RS20080141A

RS20080141A - Inhibitori enzima hiv integraze

Info

Publication number: RS20080141A
Application number: RSP-2008/0141A
Authority: RS
Inventors: Klaus Ruprecht Dress; Ted William Johnson; Steven Paul Tanis; Michael Bruno Plewe; Huichun Zhu
Original assignee: Pfizer Products Inc.,
Priority date: 2005-10-07
Filing date: 2006-09-25
Publication date: 2009-07-15
Also published as: AP2008004400A0; CR9859A; NL2000255A1; EA200800758A1; TW200800219A; IL189939A0; MA29855B1; UY29843A1; PE20070494A1; JP2009511463A; AR061398A1; KR20080042171A; EP1934220A1; WO2007042883A1; US20070099915A1; AU2006300926A1; NO20081230L; SV2009002864A; BRPI0616657A2; CA2623506A1

Abstract

Ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenja formule (I), i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvate, na njihovu sintezu i na njihovu upotrebu kao modulatora ili inhibitora enzima integraze humanog virusa imunodeficitarnosti ("HIV").

Description

INHIBITORI ENZIMA HIV INTEGRAZE

Ovu prijavu štiti prioritet dokumenata United States Patent Application No. 60/724,484, podnet 7. oktobra 2005, No. 60/730/701, podnet 26. oktobra 2005, No. 60/761,605, podnet 24. januara 2006, No. 60/823,954, podnet 30. avgusta 2006 i No. 60/826,379, podnet 20 septembra 2006, koji su svi ovde priključeni kroz ovaj citat.

OBLAST

Ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenja i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvate, na njihovu sintezu i na njihovu upotrebu kao modulatora ili inhibitora enzima integraze virusa humane imunodeficitarnosti "HIV" (od engl. Human Immunodeficiencv Virus). Jedinjenja iz ovog pronalaska su korisna za modulisanje (npr. inhibiciju) aktivnosti enzima HIV integraze i za tretiranje bolesti ili stanja posredovanih sa HIV, kao što su na primer, sindrom stečene imunodeficitarnosti "AIDS" (od engl. Acquired ImmunoDeficiencv Svndrom) i kompleksa povezanog sa AIDS, "ARC" (od engl. AIDS Related Complex).

OSNOVA

Retrovirus, označen kao "virus humane imunodeficitarnosti" ili HIV, je etiološki agens jedne kompleksne bolesti koja progresivno uništava imuno sistem. Ova bolest je poznata kao sindrom stečene imunodeficitarnosti ili AIDS. AIDS i druge bolesti izazvane sa HIV se teško leče zbog svojstva HIV da se brzo replicira, da mutira i da stiče otpornost prema lekovima. Da bi se nakon infekcije usporila proliferacija virusa, tretman AIDS i drugih bolesti izazvanih sa HIV je usredsređen na inhibiranje replikacije HIV.

Pošto je HIV retrovirus, pa stoga kodira spiralu RNK u pozitivnom smislu, njegov mehanizam replikacije se zasniva na konverziji RNK virusa u DNK virus, pa zatim na ugrađivanju virusne DNK u genom ćelije domaćina. Replikacija HIV se zasniva na tri enzima konsekutivno kodirana sa HIV: na reversnoj transkriptazi (RT), proteazi i integrazi.

Posle infekcije sa HIV, čestice jezgra retrovirusa se vezuju za specifične receptore ćelije i stiču mogućnost ulaska u citoplazmu ćelije domaćina. Kada se nađu u citoplazmi, virusna RT katalizuje reversnu transkripciju virusne ssRNK uz nastajanje virusnih hibrida RNK-DNK. Spirala RNK iz ovog hibrida se zatim delimično razgrađuje, pa se sintetizuje sekundarna spirala DNK, što dovodi do virusne dsDNK. Integraza, koju usmeravaju proteini virusa i ćelije, zatim transportuje ovu virusnu dsDNK u jezgro ćelije domaćina, kao komponntu pred-integracionog kompleksa (PIC). Pored toga, integraza obezbeđuje permanentno umetanje, tj. integraciju, virusne dsDNK u genom ćelije domaćina, koji za uzvrat, obezbeđuje pristup virusu u mehanizam ćelije domaćina za ekspresiju gena. Posle integracije, transkripcija i translacija stvaraju prekursorske proteine virusa.

Ključni korak u replikaciji HIV, ubacivanje virusne dsDNK u genom ćelije domaćina, smatra se da je posredovan integrazom, u najmanje tri, a moguće je i u četiri, koraka: (1) sastavljanje provirusne DNK; (2) obrada kraja 3', što izaziva sastavljanje sPIC; (3) pripajanje kraja 3' ili transfer spirale DNK, tj. integracija; i (4) popunjavanje šupljine, funkcija popravke. Videti na primer, Goldgur, Y. et al.,PNAS,96(23), 13040-13043 (Nov. 1999); Savasith, K. et al.,Experi Opin. Ther. Targets,5(4), 443-464 (2001); Young, S.D.,Curr. Opin. Drug Disc & Devel., 4(4),402-410 (2001); VVal, J.S. et al.,J. Med. Chem.43( 26), 4923-4926 (2000); Debvser, Y. et al., "Assavs for the Evaluation of HIV-1 Integrase inhibitors",izMethods in Molecular Biology,160, 139-155; Schen, C.H. (uredn.), Humana Press Inc., Totovva, N.J. (2001); i Hazida, D. et al.,Drug Design and Disc,13, 17-24 (1997).

Danas se AIDS i druge bolesti izazvane sa HIV tretiraju sa "HIV koktelom", koji sadrži više lekova, uključujući inhibitore RT i proteaze. Međutim, brojni sporedni efekti i brz ulazak u rezistentnost prema leku, ograničavaju sposobnost inhibitora RT i proteaze da se bezbedno i efikasno tretira AIDS i druge bolesti izazvane sa HIV. Zbog nedostataka inhibitora RT i proteaze, postoji potreba za drugim mehanizmom preko koga se replikacija HIV može inhibirati. Integracija, pa stoga integraza, virusno kodiran enzim bez duplikata sisara, predstavlja logičnu alternativu. Videti npr. Wal, J.S. et al.,J. Med. Chem.,43, 4923-4926 (2000); Grobler, J. et al.,PNAS,99, 6661-6666 (2002); Pais, G.C.G. et al.,J. Med. Chem. 45,3184-3194 (2002); Young, S.D:,Curr. Opin. Drug Disc. & Devel.,4( 4),402-410 (2001); Godvin, CG. et al.,J. Med. Chem.,45,3184-3194 (2002) i Young, S.D. et al., "L-870,810: Discovery of Potent HIV Integrase Inhibitor with Potential Clinical Utilitv", Poster prikazan na XIV International AIDS Conference, Barcelona (7-12. jul, 2002). Konačno, nedavno je objavljeno da jedinjenje L-000870810, inhibior integraze HIV, pokazuje kliničku efikasnost u tretmanu pacijenata inficiranih sa HIV (S. Little, et al., "Antiretroviral Effect of L-000870810, a Novel HIV-1 Integase Inhibitor, in HIV-1 Infected Patients", 12th Conference on Retriviruses and Opportunistic Infections, Februar 2005, Abstrakt broj 161).

Dakle, postoji potreba za inhibitorima HIV, određenije, za inhibitorima integraze, a još određenije, za inhibitorima transfera spirale u tretiranju AIDS i bolesti izazvanih sa HIV. Pronađeni agensi, koji se ovde opisuju, su novi, snažni i selektivni inhibitori HlV-integraze, a još određenije, inhibitori transfera spirale, visoke antivirusne aktivnosti.

PREGLED

Ovaj pronalazak daje jedinjenja formule (I),

gde su:

R<1>je vodonik, CrC8alkil, C2-C8alkenil ili Ci-C8heteroalkil, gde pomenute Ci-C8alkil, C2-C8alkenil ili CrC8heteroalkil grupe mogu opciono biti supstituisane sa najmanje jednim supstituentom koji se nezavisno bira između: halo, -OR12a, -N(R12aR12b), -C(0)N(R12aR12b), -NR12aC(0)N(R12aR12b),-NR<12a>C(0)R<12a>, -NR<12a>C(NR<12a>)N(R<12a>R<12b>),-SR<12a>,-S(0)R<12a>, -S(0)2R<12a>, -S(0)2N(R<12a>R<12b>), CrC8alkil, C6-C14aril, C3-C8cikloalkil i C2-Cgheteroaril, gde su pomenute CrC8alkil, C6-C14aril, C3-C8cikloalkil i C2-Cgheteroaril grupe opciono supstituisane sa najmanje jednim supstituentom koji se nezavisno bira između halo, -C(R<1>2aR<12b>R12c), -OH i -Ci-C6alkoksi; R<2>je vodonik ili d-C8alkil; R<3>je vodonik, halogen, -CN, CrC8alkil, -(CR<7>R<8>),NR<9>R<10>, -S(0)2NR<9>R<10>, -C(0)NR<9>R<10>, Ci-C8heteroalkil, C6-Ci4aril ili C2-C9heteroaril, gde su pomenute Ci-C8heteroalkil, C6-Ci4aril ili C2-Cgheteroaril grupe opciono supstituisane sa najmanje jednim R<11>;

Z je -(CR<4>R<4>)n-, -C(R<4>)=C(R<4>)-, -C(R<4>)=C(R<4>)-(CR<4>R<4>)n-,

-(CR<4>R<4>)n-C(R<4>)<=>C(R<4>)- ili -(CR<4>R<4>)n-C(R<4>)<=>C(R<4>)-(CR<4>R<4>)n-; a

R<4>svaki nezavisno, bira se između vodonik, halo, d-C8heteroalkil, CrCsalkil, C3-C8cikloalkil, C6-Ci4aril ili C2-Cgheterociklil i C2-C9heteroaril, gde su pomenute CrC8alkil, C3-C8cikloalkil, C6-Ci4aril ili C2-C9heterociklil i C2-C9heteroaril grupe opciono supstituisane sa najmanje jednim R<13>;

R<5>je vodonik, Ci-C8heteroalkil, C6-Ci4aril ili C2-C8alkenil ili CrC8alkil, gde je pomenuti CrC8alkil opciono supstituisan sa najmanje jednom C3-C8cikloalkil ili C6-Ci4aril grupom;

R<6>je vodonik;

R<7>i R<8>, svaki od njih može biti isti ili različit, a nezavisno se bira između vodonik i d-C8alkil;

R<9>i R<10>, svaki od njih može biti isti ili različit, a nezavisno se bira između vodonik, C3-C8cikloalkil, C2-C9heterociklil i d-C8alkil, gde pomenuti CrC8alkil može opciono biti supstituisan sa najmanje jednom C2-C9heterociklil, C2-C9heteroaril, halo ili C6-C14aril grupom, a gde pomenuta C6-C14aril grupa može opciono biti supstituisana sa najmanje jednom Ci-C8ili halo grupom; ili

R9 i R<10>, zajedno sa atomom azota za koji su vezani, formiraju C2-C9heterociklil ili C2-C9heteroaril grupu, od kojih svaka može opciono biti supstituisana sa najmanje jednom R<13>grupom;

R<11>je halogen, C3-C8cikloalkil, Ci_C8heteroalkil, C2-Cgheterociklil, C6-Ci4aril ili C2-Cgheteroaril, od kojih svaki može biti opciono supstituisan sa najmanje jednim supstituentom koji se nezavisno bira između CrC8alkil, C6-C14aril, C2-C9heteroaril, -CF3, -COR<12a>, -C02R12a i -OR12a;

Ri2aR<i2b>jR<12C>>svaki od njjh može bjti jstj ju razijčjt, a nezavisno se biraju između vodonik i d-C8alkil i okso; ili

Ri2ajpi2b zajec|no sa atomom azota za koji su vezani, mogu da formiraju C2-C9heterociklil grupu;

R<13>, svaki nezavisno, bira se između halo, CrC8alkil, -(CR<7>R8)tOR<7>, -C(0)R<12a>, -S(0)2R<7>, -(CR<7>R<8>)zC(0)NR<12a>R<12b>, -NR<12a>R12bi-CF3;

t je ceo broj od 1 do 3;

n, svaki može biti isti i različit, a nezavisno se bira, predstavljajući ceo broj od 1 do 4;

z, svaki može biti isti i različit, a nezavisno se bira, predstavljajući 0, 1 ili 2; ili

njegova farmaceutski prihvatljiva so ili solvat, pod uslovom da R<5>nije vodonik kada Z predstavlja -(CH2)-, R<1>predstavlja 2,4-difluorobenzil, aR<2>, R<3>iR<6>su vodonik.

Ovde se daje i bilo koje od gornjih jedinjenja gde R<9>i R<10>, zajedno sa atomomazota za koji su vezani, formiraju C2-C9heterociklil grupu, koja sadrži 4 atoma ugljenika i atom azota; ili gde R<9>i R<10>, zajedno sa atomom azota za koji su vezani, formiraju C2-C9heterociklil grupu, koja sadrži 4 atoma ugljenika i 2 atoma azota; ili gde R<9>i R<10>, zajedno sa atomom azota za koji su vezani, formiraju C2-C9heterociklil grupu, koja sadrži 4 atoma ugljenika, atom azota i atom kiseonika, pod uslovom da pomenuti atom azota i pomenuti atom kiseonika nisu vezani jedan za drugi; ili gde R<9>i R<10>, zajedno sa atomom azota za koji su vezani, formiraju C2-C9heterociklil grupu, koja sadrži 4 atoma ugljenika, atom azota i atom sumpora; ili gde R<9>i R<10>, zajedno sa atomom azota za koji su vezani, formiraju C2-C9heterociklil grupu, koja sadrži 4 atoma ugljenika, atom azota i atom oksidisanog sumpora; ili gde R<9>i R<10>, zajedno sa atomom azota za koji su vezani, formiraju C2-C9heterociklil grupu, koja sadrži 3 atoma ugljenika i 3 atoma azota.

Ovde se daje još i bilo koje od gornjih jedinjenja gdeR9 i R<10>, zajedno sa atomom azota za koji su vezani, formiraju C2-C9heterociklil grupu koja sadrži 5 atoma ugljenika i atom azota.

Ovde se takođe daju i jedinjenja formule (I) u kojima R<3>predstavlja halogen, -CN, C6-Ci4aril ili C2-C9heteroaril, gde su pomenute C6-Ci4aril ili C2-C9heteroaril grupe opciono supstituisane sa najmanje jednim R<11.>

Dalje, ovde se daju jedinjenja formule (I) u kojima R<3>predstavlja halogen.

Dalje, ovde se daju jedinjenja formule (I) u kojima R<3>predstavlja -CN.

Dalje, ovde se daju jedinjenja formule (I) u kojima R<3>predstavlja C6-Ci4aril ili C2-C9heteroaril, gde su pomenute C6-C14aril ili C2-C9heteroaril grupe opciono supstituisane sa najmanje jednim R<11>.

U sledećoj realizaciji daju se jedinjenja formule (I), gde su:

R<1>je vodonik, CrC8alkil, C2-C8alkenil ili CrC8heteroalkil, gde pomenute

CrC8alkil, C2-C8alkenil ili d-C8heteroalkil grupe mogu opciono biti supstituisane sa najmanje jednim supstituentom koji se nezavisno bira između: halo,-OR12a,-N(R12aR12b), -C(0)N(R12aR12b),-NR12aC(0)N(R12aR12b), -NR12aC(0)<R12a>, -NR<1>2aC(NR12a)N(R12aR12b), -SR12a, -S(0)R<1>2a, -S(0)2R1<2a>, -S(0)2N(R12aR<12b>), d-Csalkil, C6-C14aril, C3-C8cikloalkil i C2-C9heteroaril, gde su pomenute d-C8alkil, C6-C14aril, C3-C8cikloalkil i C2-Cgheteroaril grupe opciono supstituisane sa najmanje jednim supstituentom koji se nezavisno bira između halo, -C(R<1>2aR<12b>R12c), -OH i d-C8alkoksi;

R<2>je vodonik ili d-C8alkil;

R<3>je halogen, -CN, CrC8alkil, -(CR<7>R<8>),NR<9>R<10>, -S(0)2NR<9>R<10>, -C(0)NR<9>R<10>, CrC8heteroalkil, C6-Ci4aril ili C2-C9heteroaril, gde su pomenute CrC8heteroalkil, C6-Ci4aril ili C2-Cgheteroaril grupe opciono supstituisane sa najmanje jednim R<11>; Z je -(CR<4>R<4>)n-. -C(R<4>)=C(R<4>)-, -C(R<4>)=C(R<4>)-(CR<4>R<4>)n-,

-(CR<4>R<4>)n-C(R<4>)<=>C(R<4>)- ili -(CR<4>R<4>)n-C(R<4>)=C(R<4>)-(CR<4>R<4>)n-; a

R<4>svaki nezavisno, bira se između vodonik, halo, CrC8heteroalkil, CrC8alkil, C3-C8cikloalkil, C6-C14aril ili C2-Cgheterociklil i C2-Cgheteroaril, gde su pomenute d-C8alkil, C3-C8cikloalkil, C6-C14aril ili C2-C9heterociklil i C2-C9heteroaril grupe opciono supstituisane sa najmanje jednim R<13>;

R<5>je vodonik, CrC8heteroalkil, C6-C14aril ili C2-C8alkenil ili CrC8alkil, gde je pomenuti C1-C8alkil opciono supstituisan sa najmanje jednom C3-C8cikloalkil ili C6-Ci4aril grupom;

R<6>je vodonik;

R<9>i R<10>, svaki od njih može biti isti ili različit, a nezavisno se bira između vodonik, C3-C8cikloalkil, C2-C9heterociklil i Ci-C8alkil, gde pomenuti d-C8alkil može opciono biti supstituisan sa najmanje jednom C2-C9heterociklil, C2-C9heteroaril, halo ili C6-d4aril grupom, a pomenuta C6-d4aril grupa može opciono biti supstituisana sa najmanje jednom CrC8 ili halo grupom; ili

R<9>i R<10>, zajedno sa atomom azota za koji su vezani, formiraju C2-C9heterociklil ili C2-Cgheteroaril grupu, od kojih svaka može opciono biti supstituisana sa najmanje jednom R13 grupom;

R<11>je halogen, C3-C8cikloalkil, Ci-C8heteroalkil, C2-C9heterociklil, C6-Ci4aril ili C2-C9heteroaril, od kojih svaki može biti opciono supstituisan sa najmanje jednim supstituentom koji se nezavisno bira između CrC8alkil, C6-Ci4aril, C2-C9heteroaril, -CF3, -COR<12a>, -C02R12a i -OR12a;

R<12a>, R<12b>i R<12c>, svaki od njih može biti isti ili različit, a nezavisno se biraju između vodonik, d-C8alkil i okso; ili

R<i2a>j<pi2b>^zajec|no sa atomom azota za koji su vezani, mogu da formiraju C2-C9heterociklil grupu;

R<13>, svaki nezavisno, bira se između halo, CrC8alkil, -(CR<7>R<8>)tOR<7>, -C(0)R<12a>, -S(0)2R<7>, -(CR<7>R<8>)zC(0)NR<12a>R<12b>, -NR12aR12b i -CF3;

t je ceo broj od 1 do 3;

n, svaki može biti isti i različit, a nezavisno se bira, predstavljajući ceo broj, od 1 do 4; i

z, svaki može biti isti i različit, a nezavisno se bira, predstavljajući 0, 1 ili 2; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili solvat.

U još jednoj realizaciji daju se jedinjenja formule (I), gde su:

R1 je vodonik, CrC8alkil, C2-C8alkenil ili CrC8heteroalkil, gde pomenute CrC8alkil, C2-C8alkenil ili CrC8heteroalkil grupe mogu opciono biti supstituisane sa najmanje jednim supstituentom koji se nezavisno bira između:halo,-OR<1>2a,-N(R12aR12b), -C(0)N(R12aR12b),-NR12aC(0)N(R12aR12b),-NR12aC(0)<R12a>, -NR<1>2aC(NR1<2>a)N(R12aR12b),-SR<1>2a, -S(0)R12a, -S(0)2R<12a>, -S(0)2N(R<12a>R<12b>), CrC8alkil, C6-C14aril, C3-C8cikloalkil i C2-C9heteroaril, gde su pomenute CrC8alkil, C6-C14aril, C3-C8cikloalkil i C2-C9heteroaril grupe opciono supstituisane sa najmanje jednim supstituentom koji se nezavisno bira između halo, -C(R<1>2aR<12b>R12c), -OH i

Ci-C8alkoksi;

R<2>je vodonik ili d-C8alkil;

R<3>je vodonik, halogen, -CN, CrC8alkil, -(CR<7>R<8>),NR<9>R<10>, -S(0)zNR<9>R<1>°, -C(0)NR<9>R<1>°, CrC8heteroalkil, C6-Ci4aril ili C2-C9heteroaril, gde su pomenute Ci-C8heteroalkil, C6-Ci4aril ili C2-C9heteroaril grupe opciono supstituisane sa najmanje jednim R<11>;

Z je -(CR<4>R<4>)n-, -C(R4)=C(R4)-(CR4RV, -(CR4R4)n-C(R4)=C(R4)- ili

-(CR4R4)n-C(R4)=C(R4)-(CR4R4)n-; a

R<4>svaki nezavisno, bira se između vodonik, halo, C1-C8heteroalkil, CrC8alkil, C3-C8cikloalkil, C6-Ci4aril ili C2-C9heterociklil i C2-C9heteroaril, gde su pomenute CrC8alkil, C3-C8cikloalkil, C6-Ci4aril ili C2-C9heterociklil i C2-C9heteroaril grupe opciono supstituisane sa najmanje jednim R<13>;

R<5>je vodonik, CrC8heteroalkil, C6-Ci4aril ili C2-C8alkenil ili CrC8alkil, gde je pomenuti d-C8alkil opciono supstituisan sa najmanje jednom C3-C8cikloalkil ili C6-Ci4aril grupom;

R<6>je vodonik;

R<7>i R<8>, svaki od njih može biti isti ili različit, a nezavisno se bira između vodonik i Ci-C8alkil;

R<9>i R<10>, svaki od njih može biti isti ili različit, a nezavisno se bira između vodonik, C3-C8cikloalkil, C2-C9heterociklil i CrC8alkil, gde pomenuti CrC8alkil može opciono biti supstituisan sa najmanje jednom C2-C9heterociklil, C2-C9heteroaril, halo ili C6-C14aril grupom, a gde pomenuta C6-Ci4aril grupa može opciono biti supstituisana sa najmanje jednom CrC8alkil ili halo grupom; ili

R<9>i R<10>, zajedno sa atomom azota za koji su vezani, formiraju C2-C9heterociklil ili C2-C9heteroaril grupu, od kojih svaka može opciono biti supstituisana sa najmanje jednom R<13>grupom;

R<11>je halogen, C3-C8cikloalkil, CrC8heteroalkil, C2-C9heterociklil, C6-Ci4aril ili C2-C9heteroaril, od kojih svaki može biti opciono supstituisan sa najmanje jednim supstituentom koji se nezavisno bira između CrC8alkil, C6-Ci4aril, C2-C9heteroaril, -CF3, -COR<12a>, -C02R12a i -OR<12a>;

pi2a pi2<b>j R<i2c>^sva(<j ocj njjn moze biti isti ili različit, a nezavisno se biraju između vodonik, d-C8alkil i okso; ili

<pi2a>j R<i2b>^<z>ajedno sa atomom azota za koji su vezani, mogu da formiraju C2-C9heterociklil grupu;

t je ceo broj od 1 do 3;

Daju se još jedinjenja formule (I), gde su:

R<1>je vodonik, CrC8alkil, C2-C8alkenil ili CrC8heteroalkil, gde pomenute CrC8alkil, C2-C8alkenil ili CrC8heteroalkil grupe mogu opciono biti supstituisane sa najmanje jednim supstituentom koji se nezavisno bira između:halo,-OR12a,-N(R12aR12b), -C(0)N(R12aR12b), -NR12aC(0)N(R12aR12b), -NR12aC(0)<R12a>, -NR<1>2aC(NR1<2>a)N(R12aR12b), -SR12a, -S(0)R12a, -S(0)2R<12a>, -S(0)2N(R12aR<12b>), CrC8alkil, C6-C14aril, C3-C8cikloalkil i C2-C9heteroaril, gde su pomenute CrC8alkil, C6-Ci4aril, C3-C8cikloalkil i C2-C9heteroaril grupe opciono supstituisane sa najmanje jednim supstituentom koji se nezavisno bira između halo, -C(R<1>2aR<12b>R12c), -OH i CrC8alkoksi; R<2>je vodonik ili d-C8alkil; R<3>je vodonik, halogen, -CN, CrC8alkil, -(CR<7>R<8>),NR<9>R<10>, -S(0)2NR<9>R<10>, -C(0)NR<9>R<1>°, CrC8heteroalkil, C6-C14aril ili C2-C9heteroaril, gde su pomenute Ci-C8heteroalkil, C6-Ci4aril ili C2-C9heteroaril grupe opciono supstituisane sa najmanje jednim R<11>;

Z je -(CR<4>R<4>)n-; a

R<4>svaki nezavisno, bira se između vodonik, halo, CrC8heteroalkil, CrC8alkil, C3-C8cikloalkil, C6-C14aril ili C2-Cgheterociklil i C2-C9heteroaril, gde su pomenute CrC8alkil, C3-C8cikloalkil, C6-C14aril ili C2-C9heterociklil i C2-C9heteroaril grupe opciono supstituisane sa najmanje jednim R<13>;

R<5>je vodonik, CrC8heteroalkil, C6-Ci4aril ili C2-C8alkenil ili CrC8alkil, gde je pomenuti CrC8alkil opciono supstituisan sa najmanje jednom C3-C8cikloalkil ili C6-Ci4aril grupom;

R<6>je vodonik;

R<7>i R<8>, svaki od njih može biti isti ili različit, a nezavisno se bira između vodonik i C-i-C8alkil;

R<9>i R<10>, svaki od njih može biti isti ili različit, a nezavisno se bira između vodonik, C3-C8cikloalkil, C2-Cgheterociklil i d-C8alkil, gde pomenuti CrC8alkil može opciono biti supstituisan sa najmanje jednom C2-Cgheterociklil, C2-C9heteroaril, halo ili C6-Ci4aril grupom, pomenuta C6-Ci4aril grupa može opciono biti supstituisana sa najmanje jednom CrC8ili halo grupom; ili

R<9>i R<10>, zajedno sa atomom azota za koji su vezani, formiraju C2-Cg heterociklil ili C2-Cgheteroaril grupu, od kojih svaka može opciono biti supstituisana sa najmanje jednom R<13>grupom;

R<11>je halogen, C3-C8cikloalkil, Ci-C8heteroalkil, C2-C9heterociklil, Ce-Ci4aril ili C2-Cgheteroaril, od kojih svaki može biti opciono supstituisan sa najmanje jednim supstituentom koji se nezavisno bira između CrC8alkil, C6-Ci4aril, C2-C9heteroaril, -CF3, -COR<12a>, -C02R12a i -OR<12a>;

R<12a>, R<12b>i R<12c>, svaki od njihmože biti isti ili različit, a nezavisno se biraju između vodonik i C-i-C8alkil i okso; ili

<pi2a>j R<i2b>^zajecjno sa atomom azota za koji su vezani, mogu da formiraju C2-C9heterociklil grupu;

R1<3>, svaki nezavisno, bira se između halo, Ci-C8alkil, -(CR<7>R<8>)tOR<7>, -C(0)R<12a>, -S(0)2R<7>, -(CR<7>R<8>)zC(0)NR<12a>R<12b>, -NR<12a>R<12b>i -CF3;

t je ceo broj od 1 do 3;

U sledećoj realizaciji daju se jedinjenja formule (I) gde Z predstavlja -(CR<4>R4)n-. Ovde se daju takođe i jedinjenja formule (I) u kojima Z predstavlja -(CH2CH2)-.

Takođe, daju se jedinjenja koja se biraju između: 8-butil-3(4-)-7-hidroksi-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-)-7-hidroksi-1-({[(2S)-2-hidroksipropil]amino}metil)-3,7-dihidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 1-{[etil(metil)amino]metil}-3-(4-)-7-hidroksi-3,7-dihidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 1-({[2-dimetilamino)-1-metiletil]amino}metil)-3-(4-)-7-hidroksi-3,7-dihidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-)-7-hidroksi-1-{[4-(hidroksimetil)piperidin-1-il]metil}-3,7-dihidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-)-7-hidroksi-1-(pirolidin-1-ilmetil)-3,7-dihidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-)-7-hidroksi-1-{[(3-hidroksibutil)amino]metil}-3,7-dihidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-[3-(4-)-7-hidroksi-6-okso-6,7-dihidro-3H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-1-il]-N,N-dimetilbenzamid; 3-(4-)-7-hidroksi-1-7,8-dihidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-)-7-hidroksi-7,8-dihidropirolo[3',2',4,5]pirido[2,3-c]azepin-6(3H)-on; 3-(4-)-7-hidroksi-N,N-dimetil-6-okso-6,7,8,9-tetrahidro-3H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-1-sulfonamid; 1-[(dimetilamino)metil]-3-(4-)-7-hidroksi-1-(pirolidin-1-ilsulfonil)-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-)-7-hidroksi-1 -(pirolidinl -ilkarbonil)-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-)-7-hidroksi-1-[(4-metoksipiperidin-1-il)karbonil]-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-)-7-hidroksi-1-[(4-metilpiperidin-1-il)sulfonil]-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-)-7-hidroksi-1-[(4-metilpiperazin-1-il)karbonil]-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; N,N-dietil-3-(4-)-7-hidroksi-6-okso-6,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; N,N-dietil-3-(4-)-7-hidroksi-1-{[(2R)-2-(metoksimetil)pirolidin-1-il]karbonil}-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-)-7-hidroksi-N-metil-6-okso-N-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-6,7,8,9-tetrahidro-3H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-1-karboksamid; N-ciklopentil-3-(4-)-7-hidroksi-N-metil-6-okso-6,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-1-sulfonamid; 3-(4-)-7-hidroksi-1-[(2-metoksietoksi)metil]-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-)-7-hidroksi-1-(pirolidin-1-ilmetil)-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 1-({[(2S)-2,3-dihidroksipropil]oksi}metil)-3-(4-)-7-hidroksi-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-)-7-hidroksi-(hidroksimetil)-3H-pirolo[2,3-c][1,7]nafthidridin-6(7H)-on; 3-(4-)-N-(2-metoksietil)-N-metil-6-okso-6,7,8,9-tetrahidro-3H-pirolo[2,3-c][1,7]nafthiridin-1-sulfonamid; 3-(4-)-7-hidroksi-1-[(4-metilpiperazin-1-il)metil]-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-)-7-hidroksi-1 -[(tetrahidro-2H-piran-4-iloksi)metil]-3J,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 1-[(2-etoksietoksi)metil]-3-(4-)-7-hidroksi-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 1-{[3-(4-)-7-hidroksi-1-6-okso-6,7,8,9-tetrahidro-3H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-1-il]metil}-L-prolinamid; 3-(4-)-7-hidroksi-1-({[(1 R)-2-hidroksi-1-metiletil]amino}metil)-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-)-7-hidroksi-1-(morfolin-4-ilmetil)-3J,8,94etrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-)-7-hidroksi-1-{[(2-hidroksietil)(metil)amino]metil}-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 1 -({[1 -(4-bromofenil)etil]amino}metil)-3-(4-)-7-hidroksi-3,7-dihidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 1-[(3,3-difluorooirolidin-1-i!)metil]-3-(4-)-7-hidroksi-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-)-7-hidroksi-1-(piperidin-1-ilmetil)-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 1-[(3,3-difluoropiperidin-1-il)metil]-3-(4-)-7-hidroksi-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 1 -{[terc-butil(2-metoksietil)amino]metil}-3-(4-)-7-hidroksi-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 1-{[3-(4-)-7-hidroksi-6-okso-6J,8,9-tetrahidro-3H-piro!o[2,3-c]-17-nafthiridin-1-il]metil}-N,N-dimetill-prolinamid; 1-[dimetilamino)metil]-3-(4-)-7-hidroksi-8-metil-3,7-dihidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-)-7-hidroksi-8-metil-1-(morfolin-4-ilmetil)-3,7-dihidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-)-7-hidroksi-8-metil-9-(morfolin-4-ilmetil)-3,7-dihidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 1-{[(2R,6S)-2.6- dimetilmorfolin-4-il]metil}-3-(4-)-7-hidroksi-3J,8,94etrahidro-6H-piro 1.7- nafthiridin-6-on; 3-(4-)-7-hidroksi-8-metil-1 -(pirolidin-1 -ilmetil)-3,7-dihidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-)-7-hidroksi-1-(hidroksimetil)-8-metil-3,7-dihidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 1 -{[(3,4-di)amino]metil}-3-(4-)-7-hidroksi-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-)-7-hidroksi-1-{[4-(2-metoksietil)piperazin-1-il]metil}-3J,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-)-7-hidroksi-1-{[metil(tetrahidro-2H-piran-3-il)amino]metil}-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 1-[(3-etoksipropoksi)metil]-3-(4-)-7-hidroksi-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 1 -hloro-3-(4-)-7-hidroksi-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-)-1-{[(2-)oksi]metil}-7-hidroksi-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on hidrohlorid; 3-(4-)-7-hidroksi-6-okso-6,7,8,9-tetrahidro-3H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-1-karbonitril; 3-(4-)-7-hidroksi-1-[(piridin-2-ilmetoksi)metil]-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on;

3-(4-)-7-hidroksi-1-(izobutoksimetil)-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 1-{[2-(benziloksi)etoksi]metil}-3-(4-)-7-hidroksi-3,7,8,9-tetrahidro-6H-piro!o[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-)-7-hidroksi-1-[(2-izobutoksietoksi)metil]-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 1-[(2-butoksietoksi)metil]-3-(4-)-7-hidroksi-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 1 -(butoksimetil)- 3-(4-)-7-hidroksi-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 1-bromo-3-(4-)-7-hidroksi-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-)-7-hidroksi-1-[(2-piridin-2-iletoksi)metil]-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-)-7-hidroksi-1-{[(4-oksopentil)oksi]metil}-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on;

3- (4-)-7-hidroksi-1-{[(2-metilpiridin-3-il)metoksi]metil}-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 1-{[(ciklopropilmetil)(metil)-amino]metil}-3-(4-)-7-hidroksi-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-)-7-hidroksi-1-{[2-(3-metoksifenil)etoksi]metil}-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-)-7-hidroksi-1-[(2-fenoksietoksi)metil]-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 1-acetil-3-(4-)-7-hidroksi-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on metan; 3-(4-)-7-hidroksi-1 -[(tetrahidro-2H-piran-4- ilamino)metil]-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 1-{[[(1-etil-1H-imidazol-2-il)metil](metil)amino]metil}-3-(4-)-7-hidroksi-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 1-{[etil(metil)amino]metil}-3-(4-)-7-hidroksi-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 1-{[(3R,4R)-3,4-

difluoropiridin-1-il]metil}-3-(4-)-7-hidroksi-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-)-7-hidroksi-1-{[metil(2,2,2-trifluoroetil)amino]metil}-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-)-7-hidroksi-1-[(3-piridin-2-ilpropoksi)metil]-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-)-7-hidroksi-1-[(2-propoksietoksi)metil]-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-)-7-hidroksi-1-[(2-izopropoksietoksi)metil]-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-)-7-hidroksi-1-{[(2-metoksietil)(metil)amino]metil}-3,7,8,9-tetrahidro-6H-piroto[2,3-c]-1,7-nafthiridin 6-on; 3-(4-)-7-hidroksi-1-{[(6-metilpiridin-2-il)metoksi]metil}-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 1-[(ciklobutilmetoksi)metil]-3-(4-)-7-hidroksi-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 1-{[2-(diizopropilamino)etoksi]metil}-3-(4-)-7-hidroksi-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 1-{[(2,2-difluoroetil)amino]metil}-3-(4-)-7-hidroksi-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 1-[(2-butoksietoksi)metil]-3-(4-)-7-hidroksi-3,7-dihidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 7-hidroksi-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; ili njihove farmaceutski prihvatljive soli ili solvati.

