KR20100040877A

KR20100040877A - 티로신 키나제 억제제, 및 인테그린 알파1베타5(ｃｄ49ｅ)에 대한 항체를 포함하는 약학 조합물

Info

Publication number: KR20100040877A
Application number: KR1020107001803A
Authority: KR
Inventors: 바니타 라마크리슈난; 비나이 바스카
Original assignee: 패시트 바이오테크 코포레이션
Priority date: 2007-07-27
Filing date: 2008-07-28
Publication date: 2010-04-21
Also published as: BRPI0813630A2; AU2008282331A1; EP2193148A2; MX2010000997A; CA2694644A1; JP2010534685A; WO2009018226A3; WO2009018226A2; US20090041767A1

Abstract

본 발명은 티로신 키나제 억제제와 함께 α5ß1 길항제를 포함하는 약학 조합물에 관한 것이다. 일 구체예에서, α5ß1 길항제는 볼록시시맙이다. 일부 구체예에서, 티로신 키나제 억제제는 수니티닙 또는 이의 약학적으로 허용되는 염이다. 본 발명은 또한 상기 약학 조합물을 피험체에게 투여하여 암을 치료하기 위한 방법에 관한 것이다.

Description

티로신 키나제 억제제, 및 인테그린 알파1베타5(ＣＤ49Ｅ)에 대한 항체를 포함하는 약학 조합물{PHARMACEUTICAL COMBINATIONS COMPRISING A TYROSINE KINASE INHIBITOR AND AN ANTIBODY AGAINST INTEGRIN ALPHA 1 BETA 5 (CD49E)}

본 발명은 암을 예방 또는 치료하기 위한 α5β1 인테그린 길항제 및 티로신 키나제 억제제를 포함하는 약학 조합물에 관한 것이다.

암은 비제어 세포 분열로 특징되는 질환 또는 질병 부류이다. 암은 모든 연령의 사람에 영향을 미치며 개발국에서 주된 사망 원인이다. 다양한 유형의 수많은 암이 존재한다. 진단을 받으면, 암은 수술, 화학요법 및 방사선요법을 조합하여 치료된다. 그러나, 이들 각 치료법들은 바람직하지 않은 수많은 부작용을 갖는다. 또한, 암은 일종의 질환이므로, 암치료를 위한 단일 치료법은 존재하지 않을 듯하다. 따라서, 신규한 암 치료법이 필요하다.

종양 혈관생성과 α5β1 인테그린의 연관성은 잘 알려져 있다. α5β1은 내피 세포의 표면 상에서 발현되어 세포외 매트릭스의 피브로넥틴으로의 이동 및 부착을 매개하는 이종이량체 인테그린이다. α5β1과 피브로넥틴간 결합 상호작용이 종양 혈관생성에 중요한 것으로 확인되었다. 종양 내 혈관생성은 1 이상의 전-혈관생성 성장 인자, 예컨대 FGF, VEGF, PDGF 등이 방출될 때 시작되어서, 국소적으로 내피 세포를 활성화시킨다. 이렇게 활성화된 내피 세포는 이후, 이들의 α5β1 인테그린을 통해 세포외 매트릭스의 피브로넥틴에 결합하여 새로운 혈관을 형성시킨다. α5β1 길항제는 생체 내 종양 모델에서 혈관생성을 억제하는 것으로 나타났다.

단백질 키나제는 단백질의 티로신, 세린 및 쓰레오닌 잔기 상의 히드록시 기의 인산화를 촉매하는 효소이다. 단백질 키나제는 티로신 키나제 및 세린-쓰레오닌 키나제의 2가지 유형이 존재한다.

티로신 키나제는 티로신 잔기의 인산화를 촉매하는 효소이다. 2가지 유형의 티로신 키나제가 존재하는데, 즉 수용체 티로신 키나제와 세포내 티로신 키나제(비수융체 티로신 키나제)이다. 티로신 키나제는 세포내 신호전달 경로에 관여하고 핵심적인 세포 기능, 예컨대 세포 성장, 증식, 분화, 항아폽토시스 신호전달 및 신경돌기 성장 등을 조절한다. 점돌연변이 등의 기전을 통해 이러한 효소를 비조절 활성화시키면 다양한 형태의 암이 유발될 수 있다.

