LT4794B - Štamas trichoderma harzianum vnb-16, skaidantis mazutą, jo gavimo būdas ir panaudojimas - Google Patents
Štamas trichoderma harzianum vnb-16, skaidantis mazutą, jo gavimo būdas ir panaudojimas Download PDFInfo
- Publication number
- LT4794B LT4794B LT2000060A LT2000060A LT4794B LT 4794 B LT4794 B LT 4794B LT 2000060 A LT2000060 A LT 2000060A LT 2000060 A LT2000060 A LT 2000060A LT 4794 B LT4794 B LT 4794B
- Authority
- LT
- Lithuania
- Prior art keywords
- strain
- soil
- vnb
- oil
- trichoderma harzianum
- Prior art date
Links
- 241000223260 Trichoderma harzianum Species 0.000 title claims abstract description 16
- 239000000295 fuel oil Substances 0.000 title claims description 23
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title abstract 2
- 239000002689 soil Substances 0.000 claims abstract description 38
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims abstract description 14
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 claims abstract description 5
- 230000003032 phytopathogenic effect Effects 0.000 claims abstract description 5
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 claims abstract description 4
- 238000011160 research Methods 0.000 claims abstract description 3
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 claims abstract description 3
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 claims abstract description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims description 14
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 10
- 239000003921 oil Substances 0.000 claims description 8
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 claims description 5
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims description 4
- 238000002955 isolation Methods 0.000 claims description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims 1
- 238000005507 spraying Methods 0.000 claims 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 2
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 abstract description 2
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 abstract description 2
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 abstract 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 abstract 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 abstract 1
- 230000003467 diminishing effect Effects 0.000 abstract 1
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 9
- 150000002430 hydrocarbons Chemical class 0.000 description 9
- 239000003209 petroleum derivative Substances 0.000 description 9
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 8
- UFWIBTONFRDIAS-UHFFFAOYSA-N Naphthalene Chemical compound C1=CC=CC2=CC=CC=C21 UFWIBTONFRDIAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000003337 fertilizer Substances 0.000 description 5
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 4
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 4
- 239000007003 mineral medium Substances 0.000 description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000223259 Trichoderma Species 0.000 description 3
- YYRMJZQKEFZXMX-UHFFFAOYSA-N calcium;phosphoric acid Chemical compound [Ca+2].OP(O)(O)=O.OP(O)(O)=O YYRMJZQKEFZXMX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 3
- 239000002426 superphosphate Substances 0.000 description 3
- 239000004215 Carbon black (E152) Substances 0.000 description 2
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N D-xylopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 description 2
- 241000219745 Lupinus Species 0.000 description 2
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 2
- 235000013405 beer Nutrition 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 239000002374 bone meal Substances 0.000 description 2
- 229940036811 bone meal Drugs 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 239000002283 diesel fuel Substances 0.000 description 2
- 239000000693 micelle Substances 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- UHPMCKVQTMMPCG-UHFFFAOYSA-N 5,8-dihydroxy-2-methoxy-6-methyl-7-(2-oxopropyl)naphthalene-1,4-dione Chemical compound CC1=C(CC(C)=O)C(O)=C2C(=O)C(OC)=CC(=O)C2=C1O UHPMCKVQTMMPCG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 240000005007 Actinomucor elegans Species 0.000 description 1
- 235000013650 Actinomucor elegans Nutrition 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000222120 Candida <Saccharomycetales> Species 0.000 description 1
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 102000005575 Cellulases Human genes 0.000 description 1
- 108010084185 Cellulases Proteins 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 241000223218 Fusarium Species 0.000 description 1
- 241000223221 Fusarium oxysporum Species 0.000 description 1