U sledećoj realizaciji daje se jedinjenje formule (I)

gde su:

R<1>je vodonik, CrC8alkil, C2-C8alkenil ili CrC8heteroalkil, gde pomenute Ci-C8alkil, C2-C8alkenil ili CrC8heteroalkil grupe mogu biti supstituisane sa jednim ili više supstituenata koji se nezavisno biraju između: halo, -CN, -OR1<2a>, -N(R<12a>R<12b>), -C(0)N(R1<2a>R<1>2b), -NR<12a>C(0)<N>(R<12a>R<l2b>),-NR12aC(0)R12a,-NR12aC(NR12a)N(R12aR12b), -SR<12a>,-S(0)R12a, -S(0)2R<12a>, -S(0)2N(R12<a>R12b), CrC8alkil, C6-C14aril, C3-C8cikloalkil i C2-C9heteroaril, gde pomenute d-C8alkil, C6-Ci4aril, C3-C8cikloalkil i C2-C9heteroaril grupe mogu biti supstituisane sa jednim ili više supstituenata koji se nezavisno biraju između halo, -C(R<12a>R12bR<12c>), -OH,

Ci-C8alkoksi i -CN;

R<2>je vodonik ili d-C8alkil;

R<3>je Ci-C8alkil, -(CR<7>R<8>)tNR<9>R<10>, -(CR<7>R<8>)tOR<9>, -S(0)zNR<9>R<10>, -C(0)NR<9>R<1>°, -C(0)R<9>, d-C8heteroalkil, C6-C14aril ili C2-C9heteroaril, gde pomenute Ci-C8heteroalkil, C6-Ci4aril ili C2-C9heteroaril grupe mogu biti supstituisane sa jednim ili više R<11>;

Z je -(CR<4>R<4>)n-, -C(R<4>)<=>C(R<4>)-(CR<4>R<4>)n-, -(CR4R4)n-C(R4)=C(R4)- ili

-(CR<4>R<4>)n-C(R<4>)<=>C(R<4>)-(CR<4>R<4>)n-; a

R<4>svaki nezavisno, bira se između vodonik, halo, CrC8heteroalkil, d-C8alkil, C3-C8cikloalkil, C6-Ci4aril ili C2-C9heterociklil i C2-C9heteroaril, gde pomenute Ci-C8alkil, C3-C8cikloalkil, C6-C14aril ili C2-C9heterociklil i C2-C9heteroaril grupe mogu biti supstituisane sa jednim ili više R<13>;

R<5>je vodonik, Ci-C8heteroalkil, C6-Ci4aril ili C2-C8alkenil ili d-C8alkil, gde pomenuti d-C8alkil može biti supstituisan sa jednom ili više C3-C8cikloalkil ili C6-Ci4aril grupa;

R<6>je vodonik;

R<9>i R<10>, svaki od njih može biti isti ili različit, a nezavisno se bira između vodonik, d-C8heteroalkil C3-C8cikloalkil, C2-C9heterociklil, -C(0)R<7>, -C(0)2R<7>i Ci-C8alkil, gde pomenuti CrC8heteroalkil C3-C8cikloalkil, C2-C9heterociklil i d-C8alkil mogu opciono biti supstituisan sa jednom ili više C2-C9heterociklil,

C2-C9heteroaril, halo ili C6-Ci4aril grupa, i gde pomenuta C6-Ci4aril grupa može biti supstituisana sa jednom ili više d-C8alkil j|j halo grupa; ili

R<9>i R<10>, zajedno sa atomom azota za koji su vezani, formiraju C2-C9heterociklil ili C2-C9heteroaril grupu, od kojih svaka može biti supstituisana sa jednom ili više R13grupa;

R<11>je halogen, C3-C8cikloalkil, d-C8heteroalkil, C2-C9heterociklil, C6-Ci4aril ili C2-C9heteroaril, od kojih svaki može biti supstituisan sa jednim ili više supstituenata koji se nezavisno biraju između CrC8alkil, C6-Ci4aril, C2-C9heteroaril, -CF3, -COR<12a>, -C02R12a i -OR12a;

R<12a>, R<12b>i R<12c>, svaki od njih može biti isti ili različit, a nezavisno se biraju između vodonik i CrC8alkil i okso; ili

<pi2>ajpi2b zajecjno sa atomom azota za koji su vezani, mogu da formiraju C2-Cgheterociklil grupu;

R<13>, svaki nezavisno, bira se između halo, CrC8alkil, -(CR<7>R<8>)tOR<7>, -C(0)R<12a>, -S(0)2R<7>, -(CR<7>R<8>)zC(0)NR<12a>R<12b>, -NR<12a>R12<b>, CrC8alkoksi, -OH i -CF3;

t je ceo broj od 1 do 3;

U sledećoj realizaciji daje se jedinjenje formule (I)

gde su:

R<1>je vodonik, CrC8alkil, C2-C8alkenil ili CrC8heteroalkil, gde pomenute Ci-C8alkil, C2-C8alkenil ili Ci-C8heteroalkil grupe mogu biti supstituisane sa jednim ili više supstituenata koji se nezavisno biraju između: halo,-CN, -OR<1>2a,-N(R12aR12b), -C(0)N(R12aR12b),-NR12aC(0)N(R12aR12b), -NR12aC(0)<R12a>, -NR<1>2aC(NR12a)N(R12aR12b), -SR12a, -S(0)R12a, -S(0)2R<12a>, -S(0)2N(R<12a>R<12b>), CrC8alkil, C6-C14aril, C3-C8cikloalkil i C2-C9heteroaril, gde pomenute CrC8alkil, C6-C14aril, C3-C8cikloalkil i C2-C9heteroaril grupe mogu biti supstituisane sa jednim ili više supstituenata koji se nezavisno biraju između halo, -C(R<12a>R12bR<12c>), -OH, CrC8alkoksi i -CN; R<2>je vodonik ili CrC8alkil; R<3>je CrC8alkil, -(CR<7>R<8>)tNR<9>R<10>, -(CR<7>R8)tOR<9>, -S(0)zNR<9>R<10>, -C(0)NR<9>R<10>, -C(0)R<9>, CrC8heteroalkil, C6-Ci4aril ili C2-C9heteroaril, gde pomenute CrC8heteroalkil, C6-Ci4aril ili C2-C9heteroaril grupe mogu biti supstituisane sa jednim ili više R<11>;

Z je -(CR4R4)n-; a

R<4>svaki nezavisno, bira se između vodonik, halo, CrC8heteroalkil, Ci-C8alkil, C3-C8cikloalkil, C6-Ci4aril ili C2-C9heterociklil i C2-C9heteroaril, gde pomenute CrC8alkil, C3-C8cikloalkil, C6-C14aril ili C2-C9heterociklil i C2-C9heteroaril grupe mogu biti supstituisane sa jednim ili više R<13>;

R<5>je vodonik, CrC8heteroalkil, C6-C14aril ili C2-C8alkenil ili CrC8alkil, gde pomenuti d-C8alkil može biti supstituisan sa jednom ili više C3-C8cikloalkil ili -C6-C-i4aril grupa;

R<6>je vodonik;

R<7>i R<8>, svaki od njih može biti isti ili različit, a nezavisno se bira između vodonik i C-|-C8alkil;

R<9>i R<10>, svaki od njih može biti isti ili različit, a nezavisno se bira između vodonik, CrC8heteroalkil C3-C8cikloalkil, C2-C9heterociklil, -C(0)R<7>, -C(0)2R<7>i CrC8alkil, gde pomenuti CrC8heteroalkil C3-C8cikloalkil, C2-C9heterociklil i CrC8alkil mogu opciono biti supstituisan sa jednom ili više C2-C9heterociklil,

C2-C9heteroaril, halo ili C6-Ci4aril grupa, i gde pomenuta C6-C14aril grupa može biti supstituisana sa jednom ili više CrC8alkil ili halo grupa; ili

R<9>i R<10>, zajedno sa atomom azota za koji su vezani, formiraju C2-C9heterociklil ili C2-Cgheteroaril grupu, od kojih svaka može biti supstituisana sa jednom ili više R<13>grupa;

R<11>je halogen, C3-C8cikloalkil, CrC8heteroalkil, C2-C9heterociklil, C6-C14aril ili C2-C9heteroaril, od kojih svaki može biti supstituisan sa jednim ili više supstituenata koji se nezavisno biraju između CrC8alkil, Cs-C^aril, C2-C9heteroaril, -CF3, -COR<12a>, -C02R<12a>i -OR<12a>;

Ri2<a>j Ri2b zajec)no sa atomom azota za koji su vezani, mogu da formiraju C2-C9heterociklil grupu;

R1<3>, svaki nezavisno, bira se između halo, Ci-C8alkil, -(CR<7>R<8>)tOR<7>, -C(0)R<12a>, -S(0)2R<7>, -(CR<7>R<8>)zC(0)NR<12a>R<12b>, -NR<1>2aR12b,Ci-C8<a>lkoksi, -OH i -CF3;

t je ceo broj od 1 do 3;

U sledećoj realizaciji daje se jedinjenje formule (II),

gde su:

R<1>je vodonik, CrC8alkil, C2-C8alkenil ili CrC8heteroalkil, gde pomenute Ci-C8alkil, C2-C8alkenil ili d-C8heteroalkil grupe mogu biti supstituisane sa jednim ili više supstituenata koji se nezavisno biraju između: halo, -CN, -OR<1>2a,-N(R12aR12b), -C(0)N(R12aR12b),-NR12aC(0)N(R12aR12b),-NR12aC(0)R12a,-NR12aC(NR12a)N(R12aR12b), -SR12a,-S(0)R<1>2a, -S(0)2R<12a>, -S(0)2N(R12aR<12b>), CrC8alkil, Ce-C^aril, C3-C8cikloalkil i C2-C9heteroaril, gde pomenute CrC8alkil, C6-Ci4aril, C3-C8cikloalkil i C2-Cgheteroaril grupe mogu biti supstituisane sa jednim ili više supstituenata koji se nezavisno biraju između halo, -C(R<1>2aR<12b>R12c), -OH i

CrC8alkoksi i -CN;

X je-S(0)2-, -(CH2)-, -(CH2CH2)-, -(CH2CH2CH2)- ili -C(O)-;

R<7>i R<8>, svaki od njih može biti isti ili različit, a nezavisno se bira između vodonik i CrC8alkil;

R<9>i R<10>, svaki od njih može biti isti ili različit, a nezavisno se biraju između vodonik, CrC8heteroalkil, C3-C8cikloalkil, C2-C9heterociklil, -C(0)R<7>, -C(0)2R<7>i CrC8alkil, gde pomenuti CrC8heteroalkil, C3-C8cikloalkil, C2-C9heterociklil i CrC8alkil mogu biti supstituisan sa jednom ili više C2-Cgheterociklil, C2-C9heteroaril, halo ili C6-Ci4aril grupa, i gde pomenuta C6-Ci4aril grupa može biti supstituisana sa jednom ili više CrC8alkil ili halo grupa; ili R<9>i R<10>, zajedno sa atomom azota za koji su vezani, formiraju C2-C9cikloheteroalkil ili C2-C9heteroaril grupu, od kojih svaka može biti supstituisana sa jednom ili više R13grupa;

Ri2a R<i2b>j R<i2c>^svakj od ?j? može Djtj jstj j|j raz|jčit, a nezavisno se bira između vodonik i CrC8alkil i okso; ili

R<i2a>j R<i2b>^zajedno sa atomom azota za koji su vezani, mogu da formiraju C2-C9cikloheteroalkil grupu;

R<13>, svaki nezavisno, bira se između halo, CrC8alkil, -(CR<7>R8)tOR<7>, -C(0)R<12a>, -S(0)2R<7>, -(CR<7>R<8>)2C(0)NR<12a>R<12b>, -NR<12a>R<12b>, d-C8alkoksi, -OH i -CF3;

t je ceo broj od 1 do 3; i

U još jednoj realizaciji daju se jedinjenja formule (II), gde su:

R<1>je CrC8alkil, supstituisan sa C6-Ci4aril grupom, gde je pomenuta C6-Ci4aril grupa supstituisana sa jednim ili više supstituenata koji se nezavisno biraju između halo i -CN;

X je-S(0)2-, -(CH2)-, -(CH2CH2)-, -(CH2CH2CH2)- ili -C(O)-;

R<9>i R<10>, svaki od njih može biti isti ili različit, a nezavisno se biraju između vodonik, Ci-C8heteroalkil, C3-C8cikloalkil, C2-C9heterociklil, -C(0)R<7>, -C(0)2R<7>i CrC8alkil, gde pomenuti CrC8heteroalkil, C3-C8cikloalkil, C2-C9heterociklil i CrC8alkil mogu biti supstituisan sa jednom ili više C2-Cgheterociklil, C2-C9heteroaril, halo ili C6-Ci4aril grupa, i gde pomenuta C6-C14aril grupa može biti supstituisana sa jednom ili više CrC8alkil ili halo grupa; ili R<9>i R<10>, zajedno sa atomom azota za koji su vezani, formiraju C2-C9cikloheteroalkil ili C2-C9heteroaril grupu, od kojih svaka može biti supstituisana sa jednom ili više R<13>grupa;

R12a i R<12b>, svaki od njih može biti isti ili različit, a nezavisno se bira između vodonik i CrC8alkil i okso; ili

Ri2<a>j R<i2b>^zajec|no sa atomom azota za koji su vezani, mogu da formiraju d-Cgcikloheteroalkil grupu;

R<13>, svaki nezavisno, bira se između halo, Ci-C8alkil, -(CR<7>R<8>)tOR<7>, -C(0)R<12a>, -S(0)2R<7>, -(CR<7>R<8>)zC(0)NR<12a>R<12b>, -NR<12a>R<12b>, CrC8alkoksi, -OH i -CF3;

t je ceo broj od 1 do 3; i

Još jedna realizacija daje jedinjenja formule (II), gde su:

R<1>je -(CH2)(C6-C14aril, gde je pomenuta C6-C14aril grupa supstituisana sa jednim ili više supstituenata koji se nezavisno biraju između halo i -CN;

X je-S(0)2-, -(CH2)-, -(CH2CH2)-, -(CH2CH2CH2)- ili -C(O)-;

R<9>i R<10>, svaki od njih može biti isti ili različit, a nezavisno se biraju između vodonik, CrC8heteroalkil, C3-C8cikloalkil, C2-C9heterociklil, -C(0)R<7>, -C(0)2R<7>i CrC8alkil, gde pomenuti d-C8heteroalkil, C3-C8cikloalkil, C2-C9heterociklil i CrC8alkil mogu biti supstituisan sa jednom ili više C2-C9heterociklil, C2-C9heteroaril, halo ili C6-C14aril grupa, i gde pomenuta C6-Ci4aril grupa može biti supstituisana sa jednom ili više CrC8alkil ili halo grupa; ili R<9>i R<10>, zajedno sa atomom azota za koji su vezani, formiraju C2-C9cikloheteroalkil ili C2-C9heteroaril grupu, od kojih svaka može biti supstituisana sa jednom ili više R13grupa;

R<i2a>j R<i2b>^svakj oc) njjn može bjtj jstj i|j različit, a nezavisno se bira između vodonik i CrC8alkil i okso; ili

Ri2<a>j Ri2b zaje(jno sa atomom azota za koji su vezani, mogu da formiraju C2-Cgcikloheteroalkil grupu;

R1<3>, svaki nezavisno, bira se između halo, Ci-C8alkil, -(CR<7>R<8>)tOR<7>, -C(0)R<12a>, -S(0)2R<7>, -(CR<7>R<8>)zC(0)NR<12a>R<12b>, -NR<12a>R<12b>, CrC8alkoksi, -OH i -CF3;

t je ceo broj od 1 do 3; i

Sledeća realizacija daje jedinjenja formule (II), gde su:

R<1>je -4-fluorobenzil; X je -S(0)2-, -(CH2)-, -(CH2CH2)-, -(CH2CH2CH2)- ili -C(O)-; R<7>i R<8>, svaki od njih može biti isti ili različit, a nezavisno se bira između vodonik i CrC8alkil; R<9>i R<10>, svaki od njih može biti isti ili različit, a nezavisno se biraju između vodonik, CrC8heteroalkil, C3-C8cikloalkil, C2-C9heterociklil, -C(0)R<7>, -C(0)2R<7>i CrCsalkil, gde pomenuti CrC8heteroalkil, C3-C8cikloalkil, C2-C9heterociklil i CrC8alkil mogu biti supstituisani sa jednom ili više C2-C9heterociklil, C2-C9heteroaril, halo ili C6-Ci4aril grupa, i gde pomenuta C6-Ci4aril grupa može biti supstituisana sa jednom ili više CrC8alkil ili halo grupa; ili R<9>i R<10>, zajedno sa atomom azota za koji su vezani, formiraju C2-C9cikloheteroalkil ili C2-C9heteroaril grupu, od kojih svaka može biti supstituisana sa jednom ili više R13grupa;Ri2<a>j Ri2b svakj oc| njjn može biti isti ili različit, a nezavisno se bira između vodonik i CrC8alkil i okso; iliRi2<a>j R<i2b>^zajedno sa atomom azota za koji su vezani, mogu da formiraju C2-C9cikloheteroalkil grupu;R1<3>, svaki nezavisno, bira se između halo, d-C8alkil, -(CR<7>R<8>)tOR<7>, -C(0)R<12a>, -S(0)2R<7>, -(CR<7>R<8>)2C(0)NR<12a>R<12b>, -NR12aR<12b>, CrC8alkoksi, -OH i -CF3;

t je ceo broj od 1 do 3; i

U sledećoj realizaciji daju se jedinjenja formule (II) gde X predstavlja -S(0)2-, ili njihova farmaceutski prihvatljiva so ili solvat. Takođe, daju se jedinjenja formule (II) gde X predstavljaju -(CH2)-, -(CH2CH2)- ili -(CH2CH2CH2)-, ili njihova farmaceutski prihvatljiva so ili solvat. Dalje, daju se jedinjenja formule (II) gde X predstavlja -(CH2)-, ili njihova farmaceutski prihvatljiva so ili solvat. Takođe, daju se jedinjenja formule (II) gde X predstavlja -(CH2CH2)- ili njihova farmaceutski prihvatljiva so ili solvat. U sledećoj realizaciji daju se jedinjenja formule (II) gde X predstavlja -(CH2CH2CH2)-, ili njihova farmaceutski prihvatljiva so ili solvat. Takođe, daju se jedinjenja formule (II) gde X predstavlja -C(O)-, ili njihova farmaceutski prihvatljiva so ili solvat.

Sledeća realizacija daje jedinjenja formule (III),

gde su:

R<1>je CrC8alkil, supstituisan sa C6-Ci4aril, gde je pomenuta C6-Ci4aril grupa supstituisana sa jednim ili više supstituenata koji se nezavisno biraju između halo i-CN;

R<9>i R<10>, svaki od njih može biti isti ili različit, a nezavisno se biraju između vodonik, d-C8heteroalkil, C3-C8cikloalkil, C2-C9heterociklil, -C(0)R<7>, -C(0)2R<7>i CrC8alkil, gde pomenuti CrC8heteroalkil, C3-C8cikloalkil, C2-C9heterociklil i Ci-C8alkil mogu biti supstituisani sa jednom ili više C2-C9heterociklil, C2-C9heteroaril, halo ili C6-Ci4aril grupa, i gde pomenuta C6-C14aril grupa može biti supstituisana sa jednom ili više CrC8alkil ili halo grupa; ili R<9>i R<10>, zajedno sa atomom azota za koji su vezani, formiraju C2-C9cikloheteroalkil ili C2-C9heteroaril grupu, od kojih svaka može biti supstituisana sa jednom ili više R13grupa;

R<12a>i R<12b>, svaki od njih može biti isti ili različit, a nezavisno se bira između vodonik i CrC8alkil i okso; ili

R12a i R<12b>, zajedno sa atomom azota za koji su vezani, mogu da formiraju C2-C9cikloheteroalkil grupu;

R<13>, svaki nezavisno, bira se između halo, Ci-C8alkil, -(CR<7>R8)tOR<7>, -C(0)R<12a>, -S(0)2R<7>, -(CR<7>R<8>)zC(0)NR<12a>R<12b>, -NR<12a>R12b,CrC8alkoksi, -OH i -CF3;

t je ceo broj od 1 do 3; i

Sledeća realizacija daje jedinjenja formule (IV),

gde su:

R<1>je Ci-C8alkil, supstituisan sa C6-C14aril, gde je pomenuta C6-C14aril grupa supstituisana sa jednim ili više supstituenata koji se nezavisno biraju između halo i-CN;

R<9>i R<10>, svaki od njih može biti isti ili različit, a nezavisno se biraju između vodonik, CrC8heteroalkil, C3-C8cikloalkil, C2-C9heterociklil, -C(0)R<7>, -C(0)2R<7>i CrC8alkil, gde pomenuti d-C8heteroalkil, C3-C8cikloalkil, C2-C9heterociklil i C-pCsalkil mogu biti supstituisani sa jednom ili više C2-C9heterociklil, C2-C9heteroaril, halo ili C6-C14aril grupa, i gde pomenuta C6-Ci4aril grupa može biti supstituisana sa jednom ili više CrC8alkil ili halo grupa; ili R<9>i R<10>, zajedno sa atomom azota za koji su vezani, formiraju C2-C9cikloheteroalkil ili C2-C9heteroaril grupu, od kojih svaka može biti supstituisana sa jednom ili više R13grupa; pi2ajpi2b svakj ocj njjn m0Ze biti isti ili različit, a nezavisno se bira između vodonik i C-|-C8alkil i okso; iliR12ai R<12b>, zajedno sa atomom azota za koji su vezani, mogu da formiraju C2-C9cikloheteroalkil grupu; R<13>, svaki nezavisno, bira se između halo, CrC8alkil, -(CR<7>R8)tOR<7>, -C(0)R<12a>, -S(0)2R<7>, -(CR<7>R<8>)zC(0)NR<12a>R<12b>, -NR<12a>R<12b>, CrC8alkoksi, -OH i -CF3;

t je ceo broj od 1 do 3; i

Sledeća realizacija daje jedinjenja formule (V),

gde su:

R<1>je CrC8alkil, supstituisan sa C6-Ci4aril, gde je pomenuta C6-Ci4aril grupa supstituisana sa jednim ili više supstituenata koji se nezavisno biraju između halo i -CN;

R<9>i R<10>, svaki od njih može biti isti ili različit, a nezavisno se biraju između vodonik, CrC8heteroalkil, C3-C8cikloalkil, C2-C9heterociklil, -C(0)R<7>, -C(0)2R<7>i CrC8alkil, gde pomenuti CrC8heteroalkil, C3-C8cikloalkil, C2-C9heterociklil i CrC8alkil mogu biti supstituisani sa jednom ili više C2-C9heterociklil, C2-C9heteroaril, halo ili C6-Ci4aril grupa, i gde pomenuta C6-C-i4aril grupa može biti supstituisana sa jednom ili više CrC8alkil ili halo grupa; ili R<9>i R<10>, zajedno sa atomom azota za koji su vezani, formiraju C2-C9cikloheteroalkil ili C2-C9heteroaril grupu, od kojih svaka može biti supstituisana sa jednom ili više R<13>grupa;

R<12a>i R<12b>, svaki od njih može biti isti ili različit, a nezavisno se bira između vodonik i Ci-C8alkil i okso; ili

R<i2a>j R<i2b>^zajecjno sa atomom azota za koji su vezani, mogu da formiraju C2-C9cikloheteroalkil grupu;

R1<3>, svaki nezavisno, bira se između halo, CrC8alkil, -(CR<7>R<8>),OR<7>, -C(0)R<12a>, -S(0)2R<7>, -(CR<7>R<8>)zC(0)NR<12a>R<12b>, -NR<1>2aR12<b>, CrC8alkoksi, -OH i -CF3;

t je ceo broj od 1 do 3; i

Sledeća realizacija daje jedinjenje formule (VI),

gde su:

R<1>je CrC8alkil, supstituisan sa C6-C14aril, gde je pomenuta C6-C14aril grupa supstituisana sa jednim ili više supstituenata koji se nezavisno biraju između halo i -CN;

R<9>i R<10>, svaki od njih može biti isti ili različit, a nezavisno se biraju između vodonik, Ci-C8heteroalkil, C3-C8cikloalkil, C2-C9heterociklil, -C(0)R<7>, -C(0)2R<7>i CrC8alkil, gde pomenuti CrC8heteroalkil, C3-C8cikloalkil, C2-C9heterociklil i Ci-C8alkil mogu biti supstituisani sa jednom ili više C2-C9heterociklil, C2-C9heteroaril, halo ili C6-C14aril grupa, i gde pomenuta C6-C14aril grupa može biti supstituisana sa jednom ili više CrC8alkil ili halo grupa; ili R<9>i R<10>, zajedno sa atomom azota za koji su vezani, formiraju C2-C9cikloheteroalkil ili C2-C9heteroaril grupu, od kojih svaka može biti supstituisana sa jednom ili više R13grupa;

Ri2<a>j p>i2b^ zajec|no sa atomom azota za koji su vezani, mogu da formiraju C2-Cgcikloheteroalkil grupu;

R<13>, svaki nezavisno, bira se između halo, CrC8alkil, -(CR<7>R<8>)tOR<7>, -C(0)R<12a>, -S(0)2R<7>, -(CR<7>R<8>)zC(0)NR<12a>R<12b>, -NR<1>2aR12b,CrC8alkoksi, -OH i -CF3;

t je ceo broj od 1 do 3; i

Sledeća realizacija daje bilo koje od jedinjenja formule (I) do (VII), gde R<1>predstavlja 4-fluorobenzil, ili njihovu farmaceutski prihvatljivu so ili solvat.

Sledeća realizacija daje jedinjenja formule (I), gde R<3>predstavlja halogen, -CN, C6-C14aril ili C2-C9heteroaril, gde su pomenute C6-C14aril i C2-C9heteroaril grupe opcionoi supstituisane sa najmanje jednim R<11>, ili njihovu farmaceutski prihvatljivu so ili solvat.

Sledeća realizacija daje jedinjenja formule (I),

gde su: R<1>je CrC8alkil, supstituisan sa C2-C9heteroaril, gde pomenuti C2-C9heteroaril može biti supstituisan sa jednim ili više supstituenata koji se nezavisno biraju između halo, -C(R12aR12bR<12c>), -OH, CrCBalkoksi i -CN; R<2>je vodonik ili CrC8alkil; R<3>je vodonik; Z je-(CH2CH2)-; R<4>svaki nezavisno, bira se između vodonik, halo, Ci-C8heteroalkil, CrC8alkil, C3-C8cikloalkil, C6-Ci4aril, C2-C9heterociklil i C2-C9heteroaril, gde pomenute CrC8alkil, C3-C8cikloalkil, C6-C14aril ili C2-C9heterociklil i C2-C9heteroaril grupe mogu biti supstituisane sa jednim ili više R<13>; R<5>je vodonik, CrC8heteroalkil, C6-C14arii, C2-C8alkenil ili CrC8alkil, gde pomenuti CrC8alkil može biti supstituisan sa jednom ili više C3-C8cikloalkil ili -C6-Ci4aril grupa; R<6>je vodonik; R<7>i R<8>, svaki od njih može biti isti ili različit, a nezavisno se bira između vodonik i CrC8alkil; R<9>i R<10>, svaki od njih može biti isti ili različit, a nezavisno se biraju između vodonik, CrC8heteroalkil, C3-C8cikloalkil, C2-C9heterociklil, -C(0)R<7>, -C(0)2R<7>i CrC8alkil, gde pomenuti CrC8heteroalkil, C3-C8cikloalkil, C2-C9heterociklil i CrC8alkil mogu biti supstituisani sa jednom ili više C2-C9heterociklil, C2-C9heteroaril, halo ili C6-Ci4aril grupa, i gde pomenuta C6-Ci4aril grupa može biti supstituisana sa jednom ili više CrC8alkil ili halo grupa; ili R<9>i R<10>, zajedno sa atomom azota za koji su vezani, formiraju C2-C9heterociklil ili C2-Cgheteroaril grupu, od kojih svaka može biti supstituisana sa jednom ili više R<13>grupa; R<11>je halogen, C3-C8cikloalkil, CrC8heteroalkil, C2-C9heterociklil, -C6-Ci4aril ili C2-C9heteroaril, od kojih svaki može biti supstituisan sa jednim ili više supstituenata koji se nezavisno biraju između CrC8alkil, C6-C14aril, C2-C9heteroaril, -CF3, -COR<12a>, -C02R<12>ai-OR<12a>;

<pi2a>R<i2b>j Ri2c svaki oc) n-h moze Djtj |Sti j|i različit, a nezavisno se bira između vodonik i CrC8alkil i okso; ili

pi2ajpi2b zajecjno sa atomom azota za koji su vezani, mogu da formiraju C2-Cgheterociklil grupu;

R1<3>, svaki nezavisno, bira se između halo, CrC8alkil, -(CR<7>R<8>)tOR<7>, -C(0)R<12a>, -S(0)2R<7>, -(CR<7>R<8>)zC(0)NR<12a>R<12b>, -NR<12a>R<12b>, CrC8alkoksi, -OH i -CF3;

t je ceo broj od 1 do 3; i

n, svaki može biti isti ili različit, a predstavlja ceo broj koji se nezavisno bira od 1 do 4; i

Sledeća realizacija daje jedinjenja formule (I), gde R<1>predstavlja -(CH2)-, supstituisan sa piridil, gde pomenuti piridil može biti supstituisan sa jednim ili više supstituenata koji se nezavisno biraju između halo, -C(R<1>2aR<12b>R12c), -OH, CrC8 alkoksi i -CN, ili njihova farmaceutski prihvatljiva so ili solvat.

Sledeća realizacija daje jedinjenja formule (I),

gde su:

R<1>je CrC8alkil, supstituisan sa C6-C14aril, gde pomenuti C6-C14aril može biti supstituisan sa jednim ili više -CN, i još opciono supstituisan sa jednim ili više supstituenata koji se nezavisno biraju između halo, -C(R<12a>R<12b>R<12c>), -OH i CrC8 alkoksi; R<2>je vodonik ili CrC8alkil; R<3>je vodonik, CrC8alkil, -(CR<7>R<8>)»NR<9>R<10>, -(CR<7>R<8>)tOR<9>, -S(0)zNR<9>R<10>, -C(0)NR<9>R<1>°, -C(0)R<9>, CrC8heteroalkil, C6-C14aril ili C2-C9heteroaril, gde pomenute CrC8heteroalkil, C6-Ci4aril ili C2-C9heteroaril grupe mogu biti supstituisane sa jednim ili više R<11>; Z je -(CH2CH2)-; R<4>svaki nezavisno, bira se između vodonik, halo, CrC8heteroalkil, CrC8alkil, C3-C8cikloalkil, C6-Ci4aril, C2-C9heterociklil i C2-C9heteroaril, gde pomenute CrC8alkil, C3-C8cikloalkil, C6-Ci4aril ili C2-C9heterociklil i C2-C9heteroaril grupe mogu biti supstituisane sa jednim ili više R<13>; R<5>je vodonik, Ci-C8heteroalkil, C6-C14aril, C2-C8alkenil ili CrC8alkil, gde pomenuti Ci-C8alkil može biti supstituisan sa jednom ili više C3-C8cikloalkil ili C6-Ci4aril grupa; R<6>je vodonik; R<7>i R<8>, svaki od njih može biti isti ili različit, a nezavisno se bira između vodonik i Ci-C8alkii; R<9>i R<10>, svaki od njih može biti isti ili različit, a nezavisno se biraju između vodonik, CrC8heteroalkil, C3-C8cikloalkil, C2-C9heterociklil, -C(0)R<7>, -C(0)2R<7>i d-C8alkil, gde pomenuti C-i-C8heteroalkil, C3-C8cikloalkil, C2-C9heterociklil i Ci-C8alkil mogu biti supstituisani sa jednom ili više C2-C9heterociklil, C2-C9heteroaril, halo ili C6-C14aril grupa, i gde pomenuta C6-C14aril grupa može biti supstituisana sa jednom ili više CrC8alkil ili halo grupa; ili R<9>i R<10>, zajedno sa atomom azota za koji su vezani, formiraju C2-C9heterociklil ili C2-Cgheteroaril grupu, od kojih svaka može biti supstituisana sa jednom ili više R<13>grupa; R<11>je halogen, C3-C8cikloalkil, CrC8heteroalkil, C2-Cgheterociklil, C6-Ci4aril ili C2-C9heteroaril, od kojih svaki može biti supstituisan sa jednim ili više supstituenata koji se nezavisno biraju između CrC8alkil, C6-C14aril, C2-C9heteroaril, -CF3, -COR1<2a>, -C02R<12a>i -OR12a; R<12a>, R<12b>i R<12c>, svaki od njih može biti isti ili različit, a nezavisno se bira između vodonik i Ci-C8alkil i okso; iliR12<a>i R<12b>, zajedno sa atomom azota za koji su vezani, mogu da formiraju C2-C9heterociklil grupu;R1<3>, svaki nezavisno, bira se između halo, CrC8alkil, -(CR<7>R<8>),OR<7>, -C(0)R<12a>, -S(0)2R<7>, -(CR<7>R<8>)zC(0)NR<12a>R<12b>, -NR<1>2aR12<b>, CrC8alkoksi, -OH i -CF3;

t je ceo broj od 1 do 3; i

z, svaki može biti isti i različit, a nezavisno se bira, predstavljajući 0, 1 ili 2; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili solvat. Još jedna realizacija daje ova jedinjenja formule (I) u kojima R<3>predstavlja vodonik, ili njihovu farmaceutski prihvatljivu so ili solvat.

Naredna realizacija daje jedinjenja formule (VII),

gde su:

R<1>je CrC8alkil, supstituisan sa C6-C14aril ili C2-C9heteroaril, gde pomenuti C6-Ci4aril i C2-Cgheteroaril mogu biti supstituisani sa jednim ili više supstituenata koji se nezavisno biraju između halo i -CN; R<7>se bira između vodonik i CrC8alkil; R<9>se bira između vodonik, Ci-C8heteroalkil, C3-C8cikloalkil, C2-Cgheterociklil, -C(0)R<7>, -C(0)2R<7>i Ci-C8alkil, gde pomenuti CrC8heteroalkil, C3-C8cikloalkil, C2-Cgheterociklil i d-C8alkil mogu biti supstituisani sa jednom ili više C2-Cgheterociklil, C2-C9heteroaril, halo ili C6-C14aril grupa, i gde pomenuta C6-Ci4aril grupa može biti supstituisana sa jednom ili više Ci-C8alkil ili halo grupa;

ili njihova farmaceutski prihvatljiva so ili solvat.

U sledećoj realizaciji daju se jedinjenja formule (VII), gde R<1>predstavlja CrC8alkil, supstituisan sa C6-C14aril, gde pomenuti C6-Ci4aril može biti supstituisan sa jednim ili više supstituenata koji se nezavisno biraju između halo i -CN; ili njihova farmaceutski prihvatljiva so ili solvat. Sledeća realizacija daje jedinjenja formule (VII) u kojima R<1>predstavlja 4-fluorobenzil; ili njihovu farmaceutski prihvatljivu so ili solvat. Sledeća realizacija daje jedinjenja formule (VII) u kojima R<1>predstavlja -(CH2)-C2-C9heteroaril, gde ovaj C2-C9heteroaril može biti supstituisan sa jednim ili više supstituenata koji se nezavisno biraju između halo i -CN; ili njihovu farmaceutski prihvatljivu so ili solvat. Sledeća realizacija daje jedinjenja formule (VII) u kojima R<1>predstavlja -(CH2)-piridil, gde pomenuti piridil može biti supstituisan sa jednim ili više supstituenata koji se nezavisno biraju između halo i

-CN; ili njihovu farmaceutski prihvatljivu so ili solvat.

U sledećoj realizaciji daju se jedinjenja formule (I) do (VII) u kojima se R<9>i R<10>, koji mogu biti isti ili različiti, nezavisno biraju između vodonik, CrC8 heteroalkil, C3-C8cikloalkil, C2-C9heterociklil, -C(0)R<7>, -C(0)2R<7>i Ci-C8alkil, gde pomenuti CrC8heteroalkil, C3-C8cikloalkil, C2-C9heterociklil i CrC8alkil mogu biti supstituisani sa jednom ili više C2-C9heterociklil, C2-C9heteroaril, halo ili C6-C14aril grupa, i gde pomenuta C6-Ci4aril grupa može biti supstituisana sa jednom ili više d-C8alkil ili halo grupa, ili njihova farmaceutski prihvatljiva so ili solvat.

U još jednoj realizaciji daju se jedinjenja formule (I) do (VII) u kojima R<9>iR10, zajedno sa atomom azota za koji su vezani, formiraju C2-C9cikloheteroalkil ili C2-Cgheteroaril grupu, od kojih svaka može biti supstituisana sa jednom ili više R<13>grupa, ili njihova farmaceutski prihvatljiva so ili solvat.

U sledećoj realizaciji daju se jedinjenja formule (I) do (VII) u kojima R<9>i R<10>, zajedno sa atomom azota za koji su vezani, formiraju C2-C9cikloheteroalkil grupu, koja može biti supstituisana sa jednom ili više R<13>grupa, ili njihova farmaceutski prihvatljiva so ili solvat.

Sledeća realizacija daje jedinjenje koje se bira između: 1-[(dimetilamino)metil]-3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-1-(pirolidin-1-ilmetil)-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-1-[(4-metilpiperazin-1-il)metil]-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 1 -{[3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-6-okso-6,7,8,9-tetrahidro-3H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-1-il]metil}-L-prolinamid; 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-1-({[(1R)-2-hidroksi-1-metiletil]amino} metil)-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo(2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-1-(morfolin-4-ilmetil)-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-1-{[(2-hidroksietil)(metil)amino]metil}-3J,^ tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 1-[(3,3-difluoropirolidin-1-il)metil]-3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-1-(piperidin-1-ilmetil)-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 1 -[(3,3-difluoropiperidin-1 -il)metil]-3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 1-{[terc-butil(2-metoksietil)amino]metil}-3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 1 -{[3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-6-okso-6,7,8,9-tetrahidro-3H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-1-il]metil}-N,N-dimetil-L-prolinamid; 1-{[(2R,6S)-2,6-dimetilmorfolin-4-il]metil}-3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 1-{[(3,4difluorobenzil) amino]metil}-3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-1 -{(4-(2-metoksietil)piperazin-1 - il)metil}-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-1-{[metil-(tetrahidro-2H-piran-3-il)amino]metil}-3,7,8,9-tetrahid pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 1 -{[(ciklopropilmetil)(metil)amino]metil}-3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-1-[(tetrahidro-2H-piran-4-ilamino)metil]-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 1-({[(1-etil-1 H-imidazol-2-il)metil](metil)amino}metil)-3-(4fluorobenzil)-7-hidroksi-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 1 -{[etil(metil)amino]metil}-3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 1 -{[(3R,4R)-3,4-difluoropirolidin-1-il]metil}-3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-1 -{[metil(2,2,2-trifluoroetil)amino]metil}-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-1-{[(2-metoksietil)(metil)amino]metil}-3,7,8,9-tetrahi^ 6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; i 1-{[(2,2-difluoroetil)amino]metil}-3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; ili njihova farmaceutski prihvatljiva so ili solvat.

Sledeća realizacija daje jedinjenje koje se bira između: 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-1-(pirolidin-1-ilmetil)-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-1-[(4-metilpiperazin-1-il)metil]-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2;3-c]-1 ;7-nafthiridin-6-on; 1 -{[3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-6-okso-6,7,8,9-tetrahidro-3H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-1-il]metil}-L-prolinamid; 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-1-(morfolin-4-ilmetil)-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 1-[(3,3-difluoropirolidin-1-il)metil]-3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-1-(piperidin-1-ilmetil)-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 1-[(3,3-difluoropiperidin-1-il)metil]-3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 1 -{[3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-6-okso-6,7,8,9-tetrahidro-3H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-1-il]metil}-N,N-dimetil-L-prolinamid; 1-{[(2R,6S)-2,6-dimetilmorfolin-4-il]metil}-3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-37,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-1-{[4-(2-metoksietil)piperazin-1-il]metil}-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; i 1-{[(3R,4R)-3,4-difluoropirolidin-1-il]metil}-3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; ili njihova farmaceutski prihvatljiva so ili solvat.

Naredna realizacija daje jedinjenje koje se bira između: 1-[(dimetilamino)metil]-3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-1-({[(1R)-2-hidroksi-1-metiletil]amino}metil)-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-1 -{[(2-hidroksietil)(metil)amino]metil}-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 1-{[terc-butil(2-metoksietil)amino]metil}-3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 1-{[(3,4-difluorobenzil)amino]metil}-3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-1-{[metil(tetrahidro-2H-piran-3-il)amino]metil}-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 1 -{[(ciklopropilmetil)

(metil)amino]metil}-3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirob 1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-1 -[(tetrahidro-2H-piran-4-ilaminoJmetill-SJ.S.S^etrahidro-eH-pirolop.a-cl-IJ-nafthiridin-e-on; 1-({[(1-etil-1H-imidazol-2-il)metil](metil)amino}metil)-3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 1 -{[etil(metil)amino]metil}-3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-37,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-1-{[metil(2,2,2-trifluoroetil)amino]metil}-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-1-{[(2-metoksietil)(metil)amino]metil}-37,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-17-nafth on; i 1-{[(2,2-difluoroetil)amino]metil}-3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; ili njihova farmaceutski prihvatljiva so ili solvat.

Sledeća realizacija daje jedinjenje koje se bira između: 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-1-(pirolidin-1-ilkarbonil)-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-1-[(4-metoksipiperidln-1-il)karbonil]-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-1-[(4-metilpiperazin-1-il)karbonil]-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; N,N-dietil-3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-6-okso-6,7,8,9-tetrahidro-3H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-1-karboksamid; 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-1-{[(2R)-2-(metoksimetil)pirolidin-1-il]karbonil}-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; i 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-N-metil-6-okso-N-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-6,7,8,9-tetrahidro-3H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-1-karboksamid; ili njihova farmaceutski prihvatljiva so ili solvat.

Još jedna realizacija daje jedinjenje koje se bira između: 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-N,N-dimetil-6-okso-6,7,8,9-tetrahidro-3H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-1-sulfonamid; 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-1 -(pirolidin-1 -ilsulfonil)-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-1-[(4-metilpiperidin-1-il)sulfonilj-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; N-ciklopentil-3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-N-metil-6-okso-6J,8,9-tetrahidro-3H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-1 -sulfonamid; 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-N-(2-metoksietil)-N-metil-6okso-6,7,8,9-tetrahidro-3H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-1-sulfonamid; i 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-1 -(morfolin-4-ilsulfonil)-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; ili njihova farmaceutski prihvatljiva so ili solvat.

Sledeća realizacija daje jedinjenje koje se bira između: 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-1-{3-[metil(tetrahidro-2H-piran-4-ilmetil)amino]propil}-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-1-{3-[metil(piridin-2-ilmetil)amino]propil}-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-1-(3-morfolin-4-ilpropil)-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; N-{3-[3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-6-okso-6,7,8,9-tetrahidro-3H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-1 -il]propil}-N-metilacetamid; i 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-1-[3-(4-metil-3-oksopiperazin-1-il)propil]-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; ili njihova farmaceutski prihvatljiva so ili solvat..

Naredna realizacija daje jedinjenje koje se bira između: 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-1-(2-pirolidin-1-iletil)-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 1-[2-(dimetilamino)etil]-3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo(2,3-c)-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-1 -{2-[metil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino]etil}-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-om 1-[2-(3,3-difluoropirolidin-1-il)etil]-3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-1 -(2-morfolin-4-iletil)-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-1-[2(tetrahidro-2H-piran-4-ilamino)etil]-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-1-{2-[metil(2,2,2-trifluoroetil)amino] etil}-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 1-{2-[(ciklopropilmetil)(metil)amino]etil}-3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-1 -{2-[(2,2,2-trifluoroetil)amino]etil}-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 1-{2-

[(2,2-difluoroetil)amino]etil}-3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-3I7,819-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-1-{2-[(3,3,3-trifluoropropil)amino]etil}-3J,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-1-{2-[(2-me pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; i 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-1-[2-(4-metil-3-oksopiperazin-1 -il)etil]-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; ili njihova farmaceutski prihvatljiva so ili solvat.

Sledeća realizazcija daje jedinjenje koje se bira između: 1-(azepan-1-ilmetil)-3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 1-[(4-acetilpiperidin-1-il)metil]-3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-1-[(4-metoksipiperidin-1-il)metil]-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; i 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi1-{[izobutil(metil)amino]metil}-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; ili njihova farmaceutski prihvatljiva so ili solvat.

U sledećoj realizazciji daje se jedinjenje koje se bira između: 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-1-[(2-metoksietoksi)metil]-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 1-({[(2R)-2,3-dihidroksipropil]oksi}metil)-3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-1-(hidroksimetil)-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-1-[(tetrahidro-2H-piran-4-iloksi)metil]-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 1 -[(2-etoksietoksi)metil]-3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 1 -[(3-etoksipropoksi)metil]-3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-fluorobenzil)-1 -{[(2-fluorobenzil)oksi]metil}-7-hidroksi-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-1-[(piridin-2-ilmetoksi)metil]-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-1-(izobutoksimetil)-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 1-{[2-(benziloxy)etoksi]metil}-3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-

(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-1-[(2-izobutoksietoksi)metil]-3J,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 1-[(2-butoksietoksi)metil]-3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 1-(butoksimetil)-3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-3J,8,9-tetrahidro-6Hpirolo[2,3-c]-17-nafthiridin-6-on; 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-1-[(2-piridin-2H^

pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-1 -{[(4-oksopentil)oksi]metil}-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-1-{[(2-metilpiridin-3-il)metoksi]metil}-3J,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-natthiridin-6-on; 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-1-{[2-(3-metoksifenil)etoksi]metil}-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-1-[(2-fenoksietoksi)metil]-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-1-[(3-piridin-2-ilpropoksi)metil]-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-1-[(2-propoksietoksi)metil]-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-1 -[(2-izopropoksietoksi)metil]-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-1-{[(6-metilpiridin-2-il)metoksi]metil}-3J,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; 1-[(ciklobutilmetoksi)metil]-3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; i 1-{[2-(diizopropilamino)etoksi]metil}-3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on; ili njihova farmaceutski prihvatljiva so ili solvat.

Ovaj pronalazak se odnosi takođe na farmaceutske preparate koji sadrže terapeutski efikasnu količinu najmanje jednog od bilo koga od jedinjenja datih ovde, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so ili solvat, i farmaceutski prihvatljiv nosač ili razblaživač.

Takođe, ovde se daju farmaceutski preparati koji sadrže terapeutski efikasnu količinu najmanje jednog od bilo koga od jedinjenja datih ovde, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so ili solvat, najmanje jedan dodatni anti-HIV agens i farmaceutski prihvatljiv nosač ili razblaživač.

Dalje, daju se postupci za inhibiciju replikacije HIV u sisaru, koji se sastoje od ordiniranja pomenutom sisaru količine najmanje jednog od jedinjenja datih ovde, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli ili solvata, stim da ta količina inhibira replikaciju HIV.

Dalje, daju se postupci za inhibiciju aktivnosti enzima HIV integraze, koji se sastoji od dovođenja u kontakt pomenutog enzima integraze sa količinom najmanje jednog od jedinjenja datih ovde, ili njegovom farmaceutski prihvatljivom solju ili solvatom, stim da ta količina inhibira replikaciju HIV.

Pored toga, ovaj pronalazak daje postupke za tretiranje sindroma stečene imunodeficitarnosti kod sisara, kao što je humano biće, koji se sastoje od ordiniranja pomenutom sisaru terapeutski efikasne količine najmanje jednog od jedinjenja datih ovde, ili njegove terapeutski efikasne soli ili solvata.

Ovaj pronalazak daje još postupke za inhibiranje replikacije HIV kod sisara, gde je pomenuti HIV rezistentan na najmanje jedan inhibitor HIV proteaze, a pomenuti postupak se sastoji od ordiniranja pomenutom sisaru količine najmanje jednog jedinjenja od pomenutih ovde, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli ili solvata, stim da ta količina inhibira replikaciju HIV.

