[go: up one dir, main page]

PL201887B1 - Peptyd, polinukleotyd kodujący ten peptyd, szczepionka, zastosowanie peptydu i polinukleotydu kodującego ten peptyd oraz przeciwciało - Google Patents

Peptyd, polinukleotyd kodujący ten peptyd, szczepionka, zastosowanie peptydu i polinukleotydu kodującego ten peptyd oraz przeciwciało

Info

Publication number
PL201887B1
PL201887B1 PL349320A PL34932099A PL201887B1 PL 201887 B1 PL201887 B1 PL 201887B1 PL 349320 A PL349320 A PL 349320A PL 34932099 A PL34932099 A PL 34932099A PL 201887 B1 PL201887 B1 PL 201887B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
peptide
arg
lys
gene
infection
Prior art date
Application number
PL349320A
Other languages
English (en)
Other versions
PL349320A1 (en
Inventor
Martin John Glenton Hughes
Joseph David Santangelo
Jonathan Douglas Lane
Paul Everest
Robert Feldman
Joanne Christine Moore
Rebecca Kerry Wilson
Richard James Dobson
Gordon Dougan
Original Assignee
Microscience Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from GBGB9828353.4A external-priority patent/GB9828353D0/en
Priority claimed from GBGB9828354.2A external-priority patent/GB9828354D0/en
Priority claimed from GBGB9828359.1A external-priority patent/GB9828359D0/en
Priority claimed from GBGB9828356.7A external-priority patent/GB9828356D0/en
Priority claimed from GBGB9828345.0A external-priority patent/GB9828345D0/en
Priority claimed from GBGB9828355.9A external-priority patent/GB9828355D0/en
Priority claimed from GBGB9828350.0A external-priority patent/GB9828350D0/en
Priority claimed from GBGB9828349.2A external-priority patent/GB9828349D0/en
Priority claimed from GBGB9828357.5A external-priority patent/GB9828357D0/en
Priority claimed from GBGB9828352.6A external-priority patent/GB9828352D0/en
Priority claimed from GBGB9900083.8A external-priority patent/GB9900083D0/en
Priority claimed from GBGB9900085.3A external-priority patent/GB9900085D0/en
Priority claimed from GBGB9900086.1A external-priority patent/GB9900086D0/en
Priority claimed from GBGB9900082.0A external-priority patent/GB9900082D0/en
Priority claimed from GBGB9900084.6A external-priority patent/GB9900084D0/en
Priority claimed from GBGB9901922.6A external-priority patent/GB9901922D0/en
Priority claimed from GBGB9901916.8A external-priority patent/GB9901916D0/en
Application filed by Microscience Ltd filed Critical Microscience Ltd
Publication of PL349320A1 publication Critical patent/PL349320A1/xx
Publication of PL201887B1 publication Critical patent/PL201887B1/pl

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/02—Bacterial antigens
    • A61K39/09—Lactobacillales, e.g. aerococcus, enterococcus, lactobacillus, lactococcus, streptococcus
    • A61K39/092—Streptococcus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/02—Drugs for disorders of the urinary system of urine or of the urinary tract, e.g. urine acidifiers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/195—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria
    • C07K14/315—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria from Streptococcus (G), e.g. Enterococci
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/569—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for microorganisms, e.g. protozoa, bacteria, viruses
    • G01N33/56911—Bacteria
    • G01N33/56944—Streptococcus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)

Abstract

Wynalazek dotyczy peptydu obejmuj acego sekwencj e aminokwasow a zidentyfikowan a w niniej- szym opisie jako SEQ ID NO. 2, b ad z jego homologu lub fragmentu, który to homolog lub fragment jest zdolny do wywo lywania przeciwcia l z powinowactwem do peptydu, do zastosowania leczniczego. Wynalazek dotyczy równie z polinukleotydu koduj acego ten peptyd do zastosowania leczniczego, szczepionki zawieraj acej ten peptyd, zastosowania tego peptydu i polinukleotydu do poszukiwania potencjalnych leków lub wykrywania zjadliwo sci oraz do wytwarzania leku do zastosowania w leczeniu lub profilaktyce stanu zwi azanego z infekcj a bakteryjn a Streptococcus grupy B. Ponadto wynalazek dotyczy przeciwcia la wywo lanemu przeciw temu peptydowi. PL PL PL PL

