RS20080371A

RS20080371A - Piperidinoilpirolodini agonisti receptora melanokortina tipa 4

Info

Publication number: RS20080371A
Application number: RSP-2008/0371A
Authority: RS
Inventors: Mark David Andrews; Alan Daniel Brown; Mark Ian Lansdell; Nicholas William Summerhill
Original assignee: Pfizer Limited,
Priority date: 2006-02-23
Filing date: 2007-02-19
Publication date: 2009-07-15
Also published as: ECSP088688A; EP1989196A2; EA200801738A1; CA2642922C; WO2007096763A2; US8138188B2; HK1126489A1; CA2642922A1; TNSN08337A1; AU2007219236A1; MEP6808A; CR10219A; WO2007096763A3; ES2402581T3; AP2008004602A0; KR20080095918A; IL193279A; EP1989196B1; NO20083480L; BRPI0708264A2

Abstract

Ovaj pronalazak se odnosi na na klasu agonista melanokortina MCR4 opšte formule (I), gde su promenljive i subsituenti kao što su ovde definisani i naročito na jedinjenja selektivne agoniste MCR4, na njihovu upotrebu u medecini, naročito u lečenju seksualne disfunkcije i gojaznosti, na intermedijere korisne u njihovoj sintezi i kompozicije koje ih sadrže.

Description

PIPERIDINOILP' IROLODINI

AGONISTIRECEPTORA MELANOKORTINA TIPA 4

Predmetni pronalazak se odnosi na određenu klasu jedinjenja, i njihove

farmaceutski prihvatljive soli, solvate, i njihove prolekove, koji su agonisti receptora melanokortina 4 (MC4), naročito na jedinjenja koja su selektivni agonisti MC4, na njihovu upotrebu u medicini, na kompozicije koje ih sadrže, na procese za njihovu pripremu i na intermedijere upotrebljene u takvim procesima. Posebno, predmetni pronalazak se odnosi na piperidinoilpirolidin jedinjenja agonista MCR4 koja su korisna za lečenje seksualnih disfunkcija, gojaznosti, dijabetesa i drugih poremećaja (Nazivi "MC4", "MC4 receptor", "MCR4", "MC4-R" itd. su ovde u upotrebi međusobno zamenjivani.

Melanokortini su peptidi izvedeni od pro-oplomelanokortina (POMC) koji se

vezuju za i aktiviraju G-protein kuplovane receptore (GRCR's) porodice receptora melanokortina. Melanokortini regulišu različiti broj fizioloških procesa uključujući seksualne funkcije i seksualno ponašanje, uzimanje hrane i metabolizam. Postoji pet receptora melanokortina koji su klonirani, MCR1, MCR2, MCR3, MCR4, MCR5 i oni su ekspresovani u različitim tkivima. MCR1 je naročito ekspresovan u melanocitima i ćelijama melanoma, MCR2 je ACTH receptor i ekspresovan je u adrenalnim tkivima, MCR3 je predominantno ekspresovan u mozgu i i sistemu organa u mozgu koji je

povezan sa emocijama i osećanjima, MCR4 je široko eskpresovan u mozgu i kičmenoj moždini i MCR5 je ekspresovan i mozgu i mnogim periferalnim tkivima uključujući kožu, u adipoznim tkivima, mišićima pričvršćenim za skelet i limfoidnim tkivima.

MCR3 može biti uključen u kontrolu seksualnih funkcija, uzimanja hrane i stvaranja

topi ote.

MC4-R je G-protein kuplovani sedam-transmembranski receptor prvenstveno ekspresovan u hipotalamusu, hipokampusu i talamusu (Gantz et al. 1993JBiol Chem268: 15174-15178): Receptor je i vezi sa centralnom regulaci jom telesne težine: MC4-R je aktiviran a-melanocit-stimulišućim hormonom (MSH), koji je izveden od pro-opiomelanokortina i inaktiviran proteinom povezanim sa aguti genom (AGRP), a-MSH izaziva gubitak težine, dok ektopična ekspresija aguti proteina dovodi do gojaznosti kod aguti miševa (Fan et al., 1993Nature385: 165-168; Lu et al., 1994Nature371: 799-802). Dodatna evidencija u ulozi MC4-R u regulaciji težine potiče kakoiz ' nokoufmodela kod miševa (Huszar et al. 1997Cell88: 131-141) tako i iz mutacije haploinsuficijencije kod ljudi (Vaisse et al. 1999J Clin Endocrinol Metab84: 1483-1486). Kod MC4-R-'nockout' miševa, povećana telesna težina je očevidna kod starosti 5 nedelja. Kod starosti 15 nedelja, homozigotni mutanti ženke su bile, prosečno, dva puta teže od njihovih divljih vršnjaka, dok su homozigotni mutanti mužjaci bili -50% teži od kontrolnih divljih primeraka. Heterozigotni miševi za MCR-4 'nokout' pokazali su dobitak težine između onog koji je primećen kod divljih i homozigotnih mutantnih vršnjaka, pokazujući na taj način efekat genske doze na regulaciju telesne težine pri ablaciji MCR-4. Uzimanje hrane kod homozigotnih mutanata je povećano za -50% u poređenju sa divljim srodnicima (Huszar et al. 1997G?//88: 131-141), [iz Am. J. Hum. Genet., 65:1501-1507, 1999]. Pokazano je da aktivacija MCR4 izaziva erekciju penisa kod glodara i pokazano je da inaktivacija MCR4 uzrokuje gojaznost (pregled kod Hardly, 1999, Ann N Y Acad Sci., 885: 1-21. Wikberg et al 200, Pharmacol Res., 43(5), 393-420.

Chaki and Najazato, u Drugs Of The Future, 2004.29(10): 1065-1974 se pozivaju na potencijalnu terapeutsku primenu za ligande koji deluju na MCR4 receptor. Međunarodne patentne prijave br. WO 2005/077935, WO 02/068387 i VVO 02/068388 i Međunarodna patentna prijava PCT/IB2006/002151 se odnose na neke piperidinilkarbonilpirolidine kao agoniste MC4 koji su korisni u lečenju seksualnih disfunkcija, gojaznosti, dijabetesa i drugih poremećaja. Prethodne publikacije su ovde u celini uključene kao referenca , u pogledu terapeutskih aspekata MC4 agonista predmetnog pronalaska.

Jedinjenja predmetnog pronalaska su korisna u lečenju oboljenja, poremećaja ili stanja koja su reakcija na aktivaciju MC4 receptora, uključujući: seksualne disfunkcije kod muškaraca i žena, uključujući poremećaj hipoaktivne seksualne želje, poremećaj povećane želje za seksualnom aktivnošću, poremećaj orgazma i/ili poremećaj seksualnog bola kod žena, disfunkciju erekcije kod muškaraca, gojaznost (redukcijom apetita, povećanjem brzine metabolizma, redukcijom uzimanja hrane ili redukcijom žudnje za ugljenim hidratima); i

dijabetes melitus (povećanjem tolerancije glukoze i/ili povećanjem insulinske rezistencije)

Jedinjenja predmetnog pronalaska su potencijalno korisna u lečenju dodatnih oboljenja, poremećaja ili stanja, uključujući, bez ograničenja, hipertenziju, hiperlipidemiju, osteoartritis, kancer, oboljenje žučne kese, nemogućnost disanja u snu, depresija, anksioznost, kompulzija, neuroze, poremećaji nesanice/spavanja, zloupotreba supstanci, bol, groznica, zapaljenje, imuno -modulacije, reumatoidni artritis, tamnjenje kože, akne i drugi poremećaji kože, neuroprotektivno i spoznajno i memorijsko pojačavanje uključujući lečenje Alchajmerove bolesti, lečenje dusfunkcije donjeg urinarnog trakta (uključujući urinarnu inkontinenciju - hiperfunkcionalnu bešiku, povećanu dnevnu učestalost, prekomerno mokrenje u toku noći, nužnost, urinarnu inkontinenciju (bilo koje stanje gde postoji neželjeno curenje urina), uključujući stresnu urinarnu inkontinenciju, nužnu urinarnu inkontinenciju i mešanu urinarnu inkontinenciju, hiperfunkciju mehura povezanu sa urinarnom inkontinencijom, mokrenje bez kontrole, noćno mokrenje, kontinualnu urinarnu inkontinenciju, situcionu urinarnu inkontinenciju, simptome donjeg urinarnog trakta (LUTS) koji su povezani sa benignom hiperplazijom prostate (BPH), i bilo koje druge indikacije pomenute u gore referisanim patentnim prijavama.

Jedinjenja predmetnog pronalaska su naročito pogodna za lečenje seksualnih disfunkcija kod žena, disfuncije erekcije kod muškaraca, gojaznosti, dijabetesa, i stanja disfinkcije donjeg urinarnog trakta.

Nazivi "lečenje", "lečiti" kako su ovde upotrebljeni imaju namenu da obuhvate kako prevenciju, tako i kontrolu, tj., profilatičko i palijativno lečenje indiciranih stanja.

Poželjne osobine za jedinjenja ovog pronalaska agoniste MCR4 uključuju poželjne potencije MCR4 agonista kao što su ovde kasnije detaljno date; selektivnost agonizma za MCR4 prema MCR1, i/ili MCR5, i/ili MCR3 kako je ovde kasnije detaljno dato, i poželjna potencija MCR4 agonista i selektivnost za MCR4 prema MCR1, i/ili MCR5, i/ili MCR3; dobre biofarmaceutske osobine kao što je fizička stabilnost, rastvorljivost, oralna bioraspoloživost, odgovarajuća metabolička stabilnost, sposobnost da izmesti AGRP iz MC4 receptora.

Predmetni pronalazak obezbeđuje jedinjenja formule (I)

gde

jedan od X i Y je N a drugi nije CH,

R je F, Cl, CN, CF3ili metoksi, uz uslov da kad Y je N, R nije F ili Cl,

R<1>je fenil, 2-piridil, C3-CĆcikloalkil ili CH2(C3-C6cikloalkil), gde je prstenasta grupa po izboru susptituisana sa jednim ili više supstituenata nezavisno odabranih od F, Cl, CN, metil ili metoksi,

R2 je H, F ili Cl, uz uslov kad Y je N, R<2>nij<e>F ili Cl,

Het je 6-člani prsten koji sadrži jedan ili dva N atoma, pri čemu je prsten ili aromatični, ili sadrži dve dvostruke veze u prstenu i =0 supstituent, pri čemu je prsten po izboru supstituisan sa jednim ili više supstituenata nezavisno izabranih od F, Cl, OH, CN, metil, etil, NH2, NHCH3, N(CH3)2i metoksi,

ili alternarivno, Het je 6-člani prsten koji sadrži jedan ili dva N atoma fuzionisanih na položajima 3 i 4, u odnosu na pripajanje za pirolidinski prsten, sa 5-članim aromatičnim prstenom koji sadrži jedan ili dva dodatna N atoma, pri čemi je 5-člani prsten po izboru supstituisan sa OH,

i njihove farmaceutski prihvatljive soli, solvati (uključujući hidrate) i prolekovi. Primeri pogodnih "Het" grupa, bez ograničenja su prikazani u daljem tekstu:

Prioritetno, X je N a Y je CH.

Prioritetno, R je hloro.

Prioritetno, R<1>je fenil po izboru supstituisan sa jednim ili više supstituenata nezavisno izabranih od F, Cl, CN, metil ili metoksi.

Prioritetnije, R<1>je fenil, 4-hlorofenil ili 4-fluorofenil.

U alternativnoj realizaciji R<1>je prioritetno C3-C6 cikloalkil, prioritetnije ciklopropil ili cikloheksil.

Prioritetno, R2 je H ili F.

Prioritetnije R2 je H.

Prioitetno, Het je piridin-2-il, piridin-3-il, piradizin-3-il, 6-okso-l,6-dihidropiradizin-3-il, 6-okso-l,6-dihidropiridiin-3-il, 2-okso-l,2-dihidropiramidin-4- il, 6-okso-1,6-dihidropiramidin-4-il, 2-okso-1,2-dihidropiridin-4-il, imidazo[ 1,2-b]piradizin-6-il, [l,2,4]triazolo[4,3-b]iradizin-6-il ili 6-okso-l,6-dihidropiridin-2-il, po izboru supstituisan sa jednim ili više supstituenata nezavisno izabranih od F, Cl, OH, CN, metil, etil i metoksi.

Prioritetnije, Het je piridin-2-il, piridin-3-il, piradizin-3-il ili 6-okso-l,6-dihidropiradizin-3-il, po izboru supstituisan sa jednim ili više supstituenata nezavisno izabranih od OH, CN, F, metil, etil i metoksi.

Još prioritetnije, Het je piridin-2-il ili piradizin -2-il, od kojih je svaki supstituisan u para položaju u odnosu na vezu sa pirolidinskom grupom , sa OH, CN, ili metoksi.

Najprioritetnije, Het je piridazin-3-il supstituisan u para položaju u odnosu na vezu sa pirolidinskom grupom , sa OH, CN, ili metoksi.

Prioritetna grupa jedinjenja, soli, solvata i prolekova uključuje ona gde:

R1 ima vrednost povezanu sa sledećim specifičnim jedinjenj ima.

Prioritetna grupa jedinjenja, soli, solvata i prolekova uključuje ona gde:

R ima vrednost povezanu sa sledećim specifičnim jedinjenj ima.

Prioritetna grupa jedinjenja, soli, solvata i prolekova uključuje ona gde:

R<2>ima vrednost povezanu sa sledećim specifičnim jedinjenjima.

Prioritetna grupa jedinjenja, soli, solvata i prolekova uključuje ona gde:

Het ima vrednost povezanu sa sledećim specifičnim jedinjenjima.

Dodatna prioritetna grupa jedinjenja, soli, solvata i prolekova uključuje ona gde: R, R<1>, R<2>i Het imaju vrednost povezane sa sledećim specifičnim jedinjenjima.

Preferentno jedinjenje je odabrano od: 6-[(3S,4S)-3-(5-hlorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-(4-fluorfenil)-4-hidroksi-3,5-dimetilpiperidin-l-il]karbonil}pirolidin-l-ii]piridazin-3-karbonitril;

6-[(3S,4S)-3-(5-hlorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-hidroksi-3,5-dimetil-4-fenilpiperidin-1- il]karbonil}pirolidin-l-il]piridazin-3-karbonitril;

6-[(3S,4S)-3-(5-hlorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-hidroksi-3,5-dimetil-4-piridin-2- ilpiperidin-1- il]karbonil}pirolidin-i -il]piridazin-3-karbonitril;

6-[(3S,4S)-3-(5-hlorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-hidroksi-3,5-dimetil-4-fenilpiperidin-1- il]karbonil}pirolidin-l-il]piridazin-3(2H)-on;

6-[(3S,4S)-3-{5-hlorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-hidroksi-3,5-dimetil-4-fenilpiperidin-1- il]karbonil}pirolidin-l-il]-2-metilpiridazin-3(2H)-on;

6-[(3S,4S)-3-{[(3R,4R,5S)-4-(4-hlorfenil)-4-hidroksi-3,5-dimetilpiperidin-l-i 1] karbon i 1} -4-(5 - hlorpiridin-2-il)pirolidin-l-il]-2-rnetilpiridazin-3(2H)-on;

6-[(3S,4S)-3-(5-hlorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-(5-hlorpiridin-

2-il)-4- hidroksi-3,5-dimetilpiperidin-l-il]karbonil}pirolidin-l-il]-2-metilpiridazin- 3(2H)-on;

6-[(3S4S)-3-(5-hlorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-(3,4-difluorfenil)-4-hidroksi-3,5- dimetilpiperidin-1 -il]karbonil}pirolidin-l -il]-2-methi!piridazin-3(2H)-on;

6-[(3S,4S)-3-(5-hlorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-hidroksi-4-(4-metoksifenil)-3,5- dimethi!piperidin-l -il]karbonil}pirolidin-l -il]-2-metilpiridazin-3(2H)-on;

6-[(3S,4S)-3-(5-hlorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-cikloheksil-4-hidroksi-3,5-dimetilpiperidin-l-il]karbonil}pirolidin-l-il]-2-metilpiridazin-3(2H)-on;

(3R,4R5S)-l-{[(3S,4S)-l-(6-hlorpiridazin-3-il)-4-(5-hlorpiridin-2-il)pirolidin-3- il]karbonil}-4-(4- fluorfenil)-3,5-dlmetilpiperidin-4-ol;

(3R,4R,5S)-l-{[(3S4S)-4-(5-hlorpiridin-2-il)-l-(6-metoksipiridazin-3-il)pirolidin-3- il]karbonil}-4- ciklopropil-3,5-dimetilpiperidin-4-ol;

(3R,4R,5S)-l-{[(3S,4S)-4-(5-hlorpiridin-2-il)-l-(5-fluorpiridin-3-il)pirolidin-3-il]karbonil}-4-(4-fluorfenil)-3,5-dimetilpiperidin-4-ol;

6-[(3S,4S)-3-(5-hlorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-(4-fluorfenil)-4-hidroksi-3,5-dimetilpiperidin-l-iI]karbonil}pirolidin-l-il]nikotinonitril;

6-[(3S,4S)-3-{[(3R,4R,5S)-4-(4-fluorfenil)-4-hidroksi-3,5-dimetilpiperidin-l-il]karbonil}-4-(5-fluorpiridin-2-il)pirolidin-l-il]piridazin-3-karbonitril;

6-[(3S,4S)-3-(5-fluorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-hidroksi-3,5-dimetil-4- fenilpiperidin-1- iljkarbonil}pirolidin-1 -il]piridazin-3-

karbonitril;

6-[(3S,4S)-3-{[(3R,4R,5S)-4-(4-hloifenil)-4-hidroksi-3,5-dimetilpiperidin-l-il]karbonil}-4-(5-lfuorpiridin-2-il)pirolidin-l-il]piridazin-3-karbonitril;

6-[(3S,4S)-3-{[(3R,4R>5S)-4-(4-hlorfenil)-4-hidroksi-3>5-dimetilpiperidin-l-il]karbonil}-4-(5-fluorpiridin-2-il)pirolidin-l-il]piridazin-3(2H)-on;

6-[(3S,4S)-3-(5-cijanopiridin-2-il)-4-{t(3R,4R,5S)-4-(4-fluorfenil)-4-hidroksi-3,5- dimethi!piperidin-l- il]karbonil}pirolidin-l-il]piridazin-3-karbonitril;

6-[(3S,4R)-3-{[(3R4R,5S)-4-(4-fluorfenil)-4-hidroksi-3,5-dimetilpiperidin-l-il]karbonil}-4-(6-metoksipiridin-3-il)pirolidin-l-il]piridazin-3-karbonitril;

6-[(3S,4S)-3-{[(3R,4R,5S)-4-(4-fluorofenil)-4-hidroksi-3,5-diinetilpiperidin-1- iljkarbonil}-4-(5- metoksipiridin-2-il)pirolidin-l-il]piridazin-3-karbonitril;

(3R,4R,5S)-4-(4-fluorfcnil)-l-{[(3S,4R)-l-(5-fluorpiridin-3-il)-4-(6-metoksipiriđin-3- iI)piroIidin-3- il]karbonil}-3,5-dimetilpiperidin-4-ol;

(3R,4R,5S)-l-{[(3S,4S)-4-(5-hlorpiridin-2-il)-l-piridazin-3-ilpirolidin-3-il]karbonil}-4- (4- fluorfenil)-3,5-dimetilpiperidin-4-ol;

6-[(3S,4S)-3-(5-hlorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-(4-fluorfenil)-4-hidroksi-3,5- dimetilpiperidin-1- il]karbonil}pirolidin-l-il]piridazin-3(2H)-on;

6-[(3S,4S)-3-(5-hlorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-(4-fluorfenil)-4-hidroksi-3,5- dimetilpiperidin-1- il]karbonil}pirolidin-l-il]-2-metilpiridazin-3(2H)-on;

(3R,4R,5S)-l-{[(3S,4S)-4-(5-hlorpiridin-2-il)-l-[l,2,4]triazolo[4,3-bjpiridazin- 6-ilpirolidin-3-iI]karbonil}-4-(4-fluorfenil)-3,5-dimetilpiperidin-4-ol;

(3R,4R,5S)-l-{t(3S,4S)-4-(5-hlorpiridin-2-il)-l-imidazo[l,2-b]piridazin-6-ilpirolidin-3- il]karbonil}-4-(4-fluorfenil)-3,5-dimetilpiperidin-4-ol;

4-[(3S,4S)-3-(5-hlorpiridin-2-il)"4-{[(3R,4R,5S)-4-(4-fluorfenil)-4-hidroksi-3,5-dimetilpiperidin-l-il]karbonil}pirolidin-l -il]pirimidin-2(l H)-on;

4-[(3S,4S)-3-(5-hlorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-(4-fluorfenil)-4-hidroksi-3,5-dimetilpiperid!n-l-il]karbonil}pirolidin-l -il]-l -metilpirimidin-2(l H)-on;

(3R,4R,5S)-l-{[(3S,4S)-4-(5-hlorpiridin-2-il)-l-(6-metoksipiridazin-3-ii)pirolidin-3- il]karbonil}-4-(4- fluorfenil)-3,5-dimetilpiperidin-4-ol;

6-[(3S,4S)-3-(5-ch!oro-3-fluorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-(4-fluorfenil)-4-hidroksi-3,5- dimetilpiperidin-1 -iljkarbonil}pirolidin-1 - il]piridazin-3-karbonitril;

6-[(3S,4S)-3-(5-hlor-3-fluorpiridin-2-ii)-4-{[(3R,4R,5S)-4-(4-fluorfenil)-4-hidroksi-3,5- dimetilpiperidin-1-iljkarbonil}pirolidin-1-il]piridazin-3(2H)-on;

6-[(3S,4S)-3-(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-(4-fluorfenil)-4-hidroksi-3,5- dimetilpiperidin-1-iljkarbonil}pirolidin-l-il]-2-metilpiridazin-3(2H)-on;

6-[(3S,4S)-3-(3,5-difluorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-(4-fluorfenil)-4-hidroksi-3,5- dimetilpiperidin-1 -il]karbonil}pirolidin-l -il]piridazin-3-karbonitril;

6-[(3S,4S)-3-(3,5-difluorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-(4-f!uorofenil)-4-hidroksi-3,5- dimetilpiperidin- l-il]karbonil}pirolidin-l-il]piridazin-3(2H)-on;

6-[(3S,4S)-3-(3,5-difluorpiridin-2-il)-4-{[(3R4R,5S)-4-(4-fluorfenil)-4-hidroksi-3,5-dimetilpiperidin- 1 -iljkarbonil}pirolidin-1 -il]-2-metilpiridazin-3(2H)-on;

6-[(3S,4S)-3-{[(3R,4R,5S)-4-(4-hlorfenil)-4-hidroksi-3,5-dimetilpiperidin-l-il]karbonil}-4-(5- hlorpiridin-2-il)pirolidin-l-il]piridazin-3-karbonitril;

6-[(3S,4S)-3-(5-hlorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-(3,4-difluorfenil)-4-hidroksi-3,5- dimetilpiperidin- 1 -il]karbonil}pirolidin-l -il]piridazin-3-karbonitril;

6-[(3S,4S)-3-{[(3R,4R,5S)-4-(4-hlorfenil)-4-hidroksi-3,5-dimetilpiperidin-l-iljkarbonil}- 4-(5-hlorpiridin-2-i[)pirolidin-l-il]piridazin-3(2H)-on;

6-[(3S,4S)-3-(5-hlorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-(3,4-difluorfenil)-4-hidroksi-3,5- dimetilpiperidin- 1 -il]karbonil}pirolidin-l -il]piridazin-3(2H)-on;

i njihove farmaceutski prihvatljive soli, solvati (uključujući hidrate), i prolekovi.

