LT6625B - Bakterinis preparatas, skirtas naftos produktų oksidacijai, ir jo panaudojimas - Google Patents
Bakterinis preparatas, skirtas naftos produktų oksidacijai, ir jo panaudojimas Download PDFInfo
- Publication number
- LT6625B LT6625B LT2017079A LT2017079A LT6625B LT 6625 B LT6625 B LT 6625B LT 2017079 A LT2017079 A LT 2017079A LT 2017079 A LT2017079 A LT 2017079A LT 6625 B LT6625 B LT 6625B
- Authority
- LT
- Lithuania
- Prior art keywords
- soil
- bacterial preparation
- oil
- preparation according
- nitrogen
- Prior art date
Links
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 31
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 title claims description 24
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 title claims 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 40
- 239000002689 soil Substances 0.000 claims abstract description 37
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 22
- 241000588624 Acinetobacter calcoaceticus Species 0.000 claims abstract description 15
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 claims abstract description 5
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 claims abstract description 5
- 239000003344 environmental pollutant Substances 0.000 claims abstract description 5
- 231100000719 pollutant Toxicity 0.000 claims abstract description 5
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims description 22
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 claims description 7
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 claims description 7
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 claims description 5
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 claims description 5
- 108020004465 16S ribosomal RNA Proteins 0.000 claims description 4
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000003209 petroleum derivative Substances 0.000 claims description 4
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 claims description 4
- 239000011591 potassium Substances 0.000 claims description 4
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 238000005273 aeration Methods 0.000 claims description 2
- 239000011785 micronutrient Substances 0.000 claims description 2
- 235000013369 micronutrients Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 claims description 2
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 claims description 2
- 230000002262 irrigation Effects 0.000 claims 1
- 238000003973 irrigation Methods 0.000 claims 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 claims 1
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 abstract description 18
- 150000002430 hydrocarbons Chemical class 0.000 abstract description 18
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 abstract description 14
- 239000011707 mineral Substances 0.000 abstract description 14
- 239000000203 mixture Substances 0.000 abstract description 9
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 abstract description 8
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 abstract description 2
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 20
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 12
- 239000003337 fertilizer Substances 0.000 description 10
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 10
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 229910001868 water Inorganic materials 0.000 description 9
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 7
- 241000589291 Acinetobacter Species 0.000 description 6
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 6
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 6
- 238000006065 biodegradation reaction Methods 0.000 description 5
- 238000000034 method Methods 0.000 description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 5
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 4
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonia chloride Chemical compound [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000004215 Carbon black (E152) Substances 0.000 description 3
- 108010079246 OMPA outer membrane proteins Proteins 0.000 description 3
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 3
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 3
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 3
- SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L manganese(II) sulfate Chemical compound [Mn+2].[O-]S([O-])(=O)=O SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 235000013379 molasses Nutrition 0.000 description 3
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 3
- 241000894007 species Species 0.000 description 3
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 3
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 2
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000004945 aromatic hydrocarbons Chemical class 0.000 description 2
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 2
- PBAYDYUZOSNJGU-UHFFFAOYSA-N chelidonic acid Natural products OC(=O)C1=CC(=O)C=C(C(O)=O)O1 PBAYDYUZOSNJGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 2
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 2
- 238000009533 lab test Methods 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 description 2
- 235000011007 phosphoric acid Nutrition 0.000 description 2
- GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M potassium dihydrogen phosphate Chemical compound [K+].OP(O)([O-])=O GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 238000005507 spraying Methods 0.000 description 2
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 2
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 2
- 241000588625 Acinetobacter sp. Species 0.000 description 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 238000001712 DNA sequencing Methods 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 239000007836 KH2PO4 Substances 0.000 description 1
- 102000004882 Lipase Human genes 0.000 description 1
- 108090001060 Lipase Proteins 0.000 description 1
- 239000004367 Lipase Substances 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004316 Oxidoreductases Human genes 0.000 description 1
- 108090000854 Oxidoreductases Proteins 0.000 description 1
