LT3111B

LT3111B - The oil pollutants decomposing microorganism azotobacter vinelandii 21

Info

Publication number: LT3111B
Application number: LTIP100A
Authority: LT
Inventors: Saulius Grigiskis; Egidijus-Vladas Baskys; Kestutis Vilutis
Original assignee: Saulius Grigiskis; Baskys Egidijus Vladas; Kestutis Vilutis
Priority date: 1992-07-15
Filing date: 1992-07-15
Publication date: 1994-12-27
Also published as: LTIP100A

Abstract

The new selected micro-organism for the Azotobacter vinelandii 21 effectively degrades heavy oil fractions. A stem has been extracted from water contaminated by heavy oil after a tanker accident. The stem may be used for the cleaning of fresh and salty water as well as for soil cleaning from oil pollutants and products of the same nature. The Azotobacter vinelandii 21 is deposited in the Genetika, scientific research institute of Russia (Moscow), collection number BKΠM B-5980, and in a collection of the Biocentre, a micro-organism museum, collection number BC-21.

Description

Išradimas priskiriamas mikrobiologinei pramonei ir jis gali būti ” taikomas biotechnologijoje, žemės ūkyje ,bei gamtos apsaugoje. Išradimo esmė - naujas bakterinis kamienas, naudojamas biologiniam vandens ir dirvos valymui nuo naftos teršalų.The invention relates to the microbiological industry and can be applied in biotechnology, agriculture and nature conservation. SUMMARY OF THE INVENTION The present invention relates to a novel bacterial strain used for biological purification of water and soil from oil pollutants.

Žinomas iš JAV patento Nri 3813316 Pseudomonas aeroginosa PAO kamienas, kuris turi kontroliuojančias angliavandenilių utilizaciją plazmides CAM, OCT-, NAH irKnown from U.S. Patent No. 3,813,316, Pseudomonas aeroginosa PAO, which has hydrocarbon utilization controlling plasmids CAM, OCT-, NAH and

SAL . ir naudojamas mikrobiologinei naftos ir jos produktų degradacijai.SAL. and is used for microbiological degradation of petroleum and its products.

Šie kamieno trūkumas - lėta nevalytos naftos utilizacija.These strain shortages are the slow recovery of crude oil.

55·ζ_?/.7';:5/55 · ζ _? /.7';:5/

Taip pat žinomas ir SU aut.l. Nr. 612958 Pseudomonas aeroginosa kamienas, turintis 0CT⁺, CAM⁴ ir' ΝΛΗ/ plazmides. Jis naudojamas biologiniam vandens nuo ' • naftos ir jos produktų valymui.Also known as SU aut.l. No. 612958 Pseudomonas aeroginosa strain containing 0CT ⁺ , CAM ⁴ and 'ΝΛΗ / plasmids. It is used for biological treatment of water from oil and oil products.

Pseudomonas aeroginosa 121 kamieno trūkumas yra siauras veikimo spektras.The disadvantage of Pseudomonas aeroginosa 121 strain is its narrow spectrum of action.

Artimiausias savo veikimu siūlomam kamienui yrą' 'Pseudomonas putida 36, degraduojantis naftą ir jos produktus vandenyje ir dirvoje. Pseudomonas putida 36 išskirtas Tiumenės srityje iš Belozersko naftos radimvietės, 13100 gręžinio (SU aut.l. Nr. 76446).Closest to the proposed strain is Pseudomonas putida 36, which degrades oil and oil products in water and soil. Pseudomonas putida 36 was isolated from the Belozersk oilfield, 13100 borehole in the Tyumen region (SU Aut. No. 76446).

Šio kamieno trūkumas yra lėtas naftos, ypač aromatinės degradavimas; per 30 parų utilizuoja 74,5% parafininės, naftos, o aromatinės - 68,4% nuo pradinio kiekio.The disadvantage of this strain is the slow degradation of oil, especially aromatic; utilizes 74.5% of paraffinic, petroleum and 68.4% of initial volume within 30 days.

Išradimo tikslas ’ - pagreitinti sunkių naftos frakcijų degradavimą.The object of the invention is to accelerate the degradation of heavy petroleum fractions.