Description

Opis wynalazku
Przedmiotem wynalazku są peptyd, polinukleotyd kodujący ten peptyd, szczepionka, zastosowanie peptydu i polinukleotydu kodującego ten peptyd oraz przeciwciało.
Streptococcus grupy B (GBS), znany również jako Streptococcus agalactiae, jest czynnikiem przyczynowym różnych stanów chorobowych. W szczególności GBS powoduje:
Wczesne infekcje u noworodków
Infekcja ta zazwyczaj zaczyna się w macicy i powoduje ciężkie posocznice i zapalenie płuc u niemowląt, które, jeś li nie leczone, jest śmiertelne, a nawet przy leczeniu wiąże się z 10-20% umieralnością.
Późne infekcje u noworodków
Infekcja ta występuje w okresie krótko po narodzeniu, przed osiągnięciem wieku około 3 miesięcy. Powoduje ona posocznicę, która w 90% jako powikłanie daje zapalenie opon mózgowych. Występują również inne ogniskowe infekcje, obejmujące zapalenie szpiku, posocznicowe zapalenie stawów, ropnie i wewnętrzne zapalenie oka.
Infekcje u dorosłych
Pojawiają się one coraz powszechniej i najczęściej występują u kobiet, które właśnie urodziły dziecko, starszych i z osłabionym układem odpornościowym. Objawiają się posocznicą i infekcjami ogniskowymi obejmującymi zapalenie szpiku, posocznicowe zapalenie stawów, ropnie i wewnętrzne zapalenie oka.
Infekcje układu moczowego
GBS jest przyczyną infekcji układu moczowego i w okresie ciąży powoduje około 10% wszystkich infekcji.
Infekcje weterynaryjne
GBS powoduje przewlekłe zapalenie sutka u krów. To z kolei prowadzi do zmniejszonego wytwarzania mleka i dlatego też jest istotne z ekonomicznego punktu widzenia.
Infekcje GBS można leczyć antybiotykami. Jednakże, preferowana jest immunizacja. Dlatego też, pożądane jest opracowanie antygenu, który mógłby być stosowany w skutecznej terapeutycznie szczepionce.
Niniejszy wynalazek jest oparty na identyfikacji genu GBS, a także pokrewnych organizmów, których produkt może występować na zewnętrznej powierzchni organizmu i dlatego można go wykorzystywać jako cel immunoterapii.
Wynalazek dotyczy peptydu obejmującego sekwencję aminokwasową zidentyfikowaną jako SEQ ID NO. 2, bądź jego homologu lub fragmentu, który to homolog lub fragment jest zdolny do wywoływania przeciwciał z powinowactwem do peptydu, do zastosowania leczniczego.
W szczególności wynalazek dotyczy peptydu obejmują cego sekwencję aminokwasową zidentyfikowaną jako SEQ ID NO. 2.
Wynalazek dotyczy również polinukleotydu kodującego peptyd zdefiniowany powyżej do zastosowania leczniczego.
Wynalazek dotyczy także szczepionki, która charakteryzuje się tym, że zawiera peptyd zdefiniowany powyżej.
Wynalazek dotyczy ponadto zastosowania peptydu i polinukleotydu zdefiniowanych powyżej do poszukiwania potencjalnych leków lub wykrywania zjadliwości.
Wynalazek dotyczy również zastosowania peptydu i polinukleotydu zdefiniowanych powyżej do wytwarzania leku do zastosowania w leczeniu lub profilaktyce stanu związanego z infekcją bakteryjną Streptococcus grupy B.
W szczególności infekcję stanowi infekcja ogniskowa lub infekcja układu moczowego.
Wynalazek dotyczy ponadto przeciwciała wywołanego przeciw peptydowi zdefiniowanemu powyżej.
Peptyd według wynalazku, obejmujący sekwencję aminokwasową zidentyfikowaną jako SEQ ID NO. 2, bądź jego homolog lub fragment, są użyteczne do zastosowania leczniczego, np. po wyizolowaniu.
Określenie „funkcyjne fragmenty” stosuje się w niniejszym opisie do zdefiniowania części genu lub peptydu, która zachowuje aktywność całego genu lub peptydu. Przykładowo funkcyjny fragment peptydu można stosować jako determinantę antygenową, użyteczną w szczepionce lub do wytwarzania przeciwciał.
PL 201 887 B1
Fragment genu można stosować do kodowania aktywnego peptydu. Alternatywnie fragment genu może być użyteczny w terapii genowej, specyficznie wpływając na gen typu dzikiego in vivo dla wywarcia wpływu terapeutycznego.
Z powodu lokalizacji zewną trzkomórkowej lub na powierzchni komórki, peptyd wedł ug wynalazku może być odpowiednim kandydatem do wytwarzania terapeutycznie skutecznej szczepionki przeciw GBS. Określenie „terapeutycznie skuteczna” w zamierzeniu obejmuje profilaktyczne działanie szczepionek. Przykładowo szczepionka może zawierać peptyd według wynalazku bądź środek do jego ekspresji do leczenia infekcji. Szczepionkę można podawać kobietom przed ciążą lub podczas ciąży w celu zabezpieczenia matki i noworodka przed infekcją GBS.
Peptyd według wynalazku lub odpowiedni gen można stosować do poszukiwania potencjalnych leków przeciwdrobnoustrojowych lub wykrywania zjadliwości.
Peptyd według wynalazku i polinukleotyd kodujący ten polipeptyd stosuje się do wytwarzania leku do zastosowania w leczeniu lub profilaktyce stanu związanego z infekcją bakteryjną Streptococcus grupy B, szczególnie infekcją ogniskową lub infekcją układu moczowego.
Chociaż opisano białko do zastosowania w leczeniu pacjentów uważa się, że zakresem wynalazku objęte są również zastosowania innych wyżej opisanych produktów w weterynarii. W szczególności peptydy lub szczepionki można stosować w leczeniu przewlekłego zapalenia sutka, zwłaszcza u krów.
Wynalazek opisano w odniesieniu do szczepu M732 paciorkowców grupy B. Jednakże wszystkie szczepy GBS oraz wiele innych szczepów bakteryjnych prawdopodobnie zawierają pokrewne peptydy lub białka, wykazujące homologię sekwencyjną do peptydu M732. Organizmy prawdopodobnie zawierające peptydy obejmują, ale nie ograniczają się do S. pneumoniae, S. pyogenes, S. suis,
S. milleri, Streptococcus grupy C i grupy G oraz Enterococcus. Szczepionki przeciw każdemu z tych wymienionych mikroorganizmów można opracować w taki sam sposób jak opisano dla GBS.
Korzystnie peptydy, które mogą być użyteczne do wytwarzania szczepionek, wykazują więcej niż 40% podobieństwa sekwencji do peptydu zidentyfikowanego w niniejszym opisie. Korzystniej peptydy wykazują więcej niż 60% podobieństwa sekwencji. Najkorzystniej, peptydy wykazują więcej niż 80% podobieństwa sekwencji, np. 95% podobieństwa.
Po scharakteryzowaniu genu możliwe jest zastosowanie jego sekwencji do ustalenia homologii w innych mikroorganizmach. W ten sposób można określić, czy inne mikroorganizmy posiadają podobne produkty na zewnętrznej powierzchni. Homologie sekwencji można ustalać przez przeszukiwanie istniejących baz danych, np. EMBL lub Genbank.