- 241000427940 Fusarium solani Species 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 241000580812 Hasegawazyma lactosa Species 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 108010029541 Laccase Proteins 0.000 description 1
- -1 Organic acid salts Chemical class 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 1
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 1
- 208000034809 Product contamination Diseases 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 241000187561 Rhodococcus erythropolis Species 0.000 description 1
- 241001030146 Rhodotorula sp. Species 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- 241001516650 Talaromyces verruculosus Species 0.000 description 1
- 102000003425 Tyrosinase Human genes 0.000 description 1
- 108060008724 Tyrosinase Proteins 0.000 description 1
- 241000235015 Yarrowia lipolytica Species 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000003042 antagnostic effect Effects 0.000 description 1
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 1
- 238000009264 composting Methods 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 239000013068 control sample Substances 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000446 fuel Substances 0.000 description 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 1
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 239000001056 green pigment Substances 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000012543 microbiological analysis Methods 0.000 description 1
- 239000002480 mineral oil Substances 0.000 description 1
- 235000010446 mineral oil Nutrition 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 239000006225 natural substrate Substances 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 1
- 230000000737 periodic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 239000010908 plant waste Substances 0.000 description 1
- 230000037452 priming Effects 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 238000005067 remediation Methods 0.000 description 1
- 239000004576 sand Substances 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 230000007226 seed germination Effects 0.000 description 1
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 1
Landscapes
- Processing Of Solid Wastes (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
Išradimas priklauso mikrobiologijos, biotechnologijos sritims, būtent, mikroorganizmų štamams, skaidantiems angliavandenilius, ir gali būti panaudotas užteršto naftos produktais dirvožemio (grunto) valymui.
Žinomas bakterijos Rhodococcus erythropolis štamas BKM Ac-1339D, aprašytas aut.
1. SU 1 805 097, C02F 3/34, išradimo aprašyme. Šis štamas naudojamas vandens ir dirvos valymui nuo naftos ir naftos produktų.
Štamo trūkumas - bakterijos geba degraduoti tirpius angliavandenilius. Nepasižymi gebėjimu skaldyti mazutą. Be to, bakterijos, įterptos į dirvožemio mikroorganizmų bendriją, sunkiau išsilaiko kitų mikroorganizmų aplinkoje.
Žinomas mikromicetas Candida guillermondii BKM Y-241, aprašytas patento RU 2 007 372, C02F 3/34. E02B 15/04. aprašyme. Šis štamas naudojamas vandens ir dirvos apvalymui m o užteršimo nafta ir naftos produktais.
Šio štamo trūkumas - nesugeba skaldyti mazutą. Mikromicetas negerina dirvožemio struktūros, sunkiau dauginasi patekęs į natūralias dirvožemio mikroorganizmų bendrijas.
Artimiausias savo veikimu siūlomam štamui yra štamas Actinomucor elegans TC405, aprašytas patento US 4 415 662 aprašyme. Šis štamas yra naftos ir naftos produktų biodestruktorius.
Šio Štamo esmini5 trūkumas - naudojamas naftos produktams skaldyti vandenyje, negerina dirvožemio struktūros ir nepasižymi antagonistinėmis savybėmis fitopatogeniniams mikroorganizmams.
Išradimo tikslas - išskirti štamą, kuriam būdingas gebėjimas skaldyti naftos angliavandenilius, tarne tarpe mazutą. įgalinantis pagreitinti naftos produktų utilizaciją dirvožemyje, atstatyti jo struktūrą ir biologinį aktyvumą.
Siūlomas mikroorganizmo štamas buvo išskirtas iš Vilniaus naftos produktų bazės teritorijos užteršto smėlio, prisotinto industriniais tepalais. Išskyrimo būdas apima dirvožemio vandeninės suspensijos paruošimą; paruoštos suspensijos užsėjimą ant agarizuotų alaus misos ir modifikuotos Čapeko terpių, kai anglies šaltiniu naudojamas 1% mazuto. Tokia terpė naudojama naftą oksiduojančių mikromicetų štamų aptikimui, kultūros išgryninimui ir monosporinės kultūros išskyrimui. Mikromicetas auginamas termostate prie 26±2 °C temperatūros 7 paras, štamas identifikuotas pagal kultūrinius ir morfologinius požymius naudojant M. A. Rifai klasifikaciją.
Štamas deponuotas Botanikos instituto Biodestruktorių tyrimo laboratorijos mikroorganizmų kolekcijoje, kolekcinis numeris IBL: F-431.
