Opis wynalazku Niniejszy wynalazek dotyczy zwi azku tiazolo[4,5-d]pirymidynowego, sposobu jego wytwarzania, zwi azków po srednich s lu zacych do jego wytwarzania, srodka farmaceutycznego zawieraj acego ten zwi azek oraz zastosowania tego zwi azku. WO 98/08847 i EP0778277 ujawniaj a szereg zwi azków 6,5-hetero-bicyklicznych, które, jak podano, s a u zyteczne jako antagoni sci CRF. Chemokiny odgrywaj a wa zn a rol e w odpowiedziach immunologicznych i zapalnych w ró znych chorobach i schorzeniach, w tym w astmie i chorobach alergicznych, jak równie z w patologiach o pod- lozu autoimmunologicznym, takich jak reumatoidalne zapalenie stawów i mia zd zyca. Te niewielkie wydzielane cz asteczki naleza do rosn acej nadrodziny bia lek 8-14 kDa, charakteryzuj acych si e zacho- wan a sekwencj a czterech reszt cysteinowych. Nadrodzin e chemokin podzieli c mo zna na dwie g lówne grupy, charakteryzuj ace si e swoistymi sekwencjami strukturalnymi, tzn. rodzin e Cys-X-Cys (C-X-C) oraz Cys-Cys (C-C). Odró znia si e je na podstawie jednoaminokwasowej wstawki pomi edzy proksy- maln a w stosunku do ko nca NH par a reszt cysteinowych oraz podobie nstwa sekwencji. Do chemokin z rodziny C-X-C nale zy kilka silnych substancji o dzia laniu chemoprzyci agaj acym i aktywujacym neutrofile, takich jak interleukina-8 (Il-8) i peptyd aktywuj acy neutrofile 2 (NAP-2). Do chemokin z rodziny C-C naleza silne substancje o dzia laniu chemoprzyci agaj acym monocy- ty i limfocyty, lecz nie neutrofile, takich jak ludzkie bialka chemotaktyczne dla monocytów 1-3 (MCP-1, MCP-2 i MCP-3), RANTES (Regulated on Activation, Normal T Expressed and Secreted), eotaksyna oraz bia lka zapalne makrofagów 1 a i 1 ß (MlP-1 a i MIP-1 ß). Badania wykaza ly, ze dzia lania chemokin zachodz a poprzez dzia lanie na podrodziny recepto- rów sprz ezonych z bia lkiem G, do których nale za CCR1, CCR2, CCR2A, CCR2B, CCR3, CCR4, CCR5, CCR6, CCR7, CCR8, CCR9, CCR10, CXCR1, CXCR2, CXCR3, CXCR4 i CX3CR1. Receptory te stanowi a dobre cele dla opracowywania leków, poniewa z leki moduluj ace czynno sc tych recepto- rów by lyby u zyteczne w leczeniu takich chorób i schorze n jak te wymienione powy zej. Przedmiotem wynalazku jest zwi azek tiazolo[4,5-d]pirymidynowy o wzorze (I) lub jego farma- ceutycznie dopuszczalna sól lub solwat: w których R 1 oznacza C 1 -C 8 -alkil, ewentualnie podstawiony jednym lub wi eksz a liczb a podstawników nie- zale znie wybranych z grupy obejmuj acej -OR 4 , fenyl, furanyl, tienyl, tiazolil, ostatnie cztery grupy ewentualnie podstawione jednym lub wi eksz a liczb a podstawników niezale znie wybranych z grupy obejmuj acej atomy chlorowca, -OR 4 , -SO 2 R 10 , C 1 -C 6 -alkil i trifluorometyl; jedna z R 2 i R 3 niezale znie oznacza atom wodoru, a druga C 1 -C 8 -alkil ewentualnie podstawiony jednym lub wi eksz a liczb a podstawników niezale znie wybranych z grupy obejmuj acej: -OR 4 , -NR 5 R 6 -CONR 5 R 6 , lub -NR 8 SO 2 R 9 ; R 4 oznacza atom wodoru, C 1 -C 6 -alkil lub fenyl, przy czym dwie ostatnie grupy s a ewentualnie podstawione jednym lub wi eksz a liczb a podstawników niezale znie wybranych z grupy obejmuj acej atomy chlorowca, -OR 11 i -NR 12 R 13 . R 5 i R 6 niezale znie oznaczaj a atom wodoru lub C 1 -C 6 -alkil ewentualnie podstawiony jednym lub wi eksz a liczb a -OR 14 ; R 10 oznacza C 1 -C 6 -alkil; a R 8 , R 9 , R 11 , R 12, R 13 , R 14 niezale znie oznaczaj a atom wodoru lub C 1 -C 6 -alkil. Korzystnie R 1 oznacza ewentualnie podstawiony benzyl. Tak ze korzystnie jedna z grup R 2 i R 3 oznacza atom wodoru, a druga z nich oznacza C 2 -C 8 -alkil podstawiony hydroksylem. W korzystnej postaci zwi azek wybrany jest z grupy obejmuj acej: 7-[(2-hydroksy-1,1-dimetyloetylo)amino]-5-[(fenylometylo)tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-2(3H)-on,PL 203 572 B1 3 (R)-7-[[1-(hydroksymetylo)propylo]amino]-5-[(fenylometylo)tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-2(3H)-on, (R)-7-[(2-hydroksy-1-metyloetylo)amino]-5-[(fenylometylo)tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-2(3H)-on, 5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]-7-[(2-hydroksy-1,1-dimetyloetylo)amino]tiazolo[4,5-d]piry- midyn-2(3H)-on, 5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]-7-[[(1R)-2-hydroksy-1-metyloetylo]amino]tiazolo[4,5-d]piry- midyn-2(3H)-on, 5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]-7-[[2-(hydroksyetoksy)etylo]amino]tiazolo[4,5-d]pirymidyn- -2(3H)-on, 5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]-7-[[2-hydroksy-1-(hydroksymetylo)etylo]amino]tiazolo[4,5-d]- pirymidyn-2(3H)-on, 7-[(2-aminoetylo)amino]-5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-2(3H)-on, 5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]-7-[(2-hydroksyetylo)amino]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-2(3H)-on, N-[2-[[5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]-2,3-dihydro-2-oksotiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]- etylo]metanoesulfonoamid, (+/-)-5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]-7-[[2-(2-hydroksyetoksy)-1-metyloetylo]amino]tiazolo[4,5-d]- pirymidyn-2(3H)-on, 7-[[(1R)-2-amino-1-metyloetylo]amino]-5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn- -2(3H)-on, 5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]-7-[[(1R)-2-[(2-hydroksyetylo)amino]-1-metyloetylo]amino]- tiazolo[4,5-d]pirymidyn-2(3H)-on, 5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]-7-[[(1R)-2-(dimetyloamino)-1-metyloetylo]amino]tiazolo[4,5-d]- pirymidyn-2(3H)-on, 5-[[[4-(2-aminoetoksy)-3-chlorofenylo]metylo]tio]-7-[[(1R)-2-hydroksy-1-metyloetylo]amino]- tiazolo[4,5-d]pirymidyn-2(3H)-on, 5-[[3-chloro-4-metoksyfenylo)metylo]tio]-7-[[(1R)-2-hydroksy-1-metyloetylo]amino]tiazolo[4,5-d]- pirymidyn-2(3H)-on, 5-[[3-chloro-2-fluorofenylo)metylo]tio]-7-[[(1R)-2-hydroksy-1-metyloetylo]amino]tiazolo[4,5-d]- pirymidyn-2(3H)-on 7-[[(1R)-2-hydroksy-1-metyloetylo]amino]-5-[[(2-metyle-4-tiazolilo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]piry- midyn-2(3H)-on, 7-[[2-hydroksy-1-(hydroksymetylo)etylo]amino]-5-[[(2-metylo-4-tiazolilo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]- pirymidyn-2(3H)-on 7-[(2-hydroksy-1,1-dimetyloetylo)amino]-5-[[(2-metylotiazolilo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn- -2(3H)-on, 7-[(2-hydroksy-1,1-dimetyloetylo)amino]-5-[[(2-metylofenylo)metylo)tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn- -2(3H)-on, 5-[(2-furanylometylo)tio]-7-[[(1R)-2-hydroksy-1-metyloetylo]amino]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-2(3H)-on, 7-[[(1R)-2-amino-1-metyloetylo]amino]-5-[[(3-chloro-2-fluorofenylo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]piry- midyn-2(3H)-on, (2S)-2-[[5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]-2,3-dihydro-2-oksotiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]- amino]-3-hydroksy-propanoamid, 7-[[(1R)-2-hydroksy-1-metyloetylo]amino]-5-[(2-tienylometylo)tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-2(3H)-on, 7-[[(1R)-2-hydroksy-1-metyloetylo]amino]-5[[[3-metylo(metylosulfonylo)fenylmetylo]tio]tiazolo- [4,5-d]pirymidyn-2(3H)-on, 5-[[[3-chloro-4-(trifluorornetoksy)fenylo]metylo]tio]-7-[[(1R)-2-hydroksy-1-metyloetylo]amino]- tiazolo[4,5-d]pirymidyn-2(3H)-on, 5-[[[2-fluoro-3-(trifluorometylo)fenylo]metylo]tio]-7-[[(1R)-2-hydroksy-1-metyloetylo]amino]tiazolo- [4,5-d]pirymidyn-2(3H)-on, 5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]-7-[2-[(dimetyloamino)etylo]amino]tiazolo[4,5-d]pirymidyn- -2(3H)-on, 5-[[(2-fluorofenylo)metylo]tio]-7-[[(1R)-2-hydroksy-1-metyloetylo]amino]tiazolo[4,5-d]pirymidyn- -2(3H)-on, 7-[[(1R)-2-hydroksy-1-metyloetylo]amino]-5-[[(2-metoksyfenylo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]piry- midyn-2(3H)-on, 7-[[(1R)-2-hydroksy-1-metyloetylo]amino]-5-[(2-fenoksyetylo)tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-2(3H)-on,PL 203 572 B1 4 7-[[(1R)-2-hydroksy-1-metyloetylo]amino]-5-[[(3-metylofenylo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn- -2(3H)-on, 5-[[(2-fluoro-3-metylofenylo)metylo]tio]-7-[[(1R)-2-hydroksy-1-metyloetylo]amino]tiazolo[4,5-d]- pirymidyn-2(3H)-on, 5-[[(3-chlorofenylo)metylo]tio]-7-[[(1R)-2-hydroksy-1-metyloetylo]amino]tiazolo[4,5-d]pirymidyn- -2(3H)-on, 5-[[(3-bromofenylo)metylo]tio]-7-[[(1R)-2-hydroksy-1-metyloetylo]amino]tiazolo[4,5-d]pirymidyn- -2(3H)-on, 5-[[[4-(difluorometoksy)fenylo]metylo]tio]-7-[[(1R)-2-hydroksy-1-metyloetylo]amino]tiazolo[4,5-d]- pirymidyn-2(3H)-on, (+/-)-5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]-7-[[2-hydroksy-1-(metoksymetylo)etylo]amino]tiazolo[4,5-d]- pirymidyn-2(3H)-on, 7-[[2-hydroksy-1-(hydroksymetylo)etylo]amino]-5-[(fenylometylo)tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn- -2(3H)-on, 5-[[(2-bromofenylo)metylo]tio]-7-[[(1R)-2-hydroksy-1-metyloetylo]amino]tiazolo[4,5-d]pirymidyn- 2(3H)-on, i ich farmaceutyczne sole i solwaty. Innymi korzystnymi zwi azkami s a zwiazki wybrane z grupy obejmuj acej: sól sodow a 5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]-7-[[(1R)-2-hydroksy-1-metyloetylo]amino]tiazolo- [4,5-d]pirymidyn-2(3H)-onu, sól sodow a 5-[[3-chloro-2-fluorofenylo)metylo]tio]-7-[[(1R)-2-hydroksy-1-metyloetylo]amino]- tiazolo[4,5-d]pirymidyn-2(3H)-onu, sól sodow a (+/-)-5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]-7-[[2-hydroksy-1-(metoksymetylo)etylo]- amino]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-2(3H)-onu, sól sodow a 7-[[2-hydroksy-1-(hydroksymetylo)etylo]amino]-5-[(fenylometylo)tio]tiazolo[4,5-d]- pirymidyn-2(3H)-onu i sól sodow a 7-[[(1R)-2-hydroksy-1-metyloetylo]amino]-5-[(fenylometylo)tio]tiazolo[4,5-d]- pirymidyn-2(3H)-onu. Korzystne zwi azki s a tak ze wybrane z grupy obejmuj acej: trifluorooctan 7-[[(1R)-2-amino-1-metyloetylo]amino]-5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]- pirymidyn-2(3H)-onu, trifluorooctan 5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]-7-[[(1R)-2-[(2-hydroksyetylo)amino]-1-metylo- etylo]amino]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-2(3H)-onu, trifluorooctan 5-[[[4-(2-aminoetoksy)-3-chlorofenylo]metylo]tio]-7-[[(1R)-2-hydroksy-1-metylo- etylo]amino]tiazolo-[4,5-d]pirymidyn-2(3H)-onu, monochlorowodorek 5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]-7-[2-[(dimetyloamino)etylo]amino]tiazolo- [4,5-d]pirymidyn-2(3H)-onu i Wynalazek dotyczy tak ze sposobu wytwarzania zwi azku o wzorze (I) powy zej, charakteryzuj a- cego sie tym, ze: (a) na zwi azek o wzorze (IIa): w którym R 1 , R 2 i R 3 maja takie znaczenie jak we wzorze (I), dzia la si e tiolem o wzorze R 1 SH w obecno sci odpowiedniej zasady, alboPL 203 572 B1 5 (b) na zwi azek o wzorze (IIB): w którym R 1 , R 2 i R 3 maja takie znaczenie jak we wzorze (I), a X oznacza atom chlorowca, dzia- la si e alkoksylanem metalu, a nast epnie dzia la si e kwasem lub zasad a i ewentualnie po etapach (a) lub (b) wytwarza si e farmaceutycznie dopuszczaln a sól. Przedmiotem wynalazku jest tak ze zwi azek po sredni o wzorze (IIA) w którym R 1 oznacza C 1 -C 8 -alkil, ewentualnie podstawiony jednym lub wi eksz a liczb a podstaw- ników niezale znie wybranych z grupy obejmuj acej -OR 4 , fenyl, furanyl, tienyl, tiazolil, ostatnie cztery grupy ewentualnie podstawione jednym lub wi eksz a liczb a podstawników niezale znie wybranych z grupy obejmuj acej atomy chlorowca, -OR 4 , -SO 2 R 10 , C 1 -C 6 -alkil i trifluorometyl; jedna z R 2 i R 3 niezale znie oznacza atom wodoru, a druga C 1 -C 8 -alkil ewentualnie podstawiony jednym lub wi eksz a liczb a podstawników niezale znie wybranych z grupy obejmuj acej: -OR 4 , -NR 5 R 6 -CONR 5 R 6 , lub -NR 8 SO 2 R 9 ; R 4 oznacza atom wodoru, C 1 -C 6 -alkil lub fenyl, przy czym dwie ostatnie grupy s a ewentualnie podstawione jednym lub wi eksz a liczb a podstawników niezale znie wybranych z grupy obejmuj acej atomy chlorowca, -OR 11 i -NR 12 R 13 ; R 5 i R 6 niezale znie oznaczaj a atom wodoru lub C 1 -C 6 -alkil ewentualnie podstawiony jednym lub wi eksz a liczb a -OR 14 ; R 10 oznacza C 1 -C 6 -alkil; a R 8 , R 9 , R 11 , R 12 , R 13 , R 14 niezale znie oznaczaj a atom wodoru lub C 1 -C 6 -alkil. Wynalazek dotyczy równie z zwiazku po sredniego o wzorze (IIB) w którym R 1 oznacza C 1 -C 8 -alkil, ewentualnie podstawiony jednym lub wi eksz a liczb a podstaw- ników niezale znie wybranych z grupy obejmuj acej -OR 4 , fenyl, furanyl, tienyl, tiazolil, ostatnie cztery grupy ewentualnie podstawione jednym lub wi eksz a liczb a podstawników niezale znie wybranych z grupy obejmuj acej atomy chlorowca, -OR 4 , -SO 2 R 10 , C 1 -C 6 -alkil i trifluorometyl;PL 203 572 B1 6 jedna z R 2 i R 3 niezale znie oznacza atom wodoru, a druga C 1 -C 8 -alkil ewentualnie podstawiony jednym lub wi eksz a liczb a podstawników niezale znie wybranych z grupy obejmuj acej: -OR 4 , -NR 5 R 6 -CONR 5 R 6 , lub -NR 8 SO 2 R 9 ; R 4 oznacza atom wodoru, C 1 -C 6 -alkil lub fenyl, przy czym dwie ostatnie grupy s a ewentualnie podstawione jednym lub wi eksz a liczb a podstawników niezale znie wybranych z grupy obejmuj acej atomy chlorowca, -OR 11 i -NR 12 R 13 ; R 5 i R 6 niezale znie oznaczaj a atom wodoru lub C 1 -C 6 -alkil ewentualnie podstawiony jednym lub wi eksz a liczb a -OR 14 ; R 10 oznacza C 1 -C 6 -alkil; a R 8 , R 9 , R 11 , R 12 , R 13 , R 14 niezale znie oznaczaj a atom wodoru lub C 1 -C 6 -alkil, a X oznacza atom chlorowca z wykluczeniem poni zszych zwi azków: i) 2[[2-bromo-5-[(fenylometylo)tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]-2-metylo-1-propanolu i ii) 2[[2-bromo-5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]-2-metylo-1- -propanolu. Wynalazek dotyczy równie z zwiazku po sredniego o wzorze (IIIA): w którym jedna z R 2 i R 3 niezale znie oznacza atom wodoru, a druga C 1 -C 8 -alkil ewentualnie podstawiony jednym lub wi eksz a liczb a podstawników niezale znie wybranych z grupy obejmuj acej: -OR 4 , -NR 5 R 6 -CONR 5 R 6 , lub -NR 8 SO 2 R 9 ; R 4 oznacza atom wodoru, C 1 -C 6 -alkil lub fenyl, przy czym dwie ostatnie grupy s a ewentualnie podstawione jednym lub wi eksz a liczb a podstawników niezale znie wybranych z grupy obejmuj acej atomy chlorowca, -OR 11 i -NR 12 R 13 ; R 5 i R 6 niezale znie oznaczaj a atom wodoru lub C 1 -C 6 -alkil ewentualnie podstawiony jednym lub wi eksz a liczb a -OR 14 ; R 10 oznacza C 1 -C 6 -alkil; a R 8 , R 9 , R 11 , R 12 , R 13 , R 14 niezale znie oznaczaj a atom wodoru lub C 1 -C 6 -alkil, a X oznacza grup e NH 2 . Przedmiotem wynalazku jest srodek farmaceutyczny zawieraj acy substancj e czynn a w po