PT87380B

PT87380B - Processo de preparacao de inibidores de esteroide 5-alfa-reductase e dos seus intermediarios

Info

Publication number: PT87380B
Application number: PT87380A
Authority: PT
Inventors: Dennis Alan Holt; Mark Alan Levy; Brian Walter Metcalf; Conrad John Kowalski; Ann Marie Tickner
Original assignee: Smithkline Beecham Corp
Priority date: 1987-04-29
Filing date: 1988-04-29
Publication date: 1992-08-31
Also published as: HU201956B; DK226888D0; AU1516588A; ZW4488A1; NO881857L; HU906229D0; FI882007A0; IL86185A; HUT47131A; CN1079747A; EP0289327A2; DK175522B1; PH25963A; ES2039278T3; CA1327352C; PT87380A; DK226888A; IL86185A0; AU615439B2; HK22695A

Description

Processo de preoaração de inibidores de esteróide 5-c<-redutase e dos seus intermediários para que

SMITHKLINE BECKMAN CORPORATION, preten de obter privilégio de invenção em Po.r tugal.

RESUMO presente invento refere-se ao processo de preparação de compostos de fórmula

na qual:

□ anel A tem até duas ligaçães duplas;

os aneis B, C e D têm ligaçães duplas opcionais, indicadas pelas linhas a tracejado, desde que o anel C não tenha uma dupla ligação em Cg-C^ quando o anel B tiver uma dupla ligação . Λ'.,·.

i ,í .

em C^-Cg	• 9
M	é	0 ou Ξ;
Z	é	(CH₂)_n e	n é	0-2;
X	é	H, Cl, F,	Br,	, I, CF^ ou alquilo C^_g;
Y	é	H, CF^, F	ou	Cl, CH^ desde que Y seja H quando não

existe ligação dupla em C,--C₆;

67'637

SKB CASE 14380

-2R^X é H ou alquilo ^cj_g»

2

R está ausente ou presente como H ou CH^ desde que R esteja ausente quando o carbono ao qual está ligado tenha uma dupla ligação;

R^X8 está ausente quando existe uma ligação dupla em ^4“^C5» ^C5^C6 ^{ou C}5”^C10 ^{ou est}^ presente como um hidrogénio alfa; b íPê (D oC-hidrogénio, oè-hidroxilo ou c<-acetoxi e/ou (a)

I 4 β-W-C-R⁴ na qual W é uma ligação ou alquilo r

^Ul-12 e

R⁴ é (i) hidrogénio, (ii) hidroxilo, (iii) alquilo (iv) hidroxialquilo ^c ₁_g>

(v) alcoxi C. _Q,

6 -L⁰ 5 6 (vi) NR R , onde R e R são selecciona dos independentemente um do outro de entre hidrogénio, alquilo C^__g, cicloalquilo C^_₆, fenilo; ou

R^ e R⁸ em conjunto com o azoto ao qual estão ligados representam um anel saturado com 5-6 membros, com preendendo até um outro heteroátomo seleccionado de entre oxigénio e azoto, ou

7 (vii) 0R , onde R é hidrogénio, metal alcalino, alquilo ou benzilo (b) /3-Alq-OR⁸, onde Alq é alquilo C^ e R⁸ é

(i) fenil(alquilC₃_^)carbonilo,

637

SKB CASE 14380

-3(2) (?) (ii) (iii) (iv) (v) (cicloalquilC₅_₁₀)carbonilo, benzoílo, (alcoxiCj._g) carbonilo, amino ou amino substituído por alquiloC^g, carbonilo, hidrogénio ou alquiloC^_g, ou =CH-W-OR , onda W é uma ligação _4 _8 ,. . .

e R e R têm o mesmo sigmfié também (vi) (vii) =CH-W-C0-R⁴ _ _4 _8 ou alquilo ^{6 R s} ” cado que anteriormente e R^ ou (alquilC₄_2g)carbonilo1 hidrogénio

	onde a ligação a tracejado substitui o 17-ot-hi-
	drogénio,
(4)	©{.-hidrogénio e β-NHCOR^, onde R^	é alquilo
	Ci a ou /3-Nr5r6 onde R^ e R^ têm	os mesmos
	significados que anteriormente,
(5)	c<-hidrogénio e /i-ciano,
(6)	ot-hidrogénio e /3-tetrazolilo ou
(7)	ceto;
ou de um seu	sal farmaceuticamente aceitável.

processo compreende:

A) tratar com uma base orgânica, uma fosfina, um compos. to de paládio (II) e um álcool alquílico C^_g e em seguida adi. cionar monóxido de carbono a um composto de fórmula:

φ 67 '637

SKB CASE 14380

B) tratar com haleto de ácido ou com um poli-haleto de ácido, um composto de fórmula:

e em seguida tratar o composto resultante com um reagente de alquil-litio seguido por um agente de carboxilação, ou com um catalisador de paládio na presença de base, um alcanol e monóxido de carbono.

Φ 67 637

SKB CASE 14380

-5MEMORIA DESCRITIVA

Campo do Invento presente invento refere-se a determinados novos análogos acrilato substituídos de compostos esteróides sintéticos, a composições farmacêuticas que contêm estes compostos e a métodos para usar estes compostos para inibir a esteróide 5-o(-redutase de mamífero.

Descrição da Arte Anterior

-^r A classe de hormonas esteróides conhecida por androgénios é responsável pelas características físicas que diferenciam os machos das fêmeas. De entre os vários órgãos que produzem androgénios, são os testículos que produzem estas hormonas em maior quantidade. Centros do cérebro exercem controlo primário sobre o nível de produção de androgénio. Surgem numerosas manifestações físicas e estados de doença quando o controlo ineficaz da produção tem como resultado uma produção excessiva de hormona androgénio. Por exemplo, a acne vulgaris, a seborreia, o hirsutismo feminino e a hipertrofia prostática benigna estão correlacionadas com níveis elevados de androgénio. Além disso, a incidência da calvície típica do macho tem sido associada a níveis elevados de androgénio.

A testosterona é o principal androgénio segregado pelos testículos e é o principal esteróide androgénico no plasma de machos. Sabe-se agora que os androgénios reduzidos em 5-o{ são as hormonas activas em alguns tecidos como a próstata e a glâjn dula sebácea. A testosterona em circulação serve, assim, como pró-hormona para di-hidrotestosterona (DHT), o seu análogo redu, zido em 5-o^ nestes tecidos mas não noutros como músculo e tes. tículo. A esteróide-5-o(-redutase é uma enzima dependente de NADPH que converte testosterona em DHT. A importância desta enzima no desenvolvimento do macho foi drasticamente aumentada com a descoberta de uma deficiência genética da esteróide-5-o<-redutase nos machos hermafroditas. Imperato-McGinley, 3., et al., (1979), J. Steroid Biochem. 11:637-648.

637

SKB CASE 14380

-60 reconhecimento da importância de níveis elevados de DHT em muitos estados de doença estimulou os esforços para sintetizar inibidores desta enzima. As estruturas de muitos inibidores de esteróide 5-«<-redutase conhecidos são apresentadas na Tabela 1.

Tabela 1

Inibidores da 5- e(.-redutase

Kj=l,lxlO“^M Hsia e l/oight (Reversível) 1973

1x10“⁶M (Irreversível)

Robaire, et al,,

1977

3,5xl0⁸ (Irreversível)

5x10~⁹M (Reversível)

Blohm, et al.,

1980

Liang, et al,,

1983 '637

SKB CASE 14380

1,25x10“⁶M Petrouj, et al., (Irreversível) 1981

primeiro inibidor descrito foi o ácido 17-/3-carboxílico (1) por Hsia e Voight em 1973. 3. Invest. Dermat. 62:224-227.

secoesteróide (2) foi o inibidor descrito a seguir e é também dtil como marcador de afinidade para 5-°t-redutase. Robaire,

B., et al., (1977), 3. Steroid Bjochem. 8:307-310. A diazoceto na (3) foi descrita como sendo um inibidor potente, dependente do tempo, da esteréide-5-ot-redutase. Blohm, T. R., et al. (1980), Biochem. Biophys. Res. Comm. 95:273-280; Patente dos Estados Unidos 4 317 817, 2 de Março de 1982. 0 composto (4) é exemplar de um grupo de inibidores 4-aza-esteróide da esteréide-5-ci-redutase descrito na Patente dos Estados Unidos 4 377 584 concedida a 22 de Março de 1983, e em Liang, T., et at. (1983), 3. Steroid Biochem. 19, 385-390. 0 6-metileno-esteróide (5) também tem sido apresentado como sendo um inactiva dor, dependente do tempo, da esteréide-5-ot-redutase. Petrow, V. et al. (1981), Steroids 38:121-140.

Também têm sido descritos outros inibidores da esteráide-5-«í-redutase. A Patente dos Estados Unidos 4 361 578, concedida a 2 de 3unho de 1986, descreve uma classe de inibidores da enzima homoesterfiide. A Patente dos Estados Unidos 4 191 759 revela amidas de 17/2>-carboxi-4-androsteno-3-ona que são activas como inibidores de 5-ot-redutase. As Patentes 3aponesas 360146855-A e 360116657-A revelam vários derivados da anilina possuindo numerosas actividades, incluindo a actividade inibidora da 5-ol-redutase. A Patente 3aponesa 360142941-A revela cetonas substituídas com fenilopossuindo actividade inibidora da 5-cx.-redutase e a Patente Europeia EP173516-A revela várias amidas substituídas com fenilo possuindo actividade semelhante. Shiseido referiu derivados do terpeno que são inibidores activos '637

SKB CASE 14380

-8da esteróide 5-οζ-redutase. Patente Japonesa N3. 059053417-A.

Tem sido descrita a carbonilação de derivados substituídos de androsteno, catalisada por paládio. Cacchi, S., et al., (1985), Tet. Letters 26:1109-1112. No entanto não é revelada nenhuma actividade biológica dos compostos sintetizados.

A preparação de esteróides 3-cloro-3,5-dienos foi descri, ta por Deghenghi, R. e R. Gaudry, Canadian J. Chem. (1962) 40: :818-820.

Foi referida a utilização de tri-haletos fosforosos para converter Δ.^-3-cetonas esteróides nos correspondentes 3-halo-3,5-dienos. Ross, J.A. e M. D. Martz, 0. Orq» Chem. (1964) 29:2784-2785.

Sumário do Invento presente invento baseia-se na descoberta de que o esterói. de 5-<-redutase é inibido por certos análogos acrilato substi. tuídos de compostos esteróides sintáticos. Os compostos são inibidores potentes da enzima.

0s compostos preferidos do presente invento e os compostos usados nas composições farmacêuticas e nos métodos do invento incluem:

ácido 2 0- c<-( hidroxi me til)-5- c<-pregna-3-eno-3-carboxlli. co, ácido N,N-diisopropil-5-c<-androsta-3-eno-17/2-carboxami da-3-carboxílico, ácido N,N-diisopropil-androsta-3,5-dieno-17/3 -carboxamida-3-carboxílico, ácido 17β -(N,N-diisopropilcarboxamida)-4-fluoro-5-o</-ari drosta-3-eno-3-carbox£lico, ácido 20-o<-(hidroximetil)-4-fluoro-5- oi-pregna-3-eno-3-carboxílico, ácido 20- oí-(hidroximetil)-A-nor-5- o(-pregna-l-eno-2-ca.r boxílico, ’637

SKB CASE 14380

-9ácido 17/i-N,N-diisopropilcarboxamida-5- -androsta-1,3-dieno-3-carboxílico, ácido N-.t-butil-androsta-3,5-dieno-17/3-carboxamida-3-carboxílico _t ácido N,N-diisopropil-5-Λ-androsta-2-eno-17/3-carboxamida-3-carboxílico, ácido N,N-diisopropil-androsta-2,4-dieno-17^3 -carboxamida-3-carboxílivo , ácido N,N-diisopropil-5-ct-androstano-17/3-carboxamida-3^-carboxílico, ácido N,N-diisopropil-estra-3,5(10)-dieno-17/3-carboxamida-3-carboxílico, ácido N,N-diisopropil-estra-3,5-dieno-17/2 -carboxamida-3-carboxílico, ácido 17 /3-(N,N-diisopropilcarboxamida)-androsta-3,5,ll-trieno-3-carboxílico, ácido 17 /3-(N,l\l-diisopropilcarboxamida)-androsta-3,5-die no-3-tiocarboxílico, ácido 17/3-(N-t-butilcarboxamida)-androsta-3,5,ll-trieno -3-carboxílico, e ácido 17-(N-t-butilcarboxamida)-androsta-3,5-dieno-3-tiocarboxílico.

Num outro aspecto do invento proporcionam-se novos inte£ mediários e novos processos úteis para preparar os compostos inibidores da 5- ot-redutase agora inventados.

invento proporciona também um método para inibir a actividade da 5-=<-redutase em mamíferos, incluindo os humanos, que compreende administrar a um sujeito que dele necessite, uma quantidade eficaz de um composto inibidor da 5- ot-redutase, do presente invento.

Estão incluídas no presente invento composições farmacêu ticas compreendendo um portador farmacêutico e compostos úteis nos métodos do invento.

*6 37

SKB CASE 14380

-10Descrição Detalhada do Invento

Os compostos agora inventados que inibem a 5-oó-redutase, têm a seguinte Fórmula (I):

na qual:

o anel A tem até 2 ligações duplas;

os aneis B, C e D têm ligaçães duplas opcionais onde indicado pelas linhas a tracejado, desde que o anel C não tenha uma ligação dupla em ^g”C^^ quando o anel B tem uma ligação dupla em C^—C_Q;

M é 0 ou S ;

Z é (CH₂)_r e n é 0-2;

X é H, Cl, F, Br, I, CF^ ou alquilo C^_^;

Y é H, CF^, F ou Cl, CH^, desde que Y seja H quando não existe ligação dupla em C^-C^;

R¹ é H, ou alquilo >

2

R está ausente ou presente como H ou CH^, desde que R esteja ausente quando o carbono ao qual se liga tenha uma ligação dupla;

r!G está ausente quando existe uma ligação dupla em ^C4“^C5’ ^C5^C6 ^{0U C}5-10’ ou está presente como hidrogénio alfa, e (1) o(.-hidrogénio, οΖ-hidroxilo ou ©{-acetoxi e/ou *6 37

SKB CASE 14380 (a) ₀

I 4

A-W-C-R⁴ onde W ê uma ligação ou alquilo ^e é (i) hidrogénio, (ii) hidroxilo, (iii) alquilo C^_g, (iv) hidroxialquilo 6·^_θ, (v) alcoxi (vi) ^J-Nr5r6, onde R^ e R⁸ são seleccio nados independentemente um do outro de entre hidrogénio, alquilo ^_θ, cicloalquilo fenilo; ou R^ e

R⁶ em conjunto com o azoto ao qual se ligam representam um anel satura do com 5-6 membros, compreendendo até um outro heteroátomo selecciona do de entre oxigénio e azoto, ou

7 (vii) OR , onde R é hidrogénio, metal al.

calino, alquilo benzilo, ou (b) β-Alq-OR⁸ onde Alq é alquilo e R⁸ é (i) fenil(alquil C^^carbonilo, (ii) cicloalquil C₅_^_Q carbonilo, (iii) benzoílo, (iv) alcoxi carbonilo, (v) amino ou amino substituído com al- quil carbonilo, (vi) hidrogénio ou (vii) alquilo C^~g, =CH-W-C0-R⁴ ou =CH-W-0R⁸, ή g ou alquilo ^Cl-12 ^{e R e 8}cado que anteriormente e R onde W é uma ligação têm o mesmo signifi também é hidrogénio ou alquil C₁__2Q carbonilo;

(2) *637

SKB CASE 14380

-12(3)

onde a linha a tracejado substitui o 17c<-hidro génio, (4) ol-hidrogénio e /â-NHCOR^ onde R^ é alquilo

6 5 6 ^C1 12 ^ou /^“^{WR R} °nde ^{R e R} 0 mesmo significado que anteriormente, (5) ot-hidrogénio e /j-ciano, (6) oi-hidrogénio e [i-tetrazolilo ou (7) cetoj ou um seu sal farmaceuticamente aceitável;

excepto compostos em que:

anel B

CH₃ e R³ anel B R¹ tenha ligaçães duplas em C^-C^ e C^-C^, R seja seja ceto;

ligação dupla a não ser que C, ,

1-n’

3’^C4* C₅-C₆ e C₁₆-C₁₇, em se significam

C^-C^, r! seja CH^ e especifique em contrá uma cadeia de hidrotenha ligaçães duplas em C seja CH^ e R³ seja COOCH^; e anel B tenha uma

R³ seja COCHj.

Como aqui usados e rio, alquilo C^__nl e alq carboneto linear ou ramificada possuindo 1 a n’ carbonos e Alq significa uma cadeia de hidrocarboneto linear ou ramificada possuindo 1 a 12 carbonos.

De entre os compostos de Fórmula (i), os compostos prefe ridos são aqueles em que Z é -CHg-.

De entre os compostos agora inventados preferem-se também os que possuem a Fórmula (II):

Έ37

SKB CASE 14380

(II) na qual:

o anel A tem até duas ligações duplas;

os aneis B e C têm ligações duplas opcionais onde indica do pelas linhas a tracejado;

M é 0 ou S;

(a) (b)

X é H ou halo, e

R^é H ou alquilo ;

está ausente quando existe uma ligação dupla em C^-C^, ou ou está presente como hidrogénio alfa, e

C(CH_;?)CH₂OR²⁰ onde R²° é H ou alquilo C^ ou C0NR²^R²² onde R²^ e R²² são independentemeri te um do outro H ou alquilo

Em particular, preferem-se os compostos de Fórmula (li) em que o anel A tem uma ligação dupla em C^-C^.

De entre os compostos agora inventados preferem-se também os que possuem a Fórmula (III):

‘637

SKB CASE 14380

(III)

2 13 na qual R , R , R e as linhas a tracejado do anel B são como na Fórmula (II) e M ê 0 ou S.

Adicionalmente, to preferem-se os que de entre os compostos do possuem a Fórmula (IV):

presente inven-

(IV)

2 j.

na qual R^x, R e R^x são definidos como para a Fórmula (li) e M é definido como para a Fórmula (I).

Os compostos de Fórmula (la) estão incluídos nas composições farmacêuticas do invento e são usados nos métodos do in vento,

X

Y '637

SKB CASE 14380

-15na qual:

o anel A tem até 2 ligações duplas?

os aneis B, C e D têm ligações duplas opcionais onde indicado pelas linhas a tracejado, desde que o anel C não tenha uma ligação dupla em Cg-C^^ quando o anel B tem uma ligação dupla em C_?-Cg;

M é 0 ou S;

Z é (CH„) e n é 0-2;

ζ n

X é H, Cl, F, Br, I, CF^, ou alquilo C^^g;

Y é H, CFg, F ou Cl, CHg, desde que Y seja H quando não existe ligação dupla em Cg-Cg;

R·¹· é H ou alquilo Cj__g >

2

R está ausente ou presente como H ou CHg, desde que R esteja ausente quando o carbono ao qual está ligado tem uma ligação dupla; e rIQ está ausente quando existe uma ligação dupla em

C^-Cg, Cg-Cg ou Cg-C^g ou está presente como hidrogénio alfa e (1) ©(.-hidrogénio, «X-hidroxilo ou c^-acetoxi e/ou

p-W-C-FT
onde W R⁴ ê	é uma ligação	ou alquilo C^ e
(i)	hidrogénio,
(ii)	hidroxilo,
(iii)	alquilo C^g,
(iv)	hidroxialquilo	^Cl-8»
(v)	alcóxi C^ θ,
(vi)	NR⁵R⁶, onde R⁵	e R^ são seleccio-
	nados independentemente um do outro

*657

SKB CASE 14380

-16de entre hidrogénio, alquilo ^cj__g> cicloalquilo fenilo; ou R⁵ e r6 em conjunto com o azoto ao qual estão ligados representam um anel saturado com 5-6 membros, com preendendo até um outro heteroátomo seleccionado de entre oxigénio e azoto, ou

7 (vii) 0R , onde R é hidrogénio, metal alcalino, alquilo C-^θ, benzilo ou (b) /3-alq-OR⁸, onde Alq é alquilo C^_^₂ ^e é

(i) fenil(alquil C^^) carbonilo, (ii) cicloalquil ^C5-10 carbonilo, (iii) benzoílo, (iv) alcoxi C^ θ carbonilo (v) amino ou amino substituído por alquilo C]__mg, carbonilo, (ui) hidrogénio, ou (2) (vii) alquilo ^c^_g> =CH-W-C0-R⁴ ou =CH-W-OR⁸ onde W ou alquilo C^ e R⁴ e R⁸ têm Picado que anteriormente e R⁸ é nio ou alquil Cj._20 ^carbonilo;

é uma ligação o mesmo signitambém hidrogé.

