[go: up one dir, main page]

RS56021B1 - Polimerni konjugati aktivnih principa, procesi za njihovu pripremu i njihovi polimerni interminedijari - Google Patents

Polimerni konjugati aktivnih principa, procesi za njihovu pripremu i njihovi polimerni interminedijari

Info

Publication number
RS56021B1
RS56021B1 RS20170450A RSP20170450A RS56021B1 RS 56021 B1 RS56021 B1 RS 56021B1 RS 20170450 A RS20170450 A RS 20170450A RS P20170450 A RSP20170450 A RS P20170450A RS 56021 B1 RS56021 B1 RS 56021B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
formula
conjugate according
cabazitaxel
group
active principle
Prior art date
Application number
RS20170450A
Other languages
English (en)
Inventor
Abderrhamane Amgoune
Didier Bazile
Fethi Bensaid
Didier Bourissou
Eric Didier
Stéphanie Greco
Harivardhan Reddy Lakkireddy
Serge Sable
Michel Veillard
Original Assignee
Sanofi Sa
Centre Nat De La Rech Scient (C N R S )
Université Paul Sabatier Toulouse Iii
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Sanofi Sa, Centre Nat De La Rech Scient (C N R S ), Université Paul Sabatier Toulouse Iii filed Critical Sanofi Sa
Publication of RS56021B1 publication Critical patent/RS56021B1/sr

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/59—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes
    • A61K47/60—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes the organic macromolecular compound being a polyoxyalkylene oligomer, polymer or dendrimer, e.g. PEG, PPG, PEO or polyglycerol
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08G—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED OTHERWISE THAN BY REACTIONS ONLY INVOLVING UNSATURATED CARBON-TO-CARBON BONDS
    • C08G65/00—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule
    • C08G65/02—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule from cyclic ethers by opening of the heterocyclic ring
    • C08G65/32—Polymers modified by chemical after-treatment
    • C08G65/329—Polymers modified by chemical after-treatment with organic compounds
    • C08G65/331—Polymers modified by chemical after-treatment with organic compounds containing oxygen
    • C08G65/332—Polymers modified by chemical after-treatment with organic compounds containing oxygen containing carboxyl groups, or halides, or esters thereof
    • C08G65/3328—Polymers modified by chemical after-treatment with organic compounds containing oxygen containing carboxyl groups, or halides, or esters thereof heterocyclic
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/59—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/69—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit
    • A61K47/6905—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit the form being a colloid or an emulsion
    • A61K47/6907—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit the form being a colloid or an emulsion the form being a microemulsion, nanoemulsion or micelle
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/69—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit
    • A61K47/6921—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit the form being a particulate, a powder, an adsorbate, a bead or a sphere
    • A61K47/6927—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit the form being a particulate, a powder, an adsorbate, a bead or a sphere the form being a solid microparticle having no hollow or gas-filled cores
    • A61K47/6929—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit the form being a particulate, a powder, an adsorbate, a bead or a sphere the form being a solid microparticle having no hollow or gas-filled cores the form being a nanoparticle, e.g. an immuno-nanoparticle
    • A61K47/6931—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit the form being a particulate, a powder, an adsorbate, a bead or a sphere the form being a solid microparticle having no hollow or gas-filled cores the form being a nanoparticle, e.g. an immuno-nanoparticle the material constituting the nanoparticle being a polymer
    • A61K47/6935—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit the form being a particulate, a powder, an adsorbate, a bead or a sphere the form being a solid microparticle having no hollow or gas-filled cores the form being a nanoparticle, e.g. an immuno-nanoparticle the material constituting the nanoparticle being a polymer the polymer being obtained otherwise than by reactions involving carbon to carbon unsaturated bonds, e.g. polyesters, polyamides or polyglycerol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Nanotechnology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Polyesters Or Polycarbonates (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Other Resins Obtained By Reactions Not Involving Carbon-To-Carbon Unsaturated Bonds (AREA)
  • Processes Of Treating Macromolecular Substances (AREA)

