-26 北京大伟嘉生物技术股份有限公司 一株高抗逆性屎肠球菌及其培养方法和应用
CN103981115B (zh) 2013-12-24 2018-10-26 北京大伟嘉生物技术股份有限公司 一株高抗逆性屎肠球菌及其应用
CN103820363B (zh) 2014-01-27 2016-02-24 福建省农业科学院生物技术研究所 一种屎肠球菌菌粉的制备与应用
CN103865846B (zh) 2014-02-27 2016-03-30 扬州绿保生物科技有限公司 一种屎肠球菌及其制备方法
CN103865849B (zh) 2014-03-07 2016-03-02 合肥工业大学 用于克罗诺菌冷热损伤修复的前增菌液体培养基
CN103849590B (zh) 2014-03-25 2016-07-06 上海交通大学 一株耐酸短双歧杆菌BB8dpH及其应用
KR101683474B1 (ko) 2014-03-26 2016-12-08 주식회사 쎌바이오텍 과민성 대장 증후군 예방 또는 치료용 조성물
US9783858B2 (en) 2014-04-02 2017-10-10 Northwestern University Altered microbiome of chronic pelvic pain
KR101583546B1 (ko) 2014-04-09 2016-01-11 국립암센터 유전자 다형성을 이용한 소라페닙 치료에 대한 반응성 예측방법
US10300137B2 (en) * 2014-04-10 2019-05-28 Riken Compositions and methods for induction of TH17 cells
CN104195075B (zh) 2014-08-14 2017-04-19 生合生物科技股份有限公司 一种屎肠球菌ef08及包含它的饲料添加物和饲料
WO2015168534A1 (en) 2014-05-02 2015-11-05 Novogy, Inc. Therapeutic treatment of gastrointestinal microbial imbalances through competitive microbe displacement
ES2960598T3 (es) 2014-05-08 2024-03-05 Kiora Pharmaceuticals Gmbh Compuestos para el tratamiento de enfermedades y trastornos oftálmicos
CN106687130B (zh) 2014-08-05 2020-01-21 深圳华大基因科技有限公司 真杆菌属在预防和治疗结直肠癌相关疾病中的用途
EP3453396A1 (en) 2014-08-28 2019-03-13 Yale University Compositions and methods for treating an inflammatory disease or disorder
US10022408B2 (en) 2014-08-29 2018-07-17 Chr. Hansen A/S Probiotic Bifidobacterium adolescentis strains
US20160058808A1 (en) 2014-09-03 2016-03-03 California Institute Of Technology Microbe-based modulation of serotonin biosynthesis
CN104546933A (zh) 2014-09-30 2015-04-29 深圳华大基因科技有限公司 粪拟杆菌在治疗或预防类风湿性关节炎或其相关疾病中的应用
CN104546940A (zh) 2014-09-30 2015-04-29 深圳华大基因科技有限公司 平常拟杆菌在治疗或预防类风湿性关节炎或其相关疾病中的应用
CN104546935A (zh) 2014-09-30 2015-04-29 深圳华大基因科技有限公司 多形拟杆菌在治疗或预防类风湿性关节炎或其相关疾病中的应用
CN104546934B (zh) 2014-09-30 2019-04-09 深圳华大基因科技有限公司 粪副拟杆菌在治疗或预防类风湿性关节炎或其相关疾病中的应用
CN104546942A (zh) 2014-09-30 2015-04-29 深圳华大基因科技有限公司 多氏拟杆菌在治疗或预防类风湿性关节炎或其相关疾病中的应用
CN104546932A (zh) 2014-09-30 2015-04-29 深圳华大基因科技有限公司 卵形拟杆菌在治疗或预防类风湿性关节炎或其相关疾病中的应用
WO2016057671A1 (en) 2014-10-07 2016-04-14 University Of Virginia Patent Foundation Compositions and methods for preventing and treating infection
DK3209308T3 (da) 2014-10-24 2022-10-03 Evolve Biosystems Inc Aktiverede bifidobakterier og fremgangsmåder til anvendelse deraf
AU2015339290B8 (en) 2014-10-30 2021-08-26 California Institute Of Technology Compositions and methods comprising bacteria for improving behavior in neurodevelopmental disorders
WO2016069795A2 (en) 2014-10-30 2016-05-06 California Institute Of Technology Compositions and methods comprising bacteria for improving behavior in neurodevelopmental disorders
WO2016070151A1 (en) 2014-10-31 2016-05-06 Whole Biome. Inc. Methods and compositions relating to microbial treatment and diagnosis of disorders
CN104435000A (zh) 2014-11-12 2015-03-25 江南大学 乳酸菌对支气管哮喘治疗中的应用
ES3010296T3 (en) 2014-11-25 2025-04-02 Memorial Sloan Kettering Cancer Center Intestinal microbiota and gvhd
MA41020A (fr) 2014-11-25 2017-10-03 Evelo Biosciences Inc Compositions probiotiques et prébiotiques, et leurs procédés d'utilisation pour la modulation du microbiome