^? ' 4 j,,://:/:/7/-/7-/+//4./.7 7././+ 4-//1// -/'- '/. 4. /-, . Atrinktas mikroorganizmas gali būti panaudotas gėlo ir sūraus (jūros) vandenę bei dirvos valymui nuo naftom teršalų. ^? '4 j ,,: //: /: /7/-/7-/+//4./.7 7././+ 4 - // 1 // - /' - '/. 4. / -,. The selected micro-organism can be used for cleaning fresh and salt (sea) water and soil from oil pollutants.

- Siūlomas Azotobacter vinelapdii 21 kamienas išskirtas iš vandens, - užteršto sunkia nafta po* tanklaivio avarijos,. Kamienas ·· deponuotas - Rusijos- moksliniame tiriamajame institute ^wGenetika* (Maskva) , kolekcinis numeris ’ ·' - ‘ i/ū|/įifli/7///l/į///^^^- Proposed strain of Azotobacter vinelapdii 21 isolated from water, - contaminated with heavy oil after * tanker accident. Strain ·· deposited - at the Russian- Scientific Research Institute ^w Genetics * (Moscow), collection number '·' - 'i / ū | / inifli / 7 /// l / in /// ^^^

Siūlomas.'-Azotobacter viuelsndįi kamienas_¥- deponuotas ir uždarosios akcinės bandrovės •'“Biocasntras® mikroorganizmų; muziejaus kolekcijoje*, kolekcinis numeris BC-21* pasižymi šiomis savybėmis.Proposed .'- Strain of Azotobacter viuelsndis _¥ - deposited and closed stock companies • '' Biocasntras® microorganisms; museum collection *, the BC-21 * collection has the following features.

' - Morfeloginės..---Ląstelės0_f 9—1*5xl*.3~2,dydžio, jų forma priklausomi. nuo kultūros .amžiaus , ir“ -'sugi&ijae sąlygų kinta nuo- storų bukais galais lazdelių iki .447/7///-7.. ': .//·< 7 /7'?-.//?+-//.-+./// + :./:/++4//+//./7./ /·./ // 7/., /7'7; i'./ /4//.^: :-7+.- '^z 4:++/77--4:4//7/7/77: +//+./4-.+/7- ·,? -' /b? /7/,·;-/7'7 />:7/4.7+ //',+ / -7/'7-/m' j .---7/7-7/· panašių į'-' kokas.* .Ląstelės dažniausiai /nukibę po'- Morphogenic ..--- Cells0 _f 9—1 * 5xl * .3 ~ 2, size, shape dependent. from culture. age, and the '-'sugi & ijae conditions range from thick blunt-ended sticks to .447 / 7 /// - 7 ..': .// · <7 /7'?-.//?+-/ /.-+./// +: ./: / ++ 4 //+//./ 7. / /·./ // 7 /., / 7'7; i './ / 4 //. ^:: -7 + .- ' ^z 4: ++ / 77--4: 4 // 7/7/77: + // +. / 4 -. + / 7- ·,? - '/ b? / 7 /, ·; - / 7'7 />:7/4.7+ // ', + / -7 /' 7- / m 'j .--- 7 / 7-7 / · Similar to'-' coke. * .Cells mostly / sprouted after

-+++ + 7/7/:+ '.7:/./ /-...77 ?'^T'/.7 ·. /7:4-7 +/7/// /47+-7;'/,://:.,7 /77-7-7/. / +;.//' . +-/. /7/74././://:/-+ 7/.--.++ / 44//, ' 4./+/+.:-4 ../+-?/., '·+ :44-/74-/7 7 -7;/4: < . · '.- +++ + 7/7 /: + '.7: /./ /-...77?' ^T '/.7 ·. / 7: 4-7 + / 7 /// /47+-7;'/,://:.7/77-7-7/. / +; .// '. + - /. /7/74././://:/-+ 7 /.--.++/44 //, '4./+/+.:-4 ../+-?/.,' · +: 44- / 74- / 7 7 -7; / 4: <. · '.

nors - yra- pavienių. - ar ‘ susitelkusių grupėmis. tūri kapsules. Judrios* turi perifcriobiBius ' · .Mušeikos» Gramneigiamos* ^ultūris^. Po 48 vai* ant mėsos peptono agaro užaugaalthough - there are - isolated. - or 'clustered'. volume of capsules. Mobile * has perifcriobiBius' · .Music »Gram-negative * ^ ulture ^. After 48 hours, peptone agar overgrows on the meat