본 발명의 대표적인 구체예는 티로신 키나제 억제제와 함께 α5β1 길항제를 포함하는 약학 조합물에 관한 것이다. 상기 약학 조합물은 α5β1 길항제의 제1 함량과 함께 티로신 키나제 억제제의 제2 함량을 포함하고, 이들은 함께 암의 예방 또는 치료를 위한 치료 유효량을 포함한다. 일 구체예에서, α5β1 길항제는 볼록시시맙 또는 이의 항원 결합 단편이다. 일부 구체예에서, 티로신 키나제 억제제는수니티닙 또는 이의 약학적으로 허용되는 염이다. 다른 구체예에서, 티로신 키나제 억제제는 소라페닙 또는 이의 약학적으로 허용되는 염이다. 추가 구체예에서, 티로신 키나제 억제제는 베바시주맙 또는 이의 항원 결합 단편이다. 본 발명의 다른 구체예는 피험체에게 상기 약학 조합물을 투여하여 암을 예방하거나 또는 치료하는 방법에 관한 것이다.

도 1A 및 1B는 횡문근육종의 마우스 이종이식 모델에서(A673), 각 제제 단독대비, 시간 경과에 따른 종양 부피에 대한 α5β1 길항제인, 단일클론 항체 339.1 및 티로신 키나제 억제제인 수니티닙(SUTENT^®(수텐트))의 약학 조합물의 효능을 도시한 2종의 개별 실험 결과에 대한 그래프이다.
도 2는 신장암의 마우스 이종이식 모델(SN12C)에서, 각 제제 단독 대비, 시간 경과에 따른 종양 부피에 대한 α5β1 길항제인 단일클론 항체 339.1 및 티로신 키나제 억제제인 수니티닙(SUTENT^®)의 약학 조합물의 효능을 도시한 그래프이다.
도 3은 신장암의 마우스 이종이식 모델(786-0)에서, 각 제제 단독 대비, 종양 부피에 대한 α5β1 길항제인 단일클론 항체 339.1 및 티로신 키나제 억제제인 수니티닙(SUTENT^®)의 약학 조합물의 효능을 나타낸 그래프이다.
도 4는 신장암의 마우스 이종이식 모델(786-0)에서 대조군 대비, 종양 부피에 대한 α5β1 길항제인 단일클론 항체 339.1(고친화성으로 마우스 α5β1에 결합), 이의 유사체, 키메라 항체 볼록시시맙(높은 친화성으로 인간 α5β1에 결합하지만 마우스 α5β1과 교차반응하지는 않음) 및 티로신 키나제 억제제인 수니티닙(SUTENT^®)의 약학 조합물의 효능을 도시한 그래프이다.
도 5는 신장암의 마우스 이종이식 모델(786-0)에서, 대조군 대비, 종양 부피에 대한 α5β1 길항제인 단일클론 항체 339.1(높은 친화성으로 α5β1에 결합함),이의 유사체, 키메라 항체 볼록시시맙(높은 친화성으로 인간 α5β1에 결합하지만 마우스 α5β1과 교차반응하지 않음) 및 티로신 키나제 억제제인 소라페닙(NEXAVAR^®(넥사바))의 약학 조합물의 효능을 도시한 그래프이다.
도 6A 및 6B는 신장암의 마우스 이종이식 모델(A673)에서, 대조군 대비, 종양 부피에 대한 α5β1 길항제인 단일클론 항체 339.1(높은 친화성으로 마우스 α5β1에 결합함), 이의 유사체, 키메라 항체 볼록시시맙(높은 친화성으로 인간 α5β1에 결합하지만 마우스 α5β1과 교차반응하지 않음) 및 티로신 키나제 억제제인 AVSTIN^®(아바스틴)의 약학 조합물의 효능을 도시한 2종의 개별 실험의 그래프이다.
도 7A 및 7B는 흑색종의 마우스 이종이식 모델(LOX)에서, 대조군 대비, 종양 부피에 대한 α5β1 길항제인 단일클론 항체 339.1(높은 친화성으로 마우스 α5β1에 결합함), 이의 유사체, 키메라 항체 볼록시시맙(높은 친화성으로 인간 α5β1에 결합하지만 마우스 α5β1과 교차반응하지 않음) 및 티로신 키나제 억제제인 AVASTIN^®의 약학 조합물의 효능을 도시한 2종의 개별 실험의 그래프이다.
도 8A 및 8B는 폐암의 마우스 이종이식 모델(H460)에서, 대조군 대비, 종양 부피에 대한 α5β1 길항제인 단일클론 항체 339.1(높은 친화성으로 마우스 α5β1에 결합), 이의 유사체, 키메라 항체 볼록시시맙(높은 친화성으로 인간 α5β1에 결합하지만 마우스 α5β1과 교차반응하지 않음), 및 티로신 키나제 억제제인 AVASTIN^®의 약학 조합물의 효능을 도시한 2종의 개별 실험의 그래프이다.

