PT88568B

PT88568B - Processo para a preparacao de derivados de sacaridos

Info

Publication number: PT88568B
Application number: PT88568A
Authority: PT
Inventors: Ingolf Macher
Original assignee: Sandoz Sa
Priority date: 1987-09-23
Filing date: 1988-09-21
Publication date: 1992-11-30
Also published as: ZA887161B; FI884345A0; MY103552A; AU2278588A; DE3731953A1; FI89494B; HU201559B; KR970005346B1; IE63517B1; JP2744912B2; IE882859L; PL157779B1; ATE102213T1; JPH01121295A; KR890005138A; DK525588D0; DE3888066D1; FI884345L; DE3888066T2; HUT50193A

Description

A invenção compreende os compostos de fórmula I

na qual ^2 ^e ^'3 ^P³⁷®³®¹¹^³¹¹¹ independentemente acilo eventualmente substituído sob a forma livre ou sob a forma de sal.

A estrutura do anel tem a configuração de^-D-glueopiranose.

acilo preferivelmente é alquiloarbonilo com ao todo 4 a 20, de preferência, 12 a 16, e especialmente com 14 átomos de carbono, o qual pode eventualmente ser monossubstituído na posição 3 por hidroxi ou aciloxi, pelo que a parte acilo do aciloxi tem de preferência o significado acima indicado como preferido para o acilo e o átomo de carbono na posição 3 pode então apresentar a configuração K ou S. Uos compostos correspondentes de fórmula I, Rj, Rg ® ^3 P°áem portanto apresentar a forma não quiral ou uma configuração R ou S. Quando estes apre sentam a forma quiral á preferível apresentarem a configuraA configuração permanece inalterável quando se efecuam os processos descritos na presente memória, nomeadamente, quando se usam compostos R,S ou racemicos como material inicial, obtêm-se os correspondentes compostos R,S ou respectivamente os compostos racémicos.

Os grupos acilo são preferivelmente substituídos.

substituinte preferencial do acilo é o grupo hidroxi.

Rp Rg e R^ são de preferência idênticos.

Um sub-grupo de compostos de fórmula I é formado por compostos de fórmula I, na qual R·^, Rg e R^ são referidos para a fórmula I como a condição de Rg e R^ ser idênticos, na forma livre ou sob a forma de sal de adição de ácido. Neste sub-grupo Rj_ pode ou não ser idêntico a Rg e Ry

Um outro sub-grupo de compostos de fórmula I é formado por compostos de fórmula I na qual Rp Rg e R^ são como acima é referido para a fórmula I com a condição de que quando R^ ® 3-hidroxidodeeanoílo ou 3-hidroxi-hexadecanoílo, então pelo menos um dos símbolos Rg e R^ é diferente de dodecanoílo, 3-(R)-hidroxidodeeanoílo ou 3-(R)-hidroxi-dodec-5-cis-enoílo, Num seu sub-grupo Rp Rg e R^ são como acima definido para a fórmula I, com a condição de que R^ seja diferente de 3-hidroxidodecanoílo ou 3-hidroxi-hexadecanoílo e Rg e R^ são diferentes de dodecanoílo, 3-hidroxidodecanoílo ou 3-hidroxi-dodec-5-enoílo.

Ainda um outro sub-grupo de compostos de fórmula I é constituído pelos compostos de fórmula (I) em que Rg e R^ são como acima é definido, para a fórmula (I) e R^ é alquilcarbonilo com 4 a 20 átomos de carbono no total e opcionalmente monossubstituído na posição 3 por hidroxi. Num dos seus sub-grupos, e Rg são alquilcarbonilo com 0 total de 4 a 20 átomos de ⁴

carbono opcionalmente monossubstituído na posição 3 por hidroxi. Num outro dos seus sub-grupos R^, R₂ ^e ^3 são alquilcarbonilo com 0 total de 4 a 20 átomos de carbono opcionalmente monossubstituído na posição 3 por hidroxi. Num dos seus sub-grupos, Rp R₂ e Rg são alquilcarbonilo com 0 total de 4 a 20 átomos de carbono monossubstituídos na posição 3 por hidroxi .