Ovaj pronalazak daje još postupke za inhibiranje replikacije HIV kod sisara, gde je pomenuti HIV rezistentan na najmanje jedan inhibitor HIV reversne transkriptaze, a pomenuti postupak se sastoji od ordiniranja pomenutom sisaru količine najmanje jednog jedinjenja od pomenutih ovde, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli ili solvata, stim da ta količina inhibira replikaciju HIV.

U sledećem aspektu daju se postupci za inhibiranje replikacije HIV kod sisara, koji se sastoje od ordiniranja pomenutom sisaru količine najmanje jednog jedinjenja od pomenutih ovde, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli ili solvata, stim da ta količina inhibira replikaciju HIV.

U još jednom aspektu sadržani su postupci za smanjenje virusnog kapaciteta HIV kod sisara inficiranog sa HIV, kao što je humano biće, koji se sastoje od ordiniranja pomenutom sisaru terapeutski efikasne količine najmanje jednog jedinjenja od pomenutih ovde, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli ili solvata.

Dalje, daje se upotreba najmanje jednog od jedinjenja datih ovde, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli ili solvata, za proizvodnju medikamenta za tretiranje sindroma stečene imunodeficitarnosti (AIDS) ili kompleksa srodnog AIDS-u, koda sisara koji je inficiran sa HIV.

Takođe, ovde se daju postupci za tretiranje HIV infekcije kod sisara inficiranog sa HIV, koji se sastoje od ordiniranja pomenutom sisaru terapeutski efikasne količine najmanje jednog jedinjenja od pomenutih ovde, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli ili solvata.

Podrazumeva se da jedinjenja iz ovog pronalaska ne obuhvataju jedinjenje formule (I) u kome R<1>predstavlja 2,4-difluorobenzil, R2 je vodonik, R3 je vodonik, Z je -(CH2)- i R6 je vodonik, a koje predstavlja jedinjenje 6-(2,4-difluorobenzil)-2-hidroksi-1I6-dihidrodipirolo[3,2-d:3',4'-to]piridin-3(2H)-on.

Termini "sadrži" i "obuhvata", kako se ovde koriste, upotrebljavaju se u otvorenom smislu, koji ne ograičava.

Termin "HIV", kako se ovde koristi, označava virus humane imunodeficitarnosti. Termin "HIV integraza", kako se ovde koristi, označava enzim integrazu virusa humane deficitarnosti.

Termin "Ci-C8alkil", kako se ovde koristi, označava zasićene monovalentne ugljovodonične radikale ravnog ili račvastog ostatka, koji sadrže od 1 do 8 atoma ugljenika. Primeri takvih grupa su, ali bez ograničavanja, metil, etil, propil, izo-propil, n-butil, izo-butil i terc-butil.

Termin "Ci-C8heteroalkil", odnosi se na ravnu ili račvastu alkil grupu, koja ima ukupno od 2 do 12 atoma u lancu, uključujući 1 do 8 atoma ugljenika i jedan ili više heteroatoma koji se biraju između S, O i N, pod uslovom da pomenuti lanac ne sadrži dva susedna O atoma ili dva susedna S atoma. U pomenutim lancima S atomi mogu opciono biti oksidisani sa jednim ili dva atoma kiseonika, dajući sulfide i sulfone, respektivno. Dalje, d-Csheteroalkil grupe u jedinjenjima iz ovog pronalaska mogu da sadrže okso grupu na bilo kom ugljenikovom atomu ili heteroatomu, koja vodi stvaranju stabilnog jedinjenja. Primeri CrC8heteroalkil grupa su, ali bez ograničavanja, alkoholi, alkiletri, primarni, sekundarni i tercijarni amini, amidi, ketoni, estri, sulfidi i sulfoni.

Termin " C2-C8alkenil", kako se ovde koristi, označava alkil ostatak koji sadrži od 2 do 8 atoma ugljenika, koji ima najmanje jednu dvogubu vezu ugljenik-ugljenik. Ova dvoguba veza ugljenik-ugljenik u takvoj grupi može biti bilo gde duž lanca ugljenika sa 2 do 8 atoma, a da vodi stvaranju stabilnog jedinjenja. Ovakve grupe obuhvataju i E i Z izomere pomenutog alkenil ostatka. Primeri takvih grupa su, ali bez ograničavanja, etenil, propenil, butenil, alil i pentenil. Termin "alil", kako se ovde koristi, označava -CH2CH=CH2grupu. Termin "C(R)=C(R)", kako se ovde koristi, predstavlja dvogubu vezu ugljenik-ugljenik u kojoj je svaki ugljenik supstituisan sa R grupom.

Kako se ovde koristi, termin "C2-C8alkinil" označava alkil ostatak koji sadrži od 2 do 8 atoma ugljenika, koji ima najmanje jednu trogubu vezu ugljenik-ugljenik. Ova troguba veza ugljenik-ugljenik u takvoj grupi, može biti bilo gde duž lanca od 2 do 8 atoma ugljenika, a da vodi stvaranju stabilnog jedinjenja. Primeri takvih grupa su, ali bez ograničavanja, etin, propin, 1-butin, 2-butin, 1-pentin, 2-pentin, 1-heksin, 2-heksin i 3-heksin.

Termin "C3-C8cikloalkil grupa" označava zasićenu, monocikličnu, fuzionisanu, spirocikličnu ili policikličnu prstenastu strukturu, koja ima ukupno od 3 do 8 atoma ugljenika. Primeri ovih grupa su, ali bez ograničavanja, ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, ciklopentenil, cikloheksil, cikloheksenil i adamantil.

Termin "C6-Ci4aril", kako se ovde koristi, označava grupu koja se izvodi iz aromatičnog ugljovodonika koji sadrži od 6 do 14 atoma ugljenika. Primeri takvih grupa su, ali bez ograničavanja, fenil ili naftil. Termini "Ph" i "fenil", kako se ovde koriste, označavaju -CeH5grupu. Termin "benzil", kako se ovde koristi, označava -CH2C6H5grupu.

Termin "C2-Cgheteroaril", kako se ovde koristi, označava aromatičnu hidrocikličnu grupu koja ima ukupno od 5 do 10 atoma u prstenu, a sadrži od 2 do 9 atoma ugljenika i od jedan do četiri heteroatoma, od kojih se svaki nezavisno bira između O, S i N, ali pod uslovom da prsten pomenutih grupa ne sadrži dva susedna O atoma ili dva susedna S atoma. Heterociklične grupe obuhvataju i prstenaste sisteme sa fuzionisanim benzo. Primeri aromatičnih heterocikličnih grupa su piridinil, imidazolil, pirimidinil, pirazolil, triazolil, pirazinil, tetrazolil, furil, tienil, izoksazolil, tiazolil, oksazolil, izotiazolil, pirolil, hinolinil, izohinolinil, indolil, benzimidazolil, benzofuranil, cinolinil, indazolil, indoliizinil, ftalazinil, piridazinil, triazinil, izoindolil, pteridinil, purinil, oksadiazolil, tiadiazolil, furazanil, benzofurazanil, benzotiofenil, benzotiazolil, benzooksazolil, hinazolinil, hinoksalinil, nafthiridinil i furopiridinil. Ove C2-C9heteroaril grupe mogu biti spojene preko C ili spojene preko N, već kako je to moguće. Na primer, grupa koja se izvodi iz pirola može biti pirol-1-il (spojena preko N) ili pirol-3-il (spojena preko C). Dalje, grupa koja se izvodi iz imidazola, može biti imidazol-1-il (spojena preko N) ili imidazol-3-il (spojena preko C).

Termin "C2-C8heterociklil", kako se ovde koristi, označava nearomatičnu, monocikličnu, bicikličnu, tricikličnu, spirocikličnu ili tetracikličnu prstenastu strukturu, koja ima od 4 do 10 atoma u prstenastom sistemu, a sadrži od 2 do 9 atoma ugljenika i od jedan do četiri heteroatoma, od kojih se svaki nezavisno bira između 0, S i N, pod uslovom da prsten pomenutih grupa ne sadrži dva susedna O atoma ili dva susedna S atoma. Dalje, ovakve C2-C9heterociklil grupe mogu da sadrže okso supstituent na bilo kom dostupnom atomu, stim da vodi stabilnom jedinjenju. Na primer, takva jedna grupa može da sadrži okso atom na dostupnom atomu ugljenika ili azota. Takva grupa može da sadrži više od jednog okso supstituenta, ukoliko je to hemijski ostvarivo. Pored toga, podrazumeva se da kada ovakva C2-C9heterociklil grupa sadrži atom sumpora, pomenuti atom sumpora može biti oksidisan sa jednim ili dva atoma kiseonika, dajući ili sulfoksid ili sulfon. Primer 4-člane heterociklične grupe je azetidinil (izvodi se iz azetidina). Primer 5-člane heterociklične grupe je tiazolil, a primer 10-člane heterociklične grupe je hinolinil. Dalje, primeri ovakvih C2-Cgheterocikličnih grupa su, ali bez ograničavanja, pirolidinil, tetrahidrofuranil, dihidrofuranil, tetrahidrotienil, tetrahidropiranil, dihidropiranil, tetrahidrotiopiranil, piperidino, morfolino, tiomorfolino, tioksanil, piperazinil, azetidinil, oksetanil, tietanil, homopiperidinil, oksepanil, tiepanil, oksazepinil, diazepinil,tiazepinil, 1,2,3,6-tetrahidropiridinil, 2-pirolinil, 3-pirolinil, 2H-piranil, 4H-piranil, dioksanil, 1,3-dioksanil, pirazolinil, ditianil, ditiolanil, dihidropiranil, dihidrotienil, dihidrofuranil, pirazolidinil, imidazolidinil, 3-azabiciklo[3.1 .Ojheksanil, 3-azabiciklo[4.1.0]heptanil, 3H-indolil hinolizinil, 3-oksopiperazinil, 4-metilpiperazinil, 4-etilpiperazinil i 1-okso-2,8-diazaspiro[4.5]dec-8-il.

Termin "CrC8alkoksi", kako se ovde koristi, označava O-alkil grupu, gde pomenuta alkil grupa sadrži od 1 do 8 atoma ugljenika, a ravna je, račvasta ili ciklična. Primeri ovih grupa su, ali bez ograničavanja, metoksi, etoksi, n-propiloksi, izo-propiloksi, n-butoksi, izo-butoksi, terc-butoksi, ciklopentiloksi i cikloheksiloksi.

Termini "halogen" i "halo", kako se ovde koriste, označavaju fluor, hlor, brom i jod.

Termin "supstituisan" označava da naznačena grupa ili ostatak nosi jedan ili više supstituenata. Termin "nesupstituisan" označava da naznačena grupa ne nosi supstituente. Termin "opciono supstituisan" označava da naznačena grupa može biti nesupstituisana ili supstituisana sa jednim ili više supstituenata. Podrazumeva se takođe, da u jedinjenjima iz ovog pronalaska, kada se kaže da je grupa "nesupstituisana" ili je "supstituisana" sa manje grupa nego da se ispune sve valencije u atomima tog jedinjenja, pri čemu su preostale valencije u toj grupi ispunjene sa vodonikom. Na primer, ako je C6grupa, koja se takođe naziva "fenil", ovde supstituisana sa dodatnim supstituentom, onaj ko je uobičajeno verziran u stanje tehnike, shvata da ta grupa ima 4 otvorene mogućnosti preostale na atomima ugljenika C6aril prstena (6 početnih pozicija, minus jedna za koju je ostatak jedinjenja iz ovog pronalaska vezan, minus još jedan dodatni supstituent, što daje 4). U ovakvim slučajevima, je za svaki od preostala 4 atoma ugljenika vezan jedan atom vodonika, kako bi se zasitile njihove valencije. Slično, ukoliko je C6aril grupa prisutna u jedinjenjima, pa se kaže da je "disupstituisana", onaj ko je uobičajeno verziran u stanje tehnike shvata da to znači da C6aril ima preostala 3 atoma ugljenika koji su nesupstituisani. Za svaki od ova tri atoma ugljenika vezan je jedan atom vodonika, kako bi se zasitile njihove valencije.

Termin "solvat", kako se ovde koristi, označava farmaceutski prihvatljiv solvatni oblik jedinjenja iz ovog pronalaska, koji zadržava biološku efikasnost tog jedinjenja. Primeri solvata su, ali bez ograničavanja, jedinjenja iz ovog pronalaska u kombinaciji sa vodom, izopropanolom, etanolom, metanolom, dimetilsulfoksidom (DMSO), etilacetatom, sirćetnom kiselinom, etanolaminom ili njihovim smešama. Posebno se naglašava da u ovom pronalasku jedan molekul rastvarača može biti povezan sa jednim molekulom jedinjenja iz ovog pronalaska, kao što je hidrat. Dalje, posebno se naglašava da u ovom pronalasku, više od jednog molekula rastvarača može biti povezano sa jednim molekulom jedinjenja iz ovog pronalaska, kao što je dihidrat. Pored toga, posebno se naglašava da u ovom pronalasku i manje od jednog molekula rastvarača može biti povezano sa jednim molekulom jedinjenja iz ovog pronalaska, kao što je hemihidrat. Dalje, naglašava se za solvate iz ovog pronalaska, da se podrazumeva da solvati iz ovog pronalaska zadržavaju biološku efikasnost ne-hidratnog oblika ovih jedinjenja.

Termin "farmaceutski prihvatljiva so", kako se ovde koristi, označava so jedinjenja iz ovog pronalaska koja zadržava biološku efikasnost slobodnih kiselina i baza naznačenog derivata, a da nije biološki ili na neki drugi način nepoželjna.

Termin "farmaceutski prihvatljiva formulacija", kako se ovde koristi, označava kombinaciju jedinjenja iz ovog pronalaska, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli ili solvata, i nosač, razblaživač i/ili dodaci, koji su kompatibilni sa jedinjenjem iz ovog pronalaska, a nisu štetni po onog ko ih prima. Farmaceutske formulacije se mogu pripremiti po procedurama koje su poznate onima koji su uobičajeno verzirani u stanje tehnike. Na primer, jedinjenja iz ovog pronalaska se mogu formulisati sa uobičajenim dodacima, razblaživačima, nosačima i formirati se u tablete, kapsule i slično. Primeri, dodataka, razblaživača i nosača, pogodnih za ovakve formulacije, su sledeći: punioci i ekstenderi, kao što su škrob, šećeri, manitol i silikatni derivati; vezivni agensi, kao što je karboksimetilceluloza i drugi derivati celuloze, alginati, želatin i polivinilpirolidon; agensi za vlaženje, kao što je glicerin; agensi za dezintegraciju, kao što su povidon, natrijum-skrobglikolat, natrijum-karboksimetilceluloza, agar, kalcijum-karbonat i natrijum-bikarbonat; agensi za usporavanje rastvaranja, kao što je parafin; ubrzivači resorpcije, kao što su jedinjenja kvaternernog amonijaka; površinski aktivni agensi, kao što su cetil alkohol, glicerin monostearat; adsorpcioni nosači, kao što su kaolin i bentonit; i lubrikanti, kao što su talk, kalcijum- i magnezijum-stearat i čvrsti polietilenglikoli. Konačni farmaceutski oblici mogu biti pilule, tablete, prahovi, pastile, kesice, kašete ili sterilno pakovani prahovi i slično, zavisno od vrste dodatka koji se koristi. Pored toga, posebno se naglašava da farmaceutski prihvatljive formulacije iz ovog pronalaska mogu da sadrže i više od jednog aktivnog sastojka. Na primer, takve formulacije mogu da sadrže više od jednog jedinjenja iz ovog pronalaska. Alternativno, takve formulacije mogu da sadrže jedno ili više jedinjenja iz ovog pronalaska i jedan ili više dodatnih anti-HIV agenasa.

Termin "inhibiranje replikacije HIV" označava inhibiranje replikacije virusa humane imunodeficitarnosti (HIV) u ćeliji. Ovakva ćelija može biti prisutnain vitro,ili može biti prisutnain vivo,kao što je u sisaru, kao što je humano biće. Ova inhibicija se može ostvariti ordiniranjem jedinjenja iz ovog pronalaska, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli ili solvata u količini koja inhibira HIV, u ćeliju, kao što je ćelija nekog sisara. Kvantitativni ishod inhibicije replikacije HIV u ćeliji, kao što je ćelija sisara, može se meriti korišćenjem postupaka koji su poznati onima koji su uobičajeno verzirani u stanje tehnike. Na primer, količina jedinjenja iz ovog pronalaska se može ordinirati sisaru, ili sama ili kao deo farmaceutski prihvatljive formulacije. Zatim se mogu uzeti uzorci krvi iz tog sisara, pa kvantitativno odrediti količina virusa HIV u uzorku, koristeći postupke koji su poznati onima koji su uobičajeno verzirani u stanje tehnike. Smanjenje količine virusa HIV u uzorku, u poređenju sa količinom nađenom pre ordiniranja jedinjenja iz ovog pronalaska, predstavlja inhibiciju replikacije HIV virusa u tom sisaru. Ordiniranje jedinjenja iz ovog pronalaska u ćeliju, kao što je ćelija sisara, može da bude u obliku jedne doze ili niza doza. U slučaju više od jedne doze, ove doze se mogu ordinirati u jednom danu, ili se mogu ordinirati duže od jednog dana.

"Agens koji inhibira HIV", označava jedinjenje iz ovog pronalaska ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so ili solvat.

Termin "anti-HIV agens", kako se ovde koristi, označava jedinjenje ili kombinaciju jedinjenja koji su u stanju da inhibiraju replikaciju HIV u ćeliji, kao što je ćelija sisara. Ova jedinjenja inhibiraju replikaciju HIV po bilo kom mehanizmu koji je poznat onima koji su uobičajeno verzirani u stanje tehnike. Termini "količina koja inhibira virus humane imunodeficitarnosti", "količina koja inhibira HIV" i "količina koja inhibira replikaciju HIV", kako se ovde koriste, odnose se na količinu jedinjenja iz ovog pronalaska, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli ili solvata, neophodnu da inhibira replikaciju virusa humane imunodeficitarnosti (HIV)in vivo,kao što je u nekom sisaru, iliin vitro.Količina takvog jedinjenja neophodna da izazove ovakvu inhibiciju može se odrediti bez nepotrebnog eksperimentisanja, koristeći postupke koji su ovde opisani i one koji su poznati onima koji su uobičajeno verzirani u stanje tehnike.

Termin "aktivnost enzima integraze koja inhibira HIV", kako se ovde koristi, označava smanjenje aktivnosti ili funkcionisanja enzima HIV integraze, biloin vitroiliin vivo,kao što je u sisaru, kao što je humano biće, preko dovođenja u kontakt ovog enzima sa jedinjenjem iz ovog pronalaska.

Termini "količina enzima integraze koja inhibira HIV" i "količina koja inhibira HIV integrazu", kako se ovde koriste, odnose se na količinu jedinjenja iz ovog pronalaska, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so ili solvat, neophodnu za smanjenje aktivnosti enzima HIV integraze, biloin vivo,kao što je u sisaru, iliin vitro.Ova inhibicija se može ostvariti sa jedinjenjem iz ovog pronalaska, vezivanjem direktno za enzim HIV integraze. Pored toga, aktivnost enzima HIV integraze se može smanjiti u prisustvu jedinjenja iz ovog pronalaska i kada se ne odigra direktno vezivanje između enzima i ovog jedinjenja. Dalje, ova inhibicija može biti kompetitivna, ne-kompetitivna ili bez kompetitivnosti. Ova inhibicija se može odrediti korišćenjem sistemain vitroiliin vivo,ili kombinovanjem oba, koristeći postupke koji su poznati uobičajeno verziranim u stanje tehnike.

Termin "terapeutski efikasna količina", kako se ovde koristi, označava količinu jedinjenja iz ovog pronalaska, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli ili solvata, koja je, kada se ordinira sisaru kome je neophodan takav tretman, dovoljjna da se ostvari tretman, kako je to definisano gore. Dakle, terapeutski efikasna količina jedinjenja iz ovog pronalaska, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli ili solvata, predstavlja količinu koja je dovoljna da moduliše ili inhibira aktivnost enzima HIV integraze, ali tako da se stanje bolesti, posredovano sa aktivnošću enzima HIV integraze, umanji ili olakša.

Termini "tretirati", "tretira" i "tretman" se odnose na bilo koji tretman bolesti ili stanja posredovanih HIV integrazom kod sisara, a naročito kod humanog bića, koji se sastoji od: (i) prevencije ove bolesti ili stanja da se odigrava u subjektu, koji može da ima predispoziciju za to stanje, tako da se taj tretman sastoji od profilaktičkog tretmana za to patološko stanje; (ii) modulisanja ili inhibiranja bolesti ili stanja, tj. zaustavljanja njihovog napredovanja; (3) poboljšanja bolesti ili stanja, tj. izazivanja regresije bolesti ili stanja; ili (iv) poboljšanja i/ili ublaženja bolesti ili stanja, tj.poboljšanja inflamatronog odgovora bez delovanja na bolesti ili stanje kojoj je subjekt podlegao.

Termini "rezistentan", "rezistentnost" i "HIV rezistentan", koriste se ovde tako što se odnose na virus HIV, demonstriranjem smanjenja u osetljivosti na posmatrani lek. Sisar, koji je inficiran sa HIV, koji je rezistentan na određeni anti-HIV agens ili kombinaciju agenasa, obično se iskazuje kroz porast virusnog kapaciteta HIV, uprkos nastavku ordiniranja tog agensa ili agenasa. Rezistentnost može biti ili genotipna, što znači da se dogodila mutacija u genetskom preobraženju HIV, ili fenotipska, što znači da je rezistentnost otkrivena uspešnim rastom laboratorijskih kultura virusa HIV u prisustvu anti-HIV agensa ili kombinacije takvih agenasa.

Termini "inhibitor proteaze" i "inhibitor HIV proteaze", kako se ovde koriste, odnose se na jedinjenja ili kombinacije jedinjenja koje interferiraju sa ispravnim funkcionisanjem enzima HIV proteaze, koja je preobražavanjem jezgra virusa odgovorna za cepanje dugih spirala proteina u odvojene proteine.

Termini "inhibitor reversne transkriptaze" i "inhibitor HIV reversne transkriptaze", kako se ovde koriste, odnose se na jedinjenja ili kombinacije jedinjenja koji interferiraju sa ispravnim funkcionisanjem enzima HIV reversne transkriptaze, koji je odgovoran za konvertovanje jednostruke spirale RNK virusa HIV u DNK virusa HIV.

Termini "inhibitor fuzionisanja" i "inhibitor HIV fuzionisanja", kako se ovde koriste, odnose se na jedinjenja ili kombinacije jedinjenja koji se vezuju na omotač proteina gp41 na površini ćelija CD4, blokirajući tako strukturne promene neophodne za fuzionisanje virusa i ćelije.

Termini "inhibitor integraze" i "inhibitor HIV integraze", kako se ovde koriste, odnose se na jedinjenje ili kombinaciju jedinjenja koji interferiraju sa ispravnim funkcionisanjem enzima HIV integraze, koji je odgovoran za insertovanje gena HIV u DNK ćelije domaćina.

Termin "antagonist CCR5", kako se ovde koristi, odnosi se na jedinjenja ili kombinacije jedinjenja koji blokiraju infekciju nekih tipova ćelija sa HIV, preko perturbacije aktivnosti ko-receptora CCR5.

Termini "virusni kapacitet" ili "virusni HIV kapacitet", kako se ovde koriste, označavaju količinu HIV u krvotoku sisara, kao što je humano biće. Količina virusa u krvi sisara se može odrediti merenjem količine RNK virusa HIV u krvi, korišćenjem postupaka koji su poznati onima koji su uobičajeno verzirani u stanje tehnike.

Termini "jedinjenje iz ovog pronalaska" ili "bilo koje od jedinjenja opisanih ovde", odnose se na gore pomenuta jedinjenja, uključujući jedinjenja formule (I) do (VII), kao i ona u Primerima u nastavku koji sledi, a obuhvataju ona koja su generički opisana ili ona koja su opisana kao vrste. Ovaj naziv se odnosi takođe i na farmaceutski prihvatljive soli ili solvate tih jedinjenja.

Detaljan opis

Jedinjenja iz ovog pronalaska su korisna za modulisanje ili inhibiranje enzima HIV integraze. Određenije, jedinjenja iz ovog pronalaska su korisna kao modulatori ili inhibitori aktivnosti HIV integraze, pa su stoga korisna za prevenciju i/ili tretman bolesti ili stanja posredovanih sa HIV (npr. AIDS i ARC), sama ili u kombinaciji sa drugim poznatim antivirusnim agensima.

X

U skladu sa konvencijom koja se koristi u stanju tehnike, simbol se ovde koristi u strukturnim formulama da naznači vezu koja je mesto spajanja ostatka ili supstituenta sa jezgrom ili skeletom strukture. U skladu sa drugom konvencijom, u nekim strukturnim formulama, atomi ugljenika i njihova veza sa

?

atomima vodonika se ne naznačuje eksplicitno, npr. ^ predstavlja metil

grupu,

itd.

predstavlja etil grupu,

predstavlja ciklopentil grupu,

Jedinjenja iz ovog pronalaska mogu imati asimetrične atome ugljenika. Veza između atoma u jedinjenjima iz ovog pronalaska se može označiti korišćenjem pune linije ( ), punog klina(~~ mm)ili isprekidanog klina ( """""i). Upotrebom pune linije za označavanje veze sa asimetričnim atomom ugljenika želi se naznačiti da se posmatra samo pokazani stereoizomer. Moguće je da jedinjenja iz ovog pronalaska sadrže i više od jednog asimetričnog atoma ugljenika. U tim jedinjenjima upotreba pune linije da se označe asimetrični atomi ugljenika znači da se ukazuje na to da su obuhvaćeni svi mogući stereoizomeri. Upotreba pune linije za označavanje veza sa jednim ili više asimetričnih atoma ugljenika u jedinjenju iz ovog pronalaska, a upotreba punog ili sprekidanog klina, za označavanje veza sa drugim asimetričnim atomima u istom jedinjenju, znači da se ukazuje na prisustvo smeše dijastereomera. Ukoliko se drugačije ne naglasi, to znači da su ovde obuhvaćeni svi mogući stereoizomeri jedinjenja iz ovog pronalaska.

Termin "stereoizomeri" odnosi se na jedinjenja koja imaju identičan hemijski sastav, ali se razlikuju u pogledu prostornog rasporeda njihovih atoma ili grupa. Određenije, termin "enantiomeri" sa odnosi na dva stereoizomera nekog jedinjenja kod kojih se njihovi likovi u ogledalu ne mogu preklopiti. Termini "racemski" ili "racemska smeša", kako se ovde koriste, odnose se na 1:1 smeše enantiomera određenog jedinjenja. Termin "dijastereomeri" se odnosi na vezu između para stereoizomera koji sadrže dva ili više centara asimetrije, a ne predstavljaju lik u ogledalu jedan u odnosu na drugi.

Ukoliko je derivat koji se koristi u postupku iz ovog pronalaska baza, željena so se može dobiti bilo kojim pogodnim postupkom, poznatim u stanju tehnike, uključujući tretman slobodne baze sa nekom neorganskom kiselinom, kao što je hlorovodonična kiselina, bromovodonična kiselina, sumporna kiselina, azotna kiselina, fosforna kiselina i slično, ili sa nekom organskom kiselinom, kao što su sirćetna kiselina, jabučna kiselina, ćilibarna kiselina, bademova kiselina, fumarna kiselina, malonska kiselina, piruvinska kiselina, oksalna kiselina, glikolna kiselina, salicilna kiselina, piranozidilna kiselina, kao što je glukuronska kiselina ili galakturonska kiselina, pa alfa-hidroksi kiselina, kao što je limunska kiselina ili vinska kiselina, pa amino kiselina, kao što je asparaginska kiselina ili glutamsinksa kiselina, pa aromatična kiselina, kao što je benzoeva kiselina ili cinaminska kiselina, pa sulfonska kiselina, kao što je p-toluensulfonska kiselina i etansulfonska kiselina i slično.

Ukoliko je derivat koji se koristi u postupku iz ovog pronalaska kiselina, željena so se može dobiti bilo kojim pogodnim postupkom, poznatim u stanju tehnike, uključujući tretman slobodne kiseline sa neorganskom ili organskom bazom, kao što su amini (primarni, sekundarni ili tercijarni), hidroksidi alkalnih ili zemnoalkalnih metala i slično. Ilustrativni primeri pogodnih soli su organske soli, koje se izvode iz amino kiselina, kao što je glicin i arginin; iz amonijaka, primarnih, sekundardnih i tercijarnih amina, pa cikličnih amina, kao što je piperidin, morfolin i piperazin, kao i neorganske soli koje su derivati natrijuma, kalcijuma, kalijuma, magnezijuma, mangana, gvožđa, bakra, cinka, aluminijuma i litijuma.

Namera je da "solvat" označava farmaceutski prihvatljiv solvatni oblik naznačenog jedinjenja, koji zadržava biološku efikasnost tog jedinjenja. Primeri solvata su, ali bez ograničavanja, jedinjenja iz ovog pronalaska u kombinaciji sa vodom, izopropanolom, etanolom, metanolom, dimetilsulfoksidom (DMSO), etilacetatom, sirćetnom kiselinom, etanolaminom ili njihovim smešama.

"Farmaceutski prihvatljiva so" označava so koja zadržava biološku efikasnost slobodnih kiselina ili baza naznačenog derivata, sadrži farmakološki prihvatljive anjone, a nije biološki ili na drugi način nepoželjna. Primeri farmaceutski prihvatljivih soli su, ali bez ograničavanja, acetat, akrilat, benzensulfonat, benzoat (kao što je hlorobenzoat, metilbenzoat, dinitrobenzoat, hidroksibenzoat i metoksibenzoat), bikarbonat, bisulfat, bisulfit, bitartarat, borat, bromid, butin-1,4-dioat, kalcijum-edetat, kamzilat, karbonat, hlorid, kaproat, kaprilat, klavulanat, citrat, dekanoat, dihidrohlorid, dihidrogenfosfat, edetat, edislat, estolat, ezilat, etilsukcinat, formijat, fumarat, glukeptat, glukonat, glutamat, glikolat, glikolilarsanilat, heptanoat, heksin-1,6-dioat, heksilrezorcinat, hidrabamin, hidrobromid, hidrohlorid, y-hidroksibutirat, jodid, izobutirat, izotionat, laktat, laktobionat, laurat, malat, maleat, malonat, mandelat, mezilat, metafosfat, metansulfonat, metilsulfat, monohidrogenfosfat, mukat, napsilat, naftalin-1-sulfonat, naftalin-2-sulfonat, nitrat, oleat, oksalat pamoat (emboat), palmitat, pantotenat, fenilacetat, fenilbutirat, fenilpropionat, ftalat, fosfat/difosfat, poligalaktouronat, propansulfonat, propionat, pirofosfat, pirosulfat, salicilat, stearat, subacetat, suberat, sukcinat, sulfat, sulfonat, sulfit, tanat, tartarat, teoklat, tozilat, trietiojodid i valerat.

Jedinjenja iz ovog pronalaska koja su po prirodi bazna u stanju su da formiraju mnoštvo različitih soli sa raznim neorganskim i organskim kiselinama. Mada te soli moraju biti farmaceutski prihvatljive za ordiniranje animalnim bićima, često je poželjno u praksi da se prvo izoluje jedinjenje iz ovog pronalaska iz reakcione smeše kao farmaceuski neprihvatljiva so, a da se zatim jednostavno konvertuje nazad u jedinjenje slobodne baze, pa u farmaceutski prihvatljivu kiselu adicionu so. Kisele adicione soli baznih jedinjenja iz ovog pronalaska mogu se dobiti tretiranjem tog bazog jedinjenja u suštini sa ekvivalentnom količinom odabrane mineralne ili organske kiseline u vodenoj sredini ili u pogodnom organskom rastvaraču, kao što je metanol ili etanol. Posle isparavanja rastvarača dobija se željena čvrsta so. Željena kisela so se može takođe dobiti taloženjem iz rastvora slobodne baze u organskom rastvaraču, dodavanjem ovom rastvoru odgovarajuće mineralne ili organske kiseline.

Ona jedinjenja iz ovog pronalaska koja su po prirodi kisela u stanju su da formiraju bazne soli sa raznim farmakološki prihvatljivim katjonima. Primeri takvih soli su soli alkalnih ili zemnoalkalnih metala, a posebno natrijumove i kalijumove soli. Sve ove soli se dobijaju konvencionalnim tehnikama. Hemijske baze, koje se koriste kao reagensi za pripremanje farmaceutski prihvatljivih baznih soli iz ovog pronalska, su one koje formiraju netoksične bazne soli sa kiselim jedinjenjima iz ovog pronalaska. Ove netoksične bazne soli su one koje se izvode iz onih farmaceutski prihvatljivih katjona, kao što su natrijum, kalijum, kalcijum, magnezijum, itd. Ove soli se mogu dobiti tretiranjem odgovarajućih kiselih jedinjenja sa vodenim rastvorom koji sadrži željene farmakološki prihvatljive katjone, pa zatim uparavanjem dobijenog rastvora do suva, poželjno pod sniženim pritiskom. Alternativno, one se mogu takođe dobiti mešanjem kiselih jedinjenja u rastvoru nižih alkana sa željenim alkoksidom alkalnog metala, pa zatim uparavanjem dobijenog rastvora do suva, na isti način kao gore. U svakom slučaju poželjno je da se koriste stehiometrijske količine reagenasa, kako bi se obezbedila kompletnost reakcije i maksimalan prinos željenog konačnog proizvoda.

Ukoliko je jedinjenje iz ovog pronalaska baza, željena farmaceutski prihvatljiva so se može dobiti bilo kojim pogodnim postupkom dostupnim u stanju tehnike, na primer, tretmanom slobodne baze sa neorganskom kiselinom, kao što je hlorovodonična kiselina, bromovodonična kiselina, sumporna kiselina, azotna kiselina, fosforna kiselina i slično, ili sa organskom kiselinom, kao što je sirćetna kiselina, jabučna kiselina, ćilibarna kiselina, bademova kiselina, fumarna kiselina, malonska kiselina, piruvinska kiselina, oksalna kiselina, glikolna kiselina, salicilna kiselina, piranozidilna kiselina kao što je glukuronska kiselina ili galaktouronska kiselina, pa alfa-hidroksi kiselina kao što je limunska kiselina ili vinska kiselina, pa aminokiselina kao što je asparaginska kiselina ili glutaminska kiselina, pa aromatična kiselina, kao što je benzoeva kiselina ili cinaminska kiselina, pa sulfonska kiselina, kao što je p-toluensulfonska kiselina ili etansulfonska kiselina i slično.

Ukoliko je jedinjenje iz ovog pronalaska kiselina, željena farmaceutski prihvatljiva so se dobija bilo kojim pogodnim postupkom, na primer tretmanom ove slobodne kiseline sa neorganskom ili organskom bazom, kao što je amin (primarni, sekundarni ili tercijarni), hidroksid alkalnog metala ili hidroksid zemnoalkalnog metala i slično. Ilustrativni primeri pogodnih soli su organske soli izvedene iz aminokiselina, kao što su glicin i arginin, amonijak, primarni, sekundarni i tercijarni amini, pa ciklični amini kao što su piperidin, morfolin i piperazin, i neorganske soli izvedene iz natrijuma, kalcijuma, kalijuma, magnezijuma, mangana, gvožđa, bakra, cinka, aliminijuma i litijuma.

U slučaju čvrstih agenasa, oni koji su verzirani u stanje tehnike shvataju da pronađena jedinjenja, agensi i soli mogu postojati u raznim kristalnim i polimorfnim oblicima, a svi su unutar obima ovog pronalaska i naznačenih formula.

Jedinjenja iz ovog pronalaska se mogu formulisati u farmaceutske preparate, kao što se opisuje u nastavku, u bilo kom farmaceutskom obliku, za koje stručnjak u stanju tehnike smatra da su pogodni. Farmaceutski preparati iz ovog pronalaska sadrže terapeutski efikasnu količinu najmanje jednog jedinjenja iz ovog pronalaska i inertan, farmaceutski prihvatljiv nosač ili razblaživač.

Da bi se tretirale ili podvrgle prevenciji bolesti ili stanja posredovanih sa HIV, farmaceutski preparat iz ovog pronalaska se ordinira u pogodnoj formulaciji, koja se dobija kombinovanjem terapeutski efikasne količine (tj.efikasna količina koja moduliše, reguliše ili inhibira HIV integrazu, tako da se postiže terapeutska efikasnost) najmanje jednog jedinjenja iz ovog pronalaska (kao aktivnog sastojka) sa jednim ili više farmaceutski prihvatljivih nosača, koji se mogu birati, na primer, između razblaživača, dodataka i pomoćnih materijala, koji olakšavaju preradu aktivnih jedinjenja u konačne farmacutske preparate.

Farmaceutski nosači, koji se koriste, mogu biti čvrsti ili tečni. Primeri čvrstih nosača su laktoza, saharoza, talk, želatin, agar, pektin, magnezijum-stearat, stearinska kiselina i slično. Primeri tečnih nosača su sirup, kikirikijevo ulje, maslinovo ulje, voda i slično. Slično, pronađena jedinjenja mogu da sadrže materijal koji vremenski odlaže ili vremenski otpušta lek, koji su poznati u stanju tehnike, kao što su glicerilmonostearat ili glicerildistearat, sami ili sa voskom, etilcelulozom, hidroksipropilmetilcelulozom, metilmetakrilatom i slično. Dalje, mogu se dodavati aditivi ili dodaci da bi se dobila željena svojstva formulacije. Na primer, mogu se dodati pojačavači biološke dostupnosti, kao što su Labrasol, Gelucire i slično, ili agensi za formulisanje, kao što je CMC (karboksimetilceluloza), PG (propilenglikol) ili PEG (polietilenglikol). Može se dodati Gelucire<®>, polu-čvrst nosač koji štiti aktivne sastojke od svetla, vlage i oksidacije, npr. prilikom dobijanja formulacije za kapsule.

Ukoliko se koristi čvrst nosač, preparat se može tabletirati, staviti u tvrde želatinske kapsule u obliku praha ili peleta, ili se formirati u troheje ili pastile. Količina čvrstog nosača može da varira, ali obično je od oko 25 mg do 1 g. Ukoliko se koristi tečni nosač, preparat može bitiu obliku sirupa, emulzije, mekih želatinskih kapsula, sterilnog rastvora za injekcije ili suspenzije u ampuli ili fioli, ili u nevodenoj suspenziji. Ukoliko se koristi polučvrst nosač, preparat može biti u obliku formulacije za tvrde ili meke želatinske kapsule. Pronađena jedinjenja se pripremaju u obliku jedinične doze prikladne načinu ordiniranja, npr. za parenteralno ili za oralno ordiniranje.

Da bi se dobio oblik doze stabilan u vodi, farmaceutski prihvatljiva so jedinjenja iz ovog pronalaska se može rastvoriti u vodenom rastvoru organske ili neorganske kiseline, kao što je 0,3 M rastvor ćilibarne kiseline ili limunske kiseline. Ukoliko nije dostupan rastvoran oblik soli, agens se može rastvoriti u podesnom ko-rastvaraču ili kombinacijama ko-rastvarača. Primeri pogodnih ko-rastvarača su alkohol, propilenglikol, polietilenglikol 300, polisorbat 80, glicerin i slično, u koncentracijama koje se kreću od 0-60% ukupne zapremine. U realizacij uzetoj za primer jedinjenje formule (I) se rastvori u DMSO, pa razblaži vodom. Preparat može takođe biti u obliku rastvora oblika soli aktivnog sastojka u odgovarajućem vodenom nosaču, kao što je voda ili izotonični rastvor soli ili dekstroze.

Ispravna formulacija zavisi od odabranog puta ordiniranja. Za injekcije, agensi jedinjenja iz ovog pronalaska se mogu formulisati u vodenim rastvorima, poželjno u fiziološki kompatibilnom puferu, kao što je Hanks-ov rastvor, Ringer-ov rastvor ili fiziološki slani pufer. Za transmukozno ordiniranje, u formulaciji se koriste penetranti, koji odgovaraju barijeri kroz koju treba da prođu. Obično, ovi penetranti su poznati u stanju tehnike.

Za oralno ordiniranje, ova jedinjenja se mogu formulisati kombinovanjem aktivnih jedinjenja sa farmaceutski prihvatljivim nosačima, poznatim u stanju tehnike. Ovi nosači omogućavaju jedinjenjima iz ovog pronalaska da se formulišu u tablete, pilule, dražeje, kapsule, tečnosti, gelove, sirupe, guste suspenzije, suspenzije i slično, za oralno uzimanje subjekta koji je podvrgnut tretmanu. Farmaceutski preparati za oralnu upotrebu mogu da se dobiju korišćenjem čvrstih dodataka pomešanih sa aktivnim sastojkom (agensom), uz opciono mlevenje dobijene smeše i preradu smeše u granule, posle dodavanja pogodnih pomoćnih sredstava, ukoliko se to želi, da bi se dobile tablete ili jezgra dražeja. Pogodni dodaci su: punioci, kao što su šećeri, uključujući laktozu, saharozu, manitol ili sorbitol, preparati celuloze, pa na primer, kukuruzni škrob, pšenični škrob, pirinčani škrob, škrob iz krompira, želatin, guma, metilceluloza, hidroksipropilmetilceluloza, natrijum-karboksimetilceluloza ili polivinilpirolidon (PVP). Ukoliko se želi, mogu se dodati agensi za dezintegraciju, kao što je umreženi polivinilpirolidon, agar ili alginska kiselina, ili njihove soli, kao na primer natrijum-alginat.

Jezgra dražeja se oblažu pogodnim prevlakama. U tu svrhu mogu se koristiti koncentrovani rastvori šećera, koji opciono mogu da sadrže gumiarabiku, polivinilpirolidon, Carbopol gel, polietilenglikol i/ili titanijum-dioksid, rastvore za lakiranje i pogodne organske rastvarače ili smeše rastvarača. Prevlakama za tablete ili dražeje mogu se dodati boje ili pigmenti, radi identifikacije ili karakterisanja različitih kombinacija aktivnih agenasa.