모든 특허 및 공개물과 이러한 특허 및 공개물에 개시된 모든 서열을 포함하여, 본 발명에서 언급한 것들은 참조하여 분명하게 포함시킨다. 달리 한정하지 않으면, 본 명세서에서 사용하는 모든 기술 및 과학 용어는 본 발명이 속한 분야의 당업자들이 공통으로 이해하는 것과 동일한 의미를 갖는다. 본 명세서에 기술한 다양한 구체예들과 유사하거나 또는 균등한 임의의 방법 및 물질을 본 발명의 실시 또는 시험에서 사용할 수 있다.

본 명세서에 개시한 모든 최대(또는 최소) 수치 제한은 모든 하위(또는 상이) 수치 제한을 포함하는데, 이러한 하위(또는 상위) 수치 제한은 명확하게 본 명세서에 기재되어 있는 바와 같이 포함되는 것을 의미한다. 또한, 본 명세서에 개시된 모든 수치 범위는, 본 명세서에서 협의의 수치 범위를 모두 명백하게 기재한 바와 같이, 이러한 광범위한 수치 범위 내에 속하는 모든 협의의 수치 범위를 포함시키고자 한다.

본 명세서에서 사용되는 어구로서, 값 또는 조건 목록과 함께 사용되는 "적어도"는 그 목록 내 각각의 값 또는 조건에 적용시키고자 한다. 예를 들어, 적어도 어구 "적어도 85%, 90%, 95% 및 99%의 서열 동일성"은 적어도 85%, 적어도 90%, 적어도 95% 및/또는 적어도 99%의 서열 동일성을 의미하는 것으로 사용된다.

본 명세서에서 사용되는 용어 "포함하는(comprising)" 및 이의 동족체는 이의 포괄적인 의미로 사용되는데, 즉, "함유(포괄)하는" 및 이의 상응하는 동족체와 균등하게 사용된다.

달리 언급하지 않으면, 각각 핵산은 5'에서 3' 방향으로 좌측에서 우측으로 기재하며, 아미노산 서열은 아미노에서 카르복실 방향으로 좌측에서 우측으로 기재한다.

본 명세서에서 제공하는 제목은 전체로서 명세서에서 참조되는 본 발명의 다양한 구체예 또는 측면을 한정하는 것이 아니다. 따라서, 이하에 정의된 용어는 전체 명세서를 참조하여 보다 완전하게 정의된다.

약학 조합물

본 발명의 대표적인 구체예는 티로신 키나제 억제제와 함께 α5β1 길항제를 포함하는 약학 조합물에 관한 것이다. 상기 약학 조합물은 α5β1 길항제의 제1 함량과 조합하여 티로신 키나제 억제제의 제2 함량을 포함하고, 이는 함께 암을 치료하거나 또는 예방하기 위한 치료 유효량을 포함한다. 일부 구체예에서, 본 발명의 약학 조합물은 단독 약학 성분(즉, 조합하지 않음)으로 치료하는 것에 비하여 암 치료에서 상승 효과(즉, 부가 효능)를 나타내는 것으로 여겨진다.

본 명세서에서 사용되는 용어 "약학 조합물"은 2 또는 그 이상의 약제 조합물을 의미한다. 상기 약제는 함께, 예컨대 단일 환약 또는 용액제로서, 또는 개별적으로 예컨대 2 이상의 개별 환약, 2 이상의 개별 용제, 또는 1 이상의 용제 및 1 이상의 환약으로 투여될 수 있다. 개별 투여하는 경우, 약제는 동시에, 순차적으로, 또는 상호간 특정 기간 내에 투여될 수 있다.

