LU81069A1 - Derive de glycinamide, preparation de ce derive, son utilisation ainsi que composition contenant ce derive - Google Patents

Description

cÎ.‘i„ ί ;> MEMOIRE DESCRIPTIF déposé à l'appui d'une demande de BREVET D'INVENTION au nom de la société anonyme dite : "Continental Pharma" pour : "Dérivé de glycinamide, préparation de ce dérivé, son utilisation ainsi que composition contenant ce dérivé".

Inventeurs : RONCUCCI Romeo - GILLET Claude - CORDI Alexis -MARTENS Mark - ROBA Joseph - NIEBES Paul -LAMBELIN Georges.

La présente invention a pour objet un dérivé de la glycinamide répondant à la formule I, ainsi que les sels de ce composé : nC„H -NH-CEL-CQ (i) 8 17 2 ^nh2 ce dérivé étant appelé : 2-n-octylaminoacétamide.

Si le dérivé de formule I se présente sous forme de sels d'addition avec des acides on peut lé transformer, selon des procédés usuels, en base libre ou en sels avec d'autres acides. /

(I

Les sels les plus couramment utilisés sont des sels d'addition d'acides, en particulier des sels d'addition d'acides non toxiques, pharmaceutiguement utilisables, formés avec des acides inorganiques appropriés, par exemple l'acide chlorhydrique, l'acide sulfurique ou l'acide phosphorique ou avec des acides organiques appropriés, comme des acides aliphatiques, cycloali-phatiques', aromatiques, araliphatiques ou hétérocycliques, carbo-xyliques ou sulfoniques, par exemple les acides formique, acétique, propionique, succinigue, glycolique, gluconique, lactique, malique, tartrique, citrique, ascorbique, glucuronique, maléique, fumarique, pyruvique, aspartique, glutamique, benzoïque, anthranilique, hy-droxÿbenzoîque, salicylique, phénylacétique, mandélique, embonigue, méthanesulfonique, éthanesulfonique, panthoténique, toluènesulfoni-que, sulfanilique, cyclohexylaminosulfonique, stéarique, algini-que, ß-hydroxypropionique, ß-hydroxybutyrique, oxalique, malonique, galactarique, galacturonique. Ces sels peuvent également dériver d'acides aminés naturels ou non, comme la lysine, la glycine, l'arginine, l'ornithine, l'asparagine, la glutamine, 1''alanine, la valine, la thréonine, la sérine, la leucine, la cystéine, etc.. La présente invention couvre donc la 2-n.octylaminoacétamide et tous ses sels.

La demanderesse a trouvé_que le composé de l'invention présente une propriété remarquable et totalement inattendue^^ * 1 - 3 -

Il présente en effet une activité nootrope c'est-à-dire, un effet de potentialisation de la mémoire, de réduction des troubles du sommeil et de réduction des effets néfastes de l'alcool pris à des doses trop élevées.

» Le dérivé de l'invention est également actif comme anti- agrégant plaquettaire, comme vasodilatateur et présente une action sur le système nerveux central.

Le composé de l'invention peut être administré en association avec différents excipients pharmaceutiques et cela, par voie orale ou parentérale.

Pour une administration orale, on utilisera des dragées, granulés, tablettes, capsules, solutions, sirops, émulsions ou suspensions contenant des additifs ou excipients classiques en pharmacie galénique. Pour 1 ·'administration parentérale, on utilisera un liquide comme de l'eau stérile ou une huile comme l'huile d'arachide ou oléate d'éthyle.

Ce composé peut être utilisé seul ou en combinaison avec j d'autres produits actifs ayant une activité similaire ou diffé- / rente. j/ \ i i i D'une façon générale, le composé suivant l'invention peut être préparé selon le schéma de base suivant : nC0ËL _X + Y-CH -CONH-* nC0Hn NH-CH. -GONH„ ο X/ 2 2 ο X / 2 2 dans lequel X et Y sont différents l'un de l'autre et sont un groupe NH^/ un atome d'halogène, notamment du chlore, un groupe OH ou un groupe sortant du type tosyle, mésyle, R'COO-, NR'R''R'"+, PR'R"R,,,+ , SR'R',+, OHR' + , OR*, CN~, R'OO, H0~, R'S02“, j * N2+' N3 ' N°2 ' dans 103¾11613 Rl» R" et R,,, peuvent être identiques ou différents et représentent des radicaux alkyles C^-C^ linéaires ou ramifiés, X ou Y étant nécessairement un groupe NH .