Description

Opis
[0001] Ovaj pronalazak se odnosi na polimerne konjugate aktivnih principa, a posebno na taksoide.
[0002] Taksoidima je generalno zajedničko to šta su veoma slabo rastvorljivi u vodi. Tako, taksol se formuliše u smeši kamfora i alkohola koje uzrokuje značajne nus-pojave, poput hiperosetljivosti, nefrotoksičnosti, kardiotoksičnosti i neurotoksičnosti. Istraživane su alternativne formulacije; a posebno su ispitivane formulacije rastvorljive u vodi na bazi polimera, poput mikrosfera, nanočestica i micela, sa ciljem obezbeđivanja alternativnih i efektivnih forma za administriranje (Gaucher et al., J. of Controlled Release, 143 (2010), 2-12).
[0003] Čestice nanometričkih veličina su posebno korisne jer im njihova veličina omogućava da dosegnu tumorsko tkivo, a njihova struktura, koja obuhvata hidrofilnu koronu, omogućava produženje vremena sistemske cirkulacije.
[0004] Tako, Američki patent 5766 635 opisuje nanočestice sa aktivnim principima koje su pripremljene iz polietilen glikola i polimlečne kiseline, pri čemu se pomenute nanočestice pripremaju uz pomoć jednostavne precipitacije. Bez obzira na to, tako formirane nanočestice nastaju usled jednostavne fizičke enkapsulacije aktivnog principa.
[0005] Nadalje, autori Nederberg et al., Biomacromolecules, 2009, 10, 1460-1468 opisuju micele koje sadrže paklitaksel i Y-kopolimer polietilen glikola i polilmlečne kiseline. Međutim, opet, dobivene micele nastaju usled jednostavne fizičke enkapsulacije paklitaksela sa pomenutim modifikovanim PEG-PLA kopolimerom.
[0006] Ipak, ovaj tip enkapsulacije ima taj nedostatak da zavisi o slabo kontrolisanom stepenu enkapsulacije, generalno uz visoki rizik od precipitacije aktivnog principa. Nadalje, nanoenkapsulacija obezbeđuje oslobađanje koje se teško kontroliše i koje zavisi o difuziji i biodegradaciji.
[0007] Prema time, potreban je drugi tip nanočestica koje nemaju pomenute nedostatke. Tako, predložena je kovalentna konjugacija aktivnog principa i (ko)polimera.
[0008] To je zbog toga jer je poželjno da se obezbede formulacije sa kovalentnom enkapsulacijom, koje posebno čini moguću stehiometrijsku enkapsulaciju, ograničenu precipitaciju aktivnog principa i/ili kontrolisano oslobađanje.
[0009] Dokument WO 99/17804 opisuje polimerne derivate kamptotecina koji nastaju usled kovalentne konjugacije kamptotecina i derivata metakriloil-glicin-aminoacila.
[0010] Međutim, ova patentna prijava se odnosi samo na derivate kamptotecina.
[0011] Kovalentni konjugati polimera i taksoida su takođe obezbeđeni. Na primer, autori Zhang et al., Biomaterials, 26(2005), 2121-2128 obezbeđuju konjugate paklitaksela sa monometoksi-polietilenglikol-polilaktidom (MPEG-PLA) uz pomoć micela koje formiraju diglikolni linker u vodenom medijumu. Međutim, aktivni princip vezan na kraju PLA je ulovljen u hidrofobnom regionu tako nastalih micela i u stvari nije lako dostupan.
[0012] Autori Cheng et al., Angew. Chem. Int. Ed., 2008, 47, 4830 su takođe opisali nanočestice u kojima je aktivni princip nakalemljen na kraj PLA, u hidrofobnom regionu koji nije lako dostupan.
[0013] Zbog toga je poželjno da se, u ovom tipu formulacije sa kovalentnom enkapsulacijom, poboljša kontrola oslobađanja aktivnog principa iz (ko)polimera, koje čini mogućom stehiometrijsku enkapsulaciju i ograničava precipitaciju aktivnog principa.
[0014] Biomacromolecules 2009, 10(6), 1460-1468 opisuje strukture koje sadrže tro-ručni kopolimer bez aktivnih principa, sa ciljem formiranja micela.
[0015] Ovaj pronalazak nastoji odgovoriti na ovaj tehnički problemu tako da obezbeđuje kovalentnu enkapsulaciju, koja se ovde naziva konjugacija, uz pomoć uvođenja linkera između (ko)polimera i aktivnog principa i uz pomoć značajnog poboljšanja pristupačnosti samom aktivnom principu sa ciljem hidrolize.
[0016] Tako, ovi pronalazači si otkrili funkcionalizovane kopolimere polietilen glikola i polimlečne kiseline koji zadovoljavaju malopre navedene zahteve.
[0017] U skladu sa prvim ciljem (predmetom), ovaj pronalazak se odnosi na konjugate aktivnog principa i kopolimera polietilen glikola i polimlečne kiseline sa formulom (Ia):
pri čemu u malopre pomenutoj formuli (I):
- p je prosečan broj jedinica etilen oksida, a kreče se u rasponu od 1 do 340;
- q predstavlja prosečni broj jedinica mlečne kiseline, a kreče se u rasponu od 10 do 700; - AP je ostatak aktivnog principa, preferirano izabran iz taksoida,
- L je linker,
- X je atom vodonika ili alkilna grupa opciono supstituisana sa jednim ili više supstituenta izabranih iz atoma halogena ili OR, CN, CF3, NRR' ili COOR, pri čemu R i R', koji su međusobno identični ili se razlikuju, su atomi vodonika ili alkilne grupe, i na njihove farmaceutski prihvatljive soli.
[0018] Termin "prosečna molekularna masa" se odnosi na prosečnu molekularnu masu.
[0019] Generalno, AP ostatak je vezan na L uz pomoć OH grupe koja se nalazi u AP.
[0020] Preferirano, PLA je, na svom opciono slobodnom hidroksilnom kraju, zaštitna grupa, na primer C(=O)alkilna grupa, poput C(=O)CH3grupe.
[0021] Preferirano, X je metilna grupa.
[0022] Generalno, p se kreće u rasponu od približno 20 do 110.
[0023] Generalno, q se kreće od približno 40 do 300.
[0024] Konjugati u skladu sa ovim pronalaskom omogućavaju stehiometrijsku enkapsulaciju aktivnog principa po lancu polimera od između 1 i 50%, generalno do 15% w/w, a posebno oko 5-6% i omogućavaju nisku precipitaciju aktivnog principa u vodenoj fazi i kontrolisano oslobađanje aktivnog principa uz pomoć linkera. Nadalje, zbog specifične Y strukture mPEG/PLA kopolimera, aktivni princip se nalazi u hidrofobno/hidrofilnom interfejsu pa je zbog toga dostupan specifičnoj i nespecifičnoj hidrolizi, koje omogućava kontrolisano oslobađanje u odnosu na situaciju kada se aktivni princip nalazi u hidrofobnom jedru.
[0025] U malopre definisanoj formuli (I), AP može da se izabere iz taksoida. Pomenuti taksoidi su posebno izabrani iz paklitaksela, docetaksela, kabazitaksela i larotaksela, poput onih sa formulama:
Paklitaksel: R10=-OC(=O)-CH3; R5'=Ph, R7=OH; R8=CH3
Docetaksel: R10= -OH; R5'=-O-C(CH3)3; R7=OH; R8=CH3
Larotaksel: R10= -O-C(=O)-CH3; R5'=-O-C(CH3)3; R7 i R8 iz ciklopropila sa atomima ugljenika na kojima su spojeni;
Kabazitaksel: R10= OCH3; R7=-OCH3; R8=CH3; R5'=-O-C(CH3)3
[0026] Generalno, u slučaju taksoida, pomenuta OH grupa je prisutna u bočnom lancu taksoida na poziciji 2', ili na poziciji 7.
[0027] Tačnije, pomenuti aktivni princip je kabazitaksel, nakalemljen na poziciji 2'.
[0028] Naročito, jedinjenja sa formulom (I) tako imaju formulu:
[0029] Termin "linker" označava neki alkilni lanac koji sadrži od 1 do 10 atoma ugljenika i jedan atom kiseonika na kraju onog njegovog kraja koji je spojen na mPEG/PLA kopolimer i, na drugom njegovom kraju koji je spojen na AP, grupu koja reaguje sa hidroksilom grupom koja je prisutna u aktivnom principu, na primer neka karboksilna kiselina. Alkilni lanac može opciono da bude prekinut sa jednim ili više atoma ili grupa izabranih iz -O-, -C(=O)-, -NR- ili -O-C(=O)-NR-, -S-, -S-S-. Pomenuti linker može da bude izabran naročito iz dikarboksilatnih derivata sukcinske kiseline, glutarne kiseline ili diglikolne kiseline. Naročito mogu da se pomenu dikarboksilatni derivati sukcinske kiseline, glutarne kiseline i diglikolne kiseline, a posebno dikarboksilatni derivat sukcinske kiseline.
[0030] Tačnije, jedinjenja sa formulom (Ia) imaju sledeću formulu (Ib):
u kojoj AP, L, p i q su definisani iznad.
[0031] U skladu sa jednom specifičnom izvedbom, konjugati u skladu sa ovim pronalaskom odgovaraju malopre pomenutoj formuli (Ib) u kojoj L je dikarboksilatni derivat, na primer, sukcinske kiseline, glutarne kiseline ili diglikolne kiseline.
[0032] Jedinjenja sa formulom (I) mogu da sadrže jedan ili više asimetričnih atoma ugljenika. Tako, pomenuti mogu da postoje u formi enantiomera ili dijastereoizomera. Ovi enantiomeri, dijastereoizomeri, i njihove smeše, uključujući racemične smeše, spadaju u okvire ovoga pronalaska.
[0033] Jedinjenja sa formulom (I) mogu da postoje u formi baza ili u formi adicionih soli sa kiselinama; ovo se posebno odnosi na slučaj kada X sadrži NRR' grupu. Takve adicione soli spadaju u okvire ovoga pronalaska.
[0034] Pomenute soli mogu da se pripreme sa farmaceutski prihvatljivim kiselinama, mada soli drugih kiselina, na primer koji se koriste tokom prečišćavanje ili izolovanja jedinjenja sa formulom (I), takođe spadaju u okvire ovoga pronalaska.
[0035] Jedinjenja sa formulom (I) mogu takođe da postoje u formi hidrata ili solvata, naime u formi kombinacija ili asocijacija sa jednim ili više molekula vode ili sa rastvaračem. Takvi hidrati i solvati takođe spadaju u okvire ovoga pronalaska.
[0036] U kontekstu ovoga pronalaska:
- halogen atom označava: fluor, hlor, brom ili jod;
- alkilna grupa označava: zasićenu, linearnu ili razgranatu, (C1-C6) alifatsku ugljovodoničnu grupu. Mogu da se pomenu, na primer, metilna, etilna, propilna, izopropilna, butilna, izobutilna, tert-butilna ili pentilna grupa;
- arilna grupa označava: aromatsku cikličnu grupu koja sadrži između 5 i 10 atoma ugljenika. Kao primeri arilne grupe mogu da se pomenu fenil ili naftil.
[0037] U skladu sa drugim predmetom (ciljem), ovaj pronalazak se odnosi na proces za pripremu konjugata u skladu sa ovim pronalaskom.
[0038] U skladu sa prvom izvedbom, konjugat sa formulom (I) može da se dobije uz pomoć kuplovanja jedinjenja sa formulom (IIIa):
sa nekim derivatom pomenutog aktivnog principa koji odgovara formuli:
AP-L-H
u kojoj L je definisan u opštom formuli (Ia).
[0039] Tako, u slučaju taksoida, AP-L-H odgovara AP derivatu u kojem je slobodna OH grupa iz bočnog lanca taksoida generalno esterifikovana sa LH grupom preko karboksilne grupe iz LH.
[0040] Ova reakcija kuplovanja može da se provede u uslovima esterifikacije koji su poznati stručnjaku, a naročito u prisutnosti aktivirajućih agenasa, poput raznih karbodiimida (poput diizopropilkarbodiimida (DIPC)), sa ili bez katalizatora poput dimetilaminopiridina (DMAP). Ova reakcija može da se provede u nekom odgovarajućem rastvaraču, poput dihlorometana, hloroforma ili etil acetata, na temperaturi između 0° C i temperature refluksa rastvarača, a generalno na ambijentalnoj temperaturi.
[0041] Modifikovani aktivni princip AP-L-H može da se dobije iz aktivnog principa AP uz pomoć kuplovanja sa prekursorom željenog linkera L.
[0042] Tako, u slučaju kada L predstavlja disukcinatno jedinjenje, korišćeni prekursor je sukcinski anhidrid. U slučaju kada L predstavlja diglikolatnu grupu, korišćeni prekursor je diglikolni anhidrid.