(3)

onde a ligação a tracejado substitui o 17-o(-hidrogénio, (4) ®<-hidrogénio e /2>-NHC0R^ onde R^ é alquilo ⁸1-12 ^0u onde R⁵ e R⁶ têm 0 mesmo significado que anteriormente;

657

SKB CASE 14380 (5) oí-hidrogênio e /3-ciano, (6) e(,-hidrogénio e ft> -tetrazolilo, ou (7) ceto?

ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

Como se usou anteriormente e se usará na restante descri ção e reivindicações os carbonos do núcleo esteróide têm os nú meros e os anéis e as letras que se indicam a seguir:

Os compostos de Fórmula (Ia) são preparados como se indi ca nos Esquemas I a X em que R e X têm a mesma definição que na Fórmula (Ia). R^ é R^ ou grupos que podem ser quimicamente convertidos nos de R por reacçães químicas conhecidas tais como as descritas em 2 3. Fried and 3. Ediuards, Organic Reactions in Stsroid Chemistry, Pub: Van Nostrand Reinhold Company (1972) desde que R não inclua nenhum dos grupos que toj? nam inoperantes os processos dos Esquemas I a X. Como se demonstra nos Exemplos que se seguem, as reacções para converter

3

R em R são realizadas sobre produtos das vias sintéticas dos Esquemas I a IX ou, quando apropriado ou preferível, sobre cer tos intermediários destas vias sintéticas.

’637

SKB CASE 14380

-18ESQUEMA I

(a)

1) Li/NH,

------a------------->

2) n-feniltrifluorometilsulfonimida trietilamina, trifenil fosfina acetato de paládio (li) ----------------> alqC₁_₆0H, CO

1) LiOH

----->

2) HC1 ‘637

SKB CASE 14380

Esquema I descreve a formação dos compostos de Fórmula (Ia) possuindo uma ligação dupla em C^-C^, X ó H, e η é 1. Os compostos de partida 4-eno-3-ona são conhecidos e facilmente obteníveis e são sintetizados a partir de precursores disponíveis usando procedimentos conhecidos. De acordo com o Esquema I uma solução de um composto 4-eno-3~ona (a) e um doador de protães orgânico adequado, tal como t-butanol ou preferivelmejn te, anilina num solvente orgânico apropriado, preferivelmente tetra-hidrofurano (THF), são adicionados a uma amina metálica redutora, preferivelmente uma solução de lítio/amoníaco (Li/ /NHj) para formar uma mistura reaccional. Esta mistura reaccional é agitada a uma temperatura entre -100°C e -30°C, de preferência -783C, interrompida com um depurador de lítio tal como dibromoetano, bromobenzeno ou preferivelmente isopreno, e evaporada para formar um resíduo. Cs compostos de fórmula (b) são então preparados por reacção do resíduo dissolvido num sol. vente orgânico adequado, preferivelmente THF, com uma N-aril-tri-haloalquilsulfonimida, preferivelmente N-feniltrifluorome tilsulfonimida a uma temperatura entre -202C e 20°C.

Os compostos de fórmula (c) são preparados adicionando a um composto de fórmula (b) dissolvido num solvente orgânico adequado, tal como dimetilformamida (DMF), uma base orgânica tal como trimetilamina ou, preferivelmente, trietilamina, uma fosfina tal como bis(difenilfosfino)propano ou, preferivelmente, trifenilfosfina, um composto de paládio (li) tal como cio67 ’637

SKB CASE 14380

-20reto de paládio (li) ou, preferivelmente, acetato de paládio (II), e um alquilC^g álcool (alqCj^OH), seguindo-se a adição de monóxido de carbono (CO). A adição de uma base forte como o hidróxido de sódio, o hidróxido de potássio ou, de pre ferência o hidróxido de lítio a um composto de fórmula (c) dis solvido num solvente orgânico adequado tal como THF e metanol seguida pela adição de ácido forte, de preferência, ácido clorídrico produz compostos de fórmula (d).

1) 2,6-di-t-butil-4-metilpiridina

------------>

2) anidrido trifluoro metanossulfónico

(f) trietilamina, acetato de bis(trifenilfosfina)paládio (II)

-------------------->

alqC^OH, CO ’637

3KB CASE 14380

-21ESjUEMA II (continuação)

1) K₂co₃ ;

2) H⁺

(h)

Esquema II delineia a síntese dos compostos de Fórmula (Ia) em que existe uma ligação dupla em C^-C^ e n é 1. Os materiais de partida são os compostos de fórmula (a) 4-eno-3-ona do Esquema 1. De acordo com o Esquema II, adiciona-se a um composto de fórmula (a), dissolvido num solvente orgânico apro priado, de preferência cloreto de metileno, 2,6-di-t-butil-4-metilpiridina. Adiciona-se então um anidrido tri-halo-alquil sulfónico, de preferência anidrido trifluorometanossulfónico, para originar compostos de fórmula (f). Aos compostos de fórmula (f) dissolvidos num solvente orgânico adequado, tal como DMF, adiciona-se uma base orgânica tal como trimetilamina ou, preferivelmente, trietilamina, um composto de paládio (II) tal como acetato de bis(difenilfosfino)propano paládio (II) ou, preferivelmente, acetato de bis(trifenilfosfina)paládio (II) e ’637

SKB CASE 14380

-22um alqC. .OH seguindo-se a adição de CO para originar compostos de fórmula (g)· Os sais dos compostos de fórmula (h) são então preparados por hidrólise com uma base forte como hidróxido de sódio, hidróxido de litio, hidróxido de potássio ou, preferivelmente, carbonato de potássio, dos compostos éster de fórmula (g). Os ácidos livres de fórmula (h) são preparados por tratamento dos sais com um ácido forte tal como com os áci dos clorídrico, sulfórico ou bromídrico.

(a)

Li/NH^

NH^Cl

(j)

1) cloreto de fenil2) selenilo ^H2°2 '637

SKB CASE 143Θ0

H (k)

poli( hidroc crio rluore to) de piridínio ----------------->

(m)

1) bis(trimetilsilil)amida de li tio

------------>

2) feniltrifluorome tilsulfonimida '637

SKB CASE 14380

-24ESQUEMA III (continuação)

F trietilamina, trifenilfosfina acetado de paládio (II) ------------------> alqC^ gOH, CO (o)

Pd/carbono

(q)

1)

2) ^K2^C03

H⁺

67’637

SKB CASE 14380

Esquema III ilustra a síntese dos compostos de Fórmula (Ia) em que X é fluorc. Os compostos de partida são os compos. tos 4-eno-3-ona (a) usados nos Esquemas I e II. De acordo com o Esquema III, os compostos de fórmula (a) dissolvidos num sol. vente orgânico adequado tal como THF e álcool t-butílico são adicionados a uma solução de amina e metal, preferivelmente uma solução de Li/NH^, para formar uma mistura reaccional que é arrefecida a uma temperatura entre -100°C e -308C, preferivelmente -782C, e interrompida com um agente depurador de lítio, tal como dibromoetano, bromobenzeno ou, preferivelmente, isopreno, para formar um enolato. Este enolato é então tratado com um sal de um ácido forte e de uma base preferivelmente cloreto de amónio (NH^Cl) para originar um composto de fórmula (j). A adição de cloreto de fenilselenilo a um composto de fórmula (j) dissolvido num solvente orgânico adequado, preferivelmente acetato de etilo, seguida pela adição de um agente oxidante, preferivelmente peróxido de hidrogénio ^0Γ·^9ΐ na um composto de fórmula (k). Os compostos epóxido de fórmula (1) seguintes são preparados por adição de um agente oxidari te, preferivelmente ^{3 um com}P^ost° de fórmula (k) dissolvido num solvente orgânico adequado, preferivelmente metanol, arrefecido a uma temperatura entre 520 e 2520, preferivelmente 1590, seguida pela adição de uma base forte tal como NaOH.

Os compostos de fórmula (1) são então dissolvidos num

67*637

SKB CASE 14380

-26solvente orgânico adequado, preferivelmente, THF, e arrefecidos a uma temperatura entre -20?C e 0°C e adiciona-se um agente de fluoração tal como fluoreto de hidrogénio, ou, preferivelmente, poli(fluoreto de hidrogénio)pirid£nio para se obterem compostos de fórmula (m) nos quais X é fluoro. Os compostos de fórmula (m) são dissolvidos num solvente orgânico adequado tal como THF, segue-se a adição a uma solução de uma base metaloamida tal como diisopropilamida de lítio ou, preferivelmente bis(trimetilsilil)amida de lítio num solvente orgânico adequado tal como THF. A esta mistura reaccional adiciona-se um agente'Trifiating tal como anidrido trifluorometanossulfónico ou, preferivelmente, N-feniltrifluorometanossulfonimida, para dar origem a compostos de fórmula (o).

Os compostos de fórmula (p) são então sintetizados por adição a um composto de fórmula (o), dissolvido num solvente orgânico adequado tal como DMF, de uma base orgânica tal como trimetilamina ou, preferivelmente, trietilamina, uma fosfina tal como bis(difenilfosfino)propano ou, preferivelmente trifenilfosfina, e um composto de paládio (II) tal como cloreto de paládio (II) ou, preferivelmente, acetato de paládio (II), seguida pela adição de CO. A hidrogenação de compostos de fórmu la (p) dissolvidos num solvente orgânico adequado tal como ace tato de etilo e hexano usando um agente de hidrogenação apropriado tal como dióxido de platina, níquel Raney ou preferível, mente, paládio em carbono (Pd/carbono) origina compostos de fórmula (q). A hidrólise do éster com uma base tal como hidró xido de sódio, hidróxido de potássio, hidróxido de lítio ou, preferivelmente, carbonato de potássio, dissolvida numa solução aquosa de um álcool alquílicoC^^^, preferivelmente metanol, origina um sal de um composto de fórmula (s). 0 tratamento do sal com ácido forte origina um composto de fórmula (s).

Os compostos de fórmula (s) nos quais X é diferente de hidrogénio ou fluoro são preparados usando processos como os exemplificados nos Exemplos 23, 24 e 25.

67'657

SKB CASE 14380

agente de alquilação ---------------->

(u)

1) isopropil-ciclo-he xilamida de lítio

---

2) brometo de fenilselenilo

3) peréxido de hidro génio *637

SKB CASE 14380

-28ESQUEMA IV (continuação)

R¹⁴ ^CH3 I

1) LiOH

----->

2) HC1

H

Esquema IV descreve a formação de compostos de Fórmula (la) nos quais n é 0. Os materiais de partida para esta formação são compostos de fórmula (j) preparados da forma descrita no Esquema III. De acordo com o Esquema IV, os compostos de fórmula (j) são dispersos num ácido forte, preferivelmente ácido acético glacial, e tratados com sesqui-hidrato de acetato tálico para preparar compostos de fórmula (t). Os com postos de fórmula (u) seguintes são preparados tratando compos. tos de fórmula (t) dispersos num solvente orgânico adequado, preferivelmente éter dietílico, com um agente de alquilação tal como um haleto de alquilo e base, por exemplo iodeto de me tilo e carbonato de sódio, iodeto de etilo e 1,8-diazabiciclo/~5.4.0_Tundec-7-eno, ou diazometano.

Os compostos de fórmula (u) são então dissolvidos num solvente orgânico adequado, preferivelmente THF, arrefecidos a uma temperatura entre -1009C e -309C, preferivelmente -789C, e adiciona-se uma base metaloamida, preferivelmente isopropil67'637

SKB CASE 14380

-29ciclo-hexilamida de lítio. Em seguida adiciona-se brometo de fenilselenilo seguido por um agente oxidante, preferivelmente peróxido de hidrogénio, para originar compostos de fórmula (v). Os compostos de fórmula (uj) são então preparados por pro. cessas empregues na síntese de compostos de fórmula (d) no Esquema I.

ESQUEMA V

1) 2,6-di-t-butil-4-metilpiridina

----------------->

2) anidrido trifluor£ metanossulfónico trietilamina, acetato de trifenilfosfina pa ládio (II) ---------------------------> alqC₁_₆0H, CO

67'6 37

SKB CASE 143Θ0

Esquema V delineia a formação de compostos de Fórmula (la) em que A é -CH=CH~. Os materiais de partida no Esquema V são compostos de fórmula (m) preparados como se descreveu no

Esquema III. De acordo com o Esquema V, os compostos de fórmu la (aa) são preparados usando os processos usados na preparação de compostos de fórmula (f) do Esquema II. Os compostos de fórmula (bb) seguintes são preparados pelas reacções empregues para formar compostos de fórmula (c) no Esquema I. Em seguida, o tratamento de compostos de fórmula (bb) como se descreveu na formação de compostos de fórmula (s) do Esquema III origina compostos de fórmula (cc).

637

SKB CASE 14380

-31ESqUEKA VI

(dd)

(ff)

Dibromantina ----------------->

LiBr trietilamina/benzeno tiol ácido m-cloroperbenzóico trietilamina

K₂co₃ butanona

Al(iPrO)₃

Li/NH,

------2----->

NH Cl

67’637

SKB CASE 14380

-32ESQUEMA VI (Continuação)

H (gg¹)

(hh)

Pd/carbono

1) cloreto de fenilse lenilo

2) H₂0₂

637

SKB CASE 143Θ0

Esquema VI mostrei a síntese de compostos de fórmula (la) nos quais existe uma ligação dupla em Cg-C^. Os materi ais de partida de fórmula (dd) são conhecidos e estão disponíveis e podem ser sintetizados a partir de materiais disponíveis usando métodos conhecidos. Os compostos de fórmula (ee) são preparados tratando primeiro compostos de fórmula (dd) num solvente orgânico adequado, tal como hexano, com um agente de bromação, tal como N-bromossuccinamida, ou, preferivelmente, dibromantina e uma base fraca, preferivelmente bicarbonato de sódio e aquecidos, preferivelmente ao refluxo. Em seguida a mistura é tratada com brometo de lítio (LiBr), arrefecida a uma temperatura entre -20°C e 202C, preferivelmente C°C, e tra tada com trietilamina e benzenotiol. Segue-se o tratamento com um agente oxidante tal como periodato de sódio, peróxido de hidrogénio ou preferivelmente ácido m-cloroperbenzóico e es. te é seguido por aquecimento a uma temperatura entre 409C e 1009C, preferivelmente 702C e tratamento com uma base orgânica tal como trimetilamina ou, preferivelmente, trietilamina. 0 tratamento com uma base forte tal como hidróxido de sódio, hidróxido de potássio, hidróxido de lítio ou, preferivelmente, carbonato de potássio origina compostos de fórmula (ee).

Os compostos de fórmula (ee) são então dissolvidos num solvente orgânico adequado, preferivelmente tolueno, e tratados com um agente alquilcetona tal como uma ciclo-hexanona ou, preferivelmente, butanona e segue-se o tratamento com isopropó. xido de alumínio e aquecimento, preferivelmente ao refluxo, pa. ra preparar compostos de fórmula (ff). A reacção dos compostos

67’637

SKB CASE 143Θ0

-34de fórmula (ff) da forma descrita na formação de compostos de fórmula (j) do Esquema III origina compostos de fórmula (gg). A hidrogenação de compostos de fórmula (gg) usando catalisadores adequados tal como dióxido de platina, níquel Raney ou, preferivelmente, Pd/carbono origina compostos de fórmula (gg'). Os compostos de fórmula (hh) são então preparados por adição de cloreto de fenilselenilo a um composto de fórmula (gg') dis solvido num solvente orgânico adequado, preferivelmente acetato de etilo, seguida pela adição de um agente oxidante, preferivelmente A substituição de compostos de fórmula (m) por compostos de fórmula (hh) no Esquema III origina compostos de fórmula (kk).

ESQUEMA VII

cloranilo ---------->

(11)

67-637

SKB CASE 14380

Esquema VII delineia a formação de compostos de fórmu5 7 la (Ia) nos quais Δ θΔ são -CH=CH-, a partir de compostos de fórmula (a) do Esquema I. 0 tratamento dos compostos de fórmula (a) num solvente adequado tal como t-butanol com cloro anilo, com aquecimento, preferivelmente ao refluxo, origina compostos de fórmula (11). Em seguida, substituindo os compos. tos de fórmula (a) por compostos de fórmula (11) no processo do Esquema II obtêm-se compostos de fórmula (mm).

637

SKB CASE 14380

-36ESQUEMA VIII (continuação)

(oo)

O Esquema VIII mostra a formação de compostos de Fórmula (la), nos quais n é 2 a partir de compostos de fórmula (a) do Esquema I. Os compostos de fórmula (nn) são preparados por tratamento dos compostos de fórmula (a) num solvente orgânico adequado tal como éter dietílico e metanol arrefecido a uma temperatura entre -2050 e 209C, de preferência a 0°C, com uma base forte tal como hidróxido de sódio, hidróxido de lítio, carbonato de potássio ou, preferivelmente, hidróxido de potássio (KOH), seguido por tratamento com um precursor de diazometano tal como N-metil-N’-nitro-N-nitrosoguanidina ou, de prefe rência, N-metilnitroso-ureia. Substituindo os compostos de fórmula (a) pelos compostos de fórmula (nn) no processo do Esquema II obtêm-se compostos de fórmula (oo).

ESQUEMA IX

(a)

Etileno-glicol ácido p-toluenossulfó nico

637

SKB CASE 143Θ0

-37ESQUEMA IX (continuação)

R¹⁴

CHg

ácido m-clorooerbenzóico

------------------------>

1) HY¹(gás), CHClg

2) H⁺

1) 2,6-di-t-butil-4- metilpiridina ------------------>

2) anidrido trifluoro metanossul fónico (rr)

637

SKB CASE 14380

-38ESQUEMfl IX (continuação)

Trietilamina --------------------> acetato de bis(trifenil fosfina)paládio (II) alqC^ ^0Η

CO

Esquema IX delineia a formação de compostos de Fórmula (Ia) nos quais Y é cloro ou fluoro (Y¹) a partir de compostos de fórmula (a) do Esquema I. Os compostos de fórmula (pp) são preparados por reacção de compostos de fórmula (a) com um agente protector do grupo ceto adequado tal como etileno-glicol na presença de um catalisador ácido tal como ácido p-tolue nossulfónico. 0 tratamento de compostos de fórmula (pp) com um agente oxidante adequado, preferivelmente, ácido m-cloropej? benzóico num solvente orgânico adequado tal como diclorometano origina compostos epóxido de fórmula (qq).

Os compostos de fórmula (rr) são então preparados por adição de cloreto de hidrogénio ou fluoreto de hidrogénio gas.0 so a um composto de fórmula (qq) num solvente orgânico adequado tal como clorofórmio ou, (quando Y^ = F) por adição ds trifluoreto-eterato de boro a um composto de fórmula (qq) num sol.

6Ί 63Ί

SKB CASE 14380

-39vente orgânico adequado, preferivelmente benzeno:éter seguida de tratamento com ácido forte, preferivelmente cloreto de hi drogénio em ácido acético glacial. Em seguida adiciona-se

2,6-di-t-butil-4-metilpiridina, seguida por anidrido trifluoro metanossulfónico, a um composto de fórmula (rr) para se obter um composto de fórmula (ss). A reacção de um composto de fôrma (ss) num solvente orgânico adequado, preferivelmente dimetil. formamida, com trietilamina, um alqC^^^OH, acetato de bis(trifenilfosfina)paládio (II) e monóxido de carbono produz compostos de fórmula (tt). Os ácidos livres de fórmula (tt) são opci onalmente preparados por processos apresentados nos esquemas precedentes. Os compostos de Fórmula (I) nos quais Y é trifluorometilo são preparados por processos como os exemplificados no Exemplo 26.

Os compostos possuindo uma ligação dupla em são preparados por modificações dos Esquemas I a X por procedimentos que serão evidentes para os peritos da especialidade e que são exemplificados no Exemplo 34, adiante.

Os compostos de Fórmula (Ia) em que á parados a partir de compostos de Fórmula (Ia) enxofre são preem que H é oxigé.

nio usando procedimentos conhecidos, como os apresentados no

Exemplo 35 adiante.

