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KR940000816B1 - 산화환원계 검출용 조성물 - Google Patents

산화환원계 검출용 조성물 Download PDF

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KR940000816B1
KR940000816B1 KR1019850006689A KR850006689A KR940000816B1 KR 940000816 B1 KR940000816 B1 KR 940000816B1 KR 1019850006689 A KR1019850006689 A KR 1019850006689A KR 850006689 A KR850006689 A KR 850006689A KR 940000816 B1 KR940000816 B1 KR 940000816B1
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Abstract

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Description

산화환원계 검출용 조성물
도면은 혈청의 크레아틴 측정용 장치이다.
* 도면의 주요 부분에 대한 부호의 설명
1 : 보호직물 2 : 분리영역
3 : 수송영역 4 : 운반필름
5 : 시약 페이퍼 B 6 : 시약 페이퍼 A
7 : 투명 덮개 필름
본 발명은 색원체(chromogen)의 산화 커플링에 의해 산화환원계를 검출하기 위한 조성물에 관한 것이다.
퍼옥시디아제 또는 과산화염-활성물질에 의해 촉진되는 적당한 색원체 물질에 의한 과산화수소의 검출은 분석화학뿐만 아니라 의료진단을 위해 매우 중요하다. 특히 이러한 시약은 과산화수소가 기질과 해당하는 기질 옥시다아제 및 산소의 반응중간체로서 형성되고, 계속하여 적당한 색원체 물질의 존재하에 및 촉매로서 주로 퍼옥시다이제(POD)의 존재하에 광학적으로 검출할 수 있는 화합물로 전환되고, 형성된 과산화수소와 정량적인 관계를 갖는 여러 가지 검출방법에 사용된다. 더욱더, 퍼옥시다이제는 면역시험에서 효소 표지물 또는 표지로서 사용되고, 과산화수소 및 상기 언급한 색원체 물질의 부가에 의하여 검출된다.
예를들면, 괄호안에 제시된 해당하는 옥시다아제와 더불어, 과산화수소-형성계를 나타내는 다음 화합물을 예시할 수 있다 :
글루코스(글루코스 옥시다아제) : 갈락토스(갈락토스 옥시다아제) : L-아미노산(L-아니노산 옥시아다제) : 콜레스테롤(콜레스테롤 옥시다아제) : 요산(우리카아제) : 사르코신(사르코신 옥시다아제) : 글리세롤(글리세롤 옥시다아제) : 글리세롤 포스페이트(글리세롤 포스페이트 옥시다아제) : 및 피루베이트(피루베이트 옥시다아제).
여러가지 색원체 및 지시약 계들이 이미 알려져 있고, 과산화수소/퍼옥시다아제의 검출을 위해 위해 사용되었다. 가장 잘 알려진 것중에 하나는 과산화수소의 활동하에, POD의 존재하에 페놀을 4-아미노안티피린과 산화적으로 결합시켜 착색물질을 얻는, 트린더(Trinder)에 의해 제시된 지시약계이다 (참고문헌 : Ann. Clin. Biochem., 6, 24-27.1969). 페놀 대신에, 커플링 성분으로서, 페놀유도체, 나프톨, 나프톨유도체, 나프틸아민, 나프틸아민 유도체 및 유사한 방법에 따라 반응하는 물질 역시 사용할 수 있다. 커플링 성분으로서, 4-아미노안티피린은 예를들면 아미노안티피린 유도체, 바닐린-디아님 술폰산, 메틸벤즈티아졸리논히드라존(MBTH) 또는 술폰화된 메틸벤즈티아졸리논 히드라존(SMBTH)으로 대체될 수 있다.
더욱더, 산화 커플링 반응은 예를들면, 효소반응에 의해 유리된 방향족 아민을 결정하는 데에도 사용된다. 진단목적을 위해 특히 중요한 것은 γ-글루타밀 트랜스펩티다이제(γ-GT) 및 루이신아미노 펩티다아제(LAP)의 검출뿐만 아니라 트롬빈의 검출이다. 이러한 경우에, 반응의 커플링 성분으로서 이용할 수 있는“펩티드아미드”, 문제의 효소에 해당하는 아미노산 서열 및 방향족 아민, 특히 페닐렌 디아민, 또는 아미노페놀 또는 이들의 유도체들인 아미드부분은 효소에 의해 먼저 분열된 다음 커플링 성분으로서 페놀 또는 아닐린을 사용하여 산화제에 의해 산화되어 착색물질이 수득된다(참고, 독일연방공화국 특허번호 33 31 588 및 유럽특허번호 0 076 042).
이러한 검출반응은 크벳(cuvette)뿐만 아니라 건조한 시약담체 위에서 수행딜 수 있다. 그의 광량은 전송 효과 측정에 의한 광도계에 의해, 경감측정에 의한 경감 광도계에 의해, 또는 육안 비교에 의한 비교색깔로 측정된다.
문헌에는 과산화수소를 위한 민감한 검출계와 더불어 4-아미노안티피린 또는 치환된 벤조티아졸리논 히드라존들과의 축합에 의해 제조될 수 있는 아닐린유도체들이 자주 제시되었다 (참고문헌, 독일연방공화국 특허번호 28 33 612 및 30 37 342 및 유럽 특허번호 0 007 787). 즉 제조된 커프링 생성물들은 해당하는 과산화수소-형성 화합물의 수용액과 비교하여 30% 이상의 흡광차를 갖는 혈청성분뿐만 아니라 몇몇 경우에 화합물 또는 커플링 생성물의 불충분한 안정성으로 인해 이들 커플링 생성물의 장해가 크다는 점이다.
그러므로, 본 발명의 목적은 혈청에 존재하는 장해물질과 반응하지 않고, 아닐린 유도체가 약산성 내지 약알칼리성 범위에서 안정하고, 따라서 크벳시험뿐만 아니라 건조 시약담체로서 사용할 수 있는 모든 매트릭스에 사용할 수 있는 과산화수소, 과산화염 활성 물질 및 커플링하는 방향족 아민의 검출을 위해 특히 유용한 산화환원계 검출용 조성물에 관한 것으로, 산화 커플링에 있어서 색깔 형성체로서 사용할 수 있는 아닐린 유도체를 제공하는 것이다.
놀랍게도, 본 발명자들은 연구노력의 결과 상기 제시한 요건을 만족하는 어떤 아닐린 유도체를 발견하였다.
즉, 본 발명은 다음 일반식(I)의 아닐린유도체 및 그의 산 및 염기부가염을 트린더반응의 색깔 형성제로 사용하는 방법뿐만 아니라 이러한 아닐린 유도체를 함유하는 조성물에 관한 것이다.
Figure kpo00001
상기식에서, R1은 수소원자 또는 C1-C6아릴 또는 C1-C6알킬기로 치환된 C6-C10아릴기이고, R2는 수소원자, C1-C6알킬 또는 히드록실, 아미노, 카르복실, 저급 알콕시카르보닐, 저급 알카노일아미도, C1-C6알킬 또는 C6-C10아릴로 치환된 C6-C10아릴 또는 하기의 식
Figure kpo00002
(식중, R5및 R6은 하기에 정의한 바와같음)의 기로 치환될 수 있는 C1-C6알킬기이고, R3는 수소원자, 불소, 염소, 브롬, 요오드 또는 카르복시기이고, R4및 R'4은 같거나 다를 수 있고, 수소원자, 불소, 염소, 브롬, 요오드, 카르복실기, C1-C6알콕시 또는 C1-C6알킬기이며, R5는 수소원자 또는 C1-C6알킬기이며, R6는 히드록실기, C-C6알콕시기, C1-C6알킬기, C6-C10아릴 또는 C1-C6알킬기로 치환된 C6-C10아릴기이다.