Preferentnije, jedinjenje je odabrano od: 6-[(3S,4S)-3-(5-hlorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-(4-fluorfenil)-4-hidroksi-3,5- dimetilpiperidin-1- iljkarbonil}pirolidin-l-i!]piridazin-3-karbonitril;

6-[(3S,4S)-3-(5-hlorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-hidroksi-3,5-dimetil-

4- fenilpiperidin-1- il]karbonil}pirolidin-l -il]piridazin-3-karbonitril;

6-[(3S,4S)-3-(5-hlorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-hidroksi-3,5-dimetil-4-fenilpiperidin- 1- il]karbonil}pirolidin-l-iljpiridazin-3(2H)-on;

6-[(3S,4S)-3-(5-hlorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-hidroksi-3,5-dimetil-4-fenilpiperidin- 1- il]karbonil}pirolidin-l-il]-2-metilpiridazin-3(2H)-on;

6-[(3S,4S)-3-{[(3R,4R,5S)-4-(4-hlorfenil)-4-hidroksi-3,5-dimetilpiperidin-1- il]karbonil}-4-(5- hlorpiridin-2-il)pirolidin-l-il]-2-metilpiridazin-3(2H)-on;

6-[(3S,4S)-3-(5-hlorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-(5-hlorpiridin-

2-il)-4- hidroksi-3,5-dimetilpiperidin-l-il]karbonil}pirolidin-l-il]-

2- metilpiridazin-3(2H)-on;

6-[(3S,4S)-3-(5-hlorpiridin-2-il)-4-{[{3R,4R)5S)-4-(3,4-difluorfenil)-4-hidroksi-3,5- dimetilpiperidin-1 -il]karbonil}pirolidin-l -ii]-2-metilpiridazin-3(2H)-on;

(3R,4R,5S)-l-{[(3S,4S)-4-(5-hlorpiridin-2-il)-l-piridazin-3-ilpirolidin-3-il]karbonil}-4-(4-fluorfenil)-3,5-dimetilpiperidin-4-ol;

6-[(3S,4S)-3-(5-hlorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-(4-fluorfenil)-4-hidroksi-3,5- dimetilpiperidin-1-iljkarbonil}pirolidin-l-il]piridazin-3(2H)-on;

6-[(3S,4S)-3-(5-hlorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-(4-fluorfenil)-4-hidroksi-3,5- dimetilpiperidin-1- il]karbonil}pirolidin-l -il]-2-metilpiridazin-3(2H)-on;

(3R,4R)5S)-l-{[(3S,4S)-4-(5-hlorpiridin-2-il)-l-[l,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-6- ilpirolidin-3-i|]karbonil}-4-(4-fluorfenil)-3,5-dimetilpiperidin-4-ol;

(3R,4R,5S)-l-{[{3S,4S)-4-(5-hlorpiridin-2-il)-l-imidazo[i,2-b]piridazin-6-ilpirolidin- 3-il]karbonil}-4-(4-fluorfenil)-3,5-dimetilpiperidin-4-ol;

4-[(3S,4S)-3-(5-hlorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-(4-fluorfenil)-4-hidroksi-3 5-dimetilpiperidin-1- iljkarbonil}pirolidin-1 -il]pirimidin-2(l H)-on;

4-[(3S,4S)-3-(5-hlorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-(4-fluorfenil)-4-hidroksi-3,5- dimetilpiperidin-1 -iljkarbonil}pirolidin-1 -il]-l -metilpirimidin-2(l H)-on;

6-[(3S,4S)-3-(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)-4-{[(3R>4R,5S)-4-(4-fluorfenil)-4- hidroksi-3,5- dimetilpiperidin-1 -il]karbonil}pirolidin-l - il]piridazin-3-karbonitril;

6-[(3S,4S)-3-(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-(4-fluorfenil)-4-hidroksi- 3,5-dimetilpiperidin-l -iljkarbonil}pirolidin-l-il]piridazin-3(2H)-on;

6-[(3S,4S)-3-(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-(4-fluorfenil)-4-hidroksi- 3,5-dimetilpiperidin-l-iljkarbonil}pirolidin-l-il]-2-metilpiridazin-3(2H)-on;

6-[(3S,4S)-3-(3,5-difluorpiridin-2-il)-4-{t(3R,4R,5S)-4-(4-fluorfenil)-4-hidroksi-3,5- dimetilpiperidin-1 -ii]karbonil}pirolidin-l -il]piridazin-3(2H)-on;

6-[(3S,4S)-3-(3,5-difluorpiridin-2-il)-4-{[(3R(4R,5S)-4-(4-fluorfenil)-4-hidroksi-3,5- dimetilpiperidin- 1 -iljkarbonil}pirolidin-1 -ilj-2-metilpiridazin-3(2H)-on;

6-[(3S,4S)-3-{[(3R,4R,5S)-4-(4-hlorfenil)-4-hidroksi-3,5-dimetilpiperidin-l-iljkarbonil}-4-(5- hlorpiridin-2-il)pirolidin-l-il]piridazin-3-karbonitril;

6-[(3S,4S)-3-(5-hlorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-(3,4-difiuorofenil)-4-hidroksi-3,5- dimetilpiperidin- 1 -iljkarbonil}pirolidin-1 -il]piridazin-3-karbonitril;

6-[(3S,4S)-3-{[(3R,4R,5S)-4-(4-hlorfenil)-4-hidroksi-3,5-dimetilpiperidin-l-ii]karbonil}-4-(5- hlorpiridin-2-il)pirolidin-l-il]piridazin-3(2H)-on;

6-[(3S,4S)-3-(5-hlorpiridln-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-(3,4-difluorfenil)-4-hidroksi-3,5-dimetilpiperidin- 1 -il]karbonil}pirolidin-l -il]piridazin-3(2H)-on;

i njihove farmaceutski prihvatljive soli, solvati (uklju;uju'i hidrate), i prolekovi

Najpreferentnije, jedinjenje je odabrano od: 6-[(3S,4S)-3-(5-hlorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-(4-fluorfenil)-4-hidroksi-3,5-dimetilpiperidin-1 -iljkarbonil} pirolidin-1 -il]piridazin-3-karbonitril;

6-[(3S,4S)-3-{[(3R,4R,5S)-4-(4-hlorfenil)-4-hidroksi-3,5-dimetilpiperidin-l-il]karbonil}-4-(5-hlorpiridin-2-il)pirolidin-l-il]-2-metilpiridazin-3(2H)-on;

6-[(3S,4S)-3-(5-hlorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-{5-hlorpiridin-2-il)-4-hidroksi-3,5- dimetilpiperidin-l-il]karbonil}pirolidin-l-il]-2-metilpiridazin-3(2H)-on;

6-[(3S,4S)-3-(5-hlorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-(3,4-difluorfenil)-4-hidroksi-3,5-dimetilpiperidin- 1 -il]karbonil}pirolidin-l -il]-2-metilpiridazin-3(2H)-on;

6-[(3S,4S)-3-(5-hlorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-(4-fiuorfenil)-4-hidroksi-3,5-dimetilpiperidin-1- iljkarbonil}pirolidin-1 -il]piridazin-3(2H)-on;

6-[(3S,4S)-3-(5-hlorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-(4-fluorfenil)-4-hidroksi-3 5-dimetilpiperidin-1-iljkarbonil} pirolidin-1-ilJ-2-metilpiridazin-3(2H)-on;

6-[(3S,4S)-3-(5-hlorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-(3,4-difluorfenil)-4-hidroksi-3,5-dimetilpiperidin-1 -il]karbonil}pirolidin-l -il]-piridazin-3-karbonitril;

6-[(3S,4S)-3-{[(3R,4R,5S)-4-(4-hlorfenil)-4-hidroksi-3,5-dimetilpiperidin-l-iljkarbonil}-4- (5-hlorpiridin-2-il)pirolidin-l-il]piridazin-3(2H)-on;

6-[(3S,4S)-3-(5-hlorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-(3,4-difluorfenil)-4-hidroksi-3,5-dimetilpiperidin- 1 -iljkarbonil} pirolidin-1 -il]piridazin-3(2H)-on;

Farmaceutski prihvatljive soli jedinjenja formule (I) uključuju njihove adicione soli. Pogodne adicione soli kiselina su stvorene od kislina koje grade netoksične soli.. Primeri uključuju acetat, adipat, aspartat, benzoat, bezilat, bikarbonat/karbonat, bisulfat/sulfat, borat, kamsilat, citrat, ciklamat, edisilati, ezilat, format, fumarat, gluceptat, glukonat, glucuronat, heksafluorofosphat, hibenzat, hidrohlorid/hlorid, hidrobromid/bromid hidrojodid/jodid, izetionat, laktat, malat, maleat, malonat, mezilat, metilsulfat, naftilat, 2-napsilat, nikotinat, nitrat, orotat, oksalat, palmitat, pamoat, fosfat/hidrogen fosfat/dihidrogen fosfat, piroglutamat, saharat, stearat, sukcinat, tannat, tartarat, tozilat, trifluoroaceta and ksinofoat soli. Hemisoli kiselina se takođe mogu stvoriti, na primer, hemisulfat. Za pregled pogodnih soli, vidi Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use od Stahl and Wermuth (Wiley-VCH, 2002).

Jedinjenja, soli, solvati i prolekovi pronalaska mogu da postoje u tautomernim, cviterjonskim, polimorfnim, kristalnim oblicima i kao tečni kristali. Svi takvi oblici su uključeni u okvir pronalaska. Kao primer ilustrovanja tautomernog odnosa, jedinjenja gde je na primer, "Het" grupa kao što je niže prikazano, i "keto" i"enol" tautomerni oblici su uključeni u okvir "Het" za jedinjenja formule (I):

Takođe su uključeni u okvir pronalaska multikomponentni kompleksi (oni koji nisu soli i solvati) gde su lek i najmanje jedna druga komponenta prisutni u stehimetrijskom ili nestehiometrijskom iznosu. Kompleksi ovog tipa uključuju klatrate (lek-domaćin inkluzione komplekse) i ko-kristale. Ovi poslednji su tipično definisani kao kristalni kompleski neutralnih molekulskih konstituenata koji su međusobno povezani ne-kovalentnom interakcijom, ali takođe mogi biti kompleksi neutralnog molekula sa soli.

Takođe su uključeni u okvir pronalaska izotopski označena jedinjenja formule (I), na primer gde su ugrađeni H, H, C, N, O ili drugi izotopi, koja mogu biti pogodna varijacija sintetičkih postupaka opisanih ovde, upotrebom postupaka i reagenasa koji su poznati u tehnici ili njihovim rutinskim modifikacijama.

Kao što je naznačeno, takozvani 'prolekovi'jedinjenja formule (I) spadaju u okvir pronalaska. Neki derivati jedinjenja formule (I), koja sama po sebi mogu da imaju malu ili nikakvu farmakološku aktivnost, mogu, kad se administriraju u ili na telo, da se pretvore ujedinjenja formule (I) koja imaju željenu aktivnost, na primer, hidrolitičkim cepanjem. 'Prolekovi' se odnose na takve derivate. Dodatne informacije o upotrebi prolekova mogu biti nađene u Pro- drugs as Novel Deliverv Svstems, Vol. 14, ACS Svmposium Serues (T. Higuchi and W. Stella) i Bioreversible Carriers in Drug Design, Pergamon Press, 1987 (ed. E. b. Roche, American Pharmaceutical Association).

Neka jedinjenja formule (I) mogu sama da deluju kao prolekovi drugih jedinjenja formule (I).

Konvencionalne tehnike za pripremu i izolaciju pojedinačnih enantiomera uključuju hiralnu sintezu iz pogodnih optički čistih prekursora ili rezoluciju racemata (ili racemata soli ili derivata) upotrebom, na primer, hiralne tečne hromatografije visokog pritiska (HPLC).

Alternativno, racemat (ili racemski prekursor) može da reaguje sa pogodnim optički aktivnim jedinjenjem, na primer, alkoholom, ili, u slučaju gde jedinjenje formule (I) sadrži kiselinsku ili baznu grupu , sa kiselinom ili ili bazom kao što je vinska kiselina ili 1-feniletilamin. Dobijena stereoizomerna smeša se može razdvojiti hromatografijom i/ili frakcionom kristalizacijom ijedan ili oba stereoizomera pretvoriti u odgovarajući čisti enantiomer (enantiomere) na način koji je dobro poznat prosečnom stručnjaku.

Hiralna jedinjenja pronalaska (i njihovi hiralni prekursori) se mogu dobiti u enantiomerno obogaćenom obliku upotrebom hromatografije, tipično HPLC, na asimetričnoj smoli, sa mobilnom fazom koja se sastoji od ugljovodonika, tipično heptana ili heksana a sadrži od 0 do 50% zapr. izopropanola, tipično od 2 do 20%, i može da sadrži od 0 do 5% zapr. alkilamina. Koncentrovanje eluata daje obogaćenu smešu. Apsolutni sastav mobilne faze će zavisiti od izabrane hiralne stacionarne faze (asimetrične smole).

Niže prikazane rute, uključujući one pomenute u Priperima i Pripremama, ilustruju postupke sintetizovanja jedinjenja formule (I). Prosečni stručnjak će razumeti da jedinjenja pronalaska, kao i intermedijeri, mogu biti načinjeni postupcima različitim od onih koji su ovde specifično opisani, na primer adaptacijom ovde opisanih postupaka, na primer postupcima koji su poznati u tehnici. Pogodni priručnici za sintezu, međusobno pretvaranje funkcionalnih grupa, upotrebu zaštitnih grupa itd, su, na primer: "Comprehensive Organic Transformations" od RC Larock, VCH Publishers Inc. (1989); Advanced Organic Chemistrv" od J. March, Wiley lnterscience (1985); "Designing Organic Svnthesis" od S Warren, Wiley lnterscience (1978); Organic Synthesis - The Disconnection Approach" od S Warren, Wiley lnetrscience (1982); "Guidebook to Organic Synthesis" od RK Mackie and DM Smith, Longman (1982); "Protective Groups in Organic Synthesis" od TW Greene and PGM Wuts, John Wiley and Sons, Inc. (1999); i "Protecting Groups" od PJ, Kocienski, Georg Thieme Verlag

(1994); i bilo koja modernizovana verzija pomenutih standardnih dela.

U opštim postupcima sinteze opisanim niže, ukoliko nije drugačije naznačeno, supstituenti R, R<1>, R<2>, X, Y i Het su kao što je gore definisano u vezi sa jedinjenjim formule (I).

Niže pikazane rute ilustruju postupke sintetizovanja jedinjenja formule (I), Prosečni stručnjak će razumeti da drugi postupci mogu biti takođe biti održivi.

Šema 1 ilustruje pripremu jedinjenja formule (I) preko kuplovanja peptida intermedijera (II) i (III), ako je potrebno, dodatkom pogodne baze i/ili aditiva (kao što je 1-hidroksibenzotriazol hidrat ili 4-dimetilaminopiridin).

Upotrebljeni alternativni uslovi uključuju mešanje rastvora piperidina opšte formule (II) i kiseline opšte formule (111) zajedno sa l-(3-dimetilaminopropil)-3-etilkarbodiimid hidrohloridom (EDCI), trietilaminom ili /V-metilmorfolinom i 1-hidroksibenzotriazol hidratom (HOBt) u dimetilformamidu (DMF), tetrahidrofuranu (THF), dihlorometanu (DCM) ili etil acetatu EtOAc) na sobnoj temperaturi. Dodatna alternativna pogodna procedura je mešanje rastvora intermedijarnih jedinjenja opše formule (II) i opšte formule (III) zajedno sa C>-benzotriazolo-l-il-Ar)7V,Af' N'-tetrametiluronijum heksafluorofosfatom (HBTU) ili cikličnim anhidridom 1-propilfosfonske kiseline u CH2CI2ili EtOAc. Bilo koji pogodni inertni rastvrač se može upotrebiti umesto ovih gore pomenutih, pri čemu inertni rastvarač znači rastvarač koji nc sadrži karboksilnu kiselinu ili primarni ili sekundarni amin. Najmanje jedan ekvivalent reagenasa za kuplovanje treba da se upotrebi i može se po želji upotrebiti višak bilo jednog od njih ili od oba.

Prema dodatnoj realizaciji predmetni pronalazak obezbeđuje nova intermedijarna jedinjenja opšte formule (III).

Šema 2 ilustruje alternativnu rutu za pripremu jedinjenja formule (I), koja ima raspon Het grupa, korišćenjem strategije zaštitnih grupa.

PG je pogodna zaštitna grupa azota.

Nova jedinjenja formula (IV), (V) i (VI) su dodatna realizacija pronalaska,

U šemi 2 aminski intermedijer opšte formule (II) i intermedijer zaštićena pirolidinska kiselina opšte formule (IV) su kuplovani upotrebom standardnih metoda kuplovanja peptida kako je ranije opisano u šemi 1 da bi se dobio kuplovani i zaštićeni intermedijer opšte formule (V), iz koga se zaštitna grupa azota može ukloniti korišćenjem stanardnih metoda uklanjanja zaštite da bi s stvorilo jedinjenje opšte formule (VI). Može se upotrebiti bilo koja zaštitna grupa azota (kao što je opisano u "Protecting Groups in Organic Svnhesis" 3<rd>Edition T. W. Greene and P. G Wuts, Wiley lnterscience, 1999). Uobičajene zaštitne grupe azota (PG) pogodne ovde za upotrebu uključujufe/r-butiksikarbonil (/-Boe), koji se lako uklanja tretiranjem kiselinom kao što je trifluorosirćetna kiselina i hlorovodonična u organskom rastvaraču kao stoje dihlorometan ili 1,4-dioksan, i benzil koji se lako uklanja hidrogenacijom u prisustvu pogodnog katalizatora ili tretiranjem sa 1-hloroacetil hloroformatom.

"Het" grupa (gde je "Het" heteroaril grupa) može biti uvedena izmaštanjem pogodne odlazeće grupa, na primer iz heteroaromatičnog prekursora formule "Het-L"

gde je L pogodna odlazeća grupa. Pogodne odlazeće grupe uključuju halogene. U nekim slučajevima, da bi se dobili željeni proizvodi kuplovanja, mogu biti potrebni katalizatori prelazni metali (na pr., paladijum, bakar) po izboru u kombinaciji sa fosfin ligandima kao stoje l,r-binaftalen-2,2'-diilbisdifenilfosfin.

Altenativno, jedinjenja opšte formule (I) koja imaju posebne Het grupe mogu se pretvoriti u druga jedinjenja opšte formule (I) koja imaju različite Het grupe. Na primer: I) Jedinjenja formule (Ia), gde het sadrži pogodnu odlazeću grupu, kao što je metoksi ili hlor, kako je prikazano u šemi 3, mogu se pretvoriti i jedinjenja formule (lb), kako je prikazano u šemi 3, hidrolizom ili pod kiselim ili pod baznim uslovima. Prioritetni su kiseli uslovi, i naročito prioritetno je tretiranje jedinjenja formule (Ia) sa sirćetnom kiselinom na temperaturi refluksa. Alternativno, jedinjenje formule (Ia), gde je L hlor, može da reaguje sa alkoksidom formule Z-O", gde je Z pogodna zaštitna grupa kiseonika, da bi se dobio intermedijer formule (Ia), gde L je OZ. Uklanjanje zaštite zatim daje jedinjenja formule (lb). Na primer, kad je Z = benzil, on može lako biti uklonjen hidrogenacijom u prisustvu pogodnog katalizatora

II) Jedinjenja formule Ic, gde je Het kao što je prikazano u šemi 4 a R<3>je H, mogu biti pretvorena ujedinjenja formule Id gde je R<3>metil ili etil, kako je prikazano u šemi 4, tretiranjem sa bazom i sredstvom za alkiliranje u pogodnom rastvaraču. Pogodne baze uključuju natrijum hidrid, litijum diizopropilamid i natrijum heksametildisilazid, pogodna srestva za alkilovanje uključuju metil jodid, metil tozilat, dimetil sulfat i etil jodid i pogodni rastvarači uključuju tetrahidrofuran, dimetilformamid i N-metil-2-pirolidinon. U reakcionnoj smeši može biti prisutan i aditiv po izboru, kao stoje so litijuma, na primer, litijum bromid. Šema 5 ilustruje rutu za pripremanje intermedijera pirolidinske kiseline opšte formule (IV) iz nezaćenih intermedijera opšte formule (VII):

Pg je pogodna zaštitna grupa azota. PG2 je pogodna zaštitna grupa karboksilne kiseline. Jedinjenja formula (VIII),( IX), (X), (XI) i (XII) su ili komercijalno dostupna ili će biti dobro poznata prosečnom stručnjaku upućivanjem na prethodnu literaturu i/ili ovde date pripreme.

Jedinjenja formule (VII) mogu biti načinjena predominantno kao željenitrans-izomeri Wittig-ovom ili sličnom olefinacijom intemedijera aldehida opšte formule (XI) pogodnim ilidom, na pr., metil(trifenilfosforaniliden)acetatom, ili fosfonatnim anjonom na pr., izvedenim iz de-protonizacije trimetifosfonoacetata.

U literaturi postoje mnogi alternativni postupci za proizvodnju nezasićenih intermedijera upotrebom standardnih postupaka, ili Heck-ovom reakcijom aromatičnog halida (IX) sa pogodnim akrilatnim derivatom (X), kao što je r-butil acetat, u prisustvu katalizatora platine i pogodne baze, kao što je trietilamin.

Dobijeni intermedijer E-olefin opšte formule (VIII) će pretrpeti [3+2]-azometin ilid cikloadiciju reakcijom sa ilid prekursorom opšte formule (XII), da bi se dobio pirolidin sa skoro isključibo/rara'-stereohemijom. Ova reakcija zahteva inertni rastvarač kao što je dihlorometan ili toluen ili tetrahidrofuran i aktivaciju jednim ili više od : (1) katalizatora kiseline, kao što je TFA; (2) desilacionog sredstva kao što je srebro fluorid; (3) zagrevanje.

Jedinjenje opšte formule (XIII) dobijeno iz cikloadicione reakcije je racemat i može zahtevati rezoluciju u svoje konstituente enantiomere, što može biti postignuto preparativnom HPLC upotrebom hiralne stacionarne faze. Alternativno, kiselina intermedijer opšte formule (IV) se može razdvojiti standardnim postupcima (na pr., stvaranjem dijastereoizomernih derivata reakcijom sa enantiomerno čistim reagensom, razdvajanjem dobijenih dijastereoizomera fizičkim postupcima i cepanjem do kiseline

(IV).

Intermedijerna jedinjenja opšte formule (XIII) mogu se pretvoriti u jedinjenja opšte formule (IV) uklanjanjem zaštitne grupe PG<2.>Da bi se postigla ova transformacije dostupni su mnogi postupci (vidi Advanced Organic Chemistrv: Reactions, Mechansms, and Structure, Fourth Edition, March, Jerry, 1992 str 378-383 publikacija Wiley, New York, N. Y. USA). Posebno, za zaštitne grupe labilnih baza, kao što je litijum hidroksid, tretiranje jedinjenja opšte formule (XIII) sa vodenim rastvorom hidroksida alkalnog metala, kao što je litijum hidroksid, natrijum hidroksid ili kalijum hidroksid u pogodnom organskom rastvaraču će dati odgovarajuće jedinjenje opšte formule (IV). Prioritetno, organski ko-rastvarači rastvorljivi u vodi (kao što je 1,4-dioksanili tetrahidrofuran) su takođe korišćeni u takvim reakcijama. Po želji, reakcija se može zagrevati da bi se pomogla hidroliza. Neke zaštitne grupe se lakše hidrolizuju u kiselim uslovima, na pr. terc-butil ili benzhidril estri. Takvi estri se mogu cepati anhidrovanim kiselinama kao što je trifluorosirćetna kiselina ili hlorovodonična u inertnom ogranskom rastvaraču kao stoje dihlorometan.

Nova jedinjenja formule (XIII) su dodatna realizacija pronalaska.

Šema 6 ilustruje alternativnu rutu za pripremu pojedinačnog enantiomera intermedijera pirolidinske kiseline opšte formule (IV) iz nezasićenih intermedijera opšte formule (VII), upotrebom oksazolidinona kao hiralnog pomoćnog sredstva. Kiselina formule (VIII) može biti dobijena skidanjem zaštite sa (VII) i potom pretvaranjem u mešani anhidrid i kuplovanjem u oksazolidinon (gde je R<4>prioritetno fenil,ferobutil, ili izopropil) da bi se dobio intermedijer Formule (XIV). Alternativno, reakcija jedinjenja formule (VII) (na pr. kad je PG2 = OCOt-Bu) sa litijumovom soli oksazolidinona, u pogodnmo rastvaraču (na pr. THF) može dati jedinjenje formule

(XIV).

Jedinjenje formule (XIV) će pretrpeti [3+2]-azometidin ilid cikloadiciju

reakcijom sa jedinjenjem opšte formule (XIII). da bi se dobili dijastereoizomeri (XV) i (XVI) koji se mogu razdvojiti hromatografijom ili kristalizacijom i hidrolizovati da bi se dobio pirolidin formule (IV). Alternativno, jedinjenje opšte formule (XVI) se može petvoriti ujedinjenje opšte formule (XIII), na primer, tretiranjem sa natrijum metoksidom u dimetil karbonatu (kad je PG<2>= OMe).

PG je izabrana od pogodnih zaštitnih grupa azota. PG<2>je uzabrana od pogodnih zaštitnih grupa karboksilne kiseline, i različite grupe se mogu upotrebiti u odnosu na jedinjenja (VII) i (XIII).

Nova jedinjenja formule (XVI) su dodatna realizacija pronalaska.

Šema 7 ilustruje rutu za pripremu intermedijera pirolidin kiseline opšte formule (III) iz intermedijera opšte formule (XIII). Jednom kad je zaštitna grupa PG uklonjena, upotrebom bilo koje konvencionalne tehnike, mogu se uvesti Het grupe pogodnim postupcima koji su gore opisani u šemi 2. Uklanjanje zaštitne grupe kiseline PG<2>, kao stoje opisano u šemi 4, daje zatim kiselinu opšte formule (III).