I

637

SKB CASE 14380

-40ESQUEMA X

v

(a) tribrometo fosforoso ou bro meto de oxalilo (b) passo(s) opcional(ais) para , „14 mtsrconversoes de d (ii)

1) Butil-lítio

2) Diáxido de carbono

3) Acido ou

Trietilamina, acetato de trifenilfosfina paládio (Π), alqC^^OH, CO (iii)

637

SKB CASE 14380

-410 Esquema X apresenta um método de síntese preferido para a preparação de compostos de Fórmula (Ia) possuindo ligações duplas em C^-C^ e C^-C^. Os materiais de partida são os compostos 4-eno-3-ona de fórmula (a) do Esquema I. ê bromo ou cloro, fluoro ou iodo. De acordo com o Esquema X os com postos de fórmula (i) são tratados com um haleto de ácido carboxílico tal como cloreto de acetilo, brometo de acetilo, cloreto de oxalilo ou, preferivelmente, brometo de oxalilo para dar compostos de fórmula (ii). Alternativamente, os compostos de fórmula (ii) são preparados por tratamento de compostos de fórmula (i) com um tri-haletos de fósforo ou penta-haletos fos. forosos tal como cloreto de fosforilo, pentacloreto fosforoso ou, preferivelmente, tribrometo fosforoso em ácido, preferível, mente ácido acético. Podem ser incluídas neste processo inter. conversões desejadas entre os vários grupos compreendendo usando procedimentos conhecidos dos químicos orgânicos, especi almente conversães de ésteres em ácidos carboxílicos, em segui, da a haletos de ácidos e depois a carboxamidas.

Os compostos de fórmula (iii), compostos de Fórmula (Ia) insaturados em C^-C^ e C^-C^, são então preparados por adição de um reagente de alquil-lítio, tal como n-butil-lítio, s-butil-lítio ou t-butil-lítio a um composto (ii) seguida por tratamento com um agente de carboxilação tal como carbonato de di. etilo, cloro formato de etilo ou, preferivelmente, dióxido de carbono. Alternativamente, estes compostos de fórmula (iii) são preparados por adição de um catalisador de paládio, preferivelmente acetato de trifenilfosfina paládio (II) na presença de uma base, preferivelmente trietilamina, e de um álcool preferivelmente metanol, sob uma atmosfera de monóxido de carbono.

Esquema X mostra a preparação de compostos de Fórmula (la) em que X e Y são hidrogénio. 0 Esquema X é usado para preparar compostos de Fórmula (Ia), em que X ou Y são diferentes de hidrogénio, por substituição dos materiais de partida de fórmula (i) pelas alternativas apropriadamente substituídas. Os compostos são seleccionados de modo a poderem ser converti-

3 dos por procedimentos conhecidos nos grupos R e R dos compo£

637

SKB CASE 14380

-42tos de Fórmula (Ia) pretendidos, por exemplo, por passos adicionais ao processo sintético, como se afirmou anteriormente.

Nos Esquemas anteriores, os materiais de partida são se- jL leccionados de modo que os grupos R e R no composto de fór2 3 mula (a) sejam os mesmos dos grupos R e R no composto de Fó£ mula (Ia) a ser sintetizado. Alternativamente, os grupos R e R^⁴ do composto de fórmula (a) são seleccionados de modo a poderem ser convertidos por procedimentos conhecidos nos grupos R^z e R⁹ dos compostos de Fórmula (Ia) pretendidos por passos adicionais ao processo sintético. Por exemplo, os compostos de Fórmula (Ia) em que R é ácido carboxílico são convertidos nas amidas correspondentes por reacção com aminas ou aminas substituídas por intermédio dos cloretos de ácidos correspondentes. Da mesma forma, os compostos de Fórmula (Ia) em que R é CH^CHCOOH são preparados por oxidação do álcool correspori dente.

Os sais de adição de ácidos dos compostos do invente, farmaceuticamente aceitáveis, contendo um grupo básico são for, mados quando for apropriado com ácidos orgânicos ou inorgânicos, fortes ou moderadamente fortes, na presença de uma amina básica por métodos conhecidos na técnica. Por exemplo, a base é feita reagir com um ácido orgânico ou inorgânico num solvente aquoso miscível, tal como etanol, com isolamento do sal por remoção do solvente ou num solvente aquoso imiscível quando o ácido é nele solúvel, tal como éter etílico ou clorofórmio, se parando-se o sal desejado directamente, ou sendo isolado por remoção do solvente. Exemplos de sais de adição de ácidos que estão incluídos neste invento são os sais maleato, fumarato, lactato, oxalato, metanossulfonato, etanossulfonato, benzenossulfonato, tartarato, citrato, cloridrato, bromidrato, sulfato, fosfato e nitrato. Os sais de adição de bases dos compostos do invento, farmaceuticamente aceitáveis, contendo um grupo acídico são preparados por métodos conhecidos a partir de bases orgânicas ou inorgânicas que incluem bases não tóxicas de metais alcalinos ou alcalino-terrosos, por exemplo hidróxido de cálcio, sódio e potássio; hidróxido de amónio e bases orgânicas não tóxicas, tal como trietilamina, butilamina, pipera

637

SKB CASE 14380

zina e (tri-hidroximetil)metilamina.

Na preparação dos compostos de Fórmula (la), agora in ventados são sintetizados novos intermediários com a seguinte

Fórmula (V):

(V) na qual:

O as ligações duplas dos anéis A, Θ, C e D, e X, Y, Z, R^z', e R·^ são todos definidos como para a Fórmula (la).

Na síntese dos compostos de Fórmula (la) agora inventa-

na qual:

as ligações duplas dos anéis A, B, C ε D, e X, Y, Z, R e R^ são definidos como para a Fórmula (la).

Em virtude de os compostos de Fórmula (Ia) inibirem a actividade da esteróide-5-0i.-redutase eles possuem utilidade terapêutica no tratamento de doenças e situações em que a diminuição da actividade da DHT produz o efeito terapêutico deseja, do. Estas doenças e situações incluem a acne vulgaris, a se67 637

SKB CASE 14380

-44borreia, o hirsutismo da fêmea, as doenças da próstata tais co mo hipertrofia prostãtica benigna e a calvície típica do macho. A potência de vários compostos do invento foi testada em relação à potência na inibição da esteróide-5-c<-redutase humana usando tecido de próstatas humanas hiperplásicas. Usou-se o seguinte procedimento para a determinação da potência na inibi, ção da enzima humana:

descongelaram-se e picaram-se em pequenos pedaços (5 mm^) próstatas humanas congeladas. 0 tecido foi homogeneizado em 3 a 5 volumes de tampão de fosfato de potássio 20 mM, pH 6,5 cojn tendo sacarose 0,33 M, ditiotreitol 1 mM e NADPH 50yxM com um Brinkmann Polytron (Sybron Corporation, Westbury, New York). A solução foi submetida a tratamento sónico durante 3 a 5 minutos com um aparelho para esse fim (Sonifier) (Branson Sonic Pouier Co.) e em seguida homogeneizou-se à mão com um homogenei. zador Dounce vidro-a-vidro (Kontes Glass Company, Vineland, Neu/ Oersey).

As partículas prostáticas foram obtidas por centrifugação diferencial a 600 ou 1000 x g durante 20 minutos e a 140 000 x g durante 60 minutos a 49C. A pelota obtida da centrifugação a 140 000 x g foi lavada com 5 a 10 volumes de teci do_, do tampão descrito anteriormente e foi de novo centrifugada a 140 000 x g. A pelota resultante foi suspensa em tampão de fosfato de potássio 20 mM, pH 6,5 contendo glicerol a 20%, ditiotreitol 1 mM e NADPH 50 JUM. A solução com partículas em suspensão foi armazenada a -80QC.

Depositou-se em tubos de ensaio uma quantidade constante de /¹⁴C_7-testosterona (52 a 55 mCi/mmol, New England Nuclear, Boston, MA) em etanol e quantidades diferentes do inibidor potencial em etanol e concentraram-se até à secura num SAVANT Speed Vac. A cada tubo adicionou-se tampãç 20^1 de NADPH 10 mM e uma alíquota da solução prostática particulada e citrato de sódio 50 mM, pH 5,0 até perfazer um volume final de 1,0 ml. Após incubação da solução a 379C durante 20 a 30 minutos interrompeu-se a reacção pela adição de 4 ml de acetato de etilo e de 0,25 ^nmol de cada um dos compostos, testosterona, di-hidrotestosterona, androstanodiol e androstanodiona, como porta67 637

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-45dor. A camada orgânica foi removida para um segundo tubo de ensaio e evaporada até à secura num Speed Vac. 0 resíduo foi dissolvido em 20 a 30ytl de clorofórmio, espalhado (spotted) numa faixa individual de uma placa de TLC em sílica-gel pré-canelada de 20 x 20 cm (Si 250F-PA, Baker Chemical) e desenvolvido duas vezes em acetona:clorofórmio (1:9). 0 teor radioquímico das bandas do substrato e dos produtos foram determinados com um Explorador de Imagem (Imaging Scanner) BIOSCAN (Bioscan, Inc., Washington, D.C.). Calculou-se a percentagem de marcador radioactivo, recuperado, convertido em produto e a partir dela determinou-se a actividade da enzima. Todas as ijn cubações foram conduzidas de modo a não se consumirem mais do que 12$ do substrato (testosterona).

0s valores obtidos experimentalmente foram introduzidos em computador de modo a obter-se uma função linear, representando o inverso da actividade da enzima (1/velocidade) em função da concentração variável de inibidor (Dixon, M. (1953), Biochem. 3», 55, 170). Assumindo que o inibidor esteróidãl é um inibidor competitivo contra testosterona, pode calcular-se um valor para a constante de inibição (K^^) a partir da equação 1:

K. = (B/A)/(S/K_m + 1) Equação 1 onde B é a intercapção com o eixo 1/velocidade, A é o declive da curva, S é a concentração do substrato (testosterona) usada na axperiância e K^ é a constante de Michaelis-Menton do substrato (testosterona) determinada numa experiência em separado e que é igual a 4,5

A Tabela II revela os resultados do ensaio anterior e mostra que os compostos do invento ensaiados são inibidores po, tentes da esteráide-5-o(_-redutase humana.

637

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-46Tabela II

Constantes da Inibição da Estaróide-S-<x-redutase Prostática

Humana

Composto

KiínMi

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	-47- Tabela II (continuação)
Composto	KJLnHl

γϊ“:Γχ^

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-48Tabela II (continuação)

Kiíntll

Composto

‘l

-T ·*% xlu

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-49Alguns dos compostos do invento também foram ensaiados em relação à sua potência in vivo na inibição da actividade da esteróide-5-cC-redutase. Administraram-se a ratazanas macho Charles River CD, com 48 dias de idade e pesando aproximadamente 200 g, 10 mg/kg de ácido N,N-diisopropil-androsta-3,5-dieno-17 /?>-carboxamida-3-carboxílico dissolvido em propileno-glicol e diluído em solução salina normal. Depois da adminis. tração do composto sacrificaram-se os animais, excisaram-se as próstatas ventrais e mediram-se os níveis da DHT pelo procedimento que se segue.

tecido da próstata foi excisado, preparado, pesado, pi cado e lavado com tampão de fosfato. 0 tecido foi então homogeneizado em tampão de fosfato e extraído por adição de acetato de etilo e misturado num misturador orbital durante quarenta e cinco minutos. Evaporou-se o acetato de etilo, reconstituíu-se o resíduo em etanol e filtrou-se centrifugando, usando um papel de filtro de 0,45 Os componentes foram então sbparados usando HPLC de fase inversa, recolhendo-se a fracção de DHT. A fracção foi reduzida até à secura e reconstituída em tampão padrão de ensaio para DHT disponível de Amersham. Os níveis da DHT foram então medidos usando técnicas padrão tal como radio-imunoensaio.

Nas ratazanas tratadas com o composto, quatro horas depois da administração do composto, os níveis prostáticos da DHT tinham diminuído quarenta por cento em relação aos controlos tra tados com veículo. Os níveis de DHT baixos mantiveram-se durante mais de oito horas após a administração e voltaram aos níveis de controlo vinte e quatro horas depois do tratamento. Após seis horas uma única dose de 10 mg/kg do metiléster do composto anterior diminuiu os níveis prostáticos de DHT em qua renta e oito por cento em relação aos controlas tratados com veículo. Assim, embora este composto não iniba a esteróide-5-oL-redutase in vitro, a administração in vivo deste composto produz uma inibição significativa da enzima.

Ensaiou-se também o ácido N,N-diisopropil-androst&-3,5-dieno-17/2>-carboxamida-3-carboxílico em relação ao seu efeito

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-50sobre o crescimento prostático. A administração orai, duas ve zes ao dia, durante catorze dias, de 0,5 a 50 mg/kg deste composto a ratazanas imaturas produziu uma diminuição dependente da dose no crescimento prostático. Os pesos das próstatas de animais do grupo da dose máxima foram quarenta a cinquenta por cento inferiores aos dos controlos.

Usando procedimentos semelhantes aos descritos acima estudaram-se também os efeitos in vivo do ácido 17/¾-N-t-butilcarboxamida-androsta-3,5-dieno-3-carboxílico. As ratazanas receberam uma dose oral simples de veículo ou 5, 10, 20 ou 50 mg/kg deste composto. A todas as doses os níveis de di-hidrotestosterona na próstata foram significativamente reduzidos pa ra aproximadamente cinquenta por cento dos dos controlos enquanto que os níveis de testosterona não foram afectados.

Administraram-se também às ratazanas 10 mg/kg deste composto e mediram-se os níveis de testosterona e di-hidrostestos. terona em várias alturas, durante vinte e quatro horas. Duas a dezoito horas depois do tratamento, os níveis de di-hidrote£ tosterona tinham diminuído significativamente para aproximadamente sessenta por cento dos dos controlos em todos os momentos, e regressaram aos valores do controlo vinte e quatro horas depois do tratamento. Os níveis de testosterona na prósta ta eram viáveis sem tendências consistentes.

Adicionalmente, administrou-se este composto às ratazanas, a 1, 5, 10, 25 ou 50 mg/kg duas vezes ao dia durante duas seroa nas, para determinar se um tratamento repetido ocasionava uma redução do peso da próstata ventral. 0 peso da próstata ventral foi de noventa por cento do do controlo a um nível de dose de 5 mg/kg e de sessenta e cinco por cento do do controlo a um nível de dose de 10 e 50 mg/kg. Os pesos da vesícula seminal estavam significativamente reduzidos em todos os níveis de tratamento.

Os compostos de Fórmula (Ia) são incorporados em formas de dosagem convenientes como por exemplo cápsulas, comprimidos ou preparações injectáveis. São usados portadores farmacêuticos sólidos ou líquidos. 0s portadores sólidos incluem amido,

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-51lactose, di-hidrato de sulfato de cálcio, terra alba, sacarose, talco, gelatina, ágar, pectina, acácia, estearato de magnésio e ácido esteárico. Os portadores líquidos incluem xarope, óleo de amendoim, azeite, solução salina e água. Do mesmo modo o portador ou diluente pode incluir qualquer material de liberta ção prolongada, como monoestearato de glicerilo ou diestearato de glioerilo, sózinho ou com uma cera. A quantidade de portador sólido varia largamente mas, de preferência, será de cerca de 25 mg a cerca de 1 g por unidade de dosagem. Quando se usa um portador líquido, a preparação terá a forma de xarope, elixir, emulsão, cápsula de gelatina mole , líquido injectável es. téril^ como uma ampola ou uma suspensão líquida aquosa ou não aquosa.

As preparações farmacêuticas são produzidas seguindo téç. nicas convencionais para o químico farmacêutico que envolvem mistura, granulação e compressão, quando necessário, para as formas em comprimido ou mistura, enchimento e dissolução dos ingredientes, como apropriado, para se obterem os produtos orais ou parentéricos desejados.

As doses dos presentes compostos de Fórmula (la) numa unidade de dosagem farmacêutica como descrita acima serão qua.n tidades não tóxicas, eficazes, seleccionadas da gama de 0,1-1000 mg/kg de composto activo, preferivelmente 1-100 mg/kg. A dose seleccionada é administrada a um paciente humano que necessite da inibição da esteróide-5-cL-redutase, 1-6 vezes ao dia, topicamente, oralmente, rectalmente, por injecção ou continuamente por infusão. As unidades de dosagem oral para admi nistração a seres humanos contêm preferivelmente de 1 a 500 mg de composto activo. Prefere-se a administração parentérica que usa dosagens mais baixas. No entanto pode-se também usar a administração oral a dosagens mais elevadas, quando for seguro e conveniente para o paciente.

método deste invento para inibir a actividade da esteróide-5-c<-redutase em mamíferos, incluindo seres humanos, compreende administrar a um sujeito que necessite dessa inibição uma quantidade de um composto de Fórmula (Ia), inibidora da

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-.......'‘ias»’

-52esteróide-5-oC-redutase e eficaz.

Por outro lado são também contemplados compostos equivalentes a compostos de Fórmula I que são compostos corresponderi tes a estes nos quais os substituintes foram adicionados a qualquer das posiçães não substituídas dos compostos de Fórmula (la) ou nos quais o grupo metilo em C-13 está ausente ou foi substituído por alquilo desde que estes compostos te nham a utilidade farmacêutica dos compostos de Fórmula (Ia).

Os exemplos que se seguem ilustram a preparação de compojs tos de Fórmula (la) e de composiçães farmacêuticas contendo es. ses compostos. Os exemplos não se destinam a limitar o âmbito do invento como definido anteriormente e reivindicado adiante.

EXEMPLO 1

Acido 20-°<· -(hidroximetil)-5-oL-preqna-3-eno-3-carboxílico (i) 20- oZ.-(hidroximetil)—preqna—4—eno-3-ona

Arrefeceu-se a OQC pregna-4~eno-3-ona-20-c£-carboxaldeído (16,4 g, 50 mmol) em etanol (250 ml) e THF (50 ml) e adiciq nou-se gota a gota uma solução de boro-hidreto de sódio (NaBH^) em 125 ml de etanol. A mistura reaccional foi agitada durante uma noite a 252C. Adicionou-se ácido acético à mistura reacci onal até pH neutro e em seguida evaporou-se a solução para remover o etanol em excesso* 0 resíduo foi dissolvido em triclo rometano e lavado com solução saturada de bicarbonato de sódio, água e salmoura. A camada orgânica foi então seca sobre sulfa to de sódio e evaporada até à secura para dar 13,9 g (82%) de 20-o<-(hidroximetil)-pregna-4-eno-3-ona.

(ii) 20-cxL-( t-butildimetilsililoximetil)pregna-4-eno-3-ona

Uma solução de 20-c<-(hidroximetil)-pregna-4-eno-3-ona (1,2 g, 3,5 mmol), cloreto de t-butildimetilsililo (627 mg, 4,15 mmol) e imidazolo (287 mg, 4,22 mmol) em DMF (40 ml) foi agitada durante uma noite a 402C. A mistura reaccional foi eri tão vertida em água gelada e a emulsão foi lavada três vezes com acetato de etilo. As camadas orgânicas foram combinadas, lavadas com ácido clorídrico diluído, frio, água e salmoura;

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-53secas sobre sulfato de sódio e evaporadas até à secura, A recristalização em metanol deu origem a 1,1 g (70%) de 20-oC-(t-butildimetilsililoximetil)pregna-4-eno-3-ona.

(iii) 20-c<-(t-Butildimetilsililoximetil)-3-(trifluorometilsulfonato)-5-d-pregna-3-eno

Destilou-se duas vezes amónia (200 ml) num balão de fundo redondo de 3 tubuladuras, equipado com um condensador de qe lo seco e com um dispositivo para fazer borbulhar argon. Dissolveu-se arame de litio (Li) (120 mg, 17,4 mmol) em amónia (NHj). Adicionou-se gota a gota uma solução de 20-c<-(t-butH dimetilsililoximetil)-pregna-4-eno-3-ona (3 g , 6,76 mmol) e anilina (49,5 1, 5,4 mmol) em THF (50 ml) à solução de Li/NH^. A mistura reaccional foi agitada a -783C durante 15 minutos e em seguida interrompeu-se a reacção com isopreno até que desaparecesse a cor azul. Os voláteis foram lentamente evaporados (para evitar espuma em excesso) aquecendo lentamente e, eventu almente, a 0,5 mmHg durante 1 e 1/2 hora. 0 resíduo foi redis, solvido em THF (50 ml) e arrefecido a 09C. Adicionou-se uma solução de N-feniltrifluorometilsulfonimida (7 g, 20 mmol) em THF (10 ml) à mistura reaccional e continuou-se a agitação durante uma noite a 43C. 0 solvente foi então evaporado e o resíduo foi cromatografado em sílica-gel, eluindo com acetato de etilo a 3% em hexano para se obterem 2,24 g (57%) do 20-o<-(t-butildimetilsililoximetil)-3-( trifluorometilsulfonato)-5- <-pregna-3-eno.

