[go: up one dir, main page]

PL166526B1 - S posób wytwarzania nowych polipeptydów PL PL - Google Patents

S posób wytwarzania nowych polipeptydów PL PL

Info

Publication number
PL166526B1
PL166526B1 PL91288761A PL28876191A PL166526B1 PL 166526 B1 PL166526 B1 PL 166526B1 PL 91288761 A PL91288761 A PL 91288761A PL 28876191 A PL28876191 A PL 28876191A PL 166526 B1 PL166526 B1 PL 166526B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
alkyl
group
formula
substituted
isopropyl ester
Prior art date
Application number
PL91288761A
Other languages
English (en)
Other versions
PL288761A1 (en
Inventor
Dennis J Hoover
Bruce A Lefker
Robert L Rosati
Original Assignee
Pfizer
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Pfizer filed Critical Pfizer
Publication of PL288761A1 publication Critical patent/PL288761A1/xx
Publication of PL166526B1 publication Critical patent/PL166526B1/pl

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/55—Protease inhibitors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/12—Antihypertensives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D205/00—Heterocyclic compounds containing four-membered rings with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D205/02—Heterocyclic compounds containing four-membered rings with one nitrogen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
    • C07D205/04—Heterocyclic compounds containing four-membered rings with one nitrogen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings
    • C07D211/04—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D211/06—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D211/08—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to ring carbon atoms
    • C07D211/18—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C07D211/26—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms with hydrocarbon radicals, substituted by nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings
    • C07D211/04—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D211/06—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D211/36—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D211/56—Nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings
    • C07D211/04—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D211/06—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D211/36—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D211/56—Nitrogen atoms
    • C07D211/58—Nitrogen atoms attached in position 4
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings
    • C07D211/04—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D211/68—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member
    • C07D211/72—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms, with at the most one bond to halogen, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D211/74—Oxygen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D333/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom
    • C07D333/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
    • C07D333/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings not substituted on the ring sulphur atom
    • C07D333/06—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings not substituted on the ring sulphur atom with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to the ring carbon atoms
    • C07D333/24—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/12—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D409/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D409/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/02—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/02—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link
    • C07K5/0202—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link containing the structure -NH-X-X-C(=0)-, X being an optionally substituted carbon atom or a heteroatom, e.g. beta-amino acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/02—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link
    • C07K5/0227—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link containing the (partial) peptide sequence -Phe-His-NH-(X)2-C(=0)-, e.g. Renin-inhibitors with n = 2 - 6; for n > 6 see C07K5/06 - C07K5/10
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06078—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aromatic or cycloaliphatic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06139—Dipeptides with the first amino acid being heterocyclic
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Pyridine Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Hydrogenated Pyridines (AREA)

