KR900006235B1

KR900006235B1 - 4'-데스히드록시에피포도필로톡신 배당체 및 그 합성방법 및 그 용도

Info

Publication number: KR900006235B1
Application number: KR1019880010570A
Authority: KR
Inventors: 지. 솔니에르 마아크; 엠. 비아스 돌라트라이
Original assignee: 브리스톨-마이어즈 스퀴브 컴페니; 아이삭 스퀴브 자아코브스키
Priority date: 1987-08-20
Filing date: 1988-08-19
Publication date: 1990-08-27
Also published as: PT88312A; GR3006943T3; NO167206C; FI88167B; FI88167C; DE3877658T2; DK467288D0; EP0304086A3; NO883703D0; NO883703L; ZA884070B; IL87475A0; FI883812A0; DK467288A; NO167206B; ATE84792T1; IL87475A; PT88312B; JPS6468394A; US4868291A

Abstract

내용 없음.

Description

4'-데스히드록시에피포도필로톡신 배당체 및 그 합성방법 및 그 용도

본 발명은 신규의 4'-데스히드록시에피포도필로톡신 배당체, 이 신규화합물의 제조방법 및 포유류의 종양 생장을 억제하는데 있어서의 이 화합물의 치료학적 용도에 관한 것이다.

에토포시드(VP-16, Ia)와 데니포시드(VM-26, Ib)는 자연산리그난, 포도필로톡신(II)으로부터 유도된 임상적으로 유효한 항암제이다. 명명 목적을 위한 넘버링 시스템을 다음의 구조식(II)에 나타내었다.

Ia R¹=CH₃, R₂=H

Ib R¹=2-티에닐, R²=H

에토포시드와 테니포시드는 포도필로톡신의 제4위치에서의 에피머인 에피포도필로톡신의 유도체이다. 에토포시드와 테니포시드는 소형 세포 폐암, 비임파성 백혈병 및 비정상피종 고환암을 포함한 여러가지 암의 치료에 있어 활성적이다.

에토포시드와 테니포시드 및 이들의 제조방법이 미국특허 제3,524,844호와 [J.Med.Chem.14(10) : 936-940, 1971]에 기재되어 있다. 이 참고문헌에서 포괄된 화합물에는 R²가 수소이고 R¹이 C₁-C₁₀알킬, C₂-C₁₀알케닐, C₃-C₇시클로알킬, 퓨릴, 티에닐, 피리딜, 피롤릴, C₆-C₁₀아릴 및 C₇-C₁₄아르알킬 중에서 선택되고, 상기 아릴 및 아르알킬 고리는 C₁-C₄알킬, 니트로, 히드록시, C₁-C₄알콕시, C₁-C₄알카노일옥시, 시아노, 아미노, C_l-C₄알킬아미노, 디(C₁-C₄)알킬아미노, 카르복시, C₁-C₄알킬티오, 메르캅토, C₂-C₄알케노일아미노, C_l-C₄알카노일, C₂-C₄알케닐 및 카르바모일 중에서 선택한 하나이상의 치환체를 임의로 가지며 ; 또는 R¹및 R²가 각각 C_l-C₁₀알킬이거나 ; R¹및 R²는 이들이 결합해 있는 탄소원자와 함께 C₅-C₆시클로알킬기를 형성하는 상술한 구조식(I)의 화합물들이 있다.

다음에 나타낸 에토포시드 3',4'-오르토퀴논(IIIa)는 미국특허 제4,609,644호에 기재된 바와같이 에토포시드를 산화시켜 유도한다. 이 퀴논(IIIa)는 쥐의 간과 헬라마이크로좀 단편에 의한 에토포시드의 대사활성화에 있어서 반응성 중간체로 가리켜져 왔으며(Proc.Am.Assc.Cancer Res.24,319,1983) 또한 쥐의 간 마이크로좀에 의한 에토포시드의 대사에 대한 연구 보고서에서도 바이오 알킬화제로 주장되어 왔다. (하임, 엔 ; 네멕, 제이 ; 로만, 제이 ; 시나, 비.케이 1985년 8월 18-22일, 매사츄세츠, 보스턴에서 열린 약리학 및 실험적 치료요법에 관한 아메리칸 소사이어티에서 발표됨). 게다가 에토포시드 또는 테니포시드의 과산화적 활성화는 2가지 대사물을 생성시키는 것으로 보여졌는데 그중 하나는 상응하는 오르토퀴논(III)으로 확인되었다.(하임, 엔, ; 로만, 제이 ; 네멕, 제이 ; 시나, 비.케이.생화학 및 생물물리학 연구 발표논문 135, 215, 1986) 동일한 이 저자들은 이 약제들의 과산화적 활성학 반응이 페녹시 래디칼 중간체를 생성시킴을 보였으며 구조식(III)의 오르토퀴논에 대한 부수적인 O-탈메틸화반응이 에토포시드와 테니포시드의 대사 작용에 있어서 중요한 것이라고 주장하였다. 에토포시드 3',4'-오르토-퀴논(IIIa)은 에토포시드를 전기 화학적으로 산학시켜 생산·분리 및 특징 짖는다.(J.Electroanal.Chem.184 ; 317, 1985 참고)