- 238000012408 PCR amplification Methods 0.000 description 1
- 102000001183 RAG-1 Human genes 0.000 description 1
- 108060006897 RAG1 Proteins 0.000 description 1
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000019270 ammonium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 150000001491 aromatic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000000721 bacterilogical effect Effects 0.000 description 1
- 238000010170 biological method Methods 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- 238000004939 coking Methods 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 239000010779 crude oil Substances 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 1
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000003795 desorption Methods 0.000 description 1
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000396 dipotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019797 dipotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- BAUYGSIQEAFULO-UHFFFAOYSA-L iron(2+) sulfate (anhydrous) Chemical compound [Fe+2].[O-]S([O-])(=O)=O BAUYGSIQEAFULO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000359 iron(II) sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 238000010169 landfilling Methods 0.000 description 1
- 235000019421 lipase Nutrition 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 239000011702 manganese sulphate Substances 0.000 description 1
- 235000007079 manganese sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000357 manganese(II) sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 150000002823 nitrates Chemical class 0.000 description 1
- 239000006916 nutrient agar Substances 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 150000002894 organic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000020477 pH reduction Effects 0.000 description 1
- 238000011197 physicochemical method Methods 0.000 description 1
- 229920000728 polyester Polymers 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 239000012286 potassium permanganate Substances 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 235000020071 rectified spirit Nutrition 0.000 description 1
- 238000005067 remediation Methods 0.000 description 1
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000010187 selection method Methods 0.000 description 1
- 239000010802 sludge Substances 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 description 1
- 239000008399 tap water Substances 0.000 description 1
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 description 1
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 239000006150 trypticase soy agar Substances 0.000 description 1
- 235000013522 vodka Nutrition 0.000 description 1
- 238000009736 wetting Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B09—DISPOSAL OF SOLID WASTE; RECLAMATION OF CONTAMINATED SOIL
- B09C—RECLAMATION OF CONTAMINATED SOIL
- B09C1/00—Reclamation of contaminated soil
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B09—DISPOSAL OF SOLID WASTE; RECLAMATION OF CONTAMINATED SOIL
- B09C—RECLAMATION OF CONTAMINATED SOIL
- B09C1/00—Reclamation of contaminated soil
- B09C1/10—Reclamation of contaminated soil microbiologically, biologically or by using enzymes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B09—DISPOSAL OF SOLID WASTE; RECLAMATION OF CONTAMINATED SOIL
- B09C—RECLAMATION OF CONTAMINATED SOIL
- B09C2101/00—In situ
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Soil Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Environmental & Geological Engineering (AREA)
- Virology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Processing Of Solid Wastes (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Šis išradimas susijęs su biologiniu angliavandenilių skaidymu dirvožemyje. Šiuo tikslu naudojamas biopreparatas, kurio sudėtyje yra nepatogeninė bakterija Acinetobacter calcoaceticus BT8, gebanti skaidyti angliavandenilius bei, papildomai, fiksuoti ore esantį azotą ir panaudoti jį kaip mineralinę medžiagą. Biopreparato kiekis ir mineralinė sudėtis yra parenkami atsižvelgiant į valomame grunte esančių naftos teršalų koncentraciją.
Description
Išradimo sritis
Šis išradimas yra susijęs su naftą skaidančio mikroorganizmo kompozicija ir jos panaudojimu naftos, ir jos darinių utilizavimui iš užteršto grunto.
Technikos lygis
Nafta yra sudėtingas angliavandenilių ir kitų organinių junginių mišinys. Jame yra šimtai ar tūkstančiai alifatinių, šakotų ir aromatinių angliavandenilių (Wang et ai. 1998), kurių dauguma yra toksiški gyviems organizmams.
Užteršto dirvožemio valymui dažniausiai naudojami fiziko-cheminiai ir biologiniai būdai. Fiziko-cheminiai apdorojimo būdai yra deginimas, terminė desorbcija, koksavimas, tirpiklių ekstrahavimas, talpinimas į sąvartynus irt.t. Tačiau šie būdai arba paverčia gruntą nebenaudotinu (deginimas), arba nepašalina esminės problemos (sąvartynai). Be to, Europoje, įstatymai reikalauja, kad būtų mažinamas visų sąvartynų skaičius ir kuo daugiau atliekų būtų perdirbama.
Dar 1946 m. Claude E. ZoBelI atrado, kad daugelis mikroorganizmų gali naudoti angliavandenilius kaip vienintelį anglies ir energijos šaltinį. Jis taip pat nustatė, kad angliavandenilių panaudojimas labai priklausė nuo naftos mišinių sudedamųjų dalių cheminio pobūdžio ir aplinkos veiksnių (Jain et ai. 2011). Mikroorganizmų panaudojimas angliavandeniliais užterštos teritorijos atkūrimui (remediacijai) yra vykdomas panaudojant naftą oksiduojančius mikroorganizmus, ypač dirvožemyje esančias vietines bakterijas ir grybus. Šie mikroorganizmai gali skaidyti daugybę naftos atliekose esančių sudedamųjų dalių (Eriksson, Dalhammar, ir Borg-Karlson 1999; Barathi ir Vasudevan 2001; Mishra et ai. 2001). Nors grybai taipogi pasižymi naftą oksiduojančiomis savybėmis, tačiau jų augimas yra sąlyginai lėtas, todėl jie sunkiai pritaikomi lauko sąlygomis ir esant dideliam užterštumui (Mohsenzadeh, Chehregani Rad, ir Akbari 2012). Siekiant paspartinti biologinį skaidymą naftos produktais užterštas gruntas apdorojamas dirbtinai užaugintais naftą oksiduojančiais mikroorganizmais, kurie naftos angliavandenilius naudoja kaip maisto šaltinį ir skaido juos iki nekenksmingų medžiagų: CO2 ir H2O.