Cé

Selon une première forme de réalisation préférentielle de ce procédé général, la réaction sur laquelle celui-ci est basé, est effectuée entre la n-octylamine et la chloroacétamide s-elon le schéma suivant : ,0 ^ ° nC0H._NH_ + Cl-CH- -0^^ ^-> nCQH1r7NH-CH--C^ 8 17 2 2 ^nh2 8 17 2 ^nh2

Cette réaction est effectuée dans un solvant organique comme des alcools tels que le méthanol, l'éthanol, l'isopropanol ou dans un solvant chloré comme le chloroforme ou le dichlorôméthane. La réaction peut se dérouler à une température ordinaire ou avan-* tageusement à température plus élevée comme la température de reflux du solvant utilisé. On ajoutera de préférence au mélange réactionnel une base organique ou minérale. Dans le cas d'une base minérale on choisira par exemple un carbonate ou un bicarbonate de métal alcalin ou alcalino-terreux ou un hydroxyde de métal alcalin ou alcalino-terreux ou encore de la chaux finement pulvérisée. Dans le cas d'une base organique, on choisira par exemple

Une variante de ce procédé consiste à partir d'un ester de 7 „ 7 l'acide chloroacétique ClCH^COOR ou R est un groupe alkyle inférieur C^-C^ linéaire ou ramifié ou un groupe benzyle.

Lorsque le couplage des deux réactifs est réalisé, la fonction ester est transformée en fonction amide par aminolyse.

D'une façon générale,cette aminolyse se fait dans un solvant organique comme l'éther, le dioxanne, le tétrahydrofuranne, le chloroforme, le dichlorométhane ou dans l'eau.

Dans le cas présent l'amine utilisée sera l'ammoniac qui sera introduite dans la solution d'ester par barbotage d'ammoniac gazeux ou par addition d'une solution aqueuse diluée.

Avantageusement,la réaction se fera sous catalyse acide; l*acide sera alors par exemple de l'acide chlorhydrique dilué ou du chlorure d'ammonium ou tout autre acide protique ou tout acide de Lewis apte à effectuer cette catalyse. La réaction se fera à température de chambre ou de préférence en chauffant légèrement ! et sous agitation.

i L'isolement du produit se fait de façon classique en chimie organique par cristallisation, par sublimation, par distillation ou par chromatographie sur colonne.

Selon une deuxième forme de réalisation préférentielle de ce procédé, celui-ci est effectué suivant la réaction î nC H. X + H_N-CH„-C<[ -> nC H -NH-CH -C<^ 8 17 2 2 ^-nh2 8 17 2 ^nh2 où X représente un halogène ou un groupe sortant du type tosyle, , mésyle, R'COO-, NR'R"R,,,+ , PR^'R"'"1", SR'R,,+ , OHR, + , 0H2+, CN~, R'Oû", HO", R'S02", N2\ n ", N02~ dans lesquels R', R" et R"' peuvent être identiques ou différents et représentent des radicaux alkvles C.-C. linéaires ou ramifiés. / //

La réaction peut être effectuée dans un solvant organique . tel que le chloroforme, le di chlor ométhane, dans un alcool tel que le méthanol ou l'éthanol, dans un hydrocarbure saturé ou aromatique tel que l'éther de pétrole, le benzène, le toluène.

La réaction se déroule soit à température ambiante ou à une température comprise entre 0°C et la température de reflux du solvant. Avantageusement, la réaction peut être effectuée en présence de base organique telle que la triéthylamine, la pyridine ou la N-diméthylaniline ou de base minérale telle que les hydroxydes, les carbonates et les bicarbonates de métaux alcalins ou alcalino-terreux ou de chaux finement pulvérisée.

L'isolement et la purification des produits se fait par cristallisation, par sublimation, par distillation ou par chromatographie sur colonne.

Une variante de ce procédé consiste à engager comme réactif ^0

un ester de la glycine de formule : H_N-CH

- 2 or' 7 R représente un radical allcyle inférieur C^-C^ linéaire ou ramifie ou un groupe benzyle. La fonction ester est transformée ultérieurement en fonction amide selon la méthode détaillée dans la première forme de réalisation décrite ci-dessus du premier procédé de base.

* Le procédé suivant l’invention peut avantageusement être appliqué en passant par le nitrile correspondant suivant le schéma H 0+ / nC8H17X + Y-CE^-CN -> nCgH^-NH-CI^CN--> / (f dans lequel X et Y ont les significations précitées.

Selon une première forme de réalisation de cette variante, la n-octylamine peut être mise en réaction avec le 2-hydroxyacéto-nitrile. Le nitrile obtenu est ensuite hydrolyse en milieu acide ou basique selon le schéma décrit ci-après : H 0+

nC0H NH + HO-CH -CN-=> nC0H. -NH-CH CN ——* ou H 0/0H

o 17 2 2 ο 1 / À £ 0

nC H -NH-CH -C

8 17 2 ^nh2

La condensation de l'amine sur le 2-hydroxyacétonitrile se fait dans un solvant organique tel que le chloroforme, le dichloro-méthane, le méthanol, l'éthanol... La réaction peut être effectuée à une température comprise entre 0°C et la température de reflux du solvant choisi. De façon avantageuse on mettra en présence des réactifs un acide comme l'acide chlorhydrique ou tout autre acide minéral ou organique.

