PT93061B

PT93061B - Processo para a preparacao de composicoes farmaceuticas a base de derivados de 5-alquil piridazina, activas sobre o sistema colinergico

Info

Publication number: PT93061B
Application number: PT93061A
Authority: PT
Inventors: Roberto Boigegrain; Camille Georges Wermuth; Paul Worms
Original assignee: Sanofi Sa
Priority date: 1989-02-07
Filing date: 1990-02-05
Publication date: 1995-12-29
Also published as: ATE114469T1; DE69014337D1; EP0382635A3; JPH02240070A; PT93061A; FR2642648A1; US5081119A; EP0382635A2; FR2642648B1; CA2009502A1; EP0382635B1

Description

PROCESSO PARA A PREPARAÇAO DE COMPOSIÇOES FARMACÊUTICAS Ã BASE DE DERIVADOS DE 5-ALQUIL PIRIDAZINA. ACTIVAS SOBRE 0 SISTEMA COLINERGICO''

em que R₁ representa um grupo alquilo C^-C^ ou um grupo fenilo; R₂ e R^ representam independentemente um grupo alquilo C^-C^ ou ainda R^ e R^ considerados com o átomo de azoto ao qual eles estão ligados constituem um grupo morfolino. ou de um dos seus sais farmaceuticamente aceitáveis com um veículo apropriado. Estas composições destinam-se a combater os estados patolo'gicos ligados a um déficit colinérgico cortical particularmente para 0 tratamento dos sindromas degenerativos ligados à senescência.

Depois de vários anos, os derivados de piridazina foram propostos como medicamentos.

Num grande numero de casos, trata-se de substâncias activas sobre o sistema cardiovascular, apresentando em especial um efeito hipotensor ou vasodilatador ; noutros casos mencionou-se para os derivados de piridazina uma acção anti-inflamatoria e analgésica.

Por fim as patentes francesas 2 1 4 1 697- 2 5 10 997 e 2 510 998 descrevem os derivados de piridazina substituído diferentemente sobre o ciclo piridazinico e transportando todos na posição 3 um substituinte

X aminado do tipo -NH-A 1qui1-Nζ em que X e Y representam

Y independentemente o hidrogénio, um grupo alquilo ou formam com o átomo de azoto ao qual eles estão ligados um heterociclo, tal como o morfolino.

Todos estes compostos apresentam uma actividade sobre o sistema nervoso central enquanto antidepressores .

Mais particularmente a patente francesa n®. 2 510 998 descreve uma família de derivados de piridazina compreendendo entre os seus membros um derivado 5-alqui1-piridazina, a saber a 3-(-2 morfolino-etilamino)5-metil-6-fenil-piridazina (I).

Este composto apresenta propriedades antidepressivas de intensidade nédia. Estudos posteriores mostraram que ele possui igualmente interessantes propriedades enquanto ligando dos receptores colinérgicos.

Nos mamíferos, existem duas subclas ses de receptores colinérgicos muscarinicos: os receptores M e M₂ .

Os receptores do tipo M₁ estão concentrados em certas zonas do cérebro tais como o hipocampo, o córtex cerebral, o músculo estriado assim como nos gânglios simpáticos. Estes locais de ligação podem ser selectivamente marcados pela C 3h J pirenzepina. Os do tipo M₂ preO dominam no coração e no ileon e podem ser marcados pela C HJ N- metilescopolamina.

As demências senis e particularmente as demências do tipo Alzheimer são afecções graves cuja frequência tende a aumentar em função do aumento da longevidade da população.

Os estudos levados a cabo por diferentes autores, puseram em evidência nestas doenças a existência de um déficit específico dos marcadores colinérgicos corticais provocando problemas graves das funções superiores.

Os resultados obtidos por utilização de agonistas muscarinicos para o tratamento das demências senis mostraram ser encorajadoras. Contudo os agonistas muscarinicos não existem senão em pequeno numero e verificou-se serem de difícil manuseamento no homem.

