LU100024B1

LU100024B1 - A method for sequentially examining a plurality of samples, sample carrier unit, and light sheet microscopic imaging unit

Info

Publication number: LU100024B1
Application number: LU100024A
Authority: LU
Inventors: Frank Sieckmann
Original assignee: Leica Microsystems
Priority date: 2017-01-20
Filing date: 2017-01-20
Publication date: 2018-07-30
Also published as: DE102018200923B4; DE102018200923A1

Abstract

Es wird ein Verfahren zum sequentiellen Untersuchen einer Mehrzahl von Proben (10) mittels eines Lichtblattebenen-Mikroskops vorgeschlagen. Das Verfahren zeichnet sich durch eine Abfolge von Schritten aus, die es erlaubt, eine Mehrzahl von an vorgegebenen Positionen angeordneten Proben (10) nacheinander zu untersuchen. Weiterhin werden eine Probentragereinheit (22) und eine Aufnahmeeinheit (34) vorgeschlagen, die insbesondere in Kombination besonders zur Durchfuhrung des Verfahrens geeignet sind.A method for sequentially examining a plurality of samples (10) by means of a light-plane microscope is proposed. The method is characterized by a sequence of steps which allows a plurality of samples (10) arranged at predetermined positions to be examined successively. Furthermore, a sample support unit (22) and a receiving unit (34) are proposed, which are particularly suitable in combination especially for carrying out the method.

Description

Beschreibungdescription

Titel: Verfahren zum sequentiellen Untersuchen einer Mehrzahl von Proben, Probenträgereinheit und Aufnahmeeinheit für LichtblattebenenmikroskopieTitle: Method for sequentially examining a plurality of samples, sample holder unit, and light sheet microscopic imaging unit

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zum sequentiellen Untersuchen einer Mehrzahl von Proben mittels eines Lichtblattebenen-Mikroskops, eine Probenträgereinheit für ein Lichtblattebenenmikroskop und eine Aufnahmeeinheit für eine Probenträgereinheit für ein Lichtblattebenenmikroskop.The invention relates to a method for the sequential examination of a plurality of samples by means of a light-plane microscope, a sample support unit for a light-level microscope and a recording unit for a sample support unit for a light-level microscope.

Die Lichtblattebenenmikroskopie ist eine in den letzten Jahren stark weiterentwickelte Unterart der Fluoreszenzmikroskopie. Oftmals wird Sie mit den Abkürzungen LSFM von englisch „Lightsheet Fluorescence Microscopy“ Oder SPIM von englisch „Selective Plane Illumination Microscopy“ bezeichnet. Als Synonym zum Wort „Lichtblattebene“ kann das Word „Lichtscheibe“ Oder englisch „Lightsheet“ verwendet werden.Light-plane microscopy is a subtype of fluorescence microscopy that has been greatly developed in recent years. It is often referred to by the abbreviations LSFM of English "Lightsheet Fluorescence Microscopy" or SPIM of English "Selective Plane Illumination Microscopy". As a synonym for the word "Lichtblattebene" the word "Lichtscheibe" or English "Lightsheet" can be used.

Bei der Lichtblattebenenmikroskopie wird die zu untersuchende Probe nicht wie bei den meisten anderen Mikroskopiemethoden von oben oder unten, sondern von der Seite beleuchtet. Dabei wird ein fokussierter Lichtstrahl verwendet, so dass jeweils nur ein relativ kleiner Volumenanteil der Probe beleuchtet wird. Die resultierende Fluoreszenz wird meist im rechten Winkel zur Einfallsrichtung des Beleuchtungslichts detektiert. Es ergeben sich gegenüber herkömmlichen Methoden der Fluoreszenzmikroskopie Vorteile bei der Auflösung und insbesondere durch die geringere Beanspruchung der Probe hinsichtlich Photobleaching, Erwärmung und chemischer Reaktionen, die durch den Eintrag von Energie in Form des Beleuchtungslichts vermittelt werden.In light-plane microscopy, the sample to be examined is not illuminated from above or below, but from the side, as in most other microscopy methods. In this case, a focused light beam is used, so that in each case only a relatively small volume fraction of the sample is illuminated. The resulting fluorescence is usually detected at right angles to the direction of incidence of the illumination light. There are advantages over conventional methods of fluorescence microscopy advantages in the resolution and in particular by the lower stress of the sample with respect to Photobleaching, heating and chemical reactions, which are mediated by the entry of energy in the form of the illumination light.

Problematisch ist bei der Lichtblattebenenmikroskopie oft die Handhabung der Probe. Es sind verschiedene Ausführungsformen von Probenhaltern für SPIM-Systeme bekannt. Dabei werden die Proben auf unterschiedliche Weise gelagert und gehalten urn möglichst artefaktfreie Aufnahmen zu gestatten. Die Proben werden z.B. in ein Gel eingebettet und durch Röhren aus einem glasähnlichen Material in den Aufnahmebereich gepresst. Ebenso gibt es Probenhalter, welche eine kleine Scheibe, in der die Proben eingeschlossen sind, oder ein Behältnis mit Proben in den Aufnahmebereich halten.The problem with the light-level microscopy is often the handling of the sample. Various embodiments of sample holders for SPIM systems are known. The samples are stored and held in different ways to allow possible artifact-free recordings. The samples are e.g. embedded in a gel and pressed through tubes of a glass-like material into the receiving area. Likewise, there are sample holders which hold a small disc in which the samples are enclosed or a container of samples in the receiving area.

Manche Probenhalter bestehen aus viereckigen Röhren aus einem glasähnlichen Material in denen sich die eigentlichen Proben befinden. Weiterhin ist es bekannt, die Proben in eine Gelstruktur einzubetten, welche dann von der Seite her beleuchtet werden kann.Some sample holders consist of square tubes made of a glass-like material in which the actual samples are located. Furthermore, it is known to embed the samples in a gel structure, which can then be illuminated from the side.

Zudem können Probenhalter manuell hergestellt werden, welche speziell auf eine Variante der Lichtblattebenenmikroskopie optimiert sind, bei der über ein herkömmliches Beobachtungsobjektiv eine Kappe mit zwei im 45°-Winkel angeordneten Spiegeln geschoben wird, überwelche dann das Beleuchtungslicht horizontal eingekoppelt werden kann. Dabei werden die Proben innerhalb einer Petrischale in einen kleinen Tropfen Agar-Agar eingebettet. Nachdem der Tropfen erkaltet ist wird eine kleine Scheibe aus dem Tropfen geschnitten. Die seitlichen Teile des Tropfens werden dann entfernt, so dass ein kleiner Steg aus Agar-Agar übrigbleibt. Dieser Steg enthält dann einige Proben in einer geeigneten Höhe, um von der Lichtblattebene beleuchtet zu werden. Zur Aufnahme wird die Spiegelkappe so neben dem Steg platziert, dass die Lichtscheiben die in dem Steg enthaltenen Proben beleuchten.In addition, sample holders can be made manually, which are optimized specifically for a variant of the Lichtblattebenenmikroskopie, in which a conventional observation objective a cap with two arranged at 45 ° angle mirrors is pushed, then overcome the illumination light can be coupled horizontally. The samples are embedded within a Petri dish in a small drop of agar-agar. After the drop has cooled, a small slice is cut out of the drop. The lateral parts of the drop are then removed, leaving a small agar-agar bar. This ridge then contains some samples at an appropriate height to be illuminated by the petal plane. For recording, place the mirror cap next to the bridge so that the lenses illuminate the samples contained in the bridge.

Die skizzierte Form der Lichtblattebenenmikroskopie hat den Vorteil, dass schnell zwischen Lichtblattebenenmikroskopie und herkömmlicher konfokaler Mikroskopie umgeschaltet werden kann. Verfügbare Probenhalter weisen aber den Nachteil auf, dass sie nicht isotrop sind, so dass Anregungs- und Detektionslicht für die unterschiedlichen Mikroskopiearten jeweils unterschiedliche optische Wege durch den Probenhalter zurücklegen müssen. Dies kann zu Artefakten und Ungenauigkeiten beim Vergleich der mittels unterschiedlicher Mikroskopiearten aufgenommenen Bilder ein und derselben Probe führen.The sketched form of light-plane microscopy has the advantage that it is possible to switch quickly between light-level microscopy and conventional confocal microscopy. However, available sample holders have the disadvantage that they are not isotropic, so that excitation and detection light for the different types of microscopes each have to cover different optical paths through the sample holder. This can lead to artifacts and inaccuracies in the comparison of images taken by different types of microscopy one and the same sample.

Weiterhin kann gemäß dem bekannten Stand derTechnik immer nureine einzelne Probe untersucht werden. Ein Scannen mehrerer Proben ohne manuelles Einsetzen jeder einzelnen Probe ist nicht möglich. Dies bedeutet mitunter einen erheblichen Zeitaufwand, da die Probenpräparation und die Probenjustage jeweils manuell auszuführende Arbeitsschritte sind, deren Zeitaufwand und Erfolg stark von Erfahrung und Geschick des jeweiligen Nutzers abhängen.Furthermore, according to the known state of the art, only one single sample can always be examined. Scanning multiple samples without manually inserting each sample is not possible. This sometimes means a considerable amount of time, since the sample preparation and the sample adjustment are each manually executed steps whose time and success depend heavily on the experience and skill of each user.

Figur 1 zeigt ein zuvor beschriebenes, aus dem Stand derTechnik bekanntes Setup für Lichtblattebenenmikroskopie. Das untere Objektiv 2 dient als Anregungsobjektiv. Über einen der beiden an der Spiegelkappe 4 angeordneten Spiegel 6 wird das Anregungslicht 8 zur Probe 10 geleitet. Die Probe 10 ist in Agar-Agar 12 eingeschlossen. Senkrecht zur Einfallsrichtung des Anregungslichts 8 emittiert die Probe das Detektionslicht 14, welches mittels des oberen Objektivs 16, das als Detektionsobjektiv dient, detektiert wird.Figure 1 shows a previously described optical plane microscopy setup known in the art. The lower objective 2 serves as an excitation objective. The excitation light 8 is conducted to the sample 10 via one of the two mirrors 6 arranged on the mirror cap 4. The sample 10 is enclosed in agar-agar 12. Perpendicular to the direction of incidence of the excitation light 8, the sample emits the detection light 14, which is detected by means of the upper objective 16, which serves as a detection objective.