본 발명에서 사용된“저급 알킬”이란 C6이하, 바람직하게는 C3이하의 직쇄 또는 측쇄 알킬기를 의미하는 것으로, 그 예로는 메틸, 에틸, 이소프로필, 이소부틸 및 3차-부틸기를 들 수 있다.
Figure kpo00003
(식중, R5및 R6은 하기에 정의함)의 기로 치환될 수 있는 저급 알킬기이고, R3는 수소원자, 할로겐원자 또는 카르복실기이고, R4및 R'4은 수소원자, 할로겐원자, 카르복실기, 또는 바람직하게는 m-위치일 수 있는 저급 알콕시기 또는 저급 알킬기이고, 두 개의 치환체가 서로 오르토위치에 있을 때 R1및 R4또는 R2및 R4, 및 R4및 R'4은 히드록실기 또는 옥소기로 치환될 수 있는 C2-C6의 포화 또는 불포화 탄화수소쇄를 함께 형성할 수 있고, R5은 수소원자 또는 저급알킬기이고, R6는 히드록실기 또는 저급 알콕시, 저급 알킬 또는 아릴기이다.
상기에 사용된“저급 알킬”이란 C6이하, 바람직하게는 C3이하의 직쇄 또는 측쇄 알킬기를 의미하는 것으로, 그 예로는 메틸, 에틸, 이소프로필, 이소부틸 및 3차-부틸기를 들 수 있다.
“아릴”은 바람직하게는 부수적으로 저급 알킬 또는 알콕시 또는 할로겐원자로 치환될 수 있는 페닐기 및 가능하다면 부분적으로 수소화될 수 있는 나프틸기를 의미한다.
할로겐으로는 불소, 염소, 브롬 및 요오드를 들수있고, 바람직하게는 불소 및 염소이다.
R1및 R4또는 R2및 R4또는 R4및 R'4은 서로 함께 포화 또는 불포화 탄화수소쇄를 형성할 수 있다. 상기 탄화수소쇄는 C2내지 C6, 바람직하게는 C2내지 C4이다. 그의 예로는 -(CH2)2-, -(CH2)3-, -CH=CH-, -CH2-CH=CH-를 들수있다. 히드록실 또는 옥소기로 치환된 포화 또는 불포화 탄화수소쇄의 예로는 -CH(OH)-(CH2)2- 및 CO-(CH2)-CH=CH-CO-을 들수있다,
저급 알카노일기란 C6이하의 카르복실산의 잔기로, 그 예로는 포르밀, 아세틸, 프로피오닐, 피발로일, 이소부티릴을 들 수 있다.
저급 알카노일기란 C6이하, 바람직하게는 C4이하의 기, 예를들면, 메톡시, 에톡시, 프로폭시, 이소프로폭시 및 3차-부톡시기를 의미한다.
일반식 (I)의 화합물, 특히 R5가 저급 알킬기이고, R6가 저급 알콕시기인 화합물은 예를들면, 참고문헌[Zh. Obshch. Khim., 47, 2741/1977; Izv, Akad. Nauk SSSR, Ser Khim., 424/1967 및 178/1982; 미합중국 특허명세서 번호 3,816,428; Z. Naturforsch., 36c, 242/1981; Chem. Abs., 99, 22914K; Chem. Abs., 91, 157812t; Bull. Soc. Chim. Fr. pt., 2343/1979; Tetrahedron, 37, 2297/1981; J.A.C.S., 74, 1528/1952; 및 Czechoslovakian 특허 명세서 번호 190,240]에 일부가 제시되어 있다. 상기 문헌에 제시된 화합물들은 예를들면 식물성장 조절제, 부유보조제, 킬레이트 형성제 및 부식억제제로서 사용된다. 그러나, 과산화수소 또는 퍼옥시다아제 또는 과산화염 활성화합물의 비색 검출을 위한 산화 커플링 반응의 성분으로서 이들의 용도는 지금까지 제시되지 않았다.
본 발명에 따라, 다음 일반식(I')의 신규 화합물뿐만 아니라 산 및 염기부가염 및 이들의 제법이 제공된다.
Figure kpo00004
상기식에서, R1, R2, R3, R4및 R'4은 식(I)에서 정의한 바와같고, R'6은 히드록실기, 저급알킬 또는 아릴기이다.
일반식(I) 및 (I')의 화합물들은 안정하며 그자체로서 물에 쉽게 용해되거나 또는 통상의 산(염산, 황산, 인산등과 같은 무기산 또는 아세트산, 시트르산, 옥살산등과 같은 유기산) 또는 염기(수산화나트륨 또는 칼륨의 수용액, 암모니아, 아민, 알칼리금속 탄산염등)와 반응함으로써 쉽게 용해되는 염으로 전환될 수 있다.
일반식(I)의 화합물은 공지의 방법에 의해 합성될 수 있다. N-C-P계의 제법을 위한 가능한 반응의 일반적인 요약은 참고문헌[Phosphorus Chemistry, 8, 515 et seq./1976]에 제시되어 있다. 하기에는 일반식(I)의 화합물의 합성을 위해 특히 유용한 각각의 예가 제시되었다.
1. 예를들면 참고문헌[J.A.C.S., 74, 1528/1952]에 제시된 것처럼, 1차 또는 2차 아민을 알데히드 및 디알킬 포스파이트 또는 디알킬에스테르와 반응시켜 일반식(I)의 화합물을 얻을 수 있다.
Figure kpo00005
출발물질로서 1차 아민 및 알데히드를 사용하는 대신에 하기에서 제조한 쉬프염기를 사용할 수 있다.
2. R7이 저급 알킬기인 일반식(II)의 N,O-아세탈을 H+ 촉매의 존재하에 R6가 저급 알콕시인 일반식(III)의 트리알킬 포스파이트와 반응시켜 R2가 수소원자인 일반식(I)의 포스폰산 에스테르를 얻는다(참고, Izv, Akad. Nauk SSSR, Ser. Khim., 424/1967) :
Figure kpo00006
이 반응은 인산 디알킬 에스테르(III, R6=저급 알킬 또는 아릴)와 더불어 수행될 수 있다.
같은 방법으로, 고리형 N,O- 아세탈, 예를들면 N-아릴 옥사졸리딘(IV)는 트리알킬 포스파이트 또는 포스폰산 디알킬 에스테르와 반응할 수 있다. 상기 반응으로, 특히 옥사졸리딘으로 부터 출발할 때 분자내 트랜스 에스테르화 반응으로 포스폰산 및 포스핀산의 고리형 에스테르를 형성할 수 있다 :
Figure kpo00007
출발물질로서 필요한, N,O-아세탈은 상기 제시한 반응(J.A.C.S. 54, 4176/1932)과 유사하게 포름알데히드 및 알코올을 2차 아닐린과 반응시킴으로써 얻을 수 있다. N,N-디메틸아닐린을 출발물질로서 사용한다면, 해당하는 포름알데히드의 N,O-아세탈은 수산화칼륨 메탄올 용액중에서 음이온성 산화반응에 의해 제조할 수 있다. 비교적 장기간 전기 분해하는 경우에, 다음 일반식의 비스-N,O-아세탈을 얻을 수 있는데, 이를 트리알킬 포스파이트 또는 포스폰산 디알킬 에스테르 2몰과 반응시켜 해당하는 이미노디메탄 포스폰산을 얻는다 :
Figure kpo00008
고리형 N,O-아세탈은 열린 사슬 화합물과 유사하게 제조할 수 있다. 즉, 예를들면, N-아릴옥사졸리딘은 N-히드록시에틸 아닐린을 알데히드, 예를들면 포름알데히드와 반응시켜 제조한다.