Em seguimento à pesquisa de agonistas muscarinicos post-sinápticos como tratamento das demências senis contudo verificou-se hoje em dia serem absolutamente desejável.

interesse de dispor de agonistas muscarinicos centrais selectivos para remediar o déficit colinérgico na doença de Alzheimer foi particularmente mencionado na ISI Atlas of Science: Pharmacology (1987), p. 98 a 100 .

presente invento tem então por objectico a utilização do composto (I) e de compostos vizinhos enquanto agonistas muscarinicos centrais selectivos utilizãveis como medicamentos para o tratamento das doenças ligadas a um déficit colinérgico central e particularmente para o tratamento das demências senis.

Estes compostos respondem a fórmula geral :

na qual R representa um grupo alquilo em C^-C^ ou um grupo fenilo ;

^2 ^e 83 representam independentemente um grupo alquilo em C1 - ou ainda ^e 83 considerados com o átomo de azoto ao qual eles estão ligados constituem um grupo morfolino.

invento compreende igualmente os sais que os compostos de formula (II) são suseeptiveis de formar com os ácidos farmaceuticamente aceitáveis.

Os compostos de fórmula (II) na qual R₁ e um grupo alquilo em ^C2^_C4· θ ^R2 ^e 83 são tal como definidos em cima são novos e constituem um outro aspecto do invento, assim como os sais que estes compostos são susceptí-6veis de formar com os ácidos farmaceuticamente aceitáveis.

Entre estes compostos são particularmente preferidos aqueles em que é -CHgCH^ ou -CH£CH2 CH^. Os compostos de fórmula (II) podem ser preparados por acção de uma amina.

Cl (2)

A reacção e efectuada por aquecimento entre 100 e 150°C do derivado clorado (22 com um grande excesso de amina (1) eventualmente em presença de cloreto de amónio.

Opera-se sem solvente ou num solvente inerte como o n-butanol.

Os derivados clorados (2) podem ser preparados a partir de uma fenilcetona (3) seguindo o esquema reaccional :

CHO

I

H

-7poci₃

A partir da cetona 3, por aquecimento com o glioxilato de etilo a uma temperatura compreendida entre 80 e ΐ40^ο0_} obtém-se o hidroxi ceto ester 4. A mistura reaccional bruta é então retomada num solvente inerte tal como o n-butanol e é adicionado o hidrato de hidrazina. Por aquecimento ao refluxo durante 24 horas, obtém-se o hidro xipiridazinona 5 que e aquecida em meio ácido conduzida pela desidratação com a 3 (2H )-piridazinona 6.

Este último aquecimento com o oxicloreto de fósforo em excesso fornece a cloro-3 piridazina 2. Opera-se sem solvente ou em presença de um solvente inerte tal como o acetonitrilo.

Em todos os casos, os produtos (II) isolados sob forma de base podem ser salificados por acção de uma quantidade equimolecular de um ácido farmaceuticamente aceitável no seio de um solvente conveniente.

Os seguintes exemplos ilustram a preparação dos compostos de formula (II).

EXEMPLO 1

3-(2-Morfolino-etilamino)-5-metil-6-fenil-piridazina dioxalato (CM 303 1 6 ) .

Α) 3-cloro-5-metil-6-fenil-piridazina.

1. 2-Η id r ο χ i-3-me t i 1-4-f en i 1-4-ο xo - but i r at ο de etilo.

Aquece-se a 135°C durante 5 horas a mistura de 13,4 g de propiofenona de 15,3 g de glioxilato de etilo. 0 produto assim obtido e utilizado tal e qual para a operação seguinte.

2. 5-meti1-6-feni1-3 (2 H ) - pi r id a z in on a .