IIIa, R¹= CH₃, R²= H

4'-데스히드록시에토포시드 아날로그(IVa)는 3',4'-오르토-퀴논(IIIa)를 생산하지 못할 것이므로, 따라서 이것에 의한 모든 생물학적 활성은 DNA 토포이소머라제 II의 저해와 같은 그밖의 대사작용에 의한 것일 것이다. 더우기, 에토포시드와 테니포시드의 제4위치에서의 유리 히드록실기는 DNA 파괴 활성에 필수적인 것으로 여겨져 왔으므로(Biochemistry 23 ; 1183, 1984 참고), 상응하는 4'-데스히드록시아날로그는 DNA의 사슬을 절단시키지는 않을 것으로 기대되며 따라서 생체외 및 생체내에서 항종양 활성을 거의 또는 전혀 나타내지 않을 것이 틀림없다.

놀랍게도, 본 발명자들은 구조식(IV)의 4'-데스히드록시 화합물들을 제조하였으며 이 화합물들이 여러가지 종양계에 대항하여 생체외 및 생체내에서 우수한 항종양 활성을 가진다는 것을 보였다.

본 발명은 다음의 구조식(IV)의 4'-데스히드록시 에피포도필로톡신 유도체에 관한 것이다.

상기 구조식중, R²는 수소이고 R¹은 C₁-C₁₀알킬, C₂-C₁₀알케닐, C₃-C₇시클로알킬, 퓨릴, 티에닐, 피리딜, 피롤릴, C₆-C₁₀아릴 및 C₇-C₁₄아르알킬 중에서 선택되 고, 상기 아릴 및 아르알킬 고리는 C₁-C₄알킬, 니트로, 히드록시, C₁-C₄알콕시, C₁-C₄알카노일옥시, 시아노, 아미노, C_l-C₄알킬아미노, 디(C₁-C₄)알킬아미노, 카르복시, C₁-C₄알킬티오, 메르캅토, C₂-C₄알케노일아미노, C_l-C₄알카노일, C₂-C₄알케닐 및 카르바모일 중에서 선택한 하나 이상의 치환체를 임의로 가지며 ; 또는 R¹및 R²가 각각 C_l-C₁₀알킬이거나 ; R¹및 R²는 이들이 결합해 있는 탄소원자 와 함께 C₅-C₆시클로알킬기를 형성한다.

본 발명의 다른 면에서, 구조식(IV)의 최종생성물의 제조시 유용한 다음의 구조식을 갖는 신규의 중간체들 ; 즉, 구조식(IV)의 화합물의 시스 또는 피크로 락톤 이성체인 다음의 구조식(V)의 화합물들,

구조식(IV)의 화합물의 상응하는 4'-(1-페닐-1H-테트라졸-5-일)-에테르류인 다음의 구조식(IV)의 화합물들,

및 구조식(V)의 중간체들의 상응하는 4'-(1-페닐-1H-테트라졸-5-일)-에테르류인 다음의 구조식(VII)의 화합물들

이 제공되며 상기 구조식(V),(VI) 및 (VⅡ)의 R¹및 R²는 구조식(IV)에서와 같다.

본 발명의 또다른 면은 구조식(IV)의 화합물의 종양 억제유효량과 약리적으로 허용되는 담체로 이루어지는 약리적 조성물을 제공한다.

본 발명의 또 다른 면은 구조식(IV)의 화합물 또는 그의 약리적 조성물의 종양 억제량을 포유류 숙주에게 투여하는 것으로 이루어지는 포유류 숙주에 있어서의 종양 억제법을 제공한다.