Description

Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania nowych polipeptydów, użytecznych jako czynniki przeciwnadciśnieniowe.
Proteolityczny enzym renina jest znana jako aktywny czynnik rozczepiający in vivo angiotensynogen,występującą w plazmie glikoproteinę. W przypadku ludzkiego angiotensynogenu rozszczepienie zachodzi pomiędzy leucyną i waliną, 10 i 12 resztą aminokwasową w N-^rmii^^ar^^m końcu angiotensynogenu. W wyniku działania rozszczepiającego reniny tworzy się N-tenminalny dekapeptyd znany jako angiotensynogen I, który następnie w ustroju jest rozszczepiany do oktapeptydu, znanego jako angiotensynogen II, o którym wiadomo, że jest silną substancją zdolną do wywoływania znacznego wzrostu ciśnienia. Przyjmuje się, że działa on drogą wywoływania skurczu naczyń krwionośnych i uwalniania z gruczołów nadnercza zatrzymującego sód hormonu aldosteronu. Tak więc, układ renina-angiotensynogen jest uważany za czynnik sprawczy w niektórych postaciach nadciśnienia i niewydolności krążeniowej prawokomorowej.
Jednym ze sposobów przeciwdziałania szkodliwym skutkom funkcjonowania systemu renina-angiotensynogen jest podawanie substancji zdolnej do hamowania rozszczepiania angiotensynogenu przez reninę. Znanych jest wiele takich substancji, np. są to przeciwciała przeciwreninowe, pepstatyna i naturalne związki fosfolipidowe.
W europe^im zgłoszeniu patentowym nr 0 266 950 /Pfizer Inc./ opisano polipeptydy nor-sttaynowe i nor-cyklostatynowe będące inhibitorami reniny.
W europejskim zgłoszeniu patentowym nr 0 324 239 /Merck and Co., Inc./ przedstawiono trójpeptydowe inhibitory reniny zawierające N-terminale grupy ureidowe lub sulfamidowe.
W europe^tom zgłoszeniu patentowym nr 0 229 667 /Abbot Laboratories/ zastrzeżono co następuje:
Związek hamujący reninę o wzorze 54, w którym A oznacza atom wodoru, niższą grupę alkilową, grupę aryloalkilową, grupę o wzorze OR 10 lub grupę o wzorze SIR 10, gdzie R10 oznacza atom wodoru, niższą grupę alkilową lub aminoalkilową, albo grupę o wzorze NRi 1R12, w którym R11 i R12 oznaczają niezależnie od siebie grupę aminoalkilową, atom wodoru, niższą grupę alkilową, cyjanoalkilową lub hydroksyalkUową; albo A oznacza grupę o wzorze 55 lub 56, gdzie B oznacza grupę NH, grupę alkiloaminową, atom tlenu, atom siarki, grupę Cl lub grupę CHOH, oraz R13 oznacza niższą grupę alkilową, cykloalkilową, arylową, aryloalkilową, alkoksylową, alkenylooksylową, hydroksyalkoksylową, dwuhydroksyalkoksylową, aryloalkoksylową, aryloalkoksyaakilową, aminową, alkiloaminową, dwualkiloaminową, /hydroksyarkilo/-/alkilo/aminową, aminoalkilową, N-<ochronioną aminoalkilową, alkiloaminoalkilową, /N-ochronioną//alkiio/aminoalkilową, dwualkiloaminoalkilową, heterocykioalkilową albo niepodstawioną grupę heterocykliczną lub jednopodstawioną grupę heterocykliczną, gdzie podstawnikiem jest grupa hydroksylowa, keto, aminowa, alkiloaminowa, dwualkiloaminowa lub niższa grupa alkilowa, przy czym jeśli grupa heterocykliczna jest nienasycona podstawnikiem nie może być grupa keto; W oznacza grupę o wzorze C=O lub o wzorze CHOH; U oznacza grupę o wzorze CH2 lub NR2 z tym, że gdy W oznacza grupę o wzorze CHOH, wówczas U
166 526 oznacza grupę o wzorze CH2; Ri oznacza niższą grupę alkilową, cykloalkilometylową, benzylową, 4-metoksybenzylową, chlorowcobenzylową, Ż1-naftylo/metylową, /2-naftylo/metylową, /4-imidiaiolilo/metylową, α, α-dwumetylbbnnzylowąi --bnnzylokkseetylową, fenetylow ą, fenoksylową, tiofenoksylową lub anilinową; przy czym jeśli Ri oznacza grupę fenoksylową, tiofenoksy!ową lub anilinową wówczas B oznacza grupę o wzorze CH2 lub CHOH albo A oznacza atom wodoru, R2 oznacza atom wodoru lub niższą grupę alkilową; R3 oznacza niższą grupę alkilową, niższą grupę alkenylową, grupę /alkoksy/alkoksyalkilową, /tioalkoksy/alkilową, benzylową albo metylową podstawioną pierścieniem heterocyklicznym; R4 oznacza niższą grupę alkilową, cykloalkilometylową lub benzylową; R5 oznacza grupę winylową, formylową, hydroksymetylową lub atom wodoru; R7 oznacza atom wodoru lub niższą grupę alkilową; R i R9 oznaczają niezależnie od siebie grupę hydroksylową lub aminową; oraz Re oznacza atom wodoru, niższą grupę alkilową, winylową lub aryloalkilową; przy czym, gdy R 5 i R7 oznaczają atom wodoru a Rsi R9 oznaczają atom wodoru, wówczas atom węgla zawierający grupę R5 ma konfigurację R a atom węgla zawierający grupę Ró ma konfigurację S; albo dopuszczalne w farmacji sole i estry powyższego związku.
Sposób według wynalazku dotyczy wytwarzania innych związków niż ujawnione we wspomnianym zgłoszeniu europejskim nr 0 229 667.
Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania związków o wzorze 1, w którym Q oznacza grupę o wzorze 2, pod warunkiem, że R 7 może być nieobecny i jeżeli R 7 nie występuje, to wtedy atom azotu nie ma dodatniego ładunku i X' jest nieobecny, X' oznacza dopuszczalny w farmacji anion lub anion z uwspólnioną parą elektronów, 1 oznacza liczbę 0, 1, 2 lub 3, m i n niezależnie od siebie oznaczają liczbę 0, 1 lub 2, Y oznacza grupę CH lub atom azotu, R1 i R2 oznaczają niezależnie od siebie atom wodoru, grupę Cl.--αlkilową, aminoOC1-8^1k.nl:^w;ą, hydrokss-Clα-αlkilową, C1-6-alkoksy-C2-8-alkilową, C1-6-^llki^oamino^C2-8-^llki^^wą, fenylową, naftylową, pirydylową, imidazolilową, tiazoinową, dwu-/Cl-8-alkilo/amino-C2---alkilową albo Cl-8-αlyokskkakbonylo-Cl-8-alkilową, albo R1 i r2 razem z atomem azotu, do którego są przyłączone, tworzą 4-8αznonowy pierścień zawierający 0, 1 lub 2 atomy wybrane spośród atomów tlenu, azotu i siarki, zaś pozostałe atomy w pierścieniu są atomami węgla, a pierścień ewentualnie zawiera jedno, lub dwa lub trzy podwójne wiązania, a także ten pierścień ewentualnie zawiera jeden lub dwa podstawniki wybrane spośród grupy hydroksylowej lub grupy Clα-αlkilowej, przy czym każda grupa hydroksylowa, o ile występuje, jest przyłączona do atomu węgla w pierścieniu, a każda ewentualnie obecna grupa Clα-αlkiiowk jest przyłączona do atomu węgla lub azotu w pierścieniu, R7 oznacza grupę Cl---alkilową, fbnylo-Clα-αlkiiową, fenylo-Clα-αlkilo-Cl--klkilokminową, Z oznacza grupę CH2, atom tlenu lub grupę o wzorze nR1, w którym r1 oznacza atom wodoru lub grupę Cl-5-alkilową, D i E niezależnie od siebie oznaczają atom wodoru lub grupę Clα-alkilową, albo D i E razem z atomem węgla, do którego są przyłączone, tworzą pierścień cyklopropylowy, cyklobutylowy lub cyklopentylowy, Rr oznacza grupę fenylową, podstawioną grupę fenylową, C5-7-cykioalkilową, C5-7-cykioalkilombtylową, 1 -naftylową, 2-naftylową, podstawioną grupę C5α-cykioalkilową, fenylometylową, podstawioną grupę fenylometylową, 2-8ienylową, podstawioną grupę 2--ienylową, 3-8ienylową lub podstawioną grupę 3-8ienylową, przy czym podstawnikami w grupie fenylowej, C5-- cykloalkilowej, fenylometylowej, 2-8ienylowej lub 3-8ienylowej są jeden lub dwie grupy, takie jak grupa Cl-5-alkoksylowk, Clα-alkiiowa, atom chlorowca i grupa hydroksylowa, R4 oznacza grupę Cl---αlkilową, podstawioną grupę C1--- alkilową, w której grupa alkilowa jest podstawiona grupą hydroksylową lub 17 β1€^γ^£11^ϊ fluoiu, grupę HCF2S-Cl.--αlkiiowo, 4-8mid£kolliometylową, 4-8iaanliiometylową, Cl---alkbnylomeSylową, Cl-8-alkilo-Cl-8-alkilową albo Cl---alkllo-S-Cl-8-alkllową, R5 oznacza grupę 2-8ienylową, 3-tienylrwą, C5-7-cyldoalkilową, C5-7-cykioalkenylową, 1,4-cyklohbkkkdienylową, Cl---α8kilową, podstawioną grupę Cl-8-αlkilową, Cl---αlkoOsklową, fenylową lub podstawioną fenylową, w których to grupach jednym lub dwoma podstawnikami są takie grupy jak Cl-5-alkoksylowk, Clα-alkilowa, atom chlorowca, grupa hydroksylowa lub grupa keto, albo grupa Clα-αlkilowa jest podstawiona 1 - 7 atomami fluoru, R6 oznacza grupę COO-C1-o-s1 kilową, COOCH2-Cl---8podstawioną/alkilΓwą, w której reszta alkilowa jest perfluorowana albo podstawiona 1 - 7 atomami fluoru, grupę Cl8-a8kiioΓiometylową, 2--midazolilową, 2-8iazolilową lub 2--blc^^^oll^^^ą, które to grupy 2--midkM^lilowk, 2-8iazolllowa i 2-oksazolllowa mogą być
166 526 ewentualnie jedno- lub dwupodstawione przy atomach węgla pierścienia jednym lub dwoma podstawnikami wybranymi niezależnie z atomu wodoru, grupy C1--alkilowej, C2 -Cs-alkenylowej, atomu chlorowca lub grupy Ci-5-alkoksykarbonylowej, a wspomniana grupa imidazolilowa może dodatkowo być podstawiona przy jednym z atomów azotu w pierścieniu grupą C1--alkilową, grupę fenylową, Ci--cykioalkilową, grupę o wzorze CONR 16Rn, w którym i R17 niezależnie od siebie wybrane są z grup podstawników podanych uprzednio w definicji R1 i R2, z tym wyjątkiem, że R16 i Rn nie mogą razem z atomem azotu, do którego są przyłączone, tworzyć pierścienia, albo grupę o wzorze CONHR8, w którym R8 oznacza grupę Cl-8-alkilową lub grupę Cl--alkilową podstawioną 1 - 3 atomami chlorowca albo grupę 4-morfolinową, tiazolilową lub imidazolilową, albo r6 oznacza grupę o wzorze 3 lub grupę o wzorze 4, w których to wzorach j oznacza liczbę 1 lub 2, Rn oznacza atom wodoru, grupę C1-6- alkilową lub grupę CH2OH, M oznacza atom tlenu lub siarki albo grupę o wzorze NR? 1, w którym Ri oznacza atom wodoru lub grupę Ci--alkilową, T oznacza atom tlenu lub siarki, E oznacza atom tlenu lub siarki, grupę C=CH2, grupę o wzorze NR4, w którym Rw oznacza atom wodoru lub grupę Cla-alkilową, albo grupę o wzorze CHRi, w którym Roznacza grupę €1---Ι1ίίΠον^, albo R-oznacza grupę o wzorze 5, w którym każde G oznacza niezależnie atom tlenu lub siarki a i oznacza niezależnie liczbę 2, 3 lub 4, i ich dopuszczalnej w farmacji soli, polegający na tym, że związek o wzorze 6, w którym Y, Z, D, E, R3, R4, R5, r6 m i n mają znaczenie podane uprzednio, poddaje się reakcji z (a) aminą o wzorze R^NH, w którym Ri i R, mają znaczenie podane uprzednio, w obecności odpowiedniego czynnika redukcyjnego, albo z (b) chlorowodorkiem aminy o wzorze R^NH, w którym Ri R, mają znaczenie podane uprzednio, i ewentualnie otrzymany produkt reakcji przekształca się w jego dopuszczalną w farmacji sól.
X' występujący we wzorze 2 jest na ogół jednowartościowym anionem (np. Cl '), ale może być także dwuwartościowym (np. SO4). Odpowiednimi dopuszczalnymi w farmacji anionami (X') są związki o wzorze -OCOIR0, w którym Rw oznacza grupę Cla2-alkilową, np. cytrynian i octan, fosforan, fluorek, chlorek, bromek, jodek, grupa o wzorze -OSO2 -Cl-l2-alkilowa i -OSO2-aenylo-Cla2-alkiiowa. Typowymi farmaceutycznymi anionami są takie jak octan, benzemosulfonian, benzoesan, wodorowęglan, wodorowinian, bromek, węglan, chlorek, cytrynian, dwuchlorowodorek, fumaran, glukoheptonian, glukonian, glutaminian, heksylorezorcynian, hydroksynaftoesan, jodek, izotionian, mleczan, laktobionian, jabłczan, maleinian, 2-fenylo-2hydroksyoctan, mezylan, metylobromek, metyloazotan, metylosiarczan, śluzan, azotan, embonian, pantotenian, fosforan, poligalakturonian, salicylan, stearynian, suboctan, sukcynian, siarczan, sól z taniną, winian.
Jeśli nie podano inaczej, grupy alkilowa, alkoksylowa i alkenylowa mogą mieć łańcuch prosty, rozgałęziony lub cykliczny, albo ich kombinację. Określenie atom chlorowca dotyczy atomu fluoru, chloru, bromu lub jodu. Jest jednak zrozumiałe, że grupa zawierająca tylko 1 lub 2 atomy nie może być grupą cykliczną. Przykładem grup alkilowych są takie jak metylowa, etylowa, propylowa, cyklopropylowa, izopropylowa, butylowa, III rz. -butylowa, cyklobutylowa, pentylowa, izopentylowa, cyklopentylowa, heksylowa, cykloheksylowa, itp.
Korzystnie wynalazek dotyczy wytwarzania związków o wzorze 1 i ich dopuszczalnych w farmacji soli, które spełniają jeden z następuj ących ośmiu warunków:
1. W grupie o wzorze 7, Ri r2, l, m, n i Y mają znaczenie podane uprzednio.
2. Y oznacza atom azotu.
-J
3. R oznacza grupę C--C7-cykioalkiIową, korzystnie cykloheksylową, grupę fenylową, 2--tenylową, benzylową, 3-tieny lo wą, 1 -nafty tową lub metoksyfenylową, korzystnie p-metoksyfenylową.
4. R4 oznacza grupę Cl-8-alkiiową, korzystnie C1^s-t^H^ilową, C2--aH<er^nlc^I^e^tt^y(ową, Ci--alkilotio-Ci--alkilową, korzystnie Cl-5-aIkilotio-Cl-3-alkilową, 4-imidazolilometylową lub 4 atiazolilometylową, przy czym grupy Crs-aakkiowe są korzystnie grupą metylową.
5. R5 oznacza grupę €1---Ι1ά1ονν4, fenylową lub C5-C7-cykioalkilową, korzystnie cykloheksylową, izopropylową lub fenylową.
6. Z oznacza grupę o wzorze CH2 lub NH lub atom tlenu.
7. r6 oznacza grupę -COO-Cl---alkiiową.
166 526
9
8. R i R oznaczają niezależnie od siebie atom nzocmnu, grupę Cue-alkilową lub dwu-Ci3-alkiloamino-C2-4-alkilową, albo R1 i R2 tworzą razem e atomem aebCu, do którego są przyłączone, pierścień morfoliny, 4-metylopiperaeyny, pirolidyny lub piperydyny. Korzystniej. R1 i r2 oznaczają niezależnie od siebie grupa metylową, etylową albo atom wodoru, albo R l i r2 razem z atomem azotu, do którego są przyłączone, tworzą pierścień pirolidyny, piperydyny lub metylopiperazyny. W szczególnie korzystnym przypadku wynalazek dotyczy sposobu wytwarzania związków, które spełniają 2 lub 3 albo wszystkie osiem warunków.
Związki o wzorze 1 mają zastosowanie w leczeniu choroby nadciśnieniowej, niewydolności sercowej prawbkbmorownj lub jaskry u ssaków. Choremu podaje się odpowiednią skuteczną ilość związku o wzorze 1 lub jego dopuszczalnej w farmacji soli, używane do tego celu preparaty farmaceutyczne zawierające w leczeniu nadciśnienia, niewydolności sercowej prawbkombrowej lub jaskry ilość związku o wzorze 1 lub jego dopuszczalnej w farmacji soli oraz dopuszczalny w farmacji nośnik. Korzystne preparaty zawierają wymienione uprzednio korzystne związki.
Dopuszczalnymi w farmacji solami związków o wzorze 1 wytwarzanymi sposobem według wynalazku są sole nietoksyczne w podawanych dawkach. Ponieważ związki o wzorze 1 mogą zawierać zasadowe grupy, możliwe jest tworzenie addycyjnych soli kwasowych. Do dopuszczalnych w farmacji addycyjnych soli kwasowych należą np. takie jak chlorowodorek, bromowodbrek, jbebwodornk, siarczan, wodorosiarczan, fosforan, wbeorofosforan, octan, mleczan, maleinian, mezylzn, fumaran, cytrynian, wodorbcytryąian, winian, dwuwinian, bursztynian, glukonian i cukrzan.
Dla skrócenia zapisów, tam gdzie to było możliwe, stosowane są powszechnie przyjęte skrócone oznaczenia dla poszczególnych aminokwasów. Np. fenyloalanina jest skrótowo oznaczona jako Phe, histydyna jako His, lizyna jako Lys, norcyklostatyna (wzór 8) jako norCSta, S-metylocystemajakb SMeCys, O-motylotyrozyna jako OMeTyr, norwalina jako Nuo, norleucyna jako Nie, itp. Gmpę ΙϊΙ-rz.-bbtoosyyarbonyyową stosowaną do ochrony grupy aminowej określa się jako Boc, grupa benzylooksykarbonylową jako CBZ oraz grupę N-ΠI-rz.-butbksykarbonylową w ^Ιζ^^ histydyny jako imBoc.
Wszystkie naturalne aminokwasy wchodzące w skład związków o wzorze 1 mają konfigurację L, występującą w naturalnych związkach, o ile nie podano inaczej.
Schemat 1 przedstawiony na rysunku ilustruje wytwarzanie związków o wzorze 1. We wzorach występujących w schemacie R1 R2, R3, R4, R5, R6, E, D, Y, Z, m, n i Q mają znaczenie podane dla wzoru 1.
Jak pokazano na schemacie 1, związek o wzorze 6, w którym m, n, Y, Z. D, E, R3. r4. r5, r6, mają znaczenie podane dla wzoru 1, poddaje się reakcji z aminą o wzorze R n R2NH, w którym R1 i Ri mają znaczenie podane uprzednio, lub z jej chlorowodorkiem, w obecności odpowiedniego czynnika redukcyjnego. Otrzymuje się związek o wzorze 1, w którym Q oznacza grupę o wzorze 2, czyli związek o wzorze 9 na schemacie 1.
Odpowiednimi czynnikami redukcyjnymi są borowodorki i cyjanbbbrowoebrki metali alkalicznych, takie np. jak borowodorek sodowy i trójzcetoksy boro wodorek sodowy. Czynnikiem redukującym może być także wodór w obecności bdkowindningo metalu szlachetnego jako katalizatora, takiegojzk platyna lub pallad. Korzystne są katalizatory palladowe, takie jak pallad nz węglu aktywnym i wodorotlenek palladu na węglu aktywnym. Proces prowadzi się pod ciśnieniem wodoru od około 7 do około 7000 kPa, korzystnie od około 70 do około 490 kPa. Jeśli stosuje się chlorowodorek aminy zamiast aminy, wówczas korzystne jest dodawanie 1-2 równoważników zasady, np. trójetylozminy lub octanu sodowego.
Reakcję prowzdzi się w obojętnym rozpuszczalniku, korzystnie w polarnym protonowym rozpuszczalniku, takimjak aceti^nitryl, dwumetyloformamid, dioksan, tetrahydrofuran, dwuimetbksyetzn i woda. Korzystnymi rozpuszczalnikami są niskocząsteczkowe alkohole, takie jak metanol, etanol i izbpropznol. Mieszaninę reakcyjną należy buforować w zzkresie od około 2,5 do około 7,5 pH, korzystnie od około 4,0 do około 6,5 pH, korzystnie octanem sodowym i kwasem octowym. Do wstępnego ustalenia poziomu pH można stosować NaOH lub kwas solny. Reakcję prowadzi się nz ogół w zzkresie temperatur od około -78°C do około 100°C, korzystnie w temperaturze pokojowej (to znaczy około 20 - 25°C).
166 526
Redukcyjne aminowanie związków o wzorze 6 można także prowadzić za pomocą uwodorniania (patrz np. Emerson, Org. Reactions, 4,134 (1948)). Przegląd reakcji redukcyjnego aminowania znaleźć można w pracy R.F. Borcha w Aldrichimica Acta, 8, 3, 10 (1975).
Związek o wzorze 1, który nie jest czwartorzędową solą amoniową można przekształcać w odpowiednią czwartorzędową sól, poddając je reakcji ze związkiem o wzorze R'X, w którym R7 ma znaczenie podane uprzednio a X oznacza atom bromu, chloru lub jodu, grupy o wzorach OSO2CH3 lub OSO2CF3, albo grupę OSCh-fenylową lub OSO2-p-metylofenylową. Reakcję prowadzi się generalnie w obojętnym rozpuszczalniku, takimjak eter etylowy, chlorek metylenu lub acetonitryl, korzystnie acetonitryl. Reakcję prowadzi się w temperaturze od około -30°C do około 100°C, korzystnie od około 20°C do około 25°C. Może być dogodne wytwarzanie związków o wzorze 1, w których X' nie jest dopuszczalnym w farmacji anionem. Taki anion może być później zastąpiony dopuszczalnym w farmacji anionem drogą wymiany na żywicy jonowymiennej. Ponadto, dopuszczalny w farmacji anion może być wymieniony na inny, korzystny, np. ze względu na trwałość w stanie stałym lub przydatność do sporządzania preparatów farmaceutycznych.
Addycyjne sole kwasowe związków o wzorze 1 można wytwarzać rozpuszczając ten związek w obojętnym rozpuszczalniku, dodając do roztworu niewielki nadmiar odpowiedniego kwasu i odsączając wytrąconą sól. Temperatura roztworu stosowanego do wytwarzania addycyjnych soli kwasowej nie jest krytycznym parametrem. Generalnie reakcję prowadzi się w zakresie temperatur od około -20°C do około 50°C, korzystnie od 20°C do 25°C. Jeśli sól jest rozpuszczalna, wówczas rozpuszczalnik można odparować i zastąpić innym, w którym sól się nie rozpuszcza. Korzystnymi rozpuszczalnikami są takie jak eter etylowy, eter izopropylowy, heksan i toluen.
Związki o wzorze 1 i ich dopuszczalne w farmacji sole wykazują in vivo aktywność przeciwnadciśnieniową u ssaków, w tym ludzi. Co najmniej znaczna część tej aktywności jest wynikiem ich zdolności hamowania rozszczepiania angiotensynogenu przez reninę. Chociaż nie chcemy być ograniczeni żadną teorią, to prawdopodobne jest, że mechanizm hamowania reniny wykazywanego przez omawiane związki polega na selektywnym wiązaniu (w porównaniu z angiotensynogenem) z reniną. Związki te wykazują aktywność hamującą enzym, selektywną w stosunku do reniny. Związki są rozpuszczalne w środowisku wodnym, co umożliwia podawanie doustne. Są one również użyteczne w leczeniu niewydolności sercowej prawokomorowej i leczeniu jaskry.
Aktywność omawianych związków aktywnych jako inhibitorów aktywności rozszczepiającej angiotensynogen reniny może być oznaczana w badaniach in vitro.
Związki mogą być w przypadku jaskry podawane bezpośrednio, domiejscowo do powierzchni rogówki.
Związki mogą być podawane jako czynniki przeciwnadciśnieniowe lub leczące niewydolność sercową doustnie lub pozajelitowo, korzystnie doustnie ze względu na wygodę pacjenta. Zwykle związki są podawane doustnie w dawkach od około 0,1 do około 20 mg/kg ciężaru ciała na dzień, korzystnie około 0,1 - 15 mg/kg, oraz około 0,1 do około 5 mg/kg ciężaru ciała na dzień, korzystnie 0,05 - 1 mg/kg przy podawaniu pozajelitowym. Wielkość dawki może się zmieniać w zależności od stanu pacjenta i podawanego związku. Powyższe związki mogą być podawane w kombinacji z dopuszczalnymi w farmacji nośnikami każdą ze wskazanych powyżej dróg podawania. Podawać można zarówno dawki pojedyncze jak i wielokrotne.
Związki można podawać doustnie w wielu różnych postaciach, to znaczy mogą być one formułowane z wieloma obojętnymi dopuszczalnymi w farmacji nośnikami, w postać tabletek, kapsułek, romboidalnych pastylek, kołaczyków, twardych cukierków, proszków, wodnych zawiesin, eliksirów, syropów itp. Do takich nośników należą stałe rozcieńczalniki lub wypełniacze, sterylne roztwory wodne i rozmaite nietoksyczne rozpuszczalniki organiczne i tym podobne. Ponadto, takie doustne preparaty farmaceutyczne mogą zawierać odpowiednie środki słodzące i/lub aromatyzujące, typu powszechnie stosowanego do powyższych celów. Na ogół, aktywne związki występują w takich preparatach doustnych w stężeniu wynoszącym od około 0,5% do około 90% wagowych w stosunku do masy całego preparatu, w ilościach wystarczających dla uzyskania pożądanych wielkości dawek jednostkowych.
166 526
Tabletki do podawania doustnego zawierają różne wypełniacze, takie jak cytrynian sodowy, węglan wapniowy oraz fosforan wapniowy, oraz różne środki rozpraszające, takie jak skrobia (korzystnie ziemniaczana lub tapiokowa), kwas alginowy i różne kompleksowe krzemiany, a także środki wiążące, takiejak poliwinylopirolidon, sacharoza, żelatyna i guma arabska. Ponadto, tabletki mogą zawierać także środki poślizgowe, takie jak stearynian magnezowy, laurylosiarczan sodowy, talk i mieszaniny podobnego typu. Laktoza, cukier mleczny i wysokocząsteczkowe glikole polietylenowe mogą być stosowane jako wypełniacze w miękkich i twardych kapsułkach. W przypadku wodnych zawiesin i eliksirów do podawania doustnego, składnik aktywny może być łączony z różnymi substancjami słodzącymi i aromatyzującymi, barwnikami i/lub rozpuszczalnikami, emulgatorami. Rozpuszczalnikiem może być woda, etanol, glikol propylenowy, gliceryna lub ich mieszaniny.
Do opisanych powyżej preparatów może być dodawany jeden lub kilka innych aktywnych związków w celu uzyskania preparatów do łączonej terapii. Do takich związków należą środki przeciwnadciśnieniowe, takie jak diuretyki, betaadrenergiczne czynniki blokujące, środki działające na ośrodkowy układ nerwowy, środki rozszerzające naczynia, czynniki blokujące neurony adrenergiczne oraz enzymy hamujące przekształcanie angiotensyny. Korzystnymi środkami przeć jwnadcjśnieniowymi do podawania razem ze związkami według wynalazku są diuretyki.
Podane poniżej przykłady ilustrują wynalazek ale nie ograniczająjego zakresu. Stosowane w przykładach określenie Boc odnosi się do grupy III-rz.-butoksykarbonylowej a Diboc do grupy dwu-III--z.-bbtoksykarbonylowej.