Acinetobacter rūšys yra plačiai paplitę ir gali būti išgaunamos iš vandens, dirvožemio, gyvų organizmų ir net iš žmogaus odos. Tai nejudrios, neigiamos oksidazės, griežtai aerobinės, gram neigiamos kokobacilos. Jos gali naudoti įvairius anglies šaltinius augimui ir gali būti auginamos palyginti paprastose terpėse, įskaitant maistinį agarą arba triptikazės sojų agarą (Abdelhaleem 2003). Acinetobacter genties bakterijos dėl savo įvairovės gamina daugybę medžiagų naudojamų biotechnologijose. Kai kurios Acinetobacter rūšys gamina didelius kiekius polisacharidų, poliesterių ir lipazių. Tačiau industriniu požiūriu svarbiausi yra emulsikliai, tokie kaip, pvz., emulsinas (Gutnick et ai. 1980), OmpA (VValzer, Rosenberg, ir Ron 2006) ar alasanas (Toren et ai. 2002). Emulsikliai ypač naudingi angliavandenilių skaidyme, nes padeda emulguoti naftą ir jos darinius, taip paspartindami degradavimo procesus. Jau prieš porą dešimtmečių buvo pastebėta, kad kai kurios Acinetobacter rūšys geba skaidyti naftą ir jos darinius, tačiau geri rezultatai buvo pasiekiami tik laboratorinėmis sąlygomis, dėl naftos inhibicinių savybių bei aeracijos trūkumo dirvoje bei skystoje terpėje (Hanson et ai. 1997). Visų mikroorganizmų augimui ir dauginimuisi yra būtinos ne tik maisto medžiagos, bet ir mikroelementai, tokie kaip azotas, kalis, fosforas, siera, magnis, kalcis ir tt. Kai kurie iš jų - gyvybiškai svarbūs, nes yra DNR sudėtyje (azotas, fosforas), amino rūgščių sudėtyje (azotas, siera) ir ląstelių sienelėse (fosforas, kalcis).
Tačiau mikroelementai taip pat gali įtakoti įvairių naftos komponentų bioremediaciją. Aromatinių angliavandenilių biologinis skaidymas yra ypač jautrus pH pokyčiams. Foght ir kt. 1999 m. ištyrė azoto šaltinio vaidmenį naftos komponentų biologiniam skaidymui esant šaltoms jūrinėms sąlygoms (10 °C). Nitratai neturėjo įtakos pH, tačiau amonio pokyčiai lėmė rūgštėjimą, dėl kurio susilpnėjo aromatinių junginių skaidymas (Margesin irSchinner2001). Tokie rezultatai rodo, kad labai svarbu tinkamai adaptuoti sąlygas, kuriose mikroorganizmai skaido teršalus ir nuolat stebėti tų sąlygų pokyčius. Dėl nepastovių oro sąlygų ir nevykdant stebėjimų, daugelis bakterinių preparatų neveikia taip kaip yra tikimąsi atlikus tik laboratorinius eksperimentus. Taigi daug su naftos biologiniu skaidymu susijusių išradimų yra nepritaikomi praktiškai arba veikia tik uždaromis ir kontroliuojamomis sąlygomis ir negali būti pritaikyti dideliems užteršto grunto plotams.
Išradimo esmė
Bakterinio preparato skaidančio naftos teršalus, apimančio Acinetobacter calcoaceticus BT 8 mikroorganizmus, panaudojimo technologija yra pagrįsta bakterijų, atrinktų iš dirvožemio, kultivavimu ir jų panaudojimu naftos degradacijai. Šis išradimas paspartina dirvožemio valymo procesą ir yra pranašesnis už kitus pramoniniu būdu gaminamus preparatus kadangi panaudojamas mikroorganizmo gebėjimas fiksuoti ore esantį azotą, taip sumažinant pridėtinių trąšų poreikį.
Detalus išradimo aprašymas
Šiame išradime aprašomas naujas bakterinis preparatas gebantis efektyviai, saugiai ir pigiai oksiduoti naftos teršalus dirvožemyje ir paversti juos nekenksmingomis cheminėmis medžiagomis. Sukurtas bakterinis preparatas pasižymi mažesniu mineralinio azoto poreikiu, nes jame naudojama bakterija A. calcoaceticus BT 8 geba fiksuoti ore esantį dujinį azotą ir versti jį mineraline medžiaga reikalinga įvairių gyvybinių funkcijų palaikymui.
