PT1608388E

PT1608388E - Processo para a preparação de um extracto de folhas de hera

Info

Publication number: PT1608388E
Application number: PT04724580T
Authority: PT
Inventors: Frank Runkel; Karl-Michael Engelhard; Georg Maximilian Engelhard
Original assignee: Engelhard Arzneimittel Gmbh
Priority date: 2003-04-02
Filing date: 2004-03-31
Publication date: 2007-10-29
Also published as: HRP20050858A2; EP1608388A1; MXPA05010573A; DE10315931A1; KR20060008310A; DE502004005201D1; WO2004087183A1; ATE375165T1; CY1108040T1; CN1767842A; PL1608388T3; EP1608388B1; EA200501534A1; JP2006522051A; ES2295846T3; KR100763866B1; RS20050740A; US20060057236A1; DK1608388T3; BRPI0409067A

Description

DESCRIÇÃO "PROCESSO PARA A PREPARAÇÃO DE UM EXTRACTO DE FOLHAS DE HERA" A presente invenção refere-se a um processo para a preparação de um extracto de folhas de hera utilizando-se um agente de extracção, em que o extracto seco apresenta a-hederina.

Os extractos de folhas de hera são hoje em dia empregues com sucesso sobretudo para a terapia de doenças das vias respiratórias, uma vez que o extracto mostra efeitos espasmoliticos, espectorantes e antiobstrutivos. Estes efeitos são atribuídos em particular aos ingredientes importantes em termos terapêuticos dos extractos de folhas de hera, que pertencem à classe das saponinas de triterpenos. A saponina principal é, neste caso, o hederacósido C bisdesmosídico e a a-hederina daí produzida por hidrólise éster. Pôde detectar-se hederagina como saponina adicional.

Uma vez que os extractos de folhas de hera podem ser obtidos por processos distintos, estes extractos apresentam frequentemente graus de eficácia diferentes. Isto deve-se ao facto de, a proporção dos ingredientes depender do respectivo método de preparação do extracto.

Com base em estudos, a requerente comprovou que a α-hederina em particular contribui para a espasmólise brônquica. Comprovou-se que a α-hederina inibe o processo de internalização de receptores β-adrenérgicos de maneira específica. Após ligação 1 de um ligando aos receptores β-adrenérgicos é em primeiro lugar activado o sistema da adenilatociclase, através do qual, como reacção secundária, por ex. a musculatura lisa do sistema bronquial é levada ao relaxamento. Um excesso do efeito é contrariado, entre outros, por sub-regulação dos receptores localizados na membrana através da sua internalização na célula.

Neste contexto pôde mostrar-se que a α-hederina não ataca directamente o receptor β-adrenérgico, mas, pelo contrário, inibe a internalização do receptor - ligando na célula. Caso seja inibida a internalização do complexo receptor - ligando, dá-se uma activação continuada do sistema de adenilatociclase, pelo que é forçado o relaxamento da musculatura lisa nos brônquios (espasmólise).

Pelo contrário, as substâncias hederacósido C ou hederagenina não puderam inibir o processo da internalização. Em consequência disso, os extractos com um teor elevado em α-hederina são particularmente adequados para um emprego como medicamento.

No dominio da farmácia e, em particular, das preparações de medicamentos, estão descritos uma multiplicidade de processos para a preparação de extractos secos de materiais vegetais. É conhecido um processo para a preparação de extractos secos de materiais de plantas por exemplo a partir do documento DE 10112168 AI. Com o processo ai revelado, o teor em substâncias lipofilicas e hidrofílicas deve poder ser ajustado. Neste caso, o material vegetal é sujeito a pelo menos duas extracções com solventes de lipofilia diferente e os extractos dai resultantes são obtidos separadamente. Os extractos são 2 secos separadamente um do outro e misturados nas razões desejadas. Desta maneira, o teor em substâncias lipofilicas e hidrofílicas pode ser ajustado. 0 processo também deve ser adequado para a obtenção de extractos secos de hera (Hedera helix) .

