RS56584B1

RS56584B1 - Kombinacije koje obuhvataju dhodh inhibitore i metotreksata

Info

Publication number: RS56584B1
Application number: RS20171054A
Authority: RS
Inventors: Marina Nuria Godessart; Lalanza Maria Pilar Pizcueta
Original assignee: Almirall Sa
Priority date: 2008-06-20
Filing date: 2009-06-18
Publication date: 2018-02-28
Also published as: LT2296663T; PE20110149A1; NO2296663T3; CN102065866A; IL209267A0; ES2641168T3; IL209267A; ZA201008041B; CA2728976A1; KR101675601B1; EP2296663B1; MX2010013409A; CA2728976C; NZ589089A; UA114388C2; EA020193B1; DK2296663T3; CO6321267A2; TWI440462B; CN102065866B

Description

Opis

[0001] Ovaj se opis odnosi na nove kombinacije metotreksata sa DHODH inhibitorima. Ove kombinacije su korisne za tretiranje, sprečavanje ili potiskivanje bolesti i poremećaja poznatih da su podložni za poboljšanje sa metotreksatom i/ili putem inhibicije dehidrogenaze dihidroorotata, kao što su bolesti autoimunog sistema, bolesti imunog sistema i inflamatorne bolesti, destruktivni poremećaji kostiju, maligne neoplastične bolesti, angiogenezom povezani poremećajim virusne bolesti, i infektivne bolesti.

STANJE TEHNIKE

[0002] Metotreksat (MTX) je antimetabolit i imunomodulator koji utiče na veliki broj međućelijskih putanja metabolizma purina. Delotvoran je za smanjenje znakova i simptoma reumatoidnog artritisa (RA), kao i kod usporavanja ili zadržavanja radiografskog oštećenja. Zbog svoje efikasnosti, lakoće primene i relativno niske cene, MTX je postao oralna terapija prvog reda kod većine pacijenata sa reumatoidnim artritisom. Kod onih pacijenata koji imaju nepotpun odgovor na MTX, još jedan DMARD (antireumatski lek koji modifikuje bolest) se dodaje povrh toga. Dakle, kombinovana terapija sa MTX je sve češća u kliničkoj praksi.

[0003] Leflunomid je primer takvog DMARD. Odobren je u septembru 1998. za upotrebu za RA. Pokazalo se da smanjuje znake i simptome te bolesti, da inhibira strukturno oštećenje (što je potvrđeno rendgenskim erozijama i suženjem prostora zgloba) i poboljšava fizičku funkciju.Teriflunomid je aktivni metabolit Leflunomida.

[0004] Smatra se da Metotreksat prvenstveno deluje na putanje purina ćelijskog metabolizma, dok Leflunomid deluje na putanje pirimidina. Imajući u vidu raznovrsne međućelijske putanje na koje utiču oba leka, kombinacija Leflunomida i metotreksata ima potencijal prema biohemijskoj sinergiji. Zapravo, prijavljeno je da kombinacija oba agensa vodi značajnom kliničkom poboljšanju (videti na primer, Weinblatt ME i saradnici. "Pharmacokinetics, safety, and efficacy of combination treatment with methotrexate and leflunomide in patients with active rheumatoid arthritis" (''Farmakokinetika, bezbednost, i efikasnost kombinovanog lečenja sa metotreksatom i leflunomidom kod pacijenata sa aktivnim reumatoidnim artritisom''). Arthritis Rheum 1999; 42 (7): 1322-8 and Kremer JM i saradnici. "Concomitant Leflunomide therapy in patients with acfive rheumatoid arthritis despite stable doses of methotrexate" (''Isotvremena terapija Leflunomidom kod pacijenata sa aktivnim reumatoidnim artritisom uprkos stabilnim dozama metotreksada''). Ann. Intern. Med., 2002; 137, 726-733).

[0005] Nažalost, i metotreksat i leflunomid imaju ozbiljna neželjena dejstva, posebno hepatotoksičnost. Metotreksat može da prouzrokuje fatalno oštećenje jetre kao što je fibroza i ciroza posle produžene upotrebe. Povećanja enzima jetre se često vide tokom terapije sa metotreksatom. Otuda, redovno i pažljivo nadgledanje pacijenata koji uzimaju MTX jeste ključno, posebno kada je MTX kombinovan sa drugim DMARD.

[0006] Najčešća prijavljena neželjena dejstva Leflunomida obuhvataju dijareu, dispepsiju, osip, gubitak kose, povišen krvni pritisak i povišene enzime jetre. Potencijal hepatotoksičnosti je od posebnog značaja i redovni laboratorijski testovi, uključujući tekstove krvi za funkciju jetre, moraju biti izvedeni za sve pacijente koji uzimaju ovaj lek. Leflunomid se ne preporučuje za upotrebu kod pacijenata sa dokazom o infekciji hepatitisom B ili C ili značajnim oštećenjem jetre.