Figur 2 zeigt das Setup gemäß Figur 1 in einem Zustand, in dem ein klassisches Konfokalmikroskopieexperiment durchgeführt wird. Durch das untere Objektiv 2 wird ein Anregungslichtstrahl 18 auf die Probe 10 geleitet. Das in der Figur nach unten hin emittierte Fluoreszenzlicht 20 wird ebenfalls von dem unteren Objektiv 2, das somit als Anregungsobjektiv und auch als Detektionsobjektiv zugleich dient, detektiert. Es wird deutlich, dass das Fluoreszenzlicht 20 einen weiteren Weg durch das Agar-Agar 12 zurücklegen muss, als das Detektionslicht 14 in Figur 1.1st das Medium Agar-Agar in eineFIG. 2 shows the setup according to FIG. 1 in a state in which a classical confocal microscopy experiment is carried out. Through the lower lens 2, an excitation light beam 18 is directed to the sample 10. The fluorescence light 20 emitted downwards in the figure is likewise detected by the lower objective 2, which thus serves at the same time as an excitation objective and also as a detection objective. It is clear that the fluorescent light 20 has to cover a further path through the agar-agar 12, as the detection light 14 in Figure 1.1st the medium agar-agar in one

Glasröhre eingeschlossen, so ergeben sich weitere strahlformende optische Elemente welche die Qualität der erreichbaren Bilder zusätzlich verschlechtern.Including a glass tube, this results in further beam-forming optical elements which additionally impair the quality of the achievable images.

Die vorliegende Erfindung lost die angesprochenen Probleme durch ein Verfahren zum sequentiellen Untersuchen einer Mehrzahl von Proben mittels eines Lichtblattebenen-Mikroskops, mit den Schritten a. Vorbereiten zumindest einer Probenträgereinheit mit einer oder mehreren zu untersuchenden Proben, b. Einsetzen zumindest einer Probenträgereinheit in eine Aufnahmeeinheit, c. Einbringen der Aufnahmeeinheit in ein Messvolumen eines Lichtblattebenen-Mikroskops, d. Untersuchen zumindest einer ersten auf einer Probenträgereinheit angeordneten Probe mittels Lichtblattebenenmikroskopie, e. Bewegen der Aufnahmeeinheit mittels eines Motortisches entlang einer Längsachse der zumindest einen Probenträgereinheit, f. Untersuchen zumindest einer zweiten auf einer Probenträgereinheit angeordneten Probe mittels Lichtblattebenenmikroskopie, g. Wiederholen der Schritte e. und f., bis alle zu untersuchenden Proben untersucht sind, und h. Entfernen der Aufnahmeeinheit aus dem Messvolumen des Lichtblattebenenmikroskops.The present invention solves the aforementioned problems by a method for sequentially examining a plurality of samples by means of a light-plane microscope, comprising the steps of a. Preparing at least one sample carrier unit with one or more samples to be examined, b. Inserting at least one sample carrier unit into a receiving unit, c. Inserting the recording unit in a measuring volume of a light plane microscope, d. Examining at least a first sample arranged on a sample carrier unit by means of light-plane microscopy, e. Moving the receiving unit by means of a motor table along a longitudinal axis of the at least one sample carrier unit, f. Examine at least a second sample placed on a sample carrier unit by means of light-plane microscopy, g. Repeat steps e. and f., until all samples to be tested are examined, and h. Removing the recording unit from the measuring volume of the light level microscope.

Weiterhin werden zur Lösung der angesprochenen Probleme eine Probenträgereinheit für ein Lichtblattebenenmikroskop, mit einer Längsachse und einem entlang der Längsachse im Wesentlichen gleichförmigen Profil, wobei das Profil ein T-Profil, ein asymmetrisches T-Profil, ein im Wesentlichen L-förmiges Profil oder ein dreieckiges Profil ist, und wobei zumindest ein sich horizontal erstreckender Anteil der Probenträgereinheit für sichtbares Licht transparent ist, sowie eine Aufnahmeeinheit für eine Probenträgereinheit für ein Lichtblattebenenmikroskop mit einem für sichtbares Licht transparenten Boden, wobei an dem Boden zumindest eine Befestigungsvorrichtung für eine Probenträgereinheit angeordnet ist, vorgeschlagen.Furthermore, to solve the above-mentioned problems, a sample carrier unit for a light-level microscope, having a longitudinal axis and a substantially uniform profile along the longitudinal axis, wherein the profile is a T-profile, an asymmetric T-profile, a substantially L-shaped profile or a triangular Profile is, and wherein at least one horizontally extending portion of the sample support unit is transparent to visible light, and a receiving unit for a sample support unit for a light plane microscope with a visible light transparent bottom, wherein at least one mounting device for a sample carrier unit is arranged, proposed ,

Erfindungsgemäß wird eine Probenträgereinheit derart ausgestaltet, dass auf ihr angeordnete Proben nach mehreren Seiten hin von keinen optisch beeinflussenden Elementen umgeben sind. Falls dies nicht für alle relevanten Seiten erreichbar ist, so werden die optischen Beeinflussungen durch geringe vom Licht zu durchdringende Materialdicken zumindest möglichst gering gehalten. Gleichzeitig ist die erfindungsgemäße Probenträgereinheit bei konstantem Profil langgestreckt ausgeformt, so dass mehrereAccording to the invention, a sample carrier unit is designed in such a way that samples arranged on it are not surrounded by any optically influencing elements in several directions. If this is not achievable for all relevant pages, the optical influences are kept as low as possible by low material thicknesses to be penetrated by the light. At the same time the sample carrier unit according to the invention is formed elongated at a constant profile, so that several

Proben entlang der Längsachse der Probenträgereinheit angeordnet werden können. Wird die Probentragereinheit nun entlang dieser Längsachse verschoben, so gelangt eine Probe nach der anderen in den Untersuchungsbereich des Mikroskops und kann untersucht werden, ohne dass die gesamte Probentragereinheit ausgetauscht und neu justiert werden müsste.Samples along the longitudinal axis of the sample carrier unit can be arranged. If the sample carrier unit is now displaced along this longitudinal axis, one sample after the other passes into the examination region of the microscope and can be examined without the entire sample carrier unit having to be exchanged and readjusted.

Unter einer Probentragereinheit wird hier insbesondere ein Objekt verstanden, das geeignet ist, um Proben von einem Präparationsort in das Messvolumen eines Mikroskops zu transportieren und dort zu positionieren. Eine einfache Probentragereinheit ware beispielsweise ein simpler Objektträger aus Glas. Üblicherweise sind solche Probenträgereinheiten vollständig transparent. Die Probentragereinheit kann insbesondere geeignet sein, um das Wachsen von lebenden biologischen Zeilen auf Ihnen zu ermöglichen. Hierbei können die Zeilen nicht nur auf horizontalen Ebenen, sondern auch auf zur Horizontalen geneigten Ebenen wachsen. Auch das Wachsen auf der Unterseite einer Probentragereinheit Oder eines Teils der Probentragereinheit ist möglich. Weiterhin können die Zeilen durch chemische Markierungen dazu gebracht werden, bevorzugt in einem bestimmten Bereich der Probentragereinheit zu wachsen.In this case, a sample carrier unit is understood to mean, in particular, an object which is suitable for transporting samples from a preparation location into the measurement volume of a microscope and positioning them there. For example, a simple sample carrier unit would be a simple glass slide. Usually, such sample units are completely transparent. The sample support unit may be particularly suitable for allowing the growth of live biological lines on it. Here, the lines can grow not only on horizontal planes, but also on inclined planes to the horizontal. It is also possible to grow on the underside of a sample carrier unit or of a part of the sample carrier unit. Furthermore, the lines can be made to grow by chemical markers, preferably in a certain area of the sample carrier unit.

In einer bevorzugten Ausfiihrungsform weist die Probentragereinheit eine Befestigungsvorrichtung zur Befestigung der Probentragereinheit am Boden einer Aufnahmeeinheit auf. Dabei kann es sich insbesondere um eine Befestigungsvorrichtung handeln, die eine formschlüssige Befestigung an einer Aufnahmeeinheit ermöglicht. Die Befestigungsvorrichtung kann so ausgestaltet sein, dass sie in eine Ausnehmung oder andere Aufnahme an der Aufnahmeeinheit eingesetzt werden kann. Dabei findet die Befestigung vorzugsweise reversibel statt und kann einfach wieder gelost werden. Mittels der Befestigungsvorrichtung kann die Position der Probentragereinheit fixiert werden.In a preferred embodiment, the sample-carrying unit has a fastening device for fastening the sample-carrying unit to the bottom of a receiving unit. This may in particular be a fastening device which allows a positive attachment to a receiving unit. The fastening device can be designed so that it can be inserted into a recess or other receptacle on the receiving unit. The attachment is preferably reversible and can easily be solved again. By means of the fastening device, the position of the sample support unit can be fixed.

Die Ausdehnung der Probentragereinheit entlang ihrer Längsachse kann zumindest das Fünffache der Ausdehnung der Probentragereinheit senkrecht zu ihrer Längsachse betragen. Es ergibt sich dann eine langgestreckte Probentragereinheit, auf der eine Mehrzahl voneinander getrennter Proben angeordnet werde kann. Die Proben können dann nacheinander untersucht werden, wenn die Probentragereinheit entlang ihrer Längsachse verfahren wird.The extent of the sample support unit along its longitudinal axis may be at least five times the extent of the sample support unit perpendicular to its longitudinal axis. This results in an elongated sample support unit, on which a plurality of separate samples can be arranged. The samples can then be sequentially examined as the sample support unit is moved along its longitudinal axis.

Die Befestigungsvorrichtung kann zumindest einen Zapfen aufweisen. Der zumindest eine Zapfen kann horizontal Oder vertikal ausgerichtet sein. Der Zapfen kann dann durch eine entsprechende horizontale oder vertikale Bewegung der gesamten Probentragereinheit in eine korrespondierende Aufnahme, die beispielsweise an einer Aufnahmeeinheit angeordnet sein kann, eingeführt werden. Der Zapfen kann einen runden, ovalen oder rechteckigen, insbesondere quadratischen, Querschnitt aufweisen. Unter einem Zapfen wird dabei insbesondere ein Vorsprung konstanten Querschnitts verstanden, der sich im Wesentlichen senkrecht von einer Oberfläche aus erstreckt. Es sind aber ebenfalls Befestitungsvorrichtungen in Form einer Schnapp-, Clips- oder Rastverbindung denkbar.The fastening device may have at least one pin. The at least one pin can be oriented horizontally or vertically. The pin can then be introduced by a corresponding horizontal or vertical movement of the entire sample carrier unit in a corresponding receptacle, which may for example be arranged on a receiving unit. The pin may have a round, oval or rectangular, in particular square, cross-section. In this case, a pin means in particular a projection of constant cross-section, which extends substantially perpendicularly from a surface. But there are also fastening devices in the form of a snap, clips or locking connection conceivable.

