PT2165698E - Composição cosmética para cuidar a pele agredida - Google Patents

Description

DESCRIÇÃO "COMPOSIÇÃO COSMÉTICA PARA CUIDAR A PELE AGREDIDA" A presente invenção tem como objeto novas composições cosméticas, dermatológicas ou farmacêuticas que apresentam um efeito calmante e reestruturante da derme para lutar contra as agressões associadas e, mais particularmente, contra as cicatrizes, a uma intervenção de cirurgia estética ou a um tratamento da pele por aparelhos, tal como lasers.

Para lutar eficazmente contra as consequências dessas intervenções, os princípios ativos associados apresentam uma sinergia extraordinária aliando um efeito calmante imediato com uma ação reestruturante acelerada.

As mulheres têm atualmente a tendência para querer parecer mais jovens, o máximo tempo possível, e procuram esbater as marcas do envelhecimento da pele que se traduz por um relaxamento do tecido cutâneo e pelo aparecimento de pequenas rugas e de pregas.

Em geral, tratam-se os efeitos do envelhecimento com a ajuda de produtos cosméticos contendo princípios ativos que atuam sobre a pele.

Nos últimos anos, uma verdadeira mania manifesta-se através de atos intervencionistas com fins estéticos realizados por profissionais, tais como a cirurgia reconstrutiva da face, pescoço, corpo, couro cabeludo, e a utilização de diferentes aparelhos, tais como lasers, lâmpadas pulsantes que permitem tratar numerosas lesões da pele (manchas vasculares, manchas pigmentares) ou lutar contra o envelhecimento e as rugas.

As mulheres que recorrem a estas técnicas sentiram os primeiros efeitos do envelhecimento, como a fragilidade e diminuição da flexibilidade da pele, aparecimento de pequenas rugas e de pregas.

Estes fenómenos são devidos essencialmente a profundas modificações caracterizadas por alterações da Matriz Extracelular (MEC). A epiderme e a derme separadas pela membrana basal, constituem o revestimento cutâneo que assenta sobre a hipoderme. A epiderme constitui a camada mais superficial da pele e assegura a sua resistência e a sua impermeabilidade. A derme, a camada interna da pele, de tecido conjuntivo é composta de células (essencialmente fibroblastos) dispersas num meio complexo denominado Matriz Extracelular (MEC).

Esta matriz é composta de fibras de colagénio e de elastina, de glicoproteinas (fibronectina e laminina) de proteoglicanos. A matriz extracelular constitui uma estrutura para as células, que permite a coesão dos tecidos e dos órgãos nos organismos pluricelulares. A derme é o centro de profundas mudanças durante o envelhecimento cutâneo, sendo que as mudanças mais significativas da Matriz Extracelular (MEC) ocorrendo na derme. A fragmentação das fibras de colagénio e as alterações do material elástico representam algumas da caracteristicas da derme envelhecida. 0 principal componente da MEC é o colagénio que é o componente proteico maioritário da derme constituído por 2 tipos: o colagénio I (80% em adultos) e o colagénio III.

Em conjunto, formam o sistema fibrilar que assegura a resistência da pele. A fibronectina e a laminina são glicoproteínas estruturais localizadas ao nível da junção epidérmica; a fibronectina como constituinte essencial da Matriz provisória na reparação cutânea é particularmente importante no processo de cicatrização.

As alterações das qualidades mecânicas da pele são o resultado da atrofia da rede estrutural da MEC da derme e a prevenção do envelhecimento cutâneo passa pela manutenção da integridade desta matriz.

As consequências desses atos intervencionistas (cirurgia reconstrutiva, tratamento a laser, etc.), são o aparecimento de fenómenos inflamatórios e a formação de lesões cicatriciais. O tripéptido humano GHK é conhecido por determinadas ações biológicas ao nível dos tecidos humanos (Loren Pickart, 2008, «The human tri-peptide GHK and tissue remodeling», Journal of Biomaterial Science Polymer Ed., Vol. 19, N2 8, pp. 969-988).

Além disso é conhecida uma utilização tradicional de óleo de camelina para tratar queimaduras e feridas da pele (Janko Rode, 2002, "Study of autochthon Camelina sativa (L.) Crantz in

Slovenia", Journal of Herbs, Spices & Medicinal Plants, Vol. 9 (N2 2/3 e 4), pp. 313-318) . A requerente verificou que se podia, por um lado, remediar os efeitos prejudiciais da inflamação e da cicatrização e, por outro, favorecer a reparação e a reestruturação da MEC combinando-se: • um péptido biomimético (a), tal como definido a seguir, numa concentração de 10~8 M a 10~2 M; • com óleo de camelina numa concentração compreendida entre 1% e 20% em peso.