Dissolve-se o produto bruto assim obtido em 150 ml de n-butanol, depois adiciona-se 9,44 ml de hidrato de hidrazina e aquece-se ao refluxo durante 24 horas. Destila-se à pressão vulgar uma parte de n-butanol de modo a eliminar a água formada na reacção sob forma de azeotropo. Concentra-se em seguida a secura sob vazio. Retoma-se o resíduo numa mistura de 100 ml de ácido acético e 10 ml de ácido clorídrico concentrado. Aquece-se a mistura a 100°C durante 4 horas. Deita-se a solução em agua fria e deixa-se cristalizar. Seca-se ao ar o solido e seca-se.

Peso: 11.6 g F : 218⁰q

3- 3-Cloro-5-metil-6-fenil-piridazina.

A 12 g de piridazinona obtida em cima adiciona-se 50 ml de oxicloreto de fosforo e aquece-se a 80°C durante 4 horas. Deita-se lentamente a mistura sobre o gelo e alcaliniza-se com uma solução de soda a 20%.

Seca-se ao ar o precipitado, lava-se abundantemente com água e recristaliza-se em isopropanol.

Obtém-se 9.9 g do produto esperado. F: 122°c

B) CM 30316

Aquece-se ao refluxo durante 12 horas uma mistura de 8 g do derivado clorado obtido em cima e 10 g de morfolino-2 etilamina em 80 ml de n-butanol,

Deita-se a solução quente em 200 ml de água e filtra-se 0 precipitado que se lava com um pouco de éter. Separa-se a fase aquosa que se extrai com éter. Reune-se os extractos étereos e extrai-se com uma solução de ácido sulfúrico 1N. Separa-se a fase aquosa ácida e alcaliniza-se com uma solução de carbonato de sódio a 10%. Extrai-se com acetato de etilo. seca-se a solução sobre sulfato de sódio e evapora-se à secura sob vácuo.

Dissolve-se a base obtida em éter isopropilico e adiciona-se 2 equivalentes de ácido oxálico. Aquece-se a ebulição ate dissolução. Por arrefecimento o dioxalato cristaliza- Seca-se ao ar e recristaliza-se no mesmo sol vente.

Peso: 6 g F: 182-183°C.

EXEMPLOS 2 A 7

A) Operando como no exemplo 1A mas fazendo variar a cetona de arranque, obtém-se as 3-cloro-piridazinas reunidas no quadro seguinte:

QUADRO 1

1 I I 1 1 1 ι R ι Constantes Físicas i ι 1 ι ι
	-CH₂CH₃ ! F	: 70°C
	1 -CH₂CH₂CH₃ ; F	: 60°_C
	-^C6^H5 1	-

A partir destes e daquele do exemplo 1A fazendo variar as obtém-se seguindo a técnica do exemplo 1B reunidos no quadro 2.

derivados clorados aminas utilizadas, os compostos (II)

QUADRO 2 <’ tr*'

Ex.

SR9Ó1Ó9 A

SR9b136 A

SR9Ó15O A

SR9óISO A :SR9ó187 A

CM3O365

R

-N

Sei

F : °C

-ch₂ch₃

-CH CII₉CH₃

-CH.

-ch₉ch₃

-CH₇CH₂CH₃

-c h. fc> o

-Ν O tr tt

CH CH_ /23

-N ch₉ch₃ ti i>

tr tt

-N O

Monooxalat o1,5H₂O : 195

Nonooxa lato : 195

Dioxalato : 152

Dioxalato : 106

Dioxalato : 143

Dicloridrato _: 235°C

Os compostos de formula (II) foram estudados no que diz respeito às suas propriedades terapêuticas e particularmente no que diz respeito à sua afinidade para os receptores colinérgicos muscarinicos.