laczeniu z farmaceutycznie dopuszczaln a substancj a pomocnicz a, rozcie nczalnikiem lub no sni- kiem, charakteryzuj acy si e tym, ze jako substancj e czynn a zawiera zwi azek o wzorze (I) lub jego far- maceutycznie zgodn a sól lub solwat. Zwi azek o wzorze (I) lub jego farmaceutycznie dopuszczalna sól lub solwat zdefiniowane powy- zej s luza do stosowania w terapii. Wynalazek dotyczy te z zastosowania zwi azku o wzorze (I) lub jego farmaceutycznie dopusz- czalnej soli lub solwatu, do wytwarzania srodka farmaceutycznego do stosowania w terapii. W kontek scie niniejszego opisu, je zeli nie podano inaczej, alkil lub alkenyl albo cz esc alki- lowa lub alkenylowa w grupie podstawnikowej mog a by c prosto la ncuchowe lub rozga lezione. Do aryli nale za fenyl i naftyl. Grupy heteroarylowe obejmuj a 5- lub 6-cz lonowe pier scienie aroma- tyczne zawieraj ace jeden lub wi eksz a liczb e heteroatomów spo sród atomów azotu, siarki i tlenu. Przyk ladami takich grup s a ugrupowania pirydyny, pirymidyny, tiazolu, oksazolu, pirazolu, imida- zolu i furanu. Niektóre zwi azki o wzorze (I) mog a wyst epowa c w postaciach stereoizomerycznych. Jest zro- zumia le, ze wynalazek obejmuje wszystkie geometryczne i optyczne izomery zwi azków o wzorze (I) i ich mieszaniny z w laczeniem racematów. Tak ze tautomery i ich mieszaniny s a obj ete niniejszym wynalazkiem.PL 203 572 B1 7 W sposobie wytwarzania obejmuj acym dzia lanie na zwi azek o wzorze (IIa) w którym R 1 , R 2 i R 3 maj a takie znaczenie jak we wzorze (I), tiolem o wzorze R 1 SH w obecno sci odpowiedniej zasady i ewentualnie wytworzenie farmaceutycznie dopuszczalnej soli reakcj e mo zna prowadzi c w mieszanym rozpuszczalniku, DMSO i etanolu, w temperaturze 0 - 100°C, z u zyciem bo- rowodorku sodu jako zasady. Zwi azki o wzorze (IIa), w którym R 1 , R 2 i R 3 maj a takie znaczenie jak we wzorze (I), mo zna wy- tworzy c drog a dzia lania na zwi azki o wzorze (I) odpowiednim srodkiem utleniaj acym, takim jak okson. Reakcj e mo zna prowadzi c w rozpuszczalniku, takim jak acetonitryl, w temperaturze 0 - 100°C. W sposobie wytwarzania obejmuj acym dzia lanie na zwi azek o wzorze (IIb): w którym R 1 , R 2 i R 3 maja takie znaczenie jak we wzorze (I), a X oznacza atom chlorowca, al- koholanem metalu, a nast epnie dzia lanie kwasem lub zasad a i ewentualnie wytworzenie farmaceu- tycznie dopuszczalnej soli, reakcj e mo zna prowadzi c w rozpuszczalniku alkoholowym, takim jak meta- nol, a odbezpieczenie prowadzi si e w takim rozpuszczalniku jak 1,4-dioksan. Do przyk ladowych alko- holanów metalu nale zy metanolan potasu. Do przyk ladowych odpowiednich kwasów nale zy kwas chlorowodorowy. Korzystnie zwi azek o wzorze (IIB) poddaje si e dzia laniu alkoholanu metalu, takiego jak metanolan potasu, a nast epnie kwasu, takiego jak stezony HCl w odpowiednim rozpuszczalniku, takim jak 1,4-dioksan. Zwi azki o wzorze (IIB), w którym R 1 , R 2 i R 3 maja takie znaczenie jak we wzorze (I), a X ozna- cza atom chlorowca, mo zna wytworzy c z odpowiednich zwi azków o wzorze (IIB), w których R 1 , R 2 i R 3 maja takie znaczenie jak we wzorze (I), a X oznacza NH 2 , drog a dzia lania srodkiem diazuj acym, takim jak azotyn izoamylu, i srodkiem chlorowcuj acym, takim jak bromoform. Zwi azki o wzorze (IIB), w którym R 1 , R 2 i R 3 maja takie znaczenie jak we wzorze (I), a X ozna- cza NH 2 , mo zna wytworzy c albo drog a dzia lania na zwi azek o wzorze (IIIA): w którym R 2 i R 3 maja takie znaczenie jak we wzorze (I), a X oznacza NH 2 , zwi azkiem o wzorze R 1 X, w którym R 1 ma wy zej podane znaczenie, a X oznacza grup e odszczepiaj ac a si e, tak a jak atom bromu, w obecno sci zasady, takiej jak diizopropyloetyloamina w oboj etnym rozpuszczalniku, takim jak DMSO/N-metylopirolidynon, w temperaturze 0 - 100°C.PL 203 572 B1 8 Zwi azki o wzorze (IIIA), w którym R 2 i R 3 maja takie znaczenie jak we wzorze (I), a X oznacza NH 2 , mo zna wytworzy c drog a dzia lania na zwi azek o wzorze (IIB), w którym R 2 i R 3 maja takie zna- czenie jak we wzorze (I), X oznacza NH 2 , a R 1 oznacza odpowiedni a grup e benzylow a, tak a jak ben- zyl lub 2,3-difluorobenzyl, srodowiskiem redukuj acym, takim jak metaliczny sód w ciek lym amoniaku, albo drog a dzia lania na zwi azek o wzorze (IIIB): w którym R 1 ma takie znaczenie jak we wzorze (I), a L oznacza grup e odszczepiaj ac a si e, tak a jak atom chloru, amin a o wzorze HNR 2 R 3 , w którym R 2 i R 3 maja takie znaczenie jak we wzorze (I). Reakcj e mo zna prowadzi c w rozpuszczalniku, takim jak N-metylopirolidyna, w temperaturze pomi edzy 0 - 150°C. Zwi azki o wzorze (IIIB), w którym R 1 ma takie znaczenie jak we wzorze (I), a L oznacza atom chlorowca, mo zna wytworzy c drog a dzia lania na zwi azek o wzorze (IIIB), w którym R 1 ma takie zna- czenie jak we wzorze (I), a L oznacza hydroksyl, srodkiem chlorowcuj acym, takim jak tlenochlorek fosforu. Reakcj e mo zna prowadzi c w obecno sci dimetyloaniliny i w temperaturze wrzenia w warun- kach powrotu skroplin. Zwi azki o wzorze (IIIB), w którym R 1 ma takie znaczenie jak we wzorze (I), a L oznacza hydrok- syl, mo zna wytworzy c drog a dzia lania na zwi azek o wzorze (IVA) zwi azkiem o R 1 X, w którym R 1 ma wy zej podane znaczenie, a X oznacza grup e odszczepiaj ac a sie, tak a jak atom bromu, w obecno sci zasady, takiej jak tert-butoksylan potasu, w oboj etnym roz- puszczalniku, takim jak DMSO, w temperaturze pokojowej, albo ogrzewanie zwi azku o wzorze (IVB), w którym R 1 ma wyzej podane znaczenie Reakcj e korzystnie prowadzi si e w odpowiednim rozpuszczalniku, takim jak DMF, w podwy z- szonej temperaturze, np oko lo 120°C. Zwi azki o wzorze (IVB) mo zna latwo wytworzy c drog a reakcji zwi azku o ogólnym wzorze (V), w którym R 1 ma wy zej podane znaczenie, z tiocyjanianem potasu i bromem w oboj etnym rozpusz- czalniku, takim jak dimetyloformamid/pirydyna.PL 203 572 B1 9 Zwi azki o wzorze (V) wytwarza si e drog a reakcji zwi azku o wzorze (VI): ze zwi azkiem o wzorze R 1 X, w którym R 1 ma wy zej podane znaczenie, a X oznacza grup e od- szczepiaj ac a si e, tak a jak atom bromu, w obecno sci zasady, takiej jak wodorek sodu, w obojetnym rozpuszczalniku, takim jak DMF, w temperaturze pokojowej. Zwi azki o wzorze (IVA) i (VI) s a albo dost epne w handlu, albo dobrze znane z literatury. Dla fachowców b edzie zrozumia le, ze w sposobach opisanych powy zej funkcyjne grupy (np. grupy hydroksylowe) zwi azków po srednich mog a wymaga c zabezpieczenia grupami zabezpie- czaj acymi. Ko ncowy etap wytwarzania zwi azków wed lug wynalazku mo ze wymaga c usuni ecia jednej lub wi ekszej liczby grup zabezpieczaj acych. Zabezpieczenie i odbezpieczenie grup funkcyjnych jest dok ladnie opisane w „Protective Groups in Organic Chemistry", wydanym przez J. W. F. McOmie, Plenum Press (1973), i w „Protective Groups in Organic Synthesis", 2 wydanie, T. W. Greene & P. G. M. Wuts, Wiley-Interscience (1991). Nowe zwi azki po srednie s a dalszym przedmiotem niniejszego wynalazku. Szczególnie zwi azki o wzorze (IIA), (IIB) i (IIIA) s a nowe i s a przedmiotem niniejszego wynalazku. Zwi azki o powy zszym wzorze (I) mo zna przekszta lci c w ich farmaceutycznie dopuszczalne sole lub solwaty, korzystnie zasadowe sole addycyjne, takie jak sole sodu, potasu, wapnia, glinu, litu, ma- gnezu, cynku, benzatyny, chloroprokainy, choliny, dietanoloaminy, etanoloaminy, etylodiaminy, me- gluminy, trometaminy lub prokainy, lub sole addycyjne z kwasami, takie jak chlorowodorek, bromowo- dorek, fosforan, octan, fumaran, maleinian, winian, cytrynian, szczawian, metanosulfonian lub p-to- luenosulfonian. Zwi azki o wzorze (I) wykazuj a aktywno sc jako substancje farmaceutyczne, a w szczególno sci jako modulatory receptorów dla chemokin i mo zna je stosowa c w leczeniu (terapeutycznym lub profilaktycz- nym) stanów/chorób u ludzi i gatunków innych ni z ludzie, które s a nasilane lub powodowane nadmier- nym lub nieregulowanym wytwarzaniem chemokin. Do przyk ladów takich stanów/chorób nale za: (1) (uk lad oddechowy) obturacyjne choroby dróg oddechowych, w tym przewlek la obturacyjna choroba p luc (COPD), astma, jak astma oskrzelowa, alergiczna, wewn etrzna, zewn etrzna i spowodo- wana pyleniem, zw laszcza astma przewlek la lub d lugotrwa la (np. pó zna astma i nadwra zliwo sc dróg oddechowych); zapalenie oskrzeli; ostry, alergiczny, zanikowy nie zyt nosa oraz przewlek ly nie zyt no- sa, w tym serowaciej acy nie zyt nosa, przerostowy nie zyt nosa, ropny nie zyt nosa, nie zyt nosa wysy- chaj acy oraz polekowy; b loniasty nie zyt nosa, w tym nie zyt nosa krupowy, w lóknikowy i rzekomob lo- niasty oraz gru zliczy; sezonowy nie zyt nosa, w tym nie zyt nosa nerwowy (katar sienny) oraz naczynio- ruchowy; sarkoidoza, p luco farmera oraz choroby pokrewne, w lóknienie p luc oraz idiopatyczne sród- mi azszowe zapalenie p luc; (2) (ko sci i stawy): reumatoidalne zapalenie stawów, seronegatywne spondyloartropatie (w tym zesztywniaj ace zapalenie stawów kr egos lupa, luszczycowe zapalenie stawów oraz choroba Reitera), choroba Behceta, zespó l Sjogrena i stwardnienie uogólnione;PL 203 572 B1 10 (3) (skóra): luszczyca, atopowe zapalenie skóry, kontaktowe zapalenie skóry oraz inne zapale- nia skóry przebiegaj ace z wypryskiem, lojotokowe zapalenie skóry, liszaj p laski, p echerzyca, p eche- rzyca p echerzowa, p echerzowe oddzielanie si e naskórka, pokrzywka, angioderma, choroby na tle stanu zapalnego naczy n, rumienie, eozynofilie skórne, zapalenie b lony naczyniowej oka, lysienie plackowate oraz wiosenne zapalenie spojówek; (4) (przewód pokarmowy): celiakia, zapalenie odbytnicy, eozynofilowe zapalenie zoladka i je- lit, mastocytoza, choroba Le sniowskiego-Crohna, wrzodziej ace zapalenie okr eznicy, alergie pokar- mowe wywieraj ace dzia lania odleg le od jelit, np. migren e, nie zyt nosa i wyprysk; (5) (inne choroby uk ladowe i tkanek): stwardnienie rozsiane, mia zd zyca, nabyty zespó l upo- sledzenia odporno sci (AIDS), tocze n rumieniowaty, uk ladowy tocze n rumieniowaty, zapalenie tarczycy typu Hashimoto, miastenia ci ezka rzekomopora zna, cukrzyca typu I, zespó l nerczycowy, eozynofilowe zapalenie powi ezi, zespó l nadmiaru IgE, tr ad, zespó l Sezary oraz idiopatyczna czerwienica trombocy- topeniczna; zrosty pooperacyjne oraz posocznica; (6) (odrzucanie przeszczepu): ostre i przewlek le po przeszczepie np. nerki, serca, w atroby, p luca, szpiku kostnego, skóry i rogówki oraz przewlek la choroba typu przeszczep przeciwko gospo- darzowi; (7) nowotwory, zw laszcza rak niedrobnokomórkowy (NSCLC), czerniak z lo sliwy, rak gruczo lu krokowego i miesak luskowaty oraz przerzuty nowotworowe; (8) schorzenia, w których angiogenezie towarzyszy podwyzszony poziom chemokin CXCR2 (np. NSCLC, retinopatia cukrzycowa); (9) mukowiscydoza, udar, uszkodzenie reperfuzyjne serca, mózgu, ko nczyn oraz innych narz adów; (10) oparzenia i przewlek le owrzodzenia skóry; (11) schorzenia uk ladu rozrodczego (np. zaburzenia owulacji, miesi aczkowania oraz implanta- cji, poród przedwczesny, endometrioza). Niniejszy wynalazek dostarcza zatem zwi azku o wzorze (I) lub jego farmaceutycznie dopusz- czalnej soli lub solwatu, jak uprzednio opisano, do stosowania w terapii. Korzystnie zwi azki wed lug wynalazku stosuje si e w leczeniu chorób, w których receptor dla chemokin nale zy do podrodziny receptorów CXC, a korzystniej docelowym receptorem dla chemokin jest receptor CXCR2. Do konkretnych chorób, jakie mo zna leczy c zwi azkami wed lug wynalazku naleza luszczyca, schorzenia, w których angiogenezie towarzyszy wzrost poziomu cytokin CXCR2 oraz COPD. Korzyst- ne jest, by zwi azki wed lug wynalazku by ly stosowane w leczeniu luszczycy. Mo zliwe jest stosowanie zwi azku o wzorze (I) lub jego farmaceutycznie dopuszczalnej soli lub solwatu, jak okre slono powy zej, do wytwarzania leku stosowanego w terapii, jak te z stosowanie zwi azku o wzorze (I) lub jego farmaceutycznie dopuszczalnej soli lub solwatu, jak okre slono powy zej, do wytwarzaniu leku przeznaczonego do leczenia chorób lub schorze n u ludzi, w których korzystna jest modulacja aktywno sci receptora dla chemokin. W kontek scie niniejszego opisu okre slenie "terapia" obejmuje równie z poj ecie "profilaktyka", o ile nie zaznaczono inaczej. Okre slenia "terapeutyczny" i "terapeutycznie" nale zy interpretowa c ana- logicznie. Mo zliwe jest leczenie choroby, w patogenezie której udzia l bior a chemokiny, gdzie chemokina wiaze si e z receptorem dla chemokin (zw laszcza CXCR2), polegaj ace na podawaniu pacjentowi tera- peutycznie skutecznej ilo sci zwi azku o wzorze (I) lub jego farmaceutycznie dopuszczalnej soli lub solwatu, jak opisano powy zej. W szczególno sci mo zliwe jest leczenie choroby zapalnej, zw laszcza luszczycy, u pacjenta cier- pi acego lub nara zonego na wyst apienie tej choroby, polegaj ace na podawaniu pacjentowi terapeu- tycznie skutecznej ilo sci zwi azku o wzorze (I) lub jego farmaceutycznie dopuszczalnej soli lub solwatu, jak opisano powy zej. W przypadku wymienionych powy zej zastosowa n terapeutycznych podawana dawka b edzie oczywi scie zmienia la si e w zale zno sci od zastosowanego zwi azku, sposobu podawania, po zadanego leczenia oraz danego schorzenia. Zwi azki o wzorze (I) oraz ich farmaceutycznie dopuszczalne sole i solwaty mo zna stosowa c same, ale b ed a zazwyczaj podawane w postaci srodka farmaceutycznego, w którym zwi a- zek/sól/solwat o wzorze (I) (aktywny sk ladnik) b edzie zwi azany z farmaceutycznie dopuszczaln a sub- stancj a pomocnicz a, rozcie nczalnikiem lub no snikiem. W zale zno sci od sposobu podawania, srodek farmaceutyczny b edzie korzystnie zawiera l 0,05 - 99%, korzystniej 0,05 - 80%, korzystniej 0,10 - 70%,PL 203 572 B1 11 a jeszcze korzystniej 0,10 - 50% (procenty wagowe) substancji czynnej. Procenty wagowe wyra zono w oparciu o ca lkowit a mas e srodka. Srodek farmaceutyczny wed lug wynalazku mo zna wytwarza c przez mieszanie zwi azku o wzorze (I) lub jego farmaceutycznie dopuszczalnej soli lub solwatu, jak okre slono powy zej, z farma- ceutycznie dopuszczaln a substancj a pomocnicz a, rozcie nczalnikiem lub no snikiem. Srodki farmaceutyczne mo zna podawa c miejscowo (np. do p luc i/lub dróg oddechowych lub na skór e) w postaci roztworów, zawiesin, aerozoli na bazie heptafluoroalkanów oraz preparatów w postaci suchego proszku, albo tez douk ladowo, np. drog a doustn a w postaci tabletek, kapsu lek, syropów, proszków lub granulek, drog a pozajelitow a w postaci roztworów lub zawiesin, drog a pod- skórn a lub doodbytnicz a w