[0007] Klinička ispitivanja su prijavila da izvestan broj pacijenata koji oseća povećanje markera jetre (izmereno kao nivoi transaminaze) jeste značajno viši u grupi sa terapihom koja se sastoji od Leflunomida plus MTX, nego samo u grupi sa samo MTX. Informacija o proizvodu za Leflunomid upozorava protiv kombinovanja sa metotreksatom na bazi da takva kombinovana terapija može da vodi dodatoj ili čak sinergističkoj hepatotoksičnosti.

[0008] Mehanizam odgovoran za hepatotoksičnost leflunomida, i posebno njegovog aktivnog metabolita, teriflunomida, je nepoznat, ali se pripisuje njegovoj aktivnosti kao inhibitoru dehidrogenaze dihidroorotata (DHODH). Toksičnost jetre je prepoznata kao neželjeni efekat direktno izveden iz mehanizma dejstva DHODH- inhibitora, koji je sprečio razvoj ove klase jedinjenja.

OPIS PRONALASKA

[0009] Sada smo utvrdili da, nasuprot opštem uverenju, inhibicija DHODH nije odgovorna za oštećenje jetre proizvedeno putem leflunomida i da su DHODH inhibitori posebno pogodni za kombinaciju sa metotreksatom.

[0010] Jasno je da inhibiranje DHODH-a proizvodi imunosupresantna i antiproliferativna dejstva. DHODH inhibitori bi mogli samim tim da se koriste kao imunosupresanti i kao antiproliferativi za lečenje bolesti autoimunog sistema, inflamatorne i proliterativne bolesti, kao što je reumatoidni artritis (RA).

[0011] Naš pronalazak se zasniva na iznenađujućem otkriću da inhibicija DHODH nije povezana sa hepatotoksičnošću i samim tim, DHODH inhibitori nemaju hepatotoksični potencijal predstavljaju važan doprinos lečenju ovih bolesti, zahvaljujući mogućnosti njihovog kombinovanja sa MTX, najčešće korišćen lek prve linije za lečenje RA.

[0012] Razvili smo in vivo model procene hepatotoksičnosti kod miševa, u kom se jedinjenja koja se testiraju primenjuju intraperitonealnom putanjom primene leka da se dobije maksimalna izloženost jetre leku. Kod ovog modela, Teriflunomid, aktivni metabolit Leflunomida, je pokazao drastično povećanje nivoa transaminaza i bilirubina u plazmi, pri čemu DHODH inhibitori ne pokazuju povećanje kod bilo kog od markera jetre od plazme kod istog modela, pri čemu se održava njihova efikasnost kod artritisa.

[0013] Dakle, ovaj je pronalazak usmeren na kombinovan proizvod koji obuhvata (a) metotreksat i (b) i DHODH inhibitor koji je 2-(3’-etoksi-3,5-difluorobifenil-4-ilamino)nikotinska kiselina, 2-(3,5-difluoro-3’-metoksibifenil-4-ilamino)nikotinska kiselina, 2-(3’-ciklopropoksi-3,5-difluorobifenil-4-ilamino)nikotinska kiselina ili 2-(3,5-difluoro-3’-metoksibifenil-4-ilamino)-5-metilnikotinska kiselina, ili njena farmaceutski prihvatljiva so ili njen N-oksid.

[0014] Kako se ovde koristi, pojam farmaceutski prihvatljiva so obuhvata soli sa farmaceutski prihvatljivom kiselinom ili bazom. Farmaceutski prihvatljive kiseline obuhvataju i neorganske kiseline, na primer, hlorovodoničnu, sumpornu, fosfornu, difosfornu, hidrobromnu, hidrojodnu i azotnu kiselinu i organske kiseline, na primer limunsku, fumarnu, maleinsku, jabučnu, bademovu, askorbinsku, oksalnu, sukcinsku, tartarnu, benzojevu, sirćetnu, metansulfonsku, etansulfonsku, benzensulfonsku, cikloheksilsulfatnu (ciklaminsku) ili p-toluensulfonsku kiselinu. Farmaceutski prihvatljvie baze obuvataju alkalni metal (npr. natrijum ili kalijum) i zemnoalkalni metal (npr. kalcijum ili magnezijum) hidroksidi i organske baze, na primer alkil amini, arilalkil amini i heterociklični amini.

[0015] Druge preporučene soli prema ovom pronalasku su jedinjenja četvorovalentnog amonijaka pri čemu se ekvivalent anjona (X-) povezuje sa pozitivnim naelektrisanjem N atoma. X-može biti anjon različitih mineralnih kiselina kao na primer, hlorid, bromid, jodid, sulfat, nitrat, fosfat, ili anjon organske kiseline kao što je na primer, sirćetna, maleat, fumarat, citrat, oksalat, sukcinat, tartrat, malat, mandelat, trifluoroacetat, metansulfonat i p-toluensulfonat. X- je preporučljivo anjon izabran iz hlorida, bromida, jodida, sulfata, nitrata, acetata, maleata, oksalata, sukcinata ili trifluoroacetata. Još preporučljivije X- je hlorid, bromid, trifluoroacetat ili metansulfonat.