Die vorgeschlagene Aufnahmeeinheit für eine Probenträgereinheit für ein Lichtblattebenenmikroskop weist einen für sichtbares Licht transparenten Boden auf, wobei an dem Boden zumindest eine Befestigungsvorrichtung für eine Probenträgereinheit angeordnet ist. Wenn mehrere Probentrëgereinheiten in die Aufnahmeeinheit eingesetzt werden können sollen, kann die Aufnahmeeinheit eine Mehrzahl von Befestigungsvorrichtungen, beispielsweise zwei, drei, vier, fünf, sechs oder noch mehr Befestigungsvorrichtungen, aufweisen. Jeder aufzunehmenden Probenträgereinheit können beispielsweise zwei, drei oder mehr Befestigungsvorrichtungen zugeordnet sein. Auch eine einzelne Befestigungsvorrichtung für jede Probenträgereinheit ist möglich.The proposed recording unit for a sample carrier unit for a light-level microscope has a bottom transparent to visible light, wherein at least one fastening device for a sample carrier unit is arranged on the bottom. If a plurality of sample carrier units are to be able to be inserted into the receiving unit, the receiving unit can have a plurality of fastening devices, for example two, three, four, five, six or even more fastening devices. Each sample carrier unit to be received can be assigned, for example, two, three or more fastening devices. Also, a single attachment device for each sample carrier unit is possible.

In einer besonders einfachen Ausführungsform weist die Befestigungsvorrichtung eine Vertiefung im Boden auf oder besteht vollständig aus einer solchen Vertiefung. Die Vertiefung kann beispielsweise rechteckig sein und in Größe und Form der Standfläche einer einzusetzenden Probenträgereinheit entsprechen. Auf diese Weise ergibt sich eine konstruktiv sehr einfach aufgebaute Befestigungseinheit. Ebenfalls kann die Vertiefung nur einem Teil der Grundfläche der einzusetzenden Probenträgereinheit entsprechen. In diesem Fall muss die Probenträgereinheit entsprechend korrespondierend ausgestaltet sein. Beispielsweise können Probenträgereinheit und Aufnahmeeinheit so ausgestaltet sein, dass sie jeweils zinnenartig oder kammartig ineinander eingreifen.In a particularly simple embodiment, the fastening device has a depression in the ground or consists entirely of such a depression. For example, the recess may be rectangular and may correspond in size and shape to the base of a sample carrier unit to be inserted. In this way, a structurally very simple design attachment unit. Likewise, the depression can correspond only to a part of the base area of the sample carrier unit to be used. In this case, the sample carrier unit must be designed correspondingly corresponding. For example, sample carrier unit and receiving unit can be designed so that they each engage in a crenellated or comb-like manner.

Es ist ebenfalls denkbar, dass die Probenträgereinheit mehrere fußartige Fortsätze aufweist, die beispielsweise an den vier Ecken einer in Draufsicht rechteckigen Probenträgereinheit angeordnet sind. Entsprechend besteht in diesem Fall die Befestigungsvorrichtung aus vier einzelnen Befestigungsvorrichtungen, beispielsweise aus vier zu den fußartigen Fortsätzen korrespondierenden Vertiefungen im Boden der Aufnahmeeinheit.It is also conceivable that the sample carrier unit has a plurality of foot-like extensions which are arranged, for example, at the four corners of a sample carrier unit which is rectangular in plan view. Accordingly, in this case, the fastening device consists of four individual fastening devices, for example, four corresponding to the foot-like projections depressions in the bottom of the receiving unit.

Die Aufnahmeeinheit kann derart ausgestaltet ist, dass sie mit einem flüssigen Medium gefüllt werden kann. Ebenfalls ist es von Vorteil, wenn der Boden eine rechteckige Grundform aufweist. Die Aufnahmeeinheit ist dann einfach zu produzieren und zu handhaben. Darüber hinaus ist eine rechteckige Grundform vorteilhaft, wenn mehrere langgestreckte Probentrëgereinheiten eingesetzt werden sollen.The receiving unit can be designed such that it can be filled with a liquid medium. It is also advantageous if the bottom has a rectangular basic shape. The recording unit is then easy to produce and handle. In addition, a rectangular basic shape is advantageous if several elongated Probenentrėgereinheiten be used.

Die Befestigungsvorrichtung kann eine formschlüssige Befestigung einer Probenträgereinheit an der Aufnahmeeinheit ermöglichen. Es ist so eine unkomplizierte, aber ausreichend feste mechanische Befestigung möglich.The fastening device can enable a positive fastening of a sample carrier unit to the receiving unit. It is such an uncomplicated, but sufficiently strong mechanical attachment possible.

Gemäß einer Weiterbildung der Erfindung ist die Befestigungsvorrichtung auf dem Boden der Aufnahmeeinheit angeordnet ist und zumindest zu einer Seite hin often. Die Befestigungsvorrichtung kann dabei nach oben hin geöffnet sein, urn das vertikale Einsetzen eines Fußes Oder Zapfens zu ermöglichen. Bevorzugt ist die Befestigungsvorrichtung aber zur Seite hin geöffnet. Dies hat den Vorteil, dass sich die Befestigungsvorrichtung auf den Boden der Aufnahmeeinheit aufbauen lässt und nicht in diesen eingearbeitet werden muss, was die Mindeststärke des Bodens erhöht, wodurch sich wiederum eine stärkere optische Beeinflussung des die Aufnahmeeinheit durchdringenden Lichts ergibt. Eine seitliche Öffnung hat also den Vorteil, dass sich durch die Aufnahmeeinheit hervorgerufene optische Beeinflussungen der Lichtstrahlen minimieren lassen.According to one embodiment of the invention, the fastening device is arranged on the bottom of the receiving unit and at least to one side often. The fastening device can be open at the top to allow the vertical insertion of a foot or pin. Preferably, however, the fastening device is open to the side. This has the advantage that the fastening device can be built on the bottom of the receiving unit and does not need to be incorporated into this, which increases the minimum thickness of the soil, which in turn results in a stronger visual influence of the receiving unit penetrating light. A lateral opening thus has the advantage that optical influences of the light beams caused by the recording unit can be minimized.

Die Befestigungsvorrichtung kann derart ausgestaltet sein, dass sie eine Aufnahme für einen sich horizontal Oder vertikal erstreckenden Zapfen umfasst. Eine solche Aufnahme kann in Form eines Bügels auf dem Boden angeordnet sein. Alternativ kann die Aufnahme aus einem massiven Block bestehen, in den beispielsweise seitlich eine Öffnung eingefräst ist, die einen Zapfen, eine Nase oder ähnliches aufnehmen kann.The fastening device may be configured such that it comprises a receptacle for a horizontally or vertically extending pin. Such a receptacle may be arranged in the form of a bracket on the floor. Alternatively, the receptacle may consist of a solid block in which, for example, an opening is milled laterally, which can receive a pin, a nose or the like.

Gemäß einer Weiterbildung der Erfindung weist die Aufnahmeeinheit zumindest eine sich im Wesentlichen senkrecht zum Boden erstreckende Seitenwand auf, welche zumindest eine Führungsvorrichtung zum Führen einer Probenträgereinheit Oder zum Fiihren eines Werkzeugs zum Einsetzen einer Probenträgereinheit aufweist. Die Führungsvorrichtung ist dabei vorzugsweise vertikal orientiert, so dass beim Einsetzen der Probenträgereinheit ein Teil der Probenträgereinheit Oder des Werkzeugs in diese Führungsvorrichtung eingreift. Die Position der Probenträgereinheit innerhalb der Aufnahmeeinheit kann so zuverlässig festgelegt werden. In einer einfachen Ausführungsform ist die Führungsvorrichtung eine Führungsnut, also lediglich eine Vertiefung in der Seitenwand.According to one embodiment of the invention, the receiving unit has at least one substantially perpendicular to the bottom extending side wall, which has at least one guide device for guiding a sample carrier unit or Fiihren a tool for inserting a sample carrier unit. The guide device is preferably oriented vertically, so that when inserting the sample carrier unit, a part of the sample carrier unit or the tool engages in this guide device. The position of the sample carrier unit within the receiving unit can be set reliably. In a simple embodiment, the guide device is a guide groove, ie only one depression in the side wall.

Das erfindungsgemäße Verfahren kann besonders gut mit zumindest einer erfindungsgemäßen Probenträgereinheit und einer erfindungsgemäßen Aufnahmeeinheit durchgeführt werden.The method according to the invention can be carried out particularly well with at least one sample carrier unit according to the invention and a receiving unit according to the invention.

Nach dem Durchführen der Untersuchungen kann die zumindest eine Probenträgereinheit aus der Aufnahmeeinheit entnommen werden. Es kann dann eine weitere bzw. es können mehrere weitere bereits vorbereitete Probenträgereinheiten eingesetzt werden, urn weitere Untersuchungen vorzunehmen. Auf diese Weise lässt sich eine große Anzahl von Proben in kurzer Zeit untersuchen.After carrying out the examinations, the at least one sample carrier unit can be removed from the receiving unit. It can then be another or it can be used several more already prepared sample carrier units to make further investigations. In this way, a large number of samples can be examined in a short time.

Die Probenträgereinheit und/oder die Aufnahmeeinheit können zwischen den Experimenten gesäubert werden, beispielsweise mittels eines Ultraschallbades.The sample carrier unit and / or the recording unit can be cleaned between the experiments, for example by means of an ultrasonic bath.