A estrutura dos compostos da invenção é um tanto relacionada com a dos lípidos A das bactérias gram-negativas e do seu pre cursor monosacárido, lípido X, e com a dos compostos referidos, por exemplo, nas seguintes publicações:

Sandos	EP	180 608
1ARP	10	86/05687
Sandoz	10	87/00174

No entanto, antes da data da presente invenção, as glucosaminas 2,3,4-triaciladas nunca antes foram descritas como componentes ou derivados do lípido A. A fórmula muito geral e especulativa referida na pág. 5 da 1ARE 10 86/05687 pode argumentar-se que abarca as glucaminas 2,3,4-triaciladas e 2,3,

4,6-tetraciladas, mas esta invenção não proporciona um método de obtenção de tais compostos, que não ocorrem naturalmente. Os compostos da presente invenção, além disso possuem propriedades farmacológicas particularmente benéficas.

A invenção também proporciona um processo para a preparação de um composto de fórmula I sob a forma livre ou sob a forma de sal compreendendo a despotrecção de um composto correspondente à fórmula II

na qual

R e R| são grupos de protecção e

R’p R.*2 e R^f-j têm os significados acima indicados para Rp R₂ e R^ respectivamente com a condição de que qualquer grupo hidroxi neles presente se encontre sob a forma protegida, e a recuperação do composto de fórmula I resultante sob a for ma livre ou sob a forma de sal.

processo da invenção ê uma reacção de desprotecção. Esta pode ser levada a cabo de acordo com os métodos conhecidos. A desprotecção pode ser efectuada num único passo ou em passos múltiplos sucessivos, dependendo da natureza dos grupos de protecção. Quando os grupos de protecção são grupos hidrogenoliticamente elimináveis tais como benzilo ou trifenilmetilo, a desprotecção pode, por exemplo, ser realizada hidrogenoliticamente, por exemplo, por hidrogenação com paládio num suporte de carvão de madeira.

Os grupos de protecção geralmente usados na química dos sacáridos são indicados como grupos de protecção. R’ pode ser, por exemplo, o grupo trifenilmetilo. Os grupos de protecção R indicados como grupos de protecção para o fosfato ou hidróxi são também geralmente conhecidos, por exemplo, benzilo.

Os compostos da fórmula I resultantes podem ser recuperados a partir da mistura reaccional e purificados de acordo com métodos conhecidos.

Os compostos da fórmula I podem ser recuperados sob a forma livre ou sob a forma de sal. As formas de sal preferidas são, por exemplo, sais com compostos hidrofílicos básicos tais como tris-hidroximetil)-aminometano e L-lisina. A forma de sal pode ser obtida a partir de formas básicas livres de acordo com métodos conhecidos, e vice-versa..

Os compostos usados como materiais de partida podem ser obtidos de acordo com as técnicas conhecidas.

Os compostos de fórmula III podem ser obtidos, por exemplo, acilando apropriadamente os correspondentes compostos de fórmula III

na qual

R e R* são como acima se definiu e

Rp R^ e Rg são hidrogénio ou têm os significados indicados anteriormente para, respectivamente Rp Rg e R^ com a condição de que qualquer grupo hidroxi neles presente esteja sob a forma protegida e com a condição de que pelo menos um dos símbolos R^, R^

e

Rg seja hidrogénio.

A acilação é de preferência realizada a uma temperatura reduzida, por exemplo, a cerca de 4-0. A reacção é de preferência levada a cabo num solvente inerte tal como um hidrocarbonato, por exemplo, cloreto de metilo. 0 agente de acilação pode ser por exemplo, suplementado com diciclo-hexilcarbodiimida e 4-metilaminopiridina.

Os compostos de fórmula III podem ser obtidos, por exemplo, partindo do composto de fórmula IV

por protecção apropriada e substituição dos grupos OH e NH^ nela presentes usando os métodos conhecidos geralmente na qui mica dos sacáridos. A escolha dos grupos de protecção é feita dependendo da posição dos grupos OH e NH₂ correspondentes, en quanto qualquer grupo OH ou, respectivamente, NH₂ que se prevê seja acilado na fase seguintes são deixados desprotegidos. Uma primeira fase de acilação para acilar, por exemplo, o NH₂e/ou um grupo é seguida por uma fase de desprotecção. A fase de desprotecção é ela mesma seguida por uma fase de protecção selectiva deixando um ou mais grupos OH desprotegidos. Subsequentemente, a acilação pode ser realizada, se apropriado, com um outro grupo acilo. A repetição de fases de reacção semelhantes permite a preparação de compostos nos quais os três grupos acilo são diferentes. Na fórmula IV, a configuração do grupo OH na posição 1 é indiferente e a introdução do grupo fosfato conduz aos compostos com a configuração indicada na fórmula III na posição correspondente.