3. 아닐린과 X가 브롬, 요오드, 토실옥시, 벤젠술포닐옥시 또는 메탄술포닐옥시인 다음 일반식(V)의 포스폰산 에스테르의 알킬화반응은 문헌에 알려져 있다(J. Recherches, C.N.R.S., 119/1956; Zh. Obshch. Khim., 47, 2741/1977) :
Figure kpo00009
4. R5가 저급 알킬기이고, R6가 저급 알콕시기이고, R1이 바람직하게는 수소원자인 일반식(I)의 아미노알킬 포스폰산 에스테르는 α-탄소원자 상에서 n-부틸리튬과 같은 강염기로 금속화될 수 있고, 요오드화 메틸과 같은 알킬화제로 알킬화된다.(참고문헌, Synthesis, 336/1977) :
Figure kpo00010
R5가 저급 알킬기이고, R6가 저급 알킬 또는 저급 알콕시기인 일반식(I)의 화합물은 비점하에서 진한 무기산, 예를들면 황산의 작용으로 비누화시키거나 또는 할로겐화 트리메틸실릴, 특히, 브롬화 트리메틸실릴 또는 요오드화 트리메틸실릴과 반응시킨 다음 물로 처리하여 비누화시킬 수 있다. 공지된 방법에 따라 R5가 저급 알킬기이고, R6가 저급 알콕시기인 일반식(I)의 화합물을 요오드화 나트륨과 같은 소듐 알코올 레이트 또는 알칼리금속염으로 처리하여 해당하는 포스폰산 헤미에스테르를 제조할 수 있다.
일반식(I)의 화합물은 유리염기 또는 강산의 염, 예를들면, 염산, 4불화붕산수소(HBF4) 또는 브롬화 수소산의 염의 형태로 단리할 수 있다. R5가 수소원자일 때, 일반식(I)의 화합물은 분자내염, 알칼리금속염, 암모늄염 또는 아민염으로서 얻어질 수 있다.
본 발명에 따른 아닐린 유도체들은 산성 및 염기성기를 함유하고 있으므로 일반적으로 분자내염으로서 존재한다.
아민질소의 3-위치에 알킬기, 특히 메틸기를 함유하는 화합물은 증가된 흡광을 나타내므로 발마직하다. 과산화수소/POD의 검출을 위해 산화할 수 있는 커플링성분으로서, 바람직하게는 4-아미노안티피린(4-AAP), 2-히드라존-2,3-디히드로-3-메틸벤즈 티아졸론(MBTH) 및 특히 2-히드라조노-2,3-디히드로-3-메틸벤즈 티아졸론 -6-술폰산(SMBTH)이 있으나, 또한 산화 커플링할 수 있는 능력이 있는 다른 성분들도 같은 방법으로 사용될 수 있다.
방향족 아민, 즉, p-페닐렌디아민 및 p-아미노페놀 유도체의 검출에 있어서, 일반식(I)의 아닐린 유도체들은 산화 커플링의 경우에 장해를 받지않고, 좋은 안정성 및 높은 흡광의 착색된 물질을 얻을 수 있으므로, 상당히 유용한 것으로 입증되었다. 효소의 검출을 위해 사용할 수 있는 기질은 다음 일반식(VI)의 화합물을 들 수 있다. :
상기식에서, R”1, R”2, R”3, 및 R”4은 같거나 다를 수 있으며, 수소원자, 할로겐원자, C6이하의 알킬 및 알콕시기, 카르복실 또는 술포닐기이거나, 또는 R”1및 R”2또는 R”3, 및 R”4은 서로 함께 알킬 또는 알킬렌 다리를 형성할 수 있고 X'은 알킬기로 일 또는 이 치환될 수 있는 히드록실 또는 아미노기이고, Y는 보호된 아미노산 또는 펩티드기일 수 있다.
루이실아미노펩티다아제의 검출을 위한, Y는 L-루이실이고, γGT의 검출을 위한 Y는 γ-L-글루타밀이고, 트롬빈의 검출을 위한 Y는 Tosyl-Gly-Pro-Arg이다.
산화제로서, 과산화수소/POD를 제외하고, 과황산염 또는 과초산염과 같은 과산화물 뿐만 아니라 과용오드산염, 클로라민 T 및 특히 육시아노철(III)산염 착물, 예를들면 육시아노철(III)칼륨을 사용할 수 있다. 독일연방공화국 특허 제33 31 583호에 따라, 옥시다아제 역시 사용할 수 있다.
상기 설명한 바와같이, 본 발명에 따른 계는 과산화수소 및 과산화수소-제조계의 검출뿐만 아니라 퍼옥시다아제 및 과산화염 활성 화합물의 검출을 위해 사용할 수 있다. 과산화수소-제조계에 의해, 기질이 공기중의 산소의 존재하에 산화되고 과산화수소가 제조되는 임상진단에서 중요한 기질/기질 옥시다아제가 커플링하는 것으로 이해되고 있다. 즉, 이 방법에서, 성분이 시약에 가해짐에 의존하여 기질 또는 기질 옥시다아제를 검출가능하다. 더욱더, 본 발명에 다른 화합물들은 산화제의 존재하에 접촉될 때 커플링할 수 있는 방향족 아민의 검출을 위해 유용하다. 예로서, 본 발명의 도입 부분에서 설명하였다.
시약조합과 더불어, 시험은 크벳에서 측정하여 준비할 수 있다. 이러한 목적을 위해, 일반식(I)의 본 발명에 따른 화합물중의 하나는 특정 매개변수의 검출을 위해 필요한 효소 또는 다른 시약, 완충액, 뿐만 아니라 임의의 수화제, 활성제 및 분말 또는 정제의 형태로 가압한 또는 바람직하게는 물에 용해시키고, 다시 건조시키거나 또는 동결 건조한 다른 보조제와 함께 혼합한다. 즉 얻어진 시약 혼합물을 사용전에 물 또는 다른 적당한 용매에 용해시켜, 시약 용액을 준비한다. 샘플(기질용액, 효소요액, 혈청 또는 플라즈마)과 시약 혼합물의 분취량을 혼합한 후, 얻어진 색깔을 광도계로 측정하고, 분자 흡광계수를 통해 계산된 특정농도 또는 기질농도 및 가해진 시약 또는 샘플의 부피를 측정한다. 반응속도 뿐만 아니라 종말점 측정이 가능하다.
또한 일반식(I)의 화합물은 퍼옥시다아제, 특정 매개변수 검출을 위해 필요한 시약 또는 다른 효소(들), 완충계, 임의의 수화제 및 활성제 뿐만 아니라 다른 보조제와 함께 산화시킬 수 있는 커플링 동반자와 배합하여 종이 또는 직물등과 같은 흡수시약 담체속으로 주입될 수 있다. 이러한 목적을 위해, 하나 또는 그 이상의 주입 용액은 시약 또는 보조제를 용해시키는 방법에 따라 수용액 또는 유기 또는 혼합 용액의 형태로 제조할 수 있다. 흡수제 또는 팽창할 수 있는 담체, 바람직하게는 여과지 또는 흡착유리 또는 합성수지직물에 상기 용액이 침투되거나 또는 주입되고, 그 다음 건조된다. 즉 제조된 시약 담체들은 액체의 성분(예를들면, 혈액, 오줌, 또는 타액과 같은 체액, 또는 과일즙, 밀크등과 같은 식료품에서)의 직접 검출을 위한 빠른 진단제로서 사용할 수 있다. 그러므로 액체는 시약 담체에 직접 가해지거나 또는 시약담체는 액체속으로 재빨리 침지될 수 있다. 반 정량적인 평가는 얻어진 색깔과 대조 색깔을 비교하여 가능하고, 정량적인 평가는 경감 광도계에 의해 수행할 수 있다. 흡수담체로부터 상기 언급한 시약을 물, 완충용액 또는 혈청으로 용출시켜, 시약용액은 광도계를 사용하여 크벳에서 상기 제시한 방법으로 결정할 수 있는 기질 또는 효소와 더불어 제조할 수 있다. 경감광도 평가에 의한 정량적인 결정은 예를들면 독일연방공화국 특허번호 1,598,153의 방법에 따라, 다른 필요한 시약, 보조제와 함께 지시약과 필름 형성 합성수지를 서로 배합하여 시약필름을 얻는 경우 특히 수행될 수 있다. 그러므로, 이러한 필름의 부드러운 표면은 통상 사용되는 흡수지보다 경감을 덜 방해하고 더 균일한 색상을 제공한다.