본 발명의 화합물들(IV)은 상기 일반식(I)의 출발물질로부터 제조한다. 이 화합물들은 미국특허 제3,524,844호 및 J.Med.Chem.14(10) : 936-940, 1971에 명시되어 있다. 구조식(I)의 바람직한 출발물질, 그에 의한 구조식(IV),(V),(VI) 및 (VⅡ)의 바람직한 화합물들은 R²가 수소이고 R¹은 C₁-C₁₀알킬, 가장바람직하게는 C₁-C₈알킬 ; C₂-C₁₀알케닐, 가장 바람직하게는 C₂-C₈알케닐 ; C₅-C₆시클로알킬 ; 2-퓨릴; 2-티에닐 ; 및 페닐, 페닐(C₁-C₄)알킬; 또는 페닐(C₂-C₄알케닐)래디칼이며 여기서 페닐고리는 할로(콜로로, 브로모, 요오도, 플루오로), C₁-C₄알킬, C₁-C₄알콕시, 히드록시, 니트로 및 아미노중에서 선택된 1가지 이상의 치환제로 일-또는 이치환될 수 있다.

구조식(I)의 가장 바람직한 출발물질과 그에 따라 가장 바람직한 구조식(IV)-(Ⅶ)의 화합물들은 R²가수소이고 R¹이 C₁-C₁₀알킬, 특히 바람직하게는 C₁-C₆알킬, 가장 바람직하게는 메틸 : 페닐 ; 또는 2-티에닐인 화합물들이다. 가장 바람직한 실시예에서는 R²가 수소이고 R¹은 메틸인 화합물, 즉 출발물질이 에토포시드이다.

구조식(IV)의 화합물은 다음의 반응 도식에 의해 제조한다.

다른 한편, 중간체(Ⅶ)를 에피머화시켜 구조식(VI)의 상응하는 트랜스 락톤 에테르를 얻을 수 있으며 이것은 다음 촉매적 수소첨가에 의해 분해되어 목적하는 최종 생성물(IV)를 얻게된다.

세심히 실험하기 위해, 불활성 용매중에서 염기의 존재하에 5-클로로-I-페닐-1H-테트라졸로 구조식(I)의 출발물질을 알킬화시키고, 부수적인 에피머화 반응에 이어, 열역학적으로 보다 안정한 구조식(Ⅶ)의 시스(피크로) 락톤 이성체를 제조한다. 반응조건을 변화시켰음에도 불구하고 구조식(VI)의 목적하는 트랜스 이성체 에테르를 얻기 위해 오직 알킬화 반응만을 달성하는 것은 불가능하였다. 알킬화 반응은 불활성 용매중에서, 바람직하게는 메틸 에틸 케톤, 디베틸포름아미드 또는 그의 혼합물과 같은 불활성 무수 유기 용매중에서 출발물질(I)과 테트라졸 반응물을 거의 같은 몰량, 또는 테트라졸을 약간 더 많이 사용하여 반응시킴으로써 수행한다. 탄산 칼륨과 같은 온화한 염기를 사용하고 예컨대 환류시키면서, 불활성 분위기중에서 가열시키면서 반응을 진행시키는 것이 바람직하다.

피크로 락톤 에테르(Ⅶ)는 목적하는 트랜스 락톤으로 에피머화시킬 수 있으며 이는 다시 촉매적 수소첨가에 의해 쪼개져서 생물 활성적인 화합물(IV)을 얻거나, 또는 다른 한편 에테르(Ⅶ)는 촉매적으로 수소첨가시켜 피크로 락톤 중간체(V)로 되고 이를 에피머화시켜 목적하는 최종 생성물(IV)로 만들 수 있다.

에테르(VI) 또는 (Ⅶ)의 촉매적 수소첨가는 에틸 아세테이트나 메탄올, 또는 이들 불활성 용매의 혼합물과 같은 비환원성 불활성 용매중에서 탄소와 같은 통상적인 담체에 의해 임의로 지지되는 팔라듐과 같은 수소첨가 촉매를 사용하여 수행된다. 수소 첨가는 봄(bomb) 장치내에서 고압(예컨대 1000-1100psi/H₂)으로약 80-100℃의 상승온도에서 수행하는 것이 최상의 방법이다.

에테르(Ⅶ)를 촉매적으로 수소첨가시켜 얻은 피크로 락톤 중간체(V) 또는 출발물질(I)를 알킬화시켜 얻은 피크로 락톤 에테르 중간체는 저온(-78℃에서 -40℃사이), 바람직하게는 약 -78℃에서 테트라히드로퓨란과 같은 불활성 유기용매중에서 피크로 이성체를 반응시킴으로써 에피머화시켜 목적하는 트랜스 락톤이성체로 될 수 있으며 반응중에 칼륨 비스(트리메틸실릴)아미드, 리튬 디이소프로필아미드(LDA) 또는 리튬비스(트리메틸실릴)아미드와 같은 강염기를 사용한다. 얻어진 음이온은 예컨대 (1)-타르타르산, 초사 등과 같은 산으로 누그러뜨려 상응하는 트랜스 락톤 이성체를 생성시킨다. 에피머화 반응은 피크로 및 트랜스이성체의 혼합물을 생성시키며 이 혼합물은 HPLC 또는 예비 TLC와 같은 통상적인 방법에 의해 분리시켜 순수한 트랜스 이성체를 얻을 수 있다.