Deverá notar-se que, em qualquer caso, para cada operação de acilação o grupo OH na posição β deve ser protegido desde que não se pretenda acilá-lo. 0 mesmo se aplica também para o resíduo de fosfato, o qual deverá ser previamente protegido para cada fase de acilação. 0 resíduo de fosfato pode ser introduzido, por exemplo, por reacção de um composto organometálico tal como butil-lítio com o composto de fórmula IV ou um seu derivado parcialmente acilado, tendo opcionalmente o grupo hidroxi na posição 6 sob a forma protegida, e adicionando posteriormente, por exemplo, dibenzilfosfocloridrato à mistura reaccional. A reacção com um composto organometélico é realizada preferencialmente no seio de um solvente inerte, por exemplo, num éter cíclico tal como o tetra-hidrofurano. A temperatura reaccional preferida é uma temperatura baixa, por exemplo -50⁵G. 0 solvente é um hidrocarboneto alifático tal como hexano. Os grupos hidroxi do resíduo de fosfato são protegidos, por exemplo, por benzilo.

Tendo em conta que a preparação das substâncias de partida não é especificamente descrita na presente memória, refere-se que estas são conhecidas ou podem ser preparadas de acordo com procedimentos conhecidos ou de forma análoga a procedimentos conhecidos, por exemplo, as maneiras de proceder descritas nos Exemplos.

Os compostos de fórmula I sob a forma livre ou sob a forma de sal farmaceuticamente aceitável, que na presente memória descritiva são designados como compostos de invenção, possuem actividade farmacológica. Eles são portante indicados para uso como produtos farmacêuticos.

Em particular, os compostos da invenção exercem um efeito sobre a resistência antimicrobiana não específica. Isso é evidenciada através dos seguintes testes:

1. Determinação da actividade endotóxica no teste do lisato de amibócitos do caranguejo das holucas.

2. Provocação do choque por endoxinas no rato.

3. Septicémia microbiana em ratos neutropénicos (número de germes por rato, por exemplo, Pseudomonas aeruginosa â 12:

Os compostos da invenção produzem melhorias relevantes no tempo e na taxa de sobrevivência em relação a controlos infectados não tratados com infecções experimentais provocadas por agentes gram(-) (por exemplo, pseudomonas e E. Coli) bem como com infecções provocadas por agentes gram-positivos (por exemplo Staph. aureus) ou leveduras (por exemplo, Candida albicar^ após administração parentérica.

4. Activação do metabolismo oxidativo de neutrófilos de sangue humano.

5. Peste de desobstrução de carbono.

6. Infecção de herpes no rato.

Na infecção experimental provocada por HSV-1, os compostos da invenção produziram melhorias relevantes no que concerna o decurso da doença, o tempo de sobrevivência e a taxa de sobrevivência em relação a controlos não tratados. Estes efeitos são observados após uma única administração i.p. ou s.c. entre os dias 0 ou -1 ou +6.

7. Indução OSE (factor estimulante de colónias)

Os compostos da invenção induzem CSPs em várias proporções no rato pelo que são também observados diferenças tempo-cinéticas nas actividades de CSP podendo tornar-se vantajoso no uso terapêutico.

8. Indução de Interleucina-1 (IL-1).

Os compostos da invenção possuem em várias proporções (em concentrações de 0,1 - 50 ^g/ml) a capacidade de provocar a produção de IL-1 em macrófagos.

9. Indução de tolerância a LPS (endotoxina) (tolerância à letalidade).

Os compostos da invenção fazem aparecer esta tolerância já após uma única administração i.p. de 0,25 mg/rato.