Peptydy według wynalazku lub białka można oczyszczać i izolować metodami znanymi w tej dziedzinie. W szczególności po zidentyfikowaniu sekwencji genu, możliwe będzie zastosowanie technik rekombinacji do ekspresji genu w odpowiednim gospodarzu. Można zidentyfikować aktywne fragmenty i homologi, i mogą one być użyteczne w terapii. Przykładowo peptydy lub ich aktywne fragmenty można stosować jako determinanty antygenowe w szczepionce do wywoływania odpowiedzi immunologicznej. Można je również stosować do wytwarzania przeciwciał, do biernej immunizacji lub w zastosowaniach diagnostycznych. Odpowiednie przeciwciała obejmują przeciwciała monoklonalne lub ich fragmenty, w tym jednołańcuchowe fragmenty fv. Metody wytwarzania przeciwciał będą oczywiste dla fachowców.
Przygotowywanie szczepionek opartych na atenuowanych mikroorganizmach jest znane fachowcom. Kompozycje szczepionek można formułować z odpowiednimi nośnikami lub adiuwantami, np. ałunem, jeśli jest to konieczne lub pożądane i, stosować w leczeniu dla zapewnienia skutecznej immunizacji przeciw paciorkowcom grupy B lub innym pokrewnym mikroorganizmom. Wytwarzanie preparatów szczepionek będzie oczywiste dla fachowca.
Ogólniej i, jak dobrze wiadomo fachowcom, do stosowania leczniczego można wybrać odpowiednią ilość składnika czynnego stosowanego zgodnie z wynalazkiem, tak jak i odpowiednie nośniki i zaróbki oraz drogi podawania. Czynniki te będzie się wybierać lub określać zgodnie ze znanymi kryteriami, takimi jak charakter/ciężkość stanu, który ma być leczony, rodzaj lub zdrowie osobnika itd.
Produkty opisane powyżej zidentyfikowano w następujący sposób.
Częściową bibliotekę genową chromosomalnego DNA GBS (szczep M732) przygotowano z użyciem wektorów plazmidowych pFW-phoA1, pFW-phoA2 i pFW-phoA3 (Podbielski, A. i inni, 1996,
Gene 177: 137-147). Plazmidy te posiadają konstytutywny marker oporności na antybiotyk, adenylotransferazę spektynomycynową, który nadaje wysoki poziom oporności na spektynomycynę i dlatego selekcja jest łatwa. Ponadto wektory te zawierają skrócony (pozbawiony sekwencji liderowej)
PL 201 887 B1 gen phoA alkalicznej fosfatazy Escherichia coli. Trzy wektory różnią się tylko pod względem ramki odczytu, w której znajduje się pozbawiony sekwencji liderowej gen phoA, w porównaniu z leżącym wcześniej w tej samej ramce miejscem restrykcyjnym BamHI. Ponieważ ten skrócony gen phoA E. coli nie ma odpowiedniej sekwencji liderowej do wydzielania na zewnątrz tego enzymu przez błonę bakteryjną, podczas namnażania tych trzech plazmidów w mutancie phoA E. coli (np. szczep DH5a) nie występuje zewnątrzkomórkowa aktywność alkalicznej fosfatazy. Chromogenny substrat alkalicznej fosfatazy, XP (5-bromo-4-chloro-3-indolilofosforan) nie wnika do nietkniętych komórek bakteryjnych i dlatego można wykrywać tylko aktywność wydzielanej lub związanej z powierzchnią alkalicznej fosfatazy. Gdy obecna jest aktywność wydzielanej lub związanej z powierzchnią alkalicznej fosfatazy, chromogenny substrat XP jest rozszczepiany z utworzeniem niebieskiego barwnika i odpowiednie kolonie bakteryjne można zidentyfikować na podstawie ich niebieskiej barwy.
Plazmidowy DNA całkowicie strawiono BamHI i zdefosforylowano z użyciem alkalicznej fosfatazy z krewetek. Genomowy DNA GBS częściowo strawiono Sau3AI, poddano frakcjonowaniu pod względem wielkości w gradiencie sacharozy i fragmenty o wielkości <1 kb zligowano z wytworzonymi wektorami pFW-phoA. Jako gospodarza do klonowania wybrano szczep DH5a E. coli, ponieważ jest on pozbawiony funkcyjnego genu phoA. Zrekombinowane plazmidy wyselekcjonowano na agarze Luria zawierającym 100 μg/ml spektynomycyny i 40 μg/ml chromogennego substratu XP. Transformanty E. coli zawierające plazmidy zawierające wstawkę DNA GBS, która komplementuje odpowiedzialną za wydzielanie sekwencję sygnałową pozbawionego sekwencji liderowej genu phoA zidentyfikowano na podstawie błękitnej barwy kolonii. W ten sposób przeszukano około 30000 różnych zrekombinowanych plazmidów zawierających wstawkę DNA GBS i do dalszych badań wybrano 83 zrekombinowane plazmidy, które komplementują pozbawiony sekwencji liderowej phoA.
W doświadczeniach tych wyselekcjonowano kilka klonów, z których każdy zawierał plazmid zawierający gen (lub jego część), który komplementuje pozbawiony sekwencji liderowej phoA.
Po zidentyfikowaniu genu w każdym klonie możliwe jest następnie otrzymanie sekwencji genu o pełnej długości, w opisany poniżej sposób.
Wykorzystując zidentyfikowany i zsekwencjonowany fragment genu, zaprojektowano startery oligonukleotydowe do sekwencjonowania genomowego DNA. Startery te zaprojektowano jako sekwencje w kierunku „na zewnątrz” od otrzymanej sekwencji. Po odczytaniu, otrzymaną sekwencję testowano dla sprawdzenia, czy osiągnięto końce 5' i 3' genu. Stwierdzano to przez sprawdzanie wobec sekwencji homologicznych, dla końca 5' obecności kodonu start, AUG (lub dopuszczalnego równoważnika) poprzedzanego przez sekwencję konsensu Shine-Dalgarno, a dla końca 3' obecności kodonu terminacji translacji (kodonu Stop).
Po zidentyfikowaniu genu o pełnej długości, zaprojektowano startery do amplifikacji produktu o pełnej długości.
Stosowane startery obejmowały miejsca rozpoznawane przez enzymy restrykcyjne (Ncol na końcu 5' i EcoO109I na końcu 3') dla umożliwienia późniejszego sklonowania produktu w stosowanym układzie ekspresyjnym Lactococcus.
Z zastosowaniem tych starterów przeprowadzono PCR i produkty sklonowano w wektorze klonującym pCR 2.1 (In Vitrogen). Po potwierdzeniu obecności sklonowanego fragmentu, DNA wycinano z użyciem enzymów restrykcyjnych Ncol i EcoO109I.
Wektor, do którego wstawiano ten fragment, był zmodyfikowaną wersją pNZ8048 (Kuipers, O.P. i inni (1998) J.Biotech. 64: 15-21). Wektor ten, zawierający miejsce początku replikacji w Lactococcus, marker oporności na chloramfenikol, promotor indukowalny nizyną i miejsce wielokrotnego klonowania, zmieniono przez zastąpienie miejsca wielokrotnego klonowania znacznikami 10X His, flankowanymi na końcu 5' miejscem Ncol, przedzielającym środek miejsca wielokrotnego klonowana (obejmującego miejsce EcoO109I) oraz kodonem Stop (terminacji) na końcu 3' znaczników His.
Gen będący przedmiotem zainteresowania wstawiano w taki sposób, aby znacznik 10X His znajdował się w pozycji 3' w stosunku do regionu kodującego. Po transformacji L. lactis (szczep NZ9000 - Kuipers, O. P. i inni (1998) supra) zrekombinowanym plazmidem, nastawiano płynną hodowlę o objętości 400 ml i translację białka indukowano przez dodanie do hodowli nizyny. Po inkubacji w ciągu 2 godzin, komórki zbierano i lizowano przez rozbijanie perełkami. Otrzymany lizat klarowano przez odwirowanie, a następnie przepuszczano przez kolumnę powinowactwa do metalu (Talon, Clonetech). Kolumnę przemywano ponownie przed elucją związanego białka imidazolem.