Wenn mehrere Probenträgereinheiten in der Aufnahmeeinheit vorhanden sind, kann die Aufnahmeeinheit mittels eines Motortisches bewegt werden, urn die Mehrzahl von Objekten, die auf der Mehrzahl von in der Aufnahmeeinheit angeordneten Probenträgereinheiten angeordnet sind, zu untersuchen. Vorzugsweise sind dabei die Probenträgereinheiten so angeordnet, dass ihre Längsachsen parallel zueinander ausgerichtet sind. Der Motortisch fiihrt dann Bewegungen entlang der Längsachse der Probenträgereinheiten aus, urn die Mehrzahl von auf einer Probenträgereinheit angeordneten Proben zu untersuchen. Weiterhin kann der Motortisch Bewegungen senkrecht zu der Längsachse der Probenträgereinheiten ausführen, so dass von einer Probenträgereinheit zu einer anderen gewechselt wird.If there are a plurality of sample carrier units in the receiving unit, the receiving unit can be moved by means of a motor table in order to examine the plurality of objects which are arranged on the plurality of sample carrier units arranged in the receiving unit. Preferably, the sample carrier units are arranged so that their longitudinal axes are aligned parallel to each other. The motor table then makes movements along the longitudinal axis of the sample carrier units to examine the plurality of samples placed on a sample carrier unit. Furthermore, the motor table can perform movements perpendicular to the longitudinal axis of the sample carrier units, so that is changed from one sample carrier unit to another.

Besonders vorteilhaft lässt sich das erfindungsgemäße Verfahren einsetzten, wenn die zumindest eine Probe vor Oder nach der Untersuchung mittels Lichtblattebenenmikroskopie mittels eines weiteren bildgebenden Verfahren, insbesondere mittels konfokaler Mikroskopie, untersucht wird.The method according to the invention can be used particularly advantageously if the at least one sample is examined before or after the examination by means of light-plane microscopy by means of a further imaging method, in particular by means of confocal microscopy.

Die Orientierung der Längsachse der Probenträgereinheit Oder der Probenträgereinheiten im eingebauten Zustand kann durch die Anordnung der Befestigungsvorrichtungen vorgegeben sein. Insbesondere können alle Probenträgereinheiten so angeordnet werden, dass ihre Längsachsen parallel zueinander verlaufen. Die Längsachsen der einzelnen Probenträgereinheiten verlaufen dabei vorzugsweise auf gleicher Höhe.The orientation of the longitudinal axis of the sample carrier unit or the sample carrier units in the installed state can be predetermined by the arrangement of the fastening devices. In particular, all sample carrier units can be arranged so that their longitudinal axes are parallel to each other. The longitudinal axes of the individual sample carrier units preferably run at the same height.

Vorteilhafte Weiterbildungen der Erfindung sind in den Unteransprüchen angegeben und in der Beschreibung beschrieben.Advantageous developments of the invention are specified in the subclaims and described in the description.

Zeichnungendrawings

Ausführungsbeispiele der Erfindung werden anhand der Zeichnungen und der nachfolgenden Beschreibung näher erläutert. Eszeigen:Embodiments of the invention will be explained in more detail with reference to the drawings and the description below. Show it:

Figur 1 eine schematische Ansicht eines Setups zurFigure 1 is a schematic view of a setup for

Lichtblattebenenmikroskopie gemäß Stand derTechnik,Lichtblattebenenmikroskopie according to the prior art,

Figur 2 das aus dem Stand der Technik bekannte Setup gemäß Figur 1 im Konfokalbetrieb,FIG. 2 shows the setup known from the prior art according to FIG. 1 in confocal mode,

Figur 3 hypothetische Lichtwege für das aus dem Stand der Technik bekannte Setup ohne Probenhalter,FIG. 3 shows hypothetical light paths for the setup known from the prior art without a sample holder,

Figur 4 ein erstes Ausführungsbeispiel einer erfindungsgemäßen Probenträgereinheit,FIG. 4 shows a first exemplary embodiment of a sample carrier unit according to the invention,

Figur 5 ein zweites Ausführungsbeispiel einer erfindungsgemäßen Probenträgereinheit,FIG. 5 shows a second exemplary embodiment of a sample carrier unit according to the invention,

Figur 6 ein drittes Ausführungsbeispiel einer erfindungsgemäßen Probenträgereinheit,FIG. 6 shows a third exemplary embodiment of a sample carrier unit according to the invention,

Figur 7 das Ausführungsbeispiel gemäß Figur 6 mit oben aufliegenden Proben,FIG. 7 shows the exemplary embodiment according to FIG. 6 with samples resting on top,

Figur 8 ein viertes Ausführungsbeispiel einer erfindungsgemäßen Probenträgereinheit,FIG. 8 shows a fourth exemplary embodiment of a sample carrier unit according to the invention,

Figur 9 ein fünftes Ausführungsbeispiel einer erfindungsgemäßen Probenträgereinheit,FIG. 9 shows a fifth exemplary embodiment of a sample carrier unit according to the invention,

Figur 10 ein erstes Ausführungsbeispiel einer erfindungsgemäßenFigure 10 shows a first embodiment of an inventive

Aufnahmeeinheit mit unterschiedlichen Probenträgereinheiten,Receiving unit with different sample carrier units,

Figur 11 ein zweites Ausführungsbeispiel einer erfindungsgemäßen Aufnahmeeinheit mit Probenträgereinheiten und Proben,11 shows a second embodiment of a receiving unit according to the invention with sample carrier units and samples,

Figur 12 die Aufnahmeeinheit gemäß Figur 10, in die gerade eine Probenträgereinheit eingesetzt wird,FIG. 12 shows the receiving unit according to FIG. 10 into which a sample carrier unit is currently being inserted,

Figur 13 ein drittes Ausführungsbeispiel einer erfindungsgemäßen Aufnahmeeinheit mit Probenträgereinheiten und Proben,13 shows a third exemplary embodiment of a receiving unit according to the invention with sample carrier units and samples, FIG.

Figur 14 die Aufnahmeeinheit gemäß Figur 13 während des Einsetzens einer Probenträgereinheit,FIG. 14 shows the receiving unit according to FIG. 13 during the insertion of a sample carrier unit,

Figur 15 eine detaillierte Darstellung eines Ausführungsbeispiels einer Befestigungsvorrichtung, undFigure 15 is a detailed illustration of an embodiment of a fastening device, and

Figur 16 eine schematische Darstellung der möglichen Bewegungen eines Motortischs während der Untersuchung.Figure 16 is a schematic representation of the possible movements of a motor table during the investigation.

Figur 3 zeigt hypothetische Lichtwege für das aus dem Stand der Technik bekannte Setup, bei dem im Zuge eines Gedankenexperiments der Probenhalter weggelassen wurde. Figur 3a zeigt den Strahlengang bei einem Lichtblattebenenexperiment, bei dem die Probe 10 von rechts beleuchtet wird. Der Beleuchtungslichtstrahl 8 wird über den rechten Spiegel 6 auf die Probe 10 gelenkt. Da in diesem hypothetischen Beispiel die Probe 10 frei im Raum schwebt, müssen weder der Beleuchtungslichtstrahl noch das Detektionslicht 14 ein weiteres Medium durchqueren, das Auswirkungen auf die optische Abbildung hätte. Figur 3b zeigt das gleiche Setup, wobei die Probe 10 hier mittels des linken Spiegels 6 von der linken Seite her beleuchtet wird.FIG. 3 shows hypothetical light paths for the setup known from the prior art, in which the sample holder was omitted in the course of a thought experiment. FIG. 3 a shows the beam path in a light-sheet plane experiment in which the sample 10 is illuminated from the right. The illumination light beam 8 is directed to the sample 10 via the right-hand mirror 6. Since, in this hypothetical example, the sample 10 floats freely in space, neither the illumination light beam nor the detection light 14 has to traverse another medium that would affect the optical imaging. FIG. 3b shows the same setup, the sample 10 being illuminated by the left-hand mirror 6 from the left-hand side.

In Figur 3c ist der Anregungslichtstrahl 18 dargestellt, der vom unteren Objektiv 2 ausgehend die Probe 10 beleuchtet. Das Fluoreszenzlicht 20, das von der Probe 10 ausgeht, wird wiederum von dem unteren Objektiv 2 aufgefangen. Auch hier sind keine optischen Hindernisse zwischen den Objektiven 2, 16, den Spiegeln 6 und der Probe 10 vorhanden.FIG. 3c shows the excitation light beam 18 which illuminates the sample 10 starting from the lower objective 2. The fluorescent light 20 emanating from the sample 10 is in turn collected by the lower objective 2. Again, no optical obstacles between the lenses 2, 16, the mirrors 6 and the sample 10 are available.

Figur 4 zeigt ein erstes Ausführungsbeispiel einer erfindungsgemäßen Probenträgereinheit 22. Dargestellt ist eine zweidimensionale Ansicht, in der zu erkennen ist, dass der Querschnitt der Probenträgereinheit 22 L-förmig ist. Die Probenträgereinheit 22 besteht also aus einem ersten, vertikal orientierten Abschnitt 24 und einem mit diesem verbundenen zweiten, horizontal orientierten Abschnitt 26. Der erste Abschnitt 24 bildet mit dem zweiten Abschnitt 24 einen rechten Winkel. Der erste Abschnitt 24 weist an seiner Unterseite eine Standfläche auf, mit der er beispielsweise auf eine Aufnahmeeinheit aufgestellt werden kann.FIG. 4 shows a first exemplary embodiment of a sample carrier unit 22 according to the invention. Shown is a two-dimensional view, in which it can be seen that the cross section of the sample carrier unit 22 is L-shaped. The sample carrier unit 22 thus consists of a first, vertically oriented portion 24 and a second horizontally oriented portion 26 connected thereto. The first portion 24 forms a right angle with the second portion 24. The first section 24 has on its underside a base, with which it can be placed, for example, on a receiving unit.

In Figur 4a ist die Situation dargestellt, dass die Probe 10 von rechts beleuchtet wird. Entsprechend ist die Probenträgereinheit 22 so angeordnet, dass der erste Abschnitt links von der Probe 10 angeordnet ist, so dass der Beleuchtungslichtstrahl 8 ungehindert bis zur Probe 10 vordringen kann. In Figur 4b ist eine Situation dargestellt, in der die Probe 10 von links beleuchtet wird. Entsprechend ist hier die Probenträgereinheit so angeordnet, dass der erste Abschnitt 24 sich rechts von der Probe 10 befindet. In Figur 4c ist das Setup aus Figur 4a gezeigt, während ein herkömmliches Konfokalexperiment durchgeführt wird. Auch hier behindert die Probenträgereinheit 22 weder das Anregungslicht 18 noch das Fluoreszenzlicht 20. Die Probe 10 kann beispielsweise aus biologischen Zeilen bestehen, die zuvor auf der Probenträgereinheit 22 wachsen gelassen wurden.FIG. 4 a shows the situation that the sample 10 is illuminated from the right. Accordingly, the sample carrier unit 22 is arranged so that the first section is arranged to the left of the sample 10, so that the illumination light beam 8 can freely penetrate to the sample 10. FIG. 4b shows a situation in which the sample 10 is illuminated from the left. Accordingly, here the sample carrier unit is arranged so that the first section 24 is located to the right of the sample 10. In Figure 4c, the setup of Figure 4a is shown while performing a conventional confocal experiment. Again, the sample carrier unit 22 obstructs neither the excitation light 18 nor the fluorescent light 20. The sample 10 can consist, for example, of biological cells which were previously grown on the sample carrier unit 22.