Farmaceutski preparati koji se mogu koristiti oralno, obuhvataju kapsule spremne za istiskivanje, načinjene od želatina, kao i meke, zatvorene kapsule, načinjene od želatina i plastifikatora, kao što su glicerin ili sorbitol. Kapsule spremne za istiskivanje mogu da sadrže aktivne sastojke pomešane sa puniocima, kao što je laktoza, vezivima, kao što su škrobovi, i/ili lubrikantima, kao što su talk ili magnezijum-stearat i opciono, stabilizatorima. U mekim kapsulama aktivni sastojci se mogu rastvoriti ili suspendovati u pogodnim tečnostima, kao što su ulja masnih kiselina, tečni parafin ili tečni polietilenglikoli. Pored toga, mogu se dodati i stabilizatori. Sve formulacije za oralno ordiniranje treba da su u dozama koje su pogodne za takvo ordiniranje. Za bukalno ordiniranje preparati mogu biti u obliku tableta ili pastila, formulisanih na konvencionalan način.

Za intranazalno ordiniranje ili za inhalacije, jedinjenja koja se koriste u skladu sa ovim pronalaskom, pogodno je da se oslobađaju u obliku spreja aerosola, iz pakovanja pod pritiskom ili iz nebulizatora, uz korišćenje odgovarajućih propelanata, npr. dihlorodifluorometana, trihlorofluorometana, dihlorotetrafluoro-etana, ugljen-dioksida ili drugog pogodnog gasa. U slučaju aerosola pod pritiskom, jediničnu dozu može da određuje ventil koji oslobađa odmerenu zapreminu. Kapsule i kartridži od želatina, koji se koriste u inhalatorima ili insuflatorima i sličnim uređajima, mogu se formulisati tako što sadrže smešu prahova jedinjenja i pogodne praškaste baze, kao što je laktoza ili škrob.

Ova jedinjenja se mogu formulisati za parenteralno ordiniranje injekcijama, npr. bolus injekcijom ili kao kontinualna infuzija. Formulacije za injekcije se daju u obliku jedinične doze, npr. u ampulama ili u kontejnerima za više doza, uz dodatak prezervativa. Ovi preparati mogu biti u obliku kao što su suspenzije, rastvori ili emulzije u uljanom ili vodenom nosaču, i mogu da sadrže agense za formulaciju, kao što su agensi za suspendovanje, stabilizovanje i/ili dispergovanje.

Farmaceutske formulacije za parenteralno ordiniranje su vodeni rastvori aktivnih jedinjenja koji su u obliku rastvornom u vodi. Pored toga, suspenzije aktivnih agenasa se mogu dobiti kao injekcije odgovarajućih suspenzija u ulju. Pogodni liofilni rastvarači, ili tečni nosači su ulja masnih kiselina, kao što je susamovo ulje, ili sintetski estri masnih kiselina, kao što je etiloleat, ili trigliceridi, ili lipozomi. Suspenzije u vodi za injekcije mogu da sadrže supstance koje povećavaju viskoznost suspenzije, kao što je natrijum-karboksimetilceluloza, sorbitol ili dekstran. Opciono, ove suspenzije mogu da sadrže takođe i pogodne stabilizatore ili agense koji povećavaju rastvorljivost ovih jedinjenja, što dozvoljava dobijanje visoko koncentrovanih rastvora.

Alternativno, aktivni sastojak može biti u obliku praha, koji se konstituiše sa pogodnim tečnim nosačem, npr. sterilnom apirogenom vodom, neposredno pred upotrebu.

Pored gore opisanih formulacija, jedinjenja iz ovog pronalaska se mogu takođe formulisati kao depo-preparati. Ove formulacije dugotrajnog delovanja se mogu ordinirati implantacijom (na primer, potkožno ili intramuskularno) ili intramuskularnim injekcijama. Tako, na primer, ova jedinjenja se mogu formulisati sa pogodnim polimernim ili hidrofobnim materijalima (na primer, kao emulzija u nekom prihvatljivom ulju), ili jonoizmenjivačkim smolama, ili kao teško rastvorni derivati, npr. kao teško rastvorna so.

Farmaceutski nosač za hidrofobna jedinjenja je sistem ko-rastvarača, koji sadrži benzil alkohol, nepolarni surfaktant, polimer koji se meša sa vodom i vodenu fazu. Sistem ko-rastvarača može biti VPD sistem ko-rastvarača. VPD je rastvor 3 % (m/V) benzilalkohola, 8 % (m/V) nepolarnog surfaktanta polisorbata 80, i 65 % (m/V) polietilenglikola 300, sa dopunjavanjem zapremine apsolutnim etanolom. Sistem ko-rastvarača VPD (VPD: 5W) sadrži VPD razblažen u razmeri 1:1 sa 5% dekstrozom u vodenom rastvoru. Ovaj sistem ko-rastvarača dobro rastvara hidrofobna jedinjenja, a sam je nisko toksičan prilikom sistemskog ordiniranja. Proporcije sistema ko-rastvarača se mogu pogodno varirati, bez poništavanja njegovih karakteristika rastvorljivosti i toksičnosti. Pored toga, identitet komponenata ko-solventa može da se varira: na primer, može se koristiti neki drugi nepolarni surfaktant umesto polisorbata 80; veličina udela polietilenglikola može da se varira; polietilenglikol mogu da zamene drugi biokmpatibilni polimeri, npr. polivinilpirolidon; a drugi šećeri ili polisaharidi mogu da supstituišu dekstrozu.

Alternativno, mogu se upotrebiti i drugi sistemi za oslobađanje farmaceutskih preparata hidrofobnih jedinjenja. Poznati primeri tečnih nosača za oslobađanje hidrofobnih lekova su lipozomi i emulzije. Neki organski rastvarači, kao što je dimetilsulfoksid, mogu takođe da se koriste, mada obično po cenu veće toksičnosti, zahvaljujući toksičnoj prirodi DMSO. Pored toga, ova jedinjenja se mogu oslobađati korišćenjem sistema za uzdržano oslobađanje, kao što su polupropustljive matrice ili čvrsti hidrofobni polimeri koji sadrže terapeutski agens. Postoje razni materijali za uzdržano oslobađanje, a poznati su onima koji su verzirani u stanje tehnike. Kapsule za uzdržano oslobađanje mogu, zavisno od njihove hemijske prirode, oslobađati ova jedinjenja u trajanju od nekoliko nedelja, pa do 100 dana. Zavisno od hemijske prirode i biološke stabilnosti terapeutskog reagensa, mogu se koristiti i druge strategije za stabilizaciju proteina.

Farmaceutski preparati mogu takođe da sadrže pogodne nosače ili dodatke u čvrstoj fazi ili u obliku gela. Ovi nosači mogu pružiti zapaženo poboljšanje u pogledu bioupotrebljivosti lekova koji su slabo rastvorni. Primeri ovakvih nosača ili dodataka su kalcijum-karbonat, kalcijum-fosfat, šećeri, škrobovi, derivati celuloze, želatin i polimeri, kao što su polietilenglikoli. Pored toga, mogu se koristiti i aditivi ili dodaci, kao što su Gelucire<®>, Caprvol<®>, Labrafil<®>, Labrasol<®>, Lauroglvcol<®>, Plurol<®>, Peceol<®>, Transcuto<®>i slični. Dalje, farmaceutski preparat se može ubaciti u transdermalni flaster, za oslobađanje leka direktno u kožu.

Podrazumeva se da stvarne doze agenasa iz ovog poronalaska variraju, u skladu sa posmatranim agensom koji se koristi, sa određenom formulacijom preparata, sa načinom i određenim mestom ordiniranja, domaćinom i bolešću koja se tretira. Oni koji su verzirani u stanje tehnike mogu da utvrde optimalne doze, koristeći konvencionalne testove za određivanje doze, u skladu sa eksperimentalnim podacima za dato jedinjenje i dati skup uslova. Za oralno ordiniranje, na primer, dnevne doze koje se obično koriste biće od oko 0,001 pa do ukupno 1000 mg/kg telesne mase, sa režimom tretmana koji se ponavlja u odgovarajućim intervalima.

Pored toga, farmaceutski prihvatljive formulacije iz ovog pronalaska mogu da sadrže jedinjenje iz ovog pronalaska ili njihovu farmaceutski prihvatljivu so ili solvat, u količini od oko 10 mg, pa do oko 2000 mg, ili od oko 10 mg, pa do oko 1500 mg, ili od oko 10 mg, pa do oko 1000 mg, ili od oko 10 mg, pa do oko 750 mg, ili od oko 10 mg, pa do oko 500 mg, ili od oko 25 mg, pa do oko 500 mg, ili od oko 50 mg, pa do oko 500 mg, ili od oko 100 mg, pa do oko 500 mg.

Pored toga, farmaceutski prihvatljive formulacije iz ovog pronalaska mogu da sadrže jedinjenje iz ovog pronalaska ili njihovu farmaceutski prihvatljivu so ili solvat, u količini od oko 0,5 mas%, pa do oko 95 mas%, ili od oko 1 mas%, pa do oko 95 mas%, ili od oko 1 mas%, pa do oko 75 mas%, ili od oko 5 mas%, pa do oko 75 mas%, ili od oko 10 mas%, pa do oko 75 mas%, ili od oko 10 mas%, pa do oko 50 mas%.

Jedinjenja iz ovog pronalaska, ili njihova farmaceutski prihvatljiva so ili solvat, mogu se ordinirati sisarima, kao što je humano biće, koji pate od infekcije sa HIV, ili sama, ili kao deo farmaceutski prihvatljive formulacije, jedanput na dan, dvaput na dan ili triput na dan.

Oni koji su uobičajeno verzirani u stanje tehnike znaju da u pogledu jedinjenja iz ovog pronalaska, određene farmaceutske formulacije, doze i broja doza koje neki sisar, kome je takav tretman neophodan, uzima na dan, svi ovi izbori su unutar znanja onoga ko je uobičajeno verziran u stanje tehnike i mogu se odrediti bez nepotrebnog eksperimentisanja. Na primer, videti "Guidelines for the Use of Antiretroviral Agents in HIV-1 Infected Adults and Adolescents", United States Department of Helath and Human Services, a od 29 oktobra, 2004 i 22. avgusta 2006 dostupno takođe na http:// www. aidsinfo. nih. gov/ guidelines.

Jedinjenja iz ovog pronalaska mogu se ordinirati u kombinaciji sa dodatnim agensom ili agensima za tretiranje sisara, kao što su humana bića, koja pate od infekcije sa virusom HIV, AIDS, kompleksa povezanog sa AIDS (ARC), ili bilo koje druge bolesti ili stanja povezanih sa infekcijom sa virusom HIV. Ovi agensi mogu da se koriste u kombinaciji sa jedinjenjima iz ovog pronalaska, a to su, bez ograničavanja, oni koji su korisni kao inhibitori HIV proteaze, inhibitori reversne HIV transkriptaze, ne-nukleozidni inhibitori reversne HIV transkriptaze, inhibitori HIV integraze, inhibitori CCR5, inhibitori fuzije HIV, jedinjenja koja se koriste kao imunomodulatori, jedinjenja koja inhibiraju virus HIV nekim nepoznatim mehanizmom, jedinjenja koja se koriste u tretmanu virusa herpesa, jedinjenja koja se koriste kao anti-infektivna sredstva i druga, kao što se navodi u nastavku.

Jedinjenja koja se koriste kao inhibitori HIV proteaze, koja se mogu koristiti u kombinaciji sa jedinjenjima iz ovog pronalaska su, ali bez ograničavanja, 141 W94 (amprenavir), CGP-73547, CGP-61755, DMP-450, nelfinavir, ritonavir, saquinavir (invirase), lopinavir, TMC126, atazanavir, palinavir, GS-3333, KN 1-413, KNI-272, LG-71350, CGP-61755, PD 173606, PD 177298, PD 178390, PD 178392, U-140690, ABT-378, DMP-460, AG-1776, MK-944, VX478, indinavir, tipranavir, TMC-114, DPC-681, DPC-684, fosamprenavir kalcijum (Lexiva), derivati benzenesulfonamida opisani u WO 03053435, R-944, Ro-03-34649, VX-385, GS-224338, OPT-TL3, PL-100, SM-309515, AG-148, DG-35-VIII, DMP-850, GW-5950X, KNI1039, L-756423, LB-71262, LP-130, RS-344, SE-063, UIC-94-003, Vb-19038, A-77003, BMS 182193, BMS-186318, SM-309515, JE-2147, GS-9005.

Jedinjenja koja su korisna kao inhibitori enzima reversne HIV transkriptaze, koja se mogu koristiti u kombinaciji sa jedinjenjima iz ovog pronalaska su, ali bez ograničavanja: abacavir, FTC, GS-840, lamivudine, adefovir dipivoxil, beta-fluoro-ddA, zalcitabine, didanosine, stavudine, zidovudine, tenofovir, amdoxovir, SPD-754, SPD-756, racivir, reverset, (DPC-817), MIV-210 (FLG), beta-L-Fd4C (ACH-126443), MIV-310 (alovudine, FLT), dOTC, DAPD, entecavir, GS-7340, emtricitabine, alovudine.

Jedinjenja koja su korisna kao ne-nukleozidni inhibitori enzima reversne HIV transkriptaze, koja se mogu koristiti u kombinaciji sa jedinjenjima iz ovog pronalaska su, ali bez ograničavanja: efavirenz, HBY-097, nevirapine, TMC-120 (dapivirine), TMC 125, etravirine, delavirdine, DPC-083, DPC-961, TMC-120, capravirine, GVV-678248, GW 695634, calanolide, i triciklični derivati pirimidinona opsani u WO 03062238.

Jedinjenja koja su korisna kao inhibitori CCR5, koja se mogu koristiti u kombinaciji sa jedinjenjima iz ovog pronalaska su, ali bez ograničavanja: TAK-779, SC-351125, SCI-I-D, UK-427857, PRO-140, and GVV-873140 (Ono-4128, AK-602).

Druga jedinjenja, koja su korisna kao inhibitori CCR5, koja se mogu koristiti u kombinaciji sa jedinjenjima iz ovog pronalaska su, ali bez ograničavanja: (N-{(1S)-3-[3-izopropil-5metil-4H-1,2,4-triazol-4-il]-egzo-8-azabiciklo[3.2.1]okt-8-il}-1-fenilpropil)-4,4-difluorocikloheksankarboksamid), etil 1 -endo-{8-[(3S)-3-(acetilamino)-3-(3fluorofenil)propil]-8-azabiciklo[3.2.1]okt-3-il}-2-metil-4,5,6,7-tetrahidro-1 H-imidazo[4,5-c]piridin-5-karbokslat, i N-{(1 S)-3-[3-endo-(5-izobutiril-2-metil-4,5,6,7-tetrahidro-1H-imidazo[4,5-c]piridin-1-il)-8-azabiciklo[3.2.1]okt-8-il]-1-(3-fluorofenil)propil}acetamid).

Jedinjenja koja su korisna kao inhibitori enzima HIV integraze, koja se mogu koristiti u kombinaciji sa jedinjenjima iz ovog pronalaska su, ali bez ograničavanja: GW-810781, derivati 1,5-nafthiridin-3-karboksamida opisani u WO 03062204, jedinjenja opisana u WO 03047564, jedinjenja opisana u WO 03049690, derivati 5-hidroksipirimidin-4-karboksamida, opisani u WO 03035076, i L-000810810.

Inhibitori fuzionisanja za tretman HIV, koji se mogu koristiti u kombinaciji sa jedinjenjima iz ovog pronalaska su, ali bez ograničavanja: enfuvirtide (T-20), T-1249, AMD-3100, i fuzionisana triciklična jedinjenja, opisana u JP 2003171381. Druga jedinjenja koja su korisna kao inhibitori HIV, koja se mogu koristiti u kombinaciji sa jedinjenjima iz ovog pronalaska su, ali bez ograničavanja: rastvorni CD4, TNX-355, PRO-542, BMS-806, tenofovir disoproxil fumarat, i jedinjenja opisana u JP 2003119137.

Jedinjenja koja su korisna u tretmanu ili vođenju virusnih infekcija različitih od HIV, koja se mogu koristiti u kombinaciji sa jedinjenjima iz ovog pronalaska su, ali bez ograničavanja: acvclovir, fomivirsen, penciclovir, HPMPC, oxetanocin G, AL721, cidofovir, cytomegalovirus immune globin, cvtovene, fomivganoiclovir, famciclovir, foscarnet natrijum, Isis 2922, KNI-272, valacvclovir, virazole ribavirin, valgancvclovir, ME-609, PCL-016.

Jedinjenja koja deluju kao imunomodulatori, a koja se mogu koristiti u kombinaciji sa jedinjenjima iz ovog pronalaska su, ali bez ograničavanja: AD-439, AD-519, alfa Interferon, AS-101, bropirimine, acemannan, CL246.738, EL10, FP-21399, gama interferon, faktor za stimulaciju kolonija granulocita makrofaga, IL-2, intravenozni immuno globulin, IMREG-1, IMREG-2, imuthiol dietilditio-karbamat, alfa-2 interferon, metionin-enkephalin, MTP-PE, faktor stimulacije kolonije granulocita, remune, rCD4, rastvorni rekombinantni humani CD4, Interferon alfa-2, SK&F106528, rastvorni T4 yhymopentin, faktor nekroze tumora (TNF), tucaresol, rekombinantni humani interferon beta, i interferon alfa n-3.

Anti-infektivi, koji se mogu koristiti u kombinaciji sa jedinjenjima iz ovog pronalaska su, ali bez ograničavanja: atovaquone, azithromvcin, clarithromvcin, trimethoprim, trovafloxacin, pyrimethamine, daunorubicin, clindamycin sa primaquine, fluconazole, pastill, ornidyl, eflornithine pentamidine, rifabutin, spiramycin, intraconazole-R51211, trimetrexate, daunorubicin, rekombinantni humani ervthropoietin, rekombinantni humani hormon rasta, megestrol acetat, testerone, i ukupno enteričko varenje.

Anti-fungitivi, koji se mogu koristiti u kombinaciji sa jedinjenjima iz ovog pronalaska su, ali bez ograničavanja: anidulafungin, C31G, caspofungin, DB-289, fluconzaole, itraconazole, ketoconazole, micafungin, posaconazole i voriconazole.

Druga jedinjenja, koja se mogu koristiti u kombinaciji sa jedinjenjima iz ovog pronalaska su, ali bez ograničavanja: acmannan, ansamvcln, LM 427, AR177, BMS-232623, BMS-234475, CI-1012, curdlan sulfat, dekstran sulfat, STOCRINE EL10, hvpericin, lobucavir, novapren, sekvencija peptida T octabpeptide, trinatrijum-fosfonoformijat, probucol i RBC-CD4.

Pored toga, jedinjenja iz ovog pronalaska se mogu koristiti u kombinaciji sa anti-proliferativnim agensima za tretman stanja, kao što je Kaposi-jev sarkom. Ovi agensi su, ali bez ograničavanja: inhibitori metalo-matričnih proteaza, A-007, bevacizumab, BMS-275291, halofuginone, interleukin-12, rituximab, paclitaxel, porfimer natrijum, rebimastat i COL-3.

Određeni izbor dodatnog agensa ili agenasa će zavisiti od brojnih faktora, kao što su, ali bez ograničavanja, stanje sisara koji se tretira, određeno stanje ili stanja koja se tretiraju, identitet jednog ili više jedinjenja iz ovog pronalaska i dodatnog agensa ili agenasa i identitet bilo kog od dodatnih jedinjenja koja se koriste u tretmanu tog sisara. Određeni izbor jednog ili više jedinjenja iz ovog pronalaska i dodatnog agensa ili agenasa je unutar znanja onog ko je uobičajeno verziran u stanje tehnike, i može se napraviti bez nepotrebnog eksperimentisanja.

Jedinjenja iz ovog pronalaska se mogu ordinirati u kombinaciji sa bilo kojim od gornjih agenasa za tretman sisara, kao što su humana bića, a koja pate od infekcije sa HIV, AIDS-a, kompleksa povezanog sa AIDS-om (ARC) ili bilo koje druge bolesti ili stanja koji su povezani sa infekcijom sa virusom HIV. Ovakva kombinacija se može ordinirati sisaru tako da su jedinjenje ili jedinjenja iz ovog pronalaska prisutni u toj formulaciji kao i dodatni agensi opisani gore. Alternativno, ovakva kombinacija se može ordinirati sisaru koji pati od infekcije sa virusom HIV tako da su jedinjenje ili jedinjenja iz ovog pronalaska prisutni u formulaciji koja je odvojena od formulacije u kojoj se nalaze drugi agensi. Ukoliko se jedinjenje ili jedinjenja iz ovog pronalaska ordiniraju odvojeno od dodatnih agenasa, takvo ordiniranje se može obavljati uporedno ili sekvencijalno, sa odgovarajućim periodom vremena između. Izbor, da li da se uključi jedinjenje ili jedinjenja iz ovog pronalaska u istu formulaciju kao dodatni agens ili agensi, je unutar znanja onog ko je uobičajeno verziran u stanje tehnike.

Pored toga, jedinjenja iz ovog pronalaska se mogu ordinirati sisaru, kao što je humano biće, u kombinaciji sa dodatnim agensom koji ima efekat pojačanja izlaganja tog sisara jedinjenju iz ovog pronalaska. Termin "izlaganja", kako se ovde koristi, odnosi se na koncentraciju jedinjenja iz ovog pronalaska u plazmi sisara, merenu tokom nekog perioda vremena. Izlaganje sisara određenom jedinjenju se može meriti ordiniranjem jedinjenja iz ovog pronalaska tom sisaru u odgovarajućem obliku, uzimanjem plazme u određenim periodima vremena i merenjem količine jedinjenja iz ovog pronalaska u plazmi, koristeći odgovarajuću analitičku tehniku, kao što je tečna hromatografija ili tečna hromatografija/masena spektroskopija. Odredi se količina jedinjenja iz ovog pronalaska prisutnog u plazmi u izvesnim vremenima, pa se podaci o koncentraciji i vremenu za sve uzorke grafički predstave krivom. Izračuna se površina ispod krive, što daje izlaganje sisara tom jedinjenju. Termin "izlaganje", "površina ispod krive" i "površina ispod krive koncentracija/vreme" imaju isto značenje i mogu se naizmenično koristiti u nastavku.

Među agensima koji se mogu koristiti za povećanje izlaganja sisara jedinjenju iz ovog pronalaska su oni koji mogu biti inhibitori najmanje jednog izoforma enzima citohroma P450 (CYP450). Izoformi CYP450, koji se uspešno mogu inhibirati su, ali bez ograničavanja, CYP1A2, CYP2D6, CYP2C9, CYP2C19 i CYP3A4.

Pogodni agensi koji se mogu koristiti za inhibiranje CYP 3A4 su, ali bez ograničavanja, ritonavir i delaviridine.

Ovakva kombinacija se može ordinirati sisaru tako da su jedinjenje ili jedinjenja iz ovog pronalaska prisutni u istoj formulaciji sa dodatnim agensima, opisanim gore. Alternativno, ovakva kombinacija se može ordinirati tako da su jedinjenje ili jedinjenja iz ovog pronalaska prisutni u formulaciji odvojenoj od formulacije u kojoj se nalazi dodatni agens. Ukoliko se jedinjenje ili jedinjenja iz ovog pronalaska ordinira odvojeno od dodatnog agensa, to ordiniranje se može obaviti uporedno ili sekvencijalno, sa odgovarajućim periodom vremena između. Izbor da li će se jedinjenje ili jedinjenja iz ovog pronalaska ubaciti u istu formulaciju sa dodatnim agensom ili agensima, unutar je znanja onoga ko je uobičajeno verziran u stanje tehnike.

Nekoliko različitih formata testiranja je dostupno za merenje integracije virusne DNK u DNK mete (ili domaćina), posredovane integrazom, pa se tako mogu identifikovati jedinjenja koja modulišu (npr. inhibiraju) aktivnost integraze. Obično, na primer, mogu se koristiti testovi vezivanja liganda za određivanje interakcije sa posmatranim enzimom. Kada se posmatra vezivanje, može se koristiti obeleženi enzim, pri čemu je obeleživač fluorescentan, radioizotop ili slično, koji registruje merljive promene nakon vezivanja za enzim. Alternativno, verzirani stručnjak može koristiti neko antitelo za vezivanje za enzim, pri čemu je to antitelo obeleženo, tako da dozvoljava pojačavanje signala. Dakle, vezivanje se može odrediti preko mehanizma direktnog vezivanja liganda za enzim. Pored toga, vezivanje se može odrediti kompetitivnim izmeštanjem liganda vezanog za enzim, pri čemu je ligand obeležen sa nekim obeleživačem koji se može detektovati. Ako se interesuje za inhibitornu aktivnost, može se ispitivati nedirnut organizam ili ćelija i pramena u organizmu ili funkciji ćelije, pa se može meriti odgovor na vezivanje inhibitornog jedinjenja. Alternativno, ćelijski odgovor se može odrediti mikroskopski, praćenjem citopatičkih efekata izazvanih virusom, na primer formiranjem sincitijuma (HIV-1, testovi formiranja sincitijuma). Dakle, postoje razniin vitroiin vivotestovi, korisni za merenje anhibitorne aktivnosti HIV integraze. Videti, npr. Lewin, S.R. et al.,Journal of Virology,73( 7), 6099-6103, (jul 1999); Hansen, M.S: et al.,Nature Biotechnology,17( 6), 578-582 (jun 1999) i Butler, S.L. et al.,Nature Medicine,7(5), 631-634 (maj 2001).

Primeri formata specifičnih testova, koji se koriste za merenje integracije posredovane sa integrazom, su, ali bez ograničavanja: tehnologije ELISA, DELFIA<®>(PerkinEImer Life Sciences Inc. (Boston, MA)) i ORIGEN<®>(IGEN International, Inc. (Gaithersburg, MD)). Pored toga, integracija na bazi gela (detektivanje integracije merenjem proizvoda stvorenog sa SDS-PAGE) i testovi dezintegracije u testu bliske scintilacije (SPA), koji koriste samo jednu jedinku dvostruko upredene DNK (ds-DNK), mogu se takođe koristiti za praćenje aktivnosti integraze.

U jednoj realizaciji ovog pronalaska, poželjan test je prenos spirale SPA integrazom (stINTSPA), koji koristi SPA za specifično merenje mehanizma transfera spirale pomoću integraze u homogenom testu, pogodnom za minijaturizaciju, koji dopušta visoku propusnost merenja. Ovaj test je usmeren na prenos spirale, a ne na vezivanje DNK i/ili 3'-procesuiranje. Ovaj osetljivi i reproduktibilni test je u stanju da razlikuje ne-specifične interakcije od prave funkcije enzima, preko formiranja 3' procesuiranih virusnih kompleksa DNK/integraza, pre adicije na ciljanu DNK. Ovakvo formiranje stvara odstupanje u odnosu na jedinjenja modulatore (npr. inhibitore) transfera spirale, a ne prema jedinjenjima koja inhibiraju 3' procesuiranje, ili sprečavaju asocijaciju integraze sa virusnom DNK. Ovo odstupanje daje testu više specifičnosti od poznatih testova. Pored toga, homogena priroda testa smanjuje broj koraka potrebnih za obavljanje testa, zato što nisu potrebni koraci ispiranja, kao u heterogenom testu.

SPA format transfera spirale integrazom se sastoji od 2 DNK komponente koje modeliraju virusna DNK i DNK mete. Model virusne DNK (poznate takođe kao DNK donora) je biotinilovana ds-DNK prethodno procesuirana sa kraja 3', dajući preklop baze CA nukleotida sa kraja 5' dupleksa. DNK mete (poznata takođe kao DNK domaćina) je nasumična sekvencija nukleotida ds-DNK, koja obično sadrži nukleotide [<3>H]-timidina na obe spirale, poželjno sa krajeva 3', kako bi se omogućila reakcija transfera spirale integrazom, koja se odigrava na obe spirale ds-DNK mete.

Integraza (stvorena rekombinantno ili sintetski, i poželjno prečišćena) se prethodno komleksira sa DNK virusa, vezanom za površinu, kao što su na primer, perlice SPA obložene streptavidinom. Obično, integraza se prethodno kompleksira šaržnim procesom, kombinovanjem i inkubacijom razblažene DNK virusa sa integrazom, pa zatim uklanjanjem nevezane integraze. Poželjan molarni odnos virusna DNK:integraza je oko 1:oko 5. Međutim, inkubacija integraze/virusne DNK je opciona, ali ova inkubacija obezbeđuje povećan indeks specifičnosti sa vremenom inkubacije integraza/virusna DNK od oko 15 min do oko 30 min, na sobnoj temperaturi ili na oko 37°C. Poželjno je da inkubacija ide na 37°C tokom oko 15 min.

Reakcija se inicira dodavanjem ciljane DNK u odsustvu ili u prisustvu jedinjenja potencijalnog modulatora integraze, perlicama integraza/virusna DNK (na primer), pa se ostavi da teče od oko 20 do oko 50 min (zavisno od vrste kontejnera testa koji se koristi), na od oko sobne temperature do oko 37°C, poželjno oko 37°C. Test se završava dodavanjem zaustavnog pufera u reakcionu smešu integraze. Komponente zaustavnog pufera, koji se dodaje u delovima ili odjedanput, ima zadatak da prekine aktivnost enzima, disocira komplekse integraza/DNK, odvoji ne-integrisane spirale DNK (agens za denaturaciju) i opciono, da perlice SPA isplivaju na površinu reakcione smeše, da bi bile bliže po opsegu detektorima, na primer, scintilacionom brojaču na bazi ploče, kako bi se izmerio sadržaj integrisane virusne DNK, koji se kvantitativno određuje kao emitovano zračenje (radioaktivno obeleženi signal) sa perlica SPA. Dodavanje dodatnih komponenata u zaustavni pufer, kao što je na primer CsCI, ili funkcionalno ekvivalentno jedinjenje je opciono, ali je poželjno da se koristi sa scntilacionim brojačem na bazi ploče, na primer, sa detektorima postavljenim iznad test bazenčića, kao što je na primer kod TopCount<®>brojača (PerkinEImer Life Sciences Inc. (Boston, MA)). CsCI se ne koristi kada se očitava PMT sa dna ploče, kao što je na primer kada se koristi MicroBeta<®>brojač (PerkinEImer Life Sciences Inc. (Boston, MA)).

Specifičnost reakcije se može odrediti iz odnosa signala koji generiše reakcija ciljane DNK sa virusnom DNK/integrazom, u poređenju sa signalom koji generiše di-deoksi virusnaDNK/integraza. Visoke koncentracije (npr. >50 nM) ciljane DNK može da poveća odnos d/dd DNK, zajedno sa povećanom koncentracijom integraze u uzorku integraza/virusna DNK.

Ovi rezultati se mogu upotrebiti za vrednovanje modulisanja integraze, kao što je na primer inhibitorska aktivnost testiranih jedinjenja. Na primer, verzirani stručnjak može da koristi metod visoke propusnosti da se testiraju kombinatorne biblioteke testiranog jedinjenja ili sitetskih jedinjenja. Procenat inhibicije jedinjenja se može izračunati korišćenjem jednačine, kao što je na primer: {1-[(uzorak CPM - CPMmin)/(CPMmax - CPMmin)]}x100. Vrednost CPMmin je signal testa u prisustvu poznatog modulatora, kao što je na primer neki inhibitor, sa koncentracijom oko 100-struko višom od IC50posmatranog jedinjenja. Signal CPMminaproksimira pravu vrednost osnovnog signala u testu. Vrednost CPMmaxje signal testa koji se dobija za posredovanje aktivnosti integraze u odsustvu jedinjenja. Pored toga, IC50vrednosti sintetskih i prečišćenih kombinatornih jedinjenja može da se odredi, pri čemu se jedinjenja pripremaju sa oko 10- do 100-struko većim koncentracijama od poželjnih u testovima, posle čega sledi razblaživanje ovih jedinjenja da bi se dobila titraciona kriva sa 8 tačaka, na primer, sa V^-log intervalima razblaživanja. Uzorak jedinjenja se zatim prebaci, na primer, u bazenčić testa. Dalja razblaživanja su opciona, kao što je na primer 10-struko razblaživanje. Procenat inhibicije za inhibitorsko jedinjenje može se , na primer, odrediti kao i gore, sa vrednostima koje se koriste za nelinearnu regresionu analizu, sigmoidalnu doza-odgovor jednačinu (varijabilni nagib), koristeći softver GraphPad Prism za fitovanje krivih (GrapPad Softvvare, Inc., San Diego, CA) ili funkcionalno ekvivalentan softver.

Poželjno je da se uslovi testa stINTSPA optimizuju za iodnose integraze, virusne DNK i ciljane DNK, kako bi se generisao snažan i specifičan signal u testu. Specifični signal testa se definiše kao signal koji razlikuje prave katalitičke događaje transfera spirale od stvaranja kompleksa integraze i DNK koji ne daje proizvod. U drugim testovima integraze, snažna ne-specifična komponenta (osnovni signal) često doprinosi ukupnom signalu testa, ukoliko se uslovi pufera rigorozno ne optimiziraju i kontra-testiraju korišćenjem modifikovanog oligonukleotida virusne DNK. Ne-specifični osnovni signal je usled stvaranja kompleksa integraza/virusna DNK/ciljana DNK, koji su veoma stabilni, nezavisno od mehanizma produktivnog transfera spirale.

Poželjan stINTSPA razlikuje stvaranje kompleksa od reakcija produktivnog transfera spirale korišćenjem modifikovanog oligonukleotida virusne DNK, koji sadrži di-deoksi nukleozid sa kraja 3', kao kontrolni uzorak. Ova modifikovana kontrolna DNK se može ugraditi u komplekse integraze/virusna DNK/ciljana DNK, ali ne može da služi kao substrat u prenosu spirale. Dakle, može se opaziti uočljivo rastojanje između reakcija produktivnog i ne-produktivnog transfera spirale. Dalje, reakcije sa perlicama sa di-deoksi virusne DNK daju signal testa koji je veoma sličan pravom osnovnom signalu tog testa, koristeći poželjne uslove optimizacije testa. Pravi osnovni signal testa se definiše iz reakcije sa svim komponentama testa (virusna DNK i [<3>H]-ciljana DNK) u odsustvu integraze.

Pufer testa, koji se koristi u testu integraze, obično sadrži najmanje jedan redukcioni agens, kao što je na primer 2-merkaptoetanol ili DTT, gde je poželjan DTT kao svež prah; najmanje jedan dvovalentni katjon, kao što je na primer Mg<++>, Mn<++>ili Zn<++>, poželjno Mg<++>; najmanje jedan agens za emulgovanje/ dispergovanje, kao što je na primer octoxynol (poznat takođe i kao IGEPAL-CA ili NP-40) ili CHAPS; NaCI ili funkcionalno ekvivalentno jedinjenje; DMSO ili funkcionalno ekvivalentno jedinjenje i najmanje jedan pufer, kao što je na primer MOPS. Ključne karakteristike pufera su odsustvo PEG, dodatak visoke koncentracije deterdženta, kao što je na primer, oko 1 do oko 5 mM CHAPS i/ili oko 0,02 do oko 0,15% IGEPAL-CA, ili funkcionalno ekvilvalentnog jednog ili više jedinjenja, koja su u stanju da umanje nespecifično lepljenje za perlice SPA i za bazenčiće u testu, i po mogućstvu poboljšanje indeksa specifičnosti; dodatak visoke koncentracije DMSO (oko 1 do oko 12%); i dodatak skromnih sadržaja NaCI (<50 mM) i MgCI2(oko 3 do oko 10 mM) ili funkcionalno ekvivalentnih jedinjenja koja su u stanju da redukuju dd-DNK osnovni signal. Test puferi mogu opciono da sadrže prezervativ, kao što je na primer NaN3, za redukciju gljivičnih i bakterijskih kontaminanata tokom skladištenja.

Poželjno je da zaustavni pufer sadrži EDTA ili funkcionalno ekvivalentno jedinjenje, koje je u stanju da prekine enzimatsku aktivnost, zatim agens za denaturizaciju koji se sastoji od, na primer, NaOH ili gvanidin hidrohlorid i opciono CsCI ili funkcionalno ekvivalentno jedinjenje koje je u stanju da pomogne isplivavavnje perlica SPA na vrh kontejnera u kome se vrši test, radi scintilacione detekcije na vrhu rezervoara i ako je moguće minimiziranja interferencije među jedinjenjima. Primer SPA za transfer spirale integrazom dat je u Primeru 3.

Alternativno, nivo aktivnosti jedinjenja modulatora se može odrediti u antivirusnom testu, kao što je na primer test koji kvantitativno meri stvaranje virusnih antigena (npr. HIV-1 p24) ili aktivnosti virusnih enzima (npr. HIV-1 reversna transkriptaza), kao indikatore replikacije virusa, ili koji mere replikaciju virusa praćenjem ekspresije egzogenog gena reportera, uvedenog u genom virusa (testovi HIV-1 virusa reportera) (Chen, B K. et al.,J. Virol.,68( 2), 654-660

(1994); Tervvilliger, E.F. et al.,PNAS,86, 3857-3861 (1989)). Poželjan postupak za merenje antivirusne aktivnosti jedinjenja potencijalnog modulatora koristi test zaštite HIV-1 ćelija, gde se replikacija virusa meri indirektno, praćenjem citopatičkih efekata ćelije domaćina izazvanih virusom, na primer, metodom redukcije boje, koji je opisan u Primeru 130.

U jednoj realizaciji, jedinjenja iz ovog pronalaska imaju vrednosti EC50protiv HIV integraze od najmanje 10~<5>M (ili najmanje 10 uM), kada se mere u testu zaštite HIV ćelija. U sledećoj realizaciji su jedinjenja iz ovog pronalaska sa vrednostima EC50protiv HIV integraze od najmanje 1 uM, kada se mere u testu zaštite HIV ćelija. U još jednoj realizaciji, jedinjenja iz ovog pronalaska imaju EC5nprotiv HIV integraze od najmanje 0,1 uM, kada se mere u testu zaštite HIV ćelija.

Pronađeni agensi se mogu dobiti korišćenjem puteva reakcije i shema sinteze koji su opisani niže, koristeći tehnike koje su dostupne u stanju tehnike i koristeći polazne materijale koji su lako dostupni. Dobijanje nekih realizacija iz ovog pronalaska je detaljno opisano u primerima koji slede, ali oni koji su uobičajeno verziraniu stanje tehnike shvataju da se opisano dobijanje može lako prilagoditi za dobijanje drugih realizacija iz ovog pronalaska. Na primer, sinteza jedinjenja koja nisu data kao primer, u skladu sa ovim pronalaskom se može obaviti modifikacijama koje su očigledne onima koji su verzirani u stanje tehnike, npr. odgovarajućom zaštitom grupa koje mogu da interferiraju ili zamenom sa drugim pogodnim reagensima, poznatim u stanju tehnike, ili pravljenjem rutinskih modifikacija uslova reakcije. Alternativno, druge reakcije koje su ovde opisane ili su poznate u stanju tehnike, jasno je da poseduju prilagodljivost za dobijanje drugih jedinjenja iz ovog pronalaska.

Postupci dobijanja

Shema 1 opisuje postupak za formiranje N-hidroksi laktama 6-5. Bromovanje radikala metil-supstituisanog indola 6-1, može se postići pomoću raznih reagenasa (Jerry March, "Advanced Organic Chemistrv", 5-th edition, John Wiley & Sons, 2001, str. 911-914), od kojih je najuobičajeniji N-bromosukcinimid (NBS). Onima koji su verzirani u stanje tehnike je jasno da uspešno obavljanje ove reakcije može veoma da zavisi od sheme supstitucije prekursora 6-1. Reakcija alkilhalida 6-2 (X. Dolsy et al.,Bioorg. Med. Chem.,7, 921-932 1999) sa benzilhidroksilaminom, u prisustvu baze kao što je trietilamin, može dati jedinjenje 6-3. Tretman sa natrijum-etoksidom u etanolu može da dovede do stvaranja laktama i odvajanja fenilsulfonil zaštitne grupe. Alkilovanje 6-4 sa alkilhalidom, u prisustvu baze kao što je natrijum-hidrid, u DMF, slično postupcima opisanim u Shemi 2, daje N-benzIoksi laktam 6-5. Zaštitna benzil grupa se može ukloniti raznim postupcima (T.vV. Greene, "Protective Groups in Organic Chemistry", 3-rd edition, John Wiley & Sons, 1999, str. 76-86), kao što je hidrogenovanje katalizovano paladijumom. Kao što je očigledno onima koji su verzirani u stanje tehnike, pri formiranju konačnog proizvoda 6-6 mogu se upotrebiti različite zaštitne grupe, umesto benzil grupe.

Shema 2 opisuje sintezu 4-supstituisanog azaindola 12-12. Tretira se etil 2-metil-1H-pirol-3-karboksilat 12-1 (VVee, A.G.H., Shu, A.Y.L, Djerassi, C.J.,Org. Chem.,U49U, 3327-3336 (1984) sa organo halidom, u prisustvu baze kao stoje NaH, dajući pirol 12-3. Bromovanje, koristeći kao izvor broma npr. NBS, sledi bromovanje radikala, posle dodavanja inicijatora radikala, kao što je benzoilperoksid, može dati jedinjenje 12-4, koje može da reaguje sa estrom tozil glicina 12-5 (Ginzel, K.D., Brungs, P., Stecken, E.,Tetrahedron,45, 1691-1701

(1989), dajući 12-6. Ciklizacija12-6 u 12-7 može se ostvariti tretmanom sa bazom, kao što je litijum-heksametildisilazid. Katalitičko hidrogenovanje (npr. sa Pd/C) može dati estar 12-8. Tretman ovog 12-8 sa organo halidom i bazom, kao što je NaH, može dati 12-9. Hidroksi grupa u 12-9 se može konvertovati u triflat 12-10, korišćenjem anhidrida trifluorometansulfonske kiseline i baze, kao što je trietilamin. Triflat 12-10 može da se podvrgne kuplovanju, katalizovanom sa paladijumom, kao što je Stille-ovo kuplovanje, sa tributilstaniletenom 12-11, u prisustvu LiCI (J.K. Stille,Angew. Chem.,98, 504 (1986);Angevv. Chem. Int. Ed. Engl.,25, 508 (1986), VV.J.Scott,, J.K. Stille,J. Am. Chem. Soc, 108,3033

(1986), C. Amatore, A.Jutand i A Suarez,J. Am. Chem. Soc, 115,9531-9541

(1993)), koristeći katalizator kao što je Pd(PPh3)2CI2(T. Sakamoto. C. Sato, Y. Kondo, H. Yamanaka,Chem. Pharm. Buli,41, 81-86 (1993)), dajući 12-12, koji se može tretirati sa hidroksilaminom, dajući 12-13. Alternativno, jedinjenje 12-10 se može ostaviti da reaguje sa n-butilviniletrom, u prisustvu paladjuma kao katalizatora, baze, fosfina i litijum-hlorida, u rastvaraču, na temperaturi oko 70°C, dajući jedinjenje 12-4. Jedinjenje 12-4 može zatim da reaguje sa bazom, kao što je litijum-hidroksid, i u prisustvu rastvarača, kao što je metanol, na oko 60°C, posle čega sledi reakcija sa sirćetnom kiselinom, na temperaturi od oko 120°C, dajući jedinjenje 12-15.