L'hydrolyse finale sera effectuée par un acide minéral tel que l'acide chlorhydrique ou l'acide sulfurique en travaillant dans des conditions de température et de concentration telles que l'hydrolyse s*arrête au stade de l'amide? avantageusement l’hydrolyse peut se faire avec de l'acide sulfurique à 96% à température normale ou avec une base comme l'hydroxyde de sodium ou de potassium pouvant contenir 6 à 12% d1 eau oxygénée.

L'isolement et la purification des produits se font das- ' siquement par cristallisation,—par sublimation, par distillation^ ou par chromatographie sur colonne. / peut être appliquée suivant le schéma : nC8H17X + H2N-CH2-C=N —> nCgH^NH-CH^N —-, H30+ ou H20/0H" Ψ ^0

nC H NH-CH -C

8 i7 2 ^·νη2

Suivant cette façon particulière de procéder,on fait réagir un réactif de formule H2N-CH2~C=N avec un composé nCgH^X

où X représente un halogène ou un groupe sortant du type tosyle, mésyle, R'COCf, NR'R,,R",+, PR'R"R",+ , SR'R"+, OHR, + , 0H2+, CN~, R'OCf, Hü“, R'S02“f N2+, N N02” dans lesquels R', R" et R'" peuvent être identiques ou différents et représentent des radicaux alkyles C^-C^ linéaires ou ramifiés.

L'étape ultime de la séquence de réaction est l'hydrolyse du groupe; nitrile.

Cette séquence de réactions s'effectue dans un solvant organique tel que des alcools, des solvants chlorés, des hydrocarbures saturés ou non, aliphatiques ou aromatiques. Elle se produit à température de chambre ou à une température comprise entre 0°C et la température de reflux du solvant choisi.

L'hydrolyse du nitrile en amide se fait en milieu acide ou en milieu basique et d'une façon classique l'hydrolyse se produit avec de l'acide sulfurique à 9'6% à température normale ou avec une solution aqueuse d'hydroxyde de sodium pouvant contenir 6 à 12% d'eau oxygénée.

Un deuxième procédé consiste en l'hydrogénolyse d'une sydno-nimine selon le schéma de réaction décrit ci-après : η08Η17χ »5,™ H ° / “Sfr nC8H17NH-CH2-C-NH2 ♦ '0 Œ où Z est un anion. La sydnonimine est synthétisée selon les procédés bien documentés dans la littérature,* son hydrogénolyse mène , à une 2-aminoacétamide.

Le catalyseur utilisé peut être du palladium sur charbon actif, du nickel, de l'oxyde de platine. D'une façon générale, le catalyseur appartient au groupe des métaux de transition, à leurs oxydes ou à leurs sulfures.

Le solvant de la réaction peut être avantageusement le méthanol, l'éthanol, l'éther de pétrole ou un solvant organique quelconque gui soit inerte dans 'les conditions de la réaction. La réaction se déroulera habituellement à température ambiante^mais la température pourra être adaptée à la réactivité de la molécule.

En fin de réaction, le produit sera séparé du catalyseur par filtration et purifié comme décrit précédemment.

Un troisième procédé consiste à faire réagir un aldéhyde, 11octanal/avec la 2-aminoacétamide et à réduire l'imine ainsi formée selon le schéma décrit ci-après : o Vcat* C_H. -CHO + H NCH-Cy -) C_H. _-CH=N-CH_-C^ * 7 15 2 2 xnh2 7 15 2 ^nh2 C7H15CH2NHCH2 nh2

Ces réactions se font dans des solvants organiques tels que des alcools comme le méthanol_Du l'éthanol, ou des solvants chlorés comme le chloroforme ou le dichlorométhane ou dans des hydrocarbures aliphatiques comme le pentane ou l'éther de pétrole. / /

Ces réactions peuvent s'effectuer à des températures comprises entre 0°C et la température d'ébullition du solvant, de préférence à la température de reflux du solvant.

Le produit est isolé et purifié comme décrit précédemment.

Une variante de ce procédé consiste à partir d'un ester de la glycine de formule générale : h2n-ch2coor7 7 . _ .

où R représente un groupe alkyle inferieur C^-C^ linéaire ou ramifié ou un groupe benzyle.

La fonction ester est ensuite transformée ultérieurement en amide selon la méthode détaillée en rapport avec la première forme de réalisation 'du premier procédé de base.