In Figur 5 ist ein zweites Ausführungsbeispiel einer erfindungsgemäßen Probenträgereinheit 22 gezeigt. Im Gegensatz zum in Figur 4 gezeigten Ausführungsbeispiel weist die Probenträgereinheit 22 einen T-förmigen Querschnitt auf. Der erste Abschnitt 24 ist wiederum vertikal orientiert, während der zweite Abschnitt 26 horizontal orientiert ist und die Probe 10 trägt. Wie anhand der zu den Figuren 4a, 4b und 4c analogen Figuren 5a, 5b und 5c zu erkennen ist, bietet die Probenträgereinheit 22 gemäß zweitem Ausführungsbeispiel die gleichen Vorteile wie die Probenträgereinheit gemäß erstem Ausführungsbeispiel. Darüber hinaus kann die gleiche Probenträgereinheit 22 sowohl für Experimente mit Beleuchtung von links, als auch für Experimente mit Beleuchtung von rechts genutzt werden, ohne die Probenträgereinheit 22 umdrehen zu müssen. Ebenfalls ist es möglich, auf beiden Seiten der Probenträgereinheit 22 Proben 10 anzuordnen und jeweils mittels Beleuchtung von links bzw. von rechts zu untersuchen.FIG. 5 shows a second exemplary embodiment of a sample carrier unit 22 according to the invention. In contrast to the exemplary embodiment shown in FIG. 4, the sample carrier unit 22 has a T-shaped cross section. The first section 24 is again oriented vertically while the second section 26 is horizontally oriented and carries the sample 10. As can be seen with reference to FIGS. 4a, 4b and 4c, FIGS. 5a, 5b and 5c, the sample carrier unit 22 according to the second exemplary embodiment offers the same advantages as the sample carrier unit according to the first exemplary embodiment. In addition, the same sample rack unit 22 can be used for both left-side lighting experiments and right-side lighting experiments without having to invert the sample rack unit 22. It is also possible to arrange samples 10 on both sides of the sample carrier unit 22 and to examine them in each case by means of illumination from the left or from the right.

Figur 6 zeigt ein drittes Ausführungsbeispiel einer erfindungsgemäßen Probenträgereinheit 22. Der zweite Abschnitt 26 ist dabei identisch wie bei den ersten beiden Ausführungsbeispielen ausgeführt und kann beispielsweise aus einer Glasplatte bestehen. Der erste Abschnitt 24 hingegen ist nicht exakt vertikal orientiert, sondern seine Seitenflächen 28, 30 bilden einen Winkel von etwa 5° mit der Vertikalen. Der erste Abschnitt 24 hat somit die Form eines Parallelogramms. Weiterhin ist der erste Abschnitt etwas breiter aufgebaut als in den zuvor beschriebenen Ausführungsbeispielen. Die Materialstärke des ersten Abschnitts 24 ist somit deutlich größer, beispielsweise urn den Faktor 3 oder mehr als den Faktor 3, als die Materialstärke des zweiten Abschnitts 26. Der angesprochene Winkel bewirkt, dass während eines Lichtblattebenenexperiments an den Seitenflächen 28, 30 des ersten Abschnitts 24 reflektiertes Licht 32 nicht direkt zur Probe 10 reflektiert wird, so dass das reflektierte Licht 32 die Messung nicht verfälschen kann. Das von den Seitenflächen 28, 30 reflektierte Licht 32 ist ebenfalls schematisch als Pfeil eingezeichnet. Die Teilfiguren 6a, 6b und 6c zeigen dabei wieder ein Lichtblattebenenenexperiment mit Beleuchtung von links, mit Beleuchtung von rechts sowie ein herkömmliches Konfokalmikroskopieexperiment bei ansonsten gleichem Setup.FIG. 6 shows a third exemplary embodiment of a sample carrier unit 22 according to the invention. The second section 26 is identical to the embodiment of the first two exemplary embodiments and may, for example, consist of a glass plate. The first section 24, however, is not exactly vertically oriented, but its side surfaces 28, 30 form an angle of about 5 ° with the vertical. The first section 24 thus has the shape of a parallelogram. Furthermore, the first section is slightly wider than in the previously described embodiments. The material thickness of the first section 24 is thus significantly greater, for example by a factor of 3 or more than the factor 3, than the material thickness of the second section 26. The angle addressed causes, during a light-plane experiment on the side surfaces 28, 30 of the first section 24 reflected light 32 is not reflected directly to the sample 10, so that the reflected light 32 can not falsify the measurement. The reflected light from the side surfaces 28, 30 32 is also schematically shown as an arrow. The sub-figures 6a, 6b and 6c show again a light-level experiment with illumination from the left, with illumination from the right and a conventional confocal microscopy experiment with otherwise the same setup.

Figur 7 zeigt das Ausführungsbeispiel aus Figur 6, wobei nun die Probe 10 oberhalb des zweiten Abschnitts 26 angeordnet ist und somit auf diesem aufliegt. Es ergeben sich die gleichen Vorteile wie für die in Figur 6 gezeigte Situation, wobei das durch die Probe 10 transmittierte Licht jeweils von dem Spiegel 6 aus dem Probenraum gelenkt wird, der nicht zur Erzeugung der Lichtblattebene verwendet wurde.Figure 7 shows the embodiment of Figure 6, wherein now the sample 10 is disposed above the second portion 26 and thus rests on this. The same advantages result as for the situation shown in FIG. 6, wherein the light transmitted through the sample 10 is in each case directed by the mirror 6 out of the sample space, which was not used to produce the plane of the light sheet.

Figur 8 zeigt ein weiteree Ausführungsbeispiel einer erfindungsgemäßen Probenträgereinheit 22. Der Querschnitt der Probenträgereinheit 22 hat die Form eines gleichschenkligen, rechtwinkligen Dreiecks. Auf der der Hypotenuse des Dreiecks zugeordneten Oberfläche der prismatischen Probenträgereinheit 22 ist die Probe 10 angeordnet. Es ist zu erkennen, dass bei Beleuchtung über die Spiegel 6 keine Beeinflussung des optischen Strahlengangs stattfindet. Im konfokalen Betrieb, wenn direkt von unten von dem Objektiv 2 aus beleuchtet wird, müssen hingegen sowohl das Anregungslicht 18 als auch das Fluoreszenzlicht 20 die Probenträgereinheit 22 durchdringen. Aufgrund des einfachen Aufbaus kann die dargestellte Probenträgereinheit 22 dennoch für einige Experimente von Vorteil sein.FIG. 8 shows a further exemplary embodiment of a sample carrier unit 22 according to the invention. The cross section of the sample carrier unit 22 has the shape of an isosceles, right-angled triangle. On the hypotenuse of the triangle associated surface of the prismatic sample carrier unit 22, the sample 10 is arranged. It can be seen that, when illuminated by the mirrors 6, there is no influence on the optical beam path. In confocal operation, when illuminated directly from below by the objective 2, on the other hand, both the excitation light 18 and the fluorescent light 20 must penetrate the sample carrier unit 22. However, due to the simple construction, the illustrated sample carrier unit 22 may still be advantageous for some experiments.

Weiterhin ist ein Filter 74 dargestellt, der derart ausgestaltet ist, dass der Anteil des Beleuchtungslichts 8, welcher durch die Probenträgereinheit 22 in Richtung des Beobachtungsobjektivs 16 reflektiert wird, zum Filter 74 gelangt und dort herausgefiltert wird. Das Emissionslicht 14, welches durch die mittels der Spiegel 6 erzeugte Lichtscheibe generiert wird, kann den Filter 74 hingegen passieren und gelangt so zur Kamera.Furthermore, a filter 74 is shown, which is designed such that the proportion of the illumination light 8, which is reflected by the sample carrier unit 22 in the direction of the observation objective 16, passes to the filter 74 and is filtered out there. The emission light 14, which is generated by the light disk generated by means of the mirror 6, however, can pass the filter 74 and thus reaches the camera.

Zwei Probenträgereinheiten 22 gemäß Figur 8 können auch zu einem Doppelprisma zusammengesetzt werden, so dass man sowohl rechts als auch links eine Fläche erhält, die Proben tragen kann.Two sample carrier units 22 according to FIG. 8 can also be combined to form a double prism, so that both surfaces on the right and left receive a surface that can carry samples.

Figur 9 zeigt ebenfalls ein Ausführungsbeispiel einer Probenträgereinheit 22, deren Querschnitt die Form eines Dreiecks aufweist. In diesem Fall ist das Dreieck jedoch weder rechtwinklig noch gleichschenklig, sondern asymmetrisch. Die Hypotenuse des Dreiecks ist seine Grundseite 68, auf der die Probenträgereinheit 22 aufliegt. Die steile Seite 70 ist zum Strahlengang hin und somit zur Untersuchungsseite hin orientiert. Auf der steilen Seite 70 ist die Probe 10 angeordnet und wird untersucht. Die der steilen Seite 70 gegenüberliegende flache Seite 72 bildet mit der Grundseite 68 einen spitzen Winkel. Dieser bewirkt, dass über die Spiegel 6 zur Durchführung eines Lichblattebenenexperiments eingekoppeltes Beleuchtungslicht 8, das nach dem Durchqueren der Probe 10 in die Probenträgereinheit 22 eingedrungen ist, an derflachen Seite 72 derart reflektiert wird, dass es zu einem großen Teil aus dem Probenraum heraus reflektiert wird. Es erreicht somit nicht das Detektionsobjektiv 16 und führt daher nicht zu Verfälschungen des Messergebnisses. An der steilen Seite 70 eventuell reflektiertes oder gestreutes und durch das Objektiv 16 aufgefangenes Beleuchtungslicht 8 kann optional beispielsweise analog zu dem in Figur 8 gezeigten Ausführungsbeispiel durch einen Filter 74 herausgefiltert werden, lm Gegensatz zu dem in Figur 8 gezeigten Ausführungsbeispiel fällt der Anteil des potentiell in das Objektiv fallenden Beleuchtungslichts 8 auf Grund der ausgeprägten Steilheit der Seite 70 allerdings gering aus. lm rechten Bereich der Figur ist zu erkennen, dass bei der beschriebenen Ausführungsform auch die Auswirkungen auf den Strahlengang eines herkömmlichen Konfokalexperiments nur minimal sind.FIG. 9 likewise shows an exemplary embodiment of a sample carrier unit 22 whose cross section has the shape of a triangle. In this case, however, the triangle is neither orthogonal nor isosceles, but asymmetrical. The hypotenuse of the triangle is its base 68, on which the sample carrier unit 22 rests. The steep side 70 is oriented towards the beam path and thus towards the examination side. On the steep side 70, the sample 10 is arranged and is examined. The steep side 70 opposite flat side 72 forms with the base 68 an acute angle. The effect of this effect is that illumination light 8, which has penetrated into the sample carrier unit 22 after passing through the sample 10, is reflected on the flat side 72 in such a way that it is largely reflected out of the sample space via the mirrors 6 in order to carry out a light-plane level experiment , It thus does not reach the detection objective 16 and therefore does not lead to distortions of the measurement result. On the steep side 70 possibly reflected or scattered and collected by the lens 16 illumination light 8 can optionally be filtered out, for example, analogous to the embodiment shown in Figure 8 by a filter 74, lm contrast to the embodiment shown in Figure 8, the proportion of potentially in the lens falling illumination light 8 due to the pronounced steepness of page 70, however, low. It can be seen in the right-hand portion of the figure that in the described embodiment, the effects on the beam path of a conventional confocal experiment are also minimal.