In vitro estudou-se a interacção dos produtos (II) com as fixações de alta afinidade da pirenzepina tritiada e da Nmetilescopolamina tritiada respectivamente sobre as membranas do hipocampo do rato e do músculo liso do ileon de cobaio

-12Metodologias

A) Pesquisa de uma afinidade para o receptor colinérgico muscarinico do tipo

A interacção das moléculas com os receptores muscarinicos do tipo Μ,] foi estudada medindo in vitro sobre o homogeneizado do hipocampo do rato, a deslocação da pirenzepina titriada ( Z7 ^JH J PZ) dos seus sítios de fixação específica. As aliquotas (100 /il ) de um homogeneizado de hipocampo de rato a 5% ( P/v ) num tampão Na₂HP0ij ( 50 mH, pH 7,40 ) , são incubados 2 h a 4°C em presença de 7 7 PZ (76 Ci/mmole;

nM final) e de concentrações crescentes dos produtos a estudar. 0 volume final é de 2 ml. A reacção para-se por centrifugação 10 mn a 50.000 xg..Após decantação e lavagem dos depósitos, a radioactividade fixada é contada por cintilação líquida. A fixação não específica é determinada em presença de 10 /iM de sulfato de atropina. A concentração inibitória 50 (ΟΙ,-θ) é determinada graficamente.

(Ref, : Watson J.D., Roeskoe W.R. e Yamamura H.I., Life Sei . , 3 1 . 2019-2029, 1 982 ) .

B) Pesquisa de uma afinidade para o receptor colinérgico muscarinico do tipo M .

A interaeção com os receptores muscarinicos do tipo ^m2 foi estudada medindo in vitro sobre um homogeneizado de músculo liso de ileon de cobaio, a deslocação da N-metil3

-escopo1amina titriada ( í H J NMS ) dos seus sítios de fixação específicos. As aliquotas ( 50/ul ) de um homogeneizado de músculo liso de cobaio a 0,625% (P/v) num tampão HEPES (20 mM) contendo NaCl (100 mM) e MgCl₂ (10 mM) (pH final : 7,5). são incubados 20 mn a 30°C em presença de NMS ( 85 Ci/mmole ; 0,3 nM final) e de concentrações crescentes em produtos a testar. 0 volume final é de 1 ml. A reacção para-se por centrifugação 5 mn a 15,000 xg. A fixação não específica é determinada em presença de 10 /jM de sulfato de atropina.

-13(Ref. : Hammer R.

Berrie C.P., Birsall N.I.M.,

Burgen

A.S.V. e Hulme E.C., Nature. 283- 90-92, 1980

Hulme E.C._f Birsdall. N.I.M._; Burgen A.S.V. e Metha P.₍Mol. Pharmacol.. 14. 737-750. 1978).

Resultados quadro 3 indica as afinidades dos produtos do invento para os receptores e . Os resultados são expressos em concentrações inibitórias 50 por cento (CI quer a concen50 tração (em ,υΜ) que inibe em 50% a fixação do ligando tritiado 3 aos receptores membranares. A ΟΙ^θ de deslocamento da Hpirenzepina representa a afinidade para o receptor M^; a CI de deslocação de ^H-NMS representa a afinidade para o receptor M„ .

Além disso na 3^a-coluna indica-se a relação r entre as ,M₂ e M₁ qi do receptor M.

ΟΙ,-θΜ^ e M₁ que exprime a selectividade dos produtos em face

QUADRO 3

Produto ns .

CM 30316

SR 96169 A

SR 96186 A

SR 96150 A

SR 96180 A

SR 96187 A

0,6

0,4

3H-PZ (M1 )

CI50 uM

0,55

3,7

0,06

0,07

3H-NMS	1 1 1 I
(M2 )	1 1	r =
CI50 um! J	M2/M1
100	1 1 1 1 1	182
30	1 1 1 1	8
18	1 1 I 1	30
2.8	1 1 1 1	47
1	1 1 1 1	14
3-5	1 1 1 1 1	9

-14Estes resultados mostram que os com postos segundo o invento apresentam uma forte afinidade para os receptores colinérgicos muscarinicos com uma especificidade para os receptores centrais do tipo M₁ .

Além disso, os compostos de formula (II) foram submetidos a um estudo in vivo.