Ratos prétratados (tolerantes) são expostos à acção de LPS com a dose de 0,1 yug de LPS+8 mg de galactosamina/rato i.p. ao fim de tempos variados (1 dia a 3 semanas) seguindo o último tratamento.

Uma maior proporção de animais sobrevive a esta acção da LPS, especialmente após repetidas administrações (3 vezes), em comparação com controlos não pré-tratados.

Além disso, os compostos da invenção possuem actividade anti-inflamatória, especialmente em inflamações não específicas, em inflamações induzidas inmunologicamente e em inflamações provocadas por hipersensibilidade e em reacções alérgicas.

Esta actividade pode ser demonstrada por variados métodos do teste, por exemplo, por investigação da influência sobre a sín tese de prostaglandina in vitro e in vivo. A inibição acen tuada da produção de P©2 provocada por zimosano foi encontrada. A inibição da libertação de PGP^ provocada por LPS pelos leucócitos peritoneais do rato após pré-tratamento com subs10 tâncias ensaiadas é medida in vivo e uma redução acentuada da libertação de PCE₂ é encontrada em comparação com os controlos.

Num outro teste é medida a influência sobre a actividade procoagulante (PCA).

A adição das substâncias ensaiadas reduz a PCA evidenciada por LPS como se verifica ao comparar com o valor do controlo como manifestado por um aumento do tempo de coagulação. 0 pré-tratamento com substâncias ensaiadas resulta semelhantemente numa redução de PCA.

in vivo, a influência do PCA provocada por LPS por leucócitos peritoneais pode ser verificada após o pré-tratamento com a substância ensaiada, A PCA dos leucócitos peritoneais do rato pode ser reduzida após indução de reacção de Schwartzman generalizada e por pré-tratamento com LPS ou com a substância ensaiada respectivamente.

Observe-se uma inibição quase completa da reacção de Schwartzman após prétratamento com LPS ou com a substância teste, reji pectivamente.

Além disso, os compostos de fórmula Ia e III possuem actividade contra tumores, como se demonstra nos testes que se seguem:

1. Indução do factor de necrose de tumores (INF).

2. Teste do melanoma B16F1,

Verificou-se que os compostos da invenção possuem actividade imunoprofilática, a qual se reflecte numa redução do número de metastases do melanoma B116F1 no pulmão. Como teste da actividade terapêutica, os ratos são tratados nos dias 3, 6,

8, 10, 13 e 15 após a inoculação das células do tumor. Também

neste caso se observa redução relevante do número de metástases.

A descrição dos métodos de ensaio farmacológico 1. a 9. acima referidos foram publicados na memória descritiva do Pedido de Patente Da Organização Mundial da Propriedade Industrial W 0 87/00174, a qual se incorpora no presente pedido como referência.

Cs compostos da invenção são pois indicados para uso como moduladores de resistência antimicrobiana não específica, na intensificação sistémica da resposta imune, e na intensificação da imunidade inespecífica. Os compostos da invenção são assim úteis no tratamento ou no tratamento de suporte (isto é, em conjunto com outras formas terapêuticas de suporte ou específicas) de condições associadas com a diminuição da resposta imune e/ou com a diminuição da reacção de supersensibilidade do tipo atrasado e no tratamento de condições em que geralmente é indicada uma modulação de resposta imune. Particularmente, os compostos da invenção são úteis no tratamento ou no tratamento de suporte de condições patológicas baseadas em de· ficiências imunológicas idiopáticas ou em deficiências imunológicas do tipc encontrado em pacientes geriátricos ou em pacientes com queimaduras profundas ou infecções generalizadas. Cs compostos da invenção são úteis no tratamento ou no tratamento de suporte de doenças virais (tais oomo herpes disseminada, varíola progressiva e doenças de varicela disseminadas) e no tratamento da doença de I-Iodgkin e outros tumores malignos. Além disso, os compostos da invenção são indicados para uso na prevenção de choque por endotoxinas, por exemplo, em acidentes, queimaduras e intervenções cirúrgicas, e como agen tes ant i-inf1amatórios.