/.//.: .+'./-'./ .'/ :--47//: t // ·/. / · -./-,/ . ./b/. .·...; 4./4. .· 7 4'/ '·' < /+4.+ . .+4///-/ /'.<: + 7* 4r4/’- / //./ +7, 7/./-:./..,.---7.- +>· /7· / · -/+/77 /. --- . ,;/-’4-4 '·+//: '- .44-.7//4- /.7.'-/·'-' + 25 pilkšvai balsvos* blizgančios; lygiais kraštais iškilios 2-4 mm diametro kolonijas* gleivėtos* ūžsėjus kultūrą į mėsos peptonc buljoną, buljonas, drumsčiasi^ plėvelė nesusidaro,/.//:. + '. / -'. /. '/: - 47 //: t // · /. / · -./-,/. ./b/. . · ...; 4/4 . · 7 4 '/' · '</+4.+. . + 4 /// - / / '. <: + 7 * 4r4 /' - / //./ +7, 7 /./-:./..,.--- 7.- +> · / 7 · / · - / + / 77 /. ---. ,; / - '4-4' · + //: '- .44-.7 // 4- /.7.'-/·'-' + 25 Grayish * Glossy; colonies 2-4 mm in diameter with smooth edges * mucus * bruising the culture to the peptonc broth of the flesh, the broth, clouding ^ film does not form,

Fiziologinės. Aerobas* - Katalazės , reakcija teigiama, oksidazės neigiama. Auga 4-41°C temperatūroje? optimali -_^0°C,_ 4_°C ir41°C temperatūroje augimas lėtas*Physiological. Aerobic * - Catalases, reaction positive, oxidase negative. Grows at 4-41 ° C? optimal at -_ ^ 0 ° C, _ 4_ ° C, and 41 ° C slow growth *

Silpnai hidrolizuo ja krakmolą* želatinos neskystina, naudoja- gliukozę?, fruktozėj, sacharozę* manitą* ramnozę. Asimiliuoja nitratus ir molekulinį atmosferos azotą.Slightly hydrolyses starch * does not liquefy gelatin, uses glucose ?, fructose, sucrose * mannitum * rhamnose. Assimilates nitrates and molecular atmospheric nitrogen.

-===.=' LT 3111 B / 4 ' · 4. ==:3 = · ' =='- ===. = 'LT 3111 B / 4' · 4. ==: 3 = · '=='

Naudoja angliavandenilius; naftaliną, antraceną, oktazą, heksaną, oktadekaną_? benzolą, toluolą, ksilolą, deka/iną, .parafiną, asfaltenus. Aromatinę naftą skaldo aktyvia® negu parafininę.Uses hydrocarbons; naphthalene, anthracene, octase, hexane, octadecane _? benzene, toluene, xylene, decane /. paraffin, asphaltenes. The aromatic oil is decomposed into active® rather than paraffinic.

Siūlomo Azotobacter vinelandii 21 ir žinomo Pseudomonas putida 36 kamienų naftą degraduojančių savybių.bei Hitų požymių palyginimas pateiktas lentelėje.The oil-degrading properties of the proposed strain Azotobacter vinelandii 21 and the known Pseudomonas putida 36 strain.

- ’' Azoto/aeter vinelandii 21 ir Pseudomonas putida kamienų'.naftą degraduojančių savybių palyginimas.- Comparison of oil-degrading properties of '' Nitrogen / aeter vinelandii 21 and Pseudomonas putida strains'.