[0043] Ova reakcija kuplovanja je generalno provodi u rastvaraču poput piridina ili u hlorovanom rastvaraču u prisutnosti katalizatora, poput DMAP ili piridina, na temperaturi između 0° C i temperature refluksa korišćenog rastvarača, a generalno na ambijentalnoj temperaturi.
[0044] U skladu sa drugom izvedbom, pomenuti proces obuhvata fazu kuplovanja pomenutog aktivnog principa AP, koji sadrži OH grupu, sa PEG/PLA kopolimerom sa formulom (II):
pri čemu LH sadrži grupu karboksilne kiseline COOH i X, n je definisan u formuli (Ia), a mPEG predstavlja:
pri čemu p je definisan u formuli (Ia), a PLA predstavlja:
pri čemu q je definisan u formuli (Ia).
[0045] Pomenuta reakcija kuplovanja može da se provede u uslovima normalne esterifikacije u rastvaraču poput dihlorometana ili hloroforma, u prisutnosti aktivirajućih agenasa, poput karbodiimida (poput diizopropilkarbodiimida (DIPC)), sa ili bez katalizatora, poput dimetilaminopiridina (DMAP). Reakcija se generalno provodi na temperaturi između 0° C i temperature refluksa rastvarača, a generalno na ambijentalnoj temperaturi.
[0046] Jedinjenje sa formulom (II) može da se dobije iz jedinjenja sa formulom (IIIa):
u kojoj p, q i X su definisani u formuli (Ia) i/ili (Ib).
[0047] u kojoj m, p, q, n i X su definisani u formuli (I), uz pomoć kuplovanja sa prekursorom linkera LH. Tako, u slučaju kada LH predstavlja disukcinatnu grupu, korišćeni prekursor je sukcinski anhidrid. Kada L je diglikolatna grupa, korišćeni prekursor je diglikolni anhidrid. Prekursori koji su dostupni za L grupu su generalno poznati stručnjaku, a dostupni su i komercijalno.
[0048] Pomenuta reakcija za kuplovanje generalno se provodi u rastvaraču, poput toluena ili dihlorometana, u prisutnosti katalizatora, poput piridina, na temperaturi između ambijentalne temperature i temperature refluksa pomenutog rastvarača.
[0049] Reakcija može da se ubrza uz pomoć odgovarajućeg katalizatora, naročito poput DMAP.
[0050] Jedinjenje sa formulom (IIIa), koje se koristi u skladu sa jednom ili drugom od malopre pomenutih sintetskih ruta, je novo. Tako, ovaj pronalazak se takođe odnosi na jedinjenje sa formulom (IIIa):
u kojoj p, q, n i X su definisani u formuli (Ia) i/ili (Ib).
[0051] Jedinjenje (IIIa) preferirano odgovara sledećoj formuli (IIIb):
[0052] U skladu sa drugim predmetom, ovaj pronalazak takođe se odnosi na proces za pripremu intermedijara sa formulom (IIIa). Pomenuti proces obuhvata:
1. fazu selektivne mono-zaštite hidroksilne grupe jedinjenja sa formulom (IV):
u kojoj (mPEG)m predstavlja:
uz pomoć odgovarajuće zaštitne grupe,
2. kuplovanje tako dobivenog mono-zaštićenog jedinjenja sa prekursorom (PLA)ngrupe sa formulom:
3. otklanjanje zaštitne grupe koja je uvedena tokom faze 1.
[0053] Šta se tiče faze 1, odgovarajuća zaštitna grupa može da se izabere naročito iz derivata silila, poput onih koji su opisani od strane autora T.W. Green & P. G. M. Wuts u Protective Organic Groups in Organic Chemistry, Wiley and Sons, 1991, ili takođe od strane autora J. F. W. McOmie u Protective Groups in Organic Chemistry, Plenum 13, 1973.
[0054] U skladu sa jednim naročito korisnim aspektom, za zaštitu se koristi jedan od sledećih derivata silila:
a preferirano
gde Lg predstavlja izlaznu grupu, poput atoma halogena ili trifluorometansulfonata, a preferirano atom halogena, poput hlora.
[0055] Ova reakcija može da se provede u uslovima koji su poznati stručnjaku, poput prisutnosti neke baze, a naročito organske baze, poput trietilamina, i rastvarača, poput dihlorometana, na temperaturi između ambijentalne temperature i temperature refluksa rastvarača, a naročito na temperaturi od približno 40° C.
[0056] Šta se tiče faze 2) reakcija kuplovanja sa prekursorom (PLA)n može da se provede uz pomoć polimerizacije uz otvaranje prstena (ROP) uz pomoć prekursora 3,6-dimetil-1,4-dioksan-2,5-diona. Kao ilustracija, ova reakcija može da se prikaže uz pomoć sledeće sheme:
[0057] Generalno, polimerizacija uz otvaranje prstena se provodi u prisutnosti nekog organskog katalizatora, poput tiouree (poput N-cikloheksil-N'-[3,5-bi(trifluorometil)fenil]tiouree), amina (poput sparteina) i/ili njihovih smeša, na temperaturi između ambijentalne temperature i temperature refluksa rastvarača. Kao odgovarajući rastvarač može da se pomene dihlorometan.
[0058] Faza otklanjanja zaštite 3) može da se provede primenom ili adaptacijom postupaka koji su poznati stručnjaku, poput onih koji su pomenuti od strane malopre pomenutih autora Green et al. i McOmie et al. Korisna je upotreba fluorida, poput tetrabutilamonijum fluorida (TBAF): Bu4N<+>,F-, ili trifluoroborana (BF3.Et2O). Ova reakcija može da se provede u nekom odgovarajućem rastvaraču, poput THF ili dihlorometana, na temperaturi između ambijentalne temperature i temperature refluksa reakcione smeše, na približno 40° C, na primer, tokom vremenskog perioda koji je dovoljan da se proizvode željeni stepen konverzije.
[0059] Jedinjenje (IV):
može da se dobije iz jedinjenja sa formulom (V):
u kojoj mPEG, m i X su definisani iznad, a
Pg1 i Pg2, koji su međusobno identični ili se razlikuju, svaki nezavisno predstavlja zaštitnu grupu koja štiti hidroksilnu grupu ili Pg1 i Pg2, zajedno sa zaštitnom grupom koja štiti diolnu grupu, uz pomoć formiranja, zajedno sa atomima kiseonika na koje su vezani, acetalne grupe koja je opciono supstituisana, na primer sa supstituisanom ili ne-supstituisanom arilnom grupom,
uz pomoć otklanjanja pomenutih zaštitnih grupa Pg1 i Pg2, a naročito uz pomoć katalitičke hidrogenacije Pd/C ili kisele hidrolize.
[0060] U skladu sa jednim specifičnim aspektom, Pg1 i Pg2 zajedno formiraju benzilidensku grupu, tako da produkt sa formulom (V) odgovara sledećoj formuli (Va):
u kojoj i je 0, 1 ili 2, a svaki R, identičan ili različiti, nezavisno predstavlja H, ili O(C1-C6)alkil, a preferirano OMe.
[0061] Jedinjenje sa formulom (V) može da se dobije uz pomoć kuplovanja jedinjenja sa formulom (VI):
i (mPEG)m,
naročito u prisutnosti agensa za kuplovanje, poput 1,3-dicikloheksilkarbodiimida, 4-(dimetilamino)piridinijum p-toluensulfonata (DPTS) i/ili njihovih smeša, ili DMAP. Ova reakcija se generalno provodi na ambijentalnoj temperaturi.
[0062] Jedinjenje (VI) može da se dobije uz pomoć zaštite jedinjenja (VII):
primenom postupaka koji su poznati stručnjaku.
[0063] Naročito u slučaju jedinjenja (VIa):
pomenuto može da se dobije iz jedinjenja (VII) i benzaldehida, a posebno primenom i/ili adaptacijom postupaka od autora U. Annby et al., Tetrahedron Letters, 1998, 39, 3217.
[0064] Jedinjenje sa formulom (VII) je komercijalno dostupno ili može da se dobije primenom ili adaptacijom postupaka koji su poznati stručnjaku i/ili spadaju u uobičajene veštine stručnjaka, a naročito uzimajući u obzir procedure koje je su opisali autori Larock et al. u Comprehensive Organic Transformations, VCH Publishers, 1989.
[0065] Proces u skladu sa ovim pronalaskom mogu dodatno da sadrži naknadnu fazu koja podrazumeva izolovanje i/ili prečišćavanje željenog jedinjenja. Tako pripremljeno željeno jedinjenje može da se obnovi iz reakcione smeše primenom konvencionalnih postupaka. Na primer, pomenuta jedinjenja mogu da se obnove uz pomoć destilovanja rastvarača iz reakcione smeše ili, ako je potrebno, nakon destilovanja rastvarača iz smeša rastvora, pri čemu se ostatak izleva u vodu, a nakon toga sledi ekstrakcija sa organskim rastvaračem koji ne može da se meša sa vodom, i konačno destilovanje rastvarača iz ekstrakta. Osim toga, pomenuto jedinjenje može, ako je poželjno, da se dodatno prečisti primenom raznih tehnika, poput ponovnog kristalizovanja, re-precipitacije ili brojnih hromatografskih tehnika, a naročito uz pomoć preparativne hromatografije na osnovu veličine.
[0066] U skladu sa drugim predmetom, ovaj pronalazak takođe se odnosi na nano-čestice koje sadrže konjugat u skladu sa pronalaskom. Ove nano-čestice generalno imaju veličinu između 10 i 300 nm, a uglavnom između 20 i 200 nm.
[0067] Tipično, pomenute sadrže PLA-jezgro i PEG-koronu, na čijem se interfejsu nalazi AP.
[0068] Pomenute se generalno pripremaju primenom nano-precipitacije, a naročito rastvaranjem konjugata u odgovarajućem rastvaraču, poput acetona, uz isparavanje pomenutog rastvarača.
[0069] U skladu sa drugim predmetom, ovaj pronalazak takođe se odnosi na farmaceutsku kompoziciju koja sadrži konjugat u skladu sa pronalaskom.
[0070] U skladu sa drugim predmetom, ovaj pronalazak takođe se odnosi na konjugat u skladu sa pronalaskom koji se upotrebljava za tretman i/ili prevenciju tumora.
SLIKE
[0071]
Slika 1 predstavlja snimak koji je dobiven primenom transmisijske elektronske mikroskopije nano-čestica dobivenih u skladu sa ovim pronalaskom.
Slika 2 predstavlja raspored veličina nano-čestica na osnovu merenja sa DLS (Dynamic Light Scattering) u vremenu T 0 i T 3 sedmice.
Slika 3 predstavlja in vitro profiliranje formulacija nano-čestica konjugata kabazitaksela (tj. PLA-PEG-Y-sukcinil-kabazitaksel, PLA-PEG-Y-glutarilkabazitaksel, i PLA-PEG-Y-dicikolil-kabazitaksel) u plazmi pacova.
PRIMERI
[0072] Sledeći primeri su namenjeni ilustrovanju ovoga pronalaska.
[0073] Rastvarači i reaktanti su korišćeni kao takvi, osim kada je posebno specifikovano. Sve sinteze i polimerizacije su provedene u atmosferi inertnog argona primenom standardne Schlenk-tehnike. Rastvarači su unapred osušeni, a neposredno pre upotrebe su destilovani: dihlorometan (DCM) preko CaH2, toluen preko natrijuma ili sa prečišćivačem rastvarača (sistem Mbraun MB-SPS-800), tetrahidrofuran (THF) preko natrijuma i dietil etar preko natrijuma. DL-laktid (PURAC) je prečišćen uz pomoć azeotropne destilacije i ponovnog kristalizovanja iz toluena. Nakon toga je sublimiran i uskladišten pod argonom u kontejneru sa odvojenom atmosferom (glove box).
[0074] Nuklearna magnetna rezonancija (NMR): NMR-spektari su snimljeni na ambijentalnoj temperaturi primenom aparata Bruker Avance 300 MHz, Bruker Avance 400 MHz i Bruker Avance 500 MHz koji su bili opremljeni sa krioprobom. Hemijski pomaci δ u<1>H i<13>C su navedeni u ppm u odnosu na rezidualni rastvarač, a hemijski pomaci δ u<29>Si su navedeni u ppm u odnosu na Me4Si kao spoljni standard. Konstante kuplovanja J su navedene u hercima. Sledeće skraćenice su korišćene za opisivanje signala: s (singlet), br (široki), d (dublet), t (triplet), q (kvartet) i m (multiplet).
