[go: up one dir, main page]

RS57638B1 - Kondenzovani imidazolilimidazoli kao antiviralna jedinjenja - Google Patents

Kondenzovani imidazolilimidazoli kao antiviralna jedinjenja

Info

Publication number
RS57638B1
RS57638B1 RS20181062A RSP20181062A RS57638B1 RS 57638 B1 RS57638 B1 RS 57638B1 RS 20181062 A RS20181062 A RS 20181062A RS P20181062 A RSP20181062 A RS P20181062A RS 57638 B1 RS57638 B1 RS 57638B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
imidazol
mmol
tert
methyl
naphtho
Prior art date
Application number
RS20181062A
Other languages
English (en)
Inventor
Elizabeth Bacon
Jeromy Cottell
Ashley A Katana
Darryl Kato
Evan S Krygowski
John O Link
James Taylor
Chinh Viet Tran
Martin Teresa A Trejo
Zheng-Yu Yang
Sheila Zipfel
Original Assignee
Gilead Pharmasset Llc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=47324426&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=RS57638(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Gilead Pharmasset Llc filed Critical Gilead Pharmasset Llc
Publication of RS57638B1 publication Critical patent/RS57638B1/sr

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
    • C07D491/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D491/04—Ortho-condensed systems
    • C07D491/044—Ortho-condensed systems with only one oxygen atom as ring hetero atom in the oxygen-containing ring
    • C07D491/052—Ortho-condensed systems with only one oxygen atom as ring hetero atom in the oxygen-containing ring the oxygen-containing ring being six-membered
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/4164—1,3-Diazoles
    • A61K31/4188—1,3-Diazoles condensed with other heterocyclic ring systems, e.g. biotin, sorbinil
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/7056—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing five-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A61K31/7064—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A61K31/7064—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines
    • A61K31/7068—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines having oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. cytidine, cytidylic acid
    • A61K31/7072—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines having oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. cytidine, cytidylic acid having two oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. uridine, uridylic acid, thymidine, zidovudine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/06—Tripeptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/07—Tetrapeptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
    • A61K38/21—Interferons [IFN]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/59—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes
    • A61K47/60—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes the organic macromolecular compound being a polyoxyalkylene oligomer, polymer or dendrimer, e.g. PEG, PPG, PEO or polyglycerol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/12—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F5/00—Compounds containing elements of Groups 3 or 13 of the Periodic Table
    • C07F5/02—Boron compounds
    • C07F5/025—Boronic and borinic acid compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Steroid Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Pyrrole Compounds (AREA)
  • Hydrogenated Pyridines (AREA)
  • Furan Compounds (AREA)