No âmbito da presente invenção, entende-se por: • Gly, a glicina, • Lys, a lisina, • His, a histidina, • Ac, acetilo O péptido (a) de acordo com a invenção é selecionado de entre os seguintes péptidos ou suas misturas:

• H-Gly-His-Lys-OH • H-Gly-His-Lys-NH2

• Ac-Gly-His-Lys-OH • Ac- Gly-His-Lys-NH2.

De um modo preferido, o péptido (a) tem a fórmula H-Gly-His-Lys-OH.

Estes péptidos foram descritos nas Patentes FR 2741075 e FR 2857597 apresentadas pelo Institut Européen de Biologie Cellulaire.

Esta família de péptidos tem o poder de mimetizar o sinal natural de renovação da pele e a capacidade de reativar a síntese das proteínas da matriz extracelular, tais como os colagénios, a fibronectina, as lamininas, a elastina.

Em particular, o péptido de fórmula H-Gly-His-Lys-OH (tripéptido-1: denominação INCI) é comercializado sob a marca Kollaren fabricado pelo Institut Européen de Biologie Cellulaire. O óleo vegetal (b) de acordo com a invenção é o óleo de camelina. O teor em ácido alfa-linoleico deste óleo é o seguinte (% em peso): -óleo de camelina 35%. A camelina (Camelina Sativa) é uma crucífera da família Brassicaceae. O seu teor em tocoferóis (vitamina E) varia entre 54 e 78 mg/100 g. Ela está disponível comercialmente, em particular, na empresa PHYTOCOS. É sabido que os lípidos são constituintes essências do nosso organismo.

Estes desempenham um papel importante ao nível cutâneo, de um ponto de vista estrutural "função de barreira cutânea", de um ponto de vista mecânico "flexibilidade membranar" e de um ponto de vista biológico "implicação nos fenómenos inflamatórios".

Alguns destes lípidos, embora indispensáveis, não são sintetizados pelo nosso organismo, tal como os ácidos gordos essenciais. A sua absorção desencadeia, com a ajuda de várias enzimas, uma cascata de reações químicas.

Na família dos AGPI omega-3, apenas o ácido alfa-linolénico (ALA) é referido essencial, porque o organismo não o pode sintetizar.

Este é o precursor de: ❖ 0 ácido eicosapentanóico (EPA) que por si próprio pode-se transformar em eicosanoides de série-3 que têm efeitos anti-inflamatórios. Este ácido EPA desempenha um papel regulador dos processos inflamatórios. ❖ 0 ácido docosa-hexanóico (DHA) que é capaz de estimular a expressão da glutationa peroxidase, uma proteção antioxidante.

Numerosos estudos têm demonstrado que uma suplementação em ácidos omega-3 DHA e EPA tem um efeito sobre a pele.

Estes efeitos muito promissores sobre a pele, obtidos após suplementação alimentar, conduziram a cosmética a interessar-se pela utilização por via tópica dos ácidos EPA e DHA.

As suas utilizações têm-se revelado limitadas pelas suas características organoléticas associadas à sua origem. A principal fonte desses AGPI são os óleos de peixe ricos em EPA/DHA.

No entanto estes óleos apresentam numerosos motivos de contestação que não permitem a sua utilização por via tópica: • Qualidade da matéria-prima, • Reprodutibilidade desta matéria-prima, • Estabilidade das características técnicas, particularmente o odor, • Métodos de extração (desodorização). A requerente verificou que o ácido alfa-linolénico pode ser biotransformado pelas células da pele que são os queratinócitos para produzir os dois AGPI omega-3 que são EPA/DHA.

Este fenómeno de metabolização do ácido alfa-linolénico em EPA e DHA conhecido por via geral nunca tinha sido demonstrado por via tópica.

Esta biotransformação que permite gerar EPA/DHA pelas células da pele desempenha um papel importante nos processos inflamatórios.

Este permite resolver os problemas associados à utilização direta dos ácidos EPA/DHA constituintes dos óleos de peixe.

Para que este efeito seja eficaz, é necessário utilizar óleos contendo grandes quantidades de ácido alfa-linolénico. No âmbito da presente invenção é óleo de camelina.

Além disso, a requerente verificou que era possível alcançar a mais alta eficiência de desempenho, combinando o tripéptido-1 e o óleo de Camelina, como descrito acima. A combinação destes 2 princípios ativos permite tratar eficazmente todos os tipos de peles agredidas mecanicamente, especialmente a área mais afetada como as cicatrizes. 0 óleo de camelina, uma dos óleos mais ricos em ácido alfa-linolénico é muito rapidamente absorvido pela pele e atua a muito curto prazo. Este garante ação rápida sobre os processos inflamatórios, após bioconversão do ácido alfa-linolénico em EPA/DHA.