Siūlomas štamas Trichoderma harzianum VNB-16, auginant jį ant skirtingų terpių, pasižymi tokiomis savybėmis:
Morfologinės savybės
Agarizuota alaus misos terpė. Kolonijos auga greitai. Po 3 parų kolonijos pasiekia 50 mm, o po 5 parų - 90 mm diametrą. Kolonijos paviršius tamsiai žalios spalvos, micelis tankus, gana aukštas, purus su daugeliu vatos pavidalo gniužulėlių. Apatinė kolonijos pusė bespalvė. Kultūros kvapas specifinis.
Agarizuota Čapeko mineralinė terpė. Kolonijos auga lėčiau - po 3 parų siekia 35, po 7
- 90 mm skersmenį. Kolonijos šviesiai žalsvos su baltais ir žalsvais puriais micelio gniužulėliais. Kolonijos apatinė pusė gelsva.
Saburo-dekstrozės agarizuota terpė. Kolonijos auga greitai, po 3 parų siekia 45, po 5 90 mm skersmenį. Micelis labai tankus, auga koncentriškais žiedais, kolonijos kraštas
- gelsvos, į centrą - žalsvos spalvos. Apatinė kolonijos pusė oranžinė.
Hifai septuoti, išsišakoję, lvgiasieniai, bespalviai, 1,5-10,0 μ skersmens. Šoninės šakelės dažniausia· išsidėsčiusios grupėmis po 2-3.
Fialidės trumpos, kėgliškos, 4,5-8,0 x 2,5-3,5 μ dydžio, dažniausiai išsidėsto grupėmis po 5, bet gali būti pavienės.
Konidijos smulkios, rutulio arba trumpo ovalo formos, lygiasienės, žalios spalvos, išsidesčiusios fialidžių viršūnėse, sudaro rutulio pavidalo netikras galvutes. Vidutiniškas konidijų dydis 2,8-3,2x-2,5-2,8 μ.
Fiziologinės savybės
Anglies šaltiniai: štamas gerai įsisavina gliukozę, sacharozę, galaktozę, ksilozę, karboksimetilceliuliozę. Silpniau įsisavina organinių rūgščių druskas, krakmolą, gliceriną.
Azoto šaltiniai: štamas gerai įsisavina amonio druskas, NaNO3, peptoną, asparaginą. Silpnai įsisavina kazeiną.
Štamas gerai auga ant gamtinių substratų, pavyzdžiui, augalų atliekų, grūdų. Aerobas. Augimo temperatūra 15-36’C, optimali - 26-30°C. Auga terpėje, kurios rūgštingumas -pH 4-7.
Štamas pasižymi fermentiniu aktyvumu: produkuoja proteazes, celiuliazes. »
Nebūdinga tirozinazės, lakazės sintezė.
Antagonistinės savybės
Štamas pasižymi dideliu antibiotiniu poveikiu į kai kuriuos fitopatogeninius grybus, pvz., Rhizocionia solani, Fusarium momliforme, F. oxysporum, F. solani, Aliernaria alternata. Tačiau jis nėra antagonistas naftos angliavandenilius skaldančioms bakterijoms ir mikromicetams-mielėms, o pastarųjų (Candida lipolytica, Rhodotorula lactosa, Rhodotorula sp. ir kt.) augimą netgi stimuliuoja.
Štamo gebėjimas oksiduoti naftos angliavandenilius buvo vertinamas pagal augimą ant agarizuotos Čapeko terpės su 1% dyzelinio kuro ir mazuto. Mikromiceto štamų kolonijų diametras (mm) po 7 parų auginimo ant Čapeko terpės ir Čapeko terpės su naftos produktais pateikiamas 1 lentelėje.