Description

Opis
STANJE TEHNIKE
[0001] Hepatitis C je prepoznat kao hronično virusno oboljenje jetre koje je okarakterisano kao oboljenje jetre. Iako lekovi koji deluju na jetru imaju široku primenu i pokazali su efikasnost, toksičnost i drugi propratni efekti su ograničili njihovu primenljivost. Inhibitori virusa hepatitisa C (HCV) su korisni da ograniče uspostavljanje i napredovanje infekcije HCV kao i u dijagnostičkim testovima za HCV.
[0002] Postoji potreba za novim HCV terapijskim agensima. Naročito, postoji potreba za HCV terapijskim agensima koji imaju široku aktivnost protiv HCV genotipova (npr. genotipovi 1a, 1b, 2a, 3a, 4a). Takođe postoji posebna potreba za agensima koji su manje podložni virusnoj rezistenciji. Rezistentne mutacije na inhibitore su opisane za HCV NS5A za genotipove 1a i 1b u Antimicrobial Agents and Chemotherapy, Septembar 2010, tom 54, str. 3641-3650.
REZIME
[0003] Predmetni pronalazak obezbeđuje jedinjenje sa formulom (I):
E<1a>-V<1a>-C(=O)-P<1a>-W<1a>-P<1b>-C(=O)-V<1b>-E<1b>(I)
gde:
W<1a>je
i W<1a>je po izboru supstituisano sa jednom ili više grupa koje su nezavisno odabrane od halo, alkil, haloalkil, ili cijano;
Y<5>je -O-CH2-, ili -CH2-O-; X<5>je -CH2-CH2- ili -CH=CH-;
E<1a>je -N(H)(alkoksikarbonil), -N(H)(cikloalkilkarbonil) ili -N(H)(cikloalkiloksikarbonil); ili E<1a>-V<1a>uzeti zajedno su R<9a>;
E<1b>je -N(H)(alkoksikarbonil), -N(H)(cikloalkilkarbonil) ili -N(H)(cikloalkiloksikarbonil); ili E<1b>-V<1b>uzeti zajedno su R<9b>;
V<1a>i V<1b>je svako nezavisno odabrano od:
P<1a>je odabrano od:
P<1b>je odabrano od:
i
R<9a>i R<9b>je svako nezavisno:
ili farmaceutski prihvatljivu so tog jedinjenja.
[0004] Utvrđeno je da jedinjenja sa formulom (I) poseduju korisnu aktivnost protiv HCV genotipova 1-Dodatno određena jedinjenja sa formulom (I) imaju značajnu potentnost protiv rezistentnih varijanti u GT1.
[0005] U skladu sa tim, određena jedinjenja sa formulom (I) poseduju korisne farmakološke karakteristike koje ih čine pogodnim da ispune trenutnu potrebu za HCV agensima sa takvim korisnim karakteristikama.
[0006] U jednom tehničkom rešenju predmetna objava obezbeđuje jedinjenje koje ima poboljšane inhibitorne ili farmakokinetičke karakteristike, uključujući povećanu aktivnost protiv razvoja virusne rezistencije, poboljšanu oralnu bioraspoloživost, veću potentnost (na primer, u inhibiranju HCV aktivnosti) ili produženi efikasni polu-život in vivo. Određena jedinjenja predmetne objave mogu da imaju manje propratnih efekata, manje komplikovane rasporede doziranja, ili da budu oralno aktivna.
DETALJAN OPIS
[0007] Sada će se detaljno ukazati na određena tehnička rešenja predmetne objave, čiji su primeri ilustrovani u pratećim strukturama i formulama. Dok se objava bude opisivala u sprezi sa nabrojanim tehničkim rešenjima, podrazumevaće se da nemaju nameru da predmetnu objavu ograniče na ova tehnička rešenja. Naprotiv, nameravano je da predmetna objava pokrije sve alternative, modifikacije, i ekvivalente, koji mogu da budu uključeni u obim predmetne objave kao što je definisano tehničkim rešenjima.
Jedinjenja
[0008] Jedinjenja predmetne objave isključuju do sada poznata jedinjenja. Međutim, u okviru je predmetne objave da se koriste jedinjenja za koja prethodno nije bilo poznato da imaju antivirusne karakteristike za antivirusne svrhe (npr. da proizvode anti virusni efekat kod životinje). Što se tiče Sjedinjenih Američkih Država, jedinjenja ili kompozicije u ovom tekstu isključuju jedinjenja koja su predviđena pod 35 USC §102 ili ona koja su očigledna pod 35 USC §103.
[0009] Kad god je ovde opisano jedinjenje supstituisano sa više od jednom istom naznačenom grupom, npr., "R<1>" ili "A<3>", tada će se podrazumevati da grupe mogu da budu iste ili različite, t.j., svaka grupa je nezavisno odabrana.
[0010] "Odsutna" - Neke grupe su definisane tako da mogu da budu odsutne. Kada je grupa odsutna ona postaje vezni konektor. Dve grupe koje bi inače bile spojene za tu odsutnu grupu povezane su jedna sa drugom preko veze.
[0011] "P" grupe (npr. P<1a>i P<1b>) definisane za formulu (I) ovde imaju jednu vezu sa -C(=O)-formule (I) i jednu vezu sa W<1a>grupom. Treba razumeti da je azot P grupe povezan sa -C(=O)- grupom formule (I) i da je ugljenik P grupe povezan sa W<1a>grupom.
[0012] U W<1a>grupi Y<5>grupa je prisutna. Kada je ta Y<5>grupa definisana kao -O-CH2-, ili -CH2-O- grupa, te Y<5>grupe imaju orjentaciju. Y<5>grupa je povezana sa W<1a>grupom u istoj s leva na desno orjentaciji od kojih je svaka nacrtana. Tako na primer, kada Y<5>je -O-CH2-, predviđena je direktno sledeća struktura:
[0013] Na primer, kada Y<5>je -CH2-O-, predviđena je direktno sledeća struktura:
[0014] U strukturi I, W<1a>grupa ima s leva-na-desno orjentaciju kao što je prikazano u I i W<1a>kako su nacrtane.
E<1a>-V<1a>-C(=O)-P<1a>-W<1a>-P<1b>-C(=O)-V<1b>-E<2b>(I)
gde:
W<1a>je
[0015] Na primer, P<1a>grupa je povezana sa imidazol grupom od W<1a>, i P<1b>grupa je povezana sa pentacikličnim prstenastim sistemom od W<1a>.
[0016] "Alkil" je C1-C18ugljovodonik koji sadrži normalne, sekundarne, tercijarne ili cikllične atome ugljenika. Primeri su metil (Me, -CH3), etil (Et, -CH2CH3), 1-propil (n-Pr, npropil, -CH2CH2CH3), 2-propil (i-Pr, i-propil, -CH(CH3)2), 1-butil (n-Bu, n-butil, -CH2CH2CH2CH3), 2-metil-1-propil (i-Bu, i-butil, -CH2CH(CH3)2), 2-butil (s-Bu, s-butil, -CH(CH3)CH2CH3), 2-metil-2-propil (t-Bu, t-butil, -C(CH3)3), 1-pentil (n-pentil, -CH2CH2CH2CH2CH3), 2-pentil (-CH(CH3)CH2CH2CH3), 3-pentil (-CH(CH2CH3)2), 2-metil-2-butil (-C(CH3)2CH2CH3), 3-metil-2-butil (-CH(CH3)CH(CH3)2), 3-metil-1-butil (-CH2CH2CH(CH3)2), 2-metil-1-butil (-CH2CH(CH3)CH2CH3), 1-heksil (-CH2CH2CH2CH2CH2CH3), 2-heksil (-CH(CH3)CH2CH2CH2CH3), 3-heksil (-CH(CH2CH3)(CH2CH2CH3)), 2-metil-2-pentil (-C(CH3)2CH2CH2CH3), 3-metil-2-pentil (-CH(CH3)CH(CH3)CH2CH3), 4-metil-2-pentil (-CH(CH3)CH2CH(CH3)2), 3-metil-3-pentil (-C(CH3)(CH2CH3)2), 2-metil-3-pentil (-CH(CH2CH3)CH(CH3)2), 2,3-dimetil-2-butil (-C(CH3)2CH(CH3)2), 3,3-dimetil-2-butil (-CH(CH3)C(CH3)3, i ciklopropilmetil
[0017] "Alkenil" je C2-C18ugljovodonik koji sadrži normalne, sekundarne, tercijarne ili ciklične atome ugljenika sa najmanje jednim nezasićenim mestom, t.j. ugljenik-ugljenik, sp<2>dvostrukom vezom. Primeri uključuju, ali nisu ograničeni na, etilen ili vinil (-CH=CH2), alil (-CH2CH=CH2), ciklopentenil (-C5H7), i 5-heksenil (-CH2CH2CH2CH2CH=CH2).
[0018] "Alkinil" je C2-C18ugljovodonik koji sadrži normalne, sekundarne, tercijarne ili ciklične atome ugljenika sa najmanje jednim nezasićenim mestom, t.j. ugljenik-ugljenik, sp trostrukom vezom. Primeri uključuju, ali nisu ograničeni na, acetilensku (-C≡CH) i propargil (-CH2C≡CH).
[0019] "Alkilen" se odnosi na zasićeni, razgranati ili ravan lanac ili ciklični ugljovodonični radikal od 1-18 ugljenikovih atoma, i koji ima dva monovalentna radikalna centra dobijena uklanjanjem dva atoma vodonika sa istog ili dva različita ugljenikova atoma osnovnog alkana. Tipični alkilen radikali uključuju, ali nisu ograničeni na, metilen (-CH2-) 1,2-etil (-CH2CH2-), 1,3-propil (-CH2CH2CH2-), 1,4-butil (-CH2CH2CH2CH2-), i slično.
[0020] "Alkenilen" se odnosi na nezasićeni, razgranati ili ravan lanac ili ciklični ugljovodonični radikal od 2-18 ugljenikovih atoma, i koji ima dva monovalentna radikalna centra dobijena uklanjanjem dva atoma vodonika sa istog ili dva različita ugljenikova atoma osnovnog alkena. Tipični radikali alkenilena uključuju, ali nisu ograničeni na, 1,2-etilen (-CH=CH-).
[0021] "Alkinilen" se odnosi na nezasićeni, razgranati ili ravan lanac ili ciklični ugljovodonični radikal od 2-18 ugljenikovih atoma, i koji ima dva monovalentna radikalna centra dobijena uklanjanjem dva atoma vodonika sa istog ili dva različita ugljenikova atoma osnovnog alkina. Tipični radikali alkinilena uključuju, ali nisu ograničeni na, acetilen (-C≡C-), propargil (-CH2C≡C-), i 4-pentinil (-CH2CH2CH2C≡CH).
[0022] Termin "alkoksi" ili "alkiloksi," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na alkil grupu vezanu za osnovni molekularni deo preko atoma kiseonika.
[0023] Termin "alkoksikarbonil," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na alkoksi grupu vezanu za osnovni molekularni deo preko karbonilne grupe.
[0024] Termin "cikloalkil," kao što je ovde korišćeno, odnosi se na zasićeni monociklični, ugljovodonični prstenasti sistem koji ima tri do sedam ugljenikovih atoma i nula heteroatoma. Reprezentativni primeri cikloalkil grupa uključuju, ali nisu ograničeni na, ciklopropil, ciklopentil, i cikloheksil. Cikloalkil grupe predmetne objave su po izboru supstituisane sa jednim, dva, tri, četiri, ili pet supstituenata nezavisno odabrana od alkoksi, alkil, aril, cijano, halo, haloalkoksi, haloalkil, heterociklil, hidroksi, hidroksialkil, nitro, i -NR<x>R<y>gde aril i heterociklil su dodatno po izboru supstituisani sa jednim, dva, ili tri supstituenta nezavisno odabrana od alkoksi, alkil, cijano, halo, haloalkoksi, haloalkil, hidroksi, i nitro.
[0025] Termin "cikloalkilkarbonil," kao što je ovde korišćeno, se odnosi na cikloalkil grupu vezanu za osnovni molekularni deo preko karbonil grupe.
[0026] Termin "cikloalkiloksi," kao što je ovde korišćeno, se odnosi na cikloalkil grupu vezanu za osnovni molekularni deo preko atoma kiseonika.
[0027] Termin "cikloalkiloksikarbonil," kao što je ovde korišćeno, se odnosi na cikloalkiloksi grupu vezanu za osnovni molekularni deo preko karbonil grupe.
[0028] "Aril" označava monovalentni aromatični ugljovodonični radikal od 6-20 ugljenikovih atoma izveden uklanjanjem jednog vodonikovog atoma sa jednog ugljenikovog atoma osnovnog aromatičnog prstenastog sistema. Tipične aril grupe uključuju, ali nisu ograničene na, radikale izvedene iz benzen, supstituisani benzen, naftalen, antracen, bifenil, i slično.
[0029] "Arilalkil" se odnosi na aciklični alkil radikal u kojem jedan od vodonikovih atoma koji je vezan za atom ugljenika, tipično terminalni ili sp<3>ugljenikov atom, je zamenjen sa aril radikalom. Tipične arilalkil grupe uključuju, ali nisu ograničene na, benzil, 2-feniletan-1-il, naftilmetil, 2-naftiletan-1-il, naftobenzil, 2-naftofeniletan-1-il i slično. Arilalkil grupa sadrži 6 do 20 ugljenikovih atoma, npr., alkil deo, uključujući alkanil, alkenil ili alkinil grupe, od arilalkil grupe je 1 do 6 ugljenikovih atoma i aril deo je 5 do 14 ugljenikovih atoma.
[0030] "Supstituisani alkil", "supstituisani aril", i "supstituisani arilalkil" označava alkil, aril, i arilalkil redom, u kojima je jedan ili više atoma vodonika svaki nezavisno zamenjen sa nevodoničnim supstituentom. Tipični supstituenti uključuju, ali nisu ograničeni na: halo (npr. F, Cl, Br, I), -R, -OR, -SR, -NR2, -CF3, -CCl3, -OCF3, -CN, -NO2, -N(R)C(=O)R, -C(=O)R, -OC(=O)R, -C(O)OR, -C(=O)NRR, -S(=O)R, -S(=O)2OR, -S(=O)2R, -OS(=O)2OR, -S(=O)2NRR, i svaka R je nezavisno -H, alkil, aril, arilalkil, ili heterociklus. Alkilen, alkenilen, i alkinilen grupe mogu takođe biti slično supstituisane.
[0031] Termin "po izboru supstituisan" u odnosu na posebni deo jedinjenja sa formulom I, (npr., po izboru supstituisana aril grupa) se odnosi na deo koji ima 0, 1, 2, ili više supstituenata.
[0032] Simbol "-----" u prstenastoj strukturi označava da je veza jednostruka ili dvostruka veza. U neograničavajućem primeru,
može biti
[0033] "Haloalkil" kao što je ovde korišćeno uključuje alkil grupu supstituisanu sa jednim ili više halogena (npr. F, Cl, Br, ili I). Reprezentativni primeri haloalkila uključuju trifluorometil, 2,2,2-trifluoroetil, i 2,2,2-trifluoro-1-(trifluorometil)etil.
[0034] "Heterociklus" ili "heterociklil" kao što je ovde korišćeno uključuje kao primer i ne kao ograničenje ove heterocikluse opisane u Paquette, Leo A.; Principles of Modern Heterocyclic Chemistry (W.A. Benjamin, Njujork, 1968), posebno poglavlja 1, 3, 4, 6, 7, i 9; The Chemistry of Heterocyclic Compounds, A Series of Monographs" (John Wiley & Sons, Njujork, 1950 do danas), posebno tomovi 13, 14, 16, 19, i 28; i J. Am. Chem. Soc. (1960) 82:5566. U jednom specifičnom tehničkom rešenju, "heterociklus" uključuje "karbociklus" kao što je ovde definisano, gde jedean ili više (npr. 1, 2, 3, ili 4) ugljenikovih atoma je zamenjeno sa heteroatomom (npr. O, N, ili S). Termin heterociklus takođe uključuje "heteroaril" koji je heterociklus gde najmanje jedan heterociklični prsten je aromatičan.
[0035] Primeri heterociklusa uključuju kao primer i ne kao ograničenje piridil, dihidropiridil, tetrahidropiridil (piperidil), tiazolil, tetrahidrotiofenil, sumpor oksidovani tetrahidrotiofenil, pirimidinil, furanil, tienil, pirolil, pirazolil, imidazolil, tetrazolil, benzofuranil, tianaftalenil, indolil, indolenil, hinolinil, izohinolinil, benzimidazolil, piperidinil, 4-piperidonil, pirolidinil, 2-pirolidonil, pirolinil, tetrahidrofuranil, tetrahidrohinolinil, tetrahidroizohinolinil, dekahidrohinolinil, oktahidroizohinolinil, azocinil, triazinil, 6H-1,2,5-tiadiazinil, 2H,6H-1,5,2-ditiazinil, tienil, tiantrenil, piranil, izobenzofuranil, hromenil, ksantenil, fenoksatinil, 2H-pirolil, izotiazolil, izoksazolil, pirazinil, piridazinil, indolizinil, izoindolil, 3H-indolil, 1H-indazolil, purinil, 4H-hinolizinil, ftalazinil, naftiridinil, hinoksalinil, hinazolinil, cinolinil, pteridinil, 4H-karbazolil, karbazolil, β-karbolinil, fenantridinil, akridinil, pirimidinil, fenantrolinil, fenazinil, fenotiazinil, furazanil, fenoksazinil, izohromanil, hromanil, imidazolidinil, imidazolinil, pirazolidinil, pirazolinil, piperazinil, indolinil, izoindolinil, hinuklidinil, morfolinil, oksazolidinil, benzotriazolil, benzizoksazolil, oksindolil, benzoksazolinil, izatinoil, i bis-tetrahidrofuranil:
[0036] Kao primer i ne kao ograničenje, ugljenikom vezani heterociklusi su vezani na poziciji 2, 3, 4, 5, ili 6 piridina, poziciji 3, 4, 5, ili 6 piridazina, poziciji 2, 4, 5, ili 6 pirimidina, poziciji 2, 3, 5, ili 6 pirazina, poziciji 2, 3, 4, ili 5 furana, tetrahidrofurana, tiofurana, tiofena, pirola ili tetrahidropirola, poziciji 2, 4, ili 5 oksazola, imidazola ili tiazola, poziciji 3, 4, ili 5 izoksazola, pirazola, ili izotiazola, poziciji 2 ili 3 aziridina, poziciji 2, 3, ili 4 azetidina, poziciji 2, 3, 4, 5, 6, 7, ili 8 hinolina ili poziciji 1, 3, 4, 5, 6, 7, ili 8 izohinolina. Još tipičnije, ugljenikom vezani heterociklusi uključuju 2-piridil, 3-piridil, 4-piridil, 5-piridil, 6-piridil, 3-piridazinil, 4-piridazinil, 5-piridazinil, 6-piridazinil, 2-pirimidinil, 4-pirimidinil, 5-pirimidinil, 6-pirimidinil, 2-pirazinil, 3-pirazinil, 5-pirazinil, 6-pirazinil, 2-tiazolil, 4-tiazolil, ili 5-tiazolil.
[0037] Kao primer i ne kao ograničenje, azotom vezani heterociklusi su vezani na poziciji 1 aziridina, azetidina, pirola, pirolidina, 2-pirolina, 3-pirolina, imidazola, imidazolidina, 2-imidazolina, 3-imidazolina, pirazola, pirazolina, 2-pirazolina, 3-pirazolina, piperidina, piperazina, indola, indolina, 1H-indazola, poziciji 2 izoindola, ili izoindolina, poziciji 4 morfolina, i poziciji 9 karbazola, ili β-karbolina. Još tipičnije, azotom vezani heterociklusi uključuju 1-aziridil, 1 -azetedil, 1-pirolil, 1 -imidazolil, 1-pirazolil, i 1-piperidinil.
[0038] "Karbociklus" se odnosi na zasićen, nezasićen ili aromatični prsten koji ima do oko 25 ugljenikovih atoma. Tipično, karbociklus ima oko 3 do 7 ugljenikovih atoma kao monociklus, oko 7 do 12 ugljenikovih atoma kao biciklus, i do oko 25 ugljenikovih atoma kao policiklus. Monociklični karbociklusi tipično imaju 3 do 6 atoma prstena, još tipičnije 5 ili 6 atoma prstena. Biciklični karbociklusi tipično imaju 7 do 12 atoma prstena, npr., raspoređenih kao biciklo [4,5], [5,5], [5,6] ili [6,6] sistem, ili 9 ili 10 atoma prstena raspoređenih kao biciklo [5,6] ili [6,6] sistem. Termin karbociklus uključuje "cikloalkil" koji je zasićen ili nezasićen karbociklus. Primeri monocikličnih karbociklusa uključuju ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, 1-ciklopent-1-enil, 1-ciklopent-2-enil, 1-ciklopent-3-enil, cikloheksil, 1-cikloheks-1-enil, 1-cikloheks-2-enil, 1-cikloheks-3-enil, fenil, spiril i naftil.
[0039] Termin "amino," kao što je ovde korišćeno, se odnosi na -NH2.
[0040] Termin "hiralni" se odnosi na molekule koji imaju svojstvo nepreklapanja sa slikom u ogledalu, dok termin"ahiralni" se odnosi na molekule koji se mogu preklopiti sa slikom u ogledalu.
[0041] Termin "stereoizomeri" se odnosi na jedinjenja koja imaju identičnu hemijsku konstituciju, ali se razlikuju u odnosu na raspored atoma ili grupa u prostoru.
[0042] "Dijastereomer" se odnosi na stereoizomer sa dva ili više centara hiralnosti i čiji se molekuli ne ponašaju kao lik i slika u ogledalu. Dijastereomeri imaju različite fizičke karakteristike, npr., tačke topljenja, tačke ključanja, spektralne karakteristike, i reaktivnosti. Smeše dijastereomera se mogu razdvojiti analitičkim procedurama visoke rezolucije kao što su elektroforeza i hromatografija.
[0043] "Enantiomeri" se odnose na dva stereoizomera jedinjenja koja se ne mogu preklopiti kao lik i slika u ogledalu.
[0044] Termin "tretman" ili "lečenje," u meri u kojoj se odnosi na bolest ili stanje uključuje sprečavanje pojave bolesti ili stanja, inhibiciju bolesti ili stanja, eliminaciju bolesti ili stanja, i/ili olakšavanje jednog ili više simptoma bolesti ili stanja.
[0045] Stereohemijske definicije i konvencije koje su ovde primenjene uopšteno slede S. P. Parker, Ed., McGraw-Hill Dictionary of Chemical Terms (1984) McGraw-Hill Book Company, Njujork; i Eliel, E. i Wilen, S., Stereochemistry of Organic Compounds (1994) John Wiley & Sons, Inc., Njujork. Mnoga organska jedinjenja postoje u optički aktivnim oblicima, t.j., ona imaju sposobnost da rotiraju ravan linearno-polarizovane svetlosti. U opisivanju optički aktivnog jedinjenja, prefiksi (D i L) ili (R i S) se primenjuju da naznače apsolutnu konfiguraciju molekula oko njegovog hiralnog centra(centara). Prefiksi d i 1 ili (+) i (-) se koriste da označe znak rotacije linearno-polarizovane svetlosti od strane jedinjenja, sa (-) ili 1 koji znače da je jedinjenje levorotirajuće. Jedinjenje sa prefiksom (+) ili d je desnorotirajuće. Za datu hemijsku strukturu, ovi stereoizomeri su identični izuzev što se ponašaju kao slika i lik u ogledalu. Specifični stereoizomer može takođe biti naznačen kao enantiomer, i smeša takvih izomera se često naziva smeša enantiomera. Smeša enantiomera 50:50 je naznačena kao racemska smeša ili racemat, što se može primetiti kada ne postoji stereoselektivnost ili stereospecifičnost u hemijskoj reakciji ili procesu. Termini "racemska smeša" i "racemat" se odnose na ekvimolarnu smešu dve enantiomerne vrste, lišene optičke aktivnosti. Objava uključuje sve stereoizomere jedinjenja koji su ovde opisani.
Prolekovi
[0046] Termin "prolek" kao što je ovde korišćeno se odnosi na bilo koje jedinjenje koje kada se administrira biološkom sistemu stvara jedinjenje iz predmetne objave koje inhibira HCV aktivnost ("aktivno inhibitorno jedinjenje"). Jedinjenje može biti formirano iz proleka kao
1
rezultat: (i) spontane hemijske reakcije(a), (ii) enzimski katalizovane hemijske reakcije(a), (iii) fotolize, i/ili (iv) metaboličke hemijske reakcije(a).
[0047] "Prolek deo" se odnosi na labilnu funkcionalnu grupu koja se odvaja od aktivnog inhibitornog jedinjenja tokom metabolizma, sistematski, unutar ćelije, hidrolizom, enzimskim cepanjem, ili pomoću nekog drugog procesa (Bundgaard, Hans, "Design and Application of Prodrugs" in A Textbook of Drug Design and Development (1991), P. Krogsgaard-Larsen and H. Bundgaard, Eds. Harwood Academic Publishers, str. 113-191). Enzimi koji su sposobni za enzimski aktivacioni mehanizam sa jedinjenjima proleka predmetne objave uključuju, ali nisu ograničeni na, amidaze, esteraze, mikrobne enzime, fosfolipaze, holinesteraze, i fosfaze. Prolek delovi mogu služiti da se poboljša rastvorljivost, apsorpcija i lipofilnost da bi se optimizirala raspodela leka, bioraspoloživost i efikasnost. Prolek deo može uključiti aktivni metabolit ili sam lek.
[0048] Tipični primeri prolek delova uključuju hidrolitički osetljive ili nepostojane aciloksimetil estre -CH2OC(=O)R<99>i aciloksimetil karbonate -CH2OC(=O)OR<99>gde R<99>je C1-C6alkil, C1-C6supstituisani alkil, C6-C20aril ili C6-C20supstituisani aril. Aciloksialkil estar je prvo primenjen kao prolek strategija za karboksilne kiseline i potom primenjen na fosfate i fosfonate od strane Farquhar et al. (1983) J. Pharm. Sci. 72: 324; takođe Američki patenti sa brojevima 4816570, 4968788, 5663159 i 5792756. Zatim, aciloksialkil estar je primenjen za raspodelu fosfonske kiseline kroz ćelijske membrane i da poboljša oralnu bioraspoloživost. Bliska varijanta aciloksialkil estra, alkoksikarboniloksialkil estar (karbonat), može takođe da poboljša oralnu bioraspoloživost kao prolek deo u jedinjenjima kombinacija predmetne objave. Tipičan primer aciloksimetil estra je pivaloiloksimetoksi, (POM) -CH2OC(=O)C(CH3)3. Tipičan primer aciloksimetil karbonat prolek dela je pivaloiloksimetilkarbonat (POC) -CH2OC(=O)OC(CH3)3.
[0049] Aril estri fosfornih grupa, kako je pokazano, naročito fenil estri, poboljšavaju oralnu bioraspoloživost (De Lombaert et al. (1994) J. Med. Chem. 37: 498). Fenil estri koji sadrže karboksilni estar u orto položaju u odnosu na fosfat su takođe opisani (Khamnei and Torrence, (1996) J. Med. Chem. 39:4109-4115). Benzil estri kako je pokazano stvaraju osnovne fosfonske kiseline. U nekim slučajevima, supstituenti na orto- ili para- poziciji mogu ubrzati hidrolizu. Benzil analozi sa acilovanim fenolom ili alkilovanim fenolom mogu da stvore fenolno jedinjenje putem dejstva enzima, npr., estaraze, oksidaze, itd., koje zatim podleže cepanju na benzilnoj CO vezi da bi se stvorili fosforna kiselina i hinon metid intermedijer. Primeri ove klase prolekova su opisani od strane Mitchell et al. (1992) J. Chem.
Soc. Perkin Trans. II 2345; Glazier WO 91/19721. Još neki benzilni prolekovi su opisani da sadrže grupu koja sadrži karboksilni estar vezanu za benzilni metilen (Glazier WO 91/19721). Prijavljeno je da su prolekovi koji sadrže tio-grupu korisni za unutarćelijsku raspodelu fosfonatnih lekova. Ovi proestri sadrže etiltio grupu u kojoj tiol grupa je bilo esterifikovana sa acil grupom bilo kombinovana sa drugom tiol grupom da bi se formirao disulfid. Deesterifikacija ili redukcija disulfida stvara slobodni tio intermedijer koji se zatim razlaže na fosfornu kiselinu i episulfid (Puech et al. (1993) Antiviral Res., 22: 155-174; Benzaria et al. (1996) J. Med. Chem. 39: 4958).
Zaštitne grupe
[0050] U kontekstu predmetne objave, zaštitne grupe uključuju delove koje su prolekovi i hemijske zaštitne grupe.
[0051] "Zaštitna grupa" se odnosi na deo u okviru jedinjenja koji maskira ili menja karakteristike funkcionalne grupe ili karakteristike jedinjenja u celini. Hemijske zaštitne grupe i strategije za zaštitu/otklanjanje zaštite su dobro poznate u ovoj oblasti. Videti npr., Protective Groups in Organic Chemistry, Theodora W. Greene, John Wiley & Sons, Inc., Njujork, 1991. Zaštitne grupe se često koriste da maskiraju reaktivnost određenih funkcionalnih grupa, da pomognu u efikasnosti željenih hemijskih reakcija, npr., stvaranje i raskidanje hemijskih veza na uređen i planiran način. Zaštita funkcionalnih grupa jedinjenja menja druge fizičke karakteristike pored reaktivnosti zaštićene funkcionalne grupe, kao što su polarnost, lipofilnost (hidrofobnost), i druge karakteristike koje mogu biti izmerene uobičajenim analitičkim metodama. Hemijski zaštićeni intermedijeri sami mogu biti biološki aktivni ili neaktivni.
[0052] Zaštićena jedinjenja mogu takođe da pokazuju izmenjene, i u nekim slučajevima, optimizovane karakteristike in vitro i in vivo, kao što je prolazak kroz ćelijske membrane i rezistencija na enzimsku degradaciju ili sekvestraciju. U ovoj ulozi, zaštićena jedinjenja sa planiranim terapijskim efektima mogu biti nazvana prolekovima. Druga funkcija zaštitne grupe je da prevede osnovni lek u prolek, gde je osnovni lek oslobođen nakon konverzije proleka in vivo. Zbog toga što aktivni prolekovi mogu biti apsorbovani efikasnije od osnovnog leka, prolekovi mogu da poseduju veću potentnost in vivo od osnovnog leka. Zaštitne grupe su uklonjene ili in vitro, u slučaju hemijskih intermedijera, ili in vivo, u slučaju prolekova. Sa hemijskim intermedijerima, nije posebno važno da rezultujući proizvodi nakon uklanjanja zaštite, npr., alokoholi, budu fiziološki prihvatljivi, iako je uopšteno poželjnije ako su proizvodi farmakološki neškodljivi.
[0053] Zaštitne grupe su dostupne, poznate i primenjene, i po izboru se primenjuju da spreče sporedne reakcije sa zaštićenom grupom tokom procesa sinteze, tj. puteva ili metoda kako bi se pripremila jedinjenja ove objave. U najvećem delu odluka o tome koje grupe treba zaštititi, kada to uraditi, i priroda hemijske zaštitne grupe "PG" će zavisiti od hemije reakcije od koje je zaštita potrebna (npr., kiseli, bazni, oksidativni, reduktivni ili drugi uslovi) i planiranog pravca sinteze. PG-e ne treba da budu, i obično nisu, iste ukoliko je jedinjenje supstituisano sa više PG. Uopšteno, PG će biti primenjena da zaštiti funkcionalne grupe kao što su karboksil, hidroksil, tio, ili amino grupe i time da spreči sporedne reakcije ili da na drugi način omogući efikasnost sinteze. Redosled uklanjanja zaštite kako bi se dobile slobodne nezaštićene grupe zavisi od planiranog pravca sinteze i reakcionih uslova na koje se nailazi, i može se javiti u bilo kom redosledu što je određeno od strane onoga ko reakciju izvodi.
[0054] Različite funkcionalne grupe jedinjenja objave mogu biti zaštićene. Na primer, zaštitne grupe za -OH grupe (bilo da je hidroksil, karboksilna kiselina, fosfonska kiselina, ili druge funkcije) uključuju "etar- ili estar-formirajuće grupe". Etar- ili estar- formirajuće grupe su sposobne da funkcionišu kao hemijske zaštitne grupe u sintetičkim shemama koje su ovde navedene. Međutim, neke hidroksilne i tio zaštitne grupe nisu ni etar- ni estar-formirajuće grupe, što će razumeti oni koji su obučeni u oblasti, i uključene su sa amidima, koji su dole razmotreni.
[0055] Veoma veliki broj hidroksil zaštitinih grupa i amid-formirajućih grupa i odgovarajućih hemijskih reakcija cepanja je opisan u Protective Groups in Organic Synthesis, Theodora W. Greene (John Wiley & Sons, Inc., Njujork, 1991, ISBN 0-471-62301-6) ("Greene"). Videti takođe Kocienski, Philip J.; Protecting Groups (Georg Thieme Verlag Stuttgart, Njujork, 1994), što je ovde inkorporisano referencom u celini. Naročito poglavlje 1, Protecting Groups: An Overview, strane 1-20, poglavlje 2, Hydroxyl Protecting Groups, strane 21-94, poglavlje 3, Diol Protecting Groups, strane 95-117, poglavlje 4, Carboxyl Protecting Groups, strane 118-154, poglavlje 5, Carbonyl Protecting Groups, strane 155-184. Za zaštitne grupe za karboksilnu kiselinu, fosfonsku kiselinu, fosfonat, sulfonsku kiselinu i druge zaštitne grupe za kiseline videti Greene kao što je naznačeno ispod.
[0056] Kao primer a ne u smislu ograničenja, promenljive opisane ovde mogu ponavljati supstituente u određenim tehničkim rešenjima. Tipično, svaki od ovih može se nezavisno pojaviti 20, 19, 18, 17, 16, 15, 14, 13, 12, 11, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2, 1, ili 0, puta u datom tehničkom rešenju. Tipičnije, svaki od ovih se može nezavisno pojaviti 12 ili manje puta u datom tehničkom rešenju. Kad god je jedinjenje koje je opisano ovde supstituisano sa više
1
nego jednom istom označenom grupom, npr., "R<1>" ili "R<3>", onda će se razumeti da grupe mogu biti iste ili različite, tj., svaka grupa je nezavisno izabrana. Talasasta linija ukazuje na mesto vezivanja kovalentnom vezom za susedne grupe, delove, ili atome.
[0057] U jednom tehničkom rešenju objave, jedinjenje je u izolovanom i prečišćenom obliku. Uopšteno, termin "izolovan i prečišćen" označava da je jedinjenje suštinski oslobođeno od bioloških materijala (npr.krvi, tkiva, ćelija, itd.). U jednom specifičnom tehničkom rešenju objave, ovaj termin označava da je jedinjenje ili konjugat objave najmanje oko 50 mas% oslobođeno od bioloških materijala; u drugom specifičnom tehničkom rešenju, termin označava da je jedinjenje ili konjugat objave najmanje oko 75 mas% oslobođeno od bioloških materijala; u drugom specifičnom tehničkom rešenju, termin označava da je jedinjenje ili konjugat objave najmanje oko 90 mas% oslobođeno od bioloških materijala; u drugom specifičnom tehničkom rešenju, termin označava da je jedinjenje ili konjugat objave najmanje oko 98 mas% oslobođeno od bioloških materijala; i u drugom tehničkom rešenju, termin označava da je jedinjenje ili konjugat objave najmanje oko 99 mas% oslobođeno od bioloških materijala. U drugom specifičnom tehničkom rešenju, objava obezbeđuje jedinjenje ili konjugat objave koje je sintetički pripremljeno (npr., ex vivo).
Stereoizomeri
[0058] Jedinjenja objave mogu imati hiralne centre, npr., hiralni ugljenik ili atome fosfora. Jedinjenja objave stoga uključuju racemske smeše svih stereoizomera, uključujući enantiomere, dijastereomere, i atropizomere. Zatim, jedinjenja objave uključuju obogaćene ili razdvojene optičke izomere na bilo kom ili svim asimetričnim, hiralnim atomima. Drugim rečima, hiralni centri koji su očigledni iz prikaza su dati kao hiralni izomeri ili racemske smeše. I racemske i dijastereomerne smeše, kao i individualni optički izomeri izolovani ili sintetisani, suštinski oslobođeni svojih enantiomernih ili dijastereomernih partnera, su svi obuhvaćeni ovom objavom. Racemske smeše su razdvojene u svoje individualne, suštinski optički čiste izomere dobro poznatim tehnikama kao što je, na primer, razdvajanje dijastereomernih soli koje su formirane sa optički aktivnim dodacima, npr., kiselinama ili bazama što je praćeno ponovnim prevođenjem u optički aktivne supstance. U većini slučajeva, željeni optički izomer je sintetisan pomoću stereospecifičnih reakcija, počevši sa odgovarajućim stereoizomerom željenog početnog materijala.
[0059] Jedinjenja objave mogu takođe postojati kao tautomerni izomeri u određenim slučajevima. Iako samo jedan tautomer može biti prikazan, svi takvi oblici su razmotreni u okvirima ove objave. Na primer, enamin tautomeri mogu postojati za purin, pirimidin, imidazol, gvanidin, amidin, i tetrazol sisteme i svi njihovi mogući tautomerni oblici su u okvirima ove objave.
Soli i hidrati
[0060] Primeri fizioloških ili farmaceutski prihvatljivih soli jedinjenja objave uključuju soli koje su dobijene iz odgovarajuće baze, kao što je alkalni metal (na primer, natrijum), zemnoalkalni metal (na primer, magnezijum), amonijum i NX4+ (gde X je C1-C4alkil). Fiziološki prihvatljive soli vodonikovog atoma ili amino grupe uključuju soli organskih karboksilnih kiselina kao što su sirćetna, benzoeva, mlečna, fumarna, vinska, maleinska, malonska, jabučna, izetionska, laktobionska i sukcinska kiselina; organske sulfonske kiseline, kao što su metansulfonska, etansulfonska, benzensulfonska i p-toluensulfonska kiselina; i neorganske kiseline, kao što su hlorovodonična, sumporna, fosforna i sulfaminska kiselina. Fiziološki prihvatljive soli jedinjenja sa hidroksilnom grupom uključuju anjon pomenutog jedinjenja u kombinaciji sa pogodnim katjonom kao što je Na+ i NX4+ (gde je X nezavisno izabrano od H ili C1-C4alkil grupe).
[0061] Za terapijsku primenu, soli aktivnih sastojaka jedinjenja objave će tipično biti fiziološki prihvatljive, tj. to će biti soli dobijene iz fiziološki prihvatljive kiseline ili baze. Međutim, soli kiselina ili baza koje nisu fiziološki prihvatljive mogu takođe naći primenu, na primer, u pripremi ili prečišćavanju fiziološki prihvatljivog jedinjenja. Sve soli, bilo da su dobijene ili nisu od fiziološki prihvatljive kiseline ili baze, su u okvirima predmetne objave.
[0062] Metalne soli tipično su pripremljene reakcijom hidroksida metala sa jedinjenjem ove objave. Primeri soli metala koje su pripremljene na ovaj način su soli koje sadrže Li+, Na+, i K+. Manje rastvorna so metala može biti istaložena iz rastvora rastvorljivije soli dodatkom odgovarajućeg jedinjenja metala.
[0063] Dodatno, soli mogu biti formirane dodatkom određenih organskih i neorganskih kiselina, npr., HCl, HBr, H2SO4H3PO4ili organskih sulfonskih kiselina, baznim centrima, tipično aminima, ili kiselim grupama. Konačno, treba razumeti da kompozicije ovde sadrže jedinjenja objave u svom nejonizovanom, kao i cviterjonskom obliku, i kombinacije sa stehiometrijskim količinama vode kao u hidratima.
[0064] Takođe uključene u okvir ove objave su soli osnovnog jedinjenja sa jednom ili više amino kiselina. Bilo koja od prirodnih ili neprirodnih amino kiselina je pogodna, naročito amino kiseline koje su prirodno prisutne kao komponente proteina, iako amino kiselina tipično ima bočni lanac sa baznom ili kiselom grupom, npr., lizin, arginin ili glutaminska kiselina, ili neutralnom grupom kao kod glicin, serin, treonin, alanin, izoleucin, ili leucin.
1
Metode za inhibiciju HCV
[0065] Ovde su objavljene metode za inhibiciju aktivnosti HCV koje obuhvataju korak tretiranja uzorka za koji se sumnja da sadrži HCV sa jedinjenjem ili kompozicijom otkrića.
[0066] Jedinjenja otkrića mogu delovati kao HCV inhibitori, kao intermedijeri za takve inhibitore ili imati druge mogućnosti kao što je ispod opisano. Inhibitori će se obično vezati za mesta na površini ili u šupljini jetre. Jedinjenja koja se vezuju u jetri mogu da se vežu sa različitim stepenom reverzibilnosti. Ona jedinjenja koja se vezuju suštinski ireverzibilno su idealni kandidati za primenu u ovoj metodi otkrića. Kada su obeležena, suštinski ireverzibilno vezujuća jedinjenja su korisna kao probe za detekciju HCV. U skladu sa tim, ovde su objavljene metode za detekciju NS3 u uzorku za koji se sumnja da sadrži HCV koje obuhvataju korake: tretiranja uzorka za koji se sumnja da sadrži HCV sa kompozicijom koja sadrži jedinjenje otkrića koje je vezano za obeleživač; i posmatranja efekta uzorka na aktivnost obeleživača. Pogodni obeleživači su dobro poznati u polju dijagnostike i uključuju stabilne slobodne radikale, fluorofore, radioizotope, enzime, hemiluminiscentne grupe i hromogene. Ovde su jedinjenja obeležena na konvencionalan način korišćenjem funkcionalnih grupa kao što je hidroksilna ili amino. Ovde stavljeno na uvid javnosti je jedinjenje sa bilo kojom od formula (I) i (A1)-(A4) koje sadrži ili koje je vezano ili spojeno za jedan ili više obeleživača koje je moguće otkriti. U okviru konteksta otkrića uzorci za koje se sumnja da sadrže HCV uključuju prirodne ili veštačke materijale kao što su živi organizmi; tkivne ili ćelijske kulture; biološke uzorke kao što su uzorci bioloških materijala (krv, serum, urin, cerebrospinalna tečnost, suze, ispljuvak, pljuvačka, uzorci tkiva, i slično); laboratorijske uzorke; hranu, vodu, ili uzorke vazduha; uzorke bioproizvoda kao što su ekstrakti ćelija, posebno rekombinantne ćelije koje sintetišu željeni glikoprotein; i slično. Tipično za uzorak će se sumnjati da sadrži HCV. Uzorci mogu biti sadržani u bilo kom medijumu uključujući vodu i smeše organski rastvarač/voda. Uzorci uključuju žive organizme kao što su ljudi, i napravljene materijale kao što su ćelijske kulture.
[0067] Korak tretiranja u ovom otkriću obuhvata dodavanje jedinjenja otkrića uzorku ili obuhvata dodavanje prekursora kompozicije uzorku. Korak dodavanja obuhvata bilo koju metodu administracije kao što je iznad opisano.
[0068] Po želji, HCV aktivnost nakon primene jedinjenja može se posmatrati bilo kojom metodom uključujući direktne i indirektne metode za detekciju HCV aktivnosti. Kvantitativne, kvalitativne, i semikvantitativne metode za određivanje HCV aktivnosti su sve razmotrene. Tipično primenjena je jedna od skrining metoda koje su opisane gore, međutim,
1
bilo koja druga metoda kao što je posmatranje fizioloških karakteristika živog organizma je takođe primenljiva.
[0069] Mnogi organizmi sadrže HCV. Jedinjenja ovog otkrića su korisna u lečenju ili profilaksi stanja povezanih sa HCV aktivacijom kod životinja ili kod čoveka.
[0070] Međutim, u skriningu jedinjenja koja su sposobna za inhibiciju HCV aktivnosti treba imati na umu da rezultati enzimskih testova ne moraju uvek da koreliraju sa testovima na ćelijskim kulturama. Stoga, test na nivou ćelije bi trebalo tipično da bude primarno korišćen u skriningu.
Farmaceutske Formulacije
[0071] Jedinjenja ovog otkrića su formulisana sa konvencionalnim nosačima i ekscipijensima, koji će biti izabrani u skladu sa uobičajenom praksom. Tablete će sadržati ekscipijense, glidante, punioce, sredstava za vezivanje i slično. Vodene formulacije su pripremljene u sterilnom obliku, i kada su namenjene za isporuku drugačijom a ne oralnom administracijom obično će biti izotonične. Sve formulacije će po izboru sadržati ekscipijense kao što su oni navedeni u Handbook of Pharmaceutical Excipients (1986). Ekscipijensi uključuju askorbinsku kiselinu i druge antioksidanse, helatna sredstva kao što je EDTA, ugljene hidrate kao što je dekstrin, hidroksialkilceluloza, hidroksialkilmetilceluloza, stearinsku kiselinu i slično. pH formulacija je u opsegu od oko 3 do oko 11, ali je obično oko 7 do 10. Tipično, jedinjenje će biti administrirano u dozi od 0.01 miligrama do 2 grama. U jednom tehničkom rešenju, doza će biti od oko 10 miligrama do 450 miligrama. U drugom tehničkom rešenju, doza će biti od oko 25 do oko 250 miligrama. U drugom tehničkom rešenju, doza će biti oko 50 ili 100 miligrama. U jednom tehničkom rešenju, doza će biti oko 100 miligrama. Razmotreno je da jedinjenje može biti administrirano jednom, dva puta ili tri puta u toku dana.
[0072] Dok je moguće da aktivni sastojci budu administrirani samostalno može biti poželjno da budu predstavljeni kao farmaceutske formulacije. Formulacije ovog otkrića, i za veterinarsku i za humanu primenu, sadrže najmanje jedan aktivni sastojak, kao što je iznad definisano, zajedno sa jednim ili više prihvatljivih nosača i po izboru druge terapijske sastojke. Nosač (nosači) može biti "prihvatljiv" u smislu da bude kompatibilan sa drugim sastojcima formulacije i fiziološki neškodljiv za onoga koji ga prima.
[0073] Formulacije uključuju one koje su pogodne za prethodno spomenute puteve administracije. Formulacije mogu pogodno biti predstavljene u obliku dozne jedinice i mogu
1
biti pripremljene bilo kojom od metoda koje su dobro poznate u farmaceutskoj oblasti. Tehnike i formulacije se obično nalaze u Remington‵s Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing Co., Iston, Pensilvanija). Takve metode uključuju korak spajanja aktivnog sastojka sa nosačem koji predstavlja jedan ili više pomoćnih sastojaka. Uopšteno, formulacije su pripremljene ravnomernim i bliskim spajanjem aktivnog sastojka sa tečnim nosačima ili fino podeljenim čvrstim nosačima ili oba, i zatim, ukoliko je neophodno, oblikovanjem proizvoda.
[0074] Formulacije predmetnog otkrića pogodne za oralnu administraciju mogu biti predstavljene kao odvojene jedinice kao što su kapsule, skrobne kapsule ili tablete od kojih svaka sadrži prethodno određenu količinu aktivnog sastojka; kao prašak ili granule; kao rastvor ili suspenzija u vodenoj ili ne-vodenoj tečnosti; ili kao tečna emulzija tipa ulje-u-vodi ili tečna emulzija tipa voda-u-ulju. Aktivni sastojak može takođe biti administriran kao bolus, elektuarijum ili pasta.
[0075] Tableta je napravljena komprimovanjem ili oblikovanjem, po izboru sa jednim ili više pomoćnih sastojaka. Komprimovane tablete mogu biti pripremljene komprimovanjem u pogodnoj mašini aktivnog sastojka u obliku koji je slobodno protočan kao što su prašak ili granule, po izboru pomešanog sa sredstvom za vezivanje, lubrikantom, inertnim razblaživačem, konzervansom, površinski aktivnim ili dispergujućim sredstvom. Oblikovane tablete mogu biti napravljene oblikovanjem u pogodnoj mašini mešavine praškastog aktivnog sastojka koji je ovlažen sa inertnim tečnim razblaživačem. Tablete mogu po izboru biti obložene ili za deljenje i po izboru su formulisane tako da obezbede sporo ili kontrolisano oslobađanje aktivnog sastojka iz njih.
[0076] Za administraciju na oko ili druga spoljašnja tkiva npr., usta i kožu, formulacije su poželjno primenjene kao topikalne masti ili kreme koje sadrže aktivni sastojak (sastojke) u količini od, na primer, 0.075 do 20% m/m (uključujući aktivni sastojak (sastojke) u opsegu između 0.1% i 20% sa uvećanjima od 0.1% m/m kao što je 0.6% m/m, 0.7% m/m, itd.), poželjno 0.2 do 15% m/m i najpoželjnije 0.5 do 10% m/m. Kada su formulisani kao masti, aktivni sastojci mogu biti korišćeni sa bilo parafinskom bilo masnom bazom koja se meša sa vodom. Alternativno, aktivni sastojci mogu biti formulisani kao krema sa bazom kreme tipa ulje-u-vodi.
[0077] Po želji, vodena faza baze kreme može da uključuje, na primer, najmanje 30% m/m polihidroksilnog alkohola, tj. alkohola koji ima dve ili više hidroksilnih grupa kao što je propilen glikol, butan 1,3-diol, manitol, sorbitol, glicerol i polietilen glikol (uključujući PEG
1
400) i njihove smeše. Topikalne formulacije mogu poželjno da uključuju jedinjenje koje povećava apsorpciju ili penetraciju aktivnog sastojka kroz kožu ili druge obuhvaćene oblasti. Primeri takvih pojačivača dermalne penetracije uključuju dimetil sulfoksid i srodne analoge.
[0078] Uljana faza emulzija ovog otkrića može biti sačinjena od poznatih sastojaka na poznati način. Dok faza može da sadrži samo emulgator (inače poznat kao emulgent), on poželjno sadrži smešu najmanje jednog emulgatora sa mašću ili uljem ili i sa mašću i sa uljem. Poželjno, hidofilni emulgator je uključen zajedno sa lipofilnim emulgatorom koji deluje kao stabilizator. Takođe je poželjno da uključuje i ulje i mast. Zajedno, emulgator (emulgatori) sa ili bez jednog ili više stabilizatora čine takozvani emulgujući vosak, i vosak zajedno sa uljem i mašću čini takozvanu emulgujuću masnu bazu koja formira uljanu dispergovanu fazu formulacija u obliku kreme.
[0079] Emulgatori i stabilizatori emulzija pogodni za primenu u formulaciji otkrića uključuju Tween® 60, Span® 80, cetostearil alkohol, benzil alkohol, miristil alkohol, gliceril monostearat i natrijum lauril sulfat.
[0080] Izbor pogodnih ulja ili masti za formulaciju se zasniva na postizanju željenih kozmetičkih karakteristika. Krema poželjno treba da bude nemasna, da ne ostavlja fleke i da bude proizvod koji može da se pere sa odgovarajućom konzistencijom kako bi se izbeglo curenje iz tuba ili druge posude. Ravan ili razgranat lanac, mono- ili dibazni alkil estri kao što su di-izoadipat, izocetil stearat, propilen glikol diestar masnih kiselina kokosa, izopropil miristat, decil oleat, izopropil palmitat, butil stearat, 2-etilheksil palmitat ili mešavina estara razgranatog lanca koja je poznata kao Crodamol CAP mogu biti korišćeni, od kojih su poslednja tri poželjni estri. Ovi mogu biti korišćeni samostalno ili u kombinaciji u zavisnosti od potrebnih karakteristika. Alternativno, lipidi sa visokom tačkom topljenja kao što je beli meki parafin i/ili tečni parafin ili druga mineralna ulja su korišćeni.
[0081] Farmaceutske formulacije u skladu sa predmetnom objavom sadrže jedno ili više jedinjenja objave zajedno sa jednim ili više farmaceutski prihvatljivih nosača ili ekscipijenasa i po izboru drugim terapijskim sredstvima. Farmaceutske formulacije koje sadrže aktivni sastojak mogu biti u bilo kom obliku koji je pogodan za planiranu metodu administracije. Kada se koriste za oralnu primenu na primer, tablete, pastile, lozenge, vodene ili uljane suspenzije, disperzibilni praškovi ili granule, emulzije, tvrde ili meke kapsule, sirupi ili eliksiri mogu biti pripremljeni. Kompozicije namenjene za oralnu primenu mogu biti pripremljene prema bilo kojoj metodi koja je poznata u oblasti za izradu farmaceutskih kompozicija i takve kompozicije mogu da sadrže jedan ili više agenasa uključujući sredstvo
1
za zaslađivanje, sredstva za poboljšanje ukusa, sredstva za bojenje i konzervanse, kako bi se obezbedio preparat prijatnog ukusa. Tablete koje sadrže aktivni sastojak u smeši sa netoksičnim farmaceutski prihvatljivim ekscipijensom koji je pogodan za izradu tableta su prihvatljive. Ovi ekscipijensi mogu biti, na primer, inertni razblaživači, kao što je kalcijum ili natrijum karbonat, laktoza, laktoza monohidrat, kroskarmeloza natrijum, povidon, kalcijum ili natrijum fosfat; agensi za granulaciju i raspadanje, kao što je kukuruzni skrob, ili alginska kiselina; agensi za vezivanje, kao što je celuloza, mikrokristalna celuloza, skrob, želatin ili akacija; i lubrikanti, kao što je magnezijum stearat, stearinska kiselina ili talk. Tablete mogu biti neobložene ili mogu biti obložene poznatim tehnikama uključujući mikroinkapsuliranje kako bi se odložilo raspadanje i apsorpcija u gastrointestinalnom traktu i time obezbedilo kontinuirano dejstvo tokom dužeg vremenskog perioda. Na primer, može se koristiti materijal za vremensko odlaganje kao što je gliceril monostearat ili gliceril distearat samostalno ili sa voskom.
[0082] Formulacije za oralnu primenu mogu biti takođe predstavljene kao tvrde želatinozne kapsule gde je aktivni sastojak pomešan sa inertnim čvrstim razblaživačem, na primer kalcijum fosfatom ili kaolinom, ili kao meke želatinozne kapsule gde je aktivni sastojak pomešan sa vodom ili uljanim medijumom, kao što je ulje kikirikija, tečni parafin ili maslinovo ulje.
[0083] Vodene suspenzije predmetne objave sadrže aktivne sastojke u smeši sa ekscipijensima koji su pogodni za izradu vodenih suspenzija. Takvi ekscipijensi uključuju agens za suspendovanje, kao što je natrijum karboksimetilceluloza, metilceluloza, hidroksipropil metilceluloza, natrijum alginat, polivinilpirolidon, tragakant guma i guma akacija, i agense za dispergovanje ili vlaženje kao što je u prirodi prisutan fosfatid (npr., lecitin), proizvod kondenzacije alkilen oksida sa masnom kiselinom (npr., polioksietilen stearat), proizvod kondenzacije etilen oksida sa alifatičnim alkoholom dugog lanca (npr., heptadekaetilenoksicetanol), proizvod kondenzacije etilen oksida sa parcijalnim estrom dobijenim od masne kiseline i heksitol anhidrida (npr., polioksietilen sorbitan monooleat). Vodena suspenzija može takođe da sadrži jedan ili više konzervanasa kao što je etil ili npropil p-hidroksi-benzoat, jedan ili više agenasa za bojenje, jedan ili više agenasa za poboljšavanje ukusa i jedan ili više zaslađivača kao što je saharoza ili saharin.
[0084] Uljane suspenzije mogu biti formulisane suspendovanjem aktivnog sastojka u biljnom ulju, kao što je ulje kikirikija, maslinovo ulje, ulje susama ili kokosovo ulje, ili u mineralnom ulju kao što je tečni parafin. Oralne suspenzije mogu da sadrže agens za povećanje gustine,
2
kao što je pčelinji vosak, čvrsti parafin ili cetil alkohol. Agensi za zaslađivanje, kao što su ona iznad navedeni, i agensi za poboljšanje ukusa mogu biti dodati kako bi se obezbedio oralni preparat prijatnog ukusa. Ove kompozicije mogu biti očuvane dodatkom antioksidansa kao što je askorbinska kiselina.
[0085] Dispergujući praškovi i granule objave pogodni za pripremu vodene suspenzije dodatkom vode obezbeđuju aktivni sastojak u smeši sa agensom za dispergovanje ili vlaženje, agensom za suspendovanje, i jednim ili više konzervanasa. Pogodni agensi za dispergovanje ili vlaženje i agensi za suspendovanje su navedeni kao primeri koji su iznad stavljeni na uvid javnosti. Dodatni ekscipijensi, na primer zaslađivači, agensi za poboljšanje ukusa i bojenje, mogu takođe biti prisutni.
[0086] Farmaceutske kompozicije objave mogu takođe biti u obliku emulzija tipa ulje-u-vodi. Uljana faza može biti biljno ulje, kao što je maslinovo ulje ili ulje kikirikija, mineralno ulje, kao što je tečni parafin, ili njihova mešavina. Pogodni emulgujući agensi uključuju u prirodi prisutne gume, kao što je guma akacija i tragakant guma, u prirodi prisutne fosfatide, kao što je soja lecitin, estre ili parcijalne estre dobijene od masnih kiselina i heksitol anhidrida, kao što je sorbitan monooleat, i proizvode kondenzacije ovih pacijalnih estara sa etilen oksidom, kao što je polioksietilen sorbitan monooleat. Emulzija može takođe da sadrži agense za zaslađivanje i poboljšavanje ukusa. Sirupi i eliksiri mogu biti formulisani sa zaslađivačima, kao što je glicerol, sorbitol ili saharoza. Takve formulacije mogu takođe da sadrže demulcent, konzervans, agens za poboljšanje ukusa ili agens za bojenje.
[0087] Farmaceutske kompozicije objave mogu biti u obliku sterilnog injekcionog preparata, kao što je sterilna injekciona vodena ili uljana suspenzija. Ova suspenzija može biti formulisana prema onome što je poznato u oblasti korišćenjem onih pogodnih agenasa za dispergovanje ili vlaženje i agenasa za suspendovanje koji su iznad pomenuti. Sterilni injekcioni preparat može takođe biti sterilni injekcioni rastvor ili suspenzija u netoksičnom parenteralno prihvatljivom razblaživaču ili rastvaraču, kao što je rastvor u 1,3-butan-diolu ili pripremljen kao liofilizirani prašak. Među prihvatljivim transporterima i rastvaračima koji mogu biti korišćeni su voda, Ringerov rastvor i izotonični rastvor natrijum hlorida. Dodatno, sterilna fiksna ulja mogu konvencionalno da se koriste kao rastvarač ili medijum za suspendovanje. Sa ovom namenom bilo koje blago fiksno ulje može biti korišćeno uključujući sintetičke mono- ili digliceride. Dodatno, masne kiseline kao što je oleinska kiselina mogu slično da budu korišćene u pripremi injekcionih preparata.
[0088] Količina aktivnog sastojka koja može biti kombinovana sa nosačem kako bi se dobio jedan dozni oblik će varirati u zavisnosti od domaćina koji je tretiran i posebnog načina administracije. Na primer, formulacije sa produženim oslobađanjem namenjene za oralnu administraciju kod ljudi mogu da sadrže otprilike 1 do 1000 mg aktivnog materijala koji je sjedinjen sa odgovarajućom i pogodnom količinom nosača koja može da varira od oko 5 do oko 95% ukupnih kompozicija (masa:masa). Farmaceutska kompozicija može biti pripremljena tako da se obezbede lako merljive količine za administraciju. Na primer, vodeni rastvor namenjen za intravensku infuziju može da sadrži od oko 3 do 500 µg aktivnog sastojka po mililitru rastvora kako bi se mogla dobiti infuzija pogodne zapremine sa brzinom od oko 30 mL/h.
[0089] Formulacije pogodne za primenu na oko uključuju kapi za oči gde je aktivni sastojak rastvoren ili suspendovan u pogodnom nosaču, naročito vodenom rastvaraču za aktivni sastojak. Aktivni sastojak je poželjno prisutan u takvim formulacijama u koncentraciji od 0.5 do 20%, povoljno 0.5 do 10% posebno oko 1.5% m/m.
[0090] Formulacije pogodne za topikalnu administraciju u ustima uključuju lozenge koje sadrže aktivni sastojak u bazi koja je sa ukusom, obično saharoza i akacija ili tragakant; pastile koje sadrže aktivni sastojak u inertnoj bazi kao što je želatin i glicerin, ili saharoza i akacija; i tečnosti za ispiranje usta koje sadrže aktivni sastojak u pogodnom tečnom nosaču.
[0091] Formulacije za rektalnu administraciju mogu biti predstavljene kao supozitorija sa pogodnom bazom koja sadrži na primer kakao buter ili salicilat.
[0092] Formulacije pogodne za intrapulmonalnu ili nazalnu administraciju imaju veličinu čestice na primer u opsegu od 0.1 do 500 mikrona (uključujući veličine čestice u opsegu između 0.1 i 500 mikrona sa povećanjem mikrona kao što je 0.5, 1, 30 mikrona, 35 mikrona, itd.), koja je administrirana brzom inhalacijom kroz nazalni put ili inhalacijom kroz usta tako da se dostignu alveolarne vrećice. Pogodne formulacije uključuju vodene ili uljane rastvore aktivnog sastojka. Formulacije pogodne za administrciju u obliku aerosola ili suvog praška mogu biti pripremljene prema konvencionalnim metodama i mogu biti isporučene sa drugim terapijskim agensima kao što su jedinjenja koja su ranije korišćena u lečenju ili profilaksi stanja koja su povezana sa HCV aktivnošću.
[0093] Formulacije pogodne za vaginalnu administraciju mogu biti predstavljene kao vagotorije, tamponi, kreme, gelovi, paste, pene ili formulacije u obliku spreja koje pored aktivnog sastojka sadrže takve nosače koji su poznati u oblasti kao odgovarajući.
[0094] Formulacije pogodne za parenteralnu administraciju uključuju vodene i nevodene sterilne injekcione rastvore koji mogu da sadrže antioksidanse, pufere, bakteriostatike i rastvorene supstance koje čine formulaciju izotoničnom sa krvlju planiranog primaoca; i vodene i nevodene sterilne suspenzije koje mogu da uključuju agense za suspendovanje i agense za zgušnjavanje.
[0095] Formulacije su predstavljene u pakovanjima za jednu dozu ili više doza, na primer zatvorenim ampulama i bočicama, i mogu biti čuvane u stanju osušenom zamrzavanjem (liofiliziranom) koje zahteva samo dodavanje sterilnog tečnog nosača, na primer vode za injekcije, neposredno pre primene. Ex tempore izrađeni injekcioni rastvori i suspenzije su pripremljeni od sterilnih praškova, granula i tableta iz vrste koja je prethodno opisana. Poželjne jedinične dozne formulacije su one koje sadrže dnevnu dozu ili jedinicu dnevne pod-doze, kako je ranije rečeno, ili njenu odgovarajuću frakciju, aktivnog sastojka.
[0096] Treba razumeti da pored sastojaka koji su posebno iznad pomenuti formulacije ove objave mogu da uključuju druge agense konvencionalne u oblasti sa obzirom na tip formulacije o kojoj se radi, na primer one pogodne za oralnu administraciju mogu da uključuju agense za poboljšanje ukusa.
[0097] Otkriće dalje obezbeđuje kompozicije za primenu u veterini koje sadrže najmanje jedan aktivni sastojak kao što je iznad definisano zajedno sa njegovim veterinarskim nosačem.
[0098] Veterinarski nosači su materijali koji su korisni u svrhu administracije kompozicije i mogu biti čvrsti, tečni ili gasoviti materijali koje su inače inertni ili prihvatljivi u oblasti veterine i kompatibilni sa aktivnim sastojkom. Ove kompozicije za primenu u veterini mogu biti administrirane oralno, parenteralno ili bilo kojim drugim željenim putem.
[0099] Jedinjenja otkrića mogu takođe biti formulisana tako da se obezbedi kontrolisano oslobađanje aktivnog sastojka kako bi se dozvolilo manje učestalo doziranje ili poboljšao farmakokinetički ili profil toksičnosti aktivnog sastojka. U skladu sa tim, otkriće takođe obezbeđuje kompozicije koje sadrže jedno ili više jedinjenja otkrića koja su formulisana za kontinuirano ili kontrolisano oslobađanje.
[0100] Efikasna doza aktivnog sastojka zavisi najmanje od prirode stanja koje se leči, toksičnosti, od toga da li se jedinjenje koristi profilaktički (niže doze), metode isporuke, i farmaceutske formulacije, i biće određena od strane kliničara korišćenjem konvencionalnih studija o povećanjima doza.
Putevi administracije
2
[0101] Jedno ili više jedinjenja otkrića (ovde označeni kao aktivni sastojci) je administrirano bilo kojim putem koji je odgovarajući za stanje koje se leči. Pogodni putevi uključuju oralni, rektalni, nazalni, topikalni (uključujući bukalni i sublingvalni), vaginalni i parenteralni (uključujući subkutani, intramuskularni, intravenski, intradermalni, intratekalni i epiduralni), i slično. Podrazumeva se da poželjni put može da varira sa na primer stanjem primaoca. Prednost jedinjenja ovog otkrića je što su ona oralno bioraspoloživa i mogu biti dozirana oralno.
HCV kombinovana terapija
[0102] U drugom tehničkom rešenju, neograničavajući primeri pogodnih kombinacija uključuju kombinacije jednog ili više jedinjenja sa formulom (I) i (A1-A4) sa jednim ili više interferona, ribavirinom ili njegovim analozima, inhibitorima HCV NS3 proteaze, inhibitorima alfa-glukozidaze 1, hepatoprotektorima, nukleozidnim ili nukleotidnim inhibitorima HCV NS5B polimeraze, nenukleozidnim inhibitorima HCV NS5B polimeraze, HCV NS5A inhibitorima, TLR-7 agonistima, inhibitorima ciklofilina, HCV IRES inhibitorima, farmakokinetičkim pojačivačima, i drugim lekovima ili terapijskim agensima za lečenje HCV.
[0103] Još specifičnije, jedno ili više jedinjenja kao što je ovde opisano mogu biti kombinovana sa jednim ili više jedinjenja koja su izabrana iz grupe koja se sastoji od:
1) interferona, npr., pegilovani rIFN-alfa 2b (PEG-Intron), pegilovani rIFN-alfa 2a (Pegasys), rIFN-alfa 2b (Intron A), rIFN-alfa 2a (Roferon-A), interferon alfa (MOR-22, OPC-18, Alfaferone, Alfanative, Multiferon, subalin), interferon alfakon-1 (Infergen), interferon alfa-nl (Wellferon), interferon alfa-n3 (Alferon), interferon-beta (Avonex, DL-8234), interferon-omega (omega DUROS, Biomed 510), albinterferon alfa-2b (Albuferon), IFN alfa-2b XL, BLX-883 (Locteron), DA-3021, glikozilirani interferon alfa-2b (AVI-005), PEG-Infergen, pegilovani interferon lambda-1 (Pegilovani IL-29), i belerofon;
2) ribavirina i njegovih analoga, npr., ribavirin (Rebetol, Copegus), i taribavirin (Viramidine);
3) inhibitora HCV NS3 proteaze, npr., boceprevir (SCH-503034, SCH-7), telaprevir (VX-950), TMC435350, BI-1335, BI-1230, MK-7009, VBY-376, VX-500, GS-9256, GS-9451, BMS-605339, PHX-1766, AS-101, YH-5258, YH5530, YH5531, ABT-450, ACH-1625, ITMN-191, MK5172, MK6325, i MK2748;
4) inhibitora alfa-glukozidaze 1, npr., celgosivir (MX-3253), Miglitol, i UT-231B;
5) hepatoprotektora, npr., emericasan (IDN-6556), ME-3738, GS-9450 (LB-84451), silibilin, i MitoQ;
6) nukleozidnih ili nukleotidnih inhibitora HCV NS5B polimeraze, npr., R1626, R7128 (R4048), IDX184, IDX-102, BCX-4678, valopicitabin (NM-283), MK-0608, sofosbuvir (GS-7977 (ranije PSI-7977)), i INX-189 (sada BMS986094);
7) ne-nukleozidnih inhibitora HCV NS5B polimeraze, npr., PF-868554, VCH-759, VCH-916, JTK-652, MK-3281, GS-9190, VBY-708, VCH-222, A848837, ANA-598, GL60667, GL59728, A-63890, A-48773, A-48547, BC-2329, VCH-796 (nesbuvir), GSK625433, BILN-1941, XTL-2125, ABT-072, ABT-333, GS-9669, PSI-7792, i GS-9190;
8) HCV NS5A inhibitora, npr., AZD-2836 (A-831), BMS-790052, ACH-3102, ACH-2928, MK8325, MK4882, MK8742, PSI-461, IDX719, i A-689;
9) TLR-7 agonista, npr., imikvimod, 852A, GS-9524, ANA-773, ANA-975, AZD-8848 (DSP-3025), i SM-360320;
10) inhibitora ciklofilina, npr., DEBIO-025, SCY-635, i NIM811;
11) HCV IRES inhibitora, npr., MCI-067;
12) farmakokinetičkih pojačivača, npr., BAS-100, SPI-452, PF-4194477, TMC-41629, GS-9350, GS-9585, i roksitromicin; i
13) drugih lekova za lečenje HCV, npr., timozin alfa 1 (Zadaxin), nitazoksanid (Alinea, NTZ), BIVN-401 (virostat), PYN-17 (altirex), KPE02003002, actilon (CPG-10101), GS-9525, KRN-7000, civacir, GI-5005, XTL-6865, BIT225, PTX-111, ITX2865, TT-033i, ANA 971, NOV-205, tarvacin, EHC-18, VGX-410C, EMZ-702, AVI 4065, BMS-650032, BMS-791325, Bavituksimab, MDX-1106 (ONO-4538), Oglufanid, i VX-497 (merimepodib).
[0104] Još specifičnije, jedno ili više jedinjenja kao što je ovde opisano može biti kombinovano sa jednim ili više jedinjenja koja su izabrana iz grupe koja se sastoji od nenukleozidnih inhibitora HCV NS5B polimeraze (ABT-072 i ABT-333), HCV NS5A inhibitora (ACH-3102 i ACH-2928) i HCV NS3 proteaznih inhibitora (ABT-450 i ACH-1625).
2
[0105] U još jednom tehničkom rešenju, predmetna prijava stavlja na uvid javnosti farmaceutske kompozicije koje sadrže jedinjenje kao što je ovde opisano, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, solvat, i/ili estar, u kombinaciji sa najmanje jednim dodatnim terapijskim agensom, i farmaceutski prihvatljivim nosačem ili ekscipijensom.
[0106] Prema jednom tehničkom rešenju, terapijski agens korišćen u kombinaciji sa jedinjenjem kao što je ovde opisano može biti bilo koji agens koji ima terapijski efekat kada se koristi u kombinaciji sa jedinjenjem kao što je ovde opisano. Na primer, terapijski agens korišćen u kombinaciji sa jedinjenjem kao što je ovde opisano mogu biti interferoni, analozi ribavirina, inhibitori NS3 proteaze, inhibitori NS5b polimeraze, inhibitori alfa-glukozidaze 1, hepatoprotektori, HCV nenukleozidni inhibitori, i drugi lekovi za lečenje HCV.
[0107] U drugom tehničkom rešenju, predmetna prijava stavlja na uvid javnosti farmaceutske kompozicije koje sadrže jedinjenje sa formulom (I), ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, solvat, i/ili estar, u kombinaciji sa najmanje jednim dodatnim terapijskim agensom koji je izabran iz grupe koja se sastoji od pegilovanog rIFN-alfa 2b, pegilovanog rIFN-alfa 2a, rIFN-alfa 2b, IFN alfa-2b XL, rIFN-alfa 2a, “konsenzus” IFN alfa, infergena, rebifa, locterona, AVI-005, PEG-infergena, pegilovanog IFN-beta, oralnog interferona alfa, ferona, reaferona, intermaksa alfa, r-IFN-beta, infergena aktimuna, IFN-omege sa DUROS-om, albuferona, rebetola, copegusa, levovirina, VX-497, viramidina (taribavirina), A-831, A-689, NM-283, valopicitabina, R1626, PSI-6130 (R1656), HCV-796, BILB 1941, MK-0608, NM-107, R7128, VCH-759, PF-868554, GSK625433, XTL-2125, SCH-503034 (SCH-7), VX-950 (Telaprevir), ITMN-191, i BILN-2065, MX-3253 (celgosivir), UT-231B, IDN-6556, ME 3738, MitoQ, i LB-84451, derivata benzimidazola, derivata benzo-1,2,4-tiadiazina, i derivata fenilalanina, zadaksina, nitazoksanida (alinea), BIVN-401 (virostat), DEBIO-025, VGX-410C, EMZ-702, AVI 4065, bavituksimaba, oglufanida, PYN-17, KPE02003002, aktilona (CPG-10101), KRN-7000, civacira, GI-5005, ANA-975 (izatoribin), XTL-6865, ANA 971, NOV-205, tarvacina, EHC-18, i NIM811 i farmaceutski prihvatljivog nosača ili ekscipijensa.
[0108] U još jednom tehničkom rešenju, predmetna prijava stavlja na uvid javnosti kombinovani farmaceutski agens koji sadrži:
a) prvu farmaceutsku kompoziciju koja sadrži jedinjenje sa formulom (I), ili farmaceutski prihvatljivu so, solvat, ili estar tog jedinjenja; i
b) drugu farmaceutsku kompoziciju koja sadrži najmanje jedan dodatni terapijski agens odabran iz grupe koja se sastoji od jedinjenja koja inhibiraju HIV proteazu, HIV nenukleozidnih inhibitora reverzne transkriptaze, HIV nukleozidnih inhibitora
2
reverzne transkriptaze, HIV nukleotidnih inhibitora reverzne transkriptaze, inhibitora HIV integraze, gp41 inhibitora, CXCR4 inhibitora, gp120 inhibitora, CCR5 inhibitora, interferona, analoga ribavirina, inhibitora NS3 proteaze, inhibitora alfaglukozidaze 1, hepatoprotektora, nenukleozidnih inhibitora HCV, i drugih lekova za lečenje HCV, i njihovih kombinacija.
[0109] U drugom tehničkom rešenju je stavljena na uvid javnosti farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje sa formulom (I) kao što je ovde opisano i nukleozidne ili nukleotidne inhibitore HCV NS5B polimeraze i po izboru interferon ili ribavirin. U jednom tehničkom rešenju, jedinjenje je metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-{(2R)-2-[(metoksi karbonil)amino]-2-fenilacetil}-4-(metoksi metil)pirolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5-metilpirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat koji ima formulu:
i inhibitor je sofosbuvir.
[0110] Kombinacije jedinjenja sa formulom I i dodatnim aktivnim terapijskim agensima mogu biti odabrane da se leče pacijenti koji su inficirani sa HCV i druga stanja kao što su HIV infekcije. U skladu sa tim, jedinjenja sa formulom I mogu biti kombinovana sa jednim ili više jedinjenja korisnih u lečenju HIV, na primer jedinjenjima koja inhibiraju HIV proteazu, nenukleozidnim inhibitorima HIV reverzne transkriptaze, HIV nukleozidnim inhibitorima reverzne transkriptaze, HIV nukleotidnim inhibitorima reverzne transkriptaze, inhibitorima HIV integraze, gp41 inhibitorima, CXCR4 inhibitorima, gp120 inhibitorima, CCR5 inhibitorima, interferonima, analozima ribavirina, inhibitorima NS3 proteaze, inhibitorima NS5b polimeraze, inhibitorima alfa-glukozidaze 1, hepatoprotektantima, nenukleozidnim inhibitorima HCV, i drugim lekovima za lečenje HCV.
[0111] Specifičnije, jedno ili više jedinjenja sa formulom (I) ili (A1)-(A4) mogu biti kombinovana sa jednim ili više jedinjenja odabranih iz grupe koja se sastoji od 1) inhibitora HIV proteaze, npr., amprenavira, atazanavira, fosamprenavira, indinavira, lopinavira, ritonavira, lopinavir ritonavira, nelfinavira, sakvinavira, tipranavira, brekanavira,
2
darunavira, TMC-126, TMC-114, mozenavira (DMP-450), JE-2147 (AG1776), AG1859, DG35, L-756423, RO0334649, KNI-272, DPC-681, DPC-684, i GW640385X, DG17, PPL-100, 2) HIV nenukleozidnog inhibitora reverzne transkriptaze, npr., kapravirina, emivirina, delaviridina, efavirenza, nevirapina, (+) kalanolida A, etravirina, GW5634, DPC-083, DPC-961, DPC-963, MIV-150, i TMC-120, TMC-278 (rilpivirin), efavirenza, BILR 355 BS, VRX 840773, UK-453,061, RDEA806, 3) HIV nukleozidnog inhibitora reverzne transkriptaze, npr., zidovudina, emtricitabina, didanozina, stavudina, zalcitabina, lamivudina, abakavira, amdoksovira, elvucitabina, alovudina, MIV-210, racivira (±-FTC), D-d4FC, emtricitabina, fosfazida, fozivudin tidoksila, fosalvudin tidoksila, apricitibina (AVX754), amdoksovira, KP-1461, abakavir lamivudina, abakavir lamivudin zidovudina, zidovudin lamivudina, 4) HIV nukleotidnog inhibitora reverzne transkriptaze, npr., tenofovira, tenofovir dizoproksil fumarat emtricitabina, tenofovir dizoproksil fumarat emtricitabin efavirenza, i adefovira, 5) inhibitora HIV integraze, npr., kurkumina, derivata kurkumina, cihorinske kiseline, derivata cihorinske kiseline, 3,5-dikafeoilhinske kiseline, derivata 3,5-dikafeoilhinske kiseline, aurintrikarboksilne kiseline, derivata aurintrikarboksilne kiseline, fenetil estra kofeinske kiseline, derivata fenetil estra kofeinske kiseline, tirfostina, derivata tirfostina, kvercetina, derivata kvercetina, S-1360, zintevira (AR-177), L-870812, i L-870810, MK-0518 (raltegravir), BMS-707035, MK-2048, BA-011, BMS-538158, GSK364735C, 6) gp41 inhibitora, npr., enfuvirtida, sifuvirtida, FB006M, TRI-1144, SPC3, DES6, Locus gp41, CovX, i REP 9, 7) CXCR4 inhibitora, npr., AMD-070, 8) “ulaznog” inhibitora, npr., SP01A, TNX-355, 9) gp120 inhibitora, npr., BMS-488043 i BlockAide/CR, 10) G6PD i NADH-oksidaznog inhibitora, npr., imunitina, 10) CCR5 inhibitora, npr., aplaviroka, vikriviroka, INCB9471, PRO-140, INCB15050, PF-232798, CCR5mAb004, i maraviroka, 11) interferona, npr., pegilovanog rIFN-alfa 2b, pegilovanog rIFN-alfa 2a, rIFN-alfa 2b, IFN alfa-2b XL, rIFN-alfa 2a, “konsenzus” IFN alfa, infergena, rebifa, locterona, AVI-005, PEG-infergena, pegilovanog IFN-beta, oralnog interferona alfa, ferona, reaferona, intermaksa alfa, r-IFN-beta, infergen aktimuna, IFN-omege sa DUROS-om, i albuferona, 12) analoga ribavirina, npr., rebetola, kopegusa, levovirina, VX-497, i viramidina (taribavirin) 13) NS5a inhibitora, npr., A-831, A-689, i BMS-790052, 14) inhibitora NS5b polimeraze, npr., NM-283, valopicitabina, R1626, PSI-6130 (R1656), HCV-796, BILB 1941, MK-0608, NM-107, R7128, VCH-759, PF-868554, GSK625433, i XTL-2125, 15) inhibitora NS3 proteaze, npr., SCH-503034 (SCH-7), VX-950 (Telaprevir), ITMN-191, i BILN-2065, 16) inhibitora alfaglukozidaze 1, npr., MX-3253 (celgosivir) i UT-231B, 17) hepatoprotektora, npr., IDN-6556,
2
ME 3738, MitoQ, i LB-84451, 18) nenukleozidnih inhibitora HCV, npr., derivata benzimidazola, derivata benzo-1,2,4-tiadiazina, i derivata fenilalanina, 19) drugih lekova za lečenje Hepatitisa C, npr., zadaksin, nitazoksanid (alinea), BIVN-401 (virostat), DEBIO-025, VGX-410C, EMZ-702, AVI 4065, bavituksimab, oglufanid, PYN-17, KPE02003002, aktilon (CPG-10101), KRN-7000, civacir, GI-5005, ANA-975 (izatoribin), XTL-6865, ANA 971, NOV-205, tarvacin, EHC-18, i NIM811, 19) farmakokinetičkih pojačivača, npr., BAS-100 i SPI452, 20) inhibitora RNKze H, npr., ODN-93 i ODN-112, 21) drugih anti-HIV agenasa, npr., VGV-1, PA-457 (bevirimat), ampligena, HRG214, citolina, polimuna, VGX-410, KD247, AMZ 0026, CYT 99007, A-221 HIV, BAY 50-4798, MDX010 (iplimumab), PBS119, ALG889, i PA-1050040.
[0112] Razmotreno je da će drugi terapijski agens biti administriran na nači koji je poznat u oblasti i doze mogu biti izabrane od strane stručnjaka u oblasti pronalska. Na primer, drugi agens može biti administriran u dozi od oko 0.01 miligrama do oko 2 grama dnevno.
Metaboliti jedinjenja
[0113] Takođe u okvirima ovog otkrića su in vivo metabolički proizvodi jedinjenja koja su ovde opisana. Takvi proizvodi mogu nastati kao rezultat na primer oksidacije, redukcije, hidrolize, amidacije, esterifikacije i slično administriranog jedinjenja, pre svega usled enzimskih procesa. U skladu sa tim, otkriće uključuje jedinjenja proizvedena procesom koji obuhvata kontaktiranje jedinjenja ovog otkrića sa sisarom tokom vremenskog perioda koji je dovoljan da nastane njegov metabolički proizvod. Takvi proizvodi su tipično identifikovani pripremom radioobeleženog (npr., C<14>ili H<3>) jedinjenja otkrića, njegovom administracijom parenteralno u dozi koju je moguće detektovati (npr., većoj od oko 0.5 mg/kg) životinji kao što je pacov, miš, zamorac, majmun, ili čovek, ostavljajući dovoljno vremena da dodje do metabolizma (tipično oko 30 sekundi do 30 sati) i izolovanjem njegovih proizvoda konverzije iz urina, krvi ili drugih bioloških uzoraka. Ovi proizvodi su lako izolovani zato što su obeleženi (ostali su izolovani primenom antitela koja su sposobna da vežu epitope koji su opstali u metabolitu). Strukture metabolita su određene na konvencionalan način, npr., MS ili NMR analizom. Uopšteno, analiza metabolita se izvodi na isti način kao i konvencionalne studije metabolizma leka koje su dobro poznate stručnjacima u oblasti pronalaska. Proizvodi konverzije, sve dok se inače ne pronalaze in vivo, su korisni u dijagnostičkim testovima za terapijsko doziranje jedinjenja otkrića čak iako ona sama ne poseduju HCV -inhibitornu aktivnost.
2
[0114] Metode za određivanje stabilnosti jedinjenja u surogat gastrointestinalnim sekretima su poznate.
Primeri metoda za pravljenje jedinjenja
[0115] Otkriće se takođe odnosi na metode za pravljenje kompozicija otkrića. Kompozicije su pripremljene bilo kojom od primenjivih tehnika organske sinteze. Mnoge takve tehnike su dobro poznate u oblasti. Međutim, mnoge od poznatih tehnika su razmotrene u Compendium of Organic Synthetic Methods (John Wiley & Sons, Njujork), tom 1, Ian T. Harrizon i Shuyen Harrizon, 1971; tom 2, Ian T. Harrizon i Shuyen Harrizon, 1974; tom 3, Louis S. Hegedus i Leroy Wade, 1977; tom 4, Leroy G. Wade, Jr., 1980; tom 5, Leroy G. Wade, Jr., 1984; i tom 6, Michael B. Smith; kao i March, J., Advanced Organic Chemistry, treće izdanje, (John Wiley & Sons, Njujork, 1985), Comprehensive Organic Synthesis. Selectivity, Strategy & Efficiency in Modern Organic Chemistry. U 9 tomova, Barry M. Trost, Editor-in-Chief (Pergamon Press, Njujork, 1993 štampa). Ostale metode za pripremu jedinjenja objave su opisane u internacionalnoj patentnoj prijavi sa brojem objave WO 2006/020276.
[0116] Nekolicina primera metoda za pripremu kompozicija otkrića je obezbeđena u shemama i primerima koji su ispod navedeni. Ove metode treba da ilustruju prirodu takvih priprema i ne treba da ograniče obim metoda koje mogu da se primene.
[0117] Uopšteno, uslovi reakcije kao što su temperatura, vreme trajanja reakcije, rastvarači, “work-up” procedure, i slično, će biti oni koji su uobičajeni u ovoj oblasti za određenu reakciju koja treba da se izvede. Materijal koji je ovde naveden kao referenca, zajedno sa materijalom koji je tamo naveden, sadrži detaljan opis takvih uslova. Tipično temperature će biti -100°C do 200°C, rastvarači će biti aprotični ili protični, a trajanje reakcije će biti 10 sekundi do 10 dana. “Work-up” se tipično sastoji od kvenčovanja bilo kog reagensa koji nije izreagovao što je praćeno podelom između sistema voda/organski sloj (ekstrakcija) i odvajanjem sloja koji sadrži proizvod.
[0118] Reakcija oksidacije i redukcije se tipično izvode na temperaturama koje su bliske sobnoj temperaturi (oko 20°C), iako je za redukcije metalnih hidrida često temperatura snižena na 0°C do -100°C, rastvarači su tipično aprotični za redukcije i mogu biti ili protični ili aprotični za oksidacije. Vremena trajanja reakcije su prilagođena tako da se postignu željene konverzije.
[0119] Reakcije kondenzacije se tipično izvode na temperaturama koje su bliske sobnoj temperaturi, iako su za neekvilibrišuće, kinetički kontrolisane kondenzacije takođe uobičajene snižene temperature (0°C do - 100°C). Rastvarači mogu biti ili protični (uobičajeno u ekvilibrišućim reakcijama) ili aprotični (uobičajeno u kinetički kontrolisanim reakcijama).
[0120] Standardne tehnike sinteze kao što je azeotropsko uklanjanje sporednih proizvoda reakcije i primena anhidrovanih reakcionih stanja (npr., prisustvo inertnog gasa) su uobičajene u oblasti i biće primenjene gde je to moguće.
[0121] Termini "tretiran", "tretiranje", "tretman", i slično, kada se koriste u vezi sa hemijskom operacijom sinteze, označavaju kontaktiranje, mešanje, reagovanje, dozvoljavanje da reaguju, dovođenje u kontakt, i druge termine koji su uobičajeni u ovoj oblasti za ukazivanje na to da je jedno ili više hemijskih entiteta tretirano na takav način da se konvertuje u jedno ili više drugih hemijskih entiteta. Ovo označava da je "tretiranje jedinjenja jedan sa jedinjenjem dva" sinonimno sa "dozvoljavanjem da jedinjenje jedan reaguje sa jedinjenjem dva", "kontaktiranje jedinjenja jedan sa jedinjenjem dva", "reagovanje jedinjenja jedan sa jedinjenjem dva", i drugim izrazima koji su uobičajeni u oblasti organske sinteze za racionalno ukazivanje na to da je jedinjenje jedan "tretirano", "reagovalo", "omogućeno da reaguje", itd., sa jedinjenjem dva. Na primer, tretiranje ukazuje na racionalan i uobičajeni način kojim je organskim hemikalijama omogućeno da reaguju. Normalne koncentracije (0.01M do 10M, tipično 0.1M do 1M), temperature (-100°C do 250°C, tipično -78°C do 150°C, tipičnije -78°C do 100°C, još tipičnije 0°C do 100°C), reakcioni sudovi (tipično staklo, plastika, metal), rastvarači, pritisci, atmosfere (tipično vazduh za reakcije koje nisu osetljive na kiseonik i vodu ili azot ili argon za osetljive na kiseonik ili vodu), itd., se podrazumevaju osim ukoliko drugačije nije naglašeno. Poznavanje sličnih reakcija koje su poznate u oblasti organske sinteze se koristi u izboru uslova i aparature za "tretiranje" u datom procesu. Posebno, prosečan poznavalac oblasti organske sinteze za kojeg se osnovano očekuje da će uspešno izvesti hemijske reakcije opisanog procesa na osnovu znanja u oblasti pronalaska bira uslove i aparaturu.
[0122] Modifikacije svake od shema koje su date kao primer u Primerima (u daljem tekstu "sheme za primer") dovode do različitih analoga specifičnih proizvedenih materijala koji su navedeni kao primeri. Gore spomenuti citati koji opisuju pogodne metode za organsku sintezu mogu se primeniti na takve modifikacije.
[0123] U svakoj od shema koje su date kao primer može biti povoljno da se izoluju reakcioni proizvodi jedan od drugog i/ili od početnog materijala. Željeni proizvodi svakog koraka ili niza koraka su razdvojeni i/ili prečišćeni (u daljem tekstu razdvojeni) do željenog stepena homogenosti tehnikama koje su poznate u ovoj oblasti. Tipično takva razdvajanja uključuju
1