Viename išradimo įgyvendinimo pavyzdyje naudojamas bakterinis preparatas susidedantis iš atrinktų A. calcoaceticus BT 8 bakterijų ir mineralinių trąšų, kurios neapima azoto. Šis preparatas buvo išbandytas laboratorinėmis sąlygomis, kur naftos teršalų koncentracija buvo 181 g/kg.
Dar viename išradimo įgyvendinimo pavyzdyje naudojamas bakterinis preparatas susidedantis iš atrinktų A. calcoaceticus BT 8 bakterijų ir mineralinių trąšų apimančių azotą. Preparatas buvo išbandytas laboratorinėmis sąlygomis, kur naftos teršalų koncentracija buvo 181 g/kg.
Dar viename išradimo įgyvendinimo pavyzdyje bakterinis preparatas yra naudojamas specializuotu būdu, po auginimo užsaldant bakterinį preparatą ir jį atšildant tik prieš purškimą ant nafta užterštos dirvos, kai preparato bei mineralinių trąšų kiekiai yra parenkami pagal dirvos užterštumo laipsnį bei numatomas papildomo purškimo grafikas.
Brėžinių paveikslų aprašymas pav. Parodytas naftos angliavandenilių kiekis po mėnesį trukusio laboratorinio eksperimento, kai pradinis teršalų kiekis buvo 181 g/kg. Palyginamas biopreparato poveikis su mineralinio azoto šaltiniu ir be jo.
pav. Parodytas naftos angliavandenilių skaidymas lauko sąlygomis, kai pradinė naftos koncentracija -189 g/kg. Eksperimento trukmė - 8 sav.
Priemonės ir metodai
Prietaisai: techninės svarstyklės KERN PCB 2500, analitinės svarstyklės KERN ABJ 220, laminarinė oro srauto spinta „Thermo Scientific“, termostatuojama purtyklė „Thermo Scientific“ MaxQ 4450, termostatuojamas mikroorganizmų inkubatorius „Thermo Scientific“ Heratherm IGS60, fermentatorius EDF-5.4_1 „Biotehniskais centrs“, autoklavas AL02-10 „Advantage-Lab“, spektrofotometras GENESYS 10S UV-Vis „Thermo Scientific“.
Reagentai:
Lentelė. Bakterinio preparato gamyboje naudojami reagentai.
| Eil. nr | Regentas | CAS numeris | Formulė | Gamintojas |
| 1. | Mitybinė terpė | CM001B | - | Oxoid |
| 2. | Bakteriologinis agaras | LP011B | - | Oxoid |
| 3. | Dyzelinas | - | - | Statoil |
| 4. | Rektifikuotas spiritas | - | - | Vilniaus Degtinė |
| 5. | Di-amonio hidrofosfatas | 7783-28-0 | (NH4)2HPO4 | Fisher Scientific |
| 6. | Amonio chloridas | 12125-02-9 | nh4ci | Acros Organics |
| 7. | Kalio dihidrofosfatas | 7778-77-0 | KH2PO4 | Fisher Scientific |
| 8. | Di-kaliohidrofosfatas | 7758-11-04 | K2HPO4 | Fisher Scientific |
| 9. | Mangano sulfatas | 7785-87-7 | MnSO4 | Roth |
| 10. | Moro druska | 7783-85-9 | FeSO4 •(NH4)SO4 | Fisher Scientific |
| 11. | Kalcio chloridas | 10043-52-4 | CaCI2 | Fisher Scientific |
| 12. | Gliukozė | 492-62-6 | - | Acros Organics |
| 13. | Natrio chloridas | 7647-13-5 | NaCI | Fisher Scientific |
| 14. | Dejonizuotas vanduo | III vandens kokybės lygis | - | - |
| 15. | Vandentiekio vanduo | - | - | - |
| 16. | Natrio šarmas | 1310-73-2 | NaOH | Sigma-aldrich |
| 17. | Fosforo rūgštis | 13598-36-2 | H3PO4 | Sigma-aldrich |
| 18. | Kalio permanganatas | 7722-64-7 | KMnO4 | Fisher Scientific |
| 19. | Techninis aliejus | - | - | Sanitex |
| 20. | Maistinis cukrus | - | - | Sanitex |
| 21. | Melasa | - | - | Sanitex |
Metodai:
Mikroorganizmų atranka
Siekiant sukurti bakterinį preparatą naftos teršalų valymui dirvožemyje buvo naudojamas selektyvios atrankos metodas išgaunant mikroorganizmus iš angliavandeniliais užteršto dirvožemio mėginių. Mėginiai buvo imti iš seno garažo automobilių remonto dirbtuvių, paėmus naftos produktais užteršto šlamo pavyzdžių. Norimų izoliatų išskyrimas buvo atliekamas ant agarizuotos terpės auginant iš mėginių išskirtus mikroorganizmus, kai vienintelis anglies šaltinis terpėje buvo angliavandeniliai. Sėkmingiausiai augę mikroorganizmai buvo naudojami kituose eksperimentuose.