KR20170091157A (ko) 2014-12-23 2017-08-08 4디 파마 리서치 리미티드 피린 폴리펩티드 및 면역 조정
HUE035569T2 (en) 2014-12-23 2018-05-28 4D Pharma Res Ltd Bacteroides thetaiotaomicron strain and its use in reducing inflammation
CN104560820B (zh) 2014-12-30 2017-10-20 杭州师范大学 屎肠球菌kq2.6及应用
WO2016118730A1 (en) 2015-01-23 2016-07-28 Temple University-Of The Commonwealth System Of Higher Education Use of short chain fatty acids in cancer prevention
CN105982919A (zh) 2015-02-26 2016-10-05 王汉成 生物减速剂抗癌技术
WO2016139217A1 (en) 2015-03-04 2016-09-09 Ab-Biotics, S.A. Composition comprising anaerobically cultivated human intestinal microbiota
WO2016149449A1 (en) 2015-03-18 2016-09-22 Tufts University Compositions and methods for preventing colorectal cancer
CA2976956A1 (en) 2015-03-18 2016-09-22 Whole Biome Inc. Methods and compositions relating to microbial treatment and diagnosis of skin disorders
TW201717975A (zh) 2015-06-01 2017-06-01 美國芝加哥州立大學 藉由控制共生微生物叢來治療癌症
HUE045413T2 (hu) 2015-06-15 2019-12-30 4D Pharma Res Ltd Baktériumtörzseket tartalmazó készítmények
MA41010B1 (fr) 2015-06-15 2020-01-31 4D Pharma Res Ltd Compositions comprenant des souches bactériennes
LT3360559T (lt) * 2015-06-15 2019-12-27 4D Pharma Research Limited Kompozicijos, apimančios bakterijų kamienus
MA41060B1 (fr) 2015-06-15 2019-11-29 4D Pharma Res Ltd Compositions comprenant des souches bactériennes
ES2753779T3 (es) 2015-06-15 2020-04-14 4D Pharma Res Ltd Blautia stercosis y wexlerae para la utilización en el tratamiento de enfermedades inflamatorias y autoinmunes
CN105112333A (zh) 2015-08-31 2015-12-02 江南大学 一种具有良好肠道定殖能力的长双歧杆菌及筛选方法和应用
CN108513545B (zh) 2015-11-20 2020-11-03 4D制药研究有限公司 包含细菌菌株的组合物
GB201520497D0 (en) 2015-11-20 2016-01-06 4D Pharma Res Ltd Compositions comprising bacterial strains
GB201520631D0 (en) 2015-11-23 2016-01-06 4D Pharma Res Ltd Compositions comprising bacterial strains
GB201520638D0 (en) 2015-11-23 2016-01-06 4D Pharma Res Ltd Compositions comprising bacterial strains
WO2017091753A1 (en) 2015-11-25 2017-06-01 Memorial Sloan-Kettering Cancer Center Methods and compositions for reducing vancomycin-resistant enterococci infection or colonization
SG11201807195VA (en) 2016-03-04 2018-09-27 4D Pharma Plc Compositions comprising bacterial blautia strains for treating visceral hypersensitivity
TW201821093A (zh) 2016-07-13 2018-06-16 英商４Ｄ製藥有限公司 包含細菌菌株之組合物
GB201621123D0 (en) 2016-12-12 2017-01-25 4D Pharma Plc Compositions comprising bacterial strains
WO2018112363A1 (en) 2016-12-16 2018-06-21 Evelo Biosciences, Inc. Methods of treating cancer using parabacteroides
WO2018112365A2 (en) 2016-12-16 2018-06-21 Evelo Biosciences, Inc. Methods of treating colorectal cancer and melanoma using parabacteroides goldsteinii

Also Published As

Publication number Publication date
CY1125136T1 (el) 2024-02-16
MX2017016398A (es) 2018-03-02
WO2016203223A1 (en) 2016-12-22
IL255662A (en) 2018-01-31
KR102616152B1 (ko) 2023-12-19
IL294213A (en) 2022-08-01
US20170368110A1 (en) 2017-12-28
MD3650033T2 (ro) 2022-08-31
DK3650033T3 (da) 2022-04-11