ekstrakciju koja se sastoji iz više faza, kristalizaciju iz rastvarača ili smeše rastvarača, destilaciju, sublimaciju, ili hromatografiju. Hromatografija može da uključi bilo koji broj metoda uključujući, na primer: reverznu-fazu i normalnu fazu; isključivanje po veličini; jonsku izmenu; metode i aparaturu za tečnu hromatografiju pod visokim, srednjim i niskim pritiskom; analitičke metode na maloj skali; simuliranu pokretnu traku (simulated moving bed - SMB) i preparativnu tankoslojnu ili hromatografiju u debelom sloju, kao i tehnike za tankoslojnu i “flash” hromatografiju na maloj skali.
[0124] Druga vrsta metoda za razdvajanje uključuje tretiranje smeše sa reagensom koji je izabran da se veže za ili da učini na drugi način odvojivim željeni proizvod, neizreagovani početni materijal, sporedni proizvod reakcije, ili slično. Takvi reagensi uključuju adsorbense ili apsorbense kao što su aktivirani ugljenik, molekulska sita, medijum za jonsku izmenu, ili slično. Alternativno, reagensi mogu biti kiseline u slučaju baznog materijala, baze u slučaju kiselog materijala, reagensi za vezivanje kao što su antitela, vezujući proteini, selektivni helatni agensi kao što su krunski etri, reagensi za tečnost/tečnost jonsku ekstrakciju (LIX), ili slično.
[0125] Izbor odgovarajućih metoda za razdvajanje zavisi od prirode materijala o kome se radi. Na primer, tačka ključanja, i molekulska masa u destilaciji i sublimaciji, prisustvo ili odsustvo polarnih funkcionalnih grupa u hromatografiji, stabilnost materijala u kiselom i baznom medijumu u višefaznoj ekstrakciji, i slično. Stručnjak u oblasti pronalaska će primeniti tehnike kojima će se najverovatnije postići željeno razdvajanje.
[0126] Jedan stereoizomer, npr., enantiomer, suštinski bez svog stereoizomera može biti dobijen razdvajanjem racemske smeše korišćenjem metode kao što je formiranje dijastereomera korišćenjem optički aktivnog agensa za razdvajanje (Stereochemistry of Carbon Compounds, (1962) E. L. Eliel, McGraw Hill; Lochmuller, C. H., (1975) J. Chromatogr., 113, 3) 283-302). Racemska smeša hiralnih jedinjenja otkrića može biti razdvojena i izolovana bilo kojom pogodnom metodom, uključujući: (1) formiranje jonskih, dijastereomernih soli sa hiralnim jedinjenjima i izolovanje frakcionom kristalizacijom ili drugim metodama, (2) formiranje dijastereomernih jedinjenja sa hiralnim derivatizujućim reagensima, razdvajanje dijastereomera, i konverzija u čiste stereoizomere, i (3) razdvajanje suštinski čistih ili obogaćenih stereoizomera direktno pod hiralnim uslovima.
[0127] Pod metodom (1), dijastereomerne soli mogu biti formirane reakcijom enantiomerno čistih hiralnih baza kao što je brucin, hinin, efedrin, strihnin, ɑ-metil-ß-feniletilamin (amfetamin), i slično sa asimetričnim jedinjenjima koja nose kiselu funkcionalnu grupu, kao
2
što je karboksilna kiselina i sulfonska kiselina. Razdvajanje dijastereomernih soli može biti indukovano frakcionom kristalizacijom ili jonskom hromatografijom. Za razdvajanje optičkih izomera amino jedinjenja, dodavanje hiralne karboksilne ili sulfonske kiseline, kao što je kamforsulfonska kiselina, vinska kiselina, bademova kiselina, ili mlečna kiselina može da rezultira formiranjem dijastereomernih soli.
[0128] Alternativno, metodom (2), supstrat koji treba da bude razdvojen reaguje sa jednim enantiomerom hiralnog jedinjenja da formira dijastereomerni par (Eliel, E. i Wilen, S. (1994) Stereochemistry of Organic Compounds, John Wiley & Sons, Inc., str.322). Dijastereomerna jedinjenja mogu biti formirana reakcijom asimetričnih jedinjenja sa enantiomerno čistim hiralnim derivatizujućim sredstvima, kao što su mentil derivati, što je praćeno razdvajanjem dijastereomera i hidrolizom kako bi se dobio slobodan, enantiomerno obogaćen supstrat. Metod za određivanje optičke čistoće uključuje pravljenje hiralnih estara, kao što je mentil estar, npr., (-) mentil hloroformat u prisustvu baze, ili Mosher estar, ɑ-metoksi-ɑ-(trifluorometil)fenil acetat (Jacob III. (1982) J. Org. Chem. 47:4165), racemske smeše, i analiziranje NMR spektra na prisustvo dva atropizomerna dijastereomera. Stabilni dijastereomeri atropizomernih jedinjenja mogu biti razdvojeni i izolovani normalno i reverzno-faznom hromatografijom koja je praćena metodama za razdvajanje atropizomernih naftil-izohinolina (Hoye, T., WO 96/15111). Metodom (3), racemska smeša dva enantiomera može biti izdvojena hromatografijom korišćenjem hiralne stacionarne faze (Chiral Liquid Chromatography (1989) W. J. Lough, Ed. Chapman i Hall, Njujork; Okamoto, (1990) J. of Chromatogr. 513:375-378). Obogaćeni ili prečišćeni enantiomeri mogu se razlikovati metodama koje se koriste za razlikovanje drugih hiralnih molekula sa asimetričnim ugljenikovim atomima, kao što je optička rotacija i cirkularni dihroizam.
Sheme i Primeri
[0129] Opšti aspekti ovih metoda koje su navedene kao primeri su opisani ispod i u Primerima. Svaki od proizvoda sledećih procesa je po izboru izdvojen, izolovan, i/ili prečišćen pre njegove primene u narednim procesima.
[0130] Nekolicina metoda koje su navedene kao primeri za pripremu jedinjenja otkrića je obezbeđena ovde, na primer, u Primerima ispod. Ove metode treba da ilustruju prirodu takvih pripremanja i ne treba da ograniče obim metoda koje mogu da se primene. Određena jedinjenja otkrića mogu biti korišćena kao intermedijeri za pripremu drugih jedinjenja otkrića. U metodama koje su ovde opisane kao primeri, fragment E-V- može takođe biti napisan kao R9-. PG predstavlja zaštitnu grupu koja je zajednička za datu funkcionalnu grupu koja je vezana. Postavljanje i uklanjanje zaštitne grupe može biti postignuto korišćenjem standardnih tehnika, kao što su one opisane u Wuts, P. G. M., Greene, T. Protective Groups in Organic Synthesis, 4. izdanje.; John Wiley & Sons, Inc.: Hoboken, Nju Džerzi, 2007.
[0131] Shema 1 prikazuje opštu sintezu E-V-C(=O)-P-W-P-C(=O)-V-E molekula objave gde, za ilustrativne svrhe, E je metoksi karbonilamino. Tretiranje bilo 1a bilo 1c sa jednim ili dva ekvivalenta redom metil hloroformata pod baznim uslovima (npr. natrijum hidroksid) obezbeđuje molekul 1b ili 1d.
[0132] Shema 2 prikazuje opštu sintezu E-V-C(=O)-P-W-P-C(=O)-V-E molekula objave gde, za ilustrativne svrhe, P je pirolidin. Vezivanje amina 2a sa kiselinom 2b je postignuto primenom reagensa za kuplovanje peptida (npr. HATU) da se dobije 2c. Alternativno, amin 2d je kuplovan sa dva ekvivalenta 2b pod sličnim uslovima da se obezbedi 2e.
4
[0133] Shema 6 prikazuje opštu sintezu R<1>-V-C(=O)-P-R<2>intermedijera gde, za ilustrativne svrhe, P je pirolidin, R<1>je opšta grupa koja je prikazana kao ili -E ili amino zaštitna grupa, i R<2>je opšta grupa koja je prikazana kao -W-P-C(=O)-V-E, -W-P-C(=O)-V-NH-PG, -W-P-NH-PG, ili -W-NH-PG. Vezivanje amina 6a (ili 6d, 6h, 6k) sa kiselinom 6b ili 6e je postignuto primenom reagensa za kuplovanje peptida (npr. HATU) da se dobije 6c (ili 6f, 6g, 6i, 6j, 61, 6m) redom.
[0134] Shema 7 prikazuje opštu sintezu E-V-C(=O)-R<1>intermedijera gde, za ilustrativne svrhe, E je metoksi karbonilamino i R<1>je opšta grupa koja je prikazana kao ili - P-W-P-C(=O)-V-NH-PG, -P-W-P-PG, -P-W-PG, -P-PG, ili -O-PG. Tretiranje 7a (ili 7c, 7e, 7g, 7i) sa metil hloroformatom pod baznim uslovima (npr. natrijum hidroksid) obezbeđuje molekul 7b (ili 7d, 7f, 7h, 7j).
[0135] Shema 9 prikazuje opštu sintezu R<1>-P-R<2>intermedijera gde, za ilustrativne svrhe, R<1>je -C(=O)-V-E ili zaštitna grupa i R<2>je supstituisani benzimidazol. Formiranje benzimidazola je postignuto vezivanjem kiseline 9b ili 9e sa arilaminom 9a, primenom reagensa za kuplovanje peptida kao što je HATU, da se dobije 9c ili 9d. Ciklizacija amida u prisustvu kiseline (kao što je sirćetna kiselina) daje benzimidazol koji sadrži molekul 9d ili 9g.
[0136] Formiranje višestrukih benzimidazola se izvodi na isti način, počevši od bis-diamina kako bi se dobio odgovarajući bis-benzimidazol.
[0137] Shema 20 prikazuje opštu sintezu R<1>-P-W-P-R<2>intermedijera objave gde, za ilustrativne svrhe, R<1>i R<2>su nezavisne zaštitne grupe i W je jedinica od dva aromatična prstena nastala putem ciklizacije posredovane prelaznim metalom. Alkilacija fenola 20b sa alkil bromidom, kao što je 20a, obezbeđuje etar 20c. Ciklizacije aromatičnih prstenova u prisustvu paladijum katalizatora obezbeđuje jedinjenje 20d. Tretiranje 20d sa CuBr2obezbeđuje α-haloketon 20e, koji obezbeđuje 20f nakon dodavanja kiseline pod baznim uslovima (npr. Et3N). Reakcija 20f sa aminom ili soli amina (npr. amonijum acetatom) daje molekul 20g koji sadrži imidazol. Oksidacija 20g, 20i, ili 201 može biti postignuta zagrevanjem u prisustvu MnO2da se obezbedi 20h, 20j, ili 20m, redom. Konverzija 20g ili 20h sa paladijum katalizatorom, kao što je Pd2dba3i X-Phos, i izvorom borona kao što je bis(pinakolato)diboron obezbeđuje boronski estar 20i ili 20j. Boronski estar je vezan sa odgovarajućim partnerom za vezivanje (npr. 20k) primenom paladijum katalizatora, kao Pd(PPh3)4ili PdCl2(dppf), da se dobije 201 ili 20m. Za svaku reakciju ukrštenog kuplovanja koja je posredovana prelaznim metalom, uloge nukleofila i elektrofila mogu biti preokrenute da se obezbedi isti proizvod vezivanja. Druga ukrštena kuplovanja koja su posredovana prelaznim metalom koja omogućavaju nastajanje W, ali uključuju alternativne vezujuće partnere i reagense, uključuju, ali nisu ograničena na, Negishi, Kumada, Stille, i Ullman kuplovanja. Za pripremanje alternativnih W grupa koje sadrže dva aromatična prstena, ova opšta shema može biti primenjena uz odgovarajući izbor početnih reagenasa.
[0138] Shema 21 prikazuje opštu sintezu R<1>-P-W-P-R<2>intermedijera objave gde, za ilustrativne svrhe, R<1>i R<2>su nezavisne zaštitne grupe i W je jedinica od dva aromatična prstena nastala putem ciklizacije posredovane prelaznim metalom. Tretiranje 20d sa aktiviranim vinil reagensom (npr. kalijum viniltrifluoroboratom) u prisustvu paladijum katalizatora (npr. paladijum acetata i S-Phos) obezbeđuje vinil jedinjenje 21a. Konverzija u odgovarajući α-halo keton može biti postignuta pomoću brominacije sa N-bromosukcinimidom, praćeno sa oksidacijom sa MnO2. Premeštanje α-halo ketona se nastavlja dodavanjem kiseline pod baznim uslovima (npr. Et3N). Brominacija 21d se nastavlja nakon tretiranja sa piridinijum tribromidom, i praćena je dodatkom druge kiseline pod baznim uslovima kako bi se obezbedio diestar 21e. Reakcija 21e sa aminom ili soli amina (npr. amonijum acetatom) daje molekul 21f koji sadrži imidazol. Oksidacija 21f može biti postignuta u prisustvu MnO2da se obezbedi 21g.
4
[0139] Shema 22 prikazuje opštu sintezu E-V-C(=O)-P-W-P-R intermedijera objave gde, za ilustrativne svrhe, R je zaštitna grupa i W je jedinica sa dva aromatična prstena. Premeštanje α-halo ketona 21b se nastavlja dodavanjem kiseline pod baznim uslovima (npr. Et3N). Brominacija 22b se nastavlja nakon tretiranja sa piridinijum tribromidom, i praćena je dodatkom druge kiseline pod baznim uslovima da se dobije diestar 22c. Reakcija 22c sa aminom ili soli amina (npr. amonijum acetatom) daje molekul 22d koji sadrži imidazol. Oksidacija 22d može biti postignuta u prisustvu MnO2da se obezbedi 22e.
[0140] Shema 23 prikazuje opštu sintezu E-V-C(=O)-P-W-P-R intermedijera objave gde, za ilustrativne svrhe, R je zaštitna grupa i W je jedinica sa dva aromatična prstena. Premeštanje α-halo ketona 21d se nastavlja dodavanjem kiseline pod baznim uslovima (npr. Et3N). Reakcija 23a sa aminom ili soli amina (npr. amonijum acetatom) daje molekul 23b koji sadrži imidazol. Oksidacija 23b može biti postignuta u prisustvu MnO2da se obezbedi 23c.
[0141] Shema 25 prikazuje opštu sintezu E-V-C(=O)-P-W-P-C(=O)-V-E molekula objave gde, za ilustrativne svrhe, E je etilkarbonilamino. Tretiranje bilo 25a bilo 25c sa jednim ili dva ekvivalenta redom propionil hlorida pod baznim uslovima (npr. natrijum hidroksid) obezbeđuje molekul 25b ili 25d.
[0142] Shema 26 prikazuje opštu sintezu E-V-C(=O)-P-R i R<1>-P-R molekula objave gde, za ilustrativne svrhe R je haloimidazol. Tretiranje aldehida 26a sa glioksalom, u prisustvu amonijum hidroksida obezbeđuje imidazol 26b. Tretiranje sa bilo N-bromosukcinamidom bilo jodom obezbeđuje odgovarajući haloimidazol 26c i 26d redom. Odvajanje od odgovarajućeg bis-halogenovanog jedinjenja može biti postignuto preparativnom HPLC hromatografijom. Konverzija bis-haloimidazola do mono-haloimidazola može takođe biti postignuta nakon zagrevanja u prisustvu natrijum sulfita. Dalja funkcionalizacija P grupe može biti postignuta nakon uklanjanja zaštitne grupe i kuplovanja sa odgovarajućom kiselinom (E-V-C(=O)-OH).
[0143] Shema 27 prikazuje alternativnu opštu sintezu R<1>-P-W-P-R<2>intermedijera gde, za ilustrativne svrhe, R<1>i R<2>su nezavisne zaštitne grupe i W je jedinica sa dva aromatična prstena nastala putem ciklizacije posredovane prelaznim metalom. Brominacija 21b sa agensom za brominaciju (t.j. piridinijum tribromidom) obezbeđuje dibromid 27a.
Premeštanje primarnog bromida se potom nastavlja dodavanjem kiseline pod baznim uslovima (npr. K2CO3) da se obezbedi 21d. Konverzija 21f ili 21g može biti postignuta prateći metode opisane u Shemi 21.
4
[0144] Shema 28 prikazuje alternativnu opštu sintezu E-V-C(=O)-P-W-P-R intermedijera gde, za ilustrativne svrhe, R je zaštitna grupa i W je jedinica sa dva aromatična prstena. Brominacija 21b sa agensom za brominaciju (t.j. piridinijum tribromidom) obezbeđuje dibromid 27a. Premeštanje primarnog bromida se zatim nastavlja dodavanjem kiseline pod baznim uslovima (npr. K2CO3) da se obezbedi 22d. Konverzija 22d ili 22e može biti postignuta prateći metode koje su opisane u Shemi 22.
Specifična tehnička rešenja
[0145] U jednom tehničkom rešenju objava obezbeđuje jedinjenje koje ima formulu:
ili
gde je prsten imidazola prikazan u formuli A1, A2, A3, i A4 po izboru supstituisan sa jednom ili više grupa nezavisno odabranih od halo, haloalkil, cijano, ili alkil;
ili farmaceutski prihvatljivu so tog jedinjenja.
[0146] U jednom tehničkom rešenju objava obezbeđuje jedinjenje koje ima formulu:
ili
gde je prsten imidazola prikazan u formuli A2 i A4 po izboru supstituisan sa jednom ili više grupa nezavisno odabranih od halo, haloalkil, cijano, ili alkil;
ili farmaceutski prihvatljivu so tog jedinjenja.
[0147] U jednom tehničkom rešenju najmanje jedno od E<1a>i E<1b>je -N(H)(alkoksikarbonil).
[0148] U jednom tehničkom rešenju najmanje jedno od E<1a>i E<1b>je -N(H)C(=O)OMe.
[0149] U jednom tehničkom rešenju oba E<1a>i E<1b>su -N(H)C(=O)OMe.
4
[0150] U jednom tehničkom rešenju najmanje jedno od E<1a>i E<1b>je -N(H)(cikloalkilkarbonil) ili -N(H)(cikloalkiloksikarbonil).
[0151] U jednom tehničkom rešenju najmanje jedno od E<1a>i E<1b>je ciklopropilkarbonilamino, ciklobutilkarbonilamino, ciklopropiloksikarbonilamino ili ciklobutiloksikarbonilamino.
[0152] U jednom tehničkom rešenju E<1a>i E<1b>je svako nezavisno odabrano od ciklopropilkarbonilamino, ciklobutilkarbonilamino, ciklopropiloksikarbonilamino ili metoksi karbonilamino.
[0153] U jednom tehničkom rešenju najmanje jedno od V<1a>i V<1b>je:
[0154] U jednom tehničkom rešenju E<1a>-V<1a>uzeti zajedno su R<9a>ili E<1b>-V<1b>uzeti zajedno su R<9b>.
[0155] U jednom tehničkom rešenju najmanje jedno od P<1a>i P<1b>je odabrano od:
[0156] U jednom tehničkom rešenju P<1a>i P<1b>je svako nezavisno odabrano od:
[0157] U jednom tehničkom rešenju jedno od P<1a>i P<1b>je:
i drugo od P<1a>i P<1b>je:
[0158] U jednom tehničkom rešenju jedno od P<1a>i P<1b>je:
4
i drugo od P<1a>i P<1b>je:
[0159] U jednom tehničkom rešenju najmanje jedno od P<1a>i P<1b>je:
[0160] U jednom tehničkom rešenju najmanje jedno od P<1a>i P<1b>je:
[0161] U jednom tehničkom rešenju najmanje jedna od -V<1a>-C(=O)-P<1a>- i -P<1b>-C(=O)-V<1b>-je:
[0162] U jednom tehničkom rešenju najmanje jedna od -V<1a>-C(=O)-P<1a>- i -P<1b>-C(=O)-V<1b>-je:
4
[0163] U jednom tehničkom rešenju obe -V<1a>-C(=O)-P<1a>- i -P<1b>-C(=O)-V<1b>- su nezavisno odabrane od:
[0164] U jednom tehničkom rešenju jedna od -V<1a>-C(=O)-P<1a>- i -P<1b>-C(=O)-V<1b>- je:
4
i druga od -V<1a>-C(=O)-P<1a>- i -P<1b>-C(=O)-V<1b>- je:
[0165] U jednom tehničkom rešenju objava obezbeđuje jedinjenje sa formulom:
4
�
ili
ili farmaceutski prihvatljivu so tog jedinjenja.
[0166] U jednom tehničkom rešenju objava obezbeđuje jedinjenje sa formulom:
ili farmaceutski prihvatljivu so tog jedinjenja.
[0167] U jednom tehničkom rešenju objava obezbeđuje jedinjenje sa formulom:
2
ili farmaceutski prihvatljivu so tog jedinjenja.
[0168] Objava će sada biti ilustrovana sledećim neograničavajućim Primerima. Sledeće skraćenice su primenjene kroz specifikaciju, uključujući Primere.
4
Primer LQ (Referenca)
[0169]
7-(2-bromo-5-hlorobenziloksi)-3,4-dihidronaftalen-1(2H)-on
[0170] Mešanom rastvoru 7-hidroksi-1-tetralona (13.9 g, 85.7 mmol) i 1-bromo-2-(bromometil)-4-hlorobenzena (25.6 g, 90.0 mmol) u dimetilformamidu (850 mL) je dodat kalijum karbonat (24 g, 172 mmol). Reakcija je mešana pod argonon tokom 18 sati zatim je razblažena sa etil acetatom (1 L). Organske supstance su oprane tri puta sa vodom i jednom sa slanim rastvorom. Organski sloj je zatim osušen sa magnezijum sulfatom, filtriran i koncentrovan. Dobijenom ulju je dodat metanol (500 mL) i suspenzija je mućkana tokom trideset minuta. 7-(2-bromo-5-hlorobenziloksi)-3,4-dihidronaftalen-1(2H)-on (27.8 g, 89% prinos) je izolovan filtracijom.
3-hloro-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g] hromen-8(9H)-on
[0171] U posudu od 1 L koja sadrži paladijum(II) pivalat (1.18 g, 3.8 mmol), tri(4-fluorofenil)fosfin (1.20 g, 3.8 mmol), pivalinsku kiselinu (2.33 g, 22.8 mmol) i kalijum karbonat (31.8 g, 228 mmol) je dodat rastvor 7-(2-bromo-5-hlorobenziloksi)-3,4-dihidronaftalen-1(2H)-ona (27.8 g, 76.2 mmol) u dimetiacetamidu (380 mL). Posuda je ispražnjena i ponovo punjena sa argonom 5 puta i zatim je mešana pod argonom na 60 °C tokom 24 sata. Reakcija je ohlađena do sobne temperature i razblažena sa MTBE i vodom. Dobijena bifazna smeša je mešana tokom 3 sata i filtrirana kroz Celite, ispiranjem sa MTBE. Organski sloj filtrata je odvojen i zatim ispran dva puta sa vodom i jednom sa slanim rastvorom. Organske supstance su zatim osušene sa magnezijum sulfatom, filtrirane, koncentrovane i prečišćene “flash” hromatografijom na koloni (Heksani/DCM) da se dobije 3-hloro-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-8(9H)-on (14.4 g, 67% prinos) kao prljavo bela čvrsta supstanca.
9-bromo-3-hloro-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-8(9H)-on
[0172] Smeši 3-hloro-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-8(9H)-ona (14.8 g, 52 mmol) u hloroformu (50 mL) i etil acetatu (50 mL) je dodat bakar(II) bromid (24.3 g, 104 mmol). Reakcija je zagrevana do 80 °C tokom 2 sata i zatim ohlađena do sobne temperature. Smeša je razblažena sa dihlorometanom i oprana dva puta sa rastvorom u odnosu 5:1 zasićenog vodenog amonijum hlorida i vodenog amonijum hidroksida (∼38%), i oprana jednom sa vodom. Organski sloj je osušen sa magnezijum sulfatom, filtriran i koncentrovan da se dobije 9-bromo-3-hloro-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-8(9H)-on (18.5 g, >95% prinos) sa >95% čistoće.
[0173] Napomena: Ova reakcija nije uvek ovoliko čista. Ponekad postoji prekomerno bromovanje i ponekad postoji značajna količina polaznog materijala. Ove nečistoće mogu da budu uklonjenje “flash” hromatografijom na koloni.
terc-Butil 2-(9-hloro-1,4,5,11-tetrahidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)pirolidin-1-karboksilat
[0174] Rastvoru (1R)-2-(terc-butoksikarbonil)ciklopentankarboksilne kiseline (10.17 g, 47.25 mmol) i 9-bromo-3-hloro-10,11-dihidro-6H-nafto[2,3-c]hromen-8(9H)-ona (5.7 mg, 15.7 mmol) u acetonitrilu (50 mL) je dodat diizopropiletilamin (11.11 mL, 64 mmol). Reakcija je mešana na 50 °C tokom 4 sata i zatim je razblažena sa etil acetatom. Organske supstance su oprane sa vodom i slanim rastvorom, osušene (MgSO4) i koncentrovane. Dobijeni sirovi ostatak je prečišćen “flash” hromatografijom da se dobije (2S)-1-terc-butil 2-(3-hloro-8-okso-8,9,10,11-tetrahidro-5H-nafto[c,g]hromen-9-il) pirolidin-1,2-dikarboksilat (4.52 g, 58%). Rastvoru (2S)-1-terc-butil 2-(3-hloro-8-okso-8,9,10,11-tetrahidro-6H-nafto[2,3-c]hromen-9-il) pirolidin-1,2-dikarboksilata (3.27 mg, 6.56 mmol) u smeši toluena (11 mL) i 2-metoksietanola (0.7 mL) je dodat amonijum acetat (5.06 g, 65.6 mmol). Reakciona smeša je zagrevana do 110 °C tokom 3 sata, ohlađena do sobne temperature i razblažena sa etil acetatom. Organske supstance su oprane sa vodom i slanim rastvorom, osušene (Na2SO4), i koncentrovane. Sirovi ostatak je prečišćen “flash” hromatografijom da se dobije terc-butil 2-(9-hloro-1,4,5,11-tetrahidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)pirolidin-1-karboksilat (1.95 g, 61%). LCMS-ESI<+>: izračunato za C27H28ClN3O342: 477.98; primećeno [M+1]<+>: 478.47
terc-Butil 2-(9-hloro-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)pirolidin-1-karboksilat
[0175] Rastvoru terc-butil 2-(9-hloro-1,4,5,11-tetrahidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)pirolidin-1-karboksilata (1.9 g, 3.96 mmol) u dihlorometanu (35 mL) je dodat mangan(IV) oksid (17 g, 198 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 18 sati, razblažena sa etil acetatom. Organske supstance su oprane sa vodom i slanim rastvorom, osušene (Na2SO4), i koncentrovane. Sirovi ostatak je prečišćen “flash” hromatografijom da se dobije terc-butil 2-(9-hloro-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)pirolidin-1-karboksilat (1.52 g, 81%). LCMS-ESI<+>: izračunato za C27H26ClN3O342: 475.9; primećeno [M+1]<+>: 476.45.
terc-Butil 2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidin-1-karboksilat [0176] Degasirana smeša terc-butil 2-(9-hloro-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)pirolidin-1-karboksilata (1.52 g, 3.17 mmol), bis(pinakolato)diborona (1.21 g, 4.75 mmol), kalijum acetata (934 mg, 9.52 mmol), tris(dibenzilidenaceton)paladijuma (116
1
mg, 0.13 mmol) i 2-dicikloheksilfosfino-2', 4', 6'-tri-i-propil-1,1'-bifenila (121 mg, 0.08 mmol) u 1,4-dioksanu (16 mL) je zagrevana do 90 °C tokom 1.5 sata, ohlađena do sobne temperature i razblažena sa etil acetatom. Organske supstance su oprane sa vodom i slanim rastvorom, osušene (Na2SO4), i koncentrovane. Sirovi ostatak je prečišćen “flash” hromatografijom da se dobije terc-butil 2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidin-1-karboksilat (1.7 g, 94%)
terc-Butil 2-[9-(2-{1-[N-(metoksi karbonil)valil]pirolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidin-1-karboksilat [0177] Rastvoru metil (S)-1-((S)-2-(5-bromo-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-il)-3-metil-1-oksobutan-2-ilkarbamata (1.48 g, 3.97 mmol), terc-butil 2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidin-1-karboksilata (1.88 g, 1.48 mmol), tetrakis(trifenil fosfin)paladijuma(0) (191 mg, 0.16 mmol) i dihloro[1,1'-bis(difenilfosfino) ferocen]paladijuma(II) (242 mg, 0.33 mmol) u smeši 1,2-dimetoksi etana (37.0 mL) i dimetilformamida (6 mL) je dodat rastvor kalijum karbonata (2M u vodi, 5 mL, 9.93 mmol). Dobijena smeša je degasirana i zatim zagrevana do 85 °C pod argonom tokom 18 sati. Nakon hlađenja do sobne temperature, reakcija je razblažena sa etil acetatom. Organske supstance su oprane sa vodom i slanim rastvorom, osušene (Na2SO4), i koncentrovane. Sirovi ostatak je prečišćen “flash” hromatografijom da se dobije terc-butil 2-[9-(2-{1-[N-(metoksi karbonil)valil]pirolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidin-1-karboksilat (1.45 mg, 59%). LCMS-ESI<+>: izračunato za C41H47N7O673733.86; primećeno [M+1]<+>: 734.87.
[1-(2-{5-[2-(1-{[(Metoksi karbonil)amino](fenil)acetil}pirolidin-2-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il]-1H-imidazol-2-il}pirolidin-1-il)-3-metil-1-oksobutan-2-il]karbaminska kiselina
[0178] Rastvor terc-butil 2-[9-(2-{1-[N-(metoksi karbonil)valil]pirolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidin-1-karboksilata (462 mg, 0.63 mmol), etanola (6 mL) i koncentrovane HCl (2 mL) je zagrevan do 60 °C tokom 1 sata. Reakcija je koncentrovana i sirovi materijal je rastvoren u DCM-u (6 mL). Ovaj rastvor je koncentrovan i ovom materijalu je dodat rastvor (R)-2-(metoksi karbonilamino)-2-fenilsirćetne kiseline (172 mg, 0.82 mmol) i COMU (311 mg, 073 mmol) u DMF-u (6 mL). Dobijenom rastvoru je dodat diizopropiletilamin (330 µL, 1.89 mmol). Nakon mešanja posle 18 sati na sobnoj temperaturi, reakcija je razblažena sa etil acetatom, oprana sa vodom i
2
slanim rastvorom, osušena (Na2SO4), koncentrovana i prečišćena preparativnom HPLC na reverznoj fazi (Gemini, 15 do 45% ACN/H2O 0.1% TFA). Frakcije proizvoda su liofilizirane da se dobije [1-(2-{5-[2-(1-{[(metoksi karbonil)amino](fenil)acetil}pirolidin-2-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il]-1H-imidazol-2-il}pirolidin-1-il)-3-metil-1-oksobutan-2-il]karbaminska kiselina (231 mg, 45%). LCMS-ESI<+>: izračunato za C46H48N8O78: 824.92; primećeno [M+1]<+>: 826.00
Primer LR (Referenca)
[0179]
(2S,4S)-1-terc-butil 2,4-dimetil pirolidin-1,2,4-trikarboksilat
[0180] Rastvoru (2S,4S)-1-terc-butil 2-metil 4-cijanopirolidin-1,2-dikarboksilata (9.0 g, 35.4 mmol) u MeOH-u (196 mL) je dodat HCl (4M u 1,4-dioksanu, 100 mL, 403 mmol). Rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 16h i koncentrovan in vacuo. Sirovi intermedijer je rastvoren u EtOAc-u (180 mL) i učinjen baznim sa vodenim bikarbonatom (zas.). Di-tercbutil dikarbonat (8.5 g, 38.9 mmol) je dodat i dvofazni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 12h. Slojevi su zatim razdvojeni i vodeni sloj je ponovo eksrahovan sa EtOAc-om.
Kombinovani organski slojevi su oprani sa slanim rastvorom, osušeni preko Na2SO4, i koncentrovani. Sirovo ulje je prečišćeno hromatografijom na silika gelu (15% do 40% do 100% EtOAc/Heksani) da se dobije (2S,4S)-1-terc-butil 2,4-dimetil pirolidin-1,2,4-trikarboksilat (9.56 g, 94%).
(3S,5S)-1-(terc-butoksikarbonil)-5-(metoksi karbonil)pirolidin-3-karboksilna kiselina [0181] Rastvoru (2S,4S)-1-terc-butil 2,4-dimetil pirolidin-1,2,4-trikarboksilata (9.56 g, 33.3 mmol) u THF-u (70 mL) na 0 °C (spoljna temperatura, ledeno kupatilo) je dodavan NaOH (1N vodeni, 33 mL, 33.3 mmol) u kapima tokom 15 min. Rastvor je mešan na 0 °C tokom 5h pre acidifikacije sa HCl (1N). Rastvor je ekstrahovan sa EtOAc-om (3x). Kombinovani organski slojevi su osušeni preko Na2SO4i koncentrovani. Sirovo ulje je prečišćeno silika gel hromatografijom pomoću (2% do 5% do 10% MeOH/CH2Cl2) da se dobije (3S,5S)-1-(tercbutoksikarbonil)-5-(metoksi karbonil)pirolidin-3-karboksilna kiselina (6.38g, 70%).
(2S,4S)-1-terc-butil 2-metil 4-(hidroksimetil)pirolidin-1,2-dikarboksilat
[0182] Rastvoru (3S,5S)-1-(terc-butoksikarbonil)-5-(metoksi karbonil)pirolidin-3-karboksilne kiseline (6.38 g, 23.3 mmol) u THF-u (116 mL) na 0 °C (spoljna temperatura, ledeno kupatilo) je dodat Et3N (4.9 mL, 35.0 mmol) i etil hloroformat (2.7 mL, 28.0 mmol). Dobijeni rastvor je mešan na 0 °C tokom 45 min, a za to vreme se formira beli talog. Reakciona smeša je filtrirana kroz celit i koncentrovana.
[0183] Sirovi intermedijer je rastvoren u THF-u (59 mL) i ohlađen do 0 °C (spoljna temperatura, ledeno kupatilo). NaBH4(4.41 g, 116.7 mmol) u H2O (59 mL) je polako dodat i dobijeni rastvor je mešan na 0 °C tokom 2 h. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc-om i oprana sa H2O. Vodeni sloj je ponovo ekstrahovan sa EtOAc-om. Kombinovani organski slojevi su osušeni preko Na2SO4i koncentrovani. Sirovo ulje je prečišćeno silika gel hromatografijom (42% do 69% do 100% EtOAc/Heksani) da se dobije (2S,4S)-1-terc-butil 2-metil 4-(hidroksimetil)pirolidin-1,2-dikarboksilat (3.63 g, 60%).
(2S,4S)-1-terc-butil 2-metil 4-(metoksi metil)pirolidin-1,2-dikarboksilat
[0184] Rastvoru (2S,4S)-1-terc-butil 2-metil 4-(hidroksimetil)pirolidin-1,2-dikarboksilata (2.57 g, 9.9 mmol) u CH2Cl2-u (50 mL) je dodat AgOTf (4.07 g, 15.8 mmol) i 2,6-di-tercbutilpiridin (4.4 mL, 19.8 mmol). Reakciona smeša je ohlađena do 0 °C (spoljna temperatura, ledeno kupatilo) i MeI (0.98 mL, 15.8 mmol) je polako dodat. Dobijena gusta masa je mešana na 0 °C tokom 1.5 h i na sobnoj temperaturi tokom 1.5 h. Gusta masa je razblažena sa CH2Cl2-om i filtrirana kroz celit. Filtrat je koncentrovan do suva, rastvoren u Et2O-u, i opran
4
sa HCl (1N) i slanim rastvorom. Vodeni slojevi su ponovo ekstrahovani sa Et2O-om i kombinovani organski slojevi su osušeni preko Na2SO4i koncentrovani. Sirovo ulje je prečišćeno silika gel hromatografijom (10% do 75% do 100% EtOAc/Heksani) da se dobije (2S,4S)-1-terc-butil 2-metil 4-(metoksi metil)pirolidin-1,2-dikarboksilat (2.11 g, 78%).<1>H-NMR: 400 MHz, (CDCl3) δ: (smeša rotomera, glavna prijavljena) 4.20 (t, 1H), 3.71 (s, 3H), 3.67 (m, 1H), 3.34 (m, 2H), 3.30 (s, 3H), 3.16 (t, 1H), 2.43 (m, 2H), 1.74 (m, 1H), 1.38 (s, 9H).
(2S,4S)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-(metoksi metil)pirolidin-2-karboksilna kiselina [0185] Rastvoru (2S,4S)-1-terc-butil 2-metil 4-(metoksi metil)pirolidin-1,2-dikarboksilata (2.11 g, 7.7 mmol) u smeši THF (38 mL) i MeOH (15 mL) je dodat LiOH (2.5 M vodeni, 15 mL, 38.6 mmol). Dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 2h, i zakiseljen sa vodenim HCl (1N). Željeni proizvod je ekstrahovan sa CH2Cl2-om (4x). Kombinovani organski slojevi su osušeni preko Na2SO4i koncentrovani da se dobije (2S,4S)-1-(tercbutoksikarbonil)-4-(metoksi metil)pirolidin-2-karboksilna kiselina (2.0 g, 99%).<1>H-NMR: 400 MHz, (CDCl3) δ: (smeša rotomera, glavna prijavljena) 4.33 (t, 1H), 3.65 (m, 1H), 3.35 (m, 2H), 3.32 (s, 3H), 3.16 (t, 1H), 2.45 (m, 2H), 2.12 (m, 1H), 1.46 (s, 9H).
Primer LR-1 (Referenca)
[0186]
(2S,4S)-terc-butil-2-(9-hloro-4,5-dihidro-5H-nafto[2,3-c]hromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4-(metoksi metil)pirolidin-1-karboksilat:
[0187] Rastvoru ((S)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-(metoksimetil)pirolidin-2-karboksilne kiseline (5.9 g, 23.1 mmol) i 9-bromo-3-hloro-10,11-dihidro-5H-nafto[c,g]hromen-8(9H)-ona (5.6 mg, 15.4 mmol) u acetonitrilu (60 mL) je dodat diizopropiletilamin (5.35 mL, 30.8 mmol). Reakcija je mešana na 50 °C tokom 18 sati i onda je razblažena sa etil acetatom. Organske supstance su oprane sa vodom i slanim rastvorom, osušene (MgSO4) i koncentrovane. Dobijeni sirovi ostatak je prečišćen “flash” hromatografijom da se dobije (2S)-1-terc-butil-2-(3-hloro-8-okso-8,9,10,11-tetrahidro-6H-nafto[2,3-c]hromen-9-il)-4(metoksi metil) pirolidin-1,2-dikarboksilat (5.12 g, 61%). Rastvoru (2S)-1-terc-butil-2-(3-hloro-8-okso-8,9,10,11-tetrahidro-6H-nafto[2,3-c]hromen-9-il)-4(metoksimetil)pirolidin-1,2-dikarboksilata (5.11 mg, 9.42 mmol) u smeši toluena (94 mL) i 2-metoksi etanola (0.1 mL) je dodat amonijum acetat (23.5 g, 304 mmol). Reakciona smeša je zagrevana do 110 °C tokom 18 sati, ohlađena do sobne temperature i razblažena sa etil acetatom. Organske supstance su oprane sa vodom i slanim rastvorom, osušene (Na2SO4), i koncentrovane. Sirovi ostatak je prečišćen “flash” hromatografijom da se dobije (2S,4R)-terc-butil 2-(9-hloro-4,5-dihidro-5H-nafto[c,g]hromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilat (1.05g, 21%) i (2S,4S)-terc-butil-2-(9-hloro-4,5-dihidro-6H-nafto[2,3-c]hromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4-(metoksi metil)pirolidin-1-karboksilat (2.0 g, 41%). LCMS-ESI<+>: izračunato za C29H32ClN3O42: 522.0; primećeno [M+1]<+>: 522.2.
(2S,4S)-terc-butil-2-(9-hloro-5H-nafto[c,g]hromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4-(metoksi metil)pirolidin-1-karboksilat.
[0188] Rastvoru (2S,4S)-terc-butil-2-(9-hloro-4,5-dihidro-5H-nafto[c,g]hromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4-(metoksi metil)pirolidin-1-karboksilata (1.99 g, 3.82 mmol) u dihlorometanu (30 mL) je dodat mangan(IV) oksid (10 g, 115 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 18 sati, razblažena sa etil acetatom. Organske supstance su oprane sa vodom i slanim rastvorom, osušene (Na2SO4), i koncentrovane. Sirovi ostatak je prečišćen “flash” hromatografijom da se dobije (2S,4S)-terc-butil-2-(9-hloro-6H-nafto[2,3-c]hromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4-metoksi metil)pirolidin-1-karboksilat (1.05g, 21%) i (2S,4S)-terc-butil-2-(9-hloro-4,5-dihidro-6H-nafto[2,3-c]hromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4-(metoksi metil)pirolidin-1-karboksilat (1.64 g, 82%). LCMS-ESI<+>: izračunato za C29H30ClN3O42: 520.02; primećeno [M+1]<+>: 520.97.
(2S,4S)-terc-butil-4-(metoksi metil)-2-(9-(4,4,5,5-tetrametil,3,2-dioksaborolan-2-il)-5H-nafto[c,g]hromeno[8,9-d]imidazol-2-il)pirolidin-1-karboksilat:
[0189] Degasirana smeša od - (2S,4S)-terc-butil-2-(9-hloro-5H-nafto[c,g]hromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4-(metoksi metil) pirolidin-1-karboksilata (649 mg1.25 mmol), bis(pinakolato)diborona (635 mg, 2.5 mmol), kalijum acetata (368 mg, 3.7 mmol), tris(dibenzilidenaceton)paladijuma (46 mg, 0.05 mmol) i 2-dicikloheksilfosfino-2', 4', 6'-tri-ipropil-1, 1'-bifenila (60 mg, 0.12 mmol) u 1,4-dioksanu (7 mL) je zagrevana do 90 °C tokom 3 sata, ohlađena do sobne temperature i razblažena sa etil acetatom. Organske supstance su oprane sa vodom i slanim rastvorom, osušene (Na2SO4), i koncentrovane. Sirovi ostatak je prečišćen “flash” hromatografijom da se dobije (2S,4S)-terc-butil 4-(metoksi metil)-2-(9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-5H-nafto[c,g]hromeno[8,9-d]imidazol-2-il)pirolidin-1-karboksilat (467 mg, 61%) LCMS-ESI<+>: izračunato za C35H42BN3O6: 611.54; primećeno [M+1]<+>: 612.96.
(2S,4S)-terc-butil 2-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoksi karbonilamino)-3-metilbutanoil)pirolidin-2-il)-1H-imidazol-5-il)-5H-nafto[c,g]hromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4(metoksi metil)pirolidin-1-karboksilat
[0190] Rastvoru (2S,4S)-terc-butil 4-(metoksi metil)-2-(9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-5H-nafto[c,g]hromeno[8,9-d]imidazol-2-il)pirolidin-1-karboksilata (467 mg, 0.76 mmol), metil (S)-1-((S)-2-(5-bromo-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-il)-3-metil-1-oksobutan-2-ilkarbamata (342 mg, 0.92 mmol), tetrakis(trifenilfosfin) paladijuma(0) (44 mg, 0.04 mmol) i dihloro[1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijuma(II) (56 mg, 0.07 mmol) u smeši 1,2-dimetoksi etana (11.0 mL) i dimetilformamida (1.9 mL) je dodat rastvor kalijum karbonata (2M u vodi, 1.15 mL, 2.29 mmol). Dobijena smeša je degasirana i zatim je zagrejana do 85 °C pod argonom tokom 18 sati. Nakon hlađenja do sobne temperature, reakcija je razblažena sa etil acetatom. Organske supstance su oprane sa vodom i slanim rastvorom, osušene (Na2SO4), i koncentrovane. Sirovi ostatak je prečišćen “flash” hromatografijom da se dobije (2S,4S)-terc-butil 2-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoksi karbonilamino)-3-metilbutanoil)pirolidin-2-il)-1H-imidazol-5-il)-5H-nafto[c,g] hromeno [8,9-d]imidazol-2-il)-4-(metoksi metil)pirolidin-1-karboksilat (180 mg, 67%). LCMS-ESI<+>: izračunato za C43H51N7O73777.91; primećeno [M+1]<+>: 778.84.
metil {2-[2-{9-[2-(1-{2-[(metoksi karbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirolidin-2-il)-1H-imidazol-5-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il}-4-(metoksi metil)pirolidin-1-il]-2-okso-1-feniletil}karbamat
[0191] Rastvor (2S,4S)-terc-butil 2-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoksi karbonilamino)-3-metilbutanoil)pirolidin-2-il)-1H-imidazol-5-il)-5H-nafto[c,g]hromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4-(metoksi metil)pirolidin-1-karboksilata (196 mg, 0.25 mmol), etanola (3 mL) i koncentrovane HCl (1 mL) je zagrevan do 60 °C tokom 1 sata. Reakcija je koncentrovana i sirovi materijal je rastvoren u DCM-u (6 mL). Ovaj rastvor je koncentrovan i ovom materijalu je dodat rastvor (R)-2-(metoksi karbonilamino)-2-fenilsirćetne kiseline (69 mg, 0.33 mmol) i COMU (124 mg, 029 mmol) u DMF-u (4 mL). Dobijenom rastvoru je dodat diizopropiletilamin (130 µL, 0.76 mmol). Nakon mešanja tokom 2 sata na sobnoj temperaturi, reakcija je razblažena sa etil acetatom, oprana sa vodom i slanim rastvorom, osušena (Na2SO4), koncentrovana i prečišćena preparativnom HPLC na reverznoj fazi (Gemini, 15 do 45% ACN/H2O 0.1% TFA). Frakcije proizvoda su liofilizirane da se dobije metil {2-[2-{9-[2-(1-{2-[(metoksi karbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirolidin-2-il)-1H-imidazol-5-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il}-4-(metoksimetil)pirolidin-1-il]-2-okso-1-feniletil}karbamat (84 mg, 39%). LCMS-ESI<+>: izračunato za C48H52N8O8: 868.98; primećeno [M+1]<+>: 870.11
Primer LS (Referenca)
[0192]
metil {1-[2-{9-[2-(1-{2-[(metoksi karbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirolidin-2-il)-1H-imidazol-5-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il}-4-(metoksi metil)pirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat
[0193] Rastvor (2S,4S)-terc-butil 2-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoksi karbonilamino)-3-metilbutanoil)pirolidin-2-il)-1H-imidazol-5-il)-5H-nafto[c,g]hromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4-(metoksi metil)pirolidin-1-karboksilata (116 mg, 0.15 mmol), etanola (5 mL) i koncentrovane HCl (1 mL) je zagrevan do 60 °C tokom 1 sata. Reakcija je koncentrovana i sirov materijal rastvoren u DCM-u (10 mL). Ovaj rastvor je koncentrovan i u ovaj materijal je dodat rastvor 2-metoksi karbonilamino-3-metilbuterne kiseline (38 mg, 0.22 mmol) i HATU (79 mg, 0.21 mmol) u DMF-u (1.4 mL). U dobijeni rastvor je dodat diizopropiletilamin (270 µL, 1.5 mmol). Nakon mešanja tokom 18 sati na sobnoj temperaturi, reakcija je razblažena sa etil acetatom, isprana sa vodom i slanim rastvorom, osušena (Na2SO4), koncentrovana i prečišćena pomoću preparativne HPLC reverznih faza (Gemini, 15 do 45% ACN/H2O 0.1% TFA). Frakcije proizvoda su liofilizirane kako bi se dobio metil {1-[2-{9-[2-(1-{2-[(metoksi karbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirolidin-2-il)-1H-imidazol-5-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il}-4-(metoksi metil)pirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat (58 mg, 13%). LCMS-ESI<+>: izračunato za C45H54N8O8: 834.96; primećeno [M+1]<+>: 835.70.
Primer LT (Referenca)
[0194]
1
(2S,4S)-terc-butil-2-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoksi karbonilamino) metilbutanoil)azabiciklo[3.1.0]heksan-3-il)-1H-imidazol-5-il)-5H-nafto[c,g]hromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4-(metoksi metil)pirolidin-1-karboksilat
[0195] U rastvor (2S,4S)-terc-butil 4-(metoksi metil)-2-(9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-5H-nafto[c,g]hromeno[8,9-d]imidazol-2-il)pirolidin-1-karboksilata (557 mg, 0.91 mmol), metil (S)-1-((1S,3S,5S)-3-(5-bromo-1H-imidazol-2-il)-2-azabiciklo[3.1.0]heksan-2-il)-3-metil-1-oksobutan-2-ilkarbamata (350 mg, 0.91 mmol)
2
tetrakis(trifenilfosfin) paladijuma(0) (53 mg, 0.04 mmol) i dihloro[1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijuma(II) (67 mg, 0.07 mmol) u smeši 1,2-dimetoksi etana (11.0 mL) i dimetilformamida (1.9 mL) je dodat rastvor kalijum karbonata (2M u vodi, 1.37 mL, 2.7 mmol). Dobijena smeša je degasirana i potom zagrevana do 85 °C pod argonom tokom 18 sati. Nakon hlađenja do sobne temperature, reakcija je razblažena sa etil acetatom. Organske supstance su oprane sa vodom i slanim rastvorom, osušene (Na2SO4), i koncentrovane. Sirovi ostatak je prečišćen “flash” hromatografijom da se dobije (2S,4S)-tercbutil 2-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoksi karbonilamino)-3-metilbutanoil)azabiciklo[3.1.0]heksan-3-il)-1H-imidazol-5-il)-5H-nafto[c,g]hromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4-(metoksi metil)pirolidin-1-karboksilat (271 mg, 38%). LCMS-ESI<+>: izračunato za C44H51N7O7.
789.92; primećeno [M+1]<+>: 790.76.
metil {2-[2-{9-[2-(2-{2-[(metoksi karbonil)amino]-3-metilbutanoil}-2-azabiciklo[3.1.0]heks-3-il)-1H-imidazol-5-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il}-4-(metoksi metil)pirolidin-1-il]-2-okso-1-feniletil}karbamat:
[0196] Rastvor (2S,4S)-terc-butil 2-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoksi karbonilamino)-3-metilbutanoil)azabiciklo[3.1.0]heksan-3-il)-1H-imidazol-5-il)-5H-nafto[c,g]hromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4-(metoksi metil)pirolidin-1-karboksilata (196 mg, 0.25 mmol), etanola (3 mL) i koncentrovane HCl (1 mL) je zagrevan do 60 °C tokom 1 sata. Reakcija je koncentrovana i sirov materijal rastvoren u DCM-u (6 mL). Ovaj rastvor je koncentrovan i u ovaj materijal je dodat rastvor (R)-2-(metoksi karbonilamino)-2-fenilsirćetne kiseline (69 mg, 0.33 mmol) i COMU (124 mg, 029 mmol) u DMF-u (4 mL). U dobijeni rastvor je dodat diizopropiletilamin (130 µL, 0.76 mmol). Nakon mešanja tokom 2 sata na sobnoj temperaturi, reakcija je razblažena sa etil acetatom, oprana sa vodom i slanim rastvorom, osušena (Na2SO4), koncentrovana i prečišćena preparativnom HPLC na reverznoj fazi (Gemini, 15 do 45% ACN/H2O 0.1% TFA). Frakcije proizvoda su liofilizirane kako bi dale metil {2-[2-{9-[2-(2-{2-[(metoksi karbonil)amino]-3-metilbutanoil}-2-azabiciklo[3.1.0]heks-3-il)-1H-imidazol-5-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il}-4-(metoksi metil)pirolidin-1-il]-2-okso-1-feniletil}karbamat (84 mg, 39%). LCMS-ESI<+>: izračunato za C49H52N8O8: 880.99; primećeno [M+1]<+>: 882.09
Primer LZ (Referenca)
[0197]
�
5-(2-bromo-5-hlorobenziloksi)-3,4-dihidronaftalen-1(2H)-on
[0198] U mešani rastvor 5-hidroksi-1-tetralona (2.0 g, 12.3 mmol) i 1-bromo-2-(bromometil)-4-hlorobenzena (3.6 g, 12.7 mmol) u dimetilformamidu (125 mL) je dodat kalijum karbonat (3.5 g, 25.1 mmol). Reakcija je mešana pod argonom tokom 1 sata zatim razblažena sa etil acetatom (1 L). Organske supstance su oprane tri puta sa vodom i jednom sa slanim rastvorom. Organski sloj je potom osušen sa magnezijum sulfatom, filtriran i koncentrovan. U dobijeno ulje je dodat metanol (100 mL) i suspenzija je mućkana tokom trideset minuta.5-(2-bromo-5-hlorobenziloksi)-3,4-dihidronaftalen-1(2H)-on (4.25 g, 94% prinos) je izolovan filtracijom.
8-hloro-2,3,4,6-tetrahidro-1H-dibenzo[c,h]hromen-1-on
[0199] U sud koji sadrži paladijum(II) pivalat (68 mg, 0.22 mmol), tri(4-fluorofenil)fosfin (70 mg, 0.22 mmol), pivalinsku kiselinu (135 mg, 1.3 mmol) i kalijum karbonat (1.83 g, 13.1 mmol) je dodat rastvor 5-(2-bromo-5-hlorobenziloksi)-3,4-dihidronaftalen-1(2H)-ona (1.61 g, 4.4 mmol) u dimetiacetamidu (23 mL). Sud je ispražnjen i ponovo napunjen sa argonom 5 puta i potom mešan pod argonom na 60 °C tokom 24 sata. Reakcija je sipana direktno na silika gel kolonu i prečišćena “flash” kolonskom hromatografijom (heksani/DCM) da se dobije 8-hloro-2,3,4,6-tetrahidro-1H-dibenzo[c,h]hromen-1-on (1.22 g, 97% prinos) kao prljavo bela čvrsta supstanca.
2-bromo-8-hloro-2,3,4,6-tetrahidro-1H-dibenzo[c,h]hromen-1-on
[0200] U smešu 8-hloro-2,3,4,6-tetrahidro-1H-dibenzo[c,h]hromen-1-ona (2.58 g, 9.1 mmol) u hloroformu (9.1 mL) i etil acetatu (9.1 mL) je dodat bakar(II) bromid (4.65 g, 19.9 mmol). Reakcija je zagrevana do 80 °C tokom 5 sati i potom ohlađena do sobne temperature. Smeša je razblažena sa dihlorometanom i oprana dva puta sa rastvorom u odnosu 5:1 zasićenog vodenog amonijum hlorida i vodenog amonijum hidroksida (∼28%), i oprana jednom sa vodom. Organski sloj je osušen sa magnezijum sulfatom, filtriran i koncentrovan. Sirov materijal je prečišćen “flash” kolonskom hromatografijom (heksani/DCM) kako bi se dobio 2-bromo-8-hloro-2,3,4,6-tetrahidro-1H-dibenzo[c,h]hromen-1-on (2.45 g, 75% prinos).
(2S)-1-terc-butil 2-(8-hloro-1-okso-2,3,4,6-tetrahidro-1H-dibenzo[c,h]hromen-2-il) pirolidin-1,2-dikarboksilat
[0201] U rastvor 2-bromo-8-hloro-2,3,4,6-tetrahidro-1H-dibenzo[c,h]hromen-1-ona (1.05 g, 2.9 mmol) i Boc-Pro-OH (1.75 g, 8.1 mmol) u acetonitrilu (9.0 mL) je dodat diizopropiletilamin (1.5 mL, 8.7 mmol). Rastvor je mešan pod argonom na 50 °C tokom dva sata. Dodatni Boc-Pro-OH (620 mg, 2.9 mmol) i diizopropiletilamin (0.5 mL, 2.9 mmol) su dodati i reakcija je mešana na 50 °C tokom 16 sati. Reakcija je ohlađena do sobne temperature i razblažena sa etil acetatom. Organske supstance su oprane sa vodom i slanim rastvorom, osušene sa magnezijum sulfatom i koncentrovane. Sirov materijal je prečišćen pomoću “flash” kolonske hromatografije i proizvod (2S)-1-terc-butil 2-(8-hloro-1-okso-2,3,4,6-tetrahidro-1H-dibenzo[c,h]hromen-2-il) pirolidin-1,2-dikarboksilat je izolovan kao smeša dijastereomera (0.99 g, 69% prinos).
terc-butil (2S)-2-(9-hloro-3,4,5,7-tetrahidroizohromeno[3',4':5,6]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)pirolidin-1-karboksilat
[0202] U rastvor (2S)-1-terc-butil 2-(8-hloro-1-okso-2,3,4,6-tetrahidro-1H-dibenzo[c,h]hromen-2-il) pirolidin-1,2-dikarboksilata (2.2 g, 4.4 mmol) u toluenu (40 mL) je dodat amonijum acetat (7 g, 91 mmol). Reakciona smeša je energično refluksovana tokom 3 sata, potom ohlađena do sobne temperature i razblažena sa etil acetatom. Organske supstance su oprane sa vodom i slanim rastvorom, osušene sa magnezijum sulfatom i koncentrovane. Sirov materijal je prečišćen pomoću “flash” kolonske hromatografije kako bi se dobio tercbutil (2S)-2-(9-hloro-3,4,5,7-tetrahidroizohromeno[3',4':5,6]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)pirolidin-1-karboksilat (1.13 g, 54% prinos) kao i prečišćen (2S)-1-terc-butil 2-(8-hloro-1-okso-2,3,4,6-tetrahidro-1H-dibenzo[c,h]hromen-2-il) pirolidin-1,2-dikarboksilat (0.8 g, 36%).). LCMS-ESI<+>: izračunato za C27H28N3O3: 477.98; primećeno [M+1]<+>: 478.54.
terc-butil (2S)-2-(9-hloro-3,7-dihidroizohromeno[3',4':5,6]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)pirolidin-1-karboksilat
[0203] U rastvor intermedijera terc-butil (2S)-2-(9-hloro-3,4,5,7-tetrahidroizohromeno[3',4':5,6]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)pirolidin-1-karboksilata (1.43 g, 3.0 mmol) u dihlorometanu (30 mL) je dodat mangan(IV) oksid (15 g, 198 mmol). Smeša je mešana tokom četiri sata na sobnoj temperaturi potom filtrirana kroz Celite. MnO2je temeljno ispran sa dihlorometanom i ukupni filtrat je koncentrovan da se dobije terc-butil (2S)-2-(9-hloro-3,7-dihidroizohromeno[3',4':5,6]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)pirolidin-1-karboksilat (1.37 g, 96% prinos). Ovaj materijal je primenjen bez daljeg prečišćavanja.
terc-butil (2S)-2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-3,7-dihidroizohromeno[3',4':5,6]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidin-1-karboksilat [0204] U rastvor terc-butil (2S)-2-(9-hloro-3,7-dihidroizohromeno[3',4':5,6]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)pirolidin-1-karboksilata (1.4 g, 2.9 mmol) u dioksanu (20 mL) je dodat bis(pinakolato)diboron (1.5 g, 5.9 mmol), tris(dibenzilidenaceton)dipaladijum(0) (110 mg, 0.12 mmol), X-Phos (145 mg, 0.30 mmol) i kalijum acetat (870 mg, 8.9 mmol). Smeša je degasirana sa strujom argona tokom deset minuta. Degasirana reakcija je zagrevana pod argonom do 90 °C tokom 2.5 sata potom ohlađena do sobne temperature i razblažena sa etil acetatom. Organske supstance su oprane sa vodom i slanim rastvorom, osušene sa magnezijum sulfatom i koncentrovane. Sirov materijal je prečišćen pomoću “flash” kolonske hromatografije (DCM/EtOAc) da se dobije terc-butil (2S)-2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-3,7-dihidroizohromeno[3',4':5,6]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidin-1-karboksilat (1.5 g, 90% prinos).
metil [(2S)-3-metil-1-okso-1-{(2S)-2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-3,7-dihidroizohromeno[3',4':5,6]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidin-1-il}butan-2-il]karbamat
[0205] Rastvor terc-butil (2S)-2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-3,7-dihidroizohromeno[3',4':5,6]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidin-1-karboksilata (0.98 g, 1.7 mmol), koncentrovane HCl (2 mL) i etanola (20 mL) je zagrevan do 60 °C tokom 2 sata. Reakcija je koncentrovana i ponovo rastvorena u minimalnoj količini metanola. Jednaka zapremina dihlorometana je dodata i rastvor je ponovo koncentrovan. Dihlorometan je dodat ostatku koji je dobijen i koncentrovan još dva puta. Sirov materijal koji se dobija je rastvoren u dimetilformamidu (17 mL). U ovaj rastvor je dodat (S)-2-(metoksi karbonilamino)-3-metilbutanska kiselina (455 mg, 2.6 mmol), HATU (955 mg, 2.5 mmol) i diizopropiletilamin (3 mL, 17 mmol). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom jednog sata potom razblažena sa etil acetatom. Organske supstance su oprane sa vodom (x2) i slanim rastvorom, osušene sa magnezijum sulfatom i koncentrovane. Rezultujući ostatak je prečišćen pomoću “flash” kolonske hromatografije da se dobije intermedijer metil [(2S)-3-metil-1-okso-1-{(2S)-2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-3,7
dihidroizohromeno[3',4':5,6]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidin-1-il}butan-2-il]karbamat (780 mg, 72% prinos preko 2 koraka).
terc-butil (2R)-2-[5-(2-{(2S)-1-[N-(metoksi karbonil)-L-valil]pirolidin-2-il}-3,7-dihidroizohromeno[3',4':5,6]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]pirolidin-1-karboksilat
[0206] Smeša pentacikličnog intermedijera metil [(2S)-3-metil-1-okso-1-{(2S)-2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-3,7-dihidroizohromeno[3',4':5,6]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidin-1-il}butan-2-il]karbamata (780 mg, 1.3 mmol), (S)-terc-butil 2-(5-bromo-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-karboksilata (450 mg, 1.4 mmol), tetrakis(trifenilfosfin)paladijuma(0) (30 mg, 0.03 mmol), PdCl2(dppf) (60 mg, 0.08 mmol), 2M vodenog kalijum karbonata (1.9 mL, 3.9 mmol), dimetoksi etana (10 mL) i dimetilformamida (2 mL) je degasirana sa argonom tokom 15 minuta. Reakcija je potom zagrevana do 85 °C tokom 3 sata. Nakon završetka, reakcija je ohlađena do sobne temperature, razblažena sa etil acetatom i filtrirana kroz Celite. Filtrat je opran sa vodom i slanim rastvorom, osušen (MgSO4) i koncentrovan. Rezultujući sirov materijal je prečišćen pomoću “flash” kolonske hromatografije (EtOAc/MeOH) da se dobije intermedijer terc-butil (2R)-2-[5-(2-{(2S)-1-[N-(metoksi karbonil)-L-valil]pirolidin-2-il}-3,7-dihidroizohromeno[3',4':5,6]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]pirolidin-1-karboksilat (390 mg, 43% prinos).
metil {(2S)-1-[(2R)-2-(5-{2-[(2S)-1-{(2S)-2-[(metoksi karbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirolidin-2-il]-3,7-dihidroizohromeno[3',4':5,6]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat
[0207] Smeša intermedijera terc-butil (2R)-2-[5-(2-{(2S)-1-[N-(metoksi karbonil)-L-valil]pirolidin-2-il}-3,7-dihidroizohromeno[3',4':5,6]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]pirolidin-1-karboksilata (390 mg, 0.53 mmol), koncentrovane HCl (2 mL) i etanola (10 mL) je zagrevana do 60 °C tokom 2 sata. Reakcija je koncentrovana i ponovo rastvorena u minimalnoj količini metanola. Jednaka zapremina dihlorometana je dodata i rastvor je ponovo koncentrovan. Dihlorometan je dodat rezultujućem ostatku i koncentrovan još dva puta. Jedna polovina sirovog materijala (∼0.27 mmol) je rastvorena u dimetilformamidu (2.5 mL). U ovaj rastvor su dodati (S)-2-(metoksi karbonilamino)-3-metilbutanska kiselina (66 mg, 0.38 mmol), HATU (140 mg, 0.37 mmol) i diizopropiletilamin (0.48 mL, 2.7 mmol). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 sata, i potom razblažena sa acetonitrilom (2 mL) i metanolom (2 mL). U ovaj rastvor je dodato deset kapi 5M vodenog NaOH rastvora i mešanje je nastavljeno tokom 30 minuta. Reakcija je razblažena sa etil acetatom i organski sloj je opran sa vodom i slanim rastvorom. Kombinovani vodeni ispirci su ekstrahovani tri puta sa etil acetatom, i kombinovani organski slojevi su osušeni (MgSO4) i koncentrovani. Sirov materijal je prečišćen pomoću HPLC na reverznoj fazi (Gemini, 15 do 45% ACN/H2O 0.1% TFA) da se dobije metil {(2S)-1-[(2R)-2-(5-{2-[(2S)-1-{(2S)-2-[(metoksi karbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirolidin-2-il]-3,7-dihidroizohromeno[3',4':5,6]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat (140 mg, 67% prinos preko 2 koraka). LCMS-ESI<+>: izračunato za C43H50N8O7: 790.91; primećeno [M+1]<+>: 791.71.
Primer MA (Referenca)
[0208]
[0209] Ovo jedinjenje je napravljeno na analogni način u odnosu na metil {(2S)-1-[(2R)-2-(5-{2-[(2S)-1-{(2S)-2-[(metoksi karbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirolidin-2-il]-3,7-dihidroizohromeno[3',4':5,6]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat, zamenjujući (R)-2-(metoksi karbonilamino)-2-fenilsirćetnu kiselinu za (S)-2-(metoksi karbonilamino)-3-metilbutansku kiselinu i zamenjujući COMU za HATU u konačnom koraku vezivanja amida. LCMS-ESI<+>: izračunato za C46H48N8O7: 824.92; primećeno [M+1]<+>: 825.72.
Primer MB (Referenca)
[0210]
terc-butil (2S)-2-[9-(2-{(2R)-1-[N-(metoksi karbonil)-L-valil]pirolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-3,7-dihidroizohromeno[3',4': 5,6] nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidin-1-karboksilat [0211] Smeša terc-butil (2S)-2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-3,7-dihidroizohromeno[3',4':5,6]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidin-1-karboksilata (450 mg, 0.79 mmol), metil (S)-1-((S)-2-(5-bromo-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-il)-3-metil-1-oksobutan-2-ilkarbamata (325 mg, 0.87 mmol), tetrakis(trifenilfosfin)paladijuma(0) (30 mg, 0.02 mmol), PdCl2(dppf) (35 mg, 0.05 mmol), 2M vodenog kalijum karbonata (1.2 mL, 2.4 mmol), dimetoksi etana (6.8 mL) i dimetilformamida (1.2 mL) je degasirana sa argonom tokom 15 minuta. Reakcija je potom zagrevana do 85 °C tokom 2.5 sata. Nakon završetka, reakcija je ohlađena do sobne temperature, razblažena sa etil acetatom i filtrirana kroz Celite. Filtrat je opran sa vodom i slanim rastvorom, osušen (MgSO4) i koncentrovan. Rezultujući sirovi materijal je prečišćen pomoću “flash” kolonske hromatografije (EtOAc/MeOH) kako bi se dobio terc-butil (2S)-2-[9-(2-{(2R)-1-[N-(metoksi karbonil)-L-valil]pirolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-3,7-dihidroizohromeno[3',4':5,6]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidin-1-karboksilat (270 mg, 46% prinos).
metil {(2S)-1-[(2R)-2-(5-{2-[(2S)-1-{(2R)-2-[(metoksi karbonil)amino]-2-fenilacetil}pirolidin-2-il]-3,7-dihidroizohromeno[3',4':5,6]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat:
[0212] Smeša terc-butil (2S)-2-[9-(2-{(2R)-1-[N-(metoksi karbonil)-L-valil]pirolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-3,7-dihidroizohromeno[3',4':5,6]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidin-1-karboksilata (270 mg, 0.37 mmol), koncentrovane HCl (1.5 mL) i etanola (8 mL) je zagrevana do 60 °C tokom 1 sata. Reakcija je koncentrovana i ponovo rastvorena u minimalnoj količini metanola. Jednaka zapremina dihlorometana je dodata i rastvor je ponovo koncentrovan. Dihlorometan je dodat u rezultujući ostatak i koncentrovan je još dva puta. Sirov materijal je rastvoren u smeši dihlorometan/dimetilformamid (3.8 mL) u odnosu 5:1. Ovom rastvoru su dodati (R)-2-(metoksi karbonilamino)-2-fenilsirćetna kiselina (96 mg, 0.46 mmol), COMU (190 mg, 0.44 mmol) i diizopropiletilamin (0.20 mL, 1.1 mmol). Reakcija je mešana na 0 °C tokom 30 minuta potom zagrevana do sobne temperature. Nakon završetka, reakcija je razblažena sa acetonitrilom (2 mL) i metanolom (2 mL). U ovaj rastvor je dodato deset kapi 5M vodenog NaOH rastvora i mešanje je nastavljeno tokom 30 minuta. Reakcija je razblažena sa etil acetatom i organski sloj je opran sa vodom i slanim rastvorom. Kombinovana vodena ispiranja su ekstrahovana tri puta sa etil acetatom, i kombinovani organski slojevi su osušeni (MgSO4) i koncentrovani. Sirov materijal je prečišćen pomoću HPLC na reverznoj fazi (Gemini, 15 do 45% ACN/H2O 0.1% TFA) da se dobije metil {(2S)-1-[(2R)-2-(5-{2-[(2S)-1-{(2R)-2-[(metoksi karbonil)amino]-2-fenilacetil}pirolidin-2-il]-3,7-dihidroizohromeno[3',4':5,6]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat (155 mg, 51% prinos preko 2 koraka). LCMS-ESI<+>: izračunato za C46H48N8O7: 824.92; primećeno [M+1]<+>: 825.67.
Primer MC (Referenca)
[0213]
1
dimetil (2S,2'S)-1,1'-((2S,2'S)-2,2'1-pirolidin-2-il)-5H-nafto[c,g]hromeno[8,9-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-il))bis(3-metil-1-oksobutan-2,1-diil)dikarbamat [0214] Ovo jedinjenje je napravljeno na analogni način u odnosu na metil {(2S)-1-[(2R)-2-(5-{2-[(2S)-1-{(2S)-2-[(metoksi karbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirolidin-2-il]-3,7-dihidroizohromeno[3',4':5,6]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat, zamenjujući 7-hidroksi-1-tetralon za 5-hidroksi-1-tetralon u prvom koraku niza. Sve reakcije u sintezi su dale slične prinose proizvoda kao u sintezi metil {(2S)-1-[(2R)-2-(5-{2-[(2S)-1-{(2S)-2-[(metoksi karbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirolidin-2-il]-3,7-dihidroizohromeno[3',4':5,6]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamata. LCMS-ESI<+>: izračunato za C43H50N8O7: 790.91; primećeno [M+1]<+>: 791.6.
2
Primer MD (Referenca)
[0215]
[0216] Ovo jedinjenje je napravljeno na analogni način u odnosu na dimetil (2S,2'S)-1,1'-((2S,2'S)-2,2'l-pirolidin-2-il)-5H-nafto[c,g]hromeno[8,9-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-il))bis(3-metil-1-oksobutan-2,1-diil)dikarbamat, zamenjujući (R)-2-(metoksi karbonilamino)-2-fenilsirćetnu kiselinu za (S)-2-(metoksi karbonilamino)-3-metilbutansku kiselinu i zamenjujući COMU za HATU u konačnom koraku vezivanja amida. LCMS-ESI<+>: izračunato za C46H48N8O7: 824.92; primećeno [M+1]<+>: 825.67.
Primer ME (Referenca)
[0217]
dimetil (2S,2'S)-1,1'-((2S,2'S)-2,2'l-pirolidin-2-il)-7H-dihidro-nafto[c,g]hromeno[8,9-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-il))bis(3-metil-1-oksobutan-2,1-diil)dikarbamat
[0218] Ovo jedinjenje je napravljeno na analogni način u odnosu na dimetil (2S,2'S)-1,1'-((2S,2'S)-2,2'1-pirolidin-2-il)-5H-nafto[c,g]hromeno[8,9-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-il))bis(3-metil-1-oksobutan-2,1-diil)dikarbamat, izostavljanjem oksidacije terc-
4
butil 2-(9-hloro-1,4,5,11-tetrahidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)pirolidin-1-karboksilata sa MnO2. LCMS-ESI<+>: izračunato za C43H52N8O7: 792.40; primećeno [M+1]<+>: 793.69.
Primer MF (Referenca)
[0219]
metil [1-(2-{5-[2-(1-{[(metoksi karbonil)amino]-3-metil-1-oksobutan-2-il}pirolidin-2-il)-1,4,5,11-tetrahidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il]-1H-imidazol-2-il}pirolidin-1-il)-fenil-1-oksoacet-2-il]karbamat
[0220] Ovo jedinjenje je napravljeno na analogni način u odnosu na dimetil (2S,2'S)-1,1'-((2S,2'S)-2,2'1-pirolidin-2-il)-7H-dihidro-nafto[c,g]hromeno[8,9-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-il))bis(3-metil-1-oksobutan-2,1-diil)dikarbamat, zamenjujući (R)-2-(metoksi karbonilamino)-2-fenilsirćetnu kiselinu za (S)-2-(metoksi karbonilamino)-3-metilbutansku kiselinu i zamenjujući COMU za HATU u konačnom koraku vezivanja amida. LCMS-ESI+: izračunato za C46H50N8O7: 826.94; primećeno [M+1]<+>: 827.71.
Primer MG (Referenca)
[0221]
[0222] Ovo jedinjenje je napravljeno na analogni način u odnosu na metil {(2S)-1-[(2R)-2-(5-{2-[(2S)-1-{(2R)-2-[(metoksi-karbonil)amino]-2-fenilacetil}pirolidin-2-il]-3,7-dihidroizohromeno[3',4':5,6]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)piroldin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat, zamenjujući terc-butil (2S)-2-[9-(2-{(2R)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]pirolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-3,4,5,11-tetrahidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidin-1-karboksilat za terc-butil (2S)-2-[9-(2-{(2R)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]pirolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-3,7-dihidroizohromeno[3',4':5,6]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidin-1-karboksilat. LCMS-ESI<+>: izračunato za C46H50N8O7: 826.94; primećeno [M+1]<+>: 827.64.
Primer MM (Referenca)
[0223]
(2S,4S)-metil {4-(metoksimetil)-2-[(9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksa borolan-2-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)pirolidin-1il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat
[0224] Rastvor (2S,4S)-terc-butil 4-(metoksimetil)-2-(9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)- 1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]-imidazol-2-il)pirolidin-1-karboksilata (424 mg, 0.69 mmol), etanola (6 mL) i koncentrovane HCl (2 mL) je zagrevan do 60 °C tokom 1 sata. Reakcija je koncentrovana i sirov materijal rastvoren u DCM-u (10 mL). Ovaj rastvor je koncentrovan i u ovaj materijal je dodat rastvor 2-metoksi karbonilamino-3-metilbuterne kiseline (152 mg, 0.86 mmol) i HATU (303 mg, 0.79 mmol) u DMF-u (6 mL). U rezultujući rastvor je dodat diizopropiletilamin (360 µL, 2.08 mmol). Nakon mešanja tokom 2 sata na sobnoj temperaturi, reakcija je razblažena sa etil acetatom, oprana sa 5% NaHCO3rastvorom, vodom i slanim rastvorom, osušena (Na2SO4), koncentrovana i osušena pod vakuumom kako bi se dobio (2S,4S)-metil {4-(metoksimetil)-2-[(9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)pirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat.
terc-butil(2S)-2-[5-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-4-metilpirolidin-2-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]pirolidin-1-karboksilat
[0225] U rastvor (2S, 4S)-metil{4-(metoksimetil)-2-[(9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,11-dihidroizo hromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)pirolidin-1il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamata (0.69 mmol), (S)-terc-butil 2-(5-bromo-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-karboksilata (220 mg, 0.69 mmol), tetrakis(trifenilfosfin) paladijuma(0) (24 mg, 0.02 mmol) i dihloro[1,1'-bis(difenilfosfino) ferocen]paladijuma(II) (31 mg, 0.04 mmol) u smeši 1,2-dimetoksi etana (6.0 mL) i dimetilformamida (1.0 mL) je dodat rastvor kalijum karbonata (2M u vodi, 1.04 mL, 2.0 mmol). Smeša koja se dobija kao rezultat je degasirana i potom zagrevana do 85 °C pod argonom tokom 18 sati. Nakon hlađenja do sobne temperature, reakcija je razblažena sa etil acetatom. Organske supstance su oprane sa vodom i slanim rastvorom, osušene (Na2SO4), i koncentrovane. Sirov ostatak je prečišćen “flash” hromatografijom da se dobije (terc-butil (2S)-2-[5-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-4-metilpirolidin-2-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]pirolidin-1-karboksilat (145 mg, 27%).
metil{(1R)-2-[(2S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(metoksikarboni|)amino]-3-metilbutanoil}-4-(metoksimetil)pirolidin-2-il]-1,11-dihidroizo hromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-il]-2-okso-1-feniletil}karbamat
[0226] Rastvor terc-butil (2S)-2-[5-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoksi karbonil)-L-valil]-4-metilpirolidin-2-il}-1,11-dihidroizohromeno [4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1Himidazol-2-il]pirolidin-1-karboksilata (145 mg, 0.18 mmol), etanola (3 mL) i koncentrovane HCl (1 mL) je zagrevan do 60 °C tokom 1 sata. Reakcija je koncentrovana i sirov materijal rastvoren u DCM-u (6 mL). Ovaj rastvor je koncentrovan i u ovaj materijal je dodat rastvor (R)-2-(metoksikarbonilamino)-2-fenilsirćetne kiseline (51 mg, 0.24 mmol) i COMU (92 mg, 021 mmol) u DMF-u (3 mL). U rezultujući rastvor je dodat diizopropiletilamin (100 µL, 0.56 mmol). Nakon mešanja tokom 2 sata na sobnoj temperaturi, reakcija je razblažena sa etil acetatom, oprana sa vodom i slanim rastvorom, osušena (Na2SO4), koncentrovana i prečišćena pomoću preparativne HPLC na reverznoj fazi (Gemini, 15 do 43% ACN/H2O 0.1% TFA). Frakcije proizvoda su liofilizirane kako bi se dobio metil {(1R)-2-[(2S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4-(metoksimetil)pirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno [4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-il]-2-okso-1-feniletil}karbamat (68 mg, 39%). MS (ESI) m/z 870 [M H]<+>. 1H NMR (400 MHz, dmso) δ 8.71 (s, 1H), 8.22 (d, 1H, J = 8 Hz), 8.09 (m, 1H), 7.88 - 7.63 (m, 6H), 7.36 -7.29 (m, 6H), 5.41 (d, 1H, J = 8.4 Hz), 5.30 - 5.24 (m, 2H), 5.14 - 5.10 (m, 1H), 4.13 -3.09 (m, 15H), 2.47 - 1.80 (m, 8H), 0.80 (dd, 6H, J = 6.4 Hz, J = 23 Hz).
Primer MN
[0227]
terc-butil(2S,4S)-2-[9-(2-{(2S4S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-4-metil pirolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-3,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-(metoksi metil)pirolidin-1-karboksilat
[0228] U rastvor (2S,4S)-terc-butil 4-(metoksimetil)-2-(9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto [1,2-d]imidazol-2-il)pirolidin-1-karboksilata (438 mg, 0.72 mmol), metil (S)-1-((2S,4S)-2-(5-bromo-1H-imidazol-2-il)-4-metilpirolidin-1-il)-3-metil-1-oksobutan-2-ilkarbamata (276 mg, 0.72 mmol), tetrakis(trifenilfosfin) paladijuma(0) (41 mg, 0.04 mmol) i dihloro[1,1'-bis(difenilfosfino) ferocen]paladijuma(II) (52 mg, 0.07 mmol) u smeši 1,2-dimetoksi etana (8.6 mL) i dimetilformamida (1.5 mL) je dodat rastvor kalijum karbonata (2M u vodi, 1.07 mL, 2.15 mmol). Smeša koja je dobijena kao rezultat je degasirana i potom zagrevana do 85 °C pod argonom tokom 18 sati. Nakon hlađenja do sobne temperature, reakcija je razblažena sa etil acetatom. Organske supstance su oprane sa vodom i slanim rastvorom, osušene (Na2SO4), i koncentrovane. Sirovi ostatak je prečišćen “flash” hromatografijom da bi se dobio terc-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S4S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-4-metilpirolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-3,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilat (182 mg, 32%).
metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2R)-2-[(metoksikarbonil)amino]-2-fenilacetil}-4-(metoksimetil)pirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno [4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-metilpirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat
[0229] Rastvor terc-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S4S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-4-metilpirolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-3,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilata (182 mg, 0.18 mmol), etanola (3 mL) i koncentrovane HCl (1 mL) je zagrevan do 60 °C tokom 1 sata. Reakcija je koncentrovana i sirov materijal rastvoren u DCM-u (6 mL). Ovaj rastvor je koncentrovan i u ovaj materijal je dodat rastvor (R)-2-(metoksikarbonilamino)-2-fenilsirćetne kiseline (47 mg, 0.23 mmol) i COMU (85 mg, 0.2 mmol) u DMF-u (3 mL). U rezultujući rastvor je dodat diizopropiletilamin (90 µL, 0.52 mmol). Nakon mešanja tokom 2 stata na sobnoj temperaturi, reakcija je razblažena sa etil acetatom, oprana sa vodom i slanim rastvorom, osušena (Na2SO4), koncentrovana i prečišćena pomoću preparativne HPLC na reverznoj fazi (Gemini, 15 do 49% ACN/H2O 0.1% TFA). Frakcije proizvoda su liofilizirane da se dobije metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2R)-2-[(metoksikarbonil)amino]-2-fenilacetil}-4-(metoksimetil)pirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno [4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-metilpirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat (32 mg, 39%). MS (ESI) m/z 884 [M H]<+>.
1H NMR (400 MHz, dmso) δ 8.70 (s, 1H), 8.21 (d, 1H, J = 8 Hz), 8.08 (s, 1H), 7.90 - 7.64 (m, 6H), 7.34 - 7.31 (m, 3H), 7.64 (d, 1H, J = 8.4 Hz), 5.47 (d, 1H, J = 7.6 Hz), 5.28 - 5.25 (m, 3H), 5.05 - 5.01 (m, 1H), 4.19 - 4.04 (m, 3H), 3.67 - 3.15 (m, 15H), 2.51 -2.46 (m, 4H), 1.95 - 1.92 (m, 2H), 1.82 - 1.76 (m, 1H), 1.10 (d, 3H, J = 6 Hz), 0.75 (dd, 6H, J = 6.8 Hz, J = 14 Hz).
1
Primer MO
[0230]
metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4-metoksimetilpirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-metilpirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat
[0231] U rastvor metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-4-(metoksimetil)pirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metil)pirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamata (57 mg, 0.08 mmol), 2-metoksi karbonilamino-3-metilbuterne kiseline (19 mg, 0.1 mmol), HATU (303 mg, 0.79 mmol) u DMF-u (1 mL) je dodat diizopropiletilamin (43 µL, 0.24 mmol). Nakon mešanja tokom 2 sata na sobnoj temperaturi, reakcija je razblažena sa etil acetatom, oprana sa 5% NaHCO3rastvorom, vodom i slanim rastvorom, osušena (Na2SO4), koncentrovana i prečišćena pomoću preparativne HPLC na reverznoj fazi (Gemini, 15 do 43% ACN/H2O 0.1% TFA). Frakcije proizvoda su liofilizirane kako bi se dobio metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metil butanoil}-4-metoksimetilpirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-metilpirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat. (13 mg, 19%). MS (ESI) m/z 850 [M H]<+>.
2
1H NMR (400 MHz, dmso) δ 8.66 (s, 1H), 8.28 - 8.13 (m, 1H), 8.12 - 7.99 (m, 1H), 7.90 -7.75 (m, 3H), 7.73 - 7.65 (m, 1H), 7.63 - 7.57 (m, 1H), 7.34 - 7.19 (m, 2H), 5.30 - 5.24 (m, 2H), 5.21 - 4.95 (m, 2H), 4.33 - 3.93 (m, 6H), 3.23 -3.58 (m, 12H), 2.76 - 2.59 (m, 2H), 2.02 - 1.73 (m, 6H), 1.12 - 1.07 (m, 3H), 0.86 - 0.68 (m, 12H).
Primer MP
[0232]
terc-butil(2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-5-metil pirolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-3,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-(metoksi metil)pirolidin-1-karboksilat
[0233] U rastvor (2S,4S)-terc-butil 4-(metoksi metil)-2-(9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)pirolidin-1-karboksilata (217 mg, 0.35 mmol), metil (S)-1-((2S,5S)-2-(5-bromo-1H-imidazol-2-il)-5metilpirolidin-1-il)-3-metil-1-oksobutan-2-ilkarbamata (170 mg, 0.39 mmol), tetrakis(trifenilfosfin) paladijuma(0) (21 mg, 0.02 mmol) i dihloro[1,1'-bis(difenilfosfino) ferocen]paladijuma(II) (26 mg, 0.04 mmol) u smeši 1,2-dimetoksi etana (4.3 mL) i dimetilformamida (0.75 mL) je dodat rastvor kalijum karbonata (2M u vodi, 0.53 mL, 1.06 mmol). Rezultujuća smeša je degasirana i potom zagrevana do 85 °C pod argonom tokom 18 sati. Nakon hlađenja do sobne temperature, reakcija je razblažena sa etil acetatom. Organske supstance su oprane sa vodom i slanim rastvorom, osušene (Na2SO4), i koncentrovane. Sirov ostatak je prečišćen “flash” hromatografijom da se dobije terc-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-3,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-(metoksi metil)pirolidin-1-karboksilat (110 mg, 39%).
metil{(2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(metoksi karbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4-metoksi metilpirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno [4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat
[0234] Rastvor terc-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-3,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-(metoksi metil)pirolidin-1-karboksilata (108 mg, 0.14 mmol), etanola (2 mL) i koncentrovane HCl (0.7 mL) je zagrevan do 60 °C tokom 1 sata. Reakcija je koncentrovana i sirov materijal rastvoren u DCM-u (10 mL). Ovaj rastvor je koncentrovan i u ovaj materijal je dodat rastvor 2-metoksi karbonilamino-3-metilbuterne kiseline (31 mg, 0.18 mmol) i HATU (60 mg, 0.16 mmol) u DMF-u (2 mL). U rezultujući rastvor je dodat diizopropiletilamin (70 µL, 0.41 mmol). Nakon mešanja tokom 2 sata na sobnoj temperaturi, reakcija je razblažena sa etil acetatom, oprana sa 5% NaHCO3rastvorom, vodom i slanim rastvorom, osušena (Na2SO4), Nakon mešanja tokom 2 sata na sobnoj temperaturi, reakcija je razblažena sa etil acetatom, oprana sa 5% NaHCO3rastvorom, vodom i slanim rastvorom, osušena (Na2SO4), koncentrovana i prečišćena pomoću preparativne HPLC reverznih faza (Gemini, 15 do 43% ACN/H2O 0.1% TFA). Frakcije proizvoda su liofilizirane kako bi se dobio metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4-metoksi metilpirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat (52 mg, 45%). MS (ESI) m/z 850 [M H]<+>.
4
1H NMR (400 MHz, dmso) δ 8.69 (s, 1H), 8.18 (d, 1H, J = 7.6 Hz), 7.99 - 7.86 (m, 4H), 7.72 (s, 1H), 7.64 (d, 1H, J = 8.8 Hz), 7.51 (d, 1H, J = 8 Hz), 7.23 (d, 1H, J = 8.4 Hz), 5.29 (s, 2H), 5.22 - 5.18 (m, 1H), 5.01 - 4.70 (m, 1H), 4.64 - 4.61 (m, 1H), 4.21-4.17 (m, 1H), 4.09-4.05 (m, 1H), 3.92 - 3.88 (m, 1H), 3.59 - 3.08 (m, 14H), 2.67 - 1.83 (m, 7H), 1.43 (d, 3H, J = 6.4 Hz), 0..91-0.71 (m, 12H).
Primer MQ (Referenca)
[0235]
(2S,4R)-terc-butil-4-(metoksimetil)-2-(9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)pirolidin-1-karboksilat [0236] Degasirana smeša -(2S,4R)-terc-butil-2-(9-hloro-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilata (335 mg, 0.64 mmol), bis(pinakolato)diborona (246 mg, 0.96 mmol), kalijum acetata (190 mg, 1.9 mmol), tris(dibenzilidenaceton) paladijuma (24 mg, 0.02 mmol) i 2dicikloheksilfosfino-2',4',6'-tri-i-propil-1,1'-bifenila (31 mg, 0.06 mmol) u 1,4-dioksanu (3.3 mL) je zagrevana do 90 °C tokom 3 sata, ohlađena do sobne temperature i razblažena sa etil acetatom. Organske supstance su oprane sa vodom i slanim rastvorom, osušene (Na2SO4), i koncentrovane. Sirovi ostatak je prečišćen “flash” hromatografijom kako bi se dobio (2S,4R)-terc-butil 4-(metoksimetil)-2-(9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol -2-il)pirolidin-1-karboksilat (379 mg, 96%).
(2S,4R)-terc-butil2-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoksi karbonilamino)-3-metil butanoil)pirolidin-2-il)-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4(metoksi metil)pirolidin-1-karboksilat.
[0237] U rastvor (2S,4R)-terc-butil 4-(metoksi metil)-2-(9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)pirolidin-1-karboksilata (299 mg, 0.49 mmol), metil (S)-1-((S)-2-(5-bromo-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-il)-3-metil-1-oksobutan-2-ilkarbamata (217 mg, 0.58 mmol), tetrakis(trifenilfosfin) paladijuma(0) (28 mg, 0.02 mmol) i dihloro[1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijuma(II) (35 mg, 0.04 mmol) u smeši 1,2-dimetoksi etana (4.3 mL) i dimetilformamida (0.75 mL) je dodat rastvor kalijum karbonata (2M u vodi, 0.73 mL, 1.46 mmol). Rezultujuća smeša je degasirana i potom zagrevana do 85 °C pod argonom tokom 18 sati. Nakon hlađenja do sobne temperature, reakcija je razblažena sa etil acetatom. Organske supstance su oprane sa vodom i slanim rastvorom, osušene (Na2SO4), i koncentrovane. Sirov ostatak je prečišćen “flash” hromatografijom da se dobije (2S,4R)-terc-butil 2-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoksi karbonilamino)-3-metilbutanoil)pirolidin-2-il)-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoksi metil)pirolidin-1-karboksilat (170 mg, 45%).
metil{(1R)-2-[(2S,4R)-2-(9-{2-[(2S)-1-{(2S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirolidin-2-il)-1H-imidazol-5-il]-1,11-dihidroizohromeno [4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il}-4-(metoksimetil)pirolidin-1-il]-2-oksofeniletil}karbamat