Azotą fiksuojančių mikroorganizmų atranka
Išskirti naftą oksiduojantys izoliatai buvo auginami ant agarizuotos terpės, be azoto šaltinių. Eksperimento metu išaugo tik tie naftą oksiduojantys izoliatai, kurie gebėjo fiksuoti ore esantį dujinį azotą ir versti jį mineraline medžiaga reikalinga įvairių gyvybinių funkcijų palaikymui.
Mikroorganizmų rūšies nustatymas
Siekiant patvirtinti išskirto mikroorganizmo rūšį jis buvo identifikuojamas BASECLEAR laboratorijoje Olandijoje. Mikroorganizmas buvo identifikuotas panaudojant validuotą MicroSeų sistemą iš „Applied Biosystems“. Ši automatinė sistema yra paremta bakterinio 16S rRNR geno PGR amplifikacija ir DNR sekoskaita. Buvo nustatyta A. calcoaceticus BT8 16S rRNR geno seka - SEQ ID Nr. 1:
GATTGAACGCTGGCGGCAGGCTTAACACATGCAAGTCGAGCGGAGTGA TGGTGyTTGCACTATCACTTAGCGGCGGACGGGTGAGTAATGCTTAGGAATCTG CCTATTAGTGGGGGACAACATTTCGAAAGGAATGCTAATACCGCATACGTCCTA CGGGAGAAAGCAGGGGATCTTCGGACCTTGCGCTAATAGATGAGCCTAAGTCG GATTAGCTAGTTGGTGGGGTAAAGGCCTACCAAGGCGACGATCTGTAGCGGGT CTGAGAGGATGATCCGCCACACTGGGACTGAGACACGGCCCAGACTCCTACGG GAGGCAGCAGTGGGGAATATTGGACAATGGGCGCAAGCCTGATCCAGCCATGC CGCGTGTGTGAAGAAGGCCTTATGGTTGTAAAGCACTTTAAGCGAGGAGGAGG CTACTGAAGTTAATACCTTCAGATAGTGGACGTTACTCGCAGAATAAGCACCGG
CTAACTCTGT.
Nustatyta, jog geno seka 99,94 % sutampa su laboratorijoje naudojamoje duomenų bazėje esančia A. calcoaceticus 16S rRNR geno seka. Rūšies nustatymas patvirtino, jog mūsų išskirta bakterija yra nepatogeninė ir tinkama naudojimui dirvožemio bioremediacijoje.
A. calcoaceticus BT 8 biopreparato paruošimas
Norint užtikrinti, kad A. calcoaceticus BT8 bus veiksmingas lauko sąlygomis, mikroorganizmas kultivuojamas paprastoje mitybinėje terpėje su sumažintu mineralinio azoto kiekiu, aerobinėmis sąlygomis. Auginimo pabaigoje biopreparatas yra paruošiamas užšaldymui -18 °C temperatūroje, pridedant 10 % (pagal tūrį) melasos. Kultūrinis skystis su melasa gerai išmaišomas, išpilstomas ir užšaldomas.
Biopreparato panaudojimo pavyzdžiai
Čia nurodomi bakterinio preparato panaudojimo pavyzdžiai. Išradimas nėra ribojamas šiais pavyzdžiais.
pavyzdys
Išaugintas ir užšaldytas A. calcoaceticus BT8 preparatas laboratorinėmis sąlygomis buvo atšildytas, atskiestas su vandeniu papildytu mineralinėmis trąšomis (P, K) ir po 50 ml išpilstytas į 1 L tūrio indus su nafta užterštu gruntu. Indai buvo laikomi kambario temperatūroje (~22 °C) mėnesį laiko. Kiekvieną savaitę gruntas buvo permaišomas ir papildomai užpilami skirtingi kiekiai biopreparato bei vandens. Kas savaitę buvo matuojamas angliavandenilių kiekis grunte. Eksperimento sąlygos pateikiamos 2 lentelėje.
lentelė
| Indo numeris | 1 | 2 | 3 | 4 |
| Pradinis naftos kiekis g/kg | 181 | 181 | 181 | 181 |
| Biopreparato kiekis ml | 0,5 | 1 | 2 | 5 |
| Vandens kiekis ml | 49,5 | 49 | 48 | 45 |
| Galutinis naftos kiekis g/kg | 101 | 91 | 84 | 93 |
pavyzdys
Išaugintas ir užšaldytas A. calcoaceticus BT8 preparatas laboratorinėmis sąlygomis buvo atšildytas, atskiestas su vandeniu papildytu mineralinėmis trąšomis (N, P, K) ir po 50 ml buvo išpilstytas į 1 L tūrio indus su nafta užterštu gruntu. Indai buvo laikomi kambario temperatūroje (~22 °C) mėnesį laiko. Kiekvieną savaitę gruntas buvo permaišomas ir papildomai užpilami skirtingi kiekiai biopreparato bei vandens. Kas savaitę buvo matuojamas angliavandenilių kiekis grunte. Eksperimento sąlygos pateikiamos 3 lentelėje.