PL 201 887 B1
W celu zidentyfikowania frakcji zawierają cych wyznakowane His zrekombinowane białko, podwielokrotną próbkę z każdej frakcji analizowano metodą SDS-PAGE, poddawano blottingowi Western i testowano z użyciem przeciwciał przeciw His.
Otrzymane zrekombinowane białko stosowano następnie do immunizacji królików rasy nowozelandzkiej białej, pobrawszy przed immunizacją surowice przedodpornościowe. Po podaniu dawki przypominającej króliki uśmiercono i zbierano surowice. Surowice te stosowano w blottingach Western, testach ELISA i zwierzęcych modelach ochrony.
Przeprowadzono badania immunosorpcyjne z użyciem surowic otrzymanych w badaniach na zwierzętach.
Streptococcus grupy B hodowano w 20 ml bulionu Todd Hewitta (THB) w ciągu 8 godzin, zbierano i ponownie zawieszano w 5 ml PBS. Próbki o objętości 50 μΐ stosowano do opłaszczania studzienek 96 studzienkowej płytki (Nunc Immuno-Sorb). Pozostawiano je w temperaturze 4°C na noc dla umożliwienia adsorbcji bakterii na płytce. Płytki dwukrotnie przemywano PBS, a następnie blokowano 3% BSA w PBS w ciągu 1 godziny w temperaturze 37°C. Płytki ponownie przemywano. Wykonano kolejne 10-krotne rozcieńczenia surowic w PBS i 50 μl tych rozcieńczeń dodawano do studzienek płytki, w dwóch powtórzeniach. Płytki przykrywano i inkubowano w ciągu 1 godziny w temperaturze 37°C. Płytki przemywano, a następnie do każdej studzienki dodawano 50 μl drugiego, skierowanego przeciw immunoglobulinom królika, przeciwciała skoniugowanego z alkaliczną fosfatazą, o stężeniu 1:5000. Po inkubacji w temperaturze 37°C w ciągu godziny, płytki ponownie przemywano. Do każdej studzienki dodawano 50 μl substratu (PNPP) i prowadzono reakcję w ciągu 30 minut przed odczytaniem absorbancji przy długości fali 405 nm.
Przeprowadzono również badania ochrony zwierząt dla sprawdzenia skuteczności ochrony immunizowanych królików.
GBS M732 namnażano w THB do osiągnięcia środkowej fazy wzrostu logarytmicznego - w ciągu około 5 godzin. Komórki zliczano w komorze do liczenia komórek i bakterie rozcieńczano do otrzymania stężenia 2 x 107 bakterii na ml surowicy przedodpornościowej lub testowanej. Surowicę tę (50 μθ wstrzykiwano drogą dootrzewnową myszy w wieku 0-1 dnia. Obserwowano przeżywalność myszy w ciągu 48 godzin.
Wynalazek został zilustrowany poniższym przykładem.
P r z y k ł a d
Wyselekcjonowano klon zawierający plazmid oznaczony pho3-1. Plazmid ten zawierał gen (lub jego część), który komplementuje pozbawiony sekwencji liderowej phoA. Sekwencję nukleotydów genu i przewidywaną sekwencję aminokwasów genu przedstawiono jako SEQ ID NO. 1 i 2.
Przeprowadzono porównania sekwencji aminokwasów pho3-1.
Homologi produktu genu pho3-1 GBS można zidentyfikować w Streptococcus pyogenes, Streptococcus pneumoniae, Bacillus subtilis (yutD) i Enterococcus faecalis. Homologi S. pyogenes,
S. pneumoniae i E. faecalis zidentyfikowano na podstawie danych o sekwencji genomu i nie były dostępne żadne komentarze co do tożsamości genów lub produktów genów. W B. subtilis funkcja genu yutD jest nieznana. Należy jednakże zauważyć, że gen yutD jest położony w chromosomie B. subtilis w regionie zawierającym geny syntezy ściany komórkowej. Fakt, że ta sekwencja DNA komplementuje pozbawiony sekwencji liderowej gen phoA sugeruje, że produkt tego genu jest położony zewnątrzkomórkowo.
PL 201 887 B1
Wykaz sekwencji <110> Microscience Limited <12 0> Peptyd, polinukleotyd kodujący ten peptyd, szczepionka, zastosowanie peptydu i polinukleotydu kodującego ten peptyd oraz przeciwciało <130> RBP05973WO <14 0>
<14l>
<l€0> 2 <170> Patentln Wersja 2.1 <210> 1 , <211> 379 <212> DNA <213> grupa B streptococcus <220>
<221> CDS <222> (1)..(579) <400> 1
atg ega Met Arg 1 aaa Lys gaa Glu gtg aca cca gag atg ctt aac tat aat aag tat cct 48
Yal 5 Thr Pro Glu Met Leu Asn Tyr Asn Lys Tyr Pro
10 15
ggc cca cag ttt att cac ttt gaa aat atc gtt aaa agt gat gat att 96
Gly Pro Gin Phe 20 Ile His Phe Glu Asn Ile Val Lys Ser 25 Asp Asp 11» 30
gaa ttt , caa ctt gtt att aat gaa aaa tea get ttt gat gtg act gtc 144
Glu phe Gin 35 Leu Yal Ile Asn Glu 40’ Lys Ser Ala Phe Asp 45 Val Thr Val
ttt gga caa cgt ttt tet gag att tta tta aaa tat gat ttt atc gtt 192
Phe Gly 50 Gin Arg Phe ser Glu 55 Ile Leu Leu Lys Tyr Asp 60 Phe Ile Yal
ggc gat tgg ggt aac gag cag ttg agg eta aga ggc ttt tac aaa gat 240
Gly Asp 65 Trp Gly Asn Glu Gin 70 Łeu Arg Leu Arg Gly Phe 75 Tyr Lys Asp 80
get agt acg att aga aaa aat gc cgg att tea cgt tta gaa gat tat 288
Ala Ser Thr Ile Arg 85 Lys Asn Ser Arg Ile Ser Arg Leu 90 Glu Asp Tyr 95
att aaa gag tat tgt aac ttt ggt tgt get tat ttt gtg ttg gag aat 336
Xle Lys Glu Tyr Cys Asn Phe Gly cye Ala Tyr Phe Yal Leu Glu Asn
PL 201 887 B1
100 105 110
cca aat Pro Asn cct Pra 115 aga Arg gat att aaa ttt gat gat gaa aga cct Arg Pro 125 cat aag cgt His Łys Arg 384
Asp Ile Lys Phe 120 Asp Asp GlU
cgt aag tca aga tcc aaa tca caa tca tca aag tca caa act aga aat 432
Arg Lys Ser Arg Ser Lys Ser Gin ser Ser Lys Ser Gin Thr Arg Asn
130 135 140 aat cgt tce cag tca aat gcc aat gct cat ttt aca agt aaa aag cgt 480
Asn Arg Ser Gin Ser Asn Ala Asn Ala His Phe Thr Ser Łys Lys Arg
145 150 155 ' 160
aaa gac aca aaa cgc cgt caa gaa cgt cat att aaa gaa gag caa gat 528
Lys Asp Thr Łys Arg Arg Gin Glu Arg His Ile Lys Glu Glu Gin Asp
165 170 175
aag gaa atg acc tct gca aag cag cat ttg tta tte gta aga aaa aat 576
Lys Glu Met Thr Ser Ala Lys Gin His Leu Leu Phe Val Arg Lys Asn
180 185 190
taa
579 <210> 2 <211> 192 <212> PRT <213> grupa B streptococcus <40O> 2
Met 1 Arg Łys GlU Val 5 Thr Pro Gili Met Leu 10 Asn Tyr Asn Lys Tyr 15 Pro
Gly Pro Gin Phe 20 Ile His Phe Glu Asn 25 Ile Val Lys Ser Asp 30 Asp Ile
Glu Phe Gin 35 Leu Val Ile Asn Glu 40 Lys Ser Ala Phe Asp 45 Val Thr Val
Phe Gly 50 Gin Arg Phe Ser Glu 55 Ile Leu Leu Lys Tyr Asp 60 Phe Ile Val
Gly Asp 65 Trp Gly Asn Glu 70 Gin Leu Arg Leu Arg Gly Phe 75 Tyr Lys Asp 80
Ala Ser Thr Ile . Arg Lys Asn Ser Arg Ile Ser Arg Leu Glu Asp Tyr
PL 201 887 B1
90 95
Ile Lys Glu Tyr Cys Asn Phe Gly Cys Ala Tyr Phe Val Leu Glu Asn 100 105 110
Pro Asn Pro Arg Asp Ile Lys Phe Asp Asp Glu Arg Pro His Lys Arg 115 120 125
Arg Lys 130 Ser Arg Ser Lys Ser 135 Gin Ser Ser Lys Ser 140 Gin Thr Arg Asn
Asn 145 Arg Ser Gin Ser Asn 150 Ala Asn Ala His Phe 155 Thr Ser Lys Lys Arg 160
Lys Asp Thr Lys Arg Arg 165 Gin Glu Arg His 170 Ile Lys Glu Glu Gin 175 Asp
Lys Glu Met Thr 180 Ser Ala Lys Gin His 185 Leu Leu Phe Val Arg 190 Lys Asn--
PL 201 887 B1