No entanto, é uma desvantagem neste processo a circunstância de terem que ser realizadas duas extracções separadas, pelo que o processo é muito dispendioso na totalidade Além disso, é conhecido do documento DE 3025223 AI uma preparação farmacêutica à base de extractos de hera e um processo para a sua preparação no qual, por utilização de acetona e metanol, é obtido um extracto de hera com um teor de hederosaponina C de 60 ou 90%. Para converter hederosaponina C, ou hederacósido C, em α-hederina, e para com isso obter um extracto somente com α-hederina, o extracto a 90% indicado no pedido é saponificado com hidróxido de sódio ou hidróxido de potássio.

No entanto, é uma desvantagem neste processo o dispêndio elevado que é provocado pelos vários passos que são necessários à obtenção de hederacósido C, para converter o hederacósido ou a hederosaponina em a-hederina.

De G. Wulff "Neueren Entwicklungen auf dem Saponingebiet" Deutsche Apotheher Zeitung, 108 (No. 23), 1968, p. 797 - 808, é conhecido que, caso se triturem folhas de hera frescas e se deixem ficar em água durante a noite, em seguida apenas se encontra α-hederina. Para o efeito são responsáveis enzimas que existem nas folhas frescas. 3

Na indústria farmacêutica são contudo empregues fármacos secas, uma vez que estas são duráveis e melhor manuseáveis. Não são de esperar actividades enzimáticas em fármacos secas deste tipo.

Por conseguinte, é objectivo da presente invenção disponibilizar um processo com o qual possa ser obtido um extracto, em particular um extracto seco, com poucos passos e sem grande dispêndio de tempo, no qual a α-hederina esteja presente no mínimo fortemente concentrada.

De acordo com o processo mencionado no início, o objectivo que está na base da invenção é solucionado pelo facto do processo apresentar os passos seguintes: a) cominuição de uma quantidade de folhas de hera secas, b) fermentação por adição de água com conversão de hederacósido C em a-hederina, c) extracção por adição do agente de extracção, e d) eventualmente, secagem do extracto.

Desta maneira, o objectivo que está na base da invenção é inteiramente solucionado.

Nomeadamente, com o processo de acordo com a invenção, pode ser obtido um extracto que apresenta α-hederina na forma concentrada como substância activa, ou que, no decurso da sua preparação, uma grande parte ou eventualmente a totalidade do 4 hederacósido C das folhas de hera originalmente presente pode ser convertido em a-hederina.

Em investigações próprias, os inventores mostraram que, em folhas secas de hera, através do passo de fermentação, é assegurada uma conversão quase total de hederacósido C em α-hederina. Com isso, não são necessários quaisquer passos adicionais, após a extracção, para converter adicionalmente os ingredientes obtidos. Pelo contrário, exactamente pelo passo de fermentação intercalado, o processo total - tanto em relação ao ganho de tempo, como aos materiais empregues - pode ser realizado de forma mais económica, o que representa uma grande vantagem face aos processos descritos no estado da técnica.

No presente documento, "fermentação" significa a degradação ou a conversão de ingredientes presentes numa substância original em outras substâncias por adição de um meio de fermentação, p. ex. liquido, à substância original, em que eventualmente determinados parâmetros, p. ex. tempo e temperatura, são ajustados ao processo de fermentação.

Os inventores descobriram que a água em particular é adequada para o emprego no passo de fermentação. Pela adição de água, o processo de conversão de hederacósido C em α-hederina é estimulado.

Com o processo de acordo com a invenção pode assim ser preparado um extracto com um teor em α-hederina particularmente elevado. Um extracto com uma proporção elevada em α-hederina é em particular desejável no caso do tratamento de doenças das vias respiratórias, uma vez que foi já comprovado pelas 5 pesquisas da requerente que a α-hederina é responsável pelo efeito.

Como mencionado acima, entre as saponinas contidas na hera, a α-hederina, em particular, é responsável pelo efeito espasmolitico nos brônquios. Por conseguinte, este extracto, com o seu teor elevado em α-hederina, é significativamente melhorado na sua eficácia face a extractos nos quais ainda está presente uma proporção relativamente elevada de hederacósido C.