Un quatrième procédé consiste à traiter un sel d'iminium adéquatement substitué par des ions cyanure; le produit résultant est alors hydrolysé. Le schéma de cette réaction est le suivant :

nC H -N=CH + WCN -* nC0Hn-N-CH -CN-, H O ou H 0/0H

8 17)2 ο 1 /1 2 ν'* ^ H H \ \ nC8H17"ÎT"CH2"C\ 8 17 H 2 ^NH2 Z représente un anion tel qu’un anion d'halogénure de sulfate, de tétrafluoroborate ou de perchlorate et W représente un cation miné- + + + + + „ ral tel que Na , K , Li , Cs ; Ca ou organique tel que tetra-n-bu- tylammonium, tri-n-butylbenzylammonium ou un cation d'autres sels d’ammonium substitués par des chaînes alkyles C^-C^, ces chaînes étant non substituées ou substituées par un ou plusieurs noyaux aromatiques, notamment des noyaux phényles.

Le sel d'iminium de départ peut être préparé selon les procédés bien décrits dans la littérature, notamment, par la réaction de la formaldéhyde avec la n-octylamine dans les conditions requises pour effectuer une réaction de Mannich.

La condensation entre le sel d'iminium et le cyanure se fait dans/ di chlor ométhane, dans des éthers, cycliques ou non, ou dans des hydrocarbures saturés ou non. La réaction se fera à température normale,mais, selon la rapidité de la réaction, la température pourra être augmentée ou diminuée.

L'hydrolyse du nitrite obtenu se fera en milieu acide ou basique de façon à obtenir l'amide et non l'acide. D'une façon classique une telle hydrolyse peut s'accomplir avec de l'acide sulfurique à 96% et à température normale ou avec une solution aqueuse d‘hydroxyde de sodium pouvant contenir 6 à 12% d'eau oxygénée.

L'isolement et la purification des produits se fait comme décrit précédemment.

Un cinquième procédé peut être réalisé suivant le schéma : Réd.

nCgH17-NH2 + 0=C-CC13 —* nC8H17-N=CH-CCl3-» nCgH^NH-CÏ^-CC^ = H 0+ . 0

nC H NH-CEL ~C ^ i nCQHn„NH-CH0-COOH

8 17 2 ^nh2 8 17 2

Par cette façon particulière de procéder, le trichloroacétal-déhyde est condensé sur la n.Octylamine. La condensation se fait préférentiellement sous catalyse acide. La formation de l'imine se fait avantageusement dans un solvant non miscible avec l'eau.

Un solvant couramment utilisé pour effectuer une telle réaction est le benzène; cepèndant tout autre solvant qui possède les propriétés décrites ci-dessus peut convenir. En général la réaction se fait à reflux du solvant mais toutefois la réaction peut être effectuée à toute température comprise entre 0°C et la température de reflux du solvant. L'imine obtenue est alors réduite de façon classique et bien documentée dans la littérature en veillant toutefois à préserver le groupement trichlorométhyle. La conversion du groupement trichlorométhyle en groupement car-boxyle se fait généralement dans l'eau avec de l'acide sulfurique à 95%; dans certains cas, il peut être avantageux d'utiliser l'acide nitrique à la place de l'acide sulfurique. Cette réaction se produit entre 0°C et 100°C.

L'acide obtenu est alors converti en amide de façon classique en chimie organique.

L'isolement et la purification se font par cristallisation, par sublimation, par distillation ou par chromatographie sur colonne.

Un sixième procédé peut être réalisé suivant le schéma ; nC H χ 0„N-CH -COOH -» H N-CH„ -COOH ---> nC0Hn _NH-CH„COOH -> Δ Δ Δ Δ O 1/ 2.

ne h17nh-ch2conh2.

Suivant cette manière de procéder, on réduit le groupement nitro de l'acide nitroacétique dans des conditions telles que seul le groupement nitro est sélectivement transformé en amine sans toucher au groupement carboxyle. Cette réaction est particulièrement bien documentée dans la littérature (Cf Houben-Weyl ;Methoden der organischen Chemie, 4e Auf 1., Band 11/1 p 431 et suivantes) .

L'amine est alors alkylée par un réactif nCglî^X

où X représente un halogène ou un groupe sortant du type tosyle, mésyle, R'COcT, NR'R"R"'+, PR'R"R"«+, SR'R"+, OHR' + , 0H2+, CN~, R'00 / HO , R'S02 ' N2 ' N3 ' N02 dans lesquels R’, R" et R’"

Cette réaction d'alkylation d'une amine est classique en chimie organique et se fait dans les conditions décrites concernant la deuxième forme de réalisation du premier procédé de base.

L'acide carboxylique est alors transformé en amide de façon classique.

La purification se fait selon la méthode décrite dans les procédés ci-dessus.

Une variante de ce procédé consiste à faire réagir l'acide 2-aminoacêtique, appelé communément glycine,avec un aldéhyde de formule nC„H._CHO dans les conditions décrites dans le troisième 7 15 procédé.

L'imine est alors réduite en amine de façon classique (cf la référence à Houben-Weyl ci-dessus) puis l’acide carboxylique est transformé en amide selon les méthodes bien documentées.