Kao što se pokazuje u Shemi 2a niže, jedinjenje 12-15 može dalje da se funkcionalizuje u položaju 3, dajući na primer, derivate gramina (12-16), derivate aldehida (12-17), derivate karboksilne kiseline (12-18) i derivate sulfonilhlorida (12-19). Svako od jedinjenja 12-16. 12-17. 12-18 i 12-19 može dalje da se funkcionalizuje, dajući dodatna intermedijarna jedinjenja koja se mogu zatim konvertovati u jedinjenja formule (I).

Kao što pokazuje Shema 2b, jedinjenje 12-15 ili derivati 12-15, prikazani u Shemi 2a, mogu zatim da reaguju sa hidroksilaminom, dajući jedinjenja formule

(I).

Shema 3 opisuje put dobijanja cikličnog jedinjenja 13-7. Estar 13-1 može da se podvrgne ciklizaciji uz formiranje piranona 13-14, kao što su opisali T.Sakamoto, Y. Kondo, A. Yasuhara, H. Yamanaka,Tetrahedron,47, 1877-1886 (1991). Katalitičko hid roge nova nje, koristeći ktalizator kao što je Pd/C, može dati lakton 13-3. Otvaranje prstena laktona sa bazom, kao što je natrijum-hidroksid, može dati kiselinu 13-5, koja se može kuplovati sa pogodno zaštićenim hidroksilaminom (npr. O-tetrahidropiranil hidroksilamin 13-5), korišćenjem reagensa za kuplovanje, kao što je HATU, uz formiranje 13-6. Uslovi Mitsunobu-ove reakcije (npr. trifenilfosfin i diizopropil azodikarboksilat) mogu dovesti do efekta ciklizacije 13-6 u 13-7 (za pregled videti D.L. Hughes,Org. Prep. Proced. Int.,28, 127-164 (1996). Uklanjanje hidropiranil grupe, koje daje 13-8, očekuje se da se vodi pod kiselim uslovima.

Jedinjenje 14-8 može da se dobije u skladu sa Shemom 4. Reakcija triflata 14-1 sa alkinom, kao što je 14-2, katalizovana sa paladijumom, daje 14-3. Katalitičko hidrogenovanje, uz upotrebu katalizatora, kao što je Pd/C, daje propanol 14-4. Saponifikacija estra 14-4 sa bazom, kao što je natrijum-hidroksid, daje kiselinu 14-5, koja se može kuplovati sa pogodno zaštićenim hidroksilaminom (npr. O-tetrahidropiranil hidroksilaminom 14-6), koristeći reagens za kuplovanje, kao što je HATU, uz formianje 13-7. Uslovi Mitsunobu-ove reakcije (npr. trifenilfosfin i diizopropilazodikarboksilat) može dovesti do ciklizacije 14-7 u 14-8 (za pregled, videti D.L. Hughes,Org. Prep. Proced. Int.,28, 127-164 (1996). Uklanjanje tetrahidropiranil grupe daje 14-9, a odigrava se pod kiselim uslovima.

Opšti postupak za dobijanje jedinjenja 15-5 i 15-6 pokazan je u Shemi 5. Reakcija triflata 15-1 sa alkinom 15-2, katalizovana paladijumom, daje estar 15-3. Tretmanom ovog estra sa hidroksilaminom i bazom, kao što je natrijum-hidroksid, koristeći uslove koje je opisao D.W. Knight,Tetrahedron Lett,43, 9187-9189 (2002), dobiju se 15-5 i 15-6.

Primeri

Namera je da se primerima, datim niže, samo ilustruju određene realizacije ovog pronalaska, a ne da se na bilo koji način ograniči obim ovog pronalaska.

U niže opisanim primerima, ukoliko se drugačije ne naglasi, sve temperature u opisima koji slede su u stepenima Celzijusa (°C), a svi udeli i procenti su maseni, ukoliko se drugačije ne ukaže.

Razni polazni materijali i reagensi se dobavljaju od komercijalnih snabdevača, kao što su Aldrich Chemical Companv ili Lancaster Svnthesis Ltd., a koriste se bez daljeg prečišćavanja, izuzev ako se drugačije ne naglasi.

Niže opisane reakcije se obavljaju pod pozitivnim nadpritiskom azota, argona ili uz cevčicu za sušenje, na temperaturi okoline (ukoliko se drugačije ne navede), u anhidrovanim rastvaračima. Obavlja se analitička tankoslojna hromatografija, na pločama od silikagela, pečenog na staklu 60°F 254 (Analtech (0,25 mm)), uz eluiranje sa rastvaračima u odgovarajućem odnosu( VA/).Reakcije se testiraju pomoću tečne hromatografije pod visokim pritiskom (HPLC) ili pomoću tankoslojne hromatografije (TLC), a završetak reakcije se sudi prema potrošnji polaznog materijala. Ploče PLC se čine vidljivim pomoću UV, fosfomolibdenskim obojenjem ili obojenjem sa jodom.

Spektri<1>H-NMR se registruju na instrumentu Bruker, koji radi na 300 MHz, a spektri<13>C-NMR se registruju na 75 MHz. NMR-spektri se dobijaju u rastvorima DMSO-d6ili CDCI3(očitavaju se u ppm), koristeći hloroform kao referentni standard (7,25 ppm i 77,0 ppm), ili DMSO-D6(2,50 ppm i 39,52 ppm). Po potrebi koriste se i drugi rastvarači za NMR. Kada se registruju multipliciteti u piku, koriste se sledeće skraćenice: s = singlet, d = dublet, t = triplet, m = multiplet, br = proširen, dd = dublet dubleta, dt = dublet tripleta. Konstante kuplovanja, kada se daju, iskazane su u hercima.

Infracrveni spektri su registrovani na instrumentu Perkin-EImer FT-IR Spectrometer, kao čista ulja, kao pelete u KBr, ili kao rastvori u CDCI3, a kada se očitavaju daju se u talasnim brojevima (cm<1>). Maseni spektri su dobijeni korišćenjem LC/MS ili APCI. Sve temperature topljenja su nekorigovane.

Svi konačni proizvodi bili su čistoće iznad 95% (pomoću HPLC), na talasnim dužinama 220 nm i 254 nm).

Sve elementarne analize ovih jedinjenja, ukoliko se drugačije ne naglasi, daju vrednosti za C, H i N analizu, i unutar su 0,4% od teorijske vrednosti, a daju se kao "C, H, N".

U sledećim primerima i preparatima "LDA" označava litijum-diizopropilamid, "Et" označava etil, "Ac" označava acetil, "Me" označava metil, "Ph" označava fenil, (PhO)2POCI označava hlorodifenilfosfat, "HCI" označava hlorovodoničnu kiselinu, "EtOAc" označava etilacetat, "Na2C03" označava natrijum-karbonat, "NaOH" označava natrijum-hidroksid, "NaCI" označava natrijum-hlorid, "NEt3" označava trietilamin, "THF" označava tetrahidrofuran, "DIC" označava diizopropilkarbodiimid, "HOBt" označava hidroksibenzoriazol, "H20" označava vodu, "NaHC03" označava natrijum-hidrogenkarbonat, "K2C03" označava kalijum-karbonat, "MeOH" označava metanol, "i-PrOAc" označava izopropilacetat, "MgS04" označava magnezium-sulfat, "DMSO" označava dimetilsulfoksid, "AcCI" označava acetilhlorid, "CH2CI2" označava metilenhlorid, "MTBE" označava metil t-butiletar, "DMF" označava dimetilformamid, "SOCI2" označava tionilhlorid, "H3P04" označava fosfornu kiselinu, "CH3S03H" označava metansulfonsku kiselinu, "Ac20" označava anhidrid sirćetne kiseline, "CH3CN" označava acetonitril i "KOH" označava kalijum-hidroksid.

Primer A

3-( 4- fluorobenzil)- 7- hidroksi- 3, 7, 8, 9- tetrahidro- 6H- pirolof2, 3- cl- 1, 7-

nafthiridin- 6- on

1. korak: 7-(4-fluorobenzil)pirano[3,4-6]pirolo[3,2-o]piridin-4(7/-/)-on

1. postupak:

Rastvor metil 4-[2-etoksivinil]-1-(4-fluorobenzil)-1H-pirolo[2,3-c]piridin-5-karboksilata (može se koristiti čist E, Z ili smeša E/Z) (0,17 g, 0,48 mmol) u metanolu (5 ml_) i hlorovodoničnoj kiselini (37%, 10 ml_), refluksuje se 2 h. Smeša se tretira zasićenim natrijum-bikarbonatom u vodi, pa ekstrahuje etilacetatom. Organski sloj se osuši iznad natrijum-sulfata, filtrira, koncentriše i prečisti sa prep-HPLC, dajući naslovljeno jedinjenje kao beli prah (20 mg, prinos 14%).

2. postupak:

Rastvor etil 4-[2-etoksivinil]-1-(4-fluorobenzil)-1/-/-pirolo[2,3-c]piridin-5-karboksilata (može se koristiti čist E, Z ili smeša E/Z) (1,1 g, 2,98 mmol) u metanolu (5 ml_), vodi (5 mL) i hlorovodoničnoj kiselini (37%o, 5 ml_), refluksuje se 16 h. Smeša se tretira sa zasićenim natrijum-bikarbonatom u vodi, pa ekstrahuje etilacetatom. Organski sloj se osuši iznad natrijum-sulfata, filtrira, koncentriše i prečisti hromatografijom Biotage, dajući naslovljeno jedinjenje kao beli prah (0,3 g, prinos 34%). 1H NMR (MeOD) 8: 8,93 (s, 1H), 7,80 (d, J=3,2 Hz, 1H), 7,84 (d, J=5,5Hz, 1H), 7,28 (d, J=5,5Hz, 1H), 7,30-7,10 (m, 5H), 5,64 (s, 2H). MS (APCI, M+H<+>): 295,1. 2. korak: 7-(4-fluorobenzil)-1,7-dihidropirano[3,4-d]pirolo[3,2-d]piridin-4(2/-/)-on Rastvor 7-(4-fluorobenzil)-1,7-dihidropirano[3,2-d]piridin-4(7/-/)-ona (0,30 g, 0,102 mmol) i Pd/C (5% Pd, 50 mg) u metanolu (100 mL), mućka se 16 h u Parr-ovoj mućkalici, pod vodonikom (1,4 bar). Katalizator se odvoji filtriranjem, a filtrat koncentriše i osuši pod vakuumom, dajući naslovljeno jedinjenje kao čvrstu supstancu (0,28 g, prinos 4%), koja se koristi u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.<1>H NMR (MeOD) 5: 8,77 (s, 1H), 7,76 (d, J=3 Hz, 1H), 7,28 (d, J=5,1 Hz, 2H), 7,07 (d, J=5,1 Hz, 2H), 6,86 (d, J=3,0 Hz, 1H), 4,66 (d, J=6 Hz, 2H), 3,41 (d,J=6Hz, 2H). MS (APCI, M+H<+>): 297,1. 3. korak: 1-(4-fluorobenzil)-4-(2-hidroksietil)-1H-pirolo[2,3-c]piridin-5-karboksilna kiselina

U 7-(4-fluorobenzil)-1,7-dihidropirano[3,4-đ]pirolo[3,2-d]piridin-4(2/-/)-on (0,11 g, 0,37 mmol) u metanolu (10 mL) doda se natrijum-hidroksid (0,066 g, 1,65 mmol) u vodi (2,0 mL). Reakcija se zatim 3 h zagreva na 60°C. Posle hlađenja, reakciona smeša se neutrališe sa 4M hlorovodoničnom kiselinom (0,42 mL, 1,65 mmol). Koncentriše se i osuši pod vakuumom, dajući sirovo naslovljeno jedinjenje, kao beli prah. (0,11 g, prinos 94%).<1>H NMR (DMSO-d6) 8 8,93 (d, J=1,9Hz, 1H), 8,06 (s, 1H), 7,36 (m, 2H), 7,16 (t, J=6,6 Hz, 2H), 6,96 (s, 1H), 5,63 (s, 2H), 3,66 (t, J=6,8 Hz, 2H), 3,44 (t, J=6,8 Hz, 2H). LCMS (APCI, M+H<+>): 315,1.

4. korak:1 -(4-fluorobenzil)-4-(2-hidroksietil)-A/-(tetrahidro-2/-/-piran-2-iloksi)-1 H-pirolo[2,3-c]piridin-5-karboksamid

U 1-(4-fluorobenzil)-4-(2-hidroksietil)-A/-(tetrahidro-2H-piran-2-iloksi)-1H-pirolo[2,3-c]piridin-5-karboksilnu kiselinu (0,11 g, 0,35 mmol) u DMF (10 mL) dodaju se trietilamin (0,15 mL, 1,05 mmol), 0-(tetrahidro-2H-piran-2-il)hidroksilamin-2-(aminooksi)tetrahidro-2/-/-piran (0,05 g, 0,43 mmol) i 0-(7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronijum heksafluorofosfat (HATU; 0,16 g, 0,42 mmol). Ova smeša se 16 h meša na temperaturi okoline. Tretira se vodom (30 mL), ekstrahuje etilacetatom (50 mL) i opere rastvorom soli (2x50mL). Organski ekstrakti se osuše iznad natrijum-sulfata, koncentrišu pod vakuumom i prečiste hromatografijom Bioage, koristeći 5% metanol u dihlorometanu kao eluent, što daje naslovljeno jedinjenje kao sirovi prah (0,16 g), koji se u narednom koraku koristi bez daljeg prečišćavanja. LCMS (APCI, M+H<+>): 414,2. 5. korak: 7-(4-fluorobenzil)-1,7-dihidropirano[3,4,-t»]pirolo[3,2-cfJpiridin-4(2/-/)-on U mešani rastvor 1-(4-fluorobenzil)-4-(2-hidroksietil)-A/-(tetrahidro-2H-piran-2-iloksi)-1H-pirolo[2,3-c]piridin-5-karboksamida (0,16 g, 0,39 mmol) i trifenilfosfina (0,12 g, 0,46 mmol) u THF (10 mL), u kapima se dodaje diizopropilazodikarboksilat (0,09 mL, 94 mg, 0,46 mmol) u THF (1 mL). Dobijena smeša se 1 h meša na sobnoj temperaturi, pa se rastvarač ispari. Prečišćavanje hromatografijom Biotage daje 0,12 g sirovog materijala koji se u narednom koraku koristi bez daljeg prečišćavanja. LCMS (APCI, M+H<+>): 396,2. 6. korak: 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-3,7,8,9-tetrahidro-6/-/-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on

Mešani rastvor 7-(4-fluorobenzil)-1,7-dihidropirano[3,4,-o]pirolo[3,2-d]piridin-4(2W)-ona (0,12 g, 0,30 mmol) u sirćetnoj kiselini (4 mL), THF (2 mL) i vodi (1 mL), zagreva se 16 h na 45°C, pa još 1 h na 100°C. Koncentrisanje i prečišćavanje sa pre-HPLC daje naslovljeno jedinjenje kao beli prah (0,023 g, prinos 24%).<1>H NMR (DMSO-d6) 5: 9,87 (s, 1H), 8,84 (s, 1H), 7,85 (d, J=3,0 Hz, 1H), 7,32-7,34 (m, 2H), 7,15 (d, J=8,7 Hz, 2H), 6,72 (d, J=3,0 Hz, 1H), 5,57 (s, 2H), 3,80 (d, J=7,0 Hz, 2H), 3,30 (d, J=7,0 Hz, 2H). LCMS (APCI, M+H<+>): 312,1. HRMS, izrač. za C17Hi5N302Fi (M+H)<+>312,1148, a nađeno je: 312,1153. HPLC: čistoća 98,3%.

Primer B

3-( 4- fluorobenzil)- 7- hidroksi- 7, 8, 9, 10- tetrahidropiranor3', 2', 4, 51piridof2, 3-

dazepin- 6( 3/-/)- on

1. korak: etil 1-(4-fluorobenzil)-4-(3-hidroksiprop-1-in-1-il)-1/-/-pirolo[2,3,-c]piridin-5-karboksilat

U rastvor etil 1-(4-fluorobenzil)-4-{[(trifluorometil)sulfonil]oksi}-1/-/-pirolo[2,3-c]piridin-5-karboksilata (1,50 g, 3,36 mmol) u DMF (4 mL) doda se propargiloksitrimetilsilan (0,73 g, 5,72 mmol), litijum-hlorid (0,214 g, 5,1 mmol), bakar-jodid (0,028 g, 0,15 mmol), trietilamin (7 mL, 50,4 mmol) i dihlorobis(trifenilfosfin)paladijum(ll) (0,052 g, 0,074 mmol). Dobijena smeša se 20 min meša na 140°C u mikrotalasnom reaktoru (Personal Chemistrv). Ispari se rastvarač, pa se doda 10 mL etilacetata. Posle 10 min mešanja smeša se filtrira kroz Celite, a filtrat koncentriše. Prečišćavanje fleš hromatografijom (Biotage) preko silikagela (1:3, heksan/etilacetat), daje naslovljeno jedinjenje kao žuto ulje (0,46 g, prinos 46%).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-D) 8: 8,69 (s, 1H), 7,36 (d, J=3,28 Hz, 1H), 7,06-7,14 (m, 2H), 6,98-7,06 (m, 2H), 6,84 (d, J=2,53 Hz, 1H), 5,40 (s, 2H), 4,67 (s, 2H), 4,48 (q, J=7,07 Hz, 2H), 1,46 (t, J=7,20 Hz, 3H). LC-MS (APCI, M+H<+>): 353,1. HPLC: čistoća 96%. 2. korak: etil 1-(4-fluorobenzil)-4-(3-hidroksiprop-1-in-1-il)-1/-/-pirolo[2,3-c]piridin-5-karboksilat.

U rastvor etil 1-(4-fluorobenzil)-4-(3-hidroksiprop-1-in-1-il)-1/-/-pirolo[2,3,-c]piridin-5-karboksilata (0,46 g, 1,31 mmol) u MeOH (6 mL), doda se paladijum (10 mas% na aktivnom ugljeniku, 15 mg, 0,014 mmol). Dobijena smeša se 4 h mućka u Parr-ovom aparatu, na sobnoj temperaturi, i pritisku od 4,1 bar vodonika. Smeša se filtrira, pa koncentriše, dajući naslovljeni proizvod kao žuto ulje (0,41 g, prinos 88%). LC-MS (APCI, M+H<+>): 357,2. HPLC: čistoća 96%.

3. korak: 1-(4-fluorobenzil)-4-(3-hidroksipropil)-1 /-/-pirolo[2,3-c]piridin-5-karboksilna kiselina

U rastvor etil 1-(4-fluorobenzil)-4-(3-hidroksiprop-1-in-1-il)-1/-/-pirolo[2,3-c]piridin-5-karboksilata (0,41 g, 1,15 mmol) u MeOH (6 mL) doda se rastvor natrijum-hidroksida (92 mg, 2,30 mmol) u 1 mL vode. Dobijena smeša se 6 h meša na 60°C. Smeša se zakiseli do pH=6,5, pomoću 1M HCI, pa se koncentriše, dajući naslovljeni proizvod kao mrku čvrstu supstancu (358 mg, prinos 95%). LC-MS (APCI, M+H<+>): 329,1. HPLC: čistoća 96%. 4. korak: 1-(4-fluorobenzil)-4-(3-hidroksipropil)-/\/-(tetrahidro-2/-/-piran-2-iloksi)-1H-pirolo[2,3-c]piridin-5-karboksamid.

U rastvor 1-(4-fluorobenzil)-4-(3-hidroksipropil)-1/-/-pirolo[2,3-c]piridin-5-karboksilne kiseline (358 mg, 1,1 mmol) u DMF (8 mL) doda se trietilamin (333 mg, 3,3 mmol), HATU (627 mg, 1,65 mmol) i 0-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-hidroksilamin. Dobijena smeša se 2,5 h meša na sobnoj temperaturi. Smeša se koncentriše. Prečišćavanje fleš hromatografijom (Biotage) preko silikagela (100%) etilacetat), daje naslovljeni proizvod kao mrko ulje (149 mg, prinos 32%). LC-MS (APCI, M+H<+>): 428,2. HPLC: čistoća 96%.

5. korak: 3-(4-fluorobenzil)-7-(tetrahidro-2H-piran-2-iloksi)-7,8,9,10-tetrahidropirolo[3',2',4,5]pirido[2,3-c-]azepin-6(3/-/)-on

U rastvor 1-(4-fluorobenzil)-4-(3-hidroksipropil)-A/-(tetrahidro-2/-/-piran-2-iloksi)-1/-/-pirolo[2,3-c]piridin-5-karboksamida (149 mg, 0,35 mmol) u THF (4 mL), doda se PPh3(110 mg, 0,42 mmol) i DIAD (85, mg, 0,42 mmol). Dobijena smeša se 1 h meša na sobnoj temperaturi. Smeša se koncentriše. Prečišćavanje fleš hromatografijom (Biotage) preko silikagela (100% etilacetat), daje naslovljeni proizvod kao mrko ulje (18,5 mg, prinos 13%). LC-MS (APCI, M+H<+>):410,1. HPLC: čistoća 96%.

6. korak: 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-7,8,9,10-tetrahidropirolo[3',2',4,5]pirido[2,3-c]azepin-6(3/-/)-on

Rastvori se 3-(4-fluorobenzil)-7-(tetrahidro-2H-piran-2-iloksi)-7,8,9,10-tetrahidropirolo[3',2',4,5]pirido[2,3-c-]azepin-6(3/-0-on (18,53 mg, 0,045 mmol) u sirćetnoj kiselini, THF i vodi (3,5 mL, 5:1:1). Dobijena smeša se 1 h meša na sobnoj temperaturi. Smeša se koncentriše i prečisti preparativnom HPLC, dajući naslovljeno jedinjenje kao beli prah (9,0 mg, prinos 61%>).<1>H NMR (300 MHz, MeOH) 8: 8,57 (s, 1H), 7,60 (d, J=3,20 Hz, 1H), 7,11-7,20 (m, 2H), 6,90-6,99 (m, 2H), 6,72 (d, J=3,01 Hz, 1H), 5,44 (s, 2H), 3,51 (t, J=6,50 Hz, 2H), 3,03 (t, J=7,16 Hz, 2H), 2,14-2,25 (m, 2H). LCMS (APCI, M+H<+>): 329,1. HPLC: čistoća 98%.

Primer C

1-( 4- fluorobenzil)- 4-( 2- hidroksietil)- A/-( tetrahidro- 2/-/- piran- 2- iloksi)- 1/-/-

pirolo[ 2, 3- c1piridin- 5- karboksamid

Prvo se 7-(4-fluorobenzil)-1,7-dihidropirano[3,4-d]pirolo[3,2-d]piridin-4(2H)-on (3,50 g, 11,81 mmol) i 0-(tetrahidro-2H-piran-2-il)hidroksilamin (2,77 g, 23,62 mmoL, 2 ekviv.) suše isparavanjem iz anhidrovanog THF (3><20 mL), a zatim rastvore u anhidrovanom THF (80 mL). U nastali zamućeni oranž rastvor se pod azotom doda čvrst LiHMDS (3,95 g, 23,62 mmol, 2 ekviv ). Reakciona smeša se zagreje do refluksa, zatim ohladi, pa preko noći meša. Doda se još jedna porcija 0-(tetrahidro-2/-/-piran-2-il)hidroksilamina (1,3 g), a rastvor se još 5 h zagreva na 50°C. Isparljivi sastojci se uklone pod vakuumom (pribl. 2,7 mbar), dajući oranž ulje. Ovaj sirovi materijal se razblaži sa DCM:MeOH 95:5 (100 mL), pa opere smešom zasićeni NH4CI:rastvor soli 1:1 (80 mL) i rastvorom soli (60 mL). Odvoji se organska faza, osuši (Na2S04) i koncentriše pod vakuumom, dajući 12,8 g mrkog ulja. Ovaj sirovi materijal se prečisti hromatografijom na koloni sa silikagelom i eluira sa gradijentom od CH2CI2do CH2CI2-MeOH 98:2( V/ V).Kombinuju se frakcije, dajući 3,81 g (prinos 78%) naslovljenog jedinjenja kao bezbojno ulje. Ovo ulje se razmuti u DCM (100 mL), pa opere zasićenim NaHC03(30 mL), 1M KOH (30 mL) i rastvorom soli (60 mL). Odvoji se organska faza, osuši (Na2S04) i koncentriše pod vakuumom, dajući belu supstancu koja se suspenduje u etru (70 mL), filtrira i opere etrom (20 mL), dajući 1,81 g (prinos 38%) naslovljenog jedinjenja. LC-MS (Eclipse XDB-C8, 0,8 mL/min, gradijent 80:20 do 5:95 H2O(+0,1%HOAc):CH3CN - 3 min, APCI, +varijanta): RT -1,150 min,m/ e =414,2 (M+H<+>, baza). 1H NMR (300 MHz, CDCI3): 8 1,64 (m, 3H), 1,92 (m, 3H), 3,67 (m, 2H), 4,09 (m, 4H), 5,12 (s, 1H), 5,38 (s, 2H), 6,69 (d, 1H), 6,96-7,20 (m, 4H), 7,31 (d, 1H), 8,42 (s, 1H), 10,46 (s, 1H).

Primer D

3-( 4- fluorobenzil)- 7-( tetrahidro- 2H- piran- 2- iloksi)- 3, 7, 8, 9- tetrahidro- 6H-pirolo[ 2, 3- c1- 1, 7- nafthiridin- 6- on

U 1-(4-fluorobenzil)-4-(2-hidroksietil)-A/-(tetrahidro-2/-/-piran-2-iloksi)-1H-pirolo[2,3-c]piridin-5-karboksamid (460 mg, 1,114 mmol) u DCM (30 mL) doda se pod azotom i-Pr2NEt (0,58 mL, 3,34 mmol, 3 ekviv.), a zatim tozilhlorid (234 mg, 1,225 mmol, 1,1 ekviv.). Oranž rastvor se preko noći meša na sobnoj temperaturi, a zatim još 3 h pod refluksom. Doda se još tozilhlorida (240 mL) i i-Pr2NEt (0,6 mL), pa se sa zagrevanjem nastavi preko druge noći. Da je reakcija završena ceni se pomoću HPLC-MS analize, pa se reakciona smeša opere zasićenim rastvorom natrijum-bikarbonata (10 mL) i rastvorom soli (10 mL). Odvoji se organska faza, osuši (Na2S04) i koncentriše pod vakuumom, dajući 834 mg mrkog ulja. Ovaj sirovi materijal se prečisti hromatografijom na koloni sa silicijum-dioksidom, eluira sa gradijentom od CH2CI2do CH2CI2-MeOH 98:2( VA/).Kombinuju se frakcije, dajući 234 mg (53%) naslovljenog jedinjenja. LC-MS (Eclipse, XDB-CB, 0,8 mL/min, gradijent 80:20 do 5:95 H2O(+0,1% HOAc):CH3CN - 3 min, APCI, + varijanta): RT - 1,121 min, m/e=396,2 (M+H<+>, baza).<1>H NMR (300 MHz, CDCI3): 8 1,68 (m, 3H), 1,94 (m, 3H), 3,40 (m, 2H), 3,66 (m, 1H), 3,92-4,20 (m, 3H), 5,28 (s, 2H), 5,42 (s, 2H), 6,64 (d, 1H), 7,02 (m, 2H), 7,26 (m, 2H), 7,32 (d, 1H), 8,78 (s, 1H).

Primer E

1-( 4- fluorobenzin- 4-( 2- hidroksietil)- A/-( tetrahidro- 2/-/- piran- 2- iloksi)- 1H-piroloF2, 3- c1piridin- 5- karboksamid

Prvo se 7-(4-fluorobenzil)-1,7-dihidropirano[3,4-6]pirolo[3,2-đ]piridin-4(2/-/)-on (3,50 g, 11,812 mmol) i 0-(tetrahidro-2H-piran-2-il)hidroksilamin (2,77 g, 23,62 mmoL, 2 ekviv.) suše isparavanjem iz anhidrovanog THF (3><20 mL), a zatim rastvore u anhidrovanom THF (80 mL). U nastali zamućeni oranž rastvor se pod azotom doda čvrst LiHMDS (3,95 g, 23,62 mmol, 2 ekviv.). Reakciona smeša se zagreje do refluksa, a zatim ohladi i preko noći meša. Doda se još jedna porcija 0-(tetrahidro-2H-piran-2-il)hidroksilamina (1,3 g), a rastvor se još 5 h zagreva na 40°C. Isparljivi sastojci se uklone pod vakuumom (pribl. 2,7 mbar), dajući oranž ulje. Ovaj sirovi materijal se razblaži sa DCM:MeOH 95:5 (100 mL), pa opere smešom zasićeni NH4CI:rastvor soli 1:1 (80 mL) i rastvorom soli (60 mL). Odvoji se organska faza, osuši (Na2S04) i koncentriše pod vakuumom, dajući 12,8 g mrkog ulja. Ovaj sirovi materijal se prečisti hromatografijom na koloni sa silicijum-dioksidom i eluira sa gradijentom od CH2CI2do CH2CI2-MeOH 98:2( VA/).Kombinuju se frakcije, dajući 3,81 g (prinos 78%) naslovljenog jedinjenja kao bezbojno ulje. Ovo ulje se razmuti u DCM (100 mL), pa opere zasićenim NaHC03(30 mL), 1M KOH (30 mL) i rastvorom soli (60 mL). Odvoji se organska faza, osuši (Na2S04) i koncentriše pod vakuumom, dajući belu supstancu koja se suspenduje u etru (70 mL), filtrira i opere etrom (20 mL), dajući 1,81 g (prinos 38%) naslovljenog jedinjenja. LC-MS (Eclipse XDB-C8, 0,8 mL/min, gradijent 80:20 do 5:95 H2O(+0,1%HOAc):CH3CN - 3 min, APCI, +varijanta): RT -1,150 min,m/ e = 414,2(M+H<+>, baza). 1H NMR (300 MHz, CDCI3): fi 1,64 (m, 3H), 1,92 (m, 3H), 3,67 (m, 2H), 4,09 (m, 4H), 5,12 (s, 1H), 5,38 (s, 2H), 6,69 (d, 1H), 6,96-7,20 (m, 4H), 7,31 (d, 1H), 8,42 (s, 1H), 10,46 (s, 1H).

Primer F

3-( 4- fluorobenzil)- 7-( tetrahidro- 2H- piran- 2- iloksi)- 3, 7, 8, 9- tetrahidro- 6/-/-

pirolof2, 3- cV1, 7- nafthiridin- 6- on

U 1-(4-fluorobenzil)-4-(2-hidroksietil)-A/-(tetrahidro-2H-piran-2-iloksi)-1/-/-

pirolo[2,3-c]piridin-5-karboksamid (460 mg, 1,114 mmol) u DCM (30 mL) doda se pod azotom i-Pr2NEt (0,58 mL, 3,34 mmol, 3 ekviv.), a zatim tozilhlorid (234 mg, 1,225 mmol, 1,1 ekviv.). Oranž rastvor se preko noći meša na sobnoj temperaturi, a zatim još 3 h pod refluksom. Doda se još tozilhlorida (240 mL) i i-Pr2NEt (0,6 mL), pa se zagrevanjem nastavi preko druge noći. Da je reakcija završena ceni se pomoću HPLC-MS analize, pa se reakciona smeša opere zasićenim rastvorom natrijum-bikarbonata (10 mL) i rastvorom soli (10 mL). Odvoji se organska faza, osuši (Na2S04) i koncentriše pod vakuumom, dajući 834 mg mrkog ulja. Ovaj sirovi materijal se prečisti hromatografijom na koloni sa silicijum-dioksidom, eluira sa gradijentom od CH2CI2do CH2CI2-MeOH 98:2( VA/).Kombinuju se frakcije, dajući 234 mg (53%) naslovljenog jedinjenja. LC-MS (Eclipse, XDB-CB, 0,8 mL/min, gradijent 80:20 do 5:95 H2O(+0,1% HOAc):CH3CN - 3 min, APCI, + varijanta): RT - 1,121 min, m/e=396,2 (M+H<+>, baza).<1>H NMR (300 MHz, CDCI3): 5 1,68 (m, 3H), 1,94 (m, 3H), 3,40 (m, 2H),

3,66 (m, 1H), 3,92-4,20 (m, 3H), 5,28 (s, 2H), 5,42 (s, 2H), 6,64 (d, 1H), 7,02 (m, 2H), 7,26 (m, 2H), 7,32 (d, 1H), 8,78 (s, 1H).

Primer G

3-( 4- fluorobenzil)- 7-( r2-( trimetilsilil) etoksi1metoksi)- 3, 7, 8, 9- tetrahidro- 6/-/-

pirolo[ 3, 2,- cl- 1, 7- nafthiridin- 6- on

U1 -(4-fluorobenzil)-4-(2-hidroksietil)-A/-{[2-(trimetilsilil)etoksi]metoksi}-1 H-pirolo[2,3-c]piridin-5-karboksamid (4,57 g, 9,944 mmol) u anhidrovanom THF (80 mL), doda se LiBr (950 mg, 10,934 mmol, 1,1 ekviv.), pa se taj rastvor 30 min meša. Zatim se doda i-Pr2NEt (5,20 mL, 29,831 mmol, 3 ekviv.), pa 4-nitrobenzensulfonilhlorid (2,42 g, 10,934 mmol, 1,1 ekviv.). Pojavi se beli talog, a oranž rastvor se meša još 20 min na sobnoj temperaturi. Da je reakcija završena ceni se prema HPLC-MS, kada se uklone isparljivi sastojci pod vakuumom (pribl. 2,8 mbar), dajući oranž ulje. Ovaj sirovi materijal se razblaži sa EtOAc (100 mL), pa opere zasićenim rastvorom natrijum-bikarbonata (2x80 mL) i rastvorom soli (20 mL). Odvoji se organska faza, osuši (Na2S04) i koncentriše pod vakuumom, dajući 5,2 g oranž ulja. Ovaj sirovi materijal se prečisti hromatografijom na koloni Biotage 651, eluira sa gradijentom od CH2CI2do CH2CI2-MeOH 95:5(V/V),preko 5 L. Kombinuju se frakcije, dajući 4,091 g (93%) naslovljenog jedinjenja. LC-MS (Eclipse XDB-C8, 0,8 mL/min, gradijent 80:20 do 5:95 H2O(+0,1% HOAc):CH3CN3- 3 min: apci, + varijanta): RT - 1,56 min,m/ e =442,2 (M+H<+>, baza). 'H NMR (300 MHz, CDCI3): 5 = 0,000 (s, 9H), 0,98 (t, 2H), 3,38 (m, 2H), 3,86 (t, 2H), 3,98 (t, 2H), 5,11 (s, 2H), 5,34 (s, 2H), 6,60 (s, 1H), 6,98 (m, 2H), 7,08 (m, 2H), 7,29 (s, 1H), 8,73 (s, 1H).

Primer H

3-( 4- fluorobenzil)- 7- hidroksi- 7, 8, 9, 10- tetrahidropirolor3', 2', 4, 51piridor2, 3-

dazepin- 6( 3/- 7)- on

1 .korak: metil 1 -(4-fluorobenzil)-4-(3-hidroksiprop-1 -in-1 il)-1 /-/-pirolo[2,3-c]piridin-5-karboksilat U rastvor metil 1-(4-fluorobenzil)-4-{[(trifluorometil)sulfonil]oksi}-1/-/-pirolo[2,3-c]piridin-5-karboksilata (500 mg, 1,16 mmol) u anhidrovanom DMF (2 mL), doda se propargiloksi-trimetilsilan (252 mg, 1,97 mmol), a zatim litijum-hlorid (74 mg, 1,74 mmol), bakar-jodid (9,72 mg, 0,051 mmol), dihlorobis(trifenilfosfin)paladijum (II) (18 mg, 0,026 mmol) i trietilamin (2,42 mL, 17,4 mmol). Ova smeša se dovede pod azot, stavi u mikrotalasnu grejalicu Biotage, pa zagreva na 130°C. Posle 20 min mešanja o tome da li je reakcija završena ceni se analizom HPLC-MS. Isparljivi sastojci se uklone pomoću rotacionog uparivača, dajući čvrst crni ostatak. Ovaj sirovi materijal se razblaži etilacetatom (30 mL), filtrira kroz Celite i zatim opere vodom. Kombinuju se ekstrakti, osuše iznad Na2S04, filtriraju i ispare. Ciljani proizvod se dalje prečisti sa prep-HPLC, dajući 298 mg (prinos 76,1%) bele čvrste supstance. LC-MS (APCI, M+H<+>):339,1. HPLC: čistoća >95%.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-D6): 6 8,90 (s, 1H), 7,93 (d, 1H), 7,30-7,38 (m, 2H), 7,12-7,20 (m, 2H), 6,73 (d, 1H), 5,59 (s, 3H), 4,41 (d, 2H), 3,83 (s, 3H). 2. korak: metil 4-(3-{[(terc-butoksikarbonil)[(terc-butoksikarbonil]oksi]amino}prop-1 -in-1 -il)-1 -(4-fluorobenzil)-1 H-pirolo[2,3-c]piridin-5-karboksilat

U rastvor metil l^^fluorobenzilH^S-hidroksiprop-l-in-l-iO-IH-pirolo^.S-c]piridin-5-karboksilata (70 mg, 0,207 mmol) u THF (5 mL), doda se terc-butilN-(terc-butoksikarboniloksi)-karbamat (58 mg, 0,25 mmol), DIAD (80,2 uL, 0,414 mmol) i trifenilfosfin vezan za polimer (345 mg, 1,035 mmol). Posle 6 h mešanja na sobnoj temperaturi o završetku reakcije se ceni pomoću HPLC-MS analize. Jedinjenje vezano za polimer se ukloni filtriranjem. Isparljivi sastojci se uklone na rotacionom uparivaču, dajući čvrst, mrk ostatak, koji se prečisti sa prep. HPLC, dajući 46 mg (prinos 40,2%) ciljanog proizvoda, kao beli prah. LC-MS (APCI, M+H<+>): 554,2. HPLC: čistoća >95%.<1>H NMR (300 MHz, MeOH) 8 8,69 (s, 1H), 7,74 (d, 1H), 7,20-7,31 (m, 2H), 6,99-7,11 (m, 2H), 6,86 (m, 1H), 5,57 (s, 2H), 4,73 (s, 2H), 3,97 (s, 3H), 1,51 (s, 9H), 1,50 (s, 9H).

3. korak: metil 4-(3-{[(terc-butoksikarbonil)[(terc-butoksikarbonil)oksi]amino}propil)-1-(4-fluorobenzil)-1H-pirolo[2,3-c]piridin-5-karboksilat

U rastvor metil 4-(3-{[(terc-butoksikarbonil)[(terc-butoksikarbonil]oksi]amino} prop-1-in-1-il)-1-(4-fluorobenzil)-1/-/-pirolo[2,3-c]piridin-5-karboksilata (40 mg, 0,072 mmol) u MeOH (2 mL), doda se Pd/C (10 mg, 10 mas%, nosač je aktivirani ugljenik). Primenjuje se balon sa vodonikom. Posle 18 h mešanja na sobnoj temperaturi, na osnovu HPLC-MS analize ceni se da je reakcija završena. Pd/C se ukloni filtriranjem. Isparlivi sastojci se uklone na rotacionom uparivaču, dajući željeni proizvod nalik lepku (38 mg, prinos 94%). LC-MS (APCI, M+H<+>): 558,2. HPLC: čistoća >90%.<1>H NMR (300 MHz, MeOH): 8 8,58

(s, 1H), 7,66 (d, 1H), 7,19-7,27 (m, 2H), 6,99-7,08 (m, 2H), 6,86 (d, 1H), 5,53 (s, 2H), 3,93 (s, 3H), 3,66 (t, 2H), 3,22-3,31 (m, 2H), 1,88-2,01 (m, 2H), 1,51 (s, 9H), 1,44 (s, 9H).

4. korak: metil 1-(4-fluorobenzil)-4-[3-(hidroksiamino)propil]-1H-pirolo[2,3-c]piridin-5-karboksilat

Kroz rastvor metil 4-(3-{[(terc-butoksikarbonil)[(terc-butoksikarbonil)oksi]amino} propil)-1-(4-fluorobenzil)-1/-/-pirolo[2,3-c]piridin-5-karboksilata (129 mg, 0,231 mmol) u DCM (2 mL) 10 min se propušta azot. Doda se TFA (2 mL). Reakciona smeša se 2 h meša na sobnoj temperaturi. Na osnovu HPLC-MS analize ceni se da je reakcija završena. Isparljivi sastojci se uklone na rotacionom uparivaču, dajući željeni proizvod nalik lepku (80 mg, prinos 96,8%). LC-MS (APCI, M+H<+>): 358,2. HPLC: čistoća >90%. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) 8 8,78 (s, 1H), 7,83 (d, 1H), 7,23-7,37 (m, 2H), 7,15 (t, 2H), 6,83 (d, 1H), 5,55 (s, 2H), 3,82 (s, 3H), 3,03-3,16 (m, 2H), 2,87-3,02 (m, 2H), 1,78-1,93 (m, 2H).