&
lentelė
| Mikromiceto rūšis | Štamo numeris | Čapeko terpė | Čapeko terpė su mazutu | Čapeko terpė su dyzeliniu kuru |
| Trichoderma harzicmum | VNB-16 | 90 | 90 | 90 |
| Penicillium verruculosum | MN-1 | 32 | 12 | 23 |
Ant mineralinės Čapeko terpės su 1% mazuto štamo Trichoderma harzianum kolonijos auga greitai - po 7 parų pasiekia 90 mm skersmenį. Kolonijos plonos, micelis žemas, silpniau gamina žalią pigmentą, kolonijos pilkos spalvos su baltais gniužulėliais.
Štamas, augdamas mineralinėje terpėje su mazutu naudoja įvairius fosforo šaltinius: kaulamilčius, superfosfatą, Kemira-Horti 2 trąšas (NPK 6:12:24). Siūlomo Trichoderma harzianum VNB-16 štamo augimo kolonijų diametras (mm) po 7 parų ant agarizuotų terpių su įvairiomis trąšomis bei mazutu pateiktas 2 lentelėje .
lentelė
| Kontrolė (KH2PO4) | Kaulamilčiai | Superfosfatas | Kemira-Horti 2 | |||||||
| Fosforo šaltinio koncentracija, g/l | 1 | 0,8 | 1.6 | 2,4 | 0.5 | l | 1,5 | 0,4 | 0.75 | 1,1 |
| Kolonijos skersmuo, mm | 43 | 90 | 90 | 90 | 52 | 48 | 45 | 45 | 50 | 42 |
Geriausiai orinio micelio formavimąsi, augant terpėje su mazutu veikia 0,4 ir 0,75 g/l Kemiros trąšų bei 1 g/l superfosfato priedas.
Skystoje terpėje su Kemiros trąšomis ir mazuto bei dyzelinio kuro mišiniu (santykis 1:1) siūlomas štamas auga gerai, mazutas per 7 paras suskyla į mažus dribsnius. Biomasės prieaugis pateikiamas 3 lentelėje.
lentelė
| Variantas | Biomasė g/50 ml |
| Kontrolė (KH2PO4- 1,0 g/I) | 0,040 |
| Kemira 0,40 g/1 | 0,027 |
| Kemira 0.75 g/1 | 0,056 |
Daržo dirvožemis (400 g) supilamas į vegetacinius indus, į juos įpilama 50 ml mikroorganizmų pagalba degraduoto mazuto. Užkrečiama siūlomo štamo suspensija 1 χ 106 - 1x107 pradų/g. Į dirvožemį pasodinami lubinai. Po 6 savaičių auginimo mikrobiologinė analizė parodė, kad mikromicetas išgyveno ir vystėsi mazuto atliekomis užterštame dirvožemyje. Angliavandenilių kiekis per šį laikotarpį tiriamame dirvožemyje sumažėjo nuo 2388 iki 370 mg/l, t.y. 6,5 karto.
Aukščiau pateiktų duomenų apibendrinimas rodo, kad siūlomas štamas Trichoderma harziamim VNB-16 pasižymi gebėjimu skaldyti mazutą ir gali būti naudojamas naftos produktų utilizacijai pagreitinti bei dirvožemio kokybei atstatyti.
pavyzdys
Siūlomo Trichoderma harziamim VNB-16 štamo auginimas skystoje mineralinėje terpėje pridedant kaip vienintelį anglies šaltinį naftos angliavandenilius.
Pagaminama skysta mitybinė mineralinė terpė tokios sudėties (g/1):
NH4NO3 1,5 kh2po4 1,0
KC1 0,5
MgSO4x7H2O 0,5
FeSO4x7H2O 0,001
Distiliuotas vanduo 1,000 ml
Pridedama mazuto arba naftalino 1% kaip vienintelio anglies šaltinio. Išpilstoma po 50 ml į 500 ml talpos kratyklines kolbas. Terpė sterilinama autoklavuojant 30 min.
ό prie 0,5 atm. Į ataušusią terpę užsėjama 2 ml 7 parų amžiaus štamo Trichoderma harzianum sporų suspensijos. Štamas inkubuojamas ant kratytuvų 7-20 parų prie 26+2° temperatūros. Po 7 auginimo parų mazutas suskyla į smulkius dribsnius, o po 20 parų lieka tik šviesiai rudas skystis.