A pirenzepina (PZ) é um antagonista específico dos ligandos dos receptores colinérgicos muscarinicos centrais A injecção intraestriatal de PZ no rato induz um comportamento rotatório. Estudou-se o antagonismo deste comportamento pelos produtos a estudar.

Os produtos segundo o invento são administrados por via oral apos terem sido solubilizados em água destilada ou postos em suspensão numa solução de goma arábica a 5% - Os controles são realizados por injecção do solvente puro nas mesmas condições.

Os animais utilizados são ratos fêmeas (Swiss. CD 1. Charles River. France) de peso corporal entre 25 e 30 gramas.

A pirenzepina é posta em solução num tampão fosfato, o pH da solução é 6.

Os produtos a estudar ou os seus solventes são administrados por via oral sob um volume de 0.4 ml para 20 g de peso corporal, 4 horas antes da injecção directa de pirenzepina na dose de 1 /ig de produto em /jl de solvente no músculo estriado direito do rato, segundo o método descrito por P. Worms e col. em Psychopharmaco1ogy 1987 93 489-493-15-

número de rotações contralaterais (sentido oposto ao lado da injecção) foi contado durante três períodos de 2 minutos apòs injecção de pirenzepina : minutos 2 a 4, 8 a 10 e 13 a 15- Cada tratamento comporta 10 animais por dose. Para cada tratamento, calcula-se o número total de rotações e a percentagem de antagonismo em face do lote controle .

No quadro 4 reunem-se os resultados obtidos com os produtos de fórmula (II) administrados por via oral na dose de 3 mg/kg de peso corporal.

QUADRO 4

Produtos ηδ .

' CM 30316 ! SR 96169 A

I ! SR 96186 A 1 I I

J SR 96150 A ! SR 96180 A

I

I ! SR 96187 A

Teste t de Student Ρ < 0,05 P < 001 %

inibição das rotações PZ 3 mg/kg p.o.

- 20%

- 46%

- 41%

- 49%

- 38%

- 37%

-16Por fim os compostos de fórmula (II) não manifestaram nenhum sinal de toxicidade nas doses em que eles são activos.

Deste modo os compostos (II) podem ser utilizados enquanto medicamentos em todos os casos em que se manifesta um déficit colinérgico cortical particularmente para o tratamento dos síndromas degenerativos ligados à senescência e particularmente aos problemas de memória e as demências senis.

Em consequência segundo um outro dos seus aspectos_t o presente pedido diz respeito às composições farmacêuticas contendo pelo menos um dos compostos de fórmula (II) ou um dos seus sais enquanto ingrediente activo.

Nas composições farmacêuticas do presente invento para administração oral, sublingual, transdermica ou rectal, os ingredientes activos de formula (II) em cima podem ser administrados sob forma unitária de administração, em mistura com os suportes farmacêuticos clássicos especialmente nos seres humanos para o tratamento das demências senis. As formas unitárias de administração apropriadas compreendem as formas por via oral, tais como os comprimidos, as gélulas_; os pós, os granulados e as soluções ou suspensões oraiSj as formas de administração sublingual e bucal, as formas de administração subcutânea, intramuscular ou intravenosa e as formas de administração rectal.

Com o fim de obter o efeito desejado, a dose de principio activo pode variar entre 20 e 500 mg por d i a .

Cada dose unitária pode conter de 5 a 200 mg de ingrediente activo em combinação com um suporte farmacêutico. Esta dose unitária pode ser administrada 1 a 4 vezes por dia -17-

Desde que se prepare uma composição sólida sob forma de comprimidos, mistura-se o ingrediente activo principal com um veículo farmacêutico tal como a gelatina, o amido, a lactose, o estearato de magnésio, o talco, a goma arábica ou análogos. Pode-se envolver os comprimidos de sacarose ou de outas mate'rias apropriadas ou ainda se podem tratar de tal modo que eles tenham uma actividade prolongada ou retardada e que eles libertem de um modo contínuo uma quantidade predeterminada de princípio activo.