PG je izabrana od pogodnih zaštitnih grupa azota. PG2 je uzabrana od pogodnih zaštitnih grupa karboksilne kiseline

Nova jedinjenja formula (XVII) i (XVIII) su dodatna realizacija pronalaska.

Kao što je ilustrovano u Šemi 8, piperidin intermedijer opšte formule (II) se može pripremiti adicijom organometalnog nukleofila ketonima opšte formule (XIX) koji sadrže pogodnu zaštitnu grupu azota (PG) da bi se stvorili intermedijeri opšte formule (XIX). Stereohemija adicije je favorizovana tako daje hidroksilna grupa

proizvoda ucispoložaju u odnosu na dve metil grupe. Kontrolisana adicija karbonil sistema kao što je ova opisana je u literaturi (na pr. Journal of Medicinal Chemistrv

(1964), 7(6), str. 726-8). Takva nukleofilna adicija je u opštem slučaju izvedena na niskoj temperaturi u anhidrovanom etarskom ili drugom nepolarnom rastvaraču, upotrebom Grignard-ovog, organolitijuma ili drugog pogodnog organometalnog reagensa. Ovi organometalni reagensi se mogu dobiti izmenom halogen-metal upotrebom pogodnog halid prekursora, R'-Br ili R<*->I i «-butil litijum ili f-butil litijum. Pogodne zaštitne grupe uključuju benzil, koji može biti uklonjen hidrogenacijom, ili Boe, koji može biti uklonjen tretiranjem sa kiselinom kao što je TFA, ili para-metoksibenzil (PMB) koji može biti uklonjen tretiranjem sa DDQ. CAN ili 1-hloroetil hlorormatom, da bi se dobio željeni piperidin intermedijer opšte formule (II). Sa nekim zaštitnim grupama i pod nekim uslovima zaštitne grupe mogu biti labilne pri tretiranju sa organometalnim reagensom, i tako obe transformacije mogu biti izvedene u jednom stupnju, na pr. kad PG = Boe zaštitna grupa može se nekad cepati kad su intermedijeri formule (XIX) tretirani organometalnim reagensom.

PG je izabrana od pogodnih zaštitnih grupa azota.

Prosečni stručnjak će razumeti da, osim zaštitnih grupa azota i kiselina, kao što je ovde ranije diskutovano, u različitim vremenima tokom sinteze jedinjenja formule (I), može biti potrebno da se zaštite dodatne grupe, kao što je, na primer, hidroksi grupa, pogodnim zaštitinim grupama, a zatim da se ona ukloni. Postupci za uklanjanje bilo koje posebne grupe će zavisiti od zaštitne grupe. Za primere metodologije zaštite i uklanjanja zaštite vidi "Protecting Groups in Organic Svnhesis", T. VV. Greene and P. G. M. VVuts. Na primer, gde je hidroksi grupa zaštićena kao metil etar, uslovi ukljanjanja zaštite mogu na primer da sadrže refuksiranje u 48% vodenom rastvoru HBr, ili mešanje sa boran tribromidom u dihlorometanu. Alternativno, gde je hidroksi grupa zaštićena kao benzil etar, uslovi uklanjanja zaštite mogu, na primer, da sadrže hidrogenaciju sa katalizatorom paladijumom u atmosferi vodonika.

Sve gornje reakcije i pripreme novih početnih materijla koji su upotrebljeni u prethodnim postupcima su konvencionalni i odgovarajući reakcioni uslovi za njihovo izvođenje ili pripremu kao i postupci za izdvajanje željenih proizvoda će biti dobro poznati prosečnom stručnjaku upućivanjem na prethodnu literaturu i ovde date Primere i Pripreme.

Farmaceutski prihvatljiva so jedinjenja formule (I) može se lako pripremiti mešanjem zajedno rastvora jedinjenja formule (I) i željene kiseline kako je pogodno. So se može istaložiti iz rastvora i biti sakupljena filtriranjem ili se može ponovo izdvojiti uparavanjem rastvora. Farmaceutski prihvatljive soli jedinjenja formule (I) mogu biti pripremljena na jedan ili više od tri načina:

(I) reagovanjem jedinjenja formule (I) sa željenom kiselinom:

(II) uklanjanjem zaštitne grupe labilne kiseline ili baze iz pogodnog prekursora jedinjenja formule (I) ili otvaranjem prstena pogodnog cikličnog prekursora, na primer, laktona ili laktama, upotrebom željene kiseline; (III) Pretvaranjem jedne soli jedinjenja formule (I) u drugu reakcijom sa odgovarajućom kiselinom ili pomoću pogodne jonoizmanjivačke kolone.

Sve tri reakcije se tipično izvode u rastvoru. Dobijena so se može istaložiti i sakupiti fdtriranjem ili se može ponovo izdvojiti uparavanjem rastvora. Stepen jonizacije dobijene soli može da varira od potpuno jonizovane do skoro nejonizovane.

Jedinjenja formule (I) predmetnog pronalaska imaju upotrebu kao agonisti MCR4 u lečenju različitih stanja bolesti. Prioritetno, pomenuti MCR4 agonisti pokazuju funkcionalnu potenciju na MCR4 receptoru, izraženu kao EC50, manju od 1000 nM, prioritetnije manju od 500 nM, još prioritetnije manje od oko 100 nM i najprioritetnije još manje od oko 50 nM pri čemu merenja pomenute EC50funkcionalne potencije mogu biti izvedena upotrebom Protokola E kako je opisano i Međunarodnoj patentnoj prijavi br WO 2005/077935. Upotrebom ovog postupka, jedinjenja prema predmetnom pronalasku pokazaju funkcionalnu potenciju na MC4 receptoru izraženu kao EC50manju od 100 nM.

Prioritetna jedinjenja pokazuju funkcionalnu potenciju na MCR4 receptoru kao stoje ovde ranije definisano i selektivna su za MCR4 iznad MCR1. Prioritetno pomenuti MCR4 agonisti imaju selektivnost za MCR4 iznad MCR1 pri čemu pomenuti agonisti MCR4 receptora su najmanje oko 10 puta, prioritetno najmanje oko 20 puta, još prioritetnije najmanje oko 30 puta i još prioritetnije najmanje oko 100 puta, najprioritetnije čak najmanje oko 300 puta, još prioritetnije čak najmanje oko 500 puta i specijalno najmanje 1000 puta više funkcionalno selektivni za MCR4 receptor u poređenju sa MCR1 receptorom pri čemu pomenuta određivanja relativne selektivnosti su bazirana na merenjima funkcionalnih potencija MCR1 i MCR4 koja mogu biti izvedena upotrebom ovde opisanih analiza.

Prioritetna jedinjenja pokazuju funkcionalnu potenciju na MCR4 receptoru kao stoje ovde ranije definisano i selektivna su za MCR4 iznad MCR5. Prioritetno, pomenuti MCR4 agonisti imaju selektivnost za MCR4 iznad MCR1 pri čemu pomenuti agonisti MCR4 receptora su najmanje oko 10 puta, prioritetno najmanje oko 30 puta, još prioritetnije najmanje oko 100 puta, još prioritetnije najmanje oko 300 puta, još prioritetnije čak najmanje oko 500 puta i specijalno najmanje 1000 puta više funkcionalno selektivni za MCR4 receptor u poređenju sa MCR5 receptorom pri čemu pomenuta određivanja relativne selektivnosti su bazirana na merenjima funkcionalnih potencija MCR5 i MCR4 koja mogu biti izvedena upotrebom ovde opisanih analiza.

Prioritetno, pomenuti MCR4 agonisti imaju selektivnost za MCR4 iznad MCR1 i MCR3, pri čemu pomenuti agonisti MCR4 receptora su najmanje oko 10 puta, prioritetno najmanje oko 30 puta, još prioritetnije najmanje oko 100 puta i još prioritetnije najmanje oko 300 puta, i još prioritetnije čak najmanje oko 1000 puta više funkcionalno selektivni za MCR4 receptor u poređenju sa MCR1 i MCR3 receptorima.

Prioritetna jedinjenja ovde pokazuzu funkcionalnu potenciju na MCR4 receptoru kako je ovde ranije definisano i selektivna su z MCR4 iznad MCR1 i MCR5. Prioritetno, pomenuti MCR4 agonisti imaju selektivnost za MCR4 iznad MCR1 i MCR5, pri čemu pomenuti agonisti MCR4 receptora su najmanje oko 10 puta, prioritetno najmanje oko 30 puta, još prioritetnije najmanje oko 100 puta i još prioritetnije najmanje oko 300 puta, još rioritetnije najmanje 500 puta, i specijalno čak najmanje oko 1000 puta više funkcionalno selektivni za MCR4 receptor u poređenju sa MCR1 i MCR5 receptorima.

Prioritetno, pomenuti MCR4 agonisti imaju selektivnost za MCR4 iznad MCR3 i MCR5, pri čemu pomenuti agonisti MCR4 receptora su najmanje oko 10 puta, prioritetno najmanje oko 30 puta, još prioritetnije najmanje oko 100 puta i još prioritetnije najmanje oko 300 puta, i još prioritetnije čak najmanje oko 1000 puta više funkcionalno selektivni za MCR4 receptor u poređenju sa MCR3 i MCR5 receptorima.

Kombinovana terapija

Jedinjenja formule (I) i njihove soli, solvati i prolekovi predmetnog pronalaska mogu se korisno isporučivati u kombinaciji sa pomoćnim efektivnim aktivnim sredstvom za lečenje stanja od interesa, kao što je seksualna disfunkcija, poremećaji donjeg urinarnog trakta, gojaznost i/ili dijabetes. Dalje, jedinjenja formule (I) ili njihove soli, solvati ili prolekovi predmetnog pronalaska mogu u nekim slučajevima biti korisno isporučeni u kombinaciji sa pomoćnim efektivnim aktivnim sredstvom za redukciju emeze. Neka pogodna pomoćna aktivna sredstva koja mogu biti upotrebljena u kombinacijama predmetnog pronalaska uključuju: 1) . Jedinjenja koja moduliraju dejstvo natriuretičnih faktora, naročito atrijalnog naturetičkog faktora (takođe poznatog kao atrijalni naturetični peptid), natriuretičke faktore tipa B i tipa C kao što su inhibitori neutralnih endopeptizada i posebno jedinjenja opisana i čija se zaštita traži u WO 02/02513, WO 02/03995, WO 02/079413 i EP-A-1258474, i posebno jedinjenje Primera 22 u WO 02/079413 (2S)-2{[l-{3-4-(hlorofenil)propil]amino}karbonil)-ciklopentil]metil}-4-metoksibuterna kiselina; 2) . Jedinjenje koje inhibira enzim koji pretvara angiotenzin kao što je enalapril, i kombinovani inhibitori ovog enzima i neutralna endopeptidaza kao što je omapatrilat; 3) . Supstrati za NO-sintazu, kao što je L-arginin; 4) . Sredstva za snižavanje holesterola kao što su statini (na pr., atorvastatin/ Lipitor ™) i fibrati; 5) . Modulatori receptora estrogena i/ili agonisti estrogena i/ili antagonisti estrogena, prioritetno raloksifen ili lazofoksifen ((-)-cis-6-fenil-5- [4-(2-pirolidin-l-il-etoksi-fenilj- 5,6,7,8-tetrahidronaftalen-2-ol i njegove farmaceutsku prihvatljive soli čija je priprema detaljno opisana u WO 96/21656; 6) . Inhibitor PDE, posebno inihibitor PDE 2, 3, 4, 5, 7, ili 8, prioritetno inhibitor PDE 2 ili PDE 5, i najprioritetnije inhibitor PDE 5 (vidi ovde kasnije), pri čemu pomenuti inhibitori imaju IC50 prema odgovarajućim enzimima manji od 100 nM (uz uslov da PDE 3 i 4 inhibitori su administrirani samo topikalno ili injekcijom u penis za lečenje erektilne disfunkcije kod muškaraca. 7) . Vazoaktivni intestinalni protein (VIP), mimetički VIP, VIP analog, naročito oni u kojima posreduje jedan ili više podtipova VIP receptora VPAC1, VPAC ili PACAP (peptid koji aktivira adenilatnu ciklazu hipofize), ili jedan ili više agonista VIP receptora ili VIP analoga (na pr., Ro-125-1553) ili VIP fragment, jedan ili više agoniusta a-adrenoceptera sa VIP kombinacijom (na pr., Invicorp, Aviptadil); 8) . Agonist receptora serotonina, antagonist ili modulator, posebno agonisti, antagonisti ili modulatori za 5HT1A (uključujući VML 670 [VVO02/074288J i flibanserin [US2003/0104980]), 5HT2A, 5HT2C, 5HT3 i/ili 5HT6 receptore, uključujući one opisane u WO-09902159, WO- 00002550 i/ili V/O-00028993; 9) . Sredstvo za zamenu testosterona (uključujući dehidroandrostendion), testosteron, (na pr., Tostrelle™, LibiGel™), dihidrotestosteron ili implan testosterona 10) . Selektivni modulatori receptora adrogena, na pr. LGD-2226; 11) . Estrogen, estrogen i medroksiprogesteron ili medroksiprogesteron acetat (MPA) (tj.kao kombinacija), ili estrogen i metil testosteron terapijsko sredstvo za zamenu hormona (na pr., g. HRT specijalno Premarin, Cenestin, Oestrofeminal, Equin, Estrace, Estrofem, Elleste Solo, Estring, Eastraderm TTS, Eastraderm Matrix, Dermestril, Premphase, Preempro, Prempak, Premique, Estratest, Estratest HS, Tibolone); 12) . Modulator transportera za noradrenalin, dopamin i/ili serotonin, kao što je bupropion, GW- 320659; 13) . Agonist ili modulator za oksitocin/vazopresin receptor, pripritetno selektivmi oksitocin agonist ili modulator; 14) . Agonist ili modulator za receptore dopamina, prioritetno D3 ili D4 selektivni agonist ili modulator, na pr. apomorin; i 15) . Antiemetično sredstvo, napr., 5-HT3 antagonist ili neurokinin-1 (NK-1) antagonist. Pogodni 5-HT3 antagonistsi uključuju, bez ograničenja, granisetron, ondansetron, tropisetron, ramosetron, palonsetron, indisetron, dolasetron, alosetron and azasetron. Pogodni NK-1 antagonisti uključuju, bez ograničenja, aprepitant, casopitant, ezlopitant, cilapitant, netupitant, vestipitant, vofopitant i 2-(R)-(l-(R)-3,5-bis(trifluorometil)fenil)etoksi-4- (5-(dimetilamino)metil-l,2,3-triazol-4-ill)metil-3-(S)-(4-fluorofenil)morfolin. Vidi, na primer, Međunarodnu patentnu prijavu br. WO2006/049933. Sa posebnom preporukom za upotrebu jedinjenja pronalaska za lečenje disfunkcije donjeg urinarnog trakta, kombinacije sa drugim sredstvima mogu da uključuju, bez ograničenja, • Antagonist receptora inuskarinskog acetilholina kao stoje tolterodin; • Antagonist alfa adrenergičnog receptora, posebno antagonist alfa 1 adrenergičnog receptora ili antagonist alfa 2 adrenergičnog receptora; • Agonist alfa adrenergičnog receptora ili parcijalni agonist, posebnoalpha 1 agonist adrenergičnog receptora 0 ili parcijalni agonist, ili agonist alfa 2 adrenergičnog receptora ili parcijalni agonist; • 5HT2C agonist (vidi WO 2004/096196); • Inhibitor ponovne apsorpcije i asimilacije serotonina and noradrenalina (SNRI); • Inhibitor ponovne apsorpcije i asimilacije noradrenalina (NRI) kao što je reboksetin, bilo u svom racemskom ili (S,S)-enantiomernom obliku • Antagonist receptora vaniloida (VR), kao što je kapsaicin; • Alfa 2 delta ligand, kao što je gabapentin ili pregabalin; • Agonist beta 3 adrenergičnog receptora; • Antagonist 5HT1 receptora ili inverzni agonist 5HT1 receptora;

• Antagonist prostanoid receptora, na pr., antagonist EP1 receptora

Što se tiče upotrebe jedinjenja formule (I) u lečenju gojaznosti i srodnih poremećaja, jedinjenja mogu takođe biti korisna zajedno sa drugim sredstvima protiv gojaznosti. Kao pogodna sredstva protiv gojaznosti uključeni su antagonisti receptora kanabinoida 1 (CB-1) (kao što je rimonabant), inhibitori apoilpoproteina-B, proteina transfera sekrecijskih/mikrozomalnih triglicerida (apo-B/MTP) (posebno, gut-selektivni MTP inhibitori, kao što su edipatapid ili dirlotapid), inhibitori 1 l(3.steroid gihidrogenaze -1,(11B-HSD tip 1), peptid YY3.36i njegovi analozi, agonisti holecistokinina-A (CCK-A), inhibitori ponovne apsorpcije i asimilacije monoamina (kao što je sibutramin), simpatomimetička sredstva, agonisti B3 adrenergičnog receptora, agonisti receptora dopamina (kao što je bromokriptin; analozi receptora hormona koji stumuliše melanocit, agonisti receptora 5HT2c, antagonisti hormona koji koncentriše melanin, leptin (OB protein), analozi leptina, agonisti receptora leptina, antagonisti galanina, inhibitori lipaze (kao što je tetrahidrolipstatin, tj., orlistat), anoretička sredstva (kao stoje agonist bombezina), antagonisti Neuropeptid-Y receptora (posebno, antagonisti receptora NPY-5), tiromimetička sredstva, dehidroepiandrosten ili njegov analog, agonisti ili antagonisti receptora glukokortikoida, antagonisti receptora oreksina, agonisti receptora peptida 1 sličnog glukagonu, cilijarni neurotrofni faktori (kao što je Axokine<IM>dostupan od Regeneron Pharmaceuticals, Inc., Tarrytown, NY i Procter & Gamble Company, Cininnati, OH), inhibitori humanog aguti-srodnog proteina, antagonisti receptora grelina, antagonisti receptora histamina 3 ili inverzni agonisti, agonisti receptora neuromedina U i slični. Druga sredstva protiv gojaznosti, uključujući prioritetna sredstva koja su ovde izložena, dobro su poznata, ili će prosečnom stručnjaku biti očigledna u svetlu predmetnog otkrića. Jedinjenja predmetnog pronalaska mogu takođe biti administrirana

u kombinaciji sa jedinjenjima koja se javljaju u prirodi i deluju na snižavanje nivoa holesterola u plazmi. Takva jedinjenja koja se javljaju u prirodi se obično nazivaju nulraceutikali i uključuju, na primer, ekstrakt belog luka, ekstrakte buljkeHoodiai niacin. Naročito prioritetna sredstva protiv gojaznosti su izabrana iz grupe koja se sastoji od CB-1 antagonista, gut-selektivnih MTP inhibitora, orlistata, sibutramina, bromokriptina, efedrina, leptina, peptida YY3.36 i njiegovih analoga, i pseudoefedrina. Prioritetno, jedinjenja predmetnog pronalaska i kombinovane terapije za lečenje gojaznosti i srodnih stanja su administrirana povezano sa vežbama i razumnom dijetom. Prioritetni CB-1 antagonisti uključuju Rimonabant (SR141716A takođe poznat pod trgovačkim nazivom Acompli ™ dostupan od Sanofi-Svnthelabo) opisan u U.S.Patentu No 5,624,941; i jedinjenja opisana u .U.S. Patentima No. 5,747,524, 6,432,984 i 6,518,264; U.S. Patent Publikacijama No. US2004/0092520, US2004/0157839, US2004/0214855, i US2004/0214838; U.S. Patentna prijava Serijal No. 10/971599 predata 22 oktobra 2004; i PCT Patentne Publickacije No. WO 02/076949, WO 03/075660, WO04/048317, WO 04/013120, i WO 04/012671. Prioritetni gut-selektivni MTP inhibitori uključuju dirlotapid opisan u U.S. Patentu No. 6,720,351; 4-(4-(4-(4-((2-((4-metil-4H-l,2,4-triazol-3- iltio)metil)-2-(4-hlorofenil)-l ,3-dioksolan-4-il)metoksi)fenil)piperazin-l-il)fenil)-2-sek-butil-2H- 1,2,4-triazol-3(4H)-on (R103757) opisan u U.S. Patentima No. 5,521,186 i 5,929,075; i implitapid (BAY 13-9952) opsan u U.S. Patentu No. 6,265,431. Druga reprezentativna sredstva protiv gojaznosti za upotrebu u kombinacijama, farmaceutskim kompozicijama i postupcima pronalaska, mogu se pripremiti upotrebom postupaka koji su dobro poznati prosečnom stručnjaku, na primer, sibutramin može biti pripremljen kao što je opisano u U.S. Pat. No. 4,929,629; bromocriptin može biti pripremljen kao što je opisano u U.S. Pat. No. 3,752,814 i 3,752,888; orlistat može biti pripremljen kao što je opisano u U.S. Pat. No. 5,274,143; 5,420,305; 5,540,917; i 5,643,874; i PYY3.36 (uključujući analoge) može biti pripremljen kao što je opisano u U.S. Publikaciji No. 2002/0141985 i WO 03/027637.

Jedna prioritetna grupa ovde je kombinacija jedinjenja predmetnog pronalaska i jednog ili više dodatnih terapeutskih sredstava odabranih od: inhibitora PDE5; inhibitora NEP; D3 ili D4 selektivnih agonista ili modulatora; modulatora receptora estrogena i/ili agonista estrogena i/ili antagonista estrogena; sredstava za zamenu testosterona, testosterona ili implanta testosterona, estrogena, estrogena i medroksiprogesterona ili medroksiprogesteron acetata (MPA), ili estrogena i metiltestosterona terapijskog sredstva za zamenu hormona.

Prioritetne kombinacije za lečenje MED su kombinacije jedinjenja predmetnog pronalaska i jednog ili više PDE5 inhibitora i/ili NEP inhibitora.

Prioritetne kombinacije za lečenje FSD su kombinacije jedinjenja predmetnog pronalaska i jednog ili više PDE5 inhibitora i/ili NEP inhibitora, i/ili modulatora receptora estrogena, agonista estrogena, antagonista estrogena; sredstava za zamenu testosterona, testosterona, implanta testosterona, estrogena, estrogena i medroksiprogesterona ili medroksiprogesteron acetata (MPA), estrogena i metiltestosterona terapijskog sredstva za zamenu hormona. Naročito prioritetni PDE5 inhibitori za zakve kombinovane proizvode za lečenje MED ili FSD su 5-[2-etoksi-5-(4-metil-l-piperazinilsulfonil)fenil]-l-metil-3-n-propil-l ,6-dihidro-7H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7-on (sildenafil, posebno prisutan kao so limunske kiseline); (6R, 12aR)-2,3,6,7,12,12a-heksahidro-2-metil-6-(3,4-metilenedioksieniI)-pirazino[2',l':6,l]pirido[3,4-b]indol-l,4-dion (IC-351 ili tadalafil);

2- [2-etoksi-5- (4-etil-piperazin-l-il-l-sulfonil)-fenl]-5-metil-7-propil-3H-imidazo[5,l-tj[ 1,2,4]triazin-4-one (vardenafd);

5-(5-acetil-2-butoksi-3-piridinil)-3-etil-2-(l -etil-3-azetidinil)-2,6- dihidro-7H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7-on;

5-(5-acetil-2-propoksi-3-piridinil)-3-etil-2-(l-izopropil-3- azetidinil)-2,6-dihidro-7H-pirazolo[4,3-djpirimidin-7-on;

5-[2-etoksi-5-(4-etilpiperazin-l- ilsulfonil)piridin-3-il]-3-etil-2-[2-metoksietilj-2,6-dihidro-7H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7-on;

4-[(3- hloro-4-metoksibenzil)amino]-2-[(2S)-2-(hidroksimetil)pirolidin-l-il]-N-(pirimidin-2- ilmetil)pirimidin-5-karboksamid (TA-1790);

3- (l -metil-7-okso-3-propil-6,7-dihidro-lH- pirazolo[4,3- d]pirimidin-5-il)-N- [2-(l-metilpirolidin-2-il)etil]-4- propoksibenzensulfonamid (DA 8159) i njihove farmaceutski prihvatljive soli.

Naročito prioriteta NEP inhibitori za takve kombinovane proizvode za lečenje MED i FSD su jedinjenja čiji su pimeri dati i WO 02/079142.

Pod upućivanjem na podatke na drugim mestimami za jedinjenja koja se nalaze u patentima ili patentnim pijavama a koja se mogu koristiti u saglasnosti sa pronalaskom, mi imamo na umu terapeutski aktivna jedinjenja kao što su definisana u zahtevima (naročito u zahtevu 1) i specifične primere (koji su svi ovde inkorporirani kao referenca).

Ako se administrira kombinacija aktivnih sredstava, tada se ona mogu administrirati istovremeno, odvojeno ili sekvencijalno, u formulacijama koje mogu biti iste ili različite.