Suskaldyto naftos produkto kiekis auginant štamą 7 ir 20 parų pateikiamas 4 lentelėje.
lentelė
| Naftos Produktas | Pradinis angliavandenilių kiekis mg/l00 ml | 7 paros | 20 parų | ||
| Likutis | Suskaldyta | Likutis | Suskaldyta | ||
| Naftalinas | 719 | 406,4 | 43,5% | 60,5 | 91,5% |
| Mazutas | 715 | 644,2 | 10,0% | - | - |
Iš pateiktų duomenų matyti, kad siūlomas štamas Trichoderma harzianum VNB-16 skaldo platų angliavandenilių spektrą: angliavandenilius, kurie sudaro sunkiąsias naftos frakcijas - naftaliną ir mazutą.
pavyzdys
Siūlomo štamo Trichoderma harzianum VNB-16 panaudojimas naftos produktų utilizacijai dirvožemyje kompostavimo būdu.
Substrato užkratui mikromiceto biomasę augina laboratorijoje steriliomis sąlygomis. Po 6-7 parų kultivavimo ant agarizuotos alaus misos terpės 26±2°C temperatūroje ruošia mikromiceto sporų suspensiją. Konidijos nuplaunamos steriliu fiziologiniu tirpalu ir gauta suspensija praskiedžiama, palaikant grybų pradų titrą 1 xlO6 - 1 χ 107/l ml. Paruoštą suspensiją naudoja užteršto grunto užkrėtimui.
Naftos produktais užterštas gruntas sukasamas į krūvas, sumaišomas su azotinėmis bei fosforo trąšomis, aplaistomas arba apipurškiamas mikromiceto sporų suspensija, gerai permaišomas. Užkrėstas mikromicetų substratas natūraliomis sąlygomis (esant 10 - 30° C temperatūrai, palaikant optimalią kompostuojamo grunto drėgmę) laikomas
- 3 mėnesius, periodiškai sekamas mikromiceto vystymasis ir naftos produkto kaita valomajame grunte.
Aukščiau aprašytu būdu valant gruntą, lyginant su kontroliniu pavyzdžiu, kuriame nebuvo inokuliuotas Trichoderma harzianum VNB-16 užkratas, po 30 d. mazuto sumažėjo 85% . Grunto konsistencija pasikeitė. Jis pasidarė puresnis, prarado naftos kvapą.
3. pavyzdys
Aukščiau aprašyto apvalyto nuo naftos produktų grunto panaudojimas augalų auginimui - galutinei dirvožemio remediacijai.
Apvalytas nuo naftos produktų gruntas nėra toksiškas aukštesniesiems augalams. Sėklų daigumas mazutu užterštame grunte be mikromiceto Trichoderma harzianum VNB-16 buvo 50%, su Trichoderma harzianum VNB-16 - 80 %. Lubinų žaliosios masės prieaugis per 2 savaites - atitinkamai 0,86 ir 1,46 g/egz.
Apvalytas gruntas gali būti panaudtas augalams auginti ir galutinai atstatyti dirvožemio struktūrą bei jo biologines savybes, kadangi introdukuotas mikromiceto Trichoderma harzianum VNB-16 štamas išlieka aktyvus dirvoje, antagonistiškai veikia fitopatogeninius mikroorganizmus ir sumažina naftos produktais užteršto dirvožemio toksiškumą augalams.
Claims (5)
- IŠRADIMO APIBRĖŽTIS1. Štamas Trichoderma harzianum VNB-16 (deponuotas Botanikos instituto Biodestruktorių tyrimo laboratorijoje (LT), kolekcijos Nr. IBL: F-431) - naftos produktus skaidantis štamas, antagonistiškai veikiantis fitopatogeninius mikroorganizmus ir sumažinantis naftos produktais užteršto dirvožemio toksiškumą augalams.
- 2. Štamas Trichoderma harzianum VNB-16 skirtas panaudoti naftos produktais užteršto dirvožemio valymui ir atstatymui.