Na preparação de medicamentos, os fármacos secos têm a vantagem de, relativamente à durabilidade, serem possivelmente melhores para manusear do que fármacos frescas.

No âmbito da técnica farmacêutica, as plantas medicinais e partes de plantas medicinais secas são designadas como "fármacos". A utilização de plantas medicinais que se apresentam como "fármacos" realiza-se neste caso ou na forma inalterada ou na forma cominuida.

Para o especialista, é visto como surpreendente que em folhas de hera secas, como são empregues na indústria farmacêutica, possa ser alcançada uma conversão a a-hederina simplesmente por adição de água.

No caso do documento DE 3025223 AI mencionado no inicio, tiveram que ser adicionados hidróxidos de álcalis para a saponificação, para desencadear uma reacção quimica.

Além disso, é preferido quando no passo a) se realiza uma cominuição das folhas de hera a ^ 5 x 5 mm, e em particular a < 2 x 2 mm. 6

Um cominuição das folhas de hera à escala indicada é particularmente vantajosa, para influenciar o teor de a-hederina do extracto preparado de acordo com a invenção. Neste caso, foi comprovado que com tamanhos crescentes de partícula tinha lugar, na totalidade, uma pior extracção e fermentação dos ingredientes.

No caso do processo de acordo com a invenção é preferido, além disso, quando o agente de extracção é uma mistura de proporções de álcool e água. É preferido de um modo particular quando é empregue como álcool um álcool C2-C10, e em particular etanol. 0 etanol é um solvente farmacêutico comprovado e é frequentemente empregue como agente de extracção no âmbito da técnica farmacêutica. Naturalmente, podem também ser empregues outros álcoois, p. ex. propanol, isopropanol, etc., portanto todos os álcoois que sejam empregáveis como misturas de água/álcool na extracção, no contexto da preparação de medicamentos.

Além disso, é preferido quando a proporção de água/álcool do agente de extracção apresenta uma razão (m/m) de 10/90 até 90/10, e em particular uma razão de água/álcool de 70/30.

No âmbito da presente invenção, são adequadas diferentes razões de álcool/água para realizar com sucesso o processo de acordo com a invenção. Neste caso, 0 emprego de um agente de extracção com uma proporção de álcool de 30% demonstrou-se como sendo particularmente adequado. 7

Além disso, é preferido quando a razão de folhas de hera para agente de extracção perfaz de 1 : 1 até 1 : 50, e em particular de 1 : 12.

Através da selecção de razões de quantidades determinadas das folhas de hera a processar e do agente de extracção, a proporção de α-hederina no extracto pode ser influenciada, em conexão com o processo de acordo com a invenção. Na determinação das razões de quantidades tem que ser tomado em consideração, por um lado, que o hederacósido C deve ser eventualmente completamente convertido. Por outro lado, a quantidade de agente de extracção a empregar deve ser ajustada ao processo de modo a que, no caso do emprego de uma quantidade baixa óptima, seja assegurada uma extracção bem sucedida. Para o especialista deve ser claro que para isso são possíveis diferentes razões de quantidades para um emprego no processo de acordo com a invenção.

Numa forma de realização do processo de acordo com a invenção é preferido quando no passo b) é adicionada uma proporção de água do agente de extracção, e em particular quando em primeiro lugar é simplesmente adicionada a proporção de água da metade do agente de extracção.

Nesta forma de realização a adição da proporção de álcool do agente de extracção, e eventualmente a adição de agentes de extracção adicionais, realiza-se somente após a fermentação. A adição de proporções de álcool do agente de extracção após a fermentação com proporções de água é vantajosa em termos de técnica do processo, uma vez que assim a quantidade de agente de extracção a empregar para diversas preparações pode ser previamente calculada, de forma exacta e simples, e ser empregue 8 para cada caso. As proporções de volumes individuais da água e do álcool podem então ser adicionadas respectivamente separadas uma da outra, ou ser juntas uma à outra nos passos b) e c).