Claims (9)

  1. Zastrzeżenia patentowe
    1. Peptyd obejmujący sekwencję aminokwasową zidentyfikowaną jako SEQ ID NO. 2, bądź jego homolog lub fragment, który to homolog lub fragment jest zdolny do wywoływania przeciwciał z powinowactwem do peptydu, do zastosowania leczniczego.
  2. 2. Peptyd według zastrz. 1, obejmujący sekwencję aminokwasową zidentyfikowaną jako SEQ ID NO. 2.
  3. 3. Polinukleotyd kodujący peptyd zdefiniowany w zastrz. 1 albo 2 do zastosowania leczniczego.
  4. 4. Szczepionka, znamienna tym, że zawiera peptyd zdefiniowany w zastrz. 1 albo 2.
  5. 5. Zastosowanie peptydu i polinukleotydu zdefiniowanych w zastrz. 1 albo 2, albo 3 do poszukiwania potencjalnych leków lub wykrywania zjadliwości.
  6. 6. Zastosowanie peptydu i polinukleotydu zdefiniowanych w zastrz. 1 albo 2, albo 3 do wytwarzania leku do zastosowania w leczeniu lub profilaktyce stanu związanego z infekcją bakteryjną Streptococcus grupy B.
  7. 7. Zastosowanie według zastrz. 6, gdzie infekcję stanowi infekcja ogniskowa.
  8. 8. Zastosowanie według zastrz. 6, gdzie infekcję stanowi infekcja układu moczowego.
  9. 9. Przeciwciało wywołane przeciw peptydowi zdefiniowanemu w zastrz. 1 albo 2.
PL349320A 1998-12-22 1999-12-22 Peptyd, polinukleotyd kodujący ten peptyd, szczepionka, zastosowanie peptydu i polinukleotydu kodującego ten peptyd oraz przeciwciało PL201887B1 (pl)