- 3. Štamo Trichoderma harzianum VNB-16 pagal 1 punktą gavimo būdas, b e s i s k i r i a n t i s tuo, kad paruošia naftos produktais užteršto grunto vandeninę suspensiją paruoštą suspensiją užsėja ant agarizuotų alaus misos ir modifikuotos Čapeko terpės, kai anglies šaltiniu yra 1% mazuto, tokią terpę panaudoja naftą skaidančių mikromicetų štamų aptikimui, jų kultūros išgryninimui ir monosporinės kultūros išskyrimui, mikromicetą augina termostate prie 26 ± 2°C temperatūros 7 paras ir štamą identifikuoja pagal kultūrinius ir morfologinius požymius naudojant M. A. Rifai klasifikaciją.
- 4. Štamo Trichoderma harzianum VNB-16 pagal 1 ir 2 punktus, gauto pagal 3 punkto būdą panaudojimo mazutu užteršto grunto valymui būdas, besiskiriantis tuo, kad mikroorganizmo biomasę augina mitybinėse terpėse laboratorinėmis sąlygomis, po to ruošia mikromiceto biomasės vandeninę suspensiją, kurioje mikromiceto pradų titras yra apie 10?-107/l ml, iš anksto paruoštą substratą užkrečia mikromiceto suspensija jį laistant arba apipurškiant minėta suspensija, po to substratą permaišo ir palaiko drėgmę, tinkamą štamui daugintis ir išlikti aktyviam substrate-grunte.
- 5. Apvalyto būdu pagal 4 punktą grunto panaudojimas augalams auginti ir galutinai atstatyti dirvožemio struktūrą bei jo biologines savybes.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| LT2000060A LT4794B (lt) | 2000-07-04 | 2000-07-04 | Štamas trichoderma harzianum vnb-16, skaidantis mazutą, jo gavimo būdas ir panaudojimas |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| LT2000060A LT4794B (lt) | 2000-07-04 | 2000-07-04 | Štamas trichoderma harzianum vnb-16, skaidantis mazutą, jo gavimo būdas ir panaudojimas |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| LT2000060A LT2000060A (lt) | 2001-01-25 |
| LT4794B true LT4794B (lt) | 2001-05-25 |
Family
ID=19721478
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| LT2000060A LT4794B (lt) | 2000-07-04 | 2000-07-04 | Štamas trichoderma harzianum vnb-16, skaidantis mazutą, jo gavimo būdas ir panaudojimas |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| LT (1) | LT4794B (lt) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| LT7087B (lt) | 2024-02-07 | 2024-09-10 | Gamtos Tyrimų Centras | Biopreparatas naftos produktais užterštam gruntui valyti ir valymo būdas |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN110903984B (zh) * | 2019-12-06 | 2021-09-10 | 中国农业科学院植物保护研究所 | 一种哈茨木霉菌、微生物菌剂及其应用 |
| CN111172040B (zh) * | 2019-12-09 | 2021-09-10 | 中国农业科学院植物保护研究所 | 一种哈茨木霉菌、微生物菌剂及其应用 |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4415662A (en) | 1981-07-30 | 1983-11-15 | Thirumalachar Mandayam J | Microbial degradation of petroleum materials |
| SU1805097A1 (ru) | 1991-12-06 | 1993-03-30 | Ufimsk Neftyanoj Inst | ШТАММ БАКТЕРИЙ КНОООСОССЦЗ ЕКУТНРОРОиЗ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ОЧИСТКИ ВОДЫ И ПОЧВЫ ОТ НЕФТИ и НЕФТЕПРОДУКТОВ |
| RU2007372C1 (ru) | 1992-04-15 | 1994-02-15 | Марьям Бекжановна Биттеева | Способ очистки воды и почвы от загрязнений нефтью и нефтепродуктами |
-
2000
- 2000-07-04 LT LT2000060A patent/LT4794B/lt not_active IP Right Cessation