Neste caso, para a fermentação, oferece-se em particular a possibilidade da adição da proporção de água da metade da quantidade do agente de extracção, o que torna o processo ainda mais praticável. No entanto, não está excluído que possam ser também adicionadas outras quantidades de água para a finalidade da fermentação, para influenciar o processo de conversão de hederacósido C a a-hederina.

Além disso, é preferido quando o passo b) é realizado durante um período de tempo de 1 min. até 120 min, de um modo preferido durante um período de tempo de 60 min.

Em conexão com o processo de acordo com a invenção, o teor de α-hederina do extracto pode ser adicionalmente controlado através da variação do período de tempo da fermentação.

Neste caso é preferido de um modo particular quando a fermentação é realizada a uma temperatura entre 10 e 40 °C, em particular a 30 °C.

Numa forma de realização adicional do processo de acordo com a invenção é preferido quando a extracção no passo c) é realizada por intumescimento prévio e percolação.

Ambas as medidas são métodos usuais no estado da técnica e, em particular, no domínio das preparações farmacêuticas a partir de plantas. Com os passos do intumescimento prévio e da percolação pode ser alcançada uma extracção exaustiva das folhas 9 de hera. Após a fermentação com proporções de água são assim adicionadas as respectivas proporções de álcool à preparação, depois do que é realizado o intumescimento prévio. Para a percolação é adicionada, de um modo preferido, a restante proporção do agente de extracção, do qual foram empregues proporções determinadas anteriormente na fermentação e nos outros passos de extracção.

Neste caso é preferido quando o intumescimento prévio é realizado durante um período de tempo de 1 h até 30 h, e em particular durante um período de tempo de 6 h.

Numa realização adicional do processo de acordo com a invenção, é preferido quando a secagem no passo d) é realizada por vaporização em filme fino e subsequente secagem por pulverização.

Ambos os processos são processos de secagem usuais, em que a vaporização em filme fino demonstrou ser um processo de evaporação suave na preparação de medicamentos, do mesmo modo que a secagem por pulverização, com a qual se podem secar preparações líquidas de acordo com a experiência, a produtos finais em forma de pó, que se caracterizam em particular por se deixarem dissolver facilmente novamente, por exemplo com água, para formar preparações prontas a utilizar.

Além disso, é preferido quando o processo de acordo com a invenção é empregue para o controlo do teor de α-hederina e hederacósido num extracto de folhas de hera.

Com o processo de acordo com a invenção é possível, além disso, controlar de forma específica a proporção em a-hederina 10 no extracto. De acordo com isso, o processo de acordo com a invenção pode ser empregue para a conversão completa de hederacósido em α-hederina num extracto de folhas de hera, ou então apenas para a conversão parcial de hederacósido em a- hederina.

Assim é p. ex. possível, em primeiro lugar, sujeitar apenas uma proporção determinada do fármaco à fermentação com água e após o decurso da fermentação adicionar a restante proporção do fármaco para a extracção. Desta maneira podem ser preparados de forma específica extractos secos, nos quais o hederacósido C não foi inteiramente convertido a a-hederina.

Deste modo é além disso possível controlar concretamente o teor em α-hederina no extracto. Isto é então desejável, p. ex. quando a proporção em α-hederina no extracto não deva ser tão elevada, mas antes que deva estar presente ainda uma determinada proporção em hederacósido C. A invenção refere-se além disso a um extracto de folhas de hera que é preparado de acordo com o processo de acordo com a invenção.

Extractos com um teor elevado em a-hederina são uma vantagem, p. ex. no caso do tratamento de doenças das vias respiratórias, uma vez que, com a α-hederina presente em concentração elevada, o ingrediente mais activo das folhas está presente em concentração elevada. A invenção refere-se além disso à utilização do extracto preparado de acordo com a invenção, em particular do extracto seco, para a preparação de um medicamento, e em particular para 11 a preparação de um medicamento para o tratamento de doenças das vias respiratórias.