[0075] Hromatografija na osnovu isključivanja veličina (steric exclusion chromatography -SEC): numeričke prosečne molarne mase Mn, težinske-prosečne molarne mase Mwi indeksi polidisperzije (Mw/Mn) su izmereni uz pomoć hromatografije na osnovu isključivanja veličina (SEC) na 35° C na liniji za trostruko detektovanje koja se sastojala od aparata Alliance Waters e2695, MALS miniDAWN (Wyatt) detektora raspršenog svetla, viskometra Viscostar-II (Wyatt) i refraktometra Waters 2414. THF je korišćen kao eluent kod stope protoka od 1.0 ml/min. Korišćene su jedna pred-kolona Styragel (WAT054405) i dve kolone Shodex (KF-802.5 i KF-804). Kalibracije su provedene uz pomoć polistirenskih standarda (400-100000 g/mol). Primerci su pripremljeni na sledeći način: produkt koji se analizuje (10 do 20 mg) je rastvoren u 1 ml THF koji sadrži toluen kao marker. Rastvor je naknadno filtriran uz pomoć filtera (0.45 µm).
[0076] Masena spektrometrija: maseni spektari hemijske jonizacije (DCI) su snimljeni na spektrometru Thermo Fisher Scientific DSQ.
[0077] Transmisijska elektronska mikroskopija (TEM): morfologija nano-čestica je analizirana uz pomoć TEM primenom mikroskopa JEOL-JEM 2100F sa poljem akceleracije od 200 keV. Sa ciljem da se pripreme primerci nekoliko kapi disperzije nano-čestica, razređene deset puta (0.5 mg/ml), je inkubirano sa 0.2% (w/v) fosfotungstenske kiseline tokom 30 min. Primerak je naknadno stavljen na bakrenu mrežicu i osušen na ambijentalnoj temperaturi.
[0078] Dinamično rasprešavanje svetla (DLS): veličina (hidrodinamički dijametar) nanočestica je izmerena primenom DLS na aparatu Zetasizer 3000 HS (Malvern).
[0079] Primerak (5 mg/ml) je stavljen u kapilarnu ćeliju nakon filtracije (filter PVDF, 1.2 µm). Merenja su provedena na 25° C pod uglom detektovanja od 90° C. Korišćena talasna dužina je 633 nm.
[0080] U primerima ispod, indeksi m i n u (mPEG)mi (PLA)nsu težinska-prosečna molekularna masa. n je određen eksperimentalno iz težine koja je dobivena primenom SEC-analize.
Sinteza 5-metil-2-fenil-1,3-dioksan-5-karboksilne kiseline (Bn-Bi-MPA)(I)
[0081]
[0082] 2,2'-bi(hidroksimetil)propionska kiselina (Bi-MPA) (10 g, 74.6 mmol), benzaldehid (8.3 g, 78.2 mmol) i metansulfonska kiselina (MSA) (1.5 g, 15.6 mmol) su rastvoreni u 100 ml toluena. Reakcioni medijum je mešan na ambijentalnoj temperaturi tokom 5 h. Rastvarač je naknadno isparen u vakuumu, a tada su dodani 10% rastvor NaHCO3(300 ml) i etar (300 ml) do potpunog rastvaranja taloga. Vodena faza je obnovljena, pa je dodano nekoliko kapi glacijalne sirćetne kiseline. Nakon snažnog oslobađanja gasa, dolazi do pojave belog precipitata. Pomenuti je odstranjen filtriranjem, ispran sa 20 ml vode i osušen u vakuumu preko noći. Wobt= 13.3 g, Y = 80%.
[0083]<1>H NMR (d6-aceton, 300 MHz): δ (ppm) 1.04 (s, 3H, -C-CH3), 3.73 (d, 2H, 1a, J<2>Ha-Hb= 11.4Hz), 4.57 (d, 2H, 1b, J<2>
Ha-Hb= 11.3 Hz), 5.52 (s, 1H, O2-CH-), 7.32 (m, 3H, ArH), 7.42 (m, 2H, ArH).
[0084]<13>C NMR (d6-aceton, 75.5 MHz) : δ (ppm) 18.4 (-CH3), 42.8 (Cq), 74.2 (-CH2-), 102.1 (-O2-CH-), 127.3 (aril CH), 128.8 (aril CH), 129.5 (aril CH), 140.0 (aril Cq), 176.2 (-COOH).
[0085] DCI izračunat za C12H14O4[M NH4]<+>, 240.12; određen = 239.90
Sinteza metoksi-polietilen glikol-benzilidena (mPEG2000-O2Bn) (II)
[0086]
[0087] Metoksi-polietilen glikol (prosečna molekularna masa: 2000 g/mol ovde označena kao mPEG2000) (10 g, 5 mmol) i zaštićeni bi-MPA (I) (1.35 g, 6.1 mmol) su rastvoreni u 45 ml bezvodnog DCM u Schlenk-ovoj posudi od 250 ml. U medijum su naknadno dodani 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)karbodiimid (EDCI) (0.96 g, 5 mmol) i 4-(dimetilamino)-piridinijum ptoluensulfonat (DPTS) (0.6 g, 2 mmol). Reakcioni medijum je mešan na 40° C pod argonom tokom 48 h. Reakcioni medijum je naknadno ekstrahovan sa 20 ml 1M rastvora HCl, 20 ml 10% rastvora NaHCO3i 20 ml H2O.
[0088] Nakon sušenja organske faze preko Na2SO4, filtriranja i isparavanja rastvarača, iz etara je precipitirao talog na 0° C. Precipitat je tada odstranjen filtriranjem i osušen u vakuumu preko noći. Dobivena je bela čvrsta materija. Wobt= 9.68 g, Y = 88%.
[0089]<1>H NMR (CDCl3, 300 MHz): δ 1.05 (s, 3H, 6), 3.37 (s, 3H, 1), 3.63 (bs, 180H, 2, 2' & 7b), 4.36 (t, 2H, 3, J<3>
H-H= 4.8 Hz), 4.66 (d, 2H, 7a, J<2>
Ha-Hb= 11.5 Hz), 5.44 (s, 1 H, 8), 7.32 (m, 3H, ArH), 7.42 (m, 2H, ArH).
[0090]<13>C NMR (CDCl3, 75.5 MHz) : δ (ppm) 17.8 (C6), 42.3 (C5), 58.9 (C1), 64.1 (C3), 68.9 (C7), 70.5 (C2), 71.8 (C2'), 73.4 (C2"), 101.2 (C8), 126.1 (aril CH), 128.0 (aril CH), 128.8 (aril CH), 137.8 (aril Cq), 173.8 (C4).
[0091] SEC: Mn= 2867 g/mol, PI = 1.06
Sinteza metoksi-polietilen glikol-diola (mPEG2000-(OH)2) (III)
[0092]
[0093] Jedinjenje (II) (9.5 g, 4.3 mmol) i paladijum-na-ugljenu (10% Pd/C) (0.95 g, 10% w/w) su pomešani u Schlenk-ovoj boci od 250 ml sa okruglim dnom i dva grla koja je bila opremljena sa balonom koji je bio ispunjen sa vodonikom (H2), a nakon toga je isledio ciklus vakuumargon. Tada je dodano 40 ml DCM i 40 ml metanola (MeOH). Proveden je ciklus vakuum-H2. Reakcioni medijum je mešan u statičkom H2pod jednom atmosferom tokom 4 h. Smeša je tada filtrirana kroz Celit. Rastvarači su ispareni u vakuumu, a ostatak je osušen u vakuumu preko noći. Dobivena je žućkasta čvrsta materija. Wobt= 8.7 g, Y = 95%.
[0094]<1>H NMR (CDCl3, 300 MHz): δ 1.11 (s, 3H, 6), 3.37 (s, 3H, 1), 3.63 (bs, 180H,), 3.69 - 3.78 (m, 4H, 7a & 7b), 4.33 (t, 2H, 3, J<3>
H-H= 4.8 Hz).
[0095]<13>C NMR (CDCl3, 125.7 MHz): δ 16.9 (C6), 49.5 (C5), 58.8 (C1), 63.2 (C3), 67.1 (C7), 68.7 (C2'), 70.4 (C2), 71.8 (C2'"), 72.6 (C2"), 175.5 (C4).
Sinteza mPEG2000-(OH)-Y-(OTBDPS) (IV)
[0096]
[0097] Jedinjenje (III) (4 g, 1.90 mmol) je rastvoreno u 18 ml bezvodnog DCM u Schlenkovoj posudi od 100 ml. Tada je dodan trietilamin (TEA), destilovan preko KOH (0.4 g, 3.95 mmol), a onda je kap po kap na 0° C dodan tert-butildifenilhlorosilan (TBDPSiCl) (1.1 g, 3.92 mmol). Reakcioni medijum je mešan na 40° C i pod argonom. Nakon 24 h nastala so je odstranjena filtriranjem, a tada je organska faza ekstrahovan sa 1M rastvorom HCl (15 ml), nakon toga sa rastvorom NaHCO3(15 ml) i konačno sa H2O (15 ml). Organska faza je osušena preko Na2SO4. Nakon filtracije, smeša je koncentrovana u vakuumu, a tada je talog precipitiran iz etra na 0° C. Dobiveni beli precipitat je tada odstranjen filtriranjem, ispran i osušen u vakuumu. Produkt je naknadno osušen uz pomoć azeotropa u toluenu. Produkt je uskladišten u kontejneru sa odvojenom atmosferom (glove box). Wobt= 4.1 g, Y = 90%.
[0098] RMN<1>H (CDCl3, 300 MHz): δ 1.02 (s, 9H, 10), 1.19 (s, 3H, 6), 3.37 (s, 3H, 1), 3.63 (br, 180H, 2/2'/2"/2"'), 3.73 - 3.80 (m, 4H, 7 & 8), 4.26 (t, 2H, 3, J<3>
H-H= 4.8 Hz), 7.35-7.64 (m, 10H, 11).
[0099] RMN<13>C (CDCl3, 75.5 MHz): δ 16.9 (C6), 19.1 (C9), 26.5 (C10), 50.3 (C5), 58.7 (C1), 63.1 (C3), 65.6 (C7), 66.4 (C8), 68.6 (C2'), 70.3 (C2), 71.7 (C2"'), 72.3 (C2"), 127.5 (CH aril), 129.5 (CH aril), 132.9 (Cq aril), 135.3 (CH aril), 174.8 (C4).
[0100] RMN<29>Si (CDCl3, 59.6 MHz): δ -4.33 (-O-Si-).
Sinteza mPEG2000-PLA14000-Y-OTBDPS kopolimera (V)
[0101]
[0102] Makroinicijator (IV) (0.8 g, 0.34 mmol) i DL-laktid (5 g, 35 mmol, DP 100) su rastvoreni u 25 ml bezvodnog DCM. Tada su dodani rastvor katalizatora (10 ml, 4 ekvivalenata tiouree (N-cikloheksil-N'-[3,5-bi(trifluorometil)fenil]tiourea) i 4 ekvivalenta (-)-sparteina. Reakcioni medijum je mešan na 35° C pod argonom do potpune konzumacije pomenutog laktida, koje je praćeno uz pomoć<1>H NMR. Nakon 6 h u reakcioni medijum su dodani sirćetni anhidrid (166 µl, 1.71 mmol) i 4-dimetilaminopiridin (DMAP) (4.5 mg, 0.35 mmol). Sve je mešano tokom 1 h. Smeša je naknadno koncentrovana u vakuumu, a tada je precipitirana iz 150 ml MeOH na 0° C. Nastao beo precipitat je odstranjen filtriranjem, ispran sa 20 ml MeOH, a tada je osušen u vakuumu preko noći.
[0103] RMN<1>H (CDCl3, 500 MHz): δ 1.02 (s, 9H, 10), 1.19 (s, 3H, 6), 1.58 (br, 595H, 14), 2.12 (s, 3H, PLA : 16), 3.37 (s, 3H, 1), 3.63 (br, 180H, 2/2'/2"/2'"), 3.73 - 3.80 (m, 2H, 8), 4.20 - 4.40 (m, 4H, 3 & 7), 5.16 (br, 192H, 13), 7.35-7.64 (m, 10H, 11).
[0104] RMN<13>C (CDCl3, 125.7 MHz): δ 16.6 (C14 & C6), 20.4 (C9), 26.6 (C10), 48.5 (C5), 58.8 (C1), 63.5 (C3), 65.0 (C7), 66.6 (C8), 68.9 (C13), 68.2 (C2'), 70.1 (C2), 71.7 (C2"'), 72.2 (C2"), 127.7, 129.8, 132.8, 135.5 (C11), 169.50 (C12 & C15), 174.82 (C4).
[0105] Prosečna molekularna masa (uz pomoć NMR): M=16150 g/mol
[0106] Reakcija polimerizacije uz otvaranje prstena (ROP) je provedena na sličan način uz pomoć 35 i 150 ekvivalenata laktida koje daje mPEG2000-PLA5000i mPEG2000-PLA21000kopolimere
Sinteza mPEG2000-PLA14000-Y-OH kopolimera (VI)
[0107]
[0108] Kopolimer (V) (3.96 g, 0.28 mmol) je rastvoren u 40 ml bezvodnog THF. Tada je kap po kap dodan 1M rastvor tetrabutilamonijum fluorida (TBAF) u THF (1.5 ml, 1.5 mmol). Reakcioni medijum je mešan na 30° C pod argonom tokom 7 h. THF je naknadno isparen u vakuumu. Ostatak je rastvoren u 15 ml DCM pa je precipitiran iz 800 ml etra na 0° C. Beo precipitat je odstranjen filtriranjem, a tada je osušen u vakuumu preko noći. Wobt= 2.14 g, Y = 55%.
[0109] RMN<1>H (CDCl3, 300 MHz): δ 1.57 (br, 590H, PLA : 11), 2.12 (s, 3H, PLA: 13), 3.37 (s, 3H, 1), 3.63 (br, 180H, 8, 2/2'/2"/2"'), 4.33 (m, 4H, 3 & 7), 5.15 (br, 186H, PLA: 10).
[0110] RMN<13>C (CDCl3, 75.5 MHz): δ 16.5 (PLA : C11), 48.5 (C5), 58.7 C1), 63.4 (C3), 64.2 (C7), 66.5 (C8), 68.8 (PLA: C10), 68.2 (C2'), 70.1 (C2), 71.7 (C2'"), 72.2 (C2"), 169.5 (PLA : C9), 174.8 (PEG : C4).
[0111] Prosečna molekularna masa (uz pomoć NMR): M=15495 g/mol
[0112] Zaštita je takođe provedena uz pomoć triizopropilhlorosilana (TIPSCI) kao šta je opisano ispod.
Sinteza mPEG2000-(OH)-Y-(OTIPS)
[0113]
[0114] U Schlenk-posudi od 25 ml, derivat mPEG-diol (0.5 g, 0.24 mmol) je rastvoren u 5 ml bezvodnog DCM. Tada je dodan trietilamin (TEA) (destilovan na KOH) (0.2 g, 2.01 mmol), a Tris-izopropil hlorosilan (TIPSCI) (0.40 g, 2 mmol) je dodan kap po kap na 0° C. Reakciona smeša je mešana na 40° C pod argonom. Nakon 24 h, nastala so je filtrirana, a organska faza je ekstrahovana sa 1M rastvorom HCl (5 ml), rastvorom NaHCO3(5 ml) i H2O (5 ml). Organska faza je osušena na Na2SO4. Nakon filtracije, smeša je koncentrovana u vakuumu, a ostatak je precipitiran u etru na 0° C. Beo precipitat je tada filtriran, ispran i osušen u vakuumu. Produkt je tada osušen sa azeotropom u toluenu. Produkt je uskladišten u hermetičkoj kutiji. Mobt= 0.4 g, R = 74 %.
[0115] NMR<1>H (CDCl3, 500 MHz): δ 0.98 -1.03 (br, 21 H), 1.16 (s, 3H), 3.37 (s, 3H), 3.63 (m, 180H), 3.73 - 3.80 (m, 4H), 4.26 (t, 2H, J<3>
H-H= 4.8 Hz).
Sinteza kopolimera mPEG2000-PLA10000-Y-OTIPS (V')
[0116]