[0238] Rastvor (2S,4S)-terc-butil 2-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoksi karbonilamino)-3-metilbutanoil)pirolidin-2-il)-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoksi metil)pirolidin-1-karboksilata (170 mg, 0.22 mmol), etanola (3 mL) i koncentrovane HCl (1 mL) je zagrevan do 60 °C tokom 1 sata. Reakcija je koncentrovana i sirov materijal rastvoren u DCM-u (6 mL). Ovaj rastvor je koncentrovan i u ovaj materijal je dodat rastvor (R)-2-(metoksi karbonilamino)-2-fenilsirćetne kiseline (59 mg, 0.28 mmol) i COMU (108 mg, 025 mmol) u DMF-u (3 mL). U rezultujući rastvor je dodat diizopropiletilamin (110 µL, 0.66 mmol). Nakon mešanja tokom 2 sata na sobnoj temperaturi, reakcija je razblažena sa etil acetatom, oprana sa vodom i slanim rastvorom, osušena (Na2SO4), koncentrovana i prečišćena pomoću preparativne HPLC na reverznoj fazi (Gemini, 15 do 44% ACN/H2O 0.1% TFA). Frakcije proizvoda su liofilizirane da se dobije metil {(1R)-2-[(2S,4R)-2-(9-{2-[(2S)-1-{(2S)-2-[(metoksi karbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirolidin-2-il)-1H-imidazol-5-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]-nafto[1,2-d]imidazol-2-il}-(metoksi metil)pirolidin-1-il]-2-okso-feniletil}karbamat (67 mg, 35%). MS (ESI) m/z 870 [M H]<+>.1H NMR (400 MHz, dmso) δ 8.71 (s, 1H), 8.20 (d, 1H, J = 8.4 Hz), 8.01 (m, 1H), 7.91 - 7.64 (m, 6H), 7.38 - 7.28 (m, 6H), 6.85 (s, 1H), 5.51 (d, 1H, J = 7.2 Hz), 5.39 - 5.29 (m, 3H), 5.13 - 5.09 (m, 1H), 4.11 -3.04 (m, 15H), 2.77 - 1.98 (m, 8H), 0.79 (dd, 6H, J = 6.8 Hz, J = 12.8 Hz).
Primer MR (Referenca)
[0239]
(2S,4S)-terc-butil4-(metoksimetil)-2-(9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-4,5-dihidro-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)pirolidin-1-karboksilat
[0240] Degasirana smeša (2S,4S)-terc-butil 2-(9-hloro-4,5-dihidro-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilata (322 mg, 0.61 mmol), bis(pinakolato) diborona (235 mg, 0.92 mmol), kalijum acetata (182 mg, 1.9 mmol), tris(dibenzilidenaceton)paladijuma (23 mg, 0.02 mmol) i 2-dicikloheksilfosfino-2',4',6'-tri-i-propil-1,1'-bifenila (29 mg, 0.06 mmol) u 1,4-dioksanu (3.3 mL) ja zagrevana do 90 °C tokom 3 sata, ohlađena do sobne temperature i razblažena sa etil acetatom. Organske supstance su oprane sa vodom i slanim rastvorom, osušene (Na2SO4), i koncentrovane. Sirovi ostatak je prečišćen “flash” hromatografijom da se dobije (2S,4S)-tercbutil 4-(metoksimetil)-2-(9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-4,5-dihidro-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)pirolidin-1-karboksilat (267 mg, 70%).
(2S,4S)-terc-butil2-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoksikarbonilamino)-3-metilbutanoil)pirolidin-2-il)-1H-imidazol-5-il-4,5-dihidro-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoksi metil)pirolidin-1-karboksilat
[0241] U rastvor (2S,4S)-terc-butil 4-(metoksi metil)-2-(9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-4,5-dihidro-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)pirolidin-1-karboksilata (267 mg, 0.52 mmol), metil (S)-1-((S)-2-(5-bromo-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-il)-3-metil-1-oksobutan-2-ilkarbamata (195 mg, 0.52 mmol), tetrakis (trifenilfosfin) paladijuma(0) (25 mg, 0.02 mmol) i dihloro[1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen] paladijuma(II) (32 mg, 0.04 mmol) u smeši 1,2-dimetoksi etana (4.3 mL) i dimetilformamida (0.75 mL) je dodat rastvor kalijum karbonata (2M u vodi, 0.65 mL, 1.3 mmol). Rezultirajuća smeša je degasirana i potom zagrevana do 85 °C pod argonom tokom 18 sati. Nakon hlađenja do sobne temperature, reakcija je razblažena sa etil acetatom. Organske supstance su oprane sa vodom i slanim rastvorom, osušene (Na2SO4), i koncentrovane. Sirovi ostatak je prečišćen “flash” hromatografijom da se dobije (2S,4S)-terc-butil 2-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoksi karbonilamino)-3-metilbutanoil)pirolidin-2-il)-1H-imidazol-5-il-4,5-dihidro-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoksi metil)pirolidin-1-karboksilat (75 mg, 22%).
metil{(1R)-2-[(2S,4S)-2-(9-{2-[(2S)-1-{(2S)-2-[(metoksi karbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirolidin-2-il)-1H-imidazol-5-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]-4,5-
1
dihidro-nafto[1,2-d]imidazol-2-il}-(metoksi metil)pirolidin-1-il]-2-okso-1-feniletil}karbamat
[0242] Rastvor (2S,4S)-terc-butil 2-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoksi karbonilamino)-3-metilbutanoil)pirolidin-2-il)-1H-imidazol-5-il-4,5-dihidro-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoksi metil)pirolidin-1-karboksilata (75 mg, 0.09 mmol), etanola (2 mL) i koncentrovane HCl (0.6 mL) je zagrevan do 60 °C tokom 1 sata. Reakcija je koncentrovana i sirov materijal rastvoren u DCM-u (6 mL). Ovaj rastvor je koncentrovan i u ovaj materijal je dodat rastvor (R)-2-(metoksi karbonilamino)-2-fenilsirćetne kiseline (26 mg, 0.13 mmol) i COMU (47 mg, 0.11 mmol) u DMF-u (2 mL). U rezultujući rastvor je dodat diizopropiletilamin (50 µL, 0.29 mmol). Nakon mešanja tokom 2 sata na sobnoj temperaturi, reakcija je razblažena sa etil acetatom, oprana sa vodom i slanim rastvorom, osušena (Na2SO4), koncentrovana i prečišćena pomoću preparativne HPLC na reverznoj fazi (Gemini, 15 do 44% ACN/H2O 0.1% TFA). Frakcije proizvoda su liofilizirane da se dobije metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(9-{2-[(2S)-1-{(2S)-2-[(metoksi karbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirolidin-2-il)-1H-imidazol-5-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]-4,5-dihidro-nafto[1,2-d]imidazol-2-il}-4-(metoksi metil)pirolidin-1-il]-2-okso-1-feniletil}karbamat (15 mg, 18%).
MS (ESI) m/z 872 [M H]<+>.
1H NMR (400 MHz, dmso) δ 7.95 - 7.63 (m, 6H), 7.35 - 7.25 (m, 7H), 6.97 (s, 1H), 5.42 (d, 1H, J = 6.8 Hz), 5.18 (s, 2H), 5.09 (s, 2H), 4.28 -2.63 (m, 19H), 2.47 - 1.80 (m, 8H), 0.77 (dd, 6H, J = 4.8 Hz, J = 12.4 Hz).
Primer MS (Referenca)
[0243]
1 1
(2S,4S)-terc-butil2-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoksikarbonilamino)-3-metilbutanoil)pirolidin-2-il)-1H-benzo[d]imidazol-6-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilat
[0244] Rastvoru (2S,4S)-terc-butil 4-(metoksimetil)-2-(9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)pirolidin-1-karboksilata (400 mg, 0.85 mmol), metil (S)-1-((S)-2-(6-bromo-1H-benzo[d]imidazol-2-
1 2
il)pirolidin-1-il)-3-metil-1-oksobutan-2-ilkarbamata (360 mg, 0.85 mmol), tetrakis(trifenilfosfin) paladijuma(0) (38 mg, 0.03 mmol) i dihloro[1,1'-bis(difenilfosfino) ferocen]paladijuma(II) (48 mg, 0.07 mmol) u smeši 1,2-dimetoksietana (8.0 mL) i dimetilformamida (1.4 mL) je dodat rastvor kalijum karbonata (2M u vodi, 0.98 mL, 1.96 mmol). Dobijena smeša je degasirana i zatim zagrejana do 85 °C pod argonom tokom 18 sati. Nakon hlađenja do sobne temperature, reakcija je razblažena sa etil acetatom. Organske supstance su oprane sa vodom i slanim rastvorom, osušene (Na2SO4), i koncentrovane. Sirovi ostatak je prečišćen “flash” hromatografijom do (2S,4S)-terc-butil 2-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoksikarbonilamino)-3-metilbutanoil)pirolidin-2-il)-1H-benzo[d]imidazol-6-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilata (156 mg, 29%).
metil{(2S)-2-[[(2S,4S)-2-{9-[2-((2S)-1-{(2S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirolidin-2-il)-1H-benzo[d]imidazol-6-i]-1,11-dihidroizo hromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il}-4-(metoksimetil)pirolidin-1-il]-2-okso-1-feniletil}karbamat
[0245] Rastvor (2S,4S)-terc-butil 2-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoksikarbonilamino)-3-metilbutanoil)pirolidin-2-il)-1H-benzo[d]imidazol-6-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilata (156 mg, 0.18 mmol), etanola (3 mL) i koncentrovane HCl (1 mL) je zagrevan do 60 °C tokom 1 sata. Reakcija je koncentrovana i sirovi materijal je rastvoren u DCM-u (6 mL). Ovaj rastvor je koncentrovan i u (90 mg, 0.12 mmol) ovog materijala je dodat rastvor (R)-2-(metoksikarbonilamino)-2-fenilsirćetne kiseline (34 mg, 0.16 mmol) i COMU (61 mg, 014 mmol) u DMF-u (2 mL). Dobijenom rastvoru je dodat diizopropiletilamin (60 µL, 0.37 mmol). Nakon mešanja 2 sata na sobnoj temperaturi, reakcija je razblažena sa etil acetatom, oprana sa vodom i slanim rastvorom, osušena (Na2SO4), koncentrovana i prečišćena preparativnom HPLC na reverznoj fazi (Gemini, 15 do 49% ACN/H2O 0.1% TFA). Frakcije proizvoda su liofilizirane da se dobije metil {(2S)-2-[[(2S,4S)-2-{9-[2-((2S)-1-{(2S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirolidin-2-il)-1H-benzo[d]imidazol-6-i]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il}-4-(metoksimetil)pirolidin-1-il]-2-okso-1-feniletil}karbamat (62 mg, 56%). MS (ESI) m/z 920 [M H]<+>.
1H NMR (400 MHz, dmso) δ 8.73 (s, 1H), 8.17 (d, 2H, J = 8.4 Hz), 7.94 (d, 3H, J = 8.8 Hz), 7.84 - 7.67 (m, 6H), 7.37 - 7.29 (m, 6H), 5.48 (d, 1H, J = 7.6 Hz), 5.35 - 5.20 (m, 5H), 4.14 -3.12 (m, 15H), 2.52 - 1.92 (m, 8H), 0.80 (dd, 6H, J = 6.8 Hz, J = 6.4 Hz).
1
Primer MT (Referenca)
[0246]
metil{(2S)-2-[(2S,4S)-2-{9-[2-((2S)-1-{(2S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirolidin-2-il)-1H-benzo[d]imidazol-6-i]-1,11-dihidroizo hromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il}-4-(metoksimetil)pirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat
[0247] Rastvor (2S,4S)-terc-butil-2-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoksikarbonilamino)-3-metilbutanoil)pirolidin-2-il)-1H-benzo[d]imidazol-6-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilata (156 mg, 0.18 mmol), etanola (3 mL) i koncentrovane HCl (1 mL) je zagrevan do 60 °C tokom 1 sata. Reakcija je koncentrovana i sirovi materijal je rastvoren u DCM-u (6 mL). Ovaj rastvor je koncentrovan i u (68 mg, 0.09 mmol) ovog materijala je dodat rastvor (R)-2-(metoksikarbonilamino)-2-fenilsirćetne kiseline (21 mg, 0.12 mmol) i COMU (41 mg, 01 mmol) u DMF-u (1 mL). Dobijenom rastvoru je dodat diizopropiletilamin (50 µL, 0.28 mmol). Nakon mešanja tokom 2 sata na sobnoj temperaturi, reakcija je razblažena sa etil acetatom, oprana sa vodom i slanim rastvorom, osušena (Na2SO4), koncentrovana i prečišćena preparativnom HPLC na reverznoj fazi (Gemini, 15 do 44% ACN/H2O 0.1%
1 4
TFA). Frakcije proizvoda su liofilizirane da se dobije metil {(2S)-2-[(2S,4S)-2-{9-[2-((2S)-1-{(2S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirolidin-2-il)-1H-benzo[d]imidazol-6-i]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il}-4-(metoksimetil)pirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat (32 mg, 40%). MS (ESI) m/z 886 [M H]<+>.
1H NMR (400 MHz, dmso) δ 8.71 (s, 1H), 8.15 (d, 1H, J = 8 Hz), 7.95 - 7.64 (m, 8H), 7.28 (dd, 2H, J = 8.8 Hz, J = 14.4 Hz), 5.31 (s, 2H), 5.23 - 5.19 (m, 2H), 4.09 - 3.85 (m, 5H), 3.58 -3.28 (m, 14H), 2.47 - 1.89 (m, 9H), 0.83 - 0.72 (m, 12H).
Primer MU
[0248]
1
terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-pirolidin-2-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilat
[0249] Rastvoru (2S)-metil {-2-[(9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,11-dihidroizohromeno [4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)pirolidin-1il]-3-metil-1-oksobutan-2-il} karbamata (460 mg, 0.74 mmol), (2S,4S)-terc-butil 2-(5-bromo-1H-imidazol-2-il)-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilata (250 mg, 0.61 mmol), tetrakis (trifenilfosfin) paladijuma(0) (35 mg, 0.03 mmol) i dihloro[1,1'-bis (difenilfosfino) ferocen]paladijuma(II)
1
(45 mg, 0.06 mmol) u smeši 1,2-dimetoksietana (9.0 mL) i dimetilformamida (1.5 mL) je dodat rastvor kalijum karbonata (2M u vodi, 0.92 mL, 1.84 mmol). Dobijena smeša je degasirana i zatim je zagrejana do 85 °C pod argonom tokom 18 sati. Nakon hlađenja do sobne temperature, reakcija je razblažena sa etil acetatom. Organske supstance su oprane sa vodom i slanim rastvorom, osušene (Na2SO4), i koncentrovane. Sirovi ostatak je prečišćen “flash” hromatografijom do terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-pirolidin-2-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilata (123 mg)
metil{(1R)-2-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S)-1-{(2S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-pirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoksimetil)pirolidin-1-il]-2-okso-1-feniletil}karbamat [0250] Rastvor terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoksi karbonil)-L-valil]-pirolidin-2-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-karboksilata (122 mg, 0.16 mmol), etanola (3 mL) i koncentrovane HCl (1 mL) je zagrevan do 60 °C tokom 1 sata. Reakcija je koncentrovana i sirovi materijal rastvoren u DCM-u (3 mL). Ovaj rastvor je koncentrovan i ovom materijalu je dodat rastvor (R)-2-(metoksikarbonilamino)-2-fenilsirćetne kiseline (43 mg, 0.2 mmol) i COMU (77 mg, 018 mmol) u DMF-u (3 mL). Dobijenom rastvoru je dodat diizopropiletilamin (80 µL, 0.37 mmol). Nakon mešanja tokom 2 sata na sobnoj temperaturi, reakcija je razblažena sa etil acetatom, oprana sa vodom i slanim rastvorom, osušena (Na2SO4), koncentrovana i prečišćena preparativnom HPLC na reverznoj fazi (Gemini, 15 do 44% ACN/H2O 0.1% TFA). Frakcije proizvoda su liofilizirane da se dobije metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S)-1-{(2S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-pirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoksimetil)pirolidin-1-il]-2-okso-1-feniletil}karbamat (60 mg, 44%). MS (ESI) m/z 870 [M H]<+>.
1H NMR (400 MHz, dmso) δ 8.71 (s, 1H), 8.22 (d, 1H, J = 8 Hz), 8.09 (m, 1H), 7.88 - 7.63 (m, 6H), 7.36 - 7.29 (m, 6H), 5.41 (d, 1H, J = 8.4 Hz), 5.30 - 5.24 (m, 2H), 5.14 - 5.10 (m, 1H), 4.13 -3.09 (m, 15H), 2.47 - 1.80 (m, 8H), 0.80 (dd, 6H, J = 6.4 Hz, J = 23 Hz).
Primer MV
[0251]
1
(1R,3S,5R)-terc-butil3-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoksikarbonilamino)-3-metilbutanoil)-4-metoksimetilpirolidin-2-il)-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-2-azabiciklo[3.1.0]heksan-2-karboksilat
[0252] Rastvoru (1R,3S,5R)-terc-butil-3-(9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-2-azabiciklo[3.1.0]heksan-2-karboksilata (213 mg, 0.37 mmol), metil (S)-1-((2S,4S)-2-(5-bromo-1H-imidazol-2-il)-4-(metoksimetil)pirolidin-1-il)-3-metil-1-oksobutan-2-ilkarbamata (142 mg, 0.31 mmol),
1
tetrakis (trifenilfosfin) paladijuma(0) (35 mg, 0.03 mmol) i dihloro[1,1'-bis(difenilfosfino) ferocen]paladijuma(II) (22 mg, 0.03 mmol) u smeši 1,4-dioksana (3.0 mL) i dimetilsulfoksida (3.0 mL) je dodat rastvor kalijum karbonata (2M u vodi, 0.46 mL, 0.9 mmol). Dobijena smeša je degasirana i zatim zagrevana do 95 °C pod argonom tokom 7 sati. Posle hlađenja do sobne temperature, reakcija je razblažena sa etil acetatom. Organske supstance su oprane sa vodom i slanim rastvorom, osušene (Na2SO4), i koncentrovane. Sirovi ostatak je prečišćen “flash” hromatografijom do (1R,3S,5R)-terc-butil 3-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoksikarbonil amino)-3-metilbutanoil)-4-metoksimetilpirolidin-2-il)-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-2-azabiciklo[3.1.0]heksan-2-karboksilata (101 mg, 42%).
metil{(1R)-2-[(1R,3S,5R)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4-metoksimetilpirolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-azabiciklo[3.1.0]heks-3-il]-2-okso-1-feniletil}karbamat
[0253] Rastvor (1R,3S,5R)-terc-butil 3-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoksi karbonilamino)-3-metilbutanoil)-4-metoksimetilpirolidin-2-il)-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-2-azabiciklo[3.1.0]heksan-2-karboksilata (101 mg, 0.16 mmol), etanola (3 mL) i koncentrovane HCl (1 mL) je zagrevan do 60 °C tokom 1 sata. Reakcija je koncentrovana i sirovi materijal rastvoren u DCM-u (3 mL). Ovaj rastvor je koncentrovan i ovom materijalu je dodat rastvor (R)-2-(metoksi karbonilamino)-2-fenilsirćetne kiseline (35 mg, 0.17 mmol) i COMU (63 mg, 015 mmol) u DMF-u (3 mL). Dobijenom rastvoru je dodat diizopropiletilamin (70 µL, 0.38 mmol). Nakon mešanja tokom 2 sata na sobnoj temperaturi, reakcija je razblažena sa etil acetatom, oprana sa vodom i slanim rastvorom, osušena (Na2SO4), koncentrovana i prečišćena preparativnom HPLC na reverznoj fazi (Gemini, 15 do 44% ACN/H2O 0.1% TFA). Frakcije proizvoda su liofilizirane da se dobije metil {(1R)-2-[(1R,3S,5R)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(metoksi karbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4-metoksi metilpirolidin-2-il]-1H-imidazol-5 il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-2-azabiciklo [3.1.0]heks-3-il]-2-okso-1-feniletil}karbamat (71 mg, 63).
MS (ESI) m/z 882 [M H]<+>.
1H NMR (400 MHz, dmso) δ 8.66 (s, 1H), 8.17 (d, 1H, J = 8.8 Hz), 8.04 (s, 1H), 7.87 - 7.59 (m, 6H), 7.39 - 7.22 (m, 6H), 5.72 (d, 1H, J = 7.6 Hz), 5.68 (s, 1H), 5.25 (s, 1H), 5.13 - 5.01
1
(m, 2H), 4.12 -4.00 (m, 2H), 3.81 - 3.00 (m, 13H), 2.60 (m, 1H), 2.43 - 2.37 (m, 3H), 1.92-1.82 (m, 3H), 0.83 - 0.58 (m, 7H), 0.59 (s, 1H), 0.00 (s, 1H).
Primer MW (Referenca)
[0254]
[0255] Ovo jedinjenje je sintetisano korišćenjem istih uslova kao primer OO supstituisanjem sa odgovarajućom (1R,3S,5R)-2-((S)-2-(metoksikarbonilamino)-3-metilbutanoil)-2-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-karboksilnom kiselinom i (2S,4S)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-((difluorometoksi)metil)pirolidin-2-karboksilnom kiselinom po potrebi.
MS (ESI) m/z 918 [M H]<+>.
Primer MX (Referenca)
[0256]
11
[0257] Ovo jedinjenje je sintetisano korišćenjem istih uslova kao primer OO supstituisanjem sa odgovarajućom (1R,3S,5R)-2-((2S,3S)-3-metoksi -2 (metoksikarbonilamino) butanoil)-2-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-karboksilnom kiselinom i (2S,3R)-3-metoksi-2-(metoksi karbonilamino)butanskom kiselinom po potrebi.
MS (ESI) m/z 898 [M H]<+>.
Primer MY (Referenca)
[0258]
(2S,4S)-1-terc-butil 2-(3-hloro-8-okso-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-9-il)4-metilpirolidin-1,2-dikarboksilat
[0259] Rastvoru 9-bromo-3-hloro-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-8(9H)-ona (1.32 g, 3.63 mmol) u MeCN-u (40 mL) su dodati (2S,4S)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-metilpirolidin-2-karboksilna kiselina (1.0 g, 4.36 mmol) i DIPEA (0.7 mL, 3.99 mmol). Nakon mešanja tokom 18 h, rastvor je razblažen sa EtOAc-om i opran sukcesivno sa zasićenim vodenim NaHCO3i slanim rastvorom. Organske supstance su osušene preko MgSO4, filtrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silika koloni (10% do 40% EtOAc/heksani) da se dobije (2S,4S)-1-terc-butil 2-(3-hloro-8-okso-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-9-il)4-metilpirolidin-1,2-dikarboksilat (1.31 g, 70%).
(2S,4S)-terc-butil 2-(9-hloro-4,5-dihidro-5H-nafto[c,g]hromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4-metilpirolidin-1-karboksilat
[0260] (2S,4S)-1-terc-butil 2-(3-hloro-8-okso-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-9-il) 4-metilpirolidin-1,2-dikarboksilat (1.31 g, 2.56 mmol) dodati su ksileni (25 mL) i amonijum acetat (3.95 g, 51.2 mmol) i rastvor je zagrejan do 136 °C i mešan preko noći. Sledećeg jutra, rastvor je ohlađen do st i razblažen sa EtOAc-om i opran sukcesivno sa vodom, zasićenim vodenim NaHCO3i slanim rastvorom. Organske supstance su osušene preko MgSO4, filtrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silika koloni (60% do 100 % EtOAc/heksani) da se dobije (2S,4S)-tercbutil 2-(9-hloro-4,5-dihidro-5H-nafto[c,g]hromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4-metilpirolidin-1-karboksilat (711 mg, 56%).
(2S,4S)-terc-butil 2-(9-hloro-5H-nafto[c,g]hromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4-metilpirolidin-1-karboksilat
[0261] Rastvoru (2S,4S)-terc-butil 2-(9-hloro-4,5-dihidro-5H-nafto[c,g]hromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4-(metil)pirolidin-1-karboksilata (935 mg, 1.9 mmol) u CH2Cl2-u (20 mL) je dodat MnO2(8.25 g, 95 mmol). Reakciona smeša je mešana tokom 3 h, i zatim je filtrirana preko celita. Materijal koji je zaostao na filteru je opran sa obimnom količinom CH2Cl2i MeOH, i filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silika koloni (0% do 10 % MeOH/EtOAc) da se dobije (2S,4S)-terc-butil 2-(9-hloro-5H-nafto[c,g]hromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4-metilpirolidin-1-karboksilat (692 mg, 74%).
(2S,4S)-terc-butil-2-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoksikarbonilamino)metilbutanoil)azabiciklo[3.1.0]heksan-3-il)-1H-imidazol-5-il)-5H-nafto[c,g]hromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4-metilpirolidin-1-karboksilat
[0262] (2S,4S)-terc-butil 2-(9-hloro-5H-nafto[c,g]hromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4-metilpirolidin-1-karboksilatu (692 mg, 1.41 mmol) u dioksanu (15 mL) je dodat bis(pinakolato)diboron (1.07 g, 4.23 mmol), KOAc (415 mg, 4.23 mmol), X-Phos (52 mg,
11
0.11 mmol), i Pd2dba3(26 mg, 0.03 mmol). Rastvor je degasiran sa N2tokom 10 min, zatim je zagrevan do 100 °C tokom 16 h. Rastvor je ohlađen do st, razblažen sa EtOAc-om, opran sa zasićenim vodenim NaHCO3, slanim rastvorom, osušen preko MgSO4, i koncentrovan. Prečišćen silika gel hromatografijom (0% do 30 % MeOH/EtOAc) da se dobije (2S,4S)-tercbutil-2-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoksikarbonilamino)metilbutanoil)azabiciklo [3.1.0]heksan-3-il)-1H-imidazol-5-il)-5H-nafto[c,g]hromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4-metilpirolidin-1-karboksilat (821 mg, kvantitativno).
(2S,4S)-terc-butil 2-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoksikarbonilamino)-3-metilbutanoil)pirolidin-2-il)-1H-imidazol-5-il)-5H-nafto[c,g]hromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4(metil)pirolidin-1-karboksilat
[0263] U rastvor (2S,4S)-terc-butil-2-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoksi karbonilamino)metilbutanoil)azabiciklo[3.1.0]heksan-3-il)-1H-imidazol-5-il)-5H-nafto[c,g]hromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4-metilpirolidin-1-karboksilata (821 mg, 1.41 mmol), metil (S)-1-((S)-2-(5-bromo-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-il)-3-metil-1-oksobutan-2-ilkarbamata (1.05 g, 2.82 mmol), tetrakis(trifenilfosfin) paladijuma(0) 162 mg, 0.14 mmol) i dihloro[1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijuma(II) (102 mg, 0.14 mmol) u DME-u (15 mL) je dodat rastvor kalijum karbonata (2M u vodi, 2.32 mL, 4.65 mmol). Dobijena smeša je degasirana i zatim je zagrevana do 85 °C tokom 18 sati. Posle hlađenja do sobne temperature, reakcija je razblažena sa etil acetatom. Organske supstance su oprane sa zasićenim natrijum bikarbonatom i slanim rastvorom, osušene preko MgSO4i koncentrovane. Sirovi ostatak je prečišćen “flash” hromatografijom da se dobije- (2S,4S)-terc-butil 2-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoksi karbonilamino)-3-metilbutanoil)pirolidin-2-il)-1H-imidazol-5-il)-5H-nafto[c,g]hromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4metilpirolidin-1-karboksilat (386 mg, 37%).
Metil {2-[2-{9-[2-(1-{2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirolidin-2-il)-1H-imidazol-5-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il}-4-(metil)pirolidin-1-il]-2-okso-1-feniletil}karbamat
[0264] Rastvor (2S,4S)-terc-butil 2-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoksikarbonilamino)-3-metilbutanoil)pirolidin-2-il)-1H-imidazol-5-il)-5H-nafto[c,g]hromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4metilpirolidin-1-karboksilata (386 mg, 0.52 mmol), CH2Cl2(8 mL), MeOH (2 mL) i HCl (4M u Dioksanu, 2 mL) i mešan je preko noći. Reakcija je koncentrovana i sirovi materijal je rastvoren u DMF-u (8 mL). Ovaj rastvor je koncentrovan i ovom materijalu je dodat rastvor (R)-2-(metoksikarbonilamino)-2-fenilsirćetne kiseline (108 mg, 0.52 mmol) i COMU (248 mg, 0.52 mmol). Dobijenom rastvoru je dodat diizopropiletilamin (0.45 mL, 2.6 mmol).
Nakon mešanja tokom 2 sata na sobnoj temperaturi, reakcija je razblažena sa 10% MeOH/EtOAc, oprana sa zasićenim NaHCO3vodom i slanim rastvorom, osušena (Na2SO4), koncentrovana i prečišćena pomoću HPLC da se dobije metil {2-[2-{9-[2-(1-{2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirolidin-2-il)-1H-imidazol-5-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',36,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il}-4-metilpirolidin-1-il]-2-okso-1-feniletil}karbamat (27 mg, 6%). LCMS-ESI<+>: izračunato za C47H50N8O7: 838.38; primećeno [M+1]<+>: 840.12
Primer NB (Referenca)
[0265]
11
Metil[(2S)-3-metil-1-{(2S,4S)-4-metil-2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidin-1-il}-1-oksobutan-2-il]karbamat
[0266] (2S,4S)-terc-butil-2-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoksikarbonilamino)metilbutanoil)azabiciklo[3.1.0]heksan-3-il)-1H-imidazol-5-il)-5H-nafto[c,g]hromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4-(metil)pirolidin-1-karboksilat (950 mg, 1.63 mmol) je rastvoren u DCM-u (12 mL), MeOH (3 mL) i HCl (4 M u dioksanu, 3 mL) su dodati. Reakciona smeša je mešana tokom 4 h i zatim je koncentrovana pod sniženim pritiskom.
11
Sirovi ostatak je tretiran sa (S)-2-(metoksikarbonilamino)-3-metilbutanskom kiselinom (285 mg, 1.63 mmol), HATU (620 mg, 1.63 mmol) i DMF (15 mL), zatim DIPEA (1.42 mL, 8.15 mmol) je dodat u kapima. Nakon 1 h, smeša je razblažena sa EtOAc-om i oprana sukcesivno sa zasićenim vodenim NaHCO3i slanim rastvorom. Organske supstance su osušene preko MgSO4, filtrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silika koloni (0% do 30% MeOH/EtOAc) da se dobije metil [(2S)-3-metil-1-{(2S,4S)-4-metil-2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidin-1-il}-1-oksobutan-2-il]karbamat (596 mg, 57%).
Terc-butil (2S)-2-[5-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-4-metilpirolidin-2-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]pirolidin-1-karboksilat
[0267] Metil [(2S)-3-metil-1-{(2S,4S)-4-metil-2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidin-1-il}-1-oksobutan-2-il]karbamat (298 mg, 0.47 mmol), (S)-terc-butil 2-(5-bromo-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-karboksilat (443 mg, 1.4 mmol), Pd(PPh3)4(54 mg, 0.05 mmol), PdCl2(dppf)2(36 mg, 0.05 mmol), i K2CO3(2M in H2O, 0.78 mL, 1.55 mmol) su kombinovani u DME-u (5 mL). Smeša je degasirana sa N2koji je propuštan u mehurićima tokom 10 min potom zagrevana do 85 °C tokom 16 h. Nakon hlađenja, reakciona smeša je razblažena sa EtOAc-om, i oprana sukcesivno sa zasićenim vodenim NaHCO3i slanim rastvorom. Organske supstance su osušene preko MgSO4, filtrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silika koloni (0% do 30% MeOH/EtOAc) da se dobije tercbutil (2S)-2-[5-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-4-metilpirolidin-2-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]pirolidin-1-karboksilat (84 mg, 24%).
Metil {(1R)-2-[(2S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4-metilpirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-il]-2-okso-1-feniletil}karbamat
[0268] Terc-butil (2S)-2-[5-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-4-metilpirolidin-2-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]pirolidin-1-karboksilat (84 mg, 0.11 mmol) je rastvoren u DCM-u (2.5 mL), MeOH (0.5 mL) i HCl (4 M u dioksanu, 0.5 mL) su dodati. Reakciona smeša je mešana tokom 18 h i zatim je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je tretiran sa (R)-2-
11
(metoksikarbonilamino)-2-fenilsirćetnom kiselinom (23 mg, 0.11 mmol), COMU (53 mg, 0.11 mmol) i DMF (3 mL), zatim DIPEA (0.10 mL, 0.56 mmol) je dodat u kapima. Nakon 30 min, smeša je razblažena sa 10% MeOH/EtOAc i oprana sukcesivno sa zasićenim vodenim NaHCO3i slanim rastvorom. Organske supstance su osušene preko MgSO4, filtrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću HPLC da se dobije metil {(1R)-2-[(2S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4-metilpirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-il]-2-okso-1-feniletil}karbamat (41 mg, 45%). LCMS-ESI<+>: izračunato za C47H50N8O7: 838.38; primećeno [M+1]<+>: 839.39
Primer NC
[0269]
Metil{(2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4-metilpirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat
[0270] Terc-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-metilpirolidin-1-karboksilat (164 mg, 0.23 mmol) je rastvoren u DCM-u (2.57 mL), MeOH
11
(0.7 mL) i HCl (4 M u dioksanu, 0.7 mL) su dodati. Reakciona smeša je mešana tokom 16 h i zatim je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je tretiran sa (S)-2-(metoksi karbonilamino)-3-metilbutanskom kiselinom (30 mg, 0.17 mmol), HATU (65 mg, 0.17 mmol) i DMF (3 mL), zatim DIPEA (0.15 mL, 0.85 mmol) je dodat u kapima. Nakon 45 min, smeša je razblažena sa 10% MeOH/EtOAc i oprana sukcesivno sa zasićenim vodenim NaHCO3i slanim rastvorom. Organske supstance su osušene preko MgSO4, filtrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću HPLC da se dobije metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4-metilpirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat (23 mg, 16%).
LCMS-ESI<+>: izračunato za C45H54N8O7: 818.41; primećeno [M+1]<+>: 820.70.
Primer ND
[0271]
11
Terc-butil (2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-metilpirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-metilpirolidin-1-karboksilat
[0272] (2S,4S)-terc-butil-2-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoksikarbonilamino)metilbutanoil)azabiciklo[3.1.0]heksan-3-il)-1H-imidazol-5-il)-5H-nafto[c,g]hromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4-metilpirolidin-1-karboksilat (293 mg, 0.0.78 mmol), (2S,4S)-terc-butil 2-(5-jodo-1H-imidazol-2-il)-4-metilpirolidin-1-karboksilat (300 mg, 0.52 mmol), Pd(PPh3)4(60 mg, 0.052 mmol), PdCl2(dppf)2(38 mg, 0.052 mmol), i K2CO3(2M u H2O, 0.86 mL, 1.72 mmol) su kombinovani u DME-u (6 mL). Smeša je degasirana sa N2koji je propuštan u mehurićima tokom 10 min potom zagrevana do 85 °C tokom 16 h. Nakon hlađenja, reakciona smeša je razblažena sa EtOAc-om, i oprana sukcesivno sa zasićenim vodenim NaHCO3i slanim rastvorom. Organske supstance su osušene preko MgSO4, filtrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silika koloni (100% EtOAc) da se dobije terc-butil (2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-metilpirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-metilpirolidin-1-karboksilat (183 mg, 50%).
Metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4-metilpirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-metilpirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat
[0273] Terc-butil (2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-metilpirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-metilpirolidin-1-karboksilat (183 mg, 0.26 mmol) je rastvoren u DCM-u (4 mL), MeOH (1 mL) i HCl (4 M u dioksanu, 1 mL) su dodati. Reakciona smeša je mešana tokom 2 h i zatim je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je tretiran sa (S)-2-(metoksi karbonilamino)-3-metilbutanskom kiselinom (91 mg, 0.52 mmol), HATU (198 mg, 0.52 mmol) i DMF (5 mL), zatim DIPEA (0.45 mL, 2.6 mmol) je dodat u kapima. Posle 1 h, smeša je razblažena sa 10% MeOH/EtOAc i oprana sukcesivno sa zasićenim vodenim NaHCO3i slanim rastvorom. Organske supstance su osušene preko MgSO4, filtrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću HPLC da se dobije metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4-metilpirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-
12
9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-metilpirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat (6 mg, 3%). LCMS-ESI<+>: izračunato za C45H54N8O7: 818.41; primećeno [M+1]<+>: 819.41.
Primer NF
[0274]
Terc-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-4-metilpirolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-metilpirolidin-1-karboksilat
[0275] (2S,4S)-terc-butil-2-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoksi karbonilamino)metilbutanoil)azabiciklo[3.1.0]heksan-3-il)-1H-imidazol-5-il)-5H-nafto[c,g]hromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4-metilpirolidin-1-karboksilat (558 mg, 0.96 mmol), metil (S)-1-((2S,4S)-2-(5-jodo-1H-imidazol-2-il)-4-metilpirolidin-1-il)-3-metil-1-oksobutan-2-ilkarbamat (501 mg, 1.15 mmol), Pd(PPh3)4(111 mg, 0.096 mmol), PdCl2(dppf)2(70 mg, 0.096 mmol), i K2CO3(2M in H2O, 1.6 mL, 3.17 mmoL) su kombinovani u DMSO-u (6 mL) i dioksanu (6 mL). Smeša je degasirana sa N2koji je propuštan u mehurićima tokom 10 min potom zagrevana do 95 °C tokom 14 h. Nakon hlađenja, reakciona smeša je razblažena sa EtOAc-om, oprana sukcesivno sa zasićenim vodenim NaHCO3i slanim rastvorom. Organske supstance su osušene preko MgSO4, filtrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silika koloni (0 %- 30% MeOH/EtOAc) da se dobije terc-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-4-metilpirolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-metilpirolidin-1-karboksilat (257 mg, 35%).
Metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2R)-2-[(metoksikarbonil)amino]-2-fenilacetil}-4-metilpirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-metilpirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat [0276] Terc-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-4-metilpirolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-metilpirolidin-1-karboksilat (257 mg, 0.34 mmol) je rastvoren u DCM-u (4 mL), MeOH (1 mL) i HCl (4 M u dioksanu, 1 mL) su dodati. Reakciona smeša je mešana tokom 3 h i zatim je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je tretiran sa (R)-2-(metoksi karbonilamino)-2-fenilsirćetnom kiselinom (71 mg, 0.34 mmol), COMU (161 mg, 0.34 mmol) i DMF (6 mL), zatim DIPEA (0.3 mL, 1.67 mmol) je dodat u kapima. Nakon 15 h, smeša je razblažena sa 10% MeOH/EtOAc i oprana sukcesivno sa zasićenim vodenim NaHCO3i slanim rastvorom. Organske supstance su osušene preko MgSO4, filtrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću HPLC da se dobije metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2R)-2-[(metoksikarbonil)amino]-2-fenilacetil}-4-metilpirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-metilpirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat (152 mg, 53%). LCMS-ESI<+>: izračunato za C48H52N8O7: 852.40; primećeno [M+1]<+>: 854.26. 'H NMR (CD3OD): 8.677 (s, 1H), 8.232-7.837 (m, 5H), 7.695-7.673 (m, 2H), 7.496-7.426 (m, 5H), 5.499 (s, 1H), 5.445-5.401 (m, 1H), 5.337 (s, 1H), 5.253-5.208 (q, 1H, J= 7.2 Hz), 4.870 (m, 1H), 4.230 (d, 1H, J= 7.2 Hz), 3.781 (m, 1H), 3.671 (s, 3H), 3.607 (s, 3H), 3.425 (m, 3H), 2.750-2.689 (m, 2H), 2.683 (m, 2H), 2.384 (m, 1H), 1.894 (quint, 2H, J=12 Hz), 1.249-1.151 (m, 6H), 0.974-0.890 (m, 6H).
Primer NG
[0277]
(2S,5S)-1-terc-butil2-(2-okso-2-(8-okso-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-3-il)etil) 5-metilpirolidin-1,2-dikarboksilat
[0278] Rastvoru 3-(2-bromoacetil)-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-8(9H)-ona u MeCN-u (30 mL) je dodata (2S,5S)-1-(terc-butoksikarbonil)-5-metilpirolidin-2-karboksilna kiselina (1.2 g, 3.23 mmol) i trietil amin (0.48 mL, 3.55 mmol) i rastvor je zagrejan do 50 °C.
12
Nakon mešanja tokom 15 h, rastvor je ohlađen do st, i razblažen sa EtOAc-om i opran sukcesivno sa zasićenim vodenim NaHCO3i slanim rastvorom. Organske supstance su osušene preko MgSO4, filtrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silika koloni (20% do 50% EtOAc/heksani) da se dobije (2S,5S)-1-terc-butil 2-(2-okso-2-(8-okso-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-3-il)etil) 5-metilpirolidin-1,2-dikarboksilat (1.09 g, 65%).
(2S,5S)-2-(2-(9-bromo-8-okso-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-3-il)-2-oksoetil)1-terc-butil 5-metilpirolidin-1,2-dikarboksilat
[0279] (2S,5S)-1-terc-butil 2-(2-okso-2-(8-okso-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-3-il)etil) 5-metilpirolidin-1,2-dikarboksilat (1.29 g, 2.48 mmol) je rastvoren u rastvoru DCM (17.5 mL) i MeOH (7 mL), zatim je tretiran sa piridinijum tribromidom (873 mg, 2.73 mmol). Nakon mešanja na ST tokom 1 h, reakciona smeša je razblažena sa DCM-om i 10% HCl, i ekstrahovana sa DCM-om. Organska faza je osušena preko MgSO4, filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom i sirovi materijal je preuzet bez dodatnog prečišćavanja.
(2S,5S)-2-(2-(9-((2S,5S)-1-(terc-butoksikarbonil)-5-metilpirolidin-2-karboniloksi)-8-okso-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-3-il)-2-oksoetil) 1-terc-butil 5-metilpirolidin-1,2-dikarboksilat
[0280] (2S,5S)-2-(2-(9-bromo-8-okso-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-3-il)-2-oksoetil) 1-terc-butil 5-metilpirolidin-1,2-dikarboksilat (700 mg, 1.17 mmol) je tretiran sa rastvorom (2S,5S)-1-(terc-butoksikarbonil)-5-metilpirolidin-2-karboksilne kiseline (375 mg, 1.64 mmol) u acetonu (6 mL) i Cs2CO3-om (267 mg, 0.82 mmol). Mešana reakciona smeša je zagrevana do 40 °C tokom 16 h, zatim je ohlađena do ST i razblažena sa CH2Cl2-om i ekstrahovana 3X. Organska faza je oprana sa slanim rastvorom, zatim je osušena preko MgSO4, filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silika koloni (40% do 100% EtOAc/heksani) da se dobije (2S,5S)-2-(2-(9-((2S,5S)-1-(terc-butoksikarbonil)-5-metilpirolidin-2-karboniloksi)-8-okso-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-3-il)-2-oksoetil) 1-terc-butil 5-metilpirolidin-1,2-dikarboksilat (464 mg, 53%).
Terc-butil (2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-(terc-butoksikarbonil)-5-metilpirolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,4,5,11-tetrahidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5-metilpirolidin-1-karboksilat
[0281] (2S,5S)-2-(2-(9-((2S,5S)-1-(terc-butoksikarbonil)-5-metilpirolidin-2-karboniloksi)-8-okso-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-3-il)-2-oksoetil) 1-terc-butil 5-metilpirolidin-1,2-dikarboksilat (464 mg, 0.62 mmol) i NH4OAc (8.48 g, 110.0 mmol) su suspendovani u rastvoru smeše PhMe/2-metoksietanol u odnosu 10:1 (22 mL). Mešana reakciona smeša je zagrevana do 110 °C tokom 20 h, zatim je ohlađena do ST i razblažena sa EtOAc-om. Organska faza je oprana sa vodom, zasićenim vodenim NaHCO3, i slanim rastvorom, zatim osušena preko MgSO4, filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silika koloni (0% do 30% MeOH/EtOAc) da se dobije terc-butil (2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-(terc-butoksikarbonil)-5-metilpirolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,4,5,11-tetrahidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5-metilpirolidin-1-karboksilat (393 mg, 90%).
Terc-butil (2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-(terc-butoksikarbonil)-5-metilpirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidin-1-karboksilat
[0282] Terc-butil (2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-(terc-butoksikarbonil)-5-metilpirolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,4,5,11-tetrahidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5-metilpirolidin-1-karboksilat (393 mg, 0.55 mmol) je suspendovan u DCM-u (7 mL) i aktivirani MnO2(1.45 g, 16.7 mmol) je dodat u jednom delu. Reakciona smeša je zagrejana do 40 °C. Nakon mešanja tokom 2.5 h, smeša je ohlađena do st i gusta masa je filtrirana preko celita. Filter pogača je oprana sa obimnom količinom CH2Cl2i MeOH i filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prenešen u sledeći korak bez daljeg prečišćavanja da se dobije terc-butil (2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-(terc-butoksikarbonil)-5-metilpirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidin-1-karboksilat (328 g, 85%).
Metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-5-metilpirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat
[0283] Terc-butil (2S,4S)-2-(5- {2-[(2S,4S)-1-(terc-butoksikarbonil)-5-metilpirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidin-1-karboksilat (164 mg, 0.23 mmol) je rastvoren u DCM-u (7 mL), MeOH (1.5 mL) i HCl (4 M u dioksanu, 1.5 mL) su dodati. Reakciona smeša je mešana tokom 16 h i zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je tretiran sa (S)-2-(metoksi
12
karbonilamino)-3-metilbutanskom kiselinom (81 mg, 0.46 mmol), HATU (175 mg, 0.46 mmol) i DMF (5 mL), zatim DIPEA (0.4 mL, 2.34 mmol) je dodat u kapima. Posle 35 min, smeša je razblažena sa 10% MeOH/EtOAc i oprana sukcesivno sa zasićenim vodenim NaHCO3i slanim rastvorom. Organske supstance su osušene preko MgSO4, filtrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću HPLC da se dobije metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-5-metilpirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat (132 mg, 69%). LCMS-ESI<+>: izračunato za C45H54N8O7: 818.41; primećeno [M+1]<+>: 820.19. 'H NMR (CD3OD): 8.492 (m, 1H), 8.179-7.538 (m, 7H), 5.267-5.201 (m, 3H), 5.125-5.082 (m, 1H), 4.070 (m, 1H), 3.383-3.592 (m, 4 H), 3.225 (s, 3H), 2.466-2.249 (m, 5H), 1.992-1.892 (m, 3H), 1.568 (d, 3H, J=6.4 Hz), 1.490 (d, 3H, J=6.8 Hz), 1.266 (m, 2H), 1.020-0.806 (m, 14H).
Primer NI
[0284]
Metil [(2S,3R)-3-metoksi-1-{(2S,5S)-2-[9-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoksikarbonil)-O-metil-L-treonil]-5-metil-pirolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-5-metilpirolidin-1-il}-1-oksobutan-2-il]karbamat
12
[0285] Terc-butil (2S,4S)-2-(5- {2-[(2S,4S)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-metilpirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-metilpirolidin-1-karboksilat (164 mg, 0.23 mmol) je rastvoren u DCM-u (7 mL), MeOH (1.5 mL) i HCl (4 M u dioksanu, 1.5 mL) su dodati. Reakciona smeša je mešana tokom 16 h i zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je tretiran sa (2S,3R)-3-metoksi -2-(metoksikarbonilamino)butanskom kiselinom (90 mg, 0.46 mmol), HATU (175 mg, 0.46 mmol) i DMF (6 mL), zatim DIPEA (0.4 mL, 2.34 mmol) je dodat u kapima. Nakon 30 min, smeša je razblažena sa 10% MeOH/EtOAc i oprana sukcesivno sa zasićenim vodenim NaHCO3i slanim rastvorom. Organske supstance su osušene preko MgSO4, filtrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću HPLC da se dobije metil [(2S,3R)-3-metoksi-1-{(2S,5S)-2-[9-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoksikarbonil)-O-metil-L-treonil]-5-metilpirolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-5-metilpirolidin-1-il}-1-oksobutan-2-il]karbamat (97 mg, 50%). LCMS-ESI<+>: izračunato za C45H54N8O9: 850.40; primećeno [M+1]<+>: 851.58. 'H NMR (CD3OD): 8.631 (s, 1H), 8.191-7.938 (m, 7 H), 6.100 (m, 1 H), 5.925 (m, 1H), 5.303 (m, 3H), 5.179 (t, 1H, J=6.8 Hz), 4.406-4.358 (m, 2H), 3.754- 3.598 (m, 8H), 3.376 (s, 3H), 3.263 (s, 3H), 2.625-2.256 (m, 6H), 2.038-1.955 (m, 2H), 1.598 (d, 3H, J=6.4 Hz), 1.530 (d, 3H, J=6.8 Hz), 1.302-1.099 (m, 6H).
Primer NJ
[0286]
12
��
(2S,5S)-2-(2-(9-((2S,4S)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-(metoksimetil)pirolidin-2-karboniloksi)-8-okso-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-3-il)-2-oksoetil)1-terc-butil 5-metilpirolidin-1,2-dikarboksilat
[0287] (2S,5S)-2-(2-(9-bromo-8-okso-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-3-il)-2-oksoetil) 1-terc-butil 5-metilpirolidin-1,2-dikarboksilat (800 mg, 1.34 mmol) je tretiran sa rastvorom (2S,4S)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-(metoksimetil)pirolidin-2-karboksilne kiseline (485 mg, 1.87 mmol) u acetonu (6 mL) i Cs2CO3-om (306 mg, 0.94 mmol). Mešana reakciona smeša je zagrevana do 40 °C tokom 16 h, zatim je ohlađena do ST i razblažena sa CH2Cl2-om i ekstrahovana 3X. Organska faza je oprana sa slanim rastvorom, zatim osušena preko MgSO4, filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silika koloni (40% do 100% EtOAc/heksani) da se dobije (2S,5S)-2-(2-(9-((2S,5S)-1-(terc-butoksikarbonil)-5-metilpirolidin-2-karboniloksi)-8-okso-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-3-il)-2-oksoetil) 1-terc-butil 5-metilpirolidin-1,2-dikarboksilat (680 mg, 65%).
Terc-butil (2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-(metoksimetil)pirolidin-2-il]-1H-imidazo|-5-il}-1,4,5,11-tetrahidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5-metilpirolidin-1-karboksilat
[0288] (2S,5S)-2-(2-(9-((2S,5S)-1-(terc-butoksikarbonil)-5-metilpirolidin-2-karboniloksi)-8-okso-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-3-il)-2-oksoetil) 1-terc-butil 5-metilpirolidin-1,2-dikarboksilat (680 mg, 0.87 mmol) i NH4OAc (10.0 g, 130.0 mmol) su suspendovani u rastvoru smeše PhMe/2-metoksietanol u odnosu 10:1 (22 mL). Mešana reakciona smeša je zagrevana do 110 °C tokom 24 h, zatim je ohlađena do ST i razblažena sa EtOAc-om. Organska faza je oprana sa vodom, zasićenim vodenim NaHCO3, i slanim rastvorom, zatim je osušena preko MgSO4, filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silika koloni (0% do 30% MeOH/EtOAc) da se dobije terc-butil (2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-(metoksimetil)pirolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,4,5,11-tetrahidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5-metilpirolidin-1-karboksilat (461 mg, 72%).
Terc-butil (2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-(metoksimetil)pirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidin-1-karboksilat
12
[0289] Terc-butil (2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-(metoksi metil)pirolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,4,5,11-tetrahidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5-metilpirolidin-1-karboksilat (461 mg, 0.62 mmol) je suspendovan u DCM-u (7 mL) i aktivirani MnO2(1.6 g, 18.8 mmol) je dodat u jednom delu. Reakciona smeša je zagrejana do 40 °C. Nakon mešanja tokom 5.5 h, smeša je ohlađena do st i gusta masa je filtrirana preko celita. Filter pogača je oprana sa obimnom količinom CH2Cl2i MeOH i filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prenešen u sledeći korak bez dodatnog prečišćavanja da se dobije terc-butil (2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-(tercbutoksikarbonil)-4-(metoksimetil)pirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidin-1-karboksilat (414 g, 90%).
Metil {(2S,3S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S,3S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilpentanoil}-4-(metoksimetil)pirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidin-1-il]-3-metil-1-oksopentan-2-il}karbamat
[0290] Terc-butil (2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-(metoksi metil)pirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidin-1-karboksilat (207 mg, 0.28 mmol) je rastvoren u DCM-u (4 mL), MeOH (1 mL) i HCl (4 M u dioksanu, 1 mL) su dodati. Reakciona smeša je mešana tokom 1.5 h i zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je tretiran sa (2S,3S)-2-(metoksikarbonilamino)-3-metilpentanskom kiselinom (106 mg, 0.56 mmol), HATU (214 mg, 0.56 mmol) i DMF (5 mL), zatim DIPEA (0.49 mL, 2.8 mmol) je dodat u kapima. Nakon 30 min, smeša je razblažena sa 10% MeOH/EtOAc i oprana sukcesivno sa zasićenim vodenim NaHCO3i slanim rastvorom. Organske supstance su osušene preko MgSO4, filtrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću HPLC da se dobije metil {(2S,3S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S,3S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilpentanoil}-4-(metoksimetil)pirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidin-1-il]-3-metil-1-oksopentan-2-il}karbamat (132 mg, 69%). LCMS-ESI<+>: izračunato za C45H54N8O7: 876.45; primećeno [M+1]<+>: 879.02
Primer NK
[0291]
1
11
(2S,4S)-1-terc-butil 2-(2-okso-2-(8-okso-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-3-il)etil) 4-metilpirolidin-1,2-dikarboksilat
[0292] Rastvoru 3-(2-bromoacetil)-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-8(9H)-ona (647 mg, 1.74 mmol) u MeCN-u (20 mL) je dodata ((2S,4S)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-metilpirolidin-2-karboksilna kiselina (559 mg, 2.44 mmol) i DIPEA (0.36 mL, 2.09 mmol) i rastvor je zagrejan do 60 °C. Nakon mešanja tokom 3 h, rastvor je ohlađen do st, i razblažen sa EtOAc-om i opran sukcesivno sa zasićenim vodenim NaHCO3i slanim rastvorom. Organske supstance su osušene preko MgSO4, filtrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silika koloni (20% do 50% EtOAc/heksani) da se dobije (2S,4S)-1-terc-butil 2-(2-okso-2-(8-okso-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-3-il)etil) 4-metilpirolidin-1,2-dikarboksilat (621 mg, 69%).
1 2
(2S,4S)-2-(2-(9-bromo-8-okso-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-3-i|)-2-oksoetil) 1-terc-butil 4-metilpirolidin-1,2-dikarboksilat
[0293] (2S,4S)-1-terc-butil 2-(2-okso-2-(8-okso-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-3-il)etil) 4-metilpirolidin-1,2-dikarboksilat (621 mg, 1.19 mmol) je rastvoren u rastvoru DCM-a (10 mL) i MeOH (4 mL), zatim je tretiran sa piridinijum tribromidom (421 mg, 1.3 mmol). Nakon mešanja na ST tokom 1.5 h, reakciona smeša je razblažena sa DCM-om i 10% HCl, i ekstrahovana sa DCM-om. Organska faza je osušena preko MgSO4, filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom i sirovi materijal je preuzet bez daljeg prečišćavanja.
(2S,4S)-2-(2-(9-((2S,4S)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-(metoksimetil)pirolidin-2-karboniloksi)-8-okso-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-3-il)-2-oksoetil) 1-terc-butil 4-metilpirolidin-1,2-dikarboksilat
[0294] (2S,4S)-2-(2-(9-bromo-8-okso-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-3-il)-2-oksoetil) 1-terc-butil 4-metilpirolidin-1,2-dikarboksilat (709 mg, 1.18 mmol) je tretiran sa rastvorom (2S,4S)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-(metoksimetil)pirolidin-2-karboksilne kiseline (614 mg, 2.36 mmol) u Me-THF-u (12 mL) i Cs2CO3-om (384 mg, 1.18 mmol). Mešana reakciona smeša je zagrevana do 50 °C tokom 16 h, zatim je ohlađena do ST i razblažena sa CH2Cl2-om i ekstrahovana 3X. Organska faza je oprana sa slanim rastvorom, zatim je osušena preko MgSO4, filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silika koloni (40% do 100% EtOAc/heksani) da se dobije (2S,4S)-2-(2-(9-((2S,4S)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-(metoksimetil)pirolidin-2-karboniloksi)-8-okso-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-3-il)-2-oksoetil) 1-terc-butil 4-metilpirolidin-1,2-dikarboksilat (651 mg, 71%).
Terc-butil (2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-(metoksimetil)pirolidin-2-il]-1H-imidazo|-5-il}-1,4,5,11-tetrahidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-metilpirolidin-1-karboksilat
[0295] (2S,4S)-2-(2-(9-((2S,4S)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-(metoksimetil)pirolidin-2-karboniloksi)-8-okso-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-3-il)-2-oksoetil) 1-tercbutil 4-metilpirolidin-1,2-dikarboksilat (651 mg, 0.84 mmol) i NH4OAc (10.0 g, 129.7 mmol) su suspendovani u rastvoru smeše PhMe/2-metoksietanol u odnosu 10:1 (22 mL). Mešana reakciona smeša je zagrevana do 110 °C tokom 20 h, zatim je ohlađena do ST i razblažena sa EtOAc-om. Organska faza je oprana sa vodom, zasićenim vodenim NaHCO3, i slanim rastvorom, zatim je osušena preko MgSO4, filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom.
1
Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silika koloni (0% do 30% MeOH/EtOAc) da se dobije terc-butil (2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-(metoksimetil)pirolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,4,5,11-tetrahidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-metilpirolidin-1-karboksilat (382 mg, 62%).
Terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-4-(metoksi metil)pirolidin-2-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-metilpirolidin-1-karboksilat
[0296] Terc-butil (2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-(metoksi metil)pirolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,4,5,11-tetrahidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-metilpirolidin-1-karboksilat (382 mg, 0.52 mmol) je suspendovan u DCM-u (8 mL) i aktivirani MnO2(1.35 g, 15.5 mmol) je dodat u jednom delu. Reakciona smeša je zagrejana do 35 °C. Nakon mešanja tokom 15 h, smeša je ohlađena do st i gusta masa je filtrirana preko celita. Filter pogača je oprana sa obimnom količinom CH2Cl2i MeOH i filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prenešen u sledeći korak bez daljeg prečišćavanja da se dobije terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-4-(metoksimetil)pirolidin-2-il}-1,11dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-metilpirolidin-1-karboksilat (347 g, 91%).
Metil {(2S,3R)-3-metoksi-1-[(2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoksikarbonil)-O-metil-L-treonil]-4-metilpirolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-il]-1-oksobutan-2-il}karbamat
[0297] Terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-4-(metoksi metil)piroldin-2-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-metilpirolidin-1-karboksilat (174 mg, 0.24 mmol) je rastvoren u DCM-u (4 mL), MeOH (1 mL) i HCl (4 M u dioksanu, 1 mL) su dodati. Reakciona smeša je mešana tokom 5 h i zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je tretiran sa ((2S,3R)-3-metoksi -2-(metoksikarbonilamino)butanskom kiselinom (92 mg, 0.48 mmol), HATU (182 mg, 0.48 mmol) i DMF (5 mL), zatim DIPEA (0.31 mL, 2.4 mmol) je dodat u kapima. Nakon 35 min, smeša je razblažena sa 10% MeOH/EtOAc i oprana sukcesivno sa zasićenim vodenim NaHCO3i slanim rastvorom. Organske supstance su osušene preko MgSO4, filtrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću HPLC da se dobije metil {(2S,3R)-3-metoksi-1-[(2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,4S)-1-[N-
1 4
(metoksikarbonil)-O-metil-L-treonil]-4-metilpirolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-il]-1-oksobutan-2-il}karbamat (72 mg, 34%). LCMS-ESI<+>: izračunato za C46H56N8O10: 880.41; primećeno [M+1]<+>: 882.39. 'H NMR (CD3OD): 8.558 (s, 1H), 8.123-7.572 (m, 7H), 5.436-5.391 (dd, 1H, J=7.2, 3.6 Hz), 5.252 (s, 2H), 5.220 (m, 1H), 4.493-4.444 (m, 2H), 4.287-4.206 (m, 2H), 3.756-3.256 (m, 21H), 2.834 (m, 1H), 2.717-2.621 (m, 2H), 2.500 (m, 1H), 2.150 (m, 1H), 1.882 (m, 1H), 1.208 (d, 3H, J=6.4 Hz), 1.159-1.099 (m, 6H).
Primer NL
[0298]
1
�
(2S,5S)-2-okso-2-(8-okso-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-3-il)etil 1-((S)-2-(metoksikarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirolidin-2-karboksilat
[0299] Rastvoru 3-(2-bromoacetil)-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-8(9H)-ona (750 mg, 2.02 mmol) u MeCN-u (20 mL) je dodata (2S,5S)-1-((S)-2-(metoksikarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirolidin-2-karboksilna kiselina (600 mg, 2.09 mmol) i DIPEA (0.35 mL, 2.02 mmol) i rastvor je zagrejan do 60 °C. Nakon mešanja tokom 4 h, rastvor je ohlađen do st, i razblažen sa EtOAc-om i opran sukcesivno sa zasićenim vodenim NaHCO3i slanim rastvorom. Organske supstance su osušene preko MgSO4, filtrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silika koloni (40% do 80% EtOAc/heksani) da se dobije (2S,5S)-2-okso-2-(8-okso-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-3-il)etil 1-((S)-2-(metoksikarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirolidin-2-karboksilat (1.16 g, kvantitativno).
(2S,5S)-2-(9-bromo-8-okso-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-3-il)-2-oksoetil 1-((S)-2-(metoksikarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirolidin-2-karboksilat
1
[0300] (2S,5S)-2-okso-2-(8-okso-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-3-il)etil 1-((S)-2-(metoksikarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirolidin-2-karboksilat (400 mg, 0.61 mmol) je rastvoren u rastvoru DCM (15 mL) i MeOH (6 mL), zatim tretiran sa piridinijum tribromidom (409 mg, 1.28 mmol). Nakon 2 sata, dodatni deo piridinijum tribromida (40 mg) je dodat. Nakon mešanja na ST tokom dodatih 20 min, reakciona smeša je razblažena sa DCM-om i 10% HCl, i ekstrahovana sa DCM-om. Organska faza je osušena preko MgSO4, filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom i sirovi materijal je preuzet bez dodatnog prečišćavanja.
(2S,4S)-1-terc-butil 2-(3-(2-((2S,5S)-1-((S)-2-(metoksikarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirolidin-2-karboniloksi)acetil)-8-okso-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-9-il) 4-metilpirolidin-1,2-dikarboksilat
[0301] (2S,5S)-2-(9-bromo-8-okso-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-3-il)-2-oksoetil 1-((S)-2-(metoksikarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirolidin-2-karboksilat) je tretiran sa rastvorom (2S,4S)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-metilpirolidin-2-karboksilne kiseline (280 mg, 1.22 mmol) u Me-THF-u (6 mL) i Cs2CO3-om (199 mg, 0.61 mmol). Mešana reakciona smeša je zagrevana do 50 °C tokom 2.5 h, zatim je ohlađena do ST i razblažena sa CH2Cl2-om i ekstrahovana 3X. Organska faza je oprana slanim rastvorom, zatim je osušena preko MgSO4, filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silika koloni (50% do 100% EtOAc/heksani) da se dobije (2S,4S)-1-tercbutil 2-(3-(2-((2S,5S)-1-((S)-2-(metoksikarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirolidin-2-karboniloksi)acetil)-8-okso-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-9-il) 4-metilpirolidin-1,2-dikarboksilat (441 mg, 90%).
Terc-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,4,5,11-tetrahidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-metilpirolidin-1-karboksilat
[0302] (2S,4S)-1-terc-butil 2-(3-(2-((2S,5S)-1-((S)-2-(metoksikarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirolidin-2-karboniloksi)acetil)-8-okso-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-9-il) 4-metilpirolidin-1,2-dikarboksilat (441 mg, 0.55 mmol) i NH4OAc (5 g, 65.0 mmol) su suspendovani u rastvoru smeše PhMe/2-metoksietanol u odnosu 10:1 (11 mL). Mešana reakciona smeša je zagrevana do 110 °C tokom 7 h, zatim je ohlađena do ST i razblažena sa EtOAc-om. Organska faza je oprana sa vodom, zasićenim vodenim NaHCO3, i slanim rastvorom, zatim osušena preko MgSO4, filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silika koloni (0% do 30%
1
MeOH/EtOAc) da se dobije terc-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,4,5,11-tetrahidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-metilpirolidin-1-karboksilat (266 mg, 63%).
Terc-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-4-metilpirolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-metilpirolidin-1-karboksilat
[0303] Terc-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,4,5,11 tetrahidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-metilpirolidin-1-karboksilat (266 mg, 0.35 mmol) je suspendovan u DCM-u (7 mL) i aktivirani MnO2(908 mg, 10.45 mmol) je dodat u jednom delu. Reakciona smeša je mešana preko noći. Nakon mešanja tokom 15 h, dodatni aktivirani MnO2(500 mg, 5.75 mmol) je dodat u jednom delu.
[0304] Nakon mešanja 2 h na 35 °C, smeša je ohlađena do st i gusta masa je filtrirana preko celita. Filter pogača je oprana sa obimnom količinom CH2Cl2i MeOH i filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prenešen u sledeći korak bez dodatnog prečišćavanja da se dobije terc-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-4-metilpirolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-metilpirolidin-1-karboksilat (266 mg, kvantitativno).
Metil{(2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S,3R)-3-metoksi-2-[(metoksi karbonil)amino]butanoil}-4-metilpirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat
[0305] Terc-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-4-metilpirolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-metilpirolidin-1-karboksilat (266 mg, 0.23 mmol) je rastvoren u DCM-u (4 mL), MeOH (1mL) i HCl (4 M u dioksanu, 1 mL) su dodati. Reakciona smeša je mešana tokom 1.5 h i zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je tretiran sa (2S,3R)-3-metoksi-2-(metoksikarbonilamino) butanskom kiselinom (44 mg, 0.23 mmol), HATU (87 mg, 0.23 mmol) i DMF (5 mL), zatim DIPEA (0.3 mL, 1.75 mmol) je dodat u kapima. Nakon 30 min, smeša je razblažena sa 10% MeOH/EtOAc i oprana sukcesivno sa zasićenim vodenim NaHCO3i slanim rastvorom. Organske supstance su osušene preko MgSO4, filtrirane i
1
koncentrovane pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću HPLC da se dobije metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-5-metilpirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat (59 mg, 31%). LCMS-ESI<+>: izračunato za C45H54N8O8: 834.41; primećeno [M+1]<+>: 836.89. 'H NMR (CD3OD): 8.186 (s, 1H), 7.800-7.291 (m, 7H), 5.258-5.213 (dd, 1H, J=7.2, 3.6 Hz), 5.027-4.918 (m, 4H), 4.620 (t, 1H, J=6.8 Hz), 4.246 (m, 1H), 4.116 (m, 1H), 3.972 (d, 1H, J=8.8 Hz), 3.701-3.675 (m, 1H), 3.503 (s, 3H), 3.479 (s, 3H), 3.177 (s, 3H), 2.554-2.191 (m, 3H), 1.906-1.821 (m, 6H), 1.392 (d, 2H, J=6.4 Hz), 1.113-0.728 (m, 12H).
Primer NM
[0306]
Terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-4-metilpirolidin-2-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoksi metil)pirolidin-1-karboksilat
[0307] Metil [(2S)-3-metil-1-{(2S,4S)-4-metil-2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidin-1-il}-1-oksobutan-2-
14
il]karbamat (312 mg, 0.49 mmol), metil (S)-1-((2S,4S)-2-(5-jodo-1H-imidazol-2-il)-4-metilpirolidin-1-il)-3-metil-1-oksobutan-2-ilkarbamat (219 mg, 0.54 mmol), Pd(PPh3)4(58 mg, 0.05 mmol), PdCl2(dppf)2(36 mg, 0.05 mmol), i K2CO3(2M in H2O, 0.8 mL, 1.6 mmoL) su kombinovani u DMSO-u (5 mL) i dioksanu (5 mL). Smeša je degasirana sa N2koji je uvođen u mehurićima tokom 10 min potom zagrevana do 95 °C tokom 5 h. Nakon hlađenja, reakciona smeša je razblažena sa EtOAc-om, i oprana sukcesivno sa zasićenim vodenim NaHCO3i slanim rastvorom. Organske supstance su osušene preko MgSO4, filtrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silika koloni (0 %- 30% MeOH/EtOAc) da se dobije terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoksi karbonil)-L-valil]-4-metilpirolidin-2-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilat (166 mg, 43%).
Metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4-metilpirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoksimetil)pirolidin-1-il]-2-okso-1-feniletil}karbamat
[0308] Terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-4-metilpirolidin-2-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilat (166 mg, 0.21 mmol) je rastvoren u DCM-u (4 mL), MeOH (1 mL) i HCl (4 M u dioksanu, 1 mL) su dodati. Reakciona smeša je mešana tokom 2 h i zatim je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je tretiran sa (R)-2-(metoksi karbonilamino)-2-fenilsirćetnom kiselinom (44 mg, 0.21 mmol), COMU (100 mg, 0.21 mmol) i DMF (5 mL), zatim DIPEA (0.18 mL, 1.05 mmol) je dodat u kapima. Nakon 1 h, smeša je razblažena sa 10% MeOH/EtOAc i oprana sukcesivno sa zasićenim vodenim NaHCO3i slanim rastvorom. Organske supstance su osušene preko MgSO4, filtrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću HPLC da se dobije metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4-metilpirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoksi metil)pirolidin-1-il]-2-okso-1-feniletil}karbamat (71 mg, 38%). LCMS-ESI<+>: izračunato za C49H54N8O8: 882.41; primećeno [M+1]<+>: 884.34. 'H NMR (CD3OD): 8.462 (s, 1H), 8.029-7.471 (m, 7H), 7.394-7.343 (m, 5H), 5.410 (d, 2H, J=6.8 Hz), 5.300 (m, 1H), 5.233 (m, 2H), 4.341 (m, 1H), 4.236 (d, 1H, J=7.2 Hz), 3.603 (s, 3H), 3.551 (s, 3H), 3.522-3.241 (m, 8H), 2.650 (m, 1H), 2.550 (m, 2H), 1.977-1.926 (m, 4H), 1.221 (d, 3H, J=3.2 Hz), 0.897-0.779 (dd, 6H, J=19.2, 6.8 Hz).
Primer NO (Referenca)
[0309]
(S)-etil 2-(terc-butoksikarbonilamino)-5-oksoheksanoat
[0310] Rastvor etil N-Boc (S)-piroglutamata (20.0 g, 77.7 mmol) je bio u anhidrovanom THF-u (150 mL) u posudi sa okruglim dnom sa dva grla pod argonom ohlađen do -40 °C.
Rastvor metil-magnezijum bromida (3.0 M u Etru, 28.5 mL, 85.5 mmol) je dodavan reakcionoj smeši u kapima tokom 30 minuta. Reakcija je mešana tokom 4 sata na -40 °C zatim tokom 1 sata na 0 °C. Reakcija je podeljena između etil acetata i zasićenog rastvora amonijum hlorida i zakiseljena sa 1 N HCl. Vodeni sloj je ekstrahovan još dva puta sa etilacetatom. Organski slojevi su kombinovani i osušeni sa natrijum sulfatom. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni (20% - 40% EtOAc/heksani) da se dobije (S)-etil 2-(terc-butoksikarbonilamino)-5-oksoheksanoat kao viskozno ulje i korišćen je direktno u sledećem koraku.
(S)-etil 5-metil-3,4-dihidro-2H-pirol-2-karboksilat
[0311] (S)-etil 2-(terc-butoksikarbonilamino)-5-oksoheksanoat u posudi od 1 L je tretiran sa rastvorom trifluoro sirćetna kiselina/ dihlorometan (1:1 smeša, 100 mL). Primećeno je penušanje i smeši je dozvoljeno da bude mešana tokom 4 sata na sobnoj temperaturi. Posle tog vremena isparljive supstance su uklonjene u vakuumu da se dobije (S)-etil 5-metil-3,4-dihidro-2H-pirol-2-karboksilat kao ulje, i koristi se direktno u sledećem koraku.
(2S,5S)-etil 5-metilpirolidin-2-karboksilat
[0312] Sirovi imin 3 u posudi od 1L je rastvoren sa etanolom (400 mL) je ispražnjen i napunjen sa argonom tri puta (3x). Paladijum na ugljeniku (prib.750 mg, 10% m/m, suvi) je dodat i gas je uklonjen iz reakcije i napunjena gasom vodonika (3x). Reakciji je dozvoljeno da se meša pod atmosferom vodonika tokom 16 sati. Smeša je filtrirana kroz čep celita i filtrat je koncentrovan in vacuo. Dietil etar je dodat ulju i formiran je talog. Smeša je filtrirana da se dobije (2S,5S)-etil 5-metilpirolidin-2-karboksilat, kao bela čvrsta supstanca (10.6 g, 67.4 mmol, 86.7% preko tri koraka).<1>H NMR (400 MHz, cdcl3) δ 4.48 (dd, 1H), 4.27 (q, 2H), 3.92 - 3.80 (m, 1H), 2.52 - 2.36 (m, 1H), 2.32 - 2.13 (m, 2H), 1.75 - 1.60 (m, 1H), 1.51 (d, 3H), 1.30 (t, 3H).
(2S,5S)-1-terc-butil 2-etil 5-metilpirolidin-1,2-dikarboksilat
[0313] Rastvoru (2S,5S)-etil 5-metilpirolidin-2-karboksilata (7.0 g, 44.5 mmol) u dihlorometanu (250 mL), ditercbutilanhidrid (10.7 g, 49.0 mmol), diizopropiletilamin (17.1 mL, 98.0 mmol) u kapima tokom 10 minuta, i dimetil amino piridin (0.27 g, 2.23 mmol) su dodati sukcesivno. Primećeno je penušanje i smeši je dozvoljeno da se meša tokom 16 sati na sobnoj temperaturi. Reakcija je oprana sa HCl (250 mL, od IN). Organski sloj je zatim osušen sa natrijum sulfatom. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni (5% - 25% EtOAc/heksani) da se dobije (2S,5S)-1-terc-butil 2-etil 5-metilpirolidin-1,2-dikarboksilat kao
14
ulje (6.46 g, 25.1 mmol, 56%). LCMS-ESI<+>: izračunato za C13H23NO4: 257.16 (M<+>); Pronađeno: 258.70 (M+H<+>).
(2S,5S)-1-(terc-butoksikarbonil)-5-metilpirolidin-2-karboksilna kiselina
[0314] Rastvoru (2S,5S)-1-terc-butil 2-etil 5-metilpirolidin-1,2-dikarboksilata (6.46 g, 25.1 mmol) u etanolu (20 mL) je dodat litijum hidroksid mono hidrat (2.11 g, 50.2 mmol) i dejonizovana voda (12mL). Smeši je dozvoljeno da se meša 16 sati zatim je podeljena između etilacetata i smeše zasićenog slanog rastvora i IN HCl u odnosu 1:1. Vodeni sloj je ekstrahovan još jednom sa etil acetatom. Organski slojevi su kombinovani, osušeni sa natrijum sulfatom i rastvarač je uklonjen in vacuo da se dobije (2S,5S)-1-(tercbutoksikarbonil)-5-metilpirolidin-2-karboksilna kiselina kao bela čvrsta supstanca (kvantitativno) i korišćena je direktno u sledećem koraku.
(2S,5S)-terc-butil 2-(hidroksimetil)-5-metilpirolidin-1-karboksilat
[0315] Rastvoru (2S,5S)-1-(terc-butoksikarbonil)-5-metilpirolidin-2-karboksilne kiseline (5.91 g, 25.8 mmol) u tetrahidrofuranu na 0 °C, je dodat boran u dimetilsulfidu (1.0 M, 3.4 mL, 34 mmol) u kapima. Reakcija je mešana tokom 4 sata na 0 °C zatim 18 sati na sobnoj temperaturi. Smeša je zatim ohlađena do 0 °C i metanol (70 mL) je dodat u kapima. Reakcija je zagrejana do sobne temperature i rastvarači su uklonjeni u vakuumu. Ostatak je prebačen u dihlorometan (200 mL) i ekstrahovan sa zasićenim natrijum bikarbonatom. Organski sloj je osušen sa natrijum sulfatom i rastvarač je uklonjen u vakuumu da se dobije (2S,5S)-terc-butil 2-(hidroksimetil)-5-metilpirolidin-1-karboksilat kao čisto ulje (5.15 g, 23.9 mmol, 93%) i korišćen je direktno u sledećem koraku.
(2S,5S)-terc-butil 2-formil-5-metilpirolidin-1-karboksilat
[0316] Rastvoru (2S,5S)-terc-butil 2-(hidroksimetil)-5-metilpirolidin-1-karboksilata (5.15 g, 23.9 mmol) u dihlorometanu, je dodat TEMPO (0.075 g, 0.48 mmol), natrijum bromid (0.246 g, 2.39 mmol) i natrijum bikarbonat (0.442 g, 5.26 mmol). Rastvor natrijum hipohlorita (2.67 g, 35.9 mmol) od 6% je dodat i bifazna smeša je snažno mešana tokom 2 sata na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je ekstrahovana dva puta sa dihlorometanom (2x100mL). Organski slojevi su kombinovani i oprani sa zasićenim rastvorom natrijum tiosulfata, osušeni sa natrijum sulfatom i rastvarač je uklonjen u vakuumu da se dobije (2S,5S)-terc-butil 2-formil-5-metilpirolidin-1-karboksilat (3.9 g, 18.29 mmol, 77%) kao blago obojeno ulje i korišćeno je direktno u sledećem koraku.
(2S,5S)-terc-butil 2-(1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidin-1-karboksilat
[0317] Rastvoru (2S,5S)-terc-butil 2-formil-5-metilpirolidin-1-karboksilata (3.9g, 18.30 mmol) u MeOH-u (15 mL) i amonijum hidroksidu (15 mL, 99.9%), glioksal (11.7 mL, 40% m/v u vodi, 102.40 mmol) je dodat u kapima. Bifazna smeša je postala narandžasta i mutna. Reakcija je mešana snažno preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen u vakuumu. Sirova smeša je ponovo rastvorena u etil acetatu i oprana sa vodom. Vodeni sloj je opran dodani put sa etil acetatom. Organski slojevi su kombinovani i oprani sa slanim rastvorom, osušeni sa natrijum sulfatom i rastvarač je uklonjen u vakuumu. Sirovi materijal je prečišćen kolonskom hromatografijom sa 85% do 100% etil acetata u heksanima da se dobije (2S,5S)-terc-butil 2-(1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidin-1-karboksilat kao prljavo bela čvrsta supstanca (3.47 g, 13.8 mmol, 75%). LCMS-ESI<+>: izračunato za C13H21N3O2: 251.16 (M<+>); Pronađeno: 252.20 (M+H<+>).
(2S,5S)-terc-butil 2-(4,5-dijodo-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidin-1-karboksilat [0318] Posuda sa okruglim dnom od 500 mL je napunjena sa (2S,5S)-terc-butil 2-(1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidin-1-karboksilatom (3.47 g, 13.8 mmol), jodom (7.7 g, 30.4 mmol) i natrijum karbonatom (4.54 g, 42.8 mmol). Dioksan (70 mL) i voda (45 mL) su dodati smeši i reakcija je snažno mešana preko noći u mraku. Reakcija je zatim podeljena između etil acetata i 10% vodenog rastvora natrijum tiosulfata i ekstrahovana. Vodeni sloj je ekstrahovan dodatni put sa etil acetatom. Organski slojevi su kombinovani, osušeni sa natrijum sulfatom i rastvarač je uklonjen u vakuumu. Sirovi materijal je filtriran kroz čep od silike sa 25% etil acetata u heksanima da se dobije (2S,5S)-terc-butil 2-(4,5-dijodo-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidin-1-karboksilat kao bela čvrsta supstanca (4.28 g, 8.50 mmol, 62%). LCMS-ESI<+>: izračunato za C13H19I2N3O2: 502.96 (M<+>); Pronađeno: 503.94 (M+H<+>).
(2S,5S)-terc-butil 2-(5-jodo-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidin-1-karboksilat
[0319] Rastvoru (2S,5S)-terc-butil 2-(4,5-dijodo-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidin-1-karboksilata (4.28 g, 8.50 mmol) u etanolu (75 mL) i vodi (75 mL), natrijum tiosulfat (10.72 g, 85.1 mmol) je dodat i reakciona smeša je mešana snažno tokom 1 sata na 100 °C, 16 sati na 90 °C, i 5 sati na 100 °C. Reakciona smeša je podeljena između etil acetata i vode. Vodeni sloj je opran dodatno sa etil acetatom i organski slojevi su kombinovani. Organski sloj je osušen sa natrijum sulfatom, koncentrovan i sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni da se dobije (2S,5S)-terc-butil 2-(5-jodo-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidin-1-karboksilat kao bela čvrsta supstanca (2.34 g, 6.20 mmol, 73%).<1>H NMR (400 MHz, cdcl3) δ 7.04 (s, 1H), 4.89 (dd, 1H), 3.92 (m, 1H), 2.91 (s, 1H), 2.18 - 2.06 (m, 2H), 1.78 (m, 1H), 1.52 (m, 1H), 1.48 (s, 9H), 1.13 (d, 3H).
14
(2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-jodo-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidin-1-il]-2-[(1-metoksi etenil)amino]-3-metilbutan-1-on
[0320] Posuda sa okruglim dnom je napunjena sa (2S,5S)-terc-butil 2-(5-jodo-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidin-1-karboksilatom (1.5 g, 3.98 mmol) i tretirana sa viškom hlorovodonične kiseline (100 mL od 4.0M u dioksanu). Smeša je mešana snažno tokom 3 sata prilikom kojih se formira talog i rastvarač je uklonjen u vakuumu. Smeši sirovog intermedijera, (S)-2-(metoksi karbonilamino)-3-metilbutanske kiseline (0.836 g, 4.77 mmol), HATU (1.81 g, 4.77 mmol) u dihlorometanu (25 mL), diizopropiletilamin (3.46 mL, 19.9 mmol) je zatim dodat u kapima i mešan je preko noći pod azotom. Reakciona smeša je podeljena etil acetatom i zasićenim natrijum bikarbonatom. Organski sloj je osušen sa natrijum sulfatom, rastvarač je uklonjen u vakuumu. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni da se dobije (2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-jodo-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidin-1-il]-2-[(1-metoksietenil)amino]-3-metilbutan-1-on kao bela čvrsta supstanca (1.63 g, 3.75 mmol, 94%). LCMS-ESI<+>: izračunato za C15H23IN4O3: 434.08 (M<+>); Pronađeno: 435.51 (M+H<+>).
Primer NP
[0321]
14
Metil{(2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2R)-2-[(metoksikarbonil)amino]-2-fenilacetil}-4-(metoksimetil)pirolidin-2-il]-1,11 dihidroizohromeno [4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat [0322] Sinteza ovog jedinjenja je pripremljena u skladu sa procedurom primera LR-1 sa sledećom modifikacijom. Tokom Suzuki kuplovanja, (2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-jodo-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidin-1-il]-2-[(1-metoksietenil)amino]-3-metilbutan-1-on je korišćen umesto (2S)-1-[(2S)-2-(5-bromo-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-il]-2-[(1-metoksietenil)amino]-3-metilbutan-1-ona. Sirovi materijal je prečišćen preparativnom HPLC da se dobije metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2R)-2-[(metoksikarbonil)amino]-2-fenilacetil}-4-(metoksi metil) pirolidin-2-il]-1,11 dihidroizohromeno [4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat kao bela čvrsta
14
supstanca (17 mg, 0.019 mmol, 17%).<1>H NMR (400 MHz, cd3od) δ 8.63 (s, 1H), 8.19 (d, 1H), 8.04 (m, 1H), 7.87 (m, 2H), 7.66 (m, 2H), 7.52 - 7.39 (m, 6H), 5.50 (m, 2H), 5.32 (s, 2H), 5.16 (m, 1H), 4.12 (m, 1H), 3.80 (m, 4H), 3.66 (s, 6H), 3.43 (m, 4H), 3.23 (s, 3H), 2.72-1.99 (m, 9H), 1.56 (d, 3H), 1.29 (m, 1H), 0.99 (d, 3H), 0.88 (d, 3H).
Primer NQ