실시예 4의 화합물을 이식 가능한 쥐의 P388 백혈병에 대해서 뿐만 아니라, 인체 및 쥐의 종양 세포주에 대한 생체의 세포독성 분석에서 그의 항종양 활성을 평가하였다.

[세포독성 분석]

생체의 세포독성 분석은 확립된 조직 배양법을 이용하여 마이크로타이터판 상의 인체 종양 세포를 포함하여 여러가지의 생육중인 포유류 종양 세포에 대한 행하였다. 그다음 세포생육을 50%까지 억제하는 데 필요한 각 화합물의 농도(IC₅₀)를 4배 연속 희석 기법으로 측정하였다. 이 방법의 타당성은 "미국 암연구회 회보" 1984, 25 : 1891(초록 제328호)에서 간행된 보고서에 의해 지지되어 왔다. 다음의 타잎의 종양 세포를 이용하였다. B16-F10 쥐의 색소 세포종, 모저 인체 결장, 테니포시드(VM)와 에토포시드(VP)에 대해 내성인 SW900 인체페 및 3가지 인체 결장 종양 세포, 즉 HCT-116, HCT-VM 및 HCT-VP, 후자의 2가지는 테니포시드(VM)와 에토포시드(VP)에 대해 각각 내성이다. IC₅₀가 500mg/ml미만인 것은 항종양활성의 긍정적인 표시이다. 표 I에 상술한 세포주에 대한 IC₅₀가를 나타냈다.

[표 1]

* 테스트 화합물은 DMSO에 용해시킨 실시예 4의 화합물임

(P388 백혈병)

쥐의 P388 백혈병의 10⁶개의 복수세포를 CDF₁암컷쥐의 복강내로 종양 접종하고 실시예 4의 화합물을 투여량을 달리하여 처리하고, 4마리는 각 투여 레벨에 대해 사용하였으며 10마리는 식염수 처리한 대조군으로 사용하였다. 화합물을 제1일과 제5일에 걸쳐 2회 복강내 주사시켜 투여하였다. 항종양 활성은 약물처리군의 평균 생존시간(MST)대 식염수 처리군의 MST의 비율인 %T/C로 나타내었다. %T/C가 125이상인 화합물은 일반적으로 P388 검사에서 커다란 항종양 활성을 갖는 것으로 고려된다. 실험은 31일 동안 계속하였고 실험 마지막날 생존 마릿수를 기록했다. 표 II는 P388 검사결과를 나타내며 ; 오직 최대 %T/C와 최대 효과를 보이는 투여량만을 기록했다.

[표 2]

* 물, 카르복시베딜셀룰로스 및 트윈-80에 용해

* 제31일에는 약물 처리군과 대조군에서 어느 쥐도 살아남지 못했다.

상술한 결과로부터 구조식(IV)의 화합물이 포유류의 종양에 대해 효과적인 억제 활성을 갖는다는 것이 명확히 드러난다. 따라서 본 발명은 구조식(IV)의 화합물의 효과적인 종양 억제 투여량을 종양이 있는 숙주에게 투여하는 것으로 이루어지는 포유류의 종양 억제법을 제공한다.

본 발명의 또다른 면은 구조식(IV)의 항종양 화합물의 유효한 종양 억제량과 약리적으로 허용되는 담체로 이루어진 약리적 조성물을 제공한다. 이 조성물들은 요구되는 투여 경로에 적합한 어떠한 약리적 형태로도 만들어질 수 있다. 이러한 조성물의 예로는 정제, 캡슐제, 알약, 분말제 및 과립제와 같은 경우 투여용 고상 조성물, 용액제, 현탁액, 유제 또는 엘릭시르제와 같은 경규투여용 액상 조성물 및 멸균 용액, 현탁액 또는 유제와 같은 비경구 투여용 제제를 들 수 있다. 이들은 또한 사용 직전에 멸균수, 생리 식염수 또는기타 주사가능한 멸균 매질중에 용해시킬 수 있는 멸균 고상 조성물의 형태로도 제조될 수 있다.