Além disso, a invenção refere-se a um medicamento que apresenta um extracto que é preparado de acordo com o processo de acordo com a invenção.

Neste caso, o medicamento pode apresentar-se na forma de cápsulas, comprimidos, drageias, supositórios, granulado, pó, soluções, cremes, emulsionantes, aerossóis, pomadas e óleos. Neste caso, as formas de administração orais são preferidas de um modo particular. 0 medicamento pode apresentar, neste caso, substâncias auxiliares que são habitualmente utilizadas na preparação de medicamentos. Encontram-se uma série de substâncias adequadas p. ex. em A. Kibbe, Handbook of Pharmaceutical Excipients, 3a ed., 2000, American Pharmaceutical Association and pharmaceutical Press. A partir da descrição e da figura anexa resultam as vantagens adicionais. Mostram

Fig. la um cromatograma de uma amostra que não foi sujeita a qualquer fermentação, e

Fig. lb um cromatograma de uma amostra que foi sujeita a uma fermentação.

Percebe-se que as caracteristicas anteriormente indicadas e as posteriores ainda a elucidar são utilizáveis não apenas na combinação respectivamente indicada, mas também em outras combinações ou isoladamente, sem abandonar o âmbito da presente invenção. 12

Exemplo 0 processo de extracção realizado até hoje no estado da técnica consiste num processo de extracção em várias fases, no qual o fármaco seca é directamente misturada com etanol a 30% (m/m) após o corte. A razão de hederacósido C/a-hederina do extracto seco corresponde neste caso a aproximadamente a do fármaco. Análises dos extractos preparados nos últimos anos mostram um teor em hederacósido C de cerca de 5 até 20% no extracto total, enquanto a α-hederina constitui aproximadamente 1 até 5% do extracto total. Com base nos métodos conhecidos no estado da técnica, deverá por conseguinte ser disponibilizado um processo com o qual a conversão de hederacósido C em a-hederina possa ser incluída no processo de extracção. Para isso foram realizados alguns ensaios prévios: 1. Cominuição forte e intensiva das folhas frescas, ainda não secas, com secagem subsequente do fármaco

Para pesquisar a influência do "post harvesting processing" sobre o fármaco e o extracto ulterior, foram cuidadosamente colhidas à mão folhas frescas de hera. Todas as folhas foram recolhidas ao mesmo tempo no mesmo local e sujeitas a diferentes processos metodológicos após a sua colheita. Em seguida as amostras forma analisadas como se segue: uma quantidade de amostra, que corresponde a aproximadamente 200 mg de fármaco seca, foi pulverizada no moinho e agitada juntamente com 30 mL de etanol a 45% (v/v) durante 1 h. Após a passagem numa tubagem de cromatografia foi perclorada com etanol fresco a 45% (v/v) até um volume de 100 mL. Para a obtenção de amostras diferentes, 13 foram efectuadas variações relativamente ao momento da cominuição e da secagem:

Amostra 1: as folhas frescas foram cortadas em pedaços de 3 x 3 mm de tamanho e secas só após um armazenamento de 12 horas.

Amostra 2: as folhas frescas foram cortadas em pedaços de 3 x 3 mm de tamanho e em seguida imediatamente secas.

Amostra 3: as folhas não cortadas foram secas a 50 °C após a colheita e só foram cortadas em pedaços de cerca de 3 x 3 mm de tamanho pouco antes do processo de extracção. A tabela seguinte reproduz as pesquisas cromatográficas relativamente ao teor em α-hederina e hederacósido C:

Tabela 1 a-Hederina Hederacósido C (%) Saponinas totais calculadas como hederacósido C Amostra 1 1,25 6,05 8,08 Amostra 2 1,40 5,45 7,73 Amostra 3 1,13 5,75 7,59

Os resultados são comparáveis entre eles e não se desviam significativamente uns dos outros, apesar de parecer reconhecer- 14 se um pequeno deslocamento da razão hederacósido C/a-hederina a favor da α-hederina nas folhas cortadas no estado fresco.