5. korak: 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-7,8,9,10-tetrahidropirolo[3',2',4,5] pirido[2,3-c]azepin-6(3/-/)-on

Kroz rastvor metil 1-(4-fluorobenzil)-4-[3-(hidroksiamino)propil]-1/-/-pirolo[2,3-c]piridin-5-karboksilata (80 mg, 0,22 mmol) u anhidrovanom MeOH (3 mL) 10 min se propušta azot. Zatim se doda LiOMe (50 mg, 1,32 mmol). Posle 48 h mešanja na 60°C na osnovu HPLC-MS analize se oceni da je reakcija završena. Reakcija se tretira rastvorom NH4CI, pa se smeša ekstrahuje etilacetatom. Kombinovane organske faze se operu rastvorom soli, osuše iznad Na2S04, filtriraju i ispare. Ciljani proizvod se prečisti sa prep-HPLC, dajući 42 mg (prinos 58%) 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-7,8,9,10-tetrahidropirolo[3',2',4,5]pirido[2,3-c]azepin-6(3/-/)-ona, kao belu čvrstu supstancu. LC-MS (APCI, M+H<+>): 326,2. HPLC: čistoća >95%.<1>H NMR (300 MHz, MeOH) 8 8,65 (s, 1H), 7,68 (d, 1H), 7,19-7,29 (m, 2H), 6,97-7,08 (m, 2H), 6,81 (d, 1H), 5,53 (s, 2H), 3,60 (t, 2H), 3,12 (t, 2H), 2,22-2,35 (m, 2H).

Primer I

3-( 4- fluorobenzil)- 7- hidroksi- 7, 8- dihidropirolof3', 2', 4, 51piridor2, 3- clazepin-6( 3H)- on

1. korak: metil 4-((1Z)-3-{[(terc-butoksikarbonil)[(terc-butoksikarbonil)oksi] amino}prop-1-en-1-il)-1-(4-fluorobenzil)-1H-pirolo[2,3-c]piridin-5-karboksilat

U rastvor metil 4-(3-{[(terc-butoksikarbonil)[(terc-butoksikarbonil)oksi]amino} prop-1-in-1-il)-1-(4-fluorobenzil)-1/-/-pirolo[2,3-c]piridin-5-karboksilata (20 mg, 0,036 mmol) u toluenu (2 mL) doda se 10 mg ,~5% paladijuma na kalcijum-karbonatu, zatrovanog sa olovom. Primenjuje se balon sa vodonikom. Posle 18 h mešanja na sobnoj temperaturi, pomoću HPLC-MS analize se oceni da je završena reakcija. Lindlar-ov katalizator se ukloni filtriranjem. Isparljivi sastojci se uklone na rotacionom uparivaču, dajući željeni priozvod nalik lepku (18,3 mg, prinos 91,0%). LC-MS (APCI, M+H<+>): 556,2. HPLC: čistoća >90%.

2. korak metil 1-(4-fluorobenzil)-4-[(1Z)-3-(hidroksiamino)prop-1-en-1-il]-1H-

pirolo[2,3-c]piridin-5-karboksilat Kroz rastvor metil 4-((1Z)-3-{[(terc-butoksikarbonil)[(terc-butoksikarbonil)oksi] amino}prop-1 -en-1 -il)-1 -(4-fluorobenzil)-1 /-/-pirolo[2,3-c]piridin-5-karboksilata (18,3 mg, 0,033 mmol) u DCM (2 mL) 10 min se propušta azot. Doda se TFA (2 mL). Reakciona smeša se 1 h meša na sobnoj temperaturi. Na osnovu HPLC-MS analize ceni se da li je reakcija završena. Isparljivi sastojci se uklone na rotacionom uparivaču. Ciljani proizvod se prečisti sa prep-HPLC, dajući mrki proizvod nalik lepku (10,2 mg, prinos 87%). LC-MS (APCI, M+H<+>): 356,2. HPLC: čistoća >90%.<1>H NMR (300 MHz, MeOH) 5 9,07 (s, 1H), 8,19 (s, 1H), 7,28-7,42 (m, 3H), 7,02-7,15 (m, 2H), 6,92 (d, 1H), 6,16-6,24 (m, 1H), 5,71 (s, 2H), 4,02 (s, 3H), 3,68 (d, 2H). 3. korak: 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-7,8-dihidropirolo[3',2',4,5]pirido[2,3-c]azepin-6(3/-/)-on

Kroz rastvor metil 1-(4-fluorobenzil)-4-[(1Z)-3-(hidroksiamino)prop-1-en-1-il]-1H-pirolo[2,3-c]piridin-5-karboksilata (10,2 mg, 0,029 mmol) u anhidrovanom MeOH (2 mL) 10 min se propušta azot. Zatim se doda LiOMe (4,41 mg, 0,116 mmol). Posle 2 h mešanja na sobnoj temperaturi na osnovu HPLC-MS analize se ceni da li je reakcija završena. Reakcija se tretira rastvorom NH4CI, pa se smeša ekstrahuje etilacetatom. Kombinovane organske faze se operu rastvorom soli, osuše iznad Na2S04, filtriraju i ispare. Ciljani proizvod se prečisti sa prep-HPLC, dajući 5,5 mg (prinos 59,3%) proizvoda kao belu čvrstu supstancu. LC-MS (APCI, M+H<+>): 324,2. HPLC: čistoća >95%.<1>H NMR (300 MHz, MeOH) 5 8,77

(s, 1H), 7,72 (s, 1H), 7,22-7,34 (m, 3H), 6,97-7,11 (m, 2H), 6,83 (d, 1H), 6,67 (m, 1H), 5,56 (s, 2H), 4,11 (d, 2H).

Primer J

8- butil- 3-( 4- fluorobenzil)- 7- hidroksi- 3, 7, 8, 9- tetrahidro- 6/-/-

pirolo[ 2, 3- c1- 1, 7- nafthiridin- 6- on

1. korak: etil 1-(4-fluorobenzil)-4-[(1E)-heks-1-en-1-il]-1H-pirolo[2,3-c]piridin-5-karboksilat

Rastvor etil 1-(4-fluorobenzil)-4-{[(trifluorometil)sulfonil]oksi}.1/-/-pirolo[2,3-c]piridin-5-karboksilata (0,20 g, 0,46 mmol), 1-heksena (0,5 mL, 4,0 mmol), trietilamina (0,5 mL, 6,8 mmol) i paladijum(ll)acetata (0,1 g, 0,61 mmol) u DMF (5 mL), zagreva se 10 min na 100°C u mikrotalasnoj grejalici Biotage Personal, a zatim 5 min na 150°C. Tretira se vodom, pa ekstrahuje etilacetatom. Organski sloj se osuši iznad natrijum-sulfata, filtrira, koncentriše i prečisti hromatografijom na koloni, koristeći etilacetat/heksani (8:2), dajući naslovljeno jedinjenje kao čvrstu supstancu (20 mg, 0,055 mmol).<1>H NMR (MeOD) S 8,63 (s, 1H), 7,85 (d, J=3,0 Hz, 1H), 7,28-7,31 (m, 2H), 7,08-7,15 (m, 3H), 6,99 (d, J=3,0 Hz, 1H), 6,33-6,43 (m, 1H), 5,61 (s, 2H), 3,96 (s, 3H), 2,34-2,41 (m, 2H), 1,43-1,62 (m, 4H), 0,99 (t, J=7,1 Hz, 3H). MS (APCI, M+H<+>): 367,2.

2. korak: 8-butil-3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on

Rastvor etil 1-(4-fluorobenzil)-4-[(1E)-heks-1-en-1-il]-1/-/-pirolo[2,3-c]piridin-5-karboksilata (0,009 g, 0,031 mmol), hidroksilamina (1,0 mL, 50% u vodi, 15,2 mmol) i natrijum-hidroksida (0,0485 g, 1,2 mmol) u metanolu (8 mL) meša se 2 h na sobnoj temperaturi. Reakcioni rastvor se koncentriše do suva, pa se doda sirćetna kiselina (2,0 mL, 33,3 mmol). Vodi se kao mikrotalasna reakcija 10 min na 150°C, koncentriše i prečisti sa prep-HPLC, dajući naslovljeno jedinjenje kao čvrstu supstancu (0,001 g, prinos 5%).<1>H NMR (MeOD) 8 8,69 (s, 1H), 7,70 (d, J=3,0 Hz, 1H); 7,25-7,28 (m, 2H), 7,05 (d,J=8JHz, 2H), 6,85 (d, J=3,0 Hz, 1H), 5,55 (s, 2H), 4,30 (m, 1H), 3,38-3,44 (m, 1H), 3,13-3,15 (m, 1H), 1,36-1,52 (m, 6H), 0,92 (t, J=7,0 Hz, 3H). LCMS (APCI, M+H<+>): 368,2. HRMS izrač. za C2iH22N302F1(M+H<+>) 368,1769; nađeno 368,1756. HPLC: čistoća 100%.

Primer K

3-( 4- fluorobenzil)- 7- hidroksi- 8- metil- 3, 7- dihidro- 6H- pirolor2, 3- cl-1, 7- nafthiridin- 6- on

1. korak: metil 1 -(4-fluorobenzil)-4-prop-1 -in-1 -il-1 A7-pirolo[2,3-c]piridin-5-karboksilat

U rastvor metil 1-(4-fluorobenzil)-4-{[(trifluorometil)sulfonil]oksi}-1H-pirolo[2,3-c]piridin-5-karboksilata (4 g, 9,25 mmol) u anhidrovanom DMF (20 mL), dodaju se litijum-hlorid (1,18 g, 27,75 mmol), bakar-jodid (87,9 mg, 0,463 mmol), dihlorobis(trifenilfosfin)oaladijum(ll) (649,35 mg, 0,925 mmol) iN, N-diizopropiletilamin (24,1 mL, 138,75 mmol). Pošto se smeša ohladi u kupatilu suvi led/aceton, doda se višak propina. Hermetični sud sa reakcionom smešom se stavi u uljano kupatilo, pa se zagreva na 80°C. Posle 24 h na 80°C, uz mešanje, pomoću analize HPLC-MS ceni se da li je reakcija završena. Isparljivi sastojci se uklone na rotacionom uparivaču, dajući crnu čvstu supstancu kao ostatak. Ovaj sirovi materijal se prečisti hromatografijom na koloni sa silikagelom, dajući 2,06 mg (prinos 69%) žute čvrste supstance. LC-MS (APCI, M+H<+>): 323,2. HPLC: čistoća >90%.<1>H NMR (300 MHz, MeOD) 8 8,60 (s, 1H), 7,67 (d, J=3,01 Hz, 1H), 7,20-7,27 (m, 2H), 7,01-7,09 (m, 2H), 6,77-6,82 (m, 1H), 5,52 (s, 2H), 3,93 (s, 3H), 2,20 (s, 3H).

2. korak:

A: 1 -(4-fluorobenzil)-A/-hidroksi-4-prop-1 -in-1 -il-1 AV-pirolo[2,3-c]piriin-5-karboksamid B: 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-8-metil-3,7-dihidro-6/-/-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on

U rastvor metil 1-(4-fluorobenzil)-4-prop-1-in-1-il-1/-/-pirolo[2,3-c]piridin-5-karboksilata karboksamida (274 mg, 0,85 mmol) u MeOH (5 mL) doda se 0,85 mL smeše NH2OH:H20 = 1:1 i NaOH (170,2 mg, 4,25 mmol). Posle 2 h mešanja na sobnoj temperaturi, formira se A, prema analizi HPLC-MS i NMR. Bez dalje obrade ili prečišćavanja, isti balon sa reakcionom smešom se stavi u uljano kupatilo, pa se zagreje na 50°C. Posle 18 h mešanja na 50°C, na osnovu analize HPLC-MS i NMR ceni se da li je reakcija završena. Isparljivi sastojci se uklone na rotacionom uparivaču, dajući mrki čvrst ostatak, koji se prečisti sa prep-HPLC, dajući 112 mg (prinos 41%) ciljanog proizvoda, kao svetlomrki prah. A: LC-MS (APCI, M+H<+>): 324,1. HPLC: čistoća >75%.<1>H NMR (300 MHz, MeOD) 5 8,59 (s, 1H), 7,66 (d, 1H), 7,24 (m, 2H), 7,05 (m, 2H), 6,77 (d, 1H), 5,53 (s, 2H), 2,18 (s, 3H).

B: LC-MS (APCI, M+H<+>): 324,1. HPLC: čistoća >95%.<1>H NMR (300 MHz, MeOD) 5 8,86 (s, 1H), 7,70 (d, 1H), 7,26 (m, 2H), 7,06 (m, 2H), 6,95 (d, 1H), 5,62 (s, 2H),2,57 (s, 3H).

Primer L

3-( 4- fluorobenzil)- 7- hidroksi- 8- metil- 1-( morfolin- 4- ilmetil)- 3, 7- dihidro-6H- pirolor2. 3- c1- 1, 7- nafthiridin- 6- on

Primer M 3-( 4- fluorobenzil)- 7- hidroksi- 8- metil- 9-( morfolin- 4- ilmetil)- 3, 7- dihidro-6/-/- pirolof2, 3- cl- 1, 7- nafthiridin- 6- on

CD

U rastvor 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-8-metil-3,7-dihidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-ona (40 mg, 0,124 mmol) u anhidrovanom acetonitrilu (3 mL) dodaju se hlorotrimetilsilan (93,6 uL, 0,74 mmol) i A/,A/-dimorfolinometan (138 mg, 0,47 mmol). Ova smeša, pod azotom, prebaci se na uljano kupatilo i zagreva na 90°C. Posle 6 dana mešanja na 90°C, na osnovu HPLC-MS analize oceni se da je reakcija završena. Isparljivi sastojci se uklone na rotacionom uparivaču, dajući mrku čvrstu supstancu kao ostatak, koji se prečisti sa prep-HPLC, dajući 7,8 mg (prinos 15%) jedinjenja C i 3 mg (prinos 6%) jedinjenja D, kao beli prah.

C: LC-MS (APCI, M+H<+>): 423,2. HPLC: čistoća >90%.<1>H NMR (300 MHz, MeOD) 5 8,84 (s, 1H), 7,62 (s, 1H), 7,46 (s, 1H), 7,25 (m, 2H), 7,05 (t, 2H), 5,57 (s, 2H), 3,81 (s, 2H), 3,68 (t, 4H), 2,56 (m, 7H).

D: LC-MS (APCI, M+H<+>): 423,2. HPLC: čistoća >90%.<1>H NMR (300 MHz, MeOD) 5 8,92 (s, 1H), 7,70 (s, 1H), 7,28 (dd, 2H), 7,20 (d, 1H), 7,06 (t, 2H), 5,63 (s, 2H), 3,95 (s, 2H), 3,62 (t, 4H), 2,67 (s, 3H), 260-265 (m, 4H).

Primer N

3-( 4- fluorobenzil)- 7- hidroksi- 1-( hidroksimetil)- 8- metil- 3, 7- dihidro-6/ 7- pirolor2, 3- c1- 1, 7- nafthiridin- 6- on

U rastvor 1 -[(dimetilamino)metil]-3-(4-fluorobenzil)-8-metil-7-{[2-(trimetilsilil) etoksi]etoksi}-3,7-dihidro-6/-/-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-ona (50 mg, 9,8 mmol) u anhidrovanom DCM (1,5 mL), doda se fenilhloroformijat (12,3 uL, 9,8 mmol). Ova smeša se po azotom meša 10 min na sobnoj temperaturi. Pomoću HPLC-MS analize ceni se da li je reakcija završena. U isti sud se dodaju voda (200 uL) i DMF (500 uL). Posle 2 h mešanja na sobnoj temperaturi, reakcija se završi, a isparljivi sastojci uklone pod vakuumom, dajući žutu čvrstu supstancu. Ostatak se rastvori u 1,5% HCI u MeOH (2 mL), pa se 18 h meša na sobnoj temperaturi. Pomoću HPLC-MS analize ocenjuje se da li je reakcija završena. Ciljani proizvod se prečisti sa prep-HPLC, dajući 14,5 mg (prinos 42%) 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-1-(hidroksimetil)-8-metil-3,7-dihidro-6/-/-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-ona, kao žutu čvrstu supstancu. LC-MS (APCI, M+H<+>): 354,1. HPLC: čistoća >95%.<1>H NMR (300 MHz, MeOH) S 8,87 (s, 1H), 7,67 (s, 1H), 7,27 (m, 2H), 7,19 (s, 1H), 7,05 (t, 2H), 5,59 (s, 2H), 4,97 (s, 2H), 2,57 (s, 3H).

Primer O

2-(( 2-( trimetilsilil) etoksi) metoksi) izoindolin- 1, 3- dion ( 1)

1

U trogrli balon ravnog dna, zapremine 2 litra, opremljen magnetnom mešalicom, levkom za ukapavanje (sa priključkom na dovod azota) i digitalnim termometrom, pod statičkim prisustvom azota, dodaju se A/-hidroksiftalimid (51,13 mg, 0,313 mmol), SEM hlorid (73,07 mL, 73,07 g, 0,438 mmol) i dihlorometan (700 mL). Balon se ohladi na 0°C, pa se u levak za ukapavanje doda trietilamin (60,96 mL, 44,32 g, 0,438 mmol) i u kapima dodaje u ovu suspenziju, ali takvom brzinom da temperatura u balonu ne pređe 10°C. Tokom ovog dodavanja opaža se prolazno crveno obojenje, koje ostaje u prisustvu viška aminske baze. Po završetku dodavanja ukloni se rashladno kupatilo, a reakcija se 4 h meša na sobnoj temperaturi. Reakcija se proverava dodavanjem još 1 mL trietilamina, pa ukoliko se opazi crveno obojenje, smeša se ostavi da se meša još jedan sat, a zatim se ponovi ovaj test. Kada se reakcija završi, prelije se u dihlorometan (0,5 L), pa opere zasićenim rastvorom NaHC03u vodi (750 mL) i rastvorom soli (750 mL). Odvoji se organski sloj, osuši iznad Na2S04i koncentriše pod vakuumom. Sirova supstanca se preko noći rekristališe iz heksana. Kristali se odvoje filtriranjem, operu hladnim heksanima, pa suše, dajući 2-((2-(trimetilsilil)etoksi)etoksi)metoksi)izoindolin-1,3-dion (85,4 g, prinos 93%)-<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) 5 0,01 (s, 9H), 0,84-0,95 (m, 2H), 3,88-3,98 (m, 2H), 5,11 (s, 2H), 7,86 (s, 4H).

Primer P

0-{[ 2-( trimetilsilil) etoksi1metil) hidroksilamin ( 2)

U trogrli balon ravnog dna, od 2 litra, opremljen mehaničkom mešalicom, levkom za ukapavanje (sa priključkom na dovod azota) i digitalnim termometrom, dodaju se 2-((2-(trimetilsilil)etoksi)metoksiizoindolin-1,3-dion (1) (77,69 g, 0,265 mmol) i Et20 (700 mL). Smeša se hladi u kupatilu led-so (temperatura oko 0°C), pa se uz snažno mešanje dodaje /V-metilhidrazin (20,9 mL, 18,29 g, 0,397 mmol), ali takvom brzinom da tepmeratura u balonu ne prelazi 5°C. Po završetku dodavanja ukloni se rashladno kupatilo, a reakcija se ostavi da se zagreje na sobnu temperaturu i meša 4 h. Beli talog, koji nastane tokom reakcije, ukloni se filtriranjem i opere sa Et20 (0,5 L), a kombinovani filtrati se koncentrišu pod vakuumom, dajući sirovi proizvod kao svetložuto ulje. Ovo sirovo ulje se prečisti destilacijom (55°-58°C, mbar), dajući 0-{[2-(trimetilsilil)etoksi]metil} hidroksilamin (2) (39,4 g, prinos 91%) kao bistru, bezbojnu tečnost.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-D6) § 0,00 (s, 9H), 0,83-0,91 (m, 2H), 3,52-3,60 (m, 2H), 4,60 (s, 2H), 6,04 (s, 2H).

Primer Q

metil 1-( 4- fluorobenzil)- 4-( 2-(( 2-( trimetilsilil) etoksi) metoksiimino) etil)- 1/-/-

pirolo[ 2, 3- c1piridin- 5- karboksilat

U (E)-metil 1-(4-fluorobenzil)-4-(2-butoksivinil)-1/-/-pirolo[2,3-c]piridin-5-karboksilat (10,00 g, 26,15 mmol) u anhidrovanom THF (250 mL) dodaju se, redom, H2NOSEM (4,91 g, 30,07 mmol, d=0,81, 6,06 mL, 1,15 ekviv.) i p-TsOH-H20 (12,93 g, 67,99 mmol, 2,6 ekviv.). Posle 1 h analiza HPLC-MS pokazuje da nema više reakcije. Posle 14,5 h HPLC-MS pokazuje 20% konverzije u ciljano jedinjenje i da je reakcija čista. Posle 24 h HPLC-MS pokazuje oko 35% konverzije, a posle 38,5 h da je završeno oko 65%. Sa mešanjem se nastavi još oko 22 h (ukupno 60 h), kada HPLC-MS pokaže da je reakcija završena (RT = 1,76 min, m/e=472). Smeša se razblaži etrom (0,25 L), pa se prelije u CH2CI2

(0,5 L) i zasićeni NaHC03u vodi (0,75 L). Odvoji se organska faza, a vodeni sloj ekstrahuje sa CH2CI2(0,5 L), pa se kombinovane organske faze suše (Na2S04), filtriraju i koncentrišu pod vakuumom, dajući sirovi proizvod, kao tamno ulje. Ovaj sirovi materijal se triturira etrom, dajući finu, mrku čvrstu supstancu, koja se odvoji filtriranjem. Uklanjanje etra iz filtrata daje ulje bež boje. Ovaj sirovi proizvod se prečisti kroz kratku, fleš kolonu (50 mm spolj. prečnik, 100 g 230-400 meš, pakovanu sa DCM, uz eluiranje sa etar/DCM 10:90, 1,0 L; etar/DCM 17,5:82.5, 1L; frakcije od po 50 mL). Kombinuju se frakcije 14-24, dajući željeni proizvod kao bezbojno, bistro, viskozno ulje (7,55 g, prinos 71%).<1>H NMR (300 MHz, CDCI3) 5: -0,01-0,05 (m, 9H), 0,92-1,05 (m, 2H), 3,64-3,72 (m, 1H), 3,73-3,80 (m, 1H), 4,01 (d, J=3,20 Hz, 3H), 4,26 (d, J=6,22 Hz, 1H), 4,43 (d, J=5,09 Hz, 1H), 5,11 (m, 1H), 5,28 (m, 1H), 5,42 (m, 2H), 6,88-6,95 (m, 1H), 7,04 (m, 2H), 7,12-7,18 (m, 2H), 7,34 (d, J=3,20 Hz, 1H), 8,69 (d, J=3,96 Hz, 1H).

Primer R

3-( 4- fluorobenzil)- 7-(( 2-( trimetilsilil) etoksi) metoksi)- 8, 9- dihidro- 3H-pirolor2, 3- c1M, 71nafthiridin- 6( 7/-/)- on

U metil1 -(4-fluorobenzil)-4-(2-((2-(trimetilsilil)etoksi)metoksiimino)etil)-1 H-pirolo[2,3-c]piridin-5-karboksilat (7,48 g, 15,86 mmol) u glacijalnoj HOAc (125 mL) dodaje se natrijum-cijanoborohidrid (2,10 g, 95%, 31,72 mmol, 2 ekviv.), u dve porcije, prva na početku reakcije, a druga posle 1 h. Reakcija se prati sa HPLC i HPLC-MS, pa se pokaže da je posle 1 h završeno oko 80-90% reakcije. Posle dodavanja drugog ekvivalenta NaBH3CN, smeša se ostavi da se meša još 1 h, kada HPLC-MS pokaže da je reakcija završena. Zatim se ukloni HOAc pod vakuumom, dajući bistro, žuto, viskozno ulje, koje se tretira sa 1,0 L smeše 95:5 etar/DCM i 0,8 L zasićenog NaHC03u vodi. Smeša se prebaci u levak za razdvajanje od 2 L, promućka i odvoji organska faza, a vodena faza se ekstrahuje sa još 0,5 L DCM, pa se kombinovane organske faze osuše (Na2S04). Filtriranje i koncentrisanje pod vakuumom daju sirovi proizvod kao svetložuto staklo, koje nakon izlaganja vakuum pumpi daje belu penu (7,4 g). Ovaj sirovi proizvod se prečisti hromatografijom Biotage (65, gradijent 2% MeOH do 12% MeOH; 98% do 88% DCM, 12 zapremina kolone, sakupljanje sa UV, frakcije od 240 mL). Detekcija sa UV inicira sakupljanje sa oko 5% MeOH u DCM, pa se sakupljanje nastavi sve dok gradijent ne dostigne 6+% MeOH u DCM, u ukupno 2 frakcije. Koncentrisanje pod vakuumom daje 5,44 g (78%) ciljanog jedinjenja, kao bistru, bezbojnu staklastu penu.<1>H NMR (300 MHz, CdCI3) 8 0,00-0,04 (m, 9H), 0,92-1,03 (m, 2H), 3,38 (t, J=6,88 Hz, 2H), 3,80-3,90 (m, 2H), 3,99 (t, J=6,88 Hz, 2H), 5,11 (s, 2H), 5,40 (s, 2H), 6,62 (d, J=3,20 Hz, 1H), 6,98 (t, J=8,67 Hz, 2H), 7,06-7,13 (d, J=3,20 Hz, 1H), 8,78 (s, 1H).

Primer S

7-( 4- fluorobenzil)- 1, 7- dihidropirano[ 3, 4-/) jpirolo[ 3, 2- o1piridin- 4( 2/-/)- on

Suspenzija/rastvor 7-(4-fluorobenzil)pirano[3,4-6]pirolo[3,2-d]piridin-4-(7/-/)-ona (17,90 g, 60,82 mmol) u THF/MeOH/H20 (1 L, 85:14:1) produvava se 15 min sa azotom, u Parr-ovom sudu za hidrogenovanje. U ovaj rastvor pod azotom se doda 5% Pd/Al203(1,79 g, 10 mas%), pa se smeša hidrogenuje 18 h pod pritiskom vodonika od 2,4 bar. Analize HPLC i HPLC-MS ukazuju na završetak reakcije, zatim se smeša produva azotom, filtrira kroz sloj Celite-a (ovlaženog sa CH2CI2/MeOH 95:5), a Parr-ov sud se ispere sa CH2CI2/MeOH (750 mL, 95:5). Kombinovani filtrati se koncentrišu pod vakuumom, dajući 19,08 g sirovog proizvoda, u obliku žućkaste pene.<1>H NMR sirovog materijala ukazuje na odnos oko 85:15 željenog zasićenog laktona prema redukovanom materijalu otvorenog prstena. Ovaj sirovi materijal se prečisti hromatografijom Biotage, u 3 porcije (4 g, 65+M gradijent kolone CH2CI2/MeOH 99:1 do 95:5, frakcije od 120 mL). Frakcije 24-27 daju 7-(4-fluorobenzil)-dihidropirano[3,4-o]pirolo[3,2-d]piridin-4(2H)-on, kao bistro, bezbojno ulje, koje se zaseje sa zasićenim laktonom prilikom rekristalizacije iz smeše etar/CH2CI2, dajući ciljano jedinjenje kao bele pločice. Ponovi se prečišćavanje 4 g (65+M gradijent u koloni CH2CI2/MeOH 99:1 do 99:5, frakcije od 120 mL), pri čemu frakcije 25-27 daju željeni lakton kao bistro, bezbojno ulje, koje se zaseje sa zasićenim laktonom prilikom rekristalizacije iz smeše etar/CH2CI2, dajući ciljano jedinjenje kao bele pločice. Preostalih 11 g sirovog proizvoda se prečisti hromatografijom Biotage (65+M, gradijent kolone CH2CI2/MelH 99:1 do 99:5, frakcije od 120 mL), pri čemu frakcije 25-28 daju željeni lakton kao bistro, bezbojno ulje, koje se zaseje sa zasićenim laktonom prilikom rekristalizacije iz smeše etar/CH2CI2, dajući ciljano jedinjenje kao bele pločice. Kombinovani materijal se rekristališe iz smeše etar/CH2CI2, dajući 13,7 g (76%) željenog zasićenog laktona, kao belu kristalnu supstancu. Iz kombinovanog matičnog luga izoluje se još 0,44 g, što daje ukupno 14,14 g (78%) 7-(4-fluorobenzil)-dihidropirano[3,4-o]pirolo[3,2-d]piridin-4(2H)-ona.<1>H NMR (300 MHz, CDCI3) 8 3,33 (t, J=6,12 Hz, 2H), 4,64 (t,J=Q, MHz, 2H), 5,45 (s, 2H), 6,68 (d, J=3,01 Hz, 1H), 6,98-7,06 (m, 2H), 7,10-7,17 (m, 2H), 7,39 (d, J=3,01 Hz, 1H), 8,79 (s, 1H).

Primer T

1-( 4- fluorobenzil)- 4-( 2- hidroksietil)- A/-(( 2-( trimetilsilil) etoksi) metioksi)- 1H-pirolor2, 3- c1piridin- 5- karboksamid

U balon od 250 mL (1N RB) dodaju se 7-(4-fluorobenzil)-1,7-dihidropirano[3,4-6]pirolo[3,2-d]piridin-4(2H)-on (2,96 g, 10,0 mmol) i H2NOSEM (3,56 g, 20,0 mmol). Smeša se stavi pod azot, rastvori u anhidrovanom THF (100 mL), pa se u jednoj porciji doda LiHMDS (3,35 g, 20,0 mmol). Smeša se ostavi da se meša na sobnoj temperaturi, uz praćenje sa HPLC-MS. Posle 2 h HPLC-MS pokazuje da je reakcija razumno završena, a čini je oko 60% otvorenog prstena, 30% SM i 10% proizvoda hidrolize. U 36 satu sav polazni materijal se utroši (LCMS), a smatra se da se smeša sastoji od oko 90:10 otvoreni prsten/eliminisani materijal. Smeša se prespe u etar (1,0 L) i zasićeni NH4CI u vodi (0,75 L). Odvoji se organska faza, opere rastvorom soli (0,1 L), osuši (Na2S04) i koncentriše pod vakuumom, dajući sirovi proizvod kao svetložuto ulje. Ovaj sirovi materijal se prečisti hromatografijom (Biotage<®>SP-1, 40M, 2% do 12% MeOH/DCM, odbace se 3 zapremine kolone, pa se sakuljaju frakcije od 25 mL), pa se kombinovanjem frakcija 27-42 i koncentrisanjem pod vakuumom dobije 2,80 g (59%)1 -(4-fluorobenzil)-4-(2-hidroksietil)-A/-((2-(trimetilsilil)etoksi)metioksi)-1 H-pirolo[2,3-c]piridin-5-karboksamida, u obliku bele kristalne supstance.<1>H NMR (300 MHz, CDCI3) § 0,01-0,04 (9H), 0,90-1,04 (m, 2H), 3,53-3,65 (m, 2H), 3,83 (dd, J=9,23 i 7,72 Hz, 2H), 4,05 (t, J=5,93 Hz, 3H), 5,02 (s, 2H), 5,37 (s, 2H), 6,69 (d, J=2,45 Hz, 1H), 6,97-7,12 (m, 4H), 7,30 (d, J=3,01 Hz, 1H), 8,41 (s, 1H), 10,44 (s, 1H).

Primer U

3-( 4- fluorobenzil)- 1-(( 3- etoksipropoksi) metil)- 7- hidroksi- 8, 9- dihidro- 3/-/-

pirolof2, 3- clf1, 71nafthiridin- 6( 7H)- on

1. korak: 3-(4-fluorobenzil)-1 -((dimetilamino)metil)-7-((2-(trimetilsilil)etoksi) metoksi)-8,9-dihidro-3H-pirolo[2,3-c][1,7]nafthiridin-6(7H)-on

U 3-(4-fluorobenzil)-7-((2-(trimetilsilil)etoksi)metoksi)-8,9-dihidro-3H-pirolo[2,3-c][1,7]nafthiridin-6(7H)-on (7,82 g, 17,71 mmol) u acetonitrilu (0,3 L), doda se A/,A/-dimetiliminijumhlorid (Fluka, 6,63 g, 70,84 mmol, 4 ekviv.). Ova smeša se

21 h meša na sobnoj temperaturi, kada HPLC-MS pokazuje da je oko 40-45% konverzije u željeno dimetilaminometil jedinjenje obavljeno. Balon se opremi sa kondenzatorom za refluks, pa uroni u uljano kupatilo na 90°C i zagreva pod refluksom i azotom 4 h. Tada HPLC-MS pokaže da je reakcija završena, pa se prekine sa refluksovanjem. Ohlađena reakciona smeša se koncentriše pod vakuumom, a dobijeni polučvrst materijal se raspodeli između EtOAc/DCM (1 L, 95:5) i zasićenog NaHC03u vodi (0,75 L). Odvoji se organska faza, opere rastvorom soli (0,75 L) i osuši (Na2S04). HPLC-MS analiza organske faze i početnog NaHC03pokazuje da je sav ciljani materijal bio prisutan u polaznoj organskoj fazi. Koncentrisanje pod vakuumom daje zatim sirovi dimetilaminometil-supstituisani-SEM-blokirani dihidrotricikl, kao tamnu čvrstu supstancu (7,732 g). Sirova supstanca (1 pik u LC-MS, dalje se prečisti trituriranjem sa vrućom smešom etar/heksani (90:10), dajući 3-(4-fluorobenzil)-1-((dimetilamino)metil)-7-((2-(trimetilsilil)etoksi)metoksi)-8,9-dihidro-3H-pirolo[2,3-c][1,7]nafthiridin-6(7H)-on (6,82 g) kao fine iglice boje slonovače. Filtrat se propusti kroz malu kolonu Biotage (40M, 2-10% MeOH/DCM, preko 19 zapremina kolone, odbace se 3 zapremine kolone, a zatim se sakupljaju frakcije od 50 mL). Frakcija broj 12 (9 zapr. kolone) daje još 0,72 g ciljanog 3-(4-fluorobenzil)-1-((dimetilamino)metil)-7-((2-(trimetilsilil)etoksi)metoksi)-8,9-dihidro-3H-pirolo[2,3-c][1,7]nafthiridin-6(7H)-ona, kao tamnu kristalnu supstancu. Ukupan prinos posle prečišćavanja je 7,54 g (85%).<1>H NMR (300 MHz, CDCI3) 5 0,03-0,07 (9H), 0,98-1,07 (m, 2H), 2,23 (s, 6H), 3,51 (s, 2H), 3,77 (t, J=6,03 Hz, 2H), 3,85-4,00 (m, 4H), 5,15 (d, J=3,07 Hz, 2H), 5,35 (s, 2H), 6,97-7,03 (m, 2H), 7,03-7,17 (m, 3H), 8,74 (s, 1H). 2. korak: 3-(4-fluorobenzil)-1-((3-etoksipropoksi)metil)-7-((2-(trimetilsilil)etoksi) metoksi)-8,9-dihidro-3/-/-pirolo[2,3-c][1,7]nafthiridin-6(7/-/)-on

U sušnici se osuši fiola od 40 mL sa septum-poklopcem, pa se u nju doda 3-(4-fluorobenzil)-1-((dimetilamino)metil)-7-((2-(trimetilsilil)etoksi)metoksi)-8,9-dihidro-3H-pirolo[2,3-c][1,7]nafthiridin-6(7/V)-on (0,450 g, 0,902 mmol), a zatim DCM (10 mL). Pod zaštitom azota ova smeša se meša, pa joj se doda fenilhloroformijat (0,143 g, 0,115 mL, 0,902 mmol). Sve ovo se 1 h meša na sobnoj temperaturi. U mešanu smešu dodaju se DIEPA (0,408 g, 0,55 mL, 3,158 mmol), 3-etoksi-1-propanol (0,235 g, 0,26 mL, 2,256 mmol) i DMF (10 mL). Reakcija se preko noći meša na 50°C. Reakcija se tretira sa MeOH (3 mL) i vodom (65 mL + 10 mL rastvora soli). Ovaj rastvor se ekstrahuje sa DCM (3x70 mL). Organska faza se opere zasićenim NaHC03(30 mL) i rastvorom soli (50 mL). Organska faza se osuši iznad Na2S04, koncentriše pod vakuumom i prečisti fleš hromatografijom na Biotage SP1 (postupak: TLC metoda 5% MeOH/DCM, kolona: 40+S). Kombinuju se čiste frakcije, pa koncenrišu pod vakuumom, dajući bistro, bezbojno ulje.

3. korak: 3-(4-fluorobenzil)-1-((3-etoksipropoksi)metil)-7-hidroksi-8,9-dihidro-3/-/- pirolo[2,3-c][1,7]nafthiridin-6(7/-/)-on

U mešani rastvor 3-(4-fluorobenzil)-1-((3-etoksipropoksi)metil)-7-((2-(trimetilsilil)etoksi)metoksi)-8,9-dihidro-3/-/-pirolo[2,3-c][1,7jnafthiridin-6(7/7)-ona

(0,34 g, 0,586 mmol) u MeOH (30 mL), doda se 2M HCI u etru (10 mL). Reakcija se preko noći meša na sobnoj temperaturi. Ispari se rastvarač, a sirova žuta čvrsta supstanca se rekristališe iz IPA (svetložute iglice).

Primer V

1-([( ciklopropilmetil)( metil) aminolmetil}- 3-( 4- fluorobenzil)- 7- hidroksi-3, 7. 8, 9- tetrahidro- 6/-/- pirolof2, 3- c1- 1, 7- nafthiridin- 6- on

1. korak: 1-{[(ciklopropilmetil)(metil)amino]metil}-3-(4-fluorobenzil)-7-{[2-(trimetilsilil)etoksi]metoksi}-3,7,8,9-tetrahidro-6/-/-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on

U rastvor 1-[(dimetilamino)metil]-3-(4-fluorobenzil)7-{[2~(trimetilsilil)etoksi] metoksi}-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-natfhiridin-6(7H)-ona (0,50 g, 1,0 mmol) u dihlorometanu (10 mL) doda se na sobnoj temperaturi fenilhloroformijat (0,126 mL, 1,0 mmol). Posle 10 min mešanja na sobnoj temperaturi ovaj rastvor se doda u rastvor (ciklopropilmetil)metilamin hidrohlorida (0,244 g, 2,0 mmol) i diizopropiletilamina (0,70 mL, 4,0 mmol), na sobnoj temperaturi. Posle još 5 h mešanja na sobnoj temperaturi, smeša se tretira sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum-bikarbonata, pa dva puta ekstrahuje dihlorometanom. Posle sušenja iznad natrijum-sulfata, organski sloj se koncentriše, a ostatak prečisti hromatografijom sa reversnom fazom, dajući beli prah (prinos 37%).

2. korak: 1 -{[(ciklopropilmetil)(metil)amino]metil}-3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-

3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on

Rastvor 1-{[(ciklopropilmetil)(metil)amino]metil}-3-(4-fluoroben (trimetilsilil)etoksi]metoksi}-3J

ona (0,189 g, 0,35 mmol) u metanolu (10 mL) i HCI u metanolu (9,42% u metanolu, 2 mL) meša se 3 dana na sobnoj temperaturi. Koncentriše se, a ostatak se prečisti sa HPLC sa reversnom fazom, dajući naslovljeno jedinjenje kao prah (prinos 35%).

Primer W

3-( 4- fluorobenzil)- 7- hidroksi- 1-( hidroksimetil)- 3, 7, 8, 9- tetrahidro- 6H-pirolo[ 2, 3- cl- 1, 7- nafthiridin- 6- on

U rastvor 1{[(dimetilamino)metil]-3-(4-fluorobenzil)-7-{[2-(trimetilsilil)etoksi]

metoksi}-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-ona (100 mg, 0,2 mmol) u anhidrovanom DCM (2 mL) doda se fenilhloroformijat (25 uL, 0,2 mmol). Ova smeša se pod azotom 10 min meša na sobnoj temperaturi. HPLC-MS analiza služi za ocenu završetka reakcije. Zatim se doda 5 kapi vode. Posle 20 min mešanja na sobnoj temperaturi, reakcija je završena, a isparljivi sastojci se uklone pod vakuumom. Ostatak se rastvori u 1,5% HCI u MeOH (2 mL), pa se 18 h meša na sobnoj temperaturi. HPLC-MS analiza služi za ocenu završetka reakcije. Ciljani proizvod se prečisti sa prep-HPLC, dajući 34,8 mg (prinos 49%) 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-1-(hidroksimetil)-3,7,8,9-tetrahidro-6/-/-

pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-ona, kao belu čvrstu supstancu. LC-MS (APCI, M+H<+>): 342,2. HPLC: čistoća >95%.<1>H NMR (300 MHz, MeOH) 5 8,69 (s, 1H), 7,65 (s, 1H), 7,22-7,31 (m, 2H), 7,04 (t, 2H), 5,50 (s, 2H), 4,60 (s, 2H), 3,95 (t, 2H), 3,70 (t, 2H).

Primer X

3-( 4- fluorobenzil)- 7- hidroksi- 1-( pirolidin- 1- ilmetil)- 3, 7, 8, 9- tetrahidro- 6H-pirolof2, 3- c1- 1, 7- nafthiridin- 6- on

1. korak: 1-[(dimetilamino)metil]-3-(4-fluorobenzil)-7-(tetrahidro-2/-/-piran-iloksi)-3,7,8,9-tetrahidro-6/-/-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on

U rastvor 3-(4-fluorobenzil)-7-(tetrahidro-2H-piran-2-iloksi)-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-ona (425 mg, 1,08 mmol) u anhidrovanom acetonitrilu (70 mL) doda se A/,A/-dimetilmetileniminijumhlorid (201,1 mg, 2,15 mmol). Ova smeša se pod azotom meša 4 h. HPLC-MS analiza služi za ocenu završetka reakcije. Ciljani proizvod se prečisti sa prep-HPLC, dajući 147 mg (prinos 30%) 1 -[(dimetilamino)metil]-3-(4-fluorobenzil)-7-(tetrahidro-2/-/-piran-iloksi)-3,7,8,9-tetrahidro-6/-/-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-ona, kao belu čvrstu supstancu. LC-MS (APCI, M+H<+>): 453,2. HPLC: čistoća >95%.