Šio eksperimento metu nustatyta, kad į terpę pridėjus papildomą azoto šaltinį angliavandenilių skaidymas pasikeitė nežymiai. Pirmo ir antro pavyzdžių rezultatų palyginimas pateikiamas 1 pav.
lentelė
| Indo numeris | 1 | 2 | 3 | 4 |
| Pradinis naftos kiekis g/kg | 181 | 181 | 181 | 181 |
| Biopreparato kiekis ml | 0,5 | 1 | 2 | 5 |
| Vandens kiekis ml | 49,5 | 49 | 48 | 45 |
| Galutinis naftos kiekis g/kg | 99 | 88 | 80 | 94 |
pavyzdys
Išaugintas ir užšaldytas A. calcoaceticus BT8 preparatas prieš naudojimą buvo atšildytas ir po 1 L buvo išpilstytas ant 4 m2 ploto dirvos, kuri buvo užteršta naftos produktais (189 g/kg). Preparatas buvo skiedžiamas su mineralinėmis trąšomis (P, K, N) papildytu vandeniu santykiu 1:20. Azoto kiekis mineralinių trąšų mišinyje buvo sumažintas iki 50 mg/kg užteršto grunto. Pusė praskiesto biopreparato buvo išpurškiama ant ~30 cm sluoksnio storio sukasto grunto, po išpurškimo gruntas vėl sukasamas ir išpurškiama antra biopreparato dalis. Kiekvieną savaitę gruntas buvo permaišomas ir papildomai užpilama biopreparato bei vandens. Kas savaitę buvo matuojamas angliavandenilių kiekis grunte. Lauko eksperimentas truko 2 mėn. Eksperimento sąlygos pateikiamos 4 lentelėje.
lentelė
| Savaitė | 0 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 |
| Naftos angliavandenilių kone, g/kg | 189 | 165 | 143 | 119 | 90,6 | 79,7 | 69,6 | 53,2 | 41,3 |
Šis eksperimentas parodė jog, naudojant mūsų išradimą, efektyviam angliavandenilių skaidymui lauko sąlygomis reikalingi mažesni azoto trąšų kiekiai.
Optimalios mūsų sukurto bakterinio preparato veikimo sąlygos bei paaiškinimai pateikti 5 lentelėje.
Lentelė. Optimalūs bakterinio preparato parametrai.
| Parametras | Ribos | Paaiškinimai |
| Naftos produktų koncentracija, g/kg | 1-300 | Naftos produktų koncentracija neturi didelės įtakos naftos angliavandenilių skaidymo efektyvumui |
| Naftą oksiduojantys mikroorganizmai, KSV/g | >106 | Esant mažesniam titrui gruntas papildomai apdorojamas biologiniu preparatu |
| Drėgmė, % | 35-60 | <35 - reikalingas papildomas laistymas vandeniu |
| >60 - reikalingas dažnesnis grunto vartymas | ||
| Ortofosfatai, mg/kg | 1000-3000 | Esant ortofosfatų trūkumui papildomai įdedamas apskaičiuotas trąšų kiekis |
| pH | 5,7-8,2 | pH koreguojamas 0,1 % NaOH/HsPCU vandeniniu tirpalu |
Literatūra
1. Abdelhaleem, Desouky. 2003. Acinetobacter: Environmental and Biotechnological Applications. T. 2.
2. Barathi, S., ir N. Vasudevan. 2001. „Utilization of Petroleum Hydrocarbons by Pseudomonas Fluorescens Isolated from a Petroleum-Contaminated Soil.“ Environment International 26 (5-6): 413-16.
3. Eriksson, M., G. Dalhammar, ir A. K. Borg-Karlson. 1999. „Aerobic Degradation of a Hydrocarbon Mixture in Natūrai Uncontaminated Potting Soil by Indigenous Microorganisms at 20 Degrees C and 6 Degrees C.“ Applied Microbiology and Biotechnology 51 (4): 532-35.
4. Gutnick, DL, EA Bayer, C Rubinovitz, O Pines, Y Shabtai, ir E Rosenberg. 1980. „Emulsan production in Acinetobacter RAG-1“. Adv. Biotechnol 11: 455-59.