Temperatury topnienia oznaczano na aparacie firmy Buchi i podawano jako niekorygowane. Widma FAB-MS wykonywane były na spektrometrze VG70-25-5 z wykorzystaniem ciekłej matrycy składającej się z mieszaniny 3:1 dwutiotreitolu i dwutioerktrytolu. Widma 'h NMR wykonywano na spektrometrze Varian XL-300 lub spektrometrze Bruker AM-300, w temperaturze około 25°C. Przesunięcia chemiczne są wyrażone w częściach na milion (ppm) licząc w dół pola od trójmetylosilanu. Chromatografię cienkowarstwową (TLC) wykonywano na płytkach z żelem krzemionkowym firmy E.Merck (Kieselgel 60 F254). Płytki wywoływano, po rozwinięciu we wskazanym rozpuszczalniku lub mieszaninie rozpuszczalników, za pomocą barwienia 15% roztworem etanolowym kwasu fosforomolibdenowego i następnie ogrzewania na gorącej płytce. Wysokociśnieniową chromatografię cieczową (HPLC) wykonywano przy szybkości 1,5 ml/ ,minutę, stosując detekcję przy 214 nm, oraz kolumnę o wymiarach 250 x 4,6 mm Dupont Zorbax C-8, eluując izokratycznie za pomocą układu dwie pompy/mieszalnik, podającego wskazaną mieszaninę acetonitrylu oraz odpowiednio bufor o pH 2,1 /H3PO4/ i 0,1 m KH2PO4. Analizowane próbki są rozpuszczane w buforze do wstrzykiwania do HPLC składającym się z równych porcji acetonitrylu i 0,1 m buforu fosforanowego o pH 7,0. Czasy retencji podawano dla wskazanego w nawiasach stosunku acetonitrylu do wodnego roztworu buforu. Określenie zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem i wypółkdparkwano oznacza odparowanie rozpuszczali^ w wyparce obrotowej, w temperaturze poniżej 40°C, pod ciśnieniem obniżonym za pomocą pompki wodnej.
Metoda A /Redukcyjne aminowanie tnójpeptydoketonów/.
Roztwór 1 równoważnika molowego w bezwodnym metanolu /25 - 30 ml na gram ketonu/ miesza się w łaźni lodowej pod azotem i dodaje się 5-bównowirżników molowych chlorowodorku aminy, 10 równoważników molowych octanu sodowego albo alternatywnie, stosuje się wolną aminę, pięć równoważników kwasu octowego i pięć równoważników octanu sodowego, po czym dodaje się 1,2 równoważnika molowego cyjanoborowodorku sodowego. Całość miesza się w ciągu 16-48 godzin, najpierw w temperaturze 0 - 20°C w ciągu 4-6 godzin a następnie w temperaturze 20 - 25°C przez pozostały okres. Reakcję można prowadzić ewentualnie w obecności sit molekularnych 3/A/ nonametry. Roztwór odparowuje się pod zmniejszonym ciśnieniem i pozostałość rozpuszcza się w chlorku metylenu lub octanie etylu, stosując na ogół 130 ml rozpuszczalnika na 1 gram ketonu. Roztwór przemywa się dwukrotnie In roztworem NaOH (20 ml/g ketonu) a następnie solanką, po czym suszy nad siarczanem sodowym i zatęża pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość chromatografuje się na żelu krzemionkowym załadowanym w mieszaninie etanolu i chlorku metylenu, stosując do elucji gradient stężenia etanolu w chlorku metylenu. W typowym przykładzie, l,2g surowej pozostałości chromatografuje się
266 526 na 45g żelu krzemionkowego załadowywanego w 5% roztworze etanolu w chlorku metylenu, stosując do elucji po 500 ml 5%, 40%, 20% i 30% roztworu etanolu w chlorku metylenu. Frakcje zawierające czysty produkt identyfikuje się poddając TLC lub HPLC odparowane próbki, rozpuszczone następnie w buforze dla HPLC. Odpowiednie frakcje łączy się, odparowuje i suszy pod zmniejszonym ciśnieniem, otrzymując pożądany związek w postaci wolnej zasady.
Metoda B (otrzymywanie chlorowodorków trójpeptydoamin)
Wolną zasadę rozpuszcza się w temperaturze 25°C w bezwodnym 4m roztworze chlorowodoru w dioksanie (na ogół 5-40 ml/g wolnej zasady) i odparowuje. Otrzymuje się stałą pozostałość, którą proszkuje się pod eterem etylowym, heksanem lub mieszaniną chloroformu i heksanu. Rozpuszczalnik dobiera się doświadczalnie tak, by uzyskać dający się sączyć proszek. Otrzymany osad odsącza się, przemywa małą ilością rozpuszczalnika i suszy pod zmniejszonym ciśnieniem, w temperaturze 56°C.
Badanie hamowania reniny.
Plazma ludzka (lub plazma innych gatunków) zawiera zarówno A0jak i reninę, a jeśli jest inkubowana w temperaturze 37°C w łaźni wodnej tworzy się Ai. Jeżeli wszystkie enzymy proteolityczne, które metabolizują Ai są zablokowane (np. przez inhibitory ACE), wówczas ilość Ai oznaczana w teście na hamowanie reniny jest miernikiem stopnia tworzenia Ai lub aktywności enzymatycznej. Plazma inkubowana w obecności inhibitorów reniny wykazuje mniejszy stopień generowania Ai w porównaniu z plazmą inkubowaną bez inhibitorów reniny. Stężenie inhibitora reniny dające 50% generacji w porównaniu z generacją w nieobecności inhibitorajest określane jako IC50 dla inhibitora danego rodzaju reniny. W badaniach stosuje się system zwany Clinical Assays’ Gammacoat-425 (Travenol-Genetech Diagnostics Co.), polegający na radioimmunologicznym oznaczaniu aktywności pod względem kompetywnego wiązania reniny w plazmie (nr kat. CA-533553). Podstawowy roztwór związku ma stężenie 6,2 x 20'- M w 400% metanolu i jest on seryjnie rozcieńczony w stosunku 2:9 2400% metanolem. Każde metanolowe rozcieńczenie jest dalej rozcieńczane w stosunku 2:9 wodą. Porcje po 40 gl każdego rozcieńczenia pobierane są do zmieszania z plazmą.
Buforowaną plazmę przygotowuje się podczas wykonywania badań w ilości wystarczającej na zmieszanie porcji po 208 (tl z każdymi 40 gl roztworu związku oraz czterema porcjami po 40 g l 20% metanolu w wodzie (inkubaty nie zawierające związku). Każda inkubowana próbka 260 gl plazmy z kwasem etylenodwuaminoczterooctowym, 40 gl buforu fosforanowego oraz inhibitory enzymów proteolitycznych (4 gl 8-hydroksychinoliny i 4 gl fluorku fenylometylosulfonowego). Wszystkie operacje z plazmą prowadzi się w łaźni lodowej. Inkubowane mieszaniny zawierają po 40 gl roztworu związku i 208 gl buforowanej plazmy. Po dodaniu buforowanej plazmy, wszystkie probówki, poza nie zawierajacymi związku, umieszcza się na okres 2 - 4 godzin w łaźni wodnej w temperaturze 37°C a następnie przenosi znów do łaźni lodowej. Czas inkubowania jest różny dla różnych rodzajów plazmy. Próbki nie inkubowane w temperaturze 37°C pozostają przez cały okres inkubacji w łaźni lodowej.
Stosując zestaw do oznaczania aktywności reniny Clinical Assays’, 2 próbki po 200 gl każdego inkubatu oraz trwającą 28 - 24 godzin inkubację w temperaturze 4°C, oznacza się stężenie A2 w każdym inkubacie. Stopień generowania A2 dla inkubatów nie zawierających i zawierających badane związki oblicza się odejmując stężenie dla inkubatów z łaźni lodowej od stężenia dla wszystkich prób inkubowanych w temperaturze 37°C i dzieląc przez czas inkubowania w temperaturze 37°C.
Stopień generacji A2 dla inkubatów zawierających związki porównuje się z inkubatami nie zawierającymi związków i oblicza procent hamowania. Procent hamowania przypisuje się odpowiednim stężeniom związku i stężenie wywołujące 50% hamowania określa się jako IC50.
Przykład I. Ester izopropylowy 4-dwumetyloaminoopiperydyno- 2 -karbonylo-PheSMeCys-norCSta.
Ester izopropylowy 4-keropiperydyno-2-karbonyro-Phe-SMeCys-nor-CSta (l,5g, patrz opis patentowy St. Zjedn. Am. nr 4 824 342) poddano redukcyjnemu aminowaniu za pomocą chlorowodorku dwumetyloaminy w ciągu 20 minut, stosując metodę A. Otrzymano 2,23g (72%) tytułowego związku w postaci bezbarwnego piankowatego produktu. Częściowo widmo lH NMR (300 MHz, CDCI3) δ : 2,25 i 2,27 (d, po 3H, J=6,3Hz), 2,08 (s, 3H), 2,25 (s, 6H), 2,35
166 526 (m, 1H), 2,73 (m, 2H), 2,92 (dd, 1H, J=9,3 i 14, OHz), 3,07 (dd, 1H, J=5,3 i 13,8 Hz), 3,28 (dd, 1H, J=5,0 i 14,1 Hz), 3,79 (m, 2H), 4,10 (d, 1H, J=6,3 Hz), 4,39 (m, 1H), 4,47 (m, 1H), 4,78 (d, 1H), 5,06 (septet, 1H, J=6,3 Hz), 6,87 (d, 1H, J=8,0 Hz), 7,10 (d, 1H, J=9,6 Hz), 7,2 - 7,35 (m, 5H). FAB-MS m/e (względne natężenie): 662 (100, MG+), 302(55), 274(50), 155(50), 129(95).
HPLC (60)40): 2,83 minut (99%).
Stosując metodę B,1,03g wolnej zasady przekształcono w 1,07g chlorowodorku (100%, przemywano eterem etylowym).
Przykład II. Ester izopropylowy 4-dwumetyloaminopiperydyno-1-karbonylo-PheSMeCys-norCSta
1,5g estru etylowego 4-ketopiperydyno-1 -karbonylo-Phe-SMeCys-noirCSta poddawano w ciągu 48 godzin redukcyjnemu aminowaniu za pomocą chlorowodorku dwumetyloaminy, stosując metodę A. Otrzymano 0,465g (28%) tytułowego związku w postaci bezbarwnego piankowatego produktu. Częściowe widmo *H NMR (300 MHz, CDCl·}) δ : 1,25 i 1,27 (d, po 3H, J=6,2Hz), 1,38 (t, 6 H, J=7,2Hz), 2,10 (s, 3H), 2,76 (m, około 4H), 3,01 (m, około 5H), 3,24 (dd, 1H, J=5,3 i 14,0 Hz), 4,01 (m, 1H), 4,08 (szeroki sygnał, 1H), 4,40 (m, 3H), 5,04 (septet, 1H, J=6,2Hz), 5,28 (szeroki sygnał, 1H), 6,94 (d, 1H, J=9,5Hz), 7,09 (d, 1H), 7,2 - 7,35 (m, około 6 H) ppm. FAB-MS m/e (względne natężenie): 690(100, MH+), 302(33), 155(50), 11(100).
Stosując metodę B, 0,46g wolnej zasady przekształcono w 0,46g (95%) chlorowodorku (przemywano heksanem). HPLC (60/40): 3,55 minut (98%).
Przykład III. Ester izopropylowy 4-melyloaminopiperydyno-1-karbonylo-Phe-SMeCys-norCSta
1,5g estru izopropylowego 4-ketopiperydyno-1 -karbonylo-Phe-SMeCys-norCSta poddawano redukcyjnemu aminowaniu chlorowodorkiem metyloaminy, stosując metodę A. Otrzymano 1,30g tytułowego związku z wydajnością 85% w postaci bezbarwnego piankowatego produktu. Częściowe widmo 'H NMR (300 MHz, CDC1) δ : 1,25 i 1,26 (d, po 3H, J=6,2 Hz), 2,08 (s, 3H), 2,40 (s, 3H), 2,54 (m, 1H), 2,74 (dd, 1H, J=5,8 i 13,8 Hz), 2,83 (m, 1H), 2,93 (dd, 1H, J=9,2 i 14,1 Hz), 3,06 (dd, 1H, J=8,6 i 13,8 Hz), 3,27 (dd, 1H, J=5,1 i 14,1 Hz), 3,70 (m, 1-2H), 4,10 (d, 1H, 2,4 Hz), 4,3 - 4,5 (m, 2-3H), 4,82 (d, 3,9Hz), 5,06 (septet, 1H, J=6,3 Hz), 6,90 (d, 1H, J=7,9 Hz), 7,12 (d, 1H, J=9,4 Hz), 7,2 - 7,35 (m, około 6H) ppm. FAB-MS m/e (względne natężenie): 648(90, MH+), 288(50), 11:5(100).
Stosując metodę B, 1,03g wolnej zasady przekształcono w 1,37g (100%) chlorowodorku (przemywano heksanem). HPLC (60/40): 2,77 minut (96%).
Przykład IV. Ester izopropylowy 4-/1-morfolino/piperydyno-1-karbonylo-Phe-SMeCys-norCSta
1,0g estru izopropylowego 4-ketopiperydyno-1 -karbonylo-Phe-SMeCys-norCSta poddano redukcyjnemu aminowaniu chlorowodorkiem morfoliny, stosując metodę A. Otrzymano 0,38g (35%) tytułowego związku w postaci bezbarwnego piankowatego produktu. Częściowo widmo *H NMR (300 MHz, CDC13) δ : 1,5 5 il ,66 (d p po 3H , J=6,3 Hz), 2,0 8 (s , 3H), 2,00 (m , 1H), 2,47 (m, 4H), 2,73 (m, 4H), 2,93 (dd, 1H), J=9,2 i 14,2 Hz), 3,06 (dd, 1H, J=5,1, 13,8 Hz), 3,27 (dd, 1H, J=5,0 i 14,1 Hz), 3,67 (m, 4H), 3,77 (m, 2H), 3,95 (m, 1H), 4,1 (szeroki sygnał, 1H), 4,5 (m, 1H), 4,77 (d, 1H, J=3,9 Hz), 5,06 (septet, 1H, J=6,3 Hz), 6,85 (d, 1H, J=8,1 Hz), 7,07 (d, 1H, J=9,5 Hz), 7,2 - 7,35 (m, około 6H) ppm.
Stosując metodę B, 0,37g wolnej zasady przekształcono w 0,32g (80%) chlorowodorku, który wytrącono z chloroformu kilkoma objętościami heksanu. FAB-MS m/s (względne natężenie): 704 (100, MH+), 344(62), 316(45), 197(35), 171(55), 126(52). HPLC (60/40): 2,47 minut (92%).
Przykład V. Ester izopropylowy 4-aminopiperydyno-1-kί^'bonylo-Phe-SMeCys-nopCSta l,5g estru izopropylowego 4-ketopiperydyno-1-karbonylp-Phe-SMeCyy-nopCCta poddano redukcyjnemu aminowaniu chlorkiem amonowym, stosując metodę A. Otrzymano 0,58g (38%) tytułowego związku w postaci bezbarwnego piankowatego produktu. Częściowe widmo Ή NMR (300 MHz, CDCh) δ : 1,25 i 1,26 (d, po 3H, J=6,2 Hz), 2,09 (s, 3H), 2,74 (dd, 1H, J=5,9 i 13,9Hz), 2,80 (m, 2-3H), 2,93 (dd, 1H, J=9,2 i 14,1 Hz), 3,07 (dd, 1H, J=5,2 i 13,9 Hz), 3,27 (dd, 1H, J=5,0 i 14,1 Hz), 3,74 (m, 1H), 4,09 (d, 1H, J=2,3 Hz), 4,3 - 4,55 (m, 3H), 4,85 (szeroki sygnał, 1H), 5,06 (septet, HH J=6,3 Hz), 6,90 (d, 1H, J=8,2 Hz), 7,12 (d, 1H, J=9,5 Hz),
166 526
7,2 - 7,4 (m, okolo 6H) pj^m. FAB-MS m/e (względne 634 (60, MH+), 274(977,
246(38), 127(100). HPLC (60/40): 2,25 minut (98%).
Stosując metodę B, 0,58g wolnej zasady przekształcono w 0,57g (93%) chlorowodorku, który wytrącono z chloroformu 5 częściami heksanu.
Przykład VI, Ester izopropylowy 4-dwuruetyloakmnopiperydyno8l-karbonylo-PheOMbSbr-nΓrCStk
A. Sól dwucskloheksylokmoniowa ΠI-rz.-butoksykaIbonylo-OMeSer
Do 15g (0,0731 mola) Boc-L-seryny w 200 ml bezwodnego dwumetyloformamidu dodano porcjami w ciągu 20 minut, podczas mieszania w temperaturze 0 - 5°C, 8,75g (0,219 mola) 60% zawiesiny wodorku sodowego w oleju. Całość mieszano w ciągu 1,5 godziny w temperaturze 0 - 5°C, pr czym w ciągu 5 minut dodano 5,0 ml (0,0803 mola) jodku metylu i znów mieszano w ciągu 1,5 godziny w temperaturze 25°C. Mieszaninę wlano podczas mieszania do mieszaniny 600 ml octanu etylu i 200 ml 1 n roztworu wodorotlenku sodowego, po czym warstwy rozdzielono i wodną przemyto 400 ml octanu etylu. Warstwę wodną zakwaszono i ekstrahowano kilka razy octanem etylu. Połączone ekstrakty przemyto wodą, wysuszono i chromktogrkfΓwano na kolumnie z żelem krzemionkowym o wymiarach 9x17 cm, stosując 10% roztwór metanolu w chlorku metylenu. Uzyskano 13,6g bursztynowego oleistego produktu, pr wysuszeniu pod zmniejszonym ciśnieniem w temperaturze 60°C. Ten produkt rozpuszczono w 125 ml eteru etylowego i do roztworu dodano 12,4 ml (1,0 równoważnik) dwucskloheksyloaminy. Po ochłodzeniu lub pr dodaniu heksanu nie wytrącał się osad. Roztwór zatężono i pozostały żółtobrązowy olej rozpuszczono w heksanie i oziębiono w łaźni lrdrwej. Wytrącony osad odsączono i przemyto zimnym heksanem i wysuszono. Otrzymano 17,2g (69%) produktu, z którego po rekrystalizacji z 100 ml heksanu otrzymano 13,9g (56%) tytułowego związku w postaci białawego, krystalicznego produktu.
B. Ester izopropylowy Boc-OMeSer-norCStk
4,00g srli dwucykloheksyloamonirwej Brc-OMeSer sprzęgnięto z 2,43g estru izopropylowego kwasu 2R-hydrrksy-3S-aminr-4-αyyioheksklobutanowegr (estru izopropylowego nor-CSta, opis patentowy St. Zjedn. Am. nr 4 814 342). Surowy produkt oczyszczano chromatograficznie na żelu krzemionkowym, stosując dr załadowania żelu i elucji mieszaninę 30:70 rctanu etylu i heksanu. Otrzymano 3,71g (84%) tytułowego związku w postaci bezbarwnego piankowategr produktu. TLC: Rf = 0,38 (żel krzemirnkrwy, mieszanina 1: 1 heksanu i octanu etylu).
Częściowe widmo Ή NMR (300 MHz, CDCh) δ : 1,26 (d, 6H, J=6,3 Hz), 1,44, (s, 9H), 3,17 (d, 1H, J=4,8 Hz), 3,35 (m, 1H), 3,37 (s, 3H), 3,70 (dd, 1H, J=3,7 ( 9 Hz), 4,04 (dd, 1Ht, J= 1,7 i 4,9 Hz), 4,10 (m, 1H), 4,48 (m, 1H), 5,02 (septet, 1H, J=6,3 Hz), 5,36 (szeroki sygnał, 1H), 6,46 (d, 1H, J=10 Hz) ppm.
C. Chlrrrwrdrrek estru izopropylowego OMeSbr-nrrCStk
Z 3,7g estru izopropylowego Boc-OMeSer-norCStk usunięto grupę ochronną. Otrzymano 3,50g tytułowego związku w postaci bezbarwnegr stałego produktu. TLC: Rf = 0,13 (żel krzemionkowy, mieszanina 18:2:1 chloroformu, etanolu i kwasu octowego). Częściowe widmo ’H NMR (300 MHz, DMSO-dó) δ : 1,17 i 1,19 (d, po 3H, J=6,5 i 7Hz), 1,38 (t, 2H), 3,47 (dd, 1H, J=7 i 10,5 Hz), 3,57 (s, 3H), 3,62 (dd, 1H, J=3,5 i 10,5 Hz), 4,01 (m, 2H), 4,21 (m, 1H), 4,84 (septet, 1H, J=6,3 Hz), 5,60 (d, 1H, J=5,2 Hz), 8,20 (szeroki sygnał, 1H), 8,27 (d, 1H, J=9,3 Hz) ppm.
D. Ester izopropylowy 4-piperydono8l-ka!bonylr-Phe-OMeSer-norCSik
3,17g chlorowodorku estru izopropylowego OMbSbr-norCStk sprzęgnięto z 2,42g 4-piperydrno8l--ϊarbonslr-Phe (opis patentowy St. Zjedn. Am. nr 4 814 342). Surowy produkt oczyszczrnr chromatograficznie na 95g żelu krzemionkowego, stosując do załadowania żelu i dr elucji octan etylu. Otrzymano jasnożółty, piankowy produkt, który utarto z chloroformem i heksanem i otrzymano 3,45g (67%) tytułowego związku w postaci bezbarwnegr stałego produktu. TLC: Rf = 0,17 (żel krzemionkowy, rctan etylu). HPlC (60/40): 3,54 minut (100%). Częściowe widmr 'H NMR (300 MHz, CDCI3) δ : 0,9 (m, 2H), 1,26 (d, 6H, J=6,2 Hz), 2,36 (m, 4H), 2,98 (dd, 1H, J=8,7 i 14,1 Hz), 3,26 (dd, 1H, J=5,5 i 14,1 Hz), 3,32 (s, 3H), 3,37 (dd, 1H, J=5,8 i 9 Hz), 3,56 (m, około 4H), 3,79 (dd, 1H, J=3,3 i 8,9 Hz), 4,07 (dd, 1H), 4,37 (m, 1H),
166 526
4,50 (m, 2H), 4,99 (d, 1H, J=4,8 Hz), 5,05 (septet, 1H, J=6,2 Hz), 6,73 (m, 2H), 7,2 - 7,35 (m, około 6H) ppm. FAB-MS m/e (względne natężenie)· 617 (30, MH+), 287(30), 273(51) 245(100), 244(33), 202(32).
E. Ester izopropylowy 4-dwumetyloaminopiperydyno-1-karbonylo-Phe-OMeSer-noC-Sta
0,5g estru izopropylowego 4-pipelydyno-1-karbonylo-Phe-OMeCys-norCSta poddano redukcyjnemu aminowaniu chlorowodorkiem dwumetyloaminy, stosując metodę A. Otrzymano 0,365g tytułowego związku w postaci bezbarwnego osadu (wydajność 70%). Częściowe widmo 'H NMR (300 MHz, CDCb) δ · 1,25 i 1,27 (d, 3H każdy, J=6,3 Hz), 2,46 (s, 6H), 2,95 (dd, 1H, J=9,l i 14,1 Hz), 3,27 (dd, 1H, J=5,1 i 14,1 Hz), 3,32 (s, 3H), 3,37 (dd, 1H, J=5,2 i 9,2 Hz), 3,82 (dd, 1H, J=3,4 i 9,2 Hz), 3,87 (m, 1H), 4,08 (m, 1H), 4,4 (m, 3H), 5,22 (d, 1H), 5,04 (septet, 1H, J=6,3 Hz), 6,79 (d, J=7,7 Hz), 6,90 (d, 1H, J=9,8 Hz), 7,2 - 7,35 (m, około 6H) ppm.
Stosując metodę B, 0,36g wolnej zasady przekształcono w 0,292g (76%) chlorowodorku, który przemyto heksanem. FAB-MS m/e (względne natężenie)· 646 (100, MH+), 302(48), 274(35), 155(38), 129(92). HPLC (60/40)· 1,97 minut ((więcej niż 95%).
Przykład VII. Ester izopropylowy 4-dwumetyloaimnopiperydyno-1-karbonylo-PhenVal-norCSta
A. Ester izopropylowy Boc-nVal-norCSta
4,45g Boc-norwaliny sprzęgnięto z 5,00g estru izopropylowego kwasu 2R-hydroksy-3Samino-4-rykloheksylobutanowego (estru izopropylowego norCSta, opis patentowy St. Zjedn. Am. nr 4 814 342). Otrzymany produkt oczyszczono chromatograficznie na 200g żelu krzemionkowego, stosując do załadowania żelu i do elucji mieszaninę 1·3 octanu etylu i heksanu. Otrzymano 6,11g (67%) tytułowego związku w postaci bezbarwnego osadu. TLC· Rf=0,50 (żel krzemionkowy, mieszanina 1 · 1 octanu etylu i heksanu). Częściowe widmo *H NMR (300 MHz, CDCl·,) δ · 0,89 (t, 3H), 1,28 (nakładający się d, 6H), 1,42 (s, 9H), 3,18 (d, 1H), 3,94 (dt, 1H), 4,07 (dd, 1H), 4,47 (dt, 1H), 4,91 (szeroki sygnał), 5,03 (septet, 1H), 6,07 (d, 1H) ppm.
B. Chlorowodorek estru izopropylowego nVal-norCSta
Z 6,09g estru izopropylowego Boc-nVal-norCSta usunięto grupę ochronną. Otrzymano 5,32g tytułowego związku w postaci bezbarwnego osadu. TLC· Rf = 0,20 (żel krzemionkowy, mieszanina 18·2·1 chloroformu, etanolu i kwasu octowego). Częściowe widmo *H NMR (DMSO-dć) δ · 0,87 (t, 3H, J=7,2 Hz), 1,17 i 1,18 (d, po 3H, J=6,2 Hz), 3,75 (szeroki sygnał, 1H), 4,01 (m, 1H), 4,23 (m, 1H), 4,83 (septet, 1H, J=6,2 Hz), 5,60 (d, 1H, J=5,1 Hz), 8,2 (m, około 4H) ppm.
C. Ester izopropylowy 4-piperydono-1-karbonylo-Phe-nVal- norCSta
1,00g chlorowodorku estru izopropylowego norwalino-norCSta sprzęgnięto z 4-piperydono-1-karbonylo-Phe (opis patentowy St. Zjedn. Am. nr 4 814 342). Otrzymany produkt oczyszczano chromatograficznie na 175g żelu krzemionkowego, załadowanego w 1% roztworze etanolu w chlorku metylenu, stosując do elucji 600 ml 1% roztworu etanolu a następnie po 1 litrze 2%, 4% i 6% roztworu etanolu w chlorku metylenu. Otrzymano 1,3g bezbarwnego piankowatego produktu, który połączono z 0,18g innej porcji podobnie otrzymanego materiału i rekrystahzowano z 9 ml mieszaniny 1·2 chloroformu i heksanu. Otrzymano 1)31 g tytułowego związku w postaci bezbarwnego osadu. TLC· Rf = 0,25 (żel krzemionkowy, octan etylu). Częściowe widmo *H NMR (300 MHz, CDC13) δ · 0,87 (t, 3H), 1,27 (d, 6H), 1,47 (t, 2H), 2,37 (m, 4H), 3,03 (dd, 1H), 3,20 (dd, 1H), 3,45 - 3,7 (m, 5H), 4,11 (dd, 1H), 4,26 (m, 1H), 4,46 (m, 1H), 4,53 (m, 1H), 5,03 (septet, 1H), 5,13 (d, 1H), 6,49 (d, 1H), 6,6, (d, 1H), 7,18 - 7,38 (m, około 6H) ppm. FAB-MS m/e (względne natężenie)· 615 (100, MH+), 343(51), 273(62), 245(60), 244(68), 217(21), 202(27).
D. Ester izopropylowy 4-dwumetyloaminopipelydyno-1-karbonylo-Phe-nVal-norCSta
0,5 estru izopropylowego 4-piperydono-1-rarbonylo-Phe-nVaI-rorCSta poddano redukcyjnemu aminowaniu chlorowodorkiem dwumetyloaminy w ciągu 20 godzin, stosując metodę
A. Otrzymano 0,33g (63%) tytułowego związku w postaci bezbarwnego piankowego osadu.
Stosując metodę B, 0,33g wolnej zasady przekształcono w 0,33g (94%) chlorowodorku, który przemywano eterem etylowym. Częściowe widmo *H NMR (300 MHz, DMSO-d$) δ: 0,86 (t, 3H, J=7,2Hz), 1,16 i 1,18 (d, po 3H, J=6,2 Hz), 4,83 (septet, 1H, J=6,3 Hz) ppm. FAB-MS
166 526 m/e (względne natężenie): 644(100, MH+), 302(32), 274(28), 129(60). HPLC (60/40): 2,46 minut (99%).
Przykład VIII. Ester izopropylowy 4-dwumetyIoaminopiperydyno-1-karbonylo-heksahydroPhe-SMeCys-norCSta
A. 4-hydroksypiperydyno-1 -karbonylo-heksahydro-Phe
Mieszaninę 4-piperydyno-1-karbonylo-Phe (opis patentowy St. Zjedn. Am. nr 4 814 342), 10% rodu na węglu aktywnym oraz 40 ml kwasu octowego wstrząsano w temperaturze 25OC i pod ciśnieniem około 338 kPa wodoru, w ciągu 23 godzin. Mieszaninę przesączono przez pomoc filtracyjną (Supercel), osad na filtrze przemyto toluenem, a następnie przesącz zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Otrzymano 3,13g zielonkawoniebieskiego piankowatego produktu, który chromatografowano na 200g żelu krzemionkowgo, załadowywanego w 2% roztworze etanolu w chlorku metylenu, stosując do elucji najpierw 1,5 litra tego samego rozpuszczalnika a następnie po jednym litrze 4%, 10% i 15% roztworu etanolu w chlorku metylenu. Połączone frakcje zawierające produkt odparowano i otrzymano 2,18g piankowatego produktu, który ucierano z eterem izopropylowym i wysuszono. Otrzymano 1,93g (63%) tytułowego związku. TLC: Rf=0,38 (żel krzemionkowy, mieszanina 18:2:1 chloroformu, etanolu i kwasu octowego). Częściowe widmo 'H NMR (300 MHz, MeOH-d4) δ : 0,9 (m, 2H), 1,57 (t, 2H). 3,0 (m. 2H). 4,06 (t, 1H) ppm. FAB-MS m/e (względne natężenie): 299 (100, MH+), 128(46).
B. 4-piperydono-1 -karbonylo-heksahydro-Phe
Do mieszanej w temperaturze 0OC zawiesiny 1,57g 4-hydroksypiperydyno-1-karbonyloheksahydro-Phe w 25 ml eteru etylowego dodano 4 ml zimnego roztworu kwasu chromowego, przygotowanego jak opisano w Organic Synthesis, Coll. Vol. V, str. 310 (1973). Po upływie 2 godzin i 20 minut dodano jeszcze 1 ml kwasu chromowego i całość mieszano w ciągu 5 minut, po czym podzielono pomiędzy octan etylu i wodę. Warstwy rozdzielono i wodę ekstrahowano octanem etylu, zakwaszono kwasem solnym i ekstrahowano dwukrotnie octanem etylu. Ostatnie ekstrakty połączono, przemyto solanką, suszono i zatężono. Otrzymano 977 mg ciemnego oleju, który chromatografowano na 40g żelu krzemionkowego, załadowywanego w 1 % roztworze etanolu w chlorku metylenu, eluując kolejno porcjami po 500 ml 1%, 2%, 4% i 10% roztworu etanolu w chlorku metylenu. Otrzymano 533 mg (34%) tytułowego związku w postaci bezbarwnego piankowatego produktu. TLC: Rf = 0,36 (żel krzemionkowy, mieszanina 18:2:1 chloroformu, etanolu i kwasu octowego). Częściowe widmo *H NMR (300 MHz, CDCl-) δ : 2,52 (m, 4H), 4,46 (m, 1H), 5,07 (d, 1H, J=7 Hz) ppm. Wydaje się, że zaszła częściowa hemiketalizacja lub ketalizacja: 1,23 (t), 3,71 (m, za duża wartość integracji dla 4H). FAB-MS m/e (względne natężenie): 325 (35, MH+ + 28), 297 (100, MH+), 251(35), 126(58).
C. Ester izopropylowy 4-piperydono-1-karbonylo-heksahydro-Phe-S-MeCys-norCSta
0,67g chlorowodorku estru izopropylowego S-metylocysteinylo-norCSta (opis patentowy
St. Zjedn. Am. nr 4 814 342) sprzęgnięto z 0,50g 4-piperydono-1-karbonylo-heksahydro-Phe. Otrzymany produkt oczyszczano chromatograficznie na 30g żelu krzemionkowego, załadowywanego w mieszaninie 1: 1 octanu etylu i heksanu, stosując do elucji porcje po 500 ml mieszaniny 1:1, 3:2, 4:1 i 9:1 octanu etylu i heksanu. Otrzymano 0,59g tytułowego związku w postaci bezbarwnego osadu. TLC: Rf=0,3 (żel krzemionkowy, octan etylu). Częściowe widmo Ή NMR (300 MHz, CDC13) δ : 1,26 (d, 6H, J=6,2 Hz), 1,65 (m, cykloheksyl), 2,14 (s, 3H), 2,52 (m, 4H),
2,72 (dd, 1H, J=6,9 i 13,8 Hz), 2,97 (dd, 1H, J=5,2 i 13,8 Hz), 3,72 (m, 4H), 4,08 (m, 1H), 4,35 (m, 2H), 4,46 (m, 1H), 4,97 (d, 1H, J=6,3 Hz), 5,02 (septet, 1H, J=6,2 Hz), 6,73 (d, 1H, J=9,6 Hz), 6,93 (d, 1H, J=7,4 Hz) ppm. Singlety przy 2,03, 2,08 i 2,18 ppm wskazują na obecność odpowiednio 10, 5 i 5% zanieczyszczeń. FAB-MS m/e (względne natężenie): 639 (45, MH+), 361(52), 279(80), 251(100), 202(37), 126(85). HPLC (60/40): 6,66 minut, przegięcie przy 6,31.