postaci czopków lub drog a przezskórn a. Zwi azki wed lug wynalazku podaje sie korzystnie drog a doustn a. Wynalazek zilustrowano w odniesieniu do poni zszych przyk ladów. W przyk ladach widma ma- gnetycznego rezonansu j adrowego (NMR) s a mierzone spektrometrem Varian Unity Inova 300 lub 400 MHz, a widma spektrometrii masowej (MS) s a mierzone spektrometrem Finnigan Mat SSQ7000 lub spektrometrem Micromass Platform. Gdy by lo to konieczne, reakcje prowadzono w oboj etnej at- mosferze azotu lub argonu. Chromatografi e prowadzono na ogó l z u zyciem Matrex Silica 60® (35 - 70 µm) lub Prolabo Silica gel 60® (35-70 µm) odpowiednich dla chromatografii flash na zelu krze- mionkowym. Oczyszczanie drog a wysokosprawnej chromatografii cieczowej prowadzono z u zyciem albo Waters Micromass LCZ z pomp a kontroln a Waters 600, detektorem Waters 2487 i kolektorem frakcji Gilson FC024, albo Waters Delta Prep 4000. W przyk ladach zastosowano skróty t.t. i DMSO odpowiednio dla temperatury topnienia i dimetylosulfotlenku. P r z y k l a d 1 7-[(2-hydroksy-1,1-dimetyloetylo)amino]-5-[(fenylometylo)tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-2(3H)-on (a) Ester kwasu 6-amino-1,4-dihydro-4-okso-2-[(fenylometylo)tio]-5-pirymidynylotiocyjanowego 6-amino-2-[(fenylometylo)tio]-4(1H)-pirymidynon (10,5 g) [wytworzony jak opisano w WO 9635678] i tiocyjanian potasu (25 g) w N,N-dimetyloformamidzie (200 ml) ogrzewano razem w temperaturze 65°C. Dodano pirydyny (6,3 ml) i roztwór och lodzono do temperatury 5°C. Nast epnie powoli dodano bromu (2,2 ml) i mieszanin e reakcyj a mieszano przez 2 godziny w temperaturze 5-10°C. Mieszanin e reakcyjn a wlano do wody z lodem, mieszano przez 1 godzin e i substancj e stala ods aczono. Po przemyciu wod a i eterem, a nast epnie po roztarciu z gor acym metanolem otrzymano czyst a próbk e. MS (APCI) 291 (M+H, 100%). (b) 2-amino-5-[(fenylometylo)tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7(4H)-on Produkt z przyk ladu 1 etapu a) (7,35 g) ogrzewano w temperaturze 120°C w N,N-dimetylo- formamidzie (40 ml)/wodzie (10 ml) przez 10 godzin. Po och lodzeniu powsta la substancj e sta la ods a- czono, przemyto wod a, a nast epnie octanem etylu i otrzymano zwi azek jak w podtytule. t.t. 325°C MS (APCI) 291 (M+H, 100%). (c) 7-chloro-5-[(fenylometylo)tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyno-2-amina Produkt z przyk ladu 1 etap b) (0,89 g), tlenochlorek fosforu (12 ml) i N,N-dimetyloanilin e (1,2 ml) ogrzewano do temperatury wrzenia w warunkach powrotu skroplin przez 2 godziny. Och lodzon a mie- szanin e reakcyjn a wlano do wody z lodem i mieszano przez 2 godziny. Po chromatografii (SiO 2 , me- tanol/dichlorometan jako eluent) otrzymano zwi azek jak w podtytule. t.t. 217-218,5°C MS (APCI) 309 (M+H, 100%). (d) 2-[[2-amino-5-[(fenylometylo)tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]-2-metylo-1-propanol Produkt z przyk ladu 1 etapu c) (0,6 g) i 1-amino-2-metylopropan-2-ol (1,1 g) w tetrahydrofuranie (10 ml) ogrzewano w szczelnie zamkni etym naczyniu w temperaturze 100°C przez 18 godzin. Mie- szanin e odparowano do sucha, oczyszczono (SiO 2 , octan etylu jako eluent) i otrzymano zwi azek jak w podtytule (0,46 g). MS (APCI) 362 (M+H + , 100%). (e) 2-[[2-bromo-5-[(fenylometylo)tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]-2-metylo-1-propanol Do roztworu produktu z przyk ladu 1 etapu d) (0,1 g) w bromoformie (5 ml) dodano azotynu izo- amylu (0,13 ml) i ca lo sc ogrzewano w temperaturze 60°C przez 10 minut. Mieszanin e odparowano do sucha, oczyszczono (SiO 2 , octan etylu:dichlorometan 1:9 jako eluent) i otrzymano zwi azek jak w pod- tytule jako bezbarwn a substancj e stala (0,043 g).PL 203 572 B1 12 MS (APCI) 427 (M+H + , 100%). (f) 2-[[2-metoksy-5-[(fenylometylo)tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]-2-metylo-1-propanol Do roztworu produktu z przyk ladu 1 etapu e) (0,36 g) w metanolu (5 ml) dodano wodorotlenku potasu (0,095 g) i ca lo sc mieszano przez 30 minut. Mieszanin e zoboj etniono st ezonym kwasem chlo- rowodorowym, a nast epnie odparowano do sucha, oczyszczono (SiO 2 , octan etylu:dichlorometan 1:9 jako eluent) i otrzymano zwi azek jak w podtytule jako bezbarwn a substancj e sta la (0,245 g). MS (APCI) 377 (M+H + , 100%). (g) 7-[(2-hydroksy-1,1-dimetyloetylo)amino]-5-[(fenylometylo)tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-2(3H)-on Do roztworu produktu z przyk ladu 1 etapu f) (0,21 g) w 1,4-dioksanie (5 ml) dodano wody (0,1 ml) i stezonego kwasu chlorowodorowego (1 kropl e). Mieszanin e ogrzewano w temperaturze 45°C przez 3 godziny, a nast epnie odparowano do sucha. Po rekrystalizacji (acetonitryl) otrzymano zwi azek tytu lowy (0,110 g). t.t 207-8°C MS (APCI) 363 (M+H + , 100%). NMR dH (d 6 -DMSO) 12,37 (1H, s), 7,43-7,23 (5H, m), 6,61 (1H, bs), 4,81 (1H, t), 4,34 (2H, s), 3,55 (2H, bs), 1,32 (6H, s). P r z y k l a d 2 (R)-7-[[1-(Hydroksymetylo)propylo]amino]-5-[(fenylometylo)tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-2(3H)-on (a) (R)-2-[[2-amino-5-[(fenylometylo)tio]tiazolo[4,5-d]-pirymidyn-7-ylo]amino]-1-butanol Do mieszaniny produktu z przyk ladu 1 etapu c) (2,5 g) i (R)-(-)-2-amino-1-butanolu (5 g) w roz- puszczalniku N-metylopirolidynonie (10 ml) dodano N,N-diizopropyloetyloaminy (5 ml) i ca lo sc ogrze- wano w temperaturze 100°C przez 10 godzin. Mieszanin e wlano do wody, produkt ods aczono i otrzy- mano zwi azek jak w podtytule (2,5 g) MS (APCI) 362 (M+H + , 100%). (b) (R)-2-[[2-bromo-5-[(fenylometylo)tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]-1-butanol Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 1 etapu e), z u zyciem produktu z przyk ladu 2, etapu a). MS (APCI) 427 (M+H + , 100%). (c) (R)-2-[[2-metoksy-5-[(fenylometylo)tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]-1-butanol Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 1 etapu f), z u zyciem produktu z przyk ladu 2, etapu b). MS (APCI) 377 (M+H + , 100%). (d) (R)-7-[[1-(hydroksymetylo)propylo]amino]-5-[(fenylometylo)tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-2(3H)-on Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 1 etapu e), z u zyciem produktu z przyk ladu 2, etapu c). t.t 217-8°C MS (APCI) 363 (M+H + , 100%). NMR dH (d 6 -DMSO) 12,37 (1H, s), 7,43-7,21 (6H, m), 4,68 (1H, t), 4,32 (2H, q), 4,09 (1H, bs), 3,47-3,32 (2H, m), 1,69-1,59 (1H, m), 1,48-1,41 (1H, m), 0,82 (3H, t). P r z y k l a d 3 (R)-7-[(2-hydroksy-1-metyloetylo)amino]-5-[(fenylometylo)tio]tiazolo[4,5-d] pirymidyn-2(3H)-on (a) (R)-2-[[2-amino-5-[(fenylometylo)tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]-1-propanol Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 2 etapu a) z u zyciem produktu z przyk ladu 1, etapu c) i (R)-(-)-amino-1-propanolu. MS (APCI) 412 (M+H + , 100%). (b) (R)-2-[[2-bromo-5-[(fenylometylo)tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]-1-propanol Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 1 etapu e), z u zyciem produktu z przyk ladu 3, etapu a). MS (APCI) 348 (M+H + , 100%). (c) (R)-2-[[2-metoksy-5-[(fenylometylo)tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]-1-propanol Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 1 etapu f), z u zyciem produktu z przyk ladu 3, etapu b). MS (APCI) 363 (M+H + , 100%). (d) (R)-7-[(2-hydroksy-1-metyloetylo)amino]-5-[(fenylometylo)tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-2(3H)-on Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 1 etapu g), z u zyciem produktu z przyk ladu 3, etapu c).PL 203 572 B1 13 MS (APCI) 349 (M+H + , 100%). NMR dH (d 6 -DMSO) 12,38 (1H, s), 7,44-7,20 (6H, m), 4,72 (1H, t), 4,32 (2H, m), 4,23 (1H, m), 3,49-3,29 (2H, m), 1,11 (3H, d). P r z y k l a d 4 5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]-7-[(2-hydroksy-1,1-dimetyloetylo)amino]tiazolo[4,5-d]piry- midyn-2(3H)-on (a) 2-amino-5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]tiazolo-[4,5-d]pirymidyn-7(4H)-on W trakcie mieszania do roztworu 2-amino-5,6-dihydro-5-tioksotiazolo[4,5-d]pirymidyn-7(4H)-onu (0,09 g) [patrz Indian J. Chem., Sect. B (1989), 28B(11), 964-5] i bromku 2,3-difluorobenzylu w di- metylosulfotlenku (2 ml) dodano roztworu t-butanolanu potasu (0,45 ml 1M roztworu w tetra- hydrofuranie). Po mieszaniu przez 3 dni mieszanin e reakcyjn a wlano do wody, przes aczono i otrzy- mano zwi azek jak w podtytule. MS (APCI) 327 (M+H + , 100%). (b) 7-chloro-5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyno-2-amina Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 1 etapu c), z u zyciem produktu z przyk ladu 4 etapu a). MS (APCI) 345 (M+H + , 100%). (c) 2-[[2-amino-5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]-2-metylo-1- -propanol Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 2 etapu a), z u zyciem produktu z przyk ladu 4 etapu b) i 2-amino-2-metylopropanolu. MS (APCI) 398 (M+H + , 100%). (d) 2-[[2-bromo-5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]-2-metylo-1- -propanol Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 1 etapu e), z u zyciem produktu z przyk ladu 4 etapu c). MS (APCI) 462 (M+H + , 100%). (e) 2-[[5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]-2-metoksytiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]-2-metylo- -1-propanol Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 1 etapu f), z u zyciem produktu z przyk ladu 4 etapu d). MS (APCI) 413 (M+H + , 100%). (f) 5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]-7-[(2-hydroksy-1,1-dimetyloetylo)amino]tiazolo[4,5-d]piry- midyn-2(3H)-on Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 1 etapu f), z u zyciem produktu z przyk ladu 4 etapu e). MS (APCI) 399 (M+H + , 100%). NMR dH (d 6 -DMSO) 12,41 (1H, s), 7,41-7,30 (2H, m), 7,21-7,13 (1H, m), 6,64 (1H, bs), 4,79 (1H, t), 4,41 (2H, s), 3,53 (2H, d), 1,29 (6H, s). P r z y k l a d 5 5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]-7-[[(1R)-2-hydroksy-1-metyloetylo]amino]tiazolo[4,5-d]pirymidyn- -2(3H)-on (a) (2R)-2-[[2-amino-5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]-1- -propanol Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 2 etapu a), z u zyciem produktu z przyk ladu 4 etapu b) i (R)-(-)-2-amino-1-propanolu MS (APCI) 384 (M+H + , 100%). (b) (2R)-2-[[2-bromo-5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]-1- -propanol Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 1 etapu e), z u zyciem produktu z przyk ladu 5, etapu a). MS (APCI) 448 (M+H + , 100%). (c) (2R)-2-[[5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]-2-metoksytiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]-1- -propanol Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 1 etapu f), z u zyciem produktu z przyk ladu 5, etapu b).PL 203 572 B1 14 MS (APCI) 398 (M+H + , 100%). (d) 5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]-7-[[(1R)-2-hydroksy-1-metyloetylo]amino]tiazolo[4,5-d]piry- midyn-2(3H)-on Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 1 etapu g), z u zyciem produktu z przyk ladu 5, etapu c). MS (APCI) 385 (M+H + , 100%). NMR dH (d 6 -DMSO) 12,41 (1H, s), 7,41-7,11 (4H, m), 4,72 (1H, t), 4,39 (2H, m), 4,21 (1H, m), 3,47-3,29 (2H, m), 1,09 (3H, d). P r z y k l a d 6 5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]-7-[[2-(hydroksyetoksy)etylo]amino]tiazolo[4,5-d]pirymidyn- -2(3H)-on (a) 2-[2-[[2-amino-5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]etoksy]- etanol Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 2 etapu a) z u zyciem produktu z przyk ladu 4 etapu b) i 2-(2-aminoetoksy)etanolu. MS (APCI) 414 (M+H + , 100%). (b) 2-[2-[[2-bromo-5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]etoksy]- etanol Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 1 etapu e), z u zyciem produktu z przyk ladu 6, etapu a). MS (APCI) 478 (M+H + , 100%). (c) 2-[2-[[5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]-2-metoksytiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]eto- ksy]etanol Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 1 etapu f), z u zyciem produktu z przyk ladu 6, etapu b). MS (APCI) 429 (M+H + , 100%). (d) 5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]-7-[[2-(2-hydroksyetoksy)etylo]amino]tiazolo[4,5-d]pirymi- dyn-2(3H)-on Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 1 etapu g), z u zyciem produktu z przyk ladu 6, etapu c). t.t 213-4°C MS (APCI) 415 (M+H + , 100%). NMR dH (d 6 -DMSO) 12,41 (1H, s), 7,39-7,11 (4H, m), 4,57 (1H, t), 4,39 (2H, s), 3,57-3,38 (8H, m). P r z y k l a d 7 5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]-7-[[2-hydroksy-1-(hydroksymetylo)etylo]amino]tiazolo[4,5-d]- pirymidyn-2(3H)-on (a) 2-[[2-amino-5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]-1,3-pro- panodiol Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 2 etapu a) z u zyciem produktu z przyk ladu 4 etapu b) i 2-amino-1,3-propanodiolu. MS (APCI) 400 (M+H + , 100%). (b) 2-[[2-bromo-5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]-1,3- -propanodiol Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 1 etapu e), z u zyciem produktu z przyk ladu 7, etapu a). MS (APCI) 464 (M+H + , 100%). (c) 2-[[5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]-2-metoksytiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]-1,3- -propanodiol Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 1 etapu f), z u zyciem produktu z przyk ladu 7, etapu b). MS (APCI) 415 (M+H + , 100%). (d) 5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]-7-[[2-hydroksy-1-(hydroksymetylo)etylo]amino]tiazolo[4,5-d]- pirymidyn-2(3H)-on Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 1 etapu g), z u zyciem produktu z przyk ladu 7, etapu c).PL 203 572 B1 15 t.t 178-9°C MS (APCI) 401 (M+H + , 100%). NMR dH (d 6 -DMSO) 12,41 (1H, s), 7,42-7,11 (4H, m), 4,66 (2H, s), 4,40 (2H, s), 4,19 (1H, m), 3,49 (4H, m). P r z y k l a d 8 7-[(2-aminoetylo)amino]-5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-2(3H)-on, (a) [2-[[2-amino-5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]etylo]karba- minian-1,1-dimetyloetylu Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 2 etapu a), z u zyciem produktu z przyk ladu 4 etapu b) i (2-aminoetylo)karbaminianu 1,1-dimetyloetylu. MS (APCI) 469 (M+H + , 100%). (b) [2-[[2-bromo-5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo)tio]tiazolo-[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]etylo]- karbaminian-1,1-dimetyloetylu Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 1 etapu e), z u zyciem produktu z przyk ladu 8 etapu