(iv) 20- o<-(t-Butildimetilsililoximetil)-3-carbometoxi-5-pregna-3-eno

Dissolveu-se, em metanol (0,5 ml) e DMF (1 ml), 20-<\L-(t-butildimetilsililoximetil)-3-(trifluorometilsulfonato)-5- c<-pregna-3-eno (100 mg, 0,173 mmol). Adicionaram-se então à sjq lução, trietilamina (55 /4., 0,386 mmol), trifenilfosfina (9 mg, 0,034 mmol) e acetato de paládio (II) (3,8 g, 0,017 mmol) e borbulhou-se C0 através da solução durante 5 minutos. A mistu ra reaccional foi então agitada durante uma noite a 455C sob 1 atmosfera de C0, diluída com acetato de etilo e lavada com água até se obter pH neutro. A camada orgânica foi seca sobre

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.........

-54sulfato de sódio e evaporada. 0 óleo escuro foi purificado por cromatografia em sílica-gel, eluindo com acetato de etilo a 10% em hexano para se obterem 52 mg (61%) do produto desejado; 20-<* -(t-butildimetilsililoximetil)-3-carbometoxi-5- c<-pregna-3-eno.

(v) 20-ot-(Hidroximetil)-3-carbometoxi-5- <-pregna-3-eno

Dissolveu-se 20- oC-(t-butildimetilsLtLloximetil)-3-carbome toxi-5-ot-pregna-3-eno (500 mg, 1,05 mmol) em THF (20 ml) e adicionaram-se 2 ml de uma solução 1 molar de fluoreto de tetra butilamónio em THF. Agitou-se a mistutura reaccional à tempera tura ambiente durante 3,5 horas e depois diluíu-se com água. A mistura aquosa foi exaustivamente lavada com diclorometano. Combinaram-se as camadas orgânicas, secaram-se sobre sulfato de sódio e evaporaram-se até à secura. A purificação por cromatografia flash, eluindo com acetato de etilo a 20% em hexa, no, deu origem a 300 mg (78%) de 20- -hidroximetil-3-carbometoxi-5- c<-pregna-3-Bno.

(vi) Acido 20- cX.-(hidroximetil)-5- ol-pregna-3-eno-3-carboxílico

Dissolveu-se 20- <X.-(hidroximetil)-3-carbometoxi-5- °C-pregna-3-eno (300 mg, 0,802 mmol) em THF (15 ml) e metanol (15 ml). Adicionou-se hidróxido de lítio (8 ml de uma solução aquosa 1 N) e agitou-se a mistura reaccional durante uma noite. A mistura reaccional foi então diluída com água e evaporou-se para remover o metanol e o THF em excesso. A solução aquosa foi acidificada com ácido clorídrico a 5% e lavada várias vezes com acetato de etilo. As camadas orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura, secas sobre sulfato de sódio e evaporadas até à secura. A recristalização em acetato de etilo e hexano deu origem a 242 mg (84%) do ácido desejado; ácido 20- <X-(hidroximetil)-5-^-pregna-3-eno-3-carboxílico, p.f. 197-2033C.

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-55EXEMPLO 2

Acido N,N-diisopropil-5- o<-androsta-3-eno-17/2 -carboxamida-3-carboxflico (i) 17 /3-(Hidroximetil)-androsta-4-eno-3-ol

Adicionaram-se aproximadamente 750 ml de THF seco a um balão de fundo redondo de 3 tubuladuras, equipado com um condensador, um dispositivo para fazer borbulhar argon e um agita dor mecânico. 0 balão foi arrefecido a 09C e adicionou-se leji tamente hidreto de alumínio e lítio (LAH) (11,39 g, 0,3 mol). Depois de se ter adicionado todo o LAH, aqueceu-se o balão até

X à temperatura ambiente. A suspensão de LAH adicionou-se lenta mente uma solução de androsta-4-eno-3-ona-17_yA-carboxilato de metilo (66 g, 0,2 mol) em 600 ml de THF. Depois da adição do esteróide aqueceu-se lentamente a mistura reaccional até ao re fluxo. Apôs 2 horas anulou-se o LAH em excesso com 11,4 ml de água, 11,4 ml de hidróxido de sódio (NaOH) a 15$ e 28 ml de água. Removeram-se os sais por filtração e lavaram-se com aproximadamente 1 litro de THF quente. A concentração das soluçães orgânicas combinadas deu origem a 63 g (94$) de 17/3-(hidroximetil)-androsta-4-eno-3-ol sob a forma de uma mistura de isómeros cV e ^3 * (ii) 3-0xo-17 /3>-(hidroximetil)-4-androsteno

Tratou-se uma solução de 17/3-(hidroximetil)-androsta-4-eno-3-ol (27 g, 0,089 mol) em 1200 ml de triclorometano com dióxido de manganésio activado (66 g). Apôs 3 horas filtrou-se a mistura. A concentração deu origem a 26 g (96$) de 3-oxo-17/3-(hidroximetil)-4-androstBno (p.f. 1512C).

(iii) 3-0xo-17 P> -(t-butildimetilsililoximetil )-4-androsteno

Adicionou-se a uma solução de 3-oxo-17/3 -(hidroximetil)-4-androsteno (15 g, 0,05 mol) em 200 ml de DMF, 5,8 g (0,085 mol) de imidazolo seguidos de 9,7 g (0,065 mol) de cloreto de t-butildimetilsililo. A mistura reaccional foi agitada à temperatura ambiente sob argon durante 2,5 horas. A mistura rea£ cional foi então vertida em 250 ml de água gelada e lavada 3 vezes com acetato de etilo. As camadas orgânicas combinadas

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............-<0i

-56foram lavadas duas vezes com ácido clorídrico frio a 5% e uma vez com solução saturada de bicarbonato de sódio e outra com salmoura. A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio e evaporada. A recristalização em metanol deu origem a 16,9 g (82%) de 3-oxo-17/3-(t-butildimetilsililoximetil)-4-androsteno sob a forma de um sólido branco cristalino.

(iv) 17 /3-(t-Butildimetilsililoximetil)-3-(trifluorometilsulfonato)-5-oL-androsta-3-eno

Destilou-se duas vezes amónia (300 ml) num balão de fundo redondo com 3 tubuladuras, equipado com um condensador com gelo seco e um dispositivo para fazer borbulhar argon. Dissolveu-se em amónia arame de Li, 250 mg (3 eq.) e agitou-se durante 15 minutos para assegurar a secagem completa. Adicionou-se então anilina recém-destilada, 0,53 ml (0,8 eq.). Adicionou-se gota a gota à solução de Li/NH^, uma solução de 3 g (7,2 mmol) de 3-oxo-17/3-(t-butildimetilsiliioximetil)-4-androsteno em 50 ml de THF seco. Adicionaram-se mais 50 ml de THF seco para ajudar na solubilidade. A mistura reaccional foi agitada a -789C durante 2 horas e depois interrompida com isopreno até que a cor azul desaparecesse. Evaporaram-se os voláteis, lentamente (para evitar a formação de espuma em excesso) por aquecimento lento e eventualmente a 0,5 mmHg durante 1,5 horas. 0 resíduo oleoso foi redissolvido em THF seco (100 ml) e arrefecido a 03C. Adicionou-se uma solução de 7,7 g (3 eq.) de N-feniltrifluorometilsulfonimida em 50 ml de THF, fechou-se o balão hermeticamente e agitou-se durante uma noite a 49C. A mistura foi então concentrada até à secura e cromatografada em sílica, eluindo com hexano. A recristalização em acetato de etilo deu origem a 2,5 g (63^) de 17/3-(t-butildimetilsililoximetil)-3-(trifluorometilsulfonato)-5-ot-androsta-3-eno (p.f. 120-1219C).

(v) 17/3-( t-butildimetilsililoximetil)-5- oí-androsta-3-eno-3-carboxilato de metilo

A uma solução de 3 g (5,46 mmol) de 17/3-(t-butildimetil sililoximetil)-3-(trifluorometilsulfonato)-5- o<-andrQSta-3-eno em 10 ml de DMF e 10 ml de metanol adicionou-se 1,5 ml (2 eq.) de trietilamina e 123 mg (0,03 eq.) do catalisador acetato de

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-57bis(trifenilfosfina)paládio (II). Durante 5 minutos fez-se boj? bulhar monóxido de carbono (CO) através da solução e agitou-se então a mistura reaccional à temperatura ambiente durante uma noite sob 1 atmosfera de CO. A mistura foi diluída com acetato de etilo e lavada com água até pH neutro. A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio e evaporada. A cromatografia em sílica-gel eluindo sucessivamente com acetato de etilo a 5%, 10% e 20% em hexano seguida da recristalização em metanol originou 17β-(t-butildimetilsililoximetil)-5-<<-androsta-3-eno-3-carboxilato de metilo.

(vi) Acido 3-carbometoxi-3-androsteno-17 /3>-carboxílico

Dissolveu-se 17/3-(t-butildimetilsililoximetil)-5-<=k -androsta-3-eno-3-carboxilato de metilo (500 mg) em 150 ml de ace tona. Adicionou-se reagente de Oones até que persistisse uma cor azul. Adicionou-se então isopropanol para anular o reagej} te de Oones em excesso. Removeu-se a acetona por decantação e dissolveram-se então os sais de crómio residuais em água e lavaram-se 3 vezes com diclorometano. As camadas orgânicas foram combinadas e passadas através de uma tampa de florosil e conceji tradas para dar 360 mg (99%) de ácido 3-carbometoxi-3-androsteno-17 β> -carboxílico.

(v i i) 3-Carbometoxi-3-androsteno-17 β-N,N-diisopropilcarboxamida

Suspendeu-se ácido 3-carbometoxi-3-androsteno-17/3-carbo xílico (360 mg, 0,78 mmol) em 10 ml de tolueno seco e tratou-se com 0,4 ml de cloreto de oxalilo durante 2 horas sob argon. A mistura reaccional foi então evaporada (1 mmHg) e o resíduo foi dissolvido em 10 ml de THF seco. Adicionou-se uma solução de 0,6 ml de diisopropilamina em 2 ml de THF seco e agitou-se a mistura reaccional durante 1 hora. A mistura foi diluída com água gelada e extraída com diclorometano. A camada orgâni ca foi então lavada duas vezes com ácido clorídrico frio a 5%, hidróxido de sódio e salmoura; seca sobre sulfato de sódio e evaporada. A cromatografia em sílica-gel eluindo com acetato de etilo a 20% em hexano, seguida por recristalização em éter dietílico deu origem a 3-carbometoxi-3-androsteno-17/S-N,N-diisopropilcarboxamida.

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-58* (viii) Acido N,N-diisopropil-5-°^<--androsta-3-eno-17/^-carboxamida-3-carboxílico

Adicionaram-se 3-carbometoxi-3-androsteno-17/J-N,N-diiso. propilcarboxamida (300 mg, 0,7 mmol) e 300 mg de ^00^ a 20 ml de solução de metanolíágua 10:1 e refluxou-se sob argon durante 20 horas. A mistura foi então concentrada até à secura e diluída cõm água. A camada aquosa foi enxaguada com acetato de etilo e acidificada. A emulsão foi lavada várias vezes com diclorometano. A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio e evaporada. 0 produto foi recristalizado dissolvendo-o em éter etílico, adicionando acetato de etilo e a concentração deu origem a ácido N,N-diisopropil-5-c<-androsta-3-eno-17/3>-carboxamida-3-carboxílico, p.f. 159-1629C.

EXEMPLO 3

Acido N,N-diisopropil-androsta-3,5-dieno-17/3-carboxamida-3-carboxílico (i) Acido androsta-4-eno-3-ona-17/3-carboxílico

Dissolveu-se androsta-4-eno-3-ona-17yi-carboxilato de me tilo (20 g, 60 mmol) em 700 ml de uma solução 20:1 de metanol: :água e adicionou-se hidróxido de potássio (7 g) e refluxou-se a solução sob argon durante 24 horas. A mistura reaccional foi então acidificada com ácido clorídrico a 5% e adicionaram-se 250 ml de água. Após envelhecimento durante 1 hora, filtrou-se a mistura e secou-se para dar 18 g (94%) de ácido androsta-4-eno-3-ona-17/3 -carboxílico como um sólido branco cris talino.

(ii) Androsta-4-eno-3-ona-17/3-N,N-diisopropilcarboxamida

Secou-se azeotropicamente uma solução de ácido androsta-4-eno-3-ona-17y3-carboxílico (18 g, 0,06 mol) em 350 ml de to lueno até se recolherem aproximadamente 100 ml de destilado. A solução foi então arrefecida para 105C. Adicionou-se piridina (6,7 ml, 0,08 mol) e em seguida adicionou-se lentamente uma s.o lução de cloreto de oxalilo (7,2 ml, 0,08 mol) em 10 ml de tolueno. A mistura reaccional foi agitada à temperatura ambiente (sob argon) durante 2 horas e depois arrefecida a 02C. Adi;

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SKB CASE 14380 a gota uma solução de diisopropilamina (89 ml, ml de tolueno de modo que a temperatura não exA mistura reaccional foi agitada durante 1 hora cionou-se gota 0,6 mol) em 40 cedesse 409C.

e depois a reacção foi interrompida com 300 ml de água gelada. As camadas foram separadas e a camada aquosa foi extraída 4 vezes com acetato de etilo (800 ml). Combinaram-se as camadas or gânicas e lavaram-se com ácido clorídrico a 5$ e salmoura. A camada orgânica foi então seca sobre sulfato de sódio e concentrada até à secura, de tolueno e adição de androsta-4-eno-3-ona-17/3 -Ν,Ν-diisopropilcarboxamida 236-2399C).

A recristalização por dissolução em 10 ml de 200 ml de hexano deu origem a 16,5 g (69$) (p.f.

(iii) /?>-(N,N-Diisopropilcarboxamida)-3-( trifluorometilsulfonato)-androsta-3,5-dieno

Dissolveu-se androsta-4-eno-3-ona-17/3 -N,N-diisopropilcarboxamida (5 g, 12,5 mmol) em 50 ml de cloreto de metileno. Adicionou-se então 2,6-di-t-butil-4-metilpiridina (3,08 g, 17,0 mmol) à solução do esteróide e agitou-se à temperatura ambiente durante 15 minutos. Adicionou-se à solução anidrido trifluorometanossulfónico (3,5 ml, 19 mmol) e continuou-se a agitação djj rante 30 minutos. A mistura reaccional foi então diluída com 50 ml de cloreto de metileno e filtrada. A camada orgânica foi lavada duas vezes com ácido clorídrico a 5%_t bicarbonato de sódio saturado e salmoura. Secou-se então sobre sulfato de sódio e evaporou-se. 0 triflato foi purificado por cromatografia em sílica—gel eluindo com acetato de etilo a 20$ em hexano para dar origem a 4 g (61$) de 17/S-(N,N-diisopropilcarboxamida)-3-(trifluorometilsulfonato)-androsta-3,5-dieno.

(iv) 3-Carbometoxi-androsta-3,5-dieno-17/* -!\l, N-diisopropilcar- boxamida

A uma solução de 17_//S-(N,N-diisopropilcarboxamida)-3-(trifluorometilsulfonato)-androsta-3,5-dieno (4 g, 7,5 mmol) em 60 ml de uma solução 1:1 de metanol em DMF adicionou-se acetato de bis(trifenilfosfina)paládio (II) (570 mg) e um grande excesso (20 ml) de trietilamina. Fez-se borbulhar monúxido de carbono através da solução durante 5 minutos e agitou-se a mis67 637

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.....:WEíS

-6 0tura reaccional a 652C durante uma noite sob 1 atmosfera de CO. A mistura foi então diluída com acetato de etilo e lavada com água até pH neutro. A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio e evaporada até se obter um óleo castanho. A purifica ção por cromatografia em sílica-gel eluindo com acetato de etilo a 20% em hexano, seguida por recristalização a partir de éter etílico e hexano deu origem a 2,1 g (64%) de 3-carbometoxi-androsta-3,5-dieno-17/3-Ν,Ν-diisopropilcarboxamida, p.f. 159-1629C.

(v) Acido N,N-diisopropil-androsta-3,5-dieno-17Z?-carboxamida-3-carboxílico

Adicionaram-se 3-carbometoxi-androsta-3,5-dieno-17/3 -N,N-diisopropilcarboxamida (1,4 g, 3,17 mmal) e 1 g de I^COj a 88 ml de uma solução 10:1 de metanol-água e refluxou-se sob argon durante 20 horas. A mistura foi então concentrada até à secura e diluída com água. A camada aquosa foi enxaguada com acetato de etilo e acidificada. A emulsão foi várias vezes lavada com diclorometano. A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio e evaporada. 0 produto foi recristalizado por dissolução em éter etílico e adição de acetato de etilo e a concentração deu origem a ácido N,N-diisopropil-androsta-3,5-dieno-17/3-carboxamida-3-carboxílico (p.f. 230-2345C).

EXEMPLO 4

Acido 17/3 -(l\l,N-diisopropilcarboxamida)-4-fluoro-5-c<-androsta-3-eno-3-carboxílico (i) 3-ΟΧΟ-17/3 -(hidroximetil )-5- °< -androstano

Destilou-se amónia (500 ml) num balão de fundo redondo com 3 tubuladuras, equipado com um condensador com gelo seco e um dispositivo para fazer borbulhar argon. Dissolveu-se arame de Li (3 g) na amónia e agitou-se durante 15 minutos para assegurar a secagem completa. Adicionou-se gota a gota uma solução de 3-0x0-17/5 -(hidroximetil)-4-androsteno (preparada como se descreveu no Exemplo 2 (ii), 37,5 g, 0,123 mol), em 625 ml de ΤΗΓ e álcool t-butílico (6,25 ml, 0,8 eq.) à solução de Li/NH^. A reacção foi agitada a -789C durante 2 horas e interrompida

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-61com isopreno até que a cor azul desaparecesse. 0 enolato resul tanta foi então anulado com cloreto de amónio e a amónia foi deixada evaporar. Adicionou-se acetona ao resíduo e refluxou-se suavemente. A solução com acetona foi então filtrada e evai porada até à secura para se obterem 24,7 g (79/) de 3-oxo-17/?> -(hidroximetil)-5-c£ -androstano.

(ii) Acido 3-oxo-S-ol-androstano-17/^-carboxílico composto do título foi preparado de acordo com o Exemplo 2 (vi) substituindo 17/3-(t-butildimetilsililoximetil)-5-o(-androsta-3-eno-3-carboxilato de metilo por 3-oxo-17/3-(hidroximetil)-5-c<. -androstano.

(i i i) 3-0xo-5-d-androstano-17/3 -N,N-diisopropilcarboxamida

Suspendeu-se ácido 3-oxo-5-ct-androstano-17/3-carboxílico em tolueno (100 ml) e adicionou-se um excesso de cloreto de oxa. lilo (8 ml). A mistura reaccional foi agitada durante 1 hora a 259C (sob argon). Removeram-se então os voláteis (0,5 mmHg durante 2 horas). 0 resíduo foi ressuspenso em THF (25 ml), arre fecido a OQC e adicionou-se diisopropilamina (10 ml). A mistura reaccional foi agitada a 09C durante 2 horas e depois diluída com água. A mistura aquosa foi extraída com acetato de etilo e evaporada. A purificação por cromatografia em sílica-gel eluindo com acetato de etilo a 20/ em hexano deu origem a 3,15 g (78/) de 3 -oxo-5-ot -androstano-17/3 -N,N-diisopropilcarboxamida.

(iv) 3-0xo-5- ot -andros ta-l-eno-17/3 -N,N-diisopropilcarboxamida

Adicionou-se cloreto de fenilselenilo (1,1 g, 5,74 mmol) a uma solução de 3-oxo-5-c<-androstano-17/3-N,N-diisopropilcarboxamida (2,3 g, 5,74 mmol) em 100 ml de acetato de etilo e agi tou-se a mistura reaccional durante 2 horas. A mistura reaccio nal foi então lavada com solução de bicarbonato de sódio a 5/ e salmoura. A solução de acetato de etilo foi arrefecida a 05C e adicionaram-se 50 ml de THF. Adicionou-se lentamente peróxido de hidrogénio (6 ml de uma solução a 30/) e agitou-se a mistura reaccional durante 2 horas. A mistura reaccional foi então lavada com solução de bicarbonato de sódio a 5/ e salmoura, e eva porada até à secura. A purificação por cromatografia em sílica67 637

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-62-gel, eluindo com acetato de etilo a 20% em hexano, deu origem a 1,3 g (56,5%) de 3-oxo-5-<X. -androsta-l-eno-17/3-l\l,N-diisopropilcarboxamida.