Biološke analize

Aktivnosti agonista melanokortin receptora: selektivnost

Merenjain vitroagonističke potencije ( ECjo) iedinienja premareceptoru

melanokortin tipa 1 i 3 ( MCI i MC3)

Aktivacija receptora melanokortina (MC) agonistima dovodi do aktivacije intracelularnog enzima adenilat ciklaze koji sintetiše molekul signalnog sekundarnog mesindžera, adenozin 3',5'-cikločni monofosfat. Merene su promene u cAMP nivoima koje prate tretiranje rekombinantnih MCI i MC3 ćelijskih linija test jedinjenjima i procena MCI i MC3 potencije EC50 izračunata kako sledi: Humane embrionalne ćelijske linije bubrega (HEK) ili jajne ćelijske linije kineskog hrčka stabilno transfektovane sa kompletnom cDNK koja kodira humane MCI i MC3 receptore, ustanovljene su standardnim postupcima molekularne biologije. Test jedinjenja su rastvorena u dimetil sulfoksidu (DMSO) pri 4 mM. 11 tačaka serije test jedinjenja pri povećanju razblaženja u polu-log jedinicama, tipično počev od 50 uM je pripremljeno u puferu koji se sastoji od fosfatne puferovane solane (PBS), 2.5% DMSO i 0.05% pluronic F-127 površinski aktivne materije. Kultura svežih ćelija pri 80-90%o confluencije je pokupljena i ponovo suspendovana uDubecco' s Modified Eagle' s Medium(DMEM). Ćelije (10 000 za MC3, 20 000 za MCI) su dodane razblaženim serijama test jedinjenja u 384 ćelijske ploče za analizu i inkubirane 1 sat na 37 °C. Relativne cAMP koncentracije u svakoj ćeliji su tada merene upotrebom komplementacione metode fragmenta enzima P-galaktoze kupljene u obliku pribora kao Discoverx cAMP II pribor od GE Ilealtcare / Amersham Biosciences UK. U slučaju MCI, 3-izobutil-l-metilksantin (IBMX) pri koncentraciji od 750 uM je uključen u DMEM kad su ćelije ponovo suspendovane za analizu. Fluorescencija svake od ćelija analize je pretvorena u procenat efekta u odnosu na maksimum kontrolnih ćelija koje odgovaraju koncentraciji hormona koji stimuliše alfa melanocit koja pokazuje maksimalni efekat. Sigmoidalne krive su fitovane u dijagram logiokoncentracije inhibitora prema procentu efekta korišćenjem domaćeg kompjuterskog programa primene nazvan SIGHTS i procene EC50određene programom kao koncentracija test jedinjenja koja daje efekat na pola puta između gornje i donje asimptote sigmoidalne krive odgovora. Svaki eksperiment je uključio određivanje EC50za alfa hormon koji stimuliše melanocit, a koji je upotrebljen kao standard da odredi konsistenciju analize i omogući pošteno upoređenje procena EC50dobijenih u različitim eksperimentima.

Aktivnost MC5 i MC50 je određena kao što je opisano u protokolima analize D i E, u US2005/0176772 (strane 28 - 30).

Inhibicija MC4 receptora pomoću Nie4, D- Phe7- a- MSH

Nie4, D-Phe7-a-MSH je stabilni analog hormona koji stimuliše melanocit (MSH), koji je agonist MC4 receptora (MC4R). Sposobnost jedinjenja da inhibiraju vezivanje Nie4, D-Phe7-a-MSH za membrane ćelija koje ekspresuju MCR4 može biti određena upotrebom analize konkurentnog vezivanjaversus[<12:>TJ Nie4, D-Phe7-a-MSH.

Ćelije koje ekspresuju MC4R su homogenizovane i fragment membrane izolovan diferencijalnim centrifugiranjem. CHO CRE MC4R ćelijske membrane su kuplovane za PVT/PEI/V/GA SPA perle tip A tokom 2 sata, centrifugirane na 1000 RPM 5 min. i suspendovane u koncentraciju od 300 ug perli/ml (0.15 ug membrane, 15 ug perli po ćeliji). Smeša membrana/perle je inkubirana sa 0.06 nM [,<25>I] Nie4, D-Phe7-a-MSH i llpolu-log koncentracijama konkurentnog liganda, u duplikatu, u ukupnoj zapremini od 50 u.1 pufera po ćeliji (25 mM HEPES, 1 mM MgCb, 2.5 mM CaCb, 1% Pluronic F68, 1 komplet EDTA inhibitora proteaze tableta/50 ml pH 7). Nespecfično vezivanje je određeno inkluzijom 100 nM SHU9119. Reakcija je započeta dodatkom smeše perle/membrana i ploče inkubirane na sobnoj temperaturi tokom 12 h (prvi sat na orbitalnoj mućkalici), posle čega je prisutna količina radioaktivnosti određena upotrebom Wallac brojača ploče, Ki vrednosti su određene analizom podataka upotrebom odgovarajućeg kompjuterskog programa.

Prioritetno, jedinjenja predmetnog pronalaska pokazuju konstantu vezivanja na MC4 receptoru izraženu kao Ki vrednost nasuprot Nie4, D-Phe7-a-MSH manju od oko 1000 nM, prioritetnije manju od 800 nM, još peferentnije manje od oko 100 nM i joše preferentnije čak manje od oko 30 nM, pri čemu su date Ki vrednosti određene upotrebom gore opisane metode.

Inhibicija MC4 receptora pomoću Nie4, D- Phe7- a- MSH

Nic4, D-Phe7-a-MSH je stabilni analog hormona koji stimuliše melanocit (MSH), koji je agonist MC3 receptora (MC3R). Sposobnost jedinjenja da inhibiraju vezivanje Nie4, D-Phe7-a-MSH za membrane ćelija koje ekspresuju MC3R može biti određena upotrebom analize konkurentnog vezivanjaversus[<125>Ij Nie4, D-Phe7-oc-MSH.

Ćelije koje ekspresuju MC3R su homogenizovane i fragment membrane izolovan diferencijalnim centrifugiranjem. CHO CRE MC3R ćelijske membrane su kuplovane za PVT/PEI/VVGA SPA perle tip A tokom 2 sata, centrifugirane na 1000 RPM 5 min. i suspendovane u koncentraciju od 800 ug perli/ml (1.2 ug membrane, 40 ug perli po ćeliji). Smeša membrana/perle je inkubirana sa 0.06 nM [l2:>I] Nie4, D-Phe7-a-MSH i i 11 polu-log koncentracijama konkurentnog liganda, u duplikatu, u ukupnoj zapremini od 50 ul pufera po ćeliji (25 mM HEPES, 1 mM MgCl2, 2.5 mM CaCl2, 1% Pluronic F68, 1 komplet EDTA inhibitora proteaze tableta/50 ml pH 7). Nespecfično vezivanje je određeno inkluzijom 100 nM SHU9119. Reakcija je započeta dodatkom smeše perle/membrana i ploče inkubirane na sobnoj temperaturi tokom 12 h (prvi sat na orbitalnoj mućkalici), posle čega je prisutna količina radioaktivnosti određena upotrebom Wallac brojača ploče, Ki vrednosti su određene analizom podataka upotrebom odgovarajućeg programa.

Velika gustina međusobnih interakcija lekova ( Drug- drig- interaction, DDI) pretragom

pomoću 3 uM koktela

Interakcija leka je situacija u kojoj supstanca utiče na aktivnost drugog leka, na pr. efekti mogu biti povećani ili smanjeni, ili zajedno proizvode novi efekat koji nijedan od njih sam ne proizvodi. Interakcija leka može biti rezultat različitih procesa ali relativno uobičajen je onaj gde jedan lek utiče na farmakokinetiku drugog inhibiranjem citohroma P450 koji ga metaboliše. Zbog važnosti ovog fenomena, određivanje DDI potencija novih hemijskih entiteta (NCEs) se smatra važnim u ranom procesu otkrivanja leka.

Pretraga DDI koktelom u mikrozomu humane jetre (HLM) je izvedena na potpuno automatizovani način i namena pretrage je da da single point određivanja DDI potencijala novog hemijskog entiteta (NCE, testiran na 3 uM) nasuprot 4 primarna enzima citohroma 450, 1A2, 2D6, 2C9 i 3A4.

Koktel supstrata za P450 DDI koristi humane mikrozome jetre zajedno sa izoformno-specifičnim kliničkim ispitivanjem leka i omogućava simultano merenje inhibicije aktivnosti P450 1A2, 2D6, 2C9 i 3A4 u jednoj inkubaciji. Ovo je izvedeno u "high throughput" tehnici sa simultanom detekcijom metabolita sa LC-MS/MS. Ova metoda je pažljivo testirana i procenjena upotrebom standardnih jedinjenja . Upotrebljeni probni supstrati su dati u sledećoj tabeli.

Pojava metabolita u svakom supstratu je merena tokom vremena u prisustvu i odsustvu NCE (test jedinjenje/inhibitor) na koncentraciji od 3 uM. Inibitorski potencijal jedinjenja je određen kao procentna vrednost i interpretirana upotrebom šeme koja sledi. Ovi podaci su tada upotrebljeni zajedno sa drugim merenjima da bi se odredila pogodnost NCEs i pomogne dizajn i napredak leka.

Inhibiciia AGRP

Aguti protein (AGRP) je endogeni antagonist /univerzni agonist visokog afiniteta za MC4 receptor (Liu et al., 1994,Nature371: 799-802, Oliman et al.,Science278: 135-138). Nivoi AGPR su regulisani uzdržavanjem odjela (Mizuno & Mobs,Endocrinology,140: 4551-4557) pa je prema tome važno odrediti sposobnost sredstava protiv gojaznosti koji deluju preko MC4 receptora da inhibiraju vezivanje AGRP. Utvrđeno je da ovaj C-terminalni fragment AGRP sadrži deteminante vezivanja MC4R (Yang et al.,1999, Mol. Endocrinol.13; 148-155), prema tome, sposobnost jedinjenja da inhibraju vezivanje AGPR za membrane iz ćelija koje ekspresuju MCC4R može se odrediti upotrebom analize konkurentnog vezivanjaversus[ 1 25I]AGRP(87-132). U tu svrhu ćelije koje ekspresuju MC4R su podvrgnute homogenizaciji i fragment membrane izolovan diferencijalnim centrifugiranjem. CHO CRE MC4R ćelijske membrane (12 ug) su inkubirane sa 0.03 nM [<125>I] AGRP(87-132) i 11 polu log koncentracijama konkurentnog liganda, u duplikatu, u ukupnoj zapremini od 100 ul pufera po ćeliji (25 mM HEPES, 1 mM MgCb, 2.5 mM CaCb, 0.5%BSA pH 7). Nespecfično vezivanje je određeno inkluzijom 1 uM SHU9119. Reakcija je započeta dodatkom smeše membrana i ploče inkubirane na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Reakcija je završena brzim filtriganjem na GF/C filtrima (prethodno namočenimu 1% PEI) koristeći vakumski sakupljač, posle čega je isprano 5 puta sa 200 ul ledeno hladnog pufera za ispitanje (pufer za vezivanje koji sadrži 500 mM NaCl). Filtri su potopljeni u 50 ul scintilacione tečnosti i prisutna količina radioaktivnosti određena upotrebom brojača. Ki vrednosti su određene analizom podataka upotrebom odgovarajućeg kompjuterskog programa.

Prioritetno, jedinjenja predmetnog pronalaska pokazuju konstantu vezivanja na MC4 receptoru izraženu kao Ki vrednost prema AGRP manju od oko 1000 nM, prioritetnije manju od 500 nM, još preferentnije manju od oko 100 nM i još preferentnije čak manju od oko 50 nM, pri čemu su date Ki vrednosti određene upotrebom gore opisane metode. Upotrebom ove metode, jedinjenja prema ovom pronalasku pokazuju konstantu vezivanja na MC4 receptoru izraženu kao Ki vrednost prema AGPR manju od 1000 nM.

Ispitiivanje unošenja hrane: da bi se odredila efikasnost MC4 agonista na unošenje hrane i telesnu težinu kod mužjaka pacova tokom perioda od 42 sata

Pacovi su aklimatizovani u istom stambanom prostoru i reverznim uslovima osvetljenja (9.30 pre podne - 9.30 po podne) tokom približno dve nedelje pre početka ispitivanja. Pacovi će biti aklimatizovani u Technical Scientific Equipment<*>(TSE) kavezima približno 24 sata pre dana ispitivanja. Pacovi će biti nasumice raspoređeni u grupe za tretiranje ujutro ispitivanja na osnovu njihove težine (n = 5 po tretiranju). Svaki pacov će dobiti ili MC4 agonist ili nosač oralno upravo pre nego što se svetio ugasi. Posle doziranja pacovi će biti odmah vraćeni u RSE kavez i unošenje hrane i upotreba vode praćeni tokom postupka ispitivanja (24 sata). Aktivnost kretanja će takođe biti praćena u obliku presecanja svetlosnog snopa.

Na kraju ispitivanja pacovi će biti ubijeni gubitkom krvi pod smrtonosnom anestezijom izofuranom. Krv će biti uklonjena iz pacova kardijačnom punkturom i analizirana na nivoe koncentracije leka i biomarkere.

Podaci su izraženi kao srednja ± SEM i poređenje između kontrole i tretmana je analizirano sa ANOVA. Statističko značenje je prihvaćeno na nivou p < 0.05.

Određivanjein vitrometabolizma pacova ( analiza humanog mikrozoma jetre ( HLM) ;

mikrozoma jetre pacova ( RLM))

Mnogi lekovi su metabolizovani sistemom mono-oksogenaze citohroma P450. Ovaj enzim je nađen u visokoj koncentraciji u jetri i vezanje za endoplazmatski retikulum hepatocita. Sistem enzima može biti dobijen u polu-prečišćenom stanju pripremom jetrenih mikrozomalnih frakcija. Određivanje polu-života jedinjenjain vitrou takvim sistemima daje koristan indikator metaboličke stabilnosti.

Materijali i reagensi

Svi reagensi su ANALAR stepena.

1. 200 mM Fosfatni pufer (Sigma) - 100 ml IM fosfatnog pufera pH 7.4 rastvoreno u 400 ml MilliQ vode. Ako je potrebno, pH treba da bude podešen sa koncentrovanom ortofosfornom kiselinom do pH 4.7, napravljeno mesečno i čuvano u frižideru (2-8 C). 2. 0.01 M MgCl2.6H20 (BDH) - 2.032 g rastvoreno u 100 ml MilliO vode, i čuvano u frižideru (2-8 C). 3. 0.02 M NADP (Sigma) - 15.3 mg rastvoreno u 1000 ml MilliQ vode - i zatim čuvano u frižideru (2 - 8 C) do dalje upotrebe. 4. 0.1 M D-L izolimunska kiselina (Sigma) - 129 mg rastvoreno u 5 ml MilliQ vode - i zatim čuvano u frižideru (2 - 8 C) dod dalje upotrebe.

5. Izolimunska dehidrogenaza, Tip IV (Sigma) - čuvano u frižideru (2-8 C).

6. Matični rastvor supstrata (približno 1 mg/ml) u organskim rastvaračima koji se mogu mešati kao stoje metanol, etanol ili voda, čuvano u frižideru (2-8 C). 7. 50 mM p-Nitroanizol (PNA) (Aldrich) - 7.65 mg rastvoreno u 1 ml metanola, i čuvano u frižideru (2 - 8 C) dok nije spremno za upotrebu. 8. 50 uM p-Nitrofenol (PNP) (Sigma) - 0.69 g rastvoreno u 100 ml vode i čuvano u frižideru (2-8 C). 9. 20% Trihlorosirćetna kiselina (TCA) (BDH) - 20 g rastvoreno u 100 ml Milliq vode, napravljeno u staklenoj posudi boje ćilibara i čuvano na sobnoj temperaturi. 10. 10 M Natrijum hidroksid (BDH) - 40 g rastvoreno u 100 ml mMilliQ vode (mora se obratiti pažnja kad se pravi ovaj rastvor jer je reakcija izotermna), napravljeno u staklenoj posudi otpornoj na lomljenje ("safebreak") i čuvano na sobnoj temperaturi. 11. Jetreni ili Supermix mikrozomi čuvani na -80 C treba da budu odmrznuiti neposredo pre upotrebe, čuvani na ledu i deljeni.

12. MilliQ voda

13. Termostatski kontrolisano vodeno kupatilo sa mućkanjem podešeno da obezbedi temperaturu inkubacije od pribl. 37 °C. 14. Reagens za završetak inkubacije (tipično organski rastvarač, kiselina ili baza).

Metotodologija zain vitroodređivanje kod pacova upotrebom jetrenih & Supermix

mikrozoma

Postupak koji je niže ukratko izložen odnosi se na inkubacionu zapreminu od 1.5 ml.

1. Sledeća smeša je pipremljena u epruveti za testiranje:

• Ova zapremina je izračunata za svaku novu šaržu.

na pr. Koncentracija proteina = 18 mg/ml

Aktivnost enzima = 3.3 jedinice /mg

prema tome specifična aktivnost = 3.3x18 jedinica/ml = 59 jedinica/ml.

2. Odmrznuti mikorozome na sobnoj temperaturi i dodati dovoljno mikrozoma da se dobije krajnja koncentracija od 0.5 mola citohroma P450/ml inkubacije, na pr., za 1.6 ml inkubacije, zabremina mikrozoma koja će biti dodana je: 3. Dodati dovoljno MilliQ vode da bi se dobila ukupna inkibaciopna zapremina od 1.425 ml. 4. Uzeti 237.5 ul inkubacione smeše i staviti u epruvetu za testiranje za pozitivnu PNA kontrolu. Dodati 2.5 ul PNA rastvora, snažno promšano na mehaničkoj mešalici( eng\. whirlmix),i staviti epruvetu u stalak u termostatski

kontrolisanom vodenom kupatilu sa mućkanjem.

5. Uzeti 100 ul za kontrolu bez supstrata i staviti u epruvetu za testiranje. Staviti epruvetu u stalak u termostatski kontrolisanom vodenom kupatilu sa

mućkanjem.

6. Dodati supstrat inkubaciji. Substrat treba da bude na početnoj koncentraciji od

1 uM. Zapremina supstrata koja je potrebna za ostatak od 1.162.5.ml inkubacije je izračunata kako sledi:

N.B. Ukupna zapremina dodanog organskog rastvarača ne treba da prelazi 0.1% ukupne inkubacione zapremine. 7. Uzeti 100 ul inkubacione smeše u epruvetu za testiranje za kontrolu bez kofaktora. Snažno promešano na mehaničkoj mešalici( whirlmix)i staviti u stalak u termostatski kontrolisanom vodenom kupatilu sa mućkanjem. 8. Pre-inkibirati epruvetu koja sadrži inkibacionu smešu, takođe i epruvetu sa pozitivnom kontrolom i epruvetu bez kofaktora i staviti u stalak u termostatski kontrolisanom vodenom kupatilu sa mućkanjem. 9. Dodati NADP da bi se započela reakcija (75 ul u svaku od 1.162.5 ml inkubacione smeše, 12.5 ul u epruvetu sa pozitivnom kontrolom i 5 u.1 u peruvetu bez supstrata) i odmah zapisati prvu vremensku tačku. Epruvete sa TNA pozitivnom kontrolom, kontrolom bez kofaktora i bez supstrata su inkubirane tokom ukupnog inkbacionog vremena. 10. Uzeti 100 ul alikvota sa do 9 različitih tačaka uzimanja uzoraka od 0 do 60 min (obično 0, 3, 5, 10, 15, 20, 30, 45 & 60 min) i prekinuti reakciju. Mogu se upotrebiti duža vremena inkubacije, ali posle 120 min mikrozomi se kvare. Reakcija može biti prekinuta dodatkom organskog rastvarača, kiseline ili baze. Na kraju inkubacionog procesa kontrole bez kofaktora i bez supstrata prekinuti na sličan način, tj. prekinuti istim reagensom.

11. Procedura pozitivne kontrole PNA

Pošto su uzeti krajnji uzorci, uzeti pozitivnu kontrolu i dodati 1 ml 20% TCA u ovu epruvetu. Takođe pripremiti epruvetu koja sadrži 250 pl PNP standarda na 50 uM, i dodati 1 ml 20% TCA.Whirlmixobe epruvete i ostaviti približno 5

min da se omogući taloženje proteina.

Centrifugirati obe epruvete tokom približno 5 min na instrumentu postavljenom na 3500 rpm. Uzeti 1 ml supernatanta i staviti u čiste epruvete, ostarak odbaciti. Dodati 1 ml 10 M NaOH supernatantu,whirlmix,i ostaviti da stoji pribl. 5 min. Očistiti spektrofotometar destilovanom vodom na 400 nm i zatim meriti

apsorbancu PNP standarda u odnosu na destilovanu vodu. Aktivnost mikrozomalne 4-nitroanizol O-demetilaze je računata kako sledi

Izračunavanje rezultata

Vrednost aktivnosti iz inkubacije MORA biti jednaka ili veća od 85% srednje vrednosti šarže upotrebljene za inkubaciju da bi bila valjana. Ako ovak kriterijum nije zadovoljen, inkubacija mora biti ponovljena. 12. Analizirati uzorke (uključujući kontrole bez kofaktora i bez supstrata) specifičnom analizom za supstrat da bi se odredila kinetika nestajanja.

Analiza podataka

Podaci dobijeni gore opisanom procedurom se mogu kvantificirati pomoćuin vitrosupstrata unutrašnjeg klirinsa (Clint). Uz uslov daje koncentracija supstrata ispod Km, metabolizam treba da bude prvog reda dajući log-linerani dijagram nestajanja supstrata sa vremenom.

In vitropoluživot supstrata može biti odeređen grafičkim prikazom prirodnog logaritma (ln) mere relativne koncentracije supstrata (na pr., odnos lek/unutrašnji standard) u odnosu na vreme i fitovanjem linije koja najbolje odgovara tim podacima. Gradijent ove linije je konstanta brzine orvog reda (k) za nestajanje supstrata i određena je regresionom analizom. Ova konstanta brzine se može pretvoiti u poluživot prema sledećoj jednačini:

Alternativno, konstanta brzine se može pretvoriti u unutrašnji klirens (Clint) prema sledećoj jednačini: Clint (ul/min/mg) = (k/koncentracija proteina u inkubaciji (mg/ml))<*>1000

Prioritetno, jedinjenja predmetnog pronalaska pokazuju klirens, kako je određeno gornjom analizom, izraženu kao vrednost manju od oko 200 ul/min/mg, prioritetnije manju od 100 ul/min/mg, još prioritetnije manju od oko 50 ul/min/mg i naprioritetnije još manju od oko 20 ul/min/mg. Upotrebom ove analize, jedinjenja prema predmetnom pronalasku koja su testirana pokazuju klirens manji od 200 ul/min/mg.

Postupci administracije

Jedinjenja pronalaska namenjena za farmaceutsku upotrebu mogu se administrirati kao kristalni ili amorfni proizvodi. Ona mogu biti dobijena, na primer, kao čvrsti kolači (čepovi), prahovi, ili filmovi, metodama kao što su taloženje, kristalizacija, sušenje zamrzavanjem, sušenje raspršivanjem ili sušenje isparavanjem. Sušenje mikrotalasnim ili radio frekvencijama se može koristiti za ove svrhe.

Jedinjenja pronalaska mogu biti administrirana sama ili u kombinaciji sa jednim ili više drugih jedinjenja pronalaska ili u kombinaciji sa jednim ili više lekova (ili kao bilo kakva njihova kombinacija). U opštem slučaju, ona će biti administrirana kao formulacija zajedno sa jednim ili više farmaceutski prihvatljivih ekscipijenata. Izraz 'ekscipijent' se ovde upotrebljava da opiše bilo koji sastojak koji nije jedinjenje (ili jedinjenja) pronalaska. Izbor ekscipijenta će u velikoj meri zavisiti od faktora kao što su poseban način administracije, uticaj ekscipijenta na rastvorljivost i stabilnost, i priroda doznog oblika.

Farmaceutske kompozicije pogodne za isporuku jedinjenja predmetnog pronalaska i postupci za njihovo dobijanje će biti očigledni prosečnom stručnjaku. Takve kompozicije i postupci za njihovo dobijanje se mogu naći, na primer, u "Remingrton's Pharmaceutical Sciences", 19th Edition (Mack Publishing Companv, 1995).

Prema tome predmetni pronalazak obezbeđuje farmaceutske kompozicije koje sadrže jedinjenje formule (I) i farmaceutski prihvatljiv razblaživač ili nosač.

Bilo koji pogodni način administracije se može koristiti za obezbeđivanje sisara, posebno ljudi, efektivnom dozom jedinjenja predmetnog pronalaska. Na primer, oralna (uključujući bukalnu i sublingvalnu administraciju), rektalna, topikalna, parenteralna, okularna, pulmonarna, nazalna i slične se mogu koristiti. Dozni oblici uključuju tablete, pastile, disperzije, suspenzije, rastvore, kapsule, kremove, masti, aerosole, i si. Prioritetno se jedinjenja formule (I) administriraju oralno i intranazalno.