a). MS (APCI) 533 (M+H + , 100%). (c) [2-[[5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]-2-metoksytiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]etylo]- karbaminian-1,1-dimetyloetylu Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 1 etapu f), z u zyciem produktu z przyk ladu 8 etapu b). MS (APCI) 489 (M+H + , 100%). (d) 7-[(2-aminoetylo)amino]-5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-2(3H)-on Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 1 etapu g), z u zyciem produktu z przyk ladu 8 etapu c). t.t 215-6°C MS (APCI) 370 (M+H + , 100%). NMR dH (d 6 -DMSO) 12,00 (1H, s), 7,45-7,11 (3H, m), 6,35 (1H, bs), 4,37 (2H, s), 3,48 (2H, m), 2,92 (2H, t). P r z y k l a d 9 5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]-7-[(2-hydroksyetylo)amino]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-2(3H)-on (a) 2-[[2-amino-5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]etanol Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 2 etapu a), z u zyciem produktu z przyk ladu 4 etapu b) i etanoloaminy MS (APCI) 370 (M+H + , 100%). (b) 2-[[2-bromo-5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]tiazolo [4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]etanol Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 1 etapu e), z u zyciem produktu z przyk ladu 9 etapu a). MS (APCI) 434 (M+H + , 100%). c) 2-[[5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]-2-metoksytiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]etanol Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 1 etapu f), z u zyciem produktu z przyk ladu 9 etapu b). MS (APCI) 385 (M+H + , 100%). (d) 5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]-7-[(2-hydroksyetylo)amino]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-2(3H)-on Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 1 etapu g), z u zyciem produktu z przyk ladu 9 etapu c). t.t 217-9°C MS (APCI) 371 (M+H + , 100%). NMR dH (d 6 -DMSO) 12,43 (1H, s), 7,67-7,64 (1H, m), 7,39-7,33 (2H, m), 7,16-7,12 (1H, m), 4,73 (1H, t), 4,40 (2H, s), 3,52-3,42 (4H, m). P r z y k l a d 10 N-[2-[[5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]-2,3-dihydro-2-oksotiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]- etylo]metanosulfonoamid (a) N-[2-[[2-amino-5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]etylo]- metanosulfonoamid Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 2 etapu a), z u zyciem produktu z przyk ladu 4 etapu b) i N-[2-aminoetylo]metanosulfonoamidu.PL 203 572 B1 16 MS (APCI) 448 (M+H + , 100%). (b) N-[2-[[2-bromo-5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]etylo]- metanosulfonoamid Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 1 etapu e), z u zyciem produktu z przyk ladu 10 etapu a). MS (APCI) 511 (M+H + , 100%). (c) N-[2-[[5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]-2-metoksytiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]etylo]- metanosulfonoamid Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 1 etapu f), z u zyciem produktu z przyk ladu 10 etapu b). MS (APCI) 462 (M+H + , 100%). (d) N-[2-[[5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]-2,3-dihydro-2-oksotiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]- etylo]metanosulfonoamid Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 1 etapu g), z u zyciem produktu z przyk ladu 10 etapu c). t.t 225-6°C MS (APCI) 448 (M+H + , 100%). NMR dH (d 6 -DMSO) 12,49 (1H, s), 7,72 (1H, t), 7,41-7,13 (4H, m), 4,43 (2H, bs), 3,49 (2H, m), 3,13 (2H, m), 2,89 (3H, s). P r z y k l a d 11 (+/-)-5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]-7-[[2-(2-hydroksyetoksy)-1-metyloetylo]amino]tiazolo[4,5- -d]pirymidyn-2(3H)-on (a) (+/-)-2-[2-[[2-amino-5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]- propoksy]etanol Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 2 etapu a), z u zyciem produktu z przyk ladu 4 etapu b) i (+/-)-2-[2-aminopropoksy]etanolu. MS (APCI) 428 (M+H + , 100%). (b) (+/-)-2-[2-[[2-bromo-5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]- propoksy]etanol Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 1 etapu e), z u zyciem produktu z przyk ladu 11 etapu a). MS (APCI) 492 (M+H + , 100%). (c) (+/-)-2-|2-[[5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]-2-metoksytiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]- propoksy]etanol Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 1 etapu f), z u zyciem produktu z przyk ladu 11 etapu b). MS (APCI) 443 (M+H + , 100%). (d) (+/-)-5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]-7-[[2-(2-hydroksyetoksy)-1-metyloetylo]amino]tiazolo- [4,5-d]pirymidyn-2(3H)-on Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 1 etapu g), z u zyciem produktu z przyk ladu 11 etapu c). t.t 221-2°C MS (APCI) 429 (M+H + , 100). NMR dH (d 6 -DMSO) 12,43 (1H, s), 7,47-7,30 (3H, m), 7,17-7,13 (1H, m), 4,56 (1H, t), 4,40 (2H, s), 4,35 (1H,m), 3,49-3,32 (6H, m), 1,10 (3H, d). P r z y k l a d 12 Trifluorooctan 7-[[(1R)-2-amino-1-metyloetylo]amino]-5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]tiazolo- [4,5-d]pirymidyn-2(3H)-onu (a) (2R)-2-[[2-amino-5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]- propanoamid Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 2 etapu a), z u zyciem produktu z przyk ladu 4 etapu b) i chlorowodorku (2R)-2-aminopropanoamidu. MS (APCI) 397 (M+H + , 100%). (b) N 7 -[(1R)-2-amino-1-metyloetylo]-5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyno- -2,7-diaminaPL 203 572 B1 17 Do roztworu produktu z przyk ladu 12 etapu a) (0,3 g) w bezwodnym tetrahydrofuranie (10 ml) do- dano 2M roztworu borowodoru w THF (10 ml) i ca lo sc ogrzewano do temperatury wrzenia w warunkach powrotu skroplin przez 6 godzin. Nast epnie zadano gor acym metanolem (30 ml), odparowano do su- cha i pozosta losc roztworzono w metanolu (30 ml) zawieraj acym kilka kropel st ezonego kwasu chlo- rowodorowego. Nast epnie mieszanin e ogrzewano w temperaturze wrzenia w warunkach powrotu skroplin przez nast epn a 1 godzin e, odparowano do sucha i otrzymano blado zó lt a substancj e sta la. MS (APCI) 383 (M+H + , 100%). (c) [(2R)-2-[[2-amino-5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]- propylo]karbaminian-1,1-dimetyloetylu Do roztworu produktu z przyk ladu 12 etapu b) (1,6 g) w THF (50 ml) dodano diw eglanu di-tert- -butylu (0,91 g) i ca lo sc mieszano przez 2 dni. Po odparowaniu do sucha otrzymano 2,0 g. MS (APCI) 483 (M+H + , 100%). (d) [(2R)-2-[[2-bromo-5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d|pirymidyn-7-ylo]amino]- propylo]karbaminian-1,1-dimetyloetylu Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 1 etapu e), z u zyciem produktu z przyk ladu 12, etapu c). MS (APCI) 547 (M+H + , 100%). (e) [(2R)-2-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]-2-metoksytiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]- propylo]karbaminian-1,1-dimetyloetylu Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 1 etapu f), z u zyciem produktu z przyk ladu 12, etapu d). MS (APCI) 498 (M+H + , 100%). (f) Trifluorooctan 7-[[(1R)-2-amino-1-metyloetylo]amino]-5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]- tiazolo[4,5-d]pirymidyn-2(3H)-onu Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 1 etapu g), z u zyciem produktu z przyk ladu 12, etapu e) i oczyszczono sposobem z przyk ladu 15 etapu f). MS (APCI) 384 (M+H + , 100%). NMR dH (d 6 -DMSO) 12,55 (1H, s), 7,81 (3H, bs), 7,45-7,31 (4H, m), 7,18-7,13 (1H, m), 4,51 -4,34 (3H, m), 2,95 (2H, m), 1,14 (3H, d). P r z y k l a d 13 Trifluorooctan 5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]-7-[[(1R)-2-[(2-hydroksyetylo)amino]-1-metylo- etylo]amino]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-2(3H)-onu Do roztworu produktu z przyk ladu 12 etapu f) (100 mg) w bezwodnym THF (5 ml) dodano [[(1,1- -dimetyloetylo)dimetylosililo]oksy]acetaldehydu (49 mg), a nast epnie triacetoksyborowodorku sodu (61 mg) i ca losc mieszano przez 1 godzin e. Mieszanin e zakwaszono stezonym kwasem chlorowodo- rowym, mieszano w temperaturze pokojowej przez 1 godzin e, a nast epnie odparowano do sucha. Produkt oczyszczono (HPLC, Novapak® kolumna C18, 0,1% wodny roztwór TFA:acetonitrylu, z elucj a gradientow a od 75:25 do 5:95 przez 15 minut) i otrzymano zwi azek tytu lowy (0,021 g). MS (APCI) 428 (M+H + , 100%). NMR dH (d 6 -DMSO) 7,39-7,29 (2H, m), 7,17-12 (1H, m), 6,92 (1H, m), 4,91 (1H, s), 4,48-4,32 (3H, m), 3,54 (2H, m), 2,94-2,82 (4H, m), 1,12 (3H, m ). P r z y k l a d 14 5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]-7-[[(1R)-2-(dimetyloamino)-1-metyloetylo]amino]tiazolo[4,5-d]- pirymidyn-2(3H)-on Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 13, z u zyciem produktu z przyk ladu 12, etapu f) i 40% wodnego roztworu formaldehydu. MS (APCI) 412 (M+H + , 100%). NMR dH (d 6 -DMSO) 12,00 (1H, s), 7,39-7,31 (2H, m), 7,18-7,09 (2H, m), 4,39 (2H, q), 4,30 (1H, m), 3,31 (6H, bs), 2,43-2,38 (1H, m), 2,24-20 (1H, m), 1,07 (3H, d). P r z y k l a d 15 Trifluorooctan 5-[[[4-(2-aminoetoksy)-3-chlorofenylo]metylo]tio]-7-[[(1R)-2-hydroksy-1-metylo- etylo]amino]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-2(3H)-onu (a) 2-(2-chloro-4-formylofenoksy)acetamid Do roztworu 3-chloro-4-hydroksybenzaldehydu (10 g) w metanolu (100 ml) dodano 1,0M roztworu t-butanolanu potasu (64 ml). Do mieszaniny dodano 2-chloroacetamidu (5,96 g) i ca lo sc ogrzewano w temperaturze wrzenia w warunkach powrotu skroplin przez noc. Mieszanin e odparowa-PL 203 572 B1 18 no i pozosta losc roztarto w wodzie (500 ml) i z zebranej substancji sta lej otrzymano zwi azek jak w podtytule (4,4 g). NMR dH (CDCI 3 ) 9,89 (1H, s), 7,97 (1H, d), 7,82 (1H, dd), 7,04 (1H, d), 6,73 (1H, s), 5,87 (1H, s), 4,63 (2H, s). (b) 2-[2-chloro-4-(hydroksymetylo)fenoksy]acetamid Do roztworu produktu z przyk ladu 15 etapu a) (4,4 g) w etanolu (500 ml) dodano borowodorku sodu (1,56 g) i ca lo sc mieszano przez 1 godzin e. Mieszanin e zakwaszono lodowatym kwasem octo- wym, odparowano do sucha, wyekstrahowano octanem etylu, przemyto wod a i otrzymano zwi azek jak w podtytule (4,3 g) NMR dH (CDCI 3 ) 7,44 (1H, d), 7,29 (1H, d), 6,90 (1H, d), 6,81 (1H, s), 5,85 (1H, s), 4,63 (2H, s), 4,48 (2H, s), 1,96 (1H, s). (c) 2-[4-[(Acetylotio)metylo]-2-chlorofenoksy]acetamid W trakcie mieszania do roztworu trifenylofosfiny (7,31 g) w THF w temperaturze 0°C dodano azokarboksylanu diizopropylu (5,5 ml). Po zako nczeniu dodawania wytr acil si e bezbarwny osad. Do tej zawiesiny dodano mieszanin e produktu z przyk ladu 15 etapu b) (3,0 g) i kwasu tiolooctowego (2,00 ml) w THF (30 ml) w temperaturze 0°C. Mieszanin e pozostawiono przez noc do uzyskania tem- peratury pokojowej, a nast epnie odparowano do sucha, pozosta losc oczyszczono (SiO 2 , 10% octanu etylu:90% eteru jako eluenta) i otrzymano zwi azek jak w podtytule (3,5 g). NMR dH (CDCI 3 ) 7,35 (1H, d), 7,17 (1H, dd), 6,84 (1H, d), 6,76 (1H, s), 5,81 (1H, s), 4,54 (2H, s), 4,04 (2H, s), 2,35 (3H, s). (d) 2-[2-chloro-4-(merkaptometylo)fenoksy]acetamid Do roztworu produktu z przyk ladu 15 etapu c) (1,0 g) w metanolu (50 ml) dodano pastylki wodo- rotlenku sodu (0,15 g) i ca losc mieszano przez 2 dni. Mieszanin e rozcie nczono wod a i po przes acze- niu otrzymano zwi azek jak w podtytule (0,7 g). NMR dH (d 6 -DMSO) 7,44 (1H, s), 7,38 (1H, d), 7,21 (1H, dd), 6,98 (1H, d), 4,55 (2H, s), 3,76 (2H, s). (e) 7-[[(1R)-2-hydroksy-1-metyloetylo]amino]-5-[(fenylometylo)sulfonylo]tiazolo[4,5-d]pirymidyn- -2(3H)-on Do roztworu produktu z przyk ladu 3 etapu d) (240 mg) w acetonitrylu (100 ml) i wody (100 ml) dodano oksonu (2,4 g) i mieszanin e ogrzewano w temperaturze 40°C przez 2 godziny. Acetonitryl usuni eto w wyparce obrotowej i po przes aczeniu otrzymano zwi azek jak w podtytule (235 mg). MS (APCI) 381 (M+H + , 100%). (f) Trifluorooctan 5-[[[4-(2-aminoetoksy)-3-chlorofenylo]metylo]tio]-7-[[(1R)-2-hydroksy-1-metylo- etylo]amino]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-2(3H)-onu Mieszanin e produktu z przyk ladu 15 etapu e) (100 mg), produktu z przyk ladu 15 etapu d) (329 mg) i borowodorku sodu (50 mg) w roztworze DMSO (1 ml) i etanolu (10 ml) ogrzewano w temperaturze 55-60°C przez 12 godzin. Mieszanin e reakcyjn a odparowano do sucha, pozosta lo sc oczyszczono (HPLC, Novapak® kolumna C18, 0,1% wodny roztwór TFA:acetonitryl, elucja gradiento- wa od 95:5 do 5:95 przez 15 minut) i otrzymano zwi azek tytu lowy (0,023 g). MS (APCI) 442 (M+H + , 100%). NMR dH (D 2 O) 7,46 (1H, bs), 7,32 (1H, d), 7,00 (1H, d), 4,36-4,20 (5H, m), 3,61 (2H, m), 3,46 (2H, m), 1,20 (3H, d). P r z y k l a d 16 5-[[3-chloro-4-metoksyfenylo)metylo]tio]-7-[[(1R)-2-hydroksy-1-metyloetylo]amino]tiazolo[4,5-d]- pirymidyn-2(3H)-on a) 3-chloro-4-metoksybenzenometanotiol Do roztworu bromku 3-chloro-4-metoksybenzylu (4,0 g, 0,02 mola) w etanolu (200 ml) dodano tiomocznika (3,04 g, 0,04 mola) i ca lo sc ogrzewano w temperaturze wrzenia w warunkach powrotu skroplin przez 16 godzin. Mieszanin e reakcyjn a zat ezono pod pró zni a i pozosta lo sc rozpuszczono nast epnie w wodnym roztworze wodorotlenku sodu (30 g, 0,75 mola w 300 ml wody), a potem ogrze- wano w temperaturze 80°C przez 1 godzin e. Mieszanin e reakcyjn a och lodzono w k apieli lodowej i zakwaszono z u zyciem st ezonego kwasu chlorowodorowego. Produkt wyodr ebniono drog a trzykrot- nej ekstrakcji eterem dietylowym. Po laczone fazy organiczne wysuszono nad bezwodnym siarczanem magnezu, przes aczono, zat ezono pod pró zni a i otrzymano zwiazek jak w podtytule w postaci bez- barwnego oleju z 83% wydajno sci a (3,0 g). NMR dH (CDCI 3 ) 7,34 (1H, m), 7,18 (1H, dd,), 6,86 (1H, d), 3,89 (3H, s), 3,68 (2H, d), 1,76 (1H, t).PL 203 572 B1 19 (b) 5-[[3-chloro-4-metoksyfenylo)metylo]tio]-7-[[(1R)-2-hydroksy-1-metyloetylo]amino]tiazolo[4,5-d]- pirymidyn-2(3H)-on 3-chloro-4-metoksybenzenometanotiol (0,128 g, 0,68 mmola) wytworzony w przyk ladzie 16 eta- pie a), produkt z przyk ladu 15 etapu e) (0,130 g, 0,349 mmola) i borowodorek sodu, (0,026 g, 0,68 mmola) w mieszaninie z dimetylosulfotlenkiem (6 ml) i etanolem (10 ml) ogrzewano w temperatu- rze w 50°C w warunkach powrotu skroplin. Po 3 godzinach i ponownie po 5 godzinach reakcji dodano dodatkowe porcje borowodorku sodu (0,05 g, 1,3 mmola) w etanolu (2 ml) do mieszaniny reakcyjnej i nadal ogrzewano do temperatury wrzenia w warunkach powrotu skroplin w 50°C, a z do ca lkowitej przemiany drog a hplc ms ( lacznie 15 godzin). Mieszanin e reakcyjn a zoboj etniono przez dodanie st e- zonego