[0117] Makroinicijator (0.18 g, 79.6 µmol) i DL-laktid (0.8 g, 5.6 mmol, 70 ekvivalenata) su rastvoreni u 7 ml bezvodnog DCM. Tada su dodani rastvor katalizatora (1 ml, 4 ekvivalenta), tiourea (N,N'-cikloheksil-3,5-bi[trifluorometil]fenil tiourea) i 2 ekvivalenta (+)-sparteina). Reakciona smeša je mešana na 35° C pod argonom do potpune konzumacije laktida, kao šta je kontrolisano uz pomoć<1>HNMR. Nakon 3 h, u reakcionu smešu su dodani sirćetni anhidrid (39 µl, 0.40 mmol) i 4-dimetilaminopiridin (DMAP) (10 mg, 82 µmol). Sve je mešano tokom jednog časa. Smeša je tada koncentrovana u vakuumu pa je precipitirana u 50 ml etra na 0° C. Beo precipitat je tada filtriran, ispran sa 20 ml MeOH pa je osušen u vakuumu tokom noći.
[0118] Mobt= 1 g, R ∼ 75%
[0119] NMR<1>H (CDCl3, 500 MHz): δ 0.98 -1.03 (br, 21 H), 1.16 (s, 3H), 1.58 (m, 423H), 2.12 (s, 3H), 3.37 (s, 3H, 1), 3.63 (m, 180H), 3.73 - 3.80 (m, 2H), 4.20 - 4.40 (m, 4H), 5.16 (m, 141 H, 13).
[0120] SEC: Mw= 13628 g/mol, Mn= 11850 g/mol, IP = 1.15
Sinteza kopolimera mPEG2000-PLA10000-Y-OH (VI')
[0121]
[0122] Zaštićeni kopolimer (1 g, 71 µmol) je rastvoren u 10 ml bezvodnog DCM. Tada je dodan BF3.Et2O (0.5 g, 3.56 mmol), kap po kap, na 0° C. Reakciona smeša je mešana na 0° C pod argonom tokom jednog časa, a tada na 30° C tokom 19 h. Tada je DCM isparen u vakuumu. Ostatak je rastvoren u 5 ml DCM pa je precipitiran u 50 ml etra na 0° C, ispran sa 20 ml MeOH, a tada i sa 20 ml pentana. Beo precipitat je filtriran i osušen u vakuumu tokom noći.
[0123] Mobt = 0.85 g, R ∼ 85%.
[0124] NMR<1>H (CDCl3, 500 MHz): δ 1.58 (m, 425H), 2.12 (s, 3H), 3.37 (s, 3H), 3.63 (m, 180H), 4.33 (m, 4H), 5.16 (m, 142H).
[0125] SEC : Mw= 13925 g/mol, Mn= 11800 g/mol, IP = 1.18
Sinteza kabazitaksel-2'-sukcinila (VII)
[0126]
[0127] Kabazitaksel (0.2 g, 0.24 mmol) je rastvoren u 4 ml piridina koji je bio rastvoren u KOH. Dodan je sukcinski anhidrid (0.2 g, 2 mmol). Reakcioni medijum je mešan na 30° C pod argonom. Reakcija je praćena uz pomoć tanko-slojne hromatografije (TLC) (DCM/MeOH: 9/1). Nakon 8 h, piridin je isparen u vakuumu, a ostatak je prečišćen uz pomoć hromatografske kolone (eluent: CHCl3/MeOH: gradijent od 99/1 do 97/3). Razne frakcije su naknadno isparene sa ciljem da se dobije beo prah koji je osušen u vakuumu. Wobt= 0.180 g, Y = 80%.
[0128] RMN<1>H (CDCl3, 300 MHz): δ 1.19 (s, 3H, 16), 1.20 (s, 3H, 17), 1.35 (s, 9H, 7'), 1.63 (s, 1 H, -OH tercijarno), 1.70 (s, 3H, 19), 1.78 (m, 1 H, 6a), 1.86 (s, 3H, 18), 2.15 (s, 6H, -CH3aceton), 2.18 - 2.33 (m, 2H, 14a & 14b), 2.34 (s, 3H, -CH3acetil u 4), 2.65 (m, 5H, -CH2sukcinska a, a' & 6b), 3.28 (s, 3H, -OCH3en 7), 3.44 (s, 3H, -OCH3en 10), 3.80 (d, 1 H, 3, J = 7.5 Hz), 3.84 (dd, 1 H, 7, J = 6.5 & 10.5 Hz), 4.16 (d, 1 H, 20a, J = 8.5 Hz), 4.28 (d, 1 H, 20b, J = 8.5 Hz), 4.80 (s, 1 H, 10), 4.95 (d, 1 H, 5, J = 10 Hz), 5.28 - 5.44 (br, 2H, 2'/4'), 5.61 (d, 1 H, 2, J = 7.5 Hz), 6.19 (b, 1 H, 13), 7.31, 7.38, 7.47, 7.59, (m, 9H, ArH), 8.10 (d, 2H, H orto benzoat).
[0129] RMN<13>C (CDCl3, 75.5 MHz): δ 10.8 (C19), 15.1 (C18), 21.2 (C16), 23.2 (CH3acetil), 27.3 (C17), 28.35, 28.62 (-CH2sukcinska a & a') 28.7 (C7'), 32.6 (C6), 35.7 (C14), 43.8 (C15), 47.9 (C3), 56.7 (C3'), 57.4 (C8), 57.5 (OCH3en C7), 57.8 (OCH3en C10), 73.1 (C13), 74.7 (C2'), 75.0 (C2), 77.0 (C20), 79.2 (C1), 80.7 (C6'), 81.2 (C7), 82.3 (C4), 83.1 (C10), 84.6 (C5), 127.3-138.9 (Ar), 136.2 (C11), 139.1 (C12), 155.8 (C5'), 167.5 (CO benzoat), 168.7 (CO acetil u 4), 170.0 - 174.0 (C1', -COO- sukcinska), 205.4 (C9).
Sinteza konjugata mPEG2000-PLA14000-Y-sukcinil-2'-kabazitaksel (VIII)
[0130]
[0131] Pomenuti kopolimer (VI) (2 g, 163 µmol) i kabazitaksel-2'-sukcinil (VII) (0.33 g, 353 µmol) su rastvoreni u 40 ml bezvodnog DCM. Dodan je N,N'-diizopropilkarbodiimid (DIPC) (45 mg, 357 µmol), a tada i DMAP (45 mg, 368 µmol). Reakcioni medijum je mešan na 35° C pod argonom tokom 24 h. Organska faza je naknadno ekstrahovana uz pomoć 1M rastvora HCl (30 ml), 10% rastvora NaHCO3(30 ml) i vode (30 ml). Organska faza je naknadno osušena preko Na2SO4, a tada je filtrirana. Sve je koncentrovano u vakuumu, a talog je precipitiran u 400 ml MeOH. Nakon filtracije, precipitat je osušen u vakuumu preko noći. Wobt= 1.5 g, Y = 75%.
[0132]<1>H NMR (CDCl3, 500 MHz): nakon precipitacije sirovog produkta iz MeOH, sledi kvantifikovanje kompletnog kuplovanja (100%). Detektovani su isti hemijski pomaci za jedinjenja (VI) i (VII), u omeru 1/1.
[0133]<13>C NMR: Pomak signala sukcinskog linkera -(CH2)-: 28.13 i 26.71 ppm, osim hemijskih pomaka jedinjenja (VI) i (VII).
[0134] Prosečna molekularna masa (uz pomoć NMR): M=16430 g/mol
Formulacija sa nanočesticama:
[0135] Malopre dobiveni konjugat (VIII) (20 mg) je rastvoren u 2 ml acetona (10 mg/ml). Dobiveni rastvor je dodan kap po kap u 4 ml dejonizovane vode, uz mešanje. Aceton je isparen, na primer, uz pomoć rotacionog evaporatora. Dobivena je finalna koncentracija konjugata od 5 mg/ml.
[0136] Tako dobivene nanočestice su karakterizovane kako sledi:
TEM: dobivena fotografija je prikazana na Slici 1. Primećen je srednji dijametar od 27 nm.
DLS: primerak je filtriran (1,2 µm): primećen je srednji dijametar od 62 nm. Distribucija je ostala nepromenjena tokom 3 sedmice. Rezultati su ilustrovani na Slici 2.
Sinteza konjugata mPEG2000-PLA1000-sukcinil-2'-kabazitaksel (VIII')
[0137]
[0138] 14 g kopolimera (VI') (Mw 12700 g /mol) i 2.24 g sukcinil-kabazitaksela je rastvoreno u suvom dihlorometanu, a tada je dodano 7 g aktivisanih molekularnih sita 4A u formi praha. Rastvor je mešan tokom 10 min na ST, a tada je dodano 310 mg DMAP i 305 mg DIPC. Rastvor je mešan na 35° C tokom 24 h. Nakon filtracije, rastvor je koncentrovan do suvoće na 40° C u vakuumu. Ostatak je mešan zajedno sa 2.8 l metanola i 1 ml dihlorometana tokom 2 h na 0° C. Suspenzija je filtrirana, a čvrsta materija je isprana sa 100 ml metanola. Nakon sušenja na ST preko noći je dobiveno 14 g belog praha.7.5 g čvrste materije je ponovo prečišćeno u 749 ml metanola uz mešanje preko noći na ST kako bi se, nakon filtracije i sušenja, dobilo 7.1 g belog praha.
[0139]<1>H NMR spektar (600 MHz, d u ppm, CDCl3-d1): 1,21 (m, 9 H) ; 1,36 (s, 9 H); 1,42 to 1,72 (m, 468 H) ; 1,79 (m, 1 H) ; 1,98 (široki s, 3 H) ; 2,13 (s, 3 H); 2,18 (m, 1 H) ; 2,29 (m, 1 H) ; 2,43 (široki s, 3 H) ; 2,54 to 2,77 (m, 5 H) ; 3,31 (s, 3 H); 3,38 (s, 3 H) ; 3,44 (s, 3 H) ; 3,50 to 3,78 (m, 180 H) ; 3,84 (d, J=6,5 Hz, 1 H) ; 3,89 (dd, J=6,5 & 10,6 Hz, 1 H) ; 4,08 to 4,41 (m, 8 H) ; 4,82 (s, 1 H) ; 4,99 (d, J=9,8 Hz, 1 H) ; 5,01 to 5,31 (m, 156 H) ; 5,32 (m, 1 H) ; 5,47 (m, 2 H) ; 5,64 (d, J=6,5 Hz, 1 H) ; 6,24 (široki t, J=9,0 Hz, 1 H) ; 7,31 (m, 3 H) ; 7,40 (t, J=7,9 Hz, 2 H) ; 7,50 (t, J=7,9 Hz, 2 H) ; 7,61 (t, J=7,9 Hz, 1 H) ; 8,11 (d, J=7,7 Hz, 2 H)
[0140] SEC Mw= 13530 g/mol, Mn= 11770 g/mol, IP=1.15
Formulacija sa nanočesticama:
1) 30 mg PLA-PEG-Y-sukcinil-kabazitaksela (VIII') je rastvoreno u 1.5 mL acetona. Rastvor je dodan kap po kap u 3 mL WFI uz mešanje (500 rpm tokom 20 min). Aceton je tada isparen na 37° C u vakuumu uz pomoć Rotavapor-a (od 300 do 45 mbar tokom 30 min).
Finalni volumen nanodisperzija je tada podešen do 3 mL sa ciljem da se kompenzuje gubitak vode tokom isparavanja.
Finalna koncentracija nanodisperzije: 10 mg/mL
Srednji dijametar (uz pomoć DLS) = 43 nm, PDI = 0.14
2) 1 g PLA-PEG-Y-sukcinil kabazitaksela (VIII') je rastvoren u 50 mL acetona na sobnoj temperaturi uz mešanje. Organski rastvor je filtriran kroz Nylon-filter (0.45 µm), a tada je uveden u Hamilton-špricu od 50 mL. 0.2 g Solutol HS15 (Makrogol 15 hidroksistearat) i 0.04 g natrijum deoksiholata je rastvoreno u 450 mL WFI uz mešanje. Ovaj vodeni rastvor je filtriran kroz filter sa porama od 0.22 µm. Organski rastvor je izliven, sa stopom od 20 mL/h, u vodenu fazu uz pomoć špric-pumpe. Sa ciljem da se dobije homogena disperzija, teflonska tuba, spojena sa špricom, je uronjena u vodenu fazu. Uz pomoć nanodisperzije tada su dobivene nanočestice veličine ≤ 100 nm (prosečna veličina je bila 30 nm, PDI = 0.14), koja je izmerena uz pomoć Malvern Nanosizer (Quasi Elastic Light Scattering).
Aceton i nešto vode su eliminirani uz pomoć rotacionog evaporatora u vakuumu na 37° C. Finalna koncentracija nanodisperzije se kretala između 10 i 200 mg/g. Veličina nanočestica je ostala kod vrednosti od ≤ 100nm (prosečna veličina je iznosila 30 nm, za sve koncentracije). Veće čestice mogu da se izvuku uz pomoć filtracije kroz filter sa porama od 0.45 µm.
Sinteza mPEG-PLA-sukcinil-larotaksela (IX)
Priprema sukcinil-larotaksela
[0142]
[0143] U bocu je dodano, u atmosferi azota, 2.36 g (2.72 mmol) larotaksel dihidrata, 47 ml dihlorometana, 2.72 g (27.19 mmol) sukcinskog anhidrida i 33 mg (0.27 mmol) DMAP. Rastvor je grejan na 30° C preko noći, a tada je dva puta ispran sa 47 ml vode. Nakon sušenja organskog rastvora sa MgSO4, rastvor je koncentrovan do suvoće na 40° C pod smanjenim pritiskom. Suvi ekstrakt je tretiran sa 3 volumena diizopropil etra, suspenzija je mešana tokom 2 h, filtrirana, a čvrsta materija je dva puta isprana sa 2 volumena diizopropil etra. Nakon sušenja na 40° C pod smanjenim pritiskom se dobija 2.28 g belog praha.
[0144] NMR<1>H spektar (500 MHz, δ u ppm, CDCl3-d): 1,26 (s, 3 H) ; 1,28 (s, 3 H); 1,32 (s, 9 H) ; 1,38 (m, 1 H) ; 1,68 (m, 1 H) ; 1,93 (s, 3 H) ; 2,11 (d, J=15,9 Hz, 1 H) ; 2,19 (široki s, 4 H) ; 2,25 (dd, J=4,8 & 10,3 Hz, 1 H) ; 2,35 (m, 1 H) ; 2,38 (s, 3 H) ; 2,49 (td, J=4,8 & 15,9 Hz, 1 H) ; 2,61 to 2,82 (m, 4 H) ; 4,07 (d, J=8,6 Hz, 1 H) ; 4,12 (d, J=7,5 Hz, 1 H) ; 4,31 (d, J=8,6 Hz, 1 H) ; 4,75 (široki d, J=4,8 Hz, 1 H) ; 5,35 to 5,51 (m, 2 H) ; 5,69 (d, J=7,5 Hz, 1 H) ; 6,23 (široki t, J=9,4 Hz, 1 H) ; 6,34 (s, 1 H) ; 7,30 (m, 3 H) ; 7,39 (t, J=7,8 Hz, 2 H) ; 7,51 (t, J=7,8 Hz, 2 H) ; 7,60 (t, J=7,8 Hz, 1 H) ; 8,16 (d, J=7,8 Hz, 2 H)
Konjugacija sukcinil-larotaksela sa kopolimerom (VI')
[0145]
[0146] U bocu od 25 ml, u atmosferi azota, je dodano 0.2 g mPEG-PLA-Y-OH kopolimera (VI') (0.0157 mmol), 31.6 mg (2.2 ekv.) sukcinil-larotaksela u 4 ml DCM, a tada je dodano 100 mg aktivisanih molekularnih sita 4A u prahu. Nakon 10 min mešanja je dodano 4.4 mg (2.3 ekv.) DMAP i 4.3 mg (2.2 ekv.) DIPC. Suspenzija je mešana tokom 24 h na 35° C, a tada je filtrirana (0.22 µm). Organska faza je koncentrovana do suvoće, a ekstrakt je tretiran sa 40 ml metanola i 2 kapi dihlorometana. Suspenzija je mešana tokom 2 h na ST, tada je filtrirana, a čvrsta materija je osušena na ST pod smanjenim pritiskom kako bi se dobilo 174 mg očekivanog jedinjenja.
[0147] NMR<1>H spektar (500 MHz, δ u ppm, CDCl3-d): 1,22 (m, 3 H) ; 1,24 (s, 3 H); 1,27 (s, 3 H) ; 1,29 (s, 9 H) ; 1,35 to 1,85 (m, 512 H) ; 1,91 (široki s, 3 H) ; 2,08 to 2,75 (m, 9 H) ; 2,13 (s, 3 H) ; 2,20 (s, 3 H) ; 2,41 (široki s, 3 H) ; 3,39 (s, 3 H) ; 3,48 to 3,81 (m, 192 H) ; 4,02 to 4,39 (m, 8 H) ; 4,75 (široki d, J=4,0 Hz, 1 H) ; 5,01 to 5,33 (m, 169 H) ; 5,34 (m, 1 H) ; 5,40 to 5,52 (m, 2 H) ; 5,68 (d, J=7,6 Hz, 1 H) ; 6,26 (široki t, J=9,0 Hz, 1 H) ; 6,34 (s, 1 H) ; 7,30 (m, 3 H) ; 7,39 (t, J=7,7 Hz, 2 H) ; 7,51 (t, J=7,7 Hz, 2 H) ; 7,61 (t, J=7,7 Hz, 1 H) ; 8,18 (d, J=7,7 Hz, 2 H)