Para os usos acima indicados a dosagem será evidentemente dependente do composto empregado, do modo de aministração e do

tratamento desejado. Geralmente obtêm-se resultados satisfatórios quando administradas dosagens diárias, ou como uma única administração para se atingir um efeito adjuvante, por exem pio em tratamento de suporte, compreendidas entre cerca de 0,0015 mg/kg até 1 mg/kg de peso corporal do animal. A administração é feita, por exemplo, parentericamente, preferivelmente i.p.. Para mamíferos maiores, uma dosagem diária total encontra-se compreendida no intervalo de cerca de 0,1 mg a cerca de 70 mg, administrada nonvenientemente no caso de dosagem diária em doses dividadas em 2 ou 4 vezes por dia sob a forma de dosagem unitária compreendendo d.esde cerca de 0,025 a cerca de 35 mg dos compostos misturados ou sob a forma de libertação lenta. Uma dosagem única total indicada situa-se no círculo acima de 70 mg do composto.

Tendo em vista a sua actividade imunomodulatória, os compostos da invenção são também indicados para uso como adjuvantes em vacinas. Para tal uso, uma dosagem indicada é desde cerca de 0,5 mg a cerca de 100 mg, preferivelmente cerca de 70 mg administrados no dia da vacinação com a repetição apropriada da mesma dose 2 a 4 semanas depois.

A invenção proporciona portante um método para o tratamento de doenças e infecções como acima se descreve compreendendo a administração de uma quantidade terapêutica efectiva dum composto da invenção a um indivíduo necessitado de tal tratamento.

A invenção, além disso, proporciona composições farmacêuticas que compreendem um composto da invenção em associação com pelo menos uma substância veicular ou diluente farmaceuticamente aceitável; tais composições podem ser preparadas de forma convencional, por exemplo, por mistura com substâncias veiculares ou diluentes convencionais farmacologicamente aceitáveis. Estes podem ser preparados, por exemplo, sob a forma de uma solução injectável ou sob a forma de liposoma.

Particularmente preferido nas indicações anteriores é o composto do Exemplo 1.

A invenção proporciona também o uso de compostos da invenção para a preparação de composições farmacêuticas compreendendo misturar-se o composto da invenção com uma substânciavacularou iSLuente farmaceuticamente aceitável.

A invenção além disso proporciona também os compostos da invenção para uso como fármacos, em particular, para uso como imunomoduladores, como agentes antivirais e como agentes anti-inflamatórios.

Ros exemplos seguintes, os quais ilustram a invenção e não são limitativos, todas as temperaturas são expressas em °C.

Exemplo 1: 2-Desoxi-2-/3- (R)-hicLroxit etradeeanamido7-3,4-di-O-Z3 -(R)-hidroxitetradecanoil7”-°<' -R-glucopiranose-1-f osf ato

ZKp E₂, R^ - 3-(R)-hidroxitetradecanoil7

500 mg de 2-/3-(R)-benziloxitetradecanamido7-3,4-di-0-/3-(R)-benziloxitetradecanoil7-2-desoxi-ô-0-trife.nilmetil- Ύ -D-glucopiranose-l-dibenzil-fosfato são dissolvidos em 150 ml de tetra- hidrof urano/água 4 : 1 e a mistura resultante é hidrogenada sob pressão normal durante 12 horas com 500 mg de paládio em carvão de madeira. A mistura reaccional é filtrada e novamente hidrogenada com 500 mg de paládio em carvão de madeira; esta operação é repetida mais duas vezes (tempo de reacção:

horas). 0 catalisador é separado por filtração e 0 tetra-hidrofurano é eliminado por destilação, a suspensão aquosa é diluída com 10 ml de água e liofilizada. 0 composto indicado em título é obtido:

Pi£ = 0,4- (em clorofórmio/metanol/água/ácido acético) 80 : 25 : 5 : 5)

ZX y = +22° (c = 0,1 em clorofórmio/metanol 3:1).

sal de mono-tri(hidroximetil)aminometano é também obtido.