본 명세서에서 사용하는 용어 "치료 유효량'은 함께 암의 1 이상의 증상 또는 합병증을 완화, 약독화 또는 치료하게 되는, 제1 약제의 제1 함량과 조합한 제2 약제의 제2 함량, 및 경우에 따라 추가 약제의 추가 함량을 의미한다. 치료 유효량을 결정하는 임상 방법은 당분야의 숙련가에게 잘 알려져 있다. 예를 들어, 치료 유효량은 조합하여, 종양 크기 감소; 암 세포 수 감소; 종양 성장 억제; 종양 전이 억제; 및 대상체에서 어느 정도로 암과 연관된 1 이상의 증상 또는 합병증을 예방 또는 완화하는 효능을 갖는 양을 의미한다.

본 명세서에서 사용되는 용어 "피험체"는 인간 및 인간 이외의 포유동물을 의미한다.

α5βl 길항제

상기 약학 조합물은 α5β1 길항제, 이의 약학적으로 허용되는 염 또는 이의 항원 결합 단편을 포함한다. 그러나, 약학 조합물은 다수의 α5β1 길항제를 포함할 수도 있다. 본 명세서에서 사용하는 용어 "α5β1 길항제"는 α5β1 인테그린에 결합하여 인테그린이 이의 리간드인 피브로넥틴에 결합하는 것을 방지하는 화합물을 의미한다. α5β1 길항제 부류의 예는 이에 제한되는 것은 아니고, 항체, 펩티드 및 소형 분자 유기 화합물을 포함한다.

일부 구체예에서, α5β1 길항제는 항체 또는 이의 항원 결합 단편이다. 본 명세서에서 사용하는 용어, "항체"는 특정 항원과 면역학적으로 반응성인 면역글로불린 분자를 의미한다. 이 용어는 단일클론 및 다클론 항체 및 또한 유전자 조작 형태, 예컨대 키메라 항체, 인간화 항체, 및 이종접합 항체, 예컨대 이중특이성 항체, 다이아바디, 트리아바디 및 테트라바디 등을 포함한다. 본 발명에서 유용한 단일클론, 다클론, 키메라, 인간화 및 이종접합 항체를 생성하는 방법은 당분야에 공지되어 있다.

용어 "항원 결합 단편"은 항체의 항원 결합 단편으로서, 항원 결합 능력을 단편, 예를 들어 Fab', F(ab')₂, Fab, Fv, scFv 및 rIgG 등을 의미한다. 본 발명에서 유용한 공지 항체로부터 항원 결합 단편을 생성하기 위한 방법은 당분야에 공지이다.

α5β1 길항제 활성을 갖는 항체 또는 이의 항원 결합 단편의 예는 이에 제한되는 것은 아니고, 볼록시시맙(이는 또한 일부 참조문헌에서 "M200"라고도 함), F200, IIA1, NKI-SAM-1, JBS5 및 본 명세서에 개시된 다양한 인간화 항체를 포함한다. 이러한 항체 및 이의 항원 결합 단편의 아미노산 서열 및 제조 방법 및 사용 방법은 여러 참조문헌 중에서도 특히, U.S. 특허 제6,852,318호, U.S. 공개 특허 출원 제2005/0054834호 및 U.S. 공개 특허 출원 제2005/0260210호에 개시되어 있으며, 이들 각각을 전체로 참조하여 본 발명에 포함시킨다.

일부 구체예에서, α5β1 길항제는 볼록시시맙이다. 볼록시시맙은 고형 종양의 치료를 위해 개발 중인 항-α5β1 항체이다. 볼록시시맙은 α5β1 인테그린에 특이적으로 결합하는 고친화성의 키메라 IgG4 단일클론 항체이다. 볼록시시맙은 현재 흑색종, 신장 세포 암종 및 췌장암의 치료를 위한 3회의 개별 임상 II기 시험 중이다.

암 치료를 위한 볼록시시맙, 이의 제조, 제형 및 용도는 당분야에 공지되어 있고, 예를 들어, U.S. 공개 특허 출원 제2005/0054834호 및 U.S. 공개 특허 출원 제2005/0260210호에 개시되어 있다. 볼록시시맙은 서열 번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄, 및 서열 번호 4의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함한다. 일부 구체예에서, 중쇄의 아미노산 서열은 서열 번호 1의 핵산 서열에 의해 코딩되고 경쇄의 아미노산 서열은 서열 번호 3의 핵산 서열에 의해 코딩된다.