Le schéma est alors comme suit :

nCH CHO

H N-CH.GOOH --> nC_H. _CH=N-CH.COOH

2 2 , 7 152

nC8Hi7-NH-CH2-<< <- nC7H15CH2NH-CH2COOH

NH2

Un septième procédé peut être réalisé suivant le schéma :

g Q

H-C-C-OH + nC H NH —> nC H -N=Ç-COOH --? nC0H_ NH-CH -COOH

* 8 1/2 8 1/ rr ο 1 / i 2 nC8H17NH-CH2-CONH2

Ce procédé consiste à transformer l'acide glyoxylique en imine en le mettant en contact avec la n.octylamine. pj

Cette réaction se fait avantageusement en milieu acide dans un solvant et en éliminant l'eau dès sa formation. L'imine obtenue est alors réduite classiquement en utilisant des conditions telles que le groupe carboxyle reste intact. De nombreuses revues ont été consacrées à des réactions de ce type (voir par exemple Houben-Weyl : Methoden der organischen Chemie, 4 Aufl.

Band 11/1, p.341 et suivantes). L'acide carboxyligue est ensuite converti en amide selon les procédés classiques. Le produit de la réaction est alors isolé et purifié selon les modes opératoires décrits dans les procédés précédents.

i

Ci-après sont donnés des exemples détaillés de préparation de la 2-n.octylaminoacétamide. Ces exemples ont surtout pour but d'illustrer davantage les caractéristiques particulières des procédés suivant l'invention.

Synthèse de la 2-n.octylaminoacétamide Exemple 1.

Dans un erlenmeyer de 500 ml, on mélange à température de chambre 10 g de 2-chloroacétamide (0,107 mole), 15,2 g de n-octyl-amine (0,118 mole) et 9,9 g de NaHCOg (0,118 mole) dans 200 ml d'éthanol p.a. Cette suspension est portée au reflux pendant 24 heures. On refroidit alors la solution, on la filtre, on lave le chlorure de sodium avec 50 ml d'éthanol et on évapore les filtrats réunis. La masse blanche obtenue est recristallisée une fois dans 140 ml de cyclohexane et une fois dans 140 ml d'acétone. Rendement 9,67 g (48,6%) F°-79,5-79,3° (Mettler 2°/min) T LC CHC1 /AcOEt/MeOH (l/l/l) + 1% AcOH' 5 0 .0 nC_H.. NH +C1CH -C^ +NaHC0^ Eth—-pl nC-H-, „NH-CH-C^f +NaCl+C0_ 8 17 2 2 ^NH_ 3 Δ 8 17 2 ^NH„ 2 -fl

Exemple 2.

H2S04 nC8H17NH2 + HOCH2-CN—> nCgH^NH-CÏ^ -CN -% nC0H „NH-CEL-C^ 8 17 2 ^nh2

Dans un ballon de 50 ml muni d'un agitateur magnétique, on ajoute,goutte à goutte, 5,7 g de glycolnitrile (0,1 mole) à 14,1 g d'octylamine (0,11 mole) en solution dans 20 ml d'éthanol.

A la fin de l'addition, la solution est abandonnée pendant 24 h à température de chambre après quoi on la refroidit dans la glace et 3 ml d'H SO cc y sont ajoutés. Le précipité qui se forme est μ “Γ récolté et ajouté par petites fractions à 40 ml d'I^SO^ cc.

Après avoir chauffé cette solution à 100°C pendant 1 heure, on la laisse revenir à température de chambre et elle est ajoutée, goutte à goutte, à 200 ml d'éthanol refroidi dans la glace.

Le précipité blanc qui apparaît est filtré et remis immédiatement en suspension dans 100 ml de méthanol? on ajoute alors du méthy-late de sodium dans le méthanol jusqu’à virage d'une goutte de phénolphtaléine. Le sulfate de sodium est filtré, le méthanol évaporé et le solide blanc obtenu est recristallisé dans le cyclo-hexane (100 ml) pour donner 9,85 g d'un produit fondant à 80°C.

Rdt : 53%.

Le tableau I donné ci-après rassemble certains résultats pharmacologiques du composé de l'invention.

Les tests pharmacologiques ont été réalisés de la façon suivante : l'activité antihypertensive a été testée par admi-‘ nistration orale à des rats spontanément hypertendus non anesthé siés, chez lesquels la pression artérielle systolique est mesurée / f au niveau de l'artère coccygienne médiane par une méthode plethysmographique (J. Roba, G. Lambelin, A.P. De Schaepdryver, Arch. int. Pharma codyn., 200, 182, 1972). La pression artérielle est mesurée toutes les 30 min, de 2 heures avant à 3 heures après l'administration orale de 60 mg/kg des produits testés ou d'un placebo (mucilage à 1% de gomme adragante) . En cas d'intérêt, les produits sont alors testés à d'autres doses, dans des conditions semblables. Seuls des rats ayant une pression systolique de 180 à 220 mm Hg sont utilisés. Deux rats sont utilisés par produit. Les traitements sont administrés à l'insu de la personne qui réalise les mesures. Les effets antihypertenseurs sont notés comme suit : O : réduction <. 10 mm Hg + : réduction de 10 à 20 mm Hg ++ : réduction de 20 à 30 mm Hg +++ : réduction de 30 à 50 mm Hg ++++ : réduction de > 50 mm Hg

Dans les conditions du test, Ι'ά-méthyldopa est scoré +++ à 100 mg/kg, la réserpine +++ à 3 mg/kg et la guanéthidine +++ à 60 mg/kg.