[0016] Kako se ovde koristi, N-oksid se formira iz tercijarnih alkalnih amina ili imina prisutnih u molekulu, korišćenjem uobičajenog agensa oksidacije.

[0017] Preporučljivo aktivni sastojci (a) i (b) formiraju deo pojedinačne farmaceutske supstance.

[0018] Još je data kombinacija kako je gore opisano koja još obuhvata (c) još jedno jedinjenje izabrano iz:

(i) Anti-TNF-alfa monoklonalna antitela kao što je infliksimab, certolizumab pegol, glimumab, adalimumab i AME-527 iz (primenjene molekularne evolucije);

(ii) TNF-alfa antagonisti kao što je etanercept, lenercept, onercept i pegsunercept;

(iii) inhibitori kalcineurina (PP-2B) / inhibitori INS ekspresije kao što su ciklosporin A, takrolimus i ISA-247 iz Isotechnika (Izotehnika);

(iv) Antagonisti IL-1 receptora kao što je Anakinra i AMG-719 kompanije Amgen;

(v) Anti-CD20 monoklonalna antitela kao što je Rituksimab, Ofatumumab, Okrelizumab i TRU-015 iz farmaceutske kompanije Trubion Pharmaceuticals;

(vi) p38 inhibitori kao što je AMG-548 (iz Amgen), ARRY-797 ( iz Array Biopharma), klormetiazol edisilat, doramapimod, PS-540446 ( iz BMS), SB-203580, SB-242235, SB-235699, SB-281832, SB-681323, SB-856553 (svi iz GlaxoSmithKline), KC-706 (iz Kemia), LEO-1606, LEO-15520 (svi iz Leo), SC-80036, SD-06 (svi iz Pfizer), RWJ-67657 (iz R.W. Johnson), RO-3201195, RO-4402257 (svi iz Roche), AVE-9940 ( iz Aventis), SCIO-323, SCIO-469 (svi iz Scios), TA-5493 (iz Tanabe Seiyaku), i VX-745 i VX-702 (svi iz Vertex-a) ;

(vii) NF-kappaB (NFKB) inhibitori aktivacije kao što je Sulfasalazin i Iguratimod;

(viii) Inhibitor reduktaze dihidrofolata (DHFR) inhibitor kao što je Aminopterin i CH-1504 iz Chelsea; (ix) Inhibitori Janus kinaze (JAK), kao CP-690, 550 iz Pfizer i INCB-18424, iz Incyte;

(x) MEK inhibitor, kao što je ARRY-162 iz Array;

(xi) Agonisti receptora Sfingosin-1 fosfata, kao što je fingolimod (Novartis);

(xii) Interferoni koji obuhvataju Interferon beta 1a kao što je Avonex iz Biogen Idec, CinnoVex iz CinnaGen i Rebif iz Merck Serono, i Interferon beta 1b kao što je Betaferon iz Schering i Betaseron iz Berlex;

(xiii) Imunomodulatore kao što je BG-12 (derivat fumarne kiseline) iz Biogen Idec/Fumapharm (xiv) Inhibitori adenozin aminohidrolaze kao što je kladribin iz Merck Serono.

[0019] Ovaj pronalazak još obezbeđuje upotrebu (a) metotreksata i (b) DHODH inhibitor iz ovog pronalaska za pripremu leka za istovremnu, odvojenu ili uzastopnu upotrebu za lečenje patološkog stanja ili bolesti izabrane iz reumatoidnog artritisa, psorijatskog artritisa, ankilozirajućeg spondilitisa, multipla skleroze, Vegenerove (Wegener’s) granulomatoze, sistemskog lupusa eritematozusa, psorijaze i sarkodioze.

[0020] Preporučljivo patološko stanje ili bolest je reumatoidni artritis, psorijatični artritis ili psorijaza. Najpreporučljivije to je reumatoidni artritis.

[0021] Takođe je data kombinacija koja obuhvata (a) Interferone kao što je Interferon beta 1a ili Interferon beta 1b, i (b) DHODH inhibitor iz ovog pronalaska, preporučljivo DHODH inhibitor iz formule (I).

[0022] Takođe je dato da upotreba kombinacije (a) Interferona kao što je Interferon beta 1a ili Interferon beta 1b, i (b) DHODH inhibitora iz ovog pronalaska, preporučljivo DHODH inhibitora iz formule (I) za prirpemu leka za istovremenu, odvojenu ili sekvencijalnu upotrebu za lečenje multiple skleroze.

[0023] Takođe je dat proizvod koji obuhvata (a) metotreksat i (b) DHODH inhibitor iz ovog pronalaska, kao kombinovan preprarat za istovremenu, odvojenu ili uzastopnu upotrebu za lečenje pacijenta koji je čovek ili životinja koji obuluje od ili je podložan patološkom stanju ili bolesti kako je gore definisano. Pomenuti proizvod može opciono da obuhvata aktivno jedinjenje (c), kako je definisano gore.