D. Ester izopropylowy 4-dwumetyIoaminopiperydynoa1-karbonyIo-heksahydro-PheSMeCys-norCSta
254 mg estru izopropylowego 4-piperydono-1-karbonyloheksahydro-Phg-SMeCys-norCSta poddano redukcyjnemu aminowaniu dwumetyloaminą, stosując metodę A. Otrzymano 0,145g (55%) tytułowego związku w postaci bezbarwnego osadu. Częściowe widmo *H NMR (300 MHz, CDC3) δ 1 1,25 i 1,27 (po po 3H, 6=2,2 Hz2, 2, 11 (s, 3H2,2,32 (66H2,2,45 (m, 1H), 2,76 (dd, 1H, J=6,2 i 13 Hz), 2,85 (m, 1H), 3,04 (dd, 11H, J=5,4 i 13,8 Hz), 4,00 (m, 1H), 4,08
166 526 (d, 1JH, J=2,2 Hz), 4,21 (m, 1H), 4,41 (m, 1H), 4,85 (d, 1H), 5,04 (septet, 1H, J=6,2 Hz), 6,97 (m, 2H) ppm.
Stosując metodę B, 0,145g wolnej zasady przekształcono w 0,125g chlorowodorku. FAB-MS m/e (względne natężenie): 668 (70, MH+). 308(45), 280(45), 129(100).
Przykład IX. Ester izopropylowy 4-/1-piroildynylb/piperydynb-1-karbbnylo-PheSMeCys-nbrCStz
1,00g estru izopropylowego 4-pikerydbnb-1-karbonylb-Phe-SroenZys-norCSta poddano redukcyjnemu aminowaniu chlorowodorkiem pirolidyny, stosując metodę A. Otrzymano 0,90g tytułowej substancji w postaci bezbarwnego osadu. Częściowe widmo *H NMR (300 MHz, CDCla) δ : 0,8 -10 (m, 2H), 1,25 i 1,27 (d, po 3H, J=6,2 Hz), 1,45 (dt, 2H, J=5,2 Hz), 1,55 1,9 (nakładający się m, około 11 H), 2,08 (s, 3H), 2,2 (m, około 2H), 2,54 (szeroki sygnał, 4H),
2,72 ddd, 1H, i 13,9Hz,, 2,82 (m, 1H)n 2,9l dekli 1H, J=9,0 i 14,0Hz)n 3,06 /dddn 1Hi
J=5,3 i 13,8Hz), 3,27 (dd, 1H, J=5,1 i 14,1 Hz), 3,69 (t, 1H), 4,10 (d, 1H, J mniejsza niż 1 Hz), 4,37 - 4,49 (m, 3H), 4,79 (d, 1H, J=3,5Hz), 5,06 (septe! 1H, J=6,2Hz), 6,87 (d, 1H, J=8,0Hz), 7,13 (d, 1H, J=9,5 Hz), 7,2 - 7,35 (m, około 6-7H) ppm.
Stosując metodę B, 0,89g wolnej zasady przekształcono w 0,93g (99%) chlorowodorku, który przemywano eterem etylowym. FAB-MS m/e (względne natężenie): 688 (100, MH+), 300(30), 181(30), 155(67). HPLC (60/40): 2,72 minut (94%).
Przykład X. Ester izopropylowy 4-encyoaminopiperydynb-1-karbonylo-Phe-SMeCysnorCSta ,00g estru izopropylowego 4-piperydbno-1-karbonylb-Phe-SMe(kys-norCSca poddano redukcyjnemu aminowaniu chlorowodorkiem etyloaminy, stosując metodę A. Otrzymano 0,87g tytułowego związku w postaci bezbarwnego stałego produktu. Częściowe widmo Ή NMR (300 MHz, CDCI3) δ : 1,09 (t, 3H, J=7,lHz), 1,25 i 127 (d, po 3H, J=6,2Hz), 145 (dt, 2H, J=5,1Hz), 1,55-1,9 (nakładający się m, około 10 H), 2,08 (s, 3H), 2,64(q, 2H,J=7,1 Hz), 2,74 (dd, J=13,8 i 5,7 Hz), 2,8 (m, 1H), 2,93 (dd, 1H, J=14,9Hz), 3,07 (dd, 1H, J=13,7 i 5,2Hz), 3,28 (dd, 1H, J=14,5 Hz), 3,70 (m, 1H), 4,11 (d, 1H), 4,38 (m, 1H), 4,46 (m, 1H), 4,80 (d, 1H), 5 - 6 (septet, 1H J=6,2Hz), 6,87 (d, 1H, J=17Hz), 7,13 (d, 1H, J=9,8 Hz), 7,2 - 7,4 (m, około 6H) ppm.
Stosując metodę B, 0,86g wolnej zasady przekształcono w 0,86g (95%) chlorowodorku, który przemyto eterem etylowym. FAB-MS m/e (względne natężenie): 662 (100, MH+), 302(57), 155(63), 129(97). HPLC (60/40): 2,42 minut (96,4%).
Przykład XI. Ester izopropylowy 4-dwumetylbaminopiperydyąo-1-karbonylo-OMeTyr-SMeCys-ąbrCStz
A. N-III-re.-butoksykarboąylo-O-metylo-L-tyrozyna
Do roztworu 10,0g (0,512 mola) O-metylo-L-tyrozyny i 2,05g (1,0 równoważnik) wodorotlenku sodowego w 100 ml wody i 100 ml tetrahydrofuranu dodano 6 n roztworu wodorotlenku sodowego do pH 12,7 oraz następnie 18 ml (1,5 równoważnika) dwuwęglanu dwu-III-rz.-butylu. Roztwór mieszano obserwując stopniowy spzdek pH do 10,8. Większość tetrahydrofuranu bepzrbwznb pod zmniejszonym ciśnieniem i wodną pozostałość ekstrahowano dwukrotnie eterem etylowym z następnie zmieszano z równą objętością octanu etylu. Otrzymaną mieszaninę mieszano i dodano 6 n kwas solny do pH 1,5. Warstwy rozdzielono i wodną ekstrahowano octanem etylu. Połączone ekstrakty octanowe przemyto solanką, suszono nad siarczanem magnezowym i zztażono. Otrzymano 13,1g (87%) tytułowego związku w postaci bezbarwnego piankowatego produktu. TLC: Rf = 0,22 (żel krzemionkowy, 10% roztwór etanolu w chlorku metylenu). HpLc (60/40): 2,88 minut (96%). Częściowe widmo *H NMR (300 MHz, CDCI3) δ : 1,41 (s, 9H), 3,09 (m, 2H), 3,78 (s, 3H), 4,55 (m, 1H), 4,90 (d, 1H), 6,83 (d, 2H, J=8,6 Hz), 7,09 (d, 2h, J=8,6 Hz) ppm.
B. Ester benzylowy N-IΠ-rz-butoksykarbbnyio-O-metylb-L-tyrozyny
Mieszaninę 13,1 g (0,0444 mola) N-IΠ-rz.-butoksykarboąyio-O-mntylb-L-ty yozyny, 6,14g (0,0444 mola, 1,0 równoważnik) węglanu potasowego oraz 5,3 ml (0,0446 mola, 1,0 równoważnik) w bezwodnym dwumetylbformzmidziel mieszano w łaźni lodowej z następnie pozwolono by w ciągu nocy temperatura doszła do pokojowej. Mieszaninę przesączono przez pomoc filtracyjną (Supercel), osad na filtrze przemyto dobrze octanem etylu. Połączone przesącze przemyto 3 x 50 ml wodnego roztworu 1m chlorku litowego, wodą i solanką, po czym wysuszono
166 526 nad siarczanem magnezowym i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Otrzymano jasnobrązowy oleisty produkt, który chromatografowano na 600g żelu krzemionkowego, załadowywanego w 10% roztworze octanu etylu w heksanie, stosując do elucji najpierw 1,5 litra powyższej mieszaniny a następnie 3 litry 15% roztworu octanu etylu w heksanie. Odpowiednie frakcje zebrano, odparowano i otrzymano 15,3g (89%) tytułowego związku w postaci bezbarwnego krystalicznego produktu o temperaturze topnienia 67 - 69°C. TLC: Rf=0,45 (żel krzemionkowy, mieszanina 1:3 octanu etylu i heksanu). HPLC (60/40): 10,98 minut (99%). Częściowe widmo 'H NMR (300 MHz, CDCI3) δ : 1,40 (s, 9H), 3,01 (m, 2H), 3,76 (s, 3H), 4,58 (m, 1H), 4,95 (d, 1H, J=7,9 Hz), 5,09 (d, 1H, J=11,2Hz), 5,15 (d, 1H, J=11,2Hz), 6,74 (d, 2H, J=8,5 Hz), 6,93 (d, 2H, J=8,4Hz), 7,25 - 7,35 (m, 5H) ppm. FAB-MS m/e ( względne natężenie): 386 (11, MH+), 330(50), 286(100), 268(50), 194(23), 150(45), 121(99). Analiza elementarna: obliczono dla C22H27 NO5: C - 68,55, H- 7,06 , N - 3,63 ; znaleziono : C - 68,46, H- 7,10, N - 3,60.
C. Chlorowodorek estru benzylowego O-metylo-L-tyrozyny
W 14,8g (0,00384 mola) estru benzylowego N-IΠ-rz.-butoksykarbknyio-O-metyio-Ltyrozyny usunięto grupę ochronną. Otrzymany produkt przemyto heksanem i uzyskano 12,0g (98%), tytułowego związku w postaci bezbarwnego osadu. TLC: Rf = 0,30 (zel krzemionkowy, mieszanina 18:2:1 chloroformu, etanolu i kwasu octowego). HPLC (60/40): 1,96 minut (97%). Częściowe widmo *H NMR (300 MHz, DMSO-dć) δ : 3,05 (dd, 1H, J=7,5 i 14,1Hz), 3,13 (dd, 1H, J=5,7 i 14,1Hz), 3,73 (s, 3H), 4,28 (dd, 1H), 5,15 (s, 2H), 6,84 (d, 2H, J=8,6Hz), 7,10 (d, 2H, J=8,6Hz), 7,29 (m, 2H), 7,36 (m, 3H), 8,63 (szeroki sygnał, 2H) ppm.
D. Ester benzylowy 4-piperydono-1-karbonylk-OMeTyr
Zawiesinę 12,0g (0,0373 mola) estru benzylowego O-metylo-L-tyrozyny i 5,2 ml (0,0373 mola, 1 równoważnik) trójetyloamink w 90 ml chlorku metylenu dodano podczas mieszania w ciągu 10 minut w temperaturze 0°C mieszaniny 5,13g (0,0746 mola) imidazolu (2,0 równoważniki) oraz 6,65g (0,0410 mola 1,1 równoważnika) karbonylodwuimidazklu w 60 ml chlorku metylenu. Całość mieszano w ciągu 30 minut w temperaturze 25°C, po czym kolejno dodano 7,45g (0,0485 mola, 1,3 równoważnika) wodzianu chlorowodorku 4-pipeiydonu oraz 6,8 ml (0,0488 mola, 1,3 równoważnika) trójetyloaminy i mieszano w ciągu 16 godzin w temperaturze 25°C. Do mieszaniny dodano 300 ml chlorku metylenu i roztwór przemyto 3 x 100 ml 1n kwasu solnego. Wodne przemywki ekstrahowano chlorkiem metylenu. Połączone ekstrakty organiczne przemyto solanką, suszono nad siarczanem magnezowym i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Otrzymaną jasnożółtą oleistą - pozostałość odparowano kilka razy z eterem etylowym i wysuszono. Otrzymano 14,3 (93%) tytułowego związku w postaci puszystego osadu. TLC: Rf = 0,20 (żel krzemionkowy, mieszanina 2:1 octanu etylu i heksanu). HPLc (70/30): 2,36 minut (97%). Widmo- H NMR (300 MHz, CDCla) {):2/-( (m,HH), 3,07 (m,HH), 3,61 ^^,HI^33/-5 (s, 3H), 4,80 (m, 1H), 4,97 (d, 1H, ,J=7,6Hz), 5,10 (d, 1H, J=12,lHz), 5,20 (d, 1H, J=12,lHz),
6,73 (m, 2H), 6,89 (m, 2H), 7,35 (m, 5H) ppm.
E. 2-piperydonk-1 -krrbknylk-OMeTyr
Mieszaninę 5,00g (0,0122 mola) estru benzylowego 4-piperydknk-1-karbonylk-OMeTyr, 0,5g 10% palladu na węglu aktywnym, 40 ml metanolu oraz 4 ml kwasu octowego wstrząsano w ciągu 1 godziny w temperaturze 25°C pod ciśnieniem wodoru około 338 kPa. Mieszaninę przesączono, przesącz odparowano, pozostałość rozpuszczono w octanie etylu, po czym roztwór przemyto dwukrotnie wodą i solanką, suszono pod siarczanem magnezowym i zatężono. Otrzymano tutułowy związek w postaci białawego stałego produktu, TLC: Rf = 0,35 (żel krzemionkowy, mieszanina 18:2:1 chloroformu, etanolu i kwasu octowego). HPLC (63/20): 2,42 minuty (96%). Widmo *H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ :2,19 (m, 4H), 2,86 (dd, 1H, J=10,5 i 13,6Hz), 3,00 (dd, 1H, J=4,5 i 13,6Hz), 3,56 (m/4H), 3,70 (s, 3H), 4,22 (m, 1H), 6,83 (d, 2H, J=8,6Hz), 6,92 (d, 1H, J=8,3Hz), 7,17 (d, 2H, J=8,6Hz) ppm.
F. Ester izopropylowy 2-piperydono-1-karbonylo-OMeTyr-S-MeCyy-norCStr
1,67g (4,21 milimoli) chlorowodorku estru izopropylowego S-metylojysteinylk-norCSta sprzęgniętoz 1,35g(4,21 milimoli, 1 równoważnik) 2-piperydono-1-karbonylk-OMeTyr. Otrzymany produkt chromatografowano na 100g żelu krzemionkowego załadowywanego w mieszaninie 3:1 octanu etylu i heksanu, eluując najpierw 3,5 litrami tego samego rozpuszczalnika a następnie samym octanem etylu. Otrzymano 2,08g (75%) tytułowego związku w postaci
266 55 26 piankowatego produktu. TLC: Rf = 0,33 (żel krzemionkowy, octan etylu). HPLC (60/40): 4,25 minut (94%). Częściowe widmo *H NMR (300 MHz, CDCI3) δ :2,25 i 2,26 (d, po 3H, J=6,2Hz), 2,20 (s, 3H), 2,42 (m, 4H), 2,72 (dd, 1H, J=6,4 i 23,7 Hz), 2,92 (dd, 2H, J=8,5 i 24,2 Hz), 3,02 (dd, 2H, J=5,2 i 23,8Hz), 3,20 (dd, 2H, J=5,4 i 24,2Hz), 3,58 (m, 4H), 3,77 (s, 3H), 4,09 (m, 2H), 4,43 (m, 3H), 4,97 (d, 2H, J=5,0Hz), 5,05 (septet, 2H, J=6,3Hz), 6,85 (d, 2H, J=8,6Hz), 7,22 (d, 2H, J=8,6Hz) ppm.
G. Ester izopropylowy 4-dwumetyloaminopiperydyne-1-karbonylo-OMeTyr-SMeCysnorCSta
0,50g estru izopropylowego 4-piperydono-2-karbonylo-OMeTyr-SMeCys-norCSta poddano redukcyjnemu aminowaniu chlorowodorkiem dwumetyloaminy, stosując metodę A. Otrzymano 0,268g (52%) tytułowego związku w postaci bezbarwnego osadu. Częściowe widmo NMR (300 MHz, CDCI3) δ : 225 i 226 (d, po 3H, J=6,3Hz), 2,09 (s,3H), 2,29 (s, 6H), 2,42 (m, 2H), 2,75 (dd, 2H, J=5,8 i 23,7Hz), 2,74 (m, 2H), 2,87 (dd, m, J=9,9 i 24,2Hz), 3,06 (dd, 2H, J=5,2 i 23,8 Hz), 3,20 (dd, 2H, J=4,9 i 24,2 Hz), 3,78 (s, 3H), 3,80 (m, 2H), 4,09 (d, 2H, J=2,4Hz), 4,33 (m, 2H), 4,45 (m, 2H), 4,47 (m, 2H), 4,82 (d, 2H), 5,06 (septet, 2H, J=6,3Hz), 6,85 (m, 3H), 7,24 (m, 3h) ppm. FAB-MS m/e (względne natężenie): 692 (200, MH+), 332(40), 304(40), 255(50), 229(99). HPLC (60/40): 2,24 minut (97%).
Stosując sposób B, 0,26g wolnej zasady przekształcono w chlorowodorek.
Przykład XII. Ester izopropylowy 4-/N-metoksykarbonylometylo-N-metyloamino/piperydyno- 2 -karbonylo-Phe-SMeCys-norCSta
2,0g estru izopropylowego 4-piperydono- 2 -karbonylo-Phe-SMeCys-norCSta poddano redukcyjnemu aminowaniu chlorowodorkiem estru metylowego N-^i^t^t^yoglicyny, stosując metodę A. Otrzymano 0.44g (39%) tytułowego związku w postaci bezbarwnego stałego produktu. Częściowe widmo H NMR (300 MHz, CDCI3) δ : 225 i 2,26 (d, po 3H, J=6,2Hz), 2,08 (s, 3H), 2,34 (s, 3H), 2,74 (dd, 2H, J=6,0 i 23,7Hz), 2,92 (dd, 2 2H, J=9,2 i 24,2Hz), 3,07 (dd, 2H, J=5,0 i 23,7Hz), 3,27 (s, 2H), 3,28 (dd, 2H), 3,70 (s, 2H), 3,8 (m, 2-2H), 3,93 (d, 2H, J=9,0Hz), 4,09 (d, 2H, J=8,7Hz), 4,38 (m, 2H), 4,46 (m, 2H), 4,76 (d, 2H, 2H, J=4Hz), 5,06 (septet, 2H, J=6,2Hz), 6,85 (d, 2H, J=8,lHz), 7,08 (d, 2H, J=9,2Hz), 7,20 - 7,35 (m, 5H) ppm.
Stosując metodę B, 0,44g wolnej zasady porzekształcono w 0,34g (73%) chlorowodorku, który przemywano eterem etylowym, FAB-MS m/e (względne natężenie): 720 (75, MH+), 360(200), 332(60), 285(80), 242(90). HPLC (60/40): 2,76 minut (97%).
Przykład XIII. Ester izopropylowy 4-N-bbIyloaImnopiperydyno-2-kio·bonylo-PheSMeCys-norCSta ,
2,0g estru izopropylowego 4-piperydono-Ί -karbonyro-Phe-SMeCys-norCSto poddano redukcyjnemu aminowaniu chlorowodorkiem n-buIyloaminy, stosując sposób A. Otrzymmo 20g (92%) tytułowego związku w postaci bezbarwnego osadu. Częściowe widmo *H NMR (300 MHz, CDCh) δ : 0,89 (t, 3H, J=7,2Hz), 225 i 2,26 (d, po 3H, J=6,2Hz), 2,07 (s, 3H), 2,57 (t, 2H, J=7,2Hz), 2,72 (dd, 2H, J=5,8 i 23,8Hz), 2,92 (dd, 2H, J=9,0 i M,2Hz), 3,07 (dd, J=5,8 i 23,8Hz), 3,27 (dd, 2H, J=5,2 i U,2Hz), 3,69 (m, 2H), 4,20 (d, 2H), 4,4 - 4,5 (m, 3H), 4,79 (d, 2H), 5,06 (septet, 2H, J=6,2Hz), 6,88 (d, 2H, J=8,0Hz), 7,22 (d, 2H, J=9,4Hz), 7,20 - 7,35 (m, 5H) ppm.
Stosując metodę B, 2,0g wolnej zasady przekształcono w 0,82g (78%) chlorowodorku, który przemywano eterem etylowym. FAB-MS m/e (względne natężenie): 690 (75, MH+), 330(45), 283(62), 257(200). HPLC (60/40): 3,54 minut (99%).
Przykład XIV. Ester izopropylowy 4-/1-piperydyno/piperydyno-1-korbonylo-PheSMeCys-norCSta
Ester izopropylowy 4-piperydono-2-karbonylo-Phe-SMe-(Cys-norCSta poddmo redukcyjnemu aminowmiu chlorowodorkiem piperydyny, stosując metedę A. Otrzymmo 0,36g (32%) tytułowego związku w postaci bezbarwnego osadu. Częściowe widmo Ή NMR (300 MHz, CDCh) δ : 2,25 i 226 (d, po 3H, J=6,2Hz), 2,08 (s, 3H), 2,43 (m, około 4H), 2,72 (m, około 2H), 2,93 (m, 2H), 3,2 2 (dd, 2H), 3,30 (dd, 2H), 3,8 (m, 2H), 4,4 (m, 2H), 4,5 (m, 2H), 4,76 (d, 2H), 5,07 (septet, 2H, J=6,2Hz), 6,86 (d, 2H, J=8,lHz), 7,23 (d, 2H), 7,2 - 7,35 (m, 5H) ppm.
166 526
Stosując metodę B, 0,36g wolnej zasady przekształcono w 0,31g (82%) chlorowodorku, który przemywano eterem etylowym. FAB-MS m/e (względne natężenie): 702 (100, MH+), 342(40), 314(70), 195(52), 169(100). HPLC (60/40)· 2,92 minut (97%).
Przykład XV. Ester izopropylowy 4-izopropyloaminopiperydyno-1 -karbonylo-PheSMeCys-norCSta
1,0g estru izopropylowego 4-pipelydono-1 -karbonylo-Phe-SMeCys-norCSta poddano redukcyjnemu aminowaniu chlorowodorkiem izopropyloaminy, stosując metodę A. Otrzymano 0,68g (64%) tytułowego związku w postaci bezbarwnego osadu. Częściowe widmo *H NMR (300 MHz, CDCl) δ · 102 (d, 6H, J=6,3Hz), 1,25 i 1,26 (d, po 3H, J=6,2 Hz), 1,45 (m, 1H), 2,08 (s, 3H), 2,43 (m, około 4H), 2,74 (m, 3-4H), 2,82 (m, 2H), 3,07 (dd, 1H, J=5,2 i 13,8 Hz), 3,27 (dd, 1H, J=5,l i 14,OHz), 3,71 (m, 2H), 4,10 (d, 1H), 4,35 - 4,5 (m, 3H), 4,80 (d, Hi), 5,06 (septet, 1H, J=6,2Hz), 6,88 (d, 1H, J=8,2Hz), 7,12 (d, 1H, J=9,2Hz), 7,2 - 7,35 (m, 5H) ppm.
Stosując metodę B, 0,58g wolnej zasady przekształcono w 0,585g (82%) chlorowodorku, który przemywano eterem etylowym. FAB-MS m/e (względne natężenie)· 676 (100, MH+), 316 (52), 288(25), 169(50), 143(85). HPLC (60/40)· 2,79 minut (98%).
Przykład XVI. Ester izopropylowy 4-r2-0hdroksyetyloamino/-piperydyno-1-karbonylo-Phe-SMeCys-norCSta
1,0g estru izopropylowego 4-pipelydonor 1 -karbonylo-Phe-SMeCys-norCSta poddano redukcyjnemu aminowaniu chlorowodorkiem 2-hydroksyetyloaminy, stosując metodę A. Otrzymano 0,68g (64%) tytułowego związku w postaci bezbarwnego stałego produktu. Częściowe widmo Ή NMR (300 MHz, CDCI3) δ · 126 i 1,27 (d, po 3H, J=6,2Hz), 1,45 (m, 1H), 2,09 (s, 3H), 2,77 (m, 2H, nakładający się na dd, 1H), 2,94 (dd, 1H, J=9,0 i 14,1Hz), 3,06 (dd, 1H, J=5,2 i 13,9Hz), 3,27 (dd, 1H, J=4,0 i 13,8Hz), 3,62 (m, 2H), 3,70 (m, 3H), 4,10 (d, 1H, J=2,3Hz), 4,39 - 4,5 (m, 3H), 4,82 (d, 1H, J=4,0Hz), 5,06 (septet, 1H, J=6,2Hz), 6,88 (d, 1H, J=8,0Hz), 7,08 (d, 1H, J=9,3Hz), 7,2 - 7,35 (m, 5H) ppm.
Stosując metodę B, 0,75g wolnej zasady przekształcono w 0,70g (89%) chlorowodorku, który przemywano eterem etylowym. FAB-MS m/e (względne natężenie)· 678 (70, MH+), 318 (52), 171(53), 145(100). HPLC (60/40)· 1,96 minut (98%).
Przykład XVII. Ester izopropylowy 4-rN-0-0wumetylo-ominopropylo-N-metyloamino/piperydyno-1 -karbonylo-Phe-SMeCys-norCSta
1,0g estru izopropylowego 4-piperydono-1 -karbonylo-Phe-SMeCys-norCSta poddano redukcyjnemu aminowaniu chlorowodorkiem N,N,N’--rójmetylo-1,3-propanodwuaminy, stosując metodę A, z tym tylko, że stosowano w reakcji 15 równoważników octanu sodowego. Otrzymano 0,949g (42%) tytułowego związku w postaci bezbarwnego stałego produktu. Częściowe widmo *H NMR (300 MHz, CDCl) δ · 126 i 127 (d, po 3H, J=6,2Hz), 2,08 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 2,20 (s, 6H), 2,24 (t, 2H, J=7,2Hz), 2,39 (m, 3H), 2,74 (dd, 1H, J=5,7 i 13,8Hz), 2,92 (dd, 1H, J=9,3 i 14,0Hz), 3,07 (dd, 1H, J=5,1 i 13,9Hz), 3,28 (dd, 1H, J=4,9 i 14,1Hz), 3,78 (m, 1H), 4,10 (szeroki sygnał, 1H), 4,35 - 4,50 (m, 3H), 4,75 (d, 1H, J=3,7Hz), 5,07 (septet, 1H, J=6,0Hz), 6,87 (d, 1H, J=8,lHz), 7,13 (d, 1H, J=9,5Hz), 7,2 - 7,35 (m, 5H) ppm.
Stosując sposób B, 0,49g wolnej zasady przekształcono w 0,438g (85%), chlorowodorku, który przemywano eterem etylowym. FAB-MS m/e (względne natężenie)· 733 (100, MH+). HPLC (50/50)· 1,65 minut (89%).
Przykład XVIII. Ester izopropylowy 4-r2-mztoksyetyloamino/piperydyno-1-kalbonylo-Phe-SMeCys-norCSta
1,0g estru izopropylowego d-piper/dono- 1 -karbonylo-Phe-OMeCys-norCSta poddano redukcyjnemu aminowaniu chlorowodorkiem 2-metoksyetyloammy, stosując metodę A. Otrzymano 0,89g (82%) tytułowego związku w postaci bezbarwnego stałego produktu. Częściowe widmo Ή NMR (300 MHz, CDCl) δ · 126 i 1,27 (d, po 3H, J=6,2Hz), 2,08 (s, 3H), 2,92 (dd, 1H, J=9,1 i 14,1 Hz), 3,07 (dd, 1H, J=5,1 i 13,8Hz), 3,27 (dd, 1H, J=5,2 i 13,8Hz), 3,33 (s, 3H), 3,46 (m, 2H), 3,69 (m, 2-3H), 4,10 (szeroki sygnał, 1H), 4,36 - 4,50 (m, 3H), 4,77 (d, 1H, J=3,7Hz), 5,06 (septet, 1H, J=6,0Hz), 6,87 (d, 1H, J=8,lHz), 7,13 (d, 1H, J=9,4Hz), 7,2 - 7,35 (m, 5H) ppm.
166 526
Stosując metodę B, 0,89g wolnej zasady przekształcono w chlorowodorek 0,85g (91%), który przemywano eterem etylowym, FAB-MS m/e (względne natężenie): 692 (75, MH+), 332 (43), 185(45), ^59(100). HPLC (60/40): 2,59 minut (94%).
Przykład XIX. Ester izopropylowy 4-840ιήπ^ι-1-ρίρ^Ί-ιηο/ρϊρεΓ^οα-80τbonylo-Phe-SMeCys-norCStk
1,0g estru izopropylowego 4-piperydsno-1 -kakbonylo-Phe-αMeCyk-norCSta poddano redukcyjnemu aminowaniu chlorowodorkiem 4-hydroksy piperydyny, stosując metodę A. Otrzymano 0,51g (45%) tytułowego związku w postaci bezbarwnego stałego produktu. Częściowe widmo Ή NMR (300 MHz, CDCh) δ : 1,26 i 1,27 (d, pr 3H, J=6,2Hz), 2,08 (s, 3H), 2,73 (dd, 1H, J=5,9 i 13,9Hz, nakładający się m, 3-4H), 2,92 (dd, 1H, J=9,2 i 14,1Hz), 3,06 (dd, 1H, J=5,2 i 13,8Hz), 3,27 (dd, 1H, J=5,0 i 14,2Hz), 3,79 (m, 2H), 4,09 (d, 1H, J=2,3Hz), 4,37 - 4,50 (m, 3H), 4,78, (d, 1H, J=4,0Hz), 5,06 (septet, 1H, J=6,3Hz), 6,86 (d, 1H, J=8,0Hz), 7,07 (d, 1H, J=9,5Hz), 7,2 - 7,35 (m, 5H) ppm.
Stosując metrdę B, 0,51 g wolnej zasady przekształcono w 0,474g (88%) chlorowodorku, który przemywano eterem etylowym. FAB-MS m/e (względne natężenie): 718 (100, MH+), 330(40), 185(50), 148(40). HPLC (60/40): 2,11 minut (95%).
Przykład XX. Ester izopropylowy 4-/4-mety lo-1-piperazyno/piperydy no-Lkarbonylo-Phe-SMeCs'k-norCStk
0,80g estru izopropylowego 4-piperydonr8--kakbonylo-Phe-αMeCys-norCSta prddanr redukcyjnemu kminowaniu dwuchlorowrdorkiem N-metylopiperazyny, stosując metrdę A, z tym tylko, że w reakcji stosowano 15 równoważników octanu sodowego. Otrzymano 0,64g (71%) tytułowego związku w postaci bezbarwnegr stałego produktu. Częściowe widmo fH NMR (300 MHz, CDCh) δ 1 16 6 1 1,27 ( d, po 3H, J=2,2Hz ), 2,08 ( s, 3H ), 2,30 ( s, 3H ), 9,92 (dd, 1H, J=9,1 i 14,1 Hz), 3,07 (dd, 1H, J=5,2 i 13,8Hz), 3,27 (dd, 1H, J=5,0 i 13,9Hz), 3,80 (m, 2H), 4,09 (d, 1H), 4,36 - 4,50 (m, 3H), 4,80 (d, 1H, J=3,7Hz), 5,06 (septet, 1H, J=6,2Hz), 6,87 (d, 1H, J= 8,0Hz), 7,09 (d, 1H, J=9,4Hz), 7,2 - 7,35 (m, 5H) ppm.
Stosując metrdę B, 0,641g wolnej zasady przekształcono w 0,59g (88%) dwuchlrrowodorku, który przemywano eterem etylowym. FAB-MS m/e (względne natężenie): 718(92), 717 (70, MH+), 057(42), 329(80), 184(75), 139(122). HPLC (50/50): 1,76 minut (92%).
Przykład XXI. Ester izopropylowy 3-dwumetyloaminopirolidyno-1-karbrnylo-PheSMeCys-norCStk
A. Ester benzylowy R,S-0-pirolidynolo8l-karbonylr-Phe
Do ochłodzrnegr do temperatury 0°C roztworu 7,3g imidazolu i 9,6g karbonylodwuimidknrlu w 60 ml chlorku metylenu wkroplrnr w ciągu 30 minut roztwór 22,9g p-8oluenosulfoniknu estru benzylowego fenylrklkniny i 7,5 ml tnójety^oaminy w 40 ml chlorku metylenu. Całość mieszano w ciągu 25 minut w temperaturze 25°C, po czym dodano 4,9g 0-pirolidynrlu i pr upływie 2,5 godzin mieszaninę rozcieńczono 200 ml chloroformu, przemyto 3 x 100 ml 2n kwasu solnego i solanką. Roztwór wysuszono i zatężono, otrzymując 20,1g tytułowego związku w postaci bezbarwnego stałego produktu.
B. Ester benzylowy 3-pjrolidono-1-karbonslo-Phe
Do roztworu 2,7 ml dwumetylosulfotlenku w 12 ml chlorku metylenu dodano w temperaturze -70°C 2,0 ml chlorku oksalilu, k następnie wkroplono w ciągu 10 minut w temperaturze -65OC roztwór 7g estru benzylowego R,S-3-pirolidsnrlr8 1-kikr-onylo-Phe w 12 ml bezwodnego chlorku metylenu. Całość mieszano w ciągu 10 minut w temperaturze -65°C a następnie w ciągu 30 minut w temperaturze -40°C, po czym oziębiono dr temperatury -78°C i dodano 13,3 ml trójetylrkmins, ogrzano mieszaninę do temperatury 25°C, rozcieńczono 75 ml chloroformu i ekstrahowano 3 x 50 ml 1n kwasu solnego. Roztwór przemyto solanką, wysuszono i odparowano. Otrzymano stały produkt, który rekrystalizowano z mieszaniny 1: 1 chlorku metylenu i eteru etylowego. Uzyskano 1,68g (24%) tytułowego związku w postaci białawego stałego produktu.
C. 300011-0108 1^100111001^
Roztwór 1,57g estru benzylowego 3-ρίΓθ1ί-οηθ8 1Λ3Γΐ-οηι1ο-Ρ1^ w 72 ml metanolu i 8 ml kwasu octowego wstrząsano w ciągu 1,5 godziny z 1,5g 10% palladu na węglu aktywnym, pod ciśnieniem wodoru około 338 kPa. Mieszaninę przesączono, przesącz zatężono i pozostałość
166 526 odparowano z dodatkiem chlorku metylenu. Otrzymano 1,28g tytułowego związku w postaci białawego stałego produktu.
D. Ester izopropylowy 3-piiΌlidonoa1-karbonylo-Phe-aMeCys-norCSta
225 mg chlorowodorku estru izopropylowego SMeCys-norCSta (opis patentowy St. Zjedn. Am. nr 4 814 324) sprzęgnięto z 0,204g 0-pirolidonoa1-karbonylo-Phe. Surowy produkt oczyszczono chromatograficznie na żelu krzemionkowym, załadowanym w mieszaninie 3:1 octanu etylu i heksanu, eluując tym samym rozpuszczalnikiem. Otrzymano 0,218g (61%) tytułowego związku w postaci białawego piankowatego produktu.
E. Ester izopropylowy 3-dwumetyIoaminopirolidynoa1-karbonylo-Phe-aMeCys-norCSta
0,1 g estru izopropylowego 3-piroli7onoa1-karbonylo-Phe-aMeCys-norCSta poddano redukcyjnemu aminowaniu chlorowodorkiem dwumetyloaminy, stosując metodę A. Otrzymano 0,06g (57%) tytułowego związku w postaci bezbarwnego stałego produktu. Częściowe widmo *H NMR (300 MHz, CDC1-) δ :1,25 i 1,26 (d, po 3H, J=6,2Hz), 2,09 (s, 3H), 2,24 (s, 6H), 4,11 (d, 1H), 4,35 - 4,55 (m, 3-4H), 5,05 (septet, 1H, J=6,2Hz), 6,93 (m, 1H), 7,15 - 7,35 (m, 6H) ppm.
Stosując metodę B, 0,06g wolnej zasady przekształcono w 0,019g (30%) chlorowodorku, który przemywano eterem etylowym. FAB-MS m/e (względne natężenie): 648 (25, MH+), 288 (30), 260(27), 141(45), 115(100). HPLC (60/40): 2,25 minut (87%).
Przykład XXII. Ester izopropylowy d-dwumetyloaminopiperydyno-1 -karbonyO^-F^lie^SMeCys-norCSta
A. Sól dwucykloheksyloamoniowa III-rz.-butoklykarbonylo-OEtSer