[0148] SEC Mw= 14140 g/mol Mn= 11260 g/mol, D = 1.25
Formulacija sa nanočesticama:
[0149] 30 mg PLA-PEG-Y-sukcinil-larotaksela je rastvoreno u 1.5 mL acetona. Rastvor je dodan kao po kap u 3 mL vode za injekciju (WFI), uz mešanje (500 rpm tokom 20 min). Aceton je tada isparen na 37° C u vakuumu uz pomoć Rotavapor-a.
[0150] Finalni volumen nanodisperzije je tada podešen do 3 mL sa ciljem da se kompenzuje gubitak vode tokom isparavanja.
[0151] Finalna koncentracija nanodisperzije: 10 mg/mL.
[0152] Srednji dijametar (uz pomoć DLS) = 48 nm, PDI = 0.17.
Sinteza mPEG-PLA-glutaril-kabazitaksela (X)
Priprema glutaril-kabazitaksela
[0153]
[0154] U bocu od 500 ml, u atmosferi azota, je dodano 10 g (11.24 mmol) solvata kabazitaksel aceton, 200 ml dihlorometana, 13.51 g (112.45 mmol) glutarnog anhidrida i 0.14 g (1.12 mmol) DMAP. Rastvor je grejan na 30° C preko noći, a tada je nekoliko puta ispran sa 100 ml vode. Nakon sušenja organskog rastvora sa MgSO4, rastvor je koncentrovan do suvoće na 40° C pod smanjenim pritiskom. Suvi ekstrakt je tretiran sa 10 volumena diizopropil etra, suspenzija je filtrirana, a čvrsta materija je dva puta isprana sa 2 volumena diizopropil etra. Nakon sušenja na ST pod smanjenim pritiskom, dobija se 6.75 g belog praha.
[0155] NMR<1>H spektar (500 MHz, δ u ppm, CDCl3-d) : 0,97 (s, 3 H) ; 0,98 (s, 3 H) ; 1,38 (s, 9 H) ; 1,50 (m, 5 H) ; 1,79 (m, 6 H) ; 2,24 (s, 3 H) ; 2,28 (t, J=7,3 Hz, 2 H) ; 2,46 (t, J=7,4 Hz, 2 H) ; 2,66 (m, 1 H) ; 3,21 (s, 3 H) ; 3,29 (s, 3 H) ; 3,59 (d, J=7,1 Hz, 1 H) ; 3,75 (dd, J=6,6 et 10,7 Hz, 1 H) ; 4,02 (s, 2 H) ; 4,47 (s, 1 H) ; 4,70 (s, 1 H) ; 4,95 (široki d, J=10,7 Hz, 1 H) ; 5,02 to 5,12 (m, 2 H) ; 5,37 (d, J=7,1 Hz, 1 H) ; 5,81 (široki t, J=9,0 Hz, 1 H) ; 7,18 (t, J=7,7 Hz, 1 H) ; 7,36 (d, J=7,7 Hz, 2 H) ; 7,43 (t, J=7,7 Hz, 2 H) ; 7,66 (t, J=7,7 Hz, 2 H) ; 7,74 (t, J=7,7 Hz, 1H) ; 7,85 (d veliko, J=9,1 Hz, 1 H) ; 7,98 (d, J=7,7 Hz, 2 H) ; 12,13 (veoma široki s, 1 H).
Konjugacija glutaril-kabazitaksela sa kopolimerom (VI')
[0156]
[0157] U bocu od 25 ml, u atmosferi azota, je dodano 0.2 g mPEG-PLA-Y-OH kopolimera (VI') (0.0157 mmol), 31.6 mg (2.2 ekv.) glutaril-kabazitaksela u 4 ml DCM, a tada je dodano i 100 mg aktivisanih molekularnih sita 4A u prahu. Nakon 10 min mešanja je dodano 4.4 mg (2.3 ekv.) DMAP i 4.3 mg (2.2 ekv.) DIPC. Suspenzija je mešana tokom 24 h na 35° C, a tada je filtrirana (0.22 m). Organska faza je koncentrovana do suvoće, a ekstrakt je tretiran sa 40 ml metanola i 2 kapi dihlorometana. Suspenzija je mešana tokom 2 h na ST, tada je filtrirana, a čvrsta materija je osušena na ST pod smanjenim pritiskom koje daje 170 mg očekivanog jedinjenja.
[0158] NMR<1>H spektar (500 MHz, δ u ppm, CDCl3-d): 1,21 (s, 3 H) ; 1,22 (s, 3 H) ; 1,25 (m, 3 H) ; 1,35 (s, 9 H) ; 1,40 to 1,70 (m, 452 H) ; 1,72 (s, 3 H) ; 1,80 (m, 1 H) ; 1,87 (m, 2 H) ; 2,00 (s, 3 H) ; 2,13 (s, 3 H) ; 2,15 to 2,51 (m, 6 H) ; 2,45 (široki s, 3 H) ; 2,71 (m, 1 H) ; 3,32 (s, 3 H) ; 3,39 (s, 3 H) ; 3,45 (s, 3 H) ; 3,48 to 3,81 (m, 172 H) ; 3,86 (d, J=7,3 Hz, 1 H); 3,91 (dd, J=6,3 & 11,0 Hz, 1 H) ; 4,10 to 4,40 (m, 8 H) ; 4,83 (s, 1 H) ; 5,00 (d, J=10,7 Hz, 1 H) ; 5,01 to 5,33 (m, 152 H) ; 5,35 (m, 1 H) ; 5,44 to 5,63 (m, 2 H) ; 5,66 (d, J=7,3 Hz, 1 H) ; 6,27 (široki t, J=9,0 Hz, 1 H) ; 7,32 (m, 3 H) ; 7,40 (t, J=7,7 Hz, 2 H) ; 7,50 (t, J=7,7 Hz, 2 H) ; 7,61 (t, J=7,7 Hz, 1 H) ; 8,12 (d, J=7,7 Hz, 2 H)
[0159] SEC Mw= 14140 g/mol Mn= 11210 g/mol, D = 1.26
Formulacija sa nanočesticama:
[0160] 30 mg PLA-PEG-Y-glutaril-kabazitaksela je rastvoreno u 1.5 mL acetona. Rastvor je dodan kap po kap u 3 mL WFI uz mešanje (500 rpm tokom 20 min). Aceton je tada isparen na 37° C u vakuumu uz pomoć Rotavapor-a.
[0161] Finalan volumen nanodisperzije tada je podešen na 3 mL sa ciljem da se kompenzuje gubitak vode tokom isparavanja.
[0162] Finalna koncentracija nanodisperzije: 10 mg/mL
[0163] Srednji dijametar (uz pomoć DLS) = 60 nm, PDI = 0.21
Sinteza mPEG-PLA-diglikolil-kabazitaksela (XI)
Priprema diglikolil-kabazitaksela
[0164]
[0165] U bocu od 250 ml, u atmosferi azota, je dodano 5 g (5.62 mmol) solvata kabazitaksel acetona, 100 ml dihlorometana, 6.53 g (56.22 mmol) diglikolnog anhidrida i 0.107 (0.56 mmol) DMAP. Rastvor je grejan na 22° C preko noći, a tada je dva puta ispran sa 50 ml vode. Nakon sušenja organskog rastvora sa MgSO4, rastvor je koncentrovan do suvoće na 40° C pod smanjenim pritiskom. Suvi ekstrakt je tretiran sa 4 volumena diizopropil etra, suspenzija je mešana tokom 30 min, tada je filtrirana, a čvrsta materija je dva puta isprana sa 2 volumena diizopropil etra. Nakon sušenja na 40° C pod smanjenim pritiskom je dobiveno 5.04 g belog praha.
[0166]<1>H NMR spektar (500 MHz, δ u ppm, CDCl3-d): 0,96 (s, 3 H) ; 0,98 (s, 3 H) ; 1,37 (m, 9 H) ; 1,44 to 1,58 (m, 2 H) ; 1,51 (s, 3 H) ; 1,80 (široki s, 4 H) ; 2,23 (s, 3 H) ; 2,67 (m, 1 H); 3,21 (s, 3 H) ; 3,28 (s, 3 H) ; 3,58 (d, J=7,3 Hz, 1 H) ; 3,75 (dd, J=6,8 & 10,5 Hz, 1 H) ; 4,02 (s, 2 H) ; 4,13 (s, 2 H) ; 4,31 (d, J=17,0 Hz, 1 H) ; 4,38 (d, J=17,0 Hz, 1 H) ; 4,51 (s, 1 H) ; 4,70 (s, 1 H) ; 4,95 (d, J=10,5 Hz, 1 H) ; 5,06 (m, 1 H) ; 5,16 (d, J=8,5 Hz, 1 H) ; 5,37 (d, J=7,3 Hz, 1 H) ; 5,82 (široki t, J=9,4 Hz, 1 H) ; 7,19 (t, J=7,8 Hz, 1 H) ; 7,36 (d, J=7,8 Hz, 2 H) ; 7,43 (t, J=7,8 Hz, 2 H) ; 7,66 (t, J=7,8 Hz, 2 H) ; 7,73 (t, J=7,8 Hz, 1 H); 7,88 (d, J=9,3 Hz, 1 H) ; 7,97 (d, J=7,8 Hz, 2 H) ; 12,78 (veoma široki s, 1 H)
Konjugacija diglikolil-kabazitaksela sa kopolimerom (VI')
[0167]
[0168] U bocu od 25 ml, u atmosferi azota, je dodano 0.2 g mPEG-PLA-Y-OH kopolimera (VI') (0.0157 mmol), 32.3 mg (2.2 ekv.) diglikolil-kabazitaksela u 4 ml DCM, a tada još 100 mg aktivisanih molekularnih sita 4A u prahu. Nakon 10 min mešanja je dodano 4.4 mg (2.3 ekv.) DMAP i 4.3 mg (2.2 ekv.) DIPC. Suspenzija je mešana tokom 24 h na 35° C, a tada je filtrirana (0.22 m). Organska faza je koncentrovana do suvoće, a ekstrakt je tretiran sa 40 ml metanola uz 2 kapi dihlorometana. Suspenzija je mešana tokom 2 h na ST, tada je filtrirana, a čvrsta materija je osušena na ST pod smanjenim pritiskom koje daje 184 mg očekivanog jedinjenja.
[0169] NMR<1>H spektar (500 MHz, δ u ppm, CDCl3-d): 1,21 (s, 3 H) ; 1,22 (s, 3 H) ; 1,26 (m, 3 H) ; 1,35 (s, 9 H) ; 1,40 to 1,70 (m, 486 H) ; 1,72 (s, 3 H) ; 1,80 (m, 1 H) ; 2,01 (široki s, 3 H) ; 2,13 (s, 3 H) ; 2,21 (m, 1 H) ; 2,32 (m, 1 H) ; 2,45 (široki s, 3 H) ; 2,71 (m, 1 H) ; 3,31 (s, 3 H) ; 3,38 (s, 3 H) ; 3,45 (s, 3 H) ; 3,48 to 3,81 (m, 180 H) ; 3,86 (d, J=7,3 Hz, 1 H) ; 3,91 (dd, J=6,6 & 11,0 Hz, 1 H) ; 4,08 to 4,40 (m, 8 H) ; 4,83 (s, 1 H) ; 5,02 (d, J=10,7 Hz, 1 H) ; 5,03 to 5,33 (m, 162 H) ; 5,40 to 5,57 (m, 3 H) ; 5,67 (d, J=7,3 Hz, 1 H) ; 6,29 (široki t, J=9,0 Hz, 1 H) ; 7,31 (m, 3 H) ; 7,40 (t, J=7,7 Hz, 2 H) ; 7,50 (t, J=7,7 Hz, 2 H) ; 7,60 (t, J=7,7 Hz, 1 H) ; 8,11 (d, J=7,7 Hz, 2 H)
[0170] SEC Mw= 14830 g/mol, Mn= 11920 g/mol, D = 1.24
Formulacija sa nanočesticama:
[0171] 30 mg PLA-PEG-Y-diglikolil-kabazitaksela je rastvoreno u 1.5 mL acetona. Rastvor je dodani kao po kap u 3 mL WFI uz mešanje (500 rpm tokom 20 min). Aceton je tada isparen na 37° C u vakuumu uz pomoć Rotavapor-a (od 300 do 45 mbar tokom 30 min).
[0172] Finalni volumen nanodisperzije je tada podešen do 3 mL sa ciljem da je kompenzuje gubitak vode tokom isparavanja.
[0173] Finalna koncentracija nanodisperzije: 10 mg/mL
[0174] Srednji dijametar (uz pomoć DLS) = 52 nm, PDI = 0.18
Studije in vitro oslobađanja iz formulacija sa nanočesticama konjugata kabazitaksela [0175] Kinetika in vitro oslobađanja slobodnog kabazitaksela iz formulacija sa nanočesticama konjugata kabazitaksela, tj. iz PLA-PEG-Y-sukcinil-kabazitaksela, PEG-Y-glutarilkabazitaksela, i PLA-PEG-Y-diglikolil-kabazitaksela, je procenjena na primercima plazme (prethodno puferovane sa 500 mM fosfatnog pufera do finalne koncentracije od 10 mM u plazmi) uzete iz pacova soja Sprague Dawley, uz pomoć tečne hromatografije visoke performanse (HPLC). U posude sa alikvotima plazme su dodane standardne formulacije sa kabazitakselom ili sa kojugatima kabazitaksela (1 mg/mL) uz pomoć mikropipete kako bi se postigao finalni volumen od 800 µL. Posude su tada ostavljene (na 37° C) u agitatoru (brzina mešanja: 250 rpm). Analiza primeraka je provedena u sledećim vremenskim tačkama (intervalima): 0 h, 1 h, 2 h, 4 h, 16 h i 24 h.
[0176] Tokom svakog pomenutog intervala, 100 µL primerka je dodano u posudu sa 0.3 mL smeše acetonitril:voda (85:15 v/v), a posude su mešane tokom 5 min kako bi se omogućila precipitacija belančevina i ekstrakcija slobodnog kabazitaksela. Primerci su tada centrifugovani na 10000 rpm tokom 10 min, a bistri supernatant je sakupljen i podvrgnut kvantifikaciji uz pomoć HPLC.
[0177] HPLC-uslovi su sledeći:
Kolona: 150 mm Zorbax SB fenil 3.5 µm
Protok: 1 mL min; temperatura kolone je bila 30° C
Ultraljubičasti (UV) dvojni detekcioni modus na 230 nm (u principu korišćeno za titraciju) i 210 nm; izokratna mobilna faza: acetonitril 60% / voda 40% / trifluorosirćetna kiselina 0.006%; retenciono vreme za kabazitaksel = 4.1 min
[0178] Rezultati su rezimirani u tabeli ispod:
Tabela: In vitro podaci za formulacije sa nanočesticama konjugata kabazitaksela (tj. PLA-PEG-Y-sukcinil-kabazitaksel, PLA-PEG-Y-glutaril-kabazitaksel, i PLA-PEG-Y-digliklilkabazitaksel) u plazmi pacova
[0179] Studije in vitro oslobađanja u plazmi pacova su otkrile da formulacije sa konjugatima kabazitaksela pokazuju profil zadržanog oslobađanja leka, pri čemu su konjugati sintetizovani uz pomoć različitih linkera posedovali različite profile oslobađanja (Slika 3). Konjugat koji sadrži sukcinilni linker je pokazao nasporiji profil oslobađanja (∼17% slobodnog kabazitaksela oslobođeno tokom 24 h), a pratio ga je konjugat sa glutarilnim linkerom (∼27% slobodnog kabazitaksela oslobođeno tokom 24 h), dok je relativno brzo oslobađanje primećeno u slučaju konjugata koji sadrži diglikolilni linker (∼47% slobodnog kabazitaksela oslobođeno tokom 24 h). Šta se tiče PLA-PEG-Y-sukcinil-kabazitaksela, oslobađanje sukcinil-kabazitaksela je kvantifikovano uz pomoć HPLC. Rezultati su otkrili oslobađanje zanemarive količine sukcinilkabazitaksela (<1% kabazitaksela koji je inicijalno bio prisutan u nanočesticama) iz formulacije. Sve u svemu, redosled oslobađanja leka je sledeći: PLA-PEG-Y-diglikolilkabazitaksel > PLA-PEG-Y-glutaril-kabazitaksel > PLA-PEG-Y-sukcinil-kabazitaksel nanočestice. Ovi rezultati otkrivaju da konjugati kabazitaksela sa različitim linkerima imaju različite profile in vitro oslobađanja.