Além disso, este tem uma ação sobre a barreira cutânea pelo que promove a reconstituição. 0 tripéptido-1 (INCI), que mimetiza o sinal natural da renovação da pele, é um princípio ativo de escolha para a reparação e reconstrução da MEC, atuando sobre os diferentes componentes da sua estrutura. A sua ação promotora da síntese de colagénio I e II, da fibronectina, da laminina e da elastina foi demonstrada in vitro. A sua ação contribui para a restauração das propriedades biomecânicas da pele, tais como a firmeza, a elasticidade e favorece a cicatrização. A combinação desses dois princípios ativos permite obter uma verdadeira ação prolongada calmante e reparadora. Existe portanto uma verdadeira sinergia entre estes dois princípios ativos. A presente invenção refere-se assim a uma composição cosmética, dermatológica ou farmacêutica caracterizada por compreender num meio fisiologicamente aceitável a combinação de acordo com a presente invenção.

No contexto da presente invenção entende-se por meio fisiologicamente aceitável, qualquer meio que é aceitável do ponto de vista fisiológico, isto é, que compreende um ou mais excipientes aceitáveis do ponto de vista fisiológico e, em particular, um ou mais excipientes cosmeticamente, farmaceuticamente ou dermatologicamente aceitáveis.

Em particular, o meio fisiologicamente aceitável é, em geral, à base de água ou de solvente, por exemplo de álcoois, de éteres ou de glicóis. Os excipientes particularmente vantajosos no contexto da presente invenção permitem especialmente uma penetração cutânea para melhorar as propriedades e a acessibilidade dos princípios ativos.

As composições de acordo com a invenção podem igualmente conter agentes tensioativos, conservantes, agentes estabilizadores, emulsionantes, espessantes, outros princípios ativos que conduzem a um efeito complementar ou eventualmente sinérgico, oligoelementos, óleos essenciais, perfumes, corantes, colagénio, filtros químicos ou minerais, agentes hidratantes, águas vegetais ou águas termais. A composição cosmética, dermatológica ou farmacêutica de acordo com a invenção é, de um modo preferido, destinada a uma administração por via tópica. Contudo, esta também se poderá apresentar nas formas que são habitualmente conhecidas para este tipo de administração, isto é, especialmente loções, espumas, géis, dispersões, sprays, soros, máscaras, leites corporais, pomadas, soluções, emulsões, géis, bálsamos anidros ou cremes. A composição de acordo com a presente invenção apresenta um teor em péptido (a) compreendido entre IO”8 M e 10”2 M, de um modo preferido, entre 10”4 M e 10”6 M. A composição de acordo com a presente invenção apresenta um teor em óleo de camelina (b) compreendido entre 1% e 20% em peso em relação ao peso total da composição, de um modo preferido, entre 5% e 10%. A presente invenção refere-se ainda a uma composição farmacêutica ou dermatológica de acordo com a presente invenção para utilização como medicamento.

Vantajosamente, o medicamento é destinado a cuidar da pele agredida e/ou fragilizada, à cicatrização de feridas, ao tratamento de queimaduras, à reparação tecidular cutânea, a acalmar a pele, a favorecer a reestruturação e/ou a regeneração da pele e/ou a reconstrução celular e/ou a diminuir os edemas e/ou a inflamação da pele.

De um modo preferido, o medicamento é aplicado sobre a pele fragilizada e/ou agredida por traumas e/ou tratamentos cirúrgicos, tratamentos por laser, dermoabrasão e/ou esfoliação.

Foi demonstrado que as combinações descritas garantem uma atenuação rápida das inflamações associadas à agressão, facilitam o controlo das reparações tecidulares e aumentam a velocidade da reparação da derme.

Se a composição da invenção é essencialmente destinada a favorecer a cicatrização e a tratar as peles agredidas por tratamentos cosméticas ou terapêuticos da pele, tais como intervenções cirúrgicas da pele, tratamentos da pele por laser, dermoabrasão ou esfoliações, esta é igualmente destinada ao tratamento curativo e preventivo do envelhecimento cutâneo. A presente invenção é ilustrada nos exemplos seguintes.

Exemplo 1 Estudo do efeito do tripéptido-1® sobre a produção de proteínas da MEC pelos fibroblastos através de imunofluorescência.