'Lentelė'Table

Požymiai ¹ - 'Symptoms ¹ - ' Azotobacter Azotobacter Pseudomonas Pseudomonas 7=4 .777α';/.='7'7://;7^;·7·77·_:·7=7'//. /.7=7/77=/707/ -/=-7==,7:/=.·./·>'·7 = 4 .777α ';/.='7'7://; 7 ^; · 7 · 77 · _: · 7 = 7 '//. /.7=7/77=/707/ - / = - 7 ==, 7: / =. ·. / ·>'· vinelandii 21 vinelandii 21 putida 36 putida 36 Naftos degradacija; Oil degradation; 3://:.=:1/=/=47:-/5/ 3: //:. =: 1 / = / = 47: - / 5 / aroaafinėa'<%> aroaafinėa '<%> 80,2 80.2 68,4 68.4 parafininės (%> paraffinic (%> • 75,6 75.6 74,5. 74.5. Degradacijos trukmė (paros) Duration of degradation (days) 21 21st 30 30th ' Sunkios.-naftos degradacija (%) 'Heavy.-Oil Degradation (%) 72,5 · 72.5 · 57,2 57.2 Degradacijos trukmė (parosi Degradation duration (parosi 21 21st 21 21st lfeftCiS.dsgradaG3.ja w-dsnyje <%); lfeftCiS.dsgradaG3.ja w-dnis (<%); .gėlame ¹ .green ¹ 77,4 77.4 60,0 60.0 - sūriame (jūros) . ·. - - in salt (sea). ·. - 46,8 46.8 9,0 9.0 tegliaWKtenilių degradacija (%) tegliaWKtenil degradation (%) anfracenas anfracen 72,6. 72.6. 46,3 46.3 dekalinas decalin 44,4 44.4 38,5 38.5 oktadekanas octadecane ’ 36,7 '36.7 41, & , 41, &, asfaltenai asphaltenes 27.5 27.5 21,5 21.5

Iš lentelėje pateiktų rezultatų matyti, kad siūlomas 4^?k®®i:®b®i<'=p@r''=2l:/./pirą:/-parafininę naftą degradavo* ikiThe results in the table show that 4 ^? k®®i: ®b®i <'= p @ r''= 2l: /./ py: / - paraffinic oil degraded * to

10.10th

75,6%, aromatinę - 80,2%, o Pseudomonas putida 36 per 30 parų degradavo atitinkamai iki 74,5% ir 68,4% nuo pradinio kiekio; per 21 parą Arotobacter vinelandii 21 degradavo 72, 8%, o Pseudomonas putida 36 - 57% sunkios naftos nuo pradinio kiekio; Zzotobacter vinelandii 21 degradavo 72,6% antraceno, 44,4% dėkai i no, 36,7% oktadekano ir 27,5% asfaltenų, o· Pseudomonas putida 36 atitinkamai <6,3%, 38,5%,· 41,8%., 21,5% nuo pradinio kiekio; Azotahącter vinelandii 21 gėlame vandenyje degradavo 77,4% naftos, sūriame - 46,8%,. o Pseudomonas putida -36 atitinkamai 60,0% ir 9,0% nuo pradinio kiekio.75.6%, aromatic 80.2% and Pseudomonas putida 36 degraded to 74.5% and 68.4% from baseline over 30 days, respectively; during the 21 days, Arotobacter vinelandii 21 degraded 72, 8% and Pseudomonas putida 36 - 57% from the initial amount; Zzotobacter vinelandii 21 degraded 72.6% of anthracene, 44.4% of gratitude, 36.7% of octadecane and 27.5% of asphaltenes, and · Pseudomonas putida 36 <6.3%, 38.5%, · 41, 8%., 21.5% from the original amount; Azotachoic vinelandii 21 degraded 77.4% of oil in fresh water and 46.8% in brine. while Pseudomonas putida -36 was 60.0% and 9.0% from baseline, respectively.

iiūlosias Azotobacter vinelandii 21 kamienas už 15 Pseudomonas putida 36 pranašesnis tuo., kad geriau ir greičiau degraduoja aromatinę bei sunkių naftą, geriau įsisavina asfaltenus, arnmatinivs (antracenas), ciklinius (dekalinas) angliavandenilius ir geriau kaip Pseudomonas putida 36 utilizuoja ' naftą sūriame vandenyje, kas . leidžia Azotobacter vinelandii 21 kamieną panaudoti biologiškai valant ne tik dirvą irThe advantageous strain of Azotobacter vinelandii 21 over 15 Pseudomonas putida 36 is that it better and faster degrades aromatic and heavy oils, better uptake of asphaltenes, armatic (anthracene), cyclic (decalin) hydrocarbons, and better than Pseudomonas putida 36 utilizes water, who. allows the use of strain Azotobacter vinelandii 21 not only for biological cleaning of soil and

- gėlą vandenį nuo sunkios naftos-ir jos produktų, bet ir sūrų jūros vandenį.- Fresh water from heavy petroleum and its products, but also salt water.

Claims

DEFINITION OF INVENTION

Azotobacter vinelandii 21 (deposited at the Museum of Genetics, Russian Research Institute, Moscow),

5 Issue No. BK M B-5980) is an oil-degrading micro-organism used for biological purification of water and soil from oil pollutants.