[0323]
Metil{(2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S)-1-{(2R)-2-[(metoksikarbonil)amino]-2-fenilacetil}pirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat
14
[0324] Sinteza ovog jedinjenja je pripremljena u skladu sa procedurom primera LQ sa sledećom modifikacijom. Tokom Suzuki kuplovanja, (2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-jodo-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidin-1-il]-2-[(1-metoksietenil)amino]-3-metilbutan-1-on je korišćen umesto (2S)-1-[(2S)-2-(5-bromo-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-il]-2-[(1-metoksietenil)amino]-3-metilbutan-1-ona. Sirovi materijal je prečišćen preparativnom HPLC da se dobije metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S)-1-{(2R)-2-[(metoksikarbonil)amino]-2-fenilacetil}pirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat kao bela čvrsta supstanca (110 mg, 0.131 mmol, 57 %).<1>H NMR (400 MHz, cd3od) δ 8.65 (s, 1H), 8.21 (d, 1H), 8.04 (m, 2H), 7.91 (s, 1H), 7.81 (m, 1H), 7.67 (m, 2H), 7.46 (m, 6H), 5.59 (s, 1H), 5.50 (dd, 1H), 5.33 (s, 2H), 5.22 - 5.09 (m, 1H), 4.14 (m, 2H), 3.74 (s, 1H), 3.65 (m, 6H), 3.52 - 3.37 (m, 2H), 2.60 -1.89 (m, 11H), 1.56 (d, 3H), 1.29 (d, 1H), 0.99 (d, 3H), 0.88 (d, 3H).
Primer NR
[0325]
14
Metil[(2S)-1-{(2S,5S)-2-[5-(2-{(2S)-1-[(2R)-2-amino-2-fenilacetil]pirolidin-2-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-5-metilpirolidin-1-il}-3-metil-1-oksobutan-2-il]karbamat
[0326] Sinteza ovog jedinjenja je pripremljena u skladu sa Primerom NQ sa sledećim modifikacijama. Tokom amidnog kuplovanja, (R)-2-(terc-butoksikarbonilamino)-2-fenilsirćetna kiselina je korišćena umesto (R)-2-(metoksikarbonilamino)-2-fenilsirćetne kiseline. Ovo je zatim tretirano sa viškom hlorovodonične kiseline (15 mL, 4.0 M u Dioksanu) tokom 2 sata. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću HPLC da se dobije metil [(2S)-1-{(2S,5S)-2-[5-(2-{(2S)-1-[(2R)-2-amino-2-fenilacetil]pirolidin-2-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-5-metilpirolidin-1-il}-3-metil-1-oksobutan-2-il]karbamat kao bela čvrsta supstanca (153 mg, 0.196 mmol, 74%).
<1>H NMR (400 MHz, cd3od) δ 8.63 (s, 1H), 8.20 (d, 1H), 7.99 (m, 1H), 7.93 (m, 2H), 7.80 (m, 2H), 7.72 - 7.64 (m, 2H), 7.63 - 7.52 (m, 5H), 5.52 (dd, 1H), 5.44 (m, 1H), 5.33 (s, 2H), 5.21 - 5.10 (m, 1H), 4.80 (m, 2H), 4.14 (m, 1H), 4.02 (m, 1H), 3.75 (s, 1H), 3.67 (s, 3H), 3.12 (dd, 1H), 2.72 - 2.13 (m, 7H), 2.00 (m, 3H), 1.56 (d, 3H), 1.30 (d, 1H), 0.98 (d, 3H), 0.88 (d, 3H).
Primer OE (Referenca)
[0327]
(2S,5S)-Etil 1-((S)-2-(metoksikarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirolidin-2-karboksilat
[0328] (2S,5S)-Etil 5-metilpirolidin-2-karboksilat-TFA (10.0 g, 39.3 mmol), (S)-2-(metoksi karbonilamino)-3-metilbutanska kiselina (6.88 g, 39.3 mmol) i HATU (14.9 g, 39.3 mmol) su
1
kombinovani u DMF-u (100 mL) i DIPEA (15.0 mL, 86.5 mmol) je dodat. Nakon mešanja tokom 1 h na ST, reakciona smeša je razblažena sa EtOAc-om. Organska faza je oprana sukcesivno sa 10% HCl, zasićenim vodenim NaHCO3i slanim rastvorom, zatim osušena preko MgSO4, filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom da se dobije (2S,5S)-etil 1-((S)-2-(metoksi karbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirolidin-2-karboksilat. Sirovi materijal je preuzet bez dodatnog prečišćavanja.
(2S,5S)-1-((S)-2-(Metoksikarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirolidin-2-karboksilna kiselina
[0329] (2S,5S)-Etil 1-((S)-2-(metoksikarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirolidin-2-karboksilat (39.3 mmol, pretpostavljajući potpunu konverziju iz prethodne transformacije) je suspendovan u MeOH-u (200 mL) i vodeni LiOH (1.0 M, 100 mL, 100 mmol) je dodat. Reakciona smeša je mešana o/n, zatim je koncentrovana pod sniženim pritiskom da se ukloni većina MeOH. Vodeni rastvor je opran 2x sa DCM-om pre nego što je zakiseljena do pH∼1-2 sa 10% HCl. Kisela vodena faza je zatim ekstrahovana 5x sa EtOAc-om. Kombinovani EtOAc ekstrakti su osušeni preko MgSO4filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom da se dobije (2S,5S)-1-((S)-2-(Metoksikarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirolidin-2-karboksilna kiselina (6.89 g, 56% preko 2 koraka).
Primer OF
[0330]
1 1
��
3-Vinil-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-8(9H)-on
[0331] Posuda od 500 mL sa okruglim dnom sa 3 grla osušena u mikrotalasnoj je ohlađena pod Ar, zatim je napunjena sa 3-Hloro-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-8(9H)-onom (12.0 g, 42.1 mmol), kalijum viniltrifluoroboratom (8.47 g, 6.32 mmol), Pd(OAc)2(473 mg, 2.11 mmol), SPhos (1.74 g, 4.25 mmol), K2CO3(17.5 g, 126 mmol) i anhidrovanim propanolom (120 mL). Reakciona smeša je poprskana sa Ar tokom 16 min, zatim je zagrevana do refluksa tokom 5.5 h. Nakon završetka, reakciona smeša je ohlađena do ST i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je supsendovan u DCM-u, zatim je opran sa H2O i slanim rastvorom. Organski rastvor je osušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Dobijeni ostatak je dalje prečišćen preko silika čepa, eluiranjem sa DCM-om da se dobije 3-vinil-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-8(9H)-on (10.2 g, 87%).
3-(2-Bromoacetil)-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-8(9H)-on
[0332] 3-Vinil-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-8(9H)-on (9.98 g, 36.1 mmol) je rastvoren u zasićenom rastvoru THF (70 mL), DMSO (70 mL) i H2O (35 mL). NBS (6.75 g, 37.9 mmol) je dodat u jednom delu i reakciona smeša je mešana na ST tokom 33 min. Nakon završetka, reakcioni medijum je razblažen sa EtOAc-om i opran dva puta sa H2O i jednom sa
1
slanim rastvorom. Organska faza je osušena preko MgSO4, filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Sirovi bromohidrin koji je dobijen je suspendovan u DCM-u (200 mL) i tretiran sa aktiviranim MnO2-om (62.7 g, 722 mmol). Nakon mešanja tokom 15 h na ST, reakciona smeša je filtrirana preko celita i filter pogača je isprana nekoliko puta sa DCM-om. Kombinovani filtrat (̴400 mL) je tretiran sa MeOH-om (̴100 mL) i smeša je postepeno koncentrovana pod sniženim pritiskom, dovodeći do taloženja čvrstog materijala iz rastvora. Kada zapremina tečnosti dostigne ∼200 mL, čvrsta supstanca je filtrirana i isprana sa MeOH-om. Niz koncentracija/taloženje/filtracija/ispiranje je sproveden još 2x, što je rezultiralo prikupljanjem 3 prinosa praškastog 3-(2-bromoacetil)-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-8(9H)-ona (7.49 g, 56% preko 2 koraka).
(4S)-1-terc-Butil 2-(2-okso-2-(8-okso-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-3-il)etil) 4-(metoksimetil)pirolidin-1,2-dikarboksilat
[0333] 3-(2-Bromoacetil)-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-8(9H)-on (7.47 g, 20.1 mmol) i (2S,4S)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-(metoksimetil)pirolidin-2-karboksilna kiselina (5.22 g, 20.1 mmol) su suspendovani u 2-Me-THF-u (75 mL) i tretirani sa Cs2CO3-om (3.27 g, 10.1 mmol). Nakon 4 h na ST, reakciona smeša je razblažena sa razblažena sa DCM-om. Organski sloj je opran sa H2O. Vodeni sloj je zatim ponovo ekstrahovan 2x sa DCM-om. Kombinovane organske supstance su osušene preko MgSO4, filtrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silika koloni (10% do 50% EtOAc/DCM) da se dobije (4S)-1-terc-butil 2-(2-okso-2-(8-okso-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-3-il)etil) 4-(metoksimetil)pirolidin-1,2-dikarboksilat (7.73 g, 70%).
(2S,4S)-2-(2-(9-Bromo-8-okso-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-3-il)-2-oksoetil) 1-terc-butil 4-(metoksimetil)pirolidin-1,2-dikarboksilat
[0334] (4S)-1-terc-Butil 2-(2-okso-2-(8-okso-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-3-il)etil) 4-(metoksimetil)pirolidin-1,2-dikarboksilat (7.66 g, 13.9 mmol) je rastvoren u rastvoru DCM (100 mL) i MeOH (40 mL), zatim tretiran sa piridinijum tribromidom (4.90 g, 15.3 mmol). Nakon mešanja na ST tokom 1.75 h, reakciona smeša je razblažena sa DCM-om i oprana sukcesivno sa 10% HCl, zasićenim vodenim NaHCO3i slanim rastvorom. Organska faza je osušena preko MgSO4, filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom i sirovi materijal je preuzet bez dodatnog prečišćavanja.
(2R,4R)-1-terc-Butil 2-(2-(9-((2S,5S)-1-((S)-2-(metoksikarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirolidin-2-karboniloksi)-8-okso-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-3-il)-2-oksoetil) 4-(metoksimetil)pirolidin-1,2-dikarboksilat
1 4
[0335] (2S,4S)-2-(2-(9-Bromo-8-okso-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-3-il)-2-oksoetil) 1-terc-butil 4-(metoksimetil)pirolidin-1,2-dikarboksilat (8.76 g, 13.94 mmol) je tretiran sa rastvorom (2S,5S)-1-((S)-2-(metoksikarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirolidin-2-karboksilne kiseline (6.85 g, 23.92 mmol) u 2-Me-THF-u (70 mL) i Cs2CO3-u (3.63 g, 11.15 mmol). Mešana reakciona smeša je zagrejana do 50 °C tokom 20 h, zatim je ohlađena do ST i razblažena sa EtOAc-om. Organska faza je oprana sa H2O i slanim rastvorom, zatim osušena preko MgSO4, filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silika koloni (0% do 30% MeOH/EtOAc) da se dobije (2R,4R)-1-terc-butil 2-(2-(9-((2S,5S)-1-((S)-2-(metoksikarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirolidin-2-karboniloksi)-8-okso-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-3-il)-2-oksoetil) 4-(metoksimetil)pirolidin-1,2-dikarboksilat (10.47 g, 90%).
terc-Butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidin-2-il}-1,4,5,11-tetrahidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilat
[0336] (2R,4R)-1-terc-Butil 2-(2-(9-((2S,5S)-1-((S)-2-(metoksikarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirolidin-2-karboniloksi)-8-okso-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-3-il)-2-oksoetil) 4-(metoksimetil)pirolidin-1,2-dikarboksilat (10.47 g, 12.56 mmol) i NH4OAc (50.9 g, 660 mmol) su suspendovani u rastvoru smeše PhMe/2-metoksi etanol u odnosu 10:1 (132 mL). Mešana reakciona smeša je zagrejana do 110 °C tokom 4.5 h, zatim je ohlađena do ST i razblažena sa EtOAc-om. Organska faza je oprana 3x sa zasićenim vodenim NaHCO3, zatim osušena preko MgSO4, filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silika koloni (0% do 30% MeOH/EtOAc) da se dobije terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidin-2-il}-1,4,5,11-tetrahidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilat (8.33 g, 84%).
terc-Butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidin-2-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoksi metil)pirolidin-1-karboksilat
[0337] terc-Butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidin-2-il}-1,4,5,11-tetrahidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilat (8.33 g, 1.049 mmol) je suspendovan u DCM-u i aktivirani MnO2(55.0 g, 630 mmol) je dodat u jednom delu. Nakon 13 h, MeOH (200 mL) je
1
dodat i gusta masa je filtrirana preko celita. Materijal koji je zaostao na filteru je opran sa MeOH-om (600 mL) i filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silika koloni (0% do 45% MeOH/EtOAc) da se dobije tercbutil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidin-2-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoksi metil)pirolidin-1-karboksilat (4.85 g, 58%).
Metil{(2S,3S)-1-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-5-metilpirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoksimetil)pirolidin-1-il]-3-metil-1-oksopentan-2-il}karbamat
[0338] terc-Butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidin-2-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilat (179 mg, 0.226 mmol) je rastvoren u DCM-u (4 mL) i HCl (4.0 M u dioksanu, 1 mL) je dodat. Reakciona smeša je mešana tokom 1 h pri ST zatim je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Dobijeni ostatak je tretiran sa (2S,3S)-2-(metoksi karbonilamino)-3-metilpentanskom kiselinom (51 mg, 0.27 mmol), HATU (95 mg, 0.25 mmol), DMF (2 mL) i DIPEA (0.39 mL, 2.3 mmol). Nakon mešaanja tokom 6 min, reakcija je kvenčovana sa H2O, filtrirana i prečišćena pomoću HPLC na reverznoj fazi da se dobije metil {(2S,3S)-1-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-5-metilpirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoksi metil)pirolidin-1-il]-3-metil-1-oksopentan-2-il}karbamat (116 mg, 59%). MS (ESI) m/z 864 [M H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, cd3od) δ 8.57 (d, J = 14.7 Hz, 1H), 8.45 (s, 1H), 8.20 (d, J = 14.4 Hz, 1H), 8.15 - 7.98 (m, 2H), 7.91 (dd, J = 21.8, 14.1 Hz, 2H), 7.85 - 7.69 (m, 2H), 7.69 - 7.48 (m, 2H), 5.42 - 5.12 (m, 5H), 4.34 (dd, J = 22.3, 13.7 Hz, 1H), 4.30 - 4.10 (m, 2H), 3.87 - 3.73 (m, 1H), 3.73 - 3.63 (m, 7H), 3.62 - 3.48 (m, 2H), 3.48 - 3.38 (m, 4H), 3.35 (s, 3H), 2.95 - 2.70 (m, 1H), 2.70 - 2.55 (m, 2H), 2.55 - 2.20 (m, 2H), 2.20 - 1.91 (m, 3H), 1.77 (d, J = 42.0 Hz, 1H), 1.65 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 1.43 (t, J = 24.6 Hz, 1H), 1.28 (d, J = 6.2 Hz, 1H), 1.23 - 1.01 (m, 3H), 0.98 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 0.90 (dd, J = 13.1, 5.9 Hz, 10H).
Primer OG
[0339]
1
[0340] Metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-aloizoleucil]-4-(metoksimetil)pirolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5-metilpirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat je pripremljen od terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidin-2-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilata pomoću iste metode koja je upotrebljena u sintezi {(2S,3S)-1-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-5-metilpirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoksimetil)pirolidin-1-il]-3-metil-1-oksopentan-2-il}karbamata, zamenjivanjem (2S,3S)-2-(metoksikarbonilamino)-3-metilpentanske kiseline sa (2S,3R)-2-(metoksikarbonilamino)-3-metilpentanskom kiselinom. MS (ESI) m/z 864 [M H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, cd3od) δ 8.62 - 8.41 (m, 1H), 8.22 (s, 1H), 8.07 (dt, J = 20.1, 10.0 Hz, 1H), 7.89 (dt, J = 35.6, 15.6 Hz, 2H), 7.77 (dd, J = 20.3, 7.0 Hz, 2H), 7.68 - 7.48 (m, 2H), 5.95 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 5.42 - 5.13 (m, 4H), 4.47 (t, J = 5.5 Hz, 1H), 4.40 - 4.09 (m, 2H), 3.80 - 3.73 (m, 1H), 3.73 - 3.62 (m, 6H), 3.57 (dt, J = 16.1, 9.7 Hz, 2H), 3.40 (s, 3H), 3.34 (d, J = 7.5 Hz,
1
1H), 2.81 (dd, J = 18.4, 12.5 Hz, 1H), 2.63 (td, J = 13.3, 6.8 Hz, 2H), 2.55 - 2.18 (m, 2H), 2.16 - 1.77 (m, 4H), 1.65 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 1.50 - 1.31 (m, 1H), 1.26 (dd, J = 15.6, 6.7 Hz, 2H), 1.17 - 1.03 (m, 2H), 0.98 (dd, J = 6.7, 4.5 Hz, 5H), 0.89 (dd, J = 15.5, 7.8 Hz, 3H), 0.86 - 0.74 (m, 3H).
Primer OH
[0341]
Metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-5-metilpirolidin-2-il]-1,4,5,11-tetrahidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoksimetil)pirolidin-1-il]-2-okso-1-feniletil}karbamat
[0342] terc-Butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidin-2-il}-1,4,5,11-tetrahidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilat (102 mg, 0.128 mmol) je rastvoren u DCM-u (4 mL) i HCl (4.0 M u dioksanu, 2.0 mL, 8.0 mmol) je dodat. Nakon mešanja na ST tokom 30 min, rastvor je koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je tretiran sa (R)-2-(metoksikarbonilamino)-2-fenilsirćetnom kiselinom (29 mg, 0.141 mmol), COMU (60 mg, 0.141 mmol), DMF (3.0 mL) i DIPEA (0.223 mL, 1.28 mmol). Nakon mešanja na ST tokom
1
20 min, reakciona smeša je razblažen sa EtOAc-om. Organski rastvor je opran sa zasićenim vodenim NaHCO3i slanim rastvorom, zatim osušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirov materijal je prečišćen pomoću HPLC na reverznoj fazi da se dobije metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-5-metilpirolidin-2-il]-1,4,5,11-tetrahidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoksimetil)pirolidin-1-il]-2-okso-1-feniletil}karbamat kao bis-TFA so (82.4 mg, 60%). MS (ESI) m/z 866 [M H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, cd3od) δ 7.94 - 7.67 (m, 4H), 7.59 (d, J = 9.1 Hz, 1H), 7.52 (s, 1H), 7.48 - 7.33 (m, 4H), 7.11 (d, J = 18.7 Hz, 1H), 5.68 (d, J = 6.3 Hz, 1H), 5.48 - 5.33 (m, 1H), 5.23 (dd, J = 24.1, 15.7 Hz, 1H), 5.17 - 5.03 (m, 3H), 4.22 (dd, J = 17.0, 9.6 Hz, 1H), 4.16 - 4.01 (m, 1H), 3.91 (d, J = 24.1 Hz, 1H), 3.83 - 3.68 (m, 1H), 3.68 - 3.59 (m, 3H), 3.59 - 3.49 (m, 3H), 3.38 (ddd, J = 15.9, 9.6, 5.7 Hz, 2H), 3.28 - 3.14 (m, 5H), 3.10 (dd, J = 14.0, 8.2 Hz, 1H), 3.00 (dd, J = 17.8, 9.6 Hz, 1H), 2.92 (dd, J = 14.5, 6.7 Hz, 1H), 2.73 - 2.41 (m, 2H), 2.40 -2.11 (m, 2H), 2.11 - 1.83 (m, 2H), 1.54 (t, J = 9.7 Hz, 2H), 1.24 (d, J = 6.2 Hz, 1H), 1.06 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 0.99 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 0.94 (d, J = 6.6 Hz, 2H), 0.85 (d, J = 6.7 Hz, 2H). Primer OI
[0343]
1
[0344] terc-Butil (2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-(metoksimetil)pirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilat je pripremljen od (2S,4S)-2-(2-(9-bromo-8-okso-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-3-il)-2-oksoetil) 1-terc-butil 4-(metoksimetil)pirolidin-1,2-dikarboksilata pomoću iste metode koja je upotrebljena u sintezi terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidin-2-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilata, zamenjivanjem (2S,5S)-1-((S)-2-(metoksikarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirolidin-2-karboksilne kiseline sa (2S,4S)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-(metoksimetil)pirolidin-2-karboksilnom kiselinom.
Metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4-(metoksimetil)pirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoksimetil)pirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat
[0345] terc-Butil (2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-(metoksimetil)pirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilat (137 mg, 0.179 mmol) je rastvoren u DCM-u (5 mL) i HCl (4.0 M u dioksanu, 1 mL) je dodat. Nakon mešanja na ST tokom 1.5 h, reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Sirov ostatak je tretiran sa (S)-2-(metoksikarbonilamino)-3-metilbutanskom kiselinom (69 mg, 0.39 mmol), HATU (149 mg, 0.393 mmol), DMF (2.0 mL) i DIPEA (0.31 mL, 1.8 mmol). Nakon mešanja tokom 15 min na ST, reakciona smeša je kvenčovana sa vodom i prečišćena pomoću HPLC da se dobije metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4-(metoksimetil)pirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoksimetil)pirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat (123 mg). MS (ESI) m/z 880 [M H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, cd3od) δ 8.48 (s, 1H), 8.05 (t, J = 11.2 Hz, 1H), 7.92 (dd, J = 19.7, 10.1 Hz, 2H), 7.74 (s, 2H), 7.59 - 7.44 (m, 2H), 5.49 (s, 1H), 5.40 (dt, J = 16.3, 8.1 Hz, 1H), 5.31 - 5.15 (m, 3H), 4.47 - 4.10 (m, 4H), 3.86 - 3.44 (m, 12H), 3.39 (dd, J = 13.2, 7.1 Hz, 6H), 2.94 - 2.57 (m, 4H), 2.25 - 1.94 (m, 4H), 1.02 - 0.82 (m, 12H).
Primer OJ
[0346]
1
[0347] Metil {(2S,3S)-1-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S,3S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilpentanoil}-4-(metoksimetil)pirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoksimetil)pirolidin-1-il]-3-metil-1-oksopentan-2-il}karbamat je pripremljen od terc-Butil (2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-(metoksimetil)pirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilata korišćenjem iste metode upotrebljene u sintezi metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4-(metoksimetil)pirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoksimetil)pirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamata, zamenjivanjem (S)-2-(metoksikarbonilamino)-3-metilbutanske kiseline sa (2S,3S)-2-(metoksikarbonilamino)-3-metilpentanskom kiselinom. MS (ESI) m/z 908 [M H]<+>.
Primer OK
[0348]
1 1
[0349] terc-Butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]pirolidin-2-il}-1,4,5,11-tetrahidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilat je sintetisan od (2S,4S)-2-(2-(9-bromo-8-okso-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-3-il)-2-oksoetil) 1-terc-butil 4-(metoksimetil)pirolidin-1,2-dikarboksilata korišćenjem istih metoda opisanih za sintezu tercbutil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidin-2-il}-1,4,5,11-tetrahidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilata, supstituisanjem (S)-1-((S)-2-(metoksikarbonilamino)-3-metilbutanoil)pirolidin-2-karboksilne kiseline za (2S,5S)-1-((S)-2-(metoksikarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirolidin-2-karboksilnu kiselinu.
[0350] Metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S)-1-{(2S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirolidin-2-il]-1,4,5,11-tetrahidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-
1 2
il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoksimetil)pirolidin-1-il]-2-okso-1-feniletil}karbamat je sintetisan od terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2- {(2S)-1 -[N-(metoksikarbonil)-L-valil]pirolidin-2-il}-1,4,5,11-tetrahidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilata korišćenjem iste metode upotrebljene za sintezu metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-5-metilpirolidin-2-il]-1,4,5,11-tetrahidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoksimetil)pirolidin-1-il]-2-okso-1-feniletil}karbamata supstituisanjem terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]pirolidin-2-il}-1,4,5,11-tetrahidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilata za terc-Butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidin-2-il}-1,4,5,11-tetrahidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilat. MS (ESI) m/z 871 [M H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, cd3od) δ 7.87 (ddd, J = 20.5, 15.3, 6.8 Hz, 4H), 7.65 (s, 1H), 7.50 - 7.38 (m, 5H), 7.17 (s, 1H), 5.41 (d, J = 24.5 Hz, 1H), 5.28 (t, J = 8.3 Hz, 1H), 5.20 (d, J = 7.3 Hz, 3H), 4.24 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 4.12 (d, J = 10.3 Hz, 1H), 4.03 - 3.94 (m, 1H), 3.89 (dd, J = 15.4, 8.6 Hz, 1H), 3.77 (t, J = 9.6 Hz, 1H), 3.72 - 3.64 (m, 4H), 3.63 - 3.52 (m, 4H), 3.43 (qd, J = 9.5, 5.6 Hz, 3H), 3.30 (s, 3H), 3.24 - 3.08 (m, 2H), 2.97 (dd, J = 11.6, 5.4 Hz, 2H), 2.59 (dt, J = 21.1, 7.8 Hz, 3H), 2.29 (s, 1H), 2.24 - 2.14 (m, 2H), 2.11 - 1.85 (m, 2H), 0.92 (dd, J = 15.8, 6.7 Hz, 6H).
Primer OL
[0351]
1
[0352] terc-Butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]pirolidin-2-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilat je pripremljen u skladu sa metodom opisanom za sintezu terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidin-2-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilata, supstituisanjem terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]pirolidin-2-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilata za terc-Butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidin-2-il}-1,4,5,11-
1 4
tetrahidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilat.
[0353] Metil {(2S)-1-[(2S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-[(2R)-2-amino-2-fenilacetil]-4-(metoksimetil)pirolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)pirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat je pripremljen u skladu sa metodom opisanom za sintezu metil (S)-1-((2S,4S)-2-(2'-((2S,4S)-1-((R)-2-amino-2-fenilacetil)-4-(metoksimetil)pirolidin-2-il)-1H,1'H-7,7'-binafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-metilpirolidin-1-il)-3-metil-1-oksobutan-2-ilkarbamata, supstituisanjem metil (S)-1-((2S,4S)-2-(2'-((2S,4S)-1-((R)-2-terc-butoksikarbonilamino-2-fenilacetil)-4-(metoksimetil)pirolidin-2-il)-1H,1'H-7,7'-binafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-metilpirolidin-1-il)-3-metil-1-oksobutan-2-ilkarbamata sa
[0354] terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]pirolidin-2-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilatom. MS (ESI) m/z 811 [M H]<+>.
Primer OM
[0355]
1
[0356] terc-Butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,4,5,11-tetrahidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilat je sintetisan od 3-(2-bromoacetil)-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-8(9H)-ona, pomoću istih metoda upotrebljenih u sintezi terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidin-2-il}-1,4,5,11-tetrahidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilata, supstituisanjem (2S,5S)-1-((S)-2-(metoksikarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirolidin-2-karboksilne kiseline za (2S,4S)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-(metoksimetil)pirolidin-2-karboksilnu kiselinu i (2S,4S)-1-(tercbutoksikarbonil)-4-(metoksimetil)pirolidin-2-karboksilne kiseline za (2S,5S)-1-((S)-2-(metoksikarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirolidin-2-karboksilnu kiselinu.
1
[0357] terc-Butil (2S,4S)-2-[9-(2- {(2S,5S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilat je pripremljen u skladu sa metodom opisanom za sintezu terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidin-2-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilata, supstituisanjem terc-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,4,5,11-tetrahidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilata za terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidin-2-il}-1,4,5,11-tetrahidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilat.
[0358] Metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,5S)-1-{(2S,3R)-3-metoksi -2-[(metoksikarbonil)amino]butanoil}-4-(metoksimetil)pirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat je pripremljen od terc-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilata u skladu sa istom metodom koja je opisana za sintezu metil (S)-1-((2S,4S)-2-(2'-((2S,4S)-1-((2S,3R)-2-metoksikarbonilamino-3-metoksi butanoil)-4-(metoksimetil)pirolidin-2-il)-1H,1'H-7,7'-binafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-metilpirolidin-1-il)-3-metil-1-oksobutan-2-ilkarbamata, supstituisanjem (2S,4S)-terc-Butil 2-(2'-((2S,4S)-1-((S)-2-(metoksikarbonilamino)-3-metilbutanoil)-4-metilpirolidin-2-il)-1H,1'H-7,7'-binafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilata sa terc-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilatom. MS (ESI) m/z 866 [M H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, cd3od) δ 8.44 (d, J = 19.8 Hz, 1H), 8.02 (t, J = 8.6 Hz, 2H), 7.98 - 7.81 (m, 3H), 7.74 (dd, J = 22.2, 13.6 Hz, 2H), 7.63 -7.41 (m, 2H), 5.79 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 5.42 (dt, J = 43.3, 21.5 Hz, 2H), 5.31 - 5.10 (m, 5H), 4.85 - 4.70 (m, 1H), 4.52 (d, J = 3.8 Hz, 1H), 4.31 (t, J = 8.2 Hz, 1H), 4.17 (dd, J = 20.8, 8.8 Hz, 1H), 3.80 (dt, J = 19.0, 7.3 Hz, 2H), 3.73 - 3.63 (m, 7H), 3.63 - 3.49 (m, 3H), 3.39 (d, J = 9.7 Hz, 4H), 3.35 (s, 5H), 3.28 (d, J = 4.4 Hz, 3H), 2.84 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 2.72 (dd, J = 12.5, 6.6 Hz, 1H), 2.59 - 2.45 (m, 1H), 2.45 - 2.11 (m, 4H), 2.11 - 1.82 (m, 2H), 1.56 (d, J =
1
6.6 Hz, 3H), 1.35 - 1.21 (m, 1H), 1.22 - 1.12 (m, 4H), 1.10 - 1.01 (m, 2H), 0.99 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 0.91 (d, J = 6.7 Hz, 3H).
Primer ON
[0359]
[0360] Metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,5S)-1-{(2S,3S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilpentanoil}-4-(metoksimetil)-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat je pripremljen u skladu sa metodom opisanom za sintezu metil {(2S,3S)-1-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S,3S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilpentanoil}-4-(metoksimetil)pirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoksimetil)pirolidin-1-il]-3-metil-1-oksopentan-2-il}karbamata supstituisanjem terc-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]pirolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilata za terc-Butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidin-2-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilat. MS (ESI) m/z 863 [M H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, cd3od) δ 8.43 (d, J = 24.6 Hz, 1H), 8.01 (dt, J = 16.1, 8.0 Hz, 1H), 7.95 - 7.78 (m, 2H), 7.77 - 7.64 (m, 2H), 7.59 - 7.41 (m, 2H), 5.79 (d, J = 5.8 Hz, 1H), 5.39 (dt, J = 46.2, 23.1 Hz, 1H), 5.27 - 5.07 (m, 3H), 4.85 - 4.72 (m, 1H), 4.42 (t, J = 8.6 Hz, 1H), 4.31 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 4.17 (dd, J = 19.7, 8.7 Hz, 1H), 3.81 (dd, J = 23.6, 13.3 Hz, 1H), 3.69 (d, J = 10.0 Hz, 5H), 3.60 (dd, J = 14.7, 7.8 Hz, 2H), 3.42 (s, 3H), 3.17 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 3.07 (s, 1H), 2.99 - 2.91 (m, 1H), 2.85 (s, 1H), 2.73 (dd, J = 12.5, 6.4 Hz, 1H), 2.62 - 2.48 (m, 1H), 2.45 - 2.14 (m, 3H), 2.10 - 1.91 (m, 2H), 1.83 (s, 1H), 1.57 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 1.44 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 1.34 - 1.23 (m, 1H), 1.20 - 0.96 (m, 5H), 0.90 (dt, J = 14.8, 6.7 Hz, 9H).
1
Primer OO (Referenca)
[0361]
[0362] Metil {(2S)-1-[(2S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-[(2R)-2-amino-2-fenilacetil]-4-(metoksimetil)piroldin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat je pripremljen u skladu sa metodom opisanom za sintezu metil (S)-1-((2S,4S)-2-(2'-((2S,4S)-1-((R)-2-amino-2-fenilacetil)-4-(metoksimetil)pirolidin-2-il)-1H,1'H-7,7'-binafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-metilpirolidin-1 -il)-3 -metil-1 -oksobutan-2-ilkarbamata, supstituisanjem terc-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]pirolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilata za (2S,4S)-terc-butil 2-(2'-((2S,4S)-1-((S)-2-(metoksikarbonilamino)-3-metilbutanoil)-4-metilpirolidin-2-il)-1H,1'H-7,7'-binafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilat. MS (ESI) m/z 811 [M H]<+>.
1
Primer OP
[0363]
[0364] Metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-5-metilpirolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,4,5,11-tetrahidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoksimetil)pirolidin-1-il]-2-okso-1-feniletil}karbamat je sintetisan u skladu sa protokolom opisanim za pripremanje metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S)-1-{(2S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirolidin-2-il]-1,4,5,11-tetrahidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoksimetil)pirolidin-1-il]-2-okso-1-feniletil}karbamata, supstituisanjem terc-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,5S)-1 -[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,4,5,11-tetrahidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilata za terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]pirolidin-2-il}-1,4,5,11 tetrahidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilat. MS (ESI) m/z 886 [M H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, cd3od) δ 8.02 - 7.85 (m, 2H), 7.85 - 7.68 (m, 2H), 7.58 (d, J = 21.5 Hz, 1H), 7.55 - 7.35 (m, 4H), 7.31 (d, J = 13.6 Hz, 1H), 5.43 (d, J = 19.1 Hz, 1H), 5.28 (t, J = 8.3 Hz, 1H), 5.25 - 5.10 (m, 3H), 4.13 (t, J = 9.5 Hz, 1H), 3.93 - 3.54 (m, 7H), 3.42 (qd, J = 9.5, 5.5 Hz, 2H), 3.34 (d,
1
J = 7.9 Hz, 1H), 3.28 (s, 3H), 3.19 (t, J = 7.8 Hz, 2H), 3.00 (t, J = 7.8 Hz, 2H), 2.74 - 2.46 (m, 3H), 2.44 - 2.15 (m, 2H), 2.12 - 1.86 (m, 2H), 1.56 (d, J = 6.7 Hz, 2H), 1.29 (d, J = 6.3 Hz, 1H), 1.15 - 1.01 (m, 1H), 0.98 (d, J = 6.7 Hz, 2H), 0.88 (d, J = 6.8 Hz, 2H).
Primer OQ (Referenca)
[0365]
1 1
(2S,4S)-1-Terc-butil 2-(3-hloro-8-okso-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-9-il) 4-etoksipirolidin-1,2-dikarboksilat
1 2
[0366] U gustu masu 9-bromo-3-hloro-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-8(9H)-ona (2.50 g, 6.8 mmol) u MeCN-u (20 mL) je dodata (2S,4S)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-etoksipirolidin-2-karboksilna kiselina (2.68 g, 10.3 mmol) i DIPEA (1.3 mL, 7.5 mmol). Reakcija je zagrejana uz mešanje do 50 °C tokom 18 h. Reakcija je zatim ohlađena do sobne temperature i razblažena sa EtOAc-om. Rastvor je opran sa HCl (1N) i slanim rastvorom. Vodeni slojevi su povratno ekstrahovani sa EtOAc-om i dobijeni organski slojevi su kombinovani, osušeni (Na2SO4) i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirov ostatak je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika gelu (15% do 50 % EtOAc/Heksani) da se dobije (2S,4S)-1-terc-butil 2-(3-hloro-8-okso-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-9-il) 4-etoksipirolidin-1,2-dikarboksilat (2.08 g, 56%).
Terc-butil (2S,4S)-2-(9-hloro-1,4,5,11-tetrahidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-etoksipirolidin-1-karboksilat
[0367] U rastvor (2S,4S)-1-terc-butil 2-(3-hloro-8-okso-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-9-il) 4-etoksipirolidin-1,2-dikarboksilata (2.08 g, 3.8 mmol) u smeši toluena (30 mL) i metoksi etanola (4 mL) je dodat amonijum acetat (2.90 g, 37.7 mmol). Rastvor je zagrejan uz mešanje do 80 °C tokom 18 h. Reakcija je zatim ohlađena do sobne temperature i razblažena sa EtOAc-om. Rastvor je opran sa slanim rastvorom, i dobijeni vodeni sloj je povratno ekstrahovan sa EtOAc-om. Dobijeni organski slojevi su kombinovani, osušeni (Na2SO4), i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirov ostatak je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika gelu (10% do 75 % EtOAc(m/5% MeOH)/Heksani) da se dobije terc-butil (2S,4S)-2-(9-hloro-1,4,5,11-tetrahidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-etoksipirolidin-1-karboksilat (0.99 g, 50%).
Terc-butil (2S,4S)-2-(9-hloro-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-etoksipirolidin-1-karboksilat
[0368] U rastvor (2S,4S)-2-(9-hloro-1,4,5,11-tetrahidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-etoksipirolidin-1-karboksilata (0.99 g, 1.9 mmol) u CH2Cl2-u (18 mL) je dodat MnO2(4.52 g, 52.0 mmol). Dobijena gusta masa je mešana na sobnoj temperaturi tokom 18 h. Reakcija je filtrirana kroz celit, oprana sa CH2Cl2-om, i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Sirov ostatak je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika gelu (10% do 75 % EtOAc(m/5% MeOH)/Heksani) da se dobije terc-butil (2S,4S)-2-(9-hloro-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-etoksipirolidin-1-karboksilat (0.71 g, 72%)
1
Metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2-(9-hloro-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-etoksipirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat
[0369] U rastvor (2S,4S)-2-(9-hloro-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-etoksipirolidin-1-karboksilata (0.46 g, 0.9 mmol) u smeši CH2Cl2(9.0 mL) i MeOH (1.5 mL) je dodata HCl (u dioksanima, 4M, 6.5 mL, 26.0 mmol). Dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Rastvor je koncentrovan do suva pod sniženim pritiskom. U sirov intermedijer u CH2Cl2-u (10.0 mL) je dodata (S)-2-(metoksikarbonilamino)-3-metilbutanska kiselina (0.17 g, 0.9 mmol), HATU (0.41 g, 1.1 mmol), i DIPEA (0.5 mL, 2.9 mmol). Dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 48 h i razblažen sa CH2Cl2-om. Rastvor je opran sa vodenim HCl (1N) i slanim rastvorom. Vodeni slojevi su povratno ekstrahovani sa CH2Cl2-om (2x). Dobijeni organski slojevi su kombinovani, osušeni (Na2SO4), i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirov ostatak je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika gelu (20% do 100 % EtOAc(m/5% MeOH)/Heksani do 80% MeOH/EtOAc) da se dobije metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2-(9-hloro-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-etoksipirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat (0.46 g, 90%).
Metil [(2S)-1-{(2S,4S)-4-etoksi-2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidin-1-il}-3-metil-1-oksobutan-2-il]karbamat
[0370] U rastvor metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2-(9-hloro-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-etoksipirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamata (0.46 g, 0.84 mmol) u dioksanu (8.5 mL) je dodat 4,4,4',4',5,5,5',5'-oktametil-2,2'-bi(1,3,2-dioksaborolan) (0.32 g, 1.3 mmol), kalijum acetat(0.25 g, 2.5 mmol), bis(dibenzilidenaceton)paladijum (0.032 g, 0.035 mmol), i 2-dicikloheksilfosfino-2',4',6'-triizopropilbifenil (Xphos, 0.032 g, 0.067 mmol). Dobijeni rastvor je degasiran sa argonom tokom 5 min i zagrejan, uz mešanje, do 90 °C tokom 6 h. Reakcija je ohlađena do sobne temperature, razblažena sa EtOAc-om, i filtrirana kroz celit. Sirov ostatak je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika gelu (20% do 100 % EtOAc(m/5% MeOH)/Heksani do 90% MeOH/EtOAc) da se dobije metil [(2S)-1-{(2S,4S)-4-etoksi-2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidin-1-il}-3-metil-1-oksobutan-2-il]karbamat (0.41 g, 73%).
1 4
Terc-butil (2S)-2-[5-(2-{(2S,4S)-4-etoksi-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]pirolidin-2-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]pirolidin-1-karboksilat
[0371] U rastvor metil [(2S)-1-{(2S,4S)-4-etoksi-2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidin-1-il}-3-metil-1-oksobutan-2-il]karbamata (0.41 g, 0.61 mmol) u smeši DME (6.1 mL) i DMF (1.0 mL) je dodat (S)-terc-butil 2-(5-bromo-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-karboksilat (0.39 g, 1.2 mmol), tetrakis(trifenilfosfin)paladijum (0.021 g, 0.018 mmol), [1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen]dihloropaladijum (0.030 g, 0.041 mmol), i vodeni kalijum karbonat (2M, 1.0 mL, 2.0 mmol). Rastvor je degasiran sa argonom tokom 5 min i zagrejan, uz mešanje, do 85 °C tokom 6 h. Rastvor je ohlađen do sobne temperature i razblažen sa EtOAcom. Organski sloj je opran sa vodom i slanim rastvorom. Vodeni slojevi su povratno ekstrahovani sa EtOAc-om (3x). Kombinovani organski slojevi su osušeni preko Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirov ostatak je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika gelu (20% do 100 % EtOAc(m/5% MeOH)/Heksani do 80% MeOH/EtOAc) da se dobije terc-butil (2S)-2-[5-(2-{(2S,4S)-4-etoksi-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]pirolidin-2-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]pirolidin-1-karboksilat (0.16 g, 33%).
Metil {(2S)-1-[(2S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-4-etoksi-1-{(2S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat
[0372] U rastvor terc-butil (2S)-2-[5-(2-{(2S,4S)-4-etoksi-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]pirolidin-2-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]pirolidin-1-karboksilata (0.048 g, 0.062 mmol) u smeši CH2Cl2(1.0 mL) i MeOH (0.25 mL) je dodat HCl (u dioksanima, 4M, 0.47 mL, 1.9 mmol). Rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 3 h, i zatim koncentrovan do suva pod sniženim pritiskom. U sirov intermedijer suspendovan u CH2Cl2-u (1.5 mL) je dodata (S)-2-(metoksikarbonilamino)-3-metilbutanska kiselina (0.012 g, 0.069 mmol), HATU (0.029 g, 0.076 mmol), i DIPEA (0.050 mL, 0.28 mmol). Dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 1.5 h. Reakcija je razblažena sa DMF-om i vodeni LiOH (2.5 M, 4 kapi) je dodat. Rastvor je koncentrovan da se ukloni CH2Cl2i sirov ostatak je prečišćen preparativnom HPLC na reverznoj fazi (10% do 52 % MeCN/voda sa 0.1% TFA). Željene frakcije su kombinovane i koncentrovane pod sniženim pritiskom da se uklone isparljive organske supstance. Dodavanje vodenog natrijum
1
bikarbonata uz mešanje rezultovalo je precipitacijom bele čvrste supstance. Precipitat je filtriran kroz membranski filter i opran sa vodom. Sušenje pod sniženim pritiskom dalo je metil {(2S)-1-[(2S)-2-(5- {2-[(2S,4S)-4-etoksi-1-{(2S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat (0.008 g, 17%). 1H-NMR: 400 MHz, (MeOD) δ: (Smeša rotomera) 8.37 (s, 1H), 7.97 (s, 2H), 7.37-7.76 (m, 5H), 5.38-5.54 (m, 1H), 5.18 (s, 2H), 5.14-5.16 (m, 1H), 4.21-4.31 (m, 4H), 3.87-4.09 (m, 1H), 3.79-3.85 (m, 2H), 3.66 (s, 3H), 3.64 (s, 3H), 3.46-3.55 (m, 2H), 2.30-2.35 (m, 3H), 2.04-2.06 (m, 3H), 1.11 (m, 2H), 0.95 (d, 3H), 0.88 (d, 3H). MS (ESI) m/z 836.02 [M H]<+>.
Primer OR (Referenca)
[0373]
Metil {(1R)-2-[(2S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-4-etoksi-1-{(2S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-il]-2-okso-1-feniletil}karbamat
1
[0374] U rastvor terc-butil (2S)-2-[5-(2-{(2S,4S)-4-etoksi-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]pirolidin-2-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]pirolidin-1-karboksilata (0.11 g, 0.14 mmol) u smeši CH2Cl2(2.0 mL) i MeOH (0.5 mL) je dodat HCl (u dioksanima, 4M, 1.0 mL, 4.0 mmol). Rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 3 h, i zatim koncentrovan do suva pod sniženim pritiskom. U sirov intermedijer suspendovan u CH2Cl2-u (1.5 mL) je dodata (R)-2-(metoksikarbonilamino)-2-fenilsirćetna kiselina (0.044 g, 0.21 mmol) i DIPEA (0.075 mL, 0.43 mmol). Dobijeni rastvor je ohlađen do - 40 °C i COMU (0.096 g, 0.22 mmol) je dodat. Reakcija je ostavljena da se polako zagreje do 0 °C tokom 1 h. Reakcija je razblažena sa DMF-om. Rastvor je koncentrovan da se ukloni CH2Cl2i sirov ostatak je prečišćen preparativnom HPLC na reverznoj fazi (10% do 55% MeCN/voda sa 0.1% TFA). Željene frakcije su kombinovane i koncentrovane pod sniženim pritiskom da se uklone isparljive organske supstance. Dodavanje vodenog natrijum bikarbonata uz mešanje rezultovalo je precipitacijom bele čvrste supstance. Precipitat je filtriran kroz membranski filter i opran sa vodom. Sušenje pod sniženim pritiskom dalo je metil {(1R)-2-[(2S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-4-etoksi-1-{(2S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-il]-2-okso-1-feniletil}karbamat (0.022 g, 18%). 1H-NMR: 400 MHz, (MeOD) δ: (Smeša ofrotomers) 8.28 (d, 1H), 7.88 (d, 1H), 7.52-7.70 (m, 3H), 7.28-7.38 (m, 5H), 6.90-6.96 (m, 2H), 5.44-5.47 (m, 1H), 5.31 (s, 1H), 5.12 (s, 2H), 4.16-4.48 (m, 3H), 3.81-3.19 (m, 1H), 3.62-3.76 (m, 2H), 3.58 (s, 3H), 2.56 (s, 3H), 2.42-2.57 (m, 1H), 2.31 (m, 1H), 1.81-2.41 (m, 5H), 1.04 (t, 3H), 0.87 (d, 3H), 0.81 (d, 3H). MS (ESI) m/z 869.55 [M H]<+>.
Primer OS (Referenca)
[0375]
1
Metil (2S,3R)-1-((S)-2-(5-bromo-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-il)-3-metoksi -1-oksobutan-2-ilkarbamat
[0376] U rastvor (S)-terc-butil 2-(5-bromo-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-karboksilata (1.00 g, 3.2 mmol) u smeši CH2Cl2(30 mL) i MeOH (5 mL) je dodat HCl (u dioksanu, 4 M, 11.5 mL, 46.0 mmol). Rastvor je mešan na 40 °C tokom 1h, ohlađen do sobne temperature, i koncentrovan do suva pod sniženim pritiskom. U sirov intermedijer suspendovan u CH2Cl2-u (30 mL) je dodata (2S,3R)-3-metoksi -2-(metoksikarbonilamino)butanska kiselina (0.67 g, 3.5 mmol), HATU (1.47 g, 3.8 mmol), i DIPEA (1.00 mL, 6.0 mmol), Dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 24 h. DMF (2 mL) i vodeni LiOH (2.5 M, 1 mL) su dodati i reakcija je koncentrovana do suva pod sniženim pritiskom. Sirov materijal je razblažen sa EtOAc-om i opran sa H2O i slanim rastvorom. Vodeni slojevi su povratno ekstrahovani sa EtOAc-om. Kombinovani organski slojevi su osušeni preko Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirov ostatak je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika gelu (20% do 100 % EtOAc(m/5% MeOH)/CH2Cl2) da se dobije metil (2S,3R)-1-((S)-2-(5-bromo-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-il)-3-metoksi -1-oksobutan-2-ilkarbamat (1.2g, 100%).
Primer OT (Referenca)
[0377]
1
Terc-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S)-1-[N-(metoksikarbonil)-O-metil-L-treonil]pirolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilat
[0378] U rastvor terc-butil 4-(metoksimetil)-2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]-nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidin-1-karboksilata (1.0 g, 3.2 mmol) u smeši DMSO (2.0 mL) i dioksana (2.0 mL) je dodat metil (2S,3R)-1-((S)-2-(5-bromo-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-il)-3-metoksi -1-oksobutan-2-ilkarbamat (0.24 g, 0.62 mmol), tetrakis(trifenilfosfin)paladijum (0.050 g, 0.043 mmol), [1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen]dihloropaladijum (0.030 g, 0.041 mmol), i vodeni kalijum karbonat (2M, 0.65 mL, 1.3 mmol). Rastvor je degasiran sa argonom tokom 5 min i zagrejan, uz mešanje, do 85 °C tokom 6 h. Rastvor je ohlađen do sobne temperature i razblažen sa EtOAcom. Organski sloj je opran sa vodom i slanim rastvorom. Vodeni slojevi su povratno ekstrahovani sa EtOAc-om (3x). Kombinovani organski slojevi su osušeni preko Na2SO4i
1
koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirov ostatak je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika gelu (20% do 100 % EtOAc(m/5% MeOH)/Heksani do 60% MeOH/EtOAc) da se dobije terc-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S)-1-[N-(metoksikarbonil)-O-metil-L-treonil]pirolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilat (0.20 g, 63%).
Metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(9-{2-[(2S)-1-{(2S,3R)-3-metoksi -2-[(metoksikarbonil)amino]butanoil}pirolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoksimetil)pirolidin-1-il]-2-okso-1-feniletil}karbamat
[0379] U rastvor terc-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S)-1-[N-(metoksikarbonil)-O-metil-L-treonil]pirolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilata (0.20 g, 0.26 mmol) u smeši CH2Cl2(3.0 mL) i MeOH (0.5 mL) je dodat HCl (u dioksanima, 4M, 2.0 mL, 8.0 mmol). Rastvor je mešan na 40 °C tokom 1 h, i zatim ohlađen do sobne temperature i koncentrovan do suva pod sniženim pritiskom. U sirov intermedijer suspendovan u CH2Cl2-u (3.0 mL) je dodata (R)-2-(metoksikarbonilamino)-2-fenilsirćetna kiselina (0.081 g, 0.39 mmol) i DIPEA (0.150 mL, 0.86 mmol). Dobijeni rastvor je ohlađen do -40 °C i COMU (0.180 g, 0.42 mmol) je dodat. Reakciji je dozvoljeno da se polako zagreje do sobne temperature tokom 30 min i održavana je tokom 1.5 h. Rastvor je razblažen sa CH2Cl2-om i opran sa vodenim bikarbonatom. Vodeni sloj je povratno ekstrahovan sa CH2Cl2-om. Kombinovani organski slojevi su osušeni preko Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirov ostatak je prečišćen preparativnom HPLC na reverznoj fazi (10% do 50% MeCN/voda sa 0.1% TFA). Željene frakcije su kombinovane i koncentrovane pod sniženim pritiskom da se uklone isparljive organske supstance. Dodavanje vodenog natrijum bikarbonata uz mešanje rezultovalo je precipitacijom bele čvrste supstance. Precipitat je filtriran kroz membranski filter i opran sa vodom. Sušenje pod sniženim pritiskom dalo je metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(9-{2-[(2S)-1-{(2S,3R)-3-metoksi -2-[(metoksikarbonil)amino]butanoil}pirolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoksimetil)pirolidin-1-il]-2-okso-1-feniletil}karbamat (0.10 g, 46%).1H-NMR: 400 MHz, (MeOD) δ: (Smeša rotomera) 8.34 (s, 1H), 7.92-7.97 (m, 2H), 7.33-7.69 (m, 10H), 5.53 (s, 1H), 5.36-5.39 (m, 1H), 5.15-5.21 (m, 3H), 4.44 (d, 1H), 3.86-3.93 (m, 2H), 3.68-3.75 (m, 2H), 3.66 (s, 3H), 3.65 (s, 3H), 3.46-3.57 (m, 2H), 3.28 (s, 3H), 3.19 (s, 3H), 2.47-2.60 (m, 3H), 2.22-2.36 (m, 4H), 1.99-2.08 (m, 3H), 1.15 (d, 3H). MS (ESI) m/z 886.19 [M H]<+>.
1
Primer OU (Referenca)
[0380]
11
Metil (1-{4-(metoksimetil)-2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidin-1-il}-3-metoksi-1-oksobutan-2-il)karbamat
[0381] U rastvor terc-butil 4-(metoksimetil)-2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidin-1-karboksilata (0.25 g, 0.41 mmol) u smeši CH2Cl2(4.0 mL) i MeOH (1.0 mL) je dodat HCl (u dioksanima, 4M, 3.0 mL, 12.0 mmol). Dobijeni rastvor je mešan na 40 °C tokom 45 min. Rastvor je ohlađen do sobne temperature i koncentrovan do suva pod sniženim pritiskom. U sirov intermedijer u CH2Cl2-u (4.0 mL) je dodata (2S,3R)-3-metoksi -2-(metoksikarbonilamino)butanska kiselina (0.08 g, 0.42 mmol), HATU (0.17 g, 0.45 mmol), i DIPEA (0.4 mL, 2.3 mmol). Dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 48 h i razblažen sa CH2Cl2-om. Rastvor je opran sa slanim rastvorom. Vodeni sloj je povratno ekstrahovan sa CH2Cl2-om (2x). Dobijeni organski slojevi su kombinovani, osušeni (Na2SO4), i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirov ostatak je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika gelu (30% do 100 % EtOAc(m/5% MeOH)/Heksani do 80% MeOH/EtOAc) da se dobije metil (1-{4-(metoksimetil)-2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidin-1-il}-3-metoksi -1-oksobutan-2-il)karbamat (0.24 g, 92%).
Terc-butil (2S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-[N-(metoksikarbonil)-O-metil-L-treonil]-4-(metoksimetil)pirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-karboksilat
[0382] U rastvor metil (1-{4-(metoksimetil)-2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidin-1-il}-3-metoksi -1-oksobutan-2-il)karbamat (0.15 g, 0.22 mmol) u smeši DMSO (2.0 mL) i dioksana (2.0 mL) je dodat (S)-terc-butil 2-(5-jodo-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-karboksilat (0.15 g, 0.40 mmol), tetrakis(trifenilfosfin)paladijum (0.028 g, 0.024 mmol), [1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen]dihloropaladijum (0.018 g, 0.025 mmol), i vodeni kalijum karbonat (2M, 0.35 mL, 0.70 mmol). Rastvor je degasiran sa argonom tokom 5 min i zagrejan, uz mešanje, do 90 °C tokom 6 h. Rastvor je ohlađen do sobne temperature i razblažen sa EtOAcom. Organski sloj je opran sa vodom i slanim rastvorom. Vodeni slojevi su povratno ekstrahovani sa EtOAc-om (3x). Kombinovani organski slojevi su osušeni preko Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirov ostatak je prečišćen preparativnom HPLC na reverznoj fazi (10% do 55% MeCN/voda sa 0.1% TFA). Željene frakcije su kombinovane i
1 2
koncentrovane pod sniženim pritiskom da se uklone isparljive organske supstance. Preostali rastvor je učinjen baznim sa vodenim bikarbonatom i ekstrahovan sa CH2Cl2-om (3x). Kombinovani organski slojevi su osušeni preko Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom da se dobije terc-butil (2S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-[N-(metoksikarbonil)-O-metil-L-treonil]-4-(metoksimetil)pirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-karboksilat (0.013 g, 7%).
Metil {(1R)-2-[(2S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metoksi butanoil}-4-(metoksimetil)pirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-il]-2-okso-1-feniletil}karbamat
[0383] U rastvor terc-butil (2S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-4-(metoksimetil)pirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-karboksilata (0.013 g, 0.016 mmol) u smeši CH2Cl2(0.5 mL) i MeOH (0.02 mL) je dodat HCl (u dioksanima, 4M, 0.20 mL, 0.80 mmol). Rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 1 h, i zatim koncentrovan do suva pod sniženim pritiskom. U sirov intermedijer suspendovan u CH2Cl2-u (0.5 mL) je dodata (R)-2-(metoksikarbonilamino)-2-fenilsirćetna kiselina (0.006 g, 0.029 mmol) i DIPEA (0.05 mL, 0.28 mmol). Dobijeni rastvor je ohlađen do 0 °C i COMU (0.012 g, 0.028 mmol) je dodat. Reakcija je mešana na 0 °C tokom 30 min. Rastvor je razblažen sa DMF-om i vodenim LiOH (2.5 M, 2 kapi) i koncentrovan pod sniženim pritiskom da se ukloni CH2Cl2. Sirovi ostatak je prečišćen preparativnom HPLC na reverznoj fazi (10% do 55% MeCN/voda sa 0.1% TFA). Željene frakcije su kombinovane i koncentrovane pod sniženim pritiskom da se uklone isparljive organske supstance. Dodavanje vodenog natrijum bikarbonata uz mešanje rezultovalo je precipitacijom bele čvrste supstance. Precipitat je filtriran kroz membranski filter i opran sa vodom. Sušenje pod sniženim pritiskom dalo je metil {(1R)-2-[(2S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metoksi butanoil}-4-(metoksimetil)pirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-il]-2-okso-1-feniletil}karbamat (0.008 g, 61%).<1>H-NMR: 400 MHz, (MeOD) δ: (Smeša rotomera) 8.37 (m, 1H), 7.96-7.98 (m, 2H), 7.60-7.79 (m, 3H), 7.35-7.52 (m, 6H), 6.98-7.03 (m, 1H), 5.52 (s, 1H), 5.26-5.39 (m, 2H), 5.20 (s, 2H), 4.44 (m, 1H), 4.27 (m, 1H), 3.64 (s, 6H), 3.50-3.57 (m, 3H), 3.37 (s, 3H), 3.29-3.44 (m, 3H), 3.20 (s, 3H), 2.68-2.72 (m, 2H), 2.57-2.62 (m, 2H), 1.89-2.15 (m, 6H), 1.18 (d, 3H). MS (ESI) m/z 885.73 [M H]<+>.
Primer OV
[0384]
1
Metil [(2S)-1-1(2S,4S)-3-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-2-azabiciklo[3.1.0]heks-2-il}-3-metil-1-oksobutan-2-il]karbamat
[0385] Metil [(2S)-1-{(2S,4S)-3-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-2-azabiciklo[3.1.0]heks-2-il}-3-metil-1-oksobutan-2-il]karbamat je pripremljen praćenjem procedure za metil [(2S)-1-{(2S,4S)-4-etoksi-2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidin-1-il}-3-metil-1-oksobutan-2-il]karbamat supstituisanjem (1S,3S,5S)-2-(terc-butoksikarbonil)-2-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-
1 4
karboksilne kiseline za (2S,4S)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-etoksipirolidin-2-karboksilnu kiselinu.
Terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(1S,3S,5S)-2-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-2-azabiciklo[3.1.0]heks-3-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilat
[0386] U rastvor metil [(2S)-1-{(2S,4S)-3-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-2-azabiciklo[3.1.0]heks-2-il}-3-metil-1-oksobutan-2-il]karbamata (0.19 g, 0.30 mmol) u smeši DMSO (2.0 mL) i dioksana (2.0 mL) je dodat (2S,4S)-terc-butil 2-(5-jodo-1H-imidazol-2-il)-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilat (0.20 g, 0.55 mmol), tetrakis(trifenilfosfin)paladijum (0.035 g, 0.030 mmol), [1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen]dihloropaladijum (0.025 g, 0.034 mmol), i vodeni kalijum karbonat (2M, 0.5 mL, 1.0 mmol). Rastvor je degasiran sa argonom tokom 5 min i zagrejan, uz mešanje, do 90 °C tokom 6 h. Rastvor je ohlađen do sobne temperature, razblažen sa EtOAc-om, i filtriran kroz celit. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom i prečišćen kolonskom hromatografijom na silika gelu (2% do 25 % CH2Cl2/MeOH) i preparativnom HPLC na reverznoj fazi (10% do 55% MeCN/voda sa 0.1% TFA). Željene frakcije su kombinovane i koncentrovane pod sniženim pritiskom da se uklone isparljive organske supstance. Vodeni sloj je učinjen baznim sa vodenim natrijum bikarbonatom i ekstrahovan sa CH2Cl2-om (3x). Organski slojevi su kombinovani, osušeni preko Na2SO4, i koncentrovani pod sniženim pritiskom da se dobije terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(1S,3S,5S)-2-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-2-azabiciklo[3.1.0]heks-3-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilat (0.025 g, 11%).
Metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(1S,3S,5S)-2-{(2S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-2-azabiciklo[3.1.0]heks-3-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoksimetil)pirolidin-1-il]-2-okso-1-feniletil}karbamat
[0387] U rastvor terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(1S,3S,5S)-2-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-2-azabiciklo[3.1.0]heks-3-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilata (0.025 g, 0.032 mmol) u smeši CH2Cl2(1.0 mL) i MeOH (0.25 mL) je dodat HCl (u dioksanima, 4M, 0.50 mL, 2.0 mmol). Rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 12 h, i zatim koncentrovan do suva pod sniženim pritiskom. U sirov intermedijer suspendovan u CH2Cl2-u (0.5 mL) je dodata (R)-2-
1
(metoksikarbonilamino)-2-fenilsirćetna kiselina (0.012 g, 0.057 mmol) i DIPEA (0.05 mL, 0.28 mmol). Dobijeni rastvor je ohlađen do 0 °C i COMU (0.023 g, 0.054 mmol) je dodat. Reakcija je mešan na 0 °C tokom 30 min. Rastvor je razblažen sa DMF-om i vodenim LiOH (2.5 M, 2 kapi) i koncentrovan je pod sniženim pritiskom da se ukloni CH2Cl2. Sirov ostatak je prečišćen preparativnom HPLC na reverznoj fazi (10% do 55% MeCN/voda sa 0.1% TFA). Željene frakcije su kombinovane i koncentrovane pod sniženim pritiskom da se uklone isparljive organske supstance. Dodavanje vodenog natrijum bikarbonata uz mešanje rezultovalo je precipitacijom bele čvrste supstance. Precipitat je filtriran kroz membranski filter i opran sa vodom. Sušenje pod sniženim pritiskom dalo je metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(1S,3S,5S)-2-{(2S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-2-azabiciklo[3.1.0]heks-3-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoksimetil)pirolidin-1-il]-2-okso-1-feniletil}karbamat (0.015 g, 55%).
<1>H-NMR: 400 MHz, (MeOD) δ: (Smeša rotomera) 8.35 (m, 1H), 7.94-7.96 (m, 2H), 7.54-7.78 (m, 6H), 6.93-7.00 (m, 1H), 5.72 (m, 1H), 5.46 (s, 1H), 5.19 (s, 2H), 5.14-5.16 (m, 1H), 3.95 (m, 1H), 3.67 (s, 3H), 3.63 (s, 3H), 3.42-3.49 (m, 2H), 3.24 (s, 3H), 2.67-2.78 (m, 2H), 2.41-2.62 (m, 3H), 2.01-2.13 (m, 2H), 1.86-1.99 (m, 3H), 0.99-1.03 (m, 2H), 0.90 (d, 3H). MS (ESI) m/z 882.23 [M H]<+>.
Primer OW
[0388]
1
Terc-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-izoleucil]-5-metilpirolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilat
[0389] U rastvor metil (1-{4-(metoksimetil)-2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidin-1-il}-3-metil-1-oksobutan-2-il)karbamata (0.47 g, 0.78 mmol) u smeši DMSO (4.0 mL) i dioksana (4.0 mL) je dodat metil (2S,3S)-1-((2S,5S)-2-(5-jodo-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidin-1-il)-3-metil-1-oksopentan-2-ilkarbamat (0.26 g, 0.72 mmol), tetrakis(trifenilfosfin)paladijum (0.090 g, 0.078 mmol), [1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen]dihloropaladijum (0.061g, 0.083 mmol), i
1
vodeni kalijum karbonat (2M, 1.2 mL, 2.4 mmol). Rastvor je degasiran sa argonom tokom 5 min i zagrevan, uz mešanje, do 90 °C tokom 6 h. Rastvor je ohlađen do sobne temperature, razblažen sa EtOAc-om, i filtriran kroz celit. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom i razblažen sa EtOAc-om. Organski rastvor je opran vodom i slanim rastvorom i vodeni slojevi su povratno ekstrahovani sa EtOAc-om. Kombinovani organski slojevi su osušeni preko Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirov ostatak je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika gelu (10% do 100% EtOAc (5% MeOH)/CH2Cl2) da se dobije terc-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-izoleucil]-5-metilpirolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilat (0.25 g, 40%).
Metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-{(2S,3S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilpentanoil}-5-metilpirolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoksimetil)pirolidin-1-il]-2-okso-1-feniletil}karbamat
[0390] U rastvor terc-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-izoleucil]-5-metilpirolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilata (0.175 g, 0.21 mmol) u smeši CH2Cl2(2.0 mL) i MeOH (0.5 mL) je dodat HCl (u dioksanima, 4M, 1.6 mL, 6.4 mmol). Rastvor je mešan na 40 °C tokom 1 h, ohlađen do sobne temperature, i zatim koncentrovan do suva pod sniženim pritiskom. U sirov intermedijer koji je suspendovan u CH2Cl2-u (3.0 mL) je dodata (R)-2-(metoksikarbonilamino)-2-fenilsirćetna kiselina (0.070 g, 0.34 mmol) i DIPEA (0.15 mL, 0.86 mmol). Dobijeni rastvor je ohlađen do -40 °C i COMU (0.15 g, 0.35 mmol) je dodat. Reakcija je zagrevana do sobne temperature tokom 30 min i razblažena sa CH2Cl2-om. Rastvor je opran sa zasićenim vodenim natrijum bikarbonatom. Vodeni sloj je povratno ekstrahovan sa CH2Cl2-om, i kombinovani organski slojevi su osušeni preko Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirov ostatak je prečišćen preparativnom HPLC na reverznoj fazi (10% do 58% MeCN/voda sa 0.1% TFA). Željene frakcije su kombinovane i koncentrovane pod sniženim pritiskom da se uklone isparljive organske supstance. Dodavanje vodenog natrijum bikarbonata uz mešanje rezultovalo je precipitacijom bele čvrste supstance. Precipitat je filtriran kroz membranski filter i opran sa vodom. Sušenje pod sniženim pritiskom dalo je metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-{(2S,3S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilpentanoil}-5-metilpirolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoksimetil)pirolidin-1-il]-2-
1
okso-1-feniletil}karbamat (0.079 g, 41%).<1>H-NMR: 400 MHz, (MeOD) δ: (Smeša rotomera) 8.36 (m, 1H), 7.93-7.98 (m, 2H), 7.66-7.84 (m, 3H), 7.35-7.48 (m, 7H), 5.53 (s, 1H), 5.36-5.39 (m, 1H), 5.17 (d, 2H), 5.08 (m, 1H), 4.14-4.35 (m, 1H), 3.74 (m, 4H), 3.64 (s, 3H), 3.62 (s, 3H), 3.46 (m, 1H), 3.19 (s, 3H), 2.76 (m, 1H), 2.46-2.60 (m, 3H), 2.24-2.35 (m, 1H), 2.08-2.18 (m, 2H), 1.91 (m, 1H), 1.61-1.87 (m, 2H), 1.48 (d, 3H), 1.13-1.21 (m, 3H), 0.80-0.97 (m, 3H). MS (ESI) m/z 898.24 [M H]<+>.
Primer OX
[0391]
Metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-{(2S,3S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilpentanoil}-5-metilpirolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoksimetil)pirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat
[0392] U rastvor terc-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-izoleucil]-5-metilpirolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilata (0.075 g, 0.09 mmol) u smeši CH2Cl2(1.0 mL) i MeOH (0.25 mL) je dodat HCl (u dioksanima, 4M, 0.7 mL, 2.8 mmol). Rastvor je mešan na 40 °C tokom 1 h, ohlađen do sobne temperature, i zatim koncentrovan do suva pod sniženim pritiskom. U sirov intermedijer koji je suspendovan u CH2Cl2-u (3.0
1
mL) je dodata (S)-2-(metoksikarbonilamino)-3-metilbutanska kiselina (0.020 g, 0.14 mmol), HATU (0.043 g, 0.11 mmol) i DIPEA (0.10 mL, 0.57 mmol). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Reakcija je razblažen sa DMF-om i vodenim LiOH (2.5 M, 3 kapi) i CH2Cl2je uklonjen pod sniženim pritiskom. Sirov ostatak je prečišćen preparativnom HPLC na reverznoj fazi (10% do 58% MeCN/voda sa 0.1% TFA). Željene frakcije su kombinovane i koncentrovane pod sniženim pritiskom da se uklone isparljive organske supstance. Dodavanje vodenog natrijuma bikarbonata uz mešanje rezultovalo je precipitacijom bele čvrste supstance. Precipitat je filtriran kroz membranski filter i opran sa vodom. Sušenje pod sniženim pritiskom dalo je metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-{(2S,3S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilpentanoil}-5-metilpirolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoksimetil)pirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat (0.031 g, 38%).<1>H-NMR: 400 MHz, (MeOD) δ: (Smeša rotomera) 8.34 (m, 1H), 7.91-9.97 (m, 2H), 7.50-7.81 (m, 3H), 7.35-7.38 (m, 2H), 5.17-5.26 (m, 3H), 5.08 (m, 1H), 4.14-4.33 (m, 4H), 3.64 (s, 3H), 3.63 (s, 3H), 3.51- 3.59 (m, 3H), 3.37 (s, 3H), 2.71 (m, 1H), 2.55-2.59 (m, 1H), 2.23-2.33 (m, 1H), 1.92-2.10 (m, 2H), 1.77-1.89 (m, 1H), 1.60 (m, 1H), 1.48 (d, 1H), 1.11-1.22 (m, 2H), 0.81-0.98 (m, 12H). MS (ESI) m/z 864.27 [M H]<+>.
Primer PF
[0393]
1
11
terc-butil (2S,4S)-4-(metoksimetil)-2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidin-1-karboksilat [0394] Jedinjenje iz naslova je dobijeno kao u primeru LQ ali korišćenjem (2S,4S)-1-(tercbutoksikarbonil)-4-(metoksimetil)pirolidin-2-karboksilne kiseline umesto (S)-1-(tercbutoksikarbonil)pirolidin-2-karboksilne kiseline.
2-[4-(metoksimetil)pirolidin-2-il]-9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol
[0395] Terc-butil (2S,4S)-4-(metoksimetil)-2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidin-1-karboksilat (310mg, 0.507mmol) je tretiran sa 2mL 1.25N HCl u etanolu i mešan na sobnoj temperaturi tokom 2h zatim na 50°C tokom 2h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da se dobije tamno žuta čvrsta supstanca koja je direktno u sledećem koraku.
metil [(2S)-1-{(2S,4S)-4-etoksi-2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidin-1-il}-3-metil-1-oksobutan-2-il]karbamat
[0396] Smeša (S)-2-(metoksikarbonilamino)-3-metilbutanske kiseline (107mg, 0.608mmol), HATU (231mg, 0.608mmol) i 6mL 10% DIPEA u DMF-u je prethodno-aktivirana tokom 5 minuta, zatim je dodata u so amina iz koraka iznad i ostavljena da se meša preko noći. Reakciona smeša je podeljena između etil acetata i zasićenog natrijum bikarbonata. Organska faza je koncentrovana i prečišćena hromatografijom na silika gelu. (103mg)
1 2
terc-butil 2-[5-(2-{1-[N-(metoksikarbonil)valil]-4-(metoksimetil)pirolidin-2-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-metilpirolidin-1-karboksilat
[0397] Jedinjenje iz naslova je dobijeno kao u primeru LQ ali korišćenjem metil [(2S)-1-{(2S,4S)-4-etoksi-2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidin-1-il}-3-metil-1-oksobutan-2-il]karbamata (103mg, 0.154mmol) umesto terc-butil 2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidin-1-karboksilata i metil (S)-1-((S)-2-(5-jodo-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-il)-3-metil-1-oksobutan-2-ilkarbamata (58mg, 0.154mmol)umesto metil (S)-1-((S)-2-(5-bromo-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-il)-3-metil-1-oksobutan-2-ilkarbamata. (50.0mg)
metil {1-[4-(metoksimetil)-2-{9-[2-(4-metilpirolidin-2-il)-1H-imidazol-5-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il}pirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat
[0398] terc-butil 2-[5-(2-{1-[N-(metoksikarbonil)valil]-4-(metoksimetil)pirolidin-2-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-metilpirolidin-1-karboksilat (50mg, 0.063mmol) je tretiran sa 2mL 1.25N HCl u etanolu i zagrevan na 60°C tokom 2h, zatim je koncentrovan pod sniženim pritiskom i pumpan suv pod visokim vakuumom i korišćen direktno u sledećem koraku.
metil {1-[2-{9-[2-(1-{[(metoksikarbonil)amino](fenil)acetil}-4-metilpirolidin-2-il)-1H-imidazol-5-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il}-4-(metoksimetil)pirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat
[0399] Smeša (R)-2-(metoksikarbonilamino)-2-fenilsirćetne kiseline (13mg, 0.063mmol), COMU (30mg, 0.069mmol) u 0.500mL DMF-a i DIPEA (0.033mL, 0.189mmol) je ostavljena da se prethodno aktivira tokom 15 minuta pre nego što je dodata u čvrstu sirovu so amina iz prethodnog koraka i mešana je preko noći. Proizvod je prečišćen pomoću HPLC na reverznoj fazi. Proizvod je konvertovan u slobodnu bazu rastvaranjem u 2mL smeše acetonitril:metanol u odnosu 1:1 i propušten kroz prethodno pakovan kartridž od polimerom podržanog karbonata. Koncentracija i sušenje su dali prljavo beli prašak. (23.3mg).
MS (ESI) m/z 883.8 [M H]<+>
'H NMR (CD3CN) 8.176 (s, 1H), 7.778 (m, 1H), 7.596-7.521 (m, 4H), 7.455-7.347 (m, 6H), 7.218 (s, 1H), 5.482 (s, 1H), 5.310 (m, 1H), 5.192 (m, 1H), 4.999 (q, 2H, J= 14 Hz), 4.372 (d,
1
1H, J= 6.4 Hz), 4.279 (m, 1H), 3.800-3.697 (m, 2H), 3.632 (s, 3H) 3.597-3.445 (m, 7H), 3.355 (s, 3H), 2.876 (m, 2H), 2.761 (m, 1H), 2.583 (m, 2H), 2.220 (m, 2H), 1.764 (m, 1H), 1.070 (d, 3H, J = 6.4 Hz), 1.020 (d, 3H, J = 6.4 Hz), 0.898 (d, 3H, J = 6.4 Hz).
Primer PG
[0400]
1 4
�
terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-4-metilpirolidin-2-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-metilpirolidin-1-karboksilat
[0401] Jedinjenje iz naslova je dobijeno kao u primeru LQ ali korišćenjem metil [(2S)-3-metil-1-{(2S,4S)-4-metil-2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidin-1-il}-1-oksobutan-2-il]karbamata (307mg, 0.481mmol) umesto terc-butil 2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidin-1-karboksilata i metil (S)-1-((S)-2-(5-jodo-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-il)-3-metil-1-oksobutan-2-ilkarbamata (181mg, 0.481mmol) umesto metil (S)-1-((S)-2-(5-bromo-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-il)-3-metil-1-oksobutan-2-ilkarbamata. (200.8mg)
metil {(2S)-3-metil-1-[(2S,4S)-4-metil-2-(9-{2-[(2S,4S)-4-metilpirolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)pirolidin-1-il]-1-oksobutan-2-il}karbamat
[0402] Terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-4-metilpirolidin-2-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-metilpirolidin-1-karboksilat (200mg, 0.262mmol) je tretiran sa 2mL 1.25N HCl u etanolu i zagrevan na 60°C tokom 2h, zatim je koncentrovan pod sniženim pritiskom i pumpan suv pod visokim vakuumom i korišćen direktno u sledećem koraku.
metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4-metilpirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-metilpirolidin-1-il]-2-okso-1-feniletil}karbamat [0403] Smeša (R)-2-(metoksikarbonilamino)-2-fenilsirćetne kiseline (13mg, 0.063mmol), COMU (30mg, 0.069mmol) u 1.5mL DMF je ostavljena da se prethodno aktivira tokom 5 minuta pre nego što je dodata u rastvor amina iz prethodne soli u 1.5mL DMF i DIPEA (0.137mL, 0.786mmol) i mešana je preko noći. Proizvod je prečišćen pomoću HPLC na reverznoj fazi. Proizvod je konvertovan u slobodnu bazu rastvaranjem u 2mL smeše acetonitril:metanol u odnosu 1:1 i propušten kroz prethodno pakovan kartridž od polimerom podržanog karbonata. Koncentracija i sušenje dalo je prljavo beli prah. (25.8mg).
MS (ESI) m/z 853.8 [M H]<+>.
'H NMR (CD3CN) 8.164 (s, 1H), 7.781 (m, 1H), 7.609 (m, 2H), 7.535 (m, 2H), 7.433-7.305 (m, 6H), 7.229 (s, 1H), 5.482 (s, 1H), 5.290 (m, 1H), 5.191 (m, 1H), 4.997 (m, 2H), 4.372 (d,
1
1H, J= 6.4 Hz), 4.267 (m, 1H), 3.735-3.445 (m, 10H), 2.573 (m, 4H), 2.197 (m, 2H), 2.017 (m, 1H), 1.760 (m, 1H), 1.204 (d, 3H, J= 6.4 Hz), 1.068 (d, 3H, J = 6.4 Hz), 1.010 (d, 3H, J = 6.8 Hz), 0.887 (d, 3H, J = 6.8 Hz).
Primer PH
[0404]
terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S)-1-[(benziloksi)karbonil]pirolidin-2-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilat
1
[0405] Jedinjenje iz naslova je dobijeno kao u primeru OF (jedinjenje terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidin-2-il}-1,4,5,11-tetrahidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilat) ali korišćenjem (S)-1-(benziloksikarbonil)pirolidin-2-karboksilne kiseline umesto (2S,5S)-1-((S)-2-(metoksikarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirolidin-2-karboksilne kiseline u koraku 6.
terc-butil (2S,4S)-4-(metoksimetil)-2-(5-12-[(2S)-pirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-karboksilat
[0406] Smeša terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S)-1-[(benziloksi)karbonil]pirolidin-2-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilata (724mg, 0.96mmol) i 70mg 10%Pd/C u 20mL etanola je hidrogenizovana na 1atm preko noći. Dodatni 10%Pd/C (300mg) i porcija čvrstog NaHCO3 su dodati i hidrogenizacija je nastavljena tokom 4 sata. Filtracija kroz celit i koncentracija filtrata pod sniženim pritiskom dali su proizvod kao tamno braon čvrstu supstancu, 454mg. Prečišćavanje pomoću HPLC na reverznoj fazi dalo je 65mg prečišćenog proizvoda.
metil {(1R)-2-[(2S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-4-(metoksimetil)pirolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)pirolidin-1-il]-2-okso-1-feniletil}karbamat
[0407] Smeša (R)-2-(metoksikarbonilamino)-2-fenilsirćetne kiseline(22mg, 0.105mmol), COMU (45mg, 0.069mmol), i terc-butil (2S,4S)-4-(metoksimetil)-2-(5-{2-[(2S)-pirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-karboksilata (65mg, 0.105mmol) u 1.5mL 10% DIPEA u DMF-u je mešana tokom 1.5h. Reakciona smeša je podeljena između etil acetata i zasićenog natrijum bikarbonata. Organska faza je osušena preko natrijum sulfata, filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Sirov intermedijer je tretiran sa 8mL 1.25N HCl u etanolu na 50°C tokom 4h. Dodat je zasićen natrijum bikarbonat i ekstrahovana je slobodna baza u dihlorometanu. (106mg).
metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S)-1-{(2R)-2-[(metoksikarbonil)amino]-2-fenilacetil}pirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoksimetil)pirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat
1
[0408] Smeša metil {(1R)-2-[(2S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-4-(metoksimetil)pirolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)pirolidin-1-il]-2-okso-1-feniletil}karbamata (55mg, 0.077mmol), (S)-2-(metoksikarbonilamino)-3-metilbutanske kiseline (14mg, 0.077mmol), HATU (32mg, 0.085mmol) i 0.4mL 10% DIPEA u DMF-u je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 sata. Proizvod je prečišćen pomoću HPLC na reverznoj fazi. Proizvod je konvertovan u slobodnu bazu rastvaranjem u 2mL smeše acetonitril:metanol u odnosu 1:1 i propušten kroz prethodno pakovan kartridž od polimerom podržanog karbonata. Eluent je koncentrovan, prebačen u 1%TFA u smeši acetonitril:voda u odnosu 1:1, zaleđen, i liofiliziran da se dobije proizvod kao trifluoroacetatna so. (30.7mg)
MS (ESI) m/z 869.9 [M H]<+>.
metil {(1R)-2-[(2S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-[N-(metoksikarbonil)-O-metil-L-treonil]-4-(metoksimetil)pirolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)pirolidin-1-il]-2-okso-1-feniletil}karbamat
[0409] Smeša metil {(1R)-2-[(2S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-4-(metoksimetil)pirolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)pirolidin-1-il]-2-okso-1-feniletil}karbamata (51mg, 0.072mmol), (2S,3R)-3-metoksi -2-(metoksikarbonilamino)butanske kiseline (14mg, 0.072mmol), HATU (30mg, 0.079mmol) i 0.4mL 10% DIPEA u DMF-u je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 sata. Proizvod je prečišćen pomoću HPLC na reverznoj fazi. Proizvod je konvertovan u slobodnu bazu rastvaranjem u 2mL smeše acetonitril:metanol u odnosu 1:1 i propušten kroz prethodno pakovan kartridž od polimerom podržanog karbonata. Eluent je koncentrovan, prebačen u 1%TFA u smeši acetonitril:voda u odnosu 1:1, zaleđen, i liofiliziran da se dobije proizvod kao trifluoroacetatna so. (24mg)
MS (ESI) m/z 885.8 [M H]<+>;
'H NMR (CD3CN) 7.635 (s, 1H), 7.434 (m, 3H), 7.330 (m, 4H), 7.233 (m, 1H), 7.164 (m, 1H), 6.983 (m, 1H), 6.747 (m, 2H), 6.127 (m, 1H), 5.584 (d, 1H, J = 6.4 Hz), 5.431 (m, 1H), 5.145 (m, 1H), 4.729 (s, 2H), 4.442 (m, 1H), 4.029 (m, 2H), 3.838 (m, 1H), 3.662-3.534 (m, 2H), 3.572 (s, 3H) 3.552 (s, 3H), 3.444-3.310 (m, 3H), 3.240 (s, 3H), 3.225 (s, 3H), 2.618 (m, 1H), 2.464 (m, 1H), 2.304 (m, 1H), 2.129 (m, 1H), 2.041 (m, 1H), 1.899 (m, 2H), 1.107 (d, 3H, J = 6.4 Hz).
1
Primer PI
[0410]
terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[(benziloksi)karbonil]-5-metilpirolidin-2-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilat
[0411] Jedinjenje iz naslova je dobijeno kao u primeru OF (jedinjenje terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidin-2-il}-1,4,5,11-tetrahidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilat) ali korišćenjem (2S,5S)-1-(benziloksikarbonil)-5-metilpirolidin-2-karboksilne kiseline umesto (2S,5S)-1-((S)-2-(metoksikarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirolidin-2-karboksilne kiseline.
2
terc-butil (2S,4S)-4-(metoksimetil)-2-(5-{2-[(2S,5S)-5-metilpirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-karboksilat