주어진 포유류 숙주에 대한 최적 투여량 및 식이법은 이 분야의 기술에 숙련된 자에게는 자명한 일이다. 물론, 실사용 투여량은 특정 조성 배합물, 사용된 특정 화합물, 투여방식 및 특정상태, 치료중인 숙주 및 질병에 따라 변화한다는 것을 이해하여야 한다. 약물의 작용을 변화시키는 많은 인자들에는 연령, 체중, 성별, 식이요법, 투여시기, 투여경로, 배설물, 환자의 상태, 약물 배합, 반응 민감성 및 병의 위중도 등이 있다.

다음의 실시예는 설명 목적만을 위한 것으로서 본 발명의 범위를 제한하고자 함이 아니다.

다음의 실시예에서, 모든 온도는 섭씨로 나타낸다. 융점은 토마스-후버 모세관 융점 장치로 기록하고 보정하지 않았다. 자외선 스팩트럼은 휴렛-팩카드 8450 자외선/가시광선 스팩트로포토미터를 이용하여 기록했다. 고압 액체 크로마토그래피(HPLC)는 워터즈 모델 590 장치를 사용하여 수행했다.¹H NMR 스펙트럼은 브루커 WM360 스펙트로포토미터(내부 기준으로 CDCl₃사용)로 기록했다. 화학 전이는 δ단위로 기록하며 커플링상수는 헤르쯔로 나타내었다. 쪼개지는 모양을 다음과 같이나타내었다 : s, 만일 ; d, 2중 ; t, 3중 ; q, 4중 ; m, 다중 ; bp, 넓은피크, 및 dd, 2중의 2중, 자외선 스팩트럼은 퍼킨-엘머 1800 푸리에 변형 적외선 스팩트로포토미터로 측정하였고 센티미터의 역수(cm^-1)로 나타냈다. "플래쉬 크로마토그래피"는 스틸(스틸, W. C.의 공동연구자 J.Org. Chem., 1978, 43 : 2923)의 방법을 참고하였고 E.머크 실리카겔(230-400 메쉬)를 사용하여 수행하였다. E.머크 20×20cm판(60F 254 키젤 겔/0.5mm)-4×20cm 예비 농축영역을 사용하여 예비 박층 크로마토그래피를 수행했을 때 최상의 결과를 얻었다.

[실시예 1]

피크로-에토포시드-4'-(1-페닐-1H-테트라졸-5-일)에테르(VIIa)

에토포시드(400mg, 0.680mmol), 5-클로로-1-페닐-1H-테트라졸(166.5mg, 0.894mmol) 및 무수탄산칼륩(505mg, 3.65mmol)의 자력으로 교반시킨 혼합물을 메틸 에틸 케톤(25ml)과 무수 디메틸포름아미드(10ml)로 처리하고 N₂하에서 19-20시간 동안 환류시켰다. 혼합물을 냉각시키고 물(20ml)과 에틸 아세테이트(2×l75ml)로 분별했다. 결합된 유기층을 H₂O(2×150ml) 보린(175ml)으로 세척하고 건조시켰다(Na₂SO₄/MgSO₄) 회전 증발시킨후 실리카겔상에서 예비 TLC 처리하여 융점190-193℃인 백색 고체로서 순수한 표제의 화합물 332.5mg(66 8%)을 얻었다.

IR(KBr) 3455. 1768, 1603, 1546, 1507, 1483, 1464, 1421, 1339, 1252, 1130, 1037, 933, 888, 761, 689cm^-1

UV(CH₃OH)λ max(log∑) 291(3.613)nm.

360MHz^lH NMR(CDCl₃)δ 7.87(d,2H), 7.58-7.45(m, 3H), 6.81(s,1H), 6.51(s,2H), 6.45(s,1H), 5.97(d,2H), 4,92(d,1H), 4.73(q,1H), 4.56-4. 42(m,2H), 4. 31(d,1H), 4.18(dd,1H), 3.95(d,1H), 3.76(s,6H), 3.62-3.55(m,2H), 3.47-3.40(m,1H), 3.32(dd,1H), 3.21-3.12(m,2H), 3.05-2.96(m,1H), 2.90(d,1H,OH), 2. 76(d,1H,OH), 1.33(d,3H).

질량 스펙트럼(FAB), m/e, 733.2393(M⁺+H).

C₃₆H₃₇N₄O₁₃은 733.2357 요구함.