본 발명에 따라 사용된 완충용액 pH 6-10, 특히 pH 6.5-7.5를 갖는다. 알칼리금속 또는 암모늄 상대이온과 더불어 인산염, 시트르산염, 붕산염 및 GOOD 완충용액이 가장 빈번히 사용되지만 다른 계도 또한 사용될 수 있다.
수화제는 본 발명에 따른 양성이온 화합물과 더불어 이온교환 반응을 하는 음이온성 및 양이온성 수화제이다. 그러나, 효소를 활성화시키는 비이온성 수화제를 사용할 수도 있다. 소듐라우릴 술페이트, 디옥틸 소듐 술포숙시네이트 및 알킬아릴 폴리에테르 알코올이 바람직하다.
활성제로서, 문제의 기질 반응을 위해 알려진 물질들이 사용된다. 프린더 반응 그자체는 속도가 빠르기 때문에 부수적인 활성화가 필요없다.
다른 보조제로서, 다른 색원체와 더불어 해당하는 시험에 알려진 것과같은 통상의 혼탁제, 유제, 광학 투명제, 데조제등을 사용할 수 있다.
커플링 반응은 통상 주변온도에서 발생할 수 있으나, 상기 효소반응의 반응속도를 위해 바람직하다면 좀더 높은 온도 예를들면 37℃에서 즉시 수행할 수 있다.
통상 발생하는 기질 또는 효소와의 반응을 위해, 시험용액의 다음 농도가 유용한 것으로 입증되었다.
아닐린 유도체 0.05-100mmol/l., 바람직하게는 0.1-1mmol/l.
커플링 성분 0.05-50mmol/l., 바람직하게는 0.1-1mmol/l.
완충용액(pH 6-10 바람직하게는 pH 6.5-8)
0.05-1mmol/l., 바람직하게는 0.1-0.5mmol/l.
수화제 0-1.0mmol/l., 바람직하게는 0.05-0.1mmol/l
a. 퍼옥시다아제 1.0-500KU/l/
b. H2O2또는 H2O2-제조기질/효소혼합물 다른 보조제
0.1-10mmol/l., 바람직하게는 1.0-5mmol/l
상기-제시한 농도범위에서, 좀더 낮은 범위는 크벳에서 광도 측정시험을 위해 바람직하고, 좀더 높은 범위는 빠른 시험 또는 고체 담체에서의 시험을 위해 바람직하다.
아미다아제로서 활동하는 효소의 검출을 위해, 상기 제시한 설명에서, 커플링 성분을 펩티드 아미드 기질의 해당하는 양으로 대체될 수 있고, 가능하다면, 과산화수소 대신에 해당하는 야의 다른 산화제가 사용된다.
다음 실시예는 본 발명을 상세히 설명하기 위한 목적으로 제시된다.
[실시예 1]
1.1 교반하면서, N-메틸아닐린 21.4g과 디에틸 포스파이트 27.6g의 혼합물을 벤즈 알데히드 21.6g과 90℃에서 혼합한다. 반응 혼합물 90℃에서 1시간동안 유지한 후 진공하에 증발건조시킨다. 조 생성물(crude product)은 1.5리터(1)의 실리카겔상에 용리제로 리그로인/아세톤(3 : 1v/v)을 사용하여 크로마토그래피시킨다. 생성물을 함유하는 분액을 응축 및 증발한다. 25g(이론치의 38%)의 유상 α-(N-메틸아닐리노)-벤질포스폰산 디에틸에스테르를 얻는다.
1.2 3.3g의 α-(N-메틸아닐리노)-벤질포스폰산 디에틸에스테르를 건조 염화 메틸렌 60ml로 용해하고 트리메틸실릴브로마이드 7.92ml을 한방울씩 가한다. 반응 혼합물을 하룻밤동안 방치한후 증발 건조시킨다. 잔류물을 디에틸 에테르와 함께 교반한후 1.85g의 조생성물을 감압 여과한다. 이것을 물과 소량의 염산중에 용해시킨다. 수용액을 디에틸 에테르로 추출하며, 황성탄으로 처리하고 증발 건조한다. 잔류물을 디에틸 에테르로 씻고, 침전물을 감압 여과하여 건조시킨다. 1.1g(이론치의 31%)의 α-(N-메틸아닐리노)-벤질 포스폰산 히드로브로마이드를 얻는다 :
m.p. 142-146℃
[실시예 2]
2.1 N,N-디메틸아닐린 71.6g을 2% 수산화칼륨 메탄올 용액 800ml에 용해시키고 유리 비이커에서 25시간동안 1.5A로 전기 분해한다. 양극은 백금 메쉬(약 50cm2)로 이루어지고 음극은 스테인레스강 메쉬(mesh)로 이루어진다. 반응 혼합물을 증발 건조시키고 잔류물을 디에틸 에테르에 용해시킨다. 불용성 잔류물을 여과해내고 에테르상을 증발시킨다. 잔류하는 오일은 진공하에 증류한다. 비그럭스 컬럼(Vigreux column)을 통해 두번 증류한 후, 24.3g(이론치의 27%)의 N-메톡시메틸-N-메틸아닐린을 얻는다 ;
b.p. 88-89℃./7mm.Hg.
2.2 교반하면서, N-메톡시메틸-N-메틸아닐린 5ml와 트리메틸 포스파이트 4.6ml를 교반기, 적하 깔대기 및 증류 브리지(bridge)를 장치한 삼구 플라스크에서 135℃로 가열한다. 여기에 아세트산 1.4ml를 1시간에 걸쳐 부분적으로 한방울씩 가하고, 반응 혼합물을 한시간 동안 더 교반한 후 높은 진공하에 반응 혼합물을 증류한다. 4.4g(이론치의 58%)의 유상(N-메틸 아닐리노)-메탄 포스폰산 디메틸 에스테르를 얻는다 :
b.p. 126-128℃./0.1mm.Hg.
2.3 4.2g의 (N-메틸아닐리노)-메탄포스폰산 디메틸 에스테르를 진한 염산 15ml로서 4시간동안 환류하에 비등시킨다. 반응 혼합물을 증발 건조시키며, 잔류물을 뜨거운 에탄올 10ml에 용해한 후 어느정도 냉각된 혼합물을 디메틸 에테르와 혼합한다. 침점된 결정체는 감압하에서 여과해내고 건조시킨다. 3.03g(이론치의 78%)의 (N-메틸아닐리노)-메탄포스폰산 히드로클로라이드를 얻는다 :
m.p. 166-168℃.(분해).
[실시예 3]
다음〈표 1〉에 기술된 아닐리노포스폰산을 실시예 2와 유사하게 제조한다. 다음〈표 2〉는 출발물질로서 합성된 N-메톡시메틸-N-메틸아닐린을 포함하고 다음〈표 3〉은 상기로부터 제조한 아닐리노포스폰산 에스테르를 기술한다.
[표 1]
Figure kpo00012
* 화합물은 물을 사용하여 H+-형태의 도웩스(Dowex) 50상에서 크로마토그래피 정제하고 이소프로판을 물에서 재결정화시킨다.