5. Hanson, K. G., A. Nigam, M. Kapadia, ir A. J. Desai. 1997. „Bioremediation of Crude Oil Contamination with Acinetobacter Sp. A3.“ Current Microbiology 35 (3): 191-93.
6. Jain, PK, VK Gupta, RK Gaur, M Lowry, DP Jaroli, ir UK Chauhan. 2011. „Bioremediation of petroleum oil contaminated soil and water“. Research journal of environmental toxicology 5(1): 1.
7. Margesin, R., ir F. Schinner. 2001. „Biodegradation and Bioremediation of Hydrocarbons in Extreme Environments.“ Applied Microbiology and Biotechnology 56 (5-6): 650-63.
8. Mishra, S., J. Jyot, R. C. Kuhad, ir B. Lai. 2001. „Evaluation of Inoculum
Addition to Stimulate in Sitų Bioremediation of Oily-Sludge-Contaminated Soil.“ Applied and Environmental Microbiology 67 (4): 1675-81.
doi:10.1128/AEM.67.4.1675-1681.2001.
9. Mohsenzadeh, Fariba, Abdolkarim Chehregani Rad, ir Mehrangiz Akbari. 2012. „Evaluation of oil removal efficiency and enzymatic activity in some fungal strains for bioremediation of petroleum-polluted soils“. Iranian Journal of Environmental Health Science & Engineering 9 (1): 26. doi: 10.1186/1735-2746-9-26.
10. Toren, Amir, Elisha Orr, Yossi Paitan, Eliora Z. Ron, ir Eugene Rosenberg. 2002. „The Active Component of the Bioemulsifier Alasan from Acinetobacter Radioresistens KA53 Is an OmpA-like Protein.“ Journal of Bacteriology 184 (1): 165— 70.
11. VValzer, Gil, Eugene Rosenberg, ir Eliora Z. Ron. 2006. „The Acinetobacter Outer Membrane Protein A (OmpA) Is a Secreted Emulsifier.“ Environmental Microbiology 8 (6): 1026-32. doi:10.1111/j.1462-2920.2006.00994.x.
12. Wang, Z., M. Fingas, S. Blenkinsopp, G. Sergy, M. Landriault, L. Sigouin, J. Foght, K. Semple, ir D. W. VVestlake. 1998. „Comparison of Oil Composition Changes due to Biodegradation and Physical VVeathering in Different Oils.“ Journal of Chromatography. A 809 (1-2): 89-107.
Claims (8)
- Išradimo apibrėžtis1. Bakterinis preparatas, skirtas naftos produktų oksidacijai, charakterizu o j a m a s tuo, kad naudojami Acinetobacter calcoaceticus BT 8 mikroorganizmai ir papildomi mikroelementai, reikalingi mikroorganizmų augimui ir vystymuisi, kur A. calcoaceticus BT 8 mikroorganizmai vykdo ore esančio azoto fiksaciją.
- 2. Bakterinis preparatas pagal 1 punktą, charakterizuojamas tuo, kad mikroelementai yra parinkti iš grupės susidedančios iš fosforo, kalio ir azoto.
- 3. Bakterinis preparatas pagal 1-2 punktus, charakterizuojamas tuo, kad azoto kiekis biopreparate yra iki 50 mg/kg užteršto grunto.
- 4. Bakterinis preparatas pagal 1-3 punktus, charakterizuojamas tuo, kad A. calcoaceticus 16S rRNR seka yra bent 99 % identiška SEQ ID Nr. 1.
- 5. Bakterinis preparatas pagal 1-4 punktus, charakterizuojamas tuo, kad pagamintas preparatas iki naudojimo yra užšaldomas.
- 6. Bakterinio preparato pagal 1-5 punktus panaudojimas naftos teršalų skaidymui dirvožemyje.
- 7. Bakterinio preparato panaudojimas pagal 6 punktą, charakterizuoja m a s tuo, kad teršalų skaidymo paspartinimui naudojama dirvožemio aeracija ir drėkinimas.
- 8. Bakterinio preparato panaudojimas pagal 6-7 punktus, charakterizuoj amas tuo, kad bakterinis preparatas yra purškiamas ant dirvožemio 2 kartus per savaitę.