[0024] Takođe je dat komplet delova koji obuhvata (b) DHODH inhibitor iz ovog pronalaska zajedno sa uputstvima za istovremenu, odvojenu ili uzastopnu upotrebu u kombinaciji sa (a) metotreksatom, za lečenje pacijenta koji je čovek ili životinja koji obuluje od ili je podložan patološkom stanju ili bolesti kako je gore definisano. Pomenuti komplet može opciono još da obuhvata aktivno jedinjenje (c), kako je definisano gore.

[0025] Takođe je obezbeđen paket koji obuhvata (b) DHODH inhibitor iz ovog pronalaska i (a) metotreksat, za istovremenu, odvojenu ili uzastopnu upotrebu za lečenje patološkog sanja ili bolesti kako je definisano gore. Pomenuti paket može opciono još da obuhvata aktivno jedinjenje (c), kako je definisano gore.

[0026] Takođe je obezbeđena upotreba (b) DHODH inhibitora iz ovog pronalaska za pripremu leka, za upotrebu u kombinaciji sa (a) metotreksatom, za lečenje patološkog stanja ili bolesti kako je definisano gore.

[0027] Takođe je obezbeđena upotreba (a) metotreksata, za dobijanje leka, za upotrebu u kombinaciji sa (b) DHODH inhibitorom iz ovog pronalaska, za lečenje patološkog stanja ili bolesti kako je definisano gore.

[0028] Takođe je obezbeđena upotreba kako je definisano gore pri čemu metotreksat (a) jeste za primenu u režimu doziranja koji obuhvata primenu 0,015 do 3 mg/kg/nedeljno metotreksata i DHODH inhibitora (b) je za primenu u režimu doziranja koji obuhvata primenu 0,03 do 30 mg/kg/dnevno DHODH inhibitora.

[0029] Obično, lek je za upotrebu za lečenje čoveka ili životinje obolelog od ili podložnog oštećenju jetre ili stanju koje bi bilo pogoršano hepatotoksičnošću. Uobičajenije, pomenuti čovek ili životinja boluje od fibroze jetre, hepatitisa (obično hepatitisa A do G), ciroze (obično prouzrokovano alkoholizmom) ili kancerom jetre.

[0030] U jednom izvođenju ovog pronalaska, kombinacija, proizvod, komplet delova ili paket obuhvata (b) DHODH inhibitor iz ovog pronalaska, i (a) metotreksat, kao isključive aktivne komponente.

[0031] Činjenica da DHODH inhibitori iz ovog pronalaska imaju smanjena prateća dejstva na jetru je pronalazak iz ovog pronalaska. Ovaj pronalazak dakle takođe obezbeđuje upotrebu DHODH inhibitora iz ovog pronalaska, kako je definisano gore, za proizvodnju leka za upotrebu u lečenju ili sprečavanju patološkog stanja ili bolesti, kako je gore definisano, kod čoveka ili životinje koji boluje od ili je podložen oštećenju jetre ili stanju koje bi pogoršalo hepatotoksičnošću, kako je definisano gore.

[0032] Takođe je obezbeđena kombinacija kako je gore definisano za upotrebu u lečenju patološkog stanja ili bolesti kako je gore definisano.

[0033] Takođe je dat DHODH inhibitor kako je definisano gore za upotrebu u lečenju čoveka ili životinje obolelog od ili podložnog patološkom stanju ili bolesti kako je definisano gore, pri čemu čovek ili životonja boluje od ili je podložniji oštećenju jetre ili stanju koje bi hepatotksičnost pogoršala, kako je definisano gore.

[0034] Aktivna jedinjenja u kombinacijama sa ovim pronalaskom mogu da se primene bilo kojom rastvorljivom rutom, zavisno od prirode poremećaja koji treba, npr. oralno (kao sirupi, tablete, kapsule, lozenge, preparati sa kontrolisanim otpuštanjem, preparati koji se brzo rastvaraju, itd); topikalno (kao kreme, masti, losioni, nazalni sprejevi ili aerosoli, itd), ubrizgavanjem (potkožno, intradermalno, intramuskularno, intravenski, itd.) ili udisanjem (kao suvi prah, rastvor, disperzija, itd).

[0035] Aktivna jedinjenja u kombinaciji mogu biti primenjena zajedno u istoj farmaceutskoj supstanci ili u različitim supstancama predviđenim za odvojeno, istovremeno, zajedničku ili uzastopnu primenu istom ili različitom putanjom.

[0036] Kombinacije iz ovog pronalaska mogu zgodno da budu predstavljene u jediničnom doznom obliku i mogu biti pripremljene putem bilo kog od postupaka dobro poznatih u oblasti farmacije.

[0037] Kombinacije iz ovog pronalaska su pogodne za oralnu primenu moguće ih je predstaviti kao diskretne jedinice kao što su kapsule, kahete ili tablete svaka obuhvata unapred određenu količinu aktivnog sastojka; kao praha ili granula; kao rastvor ili suspenzija u vodenoj tečnosti ili nevodenoj tečnosti; ili kao tečna emulzija ulja u vodi ili tečna emulzija vode u ulju. Aktivni sastojak može takođe biti prisutan kao bolus, elektorijum ili pasta.