(v) 3-0xo-5-<^-androstano-l,2-alfa-epóxido-17/3-N,l\l-diisopropilcarboxamida

Dissolveu-se 3-oxo-5-ot-androsta-l-eno-17/3 -N,N-diisopro pilcarbcxamida (4,6 g, 11,5 mmol) em 50 ml de metanol e arrefeceu-se a 152C. Adicionou-se à solução perõxido de hidrogénio (0,8 ml de uma solução a 30%) seguida por hidróxido de sódio (0,16 ml de uma solução a 10%) em 2 ml de metanol. Removeu-se o banho de gelo e continuou-se a agitação à temperatura ambiente durante 1 hora. A mistura reaccional foi então vertida em água gelada e lavada duas vezes com diclorometano. As camadas orgânicas foram combinadas e lavadas com água e salmoura; secas sobre sulfato de sódio e evaporadas. A trituração em aceto na deu origem a 4,0 g (83,7%) do epóxido desejado; 3-oxo-5-<^-androstano-1,2-ct-epóxido-17yâ -N,l\l-diisopropilcarboxamida.

(vi) 3-0xO-4-fluoro-5-d-androsta-l-eno-17/3-N,N-diisopropilcarboxamida

Dissolveu-se 3-oxo-5-c£-androstano-l,2- °t~epóxido-17/3> -N,l\l-diisopropilcarboxamida (1,7 g, 4 mmol) em 25 ml de THF e arrefeceu-se a -202C. Adicionou-se lentamente à solução (sob argon) poli(hidrogenofluoreto) de piridinio. A mistura reaccio nal foi aquecida a 02C, agitada durante 30 minutos, depois aque cida até à temperatura ambiente e agitada durante 15 minutos. A mistura reaccional foi vertida em água gelada e lavada com acetato de etilo. A camada orgânica foi lavada com água, solução de bicarbonato de sódio a 5% e salmoura; seca sobre sulfato de sódio e evaporada. A purificação por cromatografia em sílica-gel, eluindo com acetato de etilo a 20% em hexano, deu 750 mg (44%) da 3 -ox 0-4-fluoro-5-c<-androsta-l-eno-17^ - N, N-diisopropilcarboxamida desejada.

(vii) 17 /2>-(N, N-Diisopropilcarboxamida)-3-( trifluorometilsulfonato)-4-fluoro-5- °C-androsta-l, 3-dieno

Arrefeceu-se a -78QC uma solução de bis(trimetilsilil)amida de litio (4,2 mmol, 2,2 eq.) em 2 ml de THF. Adicionou-se

6Ί 637

SKB CASE 14380

-63uma solução de 3-oxo-4-fluoro-5-c<-androsta-l-eno-17/^J-N,N-diisopropilcarboxamida (800 mg, 19 mmol) em 10 ml de THF e agitou, -se a mistura reaccional durante 1 hora. Adicionou-se então uma solução de N-feniltrifluorometanossulfonimida (857 mg, 2,4 mmol) em 8 ml de THF e agitou-se a mistura reaccional durante

1,5 horas a -789C. A mistura reaccional foi então evaporada até à secura e cromatografada em sílica-gel eluindo com acetato de etilo a 20% em hexano* A trituração numa solução hexano e éter deu origem a 460 mg (46%) do produto desejado, 17/8-(N,N-diisopropilcarboxamida)-3-(trifluorometilsulfonato)-4-fluoro-5- οζ,-androsta-l,3-dieno.

(viii) 3-Carbometoxi-4-fluoro-5-ot-androsta-1,3-dieno-17/£ -l\l,N-diisopropilcarboxamida

Preparou-se o composto do título de acordo com o Exemplo 1 (iv) substituindo 20- ol-(t-butildimetilsililoximetil)-3-(trifluorometilsulfonato)-5-oG-pregna-3-eno por 17%3-(N,N-diisopropilcarboxamida)-3-( trifluorometilsulfonato)-4-fluoro-5- o£-andros. ta-1,3-dieno.

(ix) 3-Carbometoxi-4-fluoro-5-ot -androsta-3-eno-17/S -N,N-diisopropilcarboxamida

Hidrogenou-se 3-carbometoxi-4-fluoro-5- ot-androsta-1,3-dieno-17yG-N,N-diisopropilcarboxamida (120 mg, 0,26 mmol), em 15 ml de uma solução 2:1 de acetato de etilo e hexano, a 259C e 1 atmosfera sobre 20 mg de paládio a 10% em carbono. Filtrou, -se a solução para remover o catalisador e concentrou-se até se obter um sólido branco (120 mg). A recristalização em metanol e acetona deu origem a 55 mg (46%) da 3-carbometoxi-4-fluoro-5- o(-androsta-3-eno-17/S-N,N-diisopropilcarboxamida desejada, p. f. 171-1722C.

(x) Acido 17 ft-(N,N-diisopropilcarboxamida)-4-fluoro-5-Q(L-andro3ta-3-eno-3-carboxílico composto do título foi preparado de acordo com o Exemplo 2 (viii) substituindo a 3-carbometoxi-5-oí-androsta-3-eno-17/i-N,N-diisopropilcarboxamida pela 3-carbometoxi-4-fluoro-5-o(.-androsta-3-eno-17 A-diisopropilcarboxamida.

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-64EXEMPLO 5

Ácido 20-ol -(hidroximetil)-4-fluoro-5-oí-pregna-3-eno-3-carboxílico (i) 20-oí-(Hidroximetil)-5-o<-pregnano-3-ona composto do título foi preparado de acordo com o Exemplo 4 (i) substituindo 3-οχο-17β -(hidroximetil)-4-androsteno por 20-ol-.(hidroximetil)-pregna-4-eno-3-ona.

(ii) 20- <-(Hidroximetil)-5- e<-pregna-l-eno-3-ona composto do título foi preparado de acordo com o Exemplo 4 (iv) substituindo 3-oxo-5-c<-androstano-17_//3>-Ν,Ν-diisopro pilcarboxamida por 20-oL-(hidroximetil)-5-ot-pregnano-3-ona.

(iii) 20-ot-(Hidroximetil)-1,2-oC-epóxido-5-°t-pregnano-3-ona composto do título foi preparado de acordo com o Exemplo 4 (v) substituindo 3-oxo-5-<<-androsta-l-eno-17/2> -N,N-diisçi propilcarboxamida por 20- ot-(hidroximetil)-5- °<-pregna-l-eno-3-na.

(iv) 20-c<-(Hidroximetil)-4-fluoro-5- °4-pregna-l-eno-3-ona composto do título foi preparado de acordo com o Exemplo 4 (vi) substituindo 3-oxo-l ,2-°L-epâxido-5-°6-androstano-17/3»-Ν,Ν-diisopropilcarboxamida por 20-ol-(hidroximetil)-l,2-oi-epóxido-5-oó-pregnano-3-ona.

(v) 20-ot -(t-Butildimetilsililoximetil)-4-fluoro-5-o<L-pregna-l-eno-3-ona composto do título foi preparado de acordo com o Exemplo 1 (ii) substituindo 20-oà-(hidroximetil)-pregna-4-eno-3-ona por 20- °<.-(hidroximetil)-4-fluoro-5- °i-pregna-l-eno-3-ona.

(vi) 20-^Ot~(t-Butildimetilsililoximetil )-4-fluoro-3-(trifluoromatilsulfonato)-5-^c<-pregna-l,3-dieno composto do título foi preparado de acordo com o Exemplo 4 (vii) substituindo 3-oxo-4-fluoro-5-o4-androsta-l-eno-17 /3-N,N-diisopropilcarboxamida por 20-o^-(t-butildimetilsililoximetil)-4-fluoro-5-°C-pregna-l-ano-3-ona.

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SKB CASE 14380

-65(v i i) 3-Carbonietoxi-20-oà -(t-butildimetilsililoximetil)-4-fluoro-5-°l -pregna-1,3-dieno composto do título foi preparado de acordo com o Exemplo 4 (viii) substituindo 17/2>-(N,N-diisopropilcarboxamida)-3-(trifluorometilsulfonato)-4-fluoro-5- c^-androsta-l,3-dieno por 2 0-ot -(t-butildimetilsililoximetil)-4-fluoro-3-(trifluorometilsulfonato)-5-°C -pregna-1,3-dieno.

(viii) 3-Carbometoxi-20-oC-(t-butildimetilsililoxifnetil)-4-fluoro-5-oà-pregna-3-eno composto do título foi preparado de acordo com o Exemplo 4 (ix) substituindo 3-Carbometoxi-4-fluoro-5-o/-androsta-l,3-dieno-17/2> -Ν,Ν-diisopropilcarboxamida por 3-Carbometoxi-20_ c<-(t-butildimetilsililoximetil)-4-fluoro-5-oé-pregna-1,3-dieno.

(ix) 3-Carbometoxi-20-o<í -(hidroximetil)-4-fluoro-5--pregna-3-eno

A uma solução de 3-carbometoxi-20-<X.-( t-butildimetilsiM loximetil)-4-fluoro-5-c£-pregna-3-eno (610 mg, 1,2 mmol) em THF 20 ml adicionaram-se 2,4 mmol de fluoreto de tetrabutilamónio e agitou-se a mistura reaccional a 252C durante 3,5 horas sob argon. Verteu-se então a mistura reaccional em éter e lavou-se com água e salmoura; secou-se sobre sulfato de sódio e evaporou-se. A cromatografia em sílica-gel eluindo com acetato de etilo a 15$ em hexano originou 200 mg (43$) do 3-carbometoxi-20-c(-(hidroximetil)-4-fluoro-5-<X.-pregna-3-eno desejado, p.f. 177SC.

(x) Acido 20- ot-(hidroximetil)-4-fluoro-5-a4 -pregna-3-eno-3-carboxílico composto do título (p.f. 233-2369C a partir de metanol: :acetona) foi preparado de acordo com o Exemplo 1 (vi) substitu indo 20- <X.-(hidroximetil)-3-carbometoxi-5- °<-pregna-3-eno por 3-Carbometoxi-20-o<«(hidroximetil)-4-fluoro-5- °í-pregna-3-eno.

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SKB CASE 14380

-66EXEMPLO 6

Acido 20-<<-(hidroximetil)-A-nor-5-oí-preqna-l-eno-2-carboxílico z (i) Acido 20-q< -(hidroximetilj-A-nor-S-o^· -pregnano-2-^-carboxílico

Suspendeu-se 20- οζ-(hidroximetil)-5- <-pregnano-3-ona (8 g, 24,1 mmol) em 160 ml de ácido acético a 95%, tratou-se com sesqui-hidrato de acetato tálico (30,4 g, 74,5 mmol)e aqueceu-se a 852C. Após 3 horas arrefeceu-se a mistura reaccional e verteu-se em água gelada. 0 precipitado foi filtrado, redissolvido em acetato de etilo, lavado com água e salmoura; seco sobre sulfato de sódio e evaporado. 0 óleo resultante foi dissolvido em metanol, tratado com KOH aquoso (8 g em 50 ml de água), aquecido a 100BC durante 40 minutos e depois arrefecido até à temperatura ambiente e deixado a agitar durante 18 horas. A mis tura reaccional foi então diluída com água e lavada com acetato de etilo. A solução aquosa foi acidificada com ácido clorídrico concentrado e lavada várias vezes com acetato de etilo. As camadas orgânicas foram combinadas, lavadas com água e salmoura; secas sobre sulfato de sódio e evaporadas. A recristalização a partir de metanol e acetona deu origem a 4,9 g (58%) de ácido 20- d-(hidroximetil)-A-nor-5- c><-pregnano-2- cq-carboxflico.

(ii) 20- o£-(Hidroximetil)-2- <X.-carbometoxi-A-nor-5- o<-pregnano

Suspendeu-se ácido 20- <<-(hidroximetil)-A-nor-5- c<-pregna no-2- oi-carboxílico (4,9 g, 13,5 mmol) em 200 ml de éter dietílico e tratou-se com aproximadamente 67 mmol de diazometano numa solução etérea e agitou-se a mistura reaccional durante 6 ho ras. Removeu-se in vacuo o diazometano e o éter em excesso e a recristalização a partir de metanol deu origem a 3,6 g (72%) de 20- cá-(hidroxi me til)-2- cÁ-carbometoxi-A-nor-5- c^-pregnano.

(iii) 2- <Á-Carbometoxi~20- <á-(t-butildimetilsililoximetil)-fl-nor-5- o<L-pregnano composto do título foi preparado de acordo com o Exemplo 1 (ii) substituindo 20-oi-(hidroximetil)-pregna-4-eno-3-ona por 20- ot-(hidroximetil)-2- c<-carbometoxi-A-nor-5- c<-pregnano.

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SKB CASE 14380

(iv) 2-Carbometoxi-20-oC-(t-butildimetilsililoximetil)-A-nor-5- &c-pregna-2-eno

Dissolveu-se 2- ot-carbometoxi-20- oL~( t-butildimetilsililoximetil)-A-nor-5-ot-pregnano (960 mg, 2 mmol) em 30 ml de THF e arrefeceu-se a -78OC. Adicionou-se isopropilciclo-hexilamida de lítio (5 ml de uma solução 0,72 M) e agitou-se a solução durante 30 minutos a -783C, aqueceu-se até à temperatura ambiente e agitou-se mais 1 hora. A mistura reaccional foi novamente ar refecida até -782C; adicionou-se uma solução de brometo de fenilselenilo (960 ml, 4 mmol) em 6 ml de THF e agitou-se durante 30 minutos. A mistura reaccional foi então aquecida até à temperatura ambiente e agitada durante 1 hora; vertida em NH^Cl frio, saturado e lavada com acetato de etilo. As camadas orgânicas foram combinadas e lavadas com ácido clorídrico frio a 5%, solução de bicarbonato de sódio a 5%, água e salmoura. A solução de acetato de etilo foi então arrefecida a 102C e adicionojj -se peróxido de hidrogénio (1 ml de uma solução a 30%). A mistura reaccional foi então agitada à temperatura ambiente durante 2 horas, diluída com água e lavada com ^00^ saturado, sulfi to de sódio diluído e salmoura, seca sobre sulfato de sódio e evaporada. A purificação por cromatografia em sílica-gel eluijn do com acetato de etilo a 3% em hexano seguida por recristaliza ção a partir de metanol deu origem a 680 mg (72%) de uma mistura 5:1 de isómeros: o 2-carbometoxi-20-oí.-(t-butildimetilsililoximetil)-A-nor-5- <-pregna-l-eno e o isómero desejado 2-carbo metoxi-20- <=<-(t-butildimetilsililoximetil)-A-nor-5- &i-pregna-2-eno. Os isómeros foram separados para dar 100 mg de composto do título, desejado.

(v) 20- oi-(Hidroximetil)-2-carbometoxi-A-nor-5- °t-pregna-

-2-eno composto do título foi preparado de acordo com o Exemplo 1 (v) substituindo 20-oí-(t-butildimetilsililoximetil)-3carbometoxi-5-oi-pregna-3-eno por 2-carbometoxi-20-ot-(t-butildimetilsililoximetil)-A-nor-5- oi-pregna-2-eno.

(vi) Acido 20- o4-(hidroximetil)-fl-nor-5-ot-preqna-l-eno-2-

-carboxílico

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SKB CASE 14380

-680 composto do título (p.f. 2352Ca partir de metanol) foi preparado de acordo com o Exemplo 1 (vi) substituindo 20-c<-(hi droximetil)-3-carbometoxi-5-ot-pregna-3-eno por 20-c<-(hidroximetil)-2-carbometoxi-A-nor-5- °<-pregna-2-eno.

EXEMPLO 7 r

Acido 17 /5-N,N-diisopropilcarboxamida-5-o<í-androsta-l,3-dieno-3-carboxílico (i) 17 /3-(N,N-diisopropilcarboxamida )-3-(trifluorometilsulfonato)-5-<-androsta-1,3-dieno composto do título foi preparado de acordo com o Exemplo 4 (vii) substituindo 3-oxo-4-fluoro-5-o(-androsta-l-eno-17/l-Ν,Ν-diisopropilcarboxamida por 3-oxo-5-c<-androsta-l-eno-17/2-N,N-diisopropilcarboxamida.

(ii) 3-Carbometoxi-5- ot-androsta-l, 3-dieno-17/3 -N,l\l-diisopropilcarboxamida composto do título (p.f. 174-1762C) foi preparado de acordo com o Exemplo 1 (iv) substituindo 20-c£-(t-butildimetilsililoximetil)-3-(trifluorometilsulfonato)-5- oi-pregna-3-eno por 17p> -(N,N-diisopropilcarboxamida)-3-(trifluorometilsulfonato)-5-oc-androsta-1,3-dieno.

z ( i i i) Acido 17/S-l\l,N-diisopropilcarboxamida-5-°<-androsta-1,3-dieno-3-carboxílico composto do título (p.f. 1632C) foi preparado de acordo com o Exemplo 2 (viii) substituindo 3-carbometoxi-5-<X-androsta-3-eno-17 /3-N,N-diisopropilcarboxamida por 3-carbometoxi-5-c<-androsta-1,3-dieno-17/3-N,N-diisopropilcarboxamida.

EXEMPLO 8 z

Acido 19-nor-5-o(.-androsta-3-eno-17 /3-ol-3-carboxílico composto do título foi preparado de acordo com o Exemplo 1 (ii a vi) substituindo 20-o(-(hidroximetil)-pregna-4-eno-3-ona por 19-nor-testosterona.

EXEMPLO 9 z

Acido 5-o( -pregna-3-eno-(20R)-3,20-dicarboxílico

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SKB CASE 14380 (i) Acido 3-carbometoxi-5- o(-pregna-3-eno-(20R)-20-carboxílico

A uma solução de 20- c<-(hidroximetil)-3-carbometoxi-5- c(-pregna-3-eno, preparada como no Exemplo 1 (374 mg, 1,0 mmol) em 25 ml de acetona, adiciona-se gota a gota reagente de Oones até persistir uma cor vermelha. Adiciona-se então isopropanol para anular o oxidante em excesso. A solução é decantada dos sais de crómio gomosos, concentrada e repartida entre diclorometano e água. Os sais são dissolvidos em água e extraídos com diclorometano. As camadas orgânicas combinadas são então lavadas com salmoura, secas sobre sulfato de sódio e concentradas para dar ácido 3-carbometoxi-5- <£.-pregna-3-eno-(20R)-20-carbox,í lico.

z (ii) Acido 5-oC-pregna-3-eno-(20R)-3,20-dicarboxílico composto do título é preparado de acordo com o Exemplo 1 (vi) substituindo 20- <x-(hidroximetil)-3-carbometoxi-5- <x-pregna-3-eno por ácido 3-carbometoxi-5-<Á-pregna-3-eno-(20R)-20-carboxílico.

EXEMPLO 10

Acido N,N-diisopropil-5-c£-pregna-3-eno-(20R)-20-carboxamida-3-carboxílico composto do título foi preparado de acordo com o Exejn pio 2 (vii-viii) substituindo ácido 3-carbometoxi-3-androsteno-17/1,-carboxílico por ácido 3-carbometoxi-5-c<-pregna-3-eno-(20R)-20-carboxílico, preparado como no Exemplo 9.

EXEMPLO 11 z

Acido 5- °6-3-eno-17 /3-carboxaldeído-3-carboxílico (i) Cloreto de 3-carbometoxi-5-o<-androsta-3-eno-17f}-carboxilo

Suspende-se uma solução de ácido 3-carbometoxi-3-andros~ teno-17/i-carboxílico (462 mg, 1,0 mmol) em 10 ml de tolueno e trata-se com 0,5 ml de cloreto de oxalilo durante 2 horas. 0s materiais voláteis são então removidos a 1 mmHg deixando um resíduo de cloreto de 3-carbometoxi-5-o<-androsta-3-eno-17/3-carboxilo.

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SKB CASE 14380 (ii) 3-carbometoxi-5- °^-androsta-3-eno-17/^-carboxaldeído

Trata-se uma solução de cloreto de 3-carbometoxi-5-c\'-ajn drosta-3-eno-17/S-carboxilo (480 mg, 1,0 mmol) em 10 ml de tetra-hidrofurano com hidreto de tri-t-butoxialumínio e lítio (254 mg, 1,0 mmol) a OeC durante uma hora para dar, após tratamento aquoso, 3-carbometoxi-5- o(-androsta-3-eno-17/3 -carboxaldeido.

(iii) Acido 5- ot-3-androsta-3-eno-17/3-carbbxaldeido-3-carboxílico composto do título é preparado de acordo com o Exemplo 2 (viii) substituindo 3-carbometoxi-3-androsteno-17/i-N, N-diisjo propilcarboxamida por 3-carbometoxi-5- o(-androsta-3-eno-17/3-car boxaldeído.