Efektivna doza korišćcnog aktivnog sastojka može da varira u zavisnosti od upotrebljenog pojedinačnog jedinjenja, načina administracije, karakteristike sisara koji će biti lečen (na pr. telesne težine), stanja koje će se lečiti i težine stanja koje će se lečiti. Takve doze može lako da utvrdi prosečni stručnjak.

Za lečenje seksualne disfunkcije, jedinjenja predmetnog pronalaska su data u doznom opsegu od oko 0.001 mg do oko 1000 mg, prioritetno od oko 0.001 mg do oko 500 mg, još prioritetnije od oko 0.001 mg do oko 100 mg, još prioritetnije od oko 0.001 mg do oko 50 mg i naročito od 0.002 mg do oko 25 mg po kilogramu telesne težine, prioritetno kao pojedinačna doza oralno ili kao nazalni sprej. Na primer, oralna administracija može zahtevati samo od oko 0.1 mg do oko 100 mg, dok intravenozna doza može da zahteva samo od oko 0.001 do oko 100 mg. Ukupna dnevna doza se može administrirati kao jedna ili kao podeljene doze i može, ako to lekar odredi, da bude izvan tipičnog raspona koji je ovde dat.

Kad se leči gojaznost, zajedno sa dijebetesom i/ili hiperglikemijom, ili sama, generalno zadovoljavajući rezultati su dobijeni kad su jedinjenja predmetnog pronalaska administrirana kao dnevna doza od oko 0.0001 mg do oko 1000 mg, prioritetno od oko 0.001 mg do oko 500 mg, još prioritetnije od oko 0.005 mg do oko 100 mg, i naročito od 0.005 mg do oko 50 mg po kilogramu telesne težine živog bića, prioritetno kao pojedinačna doza ili podeljene doze dva do šest puta dnevno, ili kao produženi dozni oblik. U slučaju odraslog čoveka od 70 kg, ukupna dnevna doza će u opštem slučaju biti od oko 0.7 mg do oko 3500 mg. Dozni režim može bit podešen da obezbedi optimalni terapeutski odgovor.

Kad se leči dijebetes melitus i /ili hiperglikemija, kao i druga oboljenja i poremećaji za koje su korisna jedinjenja formule (I), u opštem slučaju zadovoljavajući tezulati su dobijeni kad su jedinjenja predmetnog pronalaska administrirana kao dnevna doza od oko 0.001 mg do oko 100 mg po kilogramu telesne težine živog bića, prioritetno kao pojedinačna doza ili podeljene doze dva do šest puta dnevno, ili kao produženi dozni oblik. U slučaju odraslog čoveka od 70 kg, ukupna dnevna doza će u opštem slučaju biti od oko 0.7 mg do oko 350 mg. Dozni režim može bit podešen da obezbedi optimalni terapeutski odgovor.

Ove doze su bazirane na prosečnoj težini subjekta koji ima težinu od oko 65 do 70 kg. Lekar će lako biti sposoban da odredi doze za subjekte čija je težina izvan ovog raspona, kao što su deca, stariji i gojazni.

Jedinjenja pronalaska se mogu administrirati oralno. Oralna administracija uključuje gutanje, tako da jedinjenje ulazi u gastrointestinalni trakt, i/ili bukalno. lingvalno ili sublingvalno administriranje pri čemu jedinjenje ulazi direktno iz usta u krvni tok.

Formulacije pogodne za oralnu administraciju uključuju čvrste, polučvrste i tečne sisteme kao što su tablete; meke ili tvrde kapsule koje sadrže multi- i nano-čestice, tečnosti, ili prahovi, pastile (uključujući punjene tečnošću), gume za žvakanje, gelove, đozne oblike koji se brzo disperguju; filmove; ovule, sprejove; i bukalno/muko-adhezivne meleme.

Tečne formulacije uključuju suspenzije, rastvore, sirupe i eliksire. Takve

formulacije se mogu koristiti kao punila u mekim ili tvrdim kapsulama (načinjenim, na primer, od želatina ili hidroksipropilmwtilceluloze)i tipično sadrže nosač, na primer,

vodu, etanol, polietilen glikol, propilen glikol, metilcelulozu, ili pogodno ulje, ijedno ili više sredstava za emulzifikaciju i/ili stvaranje suspenzija. Tečne formulacije se takođe mogu pripremiti rekonstitucijom čvrstih, na primer, iz vrećice.

Jedinjenja prnalaska se takođe mogu upotrebiti kao brzo-rastvorljivi, brzo.-dezintegracioni dozni oblici kao što su oni opisani u Expert Opinion in Therapeutic

Patents,U(6), 981-986, od Liang and Chen (2001).

Za dozni oblik tablete, u zavisnosti od doze, lek može da čini od 1 tež. % do 80

tež. % doznog oblika, tipičnije od 5 tež. % do 60 tež. % doznog oblika. Osim leka,

tablete u opštem slučaju sadrže dezintegrator. Primeri dezintegratora uključuju natrijum škrob glikolat, natrijum karboksimetil celulozu, kalcijum karboksimetil celulozu, natrijum kroskarmelozu, krospovidon, polivinilpirolidon, metil celulozu, mikrokristalnu celulozu, nižim alkilom supstituisanu hidroksipropil celulozu, skrob,preželatinizirani škrob i natrijum arginat. U opštem slučaju, dezintegrator će činiti od 1 tež. % do 25 tež. %, prioritetno od 5 tež. % do 20 tež. % doznog oblika.

Veziva se u opštem slučaju upotrebljavaju da učestvuju u kohezivnim

kvalitetima formulacije tablete. Pogodna veziva uključuju mikrokristalnu celulozu,

želatin, šećere, polietilen glikol, prirodne i sintetičke gume, polivinilpirolidon,

preželatinizirani škrob, hidroksipropil celulozu i hidroksipropil metilcelulozu. Tablete takođe mogu da sadrže razblaživače, kao stoje laktoza (monohidrat, raspršivanjem osušen monohidrat, anhidrovani i si.), manitol, ksilitol, saharoza, sorbitol,

mikrokristalna celuloza, škrob i dvobazni kalcijum fosfat dihidrat.

Tablete takođe mogu po izboru da sadrže površinski aktivna sredstva, kao što je natrijum lauril sulfat i polisorbat 80, i kliziva kao što je silicij um dioksid i talk. Kad su prisutna, površinski aktivna sredstva mogu da čine od 0.2 tež. % do 5 tež. % tablete, a kliziva mogu da čine od 0.2 tež. % do 1 tež. % tablete.

Tablete u opštem slučaju takođe sadrže maziva kao što je magnezijum stearat,

kalcijum stearat, cink stearat, natrijum stearil fumarat, i smeše magnezijum stearata sa natrijum lauril sulfatom. Maziva u opštem slučaju čine od 0.25 tež. % do 10 tež. %,

prioritetno od 0.5 tež. % do 3 tež. % tablete.

Drugi mogući sastojci uključuju anti-oksidante, boje, aromate, prezervative i sredstva za maskiranje ukusa.

Egzemplarne tablete sadrže od oko 80% leka, od oko 10 tež. % do oko 90 tež. % veziva, od oko 0 tež. % do oko 85 tež. % razblaživača, od oko 2 tež. % do oko 10 tež. % dezintegratora, i od oko 0.25 tež. % do oko 10 tež. % maziva.

Smeše za tablete se mogu presovati direktno ili pomoću valjka da bi se dobile

tablete. Smeše za tablete ili njihovi delovi se alternativno mogu mokro-, suvo- ili iz rastopa granulisati, učvrstiti iz rastopa, ili ekstrudovati pre tabletiranja. Krajnja formulacija može da se sastoji od jednog ili više slojeva i može biti obložena ili neobložena, ili se čak može staviti u kapsule.

Formulacija tableta je diskutovana u "Pharmaceutical Dosage Forms: Tablets", Vol.l, od H. Lieberman and L. Lachman (Marcel Dekker, Nevv York, 1980).

Potrošni oralni filmovi za humanu ili veterinarsku upotrebu su tipično dozni oblici savitljivih tankih filmova koji se u vodi rastvaraju ili bubre i koji se mogu brzo rastvoriti ili priljubiti za sluzokožu i tipično sadrže jedinjenje formule I, polimer za stvaranje filma, vezivo, rastvarač, ovlaživač, plastifikator, stabilizator ili emulzifikator, sredstvo za modifikovanje viskoziteta i rastvarač. Neke komponente formulacije mogu da imaju više od jedne funkcije

Jedinjenja formule (I) mogu biti rastvorljiva u vodi ili nerastvorljiva. U vodi rastvorlj iva jedinjenja tipično sadrže od 1 tež.% do 50 tež. % , tipičnije od 2 tež. % do 50 tež. % rastvorene supstance. Manje rastvorlj iva jedinjenja mogu da sadrže veći udeo kompozicije, tipično do 88 tež. % rastvorene supstance. Alternativno, jedinjenja formule I mogu da budu u obliku vušečestičnih kuglica.

Polimer za stvaranje filma se može izabrati od prirodnih polisaharida, proteina, ili sintetičkih hidrokoloida i tipično je prisutan u opsegu od 0.01 do 99 tež. %, tipičnije u opsegu od 30 do 80 tež. %.

Drugi mogući sastojci uključuju antioksidante, boje, aromate i pojačivače ukusa, prezervative, sredstva za stimulaciju pljuvačke, sredstva za hlađenje, ko-rastvarače (uključjući ulja), razmekšivači, kabasta sredstva, sredstva protiv penušanja, površinski aktivna sredstva i sredstva za maskiranje ukusa..

Filmovi u aglasnosti sa pronalaskom se tipično pripremaju sušenjem isparavanjem tankih vodenih filmova prevučenim na nosaču sa koga se mogu Ijuštiti, ili papiru. Ovo može biti učinjeno u sušnici ili tunelu, tipično kombinovanom sušaču prevlaka, ili sušenjem zamrzavanjem ili vakumiranjem.

Čvrste formulacije pogodne za oralnu administraciju se mogu formulisati da budu trenutno i/ili modifikovano oslobođene. Formulacije za modifikovano oslobađanje uključuju odloženo, produženo, pulsirano, kontrolisano, ciljno i programirano oslobađanje.

Pogodne formulacije za modifikovano oslobađanje za svrhe ovog pronalaska su opisane u US Patentu No. 6,106,864. Detalji drugih pogodnih tehnologija kao što su disperzija visoke energije i osmotska i presvučene čestice mogu se naći u Pharmaceutical Technologv On- line, 25(2), 1-14 od Vermaet al(2001). Upotreba žvakaćih guma da se postigne kontrolisano oslobađanje je opisana u WO 00/35298.

Jedinjenja pronalaska mogu se takođe administrirati direktno u krvni tok, u mišić, ili u unutrašnji organ. Pogodni načini za parenteralnu administraciju uključuju intravenoznu, intraarterijsku, intreperitonalnu, intratekalnu, intraventikularnu, intrauretalnu, intrasternalnu, intrakranialnu, intramuskularnu, intrasinovialnu i supkutanu. Pogodna sredstva za parenteralnu administraciju uključuju igle, (uključujući mikro igle), injektore, beziglene injektore i infuzione tehnike.

Parenteralne formulacije su tipično vodeni rastvori koji mogu da sadrže ekscipijente kao što su soli, ugljeni hidrati i puferi (prioritetno za pH od 3 do 9), ali, za neke primene, one mogu biti pogodnije formulisane kao sterilni nevodeni rastvori ili kao suvi oblici da bi se upotrebili zajedno sa pogodnim nosačem kao što je sterilna voda bez pirogena.

Priprema parenteralnih formulacija pod sterilnim uslovima, na primer, liofilizacijom, može biti lako izvedena upotrebom standardnih farmaceutskih tehnika koje su dobro poznate prosečnom stručnjaku.

Rastvorlj i vost jedinjenja formule (I) koje se upotrebljavaju za parenteralne rastvore može biti povećana korišćenjem odgovarajućih tehnika formulisanja, kao što je ugradnja sredstava za poboljšanje rastvorljivosti.

Formulacije za parenteralnu administraciju se mogu formulisati da budu trenutno i/ili modifikovano oslobođene. Formulacije za modifikovano oslobađanje uključuju odloženo, produženo, pulsirano, kontrolisano, ciljno i programirano oslobađanje. Prema tome, jedinjenja pronalaska se mogu formulisati kao čvrsta, polu-čvrsta, ili kao tiksotropne tečnosti za administraciju kao implantirani depo koji obezbeđuje modifikovano oslobađanje aktivnog jedinjenja. Primeri takvih formulacija uključuju stentove obložene lekom i mikrosfere poli(J/-mlečne-koglikolne) kiseline

(PGLA).

Jedinjenja pronalaska se takođe mogu administrirati topikalno na kožu ili sluzokožu, to jest, dermalno ili transdermalno. Tipične formulacije za ovu svrhu uključuju gelove, hidrogelove, losione, rastvore, kremove, masti, pudere, prelive, pene, filmove, flastere, oblande, implante, sinđere, vlakna, zavoje i mikroemulzije. Takođe se mogu koristiti lipozomi. Tipični nosači uključuju alkohol, vodu, mineralno ulju, tečni vazelin, beli vazelin, glicerin, polietilen glikol i propilen glikol. Mogu se ugraditi i pojačivači penetracije - vidi, na primer, J. Pharm. Sci. 88, (10), 955-958, od Finnin and Morgan (October 1999).

Drugi načini zatopikalnu administraciju uključuju isporuku elektroporacijom, jontoforezom, fonoforezom, sonoforezom i injekcije mikroiglama ili bez igala (na pr., Povvderject™, Bioject™, itd.).

Formulacije pogodne za topikalnu administraciju se mogu formulisati da budu trenutno i/ili modifikovano oslobođene. Formulacije za modifikovano oslobađanje uključuju odloženo, produženo, pulsirano, kontrolisano, ciljno i programirano oslobađanje.

Jedinjenja pronalaska se takođe mogu administrirati intranazalno ili inhalacijom, tipično u obliku suvog praha (bilo samog, kao smeša, na primer, u suvoj mešavini sa Iaktozom, ili kao smeša čestica komponenata, na primer, mešana sa fosfolipidima, kao što je fosfatidilholin) iz inhalatora suvog praha ili kao aerosolni sprej iz kontejnera pod pritiskom, pumpe, spreja, atomizera (prioritetno atomizera koji koristi elektrohidrodinamiku za dobijanje fine magle), ili nebulajzera, sa ili bez upotrebe pogodnog propelanta, kao što je 1,1,1,2-tetrafluoroetan ili 1,1,1,2,3,3,3-heptafluoropropan. Za intranazalnu upotrebu, prah može sadržati bioadhezivna sredstva, na primer, hitozan ili ciklodekstrin.

Kontejner pod pritiskom, pumpa, sprej atomizer ili nebulajzer sadrže rastvor ili suspenziju jednog ili više jedinjenja pronalaska i, na primer, etanol, vodeni etanol, ili pogodno alternativno sredstvo za dispergovanje, ili produženo oslobađanje aktivne supstance, jedan ili više propelanata kao rastvarač i po izboru površinski aktivnu supstancu, kao što je sorbitan trioleat, oleinska kiselina ili oligomlečna kiselina.

Pre upotrebe u formulaciji suvog praha ili suspenzije, proizvod leka se mikronizuje do veličine pogodne za isporuku inhalacijom (tipično manje od 5 mikrona). Ovo se može postići bilo kojom tehnikom mrvljenja, kao što je spiralno džet mrvljenje, melevenje u fluidnom sloju, procesiranje superkritičnom tečnošću da bi se stvorile nanočestice, homogenizacija pod visokim pritiskom, ili sušenje raspršivanjem.

Kapsule (načinjene, na primer, od želatina ili hidroksipropilmetil celuloze), blisteri i kartridži za upotrebu u inhalatoru ili insuflatoru se mogu formulisati tako da sadrže smešu praha jedinjenja pronalaska , pogodne praskaste baze kao što je laktoza ili škrob i modifikator izvođenja kao što je 1-leucin, manitol, ili magnezijum stearat. Laktoza može biti anhidrovana ili u obliku monohidrata, prioritetno ova druga. Drugi pogodni ekscipijenti uključuju dekstran, glukozu, maltozu, sorbitol, ksilitol, fruktozu, saharozu i trehalozu.

Pogodne formulacije rastvora za upotrebu u atomizeru koji koristi elektrohidrodinamiku da bi se dobila fina magla sadrže od 1 pg do 20 mg jedinjenja pronalaska po izvođenju i zapremina izvođenja može da varira od 1 u.1 do 100 u.1. Tipična formulacija može da sadrži jedinjenje formule (I), propilen glikol, sterilnu vodu, etanol i natrijum hlorid. Alternativni rastvarači koji se mogu koristiti umesto propilen glikola uključuju glicerol i poletilen glikol.

Ovim formulacijama pronalaska namenjenim za inhaliranje ili intranazalnu administraciju mogu se dodati i razni aromati, kao što je mentol ili levomentol, ili zaslađivači, kao što je saharin ili natrijum saharin.

Formulacije za administraciju inhaliranjem ili intranazalnu administraciju se mogu formulisati da budu trenutno i/ili modifikovano oslobođene, upotrebom, na primer, PGLA. Formulacije za modifikovano oslobađanje uključuju odloženo, produženo, pulsirano, kontrolisano, ciljno i programirano oslobađanje.

U slučaju inhalatora suvog praha ili aerosola, dozna jedineica se određuje pomoću ventila koji isporučuje odmerenu količinu. Jedinice u saglasnosti sa pronalaskom su na tipičan način određene da administriraju izmerenu dozu ili "dašak"

("puff) koji sadrži od 0.001 mg do 10 mg jedinjenja formule (I). Ukupna dnevna doza će tipično biti u rasponu od 0.001 mg do 40 mg što se može administrirati kao jedinična doza, ili obično kao podeljene doze tokom dana.

Jedinjenja pronalaska se mogu administrirati rektalno ili vaginalno, na primer, u obliku supozitorija, pesara, mikrobicida, vaginalnog prstena ili klistira. Kakao- buter je tradicionalna baza za supozitorije, ali se mogu koristiti i druga pogodna sredstva.

Formulacije za rektalnu/vaginalnu administraciju se mogu formulisati da budu trenutno i/ili modifikovano oslobođene. Formulacije za modifikovano oslobađanje uključuju odloženo, produženo, pulsirano, kontrolisano, ciljno i programirano oslobađanje.

Jedinjenja pronalaska se mogu administrirati direktno u oko ili uho, tipično u obliku kapi mikronizovane suspenzije ili rastvora u izotoničnoj, pH-podešenoj solani. Druge formulacije pogodne za okularnu ili auralnu administraciju uključuju masti, biodegradivne (na pr., želatinozni sunđeri koji se mogu apsorbovati, kolagen) i ne-biodegradivne (na primer, silikon) implante, obloge, sočiva i čestice ili vezikularne sisteme, kao što su niozomi ili lipozomi. Polimeri kao što je umrežena poliakrilna kiselina, polivinil alkohol, hijaluronska kiselina, celulozni polimer, kao stoje hidroksipropilmetil celuloza, hidrokietil celuloze, ili metil celuloza, ili heteropolisaharidni polimer, na primer, gelan guma, mogu se ugraditi zajedno sa prezervativom, kao što je benzalkonijum hlorid. Takve formulacije se takođe mogu isporučivati jontoforezom.

Formulacije za okularnu/auralnu administraciju se mogu formulisati da budu trenutno i/ili modifikovano oslobođene. Formulacije za modifikovano oslobađanje uključuju odloženo, produženo, pulsirano, kontrolisano, ciljno i programirano oslobađanje.

Za upotrebu u bilo kome prethodno pomenutom načinu administracije, jedinjenja pronalaska se mogu kombinovati sa makromolekularnim entitetima, kao što je ciklodekstrin, i pogodnim njegovim derivatima, ili polimerima koji sadrže polietilen glikol, da bi se poboljšala rastvorlj i vost, brzina rastvaranja, maskiranje ukusa, bioraspoloživost i/ili stabilnost.

Nađeno je da su opštem slučaju kompleksi lek-ciklodekstrin, na primer, korisni za većinu doznih oblika i načina administracije. Mogu se upotrebiti kako inkluzioni tako i ne-inkluzioni kompleksi. Kao alternativa direktnoj kompleksaciji leka, ciklodekstrin se može upotrebiti kao pomoćni aditiv, tj., kao nosač, razblaživač ili rastvarač. Najčešće korišćeni za ove svrhe su alfa-, beta- i gama- ciklodekstrini, čiji primeri se mogu naći u ,eđunarodnim patentnim prijavama br. WO 91/11172, WO 94/02518 i WO 98/55148.

Ukoliko može biti poželjno administrirati kombinaciju aktivnih jdinjenja, na primer, u svrhu lečenja posebnog oboljenja ili stanja, u okvir pronalaska predmetnog pronalaska spada da se dve ili više farmaceutskih kompozicija, od kojih najmanje jedna sadrži jedinjenje pronalaska, mogu na pogodan način kombinovati u obliku pribora pogodnog za koadministraciju kompozicija.

Pribor pronalaka sadrži dve ili više odvojenih farmaceutskih kompozicija, od kojih najmanje jedna sadrži jedinjenje pronalaska formule (I) u saglasnosti sa pronalaskom, i sredstva za odvojeno čuvanje pomenutih kompozicija, kao što su kontejneri, podeljena boca, ili podeljena folija. Na primer, takav pribor je poznato blister pakovanje koje se koristi za pakovanje tableta, kapsula i sličnog.

Pribor pronalaska je naročito pogodan za administraciju različitih doznih oblika, na primer, oralnog i parenteralnog, za administraciju odvojenih kompozicija u različitim doznim intervalima, ili za ili zatitriranje odvojenih kompozicija jedne prema drugoj. Da bi se pomoglo prilagođavanju, pribor tipično sadrži uputstva za administriranje i može biti dat sa tzv podsetnikomm( memora aid).

Drugi aspekti pronalaska su nabrojani u zahtevima.

Biološki podaci

Efekat jedinjenja Primera 2 kod 3 mg/kg i 10 mg/kg na kumulativno unošenje hrane tokom 24 sata, i promena telesne težine tokom 24 sata, u poređenju sa nosačem, dati su u Slikama 1 i 2.

Pronalazak je ilustrovan sledećim primerima koji ne ograničavaju i u kojima su korišćene sledeće skraćenice i definicije: APCI maseni spektar hemijske jonizacije na atmosferskom pritisku [ajo pecifična rotacija na 589 nm.

Br širok

Celite(<R>) sredstvo za filtriranje

[8] hemijski pomak

d dublet

dd dupli dublet

El elektrosprej jonizacija

Ex primer

LRMS maseni spektar male rezolucije

m multiplet

m/z pik masenog spektra

NMR nuklearna magnetna resonansa

Prec prekursor

Prep priprema

psi funta po kvadratnom inču

q kvartet

s singlet

t triplet

tic hromatografija na tankom sloju

Pošto su u mnogim slučajevima jedinjenja prvobitno izolovana u njihovom obliku slobodne baze, radi pogodnosti sinteze, ona su često bila pretvorena u svoje odgovarajuće hidrohloridne soli u svrhu analitičke identifikacije. Da bi se izbegla sumnja, smatra se da su i slobodna baza i oblik HCL soli ovde obezbeđeni.

Da bi se izbegla sumnja, nazivi jedinjenja koji su ovde korišćeni su izvedeni upotrebom ACD Labs Name Softvvare v7.11™.

PRIMERI

Primer 1

6- r( 3S. 4S)- 3-( 5- Hloropiridin- 2- il)- 4- jr( 3R, 4R, 5S)- 4-( 4- fiuorofenil)- 4- hidroksi- 3. 5-

dimetil piperidin- 1- iljkarbonjUpi rolidin-ilj nikotinonitril

2-Hloro-5-cijanopridin (96 mg, 0.69 mmol) je dodan rastvoru pirolidina iz pripreme 10 (200 mg, 0.46 mmol) i N-etildiizopropilamina (0.32 ml, 1.8 mmol) u acetonitrilu (10 ml) i smeša zagrevana na 70 °C u atmosferi azota preko noći. Rastvarač je uklonjen u vakumu i ostatak prečišćen hromatografijom na koloni (silika) eluiranjem sa dihlorometanom, povećavajući polarnost do 5% metanola u

dihlorometanu, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (191 mg, 77%) kao bela čvrsta supstanca. 'HNMR (CD3OD, 400 MHz) 5 0.4-0.6 (6H, 4 x d), 0.78-0.82, 1.60-1.68 i 1.97-2.05 (2H, 3 x m), 2.73-2.80 (1 H, m), 3.00-3.20 (1 H, m), 3.68-4.37 (8H, m), 6.62 (1 H, m), 7.01-7.08 i 7.37-7.48 (5H, 2 x m), 7.74 (1 H, m), 7.80 i 7.95 (1 H, 2 x dd), 8.40 (1 H, m), 8.57 i 8.60 (1 H, 2 x d); LRMS (El<+>) 534 [MH<+>j; [ojD<25>= - 47.0 (c= 0.215, MeOH).