2. korak: 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-1-(pirolidin-1-ilmetil)-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on

U rastvor 1-[(dimetilamino)metil]-3-(4-fiuorobenzil)-7-(tetrahidro-2H-piran-2-iloksi)-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-ona (147 mg, 0,323 mmol) u anhidrovanom DCM (3 mL) doda se fenilhloroformijat (41 uL, 0,323 mmol). Ova smeša se pod azotom meša 10 min, na sobnoj tempreraturi. HPLC-MS analiza služi za ocenu završetka reakcije. U isti balon se doda smeša pirolidina (32,1 uL, 0,388 mmol), DIEA (169 pL, 0,969 mmol) i anhidrovanog DMF (1,5 mL), pa se 2 h meša na sobnoj temperaturi. HPLC-MS analiza služi za ocenu završetka reakcije. Isparljivi sastojci se uklone pod vakuumom. Ostatak se rastvori u rastvoru TsOHH20 (77,1 mg, 0,41 mmol) u THF (4 mL) i vodi (2 mL), pa se meša 4 h na 50°C. HPLC-MS analiza služi za ocenu završetka reakcije. Ciljani proizvod se prečisti sa prep-HPLC, dajući 72 mg (prinos 56%) 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-1-(pirolidin-1-ilmetil)-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-ona, kao belu čvrstu supstancu. LC-MS (APCI, M+H<+>): 395,2. HPLC: čistoća >95%.<1>H NMR (300 MHz, MeOH) S 8,60 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 7,19-7,30 (dd, 2H), 7,00 (t, 2H), 5,55 (s, 2H), 4,67 (s, 2H), 3,81 (s, 2H), 3,44 (m, 6H), 2,12 (m, 4H).

Primer Y

3-( 4- fluorobenzil)- 1-( 2- hidroksietil)- 7-(( 2-( trimetilsilil) etoksi) metoksi))- 8, 9- dihidro-3H- pirolo[ 2, 3- cin. 71nafthiridin- 6( 7H)- on

1. korak: 3-(4-fluorobenzil)-1 -bromo-7-((2-(trimetilsilil)etoksi)metoksi)-8,9-dihidro-3H-pirolo[2,3-c][1,7]naflhiridin-6(7H)-on

U rastvor 3-(4-fluorobenzil)-7-((2-(trimetilsilil)etoksi)metoksi)-8,9-dihidro-3H-pirolo[2,3-c][1,7]nafthiridin-6(7/-/)-ona (10,00 g, 22,65 mmol) u anhidrovanom DMF (110 mL) doda se A/-bromosukcinimid (4,43 g, 24,9 mmol), a dobijena smeša se preko noći meša pod azotom, na temperaturi okoline. Reakciona smeša se koncentriše pod vakuumom, a dobijeni ostatak rastvori u dihlorometanu (250 mL), pa organski sloj opere sa 10% rastvorom natrijum-karbonata (3x500 mL), rastvorom soli (1x500 mL), osuši iznad natrij um-sulfata, filtrira i koncentriše pod vakuumom, dajući beličastu čvrstu supstancu kao proizvod (11,5 g, prinos 97%).

2. korak: (Z)-3-(4-fluorobenzil)-1 -(2-etoksivinil)-7-((2-(trimetilsilil)etoksi)metoksi)-8,9-dihidro-3/-/-pirolo[2,3-c][1,7]nafthiridin-6(7H)-on

U rastvor, 3-(4-fluorobenzil)-1 -bromo-7-((2-(trimetilsilil)etoksi)metoksi)-8,9-dihidro-3/-/-pirolo[2,3-c][1,7]nafthiridin-6(7/-/)-ona (0,77 g, 1,48 mmol) u anhidrovanom DMF (8 mL), koji je degasiran argonom, uz mešanje, u zatvorenom sudu od 50 mL, sa poklopcem od Teflona, doda se pTSA-hbO (0,206 g, 0,11 mmol), pa se reakcija 3 h meša na temperaturi okoline. Reakciona smeša se koncentriše pod vakuumom, a dobijeni ostatak rastvori u dihlorometanu (30 mL), opere zasićenim rastvorom natrijum-bikarbonata (3x30 mL) i rastvorom soli, pa organski sloj osuši iznad natrijum-sulfata, filtrira i koncentriše pod vakuumom do sirovog proizvoda (0,335 g, prinos 70%>) koji se koristi bez daljeg prečišćavanja.

4. korak: 3-(4-fluorobenzil)-1 -(2-hidroksietil)-7-((2-(trimetilsilil)etoksi)metoksi)-8,9-dihidro-3H-pirolo[2,3-c][1,7]nafthiridin-6(7/-0-on

Rastvor 2-(-3-(4-fluorobenzil)-6-okso-7-((2-(trimetilsilil)etoksi)metoksi)-6,7,8,9-tetrahidro-3/-/-pirolo[2,3-c][1,7]nafthiridin-1-il)acetaldehida (0,030 g, 0,06 mmol) u anhidrovanom metanolu (0,3 mL), ohladi se na 0°C u kupatilu sa ledom, a zatim se doda natrijum-borohidrid (1,2 mg, 0,03 mmol), i reakcija se prati pomoću LCMS, tako da je završena tokom 1 h. Reakciona smeša se koncentriše pod vakuumom, a dobijeni ostatak rastvori u dihlorometanu (5 mL), opere zasićenim rastvorom natrijum-bikarbonata (3x5 mL) i rastvorom soli, pa osuši iznad natrijum-sulfata, filtrira i koncentrišepod vakuumom, dajući sirovi proizvod kao providno staklo (20 mg, prinos 66%).

Primer Z

etil 2- metil- 1 /-/- pirol- 3- karboksilat

Pod azotom se rastvori vinilacetat (172 g, 2 mol) u suvom ugljentetrahloridu (100 mL), pa se, uz snažno mešanje, tokom 6 h u kapima dodaje brom (102 mL) u suvom ugljentetrahloridu (100 mL), u kupatilu led-voda, a napredovanje reakcije se prati digitalnim termometrom, držeći temperaturu reakcije ispod 10°C. Posle toga, reakciona smeša se meša još 30 min, pa se zatim pod vakuumom ispari ugljentetrahlorid. Sirovi a,p-dibromoetilacetat se pomeša sa etilacetoacetatom (260 g), pa se u kapima dodaje vodeni 10% rastvor amonijum-hidroksida (2 L). Dodavanje se obavlja tako da se temperatura reakcije drži ispod 10°C. Po završetku reakcije, reakciona smeša se još 2 h meša, pa ostavi da preko noći stoji na sobnoj temperaturi. Dekantuje se vodeni sloj, a talog rastvori u dihlorometanu (700 mL). Dihlorometanski sloj se opere vodom (2x500 mL), pa zatim osuši. Glavnina rastvarača (DCM) iz filtrata se ispari pod vakuumom na 50°C, tako da se dobije veoma koncentrovan rastvor. Ovaj rastvor se ohladi na 3°C u frižideru, a željeni proizvod etil 2-metil-1/-/-pirol-3-karboksilat se rekristališe dva puta iz dihlorometana, dajući tamne kristale (149 g, prinos 49%).

Primer AA

etil 2- metil- 1 -( fenilsulfonil)- l /-/- pirol- 3- karboksilat

U mešani rastvor etil 2-metil-1/-/-pirol-3-karboksilata (40,0 g, 261,13 mmol) u suvom THF (1100 mL) na -78°C (smeša suvog leda i acetona), pod azotom, doda se natrijum-hidrid (15,66 g, 60% disperzija u mineralnom ulju, 392 mmol), koji je prethodno tri puta ispran sa heksanima da se ukloni mineralno ulje. U bistar svetlomrki rastvor dodaje se natrjum-hidrid u porcijama, pomoću šprica od 20 mL. Po završetku dodavanja natrijum-hidrida reakciona smeša se 30 min meša na -72°C, pre nego što se ostavi da se zagreje na sobnu temperaturu, gde se meša još 20 min, a zatim ponovo ohladi na -78°C. Doda se benzensulfonilhlorid (35,2 mL, 274 mmol), a reakciona smeša se ostavi da se zagreje na sobnu temperaturu, pa 16 h meša, pre nego što se ukloni rastvarao pod vakuumom. Ostatku se doda zasićeni rastvor NaHC03u vodi, smeša dva puta ekstrahuje etilacetatom, kombinuju se organski slojevi, osuše iznad Na2S04, filtriraju i koncentrišu do male zapremine EtOAc. Dobijeni rastvor se ostavi da stoji nepokriven oko 48 h, dajući kristalni materijal koji se opere hladnim heksanom i osuši pod vakuumom, dajući 43,67 g naslovljenog jedinjenja. Matični lug se koncentriše, pa preko noći hladi u frižideru na <4°C, dajući još jednu žetvu kristala, koji se operu hladnim heksanima, pa se osuše pod vakuumom, dajući još 22,96 g naslovljenog jedinjenja.

Primer AB

etil 2- metil- 1 -( fenilsulfonil)- l H- pirol- 3- karboksilat

Naslovljeno jedinjenje se dobija u skladu sa prilagođenim postupkom izColl. Czech. Comm.,499(1999). U rastvor etil 2-metil-1H-pirol-3-karboksilata (15,2 g, 99,3 mmol) i tetra-n-butilamonijumbromida (3,2 g, 9,9 mmol, 0,1 ekviv.) u toluenu (500 mL) doda se benzensulfonilhlorid (26,4 g, 14,9 mmol, 1,5 ekviv.), a zatim rastvor natrijum-hidroksida (38 g, 0,95 mol, 10 ekviv.) u vodi (50 mL). Ova smeša se snažno meša 45 min. Reakcija se prati pomoću TLC (20% etilacetat u heksanima). Po završetku reakcionoj smeši se doda voda (250 mL), pa se odvoji organski sloj. Vodeni sloj se ekstrahuje sa sledećom porcijom toluena (100 mL). Kombinovane organske faze se osuše iznad natrijum-sulfata, a rastvarač ukloni, dajući proizvod u obliku viskoznog ulja, koje se prečisti propuštanjem kroz sloj silikagela uz eluiranje sa smešom etilacetat/heptani (prvo, 10%, pa 15%). Posle uklanjanja isparljivih sastojaka pod vakuumom, proizvod kristališe iz rastvora, pa se sakupi filtriranjem i opere heptanima, dajući bezbojnu čvrstu supstancu (22,12 g, 76%). Posle stajanja izoluje se druga žetva ovog proizvoda (2,75 g, 10%).

Primer AC

etil 2- metil- 1 -( fenilsulfoniD- 1 /-/- pirol- 3- karboksilat

U rastvor etil 2-metil-1/-/-pirol-3-karboksilata (100 g, 0,65 mol) i tetra-n-butilamonijumbromida (21 g, 65 mmol) u toluenu (3 L), ohlađenom u kupatilu sa ledom, doda se benzensulfonilhlorid (173,5 g, 1 mol), a zatim rastvor natrijum-hidroksida (250 g, 6,25 mol) u vodi (329 mL). Smeša se snažno meša 45 min, koristeći mehaničku mešalicu. Po završetku, reakcionoj smeši se doda voda (1 L), pa odvoji organski sloj. Vodeni sloj se ekstrahuje sa sledećom porcijom toluena (500 mL). Kombinovane organske faze se osuše iznad natrijum-sulfata, a rastvarač ukloni, dajući proizvod kao viskozno ulje, koje se prečisti propuštanjem kroz sloj silikagela, uz eluiranje sa etilacetat/heptanom (prvo, 5%, pa poraste na 15%). Po uklanjanju isparljivih sastojaka pod vakuumom, proizvod kristališe iz rastvora, sakupi se filtriranjem i opere heptanima, dajući bezbojnu čvrstu supstancu (116 g, 61%). Pri stajanju izoluje se druga žetva proizvoda (17,9 g, 9%).

Primer AD

etil 2-( bromometil)- 1 -( fenilsulfonil)- l /-/- pirol- 3- karboksilat

Rastvori se etil 2-metil-1 -(fenilsulfonil)-l H-pirol-3-karboksilat (30 g, 100 mmol) u 400 mL ugljentetrahlorida. Dodaju se /V-bromosukcinimid (27,3 g, 153 mmol) i benzoilperoksid (0,743, mg, 3,07 mmol). Ova suspenzija se 2 h zagreva pod refluksom (100°C, uljano kupatilo), a posle toga reakciona smeša se ostavi da se ohladi na sobnu temperaturu, pa filtrira. Filtrat se koncentriše na rotacionom uparivaču, a ostatak rastvori u EtOAc, pa 2 puta opere sa zasićenim rastvorom NaHC03. Kombinovani vodeni slojevi se ekstrahuju sa još jednom porcijom EtOAc, pa se organski slojevi kombinuju, osuše iznad Na2S04, filtriraju i koncentrišu. Dobijena čvrsta supstanca se istaloži iz rastvora dietiletar/heksani, uz upotrebu sonikacije, pa zatim filtrira i osuši, dajući naslovljeno jedinjenje (36,4 g, 96%).

Primer AE

etil 2-(( A/-( 2- metoksi- 2- oksoetil)- 4- metilfenilsulfonamido) metil)- 1-( fenilsulfonil)-

1 /-/- pirol- 3- karboksilat

Rastvore se etil 2-(bromometil)-1-(fenilsulfonil)-1/-/-pirol-3-karboksilat (30,0 g, 80,6 mmol) i tozilglicin (19,6 g, 80,6 mmol) u DMF (220 mL). U kapima, na temperaturi -20°C, (rashladno kupatilo, izopropanol i suvi led) se dodaje pipetom natrijum-hidrid (6,45 g, 161 mmol, 60% u mineralnom ulju, prethodno 3 puta opran heksanima). Reakciona smeša se meša 2 h na temperaturi od oko -20°C do oko 0°C. Zatim se reakcionoj smeši doda zasićeni rastvor amonijum-hlorida, pa se dobijena smeša 2 puta ekstrahuje etilacetatom. Kombinuju se organski slojevi, osuše iznad Na2S04, filtriraju i koncentrišu. Ova koncentrovana smeša se ostavi da preko noći stoji nepokrivena, dajući naslovljeno jedinjenje u obliku kristala, koji se operu hladnim heksanima i preko noći suše pod vakuumom, dajući 56 g naslovljenog jedinjenja. Matični lug se dalje prečisti na fleš koloni (5% do 60% EtOAc/heksani), dajući još 14,7 g naslovljenog jedinjenja.

Primer AF

etil 2-(( A/-( 2- metoksi- 2- oksoetil)- 4- metilfenilsulfonamido) metil)- 1-( fenilsulfonil)-1H- pirol- 3- karboksilat

Naslovljeno jedinjenje se dobija korišćenjem prilagođene procedure izBioorg. Med. Chem., V\_,1451 (2003). Rastvor A/-[(4-metilfenil)sulfonil]glicinata (55,2 g, 0,23 mol), kalijum-karbonata (31,5 g, 0,23 mol) i kalijum-jodida (1,85 g, 0,011 mol) u acetonu (600 mL) meša se 30 min na 60°C. Ovoj smeši se doda etil 2-(bromometil)-1-(fenilsulfonil)-1H-pirol-3-karboksilat (75 g, 0,2 mol), pa se reakcija 16 h meša na 60°C. Reakcija se ostavi da se ohladi, filtrira i talog ispere acetonom (100 mL). Rastvarač se ukloni pod vakuumom, a dobijeni ostatak se rastvori u metilenhloridu (500 mL). Organski sloj se opere vodom (3x250 mL) i osuši iznad natrijum-sulfata. Rastvarači se uklone pod vakuumom, a ostatku se doda etilacetat (150 mL). Zaseje se kristalom dobijenim iz prethodne reakcije, proizvodom koji je prečišćen fleš hromatografijom na silikagelu (eluiranje sa od 20% do 50%o etilacetata u heptanima), pa se naslovljeno jedinjenje izoluje kao bezbojna čvrsta supstanca, koja se ispere dietiletrom i osuši (70,3 g, 65%). Druga žetva naslovljenog jedinjenja se izoluje iz filtrata, dozvoljavanjem istom da odstoji na sobnoj temperaturi.

Primer AG

metil 4- hidroksi- 1-( fenilsulfonil)- 1H- pirolo[ 2, 3- c1piiridin- 5- karboksilat

U mešani rastvor etil 2-((A/-(2-metoksi-2-oksoetil)-4-metilfenilsulfonamido)metil)-1-(fenilsulfonil)-1W-pirol-3-karboksilata (31,84 g, 59,56 mmol) u THF (400 mL), u balonu okruglog dna od 1 L, lagano se, tokom 2 h, dodaje LiHMDS (178 mL, 178 mmol, 1,0 M u THF), iz graduisanog levka za ukapavanje, na -78°C (suvi led i aceton). Dobijena smeša se još 1 h meša na -78°C, a posle tog vremena reakcija se tretira amonijum-hloridom u vodi (400 mL). Dobijena smeša se ekstrahuje etilacetatom (2x600 mL), kombinovani organski slojevi operu vodom

(2x400 mL), a kombinovani vodeni slojevi ekstrahuju sa još etilacetata (2x400 mL). Kombinuju se dobijeni organski slojevi, operu zasićenim rastvorom natrijum-hlorida, osuše iznad Na2S04, filtriraju, pa rastvarači uklanjaju na rotacionom uparivaču sve dok se ne pojavi kristalni materijal. Preostali rastvor se zatim ohladi na sobnu temperaturu i drži u frižideru preko noći, dajući naslovljeno jedinjenje kao kristalni materijal. Dodatne žetve kristala se dobijaju ostavljajući filtrat da stoji nepokriven na sobnoj temperaturi. Dodatni materijali se dobijaju prečišćavanjem matičnog luga pomoću fleš kolone ISCO.

Primer AH

metil 4- hidroksi- 1 -( fenilsulfonil)- l H- pirolo[ 2, 3- c1piridin- 5- karboksilat

Ohladi se trogrli balon od 500 mL na -78°C u kupatilu suvi led/aceton. U ovaj balon se zatim stavi substrat (16 g, 30 mmol) i anhidrovani THF (200 mL). Nastala suspenzija se meša, pa se tokom 30 min, kroz levak za ukapavanje, u kapima dodaje rastvor LiHMDS (Aldrich, 1,0M u THF, 89 mL, 89 mmol). Posle 90 min mešanja na -78°C smeša se prespe u zasićeni rastvor amonijum-hlorida (200mL). Vodeni sloj se ekstrahuje etilacetatom (3x250 mL), vodeni slojevi kombinuju i osuše iznad natrijum-sulfata. Posle filtriranja smanjuje se zapremina rastvora pod vakuumom, dok se ne pojavi talog. Preostala smeša se zatim 30 min hladi, a nastali talog filtrira. Dobijena čvrsta supstanca se suspenduje u hloroformu, pa se suspenzija zatim zagreje, meša 10 min i onda filtrira. Dobijeni talog se osuši pod vakuumom, dajući naslovljeno jedinjenje kao bezbojnu čvrstu supstancu (5 g, 50%).

Primer Al

metil 1 -( fenilsulfonil)- 4-( trifluorometilsulfoniloksi)- 1H -

pirolo[ 2, 3- clpiridin- 5- karboksilat

Rastvor fenola (20,00 g, 60,02 mmol, 1 ekviv.), trietilamina (42,00 mL, 300,0 mmol, 5,0 ekviv.) i anhidrovanog dihlorometana (400 mL) ohladi se na -5°C u kupatilu smeše leda i rastvora soli. Ovoj smeši se u kapima dodaje anhidrid trifluorometansulfonske kiseline (25,40 mL, 150,4 mmol, 2,50 ekviv.), ali takvom brzinom da se temperatura smeše održava ispod 0°C. Po završetku dodavanja reakciona smeša se meša još 30 min. Doda se rastvor natrijum-bikarbonata (600 mL), a smeša ekstrahuje dihlorometanom (3x400 mL). Organski slojevi se operu rastvorom soli, osuše iznad natrijum-sulfata, filtriraju i koncentrišu pod vakuumom, dajući sirovi proizvod koji se dalje prečišćava hromatografijom na koloni (silikagel, 3:1, heksanLEtOAc). LCMS (APCI, M+H<+>): 465,2. 1H NMR (300 MHz, hloroform-D) 8 9,37 (d, J=0,75 Hz, 1H), 7,94-8,01 (m, 2H), 7,86 (d, J=3,58 Hz, 1H), 7,63-7,74 (m, 1H), 7,50-7,61 (m, 2H), 6,89 (d, J=3,77 Hz, 1H), 4,04 (s, 3H).

Primer AJ

metil 4- f( Z)- 2- etoksivinil1- 1 -( fenilsulfonil)- l /-/- pirolof2, 3- clpiridin- 5- karboksilat

U rastvor triflata (1,00 g, 2,15 mmol, 1,00 ekviv.) u anhidrovanom 1,4-dioksanu (20 mL, degasiran sa argonom) u zatvorenom sudu sa poklopcem od Teflona, dodaju se LiCI (228 mg, 5,38 mmol, 2,50 ekviv.), etoksivinil tri-t-butilstanan (1,09 mL, 3,23 mmol, 1,50 ekviv.) i PdCI2 (0,151 g, 0,215 mmol, 0,10 ekviv.). Dobijena smeša se 1 h zagreva na 80°C, a zatim ostavi da se ohladi. Doda se rastvor natrijum-bikarbonata, pa se smeša ekstrahuje etilacetatom, dajući smešu bezbojnog i crnog ulja. Ovi ostaci se rastvore u dihlorometanu i prečiste fleš hromatografijom (silikagel, 2:1 heksani:EtOAc do 1:1 heksani:EtOAc), dajući naslovljeno jedinjenje kao bezbojno staklo (0,630 g, 76% prinos). LCMS (APCI, M+H): 387,2.<1>H NMR (300 MHz, hloroform.D) 5 9,21 (s, 1H), 7,89-7,99 (m, 2H), 7,70 (d, J=3,58 Hz, 1H), 7,54-7,63 (m, 1H), 7,41-7,53 (m, 2H), 6,78 (dd, J=3,58 i 0,57 Hz, 1H), 6,39 (d, J=6,97 Hz, 1H), 5,93 (d, J=6,97 Hz, 1H), 3,96 (s, 3H), 3,91 (q, J=7,03 Hz, 2H), 1,22 (t, J=7,06 Hz, 2H).

Primer AK

( E)- metil 4-( 2- butoksivinil)- 1 -( fenilsulfoniD- 1 /-/- pirolof2, 3- c1piridin- 5- karboksilat

U trogrli balon okruglog dna, opemljen magnetnom mešalicom, umetkom za suvi led i 2 gumena septuma, pod azotom se dodaje metil 1-(fenilsulfonil)-4-(trifluorometilsulfoniloksi)-1/-/-pirolo[2,3-c]piridin-5-karboksilat (2,76 g, 5,95 mmol, 1 ekviv.), Pd2(dba)3(0,57 g, 1,368 mmol, 0,03 rkviv.), (t-Bu)3PHBF4(0,4 g, 1,368 mmol, 0,03 ekviv.), LiCI (1,53 g, 35,68 mmol, 3 ekviv.) i anhidrovani 1,4-dioksan (60 mL). Uz mešanje dodaju se n-butil viniletar (9,24 mL, 71,38 mmol, 12 ekviv.) i cikloheksilmetilamin (2,88 mL, 13,45 mmol, 2,26 ekviv.). Napuni se umetak za suvi led sa suvim ledom i IPA, pa se reakcija tokom 90 min zagreva u uljanom kupatilu dok spoljašnja temperatura ne dostigne 70°C, pa se zatim ostavi da se ohladi na sobnu temperaturu. Smeša se filtrira kroz Celite i ispira sa EtOAc sve dok se više ne opaža boja na izlasku iz filtra. Rastvarači se ispare pod sniženim pritiskom sve dok ne preostane viskozno ulje i dok više nema 1,4-dioksana. Dobijeno ulje se rastvori u velikoj porciji EtOAc (kao što je oko 1,1 L EtOAc za reakciju od 50 g), uz sonikaciju. Dobijeni rastvor snažno se meša 3 h, a zatim se talog filtrira i dobijeni filtrat koncentriše, dajući ulje. Ovo ulje se dalje prečisti hromatografijom na silikagelu, uz eluiranje sa etilacetat/heksanom (1/1), dajući naslovljeno jedinjenje kao čvrstu supstancu (2,1 g, prinos 85%).

Primer AL

( E)- metil 4-( 2- butoksivinil)- 1/-/- pirolof2, 3- c1piridin- 5- karboksilat

U mešani rastvor (E)-metil 4-(2-butoksivinil)-1-(fenilsulfonil)-1/-/-pirolo[2,3-c]piridin-5-karboksilata (1,86 g, 4,5 mmol) u MeOH doda se natrijum-metoksid (9 mL, 4,5 mmol, 0,5 M u MeOH), a dobijeni rastvor se oko 1 h meša na sobnoj temperaturi. Pomoću LC-MS proverava se završetak reakcije. Reakcija se tretira sa zasićenim NH4CI sve dok rastvor ne postane neutralan. Kombinovani organski slojevi se osuše i koncentrišu, a sirovi proizvod prečisti hromatografijom, sa 5% MeOH/DCM, dajući naslovljeno jedinjenje kao čvstu supstancu (1,03 g, prinos 84%).

Primer AM

4-( 2-(( 2-( trimetilsilil) etoksi) metoksiimino) etil)- 1/- y- pirolor2, 3- clpiridin- 5- karboksilat

U (E)-metil 4-(2-butoksivinil)-1H-pirolo[2,3-c]piridin-5-karboksilat (1,03 g, 3,76 mmol) u anhidrovanom 1,4-dioksanu (35 mL), dodaju se redom, H2NOSEM (1,7 mL, 8,75 mmol, đ=0,83, 2,30 ekviv.) i p-TsOH-H20 (2,79 g, 14,66 mmol, 3,90 ekviv.). Reakciona smeša se 48 h meša na sobnoj temperaturi. Smeša se prelije u EtOAc (50 mL) i zasićeni NaHC03u vodi (50 mL). Odvoji se organska faza, a vodeni sloj ekstrahuje sa EtOAc (50 mL), pa se kombinovane organske faze osuše (Na2S04), filtriraju i koncentrišu pod vakuumom, dajući sirovi proizvod (2,64 g, prinos >100%), kao čvrstu supstancu koja se koristi u narednom koraku bez daljeg prečišćavanja.

Primer AN

7-(( 2-( trimetilsilil) etoksi) metoksi)- 8, 9- dihidro- 3/-/- pirolor2, 3- cin, 71nafthiridin-6( 7H)- on

U metil 4-(2-((2-(trimetilsilil)etoksi)metoksiimino)etil)-1 H-pirolo[2,3-c]piridin-5-karboksilat (2,59 g, 7,13 mmol) u glacijalnoj sirćetnoj kiselini (25 mL) dodaje se u dve porcije natrijum-cijanoborohidrid (0,896 g, 14,26 mmol, 2 ekviv.), pa se dobijena reakciona smeša 3 h meša na sobnoj temperaturi. Ukloni se sirćetna kiselina, a ostatak rastvori u EtOAc, pa ekstrahuje sa NaHC03. Vodeni sloj se ekstrahuje sa EtOAc, a kombinovani organski slojevi se osuše i koncentrišu. Sirovi ostatak se tretira sa 1,0 L smeše 95:5 etar/DCM i 0,8 L zasićenog NaHC03u vodi. Ova smeša se prebaci u levak za odvajanje od 2 L, promućka, pa odvoji organska faza, a vodena faza se ekstrahuje sa još 0,5 L DCM. Kombinovane organske faze se osuše (Na2S04), filtriraju i ostatak osuši pod vakuumom. Sirovi proizvod se dalje prečisti hromatografijom (100% EtOAc, zatim 20% MeOH/DCM, kao eluent), dajući naslovljeno jedinjenje kao čvrstu supstancu (0,95 g, prinos 76%, iz dva koraka).

Primer AO

3-( 4- fluorobenzil)- 7- hidroksi- 1- f( 4- metoksipiperidin- 1- il) metil]- 3, 7, 8, 9-tetrahidro- 6/-/- pirolo[ 2, 3- c1- 1l7- nafthiridin- 6- on

1.korak: 3-(4-fluorobenzil)-1-((dimetilamino)metil)-7-((2-(trimetilsilil)etoksi) metoksi)-8,9-dihidro-3/-/-pirolo[2,3-c][1,7]nafthiridin-6(7H)

Rastvor 3-(4-fluorobenzil)-1-((dimetilamino)metil)-7-((2-(trimetilsiiil)etoksi) metoksi)-8,9-dihidro-3/-/-pirolo[2,3-c][1,7]nafthiridin-6(7/-/)-ona (dobijen na način sličan onom koji je opisan u Primeru R, 15,4 g, 34,9 mmol) iN, N-dimetileniminijumhlorid (9,80 g, 105 mmol) u acetonitrilu (100 mL), zagreva se 3 h pod refluksom. Dobijena smeša se zatim koncentriše pod sniženim pritiskom, tretira zasićenim rastvorom natrijum-bikarbonata u vodi (400 mL), ekstrahuje dihlorometanom (3x400 mL), osuši iznad natrijum-sulfata, koncentriše i suši pod vakuumom, dajući naslovljeno jedinjenje kao sirovi proizvod (15,6 g), koje se koristi bez daljeg prečišćavanja. LCMS (APCI, M+H<+>): 499,4.

2. korak: 3-(4-fluorobenzil)-1-((4-metoksipiperidin-1-il)metil)-7-((2-(trimetilsilil) etoksi)metoksi)-8,9-dihidro-3/-/-pirolo[2,3-c][1,7]nafthiridin-6(7H)-on

U mešani rastvor 3-(4-fluorobenzil)-1-((dimetilamino)metil)-7-((2-(trimetilsilil) etoksi)metoksi)-8,9-dihidro-3H-pirolo[2,3-c][1,7]nafthiridina-6(7H) (15,6 g, 31,3 mmol) u dihlorometanu (80 mL), doda se benzilhloroformijat (4,84 mL, 34,4 mmol), na temperaturi 23°C. Posle pola sata dodaju se 4-metoksipiperidin (5,0 g, 43 mmol) i diizopropiletilamin (15 mL, 86 mmol), pa se dobijena smeša 1 H meša na 23°C. Smeša se zatim tretira zasićenim rastvorom natrijum-bikarbonata u vodi (400 mL), ekstrahuje dihlorometanom (2x400 mL), osuši iznad natrijum-sulfata, koncentriše pod sniženim pritiskom i prečisti hromatografijom (MeOH u dihlorometanu od 0% do 10%), dajući 11,3 g žute čvrste supstance. Naslovljeno jedinjenje se zatim izoluje rastvaranjem ove žute supstance u smeši dihlorometana i dietiletra, posle čega sledi dodavanje heksana, što daje beli prah (5,8 g, prinos 63%). LCMS (APCI, M+H+):569,4. 1H NMR(300 MHz, DMSO-d6) 5 0,03 (s, 9H), 0,93 (t, J=8,5 Hz, 2H), 1,39 (m, 2H), 1,77 (m, 2H), 2,09 (m, 2H), 2,64 (m, 2H), 3,21 (m, 4H), 3,55 (s, 2H), 3,68 (t, J=6,6 Hz, 2H), 3,84 (m, 4H), 5,00 (s, 2H), 5,52 (s, 2H), 7,16 (t, J=7,0 Hz, 2H), 7,30 (m, 2H), 7,69 (s, 1H), 8,83 (s, 1H).

3. korak: 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-1-[(4-metoksipiperidin-1-il)metil]-3,7,8,9-tetrahidro-6/-/-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on

U rastvor 3-(4-fluorobenzil)-1-((4-metoksipiperidin-1-il)metil)-7-((2-(trimetilsilil) etoksi)metoksi)-8,9-dihidro-3H-pirolo[2,3-c][1,7]nafthiridin-6(7/-0-ona (5,8 g, 10,0 mmol) u MeOH (20 mL) doda se rastvor hlorovodonične kiseline (4M u dioksanu, 15 mL, 60 mmol), na temperaturi 23°C. Dobijena smeša se ostavi da se oko 16 h meša na 23°C. Smeša se zatim koncentriše pod sniženim pritiskom, tretira zasićenim rastvorom natrijum-bikarbonata u vodi (200 mL), pa ekstrahuje sa DCM (2x200 mL). Kombinovani organski slojevi se osuše iznad natrijum-sulfata, filtriraju i koncentrišu. Naslovljeno jedinjenje se zatim rekristališe iz smeše MeOH, dihlorometana i EtOAc. Dobijeni kristali se filtriraju i osuše pod vakuumom, dajući naslovljeno jedinjenje (3,66 g, 82%o). LCMS (APCI, M+H<+>): 439,2.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) 5 1,23-1,45 (m, 2H), 1,70-1,87 (m, 2H), 2,02-2,19 (m, 2H), 2,60-2,75 (m, 2H), 3,10-3,25 (m, 4H), 3,55 (s, 2H), 3,65 (t, 2H), 3,77 (t, 2H), 5,51 (s, 2H), 7,08-7,23 (m, 2H), 7,25-7,37 (m, 2H), 7,69 (s, 1H), 8,79 (s, 1H), 9,68 (s, 1H).

Primer AP

3-( 4- fluorobenzil)- 7- hidroksi- 1-( 3- morfolin- 4- ilpropil)- 3, 7, 8, 9- tetrahidro- 6H-pirolof2, 3- c1- 1, 7- nafthiridin- 6- on

1. korak: 3-(4-fluorobenzil)-1-(3-mofrolin-4-ilprop-1-in-1-il)-7-{[2-(trimetilsilil) etoksi]metoksi}-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on

U anhidrovani DMF (100 mL, 5 min produvavan azotom) dodaju se redom, 3-(4-fluorobenzil)-1-jodo-7-{[2-(trimetilsilil)etoksi]metoksi}-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on (9,97 g, 17,6 mmol), 4-prop-2-in-1-ilmorfolin (2,20 g, 17,6 mmol, 1 ekviv.), trietilamin (9,8 mL, 70,3 mmol, 4 ekviv.), PdCI2(PPh3)2(617 mg, 0,879 mmol, 0,05 ekviv.) i Cul-SMe2(335 mg, 1,76 mmol, 0,1 ekviv.). Posle oko 24 h mešanja na sobnoj temperaturi ukloni se DMF pod vakuumom (oko 2,8 mbar). Dobijeno tamno ulje se rastvori u etilacetatu (200 mL), pa opere vodom (2x150 mL) i rastvorom soli (150 mL). Dobijeni rastvor u etilacetatu se oko 10 min meša sa silikagelom funkcionalizovanim sa Si-tiolom (30 g), pa se osuši iznad natrijum-sulfata, filtrira i koncentriše, dajući sirovi proizvod kao svetložuto ulje (10,7 g). Ovaj sirovi materijal se prečisti hromatografijom na koloni sa silikagelom (750 g, 230-400 meš, pakovanje sa CH2CI2, uz eluiranje sa CH2CI2-MeOH 98:2 do 97:3,VA/,4,0 L, frakcije od 200 mL), koristeći fleš tehniku. Kombinuju se frakcije, dajući 7,708 g (78%) 3-(4-fluorobenzil)-1-(3-morfolin-4-ilpro-1-in-1-il)-7-{[2-(trimetilsilil)etoksi]metoksi}-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-ona, kao svetložutu čvrstu supstancu. 1H NMR (300 MHz, CDCI3) 8 0,05 (s, 8H), 1,02 (s, 2H), 2,58 (s, 1H), 2,64 (s, 4H), 3,54 (s, 2H), 3,77 (s, 7H), 3,88 (s, 2H), 3,99 (s, 2H), 5,15 (s, 2H), 5,36 (s, 2H), 7,04 (s, 2H), 7,14 (s, 2H), 7,43 (s, 1H), 8,77 (s, 1H).

2. korak: 3-(4-fluorobenzil)-1-(3-morfolin-4-ilpropil)-7-{[2-(trimetilsilil)etoksi] metoksi}-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on

Rastvor 3-(4-fluorobenzil)-1-(3-morfolin-4-ilprop-1-in-1-il)-7-{[2-(trimetilsilil)

etoksi]metoksi}-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-ona (7,708 g, 13,65 mmol) u metanolu (200 mL) produvava se 5 min sa azotom, a zatim se doda 5% Pd(OH)2na ugljeniku (0,908 g), pa se smeša stavi pod balon od vodonika i ostavi da se meša 16 h. Dobijena smeša se zatim 5 min produvava azotom da bi se uklonio vodonik, filtrira kroz sloj Celite-a, a filter-kolač se opere metanolom (200 mL). Kombinovani filtrati se koncentrišu pod vakuumom, dajući sirovi proizvod u obliku pene. Ovaj sirovi proizvod se prečisti hromatografijom na koloni sa silikagelom (750 g, 230-400 meš, pakovanje sa CH2CI2, eluiranje sa CH2CI2-MeOH od 97:3 do 90:10,V/V,4,0 L, 9,0 L, frakcije od 200 mL), koristeći fleš tehniku. Kombinuju se frakcije, dajući 4,68 g (60%) naslovljenog jedinjenja kao penu.<1>H NMR (300 MHz, CDCI3) 5 0,05 (s, 9H), 0,98-1,06 (m, 2H), 1,80-1,91 (m, 2H), 2,37-2,47 (m, 6H), 2,84-2,93 (m, 2H), 3,60 (t, J=6,69 Hz, 2H), 3,68-3,75 (m, 4H), 3,84-3,94 (m, 2H), 3,98 (t, J-6,78 Hz, 2H), 5,16 (s, 2H), 5,33 (s, 2H), 6,97-7,13 (m, 5H), 8,75 (s, 1H).

3. korak: 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-1 -(3-morfolin-4-ilpropil)-3,7,8,9-tetrahidro-6/-/-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on

U rastvor 3-(4-fluorobenzil)-1 -(3-morfolin-4-ilpropil)-7-{[2-(trimetilsilil)etoksi] metoksi}-3,7,8,9-tetrahidro-6/-/-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-ona (4,68 g, 8,23 mmol) u metanolu (100 mL), pod azotom, doda se 4M HCI u dioksanu (20,6 mL, 82,3 mmol, 10 ekviv.). Posle oko 48 h mešanja na sobnoj temperaturi metanol se ukloni pod vakuumom, a dobijena čvrsta supstanca se azeotropira sa etanolom (2x80 mL), da bi se uklonio zaostali metanol. Dobijena supstanca se zatim rastvori u vrućem etanolu (150 mL), rastvor ostavi da se ohladi na sobnu temperaturu, što dovodi do stvaranja belog taloga. Nakon toga, smeša se oko 3 h hladi na oko 4°C. Nastali talog se sakupi filtriranjem, opere hladnim etanolom i osuši pod vakuumom, dajući naslovljeno jedinjenje kao bi-HCI so (3,596 g, prinos 85%). Ova so se neutrališe rastvorom natrijum-bikarbonata, pa se slobodna baza ekstrahuje dihlorometanom (4x80 mL). Kombinovane organske faze se operu vodom (80 mL) i rastvorom soli (80 mL), osuše (Na2S04) i koncentrišu pod vakuumom, dajući naslovljeno jedinjenje kao čvrstu supstancu. Ova supstanca se azeotropira sa tetrahidrofuranom (2x80 mL) i dietiletrom (2x80 mL), dajući penu. Ova pena se meša sa dietiletrom (100 mL), filtrira i opere dietiletrom (500 mL), pa suši pod vakuumom na 75°C, dajući nsalovljeno jedinjenje kao prah (2,65 g, 72%).<1>H NMR (300 MHz, CDCI3) 8 1,86 (m, 2H), 2,38-2,52 (m, 6H), 2,88 (t, J=7,63 Hz, 2H), 3,60 (t, J=6,97 Hz, 2H), 3,72 (m, 4H), 3,99 (t, J=6,97 Hz, 2H), 5,34 (s, 2H), 6,97-7,13 (m, 5H), 8,72 (s, 1H).

Primer AQ

3-( 4- fluorobenzil)- 7- hidroksi- 1-( pipehdin- 1- ilmetil)- 3, 7, 8, 9- tetrahidro- 6/-/-

pirolor2, 3- c]- 1, 7- nafthiridin- 6- on

1. korak: 3-(4-fluorobenzil)-1 -(piperidin-1 -ilmetil)-7-((2-(trimetilsilil)etoksi) metoksi)-8,9-dihidro-3H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6(7H)-on

U mešani rastvor 3-(4-fluorobenzil)-1-((dimetilamino)metil)-7-((2-(trimetilsilil) etoksi)metoksi)-8,9-dihidro-3/-/-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridina-6(7H) (11,27 g, 22,60 mmol) u dihlorometanu (80 mL) doda se benzilhloroformijat (3,41 mL, 27,1 mmol), na temperaturi 230°C. Posle 30 min dodaju se piperidin (4,47 mL, 45,2 mmol) i diizopropiletilamin (20 mL, 110 mmol), pa se dobijena smeša ostavi da se još 1 h meša na 23°C. Nastala smeša se zatim tretira rastvorom natrijum-bikarbonata u vodi (400 mL), ekstrahuje dihlorometanom (2x400 mL), osuši iznad natrijum-sulfata, koncentriše i prečisiti hromatografijom na koloni, koristeći MeOH u dihlorometanu (0% do 10%) kao eluent, što daje 5,8 g čvrste supstance. Ova supstanca se rastvori u smeši dihlorometan/etiletar. Naslovljeno jedinjenje se izoluje dodavanjem heksana ovom rastvoru, posle čega sledi filtriranje i sušenje pod vakuumom, što daje beli prah (4,0 g, 33%). 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) 5 0,02 (s, 9H), 0,82-1,02 (m, 2H), 1,30-1,56 (m, 6H), 2,22-2,43 (m, 4H), 3,52 (s, 2H), 3,69 (t, J=6,69 Hz, 2H), 3,78-3,92 (m, 4H), 5,00 (s, 2H), 5,52 (s, 2H), 7,09-7,22 (m, 2H), 7,26-7,37 (m, 2H), 7,69 (s, 1H), 8,83 (s, 1H).