[0412] Smeša terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[(benziloksi)karbonil]-5-metilpirolidin-2-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilata (830mg, 1.08mmol) i 100mg 10%Pd/C u 20 mL etanola je hidrogenizovana na 1atm preko noći. Dodatni 10%Pd/C (300mg) i porcija čvrstog NaHCO3 su dodati i hidrogenizacija je nastavljena tokom 4 sata. Filtracija kroz celit i koncentracija filtrata pod sniženim pritiskom dali su proizvod kao tamno braon čvrstu supstancu, 722mg. Prečišćavanje pomoću HPLC na reverznoj fazi dalo je 100mg prečišćenog proizvoda.
terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoksikarbonil)-O-metil-L-treonil]-5-metilpirolidin-2-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilat
[0413] Smeša terc-butil (2S,4S)-4-(metoksimetil)-2-(5-{2-[(2S,5S)-5-metilpirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-karboksilata (101mg, 0.159mmol), (2S,3R)-3-metoksi -2-(metoksikarbonilamino)butanske kiseline (30mg, 0.159mmol), HATU (61mg, 0.159mmol) i 2mL 10% DIPEA u DMF-u je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1.5 sata. Zasićen natrijum bikarbonat je dodat i proizvod je ekstrahovan u dihlorometanu, osušen preko natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ovaj sirov proizvod je tretiran sa 5mL 1.25N HCl u etanolu na 50°C tokom 4h i zatim je koncentrovan pod sniženim pritiskom. Zasićen natrijum bikarbonat je dodat i proizvod je ekstrahovan u dihlorometanu, osušen preko natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom. (74.6mg)
metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,5S)-1-{(2S,3R)-3-metoksi -2-[(metoksikarbonil)amino]butanoil}-5-metilpirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoksimetil)pirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat
[0414] Smeša metil {(2S,3R)-3-metoksi -1-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-4-(metoksimetil)pirolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5-metilpirolidin-1-il]-1-oksobutan-2-il}karbamata (74.6mg, 0.105mmol), (S)-2-(metoksikarbonilamino)-3-metilbutanske kiseline (18.5mg, 0.105mmol), HATU (44mg,
2 1
0.116mmol) i 0.6mL 10% DIPEA u DMF-u je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 sata. Proizvod je prečišćen pomoću HPLC na reverznoj fazi. (48.1mg)
MS (ESI) m/z 866.1 [M H]<+>.
Primer PJ (Referenca)
[0415]
terc-butil (2S,4S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-4-(trifluorometil)pirolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilat
[0416] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao u primeru OF za jedinjenje terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidin-2-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilat, korišćenjem (2S,4S)-1-((S)-2-(metoksikarbonilamino)-3-metilbutanoil)-4-(trifluorometil)pirolidin-2-karboksilne kiseline umesto (2S,4S)-1-(tercbutoksikarbonil)-4-(metoksimetil)pirolidin-2-karboksilne kiseline i (2S,4S)-1-(terc-
2 2
butoksikarbonil)-4-(metoksimetil)pirolidin-2-karboksilne kiseline umesto (2S,5S)-1-((S)-2-(metoksikarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirolidin-2-karboksilne kiseline.
metil{(1R)-2-[(2S,4S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4-(trifluorometil)pirolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoksimetil)pirolidin-1-il]-2-okso-1-feniletil}karbamat
[0417] terc-butil (2S,4S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-4-(trifluorometil)pirolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilat (<0.412mmol, sirov iz prethodnog koraka) je tretiran sa 6mL 4N HCl u dioksanu na sobnoj temperaturi preko noći i zatim na 50°C tokom 1 sata. Dietil etar (20mL) je dodat i talog hidrohloridne soli je sakupljen vakuum filtracijom. (126mg, 0.16mmol). Ovaj materijal je kombinovan sa (R)-2-(metoksikarbonilamino)-2-fenilsirćetnom kiselinom (34mg, 0.16mmol), COMU (70mg, 0.16mmol), i 1.6mL 10% DIPEA u DMF-u. Nakon 1 sata na sobnoj temperaturi, smeša je dodata u kapima u 25mL zasićenog natrijum bikarbonata, uz mešanje i dobijeni precipitat je sakupljen vakuum filtracijom i opran sa 2mL vode. Proizvod je prečišćen, zatim ponovo prečišćen pomoću HPLC na reverznoj fazi. (3.5mg).
MS (ESI) m/z 938.1 [M H]<+>.
Primer PK
[0418]
(2S,4S)-terc-butil 2-formil-4-metilpirolidin-1-karboksilat:
[0419] Smeša (2S,4S)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-metilpirolidin-2-karboksilne kiseline (5.2g, 22.7 mmol), O,N-dimetilhidroksilamin hidorhlorida (2.4g, 24.9mmol), HATU (10.4g,
2
27.2mmol) i DIPEA (9.5mL, 54.5mmol) u 114mL DMF-a je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Smeša je ekstrahovana u etil acetatu i oprana sa zasićenim bikarbonatom i vodom, osušena preko natrijum sulfata, filtrirana, i koncentrovana. Zatim je rastvorena u dietil etru (100mL) i oprana sa vodom da se ukloni preostali DMF, osušena, filtrirana, i koncentrovana do bledo žutog ulja (5.30g, 19.5mmol) (2S,4S)-terc-butil 2-(metoksi (metil)karbamoil)-4-metilpirolidin-1-karboksilata.
[0420] (2S,4S)-terc-butil 2-(metoksi (metil)karbamoil)-4-metilpirolidin-1-karboksilat (5.30g, 19.5mmol) je rastvoren u 120mL THF, ohlađen do -78°C i tretiran sa litijum aluminijum hidridom (1M u THF-u, 19.5mL, 19.5mmol) u kapima pomoću levka za dodavanje. Posle 1 sata, smeša je dovedena do 0°C i držana na toj temperaturi tokom 2 sata. Kvenčovana je dodavanjem u kapima 50mL rastvora 3.0g KHSO4 u vodi, uklonjena je iz ledenog kupatila, i mešana 15 minuta na sobnoj temperaturi. Proizvod je ekstrahovan sa tri porcije od 75mL etil acetata i opran sa slanim rastvorom. Organska faza je osušena preko natrijum sulfata, filtrirana, i koncentrovana da se dobije sirovi (2S,4S)-terc-butil2-formil-4-metilpirolidin-1-karboksilat. (4.89g)
(2S,4S)-terc-butil 2-(1H-imidazol-2-il)-4-metilpirolidin-1-karboksilat:
[0421] U rastvor (2S,4S)-terc-butil 2-formil-4-metilpirolidin-1-karboksilata (4.89g, 22.9mmol), amonijum hidroksida (17mL) i vode (17mL) je dodat, u kapima, glioksal (40% u vodi, 14.6mL, 128mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Zasićen natrijum bikarbonat (100mL) je dodat i smeša je ekstrahovana sa četiri porcije od 75mL dihlorometana. Organska faza je oprana sa vodom, osušena preko natrijum sulfata, filtrirana i koncentrovana, i zatim prečišćena hromatografijom na silika gelu da se dobije ukupno 3.76g proizvoda.
(2S,4S)-terc-butil 2-(5-jodo-1H-imidazol-2-il)-4-metilpirolidin-1-karboksilat:
[0422] Smeša (2S,4S)-terc-butil 2-(1H-imidazol-2-il)-4-metilpirolidin-1-karboksilata (1.0g, 3.97mmol), joda (2.22g, 8.75mmol) i natrijum karbonata (1.3g, 12.31mmol) u 20mL dioksana i 13.25mL vode je pokrivena folijom i mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Smeša je razblažena sa etil acetatom i tretirana sa 10% natrijum tiosulfatom (5mL) i mešana tokom 10 minuta. Organska faza je oprana sa slanim rastvorom, i zatim je vodena faza povratno ekstrahovana sa etil acetatom. Kombinovane organske faze su osušene preko natrijum sulfata, filtrirane i koncentrovane da se dobije sirov (2S,4S)-terc-butil 2-(4,5-dijodo-1H-imidazol-2-il)-4-metilpirolidin-1-karboksilat (2.25g) kao bledo žuta čvrsta supstanca.
[0423] Rastvor (2S,4S)-terc-butil 2-(4,5-dijodo-1H-imidazol-2-il)-4-metilpirolidin-1-
2 4
karboksilata (2.25g, 4.4mmol) u 18mL etanola i 18mL vode je tretiran sa natrijum sulfitom (5.59g, 44.4 mmol) i zagrejan na 90 °C preko noći. Smeša je podeljena između etil acetata i vode. Vodena faza je ekstrahovana sa još etil acetata i kombinovana organska faza je oprana sa slanim rastvorom, osušena preko natrijum sulfata, filtrirana, koncentrovana, i prečišćena hromatografijom na silika gelu da se dobije 766mg (2S,4S)-terc-butil 2-(5-jodo-1H-imidazol-2-il)-4-metilpirolidin-1-karboksilat.
Primer PL (Referenca)
[0424]
(2S,3aS,6aS)-2-benzil 1-terc-butil heksahidrociklopenta[b]pirol-1,2(2H)-dikarboksilat [0425] U rastvor komercijalno dostupnog (2S,3aS,6aS)-2-benzil 1-terc-butil heksahidrociklopenta[b]pirol-1,2(2H)-dikarboksilata (4.70 g, 16.68 mmol) u metilen hloridu (42 mL) je dodat Di-terc-butil dikarbonat (7.28 g, 33.36 mmol) N,N-diizopropiletilamin (5.82 mL, 33.36 mmol) i 4-(Dimetilamino)piridin (0.20 g, 1.67 mmol). Rastvor je mešan pod vazduhom tokom 16 sati. Po završetku, reakcija je koncentrovana u vakuumu, razblažena u etil acetatu, i oprana sa IN HCl. Vodeni slojevi su povratno ekstrahovani dva puta sa etil acetatom i kombinovani organski slojevi su osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani. Dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (5-40% etil acetat u heksanima) da se dobije (2S,3aS,6aS)-2-benzil 1-terc-butil heksahidrociklopenta[b]pirol-1,2(2H)-dikarboksilat koji je korišćen bez daljeg prečišćavanja. MS (ESI) m/z 368.47 [M Na]<+>.
2
(2S,3aS,6aS)-1-(terc-butoksikarbonil)oktahidrociklopenta[b]pirol-2-karboksilna kiselina
[0426] U sud sa okruglim dnom od 250mL koji je opremljen sa štapićem za mešanje i (2S,3aS,6aS)-2-benzil 1-terc-butil heksahidrociklopenta[b]pirol-1,2(2H)-dikarboksilatom (5.76 g, 16.68 mmol) je dodat 10% Paladijum na ugljeniku (1.77g). Etanol je sipan preko smeše i reakciona smeša je ispražnjena i isprana sa gasom vodonika tri puta. Suspenzija je mešana na sobnoj temperaturi pod i atmosferom vodonika tokom 24 sata. Po završetku, reakciona smeša je filtrirana kroz celit i koncentrovana da se dobije (2S,3aS,6aS)-1-(tercbutoksikarbonil)oktahidrociklopenta[b]pirol-2-karboksilna kiselina (4.45g, >99%). MS (ESI) m/z 256.21 [M H]<+>.
Primer PM (Referenca)
[0427]
2
terc-butil 2-[5-(2-{(2S,3aS,6aS)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]oktahidrociklopenta[b]pirol-2-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]pirolidin-1-karboksilat
[0428] Ovo jedinjenje je napravljeno na analogni način u odnosu na terc-butil (2R)-2-[5-(2-{(2S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]pirolidin-2-il}-3,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]pirolidin-1-karboksilat supstituisanjem (2S,3aS,6aS)-1-(tercbutoksikarbonil)oktahidrociklopenta[b]pirol-2-karboksilne kiseline za inicijalnu alkilaciju 9-bromo-3-hloro-10,11-dihidro-6H-nafto[2,3-c]hromen-8(9H)-ona. Reakcije u sintezi terc-butil 2-[5-(2-{(2S,3aS,6aS)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]oktahidrociklopenta[b]pirol-2-il}-
2
1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]pirolidin-1-karboksilata dale su slične prinose proizvoda kao u sintezi terc-butil (2R)-2-[5-(2-{(2S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]pirolidin-2-il}-3,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]pirolidin-1-karboksilata. MS (ESI) m/z 774.1 [M H]<+>. Primer PN (Referenca)
[0429]
metil {(1R)-2-[2-(5-{2-[(2S,3aS,6aS)-1-{(2S)-2-[(metoksikarboni|)amino]-3-metilbutanoil}oktahidrociklopenta[b]pirol-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-il]-2-okso-1-feniletil}karbamat
[0430] U rastvor terc-butil 2-[5-(2-{(2S,3aS,6aS)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]oktahidrociklopenta[b]pirol-2-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]pirolidin-1-karboksilata (0.128 g, 0.165 mmol) u smeši CH2Cl2(1.6 mL) i MeOH (0.33 mL) je dodat HCl (4M u 1,4-dioksanu, 1.24 mL, 4.9 mmol). Rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 1.5 h i koncentrovan do suva.
[0431] Intermedijer je rastvoren u CH2Cl2-u (1.6 mL). (R)-2-(metoksikarbonilamino)-2-fenilsirćetna kiselina (0.052 g, 0.25 mmol) i DIPEA (0.087 mL, 0.496 mmol) su zatim dodati
2
u rastvor. Reakciona smeša je ohlađena do -40 °C (spoljašnja temperatura, MeCN/CO2(s) kupatilo). COMU (0.113 g, 0.265 mmol) je zatim dodat i rastvor je ostavljen da se zagreje do 0 °C tokom 1.5 h. Po završetku LCMS, rastvor je razblažen sa DMF-om i koncentrovan. Sirov proizvod je prečišćen preparativnom HPLC (Gemini kolona, 10-47% MeCN/H2O sa 0.1% TFA) i željene frakcije su kombinovane. Rastvor je koncentrovan dok nije preostao vodeni sloj i vodeni bikarbonat (zas.) je polako dodat dok rastvor nije postao bazni. Dobijena gusta masa je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2h i filtrirana. Dobijena čvrsta supstanca je osušena u vakuumu da se dobije metil {(1R)-2-[2-(5-{2-[(2S,3aS,6aS)-1-{(2S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilbutanoil}oktahidrociklopenta[b]pirol-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-il]-2-okso-1-feniletil}karbamat (0.068 g, 48%).
MS (ESI) m/z 865.7 [M H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, cd3od) δ 8.44 - 8.30 (m, 1H), 8.02 - 7.82 (m, 2H), 7.81 - 7.58 (m, 4H), 7.50 - 7.11 (m, 6H), 7.09 - 6.83 (m, 2H), 5.72 - 5.45 (m, 2H), 5.41 (s, 1H), 5.34 - 5.28 (m, 1H), 5.22 (s, 3H), 4.69 - 4.64 (m, 1H), 4.26 - 4.19 (m, 1H), 4.03 - 3.98 (m, 1H), 3.96 - 3.91 (m, 1H), 3.66 (d, 4H), 2.98 - 2.91 (m, 1H), 2.88 - 2.83 (m, 1H), 2.58 - 2.48 (m, 1H), 2.27 - 2.12 (m, 4H), 2.11 - 2.00 (m, 3H), 2.00 - 1.89 (m, 2H), 1.77 - 1.72 (m, 1H), 1.31 -1.04 (m, 3H), 0.93 (d, 6H).
Primer PO
[0432]
2
metil {(2S)-1-[2-(5-{2-[(2S,3aS,6aS)-1-{(2S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilbutanoil}oktahidrociklopenta[b]pirol-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazo|-2-il)pirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat
[0433] U rastvor terc-butil 2-[5-(2-{(2S,3aS,6aS)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]oktahidrociklopenta[b]pirol-2-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]pirolidin-1-karboksilata (0.030 g, 0.039 mmol) u smeši CH2Cl2(0.39 mL) i MeOH (0.078 mL) je dodata HCl (4M u 1,4-dioksanu, 0.29 mL, 1.16 mmol). Rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 1.5 h i koncentrovan do suva.
[0434] Intermedijer je rastvoren u CH2Cl2-u (0.39 mL). (S)-2-(metoksikarbonilamino)-3-metilbutanska kiselina (0.007 g, 0.043 mmol) i DIPEA (0.020 mL, 0.116 mmol) su zatim dodati u rastvor. HATU (0.018 g, 0.047 mmol) je dodat i rastvor je ostavljen da se meša na sobnoj temp. Po završetku, rastvor je razblažen sa DMF-om i koncentrovan. Sirov proizvod je prečišćen preperativnom HPLC (Gemini kolona, 10-47% MeCN/H2O sa 0.1% TFA) i željene frakcije su kombinovane i liofilizirane da se dobije metil {(2S)-1-[2-(5-{2-[(2S,3aS,6aS)-1-{(2S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilbutanoil}oktahidrociklopenta[b]pirol-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat (0.010g, 31%). MS (ESI) m/z 832.2 [M H]<+>.
Primer PP (Referenca)
[0435]
21
metil [(1S)-2-[2-(5-{2-[(2S,3aS,6aS)-1-{(2S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilbutanoil}oktahidrociklopenta[b]pirol-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-il]-2-okso-1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etil]karbamat
[0436] Ovo jedinjenje je napravljeno na analogni način u odnosu na metil {(2S)-1-[2-(5-{2-[(2S,3aS,6aS)-1-{(2S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilbutanoil}oktahidrociklopenta[b]pirol-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat, supstituisanjem (S)-2-(metoksikarbonilamino)-2-(tetrahidro-2H-piran-4-il)sirćetne kiseline za (S)-2-(metoksikarbonilamino)-3-metilbutansku kiselinu da se dobije metil [(1S)-2-[2-(5-{2-[(2S,3aS,6aS)-1-{(2S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilbutanoil}oktahidrociklopenta[b]pirol-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-il]-2-okso-1-(tetrahidro-2H -piran-4-il)etil]karbamat (0.039, 56%). MS (ESI) m/z 874.34 [M H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, cd3od) δ 8.58 (s, 2H), 8.26 - 8.08 (m, 2H), 7.96 - 7.75 (m, 4H), 7.65 - 7.54 (m, 5H), 5.36 - 5.11 (m, 4H), 4.34 - 4.04 (m, 4H), 3.97 - 3.79 (m, 4H), 3.65 (s, 4H), 3.53 - 3.44 (m, 2H), 2.68 - 2.47 (m, 4H), 2.32 - 2.02 (m, 7H), 1.95 - 1.82 (m, 3H), 1.77 - 1.54 (m, 4H), 1.49 - 1.24 (m, 5H), 1.10 - 0.99 (m, 3H), 0.92 - 0.85 (m, 4H).
Primer PQ (Referenca)
[0437]
terc-butil 2-[5-(2-{(2S,4S)-4-[(difluorometoksi)metil]-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]pirolidin-2-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]pirolidin-1-karboksilat
[0438] Ovo jedinjenje je napravljeno na analogni način u odnosu na terc-butil 2-[5-(2-{(2S,3aS,6aS)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil] oktahidrociklopenta[b]pirol-2-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]pirolidin-1-karboksilat supstituisanjem (2S,4S)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-((difluorometoksi)metil)pirolidin-2-karboksilne kiseline za inicijalnu alkilaciju 9-bromo-3-hloro-10,11-dihidro-6H-nafto[2,3-c]hromen-8(9H)-ona. Reakcije u sintezi terc-butil 2-[5-(2-{(2S,4S)-4-[(difluorometoksi)metil]-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]pirolidin-2-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]pirolidin-1-karboksilata dale su slične prinose proizvoda kao terc-butil 2-[5-(2-{(2S,3aS,6aS)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil] oktahidrociklopenta[b]pirol-2-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]pirolidin-1-karboksilat. MS (ESI) m/z 815.04 [M H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, cd3od) δ 8.58 (s, 1H), 8.18 (d, 1H), 7.96 - 7.85 (m, 3H), 7.70 (s, 1H), 7.60 (d, 1H), 7.50 - 7.38 (m, 4H), 7.10 (s, 1H), 6.46 (t, 1H), 5.51 (s, 1H), 5.39 - 5.36 (m, 1H), 5.31 - 5.28 (m, 2H), 4.43 - 4.36 (m, 1H), 4.24 (d, 1H), 4.13 - 4.02 (m, 3H), 3.75 - 3.62 (m, 7H), 3.51 - 3.47 (m, 1H), 3.18 - 3.11 (m, 2H), 2.93 -2.83 (m, 2H), 2.75 - 2.69 (m, 1H), 2.47 - 2.36 (m, 2H), 2.23 - 2.09 (m, 3H), 2.01 - 1.94 (m, 2H), 0.87 (dd, 6H).
Primer PR
[0439]
21
terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(1R,3S,5R)-2-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-2-azabiciklo[3.1.0]heks-3-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilat
[0440] Ovo jedinjenje je napravljeno na analogni način u odnosu na terc-butil (2R)-2-[5-(2-{(2S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]pirolidin-2-il}-3,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]pirolidin-1-karboksilat supstituisanjem (1R,5R)-2-(terc-butoksikarbonil)-2-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-karboksilne kiseline za inicijalnu alkilaciju 9-bromo-3-hloro-10,11-dihidro-6H-nafto[2,3-c]hromen-8(9H)-ona, i supstituisanjem (2S,4S)-terc-butil 2-(5-jodo-1H-imidazol-2-il)-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilata za Suzuki-Miyara kuplovanje. Reakcije u sintezi tercbutil (2S,4S)-2-[5-(2-{(1R,3S,5R)-2-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-2-azabiciklo[3.1.0]heks-3-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilata dale su sličan prinos proizvoda kao u sintezi terc-butil (2R)-2-[5-(2-{(2S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]pirolidin-2-il}-3,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]pirolidin-1-karboksilata. MS (ESI) m/z 791.0 [M H]<+>.
metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(1R,3S,5R)-2-{(2S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-2-azabiciklo[3.1.0]heks-3-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoksimetil)pirolidin-1-il]-2-okso-1-feniletil}karbamat
[0441] U rastvor terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(1R,3S,5R)-2-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-2-azabiciklo[3.1.0]heks-3-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilata (0.060 g, 0.076 mmol) u smeši CH2Cl2(0.76 mL) i MeOH (0.15 mL) je dodata HCl (4M u 1,4-dioksanu, 0.570 mL, 2.28 mmol). Rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 2 h i koncentrovan do suva.
[0442] Intermedijer je rastvoren u CH2Cl2-u (0.76 mL). (R)-2-(metoksikarbonilamino)-2-fenilsirćetna kiselina (0.024 g, 0.114 mmol) i DIPEA (0.040 mL, 0.228 mmol) su zatim dodati u rastvor. Reakciona smeša je ohlađena do -40 °C (spoljašnja temperatura, MeCN/CO2(s) kupatilo). COMU (0.052 g, 0.122 mmol) je zatim dodat i rastvor je ostavljen da se zagreje do 0 °C tokom 1.5 h. Po završetku LCMS, rastvor je razblažen sa DMF-om i koncentrovan. Sirov proizvod je prečišćen preparativnom HPLC (Gemini kolona, 10-45% MeCN/H2O sa 0.1% TFA) i liofiliziran da se dobije metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(1R,3S,5R)-2-{(2S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-2-azabiciklo[3.1.0]heks3-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoksimetil)pirolidin-1-il]-2-okso-1-feniletil}karbamat (0.028 g, 42%). MS (ESI) m/z 881.8 [M H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, cd3od) δ 8.45 - 8.33 (m, 1H), 8.02 - 7.94 (m, 1H), 7.91 -7.75 (m, 2H), 7.72 - 7.67 (m, 1H), 7.61 (s, 1H), 7.59 - 7.34 (m, 6H), 7.09 - 6.91 (m, 2H), 5.62 - 5.38 (m, 2H), 5.29 (t, 1H), 5.24 - 5.09 (m, 3H), 4.61 (d, 1H), 4.37 - 4.26 (m, 1H), 3.83 -3.73 (m, 1H), 3.69 - 3.56 (m, 6H), 3.50 - 3.40 (m, 1H), 3.20 - 3.11 (m, 1H), 2.99 (s, 1H), 2.83 (d, 1H), 2.63 - 2.50 (m, 2H), 2.47 - 2.34 (m, 2H), 2.29 - 2.13 (m, 2H), 2.10 - 1.95 (m, 2H), 1.37 - 1.23 (m, 3H), 1.19 -1.10 (m, 1H), 1.03 - 0.78 (m, 7H).
Primer PS
[0443]
terc-butil (2S,4S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-(terc-butoksikarbonil)-5-metilpirolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-[(difluorometoksi )metil]pirolidin-1-karboksilat
[0444] Ovo jedinjenje je napravljeno na analogni način u odnosu na terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidin-2-il}-1,11-
21
dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilat supstituisanjem (2S,5S)-1-(terc-butoksikarbonil)-5-metilpirolidin-2-karboksilne kiseline za inicijalnu alkilaciju 3-(2-bromoacetil)-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-8(9H)-ona, i supstituisanjem (2S,4S)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-((difluorometoksi)metil)pirolidin-2-karboksilne kiseline za drugu alkilaciju u nizu. Reakcije u sintezi terc-butil (2S,4S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-(terc-butoksikarbonil)-5-metilpirolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-[(difluorometoksi)metil]pirolidin-1-karboksilata dale su sličan prinos proizvoda kao u sintezi terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidin-2-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilata. MS (ESI) m/z 772.03 [M H]<+>.
metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-4-[(difluorometoksi )metil]-1-{(2S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat
[0445] U rastvor terc-butil (2S,4S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-(terc-butoksikarbonil)-5-metilpirolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-[(difluorometoksi )metil]pirolidin-1-karboksilata (0.081 g, 0.105 mmol) u smeši CH2Cl2(1.05 mL) i MeOH (0.210 mL) je dodata HCl (4M u 1,4-dioksanu, 0.788 mL, 3.15 mmol). Rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 2 h i koncentrovan do suva.
[0446] Intermedijer je rastvoren u CH2Cl2-u (1.05 mL). (S)-2-(metoksikarbonilamino)-3-metilbutanska kiselina (0.040 g, 0.231 mmol) i DIPEA (0.055 mL, 0.315 mmol) su zatim dodati u rastvor. HATU (0.176 g, 0.462 mmol) je dodat i rastvor je ostavljen da se meša na sobnoj temp. Po završetku, rastvor je razblažen sa DMF-om i koncentrovan. Sirov proizvod je prečišćen preparativnom HPLC (Gemini kolona, 10-45% MeCN/H2O sa 0.1% TFA) i željene frakcije su kombinovane. Rastvor je koncentrovan dok nije ostao vodeni sloj i vodeni bikarbonat (zas.) je polako dodat dok rastvor nije postao bazni. Dobijena gusta masa je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2h i filtrirana. Dobijena čvrsta supstanca je osušena u vakuumu da se dobije metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-4-[(difluorometoksi )metil]-1-{(2S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat (0.025 g, 27%). MS (ESI) m/z 886.1 [M H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, cd3od) δ 8.49 - 8.25 (m, 2H), 8.08 - 7.82 (m, 2H), 7.79 - 7.27 (m, 5H), 6.45
21
(t, 1H), 5.36 - 5.26 (m, 1H), 5.22 - 5.07 (m, 3H), 4.78 - 4.49 (m, 2H), 4.45 - 4.19 (m, 3H), 4.16 - 4.05 (m, 2H), 3.99 - 3.92 (m, 1H), 3.85 - 3.71 (m, 2H), 3.66 (s, 3H), 2.88 - 2.70 (m, 2H), 2.69 - 2.49 (m, 2H), 2.42 - 2.26 (m, 2H), 2.23 - 2.10 (m, 2H), 2.07 - 1.87 (m, 3H), 1.51 (d, 2H), 1.34 - 1.20 (m, 2H), 1.17 - 0.76 (m, 12H).
Primer PT
[0447]
metil {(2S)-1-[(2S,4S)-4-[(difluorometoksi)metil]-2-(5-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-5-metilpirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat
[0448] Ovo jedinjenje je napravljeno na analogni način u odnosu na terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidin-2-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilat supstituisanjem (2S,4S)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-((difluorometoksi)metil)pirolidin-2-karboksilne kiseline za inicijalnu alkilaciju 3-(2-
21
bromoacetil)-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-8(9H)-ona, i supstituisanjem (2S,5S)-1-(terc-butoksikarbonil)-5-metilpirolidin-2-karboksilne kiseline za drugu alkilaciju u nizu. Reakcije u sintezi terc-butil (2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,5S)-1-(terc-butoksikarbonil)-5-metilpirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-[(difluorometoksi)metil]pirolidin-1-karboksilata dale su sličan prinos proizvoda kao u sintezi terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidin-2-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilata. MS (ESI) m/z 772.31 [M H]<+>. metil {(2S)-1-[(2S,4S)-4-[(difluorometoksi)metil]-2-(5-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-5-metilpirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat
[0449] U terc-butil (2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,5S)-1-(terc-butoksikarbonil)-5-metilpirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-[(difluorometoksi)metil]pirolidin-1-karboksilat (0.057 g, 0.074 mmol) u smeši CH2Cl2(0.739 mL) i MeOH (0.148 mL) je dodata HCl (4M u 1,4-dioksanu, 0.555 mL, 2.218 mmol). Rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 2 h i koncentrovan do suva.
[0450] Intermedijer je rastvoren u CH2Cl2-u (0.739 mL). (S)-2-(metoksikarbonilamino)-3-metilbutanska kiselina (0.028 g, 0.163 mmol) i DIPEA (0.039 mL, 0.222 mmol) su zatim dodati u rastvor. HATU (0.124 g, 0.325 mmol) je dodat i rastvor je ostavljen da se meša na sobnoj temp. Po završetku, rastvor je razblažen sa DMF-om i koncentrovan. Sirov proizvod je prečišćen preparativnom HPLC (Gemini kolona, 10-46% MeCN/H2O sa 0.1% TFA) i željene frakcije su kombinovane i liofilizirane da se dobije metil {(2S)-1-[(2S,4S)-4-[(difluorometoksi)metil]-2-(5-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-5-metilpirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat (0.011 g, 17%). MS (ESI) mlz 886.1 [M H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, cd3od) δ 8.67 - 8.51 (m, 1H), 8.26 - 8.11 (m, 1H), 8.04 - 7.75 (m, 3H), 7.69 - 7.58 (m, 2H), 6.43 (t, 1H), 5.41 - 5.15 (m, 4H), 4.48 - 3.90 (m, 6H), 3.82 (s, 1H), 3.71 - 3.57 (m, 5H), 3.53 - 3.43 (m, 1H), 3.20 - 3.01 (m, 2H), 2.92 -2.63 (m, 3H), 2.60 - 2.25 (m, 4H), 2.15 - 1.86 (m, 4H), 1.57 (d, 3H), 1.24 (d, 2H), 1.07 (dd, 2H), 0.98 - 0.77 (m, 9H).
Primer PU
[0451]
21
terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,4S)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-[(difluorometoksi)metil]pirolidin-2-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilat
[0452] Ovo jedinjenje je napravljeno na analogni način u odnosu na terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidin-2-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilat supstituisanjem (2S,4S)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-(metoksimetil)pirolidin-2-karboksilne kiseline za inicijalnu alkilaciju 3-(2-bromoacetil)-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-8(9H)-ona, i supstituisanjem (2S,4S)-1-(tercbutoksikarbonil)-4-((difluorometoksi)metil)pirolidin-2-karboksilne kiseline za drugu alkilaciju u nizu. Reakcije u sintezi terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,4S)-1-(tercbutoksikarbonil)-4-[(difluorometoksi)metil]pirolidin-2-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilata dale su sličan prinos proizvoda kao u sintezi terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidin-2-il}-1,11-
21
dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilata. MS (ESI) m/z 801.1 [M H]<+>.
metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-4-[(difluorometoksi)metil]-1-{(2S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoksimetil)pirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat
[0453] U terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,4S)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-[(difluorometoksi)metil]pirolidin-2-il}-1,11 dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilat (0.092 g, 0.115 mmol) u smeši CH2Cl2(1.15 mL) i MeOH (0.230 mL) je dodata HCl (4M u 1,4-dioksanu, 0.862 mL, 3.446 mmol). Rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 2 h i koncentrovan do suva.
[0454] Intermedijer je rastvoren u CH2Cl2-u (1.149 mL). (S)-2-(metoksikarbonilamino)-3-metilbutanska kiselina (0.044 g, 0.253 mmol) i DIPEA (0.060 mL, 0.345 mmol) su zatim dodati u rastvor. HATU (0.192 g, 0.505 mmol) je dodat i rastvor je ostavljen da se meša na sobnoj temp. Po završetku, rastvor je razblažen sa DMF-om i koncentrovan. Sirov proizvod je prečišćen preparativnom HPLC (Gemini kolona, 10-45% MeCN/H2O sa 0.1% TFA) i željene frakcije su kombinovane. Rastvor je koncentrovan dok nije ostao vodeni sloj i vodeni bikarbonat (zas.) je polako dodat dok rastvor nije postao bazni. Dobijena gusta masa je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2h i filtrirana. Dobijena čvrsta supstanca je osušena u vakuumu da se dobije metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-4-[(difluorometoksi)metil]-1-{(2S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoksimetil)pirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat (0.042 g, 40%). MS (ESI) m/z 916.30 [M H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, cd3od) δ 8.55 - 8.25 (m, 1H), 8.15 - 7.85 (m, 2H), 7.83 - 7.26 (m, 5H), 6.44 (t, 1H), 5.37 - 5.02 (m, 4H), 4.47 - 4.35 (m, 1H), 4.33 - 4.18 (m, 3H), 4.15 - 3.90 (m, 3H), 3.81 - 3.45 (m, 11H), 3.39 (s, 3H), 2.90 - 2.27 (m, 5H), 2.22 - 1.92 (m, 4H), 1.12 - 0.73 (m, 13H).
Primer PX (Referenca)
[0455]
22
(2S,4S)-1-terc-butil 2-metil 4-((difluorometoksi )metil)pirolidin-1,2-dikarboksilat [0456] Sud sa okruglim dnom od 100 mL je napunjen sa (2S,4S)-1-terc-butil 2-metil 4-(hidroksimetil)pirolidin-1,2-dikarboksilatom (3.33 g, 12.84 mmol), CuI (0.489 g, 2.56 mmol), i anhidrovanim acetonitrilom (57.1 mL). Reakcija je zagrejana do 45 °C (spolj. uljano kupatilo). 2,2-difluoro-2-(fluorosulfonil)sirćetna kiselina (2.655 mL, 25.68 mmol) je dodavana na 45 °C tokom 30 minuta preko špric pumpe. Reakcija je zagrevana tokom 30 minuta. Po završetku kako je praćeno pomoću TLC, reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i koncentrovana u vakuumu. Sirov ostatak je razblažen u EtOAc-u i opran sa natrijum bikarbonatom (vod). Bikarbonatni sloj je povratno ekstrahovan sa etil acetatom dva puta. Kombinovani organski slojevi su oprani sa slanim rastvorom, osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani. Dobijeni ostatak je dalje prečišćen hromatografijom na silika gelu (10 do 40 % EtOAc/Heksani) da se dobije (2S,4S)-1-terc-butil 2-metil 4-((difluorometoksi)metil)pirolidin-1,2-dikarboksilat (2.41 g, 61%). MS (ESI) m/z 210.21 [M H - Boc]<+>.
(2S,4S)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-((difluorometoksi)metil)pirolidin-2-karboksilna kiselina
[0457] U rastvor (2S,4S)-1-terc-butil 2-metil 4-((difluorometoksi)metil)pirolidin-1,2-dikarboksilata (2.41 g, 7.79 mmol) u smeši THF (39 mL) i MeOH (15.6 mL) je dodat LiOH (2.5 M vodeni, 15.6 mL, 38.9 mmol). Dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 1h. Po završetku TLC reakciona smeša je bila i zakiseljena sa vodenim HCl (1N). Željeni proizvod je ekstrahovan sa CH2Cl2-om (3x). Kombinovani organski slojevi su osušeni preko Na2SO4i koncentrovani da se dobije (2S,4S)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-((difluorometoksi metil)pirolidin-2-karboksilna kiselina (2.4 g, 99%). MS (ESI) m/z 294.96 [M - H]-.<1>H-NMR: 400 MHz, (aceton-d6) δ (smeša rotomera): 6.50 (t, 1H), 4.36-4.17 (m, 1H), 3.93 (d, 2H), 3.77-3.67 (m, 1H), 3.63-3.59 (m, 1H), 3.26-3.12 (m, 1H), 2.72-2.41 (m, 2H), 1.89-1.73 (m, 2H), 1.41 (s, 9H).
Primer PY (Referenca)
[0458]
Metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-{(2R)-2-[(metoksikarbonil)amino]-2-fenilacetil}-4-(metoksimetil)pirolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5-metilpirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat
[0459] Rastvor terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidin-2-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilata (150 mg, 0.19 mmol) u 1.25 N HCl-u u EtOH-u (3 mL) je mešan preko noći zatim zagrevan do 50 °C tokom 3h. Reakcija je koncentrovana i sirov materijal rastvoren u DMF-u (2 mL). U ovaj rastvor je dodat rastvor (R)-2-(metoksikarbonilamino)-2-fenilsirćetne kiseline (52 mg, 0.25 mmol) i COMU (90 mg, 0.21 mmol). U dobijeni rastvor je dodat diizopropiletilamin (0.099 mL, 0.57 mmol). Nakon mešanja tokom 2h na sobnoj temperaturi, reakcija je kvenčovana sa IN HCl (0.200 mL) i prečišćena pomoću HPLC. Nakon liofilizacije, TFA so je rastvorena u EtOAc-u i oprana sa zasićenim NaHCO3. Organska faza je osušena preko Na2SO4i koncentrovana. Slobodna baza je zatim rastvorena u smeši MeCN/H2O i liofilizirana da se dobije metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-{(2R)-2-[(metoksikarbonil)amino]-2-fenilacetil}-4-(metoksimetil)pirolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5-metilpirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat (65 mg, 39%). LCMS-ESI<+>: izračunato za C49H54N8O8: 882.4; primećeno [M+1]<+>: 884.1. Dijagnostički pikovi u NMR 'H NMR (CD3OD): 8.28 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.91-7.01 (m, 10H), 3.62 (s, 3H), 3.34 (s, 3H), 3.23 (s, 3H), 1.56 (d, 3H), 1.03 (d, 3H), 0.94 (d, 3H).
Primer PY-1 (Referenca)
[0460]
9-bromo-3-(2-bromoacetil)-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-8(9H)-on
[0461] U 3-(2-bromo-1-hidroksietil)-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-8(9H)-on (20.3g, 54.4 mmol) u DCM-u (365 mL) je dodat MeOH (22 mL) i piridinijum tribromid (18.24 g, 57.0 mmol). Nakon 2h, voda je dodata (100mL) i nakon kratkog mućkanja slojevi su podeljeni i donji organski sloj je sakupljen. Organski sloj je zatim opran sa 1M HCl (100 mL)
22
i donji organski sloj koji sadrži 9-bromo-3-(2-bromo-1-hidroksietil)-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-8(9H)-on je sakupljen. 400 MHz<1>H NMR (CDCl3) 7.75 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.68 (s, 1H), 7.61 (s, 1H), 7.42 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 7.24 (s, 1H), 5.13 (s, 2H), 4.99-4.96 (m, 1H), 4.73 (dd, J = 4.1, 4.1 Hz, 1H), 3.69-3.66 (m, 1H), 3.58-3.53 (m, 1H), 3.35-3.27 (m, 1H), 2.96-2.90 (m, 1H), 2.58-2.44 (m, 2H), C-OH nije primećen.
[0462] U 9-bromo-3-(2-bromo-1-hidroksietil)-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-8(9H)-on (približno 54.4 mmol) u DCM-u (365mL) je dodat natrijum bikarbonat (5.45 g), natrijum bromid (6.14 g), TEMPO (16.55 mg) i voda (60 mL). Rastvor je ohlađen između 0-5 °C i 6% izbeljivač (91.5 mL) je dodat. Nakon 1h izopropil alkohol (20 mL) je dodat i reakciona smeša je zagrejana do sobne temperature. Mućkanje je zaustavljeno, slojevi odvojeni i donji organski sloj je sakupljen i koncentrovan uklanjanjem približno 345 g rastvarača. Gusta masa je filtrirana i pogača je oprana sa 50 mL vode i zatim 50 mL DCM (prethodno-ohlađenog do 5 °C). Čvrste supstance su sakupljene i osušene pod vakuumom da se dobije 9-bromo-3-(2-bromoacetil)-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-8(9H)-on (18.6 g, 76% prinos). 400 MHz<1>H NMR (CDCl3) δ 8.03-8.01 (m, 1H), 7.85 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.71 (s, 1H), 7.67 (s, 1H), 5.19 (s, 2H), 4.74 (dd, J = 4.1, 4.1 Hz, 1H), 4.45 (s, 2H), 3.37-3.29 (m, 1H), 2.99-2.92 (m,1H), 2.59-2.46 (m, 2H); 100 MHz<13>C NMR (CDCl3) δ 190.4, 189.6, 154.2, 136.6, 134.1, 133.9, 132.9, 131.8, 129.3, 127.2, 125.6, 124.2, 123.3, 117.0, 68.1, 49.9, 31.8, 30.4, 25.5.
Primer PY-2 (Referenca)
[0463]
9-bromo-3-(2-bromoacetil)-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-8(9H)-on
[0464] Smeša 3-(2-bromoacetil)-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-8(9H)-ona (2.58 g, 6.95 mmol), piridinijum tribromida (2.56 g, 8.0 mmol), dihlorometana (22mL) i metanola (2.5mL) je mešana na oko 20°C tokom 3 sata da se dobije gusta masa. Precipitiran proizvod je filtriran, opran sa dihlorometanom (10mL) i osušen u vakuum rerni na 40°C da se dobije 9-bromo-3-(2-bromoacetil)-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-8(9H)-on (2.62 g, 84% prinos). 400 MHz<1>H NMR (CDCl3) δ 8.03-8.01 (m, 1H), 7.85 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.71 (s, 1H), 7.67 (s, 1H), 5.19 (s, 2H), 4.74 (dd, J = 4.1, 4.1 Hz, 1H), 4.45 (s, 2H), 3.37-3.29 (m, 1H), 2.99-2.92 (m,1H), 2.59-2.46 (m, 2H).
Primer PY-3 (Referenca)
[0465]
3-((trimetilsilil)etinil)-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-8(9H)-on
[0466] Sud od 300 mL opremljen sa stubnom mešalicom i refluksnim kondenzatorom u atmosferi azota je napunjen sa 3-hloro-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-8(9H)-onom (10.0g, 35.12 mmol), praškastim anhidrovanim trikalijum fosfatom (22.4 g, 105.4 mmol), XPhos (1.34 g, 2.81 mmol), i PdCl2(MeCN)2(364 mg, 1.40 mmol). Acetonitril (140 mL) je dodat praćeno sa TMSacetilenom (18 mL, 141 mmol). Smeša je zagrejana do 65 °C. Nakon 6h, reakcija je procenjena da je završena, i smeša je ohlađena do 20 °C. Smeša je filtrirana kroz fritovani levak, i filter pogača je oprana sa acetonitrilom. Filtrat je koncentrovan do oko 150 mL pod smanjenim pritiskom i ekstrahovan sa heptanom (50 mL, 3×100 mL). N-Acetil cistein (15 g) je dodat u acetonitrilnu fazu, i smeša je mućkana tokom 5 h na 45 °C. Smeša je ohlađena do ambijentalne temperature, filtrirana kroz fritovani levak, i filter pogača je oprana sa acetonitrilom. Filtrat je koncentrovan do oko 120 mL pod sniženim pritiskom. Voda (120 mL) je dodata i smeša je mućkana tokom 40 minuta na 45 °C i zatim ohlađena do ambijentalne temperature. Nakon 30 minuta smeša je filtrirana kroz fritovani levak da se dobije 3-((trimetilsilil)etinil)-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-8(9H)-on (4.07 g, 33.4%
22
prinos) kao žuta čvrsta supstanca: 400 MHz<1>H NMR (CDCl3) δ 7.65 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.60 (s, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.47 (dd, J = 8.1, 1.4 Hz, 1H), 7.27 (s, 1H), 5.06 (s, 2H), 2.95 (t, J = 6.1 Hz, 2H), 2.67 - 2.59 (m, 2H), 2.18 - 2.08 (m, 2H), 0.26 (s, 9H).
3-acetil-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g] hromen-8(9H)-on
[0467] Bočica od 20 mL sa štapićem za mešanje je napunjena sa 3-((trimetilsilil)etinil)-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-8(9H)-onom (850 mg, 2.44 mmol) i mravljom kiselinom (9.8 mL). Rastvor je zagrejan do 65 °C. Nakon 3 h, reakcija je ocenjena kao završena. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom; dobijeni ostatak je prebačen u CH2Cl2i nanet na prethodno pakovan kartridž sa 25g silika gela. Proizvod je prečišćen hromatografijom na prethodno pakovanoj koloni sa 80g silika gela eluiranjem sa gradijentom rastvarača od 5% do 85% EtOAc/heksani. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i koncentrovane da se dobije 3-acetil-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-8(9H)-on (616 mg, 86%): 400 MHz<1>H NMR (CDCl3) δ 8.00 - 7.94 (m, 1H), 7.81 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.64 (s, 2H), 5.16 (s, 2H), 2.98 (t, J = 6.1 Hz, 2H), 2.69 - 2.64 (m, 2H), 2.63 (s, 3H), 2.21 - 2.09 (m, 2H).
9-bromo-3-(2-bromoacetil)-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-8(9H)-on
[0468] Bočica od 20 mL sa štapićem za mešanje je napunjena sa 3-acetil-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-8(9H)-onom (100 mg, 0.366 mmol), smešom CH2Cl2/MeOH u odnosu 9:1 (3.4 mL) i piridinijum tribromidom (246 mg, 0.769 mmol). Rastvor je zagrejan do 35 °C. Nakon 30 minuta, reakcija je ocenjena kao završena. Smeša je ohlađena do ambijentalne temperature, razblažena sa EtOAc-om (50 mL) i sekvencijalno oprana sa zasićenim vodenim Na2S2O3(20 mL), 2% vodenim NaHCO3(20 mL), vodom (20 mL), i slanim rastvorom (10 mL). Organska faza je osušena preko MgSO4, filtrirana i koncentrovana pod smanjenim pritiskom dajući 9-bromo-3-(2-bromoacetil)-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-8(9H)-on (68 mg, 41%): 400 MHz<1>H NMR (CDCl3) δ 8.03 - 8.01 (m, 1H), 7.85 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.71 (s, 1H), 7.67 (s, 1H), 5.19 (s, 2H), 4.74 (dd, J = 4.1, 4.1 Hz, 1H), 4.45 (s, 2H), 3.37-3.29 (m, 1H), 2.99 - 2.92 (m,1H), 2.59 - 2.46 (m, 2H).
Primer PY-4 (Referenca)
[0469]
22
(2S, 5S)-2-(2-(9-bromo-8-okso-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-3-il)-2-oksoetil) 1-terc-butil 5-metilpirolidin-1,2-dikarboksilat
[0470] 9-bromo-3-(2-bromoacetil)-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-8(9H)-on (1.43 g, 3.17 mmol) je tretiran sa rastvorom (2S,5S)-1-(terc-butoksikarbonil)-5-metilpirolidin-2-karboksilne kiseline (800 mg, 3.49 mmol) u dihlorometanu (14 mL) i K2CO3(658 mg, 1.18 mmol). Promešana reakciona smeša je mešana na ST i razblažena sa CH2Cl2-om i ekstrahovana 3X. Organska faza je oprana sa slanim rastvorom, zatim osušena preko MgSO4, filtrirana i koncentrovana pod smanjenim pritiskom da se dobije ((2S,5S)-2-(2-(9-bromo-8-okso-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-3-il)-2-oksoetil) 1-terc-butil 5-metilpirolidin-1,2-dikarboksilat (1.61 g, 84%).
[0471] Ova sinteza može biti korišćena da se naprave razna jedinjenja opisana ovde, uključujući jedinjenje služi kao primer u PY.
Primer PZ
[0472]
22
Metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4-(metoksimetil)pirolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5-metilpirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat
[0473] Terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidin-2-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilat (100 mg, 0.13 mmol) u 1.25 N HCl u EtOH-u (3 mL) je zagrejan do 50 °C tokom 3h i zatim koncentrovan pod smanjenim pritiskom. Sirov ostatak je tretiran sa (S)-2-(metoksikarbonilamino)-3-metilbutanskom kiselinom (34 mg, 0.20 mmol), HATU (54 mg, 0.14 mmol) i DMF (1.3 mL), zatim N-metilmorfolin (0.043 mL, 0.39 mmol) je dodat u kapima. Nakon 3h, smeša je kvenčovana sa 1N HCl (0.100 mL) i zatim prečišćena pomoću HPLC da se dobije metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4-(metoksimetil)pirolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5-metilpirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat (91 mg, 82%).
22
LCMS-ESI<+>: izračunato za C46H56N8O8: 848.4; primećeno [M+1]<+>: 850.2.
Primer Q<A>
[0474]
Metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-{(2S,3S)-3-metoksi -2-[(metoksikarbonil)amino]butanoil}-4-(metoksimetil)pirolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5-metilpirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat
[0475] Terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidin-2-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilat (119 mg, 0.15 mmol) u 1.25 N HCl u EtOH-u (3 mL) je zagrevan do 50 °C tokom 3h i zatim koncentrovan pod smanjenim pritiskom. Sirov ostatak je tretiran sa (2S,3R)-3-metoksi-2-(metoksikarbonilamino)butanskom kiselinom (43 mg, 0.23 mmol), HATU (63 mg, 0.17 mmol) i DMF (2 mL), zatim N-metilmorfolin (0.050 mL, 0.45 mmol) je dodat u kapima. Nakon 3 sata, smeša je kvenčovana sa IN HCl (0.100 mL) i zatim prečišćena pomoću HPLC da se dobije metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-{(2S,3S)-3-metoksi-2-[(metoksikarbonil)amino]butanoil}-4-(metoksimetil)pirolidin-2-il]-1H-imidazol-
22
5-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5-metilpirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat (76 mg, 59%).
LCMS-ESI<+>: izračunato za C46H56N8O9: 864.4; primećeno [M+1]<+>: 866.1.
Primer QB
[0476]
2
Metil (2S,3S)-1-((2S,4S)-2-(5-bromo-1H-imidazol-2-il)-4-metilpirolidin-1-il)-3-metil-1-oksopentan-2-ilkarbamat
[0477] (2S,4S)-terc-butil 2-(5-bromo-1H-imidazol-2-il)-4-metilpirolidin-1-karboksilat (100 mg, 0.13 mmol) u 1.25 N HCl u EtOH-u (15 mL) je zagrevan do 50 °C tokom 3h i zatim koncentrovan pod smanjenim pritiskom. Sirov ostatak je tretiran sa (2S,3S)-2-(metoksikarbonilamino)-3-metilpentanskom kiselinom (625 mg, 3.30 mmol), HATU (1.05 g, 2.77 mmol) i DMF (10 mL), zatim DIPEA (1.33 mL, 7.62 mmol) je dodat u kapima. Nakon 2h, smeša je sipana u zasićeni vodeni NaHCO3i zatim ekstrahovana sa EtOAc-om. Organska faza je oprana sukcesivno sa 5% vodenim LiCl i slanim rastvorom. Organske supstance su osušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane pod smanjenim pritiskom. Sirov ostatak je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika gelu (30 do 90% 10%MeOH/EtoAc u Heksanima) što je dalo metil (2S,3S)-1-((2S,4S)-2-(5-bromo-1H-imidazol-2-il)-4-metilpirolidin-1-il)-3-metil-1-oksopentan-2-ilkarbamat (932 mg, 81%).
Terc-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-aloizoleucil]-4-metilpirolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilat
[0478] (2S,4S)-Terc-butil 4-(metoksimetil)-2-(9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)pirolidin-1-karboksilat (856 mg, 1.4 mmol), metil (2S,3S)-1-((2S,4S)-2-(5-bromo-1H-imidazol-2-il)-4-metilpirolidin-1-il)-3-metil-1-oksopentan-2-ilkarbamat (932 mg, 2.1 mmol), Pd(PPh3)4(162 mg, 0.14 mmol), PdCl2(dppf)2(102 mg, 0.14 mmol), i K2CO3(2M in H2O, 2.31 mL, 4.62 mmol) su kombinovani u DMSO-u (8 mL) i dioksanima (8 mL). Smeša je degasirana propuštanjem Argona u mehurićima tokom 10 min zagrevana do 95 °C tokom 1h. Nakon hlađenja, reakciona smeša je razblažena sa EtOAc-om, i opran sukcesivno sa zasićenim vodenim NaHCO3i slanim rastvorom. Organske supstance su osušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane pod smanjenim pritiskom. Sirov ostatak je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika gelu (1% do 20% MeOH/EtOAc) da se dobije terc-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-aloizoleucil]-4-metilpirolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilat (701 mg, 62%).
Metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-{(2S,3R)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilpentanoil}-4-metilpirolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-
2 1
dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoksimetil)pirolidin-1-il]-2-okso-1-feniletil}karbamat
[0479] Rastvor terc-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-aloizoleucil]-4-metilpirolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilata (218 mg, 0.27 mmol) u 1.25 N HCl u EtOH-u (3 mL) je zagrevan do 50 °C tokom 3h. Reakcija je koncentrovaan i sirov materijal rastvoren u DMF-u (3 mL). U ovaj rastvor je dodat rastvor (R)-2-(metoksikarbonilamino)-2-fenilsirćetne kiseline (73 mg, 0.35 mmol) i COMU (127 mg, 0.30 mmol). U dobijeni rastvor je dodat diizopropiletilamin (0.141 mL, 0.81 mmol). Nakon mešanja tokom 2h na sobnoj temperaturi, reakcija je kvenčovana sa IN HCl (0.200 mL) i prečišćena pomoću HPLC. Nakon liofilizacije, TFA so je rastvorena u EtOAc-u i oprana sa zasićenim NaHCO3. Organska faza je osušena preko Na2SO4i koncentrovana. Slobodna baza je zatim rastvorena u smeši MeCN/H2O i liofilizirana da se dobije metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-{(2S,3R)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilpentanoil}-4-metilpirolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoksimetil)pirolidin-1-il]-2-okso-1-feniletil}karbamat
(121 mg, 50%). LCMS-ESI<+>: izračunato za C50H56N8O8: 896.4; primećeno [M+1]<+>: 897.5. Primer QC
[0480]
2 2
Metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-{(2S,3R)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilpentanoil}-4-metilpirolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoksimetil)pirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat
[0481] terc-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-aloizoleucil]-4-metilpirolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilat (105 mg, 0.13 mmol) u 1.25 N HCl u EtOH (3 mL) je zagrejan do 50 °C tokom 3h i zatim koncentrovan pod smanjenim pritiskom. Sirov ostatak je tretiran sa (S)-2-(metoksikarbonilamino)-3-metilbutanskom kiselinom (32 mg, 0.18 mmol), HATU (59 mg, 0.16 mmol) i DMF-om (1.3 mL), zatim N-metilmorfolin (0.043 mL, 0.39 mmol) je dodat u kapima. Nakon 3h, smeša je kvenčovana sa IN HCl (0.100 mL) i zatim prečišćena pomoću HPLC da se dobije metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-{(2S,3R)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilpentanoil}-4-metilpirolidin-2-
2
il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoksimetil)pirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat (80 mg, 71%).
LCMS-ESI<+>: izračunato za C47H58N8O8: 862.4; primećeno [M+1]<+>: 864.2.
Primer QD
[0482]
Metil {(2S,3R)-1-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-[N-(metoksikarbonil)-O-metil-L-alotreonil]-4-(metoksimetil)pirolidin-2-il]-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-metilpirolidin-1-il]-3-metil-1-oksopentan-2-il}karbamat [0483] terc-butil (2S,4S)-2-[9-(2- {(2S,4S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-aloizoleucil]-4-metilpirolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-
2 4
d]imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilat (105 mg, 0.13 mmol) u 1.25 N HCl u EtOH (3 mL) je zagrejan do 50 °C tokom 3h i zatim koncentrovan pod smanjenim pritiskom. Sirov ostatak je tretiran sa (2S,3R)-3-metoksi-2-(metoksikarbonilamino)butanskom kiselinom (35 mg, 0.18 mmol), HATU (59 mg, 0.16 mmol) i DMF-om (1.3 mL), zatim N-metilmorfolin (0.043 mL, 0.39 mmol) je dodat u kapima. Nakon 3 sata, smeša je kvenčovana sa IN HCl (0.100 mL) i zatim prečišćena pomoću HPLC da se dobije metil {(2S,3R)-1-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-[N-(metoksikarbonil)-O-metil-L-alotreonil] -4-(metoksimetil)pirolidin-2-il] -1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-metilpirolidin-1-il]-3-metil-1-oksopentan-2-il}karbamat (92 mg, 81%).
LCMS-ESI<+>: izračunato za C47H58N8O9: 878.4; primećeno [M+1]<+>: 879.3.
Primer QE
[0484]
Metil {(3R)-1-[(2S,4S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-{(2S,3R)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilpentanoil}-4-metilpirolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoksimetil)pirolidin-1-il]-3-metil-1-oksopentan-2-il}karbamat
2
[0485] terc-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-aloizoleucil]-4-metilpirolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-(metoksimetil)pirolidin-1-karboksilat (105 mg, 0.13 mmol) u 1.25 N HCl u EtOH (3 mL) je zagrejan do 50 °C tokom 3h i zatim koncentrovan pod smanjenim pritiskom. Sirov ostatak je tretiran sa (2S,3S)-2-(metoksikarbonilamino)-3-metilpentanskom kiselinom (34 mg, 0.18 mmol), HATU (59 mg, 0.16 mmol) i DMF (1.3 mL), zatim N-metilmorfolin (0.043 mL, 0.39 mmol) je dodat u kapima. Nakon 3h, smeša je kvenčovana sa IN HCl (0.100 mL) i zatim prečišćena pomoću HPLC da se dobije metil {(3R)-1-[(2S,4S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-{(2S,3R)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilpentanoil}-4-metilpirolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoksimetil)pirolidin-1-il]-3-metil-1-oksopentan-2-il}karbamat (98 mg, 86%).
LCMS-ESI<+>: izračunato za C48H60N8O8: 876.5; primećeno [M+1]<+>: 878.2.
Primer QF
[0486]
2
�
(2S,5S)-1-terc-butil 2-(3-hloro-8-okso-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-9-il) 5-metilpirolidin-1,2-dikarboksilat
[0487] U rastvor 9-bromo-3-hloro-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-8(9H)-ona (1.41 g, 3.88 mmol) u MeCN (17 mL) je dodata (2S,5S)-1-(terc-butoksikarbonil)-5-metilpirolidin-2-karboksilna kiselina (980 mg, 4.27 mmol) i DIPEA (1.49 mL, 8.54 mmol). Nakon mešanja tokom 18 h na 50 °C, rastvor je razblažen sa EtOAc-om i opran sukcesivno sa IN HCl, zasićenim vodenim NaHCO3i slanim rastvorom. Organske supstance su osušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane pod smanjenim pritiskom. Sirov ostatak je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika gelu (10% do 30% EtOAc/heksani) da se dobije (2S,5S)-1-terc-butil 2-(3-hloro-8-okso-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-9-il) 5-metilpirolidin-1,2-dikarboksilat (1.63 g, 81%).
(2S,5S)-terc-butil 2-(9-hloro-4,5-dihidro-5H-nafto[c,g]hromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-5-(metil)pirolidin-1-karboksilat
2
[0488] (2S,5S)-1-terc-butil 2-(3-hloro-8-okso-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]hromen-9-il) 5-metilpirolidin-1,2-dikarboksilat (1.63 g, 3.18 mmol) je dodat toluen (30 mL), 2-metoksietanol (3 mL), i amonijum acetat (3.68 g, 77.1 mmol) i rastvor je zagrejan do refluksa preko noći. Sledeće jutro, rastvor je ohlađen do st i je razblažen sa EtOAc-om i opran sukcesivno sa vodom, zasićenim vodenim NaHCO3i slanim rastvorom. Organske supstance su osušene preko Na2SO4, filtriran i koncentrovane pod smanjenim pritiskom. Sirov ostatak je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika gelu (40% do 80 % EtOAc/heksani) da se dobije (2S,5S)-terc-butil 2-(9-hloro-4,5-dihidro-5H-nafto[c,g]hromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-5-metilpirolidin-1-karboksilat (1.13 g, 72%).
((2S,5S)-terc-butil 2-(9-hloro-5H-nafto[c,g]hromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-5-metilpirolidin-1-karboksilat
[0489] U rastvor (2S,5S)-terc-butil 2-(9-hloro-4,5-dihidro-5H-nafto[c,g]hromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-5-(metil)pirolidin-1-karboksilata (1.13 g, 2.3 mmol) u CH2Cl2(25 mL) je dodat MnO2(9.98 g, 115 mmol). Reakciona smeša je mešana preko noći zatim filtrirana preko celita. Materijal koji je ostao na filteru je opran sa obilnim CH2Cl2i MeOH, i filtrat je koncentrovan pod smanjenim pritiskom da se dobije sirov proizvod (2S,5S)-terc-butil 2-(9-hloro-5H-nafto[c,g]hromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-5-metilpirolidin-1-karboksilat (931 mg, 83%).
Metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(9-hloro-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5-metilpirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat
[0490] (2S,5S)-terc-butil 2-(9-hloro-5H-nafto[c,g]hromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-5-metilpirolidin-1-karboksilat (931 mg, 1.9 mmol) u 1.25 N HCl u EtOH (8 mL) je zagrejan do 50 °C tokom 3h i zatim koncentrovan pod smanjenim pritiskom. Sirov ostatak je tretiran sa (S)-2-(metoksikarbonilamino)-3-metilbutanskom kiselinom (499 mg, 2.9 mmol), HATU (795 mg, 2.1 mmol) i DMF (10 mL), zatim N-metilmorfolin (0.627 mL, 5.7 mmol) je dodat u kapima. Nakon mešanja tokom 1 h, reakcija je razblažen sa EtOAc-om i oprana sukcesivno sa zasićenim vodenim NaHCO3, 5% LiCl, i slanim rastvorom. Organske supstance su osušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane pod smanjenim pritiskom. Sirov ostatak je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika gelu (50% do 100% EtOAc/heksani) da se dobije metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(9-hloro-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5-metilpirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat (950 mg, 91%).
2
Metil [(2S)-3-metil-1-{(2S,5S)-2-metil-5-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidin-1-il}-1-oksobutan-2-il]karbamat
[0491] U metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(9-hloro-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5-metilpirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat (950 mg, 1.74 mmol) u dioksanu (17 mL) je dodat bis(pinakolato)dibor (662 mg, 2.61 mmol), KOAc (512 mg, 5.22 mmol), X-Phos (25 mg, 0.05 mmol), i Pd2dba3(80 mg, 0.08 mmol). Rastvor je degasiran sa N2tokom 10 min, zatim zagrejan do 90 °C tokom 16 h. Rastvor je ohlađen do st, razblažen sa EtOAc-om, opran sa zasićenim vodenim NaHCO3, slanim rastvorom, osušen sa Na2SO4, i koncentrovan. Prečišćavanje hromatografijom na silika gelu (30% do 75 % gradijent korišćenjem 5%MeOH/EtOAc u Heksanima) da se dobije metil [(2S)-3-metil-1-{(2S,5S)-2-metil-5-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidin-1-il}-1-oksobutan-2-il]karbamat (800 mg, 72%).
terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidin-2-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-metilpirolidin-1-karboksilat
[0492] U rastvor [(2S)-3-metil-1-{(2S,5S)-2-metil-5-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidin-1-il}-1-oksobutan-2-il]karbamata (269 mg, 0.42 mmol), metil (S)-1-((2S,4S)-2-(5-bromo-1H-imidazol-2-il)-4-metilpirolidin-1-il)-3-metil-1-oksobutan-2-ilkarbamata (206 mg, 0.54 mmol), tetrakis(trifenilfosfin) paladijum(0) (49 mg, 0.042 mmol) i dihloro[1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) (31 mg, 0.042 mmol) u DMSO (3 mL) i dioksanima (3 mL) je dodat rastvor kalijum karbonata (2M u vodi, 0.69 mL, 1.39 mmol). Dobijena smeša je degasirana i zatim zagrejana do 95 °C tokom 2h. Nakon hlađenja do sobne temperature, reakcija je razblažena sa etil acetatom. Organske supstance su oprane sa zasićenim natrijum bikarbonatom i slanim rastvorom, osušene preko Na2SO4i koncentrovane. Sirov ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (1 do 20% MeOH/EtOAc) da se dobije terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidin-2-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-metilpirolidin-1-karboksilat (202 mg, 63%).
24
Metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-{(2R)-2-[(metoksikarbonil)amino]-2-fenilacetil}-4-metilpirolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':
6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5-metilpirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat [0493] Rastvor terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidin-2-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-metilpirolidin-1-karboksilata (80 mg, 0.11 mmol) u 1.25 N HCl u EtOH (2 mL) je zagrejan do 50 °C tokom 3h. Reakcija je koncentrovana i sirov materijal rastvoren u DMF-u (1.5 mL). U ovaj rastvor je dodat rastvor (R)-2-(metoksikarbonilamino)-2-fenilsirćetne kiseline (29 mg, 0.14 mmol) i COMU (52 mg, 0.12 mmol). U dobijeni rastvor je dodat diizopropiletilamin (0.057 mL, 0.33 mmol). Nakon mešanja tokom 2h na sobnoj temperaturi, reakcija je kvenčovana sa IN HCl (0.200 mL) i prečišćena pomoću HPLC. Nakon liofilizacije, TFA so je rastvorena u EtOAc-u i oprana sa zasićenim NaHCO3. Organska faza je osušena preko Na2SO4i koncentrovana. Slobodna baza je zatim rastvorena u MeCN/H2O i liofilizovana da se dobije metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-{(2R)-2-[(metoksikarbonil)amino]-2-fenilacetil}-4-metilpirolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5-metilpirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat: (42 mg, 45%). LCMS-ESI<+>: izračunato za C48H52N8O7: 852.4; primećeno [M+1]<+>: 854.2.
Primer QG
[0494]
Metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4-metilpirolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5-metilpirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat
[0495] terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2- {(2S,5S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidin-2-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-metilpirolidin-1-karboksilat (60 mg, 0.079 mmol) u 1.25 N HCl u EtOH (2 mL) je zagrejan do 50 °C tokom 3h i zatim koncentrovan pod smanjenim pritiskom. Sirov ostatak je tretiran sa (S)-2-(metoksikarbonilamino)-3-metilbutanskom kiselinom (21 mg, 0.12 mmol), HATU (36 mg, 0.095 mmol) i DMF (1.5 mL), zatim N-metilmorfolin (0.027 mL, 0.24 mmol) je dodat u kapima. Nakon 3h, smeša je kvenčovana sa IN HCl (0.100 mL) i zatim prečišćena pomoću HPLC da se dobije metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4-metilpirolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5-metilpirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat (33 mg, 51%).
LCMS-ESI<+>: izračunato za C45H54N8O7: 818.4; primećeno [M+1]<+>: 820.2.
Primer QH
Metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4-metilpirolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5-metilpirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat
[0497] terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2- {(2S,5S)-1-[N-(metoksikarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidin-2-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-metilpirolidin-1-karboksilat (20 mg, 0.079 mmol) u 1.25 N HCl u EtOH (2 mL) je zagrejan do 50 °C tokom 3h i zatim koncentrovan pod smanjenim pritiskom. Sirov ostatak je tretiran sa (2S,3R)-3-metoksi-2-(metoksikarbonilamino)butanskom kiselinom (8 mg, 0.04 mmol), HATU (12 mg, 0.03 mmol) i DMF-om (0.5 mL), zatim N-metilmorfolin (0.009 mL, 0.078 mmol) je dodat u kapima. Nakon 3h, smeša je kvenčovana sa IN HCl (0.100 mL) i zatim prečišćena pomoću HPLC da se dobije metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(metoksikarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4-metilpirolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizohromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5-metilpirolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il}karbamat (7.5 mg, 35%).
LCMS-ESI<+>: izračunato za C45H54N8O8: 834.4; primećeno [M+1]<+>: 835.7.
24
Jedinjenja 602-646
[0498] Korišćenjem procedura koje su slične onima opisanim ovde, sledeća jedinjenja ove objave su pripremljena.
BIOLOŠKI TESTOVI
[0499] Efekat proteina iz seruma na potentnost replikona: Replikon testovi se izvode u normalnom medijumu za ćelijske kulture (DMEM 10%FBS) obogaćenom sa fiziološkim koncentracijama humanog serum albumina (40 mg/mL) ili α-kiselog glikoproteina (1 mg/mL). EC50vrednosti u prisustvu proteina iz humanog seruma se porede sa EC50u normalnom medijumu da bi se odredio stepen promene u potentnosti.
[0500] Citotoksičnost MT-4 ćelija: MT4 ćelije su tretirane sa serijskim razblaženjima jedinjenja tokom perioda od 5 dana. Ćelijska vijabilnost je izmerena na kraju perioda tretiranja korišćenjem Promega CellTiter-Glo testa i ne-linearna regresija je izvedena da se izračuna CC50.
[0501] Koncentracija jedinjenja povezana sa ćelijama pri EC50: Huh-luc kulture su inkubirane sa jedinjenjem u koncentracijama jednakim EC50. Na više vremenskih tačaka (0 -72 sata), ćelije su oprane 2X sa hladnim medijumom i ekstrahovane sa 85% acetonitrilom; uzorak medijuma na svakoj vremenskoj tački će takođe biti ekstrahovan. Ekstrakti ćelija i medijuma su analizirani pomoću LC/MS/MS da bi se odredila Molarna koncentracija jedinjenja u svakoj frakciji. Reprezentativna jedinjenja ove objave su pokazala aktivnost.
[0502] Rastvorljivost i stabilnost: Rastvorljivost je određena uzimanjem alikvota od 10 mM DMSO koncentrovanog (štok) rastvora i pripremanjem jedinjenja u finalnoj koncentraciji 100 µM u test rastvorima medijuma (PBS, pH 7.4 i 0.1 N HCl, pH 1.5) sa ukupnom DMSO koncentracijom 1%. Test rastvori medijuma se inkubiraju na sobnoj temperaturi uz mućkanje tokom 1 sata. Rastvori će zatim biti centrifugirani i dobijeni supernatanti se ispituju na HPLC/UV. Rastvorljivost će biti izračunata upoređivanjem količine jedinjenja detektovanog u određenom test rastvoru u poređenju sa količinom detektovanom u DMSO u istoj koncentraciji. Stabilnost jedinjenja nakon 1 sata inkubacije sa PBS na 37°C će takođe biti određeni.
[0503] Stabilnost u krioprezerviranim hepatocitima čoveka, psa i pacova: Svako jedinjenje je inkubirano tokom do 1 sata u suspenzijama hepatocita (100 µl, 80,000°Ćelija po bunariću) na 37°C. Krioprezervirani hepatociti su rekonstituisani u medijumu za inkubaciju bez seruma. Suspenzija je prebačena u ploče sa 96 bunarića (50 µL/bunariću). Jedinjenja su razblažena do 2 µM u medijumu za inkubaciju i zatim su dodata u suspenzije hepatocita da bi se započela inkubacija. Uzorci su uzeti na 0, 10, 30 i 60 minuta nakon početka inkubacije i reakcija će biti kvenčovana sa smešom koja se sastoji od 0.3% mravlje kiseline u 90% acetonitrilu/10% vodi. Koncentracija jedinjenja u svakom uzorku je analizirana korišćenjem
24
LC/MS/MS. Polu-život nestajanja jedinjenja u suspenziji hepatocita je određena podešavanjem podaka koncentracija-vreme sa monofaznom eksponencijalnom jednačinom. Podaci će takođe biti povećani da bi predstavili unutrašnji hepatični klirens i/ili ukupni hepatični klirens.
[0504] Stabilnost u hepaičnoj S9 frakciji iz čoveka, psa, i pacova: Svako jedinjenje je inkubirano tokom 1 sata u S9 suspenziji (500 µl, 3 mg proteina/mL) na 37°C (n = 3). Jedinjenja su dodata u S9 suspenzija da se započne inkubacija. Uzorci su uzeti na 0, 10, 30, i 60 minuta nakon početka inkubacije. Koncentracija jedinjenja u svakom uzorku je analizirana korišćenjem LC/MS/MS. Polu-život nestajanja jedinjenja u S9 suspenziji je određen podešavanjem podaka koncentracija-vreme sa monofaznom eksponencijalnom jednačinom.
[0505] Caco-2 Permeabilnost: Jedinjenja su ispitana preko ugovorene usluge (Absorption Systems, Exton, PA). Jedinjenja su obezbeđena saradniku na “slep način” (bez pružanja informacija o istom). I napred usmerena (A-ka-B) i reverzna (B-ka-A) permeabilnost će biti izmerene. Caco-2 monoslojevi su gajeni do konfluentnosti na kolagenom-obloženim, mikroporoznim, polikarbonatnim membranama u Costar TRANSWELL® pločama sa 12 bunarića. Jedinjenja su dozirana na apikalnoj strani za napred usmerenu permeabilnost (A-ka-B), i dozirana su na bazolateralnoj strani za reverznu permeabilnost (B-ka-A). Ćelije su inkubirane na 37°C sa 5% CO2u inkubatoru sa podešenom vlažnošću. Na početku inkubacije i na 1 h i 2 h nakon inkubacije, alikvot od 200-µL je uzet iz prijemne komore i zamenjen sa svežim puferom za test. Koncentracija u svakom uzorku je određena sa LC/MS/MS. Očigledna permeabilnost, Papp, je izračunata.
[0506] Vezivanje proteina iz plazme: Vezivanje proteina iz plazme je izmereno ravnotežnom dijalizom. Svako jedinjenje je dodato u blank plazmu u finalnoj koncentraciji od 2 µM. Takva plazma i fosaftni pufer je postavljen na suprotnim stranama sastavljenih dijaliznih ćelija, koje će zatim biti rotirane polako u vodenom kupatilu na 37°C. Na kraju inkubacije, koncentracija jedinjenja u plazmi i fosfatnom puferu je određena. Procenat nevezanog je izračunat korišćenjem sledeće jednačine:
[0507] Gde su Cfi Cbkoncentracije slobodnog i vezanog određene kao post-dijalizne koncentracije u puferi i plazmi, redom.
24
[0508] CYP450 Profilisanje: Svako jedinjenje je inkubirano sa svakim od 5 rekombinantnih humanih CYP450 enzima, uključujući CYP1A2, CYP2C9, CYP3A4, CYP2D6 i CYP2C19 u prisustvu i odsustvu NADPH. Serijski uzorci će biti uzeti iz inkubacione smeše na početku inkubacije i na 5, 15, 30, 45 i 60 minuta nakon početka inkubacije. Koncentracija jedinjenja u inkubacionoj smeši je određena pomoću LC/MS/MS. Procenat jedinjenja koje je preostalo nakon inkubacije na svakoj vremenskoj tački je izračunato upoređivanjem sa uzimanjem uzorka na početku inkubacije.
[0509] Stabilnost u plazmi pacova, psa, majmuna i čoveka: Jedinjenja će biti inkubirana tokom do 2 sata u plazmi (pacova, psa, majmuna, ili čoveka) na 37°C. Jedinjenja su dodata u plazmu u finalnim koncentracijama od 1 i 10 µg/mL. Alikvoti su uzeti na 0, 5, 15, 30, 60, i 120 minuta nakon dodavanja jedinjenja. Koncentracija jedinjenja i glavni metaboliti na svakoj vremenskoj tački su izmereni pomoću LC/MS/MS.
[0510] Evaluacija ćelijski-bazirane anti-HCV aktivnosti: Antiviralna potentnost (EC50) je određena korišćenjem HCV replikon reporter testa baziranog na Renilla luciferazi (RLuc). Da bi se izveo test za JFH-1 genotipa 1 i 2a, stabilne HCV 1a RLuc replikonske ćelije (koje sadrže dicistronski H77 replikon genotipa 1a koji kodira RLuc reporter), stabilne HCV 1b RLuc replikon ćelije (koje sadrže dicistronski Con1 replikon genotipa 1b koji kodira a RLuc reporter), ili stabilne HCV 2a JFH-1 Rluc replikon ćelije (koje sadrže dicistronski JFH-1 replikon genotipa 2a koji kodira RLuc reporter; sa L31 prisutnim u NS5A) su raspodeljene u ploče sa 384 bunarića za EC50testove. Da bi se izveo test za genotip 2a (sa M31 prisutnim u NS5A) ili 2b, NS5A himerni JFH-1 replikoni genotipa 2a koji kodiraju RLuc-Neo reporter i ili NS5A gen J6 soja genotipa 2a ili NS5A gen MD2b-1 soja genotipa 2b (oba sa M31 prisutnim) redom, su ili prolazno transfektovani (t) u Huh-Lunet ćelije ili su uspostavljeni kao ćelije koje stabilno replikuju replikon (s). Bilo koje ćelije su nanete u ploče sa 384 bunarića za EC50testove. Da se izvede test za genotip 3 i 4, NS5A himerni Con1 replikoni genotipa 1b koji kodiraju Pi-RLuc reporter i ili gen NS5A S52 soja genotipa 3a ili gen NS5A ED43 soja genotipa 4a redom, su prolazno transfektovani (t) u Huh-Lunet ćelije, koje su zatim nanete u ploče sa 384 bunarića. Jedinjenja su rastvorena u DMSO u koncentraciji 10 mM i razblažena u DMSO ili ručno ili korišćenjem instrumenta za automatizovano pipetiranje. Serijski 3-struko razblažena jedinjenja su ili ručno izmešana sa medijumom za ćelijske kulture i dodata u zasađene ćelije ili su direktno dodata u ćelije korišćenjem automatizovanog instrumenta. DMSO je korišćen kao negativna (rastvarač; nema inhibicije) kontrola, i proteazni inhibitor ITMN-191 je uključen u koncentraciji > 100 x EC50kao pozitivna kontrola. 72 sata kasnije,
24
ćelije su lizirane i aktivnost Renilla luciferaze je kvantifikovana kako je preporučeno od strane proizvođača (Promega-Madizon, WI). Ne-linearna regresija je izvedena da bi se izračunale EC50vrednosti.
[0511] Da bi se odredila antivirusna potentnost (EC50) na rezistentne mutante, rezistentne mutacije, uključujući M28T, Q30R, Q30H, L31M, i Y93C u NS5A genotipa 1a i Y93H u NS5A genotipa 1b, su uvedene pojedinačno u ili 1a Pi-Rluc ili 1b Pi-Rluc replikone pomoću usmerene mutageneze. RNK Replikona svakog rezistentnog mutanta je prolazno transfektovana u Huh-7-izvedene izlečene-51 ćelije i antivirusna potentnost je određena na ovim transfektovanim ćelijama kao što je opisano iznad.
[0512] EC50opsezi za genotip 1a, 1a Q30R, i 2a JFH su kao što sledi: A ≥ 44 nM, B = 1 nM do 43.99 nM, C < 1 nM. EC50opsezi za genotip 2a J6, 2b, 3a, i 4a su kao što sledi: A ≥ 5 nM, B = 1 nM do 4.99 nM, C < 1 nM. EC50opsezi za genotip 2a J6, 2b, i 4a odgovaraju testu prolazno transfektovanih ćelija (t). Ako su ovi podaci nedostupni, EC50opseg za stabilno replikujuće ćelije (s) je obezbeđen.
[0513] Farmakokinetičke studije za IV i PO jednokratno doziranje kod SD pacova:
Farmakokinetika odabranih jedinjenja je okarakterisana kod muških Sprague-Dawley (SD) pacova (250-300g). U ovoj studiji, dve grupe naivnih čistokrvnih SD pacova (N=3 po grupi, koji su postili preko noći) primila je izabrano jedinjenje bilo kao intravensku (IV) infuziju (1 mg/kg tokom 30 minuta) preko jugularne vene ili oralnom gavažom (2 mg/kg). Nosač za intravensko (IV) doziranje je bio 5% etanol, 35% polietilen glikol 400 (PEG 400) i 60% voda pH 2.0. Nosač za oralno doziranje je bio 5% etanol, 55% PEG 400 i 40% citratni pufer pH 2.2.
[0514] Serijski uzorci krvi (približno 0.3 mL svaki) su sakupljeni iz jugularne vene ili druge pogodne vene na specifičnim vremenskim tačkama. Za IV infuzijsku grupu, uzorci krvi su sakupljeni pre doziranja i na 0.25, 0.48, 0.58, 0.75, 1.5, 3, 6, 8, 12 i 24 sati nakon početka infuzije. Za oralnu grupu, uzorci krvi su sakupljeni pre doziranja i 0.25, 0.50, 1, 2, 4, 6, 8, 12 i 24 sati nakon doziranja. Uzorci krvi su sakupljeni u Vacutainer™ epruvete koje sadrže EDTA-K3kao antikoagulans i centrifugirani su na približno 4°C da se dobije plazma. Uzorci plazme su čuvani na -20°C do analize pomoću LC/MS/MS.
[0515] Bioanalitička metoda koja koristi tečnu hromatografiju visokih perfomansi povezanu sa tandem masenom spektrometrijom (LC/MS/MS) je razvijena za analizu odabranog jedinjenja u plazmi pacova. Detekcija je izvedena korišćenjem praćenja odabrane reakcije (selected reaction monitoring - SRM); Joni koji predstavljaju prekursorsku (M+H)<+>vrstu su
24
odabrani u kvadrupolu 1 (Q1) i sudarali su se sa gasom argona u kolizionoj ćeliji (Q2) da bi se generisao specifičan proizvedeni jon, koji je kasnije bio praćen pomoću kvadrupola 3 (Q3). Standardna kriva i uzorci za kontrolu kvaliteta su pripremljeni u plazmi muških pacova i obrađeni na isti način kao test uzorci da se generišu kvantitativni podaci.
[0516] Farmakokinetički parametri su generisani korišćenjem ne-kompartmentalne farmakokinetičke analize (Phoenix WinNonlin, verzija 6.3). Vrednostima ispod donje granice kvantifikacije (LLOQ) je dodeljena vrednost nula ukoliko je psotojalo prethodno doziranje a potom su tretirane su kao one koje nedostaju. Oblast ispod krive (area under the curve -AUC) je izračunata korišćenje linearnog trapezoidalnog pravila. Oralna biodostupnost (%F) je određena pomoću poređenja oblasti ispod krive (AUC) jedinjenja i/ili metabolita generisanog u plazmi nakon oralne administracije sa onom generisanom nakon instravenske administracije.
24
�
21
22
[0517] Dodatno, ono što sledi je ovde stavljeno na uvid javnosti:
(i) farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje kao što je definisano u bilo kom od patentnih zahteva 1-22 ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so; i najmanje jedan farmaceutski prihvatljiv nosač;
(ii) farmaceutska kompozicija iz (i) za primenu u lečenju poremećaja u vezi sa hepatitisom C (HCV);
(iii) farmaceutska kompozicija iz (ii), koja dalje sadrži najmanje jedan dodatni terapijski agens za lečenje HCV;
(iv) farmaceutska kompozicija iz (iii), gde pomenuti dodatni terapijski agens je odabran od ribavirina, NS3 proteaznog inhibitora, nukleozidnog ili nukleotidnog inhibitora HCV NS5B polimeraze, inhibitora alfa-glukozidaze 1, hepatoprotektanta, ne-nukleozidnog inhibitora HCV polimeraze, ili njihove kombinacije;
(v) farmaceutska kompozicija iz (i), koja dalje sadrži nukleozidni ili nukleotidni inhibitora HCV NS5B polimeraze;
(vi) farmaceutska kompozicija iz (v), gde pomenuti nukleozidni ili nukleotidni inhibitor HCV NS5B polimeraze je odabran od ribavirina, viramidina, levovirina, L-nukleozida, ili izatoribina;
(vii) farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje kao što je definisano u bilo kom od patentnih zahteva 1-22, najmanje jedan nukleozidni ili nukleotidni inhibitor HCV NS5B polimeraze, i najmanje jedan farmaceutski prihvatljiv nosač;
(viii) farmaceutska kompozicija iz (vii), koja dalje sadrži interferon, pegilovani interferon, ribavirin ili njihove kombinacije;
(ix) farmaceutska kompozicija iz (vii) ili (viii), gde nukleozidni ili nukleotidni inhibitor HCV NS5B polimeraze je sofosbuvir;
(x) jedinjenje kao što je definisano u bilo kom od patentnih zahteva 1-22 ili njegova farmaceutski prihvatljiva so za primenu u medicinskoj terapiji; i
(xi) jedinjenje kao što je definisano u bilo kom od patentnih zahteva 1-22 ili njegova farmaceutski prihvatljiva so za primenu u profilaksi ili terapijskom tretmanu hepatitisa C ili poremećaja povezanog sa hepatitisom C.
2