[표 2]
Figure kpo00013
[표 3]
Figure kpo00014
* 실리카겔 상에서 크로마토그래피 정제
융리제 : 에틸 아세테이트 ±10% 에탄올
[실시예 4]
4.1 N-에틸아닐린 60.5g과 파라포름알데히드 15g을 벤젠 100ml와 에탄올 50ml중에 용해시키고 물 분리기에서 4시간동안 비등시킨다. 이어서 용액을 증발 건조시키고 잔류물을 분별 증류한다. 주분액으로, 49.8g(이론치의 56%)의 N-에틸-N-에톡시메틸-아닐린을 얻는다 :
b.p. 77-80℃./1mm.Hg
4.2 N-에틸-N-에톡시메틸아닐린을 실시예 2.2와 유사하게 트리메틸 포스파이트와 반응시킨다. 압도적으로 존재하는 디메틸 포스폰산 에스테르외에도, 에스테르 교환에 기인한 소량의 디에틸 및 에틸 메틸 에스테르 역시 함유하는 에스테르 혼합물을 얻는다 : b.p. 139.5-141.5℃./0.2mm.Hg. 실시예 2.3와 유사하게 진한 염산으로 비누화하여, (N-에틸아닐리노)-메탄-포스폰산 히드로클로라이트를 얻는다.
m.p. 105-110℃.(분해).
[실시예 5]
실시예 4와 유사하게, 다음의 (표 4)에 적혀있는 포스폰산(R=PO(OH)2)를 얻는다. 더나아가, (표 4)는 중간체로 제조한 알콕시메틸아민(R=-CH2-O-알킬)과 그것으로 제조한 포스폰산 다알킬 에스테르(R=PO(O-알킬)2)를 포함한다. 독립적인 포스폰산 에스테르(cf. (표 4)에서 제시)는 실시예 1.2와 유사하게 트리메틸실릴 브로마이드로 분리한다. 화합물 3-8을 제조할 경우에 있어서는, 트리에틸 포스파이트가 사용된다.
[표 4]
Figure kpo00015
.
Figure kpo00016
a) 실리카겔상에서 크로마토그래피 정제
용리제 : 에틸아세테이트 +2-10% 에탄올.
b) 인산은 트리메틸브로모실란으로 에스테르를 분열하여 상응하는 다알킬 에스테르로부터 얻는다(실시예 1,2와 유사)
c) 인산은 용리제로 물을 사용하여 강한 산성이온교환기 도웩스 50H+-형태상에서 크로마토그래피 정제한다.
[실시예 6]
실시예 2와 유사하게, N,N-디메틸-1-나프틸아민으로부터 N-메톡시메틸화합물을 얻고, 이를 트리메틸포스파이트와 반응시키고, 용리제로 리그로인/아세톤(3 : 1v/v)을 사용하여 실리카겔상에서 크로마토그래피 정제한 유상의 N-메틸-1-나트탈아미노메탄포스폰산 디메틸 에스테르를 얻는다. 이러한 에스테르를 진한 염산으로 비등시킴으로써 비누화 반응시켜 N-메틸-1-나프틸아미노-메탄포스폰산- 하이드로클로라이드를 얻는다 ;
m.p. 78-80°(분해).
[실시예 7]
7.1 실시예 2.2와 유사하게, 18g의 3-페닐옥사졸리딘을 빙초산의 존재하에서 트리메틸 포스파이트와 반응시킨다. 조생성물은 용리제로 리그로인/에탄올 (80 : 20-70 : 30v/v)을 사용하여 실리카겔상에서 크로마토그래피 정제한다. 다음과 같은 구조를 가지는 15g의 유상 생성물을 얻는다 ;
Figure kpo00017
7.2 상기에 얻어진 2.3g의 화합물을 60ml의 건조메틸렌 클로라이드중에 용해시키고, 교반하면서, 7.9ml의 트리메틸실릴브로마이드와 혼합한다. 하룻밤이상 방치시킨후, 반응혼합물을 60ml의 진한 암모니아 용액과 혼합한다. 1시간동안 교반을 지속하면서, 증발 건조시킨다. 잔류물은 진한 염산을 첨가하여 에탄올에 용해시킨다. 그 용액을 프로필렌 옥사이드와 혼합하고 얻어진 침전물을 감압하에서 여과해낸다. 0.85g(이론치의 40%)의 N-(2-아미노에틸)-아닐리노메탄-포스폰산을 얻는다 ;
m.p. 280-285℃(분해).
[실시예 8]
18.3g의 N-메틸아닐리노메탄포스폰산 디메틸 에스테르(실시예 2.2로부터 수득)를 건조 디에틸 에테르 100ml에 용해하고 -70℃까지 냉각한다. 54ml의 n-부틸리튬(15% 헥산)을 질소대기하에 한방울씩 부가한다. 반응혼합물을 -70℃애서 2시간동안 교반하며, 디에틸 에테르 20ml에 녹인 요오드화 메틸 4.9ml의 용액과 혼합하며, -70℃에서 2시간동안 더욱더 교반하며, 주변 온도에서 하룻밤이상 방치시키고 20ml의 물과 함께 교반한다. 유기상을 분리하며, 건조 및 증발시킨다. 나머지 오일은 용리제로 에틸 아세테이트/에탄올(98 : 2v/v)을 사용하여 실리카겔상에서 크로마토그래피시킨다. 2.15g의 유상 1-(N-메틸아닐리노)-에탄-포스폰산 디메틸 에스테르를 얻는다. 이 에스테르를 실시예 1.2와 유사하게 트리메틸 브로모실란으로 분열했다. 조생성물은 용리제로서 n-프로파놀/물/암모니아(6 : 3 : 1v/v/v)를 사용해 실리카겔상으로 크로마토그래피한다. 생성물을 함유하는 분액을 배합하고, 암모니아 이온을 제거하기 위해, H 형태의 산성이온 교환기 도웩스 50에 가한다. 물로서 용리하고 용리제를 증발시켜, 0.5g의 유리질의 생성물을 얻고 이것을 아세톤/디에틸 에테르에서 재결정화시켜 정제한다. 0.27g의 1-N-(2-메틸아닐리노)-에탄포스폰산을 마지막으로 얻는다.
m.p. 103-106℃(분해).
[실시예 9]
실시예 7.1에서 얻어진 3.5g의 화합물을 진한 염산 25ml와 함께 환류하에 5시간동안 가열한다. 반응혼합물을 증발시키고 용리제로서 n-프로파놀/물/암모니아 (6 : 3 : 1v/v/v)를 사용해 실리카겔상에서 크로마토그래피시킨다. 생성물을 함유하는 분액을 배합하고 증발시키고, 암모니아 이온을 제거하기위해, 잔류물은 H+형태의 도웩스 50상에서 물을 용리제로 사용하여 크로마토그래피시킨다. 침전물분액을 증발시킨후, 유상잔류물을 몇일후 결정화한다. 1.78g(이론치의 50%)의 N-히드록시에틸아닐리노메탄포스폰산을 얻는다 :
m.p. 120-121℃(분해).
[실시예 10]
실시예 2.2와 유사하게, N,N-비스(메톡시메틸)-아닐린을 2mole의 트리메틸 포스파이트와 반응시키고 얻어진 비스-포스폰산 디메틸 에스테르를, 실시예 1.2와 유사하게, 트리메틸실릴브로마이트로서 비누화 반응시킨다. 정제하기위해, 조생성물은 강한 산성이온 교환기(H+형태의 도웩스 50) 상에서 물을 사용하여 크로마토그래피한다. 생성물을 함유하는 분액을 증발시킨후, 유리질의 생성물을 얻어 이것을 아세톤, 디에틸 에테르 및 리그온인의 혼합물과 함께 배산한 후 결정화한다. 페닐이미노디메탄 포스폰산을 얻었다 :
m.p. 130-131℃(분해).