Primer 2

6- r( 3S, 4S)- 3-( 5- Hloropiridin- 2- il)- 4- {(( 3R. 4R. 5S)- 4-( 4- fluorofenil)- 4- hidroksi- 3, 5-

dimetilpiperidin- 1- iljkarboniUpirolidin- l- iljpiradizin- 3- karbonitril

3-Hloro-6-cijanopiridazin (pripremljen prema US 3,637,691) (20 mg, 0.14 mmol) dodan je rastvoru pirolidina iz pripreme 10 (40 mg, 0.09 mmol) i N-etildiizopropilamina (0.06 ml, 0.37 mmol) u acetonitrilu (10 ml) i smeša zagrevana na 70 °C u atmosferi azota preko noći. Rastvarač je uklonjen u vakumu i ostatak prečišćen hromatografijom na koloni (silika) eluiranjem sa dihlorometanom, povećavajući polarnost do 5% metanola u dihlorometanu, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (41 mg, 83%) kao bela čvrsta supstanca. 'HNMR (CD3OD, 400 MHz) 5 0.4-0.6 (6H, 4 x

d), 0.78-0.85, 1.60-1.69 i 1.97-2.10 (2H, 3 x m), 2.72-2.80 (1 H, m), 3.00-3.23 (1 H, m), 3.68-4.38 (8H, m), 6.99-7.08 i 7.38-7.50 (6H, 2 x m), 7.70 (1 H, d), 7.80 i 7.94 (1

H, 2 x dd), 8.58 i 8.61 (1 H, 2 x d); LRMS (El<+>) 535 [MH<+>j.

Primer 3

( 3R, 4R, 5S)- 1- { r( 3S, 4S)- l-( 6- Hloropiridazin- 3- il)- 4-( 5- hloropiridin- 2- il) pirolidin- 3-

iljkarbonil)- 4-( 4- fluorofenil)- 3, 5- dimetilpiperidin- 4- ol

1,6-Dihloropiridazin (173 mg, 1.2 mmol) je dodan rastvoru pirolidina iz pripreme 10 (100 mg, 0.23 mmol) i N-etildiizopropilamina (0.16 ml, 0.93 mmol) u

acetonitrilu (5 ml) i smeša zagrevana na 70 °C u atmosferi azota preko noći. Rastvarač je uklonjen u vakumu i ostatak prečišćen hromatografijom na koloni (silika) eluiranjem sa dihlorometanom, povećavajući polarnost do 5% metanola u dihlorometanu, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (52 mg, 42%) kao bela čvrsta supstanca. 'H NMR (CD30D, 400 MHz) 5 0.4-0.6 (6H, 4 x d), 0.78-0.85, 1.60-1.69 i 1.97-2.10 (2H, 3 x m), 2.72-2.80 (IH, m), 3.00-3.23 (1 H, m), 3.68-4.38 (8H, m), 6.99-7.08 i 7.38-7.50 (6H, 2 x m), 7.70 (1 Hl d), 7.80 i 7.94 (1 H, 2 x dd), 8.58 i 8.61 (1 H, 2 x d); LRMS (El<+>) 544 [MH<+>].

Primer 4

( 3R, 4R, 5S)- 1- ( r( 3S. 4S)- 4-( 5- Hloropiridin- 2- il)- l-( 6- metoksipiradizin- 3- il) pirolidin- 3-

iljkarbonil)- 4-( 4- fluorofenil)- 3, 5- dimetilpiperidin- 4- ol

Natrijum /-butoksid (31 mg, 0,32 mmol), 3-hloro-6-metoksipiradizin (34 mg, 0.23 mmol), tris(dibenzilidenaceton)dipaIadijum (0) (8.5 g, 0.009 mmol) i 2,2'-bis(difenilfosfino)-l,r-binaftalen (11.5 mg,0.0185 mmol) je dodano rastvoru pirolidina iz pripreme 10 (100 mg, 0.23 mmol) u toluenu (10 ml) i smeša zagrevana na 80 °C u atmosferi azota preko noći. Rastvarač je uklonjen u vakumu i ostatak stavljen u etil acetat (25 ml), ispran vodom, sušen (MgS04) i uparen. Prečišćavanje hromatografijom na koloni (silika) eluiranjem sa dihlorometanom, povećavajući polarnost do 5% metanola u dihlorometanu, dalo je jedinjenje iz naslova (48 mg, 40%) kaožutu penu.<*>H NMR (CD3OD, 400 MHz) 5 0.4-0.62 (d+t+t, 6H), 0.86 (m, 1 H), 1.65 (m, 1 H), 1.93-2.08 (br, 1 H), 2.75 (m, 1 H), 3.17 (t, 1 H), 3.74 (m, 3H), 3.95 (s, 3H), 3.96-4.21 (m, 3H), 4.32 (d, 1 H), 6.98-7.1 (m, 5H), 7.38-7.48 (m, 2H), 7.79+7.48 (2 x dd, 1 H), 8.56 (d, 1 H); LRMS (El<+>) 540 [MH<+>j.

Primer 5

( 3R, 4R, 5S)- 4-( 4- hlorofenil)- l- { r( 3S. 4S)- l-( 6- hloropiridazin- 3- il)- 4-( 5- lfuoropiridin-2- il) pirolidin- 3- iHkarbonil|- 3. 5- dimetilpiperidin- 4- ol

Rastvoru (3R,4R,5S)-4-(4-hlorofenil)-l- {[(3S,4S)- 4-(5-fluoropiridin 2-il)pirolidin-3- iljkarbonil}-3,5-dimetilpiperidin-4-ola (pripremljenog istim postupkom koji je upotrebljen za amin iz pripreme 10, počev od aldehida iz pripreme 17 i (3R,4s,5S)-4-(4-hlorofenil)-3,5-dimetilpiperidin-4-ola, pripremljanog prema publikaciji međunarodne patentne prijave br. WO 2005/077935) (120 mg, 0.28 mmol) u dimetilsufloksidu (2 ml) dodan je 3,6-dihloropiradizin (98 mg, 0.56 mmol), trietilamin (0.12 ml, 0.84 mmol), i cezijum fluorid (13 mg, 0.084 mmol). Smeša je mešana na 110 °C u atmosferi azota tokom 3 sata. Reakciona smeša je razblažena metanolom (5 ml) i stavljena na SCX kolonu, eluiranjem metanolom da se ukloni ne-bazni materijal i dimetilsulfoksid, pa zatim sa 2 M NH3u metanolu da bi se eluirao bazni materijal. Rastvarač je uklonjen u vakumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (74 mg, 49%>) kao bezbojna guma. 'H NMR (CD3OD, 400 MHz) 5 0.44-0.60 (6H, 4 x d), 0.95-1.02, 1.64-1.73 i 1.94-2.09 (2H, 3 x m), 2.69-2.79 (1 H, m), 2.99-3.06 i 3.16-3.22 (1 H, 2 x m), 3.74-3.79 (3H, m), 4.01-4.24 (4H, m), 4.32-4.36 (1 H, m), 7.02-7.07 (1 Hl m), 7.29-7.70 (7H, m), 8.45-8.49 (1 II, m); LRMS (El+) 544 [MH+j. Primer 6 6- r( 3S, 4SV3-{ f( 3R, 4R, 5S)- 4-( 4- hlorofenil)- 4- hidroksi- 3. 5- dimetilpiperidin- l-inkarbonil}- 4-( 5- lfuoropiridin- 2- il)- pirolidin- 1- il] piradizin- 3( 2H)- on

Rastvor hloropiradizina iz Primera 5 (70 mg, 0.13 mmol) je rastvoren u degaziranoj sirćetnoj kiselini i mešan na refluksu u atmosferi azota preko noći.

Rastvarač je uklonjen u vakumu i ostatak prečišćen hromatografijom na koloni (silika) eluiranjm smešom dihlorometan/metanol/aq.amonijak 95/5/0.5. Ovo je dalo jedinjenje iz naslova kao beličastu čvrstu supstancu (37 mg, 55%). 'H NMR (CD3OD, 400 MHz) 5 0.43-0.59 (6H, 4 x d), 0.94-1.03, 1.64-1.73 i 1.93-2.03 (2H, 3 x m), 2.65-2.78 (1 H, m), 2.97-3.03 i 3.14-3.20 (1 H, 2 X m), 3.62-3.79 (311, m), 3.86-4.17 (4H, m), 4.31-4.35 (1 H, m), 6.88-6.91 (1 H, m), 7.30- 7.42 (5H, m), 7.47-7.57 (1 H, m), 7.63-7.68 (1 H, m), 8.44-8.48 (1 H, m); LRMS (El<+>) 526 [MH<+>j.

Primer 7

6- [( 3S, 4S)- 3-{ j( 3R, 4R, 5S)- 4-( 4- hlorofenil)- 4- hidroksi- 3. 5- dimetilpiperidin- l-il1karbonill- 4-( 5- lfuoropiridin- 2- il)- pirolidin- l- il]- 2- metilpiradizin- 3( 2H)- on

Rastvoru piridazinona iz Primera 6 (30 mg, 0.057 mmol) u dimetilformamidu (2 ml) dodan je natrijum heksametidisilazid IM u tetrahidrofuranu (0.07 ml, 0.07 mmol) i litijum bromid (6 mg, 0.07 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi u atmosferi azota tokom 30 minuta, zatim je dodan metil jodid (0.04 ml, 0.07 mmol) i smeša mešana u atmosferi azota na sobnoj temperaturi tokom 2 sata. Rastvarač je uklonjen u vakumu i ostatak prečišćen hromatografijom na koloni (silika) eluiranjm smešom dihlorometan/metanol/aq.amonijak 95/5/0.5. Ovo je dalo jedinjenje iz naslova kao žutu čvrstu supstancu (37 mg, 55%). ]H NMR (CD3OD, 400 MHz) 8 0.44-0.59 (6H, 4xd), 0.94-1.03, 1.64- 1.73 i 1.95-2.04 (2H, 3 x m), 2.68-2.78 (1 H, m), 2.95-3.01 i 3.14-3.21 (1 H, 2 xm), 3.62-3.81 (6H, m), 3.87-4.17 (4H, m), 4.31-4.35(1 H, m), 6.87-6.90 (1 H, m), 7.25-7.34 (4H, m), 7.38-7.42 (1 H, m), 7.48- 7.58 (1 H, m), 7.64-7.69 (1 H, m), 8.44-8.48 (IH, m); LRMS (Ef) 540 [MH<+>j.

Primer 8

( 3R, 4R. 5S)- 1- ( r( 3S, 4S)- 4-( 5- hloropiridin- 2- il)- l-( 5- fluoropiridin- 3- il) pirolidin- 3-

iljkarbonil}- 3, 5- dimetil- 4- piridin- 2- ilp iperidin- 4- ol

Rastvoru (3R,4R,5S)-1- {[(3S.4S)- 4-(5-hloropiridin- 2-il)pirolidin-3-il]karbonil}-3,5-dimetil-4-piridin-2-ilpiperidin-4-ola (pripremljenog istim postupkom koji je upotrebljen zaamin iz pripreme 10, počev (3R,4s,5S)-3,5-dimetil-4-piridin-2ilpiperidin-4-ola, pripremljanog prema publikaciji međunarodne patentne prijave br. WO 2005/077935) (50 mg, 0.12 mmol) u toluenu (5 ml), dodan je 3-bromo, 5-fluoropiridin (25 mg, 0.14 mmol), tris(dibenzilidenaceton)dipaladijum (4.4 mg, 0.0048 mmol), BINAP (6 mg, 0.0096 mmola) i natrijum terc-butoksid (26 mg, 0.27 mmol). Smeša je mešana na 80 °C u atmosferi azota preko noći. Rastvarač je uklonjen u vakumu i ostatak prečišćen hromatografijom na koloni (silika) eluiranjm smešom dihlorometan/metanol/aq.amonijak 99/1/0.1., povećavaćuji polarnost do 95%5%0.5 Ovo je dalo jedinjenje iz naslova kao žutu gumu(l 1 mg, 18%). 'H NMR (CD3OD, 400 MHz) 5 0.33-0.53 (6H, 4 xd), 0.81-0.93, 1.81-1.92 i2.08-2.28 (2H, 3 xm), 2.69-2.78 (1 H, m), 2.99-3.20 (IH, m), 3.61-3.94 (5H, m), 4.01-4.23 (2H, m), 4.34-4.42 (1 H, m), 6.81-6.90 (1 H, m), 7.26-7.50 (3H, m), 7.70-7.94 (4H, m), 8.51-8.62 (2H, m); LRMS (El+) 510[MH+j.

Primer 9

( 3R. 4R. 5SV1- { rf3S, 4S)- 4- f5- hloropiridin- 2- il)- l- piridazin- 3- iIpirolidin- 3-

il] karbonil}- 3, 5- dimetil- 4- piridin- 2- ilpiperidin- 4- ol

Rastvoru (3R,4R,5S)-1- {[(3S,4S)-4-(5-hloropiridin- 2-il)piroliđin-3-il]karbonil}-3,5-dimetil-4-piridin-2-ilpiperidin-4-ola (pripremljenog istim postupkom koji je upotrebljen za amin iz pripreme 10, počev (3R,4s,5S)-3,5-dimetil-4-piridin-2-ilpiperidin-4-ola, pripremljanog prema publikaciji međunarodne patentne prijave br. WO 2005/077935) (50 mg, 0.12 mmol) u DMSO (2 ml) dodan je 3-hloropiradizin (28 mg, 0.24 mmol), cezijum fluorid (18 mg, 0.12 mmol) i trietilamin (0.05 ml, 0.36 mmol). Smeša je mešana na 100 °C u atmosferi azota preko noći. Reakciona smeša je razblažena sa 10 ml etil acetata i isprana sa 3 x 20 ml vode. Kombinovani vodeni ekstrakti su ekstrahovani sa 10 ml etil acetata i kombinovani organski ekstrakti su isprani sa 10 ml solane, sušeni (MgS04) i rastvarač uklonjen u vakumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni (silika) eluiranjm smešom dihlorometan/metanol/aq. amonijak 99/1/0.1., povećavaćuji polarnost do 95%5%0.5 Ovo je dalo jedinjenje iz naslova kao žutu gumu(16 mg, 27%). 'H NMR (CD3OD, 400 MHz) 5 0.20-0.37 (6H, 4 xd), 0.91-1.13, 1.67-1.76 i 1.94-2.09 (2H, 3 x m), 2.54-2.62 (IH, m), 2.87-2.93 i 2.99-3.05 (1 H, 2 x m), 3.61-3.74 (3H, m), 3.86-4.08 (4H, m), 4.20-4.26 (IH, m), 6.83-6.88 (IH, m), 7.11-7.44 (4H, m), 7.63-7.78 (2H, m), 8.30-8.46 (3H, m); LRMS (El<+>) 493 [MH<+>j.

Primer 10

6- K3S, 4S)- 3-( 5- hloropiridin- 2- il)- 4-{[( 3R, 4R. 5S)- 4-( 5- hloropiridin- 2- il)- 4- hidroksi-3, 5- dimetilpiperidin- l- iljkarbonil)- pirolidin- 1- ilj- 2- metilpiradizin- 3( 2H)- on

Rastvoru karboksilne kiseline iz pripreme 15 (42 mg, 0.08 mmol) u dihlorometanu (3 ml) dodan je N-etildiizopropilamin (0.04 ml, 0.25 mmol), 1-hidroksibenzotriazol (15 mg, 0.095 mmol) i l-(3-dimetilaminopropil)-3-etilkarbodiimid i smeša mešana u atmosferi azota tokom 30 minuta. Dodan je amin iz pripreme 16 i smeša mešana u atmosferi azota preko noći. Reakciona smeša je razblažcna dihlorometanom (20 ml) i isprana zasićenim NaHC03(20 ml) i solanom (20 ml). Organski slojevi su sušeni iznad MgS04, filtrirani i upareni da bi dali žutu uljastu čvrstu supstancu. Ovo je prečišćeno hromatografijom na koloni (silika) eluiranjem dihlorometanom i povećavaćuji polarnost do 95%5% dihlorometan/ etanol da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (31 mg, 67%). ]H NMR (CD3OD, 400 MHz) 5 0.36-0.6 (m, 6H), 1.18 (br, 1 H), 1.89 (br, IH), 2.16 (br, IH), 2.71 (m, IH), 3.13 (m, IH), 3.6-4.2 (s + m, 9H),4.33(d, IH), 6.89 (d, IH), 7.2-7.5 (m, 3H), 7.78-7.92 (m, 2H), 8.56 (d, 2H); LRMS (El<+>) 558 [MH<+>j.

Primeri 11 - 46

Primeri 11 - 46 su pripremljeni prema gore opisanim postupcima za primere 1 - 10, počev od odgovarajućeg piridin aldehida<1>i odgovarajućeg 4 supstituisanog 3,6-dimetilpiridin-4-ola<2>. 1. 2-Metoksipiridin-5-karbaldehid je komercijalno dostupan. Drugi aldehidi su opisani u pripremama 2, 17, 18 i 22. 2. (3R,4s,5S)-4-(5-Hloropiridin-2-il)-3,5-dimetilpiperidin-4-ol je opisan u pripremi 16. Sinteza drugih potrebnih piperidinola je opisana u publikaciji međunarodne patentne prijave br WO 2005/077935.

PRIPREME

Priprema 1

5- Hloro- 2- jodopiridin

Acetil hlorid (11.05 ml, 0.155 mol) je dodan rastvoru 2-bromo-5-hloropiridina (20.0 g, 0.103 mol) u acetonitrilu (120 ml), pa je zatim dodan natrijum jodid (23.3 g, 0.155 mol) i smeša zagrevana na refluksu sa dodatom staklenom cevi za sušenje, u toku 3 sata. Reakcija je ohlađena u ledenom kupatilu, pažljivo alkalizovana zasićenim vodenim rastvorom natrijum karbonata, pa zatim ekstrahovana etil acetatom (2 x 100 ml). Kombinovani organski slojevi su isprani zasićenim vodenim rastvorom natrijum sulfita (200 ml), sušeni (MgS04) i upareni. Ostatak tada ponovo podvrgnut identičnoj reakciji i uslovima izvođenja da bi se osigurala kompletna reakcija i ovo je dalo jedinjenje iz naslova (18.71 g, 75%) kao braon čvrstu supstancu.<l>H NMR (CDCI3, 400 MHz) S 7.30 (IH, dd), 7.65 (IH, d), 8.35 (IH, d); LRMS (APCI<+>) 240 [MH<+>]

Priprema 2

5- Hloropiridin- 2- karbaldehid

Jodid iz pripreme 2 (18.71 g, 78.1mmol) je rastvoren u letrahidrofuranu (100 ml) i ohlađen na -15 °C u atmosferi azota. Rastvor izopropil magnezijum hlorida u tetrahidrofuranu (2 M, 42.2 ml, 84.4 mmol) je tada dodan u kapima, vodeči računa da temperatura ostane ispod 0°C. Reakciona smeša je ohlađena na -15 °C, mešana 1 sat pa je dodan u kapima dimetilformamid (9.0 ml, 116 mmol), održavajući temperaturu ispod 0 °C. Reakciona smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana 1 sat pre nego što je ponovo ohlađena na 0 °C i pažljivo ugašena dodatkom u kapima 2M HC1 (100 ml). Pošto je dodavanje završeno, smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 30 min pre nego što je pH podešen na 6 - 7 dodatkom zasićenog vodenog rastvora natrijum bikarbonata. Organski slojevi su izdvojeni i vodeni sloj ekstrahovan dihlorometanom (2 x 200 ml). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (200 ml), sušeni (MgS04) i koncentrovani u rotacionom isparivaču, održavajući temperaturu ispod 30 °C, da bi se dobio sirovi proizvod kao braon ulje koje je upotrebljeno bez dodatnog prečišćavanja 'H NMR (CDC13, 400 MHz) 5 7.35 (IH, d), 7.95 (IH, d), 8.73 (IH, s), 10.02 (IH, s); LRMS (APCI<+>) 142 [MH<+>]

Priprema 3

terc- Butil ( 2E)- 3-( 5- hloropiridin- 2- il) akrilat

n-Butil litijum (2.5 M u heksanu, 34 ml, 85 mmol) dodan je u kapima rastvoru terc-butil dietifosfonoacetata (19.1 ml 81 mmol) u dietil etru (80 ml) na -78 °C u atmosferi azota i mešanje nastavljeno 20 min. Rastvor sirovog aldehida iz pripreme 2

(od 78.1 mmolajodida iz pripreme 1) u dietil etru (20 ml) je tada dodan u kapima, održavajući temperaturur ispod -65 °C. Kad je dodavanje završeno, smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature tokom 2 sata pre nego stoje pažljivo ugašena dodatkom zasićenog vodenog rastvora amonijum hlorida (200 ml). Smeša je ekstrahovana dietil etrom (2 x 150 ml) i kombinovani organski ekstrakti isprani solanom (200 ml), sušeni (MgS04) i upareni. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni (silika), eluiranjem sa pentanom povećavajući polamost do pentan/etil acetat 8:2, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (13.34 g, 74% tokom 2 stupnja) kao ulje. 'H NMR (CDC13, 400 MHz) 8 1.51 (9H, s), 6.79 (IH, d), 7.35 (IH, d), 7.52 (IH, d), 7.66 (IH, dd), 8.55 (IH, d); LRMS (APCf) 240 [MH<+>]

Priprema 4

( 2E)- 3-( 5- Hloropiridin- 2- il) akrilna kiselina so triflurosirćetne kiseline

Rastvor trifluorosirćetne kiseline (10 ml) u dihlorometanu (10 ml) je dodan u kapima ledom hlađenom rastvoru estra iz pripreme 3 (2.09 g, 8.7 mmol) u dihlorometanu (10 ml) i dobijena smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen u vakumu, dodan je toluen (10 ml) i uklonjen u vakumu, dodan je dihlorometan (10 ml) i uklonjen u vakumu, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (2.44 g, 94%) kao crvena čvrsta supstanca. 'H NMR (CD3OD, 400 MHz) 8 6.86 (1 H,

d), 7.64 (2H, m), 7.87 (IH, dd), 8.59 (IH, d); LRMS (APCf) 184 [MH<+>j.

Priprema 5

( 4S)- 4- Benzil- 3-[( 2E)- 3-( 5- hloropridin- 2- il) pro p- 2- enoill- l, 3- oksazolidin- 2- on

Rastvor kiseline iz pripreme 4 (2.44 g, 8.2 mmol) u tetrahidrofuranu (15 ml) je ohlađen na -78 °C u atmosferi azota. Dodan je u kapima trietilamin (2.85 ml, 20 mmol), pa zatim trimetilacetil hlorid (1.11 ml, 9.0 mmol), kontrolišući brzinu dodavanja tako da temperatura ostane ispod -65 °C. Smeša je tada mešana na -78 °C tokom 2 sata. Dodan je "BuLi (2.5 M u heksanu, 4.26 ml, 10.7 mmol) u kapima rastvoru (4S)-4-benzil-l,3-oksazolidin-2-ona (1.74 g, 9.8 mmol) u tetrahidrofuranu (15 ml) u atmosferi azota na -78 °C, kontrolišući brzinu dodavanja tako da temperatura ostane ispod -65 °C. Posle mešanja na -78 °C tokom 20 minuta dodan je kanilom rastvor oksazolidinon anjona mešanom rastvoru anhidrida na -78 °C. Reakcija je mešana na -78 °C pa zatim ostavljena da se polako zagreje preko noći. do sobne temperature. Reakcija je ugašena dodatkom zasićenog vodeng rastvora amonijum hlorida (30 ml) i zatim koncentrovana u vakumu da bi se uklonio tetrahidrofuran. Čvrsti talog je filtriran i ispran dietil etrom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1.52 g, 54%) kao žućkasta čvrsta supstanca. Etar kojim je ispirano je uparen do suva, pomešan sa dietiletrom i filtriran da bi se dobio dodatni proizvod (0.42 g, 15%).'H NMR (CDC13, 400 MHz) 5 2.84 (1 H, t), 3.37 (IH, d), 4.22 (2H, m), 4.78 (1 H, m), 7.2-7.4 (5H, m), 7.51 (1 H, d), 7.69 (1 H, d), 7.86 (1 H, d), 8.23 (IH, d), 8.62 (IH, s); LRMS (APCf) 343 [MH+j.