L'activité vasodilatatrice périphérique des produits de l'invention a été mesurée chez le chien anesthésié, au niveau de la circulation artérielle fémorale. Dans ce but, l'artère fémorale, dont les collatérales ont été ligaturées, est perfusée à débit constant au moyen de sang prélevé dans l'aorte. La pression de perfusion, mesurée au niveau de l'artère fémorale, varie donc en fonction de la résistance du territoire perfusé. Les produits testés, et les solvants correspondants, sont injectés directement/ # dans le circuit, à la dose de 30^g/kg. Le débit sanguin étant maintenu constant, une vasodilatation est donc mesurée par une diminution de la pression de perfusion. Celle-ci est scorée par rapport à l'action de la papavérine, considérée comme référence et injectée une fois par groupe de 4 produits. En cas d'intérêt, les produits sont testés à d'autres doses dans les mêmes conditions. L'activité vasodilatatrice est appréciée comme suit : 0 : inactif (< 10 mm Hg de réduction) + : 1/3 de l'activité de la papavérine ++ : 2/3 de l'activité de la papavérine +++ : activité égale à celle de la papavérine (soit 30 à 40 mm H< ++++ : activité supérieure à celle de la papavérine.

L'activité antispasmodique des produits de l'invention a été testée vis-à-vis des contractions de l'iléon de cobaye induites par l'histamine et l’acétylcholine. Ces tests permettent de mettre en évidence une activité antihistaminique, anticholinergique ou antispasmodique musculotrope. La-.réponse de l'agent contractant ί (concentration submaximale) est répétée toutes les 5 min. avant et après l'injection de doses croissantes des produits testés (10~7 à 10~4 M) .

Les diverses doses sont espacées de 20 min. ou du temps nécessaire au développement de l'effet maximal. On calcule le pourcentage d'inhibition sous l'influence des produits testés et on détermine graphiquement,pour chaque expérience ,1a concentration théorique produisant 50% d'inhibition. Ces valeurs sont exprimées en „ -log Cl50 (M) . La valeur de référence, pour la papavérine, est /

de 4,50, soit une concentration effective de 30 ^M. /V

La toxicité aiguë des produits de l'invention a également été déterminée après administration orale (gavage d'un mucilage à 1% de gomme adragante) à des souris mâles (souche CD 1, Charles River, à jeun depuis 18 heures).

Des groupes de 5 souris sont utilisés et reçoivent l'une des trois doses suivantes : 300, 1000 et 3000 mg/kg. Eventuellement d'autres doses, inférieures ou supérieures, sont étudiées.

Le comportement des animaux est étudié 2 à 6 heures après l'administration ainsi qu1après 24 heures ou plus en cas de persistance des symptômes. L"examen comportemental est réalisé selon une méthode dérivée de celle de Irwin (Gordon Research Conf. on Médicinal Chem., 133, 1959). Les mortalités sont enregistrées au cours des 14 jours suivant le traitement. Les DL,-0 sont calculées selon la méthode de Litchfield et Wilcoxon (J. Pharmacol. Exp.Ther. 96, 99, 1949) et exprimées en mg/kg.

Tableau I.

Résultats pharmacologiques de la 2-n.octvlaminoacétamide - LD50 î 2200 - activité antihypertensive : ++ - activité vasodilatatrice : +++ - activité antispasmodique : . Histamine : 4,47 , Acétylcholine : 4;54 - activité sur le système nerveux central : 300 : excitation, , /

Le tableau II rassemble les principaux résultats du criblage biochimique du composé de l'invention.

Les tests ont été réalisés in vitro selon les modes opératoires suivants : 1) Inhibition de l'agrégation plaquettaire.

La méthode turbidimétrique décrite par G.V.R. Born et M.J. Cross (J. Physiol., 168, 178-195, 1973) est utilisée. Le plasma riche en plaquettes est préincubé pendant 4 minutes avant l'introduction de l'inducteur (Thrombofax) . Les légères variations sont enregistrée sur une période de 10 minutes avec un agrëgomètre "Upchurch". L'inhibition des amplitudes du maximum d'agrégation est mesurée.

2) Inhibition de la lipolyse.

De la graisse épididymaire est enlevée de rats à jeun.