Material: fibroblastos de linhagem humana.

Protocolo: os fibroblastos são cultivados na presença ou ausência do tripéptido-1® a 10 7 M.

Estudo microscópico por microscopia confocal. >- Resultados:

Exemplo 2 Estudo da biotransformação do ácido alfa- linolénico pelos queratinócitos da pele.

Material: queratinócitos da linhagem NCTC.

Protocolo: - os queratinócitos são colocados em contacto com óleo de camelina durante 30 min, à temperatura de 37 2C.

Após incubação, o óleo é eliminado, as células são lavadas e novamente colocadas em contacto com meio de cultura. - Os doseamentos foram realizados 3H, 5H, 24h (Dl), 48h (D2), 72h (D3) em meio de cultura (sobrenadante) e no interior das células após lise.

Doseamento por HPLC do ácido alfa-linolénico e dos ácidos EPA e DHA. > Resultados: a) No sobrenadante, nenhum vestígio de ácido alfa-linolénico é encontrado nas 3H.

Aparecimento dos ácidos EPA e DHA após 3H de incubação. b) 0 doseamento por HPLC revela nas células de queratinócitos quantidades importantes de ácido alfa-linolénico nas 3H de incubação e aparecimento do ácido EPA ao D2.

Exemplo 3 Estudo da biotransformação do ácido alfa- linolénico pelos fibroblastos.

Material: Fibroblastos de linhagem MRC5.

Protocolo: Idêntico àquele descrito para o exemplo 2.

Doseamento por HPLC do ácido alfa-linolénico e dos ácidos EPA e DHA. > Resultados:

No sobrenadante, o ácido alfa-linolénico é detetado em quantidades mais baixas do que a quantidade de partida.

Aparecimento dos ácidos EPA e DHA após 3H de incubação, no meio sobrenadante.

Exemplo 4 Avaliação do efeito cicatrizante de uma formulação de acordo com o exemplo 8 contendo o tripéptido-1® e óleo de camelina num modelo de pele mantida viva. A formulação utilizada neste exemplo é aquela indicada no exemplo 8.

Para permitir avaliar efeito cicatrizante, um modelo de alteração das capacidades reconstrutivas da pele foi realizado por aplicação de um dermocorticoide à superfície da epiderme a fim de quantificar a estimulação de renovação celular. A estimulação da renovação celular foi estudada por quantificação do potencial mitótico das células basais.

Material: Fragmentos de pele de vários dadores diferentes.

Protocolo: Os fragmentos de pele são mantidos vivos durante 4 dias com aplicação de um dermocorticoide de classe II ao DO e Dl. A formulação foi aplicada todos os dias de Dl a D4.

Resultado: Análise imuno-histoquímica da proliferação celular.

+ ·. diferença estatisticamente significativa com relação ao modelo de alteração por dermocorticoide (teste de Student emparelhado, p < 0,05). O efeito cicatrizante foi colocado em evidência pela obtenção de uma restauração estatisticamente significativa do indice mitótico do epitélio após alteração experimental da pele.

Exemplo 5 Avaliação do efeito hidratante e reestruturante de uma formulação contendo tripéptido-1® e óleo de Camelina de acordo com o exemplo 8 num modelo de pele mantida viva. A formulação utilizada neste exemplo é aquela indicada no exemplo 8. O efeito hidratante e reestruturante foi analisado após realização de um modelo de alteração da barreira cutânea por laurilsulfato de sódio (LSS) responsável de uma perda insensível de água acompanhada de alteração da expressão da involucrina. A avaliação da expressão da involucrina permite quantificar a proteção conferida pela formulação ao nível da camada córnea e da estimulação do seu metabolismo ao nivel dos queratinócitos da pele.

Material: Fragmentos de pele de vários dadores diferentes.

Protocolo: Os fragmentos de pele são mantidos vivos durante 4 dias com 2 aplicações tópicas de LSS a 1% ao DO e Dl. A formulação foi aplicada todos os dias de Dl a D4.

Avaliação imuno-histoquímica da expressão da involucrina.

*: diferença estatisticamente significativa com relação à pele de referência (teste de Student emparelhado, p ^ 0,05). ¥=: diferença estatisticamente significativa com relação à pele alterada por LSS (teste de Student emparelhado, p < 0,005). O efeito hidratante e reestruturante foi visualizado e quantificado após realização do modelo de alteração da barreira cutânea por LSS, pela colocação em evidência de um aumento da involucrina ao nível da epiderme. 0 aumento desta expressão é testemunha da proteção conferida pelo complexo, mas igualmente da estimulação do metabolismo das células da parte superior do epitélio.