Do 9,5g (0,0463 mola) Boc-L-serynny w 125 ml bezwodnego dwumetyloformiamidu dodaje się podczas mieszania w temperaturze 0 - 5OC, porcjami w ciągu 30 minut 5,55g (0,139 mola) 60% zawiesiny wodorku sodowego w oleju. Całość miesza się w ciągu 1,5 godziny w temperaturze 0 - 50OC, po czym dodaje się 4,1 ml (0,0507 mola) jodku etylu i miesza w temperaturze 25OC w ciągu 15 godzin. Całość wlewa się podczas mieszania do mieszaniny 800 ml octanu etylu i 200 ml 1n roztworu NaOH, po czym rozdziela warstwy i wodną przemywa octanem etylu. Warstwę wodną zakwasza się i ekstrahuje dwukrotnie octanem etylu. Ekstrakty octanowe łączy się, przemywa wodą, suszy i zatęża, otrzymując 9,25g (86%) kwasu w postaci oleju. Częściowe widmo *H NMR (300, MHz, CDCI-) δ : 1,17 (t, 3H, J=7,0Hz), 1,-44 (s, 9H), 3,52 (q, 2H, J=7,0Hz), 3,63 (dd, 1H, J=4,1 i 9,4Hz), 3,88 (dd, 1H, J=6,2Hz),4,42 (szeroki sygnał, 1H), 5,38 (d, 1H, J=7,5Hz) ppm. Olej rozpuszcza się w eterze etylowym i dodaje 7,9 ml dwucykloheksyloaminy. Mieszaninę zatęża się i rozpuszcza w heksanie, po czym oziębia, odsącza wytrącony osad i przemywa go heksanem. Wydajność 11,6g (71%).
B. Ester izopropylowy Boc-OEtSer-norCSta
5,0g soli dwucykloheksyloamoniowej Boc-OEtSer sprzęgnięto z 2,94g estru izopropylowego kwasu 2R-hydrok2y-3S-amino-a-aykio0eks2Iobutanowego (ester izopropylowy norCSta, opis patentowy St. Zjedn. Am. nr 4 814 342). Surowy produkt oczyszczano chromatograficznie na żelu krzemionkowym załadowywanym mieszaniną 1:5 octanu etylu i heksanu, eluujac tym samym rozpuszczalnikiem. Otrzymano 3,72g (67%) tytułowego związku w postaci bezbarwnego piankowatego produktu. TLC: Rf = 0,42 (żel krzemionkowy, mieszanina 1: 1 heksanu i octanu etylu). Częściowe widmo *H NMR (300 MHz, CDC-) δ : 1,20 (t, 3H, J=7,0Hz), 1,26 (d, 6H, J=6,3Hz), 1,44(s,9H), 3,16(d, 1H, J=4,7Hz),0,06(dd, 1H, J=7,6i8,7Hz),3,52(q,2H, J=7,0Hz),
3,74 (dd, 1H, J=3,7 i 9Hz), 4,04 (dd, 1H, J=1,7 i 5,0Hz),4,09 (szeroki sygnał, 1H),4,49 (m, 1H), 5,02 (septet, 1H, J=6,3Hz), 5,39 (szeroki sygnał, 1H), 6,55 (d, 1H, J=9,8Hz) ppm. FAB-MS m/e (względne natężenie): 459(50, MH+), 483(100), 359(95).
C. Chlorowodorek estru izopropylowego OEtSer-norCSta
3,72g estru izopropylowego Boc-OEtSer-norCSta poddano reakcji usuwania grupy ochronnej. Otrzymano 3,46g tytułowego związku w postaci bezbarwnego stałego produktu. TLC: Rf=0,20 (żel krzemionkowy, mieszanina 18:2:1 chloroformu, etanolu i kwasu octowego). Częściowe widmo lH NMR (300 MHz, DMSO-te) δ : 1,14 (t, 3H, J=7,0Hz), 1,17 i 1,19 (d, po 3H, J=6,0 i 6,3Hz), 3,47 (m, 2H), 3,65 (dd, 1H, J=3,5 i 10,4 Hz), 4,01 (m, 2H), 4,21 (m, 1H), 4,83 (septet, 1H, J=6,2Hz), 5,60 (d, 1H, J=5,2Hz), 8,17 (szeroki sygnał, 1H), 8,25 (d, 1H, J=9,lHz), ppm.
166 526
D. Ester izopropylowy 4-^i^^i^^(dono-1 -^t^I^l^onylp—^^^^^C^IΞt^ys-I^OI^(^^3ta
2,18g chlorowodorku estru izopropylowego OEtSer-norCSta sprzęgnięto z 1,6g 4-piperydono-1-karbonylo-Phe (opis patentowy St. Zjedn. Am. nr 4 814 342). Surowy produkt oczyszczano chromatograficznie na 100g żelu krzemionkowego załadowanego w mieszaninie 9:1 octanu etylu i heksanu, eluując tym samym rozpuszczalnikiem. Otrzymano białawy, piankowaty produkt, który rekrystalizowano z mieszaniny chloroformu i heksanu i otrzymano 1,44g (41%) tytułowego związku w postaci bezbarwnego stałego produktu. TLC: Rf = 0,22 (żel krzemionkowy, octan etylu). HPLC (60/40): 4,37 minut (99%). Częściowe widmo *H NMR (300 MHz, CDC13) δ : 1,14 (t, 3H, J=7,0Hz), 1,26 (d, 6 H, J=6,2Hz), 2,34 (m, 4H), 2,99 (dd, 1H, J=8,6Hz i 14,1Hz), 3,25 (dd, 1H, J=5,6 i 14,0Hz), 3,39 (dd, 1H, J=6,1 i 9,1Hz), 3,48 (q, 2H, J=7,0Hz), 3,59 (m, 4H), 3,81 (dd, 1H, J=3,2 i 9,1Hz), 4,07 (dd, 1H, J=2,0 i 7,4Hz), 4,33 (m, 1H), 4,49 (m, 2H), 5,05 (m, 2H), 6,77 (m, 2H), 7,2 - 7,35 (m, około 5H) ppm. FAB-MS m/e (względne natężenie): 631 (65, MH+), 359(95), 273(72), 245(100), 125(88).
E. Ester izopropylowy 4-dwumelyloaminopiperydynp-1 -karbonylo-Phe-OEtCys-norCSta
0,54g estru izopropylowego 4-I^iJ^^l^^ί(onρ-1 -karbonylo-Phe-OEtSer-nooCSta poddano redukcyjnemu aminowaniu chlorowodorkiem dwumetyloaminy, stosując metodę A. Otrzymano 0,348g (63%) tytułowego związku w postaci bezbarwnego stałego produktu. Częściowe widmo ‘H NMR (300 MHz, CDCI3) δ : 113 (t, 3H, J=7,0Hz), 1,25 i 1,26 (d, po 3H, J=6,3Hz), 2,25 (s, 6H), 2,73 (m, 1H), 2,93 (dd, 1H, J=9,1 i 14,1Hz), 3,27 (dd, 1H, J=5,0 14,1Hz), 3,41 (m, 1H), 3,46 (dq, 2H, J= 1,4 i 7,0Hz), 3,87 (dd, 1H, J=3,0 i 9,3Hz), 4,09 (d, 1H), 4,4 (m, 2H), 4,5 (m, 1H), 4,84 (d, 1H), 5,6 (septet, 1H, J=6,2Hz), 6,8 (d, 7,2Hz), 7,01 (d, 1H, J=9,4Hz), 7,2 - 7,35 (m, 5H) ppm.
Stosując metodę B, 0,36g wolnej zasady przekształcono w 0,30g (82%) chlorowodorku. FAB-MS m/e (względne natężenie): 660(100, MH+), 302(41), 274(40), 129(90). HPLC (60/40): 2,34 minut (98%).
Przykład XXIII. Ester propylowy 4-dwumetyloaminopipeyyynPk-l-karbρnyIo-PheSMeCys-norCSta
A. Ester N-hydroksysukcynimidowy 4-piperydyno-1 -karbonylo-Phe
Roztwór 20g (0,069 mola) 4-pipery dono-1-karbonylp-Phe, 7,93g (0,069 mola) N-hydroksysukcynimidu oraz 14,1g (0,069 mola) dwucykloheksylokarbo^wuimidu mieszano w łaźni a następnie pozostawiono w ciągu nocy w temperaturze 25°C. Zawiesinę przesączono, przesącz zatężono i pozostałość rozpuszczono w octanie etylu. Otrzymany roztwór przemyto wodnym roztworem NaHCCb i solanką a następnie wysuszono i zatężono. Otrzymano 25,6g (96%) tytułowego związku w postaci stałego produktu.
B. Sól dwucykloheksyloamoniowa 4-pipery dono-1-kaabonylo-Phe-SMeCys
Do roztworu 4,14g S-metylocysteiny w 45 ml nasyconego roztworu NaHCCb dodano w temperaturze 25°C roztwór 7,92g estru N-hydroksysukcymmidowego 4-piperydono-1karbonylo-Phe. Po upływie 30 minut pH doprowadzono do 10,5 1n roztworem NaOH i mieszaninę ekstrahowano eterem etylowym. Warstwę wodną zakwaszono do pH 1 kwasem solnym i ekstrahowano chloroformem. Ekstrakt chloroformowy wysuszono i zatężono. Otrzymano 6,9g stałego produktu, który chromatografowano na 200g żelu krzemionkowego załadowanego w octanie etylu, stosując do elucji porcje po 1 litrze 5% i 10% etanolu w octanie etylu. Otrzymano 5,5g surowego produktu, który rozpuszczono w 80 ml chlorku metylenu i do roztworu dodano 2,7 ml dwucykloheksyloaminy. Po zatężeniu uzyskano 7,9g produktu, który dwukrotnie rekrystabzowano z eteru etylowego i chlorku metylenu. Otrzymano 4,75g (39%) tytułowej soli.
C. Ester metylowy ^pipe^ono-t-karbonylo-Phe-SMeCys-norCSta
1,44g estru metylowego norCSta (opis patentowy St. Zjedn. Am. nr 4 814 342) sprzęgnięto z 3,37g soli dwucykloheksyloamoniowej 4-piperydpnp-1-karbonylo-Phe-SMeCys. Surowy produkt oczyszczano chromatograficznie na 240g żelu krzemionkowym, stosując do załadowania i elucji mieszaninę 2:1 octanu etylu i heksanu. Otrzymano 2,2g (64%) tytułowego estru. Analiza elementarna: obliczono C - 59,54, H - 7,33, N - 9,26%; znaleziono: C - 59,44, H - 7,30, N 8,94%.
166 526
D. Ester n-propylowy 4-piperydonor1-karbonylo-Phe-SMeCys-norCSta
0,35g estru metylowego 4-piperydonor1-ka3bonylo-Phe-SMeCys-norCSta i 0,06 ml czteroizopropoksylanu tytanu mieszano w 1 ml alkoholu n-propylowego w temperaturze 11X)°C, w ciągu 1 godziny. Mieszaninę zatężono i chromatografowano na żelu krzemionkowym załadowanym w mieszaninie 1·1 octanu etylu i heksanu, stosując do elucji kolejno mieszaniny 2·1,3· 1,4·1 i 5·0 octanu etylu i heksanu. Otrzymano 0,272g (74%) tytułowego związku w postaci bezbarwnego stałego produktu.
E. Ester n-propylowy 4-dwumetyloaminopiperydonor1-karbonylo-Phe-0MeCys-norCSta
0,13g estru n-propylowego 4-piperydonor1-ka3bonylo-Phe-0MeCys-norCSta poddano redukcyjnemu aminowaniu chlorowodorkiem dwumetyloaminy, stosując postępowanie A. Otrzymano 0,084g (62%) tytułowego związku w postaci bezbarwnego stałego produktu. Częściowe widmo ‘H NMR (300 MHz, CDCI3) δ · 0,94 (t, 3H, J=7,4Hz), 2,09 (s, 3H), 2,33 (s, 6H), 2,95 (dd, 1H, J=9,2 i 14,0Hz), 3,03 (dd, 1H, J=5,2 i 13,8Hz), 3,27 (dd, 1H, J=9 i 14,0Hz), 3,82 (d, 2H, J=13,lHz), 4,10 (t, J=6,9Hz, nakładający się na s, razem 3H), 4,37 - 4,87 (d, 1 h), 6,92 (d, 1H, J=8,0Hz), 7,05 (d, 1H, J=9,4Hz), 7,2 - 7,35 (m, 5-6H) ppm.
Stosując metodę B, 0,084g wolnej zasady przekształcono w 0,56g (63%) chlorowodorku, który przemywano eterem etylowym. HPLC (60/40)· 3,29 minut (93%).
Przykład XXIV. Ester izopropylowy 4-dwumetyloaminopiperydyno-1-karbonyloPhe-Nle-norCSta
A. Ester izopropylowy Boc-Nle-norCSta
3,64g Boc-Nle sprzęgnięto z 3,82g estru izopropylowego kwasu 2Rrhydroksy-3S-amino-4-oykloheksylobutanowego (norCSta, ester izopropylowy, opis patentowy St. Zjedn. Am. nr 4 814 3,2). Surowy produkt oczyszczano chromatograficznie na żelu krzemionkowym stosując do załadowania i elucji mieszaninę 1·4 octanu etylu i heksanu. Otrzymano 4,85g (68%) tytułowego związku w postaci bezbarwnego piankowatego produktu. TLC· Rf = 0,18 (żel krzemionkowy, mieszanina 4· 1 heksanu i octanu etylu). Częściowe widmo 'h NMR (300 MHz, CDCI3) δ · 0,88 (t, 3H, J=6,7Hz), 1,26 i 1,27 (d, po 3H, J=6,3Hz), 1,43 (s, 9H), 3,18 (d, 1H, J=4,4Hz), 3,91 (dt, 1H), 4,05 (dd, 1H, J=1,8 i 4,4Hz), 4,46 (dt, 1H), 4,89 (szeroko sygnał, 1H), 5,03 (septet, 1H, J=6,3Hz), 6,06 (d, 1H, J=9,7Hz), ppm. FAB-MS m/e (względne natężenie)· 457 (54, MH+), 401(100), 357(88), 315(25), 244(36), 202(43), 126(60).
B. Chlorowodorek estru izopropylowego Nle-norCSta
4,80gestru izopropylowego Boc-Nle-norCSta poddano reakcji usuwania grupy ochronnej. Otrzymano 4,38g tytułowego związku w postaci bezbarwnego stałego produktu. TLC· Rf = 0,33 (żel krzemionkowy, mieszanina 18·2·1 chloroformu, etanolu i kwasu octowego). Częściowe widmo ‘H NMR (300 MHz, DMSO-de) δ · 0,87 (t, 3H), 1,17 i 1,18 (d, po 3H, J=6,3Hz), 3,74 (m, 1H), 4,01 (dd, 1H), 4,25 (dt, 1H), 4,83 (septet, 1H, J=6,3Hz), 5,60 (d, 1H, J=5,2Hz), 3,17 (szeroki sygnał, 1H), 8,22 (d, 1H) ppm. FAB-MS m/e (względne natężenie)· 357 (100, Mh+), 244(33), 202(20).
C. Ester izopropylowy 4-pipelydono-1-karbonylo-Phe-Nle-norCSta
2,18g chlorowodorku estru izopropylowego Nle-norCSta sprzęgnięto z 2,33g 4-piperydono-1 -karbonylo-Phe (opis patentowy St. Zjedn. Am. nr 4 814 342). Surowy produkt oczyszczano chromatograficznie na 100g żelu krzemionkowego, stosując do załadowania i elucji mieszaninę octanu etylu i heksanu. Otrzymano 1,83g białawego piankowatego osadu, z którego po rekrystalizacji z chloroformu i heksanu otrzymano 1,20g (24%) tytułowego związku w postaci bezbarwnego stałego produktu. TLC· Rf = 0,44 (żel krzemionkowy, octan etylu), temperatura topnienia 175-176°C. Częściowe widmo *H NMR (300 MHz, CDCl) δ · 0,85 (t, 3H, J=7,3Hz),
1,26 (d, 6H, J=6,3Hz), 2,36 (rn, 4H), 3,9 (dd, 1H, J=7,9 i 14,1Hz), 3,1*7 (dd, 1H, J=6,0 i 14,0 Hz), 3,53 (m, 3H), 3,64 (m, 2H), 4,10 (m, 1H), 4,21 (m, 1H), 4,45 (dt, 1H), 4,52 (m, 1H), 5,06 (septet, 1H, J=6,3Hz), 5,10 (d, 1H, J=6,1Hz), 6,35 (d,lH, J=9,7Hz), 7,51 (d, 1H, J=7,8Hz), 7,2 - 7,35 (m, 5H) ppm. FAB-MS m/e (względne natężenie)· 629 (40, Mh+), 357(55), 273 (66), 245 (100), 202 (44), 126 (71). HPLC (60/40)· 5,7 minut.
D. Ester izopropylowy 4-dwumety loaminopiperydyno-1-karbonylo-Phe-Nle-norCSta
0,45g estru izopropylowego 4-pίperydonor1-ka3bonylo-Phe-Nle-norCSta poddano redukcyjnemu aminowaniu chlorowodorkiem dwumetyloaminy, stosując metodę A. Otrzymano
166 526
0,362g tytułowego związku w postaci bezbarwnego stałego produktu, z wydajnością 73%. Częściowe widmo -HNMR (300 MHz,CDC1) δ :0,86 (t, 3H, J=7,2Hz), 1,25 i 1,26 (d, po 3H, J=6,2Hz), 2,34 (s, 6H),2,51 (m, 1H),3,00(d, IH, J=8,4i 14,1 Hz), 3,18 (dd, 1H, J=5,7i 14,0Hz), 3,78 (d, 1H, J=13,2Hz), 3,89 (d, 1H), 4,08 (d, 1H, J=2,5Hz), 4,22 (m, 1H), 4,40 (m, 2H), 4,99 (d, 1H), 5,04 (septet, 1H, J=6,2Hz), 6,54 (d, 1H, J=7,9Hz), 6,55 (d, 1H, J=9,5Hz), 7,2 - 7,33 (m, 5H) ppm.
Stosując metodę B, 0,36g wolnej zasady przekształcono w 0,39g (96%) chlorowodorku. FAB-MS m/e (względne natężenie): 658 (40, Mh+), 302 (50), 274 (35), 155 (36), 129 (100). HPLC (60/40): 2,89 minut (98%)
Przykład XXV. Ester izopropylowy 2-dwumelyloaminopiperydyno-1 -krrbonyio-PheHis-norCSta
A. Ester izopropylowy Boc-His-norCS^
3,50g dwuBoc-His sprzęgnięto z 2,40g estru izopropylowego kwasu 2R-hydroksy-3Samino-4-byyloheksylobutankwego (ester izopropylowy norCSta, opis patentowy St. Zjedn. Am. nr 4 813 342). Surowy produkt oczyszczano chromatograficznie na żelu krzemionkowym, stosując do załadowania i elucji mieszaninę octanu etylu i heksanu. Otrzymano 4,85g (68%) tytułowego związku w postaci białawego piankowatego produktu. TLC: Rf = 0,2 (żel krzemionkowy, mieszanina 1:1 heksanu i octanu etylu). Częściowe widmo *H NMR (300 MHz, CDC3) δ : 1,24 i 1,26 (d, po 3H, J=6,2Hz), 1,44 (s, 9H), 1,58 (s, 9H), 2,86 (dd, 1H, J=6,0 i 14,9Hz), 3,03 (dd, 1H, J=4,8 i 14,9Hz), 3,68 (szeroki sygnał, 1H), 4,0 (d, 1H), 4,29 (dt, 1H), 4,39 (dt, 1H). 5,01 (septet, 1H, J=6,3Hz), 6,18 (d, 1H, J=7,2Hz), 7,17 (s, 1H),8,01 (s, 1H) ppm.
B. Dwuchlorowodorek estru izopropylowego His-norCSta
Roztwór 3,30g estru izopropylowego dwu-boc-His-norCSta w 25 ml kwasu trójflukrooctowego mieszano w ciągu 2 godzin w temperaturze 0°C, po czym odparowano. Pozostałość rozpuszczono w 15ml 4m roztworu chlorowodoru w dioksanie, odparowano, pozostałość przemyto eterem etylowym i wysuszono. Otrzymano 2,62g (100%) tytułowego związku w postaci białawego proszku. Częściowe widmo Ή NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ : 1,16 i 1,17 (d, po 3H, J=6,2Hz), 3,08 (d, 1H, J=8,2 i 15,8Hz), 3,24 (dd, 1H, J=4,8 i 15,8Hz), 4,00 (d, 1H, J=2,9 Hz), 4,23 (d, 2H),4,78 (septet, 1H, J=6,3Hz),7,5 (s, 1H), 9,09(2,1H), 14,5 (szeroki sygnał, 1H) ppm.
C. Ester izopropylowy 4-piperydynk-1-karbonylo-Phe-His-nokCSta
1,60g dwuchlorowodorku estru izopropylowego His-nor-CSta sprzęgnięto z 1,03g .2-piperydono-1-karbonylk-Phe (opis patentowy St. Zjedn. Am. nr 4 814 342). Surowy produkt oczyszczano chromatograficznie na 80g żelu krzemionkowego, załadowanego w 2% roztworze etanolu w chlorku metylenu, stosując do elucji porcje po 1 litr 2%, 4%, 10% i 20% roztworu etanolu w chlorku metylenu. Otrzymano 1,05g (46%) białawego piankowatego produktu. Częściowe widmo *H NmR (300 MHz, CDCI3) δ : 1,24 i 1,28 (d, po 3H, J=6,2Hz), 2,34 i 2,43 (m, po 3H), 2,79 (dd, 1H), 2,99 (dd, 1H, J=4,0 i 14,0Hz), 3,57 (m, 4H), 4,05 (d, 1H, J=2,3Hz), 4,35 (m, 1H), 4,43 (m, 1H), 4,57 (m, 1H), 5,06 (septet, 1H, J=6,2Hz), 5,21 (d, 1H), 6,80 (s, 1H), 6,90 (d, 1H), 7,21-7,37 (m, 6H) ppm. HPLC (60/40): 2,21 minut (98%).
D. Ester izopropylowy 4-dwumetklormmkpiperydyno-1-karbknylo-Phe-His-norCStr
0,395g estru izopropylowego poddano redukcyjnemu aminowaniu chlorowodorkiem dwumetyloaminy, stosując metodę A. Otrzymano 0,190g (46%) tytułowego związku w postaci bezbarwnego stałego produktu. Częściowe widmo *H nMr (300 MHz, CDCI3) δ : 1,2, i 1,26 (d, po 3H, J=6Hz), 2,27 (s, 6H), 2,6 - 2,95 (m, 3-4H), 3,15 - 3,35 (nakładający się dd, 2H), 3,7 (d, 1H), 3,8 (d, 1H), 4,06 (d, 1H, J=2,7Hz), 4,35 (m, 2H), 4,59 (m, 1H), 5,07 (septet, 1H, J=6,2Hz), 6,78 (s, 1H), 7,04 (d, 1H, J=9,3Hz), 7,2 - 7,34 (m, 5-6H), 7,57 (s, 1H), 8,1 (szeroki sygnał, 1H) ppm.
Stosując metodę B, 0,19g wolnej zasady przekształcono w 0,181g chlorowodorku. FAB-MS m/e (względne natężenie): 682 (100, MH+), 381 (25). HPLC (40/60): 2,32 minut (97%).
166 526
Przykład XXVI. Chlorowodorek estru izopropylowego 4-dwumetytoaminopiperydyno-1 -karbbąyld-Phe-L-aΠiloglicylo-nbrCSta
A. Ester izopropylowy Bbc-L-alliloglicylo-ąbrCSta
450 mg Bbc-L-alliioglicyny sprzęgnięto z 535 mg norCSta-OiPr. Otrzymany produkt oczyszczano chromatograficznie na żelu krzemionkowym, eluując mieszaninę 1: 1 octanu etylu i heksanu. Otrzymano 593 mg (64%) tytułowego związku. TLC: Rf = 0,73 (octanu etylu).
B. Chlorowodorek estru izopropylowego Ι^ΠΙ^Ι^υ^-ποΙ^Μ
490g związku z punktu A poddano reakcji usuwania grupy ochronnej. Otrzymano 300g tytułowego związku w postaci bezbarwnego stałego produktu.
C. Ester izopropylowy 4-piperydonb-1-karbonylo-Phe-L-aΠilogllcylb-norCStz
305 mg związku z punktu B sprzęgnięto z 258 mg 4-piperyebno-1-karbonylo-Phe. Otrzymany produkt oczyszczano za pomocą ucierania w gorącej mieszaninie estru izopropylowego i octanu etylu. Otrzymano 230 mg (44%) tytułowego związku.
D. Ester izopropylowy 4-dwumetyloamiąopiperydyno-1-karbonylb-Phe-L-aΠlloglicylon^CSta
200 mg tytułowego związku z punktu C zminowano chlorowodorkiem dwumntyloamiąy i otrzymano 146 mg tytułowego związku.
E. Chlorowodorek estru izopropylowego 4-dwuaminopiperydyąo-1 -karbonylo-Phe-Lzlliloglicylo-norCStz
146 mg związku z punktu D przekształcono w chlorowodorek, stosując metodę B. Po odsączeniu z eteru etylowego otrzymano 137 mg (86 %) tytułowego związku w postaci bladożółtego stałego produktu. HPLC (60/40): 2,54 minuty (97%). FAB-MS m/e (względne natężenie): 642,5 (MH+), 302,2, 274,3, Częściowe widmo Ή NMR (CD3OD, 300 MHz) δ : 1,25 (d, 3H, J=6,2Hz), 1,29 (d, 3H, J=7l4He), 1,90 (m, 1H), 2,45 (m, 1H), 2,52 (m, 1H), 2,81 (bs, 6H), 2,90 (dd, 1 H,J= 10,9 i 14,1 Hz), 4,09 (d, 1H, J=2,4Hz), 5,00 (m, 1H), 5,10 (m, 2H), 5,80 (m, 1H), 7,20 (m, 5H) ppm.
Przykład XXVII. Ester izopropylowy 4-/1-piroiidyąylo/-piperydyąo-1-karbbnylbPhe-L-alllioglicylo-norCSta
Stosując metodę A, 100 mg estru izopropylowego 4-piperydono-1-karbbnylo-Phe-L-allilbglicylo-norCStz poddano reakcji z pirolidyną i cyjanoboro wodorkiem sodowym. Otrzymaną wolną aminę przekształcono w chlorowodorek, stosując metodę B. Otrzymano 46 mg (41%) tytułowego związku w postaci bladożółtego proszku. HPLC (70/30): 3,09 minut (92%). FABMS m/e (względne natężenie): 668,5 (MH+), 328,2, 300,3. Częściowe widmo Ή NMR (300 MHz, CDCI3) δ : 1,24 (d, 3H, J=6,3Hz), 1,26 (d, 3H, J=6,1Hz), 2,80 (m, 2H), 2,94 (dd, 1H, J=8,6 i 14,1 Hz), 3,20 (dd, 1H, J=5,3 i 14,1 Hz), 3,50 (m, 1H), 3,70 (m, 2H), 4,10 (m, 1H), 4,82 (d, 1H, J=4,0He), 5,10 (m, 2H), 5,60 (m, 1H), 6,41 (d, 1H, J=7,0Hz), 6,89 (d, 1H, J=9,4Hz), 7,30 (m, 5H) ppm.
Przykład XXVIII. Ester izopropylowy /4-/4-dwunm0yloamino/-1-piper·ydyno/-2Rbenzylosukcynbilo-SMnkys-norCSCz
A. 4-/4-picknyyono-2R-beezylobursztynizą 1 -benzylu
1,82g 2R-benzylobursztyąiaą 1 -benzylu (otrzymanego w sposób opisany przez J. Plzttnerz i wsp. w J.Med.Chem,. 11, 2277 (1988) poddano reakcji sprzęgania z 1,03g jednbwodeiznu chlorowodorku 4-piperydonu. Otrzymano 2,08g (90%) tytułowego związku.
B. Ester izopropylowy 4-/4-pipknydeno/-2R-beezzlosskccyoiio-SMeCys-norCSta
Poddając 1,90g związku z punktu A uwodornieniu w etanolu w obecności Pd(OH)2, w ciągu 16 godzin i pod ciśnieniem wodoru około 140 kPa. Otrzymano 760 mg (53%) wolnego kwasu. Surowy kwas sprzęgnięto z estrem izopropylowym SMe-Cys-norCStz. Po oczyszczeniu chromatograficznym na żelu krzemionkowym (elucjz octanem etylu) otrzymano 405 mg (27%) tytułowego związku.
C. Ester izopropylowy 4-/4-dwumetyloaminb/-1-piperydyno-2R-benzylosukcynbiloSMeCys-nbrCScz
105 mg związku z punktu B poddano redukcyjnemu aminowaniu chlorowodorkiem dwmetyloaminy, stosując metodę A. Otrzymano tytułowy związek. FAB-MS m/e (względne natężenie): 661,3 (MH+), 301,2. Widmo lH NMR (300 MHz, CDCI3, dwa rotamery) δ : 1,22
266 526 (d, 3H), 2,23 (d, 3H), 2,23 (s, 25H), 2,24 (s, 2,5H), 3,70 (m, 2H), 4,05 (d, 2H), 4,52 (m, 2H), 5,00 (septet, 2H), 6,66 (d, 0,5H), 6,70 (d, 0,5H), 6,74 (d, 0,5H), 6,72 (d, 0,5H), 7,20 (m, 6H), ppm. hPlC (70/30): 3,05 minut (95%). Wolną aminę przekształcono w 62 mg (37%) chlorowodorku, stosując metodę B.
Przykład XXIX Ester izopropylowy 4-dwuaminopiperydyne-2-karbonylo-3-L-fenylolaktylo-SMeCys-nerCSta
A. Kwos 4-piperydone-2-karbonyle-3-L-fennlomlekowy
Do roztworu 692 mg imidazolu i 843 mg 1,2’-karbbenlodwuimidαzoru w 20 ml bezwodnego chlorku metylenu wkroplono w trakcie mieszmia w temperaturze 0°C 2,30g L^-fenylomleczanu benzylu w 5 ml chlorku metylenu. Całość mieszano w ciągu 25 minut w temperaturze 0°C, po czym ogrzano do temperatury 23°C i mieszano dodatkowo w ciągu 2 godziny. Do mieszaniny dodano jednorazowo roztwór 780 mg jednowodzianu chlorowodorku piperydonu i 564 mg trójetyleominy w 5 ml chlorku metylenu i całość mieszano w ciągu 2 8 godzin a następnie rozcieńczono 250 ml octanu etylu i ekstrahowano kolejno 2n roztworem wodorotlenku sodowego, wodą i solanką. Po wysuszeniu nad MgSCU roztwór zatężono i surową pozostałość oczyszczano chromatograficznie na żelu krzemionkowym, eluując mieszaninę 25:75 octanu etylu i heksanu. Otrzymany ester uwodorniono pod ciśnieniem około 320 kPa, w obecności K)0 mg Pd(OH)2, w etanolu, w ciągu 26 godzin, Mieszaninę przesączono przez ziemię okrzemkową (Celite) i zatężene. Otrzymano 2,00g (72%) tytułowego związku. Widmo *H NMR (CDCI3) δ :
2.40 (m, 4H), 3,28 (dd, 22H), 3,32 (dd, 2H), 3,70 (m, 4H), 5,27 (dd, 2H), 6,80 (bs, 2H), 7,25 (m, 5H) ppm.
B. Ester izopropylowy 4~piperydono-1-karbonylo-3-L-la0iylo-SMeCys-norCStα
422 mg związku z punktu A sprzęgnięto z 575 mg estru izopropylowego SMeCy s-no^Sta. Po czyszczeniu chromatograffcznym na żelu krzemionkowym, (elucja mieszaniną U octanu etylu i heksanu) otrzymano 390 mg (42%) tytułowego związku. Częściowe widmo *H NMR (300 MHz, CDC3) δ : 222 (d, 3H), 224 (d, 3H), 2,26 (s, 3H), 2,45 (dd, 2H), 2,95 (dd, 2H),
3,26 (dd, 2H), 3,3 (dd, 2H), 4,20 (m, 2H), 4,45 (m, 2H), 5,02 (septet, 2H), 5,32 (dd, 2H), 6,52 (d, 2H), 6,86 (d, 2H), 7,25 (m, 5H) ppm.
C. Ester izopropylowy 4-dwumetylerminopiperydyne-2-karbonylo-3-L-fenylelaktylo-SMeCyt-nerCStr
228 mg związku z punktu B poddano redukcyjnemu aminowaniu chlorowodorkiem dwumetyloaminy, stosując metodę A. Otrzymano 245 mg tytułowego związku. FAB-MS m/e (względne natężenie): 663 (MH+), 300, 275. Częściowe widmo 'Η NMR (300 MHz, CDCI3) δ : 2,22 (t, 6H), 3J0 (dd, 2H),3,28(m, 2H), 4,40 (m, 2H), 5,02 (septet, 2H),5,27(m, 2^),6,65 (m, 2H), 7,25 (m, 6H) ppm. Wolną zasadę przekształcono w chlorowodorek, stosując metodę
B. Otrzymano 232 mg (55%) bezbarwnego stałego produktu.
Przykład XXX. Ester izopropylowy 4-/2-pirolldynylo/-piperydyne-2-karbonylo-PheSer-norCSta
A. Ester izopropylowy Bos-Ser-norCsta
205g Boc-Ser sprzęgnięto z 2,30g estru izopropylowego norCSta. Produkt reakcji oczyszczano chromatograficznie na żelu krzemionkowym, eluując octanem etylu. Otrzymano 2,86g (93%) tytułowego związku.
B. Ester izopropylowy 4-piperydone-1-karbonyle-Phe-Ser-noeCSta
286g związku z punktu A poddano reakcji usuwania grupy ochronnej. Otrzymano 2,47g bezbarwnego stałego produktu, który sprzęgnięto z 2,38g 4-pipery dono-2 -karbonylo-Phe. Otrzymano 224g (47%) bezbarwnego stałego produktu, po oczyszczeniu chromatograficznym na żelu krzemionkowym (elucja mieszaniną 95:5 octanu etylu i metanolu). Częściowe widmo *H NMR (CDCI3) δ : 2,25 (d, 6H), 3,0 (dd, 2H), 3,28 (dd, 2H), 3,88 (dd, 2H), 4,20 (m, 2H),
4.40 (m, 2H), 4,55 (m, 2H), 5,02 (septet, 2H), 5,45 (d, 2H), 7,02 (d, 2H), 7,22 (m, 6 H) ppm. FAB-MS m/e (względne natężenie): 603 (MH+), 33,273, 245.
C. Ester izopropylowy 4-/1-pirolidynylo/piperydyno-1-karbonyle-Phe-Ser-norCStα
282 mg związku z punktu B poddano redukcyjnemu aminowmiu pirolidyną, stosując metodę A. Po oczyszczeniu chromatograficznym na żelu krzemionkowym (elucja 20% metanolem w octanie etylu) otrzymano 225 mg tytułowego związku. Wolną zasadę przekształcono w
166 526 chlorowodorek, stosując metodę B. Otrzymano 105 mg (50%). FAB-MS m/e (względne natężenie): 658 (MH+), 328, 300. Częściowe widmo *H NMR (CD3OD, 300 MHz) δ : 1,21 (d, 3H), 1,22 (d, 3H), 2,60 (m, 4H), 2,70 (m, 2H), 2,90 (dd, 1H),3,20(dd, 1H),3,40(dd, 1H),^^^0^^I^tet, 1H), 5,30 (d, 1H), 7,24 (m, 5H) ppm.