In Figur 10 ist eine erfindungsgemäße Aufnahmeeinheit 34, in die verschiedene Probenträgereinheiten 22.1 bis 22.6 eingesetzt sind. Die Aufnahmeeinheit 34 weist einen Boden 36 in Form einer rechteckigen Grundfläche auf und ist wannenartig ausgestaltet. An den Seiten wird der Innenraum der Aufnahmeeinheit 34 von Seitenwänden 40 begrenzt. Die Seitenwände 40 sind etwas höher als die einzusetzenden Probenträgereinheiten 22 ausgestaltet. So kann die Aufnahmeeinheit 34 so mit einem Medium gefüllt werden, dass die Probenträgereinheiten 22 vollständig von dem Medium bedeckt werden.FIG. 10 shows a receiving unit 34 according to the invention, into which different sample carrier units 22.1 to 22.6 are inserted. The receiving unit 34 has a bottom 36 in the form of a rectangular base and is designed trough-like. On the sides of the interior of the receiving unit 34 is bounded by side walls 40. The side walls 40 are configured slightly higher than the sample support units 22 to be used. Thus, the receiving unit 34 can be filled with a medium so that the sample support units 22 are completely covered by the medium.

Die Probenträgereinheiten 22 sind mittels geeigneter Befestigungsvorrichtungen an dem Boden 36 der Aufnahmeeinheit 34 befestigt. Die Befestigungsvorrichtungen weisen einen Abstand voneinander auf, der groß genug ist, urn die Probenträgereinheiten 22 mit einem aus dem Stand der Technik bekannten Objektiv mit aufgesetzter Spiegelkappe zu untersuchen und dieses Objektiv entlang der Längsachse L der Probenträgereinheiten 22 zu verfahren. Die Befestigung kann dabei beispielsweise durch klipsen, pressen, stecken, klemmen, kleben, magnetisch oder durch Adhäsion erfolgen. Der Boden 36 der Aufnahmeeinheit 34 ist aus einem transparenten Material, beispielsweise aus Glas oder einem Kunststoff, gefertigt. Insbesondere ist das Material für typische Anregungswellenlängen und typische Fluoreszenzwellenlängen transparent. In der dargestellten Aufnahmeeinheit 34 sind sechs verschiedene Probenträgereinheiten 22.1 bis 22.6 eingesetzt, die jeweils einen konstanten Querschnitt entlang ihrer Längsachse L aufweisen und sich voneinander durch unterschiedliche Querschnitte unterscheiden. Die Längsachsen aller Probenträgereinheiten 22.1 bis 22.6 sind dabei parallel zueinander ausgerichtet. Die Suffixe .1 bis .6 zählen dabei die Probenträgereinheiten in der Abbildung von links nach rechts durch.The sample carrier units 22 are fastened to the bottom 36 of the receiving unit 34 by means of suitable fastening devices. The fastening devices are at a distance from one another which is large enough to examine the sample carrier units 22 with a lens with attached mirror cap known from the prior art and to move this objective along the longitudinal axis L of the sample carrier units 22. The attachment can be done, for example, by clipping, pressing, stuck, clamp, glue, magnetic or by adhesion. The bottom 36 of the receiving unit 34 is made of a transparent material, for example made of glass or a plastic. In particular, the material is transparent for typical excitation wavelengths and typical fluorescence wavelengths. In the illustrated receiving unit 34 six different sample carrier units 22.1 to 22.6 are used, each having a constant cross section along its longitudinal axis L and differ from each other by different cross sections. The longitudinal axes of all sample carrier units 22.1 to 22.6 are aligned parallel to each other. The suffixes .1 to .6 count the sample carrier units in the illustration from left to right.

Die Probenträgereinheit 22.1 weist einen dreieckigen Querschnitt auf. lm dargestellten Fall ist der Querschnitt als gleichschenkliges Dreieck ausgestaltet, wobei die Hypotenuse die Unterseite 43 bildet. Insbesondere kann es sich um ein rechtwinkliges Dreieck handeln. Es sind aber auch alle anderen Arten von Dreiecken möglich. Die gesamte Probenträgereinheit 22.1 hat somit die Form eines Prismas mit dem beschriebenen Dreieck als Grundfläche. Die Probenträgereinheit 22.1 weist zwei Probenflächen 42.1 auf, auf denen die zu untersuchenden Proben angeordnet werden können. Jeweils eine der Probenflächen 42.1 verläuft von zentral oben nach links unten und eine von zentral oben nach rechts unten. Bei einer Untersuchung mit dem zuvor beschriebenen Objektiv mit Spiegelkappen können auf einer der Probenflächen 42.1 angeordnete Proben über den linken Spiegel beleuchtet werden, wohingegen die auf der anderen Probenfläche 42.1 angeordnete Proben über den rechten Spiegel beleuchtet werden können.The sample carrier unit 22.1 has a triangular cross-section. In the illustrated case, the cross section is configured as an isosceles triangle, the hypotenuse forming the underside 43. In particular, it may be a right-angled triangle. But there are also all other types of triangles possible. The entire sample carrier unit 22.1 thus has the shape of a prism with the triangle described as a base. The sample carrier unit 22.1 has two sample surfaces 42.1 on which the samples to be examined can be arranged. In each case one of the sample surfaces 42.1 runs from the top center to the bottom left and one from the top center to the bottom right. In a study with the previously described objective with mirror caps, samples arranged on one of the sample surfaces 42.1 can be illuminated via the left mirror, whereas the samples arranged on the other sample surface 42.1 can be illuminated via the right mirror.

Die Probenträgereinheit 22.2 weist ebenfalls ein Dreieck als Grundfläche auf. Allerdings wird hier die Unterseite der Probenträgereinheit 22.2 von einer ersten Kathete des Dreiecks gebildet. Im dargestellten Fall ist das Dreieck ein rechtwinkliges Dreieck, so dass die zweite Kathete senkrecht zum Boden ausgerichtet ist. Die Probenfläche 42.2 verläuft von oben nach links unten und kann somit über den linken Spiegel eines Objektivs mit Spiegelkappe erreicht werden.The sample carrier unit 22.2 likewise has a triangle as the base area. However, here the underside of the sample carrier unit 22.2 is formed by a first catheter of the triangle. In the case shown, the triangle is a right-angled triangle, so that the second catheter is oriented perpendicular to the ground. The sample surface 42.2 runs from top to bottom left and can thus be reached via the left mirror of a lens with mirror cap.

Die Probenträgereinheit 22.3 ist identisch zur Probenträgereinheit 22.2 ausgestaltet mit dem einzigen Unterschied, dass sich die Probenfläche 42.3 von oben nach rechts unten erstreckt.The sample carrier unit 22.3 is identical to the sample carrier unit 22.2 designed with the only difference that the sample surface 42.3 extends from top to bottom right.

Die Probenträgereinheit 22.4 weist einen L-förmigen Querschnitt auf, wobei im gezeigten Beispiel beide Schenkel des L in etwa gleich lang sind. Ein erster Schenkel 44.1 des L erstreckt sich parallel zum Boden 36 und bildet die Probenfläche 42.4. Ein zweiter Schenkel 44.2 des L fungiert als Fuß und erstreckt sich senkrecht zum Boden 36. Die Unterseite des zweiten Schenkels 44.2 ist am Boden 36 befestigt. Die Proben können auf dem ersten Schenkel 44.1 aufliegen Oder unter dem ersten Schenkel 44.1 hangen, so dass die Oberseite und die Unterseite des ersten Schenkels 44.1 jeweils die Probenfläche 42.4 darstellen können.The sample carrier unit 22.4 has an L-shaped cross-section, wherein in the example shown, both legs of the L are approximately the same length. A first leg 44.1 of the L extends parallel to the bottom 36 and forms the sample surface 42.4. A second leg 44.2 of the L acts as a foot and extends perpendicular to the floor 36. The underside of the second leg 44.2 is secured to the floor 36. The samples may rest on the first leg 44.1 or hang below the first leg 44.1 so that the top and bottom of the first leg 44.1 may each represent the sample surface 42.4.

Die Probenträgereinheit 22.5 ist identisch zur Probenträgereinheit 22.4 ausgestaltet, mit dem einzigen Unterschied, dass der erste Schenkel 44.1 des L der Probenträgereinheit 22.4 an seiner linken Kante mit dem zweiten Schenkel 44.2 verbunden ist, wohingegen der erste Schenkel 44.3 der Probenträgereinheit 22.5 an seiner rechten Kante mit dem zweiten Schenkel 44.4 verbunden ist.The sample carrier unit 22.5 is configured identically to the sample carrier unit 22.4, with the only difference that the first leg 44.1 of the L of the sample carrier unit 22.4 is connected at its left edge to the second leg 44.2, whereas the first leg 44.3 of the sample carrier unit 22.5 at its right edge the second leg 44.4 is connected.