material de partida prepara-se como a seguir se descreve:

a) A uma solução de 2 g de 2-/3 - (R)-benziloxitetra,decanamido7-2-desoxi-6-0-trifen.ilmetil-D-glucopiran.ose em 270 ml de tetra-hidrofurano arrefecido a -60° são adicionados 2,55 ml de uma solução 1,6 M de butil-lítio em hexano. Após 5 minutos, uma solução de 1,21 g de dibenzilfosforocloridrato em 4 ml de benzeno é adicionada gota a gota à mesma temperatura tal como acima. A agitação é mantida durante 20 minutos à temperatura de -60°, o pl-í ajustado a 7 e o solvente evaporado até à secura. 0 resíduo é cromatografado sem demora (tolueno/acetato de etilo 1:1). Obtém-se 2-/3-(R)-benziloxitetradecanamido7-2-desoxi-6-0-trifenilmetil-<Y -D-glucopiranose-l-dibenzil-fosfato (R_f= 0,47 em tolueno/acetato de etilo 1:1).

b) A uma solução de 1,1 g do composto obtido como se descreveu em a) 1 g de ácido 3-(R)-benziloxitetradecanoico e 40 mg de 4-dimetilaminopiridina em 20 ml de diclorometano arrefecido a 0° são adicionados 619 mg de diciclo-hexilcarbodiimida. Após 30 minutos a mistura reaccional é levada à temperatura ambiente, após 4 horas a solução é filtrada e o solvente evaporado. 0 resíduo é cromatografado em tolueno/éster acético 4 : 1. Obtém-se 2-/3-(R)-benziloxite trade c anamido7- 3,4-di- 0-/3- (R)-benz iloxit e t r ade canoil7-2-desoxi-6-0-trifenilmetil-0( -D-glucopiranose-l-dibenzil-fosfato (R^ = 0,75 em tolueno/acetato de etilo 4:1).

Μ

Exemplo 2: 2- Desoxi- 2-/3- (R)-hidroxitetradecanamido7- 3-0-/3- (R)-hidr oxit e t rade canoi17- 4- 0-t et rade cano il- Oi-D-glucopiranose-l-fosfato /^, R₂ = 3-(R)-hidroxitetradecanoílo; R^ = tetradecanoílp7 obtido o composto indicado em título (R^ = 0,45 em elorofórmio/metanol/água/ácido acético 80 : 25 ϊ 5 : 5) como se descreve no Exemplo 1, a partir de 2-/3-(R)-benziloxitetradecanamido7-3-0-/3-(R)-benziloxitetradecanoíl7-2-desoxi-4-0-tetradecanoíl-6-O-trifenilmetil-^ -B-glucopiranose-l-benzil-fosfato.

material de partida é obtido como se segue:

a) 2,5 g de imidazol e 5,03 g de l,3-dicloro-l,l,3,3-tetra-isopropil-dissiloxano é agitado durante 4 horas a 10° em 65 ml. de dimetilformamida. A solução é adicionada entretanto -10° e sob árgon, a uma solução de 5,45 g de 2-/3-(R)-benziloxitetradecanamido7-D-glucopiranose em 150 ml de dimetilformamida. Após 90 minutos, adicionam-se cerca de 3 ml de metanol, a dimetilformamida é eliminada por destilação, o resíduo é retomado em diclorometano/água, a fase orgânica é seca e submetido a destilação. 0 resíduo é cromatografado em tolueno/acetato de etilo 2 : 1. Obtém-se

2-/3-(R)-benziloxitetradecanamido7-2-de soxi-4,6-0-(1,1,3,3-tetra-isopropildissiloxanilideno)-D-glucopiranose.

(R£ = 0,8 em tolueno/acetato de etilo 1:1).

b) 0 composto obtido como ê descrito na alínea a) é feito reagir com butil-lítio e dibenzilfosforocloridrato como é descrito no Exemplo 1 a). Obtém-se 2-/3-(R)-benziloxitetrade-

canamido7-2-desoxi-4,6-0-(1,1,3,3-tetraisopropildissiloxanilidâho)—b( -D-glucopiranose-l-dibenzil-fosfato.

(R.£ = 0,6 em tolueno/acetato de etilo 1 : 1)

c) 0 composto obtido como é descrito em b) é feito reagir ccm ácido 3-(R)-benziloxitetradecanóico como é descrito no Exemplo 1 b). Obtém-se 2-/3-(R)-benziloxitetradecanamido?- 3- 0-/3- (R)-benziloxit e t r ade cancíl/- 2- de s oxi- 4,6-0-(1,1,3,3-tetra-isopropildissiloxanilideno)--R-glucopiranose-l-dibenzil-fosfato.