Priprema 6

( 4S)- 4- Benzil- 3- { r( 3S. 4S)- l- benzil- 4-( 5- hloropiridin- 2- il) pirolidin- 3- inkarbonil}- 1, 3-

oksazolidin- 2- on

Trifluorosirćetna kiselina (90 ul, 1.2 mmol) dodana je suspenziji oksazolidinona iz pripreme 5 (1.93 g, 5.6 mmol) u dihlorometanu (20 ml) i tada je dodan A^-benzil-^metoksimetiOtrimetilsililamin (2.3 ml, 9.0 mmol) u kapima tokom 10 minuta. Postoje dodavanje završeno, reakcija je ostavljena da se meša preko noći na sobnoj temperaturi.. Reakciona smeša je tretirana zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata (20 ml) i slojevi razdvojeni . Vodeni sloj je ekstrahovan dihloromethanom (2 x 20 ml) i kombinovani organski slojevi sušeni (MgSCU) i upareni. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni (silika), eluiranjem sa smešom etil acetat/pentan 2:8 povećavaju polarnostt do 2:3, da bi se dobio neželjeni (4S)-4-benzil-3-{[(3R,4R)-l-benzil-4-(5-hloropiridin-2-il)pirolidin-3-ilkarbonil-l,3-oksazolidin-2-on (1.16 g, 44%) kao prva komponenta eluiranja i željeni (4S)-4-benzil-3-{[(3S,4S)-l-benzil-4-(5-hloropiridin-2-il)pirolidin- 3-il]karbonil}-l,3-oksazolidin- 2-on (1.18 g, 45%) kao druga komponenta eluranja. 'H NMR (CDC13, 400 MHz) 5 2.75 (2H, m), 2.92 (1 H, m), 3.20 (3H, m), 3.27 (1 H, br), 3.68 (2H, br), 4.14 (2H, m), 4.23 (1 H, m), 4.50 (1 H, m), 4.67 (1 H, m), 7.10-7.40 (11 H, m), 7.58 (1 H, dd), 8.50 (1 H,

d); LRMS (APCf) 476 [MH<+>].

Priprema 7

Metil ( 3S, 4S)- l- benzil- 4-( 5- hloropiridin- 2- il) pirolidin- 3- karboksilat

Natrijum metoksid (664 mg, 12 mmol) je dodan rastvoru okszolidinona iz prupreme 6 (1.17 g, 2.5 mmol) i dimetil karbonata (1.03 ml, 12 mmol) u

dihlorometanu (15 ml) i reakcija mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je koncentrovana u vakumu i ostatak razdeljen između etil acetata (50 ml) i vode (30 ml). Vodeni sloj je neutralizovan dodatkom 2M HC1 (~6 ml) i zatim koncentrovan u vakumu. Ostatak je mrvljen u prisustvu acetonitrila (25 ml) i potom filtriran. Koncentrovanje filtrata dalo je (3S,4S)-l-benzil-4-(5-hloropiridin-2-ili)pirolidin-3-karboksilnu kiselinu (123 mg, 16%) kao žutu čvrstu supstancu (vidi pripremu 8 za spektroskopske podatke). Etil acetatni sloj je sušen (MgS04) i uparen. Prečišćavanje ostatka hrometografijom na koloni (silika) eluiranjem sa etil acetat/pentan 2:8, povećavajući polarnost do 2:3 dalo je jedinjenje iz naslova (371 mg, 45%) kao bezbojno ulje.<]>H NMR (CDC13, 400 MHz) 5 2.71 (1 H, t), 2.97 (1 H, t), 3.05 (2H, m), 3.23 (1 H, m), 3.63 (5H, m), 3.82 (1 H, q), 7.15-7.35 (6H, m), 7.55 (1 H, d), 8.46 (1 H, s); LRMS (APCi<+>)331 [MH<+>].

Priprema 8

( 3S, 4S)- l- Benzil- 4-( 5- hloropiridin- 2- il) pirolidin- 3- karboksilna kiselina bis

hidrohlorid

Rastvor NaOH (135 mg, 3.3 mmol) u vodi (5 ml) je dodan rastvoru estra iz pripreme 7 (371 mg, 1.1 mmol) u dioksanu (10 ml) i smeša mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Rakciona smeša je koncentrovana u vakumu, stavljena u vodu (10 m) neutralisana sa 2M HCI (~1.7 ml). Smeša je tada koncentrovana u vakumu, mrvljena u prisustvu acetonitrila (20 ml) i potom filtrirana. Filtrat je zakišeljen sa 2M etarskom HCI i koncentrovan u vakumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (290 mg, 68%) kao čvrsta supstanca. 'H NMR (CD3OD, 400 MHz) 5 3.40-4.20 (6H, m), 4.53 (2H, m), 7.40-7.60 (6H, m), 7.81 (1 H, d), 8.60 (1 H, br); LRMS (APCf) 317 [MH<+>j.

Priprema 9

( 3R, 4R, 5S)- l-{ r( 3S, 4S)- l- Benzil-4-(5-hloropiridin-2-il) pirolidin- 3- illkarbonil)- 4-( 4-fluorofenil)- 3, 5- dimetilpiperidin- 4- ol

1-Hidroksibenzotriazol (230 mg, 1.7 mmol) i l-(3-dimetilaminopropil)-3-etil-karbodiimid hidrohlorid (354 mg, 1.8 mmol) su dodani rastvoru kiseline iz pripreme 8 (522 mg, 1.5 mmol) u dihloromethanu (10 m) i trietilaminu (1.03 ml, 7.4 mmol) i smeša mešana na sobnoj temperaturi tokom 30 minuta pre nego što je dodan (3R,4s,5S)-4-(4-fluorofenil)-3,5- dimetilpiperidin-4-ol hidrohlorid (pripremljen prema US 2005/176772) (384 mg, 1.5 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći, rastvarač uklonjen u vakumu i ostatak razdeljen između etil acetata (50 ml) i zasićenog vodenog rastvora natrijum bikarbonata (50 ml). Organski sloj je ispran solanom (50 m), sušen (MgS04) i uparen. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni (silika) eluiranjem sa dihlorometanom, povećavajući polarnost do 5% metanola u dihlorometanu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (546 mg, 71%)kao ulje . 'H

NMR (CD3OD, 400 MHz) 8 0.3-0.6 (6H, 4 x d), 1.23 (1 Hl m), 1.75-1.95 (2H, m), 2.72 (1 H, t), 2.85 (1 H, m), 2.90-3.20 (3H, m), 3.45-4.05 (5H, m), 4.32 (IH, d), 7.02 (3H, m), 7.20-7.50 (7H, m), 7.80, (1 H, dd), 8.50 (1 H, d); LRMS (APCf) 522 [MH<+>].

Priprema 10

( 3R. 4R, 5S)- l-{[( 3S, 4S)- 4-( 5- Hloropiridin- 2- il) pirolidin- 3- inkarbonill- 4-( 4-fluorofenil)- 3, 5- dimetilpiperidin- 4- ol

ff'?""'\—/ T—f'"

H

1-Hloroetil hloroformat (0.3 ml, 2.8 mmol) je dodan rastvoru amida iz pripreme 9 (370 mg, 0.7 mmol) i N-etildiizopropilamina (0.27 ml, 1.6 mmol) u dihlorometanu (10 ml) i smeša mešana na refluksu tokom 3 sata. Posle hlađenja do sobne temperature rastvarač je uklonjen u vakumu i ostatak razdeljen između 10% vodenog rastvora limunske kiseline (30 ml) i dihlorometana (30 ml). Organski sloj je ispran vodom (30 ml), sušen (MgS04) i uparen. Dobijeno tamno ulje je stavljeno u metanol (10 ml) i zagrevano na refluksu tokom 3 sata. Rastvarač je uklonjen u vakumu i ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni (silika) eluiranjem sa 5% metanola u dihlorometanu, povećavajući polarnost do 10% metanola u dihlorometanu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (305 mg, 100%)kao ulje. 'H NMR (CD3OD, 400 MHz) 8 0.4-0.6 (6H, 4 xd), 1.00-1.06, 1.77- 1.82 and 1.98-2.05 (2H, 3 x m), 2.76-2.82 (1 H, m), 3.00-3.20 (2H, m), 3.40-4.10 (6H, m), 4.36 (1 H, m)7.00-7.50 (5H, m), 7.85 and 7.95 (IH, 2 x dd), 8.61 and 8.63 (IH, 2 x d); LRMS (APCI<+>) 432 [MH<+>j.

Priprema 11

Metil ( 3S, 4S)- 4-( 5- hloropiridin- 2- il) pirolidin- 3- karboksilat

1-Hloroetil hloroformat (2.33 ml, 21.4 mmol) je dodan rastvoru estra iz pripreme 7 (1.77 g, 5.35 mmol) i N-etildiizopropilamina (2.1 ml, 12 mmol) u dihlorometanu (10 ml) i smeša mešana na refluksu 3 sata. Posle hlađenja do sobne

temperature rastvarač je uklonjen u vakumu i ostatak stavljen u metanol (10 ml) i zagrevan na refluksu 16 sati. Rastvarač je uklonjen u vakumu i ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni (silika) eluiranjem sa dihlorometanom, povećavajući polarnost do 10% metanola u dihlorometanu da bi se dobila smeša željenog proizvoda i N-etildiizopropilamina kao ulje. Ulje je stavljeno u etil acetat (30 ml) i dobijeni talog filtriran. Filtrat je uklonjen u vakumu i ostatak stavljen u acetonitril (25 ml). Dobijeni talog je filtriran da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (619 mg, 48%) kao bela čvrsta supstanca. 'H NMR (CD3OD, 400 MHz) 5 3.46 (m, 1 H), 3.61-3.77 (m, 7H), 3.74 (s, 3H), 3.98 (m, 1 H), 7.42 (d. 1 H), 7.82 (dd, 1 H), 8.57 (d, 1 H); LRMS (APCI<+>) 241

[MH<+>]

Priprema 12

Metil ( 3S. 4S)- l-( 6- hloropiridazin- 3- il)- 4-( 5- hloropiridin- 2- il) pirolidin- 3- karboksilat

Rastvoru pirolidina iz pripreme 1 1 (350 mg, 1.50 mmol) u dimetilsulfoksidu (10 ml) dodan je 3,6-dihloropiridazin (330 mg, 2.20 mmol), trietilamin (0.61 ml, 4.40 mmol), and cezijum fluorid (220 mg, 1.45 mmol). Smeša je mešana na 80 °C u atmosferi azota preko noći.. Reakciona smeša je stavljena u 25 ml etil acetata i isprana sa 20 ml vode. Organski sloj je izdvojen a vodeni sloj je ponovo ekstrahovan sa dodatnih 25 ml etil acetata. Kombinobani etil acetatni ekstrakti su sušeni iznad MgS04, filtrirani i upareni da bi se dobilo bledo narandžasto ulje koje je prečišćeno hromatografijom na koloni (silika) eluiranjem sa dihlorometanom, povećavajući polarnost do 95/5 dihlorometan/metanol. Ovo je dalo jedinjenje iz naslova kao žutu čvrstu supstancu. 'H NMR (CD3OD, 400 MHz) 8 3.66 (s, IH), 3.72 (m, 1 H), 3.78 (t, 1 H), 3.96-4.12 (m, 4H), 7.04 (d, 1 H), 7.42 (m, 2H), 7.79 (d, 1 H), 8.52 (s, 1 H); LRMS (El<+>) 353 [MH<+>j.

Priprema 13

Metil ( 3S, 4S)- 4- f5- hloropiridin- 2- il)- l-( 6- okso- l, 6- dihidropiridazin- 3- il) pirolidin- 3-

karboksilat

Rastvor hloropiradizina iz pripreme 12 (803 mg, 2.27 mmol) je rastvoren u deoksigenizovanoj sirćetnoj kiselini i zagrevan na refluksu tokom 44 sati. Rastvarač je uklonjen u vakumu i dodano 15 ml metanola. Gasoviti HCI je propuštan kroz reakcionu smešu dok ona nije zasićena i smeša je mešana uz nameštenu cev za sušenje preko noći. Metanol je uklonjen u vakumu i ostatak razdeljen između DCM i 10% K2CO3. Organski sloj je izdvojen, sušen iznad MgS04, filtriran i uparen da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao svetio braon čvrsta supstanca (577 mg, 76%). ] H NMR (CD3OD, 400 MHz) 5 3.58-3.76 and 3.83-3.97 (6H, 2 X m), 3.65 (3H, s), 6.89 (IH, d), 7.31 (1H, d), 7.39 (1 H, d), 7.79 (1 H, dd), 8.52 (1 H, d); LRMS (El +) 335 [MH+j.

Priprema 14

Metil ( 3S, 4S)- 4-( 5- hloropiridin- 2- il)- l-( l - metil- 6- okso- l, 6- dihidropiridazin- 3-

il) pirolidin- 3- karboksilat

Rastvoru piridazinona iz pripreme 13 (557 mg, 1.66 mmol) u dimetilformamidu (10 ml) dodan je natrijum heksametidisilazid (IM u tetrahidrofuranu, 2.00 ml, 2.00 mmol) i litijum bromid (173 mg, 2.00 mmol). Reakcija je mešana u atmosferi azota 10 minuta pre nego što je dodan jodometan (0.083 ml, 1.30 mmol). Reakcija je mešana u atmosferi azota tokom 4 sata i zatim razdeljena između etil acetata (30 ml) i vode (30 ml). Orgasnki sloj je izdvojen, sušen iznad MgS04, filtriran i uparen da bi se dobilo braon ulje ulje koje je prečišćeno hromatografijom na koloni (silika) eluiranjem sa 100% dihlorometanom, povećavajući polarnost do 95/5 dihlorometan/metanol. Ovo je dalo jedinjenje iz naslova kao žuto ulje (500 mg, 90%). 'H NMR (CD3OD, 400 MHz) 5 3.64 (m, 9H), 3.92 (m, 3H), 6.87 (d, 1 H), 7.26 (d, IH), 7.37 (d, IH), 7.79 (dd, IH), 8.51 (s, 1 H); LRMS (El<+>) 349 [MH<+>]

Priprema 15

( 3 S, 4S)- 4-( 5- Hloropiridin- 2- il)- 1 -( 1 - metil- 6- okso- 1, 6- dihidropiridazin- 3 -

il) pirolidin- 3- carboksilna kiselina

Rastvoru estra iz pripreme 14 (500 mg, 1.43 mmol) u dioksanu (10 ml) dodan je natrijum hidroksid (172 mg, 4.30 mmol) kao rastvor u 5 ml vode. Reakcija je mešana uz nameštenu cev za sušenje preko noći. Rastvarač je uklonjen u vakumu, ostatak je stavljen u vodu, neutralisan sa 4 ekviv. 2M HCI i uparen. Ostatak je mešan sa 20 ml acetonitrila i fdtriran da bi se dobila žućkasta čvrsta supstanca (512 mg kojisadrže 3 ekviv. NaCl - 338 mg proizvoda + 174 mg NaCl). 'H NMR (CD3OD, 400 MHz) 5 3.6 (m, 2H), 3.64 (s, 3H), 3.7 (t, 1H)1 3.9 (m, 3H)1 6.88 (d, 1 H), 7.27 (d, 1 H), 7.41 (d, 1 H), 7.79 (dd, 1H)1 8.52 (s, IH); LRMS (El") 335 [MH<+>j.

Priprema 16

( 3R, 4s. 5S)- 4-( 5- hloropiridin- 2- il)- 3, 5- dimetilpiperidin- 4- ol

Stupanj A: ( 3R. 4s. 5S)- 4-( 5- hloropiridin- 2-i l)- l -( 4- metoksibenzil)- 3, 5-

dimetilpiperidin- 4- ol

Rastvor 2-bromo-5-hloropiridina (6.0 g, 31.2 mmol) u toluenu (90 ml) je ohlađen do -78 °C u atmosferi azota Dodan je n-butillitijum (2.5 M u heksanu) (15 ml, 37.5 mmol) u kapima tokom 12 minuta i smeša mešana na -78 °C 1 sat. Rastvor (3R,5S)-l-(4-metoksibenzil)-3,5- dimetilpiperidin-4-ona (pripremljenog prema publikaciji međunarodne patentne prijave br. WO 2005/077935) (6.93 g, 28.1 mmol) u toluenu (15 ml) je zatim dodan u kapima tokom 10 minuta i smeša mešana na -78 °C još 3 sata pre nego što je ostavljena da se zagreje do sobne temperature. Smeša je sipana u zasićeni amonijum hlorid (100 ml) i, posle mešanja 5 minuta, smeša je razdeljena između vode (50 ml) i etil acetata (300 ml). Organska faza je izdvojena i vodena faza ekstrahovana sa još etil acetata (2 x 300 ml). Kombinovani organski ekstrakti su sušeni iznad magnezijum sulfata, filtrirani i potom upareni do suvog da bi se dobio sirovi intermedijer. Prečišćavane hromatografijom na koloni (silika) eluiranjem sa2%metanola u dihlorometanu, povećavajući polarnost do 10% (10:1 metanol:880 amonijak) u dihlorometanu dalo je (3R,4s,5S)-4-(5-hloropiridin-2-il)-l -

(4-metoksibenzil)-3,5- dimetilpiperidin-4-ol kao narandžasto ulje (8.48 g, 83%).

Stupanj B: ( 3R, 4s, 5S)- 4-( 5- hloropiridin- 2- il)- 3, 5- dimetilpiperidin- 4- ol

Proizvod iz stupnja A (6.56 g, 18.2 mmol) je rastvoren u duhlorometanu (100 ml), dodan je trietilamin (2.02 g, 20.0 mmol) i rastvor ohlađen na 5 °C u atmosferi azota. Mešanom rastvoru dodan je u kapima hloroetilhloroformat (3.1 g, 21.9 mmol) i po završetku dodavanja smeša je mešana još 2.5 sata na sobnoj temperaturi. Smeša je tada isprana sa 10% vodenim rastvorom kalijum karbonata (3 x 50 ml), sušena iznad magnezijum sulfata i uparena do suvog. Sirovo ulje je zagrevano pod refluksom u metanolu (100 ml) tokom 2.5 sata i rastvarač uklonjen u vakumu. Ostatak je rastvoren u dihlorometanu (100 ml) i metanolu (10 ml), dodan je čvrsti kalijum karbonat (10 g) i heterogena smeša mešana 30 minuta. Čvrsti kalijum karbonat je otfiltriran i filtrat uparen do suvog. Sirovi proizvod je tada prečišćen hromatografijom na koloni (silika) eluiranjem sa 10%> metanola u dihlorometanu, povećavajući polarnost do 20% (10:1 ,etanol:880 amonijak) u dihlorometanu, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (3.37 g, 77%) kao žućkasta čvrsta supstanca.. 'H NMR (CDC13, 400 MHz) 5 0.53 (3H, s), 0.57 (s, 3H), 2.60-2.71 (m, 2H), 3.13 (q, 2H), 3.32 (d, 2H), 7.43 (d, 1 H), 7.78 (dd, 1 H), 8.50 (IH, d), 9.58 (br, 1 H), 9.84 (br, 1 H); LRMS (APCI+) 241 243 [MH<+>j.

Priprema 17

5- Fluoropridin- 2- karbaldehid

Jedinjenje iz naslova je dobijeno prema postupcima iz priprema 1 i 2, počev od 2- bromo-5-fluoropiridina. Ovo je dalo sirovi materijal koji sadrži tetrahidrofuran i dietil etar koji je upotrebljen bez daljeg prečišćvanja.. 'H NMR (CDCI3, 400 MHz) 5 7.57 (IH, dt), 8.03 (IH, dd), 8.62 (IH, d), 10.04 (1 H, s); LRMS (APCI<+>) 126 [MH<+>j.

Priprema 18

6- Formilnikotinonitril

Smeša 6-metilnikotinonitrila (10.0 g, 84.6 mmol) i joda (20.0 g, 78.8 mmol) u dimetilsulfoksidu (150 ml) je zagrevana na 150 °C u atmosferi azota tokom 20 minuta (reakcioni izvod je dobro opran hlornim krečom da bi se uklonio dimetil sulfid). Posle hlađenja do sobne temperature dodan je pažljivo zasićeni vodeni rastvor natrijum bikarbonata (200 ml) i dobijena smeša ekstrahovana toluenom (3 x 100 ml). Kombinovani organski ekstrakti su isprani solanom, (MgS04) i upareni da bi se dobio željeni proizvod kao narandžasto ulje. (5.65 g, 50%) koje je upotrebljeno bez daljeg prečišćavanja. 'H NMR (CDC13, 400 MHz) 5 8.06 (IH, d), 8.17 (IH, dd), 9.05 (IH,

d), 10.12 (IH, s).

Priprema 19

5- Metoksi- 2- metilpridin

6-Metilpiridin-3-ol (50.0 g, 0.458 mol) je dodan suspenzioji sprašenog KOH

(103 g, 1.83 mol) u dimetilsufloksidu (750 ml) i smeša ostavljena da se meša na sobnoj temperaturi u atmosferi azota tokom 1.5 sata. Tada je dodan metil jodid (30 ml, 68.3 g, 0.481 mol) u kapima, tokom 1 sata, do tamno braon smeše (egzotermno) Posle mešanja na sobnoj temperaturi tokom 1.5 sata dodana je voda (1.0 1) i smeša ekstrahovana etil acetatom (2 x 300 ml). Kombinovani organski ekstrakti su isprani solanom, sušeni

(MgS04) i upareni na 40 °C u rotacionom isparuvaču. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni (silika), eluiranjem sa pentanom, povećavajući polarnost do etil acetata, da bi se dobio isparljivi proizvod kao~1:1 smeša sa etil acetatom (40 g, -23.3 g proizvoda, 41%). 'H NMR (CDC13, 400 MHz) 5 2.45 (3H, s), 3.79 (3H, ss), 7.02 (IH, d), 7.08 (IH, dd), 8.16 (IH, d).

Priprema 20

5- Metoksi- 2- metilpiridin- l - oksid

m-Hlorobenzoeva kiselina (51.3 g, 0.297 mol) dodana je u delovima rastvoru jedinjenja iz pripreme 19 (40 g 1:1 smeše sa etil acetatom, 23.3 g, 189 mmol) u dihlorometanu (1500 ml) i smeša mešana na sobnoj temperaturi 2 sata. Reakciji je tada je dodan rastvor natrijum sulfita (45 g) u vodi (250 ml) i smeša mešana 15 minuta, na kojoj tačci je indikatorski papir skrob/KI dao negativan test za prisustvo oksidanta. Organski slojevi su razdvojeni, sušeni iznad MgS04i upareni da bi se dobila bledo žuta čvrsta supstanca (54 g) koja je bila -1:1 smeša željenog proizvoda i m-hlorobenzoeve kiseline (mCBA). Ovo je upotrebljeno u sledećem stupnju bez daljeg prečišćavanja. ]H NMR (CDC13, 400 MHz) 5 3.84 (3H, s), 6.97 (IH, dd), 7.19 (IH, d), 7.34 (IH, t, mCBA), 7.48 (IH, d, mCBA), 7.94 (IH, d, mCBA), 8.04 (IH, s, mCBA), 8.36 (IH, d).

Priprema 21

( 5- Metoksipiridin- 2- il) metanol

Anhidrid trifluorosirćetne kiseline (28.2 ml, 203 mmol) je dodan u kapima ledom hlađenom rastvoru proizvoda iz pripreme 20( - 135 mmol) u dihlorometanu (500 ml), smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana preko noći. Tlc analiza je pokazala prisustvo još uvek velike količine početnog materijala, tako da je dodan drugi deo anhidrida trifluorosirćetna kiseline (15 ml, 108 mmol) i smeša ostavljena da se meša dodatnih 27 sati. Reakcija je ugašena pažljivim dodatkom metanola (250 ml) i ostavljena da se mesa 30 minuta pre nego što je koncentrovana u vakumu. Tada je pažljivo dodan 2.5M natrijum hidroksid (100 ml) i smeša ekstrahovana dihlorometanom (4 x 100 ml). Kombinovani organski ekstrakti su sušeni (MgSCu) i upareni da bi se dobio željeni proizvod (12 g, 64%) zaprljan početnim materijalom (~15 mol%). 'H NMR (CDC13, 400 MHz) 8 3.80 (3H, s), 4.40 (IH, br), 4.66 (2H, s), 7.16 (IH, dd), 7.20 (IH, d), 8.17 (IH, d).

Priprema 22

5 - Metoksipiridin- 2- karbaldehid

MnC>2 (97.0 g, 360 mmol) je dodan u jednom delu rastvoru alkohola iz pripreme 21 (12 g, 86 mmol) u dihlorometanu (500 ml) i dobijena suspenzija mešana na sobnoj temperaturi tokom 64 sata. Reakciona smeša je filtrirana kroz Celite® i rastvarač uklonjen u vakumu da bi se dobio željeni proizvod (8.6 g, 73%>) zaprljan sa 5-metoksi-2-metilpiridin-l-oksidom (15 ml%) kao narandžasto ulje.. 'H NMR (CDCI3, 400 MHz) 8 3.93 (3H, s), 7.26 (IH, dd), 7.91 (IH, d), 8.37 (IH, d), 9.94 (IH, s).