[실시예 2]

피크로 -4'-데스메톡시에토포시드(Va)

에틸 아세테이트(14ml)와 메탄올(4ml)중의 실시예 1에서 제조한 피크로-에토포시드-4'-테트라졸 에테르(470mg, 0.642mmol)용액을 탄소(300mg)상에서 20% Pd(OH)₂로 처리하고 봄장치내에서 1050-1100psi/H₂로 약 80-100℃에서 21시간 동안 수소 첨가시켰다. 혼합물을 냉각시키고 셀라이트로 여과시켰으며, 고체를 과량의 에틸 아세테이트로 세척했다. 여과물을 진공에서 증발시키고 잔사는 2% CH₃OH/EtOAc를 사용하여 실리카겔상에서 플래쉬 크로마토크래피에 의해 정제시켜 무색의 고체로서 순수한 피크로-4'-데스메톡시에토포시드 212.3mg(58%)을 얻었다. 4% CH₃OH/EtOAc 추가로 용출시켜 170mg의 피크로-에토포시드를 얻었다. 피크로-4'-데스메톡시에토포시드의 자료 ; 융점 134-136℃

IR(KBr)3480,3450,1767,1600,1485,1430,1383,1259,1207,1160,1080, 1014,935,890,837cm^-1

UV(CH₃OH) max(log ∑) 284(3.972)nm.

360MHz^lH NMR(CDC1₃)δ 6.79(s,1H), 6.44(s,1H), 6.37(t, 1H), 6.35(d,2H), 5.96(s,2H), 4.8g(d,1H), 4.73(q,1H), 4.52-4.40(m,2H), 4.24(d,1H), 4.14(dd,1H), 3.97(d,1H), 3.78(s,6H), 3.62-3.53(m,2H), 3.47-3.41(m,1H), 3.32(dd,1H), 3.21(dd,1H), 3.17-3.10(m,1H), 3.04-2.97(m,1H), 2.68(d,1H,OH), 2.62(d,1H,OH), 1.35(d,3H).

질량 스펙트럼(EI), m/e,572.1903(M+). C₂₉H₃₂O₁₂은 572.1894 요구함.

[실시예 3]

에토포시드-4'-(1-페닐-1H-테트라졸-5-임)에테르(VIa)

건조 THF(4ml)중의 디이소프로필아민(0.48g, 4.74mmol)용액을 자력으로 교반시켜 N2하에서 -78℃로 냉각시키고n-부틸리튬(헥산중 1.6M ; 2.6ml, 4.14mmol)을 시린지를 통해 첨가하였다. 혼합물을 0℃로 15분에 걸쳐 가열하고 -78℃로 재냉각시켰으며 건조 THF(10ml)중의 피크로-4'-(1-페닐-1H-테트라졸-5-일) 에테르(480mg, 0.665mmol)용액을 배관을 통해 5분에 걸쳐 천천히 첨가하였다. 결과적인 암청색 용액을 약 -70℃에서 3 1/2시간 동안 교반하고 건조 THF(12ml)중의 (1)-타르타르산 용액을 3분에 걸쳐 첨가하였다. 5분후, -78℃에서 빙초산(2ml)을 첨가하고 혼합물을 -78℃에서 10분간 교반하였으며, CH₂Cl₂(4ml)와 H2O(2ml)로 처리하여 실온에 이르도록 가열시켰다. 혼합물을 H₂O(100ml), 5% 수성중탄산나트륨(100ml), H₂O(100ml) 및 브린(100ml)으로 세척하고 건조(Na₂SO₄)시켰다. 회전 증발시켜 시스(피크로)와 트랜스 락톤 이성체(HPLC ; 65:35 CH₃OH/H₂O ; IBM Cl8 컬럼)의 74:26 혼합물로서 조생성물을 얻었다. 4 : 96 CH₃OH/CH₂Cl₂를 사용하여 실리카겔상에서 예비 HPLC를 행하여 피크로 이성체 200mg에 더하여, 무색의 고체로서 순수한 트랜스 락톤 이성체 65.1mg을 얻었다. 트랜스 이성체 생성물에 대한 자료는 다음과 같다 :

IR(KBr) 1775, 1603, 1545, 1506, 1486, 1237, 1131, 1098, 1078, 763cm^-1.

360MHz¹H NMR(CDCl₃)δ7.82(d, 2H,J=7.9Hz), 7.54-7.42(m, 3H), 6.82(s, 1H), 6.55(s, 1H), 6.33(s, 2H), 5.99(d, 2H), 4.91(d, 1H,J=3.4Hz), 4.74(q, 1H,J=5.0Hz), 4.66-4.63(m, 2H), 4.43(dd, 1H), 4.24(dd, 1H), 4.16(dd, 1H,J=4.1 alc 10.4Hz), 3.74(m, 1H), 3.66(s,6H), 3.57(m, 1H), 3.43(m, 1H), 3.34-3.27(m, 3H), 2.90-2.80(m, 1H), 2.69(br s, 1H, OH), 2.43(br s, 1H, OH), 2.43(br s, 1H, OH), 1.38(d, 3H,J=5.0Hz).