Des fragments de tissu adipeux (+ 150 mg) sont incubés dans le tampon de Krebs-Ringer contenant 3% d'albumine de sérum de boeuf et la substance à étudier. Un échantillon au temps zéro est pré- . levé après une incubation de 30 minutes à 37 °C. La néropinéphrine est utilisée pour induire la lipolyse. Le taux d'acides aminés libres est mesurée après 20 minutes d'incubation (Duncombe W.G.

Clin. Chim. Acta, 8^ 122, 1964).

3) Inhibition du captage des bioamines par les synaptosornes.

Les synaptosomes sont isolés de cerveau de rats après fractionnement subcellaire partiel dans un gradient de sucrose (Gray R.G. et Wittaker V.P., J. Anat., 92, 79, 1962).

Le captage de la 5-HT (sérotonine) est effectué comme décrit ci- / dessous. /]/ /

Après préincubation de 5 minutes de la drogue testée avec des synaptosomes, la préparation est incubée 5 minutes à 37°C en 14 présence de C-5HT, filtrée sur filtre "Millipore" et les filtres sont lavés avec du tampon glacé. La radioactivité des filtres est mesurée par comptage par scintillation liquide. L'uptake est la différence entre la radioactivité mesurée à 37°C et celle mesurée à 0°C.

Le produit de l'invention inhibe la lipolyse et l'agréga-tion des plaquettes sanguines.

Tableau II.

Résultats biochimiques de la 2-n.octylaminoacétamide - inhibition de l'agrégation des plaquettes : 98 - inhibition de la lipolyse : 17 - uptake du 5HT : 9

Pour l'administration du nouveau composé de l'invention, la dose journalière sera de 50 à 2000 mg, de préférence, elle sera de 100 à 1500 mg. La dose unitaire sera de 200 à 500 mg.

Le produit de l'invention peut être utilisé sous diverses formes. Les exemples qui suivent ne sont pas limitatifs et con^ cernent les formulations galéniques contenant le produit actif de l'invention désigné par la lettre A.

Comprimés.

A 300 mg Aérosil .. 2 mg

Amidon STA-RX 1500 18 mg / /

Phosphate calcique (CaHPO^) 100 rag

Stéarate de magnésium 10 mg A 350 mg

Cellulose microcristalline 70 mg

Auby-gel X 52 20 mg

Amidon de mais 50 mg

Stéarate de magnésium 10 mg A 350 mg

Cellulose microcristalline 100 mg

Amidon STA-RX 1500 50 mg

Talc 15 mg Aérosil 5 mg A 300 mg

Stéarate de magnésium ’ 10 mg Aérosil 5 mg

Amidon STA-RX 100 80 mg

Capsules A 300 mg

Amidon STA-RX 1500 94 mg

Stéarate de magnésium 1 mg

Laurylsulfate de sodium 5 mg / </ k· A 350 mg

Cellulose microcristalline 70 mg

Amidon de maïs 30 mg

Huile d'arachide 0,01 mg

Laurylsulfate de sodium 5 mg A 300 mg

Laurylsulfate de sodium 5 mg

Cellulose microcristalline 70 mg

Oxyde de magnésium 20 mg A 350 mg

Amidon STA-RX 1500 100 mg

Stéarate de magnésium 1 mg

Laurylsulfate de sodium 9 mg

Cellulose microcristalline 30 ^

Claims (20)

1 R" et R1" peuvent être identiques ou différents et représentent { i des radicaux alkyles C^-C^ linéaires ou ramifiés, X ou Y étant ! nécessairement un groupe NH2, au cas où la réaction aurait lieu avec un ester,le groupe ester, étant transformé,par aminolyse, en un groupe amide. 3, - Procédé suivant la revendication 2, caractérisé en qu'on fait réagir de la n.oetylamine avec de la 2-chloro-acétamide ou avec un ester de l'acide 2-chloroacétique. 4, - Procédé suivant la revendication 2, caractérisé en ce ' qu'on fait réagir un dérivé de n.octane substitué par un atome d'halogène ou par un groupe sortant du type tosyle, mésyle/ R'COO , nR«r"r",+, pr'r"r'»+, ohr'+, oh2+, cn~, r'oo~, ho-, r'so2~, n2+, n3" N02 dans leguels R', R" et R"' peuvent être identiques ou diffé- rnnfc o-f- T*onrâssnt-pnf* raflï naiiv alVi/loS P —P linoairoc; mi //

5. Procédé de synthèse du dérivé de glycinamide suivant la revendication 1, caractérisé en ce qu'on soumet un composé de formule nCgH^^-NH-CH^-CN à une hydrolyse, de manière à transformer le groupe nitrile en amide.

6. Procédé suivant la revendication 5, caractérisé en ce . qu'on fait réagir un composé de formule nCgEL^X avec un composé de formule Y-CH2-CN jusqu'à former le composé de formule nC0H.„-NH-CH--CN et en ce qu'on soumet ce dernier composé à une hydrolyse du nitrile en un groupe amide, X et Y ayant les significations données ci-dessus.