Applications Claiming Priority (17)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GBGB9828356.7A GB9828356D0 (en) 1998-12-22 1998-12-22 Protein and compositions containing it
GBGB9828345.0A GB9828345D0 (en) 1998-12-22 1998-12-22 Protein and compositions containing it
GBGB9828355.9A GB9828355D0 (en) 1998-12-22 1998-12-22 Protein and compositions containing it
GBGB9828350.0A GB9828350D0 (en) 1998-12-22 1998-12-22 Protein and compositions containing it
GBGB9828349.2A GB9828349D0 (en) 1998-12-22 1998-12-22 Protein and compositions containing it
GBGB9828359.1A GB9828359D0 (en) 1998-12-22 1998-12-22 Protein and compositions containing it
GBGB9828357.5A GB9828357D0 (en) 1998-12-22 1998-12-22 Protein and compositions containing it
GBGB9828353.4A GB9828353D0 (en) 1998-12-22 1998-12-22 Protein and compositions containig it
GBGB9828352.6A GB9828352D0 (en) 1998-12-22 1998-12-22 Protein and compositions containing it
GBGB9828354.2A GB9828354D0 (en) 1998-12-22 1998-12-22 Protein and compositions containing it
GBGB9900083.8A GB9900083D0 (en) 1999-01-04 1999-01-04 Protein and compositions containing it
GBGB9900085.3A GB9900085D0 (en) 1999-01-04 1999-01-04 Protein and compositions containing it
GBGB9900086.1A GB9900086D0 (en) 1999-01-04 1999-01-04 Protein and compositions containing it
GBGB9900082.0A GB9900082D0 (en) 1999-01-04 1999-01-04 Protein and compositions containing it
GBGB9900084.6A GB9900084D0 (en) 1999-01-04 1999-01-04 Protein and compositions containing it
GBGB9901922.6A GB9901922D0 (en) 1999-01-28 1999-01-28 Protein and compositions containing it
GBGB9901916.8A GB9901916D0 (en) 1999-01-28 1999-01-28 Protein and compositions containing it

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL349320A1 PL349320A1 (en) 2002-07-15
PL201887B1 true PL201887B1 (pl) 2009-05-29

Family

ID=27585888

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL349320A PL201887B1 (pl) 1998-12-22 1999-12-22 Peptyd, polinukleotyd kodujący ten peptyd, szczepionka, zastosowanie peptydu i polinukleotydu kodującego ten peptyd oraz przeciwciało

Country Status (22)

Country Link
US (3) US6812021B1 (pl)
EP (3) EP1757696A3 (pl)
JP (1) JP2002533083A (pl)
KR (3) KR100790653B1 (pl)
CN (1) CN101066447A (pl)
AP (1) AP1502A (pl)
AT (1) ATE353367T1 (pl)
AU (1) AU776735B2 (pl)
CA (1) CA2354135A1 (pl)
CY (1) CY1106559T1 (pl)
CZ (1) CZ20012172A3 (pl)
DK (1) DK1141308T3 (pl)
EA (1) EA004444B1 (pl)
ES (1) ES2281977T3 (pl)
HU (1) HUP0104825A3 (pl)
NO (1) NO20013102L (pl)
NZ (3) NZ512297A (pl)
OA (1) OA11734A (pl)
PL (1) PL201887B1 (pl)
PT (1) PT1141308E (pl)
SI (1) SI1141308T1 (pl)
WO (1) WO2000037646A2 (pl)