[실시예 11]
11.1 실시예 2.2와 유사하게, 메탄포스폰산 디에틸 에스테르를 100℃의 배드온도로 N-메톡시메틸-N-메틸아닐린과 반응시킨다. 소량의 상응하는 메틸 에스테르를 함유하고 있는 1.65g(이론치의 55%)의 [(N-메틸아닐리노)-메틸]-메틸포스폰산 에틸 에스테르(b.p. 123℃/0.1mm.Hg)를 얻는다.
11.2 상기에 얻어진 2g의 생성물을 8ml의 진한 염산과 함께 환류하에서 4시간동안 가열한다. 혼합물을 증발 건조시키고 잔류물을 에탄올/디에틸 에테르에서 재결정화한다. 1.98g(이론치의 95%)의 [(N-메틸-아닐리노)-메틸]-메틸포스폰산 히드로클로라이드를 얻는다 ;
m.p. 166-168(분해).
[실시예 12]
4.5g의 (N-메틸아닐리노)-메탄포스폰산 디메틸에스테르를 20ml의 메틸 에틸 케톤에 용해시키고 3g의 요오드화 나트륨과 혼합한다. 혼합물을 30분간 환류하에 가열하며, 냉각하고 디에틸 에테르와 혼합한다. 얻어진 침전물을 여과해내고 에탄올/디에틸 에테르에서 재결정화시킨다. 추가의 정제를 위해, 그 생성물을 용리제로서 에탄올을 사용해 실리카겔상에서 크로마토그래피시킨다. 생성물을 함유하는 분액을 증발시키고 잔류물을 에탄올/디에틸 에테르에서 재결정화시킨다. 180℃이상으로 가열할 때 분해되는, 0.71g(이론치의 15%)의 (N-메틸아닐리노)-메탄포스폰산 모노메틸 에스테르를 얻는다.
[실시예 13]
실시예 7에서 얻어진 1.5g의 (N-(2-아미노에틸)-아닐리노)-메탄-포스폰산을 물 4ml와 2N 수산화칼륨 수용액 6ml에 용해시킨다. 이 용액을 소량의 빙초산과 혼탁이 생길때까지 혼합한다. 그 다음에, 거기에 2ml의 아세트 무수물을 가하며, 혼합물을 주변온도에서 2시간동안 교반한 후 용액을 증발시킨다. 잔류물을 H+형태의 20ml의 도웩스 50상에서 물을 사용하여 크로마토그래피시킨다. 생성물을 함유하는 분액을 배합하고 증발시킨다. 잔류물을 에탄올/디에틸 에테르에서 재결정화시킨다. 1.25g(이론치의 71%)(N-(2-아세트아미도에틸)-아닐리노)-메탄포스폰산을 얻는다;
m.p. 117-118℃(분해).
[실시예 14]
14.1 19.85g의 숙신이미드, 16.21ml의 37% 포름알데히드 수용액 및 150ml의 에탄올을 45분간 환류하에 가열한다. 혼합물을 어느정도로 냉각시키며, 거기에 에탄올 50ml에 녹인 메틸-3-아미노-벤조에이트 30.2g의 용액을 부가하고 반응혼합물을 6시간동안 환류하에 가열한다. 반응용액을 어느정도 증발시키고 냉장고에 방치한다. 침전된 결정체를 감압하에서 여과해낸다. 33.4g의 메틸-3-숙신이미도메틸아미노벤조에이트를 얻고 이것을 90ml의 디메틸 술폭사이드에 용해시키고 4.75g의 수소화붕소 나트륨 정제와 혼합한다. 정제를 용해시킨 후, 혼합물을 40분내에 100℃까지 가열한다. 이어서 혼합물을 얼음물에 따르고 디에틸 에테르로 추출한다. 에테르상을 물 9ml에 녹인 염화아연 9g의 용액과 혼합하고 격렬히 교반시킨다. 수용액상을 분리해내고 에테르상을 물로 씻는다. 15.1g의 유상 메틸 3-N-메틸아미노벤조에이트를 얻는다.
14.2 상기에 얻어진 벤조상 에스테르를, 실시예 4와 유사하게, 파라포름알데히드 및 메탄올과 반응시켜 상응하는 N,O-아세탈을 얻고 이것을, 실시예 2.2와 유사하게, 트리메틸 포스파이트와 반응시켜서 유상의 메틸 3-(N-디메톡시포스포노메틸-N-메틸)-벤조에이트를 얻고, 이를 용리제로서 에틸 아세테이트/1% 에탄올을 사용하여 실리카겔상에서 크로마토그래피 정제한다. 실시예 2.3와 유사하게 상기 에스테르를 비누화 반응시켜 3-(N-디히드록시포스포노메틸-N-메틸)-벤조산을 얻는다;
m.p. 189-191℃(분해).
[실시예 15]
수용액중에서 과산화수소의 측정.
용액 A. 0.05mol/l. SMBTH(1)
0.5mmol/l. 아닐린 유도체
500KU/l. 퍼옥시다아제
0.1mol/l. 인산염 완충액(pH=8.0)
용액 B. 0.05mol/l. MBTH(2)
0.5mmol/l. 아닐린 유도체
500KU/l. 퍼옥시다아제
0.1mol/l. 인산염 완충액(pH=8.0)
용액 C. 0.05mol/l. 4-AAP(3)
0.5mmol/l. 아닐린 유도체
500KU/l. 퍼옥시다아제
0.1mol/l. 인산염 완충액(pH=8.0)
(1)=3-메틸-2-벤즈티아졸리논 히드라존-6-술폰산
(2)=3-메틸-2-벤즈티아졸리논 히드라존
(3)=4-아미노안티피리딘
600㎕의 인산염 완충액(pH 8)을 1cm의 크벳에 위치시키고, 각각의 경우에서, 거기에다 100㎕의 아닐린 유도체, 퍼옥시다아제 및 결합제 함유용액을 가한다. 에펜도르프(Eppendorf) 광도계에서 블랭크 치(blank value)를 조절한 후, 거긱에 100㎕의 과산화수소 보존(stock)용액 (CH202
Figure kpo00018
5×10-5mol/l)을 가하고, 2 또는 5분후에, 흡광을 λmax에서 측정한다. 다음의 표 5에 기술된 흡광을 측정하며, 아닐린 유도체 8-10은 비교용으로 제시된다. 본 발명의 아닐리노포스폰산 유도체가 본 발명에 따른 용도로 지금까지 사용되어진 또 다른 산성그룹-함유 아닐린의 흡광에 비해 2 내지 3배 더 높은 흡광을 보인다는 것을 알 수 있다.
[표 5]
Figure kpo00019
사용된 아닐린 유도체의 화합물명
1. (N-메틸아닐리노)-메탄포스폰산
2. (4-플루오로-N-메틸아닐리노)-메탄포스폰산
3. (3-메틸-N-메틸아닐리노)-메탄포스폰산
4. (4-플루오로-3-메틸-N-메틸아닐리노)-메탄포스폰산
5. (N-에틸-4-플루오로아닐리노)-메탄포스폰산
6. 1,2,3,4-테트라히드로퀴놀리닐-N-메탄포스폰산
7. 6-플루오로-1,2,3,4-테트라히드로퀴놀린-N-메탄포스폰산
8. (3-메틸-N-에틸아닐리노)-에탄술폰산
9. 4-(N-에틸-3-메틸아닐리노)-메탄벤조산
10. 소듐 비스-(3-메틸페닐이미노)-프로피온에이트
11. 4-(비스-(3-메틸페닐이미노)-메틸벤조산
12. N-히드록시에틸-1,2,3,4-테트라히드로퀴놀린
[실시예 16]
혈청장해의 측정
용액 A. 0.05mol/l. SMBTH(1)
0.5mmol/l. 아닐린 유도체*
500KU/l. 퍼옥시다아제
0.1mmol/l. 인산염 완충용액
용액 B. 0.05mol/l. SMBTH(2)
0.5mmol/l. 아닐린 유도체*
500KU/l. 퍼옥시다아제
인혈청
*=인산염 완충용액(0.1mmol/l; pH=8.0)에 용해
(1)=3-메틸-2-벤즈티아졸론 히드라존-6-술폰산
혈청측정은 실시예 15에 기술된대로 A을 사용하여 한다.