[0038] Kao formulacija sirup će generalno da obuhvata suspenziju ili rastvor jedinjenja ili soli u tečnom nosaču na primer, etanol, kokosovo ulje, maslinovo ulje, glicerin ili voda sa agensom arome ili bojenja.

[0039] Gde je kombinacija u obliku tablete, bilo koji farmaceutski nosač se rutinski koristi za pripremu čvrstih formulacija moguće je koristiti. Primeri takvih nosača obuhvataju magnezijum stearat, talk, želatin, akaciju, stearinsku kiselinu, skrob, laktozu i saharozu.

[0040] Tabletu je moguće napraviti sabijanjem ili oblikovanjem u kalupu, opciono sa jednim ili više pratećih sastojaka. Sabijene tablete moguće je pripremti sabijanjem u odgovarajućoj mašini. Aktivni sastojak u obliku slobodnog protoka kao što je prah ili granule opciono pomešan sa vezivnim sredstvom, sredstvom za podmazivanje, inertnim sredstvom za razređivanje, površinski aktivnim agensom ili raspršujućim agensom. Oblikovane tablete je moguće napraviti oblikovanjem u odgovarajućoj mašini u mešavini praškastog jedinjenja navlaženog inertnim tečnim razblaživačem. Ove tablete mogu biti opciono obložene ili presvučene i mogu biti formulisane tako da obezbeđuju sporo ili kontrolisano otpuštanje aktivnog sastojka koji se nalazi u njima.

[0041] Kada je kombinacija u obliku kapsule, bilo kakvo rutinsko stavljanje u kapsulu je pogodno, na primer korišćenjem gore pomenutih nosača u tvrdo želatinastoj kapsuli. Kada je supstanca u obliku meke želatinaste kapsule bilo koji farmaceutski nosač koji se rutinski koristi za pripremu disperzija ili suspenzija moguće je razmatrati, na primer vodene gume, celuloze, silikati ili ulja, i ugraditi u meku želatinastu kapsulu.

[0042] Ova kombinacija može još da bude u obliku suve praškaste supstance za topikalnu isporuku u pluća inhalacijom. Suve praškaste supstance mogu, na primer, da budu predstavljene u kapsulama i patronama od na primer želatina ili mehurića od na primer laminirane aluminijumske folije, za upotrebu kao inhalator ili insuflator. Ove formulacije generalno obuhvataju praškastu mešavinu za udisanje jedinjenja prema ovom pronalasku i pogodnu praškastu bazu (supstanca nosač) kao što je laktoza ili skrob. Upotrebi laktoze se daje prednost. Svaka kapsula ili patrona može generalno da sadrži između 2 µg i 150 µg svakog terapijski aktivnog sastojka. Alternativno, aktivni sastojak (s) može biti prisutan bez ekscipijenata.

[0043] Pakovanje formulacije za udisanje moguće je izvesti korišćenjem pogodnih inhalacionih uređaja kao što je Novolizer ® SD2FL ili Genuair ® koji se opisuju u sledećim prijavama patenta: WO 97/000703, WO 03/000325 i WO 03/061742.

[0044] Ova kombinacija može biti u obliku supstance za nazalnu isporuku. Uobičajene supstance za nazalnu isporuku obuhvataju one pomenute gore za udisanje i još obuvhataju supstance koje nisu pod pritiskom u obliku rastvora ili suspenzije u inertnom pomoćnom sredstvu kao što je voda opciono u kombinacij sa uobičajenim ekscipijentima kao što su puferska sredstva, antimikrobi, agensi za modifikovanje toničnosti i agensi za modifikovanje viskoznosti koje je moguće primeniti putem nazalne pumpe.

[0045] Uobičajene dermalne i transdermalne formuacije obuhvataju uobičajeno vodeno ili nevodeno pomoćno sredstvo, na primer, krema, mast, losion ili pasta ili su u obliku medicinskog gipsa, kao što je flaster ili membrana.

[0046] Preporučljivo ta kombinacija je u obliku jedinične doze, na primer tablete, kapsule ili izmerene aerosolne doze, tako da pacijent može primeniti pojedinačnu dozu.

[0047] Količina svakog aktivnog koji je neophodan da se postigne terapijsko dejstvo će, naravno, varirati sa određenom aktivnom, putanjom primene, subjektu koji se leči, i posebno poremećaja ili bolesti koja se leči.

[0048] Najčešće svi aktivni agensi u toj kombinaciji se primenjuju u isto vreme, ili veoma bliskom vremenskom periodu. Alternativno, jedan ili dva aktivna bi mogla biti uzeta ujutro i drugi (s) kasnije tokom dana. Ili u drugom scenariju, jedan ili dva aktivna bi mogla biti uzeta dvaput dnevno a drugi (s) jednom dnevno, bilo da se to desi u isto vreme kao jedna od dve doze dnevno, ili odvojeno. Preporučljivo barem dva, ili više preporučljivo svi, aktivni treba da budu uzeti zajedno u isto vreme. Preporučljivo, barem dva, i više preporučljivo svi aktivni bi bili primenjeni kao mešavina.