Em pesquisas adicionais foram efectuadas variações relativamente ao grau de cominuição das folhas de hera e ao momento da determinação do teor:

Amostra 1: as folhas frescas foram finamente trituradas e imediatamente extraídas com etanol a 45% (v/v).

Amostra 2: as folhas frescas foram finamente trituradas e extraídas com etanol a 45% (v/v) após um tempo de espera de 45 min.

Amostra 3: as folhas não cortadas foram secas a 50 °C após a colheita e foram cominuídas pouco antes do processo de extracção.

Na tabela 2 seguinte estão representados os resultados das pesquisas cromatográficas relativamente ao teor de α-hederina e de hederacósido C:

Tabela 2 a-Hederina Hederacósido C (%) Saponinas totais calculadas como hederacósido C Amostra 1 3,74 0,37 6,45 Amostra 2 3,17 0,19 5,34 Amostra 3 1,13 5,75 7,59 15

Como se pode deduzir da tabela, através da cominuição intensiva, o hederacósido C foi quase completamente convertido a α-hederina. 2. Fermentação do fármaco seca e cominuida antes da extracção

Para destruir a integridade das células, foi estimulado o processo de conversão de hederacósido C em α-hederina por forte cominuição e sob adição de água. Isto foi atestado pela experiência seguinte:

Folhas de hera inteiras, secas, com um teor previamente determinado de 7,94% de hederacósido C e 0,59% de a-hederina foram tratadas como se segue:

Amostra 1: 200 mg das folhas fortemente cominuídas são misturadas com 20 mL de água. Após remoção da água por evaporação em vácuo, a preparação é extraída como habitualmente com etanol a 45% (v/v).

Amostra 2: o fármaco é tratada como a amostra 1, mas em vez da água é utilizado etanol a 30% (m/m).

Os resultados cromatográficos estão reproduzidos na tabela 3 seguinte relativamente ao teor em α-hederina e hederacósido C: 16

Tabela 3 a-Hederina Hederacósido C (%) Saponinas totais calculadas como hederacósido C Amostra 1 4,40 0 7,15 Amostra 2 1,12 6, 51 8,33 Amostra 3 0,59 7,94 8,90

Como se pode deduzir dos dados, o hederacósido C foi completamente transformado em a α-hederina através da adição de água ao fármaco cominuida. A fig. 1 mostra os cromatogramas obtidos por HPLC da amostra 1 (fig. lb) e da amostra 2 (fig. la) . Nas figuras, o pico obtido para a substância hederacósido C está indicado com "HC", o pico obtido para a α-hederina com, respectivamente, "α-H". Como se pode deduzir pela comparação dos picos na fig. la e lb, a proporção em hederacósido C é reduzida quase na totalidade às custas da α-hederina, o que mostra que foi convertida a totalidade de hederacósido C. A fermentação em etanol a 30% (m/m) também conduziu, com efeito, a uma decomposição do hederacósido C, no entanto numa escala claramente menor.

Em pesquisas adicionais pôde mostrar-se que o grau de cominuição do fármaco e a quantidade adicionada em água tem um significado decisivo para a extensão da conversão: experiências de extracção com fragmentos de folhas de cerca de 5 x 5 mm de tamanho, que foram fermentados em água como descrito, mostraram com efeito um enriquecimento da α-hederina às custas do 17 hederacósido C, no entanto a conversão não foi completa devido à integridade de muitas células. Também a experiência de apenas pulverizar levemente com água folhas finamente cominuídas conduziu a um resultado de uma conversão incompleta do hederacósido C.

Para converter com sucesso os conhecimentos acima descritos obtidos até agora relativamente à conversão de hederacósido C em α-hederina num procedimento de extracção bem sucedido, realizaram-se as seguintes variantes de um processo de extracção:

Extracto 1:

Extracto 2 : 3,0 g de folhas de hera cominuídas (5x5 mm) foram extraídas com 12 vezes a quantidade em etanol a 30% (m/m) (extracção normal). 3,0 g de folhas de hera cominuídas (5x5 mm) foram cobertas com água numa coluna cromatográfica. Após 1 h, a água foi deixada sair através de uma saída, para se extrair subsequentemente com 12 vezes a quantidade em etanol a 30% (m/m).