Claims (22)

  1. Patentni zahtevi 1. Jedinjenje formule (I): E<1a>-V<1a>-C(=O)-P<1a>-W<1a>-P<1b>-C(=O)-V<1b>-E<1b>(I) gde W<1a>je
    i W<1a>je po izboru supstituisan sa jednom ili više grupa koje su nezavisno odabrane od halo, alkil, haloalkil, ili cijano; Y<5>je -O-CH2-, ili -CH2-O-; X<5>je -CH2-CH2- ili -CH=CH-; E<1a>je -N(H)(alkoksikarbonil), -N(H)(cikloalkilkarbonil) ili -N(H)(cikloalkiloksikarbonil); ili E<1a>-V<1a>uzeti zajedno su R<9a>; E<1b>je -N(H)(alkoksikarbonil), -N(H)(cikloalkilkarbonil) ili -N(H)(cikloalkiloksikarbonil); ili E<1b>-V<1b>uzeti zajedno su R<9b>; V<1a>i V<1b>su svaki nezavisno odabrani od:
    P<1a>je odabran od:
    i 2 4 R<9a>i R<9b>su svaki nezavisno:
    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
  2. 2. Jedinjenje iz patentnog zahteva 1 koje ima formulu:
    ili
    gde je prsten imidazola prikazan u formuli A1, A2, A3, i A4 po izboru supstituisan sa jednom ili više grupa koje su nezavisno odabrane od halo, haloalkil, cijano, i alkil; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
  3. 3. Jedinjenje iz patentnog zahteva 1 koje ima formulu:
    ili
    gde je prsten imidazola prikazan u formuli A2 i A4 po izboru supstituisan sa jednom ili više grupa koje su nezavisno odabrane od halo, haloalkil, cijano, ili alkil; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
  4. 4. Jedinjenje iz bilo kog od patentnih zahteva 1-3 gde najmanje jedan od E<1a>i E<1b>je -N(H)(alkoksikarbonil).
  5. 5. Jedinjenje iz bilo kog od patentnih zahteva 1-3 gde najmanje jedan od E<1a>i E<1b>je -N(H)C(=O)OMe.
  6. 6. Jedinjenje iz bilo kog od patentnih zahteva 1-3 gde oba E<1a>i E<1b>su -N(H)C(=O)OMe.
  7. 7. Jedinjenje iz bilo kog od patentnih zahteva 1-3 gde najmanje jedan od E<1a>i E<1b>je -N(H)(cikloalkilkarbonil) ili -N(H)(cikloalkiloksikarbonil).
  8. 8. Jedinjenje iz bilo kog od patentnih zahteva 1-3 gde najmanje jedan od E<1a>i E<1b>je ciklopropilkarbonilamino, ciklobutilkarbonilamino, ciklopropiloksikarbonilamino ili ciklobutiloksikarbonilamino.
  9. 9. Jedinjenje iz bilo kog od patentnih zahteva 1-3 gde E<1a>i E<1b>su svaki nezavisno odabrani od ciklopropilkarbonilamino, ciklobutilkarbonilamino, ciklopropiloksikarbonilamino ili metoksikarbonilamino.
  10. 10. Jedinjenje iz bilo kog od patentnih zahteva 1-9 gde najmanje jedan od V<1a>i V<1b>je:
  11. 11. Jedinjenje iz bilo kog od patentnih zahteva 1-10 gde E<1a>-V<1a>uzeti zajedno su R<9a>ili gde E<1b>-V<1b>uzeti zajedno su R<9b>.
  12. 12. Jedinjenje iz bilo kog od patentnih zahteva 1-11 gde najmanje jedan od P<1a>i P<1b>je odabran od:
    2
  13. 13. Jedinjenje iz bilo kog od patentnih zahteva 1-11 gde P<1a>i P<1b>su svaki nezavisno odabrani od:
  14. 14. Jedinjenje iz bilo kog od patentnih zahteva 1-11 gde jedan od P<1a>i P<1b>je:
    i drugi od P<1a>i P<1b>je:
  15. 15. Jedinjenje iz bilo kog od patentnih zahteva 1-11 gde jedan od P<1a>i P<1b>je:
    i drugi od P<1a>i P<1b>je:
  16. 16. Jedinjenje iz bilo kog od patentnih zahteva 1-11 gde najmanje jedan od P<1a>i P<1b>je:
  17. 17. Jedinjenje iz bilo kog od patentnih zahteva 1-11 gde najmanje jedan od P<1a>i P<1b>je:
  18. 2 18. Jedinjenje iz bilo kog od patentnih zahteva 1-3 gde najmanje jedan od -V<1a>-C(=O)-P<1a>- i -P<1b>-C(=O)-V<1b>- je:
  19. 19. Jedinjenje iz bilo kog od patentnih zahteva 1-3 gde najmanje jedan od -V<1a>-C(=O)-P<1a>- i -P<1b>-C(=O)-V<1b>- je:
  20. 20. Jedinjenje iz bilo kog od patentnih zahteva 1-3 gde oba od -V<1a>-C(=O)-P<1a>- i -P<1b>-C(=O)-V<1b>- su nezavisno odabrani od:
    2
  21. 21. Jedinjenje iz bilo kog od patentnih zahteva 1-3 gde jedan od -V<1a>-C(=O)-P<1a>- i -P<1b>-C(=O)-V<1b>- je:
    i drugi od -V<1a>-C(=O)-P<1a>- i -P<1b>-C(=O)-V<1b>- je:
  22. 22. Jedinjenje iz patentnog zahteva 1 koje je jedinjenje formule:
    2
    �
    21
    ili
    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so. Izdaje i štampa: Zavod za intelektualnu svojinu, Beograd, Kneginje Ljubice 5 2 2
RS20181062A 2011-11-16 2012-11-16 Kondenzovani imidazolilimidazoli kao antiviralna jedinjenja RS57638B1 (sr)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201161560654P 2011-11-16 2011-11-16
EP15156617.1A EP2907816B1 (en) 2011-11-16 2012-11-16 Condensed imidazolylimidazoles as antiviral compounds