[0049] Preporučljivo kombinacija leka iz ovog pronalaska je za primenu kao režim doziranja koji obuhvata primenu (i) 0,015 do 3 mg/kg/nedeljno metotreksata, još preporučljivije 0,07 do 0,7 mg/kg/nedeljno metotreksata i najpreporučljivije 0,15 do 0,35 mg/kg/nedeljno metotreksata, i (ii) 0,03 do 30 mg/kg/dnevno DHODH inhibitora, još preporučljivije 0,07 do 14 mg/dnevno DHODH inhibitora i najpreporučljivije 0,15 do 0,3 mg/kg/dnevno DHODH inhibitora.

PRIMERI

Primer 1 - ogled inhibicije ljudske DHODH aktivnosti

[0050] DHODH aktivnost i njegova inhibicija su proučavani korišćenjem ogleda smanjenja hromogena sa DCIP (2,6-dihlorofenol-indofenol). Oksidacija supstrata (Dihidrooratat, L-DHO), kao i redukcija ko-supstrata (koenzim Q, CoQ) je spojena na redukciju hromogena, otuda enzimatska aktivnost daje kao rezultat gubitak apsorpcije hromogenna na 600 nm.

[0051] Ekstrakti enzima (8 µl, ∼1,5 µg ljudskog proteina) su inkubirani u pločama od 96 pregrada. Ta mešavina za ogled (200 µl) je sadržala 200 µM CoQD, 100 µM L-DHO, 120 µM DCIP u puferskom sredstvu iz ogleda (100 mM HEPES pH 8,0, 150 mM NaCl, 10% Glicerol, 0,05% Triton X-100) i 2 µl jedinjenja koje se testira. Jedinjenja su rastvorena u DMSO pri koncetraciji zalihe od 1 mM, i testirani pri različitim koncentracijama koje su varirale od 10 µM do 1 pM da se izračuna IC50(koncentracija inhibitora neophodna za 50% inhibicije).

[0052] Reakcija je pokrenuta dodavanjem enzima i zatim je inkubirana tokom 10 min na sobnoj temperaturi pre merenja DCIP smanjenja brojanjem smanjenja apsorpcije na 600 nm korišćenjem standardnih instrumenata (Spectramax).

[0053] Sve reakcije su izvedene u duplikatu i na grafikonu, gde se određuju IC50vrednosti za svako jedinjenje, su iscrtani korišćenjem ABase softvera.

[0054] Tabela 1 pokazuje aktivnosti kod čoveka u ogledu DHODH inhibicije nekih jedinjenja iz ovog pronalaska koja pokazuju da su ova jedinjenja jaki DHODH inhibitori.

TABELA 1

Primer 2 - smanjena hepatotoksičnost

[0055] Ogledi sa akutnom hepatotoksičnošću su izvedeni na švajcarskim miševima. Životinje su primile pojedinačnu dozu bilo pomoćnog sredstva, ili 100 mg/kg teriflunomida ili jedinjenja iz ovog pronalaska (jedinjenja sa spiska prethodno navedena) intraperitonealnom putanjom. Dvadeset četiri sata kasnije, životinje su žrtvovane i nivoi markera za jetru AST (aspartat aminotransferaza), ALT (alanin aminotransferaza) i BIL (ukupni bilirubin) u plazmi su određeni.

Tabela 2: Nivoi plazme markera jetre miševa posle primene 100 mg/kg jedinjenja, 100 mg/kg teriflunomida ili pomoćnog sredstva (IU: Međunarodne jedinice).

[0056] Kao što jasno može da se vidi iz Tabele 2, miševi lečeni Teriflunomidom su pokazali dramatično povećanje u tri markera jetre u poređenju sa miševima tretiranim pomoćnim sredstvom, jasno ukazujući na visoku hepatotoksičnost, dok DHODH inhibitori u skladu sa ovim pronalaskom nisu prouzrokovali značajno povećanje bilo kog od izmerenih parametara

PRIMER 3: Ogled efikasnosti na artritisu indukovanom adjuvansom kombinovanog proizvoda iz ovog pronalaska.

[0057] Dejstva DHODH inhibitornih jedinjenja su testirana u kombinaciji sa metotreksatom (0,05 mg/kg/ dan) na modelu pacova za artritis indukovan ađuvansom (AIA) kod životinja kod kojih je uspostavljena bolest (kurativni protokol). Ukratko, ubrizgan je CFA adjuvans (Complete Freund Adjuvant) u levo zadnje stopalo Vistar pacova, i 10 dana kasnije otok dve zadnje šape je izmeren pletismometrom. Pacovi su ispoljili sličan stepen upale u obe šapice su nasumično izabrani u terapijske grupe (n=7 po grupi). Jedinjenja su primenjena oralno jednom dnevno tokom 10 dana i zapremine šapice su određen svaka dva dana sve do 21. dana.