2. korak: 3-(4-fluorobenzil)-7-hidroksi-1-(piperidin-1-ilmetil)-3,7,8,9-tetrahidro-6/-/- pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6-on

U mešani rastvor 3-(4-fluorobenzil)-1-(piperidin-1-ilmetil)-7-((2-(trimetilsilil)etoksi) metoksi)-8,9-dihidro-3H-pirolo[2,3-c]-1,7-nafthiridin-6(7H)-ona (4,0 g, 7,4 mmol) u MeOH (20 mL) doda se rastvor hlorovodonika (4M u dioksanu, 10 mL, 40 mmol), na temperaturi 23°C. Dobijena smeša se ostavi da se 16 h meša na 23°C, a zatim koncentriše pod sniženim pritiskom, tretira sa zasićenim rastvorom natrijum-bikarbonata u vodi (200 mL), pa ekstrahuje sa DCM (2x200 mL). Kombinuju se organski slojevi, osuše iznad natrijum-sulfata, filtriraju i koncentrišu. Naslovljeno jedinjenje se dobije koncentrisanjem smeše MeOH/dihlorometan/EtOAc. Filtrira se i osuši pod vakuumom, dajući belu čvrstu supstancu (2,43 g, 80%).<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) 5 1,61-1,59 (m, 6H), 2,22-2,24 (m, 4H), 3,51 (s, 2H), 3,66 (t, J=6,31 Hz, 2H), 3,76 (t, J=6,31 Hz, 2H), 5,50 (s, 2H), 7,09-7,24 (m, 2H), 7,26-7,41 (m, 2H), 7,67 (s, 1H), 8,79 (s, 1H), 9,70 (s, 1H).

Opšte eksperimentalne procedure

1. korak: Dobijanje 9-[(dimetilamino)metil]-7-(4-fluorobenzil)pirano[3,4-/b]pirolo[3,2-đ]piridin-4(7/-/)-ona

U rastvor enol-laktona (1,00 g, 3,401 mmol) u acetonitrilu (25 mL), mešan mehaničkom mešalicom, doda se Eschenmoser-ova so (0,64 g, 6,803 mmol), pa se smeša 2 h zagreva pod refluksom. Rastvor se ohladi na sobnu temperaturu, a čvrst proizvod filtrira. Filtratu se doda zasićeni rastvor natrijum-bikarbonata, pa se smeša ekstrahuje dihlorometanom (3x100 mL. Organski ekstrakti se osuše iznad natrijum-sulfata, filtriraju i koncentrišu pod sniženim pritiskom, dajući proizvod kao čistu belu supstancu (1,0 g, 84%).<1>H NMR (DMSO-d6) 8 9,10 (s, 1H), 7,87 (s, 1H), 7,68 (d, 1H), 7,36 (d, 1H), 7,34 (m, 2H), 7,16 (m, 2H), 5,62 (s, 2H), 2,20 (s, 6H). LCMS (ESI, M+1) 352.

Opšta procedura A1:

u rastvor odgovarajućeg A/,A/-dimetilaminometil tricikla (1,0 ekviv., 0,197 M u dihlorometanu) doda se etilhloroformijat (1,0 ekviv.). Smeša se 1 h meša, a zatim doda odgovarajući alkohol (4,0 ekviv., 1mM u anhidroanom DMF), pa posle toga diizopropiletilamin (5,0 ekviv.). Smeša se stavi pod azot, pa zagreva na 40°C u uljanom kupatilu. Posle 48 h mešanja isparljivi sastojci se uklone pod vakuumom (oko 2,8 mbar), dajući ulje. Ovaj sirovi materijal se razblaži etilacetatom, pa opere vodom i rastvorom soli. Odvoji se organska faza, osuši iznad natrijum-sulfata i koncentriše pod vakuumom. Ostatak se meša u etru, filtrira i suši pod vakuumom, dajući željeni proizvod.

Opšta procedura A2:

U rastvor odgovarajućeg /V,/V-dimetilaminometil aromatičnog enol-laktona (1,0 ekviv.) u dihlorometanu (6 mL/mmol enol-laktona) doda se diizopropiletilamin (0,0 ekviv. za slobodnu bazu, 1,0 ekviv. za Hl- ili HCI-so A/,/V-dimetilaminometil aromatičnog enol-laktona) i etilhloroformijat (1,0 ekviv.), na sobnoj temperaturi. Posle 10 min mešanja na sobnoj temperaturi reakcionoj smeši se dodaju, na sobnoj temperaturi, DMF (4 mL/mmol enol-laktona), diizopropiletilamin (1,0 ekviv.) i amin (1,0 ekviv). Posle još sat mešanja na sobnoj temperaturi, doda se reakcionoj smeši zasićeni rastvor natrijum-bikarbonata, pa se ekstrahuje dihlorometanom (2*). Ekstrakti se osuše iznad natrijum-sulfata, organski sloj koncentriše pod vakuuumom, a proizvod opciono prečisti sa HPLC sa reversnom fazom (acetonitril:voda,0,1% sirćetna kiselina) dajući željeno jedinjenje.

2. korak: 7-(4-fluorobenzil)-4-okso-4,7-dihidropirano[3,4-o]pirolo[3,2-cf]piridin-9-karbaldehid

U rastvor enol-laktona (2,0 g, 6,803 mmol) u DMF (20 mL) doda se Eschenmoser-ova so (2,5 g, 13,605 mmol), pa se smeša 2 h mikrotalasno zagreva na 130°C. Doda se još Eschenmoser-ove soli (2,5 g, 13,605 mmol), pa se smeša ponovo 2 h mikrotalasno zagreva na 130°C. Smeša se koncentriše pod sniženim pritiskom, a dobijeni ostatak suspenduje i smeši aceton:voda (1:1), pa filtrira, dajući aldehid, kao čistu svetlomrku supstancu (1,41 g,64%).<1>H NMR (DMSO-d6) 6 9,98 (s, 1H), 9,26 (s, 1H), 8,93 (s, 1H), 8,12 (d, 1H), 7,75 (d, 1H), 7,47 (m, 2H), 7,21 (m, 1H); 5,77 (s, 2H). LC/MS (ESI, M+1) 323.

Opšta procedura A3:

U rastvor odgovarjućeg aldehida (1,0 ekviv.) u dihlorometanu (0,2 M), doda se odgovarajući amin (1,0 ekviv.). Posle 2 h mešanja na sobnoj temperaturi doda se natrijum-triacetoksiborohidrid (3,0 ekviv.). Ova smeša se ostavi da se meša na sobnoj temperaturi još 18-24 h, a zatim se rastvarač ukloni pod vakuumom. Preostali ostatak se rastvori u DMSO, pa prečisti sa prep-HPLC sa reversnom fazom (acetonitril:voda,0,1% sirćetna kiselina) dajući željena jedinjenja.

3. korak: 7-(4-fluorobenzil)-4-okso-4,7-dihidropirano[3,4-D]pirolo[3,2-c/]piridin-9-sulfonilhlorid

U rastvor 7-(4-fluorobenzil)pirano[3,4-b]pirolo[3,2-d]piridin-4(7/-/)-ona (1,0 ekviv.) u hlorosulfonskoj kiselini (60 ekviv., 0,55 M) doda se tionilhlorid (30 ekviv.). Ova smeša se 2 h meša na sobnoj temperaturi, a HPLC-MS analiza određuje završetak reakcije. Ova smeša se u kapima dodaje u smešu leda i vode, a suspenzija se filtrira, dajući sulfonilhlorid, kao čistu belu supstancu, sa prinosom 86%.<1>H NMR (MeOH-d4) d 9,31 (s, 1H), 8,95 (s, 1H), 7,79 (d, 1H), 7,74 (d, 1H), 7,47 (m, 2H), 7,15 (m, 2H), 5,80 (s, 2H). MC(MS (ESI, M+1) 393.

Opšta procedura A5:

U rastvor odgovarajućeg sulfonilhlorida (1,0 ekviv., 0,13 M u THF) i diizopropiletilamina (DIE, 1,1 ekviv.) dodaje se amin (1,0 ekviv.). Ova smeša se 2 h meša na sobnoj temperaturi, ili dok se analizom HPLC-MS ne utvrdi da je reakcija završena. Isparljivi sastojci se uklone pod vakumom, a sirovi materijal razblaži dihlorometanom i opere zasićenim natrijum-bikarbonatom. Odvoji se organska faza, osuši iznad natrijum-sulfata i koncentriše pod vakuumom. Sirovi materijal se prečisti sa HPLC sa reversnom fazom (acetonitril:voda,0,1 sirćetna kiselina), dajući željeno jedinjenje.

4. korak: 7-(4-fluorobenzil)-4-okso-4,7-dihidropirano[3,4-b]pirolo[3,2-cf]piridin-9-karboksilna kiselina

U mešani rastvor aldehida (1,30 g, 4,034 mmol) u smeši dioksamvoda (3:1, 40 mL), doda se natrijum-hlorid (9,547 g, 6,050 mmol), a zatim sulfaminska kiselina (2,23 g, 22,99 mmol). Ovaj rastvor se nekoliko sati meša, sve dok LC/MS ne pokaže da je reakcija završena. Većina dioksana se ukloni pod sniženim pritiskom, a nastala suspenzija u vodi se filtrira, pa se filtrat opere acetonom, dajući kiselinu kao beličastu čvrstu supstancu (1,20 g, 88%).<1>H NMR (DMSO-d6) 5 9,20 (s, 1H), 8,69 (s, 1H), 8,38 (d, 1H), 7,71 (d, 1H), 7,44 (m, 1H), 7,18 (m, 2H), 5,72 (s, 2H). LC/MS (M+1) 339.

Opšta procedura A6:

Urastvor odgovarajuće karboksilne kiseline (1,0 ekviv., 0,07 M u DMF) i 4-metilmorfolina (NMM, 3,2 ekviv.) doda se 2-hloro-4,6-dimetoksi-1,3,5-triazin

(CDMT, 1,2 ekviv.). Ova smeša se 1 h meša na sobnoj temperaturi, pa se doda odgovarajući amin (2,0 ekviv.). Nastala smeša se meša na sobnoj temperaturi nekoliko sati, dok se pomoću analize HPLC-MS ne utvrdi da je reakcija završena. Isparljivi sastojci se uklone pod vakuumom, a sirovi materijal razblaži etilacetatom, pa opere zasićenim natrijum-bikarbonatom. Odvoji se organska faza, osuši iznad natrijum-sulfata i koncentriše pod vakuumom. Ovaj sirovi materijal se prečisti sa HPLC sa reversnom fazom (acetonitril:voda,0,1% AcOH) dajući željeno jedinjenje.

Opšta procedura A7:

U rastvor odgovarajućeg aldehida u dihlorometanu dodaju se odgovarajući primarni ili sekundarni amin (2 ekviv.) i glacijalna sirćetna kiselina (4 do 5 ekviv./ekviv. aldehida). Nastala smeša se ostavi da se oko 1 h meša na sobnoj temperaturi. U smešu se zatim dodaje triacetoksiborohidrid (oko 4 ekviv./ekviv. aldehida), a nastala smeša se ostavi da se meša još 1 do 24 h. Smeša se zatim razblaži dihlorometanom, organski sloj opere zasićenim rastvorom natrijum-bikarbonata (3><10 mL), rastvorom soli, zatim suši natrijum-sulfatom, filtrira i koncentriše pod vakuumom, dajući sirovi proizvod.

Ošta procedura B1:

Rastvor enol-laktona (1,0 ekviv.) u etanolu (27 mL/mmol enol-laktona) i hidroksilamina (50 mas% u vodi, 0,68 mL/mmol enol-laktona) refluksuje se 3 h ili dok LC/MS ne pokaže da je završena konverzija u željeni A/-hidroksipiridon. Nastali rastvor se koncentriše, pa prečisti sa HPLC sa reversnom fazom (acetonitril:voda,0,1% AcOH) dajući željeno jedinjenje.

Primeri 1- 129:

Primer 130

Test bliske scintilacije za transfer spirale integraze

Oligonukleotidi:

Oligonukleotid #1: 5'-(biotin)CCCCTTTTAGTCAGTGTGGAAAATCTCTAGCA-3'

(Sekv. ID NO: 1) i

Oligonukleotid #2: 5'-ACTGCTAGAGATTTTCCACACTGACTAAAAG-3' (Sekv. ID NO: 2), su sintetizovani postupkom TriLink Bio Technologies, Inc. (San Diego, CA). Otpušteni proizvod predstavlja re-procesurianu virusnu ds-DNK, izvedenu iz LTR U5 sekvencije virusng genoma. Kontrolna ds-DNK za testiranje nespecifičnih interakcija je napravljena korišćenjem 3' di-deoksi derivata oligonukleotida #1, otpuštanjem u oligonukleotid #2. CA preklop sa kraja 5' ne-biotinilovanog struka ds-DNK stvoren je veštačkim puitem, korišćenjem komplementarnoog oligonukleotida DNK, skraćenog za 2 bazna para. Ova konfiguracija eliminiše zahtev za 3' korakom procesurianja enzima integraze, pre delovanja mehaniznma transfera spirale.

ds-DNK domaćina se dobija kao neobeleženi i sa [<3>H]-timidinom obeleženi proizvod iz otpuštenog oligonukleotida #3: -5-AAAAAATGACCAAGGGCTAATTCACT-3' (Sekv. ID NO: 3) i oligonukleotida #4: 5'-AAAAAAAGTGAATTAGCCCTTGGCA-3' (Sekv. Id. No: 4). Obe su sintetizivane postupkom TriLink BioTechnologies, Inc. (San Diego, CA). Ovaj otpušteni proizvod ima preklop sa krajeva 3' poli(dA). DNK domaćina se uobičajeno radioaktivno obeleži pomoću PerkinEImer Life Sciences Inc. (Boston, MA), korišćenjem enzimatskog postupka, sa odnosom 12/1 [metil-<3>H]dttO/hladni ds-DNK, dajući kraj 5'- ds DNK bez sparenih baza, sa specifičnom aktivnošću od

>900 Ci/mmol. Ovaj radioaktivno obeleženi proizvod se prečisti korišćenjem kartridža NENSORB, pa se skladišti u stabilizovanom vodenom rastvoru (PerkinEImer). Krajnji radioaktivno obeleženi proizvod ima šest [<3>H]-timidinskih nukleotida sa oba kraja 5' ds-DNK domaćina.

Reagensi:

SPA perlice poliviniltoluena (PVT) obložene streptavidinom dobavljene su iz firme Amersham Biosciences (Piscataway, NJ). Cezijum-hlorid je dobavljen iz firme Shelton Scientific, Inc. (Shelton, CT). Bele, polistrienske ploče sa 96 bazenčića ravnog dna i nevezujuće površine, dobavljene su iz firme Corning. Sve komponente za pufer su dobavljene iz firme Sigma (St Louis, MO), ukoliko se drugačije ne ukaže.

Konstrukcija enzima:

Sekvencija čitave dužine divljeg tipa HIC-1 integraze (SF1) (aminokiseline 1-289) konstruisana je u vektoru pET24a (Novagen, Madison, Wl). Ovaj konstrukt je povrđen preko sekvencioniranja DNK.

Prečišćavanje enzima:

Čitava dužina divljeg tipa HIV-1 integraze se izlučuje u ćelijama E.coli BL21 (DE3), a indukuje sa 1 mM izopropil-1-tio-p-D-galaktopiranozidom (IPTG), kada ćelije dostignu optimalnu optičku gustinu, između 0,8-1,0, na 600 nm. Ćelije se lizuju mikrofluidacijom u 50 mM HEPES pH 7,0, 75 mM NaCI, 5 mM DTT, 1 mM 4-(2-aminoetil)benzensulfonilfluorid HCI (AEBSF). Lizat se zatim 20 min centrifugira pri 11 k o/min u GSA rotoru Sorvall RC-5B, na 4°C. Gornji bistri sloj se odbaci, a peleta resuspenduje u 50 mM HEPES pH 7,0, 750 mM NaCI, 5 mM DTT, 1 mM AEBS, pa homogenizuje u 40 mL homogenizatora Dounce, tokom 20 min, na ledu. Homogenat se zatim 20 min cemtrifugira sa 11 k u rotoru SS34 Sorvall RC-5B, na 4°C. Odbaci se bistri sloj, a peleta resuspenduje u 50 mM HEPES pH 7,0, 750 mM NaCI, 25 mM CHAPS, 5 mM DTT, 1 mM AEBSF. Preparat se zatim 20 min centrifugira sa 11 k o/min u rotoru SS34 Sorvall RC-5B, na 4°C.

Gornji bistri sloj se zatim razblaži u odnosu 1:1 sa 50 mM HEPES pH 7,0, 25 mM CHAPS, 1 mM DTT i 1 mM AEBSF, pa se prebaci u kolonu Q-Sepharose, prethodno uravnoteženu sa 50 mM HEPES pH 7,0, 375 mM NaCI, 25 mM CHAPS, 1 mM DTT, 1 mM AEBSF. Sakupi se protok ispod pika, razblaži sa NaCI do 0,1 M, sa 50 mM HEPES pH 7,0, 25 mM CHAPS, 1 mM DTT, 0,5 mM AEBSF, pa se prebaci u kolonu sa SP-Sepharose-om, prethodno uravnoteženu sa 50 mM HEPES pH 7,0, 100 mM NaCI, 25 mM CHAPS, 1 mM DTT i 0,5 mM AEBSF. Posle ispiranja kolone sa puferom za uravnotežavanje, propušta se NaCI sa gradijentom 100 do 400 mM. Eluirana integraza se koncentriše i prebaci u difuzionu kolonu sa gelom S-300, koristeći 50 mM HEPES pH 7,0, 500 mM NaCI, 25 mM CHAPS, 1 mM DTT i 0,5 mM AEBSF. Pik iz ove kolone se koncentriše do 0,76 mg(mL, pa čuva na -70°C, i kasnije koristi za analize prenosa spirale. Sve kolone se koriste u hladnoj sobi, na 4°C.

Priprema perlica sa virusnom DNK:

Perlice SPA, obložene streptavidinom, suspenduju se, sa 20 mg/mL, u 25 mM 3-morfolinopropansulfonskoj kiselini (MOPS) (pH 7,2) i 1% NaN3. Biotinilovana virusna DNK se vezuje za hidratisane perlice SPA u šaržnom procesu, kombinovanjem 25 pmol ds-DNK sa 1 mg suspendovanih perlica SPA (10 uL 50 uM virusne DNK u 1 mL 20 mg/mol perlica SPA). Ova smeša se inkubira najmanje 20 min na 22°C, uz povremeno mešane, posle čega sledi 10 min centrifugiranja sa 2500 o/min. Međutim, brzina centrifugiranja i vreme mogu varirati, zavisno od posmatrane centrifuge i uslova. Ukloni se bistri sloj, a pelete suspenduju, sa 20 mg/mL, u 25 mM MOPS (pH 7,2) i 1% NaN3. Perlice sa virusnom DNK su stabilne nekoliko nedelja, kada se čuvaju na 4°C. Di-deoksi virusna DNK se priprema na identičan način, dajući kontrolne perlice di-deoksi virusne DNK.

Pripremanje kompleksa integraza-DNK:

Pufer za test se priprema kao 10-struki polazni rastvor, od 250 mM MOPS (pH 7,2), 500 mM NaCI, 50 mM 3-[(3-holamidopropil)dimetilamonio]-1-propansulfonat (CHAPS), 0,5% (oktilfenoksi)polietoksietanol (NP40) (IGEPAL-CA) i 0,05% NAN3. Perlice sa virusnom DNK se razblaže, sa 2,67 mg/mL, u 1-strukom puferu za test, plus 3 mM MgCI2, 1% DMSO i 10 mM svežeg DTT. Integraza (IN) se prethodno kompleksira sa perlicama virusne DNK, u šaržnom postupku (IN/virusna DNK/perlice) kombinovanjem razblaženih perlica virusne DNK sa integrazom koncentracije 385 nM, posle čega sledi minimalno vreme inkubacije od 20 min, na 22°C, uz lagano mešanje. Uzorak se drži na 22°, dok se ne prebaci u bazenčiće za testiranje.

Pripremanje DNK domaćina:

DNK domaćina se priprema kao 200 nM smeša neobeležene i sa [<3>H]T-obeležene DNK domaćina, u 1-strukom puferu za test, plus 8,5 mM MgCI2i 15 mM DTT. Korišćene koncentracije su 4 nM sa [<3>H]T-obeleženom DNK domaćina i 196 nM sa neobeleženom DNK domaćina. Ovaj odnos generiše signal SPA od 2000-3000 impulsa na minut, u odsustvu modulatora, kao što su inhibitori.

Test bliske scintilacije za transfer spirale

Reakcija transfera spirale se obavlja na mikrotitarskim pločama sa 96 bazenčića, sa konačnom zapreminom enzimatske reakcije od 100 pL. U bazenčiće za testiranje doda se 10 uL jedinjenja ili test-reagenasa u 10% DMSO, a zatim se doda 65 uL kompleksa IN/virusna DNK/perlica, pa se promešaju u mućkalici za ploče. Zatim se u bazenčiće za testiranje doda 25 uL DNK domaćina, pa se promeša na mućkalici za ploče. Reakcija transfera spirale se inicira prenošenjem ploča sa testom u suve blok-grejače na 37°C. Vreme inkubacije je 50 min, za koje se pokazalo da je u linernom opsegu enzimatske reakcije. Konačne koncentracije integraze i DNK domaćina u bazenčićima za testiranje su bile 246 nM i 50 nM, respektivno.

Reakcija transfera spirale integraze se završava dodavanjem u bazenčiće 70 uL zaustavnog pufera (150 mM EDTA, 90 mM NaOH i 6 M CsCI). Komponente zaustavnog pufera deluju tako da zaustave enzimatsku aktivnost (EDTA), disociraju komplekse integraza/DNK, a pored toga razdvoje neintegrisane strukove DNK (NaOH), i učine da isplivaju perlice SPA po površini bazenčića, da bi bile bliže detektorima PMT Top-Count<®>scintilacionog brojača za brojanje ploča (PerkinEImer Life Sciences, Inc. (Boston, MA)). Posle dodavanja zaustavnog pufera, ploče se mešaju na mućkalici za ploče, zaptiju providnom trakom i ostave da se inkubiraju najmanje 60 min na 22°C. Signal testa se meri korišćenjem TopCount<®>scinitilacionog brojača za brojanje ploča, podešenog optimalno za brojanje SPA perlica sa [<3>H]-PVT. Program TopCount<®>daje krive za standardizaciju, zbog normalizacije podataka zbog absorpcije boje ovih jedinjenja. Korigovane vrednosti podataka u impulsima na minut (u teksu će nositi oznaku QCPM) koriste se za kvantitativno iskazivanje aktivnosti integraze. Vreme merenja je 2 min/bazenčić.

Perlice di-deoksi virusne DNK se koriste za optimizovanje reakcije transfera spirale integraze. Di-deoksi završetak virusne ds-DNK sekvencije sprečava produktivnu integraciju virusne DNK u DNK domaćina pomoću integraze. Dakle, signal testa u prisustvu di-deoksi virusne DNK je mera ne-specifičnih interakcija. Optimizuju se parametri testa tako da reakcije sa perlicama di-deoksi virusne DNK daju signal veoma blizak pravoj osnovnoj vrednosti testa. Prava osnovna vrednost testa se definiše kao reakcija sa svim komponentama testa (virusna DNK i [<3>H]-DNK domaćina) u odsustvu integraze.

Određivanje aktivnosti jedinjenja:

Procenat inhibicije ovih jedinjenja se izračunava korišćenjem jednačine: {1-[(QCPNuzorka - QCPMmin)/(QCPMmax - QCPMmin)]}<x>100. Minimalna vrednost, označena sa min u indeksu, je signal testa u prisustvu poznatog inhibitora, sa koncentracijom 100-struko višom od IC5otog jedinjenja. Ovaj minimalni signal aproksimira pravu osnovnu vrednost za test. Maksimalna vrednost, označena sa max u indeksu, je signal testa koji se dobija za aktivnost posredovanu integrazom, u odsustvu jedinjenja (tj. sa DMSO umesto rastvora jedinjenja u

DMSO).

Jedinjenja se pripremaju u 100% DMSO, u 100-struko višoj koncentraciji od željene za ispitivanje u testovima (obično 5 mM), pa sledi razblaživanje jedinjenja u 100% DMSO, kako bi se dobila titraciona kriva sa 11 tačaka i intervalom razblaživanja<1>/2-log. Uzorak jedinjenja se dalje 10-struko razblažuje vodom, pa se prebacuje u bazenčiće za testiranje. Procenat inhibicije za jedinjenje-inhibitor se određuje kao i gore, sa vrednostima koje se unose u nelinearnu regresionu analizu, za sigmoidalnu jednačinu doza-odgovor (varijabilni nagib), korišćenjem softvera za fitovanje krivih GraphPad Prism (GraphPad Sofvvare, Inc., San Diego, CA). Krive koncentracija se testiraju u duplikatu, a zatim ponove u nezavisnom eksperimentu.

Primer 131

Test zaštite HIV- 1 ćelije

Antivirusne aktivnosti jedinjenja, potencijalnih modulatora (testirana jedinjenja) određuju se u tetsovima zaštite HIV-1 ćelija, korišćenjem RF obojenja HIV-1, CEM-SS ćelija, i postupka redukcije boje XTT (Weislow, O.S. et al.,J. Natl. Cancer Inst,81, 577-586 (1989)). Posmatrane ćelije se inficiraju sa HIV-1 RF virusom, sa vrednošću moi koja izaziva oko 90% smrtnosti (na primer vrednost moi u opsegu od oko 0,025 do oko 0,819), ili se lažno inficiraju, samo sa medijumom, uz dodatak 2x10<4>ćelija po bazenčiću, uz dodatak približno 200 uL medijuma, na ploče sa 96 bazenčića koje sadrže %-logaritamska razblaženja testiranih jedinjenja. Posle šest dana u bazenčiće se doda 50 uL rastvora XTT (1 mg/mL XTT tetrazolijuma i 20 nM fenazin monosulfata), pa se ploče inkubiraju 4 h. Vitalnost se određuje prema količini nastalog XTT formazana, a kvantitativno se određuje spektrofotometrijski, pomoću absorbancije na 450 nm.

Podaci CPE testova se iskazuju kao procenat formazana nastao u ćelijama tretiranim sa jedinjenjem, u poređenju sa nastalim formazanom u bazenčićima neinficiranih ćelija bez jedinjenja. Koncentracija 50% efikasnosti (EC50) se izračunava kao koncentracija jedinjenja koja izazove porast procenta nastalog formazana u inficiranim ćelijama tretiranim sa jedinjenjem, na 50% od one vrednosti koja je nastala u neinficiranim ćelijama, bez jedinjenja. Pedest-procentna citotoksična koncentracija (CC50) se izračunava kao koncentracija jedinjenja koja smanjuje procenat formazana proizvedenog u neinficiranim ćelijama tretiranim sa jedinjenjem na 50% vrednosti u neinficiranim ćelijama bez jedinjenja. Terapeutski indeks se izračunava deljenjem citotoksičnosti (CC50) sa antivirusnom aktivnošću (EC50).

Claims

1. Jedinjenje formule (I), naznačeno time, što su: R<1>je vodonik, Ci-C8alkil, C2-C8alkenil ili CrC8heteroalkil, gde pomenute Ci-C8alkil, C2-C8alkenil ili CrC8heteroalkil grupe mogu biti supstituisane sa jednim ili više supstituenata koji se nezavisno biraju između: halo,-CN, -OR<1>2a,-N(R12aR12b), -C(0)N(R12aR12b),-NR12aC(0)N(R12aR12b), -NR12aC(0)<R12a>, -NR<1>2aC(NR<1>2a)N(R12aR12b), -SR12a, -S(0)R12a, -S(0)2R<12a>, -S(0)2N(R12aR<12b>), CrC8alkil, C6-Ci4aril, C3-C8cikloalkil i C2-Cgheteroaril, gde pomenute CrC8alkil, C6-C14aril, C3-C8cikloalkil i C2-Cgheteroaril grupe mogu biti supstituisane sa jednim ili više supstituenata koji se nezavisno biraju između halo, -C(R<12a>R12bR<1>2c), -OH, CrC8alkoksi i -CN; R<2>je vodonik ili CrC8alkil; R<3>je CrC8alkil, -(CR7R8)tNR<9>R<10>, -(CR<7>R<8>),OR<9>, -S(0)zNR<9>R<10>, -C(0)NR<9>R<1>°, -C(0)R<9>, Ci-C8heteroalkil, C6-C14aril ili C2-C9heteroaril, gde pomenute CrC8heteroalkil, C6-Ci4aril ili C2-Cgheteroaril grupe mogu biti supstituisane sa jednim ili više R<11>; Z je-(CR<4>R<4>)n-; a R<4>svaki nezavisno, se bira između vodonik, halo, CrC8heteroalkil, CrC8alkil, C3-C8cikloalkil, C6-Ci4aril ili C2-C9heterociklil i C2-Cgheteroaril, gde pomenute CrC8alkil, C3-C8cikloalkil, Ce-C^aril ili C2-C9heterociklil i C2-C9heteroaril grupe mogu biti supstituisane sa jednim ili više R<13>; R<5>je vodonik, C-|-C8heteroalkil, C6-C14aril ili C2-C8alkenil ili CrC8alkil, gde pomenuti d-C8alkil može biti supstituisan sa jednom ili više C3-C8cikloalkil ili C6-Ci4aril grupa; R<6>je vodonik; R<7>i R<8>, svaki od njih može biti isti ili različit, a nezavisno se bira između vodonik i CrC8alkil; R<9>i R<10>, svaki od njih može biti isti ili različit, a nezavisno se bira između vodonik, CrC8heteroalkil C3-C8cikloalkil, C2-C9heterociklil, -C(0)R<7>, -C(0)2R<7>i CrC8alkil, gde pomenuti Ci-C8heteroalkil C3-C8cikloalkil, C2-C9heterociklil i CrC8alkil mogu opciono biti supstituisan sa jednom ili više C2-C9heterociklil, C2-C9heteroaril, halo ili C6-Ci4aril grupa, i gde pomenuta C6-C-i4aril grupa može biti supstituisana sa jednom ili više Ci-C8alkil ili halo grupa; ili R<9>i R<10>, zajedno sa atomom azota za koji su vezani, formiraju C2-C9heterociklil ili C2-C9heteroaril grupu, od kojih svaka može biti supstituisana sa jednom ili više R13grupa; R<11>je halogen, C3-C8cikloalkil, CrC8heteroalkil, C2-C9heterociklil, C6-Ci4aril ili C2-C9heteroaril, od kojih svaki može biti supstituisan sa jednim ili više supstituenata koji se nezavisno biraju između C-i-C8alkil, C6-C-i4aril, C2-C9heteroaril, -CF3, -COR<12a>, -C02<R12a>i -OR<12a>; <pi2>a pi2bjp<i2c>sva(<j ocj njjn moze t»iti isti ili različit, a nezavisno se biraju između vodonik i CrC8alkil i okso; ili R12ai R<12b>, zajedno sa atomom azota za koji su vezani, mogu da formiraju C2-C9heterociklil grupu; R1<3>, svaki nezavisno, bira se između halo, CrC8alkil, -(CR<7>R<8>)tOR<7>, -C(0)R<12a>, -S(0)2R<7>, -(CR<7>R<8>)zC(0)NR<12a>R<12b>, -NR<12a>R12b,CrC8alkoksi, -OH i -CF3; t je ceo broj od 1 do 3; n, svaki može biti isti i različit, a nezavisno se bira, predstavljajući ceo broj, od 1 do 4; i z, svaki može biti isti i različit, a nezavisno se bira, predstavljajući 0, 1 ili 2; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili solvat.

2. Jedinjenje prema Zahtevu 1, naznačeno time, što Z predstavlja -(CH2CH2)-, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili solvat.

3. Jedinjenje formule (II), naznačeno time, što su: R<1>je vodonik, CrC8alkil, C2-C8alkenil ili d-C8heteroalkil, gde pomenute CrC8alkil, C2-C8alkenil ili CrC8heteroalkil grupe mogu biti supstituisane sa jednim ili više supstituenata koji se nezavisno biraju između: halo, -CN, -OR<1>2a, -N(R12aR12b), -C(0)N(R12aR12b),-NR12aC(0)N(R12aR12b),-NR12aC(0)R12a,-NR12aC(NR12a)N(R12aR12b),-S<R12>a,-S(0)R<1>2a, -S(0)2R<12a>, -S(0)2N(R<12a>R<12b>), Ci-C8alkil, C6-C14aril, C3-C8cikloalkil i C2-C9heteroaril, gde pomenute Ci-Cealkil, C6-C14aril, C3-C8cikloalkil i C2-Cgheteroaril grupe mogu biti supstituisane sa jednim ili više supstituenata koji se nezavisno biraju između halo, -C(R<1>2aR<12b>R12c), -OH i d-C8alkoksi i -CN; X je-S(0)2-, -(CH2)-, -(CH2CH2)-, -(CH2CH2CH2)- ili -C(O)-; R<7>i R<8>, svaki od njih može biti isti ili različit, a nezavisno se bira između vodonik i d-C8alkil; R<9>i R<10>, svaki od njih može biti isti ili različit, a nezavisno se biraju između vodonik, CrC8heteroalkil, C3-C8cikloalkil, C2-C9heterociklil, -C(0)R<7>, -C(0)2R<7>i CrC8alkil, gde pomenuti Ci-C8heteroalkil, C3-C8cikloalkil, C2-C9heterociklil i CrC8alkil mogu biti supstituisan sa jednom ili više C2-C9heterociklil, C2-C9heteroaril, halo ili C6-C14aril grupa, i gde pomenuta C6-C14aril grupa može biti supstituisana sa jednom ili više CrCgalkil ili halo grupa; ili R<9>i R<10>, zajedno sa atomom azota za koji su vezani, formiraju C2-C9cikloheteroalkil ili C2-C9heteroaril grupu, od kojih svaka može biti supstituisana sa jednom ili više R<13>grupa;R12a,R12bi R<12c>, svaki od njih može biti isti ili različit, a nezavisno se bira između vodonik i CrC8alkil i okso; iliR12a i R<12b>, zajedno sa atomom azota za koji su vezani, mogu da formiraju C2-Cgcikloheteroalkil grupu; R<13>svaki nezavisno, bira se između halo, CrC8alkil, -(CR<7>R<8>)tOR<7>, -C(0)R<12a>, -S(0)2R<7>, -(CR<7>R<8>)zC(0)NR<12a>R<12b>, -NR<12>aR12b,CrC8alkoksi, -OH i -CF3; t je ceo broj od 1 do 3; i z svaki može biti isti i različit, a nezavisno se bira, predstavljajući 0, 1 ili 2; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili solvat.

4. Jedinjenje prema Zahtevu 3, naznačeno time, što su R<1>je CrC8alkil, supstituisan sa C6-C14aril, gde je pomenuta C6-C14aril grupa supstituisana sa jednim ili više supstituenata koji se nezavisno biraju između halo i, -CN; X je-S(0)2-, -(CH2)-, -(CH2CH2)-, -(CH2CH2CH2)- ili -C(O)-; R<7>i R<8>, svaki od njih može biti isti ili različit, a nezavisno se bira između vodonik i CrC8alkil; R<9>i R<10>, svaki od njih može biti isti ili različit, a nezavisno se biraju između vodonik, Ci-C8heteroalkil, C3-C8cikloalkil, C2-C9heterociklil, -C(0)R<7>, -C(0)2R<7>i CrC8alkil, gde pomenuti CrC8heteroalkil, C3-C9cikloalkil, C2-C9heterociklil i CrC8alkil mogu biti supstituisan sa jednom ili više C2-C9heterociklil, C2-C9heteroaril, halo ili C6-C14aril grupa, i gde pomenuta C6-C14aril grupa može biti supstituisana sa jednom ili više CrC8alkil ili halo grupa; ili R<9>i R<10>, zajedno sa atomom azota za koji su vezani, formiraju C2-C9cikloheteroalkil ili C2-C9heteroaril grupu, od kojih svaka može biti supstituisana sa jednom ili više R13grupa; R12<a>i R<12b>, svaki od njih može biti isti ili različit, a nezavisno se bira između vodonik i Ci-C8alkil i okso; ili R12<a>i R<12b>, zajedno sa atomom azota za koji su vezani, mogu da formiraju C2-C9cikloheteroalkil grupu; R13 svaki nezavisno, bira se između halo, CrC8alkil, -(CR<7>R8)tOR<7>, -C(0)R<12a>, -S(0)2R<7>, -(CR<7>R<8>)zC(0)NR<12a>R<12b>, -NR<12a>R12b,CrC8alkoksi, -OH i -CF3; t je ceo broj od 1 do 3; i z svaki može biti isti i različit, a nezavisno se bira, predstavljajući 0, 1 ili 2; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili solvat.

5. Jedinjenje prema Zahtevu 4, naznačeno time, što su R<1>je -(CH2)(C6-Ci4aril), gde je pomenuta C6-Ci4aril grupa supstituisana sa jednim ili više supstituenata koji se nezavisno biraju između halo i, -CN; X je-S(0)2-, -(CH2)-, -(CH2CH2)-, -(CH2CH2CH2)- ili -C(O)-; R<7>i R<8>, svaki od njih može biti isti ili različit, a nezavisno se bira između vodonik i CrC8alkil; R<9>i R<10>, svaki od njih može biti isti ili različit, a nezavisno se biraju između vodonik, CrC8heteroalkil, C3-C8cikloalkil, C2-C9heterociklil, -C(0)R<7>, -C(0)2R<7>i CrC8alkil, gde pomenuti CrC8heteroalkil, C3-C8cikloalkil, C2-C9heterociklil i Ci-C8alkil mogu biti supstituisan sa jednom ili više C2-Cgheterociklil, C2-C9heteroaril, halo ili C6-C14aril grupa, i gde pomenuta C6-Ci4aril grupa može biti supstituisana sa jednom ili više CrC8alkil ili halo grupa; ili R<9>i R<10>, zajedno sa atomom azota za koji su vezani, formiraju C2-C9cikloheteroalkil ili C2-C9heteroaril grupu, od kojih svaka može biti supstituisana sa jednom ili više R13grupa; R<12a>i R<12b>, svaki od njih može biti isti ili različit, a nezavisno se bira između vodonik i CrC8alkil i okso; ili R12ai R<12b>, zajedno sa atomom azota za koji su vezani, mogu da formiraju C2-Cgcikloheteroalkil grupu; R13 svaki nezavisno, bira se između halo, CrC8alkil, -(CR<7>R8)tOR<7>, -C(0)R<12a>, -S(0)2R<7>, -(CR<7>R<8>)zC(0)NR<12a>R<12b>, -NR<12a>R<12b>, CrC8alkoksi, -OH i -CF3; t je ceo broj od 1 do 3; i z svaki može biti isti i različit, a nezavisno se bira, predstavljajući 0, 1 ili 2; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili solvat.

6. Jedinjenje prema Zahtevu 5, naznačeno time, što su R<1>je 4-fluorobenzil; X je -S(0)2-, -(CH2)-, -(CH2CH2)-, -(CH2CH2CH2)- ili -C(O)-; R7 i R<8>, svaki od njih može biti isti ili različit, a nezavisno se bira između vodonik i CrC8alkil; R<9>i R<10>, svaki od njih može biti isti ili različit, a nezavisno se biraju između vodonik, CrC8heteroalkil, C3-C8cikloalkil, C2-C9heterociklil, -C(0)R<7>, -C(0)2R<7>i CrC8alkil, gde pomenuti CrC8heteroalkil, C3-C8cikloalkil, C2-Cgheterociklil i CrCsalkil mogu biti supstituisan sa jednom ili više C2-C9heterociklil, C2-C9heteroaril, halo ili C6-Ci4aril grupa, i gde pomenuta C6-C14aril grupa može biti supstituisana sa jednom ili više Ci-C8alkil ili halo grupa; ili R<9>i R<10>, zajedno sa atomom azota za koji su vezani, formiraju C2-C9cikloheteroalkil ili C2-C9heteroaril grupu, od kojih svaka može biti supstituisana sa jednom ili više R13grupa; R12a i R<12b>, svaki od njih može biti isti ili različit, a nezavisno se bira između vodonik i d-C8alkil i okso; ili R12<a>i R<12b>, zajedno sa atomom azota za koji su vezani, mogu da formiraju C2-C9cikloheteroalkil grupu; R13 svaki nezavisno, bira se između halo, CrC8alkil, -(CR<7>R8)tOR<7>, -C(0)R<12a>, -S(0)2R<7>, -(CR<7>R<8>)zC(0)NR<12a>R<12b>, -NR<12>aR12b,CrC8alkoksi, -OH i -CF3; t je ceo broj od 1 do 3; i z svaki može biti isti i različit, a nezavisno se bira, predstavljajući 0, 1 ili 2; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili solvat.

7. Jedinjenje prema bilo kom od Zahteva od 1 do 6, naznačeno time, što R<9>i R<10>, a svaki od njih može biti isti ili različit, nezavisno se biraju između vodonik, Ci-C8heteroalkil, C3-C8cikloalkil, C2-C9heterociklil, -C(0)R<7>, -C(0)2R7 i CrC8alkil, gde pomenuti CrC8heteroalkil, C3-C8cikloalkil, C2-C9heterociklil i CrC8alkil mogu biti supstituisan sa jednom ili više C2-C9heterociklil, C2-C9heteroaril, halo ili Ce-Cuaril grupa, i gde pomenuta C6-C14aril grupa može biti supstituisana sa jednom ili više CrC8alkil ili halo grupa, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili solvat.

8. Jedinjenje prema bilo kom od Zahteva od 1 do 6, naznačeno time, što R<9>i R<10>, zajedno sa atomom azota za koji su vezani, formiraju C2-C9cikloheteroalkil ili C2-C9heteroaril grupu, od kojih svaka može biti supstituisana sa jednom ili više R<13>grupa, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili solvat.

9. Jedinjenje prema bilo kom od Zahteva od 1 do 6, naznačeno time, što R<9>i R<10>, zajedno sa atomom azota za koji su vezani, formiraju C2-C9 cikloheteroalkil grupu, koja može biti supstituisana sa jednom ili više R<13>grupa, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili solvat.

10. Farmaceutski preparat, naznačen time, što sadrži terapeutski efikasnu količinu najmanje jednog jedinjenja prema bilo kom od Zahteva 1 do 9, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so ili solvat, i farmaceutski prihvatljiv nosač ili razblaživač.

11. Upotreba jedinjenja prema bilo kom od Zahteva 1 do 9, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli ili solvata, za dobijanje medikamenta za tretman sisara inficiranog sa HIV.

12. Upotreba jedinjenja prema bilo kom od Zahteva 1 do 9, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli ili solvata, za dobijanje medikamenta za tretman sisara koji pati od AIDS.