Przykład XXXI. Ester izopropylowy 4--bisa/-m5to0s2etyIo//mino'l-aipegydyno-1karbonylo-Phe-SMeCys-norCSta
734 mg estru izopropylowego 4-piperydono-1-karbonylo-Phe-aMeCys-aorCSta poddano redukcyjnemu aminowaniu z bis-/2-metoksyetyIo/aminą i otrzymano 120 mg (15%) tytułowego związku. FAB-MS m/e (względne natężęnie): 750,3 (MH+). Częściowe widmo Ή NMR (300 MHz, CDCL3) δ 1 12 5 (d, HH), U 8 (d, HH), 20 0 (s, HH2, 9,99 (dd, HI), 3,1 3 (dd, HI), 300 (s, 6H), 308 (t, 4H), 5,00 (m, 2H), 6,96 (d, 1H), 7,24 (m, 5H) ppm. Wolną zasadę przekształcono w 110 mg (91%) chlorowodorku mającego postać bezbarwnego stałego produktu, stosując do tego celu metodę B.
Przykład XXXII. Ester izopropylowy (1-dwumetyloamino--cykloheksano-4-karbonylo-Phe-SMeCys-norCSta
A. Ester izopropylowy 1-cykioheksanono-4-karbonylo-Phe-aMeCys-norCSta
320 mg kwasu 1 -aykioheksanono-4-aarboksyIowego sprzęgnięto z 1,23g estru izopropylowego Phe-SMeCys-norCSta. Surowy produkt oczyszczano za pomocą krystaHzacji z gorącej mieszaniny eteru izopropylowego i octanu etylu, i otrzymano 950 mg (67%) tytułowego związku. FAB-MS m/e (względne natężenie): 632,3 (MH+), 361,2, 244,3. Częściowe widmo ’H NMR (300 MHz, CDCl·-) δ : 1,25 (d, 6H), 2,65 (dd, 1H), 2,90 (dd, 1H), 3,08 (dd, 1H), 3,20 (dd, 1H), 4,10 (m, 1H), 4,70 (q, 1H), 5,07 (septet, 1H), 6,12 (m, 1H), 6,50 (d, 1H), 6,80 (m, 1H), 7,25 (m, 5H) ppm.
B. Ester izopropylowy /1-dwumetyloa5iinoa-cykloheksano-4-karbonylo-Phe-SMeCylnorCSta
300 mg estru izopropylowego 1-cykloheksanono-4-karbonylo-Phe-aMeCys-norCSta poddano redukcyjnemu aminowaniu chlorowodorkiem dwumetyloaminy, stosując metodę A. Otrzymano mieszaninę 1: 1 izomerów cis i trans cykloheksanu. Powyższych izomerów nie udało się rozdzielić chromatograficznie na żelu krzemionkowym przy zastosowaniu do elucji mieszaniny 85:15 octanu etylu i metanolu. FAB-MS m/e (względne natężenie): 661,3 (MH+), 154,1 119,9. Częściowe widmo *H NMR (300 MHz, CDC3, dwa izomery) δ : 1,30 (d, 6H), 2,09 (s, 3H), 2,19 (s, 3H), 2,24 (s, 3H), 2,68 (m, 1H), 3,00 (m, 2H), 3,20 (m, 1H), 4,10 (d, 1H), 4,65 (q, 1H), 5,05 (septet, 1H), 6,61 (d, 0,5Hz), 6,62 (d, 0,5H), 6,78 (d, 0,5H), 6,80 (d, 0,5H), 7,25 (m, 6 H) ppm.
Wolną zasadę przekształcono w chlorowodorek tytułowego związku, stosując metodę B. Otrzymano 200 mg (61%) bezbarwnego stałego produktu. HPLC (60/40): 4,24 i 5,46 minut (96%, 1:1).
Związki opisane w przykładach I - XXXII testowano na hamowanie aktywności reniny w plazmie ludzkiej przy pH 7,4, stosując test na hamowanie reniny opisany uprzednio. Dla wszystkich związków wartości IC-o była mniejsza niż 50 nanomoli.
Przykłady XXXII-XXXVII
Stosując postępowanie opisane w przykładzie XI i odpowiedni aminokwas zamiast OMeTyr, zsyntetyzowano związki zestawione w tabeli 1.
T a b e l a 1 wzór 10
Przykład R MS FAB/M+H/+ 1h NMR δ //częściowe/
XXIII wzór 11 668,4 2(20 /2d, 6H/, 2,07 /s, 3H/, 2,20 /s, 6H/, 7,20 /s,
XXXIV wzór 12 2,20 /2d, 6H/, 2,02 /s, 02/, 2,20 /s, 6H/, 5,0)2 /m, 1H/, 7,00 /m, 3H/
166 526
c. d. tabeli 1
Przykład R US FAB/M+H/+ ‘h NMR /CDCl,//δ //częściowe/
XXXV wzór 13 712,5 1,30 /2d, 6H/, 2,05 /s, 3H/, 2,17 /s, 6H/, 5,05 /m. 1H/, 6,70 /d, 1H/
XXXVI wzór 14 1,20 /2d, 6H/, 1,97 /s, 3H/, •2,05 /s, 6H/, 6,95 /d, 1H/, 6,09 /d, 1H/
XXCVII wzór 15 676,1 1,24 /2d, 6H/, 2,10 /s, 3H/, 2,41 /b, 6H/, 5,02 /m, 1H/
Stosując postępowanie z przykładu VI, zastępując grupę OMeSer grupą SMECys oraz stosując odpowiedni amid nor-CSt (przykład I) zamiast estru izopropylowego nor-CSta, otrzymano związki zestawione w tabeli 2.
Tabela 2 wzór 16
Przykład R FAB 'h NMR
XHWUI wzór 17 710,5 2,05 /s, 3H/, 2,24 /s, 6H/, 7,62 /m, 2H/, 8,50 /d, 1H/
XXXIX wzór 18 2,09 /s, 3H/, 2,30 /s, 6H, 4,85 /m, 1H/, 7,30 /m, 5H/
XL wzór 19 732,9 2,01 /s, 3H, 2,20 /s, 6H/, 2,40 /m, 4H/, 3,80 /m, 4H/, 7,20 / /m, 5H/
Przykład XLI
A. Chlorowodorek amidu 2-ominometylopilydylo-nolCSta
Do roztworu 150,5 mg (0,5 mola) kwasu Boc-norCSta (opis patentowy St. Zjedn. Am. nr 4 599 198) w 15 ml chlorku metylenu dodano porcjami 5, mg (0,5 mola) 2- aminometylopirydyny, 67,5g (0,5 mola) N-hydroksybenzotriazolu oraz 103 mg (0,5 mola) dwucyklohek^^l^ka^^<^<^^i^^^idu. Całość mieszano w ciągu nocy w pokojowej temperaturze, po czym przesączono i przesącz odparowano do sucha. Pozostałość rozpuszczono w octanie etylu, przesączono i roztwór przemyto nasyconym roztworem NaHCO, i solanką a następnie wysuszono nad MgSOą i odparowano. Uzyskano 256 mg Boc-pochodnej tytułowego związku w postaci piankowatego produktu. Stosując metodę D, produkt ten przekształcono w 200 mg tytułowego związku, mającego postać piankowatego produktu. Częściowe widmo 'Η NMR(CD ,OD) δ · 8,10 (d, 1H,J=8 Hz) ppm.
B. Stosując opisane* powyżej postępowanie otrzymano, stosując odpowiednią aminę, związki o wzorze 20, w którym R oznacza grupę o wzorze 18 lub grupę o wzorze 19.
Stosując postępowanie opisane w przykładzie VI, zastępując grupę OMeSer grupę SMeCys oraz stosując odpowiedni ester nor-CSta (przykład L ) ammiast esrru izrprrpylowgoo nor-CSta, otrzymano związki zestawione w tabeli 3.
166 526
Tabela 3 wzór 16
Przykład R FAB 1h NMR
XIII wzór 21 2,10 /s, ,Η/, 2(02 /s, 62/, 4,70 A, 4H/, 7(02 /u, 52/
XLIII wzór 22 0,95 /2d, ,Η/, 2,04 /s, ,H/, 2,22 /s, 6H/, 7(02 /u, 52/
XLIV wzór 2, 0,92 /2d, 62/, 2,10 /s, ,Η/, 2(02 /s, 6H/, 7(22 /u, 52/
XIV wzór 24 2,10 /s, ,Η/, 2,,0 /s, 32/, 5,20 /u, 1H/, 7(22α7(42 /u, 5H
XLVI wzór 25 1(22 /2d, 32/, 2,10 /s, 32/, 2,25 /s, 6H/, 7(15α7(05 /u, 52/
XLVII wzór 26 0,75 /m, 6H/, 2,05 /s, ,Η/, 2,20 /s, 6H/, 7(15α7(05 /u, 52/
XLVIII wzór 27 716,5 1,00 /4s, 6H/, 2,10 /s, ,Η/, 2,35 /s, 6H/, 5,00 /u, 12/, 7,30 /u, 5H/
XLIX wzór 28 716,5 1,05 /2d, 6H/, 2,10 /s, ,Η/, 2,25 /s, 62/, 4,80 /u, 1H/, 7,40 /u, 5H/
Przykład L.
A. Chlorowodorek estru kwasu trkns-2-α-αwomUtelocykiopentylrwegr nrr-CSta
Zawiesinę 200 mg chlorowodorku estru metylowego nor-CStk (opis patentowy St. Zjedn.
Am. nr 4 814 342) w 1,5g trans-2-8iakn-.5--dwumetylooyyiopenlanrlu [(L. Brener i H.C. Brown, J.Org. Chem., 42, 2702 (1977)] wysycrno bezwodnym gazowym chlorowodorem w temperaturze 25°C i następnie ogrzewano w ciągu nocy w temperaturze 90 - 100°C. Po ochłodzeniu do pokojowej temperatury mieszaninę reakcyjną rozcieńczono eterem etylowym i odsączono wytrącony osad. Otrzymano 215 mg tytułowego związku w postaci bezpostaciowego stałego produktu. Częściowe widmr *H NMR (DMSO-dó) δ : 0,95 (2d, 6H), 2,95 (m, 2H), 4,03 (t, 1H),
4,26 (t, 1H) ppm.
B. Stosując opisaną uprzednio metrdę i używając odpowiednie alkohole, otrzymano następujące pokrewne związki o wzorze 29, w którym R oznacza grupy o wzorach 24, 21 26 25, 22, 23, 28, 30 i 27. ’
Stosując postępowanie opisane w przykładach VIB i VIC, zastępując ester izopropylowy nor-CStk innym odpowiednim estrem nor-CStk (przykład XLI) oraz następnie stosując postępowanie podane w przykładzie XXVIII, otrzymano związki zestawione w tabeli 4.
166 526
Tabela 4 wzór 31
Przykład R FAB ^H NMR
LI ^z^Sz· 24 2,12 /s, 3H/, 2,32 /s, 6H/, 5,14 /br, β, 1H/, 7,30 /m, 5H/
LU wzór 26 2,25 /d, 6H/, 4,70 /m, 1H/, 7,30 /m, 5H/
LIII wzór 25 701 0,90 /2d, ĆH/, 2,15 /s, 3H/, 2,40 /s, 6H/, 4,80 /m, 1H/
LIV wzór 28 715,6 1,0)5 /2d, 6H/, 2,12 /s, 3H/, 2.25 /s, δί!/, 4,10 /m, UH/, 7.25 /m, 5H/
LV wzór 30 1,0 /m, 6H/, 2,10 /s, 3H/, 2,27 /s, 6H/, 4,30 /m, 5H
LVI wzór 27 715,4 0,97 /4s, 6H/, 2,12 /s, 2,25 /d, 6H/, 7,30 m, 5H
Stosując postępowanie z przykładu XIA-E, zastępując Phe naftylprlrnmąl i następnie stosując postępowanie z przykładu XIG oraz zamiast dwumetyloaminy stosując N-metyloetalub N-metylp-N’-Bcp:-klyleeoPwuaminę, otrzymano związki zestawione w tabeli 5.
Tabela 5 wzór 32
Przykład R FAB NMR
LVII wzór 33 742,4 1,25 /2d, 6H/l 2,05 /s, 3H/, 2,15 /s, 3H/, 5,05 /m, 1H/
LVIII wzór 34 666,6 1,15 /d, 6H/, 2,10 /s, 3H/, 2,65 /s, 3H/, 4,80 /s, 1H/, 7,85 /d, 1H/
Stosując postępowanie z przykładu XI oraz zastępując OMeTyr odpowiednim aminokwasem i dwumetyloaminę piperydyną, otrzymano związki zestawione w tabeli 6.
166 526
Tabela 6 wzór 35
Przykład R FAB 1H NMR
LIX wzór 36 708,4 1,30 /2d, 6H/, 2,10 /s, 3H/, 2,48 /m, 4H/, 7,35 /t, 1H/
LX wzór 37 752,6 1,21 /2d, 6H/, 2,01 /s, 3H/, 2,35 /m, 4H/, 6,95 /d, 1H/
LXI wzór 38 716,4 1,21 /2d, 6H/, 2,06 /s, 3H/, 2,20 /m, 4H/, 3,15b3,33 /m,5H/
Stosując postępowanie z przykładu VI, zastępując grupę OMeSer grupę SMeCys, a ester izopropylowy nor-CSta innym estrem nor-CSta, oraz zastępując w etapie E dwumetyloaminę piperydyną, otrzymano związki zestawione w tebeli 7.
Tabela 7 wzór 39
Przykład • R FAB 1h NMR
LXII wzór 24 2,06 /s, 3H/, 2,50 /m, 4H/, 5,35 /m, 1H/, 3,20b3,40 /m, 5H/
UCIII wzór 25 742,4 1,00 /2d, 3H/, 2,10 /s, 3H/, 4,80 /m, 1H/, 3,20b3,45 /m, 5H/
Powtarzając postępowanie z przykładu VI, stosując SMeCys zamiast OMeSer, a OMeTyr lub heksahydro-Phe zamiast Phe oraz zastępując ester izopropylowy nor-CSta odpowiednim estrem nor-CSta (przykład XLIX), otrzymano związki zestawione w tabeli 8.
T a b e l a 8 wzór 40
Przykład R r1 FAB 1 NMR
LXIV wzór 41 wzór 26 0,90 /m, 6H/, 2,15 /b, 3H/, 2,40 /s, 6H/,, 4,80 /m, 1H/
LXV wzór 41 wzór 25 1,00 /2d, 3H/, 2,10 /s, 3H/, 2,22 /d, 6H/, 4,72 /m, 1H/, 7,30 /m, 5H/
LXVI wzór 41 wzór 27 0,90 /4s, 6H/, 2,09 /s, 3H/, 2,29 /s, 6H/, 2,92 /m, 2H/
LXVV! wzór 42 wzór 26 0,90 /m, 6H/, 2,10 /b, 3H/, 2,30 /s, 6H/, 3,80 /s, 3H/, 6,85 /d, 2H/, 7,15 /s, 2H/
UVIII wzór 42 wzór 24 2,05 /b, 3H/, 2,40 /b, 3,75 /s, 3H/, 6,85 /d, 2H/, 7,20 /d, 2H/
166 526
c. d. tabeli 8
Przykład R r1 FAB 'h NMR
LXIX wzór 42 wzór 25 1,00 /2d, 3H/, 2,15 /b, 3H/, 2,30 /s, 6H/, 4,85 /m, 1H/
1X2 wzór 42 wzór 27 746,4 1,00 /4, 6H/, 2,10 /b, 3H/, 2,30 /b, 6,/, 3,80 /s, 3H/, 6,88 /d, 2H/, 7,15 /d, 2H/
P r z k ł a d LXXI. 9-Fluorofenylometytenooksykarbonylo-S-metylo-L-cystema
W reakcji N-/O-rluorenylometylenooksykalbonylookay/-rskcynimidu z S-metylo-L-cysteiną, prowadzonej sposobem opisanym w J.Org.Chem., 37,3404 (1972), otrzymano tytułowy związek z 99% wydajnością. fAb-MS m/e (względne natężenie)· 358 (25, M++H), 179 (100). Częściowe widmo 'H NMR (CDCI3) δ · 2,15 (s, 3H), 3,0 (m, 2H), 4,22 (t, 1H), 4,42 (d, 2H), 4,64 (q, 2H), 4,70 (d, 1H) ppm.
Przykład LXXII. 4-Dwumetyloammomerylopirerydyna
A. Boc-r4-rormzlo/pipefydyna
Do roztworu 9,6g chlorku meSoksymeSyloSrójfenylofosfoniowego w 75 ml bezwodnego tetrahydrofulanu dodano podczas mieszania 3,5g ΠI-lz.-butoksylanu potasowego. Całość mieszano w ciągu 2 godzin i następnie dolano 5,6g N-III-rz. -Boc-4-oipet'ydonu. Całość mieszano w ciągu 16 godzin, po czym do brązowej mieszaniny reakcyjnej dodano 1n roztwór NaOH, rozcieńczono octanem etylu i ekstrahowano nasyconym roztworem wodorowęglanu sodowego, solanką, wysuszono nad MgSOą i zatężono. Pozostałość ucierano z eterem etylowym i heksanem (1·1) i odsączono osad. Ług macierzysty zatężono i oczyszczono chromatograficznie na żelu krzemionkowym (30 pM, SI, Amicon). Otrzymano 5,1g eteru metylowego enolu. Produkt ten rozpuszczono w 40 ml tetrahydrofuranu i dodano 2 ml stężonego kwasu solnego. Całość mieszano w ciągu 1 godziny, po czym rozcieńczono octanem etylu, przemyto 0,5n roztworem NaOH i solanką, suszono nad Na2SOą i zatężono. Po oczyszczeniu chromatograficznym na żelu krzemionkowym (30 pM, SI, Amicon) otrzymano 3,90g tytułowego związku. Widmo *H NMR (300 MHz, CDCl) δ · 143 (s, 9H), 1,60 (m, 2H), 190 (m, 2H), 2,39 (m, 1H), 2,90 (m, 2H), 3,97 (m, 2H), 9,64 (s, 1H) ppm.
B. Boc-4-dwumetyloaminomety lopiperydyna
Stosując metodę A, 652 mg związku z punktu (a) poddano redukcyjnemu aminowaniu chlorowodorkiem dwumetyloaminy. Otrzymano 656 mg tytułowego związku. Widmo *H NMR (300 MHz, CDCI3) δ · 1,12 (m, 2H), 1,49 (s, 9H), 166 (m, 1H), 1,75 (m, 2H), 2,12 (d, 2H), 2,22 (s, 6H), 2,69 (m, 1H), 4,10 (m, 2h) ppm.
C. 4-DwumetyloaminomeSylopiperydyna
Porcję 346 mg produktu z punktu (b) poddano reakcji usuwania grupy ochronnej według metody B i otrzymano dwuchlorowodorek tytułowego związku.
Przykład LXXIII. 4-/-1 -piperydynometylo/pipelydyna
Stosując sposób opisany w przykładzie LXXII (b), 638 mg NrΠI-rzoBoc-/4-formylo/-piperydyny poddano redukcyynemu aminowaniu piperydyną. Po usunięciu grupy ochronnej uzyskano tytułowy związek.
Przykład LXXIV. 4-[Boc-rN-metylo/aminomerylo]-piperydyna
A. 1 -Bensylo-4-rBoc-/N-mztylo/aminometylo]-pipeΓydyna
Do ochłodzonej do temperatury 0°C mieszaniny benzenu i metanolu (30 ml) dodano 1,13g 1 -benzylo-4-rormzlopiperydyny i 1g sita molekularnego 4 (A) nonamerów, po czym mieszaninę przepuszczano w ciągu 15 minut gazową metyloaminą. Całość mieszano w temperaturze 0°C w ciągu 30 minut i następnie zatężono. Pozostałość rozpuszczono w metanolu, ochłodzono do temperatury 0°C i następnie dodano w jednej porcji 700 mg NaCNBH,. Mieszaninę ogrzano do
266 526 pokojowej temperatury,mieszano w ciągu 3 godzin, przesączono przez warstwę ziemi okrzemkowej, po czym zatężono, rozcieńczono octanem etylu, przemyto 2 n roztworem NoOH i solanką, suszono nad K2CO3 i zatężono. Otrzymano 2,20g żółtego oleistego produktu, który rozpuszczono w mieszaninie 2:2 dioksanu i wody i dodano 2,22g dwuwęglanu dwu-III-rz.-butyru. Wartość pH roztworu utrzymywano na poziomie Kł-H za pomocą 2n roztworu NaOH. Po upływie 2 godzin dioksan odparowano pod zmniejszonym ciśnieniem i pozostałość ekstrahowano dwukrotnie octanem etylu. Połączone ekstrakty organiczne przemyto 2 n roztworem NoOH i solanką, suszono nad K2CO3 i zatężono. Po oczyszczeniu chromatograficznym na żelu krzemionkowym (30 gM, SI, Amicon) otrzymano 0,80g tytułowego związku. Widmo *H NMR (300 MHz, CDC3) δ : 232 (m, 2H), 245 (s, 9H), 262 (m, 2H), 2,00 (m, 2H), 2,84 (s, 3H), 2,92 (m, 2H), 3,09 (d, 2H) ppm. FAB-MS: 329 (MH+).
B.4-/N-III-rz.-Bcei-—-meryloeaminometylo/-piperydynα
Do 50 ml 5% roztworu kwasu mrówkowego w metanolu zawierającego 375 mg czerni palladowej dodano 0,80g związku z punktu (o) w 10 ml metanolu. Całość mieszano pod azotem w ciągu 36 godzin, po czym przesączono i zatężono. Pozostałość rozpuszczono w octanie etylu, przemyto 2n roztworem NaOH i solanką, po czym suszono nad Na2SO4 i zatężono. Otrzymano 0,59g tytułowego związku w postaci bezbarwnego oleju. Widmo 2h NMR (CD3OD, 300 MHz) δ : 224 (m, 2H), 2,43 (s, 9H), 2,62 (m, 2H), 2,77 (m, 2H), 2,53 (dt, 2H), 2,82 (s, 3H), 3,03 (m, 2H), 3J2 (m, 2H) ppm.
Przykłady 2XXV-XCVni
Wykorzystując ogólną metodę A, zsyntetyzowano związki z tych przykładów drogą redukcyjnego aminowania odpowiedniego trójpeptydoketonu odpowiednią aminą.
166 526
Tabel , 9 wzór 43
fr- CA os
r- CM rd o \
CM ·> ·> * X
* *. rd CM CA « rd
rd •o <a *
* *0 o> * * X «
* «» w H B
o K » ca >4 » n rd
fc CA CA £- rd CA CA *
o O ·> * Ό tr
td «* • ·> • * ·> T3 Ό o
O 00 <A Ί} Q Ό >s, *
'10 \ \ \ \ IA
α» ·> «> O
o so 00 Ό 00 SO so rd CA •
O rd CM o επ u t* CM O OS «.
* «. rd * « * ·. * CA w
rd CM H r-l CM CM rd
β «. os
9 O * Ό CM ·> * O • » **%k *
X \ T3 * B \ s. w Ό
CA w \ fA w V» ca X « rd
w rd ca rd CA CA
rd o ca * so Q « IA
Q ·. OS • o « ·> «k Ό r-
O Ό •k K α ·> o Ό O Ό •
\ CM H IA
& Λ
\ '—
O o
a 10 10
i w σ\ \ \
X + so 00
«< + 00 CA
a t- e-
f—i
Ό 00
CO
fi fi
SO «rd
& t- CM CM
O O
O O
LA α o
« so & «5»
tt ·>
a a
CO CO
« IA CM W p?
u o
fA Λ XI
Ρί Pt P«
tQ ca £ NH
•łj·
a X
X CM\
CM A w 4>
X CM Ό α a
r-d N X3
Λ » Pt 1
Ό
CS
iM M
X >
1» rd
N M w
fi
166 526
c.d. tabeli 9
KO CM 0- KO M· • X KO 00 •
CM t- X CM 0- X a CM o X X
·> • •k a « • a ri •k •k a a
ri CM CM Bk ri ri CM CM ri m «k ri CM
X X x
• * w ·> • • a * a • » a « *
X X X ri a X X ri a X X s ri *d *d
w a K X a a X W X X X
<n m ri ·> m m ·> rn m rn *
TJ *d O o Ό KO m
·. * • Ό o • *d M- * «k *k *d o ri
»d CD a X «k *d o X « IA 'd ffi • *
x X X KO ŁA x <n Μ* * X X CM IA t-
ia ri K0 o • IA o •k X IA 00 CM « *
CM ri ŁA •k X CM ri « X a CM o • X X
o * ·< * m a * • m a ri «k rn a a
ri ri CM CM ri ri CM ri ri CM H CM
* * * ·>
O * * x • O • x * O • X •k •
X X X 3 'd X X a a 43 X X a *d *d
m a w m a ri X X rn X H X X
Cl r*> rn ri «η ri rn
• σ\ O «k ri CM s? ·> σ\ ŁA
« • * *d o Q *> Ό CM C0 o ·> *d o 00
o Ό co *d » O Ό 'd * • o -d * •
X X X X X X X X X \ SO
.O O O
X X X
X O o O
o o o o
σ\ 0> ri ri ri
X X X X
IA O CM
lA ri ri m
SO ri r- C-
i w
ri m m ri
00 O a o O
a O co X
fi fi fi
r- «Η Ti
CM CM CM
O O O
O O O
O β O
SO & & <&
Φ Φ
a a a
lA co W co
CM X CM X
o o o
1
a ffl oa
*3“ & & • Λ 'C o. a o
w a
m X ε X
IA KO
w h
C\J Ό O
Φ M H
a B B
w
H M
M W K
f» > H
r-( s
166 526
c.d. tabeli 9
KO oo • <n in h- ©
CM ·> o fc 3 3Ϊ CM • CM • b- • SO • rd
rd σ> * CM CM b- rd O m r-
·. • • • « ·>
W « Ό TJ « £ W ΒΪ £ ai
r\ <*> * <n «*> σκ KO rd CM
• TJ •0 σκ o □ * e • • •
DO «. «k co Q Ό o TJ TJ
\ \ O *φ r- \ 8
O 00 CM ·> « CM f*K KO KO 3
rd CM o rd t- CM f*\ o
·> * (Λ W SC * * * ·> * •
i-1 CM CM CM CM rd CM KO
O * * O «k O «. «.
\ 3 00 TJ \
r*\ W \ a a r\ W a 3 a
rd rd SO l/K rd <*K <*K CM
8 * oo in Q O
* TJ t- 00 Q • » Q * • • •
O TJ Ό ·. ·> O o a O TJ o fl TJ
\ KO \ \ >s.
o o O
\ \
o o o
o o o o <*\
t*- rd rd t*
o\ \
CO r\ OK t- CM
rd σ> CM (M t-
r- KO rd rd KO
rd rd
00 o O O
a a W
£ o £
b- «Η s •H
CM CM
O o O
o o O
<0 o a
KO £ £ £
O Φ
a a 0
in CO CO o
aT o sT o o
1 1
c W o W
1 4 KO Λ 1 e KO
0.5)0 Pd p,se
g g g
>-
CM h S5
Ό CM CM
M Φ •
* a a
hd
hd
kd M
rd a 3
166 526
c.d* tabeli 9
οτ KO CM cm a * *x ri’ W S \ \ S «8 W W 8 mm·***». tj m • * Ό CM O 4» CD ''ś. * · \ \ A CM oo co <—ł · * CO CM · \ **x • * m W a O CM r4 H o . · » \ \ 53 Ό -U m W rH \ \ r-i m o » σ\ σ\ « · ό o co O TJ Ό · · \ \ \ ·** kO ι-l ΓΊ <M <*> O \ ri* N Π » S » · \ m * K Η H W W Η 'o m (*> - ·. Ό σ\ • » Ό Ό O *0 <D Ό 'k * *x \ a co LA 0\ r-ł rH * CM O m \ • · · c*\ K rH CM CM H * O · * **>. · \ \ \ W B m w χ h •-i m ko O · CM Q · · U CO O Ό Π) Ό « 'χ X \ 'Χ <Λ Np m O t- 1 » · rH cm m · t— ·> ·> X \ * W W cm m w CM • · a ’ϋ · \ 8 X LA A 00 Tf • * * •Sfc O CM W A O - * \ \ » m W W 8 h m o * * m o o o* · *s» C-
<7\ 770/100/° o \ o LA O KO r4 \ >> co σ\ 00 CM t*· f-ł o \ o o rH σ\ KO
oo r-1 « rd O W w c°
c- fi •H CM O O R •H CM O O Fi X) NC0 ► <Φ
KO β & O £ «0 &
a fi β O a CO CM g a co CM g
i W ł—1 KO 1 u α i 1 w* M ko 1 o P. 1 fi
m w ss g o
CM & CM Φ a sz; CM Φ a s
rH H W W > w >
166 526
c.d. tabeli 9
O 1 ia <n CM O CM
O CM CM r—1 rH CM O Ch
* ·> • * * * *
cm m ·> r- CM cl CM M· \X>
* * * w> * •
• *N» • >s X. **> >x Si s.
> w 3 a a a a 3
W <n CM a M3 <*> <n m d
• « * ♦ * •
• T> « B Ό n *d a a fi
β fi \ \
00 o IA <*> CM CM o CM
<r> m CM CM CM c1 r- σ\
* * * * * * Wb « * *
o O 04 a r-ł CM d CM <*>
rH O * • IA O * O * * *
·> s >s.
<”> w a 33 fi a a a 3 »
rH (*\ H H n d d
8 « ·> <*\ 8 ·> s « * *
o a Ό Ό O (0 o Ό Ό 4* fi
r- \
o ja
\
o O
o O
i—1 d
σ\
łA r-
(A CD
\O CM
1 33
<n<*> »“4 d
00 κ o O O
o oa W W
fi fi
c— »4 •H d
O CM CM
n σ\ co co
a fl co
\X> «& & &
• © •
a a a
ia CO CO CO
CM W CM S 3?
s 6 O
n
XI fM & £
3?
o o O
S5
CM K 2g a
£ ρς
Φ Φ Φ
a a a
l-ł
H d
W K K
> 3» ?·
r—ł 9 a
166 526
•b •k
Η a a
γ4 Η • σ\ • rł
• • ΙΑ θ B
* Η <Μ • • • • ·»
X. r-ł >K 4> β
η w ο • o (A n w **x 3 3 X.
οκ Η α • KO • CM
» « ΙΑ >» X. ·> <Λ CM • KO
*ΰ r-ł • 3 •o • •0 ·»
γ4 κο • *s. r-ł «k »4
• r- *X> JO
• • a * * a «
CM X Β CM IA Θ CM IA **x >>
* <*\ • \ • a o a a
ο rd * rł r-ł <A r-ł rH H
• σ\ CM •
α 4» ο a • KO O * w • •
Ό * ΙΑ α ·> > 4> B a a
« \ CM • Q X. *>» * X
ο r-ł o
cT Ο « e Φ e* • *«x cT M- <Λ O r4 n IA 3 O rł
ο * a α * a o « • « «
r-l r-ł CM H CM rH «Α
43 •o
Ο o >x
ο CM o CM
γΗ σ> rł σκ
σ\ \ >x.
ια ια OK o>
t- r-ł o CM
κο σ> ko <n
γ4 rł
ω ο O
w a
t- £ τΊ £ rł
CM 8 CM 8
α β
κο $ &
• ©
a a
ιη CO GO
CM 8 aw 8
λ jp
Ρ» Pi
CM w
ο o
&5
CM Ο Λ
CM 4·
4* w
Η
«
rH Β o
5 M
266 526
CU ·> ·> W r4 ♦ s W r4 CU *d •0 O O
r-H ·> rH r4 * Fm «
« * & c~ uy
* « Ό • ·> w \ iH
uy χί Ό B uy « «
W • *-> \ w * ^X>
cy rU rH c- W
cy >- Cd * » r-ł
·, » uy O O ·> * CY \
Ό O • « • Ό O X ·>
CJ in \ \ • H tJ
m • * O Φ w * Fm
CJ rd s CU o uy B 43
Ο ·, K w w ·> ·, ·> \
ł~ł «—ł Cd cy e-ł rd r4 CU r—< o o
o ·> » O ’Μ- v-D
\ o FI B \ 00 ·> •
C\ w \ \ CY w ’Φ ^J-
r—ł cy rH cy H
O cy CU o O t- ·. «>
o r4 r- CY « « o \ «
o Ό ·> * * O Ό * w K a
\ \ CU <*\ xj· \ Cd rH rd
&
X3 \
\ O O
uy O o UY
σ\ cy r—1 c4 σ\
\ \ \
<Λ cy . rH rd
CY r- O
CU t- CY
rH
00 O O
w w
fi fi
r- •H
CU CU
O O
O O
o
& £
<D O
a a
UY CO CO
Cd CJ
CH w o
X3 -a
Pm Pm
Cd CJ
w «
c o
KO
’φ·
CU &
CU Fm
w Ό
N
»
M K
O w
W o
H
οτ r-ł » CM · 8 • \ CM W CM A * CM i-ł • · Ό O * **x f-ł Ό · t* K Χχ A KO · * α cm · · • \ O \ \ Ό * W W •s. CM H CM CM KO * · · · CN CM **x Β Ό • W \ rd * rH \ O CO o W * A os *X A 6 · * m * x ko x «Η H CM Q O · * O CO * 33 X Ό \ \ m rH »-( v m · · CM 8 8 • *x \ r-ł · · > » CM CM » K *x. O O χ. A · · W ·> O M* A m r4 ·> ·> « » · CM X >·. Ό tn w 33 53 'Χ f*> rri H cm cm 55 » * · cm <-ι m <a Β Ό • · · -X. >» ι—1 CM rd »-t m <n O · * KO CM Χχ Χχ CO » · · Q W \ CM t- o m m m · * · O · r-ł \ X *x O Ό * W X W \ *X. CM m rt H
σ\ •Ω O **> o co ι-H <J\ \ \ Er ίο CM h- ,Ω X O X o C— i-l C— *X £: t- o ko m ko
co r4 § i-ł O W
r- fi •H CM O O fi vH CM O o
κθ co & CD i?
A a co 5? o o a co 5? O
*$ 1 W Μ KO 1 o Οι 1 h o NO ft A
m CM .—1 6 aT O
CM SS CM £ Ss CM O a
rH M ł-ł ł-ł O > M O W
166 526
c.d. tabeli 9
GO CO • • CM a 1 X > 1 X
CM d * * d fA * X 3 X 3 fA CM 3 3
X « Wb •b
* ·> 3 « «b • X Ό B
X X β a X a X X
a a X X a d B
ca ko w KO O o
«σ CA o * d o IA
·> * ό fr- KO * *d « w r-
d o * ·& Ό IA «>
X X C- CA tT X X •b IA
IA fA CA * * <A O X X *
CM CM X X X CM σ\ K w X
« » CA 3 a a ·> » d d X
O d CM d d d CM d
·> ·> *
O * X •b • * o • Ό Ό «
X X 3 B β B X X Ό Ό B
<λ a X X X Q a X X X
d fA O fA
O • co co IA <A O O o
Q · TJ KO o O Q * CM IA d
o H Ό * •b •b O CO ·> * •
\ 'χ X fA IA X X fA IA
X5
X
O X
x> O o
C— X ’Μ- d co
σκ «Ο · ”X X X
CO O OJ IA t- σ\
O\ d O (A σ\ CM
CO x oi X KO fA
d d
GO O O
a W
fi fi
C* H •H
CM CM
O o
O o
« co
£ &
in R R
Ό Ό
H d H(A
» IA B ir\
Λ Λ
Aj PM
ca NH NH 1
CM
s; IA
CM CM
• R
a Ό
M
»
d
> >
O o
K M
166 526
c.d. tabeli 9
ri m * m ri • * X X 3 I /HT .88
ri CM X ri » • GO
IA * * X *d cn
• * •d *d * a X * *
X X ri *e *d X IA X
a X X X a KO a
SO m » KO ri b- Bk CM
B CM CM Bk X
·> • X CA ri B> * CM 3 *
'd *d • » ’ΰ O *d
X X lA CM X X • X
ri X B>
SO CM * * M· σ> a Ό m
CM <n CM X X CM O IA *d o X
o • ·> a 1H * ·> • X Bk a
ri ri ri CM ri b- CM
X o
O » a • * O Bk B> ri Bk *
X X IA β a X £ O Bk X ’ΰ
Q X • X X o X a X
O rn ri o ri ri
m GO o <n o B> O
Q • • m o Q • ri X * so
o ’ΰ ffl • Bk O a Bk a a •
X X X CM *φ X X CM rn X b-
«o X o X
X o X X O
IA o o o o
o> t ri IA rn ri
X X X X X
lA (A rn r~ <n
t- ri r- ri
SO m r- KO
ri ri
GO O O
a a
t— fi fi fi ri
Al CM
O o
O o
ffl ffl
KO & £
B B
a a
co CO
in aT aT
O u
i a
a Hi KO
a 1 c
a i
<n aT a? O
O
525 a
X X
cm X a
X X
B
a a
•rł
Hi Hi
W Hi
> Hi
O >
H o
►i
•
O ri & I i?
$ β
B
B
M
3
O o
B »
B ffl ri ri Ό *d
166 526
166 526
Ο
II djX
Cz Η T^H |
II H =,
O R
Wżer 1
O
II c
?+
R2-N-(CH2),
X R7
4V
T
Wzór 4
Wzór 5
R-N-tCH,),
R2 . . O Dx(^ H O HxCxu (CH2)m ll ł>H 1 ii Ι>Ή 6 y/L \7/L\r/N\r/LL\r/K „'-•-(CHA J H-j, h H^n Wzflr6 NaCNB^l R’R2NH lub R1RzNH*HCl 0 Ηχέχμ
A f H R6 H<t N H*ę H R4 H ÓH
(CH,),
?
I’ z 1 ^(CH2)n Wzór 9
Schemat 1
R1 (CH2k f®‘-<chaJJ-Y„a
X R7
Wzór 2
166 526
SMECys-NORCSta- O
Wzór 11
R
Wzór 10
Wzór 12
-✓Ww
Wzór 14
Wzór 15
266 526 ^O^^Phe-SMECys-NORCSta-R
Wzór 16
Wzór 18 Wzór 19 °-Cf °<D
Wzór 21 Wzór 22 o-C
O-O
Wzór 24 o-C
Wzór 26
Wzór 27
Wzór 28
166 526
Wzór 29 Wzór 30 h ^^CO-SMECys
NORCSTa-R
Wzór 31 •N^^N^p-naftyloalaminci ] — — SMECys-NORCSta-OWzór 32
Wzór 33
Wzór 34
166 526 θ A^ć-SMeCys-WR C3a-o{ VR
Wzór 35 z
Wzór 40
266 526
Wzór 41 Wzór 42
Wzór 43
Wzór 45
Wzór 46
''Γ/'
Wzór 47
Wzór 48
Wzór 49
166 526
Wzór 50
ck
Wzór 52
Wzór 53
Rl3 B
Ύ o
R|3 zB o o
Wzór 55
Wzór 56
Departament Wydawnictw UP RP. Nakład 90 egz. Cena 1,00 zł.