EXEMPLO 12

Λ

Acido 5 <Z-androsta-3-eno-17/3 -(l-oxobutil)-3-carboxílico (i) 3-Carbometoxi-17Z*-(l-oxobutil)-5-c< -androsta-3-eno

Trata-se uma solução de cloreto de 3-carbometoxi-5-^-an drosta-3-eno-17/3-carboxilo (480 mg, 1 mmol), preparado tal como no Exemplo 11, em 10 ml de THF, com 1,0 mmol de di-n-butil cobre-lítio a -789C. A reacção é interrompida com cloreto de amónio aquoso. A extracção com diclorometano seguida por concentração dos extractos orgânicos e cromatografia do resíduo dá origem a 3-carbometoxi-17/3-(l-oxobutil)-5-o£-androsta-3-eno.

(ii) Acido 5-c<-androsta-3-eno-17z3-(l-oxobutil)-3-carboxílico composto do título é preparado de acordo com o Exemplo 1 (vi) substituindo 20-ot-(hidroximetil)-3-carbometoxi-5-°^-pregna-3-ona por 3-carbometoxi-17/3-(l-oxobutil)-5- o<f-androsta-3-eno.

EXEMPLO 13 z

Açido androsta-3,5-dieno-17/3-ol-3-carboxílico composto do título foi preparado de acordo com o Exemplo 3 (iii a v) substituindo androsta-4-eno-3-ona-17/J-N,N-diisopropilcarboxamida por acetato de testosterona disponível no

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SKB CASE 14380

-71comércio.

EXEMPLO 14 •z

Acido androsta-3,5-dieno-17-ona-3-carboxílico composto do título foi preparado de acordo com o Exem pio 9 (i) substituindo 20-oL-(hidroximetil )-3-carbometoxi-5-GZ -pregna-3-eno por ácido androsta-3,5-dieno-17/3 -ol-3-carboxílico (Exemplo 13).

EXEMPLO 15

Preqna-3,5,17(20)-trieno-3-carboxi-21-oato de etilo

Adicionou-se uma solução de etóxido de sódio (680 mg, 10 mmol) em 5 ml de etanol, a uma mistura de ácido androsta-3,5-dieno-17-ona-3-carboxílico (942 mg, 3 mmol), preparado como no Exemplo 14, e de dietilfosfonoacetato de metilo (2,12 g, 10 mmol) e aqueceu-se a mistura resultante ao refluxo durante 4 ho ras. A mistura é arrefecida, concentrada, diluída com ácido acfe tico diluído e lavada com êter· Os extractos etéreos combinados são lavados com água e salmoura e concentrados para dar origem a pregna-3,5,17(20)-trieno-3-carboxi-21-oato de etilo.

EXEMPLO 16 z

Acido androsta-3,5,16-trieno-17-N,N-diisopropilcarboxamida-3-carboxílico z

(i) Acido androsta-3,5,16-trieno-17-(tri-fluorometilsulfonato)-3-carboxílico

A uma solução de ácido androsta-3,5-dieno-17-ona-3-carbo xílico (314 mg, 1 mmol), preparada como no Exemplo 14, em 10 ml de cloreto de metileno adiciona-se 2,6-di-t-butil-4-metilpiridi. na (272 mg, 1,5 mmol) e anidrido trifluorometanossulfónico (0,3 ml, 1,6 mmol) e agita-se a solução durante 4 horas. A mistura reaccional é então diluída com cloreto de metileno, lavada com ácido clorídrico a 10% e salmoura e concentrada para dar origem a ácido androsta-3,5,16-trieno-17-(trifluorometilsulfonato)-3-carboxílico bruto.

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SKB CASE 14380

-72P (ii) Acido androsta-3,5,16-trieno-17-N,N-diisopropilcarboxamida-3-carboxílico

Agíta-se, sob uma atmosfera de monóxido de carbono e durante 4 horas, uma mistura de ácido androsta-3,5,16-trieno-17-(trifluorometilsulfonato)-3-carboxílico (447 mg, 1 mmol), trietilamina (200 mg, 2 mmol), diisopropilamina (4 g, 40 mmol) e acetato de bis(trifenilfosfina)paládio (II) (22 mg, 0,03 mmol), em 4 ml de DMF. Dilui-se então a mistura com ácido clorídrico a 10$ e lava-se profundamente com diclorometano. A solução de diclorometano á lavada com salmoura, seca e concentrada e o resíduo é recristalizado (éter dietílico) para dar origem a ácido androsta-3,5,16-trieno-17-Ν,N-diisopropilcarboxamida-3-carboxílico.

EXEMPLO 17

Acido 2 ^r,3'-c<-tetra-hidrofurano-2^,-espiro-17-(3,5-androstadieno)-3-carboxílico composto do titulo é preparado de acordo com o Exemplo 3 (iii a v) substituindo androsta-4-eno-3-ona-17/3>-N,N-diisopro pilcarboxamida por 2',3'-o<-tetra-hidrofurano-2’-espiro-17-(androsta-4-eno-3-ona).

EXEMPLO 18

3-Carbametoxi-17 /3>-acetamido-3,5-androstadieno composto do título ê preparado de acordo com o Exemplo 3 (iii-iv) substituindo androsta-4-eno-3-ona-17/3-N,N-diisopropilcarboxamida por 17/4-acetamido-4-androsteno-3-ona.

EXEMPLO 19

P

Acido androsta-3,5-dieno-17-c<-ol-3,17 /4-dicarboxílico (i) 17/4 -Ciano-17-ç<-acetoxiandrosta-4-eno-3-ona

Dissolve-se 4-androsteno-3,17-diona (20 g) aquecendo sua vemente em acetona ciano-hidrina (30 ml). 0s cristais que se formam, após vários minutos, são filtrados, lavados com pentano e em seguida dissolvidos numa mistura de piridina (50 ml) e ani drido acético (50 ml). Após 48 horas os voláteis são removidos

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SKB CASE 14380

-73sob pressão reduzida. 0 resíduo é então dissolvido em éter e lavado sucessivamente com ácido clorídrico a 5% e bicarbonato de sódio aquoso. A solução orgânica é seca e concentrada para dar uma mistura de epímeros em C-17 de 17-ciano-17-acetoxiandros, ta-4-eno-3-ona. A cromatografia dá 17/-ciano-17-ct-acetoxiandrosta-4-eno-3-ona.

(ii) 3-Carbometoxi-17/3 -ciano-17-c<-acetoxiandrosta-3,5-dieno composto do título é preparado de acordo com o Exemplo 3 (iii-iv) substituindo androsta-4-eno-3-ona-17/> -N,N-diisopropilcarboxamida por 17-ciano-17-acetoxiandrosta-4-eno-3-ona.

(iii) Acido androsta-3,5-dieno-17-oí-ol-3,17/3 -dicarboxílico

Arrefece-se a 159C uma solução de 3-carbometoxi-17/ -cia no-17<sL-acetoxiandrosta-3,5-dieno em metanol. Faz-se borbulhar ácido clorídrico seco na solução e deixa-se a mistura repousar à temperatura ambiente durante 2 horas. 0 solvente é então removido sob pressão reduzida. Adiciona-se uma mistura de 1:1 de THF-água seguida por hidróxido de sódio em excesso e agita-se a mistura durante 2 horas. A mistura reaccional ó então acidificada e extraída com clorofórmio. A concentração da solução orgânica dá origem a ácido androsta-3,5-dieno-17-c£ -ol-3,17/-dicarboxílico que é recristalizado em metanol.

EXEMPLO 20 z

Acido 5-°< -androsta-3,8(14)-dieno-17/3-ol-3-carboxílicQ (i) Androsta-5,7-dieno-3/3 ,17/3-diol

Aquece-se sob refluxo durante 0,5 horas, uma mistura de diacetato de androsta-5-eno-3/,17/-diol (3,75 g, 10 mmol), di, bromantina (2,03 g, 7 mmol) e bicarbonato de sódio (4,54 g, 54 mmol) em hexano (200 ml). Arrefece-se então a mistura e filtra -se e evapora-se o filtrado até à secura. 0 resíduo é dissolvi, do em 50 ml de tolueno e tratado com brometo de lítio (2 g) em 5 ml de acetona. A mistura é agitada a OQC durante 2 horas e depois tratada com 2 ml de trietilamina e 1,5 ml de benzenotiol. Após agitação à temperatura ambiente durante 1,5 horas, adicionam-se 100 ml de acetato de etilo e lava-se a solução orgânica com ácido clorídrico 1 N e água. A fase orgânica é seca e con

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SKB CASE 14380

-74centrada. 0 resíduo é então redissolvido em 75 ml de acetato de etilo, arrefecido a 08C e tratado com 2,6 g de ácido m-cloroperbenzóico durante 2 horas. A mistura é lavada com solução a 10% de bicarbonato de sódio e depois concentrada. 0 resíduo ê dissolvido em 100 ml de tolueno, tratado com trietilamina (3,6 ml), aquecido a 709C durante 24 horas, arrefecido e lavado com água. A solução orgânica foi concentrada e cromatografada para dar origem a diacetato de androsta-5,7-dieno-3/3 ,17/2 -diol. 0 diacetato á tratado durante uma noite com K^CO-j numa solução 10:1 de metanol:água para dar origem, após tratamento extractivo a androsta-5,7-dieno-3/2 ,17/3-diol.

(ii) Androsta-4,7-dieno-3,17-diona

Seca-se azeotropicamente, durante uma hora, uma solução de androsta-5,7-dieno-3/3 ,17/3-diol (2,9 g, 10 mmol) em 150 ml de tolueno. Adiciona-se butanona (15 ml) seguida por isopropóxido de alumínio (1,7 g, 8 mmol) e aquece-se a mistura ao reflu, xo durante 2,5 horas. A solução é então concentrada até um volume de 25 ml, diluída com triclorometano e lavada com ácido clorídrico a 5%, bicarbonato de sódio aquoso e salmoura. A cojn centração e cromatografia dão origem a androsta-4,7-dieno-3,17-diona.

(iii) 5- o<-androsta-7-eno-3-ona-17 composto do título é preparado de acordo com o procedimento do Exemplo 4 (i) substituindo 3-oxo-17/3-(hidroximetil)-4-androsteno por androsta-4,7-dieno-3,17-diona.

(iv) 5-c<-andros ta-8( 14)-eno-3-ona-17 /3-ol

Hidrogena-se uma solução de 5-o(-androsta-7-eno-3-ona-17/S-ol em acetato de etilo, à temperatura ambiente e a 1 atmos. fera sobre paládio a 10% em carbono durante 8 horas. A filtração remove o catalisador e a concentração dá origem a 5-<X-andros ta-8 (14)-eno-3-ona-17/S -ol.

(v) 5- cZ-androsta-1,8(14)-dieno-3-ona-17/3-ol composto do título é preparado de acordo com o Exemplo 5 (ii) substituindo 20-o<-(hidroximetil)-5-ot-pregnano-3-ona por 5- o<-androsta-8(14)-eno-3-ona-17/3 -ol.

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SKB CASE 14380

-75(ui) Acido 5-cZ-»androsta-3,8(14)-dieno-17Z3 -ol-3-carboxílico composto do título é preparado de acordo com o Exemplo 5 (v a x) substituindo 20-oC-(hidroximetil)-pregna-4-eno-3-ona por 5- ot-androsta-1,8(14)-dieno-3-ona-17/3-ol.

EXEMPLO 21 z

Acido N,N-diisopropilandrosta-3,5,7-trieno-17/3-carboxamida-3-carboxílico (i) Androsta-4,6-dieno-3-ona-17/S -N,N-diisopropilcarboxamida

Aquece-se ao refluxo, durante 3,5 horas, androsta-4-eno-3-ona-17/3-N,N-diisopropilcarboxamida (12 g, 30 mmol) e cloroanilo(8,95 g, 36,4 mmol) em 700 ml de t-butanol e depois arrefe ce-se e filtra-se. 0 filtrado é concentrado e o resíduo retoma do em 700 ml de triclorometano e lavado sucessivamente com 4 x 150 ml de água, 3 x 150 ml de bicarbonato de sódio aquoso, 3 x 150 ml de hidróxido de sódio a 5% e 3 x 150 ml de salmoura, seco sobre sulfato de sódio e concentrado para dar origem a androsta-4,6-dieno-3-ona-17/3-Ν,Ν-diisopropilcarboxamida.

z (ii) Acido N,N-diisopropilandrosta-3_>5,7-trieno-17/3-carboxamida- 3-carboxílico composto do título é preparado de acordo com o Exemplo 3 (iii-v) substituindo androsta-4-eno-3-ona-17/3-N,N-diisopropilcarboxamida por androsta-4,6-dieno-3-ona-17/3-N,N-diisopropilcarboxamida.

EXEMPLO 22 z

Acido A-homo-5-ot -4-eno-17/3 -N,N-diisopropilcarboxamida-4-carboxflico (i) A-homo-5- °< -androstano-4-ona-17 Z3-N,l\l-diisopropilcarboxamida

A uma solução a 08C de 3-oxo-5-c<-androstano-17/3 -N,N-diisopropilcarboxamida (15 g), preparada como no Exemplo 4, e KOH (28 g) em éter (500 ml) e metanol (850 ml) adicionam-se 20 g de N-metilnitroso-ureia ao longo de 20 minutos. Após 5 horas, adicionam-se 300 ml de ácido clorídrico a 10% e filtra-se e con

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SKB CASE 14380

-76centra-se a mistura para remover os solventes orgânicos. A sus pensão aquosa resultante é extraída com éter e a solução éterea é seca e concentrada. A cromatografia do resíduo dá origem a A-homo-5- <A-androstano-4-ona-17/?»-N, N-diisopropilcarboxamida.

z (ii) Acido A-homo-5-oó -4-eno-17/3-N,N-diisopropilcarboxamida-4-carboxílico

Utilizando o protocolo do Exemplo 3 (iii-v) e substituin do androsta-4-eno-3-ona-17/3 -N,N-diisopropilcarboxamida por A-homo-5-ot-androstano-4-ona-17/?> -N,N-diisopropilcarboxamida obtém-se uma mistura de ácidos A-homo-4-carboxílicoSj 3-eno e 4-eno. A cromatografia e recristalização dão origem a ácido A-homo-5-o( -androsta-4-eno-17/S -N,N-diisopropilcarboxamida-4-car, boxílico puro.

EXEMPLO 23 z

Acido N,N-diisopropil-4-cloro-androsta-3,5-dieno~17 ^/-carbcxamida-3-carboxílico (i) 3-0xo-androstano-4-5- °4-epóxido-17/3 -N,N-diisopropilcarboxamida composto do título é preparado de acordo com o Exemplo 4 (v) substituindo 3-oxq-5-oí -androsta-l-eno-17/3 -N,N-diisopropilcarboxamida por androsta-4-eno-3-ona-17/3 - N,N-diisopropilcar boxamida.

(ii) 3-0xo-4-cl oro-4-androsteno-17/3-N,N-diisopropilcarboxamida

Faz-se passar uma corrente de cloreto de hidrogénio gaso so através de uma solução, em clorofórmio, de 3-oxo-androstano-4,5-o(-epóxido-17/3 -N,N-diisopropilcarboxamida durante 2 horas. A solução é então lavada com água, seca (Na2S0^) e concentrada para dar 3-oxo-4-cloro-4-androsteno-17/3-N,N-diisopropilcarbox£ mi da.

(i i i ) Acido N,N-diisopropil-4-cloro-androsta-3,5-dieno-17/3-carboxamida-3-carboxílico composto do título é preparado de acordo com o Exemplo 3 (iii a v) substituindo androsta-4-eno-3-ona-17/? -N,N-diisopro. pilcarboxamida por 3-oxo-4-cloro-4-androsteno-17/3-N,N-diisopro • ^{67 637}

SKB CASE 14380

-77pilcarboxamida.

EXEMPLO 24

Ácido N,N-diisoprDpil-4-metil-5-oL-androsta-3-eno-17^?-carboxamida-3-carboxílico (i) 3-0xo-17 /3-(hidroximetil)-4-metil-4-androsteno

Aquece-se ao refluxo uma mistura de t-butóxido de potássio (5 g) em 100 ml de t-butanol. Adiciona-se uma solução de 3-oxo-17/>-(hidroximetil)-4-androsteno (10 g) em t-butanol segui, da por uma solução de iodeto de metilo (2,7 o) em t-butanol. 0 aquecimento continua durante 3 horas. A mistura é então arrefe cida, acidificada e extraída com diclorometano. A solução de diclorometano è lavada com salmoura, seca e concentrada para originar 3-oxo-17p> -(hidroximetil)-4-metil-4-androsteno.

z (ii) Acido N,N-diisopropil-4-metil-5-cÁ-androsta-3-eno~17/3 -carboxamida-3-carboxílico composto do título é preparado de acordo com o Exemplo 2 (iii a viii) substituindo 3-oxo-17/3-(hidroximetil )-4-androsteno por 3-oxo-17/3-(hidroximetil)-4-metil-4-androsteno.

EXEMPLO 25 z

Acido N,N-diisopropil-4-trifluorometil-androsta-3,5-dieno-17/3 -carboxamida-3-carboxílico (i) 3-0xo-4-trifluorometil-4-androsteno-17/S-N,N-diisopropilcarboxamida

Arrefece-se a -782C uma solução de 3-oxo-4-androsteno-17/3-N,N-diisopropilcarboxamida (1 g) em 10 ml de piridina. Condensa-se iodeto de trifluorometilo gasoso num banho de gelo seco-acetona e adiciona-se à solução arrefecida de esteróide-pi. ridina. A solução resultante é submetida a fotólise usando uma lâmpada de vapor de mercúrio de 450 watt, de pressão média à tem peratura ambiente durante 18 horas. A mistura reaccional é então diluída com acetato de etilo, lavada com ácido clorídrico frio, diluído, bissulfito de sódio a 5%, água e salmoura e seca sobre sulfato de sódio anidro e concentrada até à secura. A ριι

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SKB CASE 14380

-78rificação numa coluna de sílica-gel eluíndo com acetato de etilo a 20$ em hexano dá origem a 3-oxo-4-trifluorometil-4-androsteno-17/3-N,N-diisopropilcarboxamida.

z (i i) AcidoN,l\l-diisopropil-4-trifluorometil-androsta-3,5-dieno-17/3-carboxamida-3-carboxílico composto do título é preparado de acordo com o Exemplo 3 (iii a v) substituindo androsta-4-eno-3-ona-17/3 -N,N-diisopro pilcarboxamida por 3-oxo-4-trifluorometil-4-androsteno-iy2>-N,N-diisopropilcarboxamida.

EXEMPLO 26

Acido N_>N-diisopropil-6-trifluorometil-androsta-3,5-dieno-17/3-carboxamida-3-carboxílico (i) 3-0xo-6-trifluorometil-4-androsteno-17/S-N, N-diisopropilcarboxamida

Dissolve-se 17^-N,N-diisopropilcarboxamida-3-(trifluor£ metilsulfonato)-androsta-3,5-dieno (1 g) em 10 ml de piridina e submete-se a fotólise usando uma lâmpada de vapor de mercúrio de 450 u/att_y de pressão média Hanovia à temperatura ambiente durante 18 horas. A solução reaccional é diluída com acetato de etilo que por sua vez é lavado com ácido clorídrico frio diluído, água e salmoura, seco sobre sulfato de magnésio anidro e evaporado até à secura. A cromatografia numa coluna de silica gel eluindo com acetato de etilo a 20% em hexano dá origem a 3-oxo-6-trifluorometil-4-androsteno-17/S-N,N-diisopropilcarboxamida.

z (ii) Acido N,N-diisopropil-6-trifluorometilandrosta-3,5-dieno-17 /3-carboxaniida-3-carboxílico composto do título é preparado de acordo com o Exemplo 3 (iii a v) substituindo androsta-4-eno-3-ona-17/3-N,N-diisopro pilcarboxamida por 3-oxo-6-trifluorometil-4-androsteno-17/3>-N,N-diisopropilcarboxamida.

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SKB CASE 14380

-79EXEMPLO 27 z

Acido 17/S-N,N-diisopropilcarboxamida-6-fluoroandrosta-3,5-dieno-3-carboxílico (i) 17 /3-N, N-diisopropilcarboxamida-5-o<L-androsteno-3-espiro-2'-dioxolano

A uma solução de 3-oxo-4-androsteno-17/3 -N,N-diisopropil carboxamida (8 g) em 300 ml de benzeno adicionaram-se 30 ml de etileno-glicol e ácido p-toluenossulfónico (240 mg)· A solução resultante foi refluxada sob argon com recolha de água, usando uma ratoeira de Dean Stark, durante 30 horas. Deixou-se então a mistura reaccional arrefecer até à temperatura ambiente e diluiu-se com acetato de etilo· A camada orgânica foi lavada com bicarbonato de sódio a 5% e salmoura, seca sobre sulfato de magnésio anidro e evaporada até à secura. 0 material bruto foi purificado numa coluna de sílica-gel usando como solvente de eluição acetato de etilo a 20% em hexano para dar origem a 7 g de 17/i-N,N-diisopropilcarboxamida-5-cxL-androsteno-3-espiro-2 '-dioxolano (80%).