kwasu chlorowodorowego i etanol usuni eto pod pró zni a. Pozosta lo sc oczyszczono drog a chromatografii z odwróconymi fazami w kolumnie Symmetry C8, z elucj a gradientow a od 25% do 95% acetonitrylu w 0,1M wodnym roztworze octanu amonu przez 10 minut. Produkt poddano liofilizacji z metanolu/wody/acetonitrylu i otrzymano zwi azek jak w podtytule z 33% wydajno scia jako bia ly liofili- zat (0,046 g). MS (APCI) 413 (M+H + , 100%). NMR dH (d 6 -DMSO) 12,39 (1H, bs), 7,47 (1H, m), 7,36 (1H, m), 7,25 (1H, d), 7,06 (1H, d), 4,72 (1H, t), 4,32-4,21 (3H, m), 3,82 (3H, s), 3,49-3,30 (2H, m), 1,11 (3H, d). P r z y k l a d 17 5-[[3-chloro-2-fluorofenylo)metylo]tio]-7-[[(1R)-2-hydroksy-1-metyloetylo]amino]tiazolo[4,5-d]- pirymidyn-2(3H)-on (a) 3-chloro-2-fluorobenzenometanotiol Zwi azek jak w podtytule wytworzono jako bezbarwny olej z 65% wydajno scia (2,51 g) sposo- bem opisanym w przyk ladzie 16 etap a) z bromku 3-chloro-2-fluorobenzylu (5,0 g, 0,022 mola). NMR dH (CDCI 3 ) 7,32-7,21 (2H, m), 7,04 (1H, t), 3,75 (2H, d), 1,90 (1H, t). (b) 5-[[3-chloro-2-fluorofenylo)metylo]tio]-7-[[(1R)-2-hydroksy-1-metyloetylo]amino]tiazolo[4,5-d]- pirymidyn-2(3H)-on Zwi azek tytu lowy wytworzono sposobem opisanym w przyk ladzie 16 etap b) z 3-chloro-2- -fluorobenzenometanotiolu wytworzonego w przyk ladzie 17 etap a) i produktu z przyk ladu 15 etapu e). Produkt otrzymano z 12% wydajno scia jako bia ly liofilizat (0,038 g). t.t 234-5°C MS (APCI) 401 (M+H + , 100%). NMR dH (d 6 -DMSO) 12,4 (1H, bs), 7,55 (1H, m), 7,48 (1H, t), 7,26 (1H, d), 7,17 (1H, t), 4,72 (1H, bs), 4,38 (2H, m), 4,19 (1H, m), 3,3 (2H, m), 1,08 (3H, d). P r z y k l a d 18 5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]-7-[[(3R,4R)-4-hydroksypirolidyn-3-ylo]amino]tiazolo[4,5-d]- pirymidyn-2(3H)-on (a) 3-[[2-amino-5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]-4-hydroksy- -(3R,4R)-1-pirolidynokarboksylan 1,1-dimetyloetylu (3R,4R)-3-amino-4-hydroksy-1-pirolidynokarboksylan 1,1-dimetyloetylu (0,73 g), diizopropylo- etyloamin e (1,0 ml) i produkt z przyk ladu 4 etapu b) mieszano w NMP (10 ml) w temperaturze 100°C przez 28 godzin. Och lodzon a mieszanin e wlano do wody, wytr acon a substancj e stala zebrano, prze- myto wod a i wysuszono powietrzem. Surowy produkt oczyszczono (SiO 2 , octan etylu jako eluent) i otrzymano zwi azek jak w podtytule jako bezbarwn a substancj e sta la (0,58 g). t.t. 182-5°C MS (APCI) 511 (M+H, 100%). (b) 3-[[2-bromo-5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]-4-hydroksy- -(3R,4R)-1-pirolidynokarboksylan 1,1-dimetyloetylu Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 1 etapu e), z u zyciem produktu z przyk ladu 18 etapu a). MS (APCI) 572 (M-H + , 100%). (c) 3-[[5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]-2-metoksytiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]-4-hydroksy- -(3R,4R)-1-pirolidynokarboksylan 1,1-dimetyloetylu Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 1 etapu f), z u zyciem produktu z przyk ladu 18 etapu b). MS (APCI) 526 (M+H + , 100%).PL 203 572 B1 20 (d) 5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]-7-[[(3R,4R)-4-hydroksypirolidyn-3-ylo]amino]tiazolo[4,5-d]- pirymidyn-2(3H)-on Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 1 etapu g), z u zyciem produktu z przyk ladu 18 etapu c). t.t. 270°C (rozpad) MS (APCI) 412 (M+H + , 100%). NMR dH (d 6 -DMSO) 7,32 (2H, m), 7,14 (1H, m), 6,46 (1H, d), 5,57 (1H, s), 4,39 (2H, s), 4,30 (2H, m), 3,39 (2H, m), 3,12 (1H, dd), 2,98 (1H, d). P r z y k l a d 19 Dichlorowodorek 5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]-7-[(3R)pirolidyn-3-yloamino]tiazolo[4,5-d]- pirymidyn-2(3H)-onu (a) 3-[[2-amino-5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]-(3R)-1- -pirolidynokarboksylan 1,1-dimetyloetylu Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 18 etapu a), z u zyciem (R)-3-amino-1- -pirolidynokarboksylanu 1,1-dimetyloetylu i produktu z przykladu 4 etapu b). MS (APCI) 495 (M+H + , 100%). (b) 3-[[2-bromo-5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]-(3R)-1- -pirolidynokarboksylan 1,1-dimetyloetylu Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 1 etapu e) z u zyciem produktu z przyk ladu 19 etapu a). MS (APCI) 559 (M+H + , 100%). (c) 3-[[5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]-2-metoksytiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]-(3R)-1- -pirolidynokarboksylan 1,1-dimetyloetylu Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 1 etapu f) z u zyciem produktu z przyk ladu 19 etapu b). MS (APCI) 510 (M+H + , 100%). (d) Dichlorowodorek 5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]-7-[(3R)-pirolidyn-3-yloamino]tiazolo[4,5-d]- pirymidyn-2(3H)-onu Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 1 etapu g), z u zyciem produktu z przyk ladu 19 etapu c), a nast epnie przekszta lcono w sól. t.t. 178-181°C MS (APCI) 396 (M+H + , 100%). NMR dH (d 6 -DMSO) 12,75 (1H, s), 9,19 (2H, bd), 7,91 (1H, d), 7,37 (2H, m), 7,17 (1H, m), 4,66 (1H, m), 4,43 (2H, dd), 3,10-3,50 (4H, m), 2,17 (1H, m), 1,96 (1H, m). P r z y k l a d 20 7-[[(1R)-2-hydroksy-1-metyloetylo]amino]-5-[[(2-metylo-4-tiazolilo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]- pirymidyn-2(3H)-on (a) 6-amino-2-[[(2-metylo-4-tiazolilo)metylo]tio]-4(3H)-pirymidynon Hydrat 4-amino-6-hydroksy-2-merkaptopirymidyny (16,1 g) i sproszkowany wodorotlenek sodu (8,0 g) mieszano w bezwodnym DMF (100 ml) przez 20 minut. Dodano porcjami momohydratu chlo- rowodorku 4-chlorometylo-2-metylotiazolu (20 g) i powsta la suspensj e mieszano przez 18 godzin. Mieszanin e wlano do wody, substancj e sta la zebrano, przemyto wod a, wysuszono i otrzymano zwi a- zek jak w podtytule (24,3 g) MS (APCI) 255 (M+H + , 100%). (b) 2-amino-5-[[(2-metylo-4-tiazolilo)metylo]tio]tiazolo [4,5-d]pirymidyn-7(6H)-on Produkt z przyk ladu 20 etapu a) (24,3 g) i tiocyjanian potasu (37,1 g) mieszano w bezwodnym DMF (400 ml) z pirydyn a (13,1 ml) w temperaturze 0°C. Po 1 godzinie dodano bromu (4,5 ml), mie- szano przez 2 godziny i mieszanin e wlano do wody. Powsta ly roztwór zat ezono do ma lej obj eto sci, a nast epnie dodano wody. Powsta la substancj e sta la zebrano, roztworzono w 2M roztworze kwasu chlorowodorowego i wytr acono przez dodanie nasyconego roztworu wodorow eglanu sodu. Substancje stala zebrano, przemyto wod a, wysuszono i otrzymano zwi azek jak w podtytule (8,7 g). MS (APCI) 312 (M+H + , 100%). (c) 7-chloro-5-[[(2-metylo-4-tiazolilo)metylo]tio]tiazolo [4,5-d]pirymidyno-2-amina Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 1 etapu c), z u zyciem produktu z przyk ladu 20 etapu b) (4,3 g). MS (APCI) 330/332 (M+H + ), 330 (100%).PL 203 572 B1 21 (d) (2R)-2-[[2-amino-5-[[(2-metylo-4-tiazolilo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]-1- -propanol Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 18 etapu a), z u zyciem produktu z przyk ladu 20 etapu c) t.t. 220-2°C MS (APCI) 369 (M+H, 100%). (e) (1R)-2-[[2-bromo-5-[[(2-metylo-4-tiazolilo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]-1- -propanol Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 1 etapu e) z u zyciem produktu z przyk ladu 20 etapu d) MS (APCI) 433 (M+H + , 100%). (f) (2R)-2-[[2-metoksy-5-[[(2-metylo-4-tiazolilo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]-1- -propanol Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 1 etapu f), z u zyciem produktu z przyk ladu 20 etapu e) MS (APCI) 384 (M+H + , 100%). (g) 7-[[(1R)-2-hydroksy-1-metyloetylo]amino]-5-[[(2-metylo-4-tiazolilo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]- pirymidyn-2(3H)-on Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 1 etapu g), z u zyciem produktu z przyk ladu 20 etapu f). t.t. 208-9°C MS (APCI) 370 (M+H + , 100%). NMR dH (d 6 -DMSO) 12,37 (1H, s), 7,35 (1H, s), 7,32 (1H, d), 4,73 (1H, t), 4,36 (2H, s), 4,21 (1H, m), 3,38 (2H, m), 2,62 (3H, s), 1,10 (3H, d). P r z y k l a d 21 7-[[2-hydroksy-1-(hydroksymetylo)etylo]amino]-5-[[(2-metylo-4-tiazolilo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]- pirymidyn-2(3H)-on (a) 2-[[2-amino-5-[[(2-metylo-4-tiazolilo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]-1,3- -propanodiol Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 18 etapu a), z u zyciem produktu z przyk ladu 20 etapu c) i 2-amino-1,3-propanodiolu. t.t. 158-160°C MS (APCI) 385 (M+H, 100%). (b) 2-[[2-bromo-5-[[(2-metylo-4-tiazolilo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]-1,3- -propanodiol Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 1 etapu e), z u zyciem produktu z przyk ladu 21 etapu a). MS (APCI) 448 (M+H + , 100%). (c) 2-[[2-metoksy-5-[[(2-metylo-4-tiazolilo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]-1,3- -propanodiol Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 1 etapu f), z u zyciem produktu z przyk ladu 21 etapu b). MS (APCI) 400 (M+H + , 100%). (d) 7-[[2-hydroksy-1-(hydroksymetylo)etylo]amino]-5-[[(2-metylo-4-tiazolilo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]- pirymidyn-2(3H)-on Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 1 etapu g), z u zyciem produktu z przyk ladu 21 etapu c). t.t. 239-243°C MS (APCI) 386 (M+H + , 100%). NMR dH (d 6 -DMSO) 12,37 (1H, s), 7,38 (1H, s), 7,24 (1H, d), 4,67 (2H, t), 4,36 (2H, s), 4,20 (1H, m), 3,50 (4H, m), 2, 62 (3H, s). P r z y k l a d 22 7-[(2-hydroksy-1,1-dimetyloetylo)amino]-5-[[(2-metylo-4-tiazolilo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]piry- midyn-2(3H)-on (a) 2-[[2-amino-5-[[(2-metylo-4-tiazolilo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]-2-metylo- -1-propanolPL 203 572 B1 22 Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 18 etapu a), z u zyciem produktu z przyk ladu 20 etapu c) i 2-amino-2-metylopropanolu. t.t. 250-252°C MS (APCI) 383 (M+H, 100%). (b) 2-[[2-bromo-5-[[(2-metylo-4-tiazolilo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]-2-metylo- -1-propanol Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 1 etapu e), z u zyciem produktu z przyk ladu 22 etapu a). MS (APCI) 446 (M+H + , 100%). (c) 2-[[2-metoksy-5-[[(2-metylo-4-tiazolilo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]-2-metylo- -1-propanol Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 1 etapu f), z u zyciem produktu z przyk ladu 22 etapu b). MS (APCI) 398 (M+H + ,100%). (d) 7-[(2-hydroksy-1,1-dimetyloetylo)amino]-5-[[(2-metylo-4-tiazolilo)metylo]tio]tiazolo(4,5-d]piry- midyn-2(3H)-on Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 1 etapu g), z u zyciem produktu z przyk ladu 22 etapu c). t.t. 231-2°C MS (APCI) 384 (M+H + , 100%). NMR dH (d 6 -DMSO) 12,36 (1H, s), 7,37 (1H, s), 6,61 (1H, bs), 4,80 (1H, t), 4,37 (2H, s), 3,55 (2H, d), 2,62 (3H, s), 1, 31 (6H, s). P r z y k l a d 23 7-[(2-hydroksy-1,1-dimetyloetylo)amino]-5-[[(2-metylofenylo)metylo)tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn- -2(3H)-on (a) 7-[(2-hydroksy-1,1-dimetyloetylo)amino]-5-[(fenylometylo)sulfonylo]tiazolo[4,5-d]pirymidyn- -2(3H)-on W trakcie mieszania roztwór produktu z przyk ladu 1 etapu g) (0,14 g) w lodowatym kwasie octowym (30 ml) poddano dzia laniu kwasu nadoctowego (36/40% w kwasie octowym, 2 ml), mieszano przez 2 godziny, a nast epnie w temperaturze 50°C przez 1 godzin e. Roztwór zadano nadmiarem siarczku dimetylu, odparowano i otrzymano produkt w postaci zywicy. MS (APCI) 395 (M+H + , 100%). (b) 7-[(2-hydroksy-1,1-dimetyloetylo)amino]-5-[[(2-metylofenylo)metylo)tio]tiazolo[4,5-d]pirymi- dyn-2(3H)-on Produkt z przyk ladu 23 etapu (a) roztworzono w DMSO (1,73 ml), poddano dzia laniu butanola- nu potasu i podzielono na 3 porcje. Jedn a porcj e poddano dzia laniu 2-metylofenylometylomerkaptanu (0,053 g), mieszano w temperaturze 50°C przez 1-2 godziny, zoboj etniono lodowatym kwasem octo- wym, poddano preparatywnej chromatografii HPLC z odwróconymi fazami w kolumnie C8 (19 x 50 mm) z u zyciem od 10 do 60% acetonitrylu w 0,1% wodnym roztworze octanu amonu przez 6 minut przy 20 ml/minute i otrzymano zwi azek tytu lowy. MS (APCI) 377 (M+H + , 100%). NMR dH (d 6 -DMSO) 1,33 (s, 6H); 2,35 (s, 3H); 3,57 (d, 2H); 4,33 (s, 2H); 4,82 (t, 1H); 6,57 (szeroki s, 1H); 7,12-7,20 (mult., 3H); 7,41 (d, 1H); 12,37 (szeroki s, 1H). P r z y k l a d 24 5-[(2-Furanylometylo)tio]-7-[[(1R)-2-hydroksy-1-metyloetylo]amino]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-2(3H)-on (a) 7-[[(1R)-2-hydroksy-1-metyloetylo]amino]-5-[(fenylometylo)sulfonylo]tiazolo[4,5-d]pirymidyn- -2(3H)-on Ten zwi azek wytworzono z produktu z przyk ladu 3 etapu d), z u zyciem sposobu z przyk ladu 23, etapu (a). MS (ES) 381 (M+H + , 100%). (b) 5-[(2-Furanylometylo)tio]-7-[[(1R)-2-hydroksy-1-metyloetylo]amino]tiazolo[4,5-d]pirymidyn- -2(3H)-on Zwi azek tytu lowy wytworzono z produktu z przyk ladu 24 etapu a), z u zyciem sposobu z przy- k ladu 23 etapu (b), z u zyciem furfurylomerkaptanu. MS (APCI) 339 (M+H + , 100%).PL 203 572 B1 23 NMR dH (d 4 -metanol) 1,12 (d, 3H); 3,41-3,45 (mult., 1H); 3,49-3,53 (mult., 1H); 4,24-4,32 (mult., 3H); 6,18-6,22 (mult., 2H); 7,29 (szeroki s, 1H). P r z y k l a d 25 7-[[(1R)-2-amino-1-metyloetylo]amino]-5-[[(3-chloro-2-fluorofenylo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]piry- midyn-2(3H)-on (a) [(1R)-2-amino-1-metylo-2-oksoetylo]karbaminian 9H-fluoren-9-ylornetylu Roztwór chlorowodorku D-alaninoamidu (3 g) w 10% roztworze w eglanu sodu (50 ml) i dioksanu (50 ml) poddano dzia laniu chlorkiem FMOC (6,24 g) w dioksanie (40 ml) i ca losc mieszano przez noc. Mieszanin e rozcie nczono wod a (500 ml) i produkt ods aczono, wysuszono pod pró zni a i otrzymano 9,0 g zwi azku jak w podtytule. MS (ESI) BP 311 (+H). (b) [(1R)-2-amino-1-metyloetylo]karbaminian 9H-fluoren-9-ylometylu Do roztworu produktu z przyk ladu 25 etapu a) (6,9 g) w THF (100 ml) dodano kompleksu boro- wodór-sulfid metylowy (4,4 ml) i mieszanin e ogrzewano do temperatury wrzenia w warunkach powrotu skroplin przez 2 godziny. Mieszanin e ostro znie zadano metanolem (100 ml), odparowano do sucha, pozosta losc roztworzono w metanolu (100 ml) i zakwaszono do pH 1-2 z u zyciem st ezonego kwasu chlorowodorowego. Mieszanin e nast epnie ogrzewano w temperaturze wrzenia w warunkach powrotu skroplin przez 30 minut i odparowano do sucha. Pozosta lo sc roztarto w eterze i otrzymano substancj e stala ods aczono, a nast epnie rozpuszczono w wodzie, wolna zasad e wytr acono przez dodanie wod- nego roztworu wodorow eglanu sodu i otrzymano zwi azek jak w podtytule (3,1 g). MS (ESI) BP 297 (+H). (c) (2R)-[2-(9H-fluoren-9-ylometoksykarbonyloamino)propylo]karbaminian 