Claims (3)

  1. Zastrzeżenia patentowe
    Sposób wytwarzania nowych polipeptydów o wzorze 1, w którym Q oznacza grupę o wzorze
  2. 2, pod warunkiem, że R7 może być nieobecny i jeżeli R7 nie występuje, to wtedy atom azotu nie ma ładunku dodatniego i X' jest nieobecny, X' oznacza dopuszczalny w farmacji anion lub anion z uwspólnioną parą elektronów, 1 oznacza liczbę 0, 1, 2 lub 3, m i n niezależnie od siebie oznaczają liczbę 0,1 lub 2, Y oznacza grupę CH lub atom azotu, Rl i R2 oznaczają niezależnie od siebie atom wodoru, grupę C ι-8-alkilową, amino-C1--alkilową, hydroksyl--alkilową, C1-6-alkoksy-C2--alkilową, C1-6-alkiloamino-C2--alkilową, fenylową, naftylową, pirydylową, imidazolilową, tiazolilową . dwu-/C1--alkilo/amino-C2--alkilową, albo -ankiową, albo R 1 i r2 razem z atomem azotu, do którego są przyłączone, tworzą 4 - 8-członowy pierścień zawierający 0,1 lub 2 atomy wybrane spośród atomów tlenu, azotu i siarki, zaś pozostałe atomy w pierścieniu są atomami węgla, a pierścień ewentualnie zawiera jedno, lub dwa lub trzy podwójne wiązania, a także ten pierścień ewentualnie zawiera jeden lub dwa podstawniki wybrane spośród grupy hydroksylowej lub grupy C l-6-alkiiowej, przy czym każda grupa hydroksylowa, o ile występuje, jest przyłączona do atomu węgla w pierścieniu, a każda ewentualnie obecna grupa C1-^-^H^^^^,wa jest przyłączona do atomu węgla lub azotu w pierścieniu, r7 oznacza grupę Cl--alkiiową, fenylo-Ct--alkilową, fenylo-C1--alkilo-C1--alkiloaminową, Z oznacza grupę CH2, atom tlenu lub grupę o wzorze NR, w którym Rn oznacza atom wodoru lub grupę Ct-5-alkilową, D i E niezależnie od siebie oznaczają atom wodoru lub grupę C1--alkilową, albo D i E razem z atomem węgla, do którego są przyłączone, tworzą pierścień cyklopropylowy, cyklobutylowy lub cyklopentylowy, Rroznacza grupę fenylową, podstawioną grupę fenylową, C5-7-cykloalkilową, C5-7-cykloalkilometylową, 1-naftylową, 2-naftylową, podstawioną grupę Cs-7-cykloalkilową, fenylometylową, podstawioną grupę fenylometylową, 2-tienylową, podstawioną grupę 2-tienylową, 3-tienylową lub podstawioną grupę
  3. 3-tienylową, przy czym podstawnikami w grupie fenylowej, C5-7-cykloalkilowej, fenylometylowej, 2-tienylowej lub 3-tienylowej są jedna lub dwie grupy, takie jak grupa C1--alkoksylowa, C1-5-alkilowa, atom chlorowca i grupa hydroksylowa, R4 oznacza grupę C1--alkilową, podstawioną grupę Ci--alkilową, w której grupa alkilowa jest podstawiona grupą hydroksylową lub 1 - 7 atomami fluoru, grupę HCF2S-C1-5-alkilową, 4-imidazolilometylową, 4-tiazolilometylową, C2-8-alkenylometylową, Cι--alkilo-O-Cι--alkiiową albo C1--alki!o-S-C1--alkilową, R 3 oznacza grupę 2-tienylową, 3-tienylową, C5-7-cykloalkilową C5-7-cykloalkenylową, 1,4-cykloheksadienylową, Cι--alkilową, podstawioną grupę C1--alkilową, Cι-8-alkoksylową, fenylową lub podstawioną fenylową, w których to grupach jednym lub dwoma podstawnikami są takie grupy jak Ch5-alkoksylowa, C1-5-alkilowa, atom chlorowca, grupa hydroksylowa lub grupa keto, albo grupa C1--alkilowa jest podstawiona 1 - 7 atomami fluoru, R6 oznacza grupę COO-Cuo-alkilową, COOCH2-Cι--/podstawionί^alkilową, w której reszta alkilowa jest perfluorowana albo podstawiona 1 - 7 atomami fluoru, grupę C1--alkilotiometylową, 2-imidazolilową, 2- tiazolilową lub 2-oksazolilową, które to grupy 2-imidazolilowa, 2-tiazolilowa i 2-oksazolilowa mogą być ewentualnie jedno- lub dwupodstawione przy atomach węgla pierścienia jednym lub dwoma podstawnikami wybranymi niezależnie z atomu wodoru, grupy Cl--alkiiowej, C2-C5-alkenylowej, atomu chlorowca lub grupy Cl-5-alkoksykarbonylowej, a wspomniana grupa imidazolilowa może dodatkowo być podstawiona przy jednym z atomów azotu w pierścieniu grupą C1-5-alkilową, grupę fenylową, C5-7-cykloalkilową, grupę o wzorze CONR^R^, w którym R*6 i Rn niezależnie od siebie wybrane są z grup podstawników podanych uprzednio w definicji R1 i r2, z tym wyjątkiem, że r16 i Rn nie mogą razem z atomem azotu, do którego są przyłączone, tworzyć pierścienia, albo grupę o wzorze CONHR-, w którym R- oznacza grupę Cl--alkiiową lub grupę Cl--alkiiową podstawioną 1 - 3 atomami chlorowca albo grupę 4-morfolinową, tiazolilową lub imidazolilową, albo r6 oznacza grupę o wzorze 3 lub grupę o wzorze 4, w których to wzorach j oznacza liczbę 1 lub 2, Rn oznacza atom wodoru, grupę C^6-alkilową lub grupę
    166 526
    CH2OH, M oznacza atom tlenu lub siarki albo grupę o wzorze NR12, w którym R12 oznacza atom wodoru lub grupę Ci6-alkilową, T oznacza atom tlenu lub siarki, E oznacza atom tlenu lub siarki, grupę C=CH2, grupę o wzorze NR14, w którym R14 oznacza atom wodoru lub grupę Cie-aHlkiową, albo grupę o wzorze CHRi, w którym R 1 oznacza grupę Ci—Ucilową, albo R^oznacza grupę o wzorze 5, w którym każde G oznacza niezależnie atom tlenu lub siarki a i oznacza niezależnie liczbę 2, 3 lub 4, i ich dopuszczalnej w farmacji soli, znamienny tym, że związek o wzorze 6, w którym Y, Z, D, E, R3, R4, R5, R6, m i n mają znaczenie podane uprzednio, poddaje się reakcji z (a) aminą o wzorze R*r2nH, w którym R1 i r2 mają znaczenie podane uprzednio, w obecności odpowiedniego czynnika redukcyjnego, albo z (b) chlorowodorkiem aminy o wzorze r4r2NH, w którym R1 i R2 mają znaczenie podane uprzednio, i ewentualnie otrzymany produkt reakcji przekształca się w jego dopuszczalną w farmacji sól.
PL91288761A 1990-01-18 1991-01-18 S posób wytwarzania nowych polipeptydów PL PL PL166526B1 (pl)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US46706890A 1990-01-18 1990-01-18