용액 B의 경우에 있어서는, 600 1의 인산염 완충용액을 인혈청으로 대체한다.
2와 5분후의 양쪽의 경우에서 얻어진 흡광치는 다음(표 6)에 비교하였다.
[표 6]
Figure kpo00020
* 아닐린 유도체는 상기에 기술되었다.
[실시예 17]
혈청중의 트리글리세리드의 측정
검출에 대해 필요한 시약을 필름 코우팅 덩어리에 혼합시킨다 ;
인산염 완충용액(pH 8.0) 0.2mol l.
청전제(지방 알콜 플리글리콜 에테르) 0.5%
SMBTH 0.2mmol/l.
(N-에틸-4-플루오로아닐린)-메탄-포스폰산 1mmol/l.
글리세롤 포스페이트 옥시다아제 1KU/l.
글리세롤 키나아제 3KU/l.
콜레스테롤 에스트라아제 3KU/l.
포옥시다아제 10KU/l.
코우팅 덩어리를 200μm의 두께인 포칼론(Pokalon) 필름에 적용한다. 필름형성을 위해, 코우팅된 필름을 건조 캐비넷속에서 약 30분간 45℃로 건조시킨다.
트리글리세리드 농도의 측정을 위해, 10㎕의 혈청을 필름에 적용한다. 37℃에서 2-3분간 반응시킨 후, 광도계로 경감을 측정한다. 트리그리세리드 농도를 이전에 만든 검정곡선(calibration curve)을 사용해 정확히 계산할 수 있다.
다음에 따르는(표 7)에 있어서, 검정곡선의 수치가 트리글리세리드 농도를 측정하기 위해 제시된다 :
[표 7]
Figure kpo00021
[실시예 18]
혈청중의 크레아티닌의 측정
흡수운반체(예를 들어 Scholler과 Hosch 회사의 스텐실 페이퍼(stencil paper); 12g/m2의 단위 표면적 당중량; 50ml/m2의 흡수기능)를 0.2몰의 인산염 완충용액(pH 7.0)에 용해시킨 300KU/l의 포옥시다아제와 20mmol/l의 1,2,3,4-테트라히드로퀴놀리닐메탄포스폰산으로 이루어지는 용액으로 포화시키고 건조(시약 페이퍼 A)시킨다. 시약 페이퍼 B는 상기 페이퍼를 사르코신옥시다아제 20KU/l, 크레아틴아미디노히드롤라아제 30KU/l, 크레아티닌아미도히드롤아제 40KU/l 및 술폰화된 메틸벤즈티아졸리논 히드라존 (SMBTH) 100mmol으로 구성되는 포화용액뿐만 아니라 0.2몰의 인산염 완충용액에 용해된 0.1% 청정제(지방 알코올 글리콜 에테르)에 포화시킴으로써 제조한다음 건조시킨다. 크레아티닌을 검출하기위해, 두 개의 시약 페이퍼 A와 B를 첨부한 도면에 나타낸 시험장치내로 혼입한다.
크레아티닌을 검출하기위해, 30㎕의 혈청을 투약영역상에 피펫으로 옮긴다. 반응은 지시약과 효소 페이퍼를 수송영역상에 압착시키므로서 시작된다. 1분간 37℃로 반응시킨후 형성된 색상으로 광학적인 경감을 측정한다. 크레아티닌 농도는 적절한 검정곡선에 의해 측정한다.
[표 8]
Figure kpo00022
광도계에서 퀴크(Quick)의 방법에 따른 제1단계 응고시간의 측정
다음과 같은 조성물의 용액 1200㎕를 피펫을 사용하여 크벳속으로 옮긴다 : 100mmol/l의 트리스/Hcl 환충용액(pH 8.1) 6mmol/l의 염화칼슘, 0.1mmol/l 의 Tos-Gly-Arg-p-페닐렌디아민, 5mmol/l의 N-메틸-N-(4-메틸페닐)-메틸렌-포스폰산 및 1.2mg/ml의 토끼뇌 토름브풀라스틴. 이러한 용액을 37℃의 온도에 맞춘다. 여기에 100㎕의 시트르산염 혈장과 100㎕의 10mol/l 육시아노철(III) 칼륨수용액을 일제히 피펫으로 옮기며, 잘 혼합하고, 시료의 부가와 더불어 동시에 출발한 기록계의 수단으로, 흡광의 증가를 670nm의 파장에서 시간에 따라 청취한다.
측정치로서, 0.1의 흡광변화가 달성될때까지 반응의 출발에서부터 끝난시간을 잰다. 상술한 방법에 따라 얻어진 함수곡선은 다음의 표 9에 기술하였다.
[표 9]
Figure kpo00023

Claims (4)

  1. a) 다음 일반식(VI)의 1차 또는 2차 아민 및 알데히드 또는 해당하는 쉬프염기(Schiff base)를 다알킬 포스파이트 또는 디알킬 에스테르와 반응시키거나 : 또는 b) 산촉매의 존재하에서 다음 일반식(II)의 N,O-아세탈 또는 고리형 N,O-아세탈 또는 다음 일반식(VI)의 N-아릴옥사졸리딘을 트리알킬 포스파이트 또는 다음 일반식(III)의 포스폰산 디알킬에스테르와 반응시켜 R1이 수소원자인 일반식(I)의 포스폰산 에스테르를 형성하거나 : 또는 c)일반식(VI)의 아닐린을 다음 일반식(V)의 포스폰산 에스테르와 반응시키거나 : 또는 d) R5가 수소원자이고 및/또는 R가 히드록실기인 일반식(I)의 아미노알킬포스폰산 에스테르를 강염기와 더불어 알킬화제로 알킬화시킴을 특징으로 하는 다음 일반식(I')의 아닐린 유도체 및 그의 산 및 염기부가염의 제조방법 :
    Figure kpo00024
    Figure kpo00025
    상기식에서, R1은 수소원자 또는 저급알킬 또는 아릴기이고, R2는 수소원자 ; 또는 히드록실, 아미노, 키르복실, 저급 알콕시 카르보닐, 저급 알카노일아미노, 아릴저급알킬 또는 아릴기 또는 식
    Figure kpo00026
    (식중, R'6은 하기에 정의한 바와 같음)의 기로 치환될 수 있는 저급알킬기이고, R3는 수소원자, 할로겐원자 또는 카르복실기이고, R4및 R'4은 같거나 또는 다를수 있고, 수소원자, 할로겐원자, 카르복실기 또는 저급알콕시기 또는 저급알킬기로 바람직하게는 m-위치에 치환되고, 두개의 치환체가 서로 오르토위치일 때 R1및 R2, R2및 R4또는 R4및 R'4은 함께 히드록실 또는 옥소기로 치환될 수 있는 C2-C6의 포화 또는 불포화 탄화수소쇄를 형성할 수 있고, R'6은 히드록실기, 저급알킬기 또는 아릴기이고, R7은 저급알킬기이고, R5은 저급알킬기이고, R6은 저급알킬 또는 아릴기이며, X는 브롬, 요오드, 토실옥시, 벤젠 술포닐옥시 또는 메탄술포닐 옥시기이다.