Exemplo 6 Avaliação do efeito calmante de uma formulação contendo tripéptido-1® e óleo de Camelina de acordo com o exemplo 8 num modelo de pele mantida viva. A formulação utilizada neste exemplo é aquela indicada no exemplo 8. 0 efeito calmante foi analisado após realização sobre a pele de um modelo de queimadura experimental (aplicação de um gel de agarose a 80 2C). A atividade calmante foi estudada analisando a limitação ao mesmo tempo da destruição da epiderme (correspondente à extensão da queimadura) e da dilatação vascular.

Material: Fragmentos de pele de vários dadores diferentes.

Protocolo: Os fragmentos de pele são mantidos vivos durante 4 dias. O modelo experimental de alteração é obtido por queimadura após aplicação de um gel de agarose a 85 2C ao DO . A formulação foi aplicada todos os dias até ao D4. * Resultados: 1) Análise histológica das alterações celulares ao nivel da epiderme (% de células alteradas)

2) Análise histológica da dilatação dos vasos (superfície dos vasos dilatados em um2)

*: diferença estatisticamente significativa com relação à pele de referência (teste de Student emparelhado, p < 0,05). Φ: diferença estatisticamente significativa com relação à pele de controlo alterada por queimadura (teste de Student emparelhado, p < 0,05). 3) Análise histológica da dilatação dos vasos (% de vasos dilatados)

*: diferença estatisticamente significativa com relação à pele de referência (teste de Student emparelhado, p < 0,05) Φ: diferença estatisticamente significativa com relação à pele de controlo alterada por queimadura (teste de Student emparelhado, p < 0,05) 4) Análise histológica de edema (pontuação)

*: diferença estatisticamente significativa com relação à pele de referência (teste de Student emparelhado, p < 0,05). 0 efeito calmante foi quantificado de forma significativa após realização sobre a pele de um modelo de queimadura experimental por colocação em evidência da limitação da dilatação dos capilares da pele. A limitação da destruição da epiderme (correspondente à extensão da queimadura) foi observada de forma mais moderada e não significativa.

Exemplo 7: Emulsão de tratamento de acordo com a invenção

Exemplo 8: formulação de acordo com a invenção

Lisboa, 15 de junho de 2016

Claims (9)

1. REIVINDICAÇÕES

   1. Composição cosmética, dermatológica ou farmacêutica destinada a uma administração por via tópica compreendendo num meio fisiologicamente aceitável a combinação de a) pelo menos um péptido selecionado de entre os péptidos seguintes ou suas misturas: • H-Gly-His-Lys-OH, • H-Gly-His-Lys-NH2, • Ac-Gly-His-Lys-OH, • Ac-Gly-His-Lys-NH2 b) óleo de camelina, estando o teor em óleo de camelina (b) compreendido entre 1% e 20% em peso em relação ao peso total da composição e estando o teor em péptido (a) compreendido entre 10“8 M e 10“2 M.
2. 2. Composição de acordo com a reivindicação 1 caracterizada por o péptido (a) ter a fórmula H-Gly-His-Lys-OH.
3. 3. Composição de acordo com gualguer uma das reivindicações 1 ou 2 caracterizada por o seu teor em péptido (a) estar compreendido entre 1CT4M e 10“6M.
4. 4. Composição de acordo com gualguer uma das reivindicações 1 a 3 caracterizada por o seu teor em óleo de camelina estar compreendido entre 5% e 10% em peso em relação ao peso total da composição.
5. 5. Composição farmacêutica ou dermatológica de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4 para utilização como medicamento.
6. 6. Composição farmacêutica ou dermatológica de acordo com a reivindicação 5 caracterizada por o medicamento ser destinado a cuidar da pele agredida e/ou fragilizada, à cicatrização de feridas, ao tratamento de queimaduras, à reparação tecidular cutânea, a acalmar a pele, a favorecer a reestruturação e/ou a regeneração da pele e/ou a reconstrução celular e/ou a diminuir os edemas e/ou a inflamação da pele.
7. 7. Composição de acordo com a reivindicação 6 caracterizada por o medicamento ser aplicado sobre a pele fragilizada e/ou agredida por traumas e/ou tratamentos cirúrgicos, tratamentos por laser, dermoabrasões e/ou esfoliações.
8. 8. Composição de acordo com a reivindicação 6 caracterizada por o medicamento ser aplicado sobre as cicatrizes.
9. 9. Composição de acordo com as reivindicações 1-4 caracterizada por ser destinada ao tratamento curativo e preventivo do envelhecimento cutâneo. Lisboa, 15 de junho de 2016