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL288761A1 PL288761A1 (en) 1992-10-05
PL166526B1 true PL166526B1 (pl) 1995-05-31

Family

ID=23854216

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL29467991A PL294679A1 (en) 1990-01-18 1991-01-18 Method of obtaining novel polypeptides
PL91288761A PL166526B1 (pl) 1990-01-18 1991-01-18 S posób wytwarzania nowych polipeptydów PL PL

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL29467991A PL294679A1 (en) 1990-01-18 1991-01-18 Method of obtaining novel polypeptides

Country Status (19)

Country Link
EP (2) EP0661292A1 (pl)
JP (1) JPH05213873A (pl)
KR (1) KR930007431B1 (pl)
CN (1) CN1054071A (pl)
AU (1) AU632894B2 (pl)
BR (1) BR9100221A (pl)
CA (1) CA2034315A1 (pl)
CS (1) CS9691A2 (pl)
FI (1) FI910254L (pl)
HU (1) HUT56853A (pl)
IE (1) IE910146A1 (pl)
IL (1) IL96928A0 (pl)
NO (1) NO910200L (pl)
NZ (1) NZ236810A (pl)
PL (2) PL294679A1 (pl)
PT (1) PT96489A (pl)
TW (1) TW209870B (pl)
YU (1) YU7191A (pl)
ZA (1) ZA91345B (pl)

Families Citing this family (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5280122A (en) * 1992-07-01 1994-01-18 Pfizer Inc. Resolution of 2-benzyl-4-piperidone-succinic acid
US5212185A (en) * 1992-08-14 1993-05-18 G. D. Searle & Co. Piperidinyl-terminated alkylamino ethynyl alanine amino diol compounds for treatment of hypertension
US5422349A (en) * 1992-08-14 1995-06-06 G. D. Seale & Co. Morpholino-oxazinyl-terminated alkylamino ethynyl alanine amino diol compounds for treatment of hypertension
CA2142883A1 (en) * 1992-08-21 1994-03-03 Saizo Shibata Dioxacycloalkane compound having renin-inhibitory activity
US5420283A (en) * 1993-08-02 1995-05-30 Pfizer Inc. Resolution of (R)-2-benzylsuccinic acid 4-[4-(N-t-butoxycarbonylmethylamino)-piperidine] amide
FR2777566B1 (fr) 1998-04-15 2003-02-21 Synthelabo Derives d'azacycloalcanes, leur preparation et leur application en therapeutique
WO2000063168A1 (en) * 1999-04-16 2000-10-26 Coelacanth Chemical Corporation Synthesis of azetidine derivatives
MXPA02010028A (es) * 2000-04-10 2004-08-19 Ishida Yuichi Hipotensores.
DE10250082A1 (de) 2002-10-25 2004-05-13 Boehringer Ingelheim Pharma Gmbh & Co. Kg Ausgewählte CGRP-Antagonisten, Verfahren zu deren Herstellung sowie deren Verwendung als Arzneimittel
US7595312B2 (en) 2002-10-25 2009-09-29 Boehringer Ingelheim Pharma Gmbh & Co. Kg Selected CGRP antagonists, processes for preparing them and their use as pharmaceutical compositions
DE102004015723A1 (de) 2004-03-29 2005-10-20 Boehringer Ingelheim Pharma Ausgewählte CGRP-Antagonisten, Verfahren zu deren Herstellung sowie deren Verwendung als Arzneimittel
US7491717B2 (en) 2005-03-23 2009-02-17 Boehringer Ingelheim International Gmbh Selected CGRP-antagonists, process for preparing them and their use as pharmaceutical compositions
TW200819457A (en) 2006-08-30 2008-05-01 Actelion Pharmaceuticals Ltd Spiro antibiotic derivatives
WO2018074455A1 (ja) * 2016-10-21 2018-04-26 富士レビオ株式会社 レニン濃度の免疫学的測定法

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IL81234A (en) * 1986-01-16 1992-09-06 Abbott Lab Peptidylaminodiols,process for their preparation and pharmaceutical compositions comprising them
MY103189A (en) * 1986-10-31 1993-05-29 Pfizer Nor-statine and nor-cyclostatine polypeptides
DE3733296A1 (de) * 1987-10-02 1989-04-20 Merck Patent Gmbh Aminosaeurederivate
EP0314239A3 (en) * 1987-10-28 1990-12-27 Merck & Co. Inc. Tripeptide renin inhibitors with n-terminal ureido or sulfamido groups
DE3812328A1 (de) * 1988-04-14 1989-10-26 Merck Patent Gmbh Aminosaeurederivate
DE3814325A1 (de) * 1988-04-28 1989-11-09 Merck Patent Gmbh Aminosaeurederivate
DE3840289A1 (de) * 1988-11-30 1990-05-31 Merck Patent Gmbh Aminosaeurederivate
DE3913272A1 (de) * 1989-04-22 1990-10-25 Hoechst Ag Dipeptid-derivate mit enzym-inhibitorischer wirkung
DK0410278T3 (da) * 1989-07-25 1994-05-24 Hoechst Ag Reninhæmmende aminooligohydroxyderivater

Also Published As

Publication number Publication date
EP0438233A2 (en) 1991-07-24
YU7191A (sh) 1994-06-24
FI910254A7 (fi) 1991-07-19
ZA91345B (en) 1992-08-26
CN1054071A (zh) 1991-08-28
NO910200D0 (no) 1991-01-17
HUT56853A (en) 1991-10-28
FI910254L (fi) 1991-07-19
FI910254A0 (fi) 1991-01-17
EP0661292A1 (en) 1995-07-05
HU910134D0 (en) 1991-08-28
AU6946491A (en) 1991-07-25
PL288761A1 (en) 1992-10-05
PT96489A (pt) 1991-10-15
KR910014396A (ko) 1991-08-31
NZ236810A (en) 1993-11-25
BR9100221A (pt) 1991-10-22
PL294679A1 (en) 1992-10-19
CA2034315A1 (en) 1991-07-19
TW209870B (pl) 1993-07-21
AU632894B2 (en) 1993-01-14
NO910200L (no) 1991-07-19
KR930007431B1 (ko) 1993-08-10
JPH05213873A (ja) 1993-08-24
CS9691A2 (en) 1991-09-15
IE910146A1 (en) 1991-07-31
IL96928A0 (en) 1992-03-29
EP0438233A3 (en) 1992-09-09

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US4863904A (en) Dipeptides as renin inhibitors
JP2656702B2 (ja) ペプチド性キヌクリジン
PL166526B1 (pl) S posób wytwarzania nowych polipeptydów PL PL
KR100388747B1 (ko) 인돌유도체
SK14302000A3 (sk) Deriváty indolyl-3-glyoxylovej kyseliny s protinádorovým účinkom
US20100222340A1 (en) SUBSTITUTED PYRIDO [1,2-a] ISOQUINOLINE DERIVATIVES
SK285618B6 (sk) N-Substituované indol-3-glyoxylamidy s antiastmatickým, antialergickým a imunosupresívnym/imunomodulujúcim účinkom, použitie týchto zlúčenín na výrobu liečivého prípravku, liečivý prípravok obsahujúci N-substituované indol-3-glyoxylamidy, spôsob výroby liečivého prípravku a spôsob výroby N-substituovaných indol-3-glyoxylamidov
EP2103602A1 (en) Novel 1,2,4-triazole derivatives and process of manufacturing thereof
JPH05271194A (ja) レニン阻止剤
RU2266280C2 (ru) Замещенные производные n-бензилиндол-3-ил-глиоксиловой кислоты, обладающие противоопухолевым действием (варианты), их кислотно-аддитивные соли (варианты), фармацевтический препарат, фармацевтическая форма
US5442044A (en) Orally active renin inhibitors
PL180801B1 (pl) Nowa pochodna pirolokarbazolu oraz zawierająca ją kompozycja farmaceutyczna
JPH0372467A (ja) ピペラジン誘導体
EP0325406B1 (en) Diamine compounds
WO2020023710A1 (en) Substituted tetrahydrocyclopenta[c]pyrroles, substituted dihydropyrrolizines, analogues thereof, and methods using same
GB2261661A (en) Derivatives of poly-4-amino-2-carboxy-1-methyl pyrroles
EP0876365A1 (en) Substituted quinolylmethylen-oxindole analogues as tyrosine kinase inhibitors
NZ302392A (en) Tricyclic substituted imidazole derivatives and medicaments thereof
US4873236A (en) Condensed diazepinones, processes for preparing them and pharmaceutical compositions containing these compounds
US4737496A (en) 1,3,4,16b-tetrahydro-2H,10H-indolo[2,1-c]pyrazino-[1,2-a][1,4]benzodiazepines useful as serotonin-2 receptor antagonists
SK15002000A3 (sk) Oxazolchinolónové deriváty, farmaceutický prostriedok s ich obsahom a ich použitie na inhibíciu mrp1 u cicavcov
JP2003506313A (ja) アミノペプチダーゼａの選択的インヒビターとして役立つトリペプチド組成物及び対応する医薬組成物
BG64623B1 (bg) Нови морфолинови производни, метод за тяхното получаване и фармацевтични състави, които ги съдържат
EP0641763A1 (en) Novel quaternary ammonium salts and use thereof as medicine
US5332738A (en) Imidazolidine antipsychotic agents