SA517390513B1 (ar) 2022-01-24
SI3650033T1 (sl) 2022-05-31
SMT202200174T1 (it) 2022-05-12
CO2017012829A2 (es) 2018-02-28
RS59038B1 (sr) 2019-08-30
EP3650033B1 (en) 2022-02-16
EP4056191A1 (en) 2022-09-14
CL2017003142A1 (es) 2018-06-22
MD3206700T2 (ro) 2019-12-31
CY1122306T1 (el) 2021-01-27
US20190247448A1 (en) 2019-08-15
NZ777234A (en) 2022-02-25
US11331352B2 (en) 2022-05-17
DK3360559T3 (da) 2019-12-02
JP7368433B2 (ja) 2023-10-24
PL3206700T3 (pl) 2019-11-29
AU2016278072B2 (en) 2020-07-23
US10864236B2 (en) 2020-12-15
PL3650033T3 (pl) 2022-05-16
HK1258573A1 (en) 2019-11-15
CA2988695A1 (en) 2016-12-22
US10744167B2 (en) 2020-08-18
EP3206700A1 (en) 2017-08-23
ME03595B (me) 2020-07-20
LT3206700T (lt) 2019-08-26
LT3360559T (lt) 2019-12-27
SMT201900446T1 (it) 2019-09-09
ES2742514T3 (es) 2020-02-14
EP3360559A1 (en) 2018-08-15
US20220218766A1 (en) 2022-07-14
ES2766867T3 (es) 2020-06-15
JP2017533882A (ja) 2017-11-16
JP6527280B2 (ja) 2019-06-05
ZA201707745B (en) 2018-11-28
HRP20192283T1 (hr) 2020-03-06
DK3206700T3 (da) 2019-08-05
PT3206700T (pt) 2019-08-21
JP2022003086A (ja) 2022-01-11
AU2020244599A1 (en) 2020-11-05
AU2021254635B2 (en) 2024-09-12
MX378686B (es) 2025-03-10
HUE046770T2 (hu) 2020-03-30
AU2021204486A1 (en) 2021-07-29
CY1122581T1 (el) 2021-01-27
SG10201912320TA (en) 2020-02-27
BR112017026564B1 (pt) 2022-05-03
KR20180012769A (ko) 2018-02-06
US10736926B2 (en) 2020-08-11
HUE058252T2 (hu) 2022-07-28
NZ737752A (en) 2022-02-25
EP3650033A1 (en) 2020-05-13
IL294213B2 (en) 2023-08-01
TWI797058B (zh) 2023-04-01
EA038405B1 (ru) 2021-08-24
RS63089B1 (sr) 2022-04-29
JP2019163289A (ja) 2019-09-26
MD3360559T2 (ro) 2020-02-29
TW201709917A (zh) 2017-03-16
JP2019001815A (ja) 2019-01-10
CN108271353A (zh) 2018-07-10
AU2021204486B2 (en) 2022-06-30
AU2016278072A1 (en) 2017-12-14
US20190099458A1 (en) 2019-04-04
AU2021254635A1 (en) 2021-11-18
IL255662B (en) 2022-08-01
PT3650033T (pt) 2022-05-25
JP6957554B2 (ja) 2021-11-02
SG10201912319SA (en) 2020-02-27
EA201890051A1 (ru) 2018-05-31
ES2910946T3 (es) 2022-05-17
SMT201900736T1 (it) 2020-01-14
SI3360559T1 (sl) 2020-02-28
JP6439037B2 (ja) 2018-12-19
PL3360559T3 (pl) 2020-04-30
PT3360559T (pt) 2020-01-06
BR112017026564A2 (sr) 2018-08-21
EP3360559B1 (en) 2019-10-23
HUE044617T2 (hu) 2019-11-28
CN108271353B (zh) 2021-08-20
AU2020244599B2 (en) 2021-07-22
MA55434B1 (fr) 2022-02-28
US20210145900A1 (en) 2021-05-20
EP3206700B1 (en) 2019-06-05
LT3650033T (lt) 2022-04-11
HRP20191344T1 (hr) 2019-11-01
CN114028431A (zh) 2022-02-11
ME03511B (me) 2020-04-20
MX2021000077A (es) 2021-04-12
SI3206700T1 (sl) 2019-08-30
PE20180242A1 (es) 2018-01-31
HRP20220389T1 (hr) 2022-06-24
MA55434A (fr) 2020-05-13
IL294213B1 (en) 2023-04-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP7368433B2 (ja) 細菌株を含む組成物
JP6389950B2 (ja) 細菌株を含む組成物
JP2018203742A (ja) 細菌株を含む組成物
HK40081250A (en) Compositions comprising bacterial strains
HK1258573B (en) Compositions comprising bacterial strains
HK1240833B (en) Compositions comprising bacterial strains
HK1240833A1 (en) Compositions comprising bacterial strains
OA18777A (en) Compositions comprising bacterial strains.