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| LT2017079A LT6625B (lt) | 2017-10-13 | 2017-10-13 | Bakterinis preparatas, skirtas naftos produktų oksidacijai, ir jo panaudojimas |
| PCT/IB2018/050306 WO2019073308A1 (en) | 2017-10-13 | 2018-01-18 | PETROLEUM OXIDIZING MICROORGANISM AND PRODUCTS THEREOF AND USE TECHNOLOGY THEREOF |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| LT2017079A LT6625B (lt) | 2017-10-13 | 2017-10-13 | Bakterinis preparatas, skirtas naftos produktų oksidacijai, ir jo panaudojimas |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| LT2017079A LT2017079A (lt) | 2019-04-25 |
| LT6625B true LT6625B (lt) | 2019-05-27 |
Family
ID=61283265
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| LT2017079A LT6625B (lt) | 2017-10-13 | 2017-10-13 | Bakterinis preparatas, skirtas naftos produktų oksidacijai, ir jo panaudojimas |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| LT (1) | LT6625B (lt) |
| WO (1) | WO2019073308A1 (lt) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| LT7087B (lt) | 2024-02-07 | 2024-09-10 | Gamtos Tyrimų Centras | Biopreparatas naftos produktais užterštam gruntui valyti ir valymo būdas |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN110713947A (zh) * | 2019-10-30 | 2020-01-21 | 中国石油集团川庆钻探工程有限公司长庆井下技术作业公司 | 一种石油污染修复复合微生物菌剂及其制备方法 |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP5715477B2 (ja) * | 2011-04-25 | 2015-05-07 | 石川県 | 燃料油分解能を有する新規微生物、環境浄化剤、及びそれを用いた環境浄化方法 |
| CN102899381A (zh) * | 2012-10-11 | 2013-01-30 | 天津大学 | 一种表面活性剂生产菌对石油降解协同作用的研究方法 |
-
2017
- 2017-10-13 LT LT2017079A patent/LT6625B/lt not_active IP Right Cessation
-
2018
- 2018-01-18 WO PCT/IB2018/050306 patent/WO2019073308A1/en not_active Ceased
Non-Patent Citations (12)
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| LT7087B (lt) | 2024-02-07 | 2024-09-10 | Gamtos Tyrimų Centras | Biopreparatas naftos produktais užterštam gruntui valyti ir valymo būdas |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| WO2019073308A1 (en) | 2019-04-18 |
| LT2017079A (lt) | 2019-04-25 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| DK3104988T3 (en) | BIOCATALYTIC COMPOSITION FOR SUBSTRATE CONVERSION | |
| Agamuthu et al. | Bioremediation of hydrocarbon contaminated soil using selected organic wastes | |
| US20150352610A1 (en) | Microbial compositions for hydrocarbon remediation and methods of use thereof | |
| CN113215033B (zh) | 一种磺胺类抗生素降解菌及其应用 | |
| Acuña et al. | Effect of nitrogen deficiency in the biodegradation of aliphatic and aromatic hydrocarbons in Patagonian contaminated soil | |
| LT6625B (lt) | Bakterinis preparatas, skirtas naftos produktų oksidacijai, ir jo panaudojimas | |
| Tejada et al. | Application of biostimulants in benzo (a) pyrene polluted soils: short-time effects on soil biochemical properties | |
| Li et al. | Identification of a novel hydrolase encoded by hy-1 from Bacillus amyloliquefaciens for bioremediation of carbendazim contaminated soil and food | |
| Sivasubramanian et al. | Evaluation of phenol degradation by effective microorganism (EM) technology with EM-1 | |
| EP1352694A2 (en) | Compositions for the bioremediation of soils contaminated with hydrocarbons and/or solvents and/or organic compounds | |
| RU2502569C1 (ru) | Способ очистки почвы от углеводородных загрязнений | |
| KR20100123997A (ko) | 토양내 난용성 인산염을 가용화하는 토양 미생물 및 이를 포함하는 토양처리제 조성물 | |
| WO2020022933A1 (ru) | Способ ремедиации загрязненных земель | |
| RU2529735C1 (ru) | Способ получения биопрепарата для очистки и восстановления плодородия почвогрунтов, загрязненных нефтепродуктами | |
| Bekeshev et al. | Isolation of kerosene-degrading bacteria from soil samples and determination of optimal growth conditions | |
| Bara et al. | Review on bioremediation of methyl parathion contaminated agricultural soil by microorganisms | |
| KR20220160964A (ko) | 신규한 노보스핑고비움 속 균주 및 이의 용도 | |
| Jabbar et al. | Bioremediation of soil contaminated with diesel using biopile system | |
| JP2002238551A (ja) | 揮発性芳香族炭化水素分解能を有する新規菌株及びその用途 | |
| Hegeman | The mineralization of organic materials under aerobic conditions | |
| Echeverria et al. | Composting wet olive husks with a starter based on oil-depleted husks enhances compost humification | |
| Gofar | Synergism of wild grass and hydrocarbonoclastic bacteria in petroleum biodegradation | |
| Pozo et al. | Linear alkylbenzene sulfonates (LAS) on soil microbial activity | |
| Hegeman | AEROBIC CONDITIONS | |
| Singh et al. | 14 Role of Microbes in |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| BB1A | Patent application published |
Effective date: 20190425 |
|
| FG9A | Patent granted |
Effective date: 20190527 |
|
| MM9A | Lapsed patents |
Effective date: 20191013 |