1,1-dimetyloetylu W trakcie mieszania do roztworu produktu z przyk ladu 25 etapu b) (3,0 g) w THF (100 ml) do- dano wodorow eglanu di-tert-butylu (2,2 g) i ca lo sc mieszano w temperaturze pokojowej przez 30 mi- nut. Mieszanin e odparowano do sucha, surowy produkt oczyszczono (SiO 2 , dichlorometan jako elu- ent) i otrzymano zwi azek jak w podtytule (3,8 g). NMR dH (CDCI 3 ) 7,76 (2H, m), 7,42 (2H, m), 7,39-26 (4H, s), 5,01 (1H, s), 4,85 (1H, s), 4,38 (2H, d), 4,19 (1H, t), 3,77 (1H, m), 3,18 (2H, m), 1,27 (9H, s). (d) [(2R)-2-aminopropylo]karbaminian 1,1-dimetyloetylu Do roztworu produktu z przyk ladu 25 etapu c) (3,8 g) w THF (100 ml) dodano piperydyny (5 ml) i mieszanin e pozostawiono przez 1 godzin e w temperaturze pokojowej. Mieszanin e nast epnie odpa- rowano do sucha, pozosta lo sc oczyszczono (SiO 2 , 5% metanol:dichlorometan jako eluent) i otrzymano zwi azek jak w podtytule jako bezbarwny olej (1,7 g). NMR dH (CDCI 3 ) 4,95 (1H, s), 3,13 (1H, m), 2,99 (1H, m), 2,87 (1H, m), 1,38 (9H, s), 1,08 (3H, d). (e) [(2R)-2-[[2-amino-5-[(fenylometylo)tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]propylo]karba- minian 1,1-dimetyloetylu Produkt z przyk ladu 1 etapu c) (2,0 g) i produkt z przyk ladu 25 etapu d) (1,3 g) w rozpuszczalniku NMP (10 ml) zawieraj acego zasad e Hunigs'a (3 ml) ogrzewano w temperaturze 110°c przez 10 godzin. Mieszanin e odparowano do sucha, oczyszczono (SiO 2 , (1:1) dichlorometan:octan etylu (1:1) jako eluent) i otrzymano zwi azek jak w podtytule (1,9 g). MS (ESI) BP 447 (+H). (f) [(2R)-2-[[2-amino-5-[(fenylometylo)sulfonylo]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]propylo]- karbaminian 1,1-dimetyloetylu Do roztworu oksonu (7,0 g) w wodzie (400 ml) dodawano wodorow eglanu sodu do uzyskania warto sci pH 7,4. Do takiego roztworu dodano produkt z przyk ladu 25 etapu e) (1,9 g) w acetonitrylu (100 ml) i mieszanin e ogrzewano w temperaturze 40°C przez 2 godziny. Po zako nczeniu reakcji ace- tonitryl usuni eto w wyparce obrotowej i otrzymano zwi azek jak w podtytule (1,7 g). MS (ESI) BP 479 (+H). (g) 3-chloro-2-fluorobenzenometanotiol Mieszanin e bromku 3-chloro-2-fluorobenzylu (5,0 g) i tiomocznika (3,4 g) w etanolu (200 ml) ogrzewano w temperaturze wrzenia w warunkach powrotu skroplin przez 16 godzin. Mieszanin e odpa- rowano do sucha i do pozosta lo sci dodano roztworu wodorotlenku sodu (30 g) w wodzie (300 ml), a nast epnie mieszanin e ogrzewano w temperaturze wrzenia w warunkach powrotu skroplin przez 1 godzin e. Mieszanin e pozostawiono do och lodzenia si e do temperatury pokojowej, a nast epnie za- kwaszono j a st ezonym kwasem chlorowodorowym, wyekstrahowano eterem i otrzymano zwi azek jak w podtytule jako olej (2,51 g).PL 203 572 B1 24 NMR dH (CDCI 3 ) 7,32-21 (2H, m), 7,04 (1H, t), 3,75 (2H, d), 1, 90 (1H, t). (h) [(2R)-2-[[2-amino-5-[[(3-chloro-2-fluorofenylo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]- propylo]karbaminian 1,1-dimetyloetylu Do mieszaniny produktu z przyk ladu 25 etapu f) (1,2 g), produktu z przyk ladu 25 etapu g) (1,6 g) w zmieszanym rozpuszczalniku etanolu (30 ml) i DMSO (5 ml) dodano borowodorku sodu (100 mg) i ca lo sc ogrzewano w temperaturze 50°C przez 2 godziny. Etanol usuni eto w wyparce obrotowej, su- rowy produkt wyekstrahowano octanem etylu i przemyto wod a. Po oczyszczeniu (SiO 2 , dichlorome- tan:octan etylu (1:1) jako eluent) otrzymano zwi azek jak w podtytule (1,95 g). MS (ESI) BP 499 (+H). (i) [(2R)-2-[[2-bromo-5-[[(3-chloro-2-fluorofenylo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]- propylo]karbamini an 1,1-dimetyloetylu Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 1 etapu e) z u zyciem produktu z przyk ladu 25 etapu h). MS (APCI) 562 (M+H + , 100%). (j) [(2R)-2-[[5-[[(3-chloro-2-fluorofenylo)metylo]tio]-2-metoksytiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]- propylo]karbaminian 1,1-dimetyloetylu Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 1 etapu f), z u zyciem produktu z przyk ladu 25 etapu i). MS (APCI) 514 (M+H + , 100%). (k) 7-[[(1R)-2-amino-1-metyloetylo]amino]-5-[[(3-chloro-2-fluorofenylo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]- pirymidyn-2-(3H)-on Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 1 etapu g), z u zyciem produktu z przyk ladu 25 etapu j). t.t 241-3°C MS (APCI) 400 (M+H + , 100%). NMR dH (d 6 -DMSO) 7,56 (1H, m), 7,49 (1H, m), 7,17 (1H, m), 7,05 (1H, bs), 4,44 (1H, m), 4,39 (2H, ab), 2,92 (2H, d), 1,13 (3H, d). P r z y k l a d 26 (2S)-2-[[5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]-2,3-dihydro-2-oksotiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]- amino]-3-hydroksypropanoamid (a) (2S)-2-[[2-amino-5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]-3-hydro- ksypropanoamid Ten zwi azek wytworzono zgodnie z przyk ladem 2 z etapu (a), z u zyciem produktu z przyk ladu 4 etapu b) (2 g, 6 mmoli), 1-serynoamidu (0,66 g, 6 mmoli), NMP (80 ml) i diizopropyloetyloaminy (2 ml), w wyniku czego otrzymano (1,36 g) produkt. t.t. 145-151°C MS (APCI) 413 (M+H + , 100%). NMR dH (d 6 -DMSO) 8,10 (2H, brs), 7,40-7,07 (6H, m), 4,57 (1H, q), 4,43 (1H, d), 4,36 (1H, d), 3,71 (2H, d). (b) (2S)-2-[[5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]-2,3-dihydro-2-oksotiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]- amino]-3-hydroksypropanoamid Ten zwi azek wytworzono kolejnym zastosowaniem sposobów z przyk ladu 1 z etapów e), f), i g), z u zyciem produktu z przyk ladu 26 etapu (a). Zwi azki wytwarzane podczas oddzielnych etapów nie oczyszczano ani nie charakteryzowano. MS (APCI) 414 (M+H + , 100%). NMR dH (d 6 -DMSO) 12,47 (1H, br), 7,47 (1H, br), 7,42 (1H, s), 7,34 (2H, m), 7,13 (1H, m), 7,09 (1H, s), 4,90 (1H, t), 4,58 (1H, m), 4,39 (2H, m), 3,70 (2H, m). P r z y k l a d 27 7-[[(1R)-2-hydroksy-1-metyloetylo]amino]-5-[(2-tienylometylo)tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-2(3H)-on a) 7-[[(1R)-2-hydroksy-1-metyloetylo]amino]-5-[(2-tienylometylo)tio)tiazolo[4,5-d]pirymidyn- -2(3H)-on Zwi azek tytu lowy wytworzono sposobem opisanym w przyk ladzie 16 w etapie b) z produktu z przyk ladu 15 etapu e) (0,300 g, 0,79 mmola) i 2-tiofenometanotiolu (0,32 ml, 3,9 mmola). Produkt otrzymano z nisk a 3% wydajno sci a jako bia ly liofilizat (0,010 g). MS (APCI) 355 (M+H + , 100%).PL 203 572 B1 25 NMR dH (d 6 -DMSO) 12,50 (1H, bs), 7,36 (1H, m), 7,16 (1H, bs), 7,07 (1H, m), 6,92 (1H, m), 4,72 (1H, bs), 4,55 (2H, d), 4,26 (1H, m), 3,44 (2H, m), 1,12 (3H, d). P r z y k l a d 28 7-[[(1R)-2-hydroksy-1-metyloetylo]amino]-5[[[3-metylo-4-(metylosulfonylo)fenylo]metylo]tio]- tiazolo[4,5-d]pirymidyn-2(3H)-on a) 3-metylo-4-(metylotio)benzaldehyd Do och lodzonego w k apieli lodowej roztworu 1-metylo-2-(metylotio)benzenu (10 g, 0,073 mola) w bezwodnym dichlorometanie (200 ml) dodano chlorku cyny(IV) (13,6 ml, 0,116 mola) i w atmosferze azotu mieszano w temperarurze 0°C przez 2 godziny. Do mieszaniny wprowadzono eter a, a- -dichlorometylometylowy (6,56 ml, 0,073 mola) i mieszano przez 1 godzin e w temperaturze <10°C, a potem usuni eto ch lodzenia. Po osi agni eciu temperatury pokojowej mieszanin e reakcyjn a wlano do wody z lodem (400 ml), mieszano, a nast epnie wyekstrahowano dichlorometanem (trzykrotnie). Po la- czone warstwy organiczne wysuszono nad bezwodnym siarczanem magnezu, przes aczono, zat ezono na zelu krzemionkowym, oczyszczono drog a chromatografii rzutowej z elucj a eterem dietylo- wym/izoheksanem (10:1) i otrzymano zwi azek jak w podtytule jako br azowy olej (6,54 g) z wydajno- sci a 54%. GCMS 166 (M + , 100%). NMR dH (CDCI 3 ) 9,91 (1H, s), 7,68 (1H, m), 7,62 (1H, s), 7,24 (1H, t), 2,54 (3H, s), 2,36 (3H, s). b) 3-metylo-4-(metylotio)benzenometanol Do och lodzonego w k apieli lodowej roztworu produktu z przyk ladu 28 etapu a) (6,16 g, 0,037 mola) w etanolu (50 ml) dodano borowodorku sodu (1,40 g, 0,037 mola). Po 1 godzinie miesza- nin e reakcyjn a zoboj etniono przez ostro zne dodawanie wodnego roztworu kwasu chlorowodorowego (2 molowego) i zat ezono pod pró zni a do usuni ecia rozpuszczalnika organicznego. Pozostaj acy wodny roztwór wyekstrahowano octanem etylu (trzykrotnie). Po laczone warstwy organiczne wysuszono nad bezwodnym siarczanem magnezu, przes aczono, zatezono pod pró zni a i otrzymano zwi azek jak w podtytule jako br azowy olej (6 g) z ilo sciow a wydajno scia. GCMS 168 (M + , 100%). NMR dH (CDCl 3 ) 7,18 (3H, m), 4,62 (2H, bs), 2,46 (3H, s), 2,33 (3H, s). c) 3-metylo-4-(metylosulfonylo)benzenometanol Kwas 3-chloronadbenzoesowy (57-86%, 20,4 g) mieszano w dichlorometanie (150 ml), wy- suszono nad bezwodnym siarczanem magnezu i przes aczono. W trakcie mieszania do roztworu och lodzonego w k apieli lodowej produktu z przyk ladu 28, etapu b) (5,67 g, 0,034 mola) w dichlorome- tanie (50 ml) wkroplono przes acz w ci agu 1 godziny. Mieszanin e reakcyjn a przes aczono i przes acz przemyto wodnym roztworem wodorow eglanu sodu, a nast epnie wodnym roztworem ditionianu sodu (10 g Na 2 O 4 S 2 w 150 ml wody). Warstw e organiczn a wysuszono nad bezwodnym siarczanem magne- zu, przes aczono i zatezono pod pró zni a przed oczyszczeniem drog a chromatografii rzutowej z elucj a dichlorometanu/metanolu (100:2). Otrzymano zwi azek jak w podtytule jako zó lty olej (5,52 g) z 82% wydajno scia. MS (APCI) 201,1 (M+H + , 94,3%). NMR dH (CDCI 3 ) 7,87 (1H, d), 7,38 (2H, m), 5,40 (1H, q), 4,56 (2H, d), 3,18 (3H, s), 2,61 (3H, s). d) Octan 3-metylo-4-(metylosulfonylo)benzenometanotiolu Do och lodzonej w k apieli lodowej trifenylofosfiny (7,20 g, 0,028 mola) w tetrahydrofuranie (40 ml) dodano azodikarboksylanu dietylu (4,33 ml, 0,028 mola). Do powsta lej zawiesiny dodano roz- tworu produktu z przyk ladu 28 etapu c) (5,5 g, 0,028 mola) rozpuszczonego w tetrahydrofuranie (20 ml). Po rozpuszczeniu wytr aconego osadu do roztworu reakcyjnego dodano kwasu tiolooctowe- go, a potem usuni eto ch lodzenie. Po 16 godzinach w temperaturze pokojowej, mieszanin e reakcyj- n a zat ezono na zelu krzemionkowym i oczyszczono drog a chromatografii rzutowej z elucj a izo- heksanem/octanem etylu (2:1). Zwi azek jak w podtytule otrzymano jako ró zow a substancj e sta la (2,46 g) z 35% wydajno sci a. NMR dH (d 6 -DMSO) 7,84 (1H, d), 7,36 (2H, m), 4,16 (2H, s), 3,19 (3H, s), 2,61 (3H, s), 2,37 (3H, s). e) bis[[3-metylo-4-(metylosulfonylo)fenylo]metylodisulfid Mieszanin e produktu z przyk ladu 28 etapu d) (1,98g, 7,66 mmola) i 7M metanolowego roztworu amoniaku (30 ml) mieszano przez 24 godziny. Wyt acony produkt ods aczono i wysuszono pod pró zni a. Przes acz poddano podobnemu dzia laniu z 7M metanolowym roztworem amoniaku i otrzymano drugi rzut substancji sta lej w postaci bia lego produktu. Otrzymano zwi azek jak w podtytule (0,534 g) z wy- dajno scia 32%.PL 203 572 B1 26 MS (APCI) 451 (M+NH + , 98,9%). NMR dH (d 6 -DMSO) 7,88 (2H, s), 7,38-7, 34 (4H, m), 3,88 (4H, s), 3,20 (6H, s), 2,64 (6H, s). f) 7-[[(1R)-2-hydroksy-1-metyloetylo]amino]-5-[[[3-metylo-4-(metylosulfonylo)fenylo)metylo]tio]- tiazolo[4,5-d]pirymidyn-2(3H)-on Zwi azek tytu lowy wytworzono sposobem opisanym w przyk ladzie 16 w etapie b) z u zyciem pro- duktu z przyk ladu 15 etapu e) (0,20 g, 0,53 mmola) i produktu z przyk ladu 28 etapu e) (0,34 g, 0,79 mmola), w wyniku czego otrzymano z wydajno sci a 11% produkt jako bia ly liofilizat (0,025 g). MS (APCI) 441 (M+H + , 100%). NMR dH (d 6 -DMSO) 12,40 (1H, s), 7,81 (1H, d), 7,52 (2H, m), 7,33 (1H, d), 4,74 (1H, t), 4,35 (2H, s), 4,19 (1H, m), 3,41 (1H, m), 3,34-3,28 (1H, m), 3,18 (3H, s), 2,61 (3H, s), 1, 08 (3H, d). P r z y k l a d 29 5-[[[3-chloro-4-(trifluorometoksy)fenylo]metylo]tio]-7-[[(1R)-2-hydroksy-1-metyloetylo]amino]tia- zolo[4,5-d]pirymidyn-2(3H)-on a) 3-chloro-4-(trifluorometoksy)benzenometanotiol Do roztworu bromku 3-chloro-4-(trifluorometoksy)benzylu (5 g) w etanolu (100 ml) dodano tiomocznika (5 g) i mieszanin e ogrzewano w temperaturze wrzenia w warunkach powrotu skroplin przez 2 godziny. Mieszanin e odparowano do sucha i pozosta lo sc roztworzono w wodzie (100 ml). Do tego roztworu dodano pastylki wodorotlenku sodu (3 g) i mieszanin e ogrzewano w temperaturze wrzenia w warunkach powrotu skroplin przez 1 godzin e. Mieszanin e pozostawiono do och lodzenia si e do temperatury pokojowej, nast epnie zakwaszono st ezonym kwasem chlorowodorowym, wyekstraho- wano eterem, wysuszono, odparowano i otrzymano zwi azek jak w podtytule jako bezbarwn a wosko- wat a substancj e stala (3,5 g). NMR dH (CDCI 3 ) 7,35-7,09 (3H, m), 3,58 (2H, s). b) 5-[[[3-chloro-4-(trifluorometoksy)fenylo]metylo]tio]-7-[[(1R)-2-hydroksy-1-metyloetylo]amino]- tiazolo[4,5-d]pirymidyn-2(3H)-on Zwi azek tytu lowy wytworzono sposobem opisanym w przyk ladzie 16 w etapie b) z u zyciem pro- duktu z przyk ladu 15 etapu e) (0,40 g, 1,05 mmola) i produktu z przyk ladu 29 etapu a) (0,71 g, 1,5 mmola) i otrzymano z wydajno scia 10% produkt jako bia ly liofilizat (0,046 g). MS (APCI) 467 (M+H + , 100%). NMR dH (d 6 -DMSO) 12,42 (1H, s), 7,75 (1H, m), 7,52 (2H, m), 7,43 (1H, d), 4,72 (1H, t), 4,34 (2H, d), 4,18 (1H, kwintet), 3,46-3,27 (2H, m), 1,07 (3H, d). P r z y k l a d 30 5-[[[2-fluoro-3-(trifluorometylo)fenylo]metylo]tio]-7-[[(1R)-2-hydroksy-1-metyloetylo]amino]tiazolo- -[4,5-d]pirymidyn-2(3H)-on a) 2-fluoro-3-(trifluorometylo)benzenometanotiol Ten zwi azek wytworzono z bromku 2-fluoro-(3-trifluorometylobenzylu (10 g) z zastosowaniem sposobu z przyk ladu 29 etapu a). NMR dH (CDCI 3 ) 7,68-7,18 (3H, m), 3,74 (2H, s), 1,98 (1H, s). b) 5-[[[2-fluoro-3-(trifluorometylo)fenylo]metylo]tio]-7-[[(1R)-2-hydroksy-1-metyloetylo]amino]- tiazolo[4,5-d]pirymidyn-2(3H)-on Zwi azek tytu lowy wytworzono sposobem opisanym w przyk ladzie 16 w etapie b), z u zyciem produktu z przyk ladu 15 etapu e) (0,47 g, 1,23 mmola) i produktu z przyk ladu 30 etapu a) (0,775 g, 3,7 mmola) i otrzymano z wydajno scia 5% produkt jako bia ly liofilizat (0,025 g). MS (APCI) 435 (M+H + , 100%). NMR dH (d 6 -DMSO) 12,42 (1H, s), 7,92 (1H, t), 7,68 (1H, t), 7,35 (2H, m), 4,71 (1H, bs), 4,42 (2H, m), 4,16 (1H, kwintet), 3,40-3,30 (2H, m), 1,07 (3H, d). P r z y k l a d 31 Monochlorowodorek 5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]-7-[2-[(dimetyloamino)etylo]amino]tiazolo- [4,5-d]pirymidyn-2(3H)-onu (a) 2-bromo-7-chloro-5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyna Produkt z przyk ladu 4 etapu (b) (8,0 g) przeprowadzono stan suspensji w bromoformie (200 ml), a nast epnie dodano azotynu tert-butylu (8 ml) i ca losc ogrzewano w temperaturze 60°C przez 30 mi- nut. Rozpuszczalniki usuni eto pod