Families Citing this family (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CZ20012174A3 (cs) * 1998-12-22 2002-02-13 Microscience Limited Vnějąí povrchové proteiny, jejich geny a jejich pouľití
US6890539B2 (en) * 1998-12-22 2005-05-10 Microscience, Ltd. Genes and proteins, and their use
EA004444B1 (ru) 1998-12-22 2004-04-29 Майкросайенс Лимитед Гены и белки и их применение
GB0105922D0 (en) * 2001-03-09 2001-04-25 Microscience Ltd Genes and proteins, and their use
US6849407B2 (en) 2000-08-31 2005-02-01 Mayo Foundation For Medical Education And Research Detection of varicella-zoster virus
GB0021977D0 (en) 2000-09-07 2000-10-25 Pyrosequencing Ab Method of sequencing DNA
US7691571B2 (en) 2001-01-31 2010-04-06 Mayo Foundation For Medical Education And Research Detection of bordetella
US7074598B2 (en) 2002-09-25 2006-07-11 Mayo Foundation For Medical Education And Research Detection of vancomycin-resistant enterococcus spp.
US7365176B2 (en) 2002-09-26 2008-04-29 Mayo Foundation For Medical Education And Research Detection of Epstein-Barr virus
EP1567868A4 (en) * 2002-12-02 2008-02-06 Biosynexus Inc CELL WALL TEICHONSURE AS A GOAL F RANTI-STAPHYLOCOCCUS THERAPIES AND VACCINATES
US7427475B2 (en) 2003-11-18 2008-09-23 Mayo Foundation For Medical Education And Research Detection of group B streptococcus
EP2104512A2 (en) * 2006-12-21 2009-09-30 Emergent Product Development UK Limited Streptococcus proteins, and their use in vaccination
AU2013261006B2 (en) 2012-05-18 2016-07-14 Tata Consultancy Services Limited Method and system for determining and implementing a viable containment design of a data center
CN106822885B (zh) 2017-02-16 2020-06-30 清华大学 肺炎链球菌疫苗

Family Cites Families (38)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5328996A (en) * 1989-03-29 1994-07-12 University Of Florida Research Foundation, Inc. Bacterial plasmin receptors as fibrinolytic agents
WO1993014198A1 (en) 1992-01-08 1993-07-22 The Rockefeller University Multifunctional surface protein of streptococci
US6015889A (en) * 1993-03-19 2000-01-18 Gunnar Lindahl Protein rib, a cell surface protein that confers immunity to many strains of the group B streptococcus: process for purification of the protein, reagent kit and pharmaceutical composition
SG47049A1 (en) * 1993-03-19 1998-03-20 Gunnar Lindahl Protein rib a cell surface protein that confers immunity to manu strains of the group b strepto-ccus process for purification of the protein reagent kit
US5807978A (en) * 1995-06-07 1998-09-15 Kokolus; William J. Immunogenic peptides of prostate specific antigen
US6420135B1 (en) 1996-10-31 2002-07-16 Human Genome Sciences, Inc. Streptococcus pneumoniae polynucleotides and sequences
US7196164B2 (en) * 1997-07-08 2007-03-27 Human Genome Sciences, Inc. Secreted protein HHTLF25
US6800744B1 (en) * 1997-07-02 2004-10-05 Genome Therapeutics Corporation Nucleic acid and amino acid sequences relating to Streptococcus pneumoniae for diagnostics and therapeutics
US7129340B1 (en) * 1997-07-02 2006-10-31 sanofi pasteur limited/sanofi pasteur limitée Nucleic acid and amino acid sequences relating to streptococcus pneumoniae for diagnostics and therapeutics
US6380370B1 (en) * 1997-08-14 2002-04-30 Genome Therapeutics Corporation Nucleic acid and amino acid sequences relating to Staphylococcus epidermidis for diagnostics and therapeutics
JP4637350B2 (ja) 1998-02-20 2011-02-23 アイディ・バイオメディカル・コーポレイション グループｂ連鎖球菌抗原
US6248329B1 (en) * 1998-06-01 2001-06-19 Ramaswamy Chandrashekar Parasitic helminth cuticlin nucleic acid molecules and uses thereof
DK1096954T3 (da) 1998-07-14 2005-01-31 Wyeth Corp Adjuvans- og vaccinesammensætninger indeholdende monophosphoryllipid A
JP2002531054A (ja) 1998-07-27 2002-09-24 マイクロビアル テクニクス リミティッド Ｂ群連鎖球菌由来の核酸およびタンパク質
IL142831A0 (en) 1998-10-30 2002-03-10 Janssen Pharmaceutica Nv An unusual retrotransposon from the yeast candida albicans
AU1818200A (en) 1998-11-05 2000-05-22 Daniel Carucci Chromosome 2 sequence of the human malaria parasite (plasmodium falciparum) and proteins of said chromosome useful in anti-malarial vaccines and diagnostic reagents
EA004444B1 (ru) 1998-12-22 2004-04-29 Майкросайенс Лимитед Гены и белки и их применение
CZ20012174A3 (cs) * 1998-12-22 2002-02-13 Microscience Limited Vnějąí povrchové proteiny, jejich geny a jejich pouľití
US6890539B2 (en) * 1998-12-22 2005-05-10 Microscience, Ltd. Genes and proteins, and their use
EP1169343B1 (en) 1999-04-09 2006-05-24 Heska Corporation Flea head, nerve cord, hindgut and malpighian tubule nucleic acid molecules, proteins and uses thereof
US6605709B1 (en) * 1999-04-09 2003-08-12 Genome Therapeutics Corporation Nucleic acid and amino acid sequences relating to Proteus mirabilis for diagnostics and therapeutics
GB9921125D0 (en) 1999-09-07 1999-11-10 Microbial Technics Limited Proteins
AU1478301A (en) 1999-11-09 2001-06-06 Glaxo Group Limited Staphylococcus epidermidis nucleic acids and proteins
AU2001254857A1 (en) 2000-04-11 2001-10-23 Institut Pasteur Listeria monocytogenes genome, polypeptides and uses
US6974667B2 (en) 2000-06-14 2005-12-13 Gene Logic, Inc. Gene expression profiles in liver cancer
NZ594877A (en) 2000-10-27 2012-07-27 Novartis Vaccines & Diagnostic Nucleic acids and proteins from streptococcus groups A & B
WO2002077183A2 (en) 2001-03-21 2002-10-03 Elitra Pharmaceuticals, Inc. Identification of essential genes in microorganisms
GB0107658D0 (en) 2001-03-27 2001-05-16 Chiron Spa Streptococcus pneumoniae
GB0107661D0 (en) 2001-03-27 2001-05-16 Chiron Spa Staphylococcus aureus
CN1636062A (zh) 2001-04-16 2005-07-06 惠氏控股公司 编码多肽抗原的新肺炎链球菌可读框及其应用
EP2545937A1 (en) 2001-06-05 2013-01-16 The Regents Of The University Of Michigan Nanoemulsion vaccines
WO2003009869A1 (en) 2001-07-26 2003-02-06 Chiron Srl. Vaccines comprising aluminium adjuvants and histidine
GB0210128D0 (en) 2002-05-02 2002-06-12 Chiron Spa Nucleic acids and proteins from streptococcus groups A & B
ES2504166T3 (es) 2002-09-13 2014-10-08 Novartis Vaccines And Diagnostics, Inc. Vacuna de estreptococo del grupo B
EP2287177A3 (en) 2003-05-07 2011-08-31 Intercell AG Streptococcus agalactiae antigens I + II
CA2537742C (en) 2003-09-15 2014-07-22 Chiron Corporation Immunogenic compositions for streptococcus agalactiae
AU2005335216A1 (en) 2004-10-05 2007-02-15 Wyeth Probe arrays for detecting multiple strains of different species
CA2591510A1 (en) 2004-12-22 2006-06-29 Novartis Vaccines And Diagnostics, Inc. Group b streptococcus