Extracto 3: a 3,0 g de folhas de hera cominuídas (5x5 mm) adicionou-se a água de 12 partes de agente de extracção (etanol a 30% (m/m)) . Após 1 h de tempo de fermentação foi adicionada a proporção de etanol de 12 partes de agente de extracção, para se extrair.

Os cálculos cromatográficos deram os resultados mostrados na tabela 4 seguinte: 18

Tabela 4 a-Hederina Hederacósido C (%) Saponinas totais calculadas como hederacósido C Extracto 1 0,48 19,80 20,58 Extracto 2 4,11 1,38 8,06 Extracto 3 8,38 5,88 19,51

Uma vez que, no caso destas extracções, o fármaco foi apenas cominuída a 5 x 5 mm, a conversão não se realizou na extensão completa. A partir da tabela pode deduzir-se claramente que a drenagem da água de fermentação (extracto 2) conduziu a perdas dos ingredientes.

Por combinação das experiências prévias acima descritas desenvolveu-se um processo de extracção adicional com o qual pode ser controlado o teor de α-hederina de um extracto seco de folhas de hera. 3. Processo de extracção para a preparação de extractos secos de folhas de hera com teor controlável de a-hederina

Após testar a qualidade e libertação através do controlo de qualidade, uma parte do fármaco (folhas de hera DAC) foi fortemente cominuida num moinho, em que uma crivagem de protecção garantiu um tamanho dos fragmentos de no máximo 2x2 mm. Adicionalmente, o material crivado foi bem testado opticamente relativamente a partículas maiores e impurezas. 19 À amostra cominuída foi adicionada a proporção de água de 6 partes de agente de extracção (etanol a 30% (m/m)). Esta preparação foi fermentada a 30 °C sob mistura/agitação ocasional, durante 60 min.

Em seguida foi adicionada a proporção de etanol a 96% de 6 partes do agente de extracção % e a preparação foi homogeneizada por agitação.

Após uma fase de intumescimento prévio de 6 horas, o eluato foi separado e o fármaco remanescente foi percolada com as restantes 6 partes do agente de extracção.

Os eluatos reunidos foram novamente filtrados para exclusão de partículas de fármaco pequenas e homogeneizados, antes de serem secos por meio de vaporização em filme fino a 55 °C e 150 mbar até um extracto espesso. Este foi homogeneizado e seco em seguida por secagem por pulverização a 45 até 60 °C até à formação de um extracto seco de folhas de hera.

Para testar este processo de preparação foram preparados os seguintes extractos: a partir de folhas de hera com um teor de 3,91% de hederacósido C e 0,20% de α-hederina foi produzido um extracto, uma vez de acordo com o método convencional (cominuição da amostra seca com conversão ulterior directa com etanol a 30% (m/m) e extracção) e uma vez de acordo com o método novo. Na tabela 5 seguinte estão reproduzidos os resultados cromatográficos relativamente ao teor em α-hederina e hederacósido: 20

Tabela 5 a-Hederina (%) Hederacósido C (%) Saponinas totais calculadas como hederacósido C (%) Convencional 0,53 8, 68 9,54 Novo 4,74 0 7,71

Como se pode deduzir da tabela, com o processo de extracção novo o hederacósido C contido nas folhas pôde ser convertido na totalidade em a-hederina.

Um vez que o teor em saponinas totais, calculado como hederacósido C, se move na mesma ordem de grandeza, está-se em condições - no caso de conhecer a concentração correspondente de saponina no fármaco e considerando o factor de concentração de cerca de 2 até 3 - de estimar o teor final de α-hederina do extracto.

Para converter apenas uma parte do hederacósido C presente no fármaco em α-hederina, pode assim sujeitar-se apenas uma proporção determinada do fármaco à fermentação com água, em que todos os outros parâmetros se mantêm constantes. Após o decurso da fermentação de 60 minutos, é então adicionada o fármaco restante e o etanol para o intumescimento prévio de 6 horas.