zmniejszonym ci snieniem, pozosta lo sc oczyszczono drog a chromatografii kolumnowej (krzemionka, dichlorometan/izoheksan 1:1) i otrzymano zó lt a substancj e sta la (5,6 g). MS (APCI) 409/411 (M+H, 100%).PL 203 572 B1 27 (b) 7-chloro-5-[(2,3-difluorofenylometylo)tio]-2-metoksytiazolo[4,5-d]pirymidyna Produkt z przyk ladu 31 etapu a) (5,6 g) przeprowadzono w stan suspensji w metanolu (150 ml), dodano sproszkowanego wodorotlenku potasu (0,77 g) i ca lo sc mieszano w temperaturze pokojowej przez 2 godziny. Mieszanin e doprowadzono do pH 7 kilkoma kroplami st ezonego kwasu chlorowodo- rowego przed odparowaniem do sucha. Po oczyszczeniu drog a chromatografii kolumnowej (krze- mionka, izoheksan/dichlorometan 3:2 do 1:1) otrzymano bia la substancj e stala (2,0 g). MS (APCI) 360/362 (M+H, 100%). (c) 7-chloro-5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-2(3H)-on Produkt z przyk ladu 31 etapu (b) (2,0 g) rozpuszczono w dioksanie (150 ml), dodano nast epnie st ezonego kwasu chlorowodorowego (1 ml) i wody (1 ml) i ca lo sc ogrzewano w temperaturze 40°C przez 67 godzin. Mieszanin e odparowano do sucha, oczyszczono drog a chromatografii kolumnowej (krzemionka, dichlorometan) i otrzymano bia la substancj e sta la (1,4 g). MS (APCI) 346/348 (M+H, 100%). (d) Monochlorowodorek 5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]-7-[2-[(dimetyloamino)etylo]amino]- tiazolo[4,5-d]pirymidyn-2(3H)-onu Produkt z przyk ladu 31 etapu (c) (1,4 g) rozpuszczono w bezwodnym tetrahydrofuranie (5 ml) i do roztworu dodano N,N-dimetyloetylenodiaminy (0,25 g) w bombie palcowej, ogrzewanej w tempe- raturze 80°C przez 24 godziny. Rozpuszczalniki usuni eto pod zmniejszonym ci snieniem i pozosta lo sc rozdzielono mi edzy octan etylu i solank e. Polaczone ekstrakty organiczne wysuszono (siarczan sodu), odparowano pod zmniejszonym ci snieniem dla uzyskania pozosta losci, któr a oczyszczono drog a chromatografii kolumnowej (krzemionka, octan etylu/metanol 5:1) i otrzymano woln a zasad e jako lep- k a substancj e stala (0,095 g). Przekszta lcono j a w monochlorowodorek drog a przeprowadzenia w stan suspensji w metanolu (10 ml), a nast epnie dodano stezonego kwasu chlorowodorowego (3 krople) dla zapewnienia rozpuszczalno sci, a potem wody (100 ml) w celu liofilizacji tego zwi azku, w wyniku czego otrzymano br azowy proszek (0,080 g). t.t. 263°C(rozpad) MS (APCI) 398 (M+H, 100%). NMR dH (d 6 -DMSO) 12,57 (1H,s), 10,22 (1H,s), 7,94 (1H, t), 7,40 (1H, m), 7,34 (1H, m), 7,16 (1H, m), 4,43 (2H, s), 3,78 (2H, s), 3,21 (2H, m), 2,78 (6H, d). P r z y k l a d 32 5-[[(2-fluorofenylo)metylo]tio]-7-[[(1R)-2-hydroksy-1-metyloetylo]amino]tiazolo[4,5-d]pirymidyn- 2(3H)-on (a) 2-[[2-amino-5-[(fenylometylo)tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]-(2R)-1-propanol Produkt z przyk ladu 1 etapu c) (25,0 g), D-alaninol (12,3 g) i diizopropyloetyloamin e (26,0 g) rozpuszczono w N-metylopirolidynonie (250 ml), mieszano w temperaturze 100°C przez 24 godziny przed och lodzeniem i mieszanin e reakcyjn a wlano do H 2 O (2,5 litra). Wytr acony osad ods aczono i wysuszono pod pró zni a przed absorpcj a wst epn a na zelu krzemionkowym. Po chromatografii z u zyciem EtOAc, 4% MeOH/EtOAc jako eluenta otrzymano po zadany produkt jako zó lt a substancj e stala (9,0 g. 32%). MS (APCI) 347 (M+H, 100%). (b) 2-[(2-amino-5-merkaptotiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo)amino]-(2R)-1-propanol Do roztworu produktu z przyk ladu 32 etapu a) (5,0 g) w amoniaku (150 ml) dodano porcjami sodu metalicznego do wyst apienia niebieskiego zabarwienia. Dodano chlorku amonowego, a nast epnie rozpuszczalnik odparowano. Pozostalo sc rozpuszczono w H 2 O (200 ml) przed zoboj et- nieniem z u zyciem 2M roztworu HCl. Szary wytr acony osad ods aczono, przemyto H 2 O (200 ml), wy- suszono pod pró zni a przez 48 godzin i otrzymano zwi azek jak w podtytule jako br azow a substancj e stala (3,0 g). MS (APCI) 258 (M+H, 100%). (c) 2-[[2-amino-5-[[(2-fluorofenylo)metylo]tio]tiazolo-[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]-(2R)-1-propanol Do roztworu produktu z przyk ladu 32 etapu b) (0,5 g) i diizopropyloetyloaminy (0,26 g) w DMSO/N-metylopirolidynonie (4 ml/0,5 ml) w temperatirze 50°C dodano porcjami bromku 2-fluorobenzylu (0,369 g) i ca lo sc mieszano przez 1 godzin e. Mieszanin e rozdzielono mi edzy H 2 O (200 ml) i EtOAc (120 ml). Substancje organiczne odzyskano, przemyto H 2 O (200 ml), wysuszono nad MgSO 4 i zatezono na zelu krzemionkowym. Zwi azek jak w podtytule oczyszczono drog a chromatogra- fii rzutowej z u zyciem DCM, a nast epnie EtOAc jako eluentów i otrzymano bia la substancj e stala (245 mg, 35%).PL 203 572 B1 28 MS (APCI) 366 (M+H, 100%) (d) 2-[[2-bromo-5-[[(2-fluorofenylo)metylo]tio]tiazolo-[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]-(2R)-1-propanol Do zawiesiny produktu z przyk ladu 32 etapu c) (0,23 g) w bromoformie (15 ml) i acetonitrylu (15 ml) dodano w temperaturze 50°C azotynu izoamylu (0,3 ml) i ca losc mieszano przez 10 minut przed zatezeniem do oko lo 3 ml. Pozosta lo sc oczyszczono drog a chromatografii kolumnowej z u zyciem 20% EtOAc /DCM jako eluenta i otrzymano zwi azek jak w podtytule jako zó lt a substancj e (102 mg, 38%). MS (APCI) 429 (M+H, 100%). (e) 2-[[5-[[(2-fluorofenylo)metylo]tio]-2-metoksytiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]-(2R)-1-propanol Do roztworu produktu z przyk ladu 32 etapu d) (0,1 g) w MeOH (10 ml) dodano wodorotlenku potasu (27 mg) i ca lo sc mieszano przez 24 godziny, a nast epnie zoboj etniono do pH 7 z u zyciem 2M roztworu HCl. Substancje lotne usuni eto pod pró zni a i produkt u zyto bezpo srednio w nast epnym etapie. MS (APCI) 381 (M+H, 100%). (f) 5-[[(2-fluorofenylo)metylo]tio]-7-[[(1R)-2-hydroksy-1-metyloetylo]amino]tiazolo[4,5-d]-pirymi- dyn-2(3H)-on Produkt z przyk ladu 32 etapu e) rozpuszczono w 1,4-dioksanie (50 ml), H 2 O (1 ml) i roztworze st ezonego HCl (0,5 ml) i mieszano przez 20 godzin w temperaturze 40°C. Substancje lotne usuni eto pod zmniejszonym ci snieniem, surowy produkt oczyszczono drog a preparatywnej HPLC i otrzymano zwi azek jak w podtytule jako bia la substancj e sta la (21 mg). MS (APCI) 367 (M+H, 100%) NMR dH (d 6 -DMSO) 12,40 (1H, s), 8,14-7,11 (5H, m), 4,72 (1H, t), 4,35 (2H, m), 4,22 (1H, m), 3,47-3,29 (2H, m), 1,10 (3H, d). P r z y k l a d 33 7-[[(1R)-2-hydroksy-1-metyloetylo]amino]-5-[[(2-metoksyfenylo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn- -2(3H)-on (a) 2-[[2-amino-5-[[(2-metoksyfenylo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]-(2R)-1-propanol Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 32 etapu c), z u zyciem produktu z przyk ladu 32 etapu b). MS (APCI) 378 (M+H + , 100%). (b) 2-[[2-bromo-5-[[(2-metoksyfenylo)metylo]tio]tiazolo-[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]-(2R)-1-propanol Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 32 etapu d), z u zyciem produktu z przyk ladu 33 etapu a). MS (APCI) 441 (M+H + , 100%). (c) 2-[[2-metoksy-5-[[(2-metoksyfenylo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]-(2R)-1- -propanol Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 32 etapu e), z u zyciem produktu z przyk ladu 33 etapu b). MS (APCI) 393 (M+H + , 100%). (d) 7-[[(1R)-2-hydroksy-1-metyloetylo]amino]-5-[[(2-metoksyfenylo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]piry- midyn-2(3H)-on Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 32 etapu f), z u zyciem produktu z przyk ladu 33 etapu c). MS (APCI) 379 (M+H + , 100%). NMR dH (d 6 -DMSO) 7,40 (1H, dd), 7,22 (1H, dt), 6,97 (1H, d), 6,84 (1H, dt), 6,00 (1H, d), 4,25 (2H, m), 4,15 (1H, m), 3,83 (3H, s), 3,48-3,31 (2H, m), 1,10 (3H, d). P r z y k l a d 34 7-[[(1R)-2-hydroksy-1-metyloetylo]amino]-5-[(2-fenoksyetylo)tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-2(3H)-on (a) 2-[[2-amino-5-[(2-fenoksyetylo)tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]-(2R)-1-propanol Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 32 etapu c), z u zyciem produktu z przyk ladu 32 etapu b). MS (APCI) 378 (M+H + , 100%). (b) 2-[[2-bromo-5-[(2-fenoksyetylo)tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]-(2R)-1-propanol Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 32 etapu d), z u zyciem produktu z przyk ladu 34 etapu a). MS (APCI) 441 (M+H + , 100%).PL 203 572 B1 29 (c) 2-[[2-metoksy-5-[(2-fenoksyetylo)tio]tiazolo[4,5-d]-pirymidyn-7-ylo]amino]-(2R)-1-propanol Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 32 etapu e), z u zyciem produktu z przyk ladu 34 etapu b). MS (APCI) 393 (M+H + , 100%). (d) 7-[[(1R)-2-hydroksy-1-metyloetylo]amino]-5-[(2-fenoksyetylo)tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-2(3H)-on Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 32 etapu f), z u zyciem produktu z przyk ladu 34 etapu c). MS (APCI) 379 (M+H + , 100%). NMR dH (d 6 -DMSO) 12,37 (1H, s), 7,30-7,26 (3H, m), 6,96-6,91 (3H, m), 4,71 (1H, t), 4,23-4,14 (3H, m), 3,46-3,28 (4H, m), 1,08 (3H, d). P r z y k l a d 35 7-[[(1R)-2-hydroksy-1-metyloetylo]amino]-5-[[(3-metylofenylo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn- -2(3H)-on (a) 2-[[2-amino-5-[[(3-metylofenylo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]-(2R)-1-pro- panol Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 32 etapu c), z u zyciem produktu z przyk ladu 34 etapu b). MS (APCI) 362 (M+H + , 100%). (b) 2-[[2-bromo-5-[[(3-metylofenylo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]-(2R)-1-pro- panol Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 32 etapu d), z u zyciem produktu z przyk ladu 35 etapu a). MS (APCI) 425 (M+H + , 100%). (c) 2-[[2-metoksy-5-[[(3-metylofenylo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]-(2R)-1- -propanol Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 32 etapu e), z u zyciem produktu z przyk ladu 35 etapu b). MS (APCI) 377 (M+H + , 100%). (d) 7-[[(1R)-2-hydroksy-1-metyloetylo]amino]-5-[[(3-metylofenylo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]piry- midyn-2(3H)-on Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 32 etapu f), z u zyciem produktu z przyk ladu 35 etapu c). MS (APCI) 363 (M+H + , 100%). NMR dH (d 6 -DMSO) 12,37 (1H, s), 7,23-7,16 (4H, m), 7,04 (1H, d), 4,73 (1H, t), 4,28 (2H, m), 4,24 (1H, m), 3,48-3,30 (2H, m), 2,28 (3H, s), 1,11 (3H, d). P r z y k l a d 36 5-[[(2-fluoro-3-metylofenylo)metylo]tio]-7-[[(1R)-2-hydroksy-1-metyloetylo]amino]tiazolo[4,5-d]pi- rymidyn-2(3H)-on (a) 2-[[2-amino-5-[[(2-fluoro-3-metylofenylo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]-(2R)- -1-propanol Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 32 etapu c), z u zyciem produktu z przyk ladu 32 etapu b). MS (APCI) 380 (M+H + , 100%). (b) 2-[[2-bromo-5-[[(2-fluoro-3-metylofenylo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]-(2R)- -1-propanol Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 32 etapu d), z u zyciem produktu z przyk ladu 36 etapu a). MS (APCI) 443 (M+H + , 100%). (c) 2-[[5-[[(2-fluoro-3-metylofenylo)metylo]tio]-2-metoksytiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]- (2R)-1-propanol Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 32 etapu e), z u zyciem produktu z przyk ladu 36 etapu b). MS (APCI) 395 (M+H + , 100%). (d) 5-[[(2-fluoro-3-metylofenylo)metylo]tio]-7-[[(1R)-2-hydroksy-1-metyloetylo]amino]tiazolo[4,5-d]- pirymidyn-2(3H)-onPL 203 572 B1 30 Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 32 etapu f), z u zyciem produktu z przyk ladu 36 etapu c). MS (APCI) 381 (M+H + , 100%). NMR dH (d 6 -DMSO) 12,39 (1H, s), 7,37-7,00 (4H, m), 4,72 (1H, t), 4,33 (2H, m), 4,22 (1H, m), 3,47-3,30 (2H, m), 2,23 (3H, s), 1,11 (3H, d). P r z y k l a d 37 5-[[(3-chlorofenylo)metylo]tio]-7-[[(1R)-2-hydroksy-1-metyloetylo]amino]tiazolo[4,5-d]pirymidyn- 2(3H)-on (a) 2-[[2-amino-5-[[(3-chlorofenylo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]-(2R)-1-propanol Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 32 etapu c), z u zyciem produktu z przyk ladu 32 etapu b). MS (APCI) 382 (M+H + , 100%). (b) 2-[[2-bromo-5-[[(3-chlorofenylo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]-(2R)-1-propanol Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 32 etapu d), z u zyciem produktu z przyk ladu 37 etapu a). MS (APCI) 445 (M+H + , 100%). (c) 2-[[5-[[(3-chlorofenylo)metylo]tio]-2-metoksytiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]-(2R)-1-propanol Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 32 etapu e), z u zyciem produktu z przyk ladu 37 etapu b). MS (APCI) 397 (M+H + , 100%). (d) 5-[[(3-chlorofenylo)metylo]tio]-7-[[(1R)-2-hydroksy-1-metyloetylo]amino]tiazolo[4,5-d]piry- midyn-2(3H)-on Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 32 etapu f), z u zyciem produktu z przyk ladu 37 etapu c). MS (APCI) 383 (M+H + , 100%). NMR dH (d 6 -DMSO) 12,40 (1H, s), 7,49 (1H, d), 7,43-7,30 (4H, m), 4,72 (1H, t), 4,32 (2H, m), 4,21 (1H, m), 3,48-3,26 (2H, m), 1,09 (3H, d). P r z y k l a d 38 5-[[(3-bromofenylo)metylo]tio]-7-[[(1R)-2-hydroksy-1-metyloetylo]amino]tiazolo[4,5-d]pirymidyn- 2(3H)-on (a) 2-[[2-amino-5-[[(3-bromofenylo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]-(2R)-1-propanol Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 32 etapu c), z u zyciem produktu z przyk ladu 32 etapu b). MS (APCI) 426 (M+H + , 100%). (b) 2-[[2-bromo-5-[[(3-bromofenylo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]-(2R)-1-pro- panol Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 32 etapu d), z u zyciem produktu z przyk ladu 38 etapu a). MS (APCI) 491 (M+H + , 100%). (c) 2-[[5-[[(3-bromofenylo)metylo]tio]-2-metoksytiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]-(2R)-1- -propanol Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 32 etapu e), z u zyciem produktu z przyk ladu 38 etapu b). MS (APCI) 443 (M+H + , 100%). (d) 5-[[(3-bromofenylo)metylo]tio]-7-[[(1R)-2-hydroksy-1-metyloetylo]amino]tiazolo[4,5-d]piry- midyn-2(3H)-on Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 32 etapu f), z u zyciem produktu z przyk ladu 38 etapu c). MS (APCI) 427 (M+H + , 100%). NMR dH (d 6 -DMSO) 12,40 (1H, s), 7,63 (1H, t), 7,46-7,24 (4H, m), 4,72 (1H, t), 4,31 (2H, m), 4,21 (1H, m), 3,48-3,26 (2H, m), 1,10 (3H, d). P r z y k l a d 49 5-[[[4-(Difluorometoksy)fenylo]metylo]tio]-7-[[(1R)-2-hydroksy-1-metyloetylo]amino]tiazolo[4,5-d]- pirymidyn-2(3H)-on (a) 2-[[2-amino-5-[[[4-(difluorometoksy)fenylo]metylo]tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]- -(2R)-1-propanolPL 203 