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4415662A (en) | 1981-07-30 | 1983-11-15 | Thirumalachar Mandayam J | Microbial degradation of petroleum materials |
| SU1805097A1 (ru) | 1991-12-06 | 1993-03-30 | Ufimsk Neftyanoj Inst | ШТАММ БАКТЕРИЙ КНОООСОССЦЗ ЕКУТНРОРОиЗ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ОЧИСТКИ ВОДЫ И ПОЧВЫ ОТ НЕФТИ и НЕФТЕПРОДУКТОВ |
| RU2007372C1 (ru) | 1992-04-15 | 1994-02-15 | Марьям Бекжановна Биттеева | Способ очистки воды и почвы от загрязнений нефтью и нефтепродуктами |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| LT7087B (lt) | 2024-02-07 | 2024-09-10 | Gamtos Tyrimų Centras | Biopreparatas naftos produktais užterštam gruntui valyti ir valymo būdas |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| LT2000060A (lt) | 2001-01-25 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Umar et al. | Low-cost production and application of lipopeptide for bioremediation and plant growth by Bacillus subtilis SNW3 | |
| Soud | Biodegradation of Polyethylene LDPE plastic waste using Locally Isolated Streptomyces sp. | |
| CN107189950B (zh) | 一种降解除草地膜的菌株gfdz1及菌剂制备方法和应用 | |
| CN105964680B (zh) | 一种滨海盐碱地连作棉花土壤生态修复剂及其制备方法与应用 | |
| CA2016790A1 (en) | Antibacterial, anti-nematode and/or plant-cell activating composition, and chitinolytic microorganisms for producing the same | |
| KR20080089324A (ko) | 토양 방선균 배양액을 이용한 참다래 재배방법 | |
| CN102021120B (zh) | 一种宛氏拟青霉菌株及其应用 | |
| LT4794B (lt) | Štamas trichoderma harzianum vnb-16, skaidantis mazutą, jo gavimo būdas ir panaudojimas | |
| Ishaq et al. | Isolation, identification and comparative study of fungal and bacterial strains found in organic and inorganic soils of different agricultural fields | |
| JP2000253868A (ja) | 硝酸態窒素の生成を抑制または蓄積を抑制する微生物 | |
| KR101377800B1 (ko) | 불용성염 가용화 활성 및 항진균 활성이 있는 신규 균주 락토코커스 락티스 엘케이에스49 | |
| CN102021121B (zh) | 一种集蜂曲霉菌株及其应用 | |
| KR100849407B1 (ko) | 토양 친화 미생물의 자체 순환 시스템을 이용한 식물성장촉진방법 | |
| CN113322191B (zh) | 一株用于制备纳米银的黑曲霉菌hq-1及其应用 | |
| CN118064296A (zh) | 一种抑制平菇细菌性病害的复合菌剂 | |
| KR20060021162A (ko) | 신규한 항진균성 작물생육촉진 미생물 바실러스아밀로리퀴파시엔스 ｍｊ-3 및 이를 이용한 미생물 상토 | |
| Azmi et al. | Isolation and morphological identification of soil fungi from agricultural soil in kuantan | |
| Bakli et al. | Isolation of fluorescent Pseudomonas spp. strains from rhizosphere agricultural soils and assessment of their role in plant growth and phytopathogen biocontrol | |
| CN102010839A (zh) | 功能菌株七号及其培养方法和菌剂的应用 | |
| CN101649295A (zh) | 菌株mt-06及其应用 | |
| CN108587986B (zh) | 一种具有防病和降解有机磷双重作用的解淀粉芽孢杆菌 | |
| Gond et al. | Isolation and Characterization of Phosphate Solubilizing Fungi from Rhizospheric Soil of Paddy Crop Fields and their Functional Capacity. | |
| KR20030075092A (ko) | 식물병 방제활성을 갖는 항진균 물질을 생성하는패니바실러스 에스디 17 균주 및 이를 함유하는 생물농약조성물 | |
| Singh et al. | Bio-Prospecting of Root Endophytic Freshwater Fungi Anguillospora longissima and Cylindrocarpon aquaticum as Phosphate Solubilization Potential | |
| Fitri et al. | Isolation and celulolytic activity assay of actinobacteria isolated from palm oil wastewater |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM9A | Lapsed patents |
Effective date: 20020704 |