Claims (16)

  1. Patentni zahtevi 1. Konjugat, naznačen time, što se sastoji od aktivnog principa i kopolimera polietilen glikola i polimlečne kiseline sa formulom (Ia):
    u kojoj: - p je broj između 1 i 340; - q je broj između 10 i 700; - AP je ostatak aktivnog principa; - L je linker, - X je atom vodonika ili alkilna grupa opciono supstituisana sa jednim ili više supstituenata izabranih iz atoma halogena, OR, CN, CF3, NRR' i COOR, pri čemu R i R', koji su međusobno identični ili različiti, su atomi vodonika ili alkilne grupe, i njegove farmaceutski prihvatljive soli.
  2. 2. Konjugat u skladu sa zahtevom 1, naznačen time, što je AP-ostatak spojen na L uz pomoć OH grupe iz samog AP.
  3. 3. Konjugat u skladu sa zahtevom 1 ili 2, naznačen time, što pomenuti AP je taksoid.
  4. 4. Konjugat u skladu sa zahtevom 3, naznačen time, što je pomenuti taksoid izabran iz paklitaksela, docetaksela, kabazitaksela i larotaksela.
  5. 5. Konjugat u skladu sa bilo kojim od prethodnih zahteva, naznačen time, što pomenuti aktivni princip je kabazitaksel, koji je nakalemljen na poziciju 2'.
  6. 6. Konjugat u skladu sa bilo kojim od prethodnih zahteva, naznačen time, što pomenuti PLA, na svom opciono slobodnom hidroksilnom kraju, sadrži zaštitnu grupu.
  7. 7. Konjugat u skladu sa bilo kojim od prethodnih zahteva, naznačen time, što odgovara sledećoj formuli (Ib):
    u kojoj L, p, q, i AP su definisani u skladu sa bilo kojim od zahteva od 1 do 6.
  8. 8. Konjugat u skladu sa bilo kojim od prethodnih zahteva, naznačen time, što L predstavlja dikarboksilatni derivat sukcinske kiseline, glutarne kiseline ili diglikolne kiseline.
  9. 9. Proces za pripremu konjugata u skladu sa bilo kojem od prethodnih zahteva, naznačen time, što podrazumeva kuplovanje jedinjenja sa formulom (IIIa):
    sa derivatom pomenutog aktivnog principa koji odgovara formuli: AP-L-H u kojoj p, q, X, AP i L su definisani u skladu sa bilo kojim od zahteva od 1 do 8.
  10. 10. Jedinjenje, naznačeno time, što ima formulu (IIIa):
    u kojoj p, q, i X su definisani u skladu sa bilo kojim od zahteva od 1 do 8.
  11. 11. Proces za pripremu jedinjenja sa formulom (IIIa) u skladu sa zahtevom 10, naznačen time, što obuhvata: 1. fazu selektivne mono-zaštite hidroksilne grupe jedinjenja sa formulom (IV):
    u kojoj (mPEG)mpredstavlja:
    uz pomoć odgovarajuće zaštitne grupe, 2. kuplovanje tako dobivenog mono-zaštićenog jedinjenja sa prekursorom sa formulom:
    i 3. otklanjanje zaštitne grupe uvedene u fazi 1, pri čemu su p, q, i X definisani u skladu sa bilo kojem od zahteva od 1 do 9.
  12. 12. Proces u skladu sa zahtevom 11, naznačen time, što se pomenuta mono-zaštita provodi uz pomoć
    gde Lg predstavlja izlaznu grupu, poput atoma halogena ili trifluorometansulfonata.
  13. 13. Proces u skladu sa zahtevom 11 ili 12, naznačen time, što se faza 2 provodi uz pomoć polimerizacije uz otvaranje prstena (ROP) primenom prekursora 3,6-dimetil-[1,4]-dioksan-2,5-diona.
  14. 14. Nanočestice, naznačene time, što sadrže konjugat u skladu sa bilo kojem od zahteva od 1 do 8.
  15. 15. Farmaceutska kompozicija, naznačena time, što sadrži konjugat u skladu sa bilo kojem od zahteva od 1 do 8.
  16. 16. Konjugat u skladu sa bilo kojem od zahteva od 1 do 8, naznačen time, što se koristi za tretman i/ili prevenciju raznih tumora.
RS20170450A 2010-11-19 2011-11-18 Polimerni konjugati aktivnih principa, procesi za njihovu pripremu i njihovi polimerni interminedijari RS56021B1 (sr)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR1059561A FR2967581B1 (fr) 2010-11-19 2010-11-19 Conjugues polymeriques de principes actifs, leur procede de preparation et leurs intermediaires polymeriques
EP11784668.3A EP2640422B1 (en) 2010-11-19 2011-11-18 Polymeric conjugates of active principles, their process of preparation and their polymeric intermediates
PCT/EP2011/070441 WO2012066117A1 (en) 2010-11-19 2011-11-18 Polymeric conjugates of active principles, their process of preparation and their polymeric intermediates