Com o processo de acordo com a invenção é assim possível alterar claramente o espectro de ingredientes de um extracto seco de folhas de hera por introdução de uma fermentação, sem utilizar um grande dispêndio de tempo e recursos. Não por último, pelas numerosas publicações sobre a actividade de a- 21 hederina, o influenciar especifico do teor em α-hederina num extracto eficácia seco, ou medicamento, actua positivamente sobre a do extracto.

Lisboa, 17 de Outubro de 2007 22

Claims

REIVINDICAÇÕES 1. Processo para a preparação de um extracto de folhas de hera sob utilização de um agente de extracção, em que o extracto apresenta α-hederina, caracterizado por apresentar os passos seguintes: a) cominuição de uma quantidade de folhas de hera secas, b) fermentação por adição de água com conversão de hederacósido C em a-hederina; c) extracção por adição do agente de extracção, e d) eventualmente, secagem do extracto.
2. Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por no passo a) se realizar uma cominuição das folhas de hera para ^ 5 x 5 mm.
3. Processo de acordo com a reivindicação 2, caracterizado por a cominuição das folhas de hera se realizar para <2x2 mm.
4. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado por ser empregue uma mistura de proporções de álcool e água como agente de extracção.
5. Processo de acordo com uma das reivindicações 1 a 4, caracterizado por ser empregue um álcool C2-Ci0 como álcool no agente de extracção. 1
6. Processo de acordo com a reivindicação 5, caracterizado por ser empregue etanol a 96% como álcool.
7. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado por a proporção de água/álcool do agente de extracção perfazer uma razão (m/m) de 10/90 até 90/10.
8. Processo de acordo com a reivindicação 7, caracterizado por a razão água/álcool perfazer 70/30.
9. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8, caracterizado por a razão de folhas de hera para agente de extracção perfazer de 1 : 1 até 1 : 50.
10. Processo de acordo com a reivindicação 9, caracterizado por a razão de folhas de hera para agente de extracção perfazer 1 : 12.
11. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9, caracterizado por, no passo b) , ser empregue uma proporção de água do agente de extracção.
12. Processo de acordo com a reivindicação 11, caracterizado por, no passo b) , ser adicionada a proporção de água da metade da quantidade total em agente de extracção.
13. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 10 a 12, caracterizado por ser adicionada a proporção de água de 6 partes do agente de extracção. 2
14. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 13, caracterizado por o passo b) ser realizado durante um periodo de tempo de 1 min. até 120 min.
15. Processo de acordo com a reivindicação 14, caracterizado por o passo b) ser realizado durante um periodo de tempo de 60 min.
16. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 15, caracterizado por o passo b) ser realizado a uma temperatura de 10 até 40 °C.
17. Processo de acordo com a reivindicação 16, caracterizado por o passo b) ser realizado a uma temperatura de 30 °C.
18. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 17, caracterizado por a extracção no passo c), ser realizada por intumescimento prévio e percolação.
19. Processo de acordo com a reivindicação 18, caracterizado por o pré-entumescimento ser realizado durante um periodo de tempo de 1 h até 30 h.
20. Processo de acordo com a reivindicação 19, caracterizado por o intumescimento prévio ser realizado durante um periodo de tempo de 6 h.
21. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 20, caracterizado por a secagem, no passo d), ser realizada por vaporização em filme fino e subsequente secagem por pulverização. 3
22. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 21 para o controlo do teor de α-hederina e hederacósido num extracto de folhas de hera.
23. Extracto de folhas de hera, caracterizado por ser preparado de acordo com o processo de acordo com uma das reivindicações 1 a 22.
24. Utilização de um extracto de acordo com a reivindicação 23 para a preparação de um medicamento.
25. Utilização de acordo com a reivindicação 24, caracterizada por o medicamento ser empregue para o tratamento de doenças das vias respiratórias.
26. Medicamento que apresenta um extracto de acordo com a reivindicação 25. Lisboa, 17 de Outubro de 2007 4