(ii) 17 (b -!\l,hl-diisopropilcarboxamida-5-c£ ,6 °<-epóxi-androstano-3-espiro-2'-dioxolano

A uma solução de 17/i-N,N-diisopropilcarboxamida-5-andros teno-3-espiro-2'-dioxolano (4,43 g, 10 mmol) em 100 ml de diclo rometano seco, a 05C, adicionou-se gota a gota através de um Fju nil de gotas, uma solução de ácido m-cloroperbenzóico (2,8 g) em 40 ml de diclorometano. Depois da adição de ácido m-cloroperbenzóico estar completa, deixou-se a mistura reaccional aque cer até à temperatura ambiente e agitou-se por mais 30 minutos. A mistura reaccional foi então lavada com solução aquosa a 10% de sulfito de sódio, quatro vezes, seguida por solução aquosa a 5% de bicarbonato de sódio e salmoura e seca sobre sulfato de magnésio anidro e concentrada até se obter um xarope. A cromatografia em coluna, eluindo com acetato de etilo a 30% em hexano, deu origem a 2,76 g de 17/2-N,N-diisopropilcarboxamida-5c<, 6<X.-*epóxi-androstano-3-espiro-2'-dioxolano sob a forma de um sj5 lido branco (61%).

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SKB CASE 14300

-80(i i i) 3-0xo-6-fluoro-4-androsteno-17/3>-N,N-diisopropilcarboxamida

Dissolveu-se 17y3-N,N-diisopropilcarboxamida-5c< ,6 <=<—epjá xi-androstano-3-espiro-2'-dioxolano (2,5 g) numa mistura 50:50 (v/v) de benzeno e éter* A esta solução adicionou-se trifluore to-eterato de boro (2,5 ml) sob argon. A solução reaccional foi agitada à temperatura ambiente sob argon durante quatro horas e depois a reacção foi interrompida com carbonato de sódio aquoso a 5%. A camada orgânica foi lavada com água e salmoura, seca sobre sulfato de magnésio anidro e evaporada até à secura sob pressão reduzida. 0 resíduo foi então tratado com 15 ml de cloreto de hidrogénio saturado em ácido acético glacial, A solução resultante foi agitada à temperatura ambiente sob argon, durante 1,5 horas e depois diluída com acetato de etilo, A solução de acetato de etilo foi lavada com bicarbonato de sódio aquoso a 5%, água e salmoura, seca sobre sulfato de magnésio anidro e evaporada até à secura. 0 material bruto foi purifica dc numa coluna de sílica-gel eluindo com acetato de etilo a 25% em hexano para dar origem a 3-oxo-6^ -fluoro-4-androsteno-17Í'^í -Ν,Ν-diisopropilcarboxamida (675 mg, 30%) e 3-oxo-6-cx -fluoro-4-androsteno-17/i> -N,N-diisopropilcarboxamida (900 mg, 40%).

(iv) 17 /3>-N,N-diisopropilcarboxamida-3-(trifluorometilsulfona- to)-6-fluoro-androsta-3,5-dieno

A uma solução dos epímeros de 3-oxo-6-fluoro-4-androsteno-17/3-N,N-diisopropilcarboxamida (1,4 g) em 50 ml de diclorometano seco adicionou-se 2,6-di-t-butil-4-metilpiridina (850 mg) seguida por anidrido trifluorometanossulfónico (0,75 ml) sob ar, gon. A solução resultante foi agitada à temperatura ambiente, sob argon, durante 3 horas, 0 solvente foi então removido sob pressão reduzida. 0 resíduo foi redissolvido em acetato de eti lo que por sua vez foi lavado com ácido clorídrico frio diluído, água, salmoura, seco sobre sulfato de magnésio anidro e ev£ porado até se obter um óleo, A cromatografia em coluna (sílica gel, acetato de etilo a 10% em hexano) deu origem a 17/3-Ν,Ν-diisopropilcarboxamida-3-( trifluorometilsul fonato)-6-fluoro-ajn drosta-3,5-dieno e 17y3-N,N-diisopropilcarboxamida-3-(trifluor2 metilsulfonato)-6-fluoro-androsta-2,4-dieno.

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SKB CASE 14380

(v) 17/5 -N,N-diisopropilcarboxamida-6-fluoro-androsta-3,5-dieno-3-carboxilato de etilo

Durante 10 minutos purgou-se, com monóxido de carbono, uma mistura de 17/5-N,N-diisopropilcarboxamida-3-(trifluorometilsulfonato)-6-fluoro-androsta-3,5-dieno (250 mg), trietilamina (0,12 ml), etanol (1,5 ml), N,N-dimetilformamida (2 ml) e acetato de bis(trifenilfosfina)paládio (II) (25 mg). A mistura reaccional foi agitada sob uma atmosfera de monóxido de carbono à temperatura ambiente, durante uma noite, e depois diluída com acetato de etilo. A solução de acetato de etilo foi então lava, da com ácido clorídrico frio diluído, água e salmoura, seca sjo bre sulfato de magnésio anidro e concentrada até à secura. A cromatografia numa coluna de sílica-gel, eluindo com acetato de etilo a 10% em hexano originou 108 mg de 17^-N,N-diisopropilcarboxamida-6-fluoro-androsta-3,5-dieno-3-carboxilato de etilo (55%).

(vi) Acido 17 /3-N,N-diisopropilcarboxamida-6-fluoro-androsta-3,5-dieno-3-carboxílico composto do título foi preparado de acordo com o Exemplo 2 (viii) substituindo 3-carbometoxi-3-androsteno-17/3-N,N-diisopropilcarboxamida por 17^3-N,N-diisopropilcarboxamida-6-fluoro-androsta-3,5-dieno-3-carboxilato de etilo. 0 produto tinha um ponto de fusão de 225-2269C (recristalizado a partir de acetonitrilo).

EXEMPLO 28 * .

Acido N-t-butil-androsta-3,5-dieno-17/^-carboxamido-3-carboxílico (i) Androsta-4-eno-3-ona-17/3-N-t-butil carboxamida composto do título foi preparado de acordo com o Exemplo 3 (ii) usando terc-butilamina em lugar de diisopropilamina.

(ii) 17 /¾-(N-t-butilcarboxamida)-3-(trifluorometilsulfonato)-androsta-3,5-dieno composto do título foi preparado com 45% de rendimento, de acordo com o Exemplo 3 (iii) usando androsta-4-eno-3-ona-17/i67 637

SKB CASE 14380

-82-N-t-butilcarboxamida em lugar de androsta-4-eno-3-ona-17/3-N,N-diisopropilcarboxamida.

(i i i) 3-carbometoxiandrosta-3,5-dieno-17/3>-N-t-butilcarboxamida composto do título foi preparado de acordo com o Exemplo 3 (iv) usando 17^3-(!\i-t-butilcarboxamida)-3-(trifluorometil sulfonato)-androsta-3,5-dieno em lugar de 17/3-(l\l,N-diisopropil carboxamida)-3-(trifluorometilsulfonato)-androsta-3,5-dieno.

z (iv) Acido N-t-butilandrosta-3,5-dieno-17/S-carboxamida-3-carboxílico composto do título foi preparado de acordo com o Exemplo 3 (v) usando 3-carbometoxiandrosta-3,5-dieno-17/3-N-t-butil carboxamida em lugar de 3-carbometoxiandrosta-3,5-dieno-17/3 -N, N-diisopropilcarboxamida. 0 composto do título foi recristalizado a partir de acetonitrilo, p.f. 247-250S.

EXEMPLO 28A

Acido N-t-butilandrosta-3,5-dieno-17/2 -carboxamida-3-carboxílico (i) N-t-butilandrosta-3,5-dieno-3-bromo-17/3-carboxamida

A uma solução gelada de ácido 3-oxo-androsta-4-eno-17-carboxílico (10 g, 30 mmol) em tolueno (100 ml) adicionou-se uma solução de brometo de oxalilo (24,2 g, 11 ml, 112 mmol) em tolueno (100 ml). A mistura reaccional foi aquecida à temperatura ambiente atá que cessasse a libertação de gás.

brometo de oxalilo em excesso foi evaporado à temperatura ambiente e gelou-se o brometo de androsta-3,5-dieno-3-bromo-17/3-ácido residual em solução de tolueno. Adicionou-se leri tamente t-butilamina (40 ml) em tolueno (70 ml) e agitou-se a mistura durante 19 horas.

A mistura reaccional foi diluída com água (200 ml) e tolueno (100 ml). 0 material orgânico solúvel foi separado e lavado com água (2 x 250 ml), seco sobre sulfato de magnésio e evaporado. 0 resíduo éleo/sólido foi submetido a cromatografia flash usando sílica-gel, grau ” flash, eluindo com hexano: :acetato de etilo 5:1 para dar 5,5 g de sólido branco, p.f. 174-77SC (40,3%).

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SKB CASE 14380 (ii) Acido N-t-butilandrosta-3,5-dieno-17/3 -carboxamida-3-carboxílico

Ao longo de 20 minutos adicionou-se N-butil-lítio (2,5 M em hexano, 90 ml, 225 mmol) a uma solução de androsta-3,5-die no-3-bromo-17/i-N-t-butilcarboxamida (25 g, 57,7 mmol) em tetra -hidrofurano seco (650 ml) arrefecido a -649C. Após 2,5 horas a reacção foi interrompida com CO seco durante 1 hora, a mistura foi diluída com tolueno (500 ml), solução de ácido clorídrico a 10% (100 ml) e água (500 ml). 0 extracto orgânico solúvel foi separado, lavado com água (2 x 300 ml), seco sobre sulfato de magnésio e evaporado. 0 sólido branco sujo bruto foi recris talizado a partir de acetato de etilo para dar 3,5 g de sólido branco, p.f. 242-499C.

EXEMPLO 28B *

Acido N-t-butilandrosta-3,5-dieno-3-bromo-17/3-carboxamida-3-carboxílico (i) Androsta-3,5-dieno-3-bromo-17/S-carboxilato de metilo

Dissolveu-se androsta-4-eno-17/?>-carboxilato de metilo (100 g, 316 mmol) em ácido acético glacial (500 ml) e adicionou -se tribrometo fosforoso (119 g, 80 ml, 440 mmol) ao longo de 15 minutos. Após agitação à temperatura ambiente durante 2 horas, filtrou-se o precipitado amarelo que se formou, lavou-se com metanol (400 ml) e secou-se em vácuo para dar 97,6 g (81,4%) de sólido branco, p.f. 178-1809C.

(ii) Acido androsta-3,5-dieno-3-bromo-17/3 -carboxílico

Adicionou-se uma solução de hidróxido de potássio (50 g, 890 mmol) em metanol:água 9:1 (500 ml) a uma pasta de androsta-3,5-dieno-3-bromo-17/S-carboxilato de metilo. Após refluxo d_u rante 41 horas, a solução amarela resultante foi arrefecida e levada a pH 4 usando solução de ácido clorídrico a 10%. 0 sóli do branco que se formou foi filtrado e lavado com água. Após secagem em vácuo a 40SC, obtiveram-se 49 g (100%) de produto, p.f. 248-2502C.

637

SKB CASE 14380 (iii) N-t-butilandrosta-3,5-dieno-3-bromo-17 /3-carboxamida

Adicionou-se cloreto de oxalilo (17 ml, 190 mmol) a uma mistura arrefecida de ácido androsta-3,5-dieno-3-bromo-17/3-car. boxílico (30 g, 79 mmol) em tolueno seco (300 ml) ao longo de 14 minutos. A mistura reaccional foi agitada à temperatura ambiente atá que cessasse a libertação de gás (cerca de 1,5 horas).

Removeu-se o cloreto de oxalilo em excesso por concentra ção em vácuo à temperatura ambiente. A mistura reaccional foi gelada e adicionou-se t-butilamina (102 ml, 954 mmol) ao longo de 10 minutos. A mistura reaccional foi agitada à temperatura ambiente durante 1,5 horas.

A mistura foi diluída com água (300 ml) e tolueno (50 ml). A camada orgânica foi separada, lavada com água (2 x 300 ml), se. ca sobre sulfato de magnésio e evaporada. 0 sólido amarelo cla^ ro resultante foi suspenso primeiro em metanolságua (7:3, 200 ml) e depois em acetonitrilozágua (39:11, 300 ml). Após filtra ção e secagem em vácuo, obtiveram-se 33,2 g (77,5%) de produto sólido branco.

(iv) Acido N-t-butilandrosta-3,5-dieno-17/S-carboxamida-3-carboxílico

Ao longo de 20 minutos adicionou-se N-butil-lítio (2,5 M em hexano, 90 ml, 225 mmol) a uma solução de androsta-3,5-dieno -3-bromo-17-N-t-butilcarboxamida (25 g, 57,7 mmol) em tetra-hidrofurano seco (650 ml) arrefecido a -64QC. Após 2,5 horas a mistura reaccional foi interrompida com 00 seco durante uma hora, diluída com tolueno (500 ml), solução de ácido clorídrico a 10% (100 ml) e água (500 ml). 0 extracto orgânico solúvel foi separado, lavado com água (2 x 300 ml), seco sobre sulfato de magnésio e evaporado. 0 sólido branco sujo bruto foi recristalizado a partir de acetato de etilo para dar 3,5 g de sólido branco, p.f. 242-499C.

EXEMPLO 28C /

Acido N,N-diisopropilandrosta-3,5-dieno-17/S-carboxamida-3-carboxílico

657

SKB CASE 14380

-850 composto do título foi preparado substituindo t-butilamina por diisopropilamina no processo do Exemplo 28B.

EXEMPLO 28D

A ndrosta-3,5-dieno-3-metoxicarbonil-17/^,2 -t-butilcarboxamida

Aqueceu-se a 85-953C sob uma atmosfera de monóxido de car bono, até que o material de partida desaparecesse, uma mistura de N-t-butil-androsta-3,5-dieno-3-bromo-17/S-carboxamida (42 mg), preparada como no Exemplo 28B, acetato de paládio (II) (20 mg), trifenilfosfina (40 mg), metanol (5 ml), dimetilformamida (5 ml) e trietilamina (3 ml). 0 composto do título foi isolado por cro matografia flash em sílica-gel com hexano:acetato de etilo 6:1.

EXEMPLO 28E Androsta-3,5-dieno-3-metoxicarbonil-17Z3-N,hl-diisopropilcarboxamida composto do título foi preparado de acordo com o Exemplo 280, substituindo N-t-butilamina por N,N-diisopropilamina. EXEMPLO 29

Acido N,N-diisopropil-5-oL-androsta-2-eno-17/3-carboxamida-3-carboxílico (i) 17/3-(N,N-diisopropilcarboxamida)-3-(trifluorometilsulfonato)-5 c<-androsta-2-eno composto do título foi preparado de acordo com o Exemplo 4 (vii) usando 3-oxo-5- oI-androstano-17/2-Ν,N-diisopropilcarboxamida em lugar de 3-oxo-4-fluoro-5-c<-androsta-l-eno-17/3>-N,N-diisopropilcarboxamida.

(ii) 3-Carbometoxi-5- oí-androsta-2-eno-17/2-N, l\l-diisopropilcarboxamida composto do título foi preparado de acordo com o Exemplo 3 (iu) usando 17_i/3-(N,N-diisopropilcarboxamida)-3-(trifluorometilsulfonato)-5 ot-andros ta-2-eno em lugar de 17/3-(N,N-diisopropilcarboxamida)-3-(trifluorometilsulfonato)androsta-3,5-dieno.

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SKB CASE 14380 (iii) Acido N,N-diisopropil-5 <=<-androsta-2-eno-17Z3-carboxamida-3-carboxílico composto do título foi preparado de acordo com o Exemplo 3 (v) usando 3-carbometoxi-5c£-androsta-2-eno-17/3-N,N-diisopropilcarboxamida em lugar de 3-carbometoxiandrosta-3,5-dieno-17/3-N,N-diisopropilcarboxamida. 0 composto do título foi recristalizado a partir de acetonitrilo; p.f. 203-2058C.

EXEMPLO 30

Acido N,N-diisopropil-androsta-2,4-dieno-17/3-carboxamida-3-carboxílico (i) 17 /2>-(N,N-diisopropilcarboxamida)-3-trifluorometilsulfonato)androsta-2,4-dieno composto do título foi preparado de acordo com o Exemplo 4 (vii) usando 3-oxoandrosta-4-eno-17_//3-N,N-diisopropilcarboxamida em lugar de 3-oxo-4-fluoro-5-o{-androsta-l-eno-17/3-Ν, N-diisopropilcarboxamida. 0 composto do título foi recristalizado a partir de metanol; p.f. 165-1689C.

(ii) 3-Carbometoxiandrosta-2,4-dieno-17/3-Ν,Ν-diisopropiloarboxamida composto do título foi preparado de acordo com □ Exemplo 3 (iu) usando 17/S-(N,N-diisopropilcarboxamida)-3-(trifluorometilsulfonato)-androsta-2,4-dieno em lugar de 17^-(N,N-diisopropilcarboxamida)-3-(trifluorometilsulfonato)-androsta-3,5-dieno. 0 composto do título tinha um ponto de fusão de 1629 após trituração com metanol.

(iii) Acido N,N-diisopropilandrosta-2,4-dieno-17/^-carboxamida-3-carboxílico composto do título foi preparado de acordo com o Exemplo 3 (v) usando 3-carbometoxiandrosta-2,4-dieno-17/£-N,N-diisjq propilcarboxamida em lugar de 3-carbometoxiandrosta-3,5-dieno-17/2-N,N-diisopropilcarboxamida. 0 composto do título foi recristalizado a partir de metanol-acetona; p.f. 2272.

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SKB CASE 14380

-87EXEMPLO 31

Ácido N,N-diisopropil-5- <?<-androstano-17/£-carboxamida-3 A-carboxílico (i) 3 /3-Carbometoxi-5 «^-androstano-17/3-N,N-diisopropilcarboxamida

3-Carbometoxi-5-οά-androsta-2-eno-17/2-N,N-diisopropilcarboxamida (87 mg, 0,19 mmol) (Exemplo 29, (ii)) em 15 ml de uma solução 10:1 de acetato de etilo e ácido acético foi hidrogenado a 255C e a 1 atm sobre 20 mg de Pd a 10/ em Carbono. A solução foi filtrada para remover o catalisador e concentrada para dar origem a 77 mg (88/) do composto do título.

z (ii) Acido N,N-diisopropil-5-o4-androstano~17/3-.carboxamida-

-3/3-carboxílico composto do título foi preparado de acordo com o Exemplo 3 (v) usando 3/3>-carbometoxi-5- ct-.androstano-17/3-N,N-diis_g propilcarboxamida em lugar de 3-carbometoxiandrosta-3,5-dieno-17/3-N,N-diisopropilcarboxamida. 0 composto do título foi recristalizado a partir de acetonitrilo; p.f. 142-1445.

EXEMPLO 32 z

Acido N,N-diisopropil-estra-3,5(10)-dieno-17/3-çarboxamida-3-carboxílico (i) 3-Metoxi-estra-l,3,5(10),16-tetraeno-17-N,N-diisopropilcarboxamida composto do título foi preparado de acordo com os dois passos do Exemplo 3 (iii, iv) usando metil-estrona em lugar de androsta-4-eno-3-ona-17/3-N,N-diisopropilcarboxamida e diisopro pilamina em lugar de metanol.

(ii) 3-Metoxi-estra-l, 3,5(10)-trieno-17/3-N,!\l-diisopropilcarboxamida

3-Metoxi-estra-l,3,5(10),16-tetraeno-17-N,N-diisopropilcarboxamida (4,45 g, 11,3 mmol) em 100 ml de uma solução 3:1 de acetato de etilo e etanol foi hidrogenada a 255 e 1 atm. Sobre PtOg (350 mg) durante 6 horas. A solução foi filtrada para re

Ο ^{67 637}

SKB CASE 14380 —88— mover o catalisador e concentrada para dar origem a 4,36 g (98%) do composto do título.

(i i i) 3-0xo-estra-5(10)-eno-17 /3-N,N-diisopropilcarboxamida

A uma solução de 3-metoxi-estra-l,3,5(10)-trieno-17_//3-N, N-diisopropilcarboxamida (1,4 g, 3,5 mmol) em amoníaco líquido (25 ml), THF (10 ml) e t-butanol (10 ml) a -335C adicionou-se 0,5 g de arame de lítio. A solução foi agitada durante 5 horas e depois adicionou-se lentamente metanol (10 ml). Deixou-se ev.a porar o amoníaco e repartiu-se depois o resíduo entre água e cio h rofórmio. A fase orgânica foi concentrada até se obter um sóli do branco que foi suspenso numa mistura de metanol-água e depois tratado com 1,4 g de ácido oxálico durante 1,5 horas. A mistura reaccional foi então diluída com água e extraída com acetato de etilo. A fase orgânica foi concentrada e o resíduo cromatografado (sílica, 1:9 acetato de etilo-hexano) para originar 0,4 g do composto do título.