(B.£ = 0,6 em tolueno/acetato de etilo 4 : 1)

d) A uma solução arréfecida a -20° de 800 mg do composto obtido como descrito na alínea c) em 4 ml de tetra-hidrofurano anidro adicionam-se gota a gota lentamente 168 ml de cloreto tetrabutilamónio em tetra-hidrofurano, seguidos 30 minutos depois por 6yUl de ácido acético. A mistura reaccional fria é então diluída com 25 ml de diclorometano e extraída com 20 mg de água. A fase orgânica é seca e evaporada. Obtém-se, sem purificação posterior, o

2-/3-(R)-benziloxitetradeeanamido7-3-0-/3-(R)-benziloxitetradecanoílo7-2-desoxi-<^ -R-glucopiranose-l-dibenzil-fosfato.

(R^ = 0,6 em tolueno/acetato de etilo 3 ί 2)

e) 600 mg do composto obtido como se descreveu na alínea d) são dissolvidas em 13 ml de diclorometano anidro e adicionam-se 312 mg de cloreto de tritilo e 290 μΐ de E,E-diisopropiletilamina à temperatura ambiente. Após 18 horas, o solvente é eliminado por destilação e o resíduo é cromatografado em tolueno/acetato de etilo 4 : 1. Obtém-se 2-/3- (R)-benziloxitetradecanamido7-3-G-/3-· (R)-benziloxitet rade c ano í 1ο7~ 2- de s oxi- 6- O-1 ri feni Ime til- °s -D-gl uo opirano εe-1-dibenzil-f o s f at o.

(Γ·£ = Ο,β en tolueno/acetato de etilo 4 > 1).

f) A uma solução de 400 mg do composto obtido como é descrito na anterior alínea e), 69 mg de ácido tetradecanóico e .1.0 yUg de 4-dimetilaminopiridina em 7 ml de diclorometano seco adicionam-se, à temperatura ambiente, 62 mg de H,!T-diciclo-bexiloarbodiimida. k mistura reaccional é filtrada 20 horas depois, o solvente eliminado por destilação e o resíduo é cromatografado em tolueno/acetato de etilo 5:1. Obtém-se 2-23- (R)-benziloxitetradecanamido7-3-C-/3- (p)-benzilQxitetradecanoíl7“2-desoxi-4~0-tetra.decanoíl-3-C-trifenilmetil-of -33-glucopiranose-l-dibenzil-fosfato.

(R_f = 0,75 em tolueno/acetato de etilo 4 : 1).

Exemplo 3: 2-Desoxi-2-/3- (R)-hidroxitetradeca.namid.o7~3,4-di-0-/3- (R)-tetradecanoiloxitetradecanoil7-'¥-D-gl uc OOir-ano s e-1- f o s f at o π i imui i fmnii iti ininwjmtWTWT· prwwwmi /r₃ = 3-(R)-hidroxitetradecanoílo;

R_o, R^ - 3-(R)-(tetradecanoiloxi)-tetraãecanoílo7 composto indicado en título é obtido como foi descrito no Exemplo 1, (P,^ = C,5 em cloroformio/metanol/água 10 : 3 : 0,1), partindo de 2-/3-(R)-henziloxitetradecanoil7-2-desoxi-3,4-di-C-/3-(R)-tetradecanoiloxitetradecsnoil7-Oí -B-glucopiranose-1-dibc-nzil-fosfato.

C material de partida ® obtido do seguinte modo:

a) Uma solução de 2-/3-(R)-benziloxitetradecanamido7-2-desoxi-6-0-trifenilmetil-<^-D-glucopiranose-l-dibenzil-fosfato, ácido 3-(R)-tetradecanoiloxitetradecanóico e 4-dimetilaminopiridina em diclorometano reage com diciclo-hexilcarbodiimida como se descreve no Exemplo 1 b).

Obtém-se o 2-/3-(R)-benziloxitetradecanamido)-2-desoxi»

-3,4-di-0-/3-(R)-tetradecanoiloxitetradecanoil7-6-0-trifenilmetil-θί -D-glucopiranose-l-dibenzil-fosfato.