[실시예 4]

4'-데스메톡시에토포시드(IVa)

건조 THF(1ml)중의 디이소프로필아민(0.30ml, 2.14mmol)용액을 자력으로 교반시켜 N₂하에서 -78℃로 냉각시키고 n-부틸리튬(핵산중에 1.6M ; 1.25ml, 2.00mmol)을 실리지를 통해 첨가하였다.

혼합물을 -78℃에서 5분간 교반시키고, 15분간 -20℃로 가열시킨 다음 -78℃로 다시 냉각시키고, 건조 THF(2ml)중의 피크로 -4'-데스메톡시에토포시드(206.1mg,0.3599mmol)용액을 서서히 첨가한 다음 건조 THF(1ml)로 헹구어 전이를 완결지었다. 얻어진 밝은 녹색용액을 -70℃에서 90분간 교반한 다음 건조 THF(1ml)중의 빙초산(0.75ml)용액을 배관을 통해 암청색 반응 혼합물로 서서히 첨가하였다. 얻어진 연한 황색 용액을 -78℃에서 5분간 교반하고, 15분 동안 0℃로 가열한 다음 H₂O(25ml)로 희석하고 CH₂Cl₂(2×45ml)로 추출하였다. 결합된 추출물을 H₂O(20ml)와 브린(50ml)으로 세척하고 건조(Na₂SO₄)시켰다. 회전 증발시켜 시스(피크로) 및 트랜스 락톤 이성체(HPLC ; 65 : 35 H₂O/CH₃CN ; Cl8 컬럼 ; 14.3분(피크로) 및 15.8분(트랜스)의 73:27 혼합물로서 조생성물을 얻었다. 5% MeOH/CH₂Cl₂와 함께 20E. 머크 0.5mm실리카겔판을 사용하여 예비 TLC 처리하여 무색의 고체로서 순수한 트랜스 락톤 이성체 표제의 화합물을 41.9mg(21%) 얻었으며 이에 더하여, 출발물질 피크로 이성체 116.0mg(58%)을 얻었으며 이것을 재순환시켜 부가로 4'-데스히드록시에토포시드를 얻었다. 표제의 화합물의 데이타는 다음과 같다.

IR(KBr) 1775, 1597, 1485, 1233, 1206, 1158, 1039, 937, 701cm^-1.

360MHz¹H NMR(CDCl₃)δ6.77(s, 1H), 6.50(s,1H), 6.27(t,1H,J=2.1Hz), 6.18(d, 2H,J=2.1Hz), 5.95(s, 2H), 4.85(d, 1H,J=3.5Hz), 4.73(q, 1H,J=5.0Hz), 4.63(d, 1H,J=7.7Hz), 4.58(d, 1H,J=5.3Hz), 4.38(dd, 1H,J=9.1 및 10.3Hz), 4.21-4.13(m, 2H), 3.75-3.72(m,1H), 3.71(s, 6H), 3.55(m, 1H), 3.42(m, 1H), 3.35-3.30(m, 2H), 3.24(dd, 1H,J=5.4 및 14.1Hz), 2.97-2.88(m, 1H), 2.66(br s,1H,OH), 2.36(br s,1H,OH), 1.37(d ,3H,J=5.0Hz).

[실시예5]

4' - 데스히드록시에토포시드

피크로-에토피시드-4'-테트라졸 에테르를 동량의 트랜스-에토포시드-4'-테트라졸 에테르(VIa)로 대치하여 실시예 2의 과정을 반복하면 목적하는 4'-데스히드록시에토포시드(IVa)가 얻어진다.

[실시예 6]

실시예 1에서 사용했던 에토포시드 출발물질대신 동량의 테니포시드(R²=H ; R¹=2-티에닐)을 사용하여 실시예 1-5의 일반공정을 수행하면 R²=H이고 R¹=2 티에닐인 구조식(Ⅳ), (Ⅴ), (Ⅵ)의 상응하는 생성물을 얻는다.

[실시예 7]

실시예 1에서 사용한 에토포시드 출발물질을 다음에 나타낸 동량의 출발물질로 대치하여 실시예 1-5의 일반공정을 실시하면 R²및 R¹이 다음에 정의된 출발물질(Ⅰ)에서와 같은 구조식(Ⅳ), (Ⅴ), (Ⅵ) 및 (Ⅶ)의 생성물을 얻는다.

(출발물질)

Claims

다음의 구조식을 갖는 화합물.