Tabela 3. Dejstva jedinjenja A (3 mg/kg/dan), metotreksat (0,05 mg/kg/dan) i njihova kombinacija na inhibiciju upale šape kod artritičnih pacova.

[0058] Rezultati su izraženi kao srednja inhibicija upale izmereni kao područje ispod krivulje (AUC) zapremine desne šape u vremenskom periodu između 10. dana i 21. dana posle indukovanja.

Procenat inhibicije za svaku grupu je izračunat naspram vrednosti iz pacova tretiranih pomoćnim farmaceutskim sredstvom. Rezultati su sredina dva nezavisna eksperimenta, svaki sa 5-6 životinja po grupi.

(nastavak)

[0059] Rezultati iz Tabele 3 pokazuju da jedinjenje A iz ovog pronalaska suzbija upalu prouzrokovanu eksperimentalnim artritisom kod pacova. Pored toga, zajednička primena MTX i jedinjenja A je dala kao rezultat povećanu efikasnost (34%) naspram jedinjenja A samog, što označava povećanu izvodljivost primene tog jedinjenja kod pacijenata lečenih sa MTX.

Tabela 4: Dejstva Teriflunomida (3 mg/kg/dan), metotreksat (0,05 mg/kg/dan) i njihova kombinacija na inhibiciju upale šape kod artritičnih pacova.

[0060] Rezultati su izraženi kao srednja inhibicija upale izmerene kao područje ispod krivulje (AUC) zapremina desne šape u periodu između 10. dana i 21. dana posle indukovanja. Procenat inhibicije za svaku grupu je izračunat naspram vrednosti iz pacova tretiranih pomoćnim farmaceutskim sredstvom. Rezultati su sredina jednog eksperimenta sa 6 životinja.

[0061] Zajednička primena MTX i Teriflunomida je dala kao rezultat povećanu efikasnost (9 %) naspram samo Teriflunomida.

[0062] Iz eksperimentalnih rezultata, moguće je zaključiti da DHODH inhibitorna jedinjenja iz ovog pronalaska pokazuju antiartritisno dejstvo sama kao i u kombinaciji sa MTX, slično teriflunomidu, ali jasno smanjen hepatotoksični potencijal, što čini da kombinacija iz ovog pronalaska, tj. (a) MTX i (b) DHODH inhibitor iz ovog pronalaska, bude atraktivniji sa stanovišta sigurnosnog profila.

1

Claims

Patentni zahtevi

1. Kombinacija koja obuhvata (a) metotreksat i (b) DHODH inhibitor koji je 2-(3’-etoksi-3,5-difluorobifenil-4-ilamino)nikotinska kiselina, 2-(3,5-difluoro-3’-metoksibifenil-4-ilamino)nikotinska kiselina, 2-(3,5-difluoro-3’-metoksibifenil-4-ilamino)-5-metilnikotinska kiselina ili 2-(3’-ciklopropoksi-3,5-difluorobifenil-4-ilamino)nikotinska kiselina ili njihova farmaceutski prihvatljiva so, ili njihov N-oksid.

2. Metotreksat i DHODH inhibitor kako je definisano u patentnom zahtevu 1 za istovremenu, odvojenu ili uzastopnu upotrebu za lečenje patološkog stanja ili bolesti izabrane iz reumatoidnog artritisa, psorijatičnog artritisa, ankilozirajućeg spondilitisa, multipla skleroze, Vegenerove granulomatoze, sistemskog lupusa eritematozusa, psorijaze i sarkoidoze.

3. Proizvod koji obuhvata (a) metotreksat i (b) DHODH inhibitor kako je definisan u patentnom zahtevu 1, kao kombinovani preparat za istovremenu, odvojenu ili uzastopnu upotrebu za lečenje pacijenta koji je čovek ili životinja obolelog ili podložnog patološkom stanju ili bolesti kako je gore definisano u patentnom zahtevu 2.

4. Komplet delova koji obuhvata (b) DHODH inhibitor kako je defnisano u patentnom zahtevu 1 zajedno sa uputstvima za istovremenu, odvojenu ili uzastopnu upotrebu u kombinaciji sa (a) metotreksatom, za lečenje pacijenta koji je čovek ili životinja obolelog ili podložnog patološkom stanju ili bolesti kako je gore definisano u patentnom zahtevu 2.

5 Paket koji obuhvata (b) DHODH inhibitor kako je definisan u patentnom zahtevu 1 i (a) metotreksat, za istovremenu, odvojenu ili uzastopnu upotrebu za lečenje patološkog stanja ili bolesti kako je gore definisano u patentnom zahtevu 2.