572 B1 31 Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 32 etapu c), z u zyciem produktu z przyk ladu 32 etapu b). MS (APCI) 414 (M+H + ,100%). (b) 2-[[2-bromo-5-[[[4-(difluorometoksy)fenylo]metylo]tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]- -(2R)-1-propanol Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 32 etapu d), z u zyciem produktu z przyk ladu 39 etapu a). MS (APCI) 477 (M+H + , 100%). (c) 2-[[5-[[[4-(Difluorometoksy)fenylo]metylo]tio]-2-metoksytiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]- (2R)-1-propanol Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 32 etapu e), z u zyciem produktu z przyk ladu 39 etapu b). MS (APCI) 429 (M+H + , 100%). (d) 5-[[[4-(Difluorometoksy)fenylo]metylo]tio]-7-[[(1R)-2-hydroksy-1-metyloetylo]amino]tiazolo- [4,5-d]pirymidyn-2(3H)-on Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 32 etapu f), z u zyciem produktu z przyk ladu 39 etapu c). MS (APCI) 415 (M+H + , 100%). NMR dH (d 6 -DMSO) 12,38 (1H, s), 7,48 (2H, dt), 7,26 (1H, d), 7,19 ( 1H, t), 7,11 (2H, dd), 4,73 (1H, t), 4,31 (2H, m), 4,21 (1H, m), 3,47-3,30 (2H, m), 1,10 (3H, d). P r z y k l a d 40 (+/-)-5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]-7-[[2-hydroksy-1-(metoksymetylo)etylo]amino]tiazolo[4,5-d]- pirymidyn-2 (3H)-on (a) Chlorowodorek (+/-)-2-amino-3-metoksy-1-propanolu Do zawiesiny DL-3-metoksyalaniny (1,0 g) w bezwodnym THF (100 ml) dodano kompleksu bo- rowodór-disulfid metylu (10 ml) i mieszanin e ogrzewano w temperaturze wrzenia w warunkach powro- tu skroplin przez 16 godzin. Mieszanin e nast epnie zadano metanolem w temperaturze wrzenia w warunkach powrotu skroplin, odparowano do sucha i pozosta losc roztworzono w metanolowym roztworze chlorowodoru (100 ml) i ca lo sc ogrzewano w temperaturze wrzenia w warunkach powrotu skroplin przez nast epne 2 godziny. Po odparowaniu do sucha otrzymano zwi azek jak w podtytule jako bezbarwn a zywic e (1,0 g). NMR dH (D 2 O) 3,40 (3H, s), 3,53-3,74 (4H, in), 3,81 (1H, m). (b) (+/-)-2-[[2-amino-5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]-3- -metoksy-1-propanol Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 12 etapu a), z u zyciem produktu z przyk ladu 4 etapu b) i produktu z przyk ladu 40 etapu a). MS (APCI) 414 (M+H + , 100%). (c) (+/-)-2-[[2-chloro-5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]-3- -metoksy-1-propanol Do roztworu produktu z przyk ladu 40 etapu b) (1,0 g) w mieszaninie st ezonego kwasu chloro- wodorowego (40 ml) i wody (32 ml) och lodzonego w wodzie z lodem, dodano roztworu azotynu sodu (0,4 g) w wodzie (5 ml) i ca lo sc mieszano w tej temperaturze przez 2 godziny. Mieszanin e nast epnie wyekstrahowano octanem etylu, wysuszono, odparowano i otrzymano zwi azek jak w podtytule (0,6 g). MS (APCI) 434 (M+H + , 100%). (d) (+/-)-2-[[5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]-2-metoksytiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]-3- -metoksy-1-propanol Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 1 etapu f), z u zyciem produktu z przyk ladu 40 etapu c). MS (APCI) 429 (M+H + , 100%). (e) (+/-)-5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]-7-[[2-hydroksy-1-(metoksymetylo)etylo]amino]tiazolo- [4,5-d]pirymidyn-2(3H)-on Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 1 etapu g), z u zyciem produktu z przyk ladu 40 etapu d). MS (APCI) 415 (M+H + , 100%).PL 203 572 B1 32 P r z y k l a d 41 7-[[2-hydroksy-1-(hydroksymetylo)etylo]amino]-5-[(fenylometylo)tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn- -2(3H)-on (a) 2-[[2-amino-5-[(fenylometylo)tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]-1,3-propanodiol Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 12 etapu a), z u zyciem produktu z przyk ladu 1 etapu c) i 2-amino-1,3-propanodiolu. MS (APCI) 364 (M+H + , 100%). NMR dH (d 6 -DMSO) 7,42-7,38 (1H, m), 7,28 (1H, t), 7,22 (1H, t), 5,30 (1H, d), 4,63 (1H, bs), 4,28 (2H, s), 4,03 (1H, m), 3,54-3,40 (4H, m). (b) 2-[[2-chloro-5-[(fenylometylo)tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]-1,3-propanodiol Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 40 etapu c), z u zyciem produktu z przyk ladu 41 etapu a). MS (APCI) 384 (M+H + , 100%). (c) 2-[[2-metoksy-5-[(fenylometylo)tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]-1,3-propanodiol Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 1 etapu f), z u zyciem produktu z przyk ladu 41 etapu b). MS (APCI) 379 (M+H + , 100%). (d) 7-[[2-hydroksy-1-(hydroksymetylo)etylo]amino]-5-[(fenylometylo)tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn- -2(3H)-on Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 1 etapu g), z u zyciem produktu z przyk ladu 41 etapu c). MS (APCI) 365 (M+H + , 100%). P r z y k l a d 42 5-[[(2-bromofenylo)metylo]tio]-7-[[(1R)-2-hydroksy-1-metyloetylo]amino]tiazolo[4,5-d]pirymidyn- -2(3H)-on (a) 2-[[2-amino-5-[[(2-bromofenylo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]-(2R)-1-propanol Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 32 etapu c) z u zyciem produktu z przyk ladu 32 etapu b). MS (APCI) 428 (M+H + , 100%). (b) 2-[[2-bromo-5-[[(2-bromofenylo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]-(2R)-1-pro- panol Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 1 etapu e), z u zyciem produktu z przyk ladu 42 etapu a). MS (APCI) 491 (M+H + , 100%). (c) 2-[[5-[[(2-bromofenylo)metylo]tio]-2-metoksytiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]-(2R)-1- -propanol Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 1 etapu f), z u zyciem produktu z przyk ladu 42 etapu b). MS (APCI) 443 (M+H + ,100%). (d) 5-[[(2-bromofenylo)metylo]tio]-7-[[(1R)-2-hydroksy-1-metyloetylo]amino]tiazolo[4,5-d]piry- midyn-2(3H)-on Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 1 etapu g), z u zyciem produktu z przyk ladu 42 etapu c). MS (APCI) 427 (M+H + , 100%). NMR dH (d 6 -DMSO) 12,41 (1H, s), 7,65-7,14 (5H, m), 4,72 (1H, t), 4,42 (2H, s), 4,21 (1H, m), 3,47-3,30 (2H, m), 1,10 (3H, d). P r z y k l a d 43 Sól sodowa 5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]-7-[[(1R)-2-hydroksy-1-metyloetylo]amino]tiazolo- [4,5-d]pirymidyn-2(3H)onu Produkt z przyk ladu 5 etapu d) przeprowadzono w stan suspensji w wodzie i do tej suspensji dodano 1 równowa znik 0,1N roztworu wodorotlenku sodu, a nast epnie dodano w ma lych dawkach tetrahydrofuranu dla u latwienia rozpuszczania. Powsta ly roztwór lilofilizowano i otrzymano zwi azek tytu lowy jako bezbarwn a substancj e stala. t.t. 218-220°C MS (APCI) 385 (M+H + , 100%).PL 203 572 B1 33 NMR dH (d 6 -DMSO) 7,39-7,09 (3H, m), 5,60 (1H, d), 4,65 (1H, m), 4,34 (2H, q), 4,09 (1H, m), 3,44-3,27 (2H, m), 1,06 (3H, d). P r z y k l a d 44 Sól sodowa 5-[[3-chloro-2-fluorofenylo)metylo]tio]-7-[[(1R)-2-hydroksy-1-metyloetylo]amino]- tiazolo[4,5-d]pirymidyn-2(3H)-onu Ten zwi azek wytworzono jak w przyk ladzie 43, z u zyciem produktu z przyk ladu 17 etapu b). MS (APCI) 401 (M+H + , 100%). P r z y k l a d 45 Sól sodowa (+/-)-5-[[(2,3-difluorofenylo)metylo]tio]-7-[[2-hydroksy-1-(metoksymetylo)etylo]amino]- tiazolo[4,5-d]pirymidyn-2(3H)-onu Ten zwi azek wytworzono sposobem jak w przyk ladzie 43, z u zyciem produktu z przyk ladu 40 etapu e). t.t. 250°C MS (APCI) 415 (M+H + , 100%). NMR dH (d 6 -DMSO) 7,39-7,04 (3H, m), 5,51 (1H, d), 4,68 (1H, t), 4,34 (2H, q), 4,22 (1H, m), 3,51-3,35 (4H, m), 3,32 (3H, s). P r z y k l a d 46 Sól sodowa 7-[[2-hydroksy-1-(hydroksymetylo)etylo]amino]-5-[(fenylometylo)tio]tiazolo[4,5-d]- pirymidyn-2(3H)-onu Ten zwi azek wytworzono sposobem jak w przyk ladzie 43, z u zyciem produktu z przyk ladu 41 etapu d). t.t. 231-2°C MS (APCI) 365 (M+H + , 100%). NMR dH (d 6 -DMSO) 7,41-7,18 (5H, m), 5,30 (1H, d), 4,63 (2H, s), 4,28 (2H, s), 4,06 (1H, m), 3,50 (4H, m). P r z y k l a d 47 Sól sodowa 7-[[(1R)-2-hydroksy-1-metyloetylo]amino]-5-[(fenylometylo)tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn- -2(3H)-onu Ten zwi azek wytworzono sposobem jak w przyk ladzie 43, z u zyciem produktu z przyk ladu 3 etapu d). t.t. (kurczenie si e w 110°C) 221-225°C. MS (APCI) 349 (M+H + , 100%). NMR dH (d 6 -DMSO) 7,41-7,18 (5H, m), 5,58 (1H, d), 4,65 (1H, t), 4,28 (2H, q), 4,11 (1H, m), 3,49-3,31 (2H, m), 1,08 (3H, d). P r z y k l a d 48 5-[(5-chloro-1,2,3-tiadiazol-4-ilo)tio]-7-[[(1R)-2-hydroksy-1-metyloetylo]amino]tiazolo[4,5-d]- pirymidyn-2(3H)-on (a) (2R)-2-[[2-amino-5-[(5-chloro-1,2,3-tiadiazol-4-ilo)tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]amino]-1- -propanol Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 32, etapu c) z u zyciem produktu z przyk ladu 32 etapu b) i 5-chloro-4-(chlorometylo)-1,2,3-tiadiazolu. MS (APCI) 390 (M+H + , 100%). (b) (2R)-2-[[2-chloro-5-[[(5-chloro-1,2,3-tiadiazol-4-ilo)metylo]tio]tiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]- amino]-1-propanol Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 40, etapu c) z u zyciem produktu z przyk ladu 48 etapu a). MS (APCI) 409 (M+H + , 100%). (c) (2R)-2-[[5-[[(5-chloro-1,2,3-tiadiazol-4-ilo)metylo]tio]-2-metoksytiazolo[4,5-d]pirymidyn-7-ylo]- amino]-1-propanol Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 1, etapu f) z u zyciem produktu z przyk ladu 48 etapu b). MS (APCI) 405 (M+H + , 100%). (d) 5-[(5-chloro-1,2,3-tiadiazol-4-ilo)tio]-7-[[(1R)-2-hydroksy-1-metyloetylo]amino]tiazolo[4,5-d]- pirymidyn-2(3H)-on Ten zwi azek wytworzono sposobem z przyk ladu 1, etapu g) z u zyciem produktu z przyk ladu 48 etapu c).PL 203 572 B1 34 MS (APCI) 391 (M+H + , 100%). NMR dH (d 6 -DMSO) 12,39 (1H, s), 7,39 (1H, d), 4,76 (2H, AB), 4,70 (1H, t), 4,24 (1H, m), 3,48 -3,30 (2H, m), 1,11 (3H, d). Dane farmakologiczne Oznaczanie wi azania ligandu [ 125 I]Il-8 (ludzka, rekombinowana) o aktywno sci w la sciwej 2,000 Ci/mmol nabyto w Amersham, Wielka Brytania. Wszystkie inne odczynniki by ly jako sci analitycznej. Du ze ilo sci hrCXCR2 ulega ly ekspresji w komórkach HEK 293 (komórki nerki zarodka ludzkiego, ECACC nr 85120602) (Lee i wsp. (1992) J. Biol. Chem. 267 str. 16283-16291). cDNA hrCXCR2 amplifikowano i klonowano z mRNA ludzkich neutrofili. DNA klonowano na PCR-Script (Stratagene), a klony identyfikowano z u zyciem DNA. Sekwencj e koduj ac a sub-klonowano do eukariotycznego wektora ekspresji RcCMV (Invitrogen). DNA plazmidu wytwarzano z u zyciem Quiagen Megaprep 2500 i transfekowano do komórek HEK 293 z u zyciem odczynnika Lipofectamine (Gibco BRL). Komórki o najwy zszej ekspresji klonu zbierano do solanki buforowanej fosforanem, zawieraj acej 0,2% (stosunek wagowo-obj eto sciowy) kwasu etyle- nodiaminotetraoctowego (EDTA) i wirowano (200 g, 5 min). Peletk e komórkow a ponownie zawie- szano w lodowatym buforze do homogenizacji (10 mM HEPES (pH 7,4), 1 mM ditiotreitolu, 1 mM EDTA oraz szereg inhibitorów proteaz (1 mM metylosulfonylofluorku, 2 µg/ml inhibitora trypsyny sojowej, 3 mM benzamidyny, 0,5 µg/ml leupeptyny oraz 100 µg/ml bacytracyny) a komórki pozosta- wiono na 10 minut, aby nap ecznia ly. Preparat komórkowy rozbito przy pomocy r ecznego szklanego mo zdzierza/homogenizatora z t luczkiem PTFE, a b lony komórkowe zebrano poprzez odwirowanie (45 minut, 100000 g, 4°C). Preparat b lon komórkowych przechowywano w temperaturze -70°C w buforze do homogenizacji z dodatkiem roztworu soli Tyroda (137 mM NaCl, 2,7 mM KCl, 0,4 mM NaH 2 PO 4 ), 0,1% (stosunek wagowo-obj eto sciowy) zelatyny oraz 10% (stosunek obj eto sciowo-ob- jeto sciowy) glicerolu. Wszystkie oznaczenia prowadzono na 96-studzienkowych p lytkach filtracyjnych MultiScreen 0,45 µm (Millipore, Wielka Brytania). W ka zdym oznaczeniu stosowano oko lo 50 pM [ 125 I]Il-8 oraz b lony (odpowiednik ok. 200000 komórek) w buforze do oznaczenia (roztwór soli Tyroda z dodatkiem 10 mM HEPES (pH 7,4), 1,8 mM CaCl 2 , 1 mM MgCl 2 , 0,125 mg/ml bacytracyny oraz 0,1% (stosunek wagowo-obj eto sciowy) zelatyny). Ponadto zwi azek o wzorze (I) wed lug przedstawionych przyk ladów rozpuszczano wst epnie w DMSO i dodawano w taki sposób, aby ostateczne st ezenie DMSO wynosi lo 1% (stosunek obj eto sciowo-obj eto sciowy). Oznaczenie rozpoczynano poprzez dodanie b lon, a po 1,5 godziny w temperaturze pokojowej b lony zbierano poprzez filtracj e z u zyciem podci snienia w aparacie Millipore MultiScreen i p lukano dwukrotnie buforem do oznaczenia (bez bacytracyny). Z uk ladu MultiScreen usuni eto p lyt e mocuj ac a, filtry wysuszono w temperaturze pokojowej, wyci agni e- to i zliczono w liczniku gamma Cobra. Stwierdzono, ze zwi azki o wzorze (I) wed lug przedstawionych przyk ladów charakteryzuj a si e warto sciami IC 50 poni zej (<) 10 µM. Badanie mobilizacji wapnia wewn atrzkomórkowego Ludzkie neutrofile uzyskano z traktowanej EDTA krwi obwodowej, jak opisano uprzednio (Baly i wsp. (1997) Methods in Enzymology 287, str. 70-72) w buforze do przechowywania (roztwór soli Tyroda (137 mM NaCl, 2,7 mM KCl, 0,4 mM NaH 2 PO 4 ) z dodatkiem 5,7 mM glukozy i 10 mM HEPES (pH 7,4). Chemokin e GRO a (ludzka, rekombinowana) nabyto w R&D Systems (Abingdon, Wielka Bryta- nia). Wszystkie inne odczynniki by ly jako sci analitycznej. Zmiany wolnego wapnia wewn atrzkomórko- wego mierzono fluorometrycznie poprzez obladowanie neutrofili wra zliwym na wap n barwnikiem flu- orescencyjnym, fluo-3, jak opisano uprzednio (Merritt i wsp. (1990) Biochem. J. 269, str. 513-519). Komórki ladowano przez 1 godzin e w temperaturze 37°C w buforze laduj acym (bufor do przechowywania z 0,1% (stosunek wagowo-obj eto sciowy) zelatyny), zawieraj acym 5 µM estru AM fluo-3, p lukano buforem laduj acym, a nast epnie ponownie zawieszano w roztworze soli Tyroda z dodatkiem 5,7 mM glukozy, 0,1% (stosunek wagowo-obj eto sciowy) albuminy surowicy bydl ecej (BSA), 1,8 mM CaCl 2 i 1 mM MgCl 2 . Komórki przenoszono przy pomocy pipety na p lytki 96-studzienkowe o studzienkach o czarnych scia- nach i przezroczystym dnie (Costar, Boston, USA) i wirowano (200 g, 5 min, temperatura pokojowa). Zwi azek o wzorze (I) wed lug przyk ladów rozpuszczano wst epnie w DMSO i dodawano w taki sposób, aby ostateczne st ezenie DMSO wynosi lo 1% (stosunek obj eto sciowo-obj eto sciowy). Oznaczenia rozpoczynano dodaniem st ezenia A 50 GRO a, a przej sciowy wzrost fluorescen- cji fluo-3 ( ? Ex =490 nm, a ? Em =520 nm) monitorowano z u zyciem FLIPR (Fluorometric Imaging Plate Reader, Molecular Devices, Sunnyvale, USA).PL 203 572 B1 35 Zbadano zwi azki o wzorze (I) wed lug przedstawionych przyk ladów i stwierdzono, ze s a one an- tagonistami receptora CXCR2 ludzkich neutrofili. PL PL PL PL PL PL PL PL PL PL PL PL PL PL PL PL