7. Procédé suivant la revendication 6, caractérisé en ce qu'on fait réagir de la n.octylamine avec de l'hydroxyacétonitrile suivie de l'hydrolyse du nitrile en amide.

8. Procédé suivant la revendication 6, caractérisé en ce qu'on alkyle de l'aminoacétonitrile par un dérivé de n-octane substitué par un atome d'halogène ou un groupe sortant du type tosyle, mésyle, R'COCf, NR,R"R,"+,PR 'R"Rm+, SR'R,,+ , OHR' + , 0H2+, CN-, R'OO-, HO-, R'S02_, N2+, N3“, N02_ dans lesquels R', R" et R"' peuvent être identiques ou différents et représentent des radicaux alkyles C^-C^ linéaires ou ramifiés, et en ce qu'on soumet le composé intermédiaire ainsi obtenu à une hydrolyse du nitrile en amide.

9. Procédé de syntèse du dérivé de glycinamide suivant la revendication 1, caractérisé en ce qu'on procède à l'hydrogéna- / ““ — · - ~ — {f

10.- Procédé de synthèse du dérivé de glycinamide suivant la revendication 1, caractérisé en ce qu'on procède à l'hydrogénation catalytique d'un imine de formule C^H^-C^N-CE^-CONB^ ou d'un ester correspondant, ce dernier étant soumis à une aminolyse, l'aminolyse pouvant avoir lieu avant ou après l'hydrogénation.

11. Procédé suivant la revendication 10, caractérisé en ce qu'on condense de l'octanal sur de la 2-amino-acétamide ou sur un ester d'acide 2-aminoacétique avant l'hydrogénation et l'amino- —4. * lyse éventuelle.

12. Procédé suivant la revendication 5, caractérisé en ce qu'on fait réagir un sel d*imminium sur un cyanure et qu'on hydrolyse le nitrile en amide.

13. Procédé de synthèse du dérivé de glycinamide suivant la revendication 1, caractérisé en ce qu'on transforme le groupe carboxylique de l'acide de formule nCgH^^NH-CH^-COOH en amide.

14. Procédé suivant la revendication 13, caractérisé en ce qu'on condense du trichloroacétaldêhyde sur de la n-octylamine, on réduit l'imine obtenue en amine, on transforme le groupement trichlorométhyle en groupement carboxylique en milieu acide et on transforme l'acide carboxylique en amide.

15. Procédé suivant la revendication 13, caractérisé en ce qu'on réduit de l’acide nitroacétique en glycine, en ce qu'on alkyle cette dernière par un dérivé du n-octane substitué par un atome d'halogène ou par un groupe sortant du type tosyle, mésyle, R'COCf, NR'R"Rmt, PR'RWR"'+, SR'R"+, 0HR' + , OE^, CN~, R'oo", HO", R'S02~, N2+, N3~, N02~ dans lesquels R', R" et R"' peuvent être identiques ou différents et représentent des radicaux alkyles C^-C^ ün®a^res ou ramifiés, et en ce qu'on transforme / l'acide carboxylique obtenu en amide. /nr

16. Procédé suivant la revendication 13, caractérisé en ce que de la glycine, formée notamment par réduction de l'acide * nitroacétigue,est mise en réaction avec l'octanal, l'imine for mée est réduite en amine et le groupement carboxylique est transformé en amide.

17. Procédé suivant la revendication 13, caractérisé en ce que de l'acide glyoxilique est mis en réaction avec de la n.octyl-amine, l'imine résultante est réduite en amine et le groupement carboxylique est transformé en amide.

18. Procédé de synthèse du dérivé de glycinamide tel que ! décrit ci-dessus.

19. Composition pharmaceutique, caractérisée en ce qu'elle comprend la 2-n.octylaminoacétamide ou un de ses sels, associé à un ou des excipients pharmaceutiques appropriés ou éventuellement à d’autres agents thérapeutiques.

20. Composition suivant la revendication 19, caractérisée en ce qu’elle se présente sous forme de dragées, granulés, tablettes, capsules, solutions, sirops, émulsions ou suspensions contenant des additifs ou excipients classiques en pharmacie galénique.

21. Composition suivant la revendication 19, caractérisée en ce qu'elle comprend de la 2-n.octylaminoacétamide'ou un sel correspondant en solution, notamment dans de l'eau stérile ou une huile, comme l'huile d'arachide ou l'oléate d'éthyle.

22. Composition pharmaceutique telle que décrite ci-dessus.

23,- Procédé d'utilisation de la 2-n.octylaminoacétamide ou de ses sels correspondants, caractérisé en ce qu'on l'administre à des doses journalières de 50 à 2000 mg,de préférence de 100 à 1500 mg. Dessins : ......^....... p! saches Ht ... n. r!-~>rU / ne π;» fie n.erda