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS57638B1 true RS57638B1 (sr) 2018-11-30

Family

ID=47324426

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20150571A RS54207B1 (sr) 2011-11-16 2012-11-16 Kondenzovani imidazolilimidazoli kao antiviralna jedinjenja
RS20181062A RS57638B1 (sr) 2011-11-16 2012-11-16 Kondenzovani imidazolilimidazoli kao antiviralna jedinjenja

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20150571A RS54207B1 (sr) 2011-11-16 2012-11-16 Kondenzovani imidazolilimidazoli kao antiviralna jedinjenja

Country Status (36)

Country Link
US (14) US8940718B2 (sr)
EP (4) EP3431477B1 (sr)
JP (5) JP6082749B2 (sr)
KR (5) KR20190121406A (sr)
CN (2) CN105837584B (sr)
AP (1) AP2013006877A0 (sr)
AU (1) AU2012318253B8 (sr)
BR (1) BR112013012091A2 (sr)
CA (2) CA2884712A1 (sr)
CL (1) CL2013001428A1 (sr)
CO (1) CO6791562A2 (sr)
CR (1) CR20130231A (sr)
CY (2) CY1116987T1 (sr)
DK (2) DK2635588T3 (sr)
EA (4) EA037883B1 (sr)
EC (2) ECSP13012790A (sr)
ES (3) ES2687291T3 (sr)
HR (2) HRP20150725T1 (sr)
HU (2) HUE039966T2 (sr)
IL (5) IL226345A (sr)
LT (1) LT2907816T (sr)
MA (1) MA34727B1 (sr)
MD (2) MD4403C1 (sr)
ME (1) ME02196B (sr)
MX (4) MX346729B (sr)
MY (2) MY173045A (sr)
PE (2) PE20171444A1 (sr)
PH (2) PH12013500976A1 (sr)
PL (3) PL2635588T3 (sr)
PT (3) PT2907816T (sr)
RS (2) RS54207B1 (sr)
SG (1) SG10201700947UA (sr)
SI (3) SI3431477T1 (sr)
SM (2) SMT201800470T1 (sr)
UA (2) UA119437C2 (sr)
WO (1) WO2013075029A1 (sr)

Families Citing this family (55)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
PL2604620T5 (pl) 2003-05-30 2024-10-14 Gilead Pharmasset Llc Zmodyfikowane fluorowane analogi nukleozydu
MX360800B (es) 2009-05-13 2018-11-16 Gilead Pharmasset Llc Star Compuestos antivirales.
TWI640526B (zh) 2010-11-17 2018-11-11 基利法瑪席特有限責任公司 抗病毒化合物
TWI482766B (zh) 2011-07-09 2015-05-01 Sunshine Lake Pharma Co Ltd As a spiro compound for hepatitis C virus inhibitors
SG11201400664WA (en) 2011-09-16 2014-04-28 Gilead Pharmassett Llc Methods for treating hcv
DK2635588T3 (en) 2011-11-16 2015-09-07 Gilead Pharmasset Llc Dehydrated imidazolylimidazoler as anti-viral compounds
US9326973B2 (en) 2012-01-13 2016-05-03 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US20130309196A1 (en) * 2012-05-16 2013-11-21 Gilead Sciences, Inc. Antiviral compounds
US20140212491A1 (en) 2013-01-31 2014-07-31 Gilead Pharmasset Llc Combination formulation of two antiviral compounds
US10032995B2 (en) 2013-02-07 2018-07-24 Kyulux, Inc. Compound having diazatriphenylene ring structure, and organic electroluminescent device
WO2014185995A1 (en) * 2013-05-16 2014-11-20 Gilead Pharmasset Llc Hepatitis c treatments with sofosbuvir
US20150023913A1 (en) 2013-07-02 2015-01-22 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C Virus Inhibitors
US9717712B2 (en) 2013-07-02 2017-08-01 Bristol-Myers Squibb Company Combinations comprising tricyclohexadecahexaene derivatives for use in the treatment of hepatitis C virus
US20160158200A1 (en) * 2013-07-09 2016-06-09 Bristol-Myers Squibb Company Combinations of Hepatitis C Virus Inhibitors
US9775831B2 (en) 2013-07-17 2017-10-03 Bristol-Myers Squibb Company Combinations comprising biphenyl derivatives for use in the treatment of HCV
EP3038601B1 (en) 2013-08-27 2020-04-08 Gilead Pharmasset LLC Combination formulation of two antiviral compounds
US20150064252A1 (en) 2013-08-27 2015-03-05 Gilead Pharmasset Llc Solid dispersion formulation of an antiviral compound
CN104418784B (zh) * 2013-09-04 2019-02-19 浙江九洲药业股份有限公司 一种抗病毒药物中间体的拆分方法
JP6568541B2 (ja) 2013-12-23 2019-08-28 ギリアド ファーマセット エルエルシー 大環状ｈｃｖ ｎｓ３阻害トリペプチドの結晶形態
TWI721947B (zh) * 2014-06-11 2021-03-21 美商基利法瑪席特有限責任公司 抗病毒化合物的固態形式
TW202014413A (zh) * 2014-06-11 2020-04-16 美商基利法瑪席特有限責任公司 製備抗病毒化合物之方法
US20190022116A1 (en) 2014-12-26 2019-01-24 Emory University N4-Hydroxycytidine and Derivatives and Anti-Viral Uses Related Thereto
CN110372559A (zh) * 2014-12-29 2019-10-25 重庆博腾制药科技股份有限公司 一种(4S)-N-Boc-4--甲氧基甲基-L-脯氨酸的合成方法
CN104586802B (zh) * 2015-02-02 2018-01-16 长春海悦药业股份有限公司 一种含有索菲布韦的药物组合物
CN106008552B (zh) * 2015-03-01 2020-08-21 南京圣和药业股份有限公司 苯并[e]吡唑并[1,5-c][1,3]噁嗪类化合物及其应用
US10617675B2 (en) 2015-08-06 2020-04-14 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
WO2017060820A1 (en) * 2015-10-08 2017-04-13 Mylan Laboratories Limited Process for the preparation of velpatasvir
CN105294713A (zh) * 2015-10-09 2016-02-03 重庆康施恩化工有限公司 Velpatasvir中间体及其制备方法
CN105801553B (zh) * 2016-04-12 2018-06-19 爱斯特（成都）生物制药股份有限公司 一种苯并色烯衍生物的制备方法
CN106916134B (zh) * 2016-04-14 2020-04-17 苏州楚凯药业有限公司 一种10,11-二氢-5H-苯并[d]萘并[2,3-b]吡喃酮衍生物的制备方法
WO2017184670A2 (en) 2016-04-22 2017-10-26 Gilead Sciences, Inc. Methods for treating zika virus infections
EP3452038B1 (en) * 2016-05-05 2022-07-06 Laurus Labs Limited Process for the preparation of intermediates useful in the preparation of hepatitis c virus (hcv) inhibitors
CN109790143A (zh) 2016-05-10 2019-05-21 C4医药公司 用于靶蛋白降解的胺连接的c3-戊二酰亚胺降解决定子体
EP4483875A3 (en) 2016-05-10 2025-04-02 C4 Therapeutics, Inc. Spirocyclic degronimers for target protein degradation
EP3455218A4 (en) 2016-05-10 2019-12-18 C4 Therapeutics, Inc. C3 CARBON-BASED GLUTARIMIDE DEGRONIMERS FOR TARGET PROTEIN REDUCTION
CN109562107A (zh) 2016-05-10 2019-04-02 C4医药公司 用于靶蛋白降解的杂环降解决定子体
AU2017271990B2 (en) 2016-05-27 2019-12-19 Gilead Sciences, Inc. Methods for treating Hepatitis B virus infections using NS5A, NS5B or NS3 inhibitors
BR102017011025A2 (pt) 2016-06-02 2017-12-19 Gilead Pharmasset Llc Formulation of combination of three antiviral compounds
CN108368123B (zh) * 2016-07-08 2021-02-19 深圳市塔吉瑞生物医药有限公司 一种取代的咪唑基化合物及其药物组合物
KR101887969B1 (ko) * 2016-08-30 2018-08-13 한국과학기술연구원 항바이러스 활성을 가지는 카르바졸 화합물
CN107573380B (zh) * 2016-11-30 2020-06-02 上海博志研新药物技术有限公司 维帕他韦中间体、制备方法及应用
CN106831737B (zh) * 2017-02-27 2020-03-17 上海众强药业有限公司 维帕他韦及其衍生物的制备
CN118440096A (zh) 2017-06-20 2024-08-06 C4医药公司 用于蛋白降解的n/o-连接的降解决定子和降解决定子体
CN107501280A (zh) * 2017-09-05 2017-12-22 安徽华昌高科药业有限公司 一种维帕他韦的合成方法
US10849960B2 (en) 2017-09-08 2020-12-01 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Synergistic combination of IL-4, interferon gamma, and interferon alpha in treating ovarian cancer
CN107655986B (zh) * 2017-09-08 2020-11-03 安徽一灵药业有限公司 一种维帕他韦有关物质的检测方法
DK3706762T3 (da) 2017-12-07 2024-12-16 Univ Emory N4-hydroxycytidin og derivater og antivirale anvendelser relateret dertil
CN108276421B (zh) * 2018-02-13 2019-08-06 浙江永太药业有限公司 一种维帕他韦的合成方法
AU2020366731A1 (en) 2019-10-18 2022-04-21 Wockhardt Limited Nitrogen containing bicyclic compounds
CN111018870B (zh) * 2019-11-29 2021-07-23 南京正济医药研究有限公司 一种维帕他韦中间体的制备方法
CN110981879B (zh) * 2019-12-09 2021-03-05 南通常佑药业科技有限公司 一种制备ns5a抑制剂-维帕他韦的方法
CN113072615B (zh) * 2021-03-24 2023-01-10 上海法默生物科技有限公司 一种维帕他韦中间体的制备方法
WO2022246109A1 (en) * 2021-05-21 2022-11-24 Gilead Sciences, Inc. Pentacyclic derivatives as zika virus inhibitors
JP7723119B2 (ja) 2021-05-21 2025-08-13 ギリアード サイエンシーズ， インコーポレイテッド ジカウイルス感染症の治療のための四環系化合物
EP4355319A4 (en) 2021-06-17 2025-01-22 ATEA Pharmaceuticals, Inc. BENEFICIAL ANTI-HCV COMBINATION THERAPY

Family Cites Families (57)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4816570A (en) 1982-11-30 1989-03-28 The Board Of Regents Of The University Of Texas System Biologically reversible phosphate and phosphonate protective groups
US4968788A (en) 1986-04-04 1990-11-06 Board Of Regents, The University Of Texas System Biologically reversible phosphate and phosphonate protective gruops
ATE131825T1 (de) 1990-06-13 1996-01-15 Arnold Glazier Phosphorylierte prodrugs
EP0481214B1 (en) 1990-09-14 1998-06-24 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Of The Academy Of Sciences Of The Czech Republic Prodrugs of phosphonates
US5543523A (en) 1994-11-15 1996-08-06 Regents Of The University Of Minnesota Method and intermediates for the synthesis of korupensamines
US5858389A (en) 1996-08-28 1999-01-12 Shaker H. Elsherbini Squalene is an antiviral compound for treating hepatitis C virus carriers
EP1411928A1 (en) 2001-07-20 2004-04-28 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. Viral polymerase inhibitors
WO2004099241A1 (en) 2003-05-09 2004-11-18 Boehringer Ingelheim International Gmbh Hepatitis c virus ns5b polymerase inhibitor binding pocket
US7157492B2 (en) 2004-02-26 2007-01-02 Wyeth Dibenzo chromene derivatives and their use as ERβ selective ligands
AP2461A (en) 2004-07-16 2012-09-14 Gilead Sciences Inc Antiviral compounds
US8891379B2 (en) 2006-06-02 2014-11-18 Riverbed Technology, Inc. Traffic flow inference based on link loads and gravity measures
US8329159B2 (en) 2006-08-11 2012-12-11 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US7659270B2 (en) 2006-08-11 2010-02-09 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US7759495B2 (en) * 2006-08-11 2010-07-20 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
EP2100606A4 (en) 2006-12-07 2009-12-30 Daiichi Sankyo Co Ltd PREPARATION WITH FILM COVER AND IMPROVED STABILITY
US7741347B2 (en) 2007-05-17 2010-06-22 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
WO2009102621A2 (en) * 2008-02-11 2009-08-20 Qualcomm Mems Technologies, Inc. Methods for measurement and characterization of interferometric modulators
WO2009102318A1 (en) 2008-02-12 2009-08-20 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis c virus inhibitors
US7704992B2 (en) * 2008-02-13 2010-04-27 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
BRPI0822323A2 (pt) 2008-02-13 2015-06-16 Bristol Myers Squibb Co Imidazolil bifenil imidazóis como inibidores do vírus da hepatite c
US8147818B2 (en) * 2008-02-13 2012-04-03 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US20100256184A1 (en) 2008-08-13 2010-10-07 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pharmaceutical composition and administrations thereof
US8729077B2 (en) * 2008-11-28 2014-05-20 Glaxosmithkline Llc Anti-viral compounds, compositions, and methods of use
KR20110098779A (ko) 2008-12-03 2011-09-01 프레시디오 파마슈티칼스, 인코포레이티드 Ｈｃｖ ｎｓ5ａ의 억제제
WO2010096777A1 (en) 2009-02-23 2010-08-26 Presidio Pharmaceuticals, Inc. Inhibitors of hcv ns5a
RU2544010C2 (ru) 2009-02-27 2015-03-10 Энанта Фармасьютикалс, Инк. Ингибиторы вируса гепатита с
CA2756255A1 (en) 2009-03-27 2010-09-30 Presidio Pharmaceuticals, Inc. Substituted bicyclic hcv inhibitors
BRPI1012282A2 (pt) 2009-03-27 2015-09-22 Presidio Pharmaceuticals Inc inibidores de anel fundidos da hepatite c.
US9139569B2 (en) 2009-05-12 2015-09-22 Merck Sharp & Dohme Corp. Fused tricyclic aryl compounds useful for the treatment of viral diseases
MX360800B (es) * 2009-05-13 2018-11-16 Gilead Pharmasset Llc Star Compuestos antivirales.
TWI576352B (zh) 2009-05-20 2017-04-01 基利法瑪席特有限責任公司 核苷磷醯胺
US8618076B2 (en) 2009-05-20 2013-12-31 Gilead Pharmasset Llc Nucleoside phosphoramidates
US8138215B2 (en) 2009-05-29 2012-03-20 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
CN102480971B (zh) * 2009-09-04 2014-11-26 杨森制药公司 化合物
EP2475256A4 (en) 2009-09-11 2013-06-05 Enanta Pharm Inc HEPATITIS C-VIRUS HEMMER
US20120276047A1 (en) * 2009-11-25 2012-11-01 Rosenblum Stuart B Fused tricyclic compounds and derivatives thereof useful for the treatment of viral diseases
US8476225B2 (en) 2009-12-04 2013-07-02 Gilead Sciences, Inc. Antiviral compounds
US8377980B2 (en) 2009-12-16 2013-02-19 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
CN102791687B (zh) * 2009-12-18 2015-02-11 北京凯因科技股份有限公司 C型肝炎病毒复制的新型抑制剂
WO2011087740A1 (en) * 2009-12-22 2011-07-21 Schering Corporation Fused tricyclic compounds and methods of use thereof for the treatment of viral diseases
EP2545060B1 (en) 2010-03-09 2015-11-25 Merck Sharp & Dohme Corp. Fused tricyclic silyl compounds and methods of use thereof for the treatment of viral diseases
US9125904B1 (en) 2010-05-11 2015-09-08 Achillion Pharmaceuticals, Inc. Biphenyl imidazoles and related compounds useful for treating HCV infections
US20110312996A1 (en) 2010-05-17 2011-12-22 Intermune, Inc. Novel inhibitors of hepatitis c virus replication
EP2616461A4 (en) 2010-08-26 2014-03-26 Rfs Pharma Llc POTENTIVE AND SELECTIVE INHIBITORS OF HEPATITIS C VIRUS
WO2012048421A1 (en) 2010-10-14 2012-04-19 Boehringer Ingelheim International Gmbh Hepatitis c inhibitor compounds
TWI640526B (zh) * 2010-11-17 2018-11-11 基利法瑪席特有限責任公司 抗病毒化合物
WO2012087976A2 (en) 2010-12-21 2012-06-28 Intermune, Inc. Novel inhibitors of hepatitis c virus replication
DK2635588T3 (en) 2011-11-16 2015-09-07 Gilead Pharmasset Llc Dehydrated imidazolylimidazoler as anti-viral compounds
HK1201186A1 (en) 2011-12-29 2015-08-28 Abbvie Inc. Solid compositions comprising an hcv inhibitor
US20130309196A1 (en) 2012-05-16 2013-11-21 Gilead Sciences, Inc. Antiviral compounds
US9079887B2 (en) 2012-05-16 2015-07-14 Gilead Sciences, Inc. Antiviral compounds
US9233974B2 (en) 2012-12-21 2016-01-12 Gilead Sciences, Inc. Antiviral compounds
US20150064252A1 (en) 2013-08-27 2015-03-05 Gilead Pharmasset Llc Solid dispersion formulation of an antiviral compound
EP3038601B1 (en) 2013-08-27 2020-04-08 Gilead Pharmasset LLC Combination formulation of two antiviral compounds
TWI721947B (zh) 2014-06-11 2021-03-21 美商基利法瑪席特有限責任公司 抗病毒化合物的固態形式
TW202014413A (zh) 2014-06-11 2020-04-16 美商基利法瑪席特有限責任公司 製備抗病毒化合物之方法
JP2016051146A (ja) 2014-09-02 2016-04-11 ウシオ電機株式会社 光検出装置

Also Published As

Publication number Publication date
AU2012318253A1 (en) 2013-05-30
PE20141163A1 (es) 2014-09-21
US8575135B2 (en) 2013-11-05
EA030941B1 (ru) 2018-10-31
EP2635588A1 (en) 2013-09-11
MD4403C1 (ro) 2016-09-30
NZ752834A (en) 2021-01-29
IL244122A0 (en) 2016-04-21
HRP20150725T1 (hr) 2015-08-14
ES2544107T3 (es) 2015-08-27
EA202190619A1 (ru) 2021-09-30
EA201890333A1 (ru) 2018-10-31
US20190276468A1 (en) 2019-09-12
ECSP18048718A (es) 2018-07-31
NZ720856A (en) 2017-12-22
PL2907816T3 (pl) 2019-03-29
HRP20181384T1 (hr) 2018-12-28
US9868745B2 (en) 2018-01-16
US20140309432A1 (en) 2014-10-16
NZ737924A (en) 2019-06-28
IL226345A0 (en) 2013-07-31
US20200071337A1 (en) 2020-03-05
PE20171444A1 (es) 2017-09-29
MD20130029A2 (en) 2013-09-30
SMT201500197B (it) 2015-09-07
AP2013006877A0 (en) 2013-05-31
EP2907816B1 (en) 2018-06-13
MX2020010330A (es) 2020-10-22
SG10201700947UA (en) 2017-03-30
CL2013001428A1 (es) 2014-06-27
JP2016199593A (ja) 2016-12-01
EA201591244A1 (ru) 2016-02-29
MX377552B (es) 2025-03-10
US9221833B2 (en) 2015-12-29
DK2907816T3 (en) 2018-09-24
EP2907816A1 (en) 2015-08-19
ES2687291T3 (es) 2018-10-24
IL244124A0 (en) 2016-04-21
US9051340B2 (en) 2015-06-09
KR20200117043A (ko) 2020-10-13
CA2815082A1 (en) 2013-05-23
CR20130231A (es) 2013-09-19
MX2013005575A (es) 2013-09-05
EP3431477B1 (en) 2020-10-14
MD4403B1 (ro) 2016-02-29
NZ610525A (en) 2017-05-26
PH12013500976A1 (en) 2016-10-26
KR102241651B1 (ko) 2021-04-20
US20130156732A1 (en) 2013-06-20
CY1116987T1 (el) 2017-04-05
IL252345A0 (en) 2017-07-31
AU2012318253A8 (en) 2015-08-13
CN103328480A (zh) 2013-09-25
EP2635588B1 (en) 2015-06-10
US20150141326A1 (en) 2015-05-21
JP2018024705A (ja) 2018-02-15
US20130164260A1 (en) 2013-06-27
BR112013012091A2 (pt) 2019-09-10
MY173045A (en) 2019-12-20
SI2907816T1 (sl) 2018-10-30
WO2013075029A1 (en) 2013-05-23
ME02196B (me) 2016-02-20
IL252345B (en) 2022-01-01
CO6791562A2 (es) 2013-11-14
SI2635588T1 (sl) 2015-10-30
RS54207B1 (sr) 2015-12-31
KR20190121406A (ko) 2019-10-25
ES2843023T3 (es) 2021-07-15
US20180244683A1 (en) 2018-08-30
PH12015502839B1 (en) 2020-10-30
PT2635588E (pt) 2015-09-14
IL226345A (en) 2016-03-31
US20130177530A1 (en) 2013-07-11
US20160083394A1 (en) 2016-03-24
CY1121225T1 (el) 2020-05-29
AU2012318253B2 (en) 2015-08-06
UA110354C2 (uk) 2015-12-25
EA023644B1 (ru) 2016-06-30
MX361735B (es) 2018-12-14
MX346729B (es) 2017-03-30
US20140112885A1 (en) 2014-04-24
SMT201800470T1 (it) 2018-11-09
PT2907816T (pt) 2018-10-18
JP6082749B2 (ja) 2017-02-15
PL3431477T3 (pl) 2021-04-06
UA119437C2 (uk) 2019-06-25
HUE039966T2 (hu) 2019-02-28
MA34727B1 (fr) 2013-12-03
KR20180095119A (ko) 2018-08-24
HUE027733T2 (en) 2016-10-28
SI3431477T1 (sl) 2021-01-29
MD4521B1 (ro) 2017-10-31
PH12015502839A1 (en) 2019-05-15
HK1188989A1 (en) 2014-05-23
US8921341B2 (en) 2014-12-30
EP3431477A1 (en) 2019-01-23
KR101890400B1 (ko) 2018-08-21
EA201390576A1 (ru) 2013-11-29
IL244123A0 (en) 2016-04-21
JP2015512860A (ja) 2015-04-30
US9809600B2 (en) 2017-11-07
CN105837584B (zh) 2018-07-13
EA037883B1 (ru) 2021-05-31
EP3778606A2 (en) 2021-02-17
KR20210043734A (ko) 2021-04-21
CN103328480B (zh) 2016-05-25
DK2635588T3 (en) 2015-09-07
KR102036469B1 (ko) 2019-10-24
MY201670A (en) 2024-03-12
CA2815082C (en) 2015-07-07
MD20150091A2 (ro) 2016-02-29
CA2884712A1 (en) 2013-05-23
KR20140096239A (ko) 2014-08-05
LT2907816T (lt) 2018-09-10
JP2021001230A (ja) 2021-01-07
US10807990B2 (en) 2020-10-20
EP3778606A3 (en) 2021-03-03
PL2635588T3 (pl) 2015-10-30
US8940718B2 (en) 2015-01-27
AU2012318253B8 (en) 2015-08-13
US20180186806A1 (en) 2018-07-05
MD4521C1 (ro) 2018-05-31
US20150299213A1 (en) 2015-10-22
US20170145027A1 (en) 2017-05-25
US20210053981A1 (en) 2021-02-25
PT3431477T (pt) 2020-12-15
JP2019206597A (ja) 2019-12-05
ECSP13012790A (es) 2013-10-31
CN105837584A (zh) 2016-08-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US10807990B2 (en) Antiviral compounds
HK40002411A (en) Condensed imidazolylimidazoles as antiviral compounds
HK40002411B (en) Condensed imidazolylimidazoles as antiviral compounds
AU2019202345A1 (en) Antiviral Compounds
NZ737924B2 (en) Condensed imidazolylimidazoles as antiviral compounds
HK1188989B (en) Condensed imidazolylimidazoles as antiviral compounds