  2. 0.05 내지 100mmol/l의 하기 일반식(I)의 아닐린 유도체와 0.05 내지 50mmol/l의 커플링 성분, 0.05 내지 1mmol/l의 pH 6-10 범위를 갖는 완충용액, 1.0 내지 500KU/l의 포옥시다아제등 제제에 적합한 보조제로 구성됨을 특징으로 하는 산화환원계 검출용 조성물 ;
    Figure kpo00027
    [상기식에서, R1은 수소원자 또는 C1-C6알킬, C1-C6아릴 또는 C1-C6알킬기로 치환된 C6-C10아릴기이고, R2는 수소원자 C1-C6알킬 또는 히드록실, 아미노, 카르복실, 저급 알콕시카르보닐, 저급 알카노일아미도, C1-C6알킬 또는 C6-C10아릴로 치환된 C6-C10아릴 또는 하기의 식
    Figure kpo00028
    (식중, R5및 R6은 하기에 정의한 바와 같음)의 기로 치환될 수 있는 C1-C6알킬기이고, R3는 수소원자, 불소, 염소, 브롬, 요오드 또는 카르복실기이고, R4및 R'4은 같거나 다를 수 있고, 수소원자, 불소, 염소, 브롬, 요오드, 카르복실기, C1-C6알콕시 또는 C6-C10알킬기이며, R5는 수소원자 또는 C1-C6알킬기이며, R6는 히드록실기, C1-C6알콕시기, C1-C6알킬기, C6-C10아릴 또는 C1-C6알킬기로 치환된 C6-C10아릴기이다.]
  3. 제2항에 있어서, 상기 아닐린 유도체가 (N-메틸아닐리노)-메탄포스폰산, (4-플루오르-N-메틸아닐리노)-메탄포스폰산, (3-메틸-N-메틸아닐리노)-메탄포스폰산, (4-플루오로-3-메틸-N-메틸아닐리노)-메탄포스폰산, (N-에틸-4-플루오로아닐리노)-메탄포스폰산, 1,2,3,4-테트라히드로퀴놀리닐-N-메탄포스폰산, 6-플루오로-1,2,3,4-테트라히드로퀴놀리닐-N-메탄포스폰산, (3-메틸-N-에틸아닐리노)-에탄술폰산, 4-(N-에틸-3-메틸아닐리노)-메틸벤조산, 비스-(3-메틸페닐아미노)-프로피온산 나트륨염, 4-비스-(3-메틸페닐아미노)-메틸벤조산 또는 N-히드록시에틸-1,2,3,4-테트라히드로퀴놀린인 산화환원계 겸출용 조성물.
  4. 제2항에 있어서, 상기 커플링 성분이 3-메틸-2-벤즈티아졸리논 히드라존-6-술폰산, 3-메틸-2-벤즈티아졸리논히드라존 또는 4-아미노안티피리딘인 산화환원계 검출용 조성물.
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Families Citing this family (18)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE3433946A1 (de) * 1984-09-15 1986-03-27 Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim Mittel und verfahren zum nachweis von wasserstoffperoxid
US5432285A (en) * 1988-11-03 1995-07-11 Theodoropulos; Spyros Chromogenic substrate to peroxidase enzymes
US4859607A (en) * 1989-01-17 1989-08-22 Kansas State University Research Foundation Colorimetric detector for ozone and method of preparation
DE3942357A1 (de) * 1989-12-21 1991-06-27 Boehringer Mannheim Gmbh 3-aminopyrazolo-heterocyclen, deren verwendung zur bestimmung von wasserstoffperoxid, wasserstoffperoxid-bildenden systemen, peroxidase, peroxidatisch wirksamen substanzen oder von elektronenreichen aromatischen verbindungen, entsprechende bestimmungsverfahren und hierfuer geeignete mittel
US5518891A (en) * 1993-03-25 1996-05-21 Actimed Laboratories, Inc. Dye forming composition and detection of hydrogen peroxide therewith
US5447868A (en) * 1993-09-14 1995-09-05 Propper Manufacturing Co. Inc. Method, reagent and kit for the detection of fecal occult blood
US5563031A (en) * 1994-09-08 1996-10-08 Lifescan, Inc. Highly stable oxidative coupling dye for spectrophotometric determination of analytes
DE19506262A1 (de) * 1995-02-23 1996-08-29 Behringwerke Ag Störungsvermindertes Redox-Nachweissystem
US20020098509A1 (en) * 1995-04-13 2002-07-25 Heike Jurgens Method for the quantitative determination of reversible acting inhibitors of the oxidoreductases
JP3236199B2 (ja) * 1995-08-25 2001-12-10 日本電気株式会社 平面光導波路型バイオケミカルセンサ
US6040151A (en) 1998-03-10 2000-03-21 Mercury Diagnostics, Inc. Diagnostic compositions and devices utilizing same
US5989845A (en) * 1996-04-05 1999-11-23 Mercury Diagnostics, Inc. Diagnostic compositions and devices utilizing same
US5776719A (en) * 1997-07-07 1998-07-07 Mercury Diagnostics, Inc. Diagnostic compositions and devices utilizing same
EP1802649B1 (en) * 2004-10-12 2011-01-19 F. Hoffmann-La Roche AG Solid phase peptide sythesis
US20080166792A1 (en) * 2007-01-05 2008-07-10 Attar Amir J Detection of analytes in materials liquids using capillary colorimetric detection
CN106018373B (zh) * 2016-07-19 2018-06-08 济南大学 三维金属增强荧光/比色双模纸芯片的制备及atp检测
CN112161972B (zh) * 2020-08-14 2021-04-20 大连理工大学 一种快速分级定量检测酸性溶液中芳伯胺含量的检测试纸组及其应用
CN113418916A (zh) * 2021-07-02 2021-09-21 安徽惠邦生物工程有限公司 肌酐定量快速检测试纸条及其制备方法

Family Cites Families (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE303734C (ko) *
GB1392044A (en) * 1971-06-26 1975-04-23 Ciba Geigy Ag Corrosion inhibiting composition
GB1392043A (en) * 1971-06-26 1975-04-23 Ciba Geigy Ag Corrosion inhibitor
USRE29498E (en) * 1972-05-12 1977-12-20 Istituto Sieroterapico e Vaccinogeno Toscano "SCLAVO", S.p.A. Process for the enzymatic determination of glucose with a glucose-oxydazed/peroxidazed enzyme system
JPS5425892A (en) * 1977-07-29 1979-02-27 Wako Pure Chem Ind Ltd Quantitative determination of hydrogen peroxide
JPS5520471A (en) * 1978-08-01 1980-02-13 Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd Hydrogen peroxide quantifying method
US4247631A (en) * 1979-01-31 1981-01-27 Millipore Corporation Reagent and method for the analytic determination of hydrogen peroxide
DE3037342A1 (de) * 1980-01-09 1981-07-16 Dojindo Laboratories, Kumamotoshi N-sulfoalkylanilinderivate und ihre verwendung
JPS57142562A (en) * 1981-02-27 1982-09-03 Fuji Photo Film Co Ltd Quantitative analysis film and colorimetric quantitative analysis
DE3124594A1 (de) * 1981-06-23 1983-01-05 Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim Mittel und verfahren zum nachweis von wasserstoffperoxid
JPS5856695A (ja) * 1981-09-28 1983-04-04 Nitto Boseki Co Ltd 新規なトロンビン測定用基質
US4588836A (en) * 1982-09-01 1986-05-13 Toyo Jozo Kabushiki Kaisha Novel synthetic substrate and assay method using the same
DE3234478A1 (de) * 1982-09-17 1984-03-22 Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim Reagenz und verfahren zur bestimmung von (gamma)-glutamyltransferase
DE3433946A1 (de) * 1984-09-15 1986-03-27 Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim Mittel und verfahren zum nachweis von wasserstoffperoxid

Also Published As

Publication number Publication date
DE3433946A1 (de) 1986-03-27
DE3577580D1 (de) 1990-06-13
ATE52544T1 (de) 1990-05-15
ZA857017B (en) 1986-09-24
JPH0827274B2 (ja) 1996-03-21
ES8604983A1 (es) 1986-03-16
JPH05312798A (ja) 1993-11-22
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