6. Kombinacija u skladu sa patentnim zahtevom 1, proizvod za upotrebu u skladu sa patentnim zahtevom 3, komplet za upotrebu u skladu sa patentnim zahtevom 4 ili pakovanje za upotrebu u skladu sa patentnim zahtevom 5, koji još obuhvata (c) još jedno jedinjenje izabrano iz:

(i) Anti-TNF-alfa monoklonalnih antitela kao što je infliksimab, certolizumab pegol, golimumab, adalimumab i AME-527 iz Applied Molecular Evolution;

(iii) inhibitori kalcineurina (PP-2B) / inhibitori INS ekspresije kao ciklosporin A, takrolimus i ISA-247 iz Isotechnika (Izotehnika);

(iv) Antagonisti IL-1 receptora kao Anakinra i AMG-719 iz kompanije Amgen;

(v) Anti-CD20 monoklonalna antitela kao što je Rituksimab, Ofatumumab, Okrelizumab i TRU-015 iz kompanije Trubion Pharmaceuticals;

(vi) p38 inhibitori kao što je AMG-548 (iz Amgen), ARRY-797 (iz Array Biopharma), klormetiazol edisilat, doramapimod, PS-540446 (iz BMS), SB-203580, SB-242235, SB-235699, SB-281832, SB-681323, SB-856553 (svi iz GlaxoSmithKline), KC-706 (iz Kemia), LEO-1606, LEO-15520 (svi iz Leo), SC-80036, SD-06 (svi iz Pfizer), RWJ-67657 (iz R.W. Johnson), RO-3201195, RO-4402257 (svi iz Roche), AVE- 9940 (iz Aventis), SCIO-323, SCIO-469 (svi iz Scios), TA-5493 (iz Tanabe Seiyaku), i VX-745 i VX-702 (svi iz Vertex-a) ; (vii) NF-kappaB (NFKB) inhibitori aktivacije kao što je Sulfasalazin i Iguratimod;

(viii) Još jedan inhibitor reduktaze dihidrofolata (DHFR) kao što je Aminopterin i CH-1504 iz Chelsea;

(ix) Inhibitori Janus kinaze (JAK), kao CP-690, 550 iz Pfizer i INCB-18424, iz Incyte;

(x) MEK inhibitor, kao što je ARRY-162 iz Array; i

(xi) Agonisti receptora Sfingosin-1 fosfata, kao što je fingolimod (Novartis);

(xv) Interferoni koji obuhvataju Interferon beta 1 a kao Avonex iz Biogen Idec, CinnoVex iz CinnaGen i Rebif iz Merck Serono, i Interferon beta 1 b kao Betaferon iz Schering i Betaseron iz Berleksa;

(xvi) Imunomodulatore kao što je BG-12 (derivat fumarne kiseline) iz Biogen Idec/Fumapharm AG;

(xvii) Inhibitore adenozin aminohidrolaze kao što je kladribin iz Merck Serono.

7. DHODH inhibitor kako je definisano u patentnom zahtevu 1 za upotrebu u kombinaciji sa metotreksatom, za lečenje patološkog stanja ili bolesti kako je definisano u patentnom zahtevu 2.

8. Metotreksat za upotrebu u kombinaciji sa DHODH inhibitorom kako je definisano u patentnom zahtevu 1 za lečenje patološkog stanja ili bolesti kao što je definisano u patentnom zahtevu 2.

9. DHODH inhibitor za upotrebu u skladu sa patentnim zahtevom 7 ili metotreksat za upotrebu u skladu sa patentnim zahtevom 8, pri čemu metotreksat

(a) jeste za primenu u režimu doziranja koji obuhvata primenu 0,015 do 3 mg/kg/nedeljno metotreksata i DHODH inhibitor (b) je za primenu u režimu doziranja koji obuhvata primenu 0,03 do 30 mg/kg/dnevno DHODH inhibitora.

10. Metotreksat i DHODH inhibitor za upotrebu u skladu sa patentnim zahtevom 2, DHODH inhibitor za upotrebu u skladu sa patentnim zahtevom 7 ili 9 ili metotreksat za upotrebu u skladu sa patentnim zahtevom 8 ili 9, pri čemu upotreba jeste za lečenje pacijenta koji je čovek ili životinja obolelog od ili podložnog oštećenju jetre ili stanju koje bi bilo pogoršano hepatotoksičnošću, i pri čemu pomenuto stanje a koje bi bilo pogoršano hepatotoksičnošću jetre jeste fibroza, hepatitis, ciroza ili kancer jetre.

11. Kombinacija u skladu sa patentnim zahtevom 1 za upotrebu za lečenje patološkog stanja ili bolesti kako je definisano u patentnom zahtevu 2.

12. DHODH inhibitor kako je definisano u patentnom zahtevu 1 za upotrebu u lečenju pacijenta koji je čovek ili životinja obolelog od ili podložnog patološkom stanju ili bolesti kako je definisano u patentnom zahtevu 2, pri čemu čovek ili životinja boluju od ili podložni su oštećenju jetre ili stanju koje bi hepatotksičnost pogoršala, kako je definisano u patentnom zahtevu 10.