Also Published As

Publication number Publication date
HK1039353A1 (en) 2002-04-19
CY1106559T1 (el) 2012-01-25
EP1141308B1 (en) 2007-02-07
AU776735B2 (en) 2004-09-23
WO2000037646A2 (en) 2000-06-29
PL349320A1 (en) 2002-07-15
EA004444B1 (ru) 2004-04-29
CA2354135A1 (en) 2000-06-29
US20090274717A1 (en) 2009-11-05
KR20070101197A (ko) 2007-10-16
AP1502A (en) 2005-12-20
NZ512297A (en) 2003-12-19
HUP0104825A2 (hu) 2002-04-29
NO20013102L (no) 2001-08-10
AP2001002189A0 (en) 2001-06-30
EP1141308A2 (en) 2001-10-10
US20080181908A1 (en) 2008-07-31
US7419672B2 (en) 2008-09-02
KR20010089844A (ko) 2001-10-11
NZ535122A (en) 2006-04-28
US6812021B1 (en) 2004-11-02
PT1141308E (pt) 2007-05-31
EP2105504A2 (en) 2009-09-30
WO2000037646A3 (en) 2000-10-26
KR20080050550A (ko) 2008-06-09
EP1757696A2 (en) 2007-02-28
OA11734A (en) 2005-05-12
NO20013102D0 (no) 2001-06-21
CN101066447A (zh) 2007-11-07
SI1141308T1 (sl) 2007-08-31
ES2281977T3 (es) 2007-10-01
KR100790653B1 (ko) 2007-12-31
EA200100700A1 (ru) 2001-12-24
DK1141308T3 (da) 2007-06-04
ATE353367T1 (de) 2007-02-15
JP2002533083A (ja) 2002-10-08
AU1878000A (en) 2000-07-12
EP1757696A3 (en) 2008-10-29
EP2105504A3 (en) 2010-01-06
NZ526879A (en) 2004-12-24
CZ20012172A3 (cs) 2001-11-14
HUP0104825A3 (en) 2008-04-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US20090274717A1 (en) Genes and proteins, and their use
JPH09502604A (ja) Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒｊｅｊｕｎｉ抗原、並びにそれらの製造及び利用
KR20080052527A (ko) 외표면 단백질들, 그들의 유전자들 및 그들의 사용
US7063850B1 (en) Protective antigen of group A Streptococci
JP2002533084A (ja) Ａ群のＳｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｉの防御的な抗原（ＳＰＡ）
US7592011B2 (en) Genes and proteins, and their use
US20070184500A1 (en) Host Receptor for Pathogenic Bacteria
KR20080052693A (ko) 유전자, 단백질 및 그들의 용도
AU3094700A (en) Novel fibronectin-binding protein
WO2002072623A1 (en) Genes and proteins, and their use
HK1039353B (en) Group b streptococcus proteins, and their use
JP2001504335A (ja) ストレプトコッカス・ユベリスのラクトフェリン結合タンパク質
ZA200104818B (en) Genes and proteins, and their use.
US20030165527A1 (en) Novel fibronectin-binding protein
PL195869B1 (pl) Peptyd, szczepionka, zastosowanie tego peptydu i przeciwciało
DE69935080T2 (de) Gruppe-b-streptococcus-proteine und deren verwendung
NZ543923A (en) Pho3-18 for a theraputic use, particulary in bacterial infection.
HK1039339B (en) Outer surface proteins, their genes, and their use

Legal Events

Date Code Title Description
LAPS Decisions on the lapse of the protection rights

Effective date: 20091222