상기 구조식중 R²는 수소이고 R¹은 C₁-C₁₀알킬, C₂-C_l0알케닐, C₃-C₇시클로알킬, 퓨릴, 티에닐, 피리딜, 피롤릴, C₆-C₁₀아릴 및 C₇-C₁₄아르알킬 중에서 선택되고, 상기 아릴 및 아르알킬 고리는 할로, C₁-C₄알킬, 니트로, 히드록시, C₁-C₄알콕시, C₁-C₄알카노일옥시, 시아노, 아미노, C₁-C₄알킬아미노, 디(C₁-C₄) 알킬아미노, 카르복시, C₁-C₄알킬티오, 메르캅토, C₂-C₄알케노일아미노, C₁-C₄알카노일, C₂-C₄알케닐 및 카르바모일 중에서 선택된 1개 이상의 치환체를 임의로 갖고 ; 또는 R¹및 R²는 각각 C₁-C₁₀알킬이거나 ; R^l및 R²는 이들이 결합해 있는 탄소원자와 함께. C₅-C₆시클로알킬기를 형성한다.
다음의 구조식을 갖는 중간체.

상기 구조식중 R²는 수소이고 R¹은 C₁-C₁₀알킬, C₂-C_l0알케닐, C₃-C₇시클로알킬, 퓨릴, 티에닐, 피리딜, 피롤릴, C₆-C₁₀아릴 및 C₇-C₁₄아르알킬 중에서 선택되고, 상기 아릴 및 아르알킬 고리는 할로, C₁-C₄알킬, 니트로, 히드록시, C₁-C₄알콕시, C₁-C₄알카노일옥시, 시아노, 아미노, C₁-C₄알킬아미노, 디(C₁-C₄) 알킬아미노, 카르복시, C₁-C₄알킬티오, 메르캅토, C₂-C₄알케노일아미노, C₁-C₄알카노일, C₂-C₄알케닐 및 카르바모일 중에서 선택된 1개 이상의 치환체를 임의로 가지며 ; 또는 R¹및 R²는 각각 C₁-C₁₀알킬이거나 ; R^l및 R²는 이들이 결합해 있는 탄소원자와 함께. C₅-C₆시클로알킬기를 형성한다.
다음의 구조식을 갖는 중간체

상기 구조식중 R²는 수소이고 R¹은 C₁-C₁₀알킬, C₂-C_l0알케닐, C₃-C₇시클로알킬, 퓨릴, 티에닐, 피리딜, 피롤릴, C₆-C₁₀아릴 및 C₇-C₁₄아르알킬 중에서 선택되고, 상기 아릴 및 아르알킬 고리는 할로, C₁-C₄알킬, 니트로, 히드록시, C₁-C₄알콕시, C₁-C₄알카노일옥시, 시아노, 아미노, C₁-C₄알킬아미노, 디(C₁-C₄) 알킬아미노, 카르복시, C₁-C₄알킬티오, 메르캅토, C₂-C₄알케노일아미노, C₁-C₄알카노일, C₂-C₄알케닐 및 카르바모일 중에서 선택된 1개 이상의 치환체를 임의로 가지며 ; 또는 R¹및 R²는 각각 C₁-C₁₀알킬이거나 ; R^l및 R²는 이들이 결합해 있는 탄소원자와 함께. C₅-C₆시클로알킬기를 형성한다.
다음의 구조식을 갖는 중간체.

상기 구조식중 R²는 수소이고 R¹은 C₁-C₁₀알킬, C₂-C_l0알케닐, C₃-C₇시클로알킬, 퓨릴, 티에닐, 피리딜, 피롤릴, C₆-C₁₀아릴 및 C₇-C₁₄아르알킬 중에서 선택되고, 상기 아릴 및 아르알킬 고리는 할로, C₁-C₄알킬, 니트로, 히드록시, C₁-C₄알콕시, C₁-C₄알카노일옥시, 시아노, 아미노, C₁-C₄알킬아미노, 디(C₁-C₄) 알킬아미노, 카르복시, C₁-C₄알킬티오, 메르캅토, C₂-C₄알케노일아미노, C₁-C₄알카노일, C₂-C₄알케닐 및 카르바모일 중에서 선택된 1개 이상의 치환체를 임의로 갖고 ; 또는 R¹및 R²는 각각 C₁-C₁₀알킬이거나 ; R^l및 R²는 이들이 결합하는 탄소원자와 함께. C₅-C₆시클로알킬기를 형성한다.
제 1 항의 화합물의 유효 종양 억제량과 약리적으로 허용되는 담체로 이루어진 항종양 조성물.