Obtém-se uma preperação em gélulas misturando o ingrediente activo com um diluente e deitando a mistura obtida nas gélulas moles ou duras.

Os pós ou os grânulos dispersíveis na água podem conter o ingrediente activo misturando com os agentes de dispersão ou os agentes molhantes, ou os agentes para pôr em suspensão como a po1ivini1 pirrolidona , do mesmo modo com os edulcorantes ou os correctores de gosto.

Para uma administração rectal, recorre-se a supositórios que são preparados com os ligantes fundindo à temperatura rectal, por exemplo manteiga de cacau ou po1ieti1enoglicóis.

Para uma administração parenteral utiliza-se suspensões aquosas, soluções salinas isoUnicas ou soluções estéreis e injectáveis que contêm os agentes de dispersão e/ou os humectantes farmacologicamente compatíveis por exemplo o propi1enoglicol e o buti1enoglico1 .

princípio activo pode ser formulado igualmente sob forma de microcapsulas . eventualmente com um ou vários suportes ou aditivos.

A título de preparação galénica pode-se preparar as gelulas contendo:

Princípio activo 0,010 g

Lactose 0,050 g

Estearato de magnésio 0,005 g misturando intimamente os ingredientes em cima, e deitando a mistura nas gelulas de gelatina dura.

Claims

R _ EIVINDIC A _Ç Ó_ E S ia._ Processo para a preparação de uma composição farmacêutica, caracterizado por se misturar derivado de 5-alquil piridazina de formula:

(II) em que R₁ representa um grupo alquilo ou um grupo fenilo ; R£ e representam independentemente um grupo alquilo C^-C^ qu ainda R
2 θ R^ considerados com o atomo de azoto ao qual eles estão ligados constituem um grupo morfolino, ou um dos seus sais farmaceuticamente aceitáveis com um veiculo apropriado, destinadas a combater os estados patológicos ligados a um déficit colinergico cortical.

23.- Processo para a preparação de composições farmacêuticas usadas para o tratamento dos estados patológicos ligados a um déficit colinergico cortical, caracterizado por consistir em utilizar como princípio activo um derivado de 5-alquil piridazina de formula:

em que R₁ representa um grupo alquilo C^_c^ ou um grupo fenilo R2 e R^ representam independentemente um grupo alquilo ou ainda R^ ^e ^3 considerados com 0 átomo de azoto ao qual eles estão ligados constituem um grupo morfolino, ou de um dos seus sais farmaceuticamente aceitáveis com um veículo apropriado destinadas a combater os estados patológicos ligados a um déficit colinergico cortical,
3^a- - Processo de acordo com a reivindicação caracterizado por as composições farmacêuticas serem utilizadas para o tratamento dos sindromas degenerativos ligados a senescência.
4S. - Processo de acordo com a reivindicação 1 2 ou 3 , caracterizado por as composições farmacêuticas estarem sob a forma de doses unitárias contendo de 5 a 200 mg do composto de formula (II) em mistura com um excipiente farmacêutico.
5^a- - Processo para a preparação de derivados 5-alquil piridazina de fórmula:

na qual representa um grupo alquilo C ₁ -C^ ou um grupo fenilo; R^ e R representam independentemente um grupo alquilo r _c ou ainâa R„ e R_o considerados com o átomo de azoto ao H 4 2 3 qual eles estão ligados constituem um grupo morfolino_; ou um dos seus sais farmaceuticamente aceitáveis, caracterizado por se fazer reagir uma amina de formula h₂n-ch₂-ch₂-n^ (D

-2 1 na qual R^ e R3 são tal como definido anteriormente com um derivado clorado de fórmula:

R

N- N (2) na qual R é tal como definido anteriormente por aquecimen1 s to entre 100 e 150 C com um grande excesso de amina (1) even tualmente em presença de cloreto de amonio.