(R.£ = 0,5 em tolueno/acetato de etilo 9:1).

b) 700 mg do composto obtido como se descreve na alínea a) são dissolvidas em 200 ml de éter dietilico e adicionam-se gota a gota lentamente. A mistura reaccional é neutralizada 2 horas depois de a, reacção se ter iniciado com uma solução saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A fase aquosa é separada e extraída e a fase orgânica é lavada uma vez com 2 ml de água. A fase orgânica é seca sobre sulfato de magnésio e evaporada. 0 resíduo é cromatografado em gel de sílica usando como eluente tolueno/acetato de etilo 4 : 1. Obtém-se 2-/3-(R)-benziloxitetradecanamido7-2-desoxi-3,4-di-0-/3-(R)-tetradecanoiloxitetradecanoil7-o( -D-glucopiranose-1-dibenzil-fosfa.to, (R^ = 0,4 em tolueno/acetato de etilo 4 : 1).

Claims

1&. - Processo para a preparação de derivados de sacáridos de fórmula (I) na qual

Rp P,₉ e R^ representam independentemente acilo eventualmente substituído, sob a forma livre ou sob a forma de sal, caracterizado pelo facto de compreender desproteger-se um correspondente composto de fórmula (II) na qual

R e R’ são grupos de protecção e

R*p R'₂ s R’2 têm as significações indicadas acima para R·,, e R^, respectivamente, com a condição de que qualquer grupo hidroxi neles presente se encontre sob a forma protegida e se recuperar o composto de fórmula I resultante sob a forma livre ou sob a forma de sal.

2^ê. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de 2-desoxi-2-/3-(R)-hidroxitetradecanamido7-3,4-di-0-/3-(R)-hidroxitetradecanoíl7“^í¥~I⁾“g¹ucopiranose-1-fosf ato sob a forma livre ou sob a forma de sal, caracterizado pelo facto de compreender desproteger-se um correspondente composto de fórmula (II), em que

R¹, R” e R”’ são como se definiu na reivindicação 1 e

R’ji, R’₂ θ R’^ são 3-(R)-hidroxitetradecanoilo com o grupo hidroxi sob a forma protegida e se recuperar o composto resultante sob a forma livre ou sob a forma de sal.

3-. - Processo de acordo com as reivindicações 1 ou 2, para a preparação do composto de fórmula I de acordo com a reivindicação 1, sob a forma livre ou sob a forma de sal, caracterizado pelo facto de compreender desproteger-se 2-/3-(R)-bensiloxit etrade c anonamido7-3,4-di-0-/3-(R)-benz iloxit e t radecanoil7-2-d.esoxi-6-0-trifenilmetil-e¥-D-glucopiranose-l-dibenzil-fosfato e se recuperar o composto resultante sob a forma livre ou sob a forma de sal.

4^ê. - Processo para a preparação duma composição farmacêutica caracterizado pelo facto de se misturar um composto de fórmula I ou um seu sal aceitável do ponto de vista farmacêutico, preparado de acordo com as reivindicações 1 a 3, de preferência, numa quantidade compreendida entre aproximadamente 0,1 e 90 7 em peso, com um veículo ou um diluente aceitável do pon21 to do vista farmacêutico.

5^S. - Processo para modular resistência antimicrobiana não «specífica, para sistemicamente intensificar a resposta imune pera intensificar a imunidade não específica, para tratar con dições associadas com resposta imune diminuída, para tratar condições em que se indica geralmente uma modulação da resposta imune, para tratar doenças provocadas por virus, a doença de Hodgkin e outros tumores malignos, para evitar o choque provocado por endotoxinas ou para tratar a inflamação em seres humanos que necessitam esse tratamento, caracterizado pelo facto de se administrar aos referidos pacientes uma dose diária duma substância activa de fórmula I, preparada de acordo com as reivindicações 1 a 3, de preferência compreendida entre aproximadamente 0,1 e 70 miligramas, vantajosamente dividida em doses unitárias, administradas 2 a 4 vezes por dia ou sob a forma d® composições farmacêuticas de acção retardada.