Claims

1. Jedinjenje formule (I) gde jedan od X i Y je N a drugi je CH R je F, Cl, CN, CF3ili metoksi, uz uslov da kad Y je N, R nije F ili Cl, R<1>je fenil, 2-piridil, C3-C6cikloalkil ili CH2(C3-C6cikloalkil), gde je prstenasta grupa po izboru susptituisana sa jednim ili više supstituenata nezavisno odabranih od F, Cl, CN, metil ili metoksi, R2 je H, F ili Cl, uz uslov kad Y je N, R<2>nije F ili Cl, Het je 6-člani prsten koji sadrži jedan ili dva N atoma, pri čemu je prsten ili aromatični, ili sadrži dve dvostruke veze u prstenu i =0 supstituent, pri čemu je prsten po izboru supstituisan sa jednim ili više supstituenata nezavisno izabranih od F, Cl, OH, CN, metil, etil, NH2, NHCH3, N(CH3)2i metoksi, ili alternarivno, Het je 6-člani prsten koji sadrži jedan ili dvaN atoma fuzionisanih na položajima 3 i 4, u odnosu na pripajanje za pirolidinski prsten, sa 5-članim aromatičnim prstenom koji sadrži jedan ili dva dodatna N atoma, pri čemije 5-člani prsten po izboru supstituisan sa OH, i njihove farmaceutski prihvatljive soli, solvati (uključujućo hidrate) i prolekovi.

2. Jedinjenje prema zahtevu 1 gde X je N i Y je CH, i i njegove farmaceutski prihvatljive soli, solvati (uključujući hidrate) i prolekovi.

3. Jedinjenje prema bilo kome od zahteva 1 i 2 gde je R hlor, i njegove farmaceutski prihvatljive soli, solvati (uključujući hidrate) i prolekovi.

4. Jedinjenje prema bilo kome od zahteva 1, 2 ili 3, i njegove farmaceutski prihvatljive soli, solvati (uključujući hidrate) i prolekovi, gde R<1>je fenil po izboru supstituisan sa jednim ili više supstituenata nezavisno izabranih od F, Cl, CN, metil i metoksi.

5. Jedinjenje prema zahtevu 4, i njegove farmaceutski prihvatljive soli, solvati (uključujući hidrate) i prolekovi, gde R<1>je fenil, 4-hlorofenil ili 4-fluorofenil.

6. Jedinjenje prema bilo kome od zahteva 1, 2 ili 3 , i njegove farmaceutski prihvatljive soli, solvati (uključujući hidrate) i prolekovi, gde R<1>je C3-C6cikloalkil

7. Jedinjenje prema bilo kome od zahteva 6,, i njegove farmaceutski prihvatljive soli, solvati (uključujući hidrate) i prolekovi, gde R<1>je ciklopropil ili cikloheksil.

8. Jedinjenje prema bilo kome od zahteva 1, 2, 2, 3, 4, 5, 6 ili 7,, i njegove farmaceutski prihvatljive soli, solvati (uključujući hidrate) i prolekovi, gde R2 je H ili F.

9. Jedinjenje prema zahtevu 8, i njegove farmaceutski prihvatljive soli, solvati (uključujući hidrate) i prolekovi, gde R je H:

10. Jedinjenje prema bilo kome od zahteva 1 ,2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 ili 9, i njegove farmaceutski prihvatljive soli, solvati (uključujući hidrate) i prolekovi, gde Het je piridin-2-il, piridin-3-il, piradizin-3-il, 6-okso-l,6- dihidropiradizin-3-il, 6-okso-l,6-dihidropiridiin-3-il, 2-okso-l,2-dihidropiramidin-4- il, 6-okso-l,6-dihidropiramidin-4-il, 2-okso-l,2-dihidropiridin-4-il, imidazo[l,2- b]piradizin-6-il, [l,2,4]triazolo[4,3-b]piradizin-6-il ili 6-okso-l,6-dihidropiridin-2-il, po izboru supstituisan sa jednim ili više supstituenata nezavisno izabranih od F, Cl, OH, CN, metil, etil i metoksi.

11. Jedinjenje prema zahtevo 10, i njegove farmaceutski prihvatljive soli, solvati (uključujući hidrate) i prolekovi, gde Het je piridin-2-il, piridin-3-il, piradizin-3-il ili 6-okso-1,6- dihidropiradizin-3-il, po izboru supstituisan sa jednim ili više supstituenata nezavisno izabranih od OH, CN, F, metil, etil i metoksi.

12. Jedinjenje prema zahtevu 11, i njegove farmaceutski prihvatljive soli, solvati (uključujući hidrate) i prolekovi, gde Het je piridin-2-il ili piradizin -2-il, od kojih je svaki supstituisan u para položaju u odnosu na vezu sa pirolidinskom grupom , sa OH, CN, ili metoksi.

13. Jedinjenje prema zahtevu 12, i njegove farmaceutski prihvatljive soli, solvati (uključujući hidrate) i prolekovi, gde Het je piridazin-3-il supstituisan u para položaju u odnosu na vezu sa pirolidinskom grupom , sa OH, CN, ili metoksi.

14. Jedinjenje prema zahtevu 12 odabrano od: 6-[(3S,4S)-3-(5-hlorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-(4-fluorfenil)-4-hidroksi-3,5-dimetilpiperidin-1-iljkarbonil} pirolidin-1 -il]piridazin-3-karbonitril; 6-[(3S,4S)-3-(5-hlorpiridin-2-iI)-4-{[(3R,4R,5S)-4-hidroksi-3,5-dimetil-4-fenilpiperidin-1-iljkarbonil }pirolidin-l-iljpirida2ine-3-karbonitril; 6-[(3S,4S)-3-(5-hlorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-hidroksi-3,5-dimetil-4-piridin-2- ilpiperidin-l-il]karbonil}pirlidin-l-il]piridazin-3-karbonitril; 6-[(3S,4S)-3-(5-hlorpiridin-2-il)-4-{[(3R(4R,5S)-4-hidroksi-3,5-dimetil-4-fenilpiperidin- 1- il]karbonil}pirolidin-l -il]piridazin-3(2H)-on; 6-[(3S,4S)-3-(5-hlorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-hidroksi-3,5-dimetil-4-fenilpiperidin-1- iljkarbonil}pirolidin-1 -il]-2-metilpiridazin-3(2H)-on; 6-[(3S,4S)-3-{[(3R,4R,5S)-4-(4-hlorfenil)-4-hidroksi-3,5-dimetilpiperidin-l-i 1] karboni I} -4-(5- hlorpiridin-2-il)pirolidin-l-il]-2-metilpiridazin-3(2H)-on; 6-[(3S,4S)-3-(5-hlorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-(5-hlorpiridin-2-il)-4-hidroksi-3 5- dimetilpiperidin-l-il]karbonil}pirolidin-1-il]-2-metilpiridazin-3(2H)-on; 6-[(3S,4S)-3-(5-hIorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-(3,4-difluorfenil)-4-hidroksi-3,5- dimetilpiperidin- 1 -iljkarbonil}pirolidin-l -il]-2-metilpiridazin-3(2H)-on; 6-[(3S)4S)-3-(5-hlorpiridin-2-il)-4-{[(3R>4R,5S)-4-hidroksi-4-(4-metoksifenil)-3,5-dimetilpiperidin- 1 -il]karbonil}pirolidin-l -il]-2-metilpiridazln-3(2H)-on; 6-[(3S,4S)-3-(5-chk>ropiridin-2-ii)-4-{f(3R,4R,5S)-4-cikloheksil-4-hidroksi-3,5-dimetilpiperidin-1-25 iljkarbonil}pirolidin-1 -il]-2-metilpiridazin-3(2H)-on; (3R,4R,5S)-l-{[(3S,4S)-l-(6-hlorpiridazin-3-il)-4-(5-hlorpiridin-2-il)pirolidin-3-il]karbonil}-4-(4- fluorfenil)-3,5-dimetilpiperidin-4-ol; (3R,4R,5S)-H[(3S,4S)-4-(5-hlorpiridin-2-il)-l-(6-metoksipiridazin-3-il)pirolidin-3-il]karbonil}-4- ciklopropil-3,5-dimetilpiperidin-4-ol; (3R,4R,5S)-l-{[(3S,4S)-4-(5-hlorpirldin-2-il)-l-(5-fluorpiridin-3-il)pirolidin-3-il]karbonil}-4-(4- fluorfenil)-3,5-dimetiIpiperidin-4-ol; 6-[(3S,4S)-3-(5-hlorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-(4-fluorfenil)-4-hidroksi-3,5-dimetilpiperidin-1- iljkarbonil}pirolidin-l-il]nikotinonitril; 6-[(3S.4S)-3-{[(3R,4R,5S)-4-(4-fluorfenil)-4-hidroksi-35-dimetilpiperidin-l-iljkarbonil}-4-(5-fluoropiridin-2-i0pirolidin-l -iljpiridazin-3-karbonitril; 6-[(3S,4S)-3-(5-fluorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-hidroksi-3,5-dimetil-4-fenilpiperidin-1- iljkarbonil}pirolidin-l-iljpiridazin-3-karbonitril; 6-[(3S,4S)-3-{[(3R,4R,5S)-4-(4-hlorfenil)-4-hidroksi-3,5-dimethi|piperidin-l-il]karbonil}-4-(5- fluorpiridin-2-il)pirolidin-l-il]piridaane-3-karbonitril; 6-[(3S,4S)-3-{[(3R,4R,5S)-4-(4-hlorfenil)-4-hidroksi-3,5-dimetilpiperidin-l-iljkarbonil}- 4-(5- fluorpiridin-2-il)pirolidin-l-il]piridazin-3(2H)-on; 6-[(3S,4S)-3-(5-cijanopiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-(4-fluorfenil)-4-hidroksi-3,5-dimetilpiperidin-l-il]karbonil}pirolidin-l-iljpiridazin-3-karbonitril; 6-[(3S,4R)-3-{[(3R,4R,5S)-4-(4-fluorfenil)-4-hidroksi-3,5-dimetilpiperidin-l-iljkarbonil}-4- (6- metoksipiridin-3-il)pirolidin-l-il]piridazin-3-karbonitril; 6-[(3S,4S)-3-{I(3R4R5S)-4-(4-fluorfenil)-4-hidroksi-3,5-dimetilpiperidin-l-iljkarbonil}-4-(5- metoksipiridin-2-il)pirolidin-l-il]piridazin-3-karbonitriI; (3R,4R,5S)-4-(4-fluorfenil)-l-{[(3S4R)-l-(5-fluorpiridin-3-il)-4-(6-metoksipiridin-3-il)pirolidin-3- il]lkarbonil}-3,5-dimetilpiperidin-4-ol; (3R,4R,5S)-l-{[(3S,4S)-4-(5-hlorpiridin-2-il)-l-piridazin-3-ilpirolidin-3-iljkarbonil}- 4-(4- fluorfenil)-3,5-dimetilpiperidin-4-ol; 6-[(3S,4S)-3-(5-hlorpiridin-2-il)4-{[(3R,4R,5S)-4-(4-fluorfenil)-4-hidroksi-3,5-dimetilpiperidin-1- iljkarbonil}pirolidin- l-il]piridazin-3(2H)-on; 6-[(3S,4S)-3-(5-hloropiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-(4-fluorfenil)-4-hidroksi-3,5-dinietilplperidin-1- il]karbonil}pirolidin-l-il]-2-metilpiridazin-3(2H)-on; (3R,4R,5 S)-1 - {[(3 S,4S)-4-(5-hIorpiridin-2-il)-1 -[ 1,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-6-ilpirolidin-3- il]karbonil}-4-(4-fluorfenil)-3,5-dimetilpiperidin-4-ol; (3R,4R,5S)-l-{[(3S,4S)-4-(5-hlorpiridin-2-il)-l-imidazo[l,2-b]piridazin-6-ilpirolidin-3-iI]karbonil}-4- (4-fluorfenil)-3,5-dimetilpiperidin-4-ol; 4-[(3S,4S)-3-(5-hlorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-(4-fluorfenil)-4-hidroksi-3,5-dimetilpiperidin-1- il]karbonil}pirolidin-l-il]pirimidin-2(l H)-on; 4-[(3S,4S)-3-(5-hlorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-(4-fluorfenil)-4-hidroksi-3,5-dimetilpiperidin-1- il]karbonil}pirolidin-l -il]-l -metilpirimidin-2( 1 H)-on; (3R,4R,5S)-l-{[(3S,4S)-4-(5-hlooriridin-2-il)-l-(6-metoksipirldazin-3-il)pirolidin-3-il]karbonil}-4-(4- fluorfenil)-3,5-dimetilpiperidin-4-ol; 6-[(3S,4S)-3-(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R>5S)-4-(4-fluorfenil)-4-hidroksi-35-dimetilpiperidin-l-il]karbonil}pirolidin-l-il]piridazin-3-karbonitril; 6-[(3S,4S)-3-(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-(4-fluorfenil)-4-hidroksi-3,5-dimetilpiperldin-1 -il]karbonil}pirolidin-l -il]piridazin-3(2H)-on; 6-[(3S,4S)-3-(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)-4-{[(3R)4R,5S)-4-(4-fluorfenil)-4-hidroksi-3,5 - dimetilpiperidin-1 -il]karbonil}pirolidin-l -il]-2-metilpiridazin-3(2H)-on; 6-[(3S,4S)-3-(3,5-dilfuorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-(4-fluorfenil)-4-hidroksi-3,5-dimetilpiperidin- 1 -il]karbonil}pirolidin-l -il]piridazin-3-karbonitril; 6-{(3S,4S)-3-(3,5-difluorpirldin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-(4-nuorfenil)-4-hidroksi-3,5-dimetilpiperidin- 1 -il]karbonil}pirolidin-l -il]piridazin-3(2H)-on; 6-[(3S,4S)-3-(3,5-difluorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-(4-fluorfenil)-4-hidroksi-3,5-dimetilpiperidin- 1 -il]karbonil}pirolidin-l -il]-2-metilpiridazin-3(2H)-on; 6-[(3S,4S)-3-{[(3R,4R,5S)-4-(4-hlorfenil)-4-hidroksi-3,5-dimetilpiperidin-l-il]karbonil}-4-(5-hlorpiridin-2-il]pirolidin-l-il]piridazin-3-karbonitril; 6-[(3S,4S)-3-(5-hlorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R5S)-4-(3,4-difluorfenil)-4-hidroksi-3,5-dimetilplperidin- l-il]karbonil}pirolidin-l -il]piridazin-3-karbonitril; 6-[(3S,4S)-3-{[(3R,4R,5S)-4-(4-hlorfenil)-4-hidroksi-3,5-dimetiIpiperidin-l-il]karbonil}- 4-(5-hlorpiridin-2-il)pirolidin-l-il]piridazin-3(2H)-on; 6-[(3S,4S)-3-(5-hlorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R^ dimetilpiperidin-1 -il]karbonil}pirolidin-l -il]piridazin-3(2H)-on; i njihove farmaceutski prihvatljive soli, solvati (uključujući hidrate), i prolekovi.

15. Jedinjenje prema zahtevu 14 odabrano od: 6-[(3S,4S)-3-(5-hlorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-(4-fluorfenil)-4-hidroksi-3,5-dimetilpiperidin-1- il]karbonil}piroiidin-l-i!Jpiridazin-3-karbonitril; 6-[(3S,4S)-3-(5-hlorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-hidroksi-3,5-dimetil-4-fenilpiperidin-1- il]karbonil}pirolidin-l-il]piridazin-3-karbonitril; 6-[(3S,4S)-3-(5-hlorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-hidroksi-3,5-dimetil-4-fenilpiperidin-1- iljkarbonil}pirolidin-1-il]piridazin-3(2H)-on; 6-[(3S,4S)-3-(5-hlorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-hidroksi-3,5-dimetil4-fenilpiperidin-1- il]karbonil}pirolidin-i -ilj-2-metilpiridazin-3(2H)-on; 6-[(3S,4S)-3-{[(3R,4R,5S)-4-(4-hlorfenil)-4-hidroksi-3,5-dimetilpiperidin-l-iljkarbonil}-4-(5- hlorpiridin-2-il)pirolidin-l-ilj-2-metilpiridazin-3(2H)-on; 6-[(3S,4S)-3-(5-hlorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-(5-hlorpiridin-2-il)-4-hidroksi-3,5-dimetilpiperidin-l-il]karbonil}pirolidin-l-il]-2-metilpiridazin-3(2H)-on; 6-[(3S,4S)-3-(5-hlorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-(3,4-difluorfenil)-4-hidroksi-3,5-dimetilpiperidin- 1 -iljkarbonil}pirolidin-l -il]-2-metilpiridazin-3(2H)-on; (3R,4R,5S)-l-{[(3S,4S)-4-(5-hlorpiridin-2-il)-l-piridazin-3-ilpirolidin-3-il]karbonil}-4-(4- fluorfenil)-3,5-dimetilpiperidin-4-ol; 6-[(3S,4S)-3-(5-hlorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-(4-fluorfeniI)-4-hidroksi-3,5-dimetilpiperidin-1- iljkarbonil}pirolidin-1 -il]piridazin-3(2H)-on; 6-[(3S,4S)-3-(5-hlorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-(4-fluorfenil)-4-hidroksi-3,5-dimetilpiperidin-1- iljkarbonil}pirolidin-l-il]-2-metilpiridazin-3(2H)-on; (3R,4R,5S)-1 -{[(3S,4S)-4-(5-hlorpiridin-2-il)-l-[l,2,4]triazolo[4,3-b]piridazin-6-ilpirolidin-3- iljkarbonil}4-(4-fluorfenil)-3,5-dimetilpiperidin-4-ol; (3R,4R,5S)-1 -{[(3S,4S)-4-(5-hlorpiridin-2-il)-l -imidazo[l,2-b]piridazin-6-ilpirolidin-3-il]karbonil}-4- (4-fluorfenil)-3,5-dimetilpiperidin-4-ol; 4-[(3S,4S)-3-(5-hlorpiridin-2-i!)-4-{[(3R,4R,5S)-4-(4-fluorfenil)4-hidroksi-3,5-dimetilpiperidin-1- il]karbonil}pirolidin-l -il]pirimidin-2(l H)-on; 4-[(3S,4S)-3-(5-hlorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5SH-(4-fluorfenil)-4-hidroksi-3,5-dimetilpiperidin-1- iljkarbonil}pirolidin-1-il]-l-metiIpirimidin-2(lH)-on; 6-[(3S,4S)-3-(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R5S)-4-(4-fluorfenil)-4-hidroksi-3,5-dimetilpiperidin-1-iljkarbonil} pirolidin-l-il]piridazin-3-karbonitril; 6-[(3S,4S)-3-(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-(4-fluorfenil)-4-hidroksi-3,5-dimetilpiperidin-1-iljkarbonil} pirolidin-l-il]piridazin-3(2H)-on; 6-[(3S,4S)-3-(5-hlor-3-fluorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-(4-fluorfenil)-4-hidroksi- 3,5- dimetilpiperidin-l-il]karbonil}pirolidin-i-il]-2-metilpiridazin-3(2H)-on; 6-[(3S,4S)-3-(3,5-difluorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-(441uorofenil)-4-hidroksi-3,5-dimetilpiperidin-1 -iljkarbonil}pirolidin-l -il]piridazin-3-karbonitril; 6-[(3S,4S)-3-(3,5-difluorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-(4-fluorfenil)-4-hidroksi-3,5-dimetilpiperidin-1 -iljkarbonil} pirolidin-1 -il]piridazin-3(2H)-on; 6-[(3S,4S)-3-(3,5-dilfuorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-(4-fluorfenil)-4-hidroksi-3,5-dimetilpiperidin-1 -iljkarbonil} pirolidin-1 -ilj-2-metilpiridazin-3(2H)-on; 6-[(3S,4S)-3-{[(3R,4R,5S)-4-(4-hlorfenil)-4-hidroksi-3,5-dimetilpipcridin-i-il]karbonil}-4- (5-hlorpiridin-2-il)pirolidin-l-iljpiridazin-3-karbonitril; 6-[(3S,4S)-3-(5-hlorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-(3,4-difluorfenil)-4-hidroksi-3,5-dimetilpiperidin-1 -il]karbonil}pirolidin-l -il]piridazin-3-karbonitril; 6-[(3S,4S)-3-{[(3R,4R,5S)-4-(4-hlorfenil)-4-hidroksi-3,5-dimetilpiperidin-l-il]karbonil}-4- (5-hlorpiridin-2-il)pirolidin-l-il]piridazin-3(2H)-on; 6-[(3S,4S)-3-(5-hlorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-(3,4-dlfluorfenil)-4-hidroksi-3,5-dimetilpiperidin-1 -iljkarboniI}pirolidin-l -il]piridazin-3(2H)-on; i njihove farmaceutski prihvatljive soli, solvati (uključujući hidrate) i prolekovi.

16. Jedinjenje prema zahtevu 15 odabrano od: 6-[(3S,4S)-3-(5-hlorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-(4-fluorfenil)-4-hidroksi-3,5-dimetilpiperidin-1- il]karbonil}pirolidin-l-il]piridazin-3-karbonitril; 6-[(3S,4S)-3-{[(3R,4R,5S)-4-(4-hlorfenil)-4-hidroksi-3,5-dimetilpiperidin-l-il]karbonil}-4-(5- hlorpiridin-2-il)pirolidin-l-il]-2-metilpiridazin-3(2H)-on; 6-[(3S,4S)-3-(5-hlorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-(5-hlorpiridin-2-il)-4-hidroksi-35-dimethiipiperidin-l-il]karbonil}pirolidin-l-il]-2-metilpiridazin-3(2H)-on; 6-[(3S,4S)-3-(5-hlorpiriđin-2-il)-4-{t(3R,4R,5S)-4-(3,4-difluorfenil)-4-hi dimetilpiperidin- 1 -il]karbonil}pirolidin-l -il]-2-metilpiridazin-3(2H)-on; 6-[(3S,4S)-3-(5-hlorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-(4-fluorfenil)-4-hidroksi-3,5-dimetilpiperidin-1- il]karbonil}pirolidin-l-il]piridazin-3(2H)-on; 6-[(3S,4S)-3-(5-hlorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-(4-fluorfenil)-4-hidroksi-3,5 dimetilpiperidin-1- il]karbonil}pirolidin-l -il]-2-metilpiridazin-3(2H)-on; 6-[(3S,4S)-3-{[(3R,4R,5S)-4-(4-hlorfenil)-4-hidroksi-3,5-dimetilpiperldin-l-il]karbonil}-4-(5- hlorpiridin-2-il)pirolidin-l-il]piridazin-3-karbonitril; 6-[(3S,4S)-3-(5-hlorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-(3,4-difluorfenil)-4-hidroksi-3,5-dimetilpiperidin-1 -il]karbonil}pirolidin-l -il]piridazin-3-karbonitril; 6-[(3S,4S)-3-{[(3R,4R,5S)-4-(4-hlorfenil)4-hidroksi-3,5-dimetilpiperidin-l-il]karbonil}-4-(5- hlorpiridin-2-il)pirolidin-l -il]piridazin-3(2H)-on; 6-[(3S,4S)-3-(5-hlorpiridin-2-il)-4-{[(3R,4R,5S)-4-(3,4-difluorfenil)-4-hidroksi-3,5-dimetilpiperidin-1 -il]karbonil}pirolidin-l -il]piridazin-3(2H)-on; i njihove farmaceutski prihvatljive soli, solvati (uključujući hidrate) i prolekovi.

17. Farmaceutska kompozicija naznačena time što sadrži jedinjenje prema bilo kome od zateva 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, ili 16, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, solvat (uključujući hidrat) ili prolek, i farmaceutski prihvatljiv razblaživač, nosač ili pomoćno sredstvo

18. Jedinjenje prema bilo kome od zateva 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, ili 16, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, solvat (uključujući hidrat) i prolek, za upotrebu kao lek.

19. Jedinjenje prema bilo kome od zateva 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, ili 16, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, solvat (uključujući hidrat) i prolek, za upotrebu kao lek za lečenje poremećaja koji bi imao benefit od agonizmaMC4.

20. Jedinjenje prema bilo kome od zateva 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, ili 16, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, solvat (uključujući hidrat) i prolek, za upotrebu kao lek za lečenje stanja koji bi imao benefit od lečenja sa agonistom MC4 receptora, kao stoje seksualna disfunkcija, gojaznost, dijabetes ili urološko stanje.

21. Postupak za lečenje poremećaja koji koji bi imao benefit od agonizma MC4 receptora koji sadrži administraciju terapeutski efektivne količine jedinjenja, soli solvata ili proleka prema bilo kome od zateva 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14,

15, ili 16, ili njihova farmaceutski prihvatljiva so, solvat (uključujući hidrat) i prolek, ili njihova farmaceutska kompozicija, pacijentu kojima su potrebni.

22. Postupak prema zahtevu 21, gde je poremećaj seksualna disfunkcija, gojaznost, diejbetcs ili urološko stanje.

23. Jedinjenje, so, solvat, prolek, proces, postupak lečenja, farmaceutska kompozicija, u osnovi kako je ovde opisano.