Λ (iv) Acido N,N-diisopropil-estra-3,5(10)-dieno-17/3-carboxamida-3-carboxílico composto do título foi preparado de acordo com o Exemplo 29 (i-iii), usando 3-oxo-estra-5(10)-eno-17/>-N,N-diisopropilcarboxamida em vez de 3-oxo-5- c^-androstano-17/-N,N-diisopro pilcarboxamida. 0 composto do título foi recristalizado a partir de acetonitrilo; p.f. 250-2533.

EXEMPLO 33

Acido N,N-diisopropil-estra-3,5-dieno-17/3-carboxamida-3-carboxílico (i) 3-0xoestra-4-eno-17 /3-N, N-diisopropilcarboxamida

3-0xoestra-5(10)-eno-17 />-N, N-diisopropilcarboxamida (Exemplo 29, (iii)) foi dissolvida em metanol e HC1 aquoso a 10% (2:1) e aquecida a 659 durante 1 hora, arrefecida e completameji te extraída com clorofórmio. 0s extractos orgânicos foram concentrados para dar o composto do título sob a forma de um sólido branco.

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SKB CASE 14380

-89(ii) Acido N,N-diisopropil-estra-3,5-dieno-17/3-carboxamida-3-carboxílico composto do título foi preparado de acordo com o Exemplo 3 (iii-v) usando 3-oxoestra-4-eno-17/S-N,N-diisopropilcarbio xamida em lugar de andros ta-4-eno-3-ona-17/3-N, N-diisopropilcaj? boxamida. 0 composto do título tinha um ponto de fusão de 2152. EXEMPLO 34

X

Acido 17 /2>-(N,N-diisopropilcarboxamida)-androsta-3_>5_>ll-trieno-3-carboxílico (i) Acido androsta-4-eno-3-ona-ll-ol-17/j-carboxílico

A corticosterona é dissolvida em metanol e tratada com uma solução aquosa de ácido periódico à temperatura ambiente du rante 18 horas. A solução é então diluída com água para induzir a precipitação de ácido androsta-4-eno-3-ona-ll-ol-17 /3-ca.r boxílico que é recolhido por filtração.

X (ii) Acido androsta-4-eno-3,ll-diona-17/^-carboxílico

A uma solução de ácido androsta-4-eno-3-ona-ll-ol-17^-carboxílico em acetona adiciona-se reagente de Bonés até que a cor vermelha persista. Adiciona-se então isopropanol para anular o oxidante em excesso. A solução é decantada e os sais de crómio residuais são profundamente lavados com acetona. As soluçães orgânicas combinadas são então filtradas através de sulfato de magnésio e concentradas para dar origem a ácido androsta-4-eno-3,ll-diona-17yâ -carboxílico.

(iii) Androsta-4-eno-3,ll-diona-17/3-(N,N-diisopropilcarboxamida) composto do título é preparado de acordo com o Exemplo 3 (ii) substituindo ácido androsta-4-eno-3-ona-17/J-carboxílico por ácido androsta-4-eno-3,ll-diona-17^-carboxílico.

(iv) 17/5-(N,N-diisopropilcarboxamida)-3-(trifluorometilsulfonato) -11-oxo-andros ta- 3, 5~dieno composto do título é preparado de acordo com o Exemplo 3 (iii) substituindo androsta-4-eno-3-ona-17/3-(N,N-diisopropil carboxamida) por androsta-4-eno-3,ll-diona-17/S-(N,N-diisopropi.l

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SKB CASE 14380

-90carboxamida).

(v) 3-Carbometoxi-ll-oxoandrosta-3,5-dieno-17 /3-(N,l\l-diisopropilcarboxamida composto do título é preparado de acordo com o Exemplo (iv) substituindo 17/3-(N,N-diisopropilcarboxamida)-3~(trifluorometilsulfonato)-androsta-3,5-dieno por 17/3-(N,N-diisopro pilcarboxamida)-3-(trifluorometilsulfonato) - 11-oxo-androsta-3,5-dieno.

(vi) 3-Carbometoxi-ll-(trifluorometilsulfonato)-androsta-3,5, ll-trieno-17 /^-(N^-diisopropilcarboxamida) composto do título é preparado de acordo com o Exemplo (vi) substituindo 3-oxo-4-fluoro-5°L-androsta-l-eno-17/3-(N,N-diisopropilcarboxamida) por 3-carbometoxi-ll~oxoandrosta-3,5-dieno-17y/2>-(N,N-diisopropilcarboxamida).

(vii) 3-carbometoxi-androsta-3,5,ll-trieno-17/3 -(Ν,Ν-diisopropilcarboxamida) composto do título ê preparado de acordo com o procedi mento de Cacchi (Tet. Lett. 25 (42) 4821-4824 (1984)) substituindo triflato de 17/S-acetoxi-androsta-3,5-dieno-3-ilo por 3-carbometoxi-ll-(trifluorometilsulfonato)-androsta-3,5,11-trieno-17/5 -(Ν,Ν-diisopropilcarboxamida).

(viii) Acido 17/3 -(l\l,N-diisopropilcarboxamida)-androsta-3,5,11-trieno-3-carboxílico composto do título é preparado de acordo com o Exemplo (v) substituindo 3-carbometoxi-androsta-3,5-dieno-17/3-(N,l\l-diisopropilcarboxamida) por 3-carbometoxi-androsta-3,5,ll-trie no-17 /^-(NjN-diisopropilcarboxamida).

EXEMPLO 35

Acido 17 A»(N-t-butilcarboxamida)-androsta-3,5,ll-trieno-3-carboxílico processo do Exemplo 35 no qual se usa N-t-butilamina em lugar de diisopropilamina dá origem a ácido 17/3-(N-t-butilcarboxamida)-androsta-3,5,ll-trieno-3-carboxílico.

P’’·

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-91EXEMPLO 36

Ácido 17/3-(N,N-diisoDrooilcarboxamida)-androsta-3_t5-dieno-3-tiocarboxílico

Suspende-se em 10 ml de tolueno uma solução de ácido 17/3-(N,N-diisopropilcarboxamida)-androsta-3,5-dieno-3-carboxílico (1 mmol) e trata-se com 0,5 ml de cloreto de oxalilo durante duas horas. A solução resultante é então lentamente adicionada a uma solução de THF e sulfito de hidrogénio através da qual se faz borbulhar sulfito de hidrogénio. A mistura é então diluída com acetato de etilo, lavada com água, seca e concentrada, sendo o resíduo recristalizado a partir de acetonitrilo para dar origem ao composto do título.

EXEMPLO 37 z

Acido 17/3-(l\l-t-butilcarboxamida)-androsta-3_f 5-dieno-3-tiocarboxílico processo do Exemplo 36 em que o ácido 17/3-(N,N-diisopropilcarboxamida)-androsta-3,5-dieno-3-carboxílico é substituí do por ácido 17/3-(N-t-butilcarboxamida)-androsta-3,5-dieno-3-carboxílico dá origem a ácido 17/3-(N-t-butilcarboxamida)-androsta-3,5-dieno-3-tiocarboxílico.

EXEMPLO 38 - 47

Os compostos que se seguem são preparados substituindo t-butilamina por diisopropilamina e usando os procedimentos dos Exemplos 2, 3, 4, 7, 27, 29, 30, 31, 32 e 33, respectivamente:

ácido N-t-butil-5-c<-androsta-3-eno-17/3-carboxamida-3-carboxílico;

ácido 17/3 -(N-t-butilcarboxamida)-6-fluoro-5-°<-androsta -3-eno-3-carboxílico 5 ácido 17/3 -(N-t-butilcarboxamida)-6-fluoro-androsta-3,5-dieno-3-carboxílico;

3-carbometoxi-N-t-butil-androsta-3,5-dieno-17/3-carboxamida;

ácido 17 /1 -N-t-butilcarboxamida-5-oi-androsta-1,3-dieno-3-carboxílico;

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-92ácido N-t-butil-5-o(-androsta-2-enc-17/^-carboxamida-3-carboxílico í ácido N-t-butil-androsta-2,4-01500-17^-carboxamida-3-carboxilico;

ácido N-t-butil-5- o( -androstano-17/3> -carboxamida-3-carboxilico;

ácido N-t-butil-estra-3,5(10)-dieno-17/S-carboxamida-3-carboxílico; e ácido N-t-butil-estra-3,5-dieno-17/?>-carboxamida-3-carbo xilico.

EXEMPLO 48

Produz-se uma forma de dosagem oral para administrar cojm postos de Fórmula (Ia) por peneiração, mistura e enchimento dos ingredientes, nas proposções indicadas na tabela V abaixo, em cápsulas de gelatina dura.

Tabela V

Ingredientes	Quantidades
ácido 20-c< -(hidroximetil)-5-c<-pregna- -3-eno-3-carboxílico	50 mg
estearato de magnésio lactose	5 mg 75 mg

EXEMPLO 49

A sacarose, o di-hidrato de sulfato de cálcio e □ compos. to de Fórmula (la) apresentado na Tabela VI abaixo, são mistura dos e granulados, nas proporções apresentadas, com uma solução de gelatina a 10%. Os grânulos húmidos são peneirados, secos, misturados com amido, talco e ácido esteárico, peneirados e com primidos para formar um comprimido.

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SKB CASE 14380

Tabela VI

Quantidades

Ingredientes

ácido l\l,N-diisopropil-5-o(-androsta-3-	100	mg
-eno-17/3-carboxamida-3-carboxílico
di-hidrato de sulfato de cálcio	150	mg
sacarose	20	mg
amido	10	mg
talco	5	mg
ácido esteárico	3	mg

EXEMPLO 50

Acido 20-o<-(hidroximetil)-4-fluoro-5-o<! -pregna-3-eno-3-carboxílico, 75 mg, é disperso em 25 ml de solução salina normal para preparar uma preparação injectável.

Embora as concretizações preferidas do invento sejam ilus tradas pelo que acima se expôs, dever-se-à entender que o inveji to não está limitado às instruções precisas aqui apresentadas e que se reserva o direito a todas as modificações que sejam abrajn gidas pelo âmbito das reivindicações que se seguem.

Claims

REIVINDICAÇÕES

1 - Processo de preparação de um composto de fórmula na qual:

o anel A tem até duas ligaçães duplas;

os aneis B, C e D têm ligaçães duplas opcionais, indicadas pelas linhas a tracejado, desde que o anel C não tenha uma dupla ligação em quando o anel B tiver uma dupla ligação

em C_?-Cg; 1 M é 0 OU S ; Z é (CH_O) e n é 0-2; 2 n X é H, Cl, F, Br, I, CF^ ou alquilo ^Cl-6⁵ Y é H, CFj, F, ou Cl, CH^ desde que Y seja H quando não

existe ligação dupla em C^-C^;

R·*· é H ou alquilo 0^_θ;

2 14 em que R , R , X e Y são definidos como anteriormente.

(2) =CH-Alq-CO-R^ ou =CH-Alq-0R⁸, onde Alq está pre-

2 - Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por 0 composto preparado ser ácida N-t-butil-androsta-3,5-dieno-17/3>-carboxamida-3-carboxílico ou ácido N,N-diisopropil-androsta-3,5-dieno-17/3 -carboxamida-3-carboxílico.

2 2

rIG está ausente quando existe uma ligação dupla C^-C^, Cç-Cg, ou ou está presente como um hidrogénio alfa; e (D ot-hidrogênio, o(-hidroxilo ou (a) ¹¹ 4 /3-W-C-R⁴ o/-acetoxi e/ou

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-95na qual W é uma ligação ao alquilo C^_^₂ ^eé (i) hidrogénio, (ii) hidroxilo, (iii) alquilo ^-8’ (iv) hidroxialquilo C^__g, (u) alcoxi C. o, (ui) Nk R°, onde Re R são seleccionados independentemente um do outro de entre hidrogénio, alquilo ^3 6’ f^enil°’ ^ou R cicloalquilo R^ em conjunto com o azoto ao qual estão ligados repre sentam um anel saturado com 5-6 membros, compreendendo até um outro heteroátomo seleccionado de entre oxigénio e azoto, ou

7 7 (vii) 0R , onde R é hidrogénio, metal alcali, no, alquilo benzilo ou (b) ^-Alq-OR⁸, onde Alq é alquilo Cj-12 ^e &

(i) fenil(alquil C^__^)carbonilo, (ii) (cicloalquiloC^uPcarbonilo, (iii) benzoílo, (iv) (alcoxiC-^_<_g)carbonilo, (v) amino ou amino substituído por alquilo- (vi) (vii) (2) ^1-8’ carbonilo, hidrogénio ou alquilo C^^g, sCH-W-CO-R⁴ ou =CH-W-0R⁸, onde W é uma ligação ou

(3) onde a linha a tracejado substitui o 17-cZ -hidro génio, (4) οί-hidrogénio e /S-NHCOR⁹ onde R⁹ é alquilo C. ou β-ΝΟ onde R^ e R° têm o mesmo significado que anteriormente, (5) c<-hidrogénio e /3-ciano,

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-100- (6) ot-hidrogénio e β>-tetrazolilo, ou (7) ceto ou grupos que podem ser quimicamente convejç tidos em grupos (1) a (7);

processo caracterizado por compreender tratar com haleto de áci do carboxílico ou com um poli-haleto fosforoso um composto de fórmula

3-carbometoxi-N-1-butil-androsta-3,5-dieno-l7/3-carboxamida, ácido 17/3 -N-t-butilcarboxamida-S-e^ -androsta-1,3-dieno-3-carboxílico,

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-98ácido N-t-butil-5-°l -androsta-2-eno-17/3> -carboxamida-3-carboxílico, ácido N-t-butil-androsta-2,4-dieno-17/3 -carboxamida-3-carboxílico, ácido N-t-butil-5- ol-androstano-17/3 -carboxamida-3-carboxílico, ácido N-t-butil-estra-3,5(10)-dieno-17/3-carboxamida-3-carboxílico, ou ácido N-t-butil-estra-3,5-dieno-17^3,-c ar boxamida-3-carboxílico.

-3-eno-3-carboxílico, ácido 17/3 -(N-t-butilcarboxamida)-6-fluoro-androsta-3,5-dieno-3-carboxílico,

-3-carboxílico, ácido 17 /3-(N-t-butilcaΓboxamida)-aπdrosta-3,5-dieno-3- tiocarboxílico, ácido N-t-butil-5-cV-androsta-3-eno-17/3 -carboxamida-3-carboxílico, ácido 17/S-(N-t-butilcarboxamida)-6-fluoro-5-oi -androsta

-3-carboxílico, ácido N,N-diisopropil-5-oí-androstano-17/3-carboxamida-3/3-carboxílico, ácido N,N-diisopropilestra-3,5(10)-dieno-17/3-carboxamida-3-carboxílico, ácido N,N-diisopropilestra-3,5-dieno-17/i-carboxamida-3-carboxílico, ácido 17/3-(N-t-butilcarboxamida)-androsta-3,5,ll-trieno

3-carbometoxi-N,N-diisopropil-androsta-3,5-dieno-17_//3-car boxamida, ácido 17/3-N,N-diisopropilcarboxamida-5- oí-androsta-1,3-dieno-3-carboxílico, ácido N,N-diisopropil-5- <*.-androsta-2-eno-17/3-carboxami da-3-carboxílico, ácido N,N-diisopropilandrosta-2,4-dieno-17/3-carboxamida.

-3,5-dieno-3-carboxílico, ácido 20-ct-(hidroximetil)-4-fluoro-5-c< -pregna-3-eno-3-carboxílico,

3 - Processo de acordo ccm a reivindicação 1, caracterizado por o composto preparado ser

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-97ácido 20-ti -(hidroximetil)-5- o<-pregna-3-eno-3-carboxílico, ácido N,N-diisopropil-5- c<-androsta-3-eno-17/3-carboxamida-3-carboxílico, ácido 17/3-(N,N-diisopropilcarboxamida)-4-fluoro-5-oZ-a£ drosta-3~eno-3-carboxílico, ácido 17 /3-(N,N-diisopropilcarboxamida)-4-fluoroandrosta

(3) onde a ligação a tracejado substitui o 17-ot-hidro génio,

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-969 9 (4) oC-hidrogénio e /^-NHCOR , onde R é alquilo C. ou /S-NR^R⁰ onde R^{2 3} e R° têm os mesmos significados que anteriormente, (5) d-hidrogénio e /3-ciano, (ó) ot-hidrogénio e /S-tetrazolilo ou (7) ceto;

ou de um seu sal farmaceuticamente aceitável;

excepto de compostos em que:

0 anel B tenha ligações duplas em C^-C^ e Cg-Cg, R¹ seja CHg e R^ seja ceto;

0 anel B tenha ligações duplas em Cg- ^C4’ ^C5“^C6 ^{B C}16~^C17’ R seja CHg e R seja COOCH^; e o anel B tenha uma ligação dupla em Cg-Cg, R¹ seja CHg e seja COCHg, caracterizado por compreender tratar com uma base orgânica, uma fosfina, um composto de paládio e em seguida mula: (li) e um álcool alquilioo C^_g de carbono a um composto de fój?

adicionar monéxido podem onde X r, 3

R ou grupos que descritos como anteriormente e R¹⁴ é quimicamente convertidos em r\

4 8 sente ou ausente e R e R têm o mesmo significa.

do que anteriormente e R também é hidrogénio ou (alquilCj._2(])^carbonilo;

4 - Processo de preparação de compostos de fórmula:

na qual χΐ é bromo, cloro, flúor ou iodo;

R está ausente ou presente como H ou CH,, desde que

R esteja ausente quando o carbono ao qual está ligado tem uma ligação dupla;

X é H, Cl, F, Br, I, CF^ ou alquilo Cj^;

Y é H, CF-j, F ou Cl, CH^, desde que Y seja H quando não existe ligação dupla em C^-C^; e (1) ot-hidrogénio, od -hidroxilo ou acetoxi e/ou (a) onde

W é uma ligação ou alquiloC^ e R⁴ é (i) hidrogénio, (ii) hidroxilo, (iii) alquilo C-^θ,

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SKB CASE 14380 (iv) hidroxialquilo (v) alcoxi C, (vi) NFcR , onde Re R são seleccionados independentemente um do outro de entre hidrogénio, alquiloC^_g Cj_6> fenilo; ou R^ e , cicloalquilo R⁶, em conjunto com o azoto ao qual se ligam, represejn tam um anel saturado com 5-6 membros (b) /3-Alq-OR , onde Alq é alquiloC, compreendendo até um outro heteroátomo seleccionado de entre oxigénio ou azoto, ou

7 7 (vii) 0R , onde R é hidrogénio, metal alcalino, alquiloC^_^g, benzilo, ou e R⁸ é (i) fenil(alquilC^_g)carbc)nilo, (ii) (cicloalquilC^ ^g)carbonilo, (iii) benzoilo, (iv) (alcoxiC^_₈)carbonilo, (v) amino ou amino substituído por alquilo C^ g, carbonilo, (vi) hidrogénio ou (vii) alquilo Cj__g>

4 8 alquilo 12 ^{e 8 e 8} têm ⁰ mesmo significado que anteriormente e R⁸ é também hidrogénio ou (al.

quilC^_₂g)carbonilo;

5 - Processo de acordo com a reivindicação 4, caracterizado por o composto preparado ser N-t-butil-androsta-3,5-dieno-3-bromo-17/3>-carboxamida ou N, N-diisopropil-androsta-3,5-dieno -3-bromo-lΊ -carboxamida.

6 - Processo de acordo com a reivindicação 4, caracterizado por compreender ainda o passo de tratar o composto prepara do com um reagente de alquil-litio seguido de um agente de carboxilação ou com um catalisador de paládio na presença de base, um alcanol e monóxido de carbono para dar origem a um composto de fórmula:

na qual R^, R^\ χ _e γ _S3₀ definidos como na reivindicação 4;

W'f^:·

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-101r! é H ou alquiloC-^gj e M é 0 ou S.

com a reivindicação 6, caracteriser ácido N-t-butil-androsta-3,5-

7 - Processo de acordo zado por o composto preparado -dieno-17.p -carbQxamida-3-carboxílico ou ácido N,N-diisopropil-androsta-3,5-dieno-17 / -carboxamida-3-carboxílico.