Die Probenträgereinheit 22.6 weist einen T-förmigen Querschnitt auf. Eine den zweiten Schenkeln 44.2 der Probenträgereinheiten 22.4 und 22.5 entsprechende Standseite des T 46 trägt eine sich parallel zum Boden erstreckende Querfläche 48. Diese kann ebenso wie die ersten Schenkel 44.1 und 44.3 der Probenträgereinheiten 22.4 und 22.5 auf Ihrer Oberseite sowie auf Ihrer Unterseite Proben tragen.The sample carrier unit 22.6 has a T-shaped cross-section. A stand side of the T 46 corresponding to the second legs 44.2 of the sample support units 22.4 and 22.5 carries a transverse surface 48 extending parallel to the floor. Like the first legs 44.1 and 44.3 of the sample support units 22.4 and 22.5, it can carry samples on its upper side and on its underside.

Figur 11 zeigt eine Aufnahmeeinheit 34, in die insgesamt fünf identische Probenträgereinheiten 22 eingesetzt sind. Der Formfaktor der Aufnahmeeinheit 34 entspricht dabei ungefähr dem einer bekannten Wellplate. Die Ausführung der Probenträgereinheiten 22 entspricht dabei der Probenträgereinheit 22.1 aus Figur 8. Auf den Probenträgereinheiten 22 sind Proben 10 angeordnet, die aus biologischem Material, insbesondere aus biologischen Zeilen, bestehen können. Mittels aus dem Stand der Technik bekannten Methoden ist es möglich, die Zeilen direkt auf vorgegebenen Bereichen der Probenträgereinheiten 22 wachsen zu lassen. Hierzu können die Probenträgereinheiten 22 aus der Aufnahmeeinheit 34 entnommen werden. Das System ist durch die vorgegebenen Positionen der Probenträgereinheiten 22 geometrisch vollständig bestimmt, so dass automatisierte Screening-Prozesse durchgeführt werden können.FIG. 11 shows a receiving unit 34, into which a total of five identical sample carrier units 22 are inserted. The form factor of the recording unit 34 corresponds approximately to that of a known Wellplate. The design of the sample carrier units 22 corresponds to the sample carrier unit 22.1 from FIG. 8. On the sample carrier units 22, samples 10 are arranged which may consist of biological material, in particular biological lines. By means known from the prior art methods, it is possible to grow the lines directly on predetermined regions of the sample carrier units 22. For this purpose, the sample carrier units 22 can be removed from the receiving unit 34. The system is geometrically completely determined by the predetermined positions of the sample carrier units 22, so that automated screening processes can be carried out.

Figur 12 zeigt den letzten Schritt der Preparation der Aufnahmeeinheit 34 für ein Experiment. Die Probentrëgereinheiten 22.2 bis 22.5 sind bereits eingesetzt. Die Probetrëgereinheit 22.1 befindet sich noch außerhalb der Aufnahmeeinheit 34. Durch den eingezeichneten Pfeil wird die Bewegung symbolisiert, die die Probenträgereinheit 22.1 ausführt. Am Boden 36 der Aufnahmeeinheit 34 ist die Befestigungsvorrichtung dargestellt, die als Mulde 52 ausgeführt ist. Die Mulde 52 hat eine rechteckige Form, die der Form der Unterseite 43 der Probenträgereinheit 22.1 entspricht. Die Mulde 52 ist minimal größerals die Unterseite 43, so dass diese in die Mulde 52 eingesetzt werden kann und dort mit möglichst geringem Spiel gehalten wird.FIG. 12 shows the last step in the preparation of the recording unit 34 for an experiment. The Probenentrëgereinheiten 22.2 to 22.5 are already used. The Probetrëgereinheit 22.1 is still outside the receiving unit 34. The arrow symbolizes the movement that performs the sample carrier unit 22.1. At the bottom 36 of the receiving unit 34, the fastening device is shown, which is designed as a trough 52. The trough 52 has a rectangular shape that corresponds to the shape of the bottom 43 of the sample carrier unit 22.1. The trough 52 is minimally larger than the bottom 43, so that it can be inserted into the trough 52 and held there with the least possible play.

Figur 13 zeigt ein weiteres Ausführungsbeispiel einer erfindungsgemëßen Aufnahmeeinheit 34 sowie erfindungsgemäßer Probentrëgereinheiten 22. Die Aufnahmeeinheit 34 entspricht in Ihrer Grundform, also hinsichtlich des Bodens 36 und der Seitenwënde 40, der zuvor beschriebenen Aufnahmeeinheit. lm Unterschied zu dieser sind dieFIG. 13 shows a further exemplary embodiment of a receiving unit 34 according to the invention and sample support units 22 according to the invention. The receiving unit 34 corresponds in its basic form, that is to say with respect to the base 36 and the side walls 40, to the receiving unit described above. ln contrast to this are the

Befestigungsvorrichtungen an der Aufnahmeeinheit aber nicht als Mulden, sondern als Bügel 52 ausgeführt. Die Bügel können beispielsweise aufgeklebt sein. Jeweils zwei Bügel 52 sind dabei auf einer Linie angeordnet, wobei ihre Öffnungen in die gleiche Richtung weisen, so dass sie gemeinsam eine Probentrëgereinheit 22 aufnehmen können. Zu diesem Zweck sind an den Probentrëgereinheiten 22 ebenfalls Befestigungseinrichtungen angeordnet. Die Probentrëgereinheit 22 weisen einen im Wesentlichen L-förmigen Querschnitt auf, ëhnlich zu den Probentrëgereinheiten 22.4 und 22.5 aus Figur 8. Dererste Schenkel 44.1 ist im Vergleich jedoch deutlich breiter ausgeführt, so dass die Unterseite des ersten Schenkels 44.1 in etwa halb so breit ist wie er zweite Schenkel 44.2. An der im unteren Bereich der Figur dargestellten Probentrëgereinheit 22 ist zu erkennen, dass der zweite Schenkel 44.2 Ausnehmungen 54 aufweist, in die sich entlang der Lëngsachse L der Probentrëgereinheit 22 Zapfen 56 erstrecken. Die Zapfen 56 sind dabei passend zu den Bügeln 52 ausgestaltet. Die Probentrëgereinheit 22 kann so positioniert werden, dass sich die Ausnehmungen 54 oberhalb der Bügel 54 befinden und dann abgesenkt werden, so dass die Unterseite des ersten Schenkels 44.1 in Kontakt mit dem Boden 36 kommt. Um die Probenträgereinheit 22 auf dem Boden 36 zu fixieren, kann dann die Probenträgereinheit 22 entlang der Längsrichtung L verschoben werden, so dass die Zapfen 56 in die Bügel 54 eingreifen.Fastening devices on the receiving unit but not as wells, but designed as a bracket 52. The bracket can be glued, for example. In each case two brackets 52 are arranged in a line, with their openings facing in the same direction, so that they can collect a sample support unit 22 together. For this purpose fastening means are also arranged on the sample support units 22. The sample support unit 22 has a substantially L-shaped cross section, similar to the sample support units 22.4 and 22.5 of FIG. 8. However, the first leg 44.1 is made significantly wider in comparison, so that the underside of the first leg 44.1 is approximately half as wide as he second leg 44.2. It can be seen from the sample support unit 22 shown in the lower region of the figure that the second leg 44.2 has recesses 54 into which pins 22 extend along the longitudinal axis L of the sample support unit 22. The pins 56 are designed to match the brackets 52. The sample support unit 22 may be positioned so that the recesses 54 are located above the stirrups 54 and then lowered so that the underside of the first leg 44.1 comes into contact with the floor 36. In order to fix the sample carrier unit 22 on the floor 36, then the sample carrier unit 22 can be moved along the longitudinal direction L, so that the pins 56 engage in the bracket 54.

Durch den Kontakt der Bügel 54 mit den Zapfen 56 entsteht eine Reibungskraft, die die Probenträgereinheit 22 auf dem Boden 36 fixiert.By the contact of the bracket 54 with the pin 56 creates a frictional force that fixes the sample carrier unit 22 on the floor 36.

Ebenfalls dargestellt ist ein Werkzeug 58, das zum Einsetzen der Probenträgereinheiten 22 genutzt werden kann. Das Werkzeug 58 kann beispielsweise von einem nicht dargesteliten Roboterarm oder auch von einem Nutzer gehalten werden. Es weist Greifmittel 60 auf, die in der Lage sind, mit an der Oberseite der Probenträgereinheit 22 angeordneten Angreifmitteln 62 zusammenzuwirken, so dass das Werkzeug 58 die Probenträgereinheit 22 greifen, bewegen und absetzen kann. Die Greifmittel 60 und die Angreifmittel 62 können dabei beispielsweise mechanisch, pneumatisch oder magnetisch zusammenwirken. lm dargesteliten Fall ist eine mechanische Verbindung gezeigt, bei der Steckzapfen 60 des Werkzeugs in Zapfenaufnahmen 62, die an der Probenträgereinheit 22 angeordnet sind, eingreifen. Das Werkzeug greift dann die Probenträgereinheit 22 außerhalb der Aufnahmeeinheit 34, führt die beschrieben Positionier- und Absenkbewegungen aus und gibt dann die Probenträgereinheit 22 frei. Um das Positionieren der Probenträgereinheit 22 zu vereinfachen, weisen die Seitenwände 40 der Aufnahmeeinheit 34 Führungsvorrichtungen auf, die in der Form von Führungsnuten 64 ausgestaltet sind. Die Führungsnuten 64 sind als sich senkrecht erstreckende Ausnehmungen in den Seitenwänden 40 ausgestaltet. Jeweils zwei Führungsnuten 64 liegen einander gegenüber und sind zwei Bügeln 52 zugeordnet.Also shown is a tool 58 that can be used to insert the sample carrier units 22. The tool 58 can be held, for example, by a not illustrated robot arm or by a user. It has gripping means 60 which are able to cooperate with engaging means 62 arranged on the upper side of the sample carrier unit 22 so that the tool 58 can grip, move and set down the sample carrier unit 22. The gripping means 60 and the engagement means 62 can cooperate, for example, mechanically, pneumatically or magnetically. In the illustrated case, a mechanical connection is shown in which pin 60 of the tool in pin receivers 62, which are arranged on the sample carrier unit 22, engage. The tool then grips the sample carrier unit 22 outside the receiving unit 34, carries out the described positioning and lowering movements and then releases the sample carrier unit 22. In order to facilitate the positioning of the sample carrier unit 22, the side walls 40 of the receiving unit 34 on guide devices which are configured in the form of guide grooves 64. The guide grooves 64 are configured as vertically extending recesses in the side walls 40. Two guide grooves 64 lie opposite each other and are associated with two brackets 52.