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS56021B1 true RS56021B1 (sr) 2017-09-29

Family

ID=43654132

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20170450A RS56021B1 (sr) 2010-11-19 2011-11-18 Polimerni konjugati aktivnih principa, procesi za njihovu pripremu i njihovi polimerni interminedijari

Country Status (18)

Country Link
US (1) US9278137B2 (sr)
EP (1) EP2640422B1 (sr)
JP (2) JP6013354B2 (sr)
AR (1) AR084728A1 (sr)
CY (1) CY1119115T1 (sr)
DK (1) DK2640422T3 (sr)
ES (1) ES2625173T3 (sr)
FR (1) FR2967581B1 (sr)
HR (1) HRP20170691T1 (sr)
HU (1) HUE032590T2 (sr)
LT (1) LT2640422T (sr)
PL (1) PL2640422T3 (sr)
PT (1) PT2640422T (sr)
RS (1) RS56021B1 (sr)
SI (1) SI2640422T1 (sr)
TW (1) TW201302225A (sr)
UY (1) UY33741A (sr)
WO (1) WO2012066117A1 (sr)

Families Citing this family (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2014015422A1 (en) * 2012-07-27 2014-01-30 Ontario Institute For Cancer Research Cellulose-based nanoparticles for drug delivery
CN110179995A (zh) * 2012-12-28 2019-08-30 塔弗达治疗有限公司 包封在颗粒中的靶向缀合物及其制剂
DK3046584T3 (en) 2013-09-16 2017-10-02 Astrazeneca Ab THERAPEUTIC POLYMER NANOPARTICLES AND PROCEDURES FOR PREPARING AND USING THEREOF
KR20180112060A (ko) 2016-02-23 2018-10-11 타베다 세라퓨틱스, 인코포레이티드 Hsp90 표적화된 접합체 및 이의 입자 및 제형
BR112021000658A2 (pt) * 2018-07-19 2021-04-13 Starpharma Pty Ltd Dendrímero, composições, composição farmacêutica, método de tratamento de câncer, uso de dendrímero, método, uso, dendrímero ou composição, processo de produção de dendrímero e intermediários para a produção de dendrímero
CN110974972B (zh) * 2019-12-03 2023-01-20 沈阳药科大学 难溶性药物的弱酸性衍生物及其脂质体制剂
CN113933441A (zh) * 2021-09-30 2022-01-14 无锡紫杉药业有限公司 一种卡巴他赛及其中间体的测定方法

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5766635A (en) 1991-06-28 1998-06-16 Rhone-Poulenc Rorer S.A. Process for preparing nanoparticles
GB9721069D0 (en) 1997-10-03 1997-12-03 Pharmacia & Upjohn Spa Polymeric derivatives of camptothecin
CZ2006207A3 (cs) * 2006-03-28 2008-01-16 Zentiva, A. S. Micelární nosiče léčiv s protinádorovou aktivitou
CN101701068B (zh) * 2009-10-30 2011-09-21 北京化工大学 一种pH响应性的Y型药物输送材料及其制备方法
US20110237686A1 (en) * 2010-03-26 2011-09-29 Cerulean Pharma Inc Formulations and methods of use
CN103408710B (zh) * 2013-06-19 2015-12-23 北京化工大学 一种生物可降解及糖响应性的y型高分子药物输送材料及制备

Also Published As

Publication number Publication date
UY33741A (es) 2012-03-30
SI2640422T1 (sl) 2017-10-30
US9278137B2 (en) 2016-03-08
JP6165920B2 (ja) 2017-07-19
US20130243719A1 (en) 2013-09-19
EP2640422B1 (en) 2017-03-01
PT2640422T (pt) 2017-05-23
FR2967581A1 (fr) 2012-05-25
AR084728A1 (es) 2013-06-05
PL2640422T3 (pl) 2017-09-29
DK2640422T3 (en) 2017-05-22
JP6013354B2 (ja) 2016-10-25
HUE032590T2 (en) 2017-10-30
HRP20170691T1 (hr) 2018-05-18
CY1119115T1 (el) 2018-02-14
EP2640422A1 (en) 2013-09-25
TW201302225A (zh) 2013-01-16
JP2016172858A (ja) 2016-09-29
LT2640422T (lt) 2017-06-26
FR2967581B1 (fr) 2012-12-28
ES2625173T3 (es) 2017-07-18
JP2013542972A (ja) 2013-11-28
WO2012066117A1 (en) 2012-05-24

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP6165920B2 (ja) 活性成分のポリマーコンジュゲート、その製造方法及びそのポリマー中間体
Wu et al. Core-crosslinked pH-sensitive degradable micelles: a promising approach to resolve the extracellular stability versus intracellular drug release dilemma
Kim et al. Thermoresponsive nanostructured polycarbonate block copolymers as biodegradable therapeutic delivery carriers
Xie et al. A novel polymer–paclitaxel conjugate based on amphiphilic triblock copolymer
Zhang et al. Synthesis and characterization of the paclitaxel/MPEG-PLA block copolymer conjugate
Li et al. Acetal-linked polymeric prodrug micelles for enhanced curcumin delivery
Sun et al. Biodegradable micelles with sheddable poly (ethylene glycol) shells for triggered intracellular release of doxorubicin
Shahin et al. Novel self-associating poly (ethylene oxide)-b-poly (ɛ-caprolactone) based drug conjugates and nano-containers for paclitaxel delivery
Zhang et al. Synthesis and characterization of a new multifunctional polymeric prodrug paclitaxel–polyphosphoester–folic acid for targeted drug delivery
Shao et al. Synthesis and characterization of amphiphilic poly (ɛ-caprolactone)-b-polyphosphoester diblock copolymers bearing multifunctional pendant groups
Yan et al. Reduction-sensitive core-cross-linked mPEG–poly (ester-carbonate) micelles for glutathione-triggered intracellular drug release
Cai et al. Synthesis of amphiphilic copolymers containing zwitterionic sulfobetaine as pH and redox responsive drug carriers
Gaitzsch et al. Revisiting monomer synthesis and radical ring opening polymerization of dimethylated MDO towards biodegradable nanoparticles for enzymes
Cheng et al. Synthesis and characterization of star-shaped block copolymer of poly-(ɛ-caprolactone) and poly (ethyl ethylene phosphate) as drug carrier
Kim et al. Novel pH-sensitive polyacetal-based block copolymers for controlled drug delivery
Fan et al. Synthesis and unimolecular micelles of amphiphilic copolymer with dendritic poly (L-lactide) core and poly (ethylene oxide) shell for drug delivery
Zhu et al. Self-assembled polymeric micelles based on THP and THF linkage for pH-responsive drug delivery
Ramesh et al. Supramolecular poly (N-acryloylmorpholine)-b-poly (d, l-lactide) pseudo-block copolymer via host-guest interaction for drug delivery
Arshad et al. Synthesis of lipid-based amphiphilic block copolymer and its evaluation as nano drug carrier
Toncheva-Moncheva et al. Linear amphiphilic polyglycidol/poly (ε-caprolactone) block copolymers prepared via “click” chemistry-based concept
He et al. Design and synthesis of redox and oxidative dual responsive block copolymer micelles for intracellular drug delivery
Li et al. Synthesis and characterization of an amphiphilic graft polymer and its potential as a pH-sensitive drug carrier
Wu et al. Synthesis and micellization of a new amphiphilic star-shaped poly (D, L-lactide)/polyphosphoester block copolymer
Wu et al. Facile preparation of core cross-linked micelles from catechol-containing amphiphilic triblock copolymer
Yuan et al. PEG-detachable and acid-labile cross-linked micelles based on orthoester linked graft copolymer for paclitaxel release