Das Werkzeug 58 kann beim Einsetzen der Probenträgereinheiten 22 in die Führungsnuten 64 eingreifen. Es wird hierdurch zum einen eine exakt senkrechte Absenkung der Probenträgereinheiten 22 und zum anderen eine genaue Positionierung der Probenträgereinheit 22 ermöglicht.The tool 58 can engage in the insertion of the sample carrier units 22 in the guide grooves 64. On the one hand, this makes possible an exactly vertical lowering of the sample carrier units 22 and, on the other hand, an exact positioning of the sample carrier unit 22.

Figur 14 zeigt entsprechend das Einsetzen der Probenträgereinheit 22 in die Aufnahmeeinheit 34. Das Werkzeug 58 hat die Probenträgereinheit 22 gegriffen und oberhalb der Bügel 52 abgesenkt. Es greift dabei in die Führungsnut 64.1 ein. Zum Fixieren der Probenträgereinheit 22 führt das Werkzeug 58 dann eine horizontale Bewegung entlang der Längsachse L aus, so dass die Zapfen 56 in die Bügel 52 eingreifen und die Probenträgereinheit 22 fixiert wird. Durch die Bewegung entlang der Längsachse L lost sich das Werkzeug 58 aus der Führungsnut 64.1 und greift mit seiner gegenüber liegenden Seite in die Führungsnut 64.2 ein. lm Folgenden wird dann die Verbindung der Greifmittel 60 mit den Angreifmitteln 62 gelost und das Werkzeug 58 nach oben aus der Aufnahmeeinheit 34 entfernt. Die Probenträgereinheit 22 bleibt in der Aufnahmeeinheit 34 zurück und ist nun in dieser fixiert.FIG. 14 correspondingly shows the insertion of the sample carrier unit 22 into the receiving unit 34. The tool 58 has grasped the sample carrier unit 22 and lowered it above the bars 52. It engages in the guide groove 64.1. For fixing the sample carrier unit 22, the tool 58 then performs a horizontal movement along the longitudinal axis L, so that the pins 56 engage in the brackets 52 and the sample carrier unit 22 is fixed. By the movement along the longitudinal axis L, the tool 58 is released from the guide groove 64.1 and engages with its opposite side in the guide groove 64.2. Subsequently, the connection of the gripping means 60 with the engagement means 62 is then released and the tool 58 is removed upward from the receiving unit 34. The sample carrier unit 22 remains in the receiving unit 34 back and is now fixed in this.

In Figur 15 sind in einer Detaildarstellung die Bügel 52 sowie die Ausnehmung 54 und der Zapfen 56 der Probenträgereinheit 22 vergrößert dargestellt. Der Boden 36, auf dem der Bügel 52 angebracht ist, ist aus Gründen der Übersichtlichkeit nicht dargestellt. lm oberen Bereich der Figur ist eine Situation während des Einsetzens der Probenträgereinheit 22 in die Aufnahmeeinheit 34 dargestellt. Die Ausnehmung 54 hat bereits den Bügel 52 aufgenommen. Die Probenträgereinheit 22 wird nun entlang des Pfeils in der Längsrichtung L in Richtung des Bügels 52 bewegt, wodurch der Zapfen 56 in den Bügel 52 eindringt, so dass der im unteren Teil der Figur gezeigte Zustand erreicht wird. Durch eine entgegengesetzte Bewegung der Probenträgereinheit 22 kann diese nun wieder von dem Bügel 52 getrennt werden, so dass der Zapfen 56 aus dem Bügel 52 entnommen wird.In Figure 15, the bracket 52 and the recess 54 and the pin 56 of the sample carrier unit 22 are shown enlarged in a detailed view. The bottom 36, on which the bracket 52 is mounted, is not shown for reasons of clarity. In the upper portion of the figure, a situation during the insertion of the sample rack unit 22 into the receiving unit 34 is shown. The recess 54 has already received the bracket 52. The sample support unit 22 is now moved along the arrow in the longitudinal direction L in the direction of the bracket 52, whereby the pin 56 penetrates into the bracket 52, so that the state shown in the lower part of the figure is reached. By an opposite movement of the sample carrier unit 22, this can now be separated again from the bracket 52, so that the pin 56 is removed from the bracket 52.

Figur 16 zeigt eine Draufsicht auf die bereits in Figur 10 dargestellte Aufnahmeeinheit 34, in die alle fünf Probenträgereinheiten 22 bereits eingesetzt worden sind. Die Aufnahmeeinheit 34 ist auf einem nicht dargestellten Motortisch angeordnet, der die gesamte Aufnahmeeinheit 34 zusammen mit den sich darin befindenden Probenträgereinheiten 22 in X-Richtung und in Y-Richtung bewegen kann. Die möglichen Bewegungen sind dabei mit den eingezeichneten Pfeilen dargestellt. Zunächst befindet sich das nicht dargestellte Objektiv über dem Startpunkt 66. Das Experiment beginnt mit der Untersuchung der in der Figur links unten angeordneten Proben 10.1 und 10.2. Der eingezeichnete Doppelpfeil symbolisiert dabei die Bewegung in X-Richtung, mit der zunächst die Probe 10.1 nah genug an den linken Spiegel der zuvor beschriebenen Spiegelkappe gebracht wird, urn die Untersuchung durchzuführen. Danach wird durch eine weitere Bewegung des Motortischs in X-Richtung die Probe 10.2 dem rechten Spiegel der Spiegelkappe angenähert. Entlang der Pfeile werden so nacheinander alle Probenträgereinheiten 22 abgefahren. Nachdem alle Probenträgereinheiten 22 untersucht wurden, kehrt der Motortisch entlang der letzten drei Pfeile zum Startpunkt 66 zurück.FIG. 16 shows a plan view of the receiving unit 34 already shown in FIG. 10, in which all five sample carrier units 22 have already been inserted. The receiving unit 34 is arranged on a motor table, not shown, which can move the entire receiving unit 34 together with the therein sample support units 22 in the X direction and in the Y direction. The possible movements are shown with the arrows. First, the lens, not shown, is located above the starting point 66. The experiment begins with the examination of the samples 10.1 and 10.2 arranged in the figure at the bottom left. The double arrow symbolizes the movement in the X direction, with which the sample 10.1 is first brought close enough to the left mirror of the previously described mirror cap to carry out the examination. Thereafter, the sample 10.2 is approximated to the right mirror of the mirror cap by a further movement of the motor table in the X direction. All the sample carrier units 22 are thus moved along the arrows in succession. After all sample carrier units 22 have been examined, the motor table returns to the starting point 66 along the last three arrows.

Claims

A method of sequentially examining a plurality of samples (10) by means of a light-plane microscope, comprising the steps of a. Preparing at least one sample carrier unit (22) with one or more samples (10) to be examined, b. Inserting at least one sample carrier unit (22) into a receiving unit (34), c. Inserting the recording unit (34) in a measuring volume of a light plane microscope, d. Examining at least a first sample (10) arranged on a sample carrier unit (22) by means of light-plane microscopy, e. Moving the receiving unit (34) by means of a motor table along a longitudinal axis (L) of the at least one sample carrier unit (22), f. Examining at least a second sample (10) arranged on a sample carrier unit (22) by means of light-plane microscopy, g. Repeat steps e. and f., until all samples to be examined (10) are examined, and h. Removing the recording unit (34) from the measuring volume of the light level microscope.

2. The method according to claim 1, characterized by the Scripture i. Removing the at least one sample carrier unit (22) from the receiving unit (34).

3. The method according to claim 1 or 2, characterized in that according to the script h. the sample carrier unit (22) and / or the receiving unit (34) are cleaned.

4. The method according to any one of the preceding claims, characterized in that the receiving unit (34) is moved by means of a motor table to a plurality of samples (10) arranged on a plurality of in the receiving unit (34) arranged sample carrier units (22) are to investigate.

5. The method according to any one of the preceding claims, characterized in that the at least one sample (10) before or after the examination by means of Lichtblattebenenmikroskopie by means of another imaging method, in particular by means of confocal microscopy, is examined.

6. sample carrier unit (22) for a Lichtblattebenenmikroskop, with a longitudinal axis (L) and along the longitudinal axis (L) substantially uniform profile, wherein the profile a T-profile, an asymmetric T-profile, a substantially L-shaped profile or a triangular profile, and wherein at least one horizontally extending portion of the visible light sample carrier unit (22) is transparent.

7. sample carrier unit (22) according to claim 6, characterized by a fastening device (56) for fixing the sample carrier unit (22) on the bottom (36) of a receiving unit (34).

8. sample carrier unit (22) according to any one of claims 6 or 7, characterized in that an extension of the sample carrier unit (22) along its longitudinal axis (L) is at least five times the extent of the sample carrier unit (22) perpendicular to its longitudinal axis (L).

9. sample carrier unit (22) according to one of claims 6 to 8, characterized in that the fastening device has at least one pin (56).

10. receiving unit (34) for a sample carrier unit (22) for a Lichtblattebenenmikroskop with a visible light transparent bottom (36), wherein at the bottom (36) at least one fastening device (50, 52) for a sample carrier unit (22) is arranged.

11. receiving unit (34) according to claim 10, characterized in that the receiving unit (34) is designed such that it can be filled with a liquid medium.

12. receiving unit (34) according to claim 10 or 11, characterized in that the bottom (36) has a rectangular basic shape.

13. receiving unit (34) according to any one of claims 10 to 12, characterized in that the fastening device (50) has a depression or depression in the ground.

14. receiving unit (34) according to any one of claims 10 to 13, characterized in that the fastening device (52) allows a positive fastening of a sample carrier unit (22) on the receiving unit (34).

15. receiving unit (34) according to one of claims 10 to 14, characterized in that the at least one fastening device (52) on the bottom (36) of the receiving unit (34) is arranged and is open at least to one side.

16. receiving unit (34) according to any one of claims 10 to 15, characterized in that the fastening device (52) comprises a receptacle for a horizontally or vertically extending pin (56).

17. receiving unit (34) according to any one of claims 10 to 16, characterized by at least one substantially perpendicular to the bottom (36) extending side wall (40), which at least one guide device (64) for guiding a sample carrier unit (22) or for guiding a tool (58) for insertion of a sample carrier unit (22).