일부 구체예에서, α5β1 길항제는 볼록시시맙의 항원 결합 단편이다. 이러한 단편, 이의 제조 및 이의 용도는 예를 들어, U.S. 공개 특허 출원 제2005/0054834호에 개시되어 있다. 이러한 단편은 서열 번호 5의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역, 및 서열 번호 6의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 구체예에서, 항원 결합 단편은 인간 불변 영역에 접합된다.

일부 구체예에서, α5β1 길항제는 볼록시시맙의 Fab 단편인 F200이다. F200, 이의 제조 및 이의 용도는 당분야에 공지되어 있다. 예를 들어, U.S. 공개 특허 출원 제2005/0054834호를 참조한다. F200은 Fab 단편이기 때문에, F200 경쇄 DNA 및 아미노산 서열은 볼록시시맙 경쇄 DNA 및 아미노산 서열과 동일하다. F200은 서열 번호 8의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄, 및 서열 번호 4의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함한다. 일부 구체예에서, 상기 중쇄의 아미노산 서열은 서열 번호 7의 핵산 서열에 의해 코딩된다.

일부 구체예에서, 5β1 길항제는 인간화 항체이다. 인간 α5β1 인테그린에 특이적으로 결합하는 상이한 인간화 항체의 범위는 예를 들어, U.S. 특허 제6,852,318호(예를 들어, 도 1 및 2 참조)에 개시되어 있고 이하에 기술되어 있는데, 여기서 항체는 서열 번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역, 및 서열 번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역; 서열 번호 11의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역, 및 서열 번호 12의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역; 서열 번호 13의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역, 및 서열 번호 14의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역; 서열 번호 15의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역, 및 서열 번호 16의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역; 서열 번호 17의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역, 및 서열 번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역; 또는 서열 번호 19의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄, 및 서열 번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함한다.

일부 구체예에서, 본 발명의 약학 조합물에 유용한 α5β1 길항제는 볼록시시맙, IIA1, 및 IIA1의 인간화 형태에서 선택된 항-α5β1 항체의 CDR 서열을 포함하는 항체이다. 볼록시시맙, IIA1 및 상기 열거한 인간화 항-α5β1 항체는 U.S. 특허 제6,852,318호(예를 들어, 도 2 참조)에서 개시된 다양한 아미노산 서열에서 도시된, 동일한 CDR 서열을 보유한다.

항-α5β1 항체 볼록시시맙은 쥣과동물 α5β1 인테그린과 교차반응하지 않는다. 다른 구체예에서, 본 발명은 인간 α5β1에 대한 볼록시시맙과 유사한 결합성 및 기능 차단 특징을 갖는, 쥣과동물 α5β1을 표적으로 하는 단일클론 항체 339.1을 제공한다. 339.1 중쇄 가변 영역(서열 번호 22) 및 339.1 경쇄 가변 영역(서열 번호 23)의 아미노산 서열은 본 명세서에 첨부한 서열 목록에 열거하였다.

다른 구체예에서, α5β1 길항제는 펩티드이다. 본 명세서에서 사용하는 용어 "펩티드"는 펩티드 결합 또는 펩티드 결합의 유사 결합을 통해 함께 연결된 아미노산 또는 아미노산 유사체의 올리고머 및 중합체를 포함한다. 따라서, 펩티드는 L-아미노산 또는 D-아미노산, 화학 변형 아미노산, 천연 발생 또는 비천연 발생 아미노산 또는 아미노산 유사체일 수 있는, 2 이상의 아미노산을 함유한다. α5β1 펩티드 길항제는 펩티드 라이브러리를 스크리닝하여 동정하거나, 공지된 화학 합성법을 사용하여 제조하거나 또는 상업적 공급처에서 구매할 수 있다.

α5β1 길항제 활성을 갖는 펩티드의 예는 이에 제한되는 것은 아니고, 아미노산 서열 CRRETAWAC(서열 번호 21) 또는 ATN-161(Attenuon, San Diego, CA)을 포함하는 펩티드를 포함한다. α5β1 길항제 펩티드는 예를 들어, U.S. 특허 제6,852,318호에 개시되어 있다.

추가 구체예에서, α5β1 길항제는 소형 분자 유기 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염이다. α5β1 길항제 활성을 갖는 소형 분자 유기 화합물의 예는 이에 제한되는 것은 아니고, 일반 화학 구조 (S)-2-페닐설포닐아미노-3-{{{8-(2-피리디닐 아미노메틸)-}-1-옥사-2-아자스피로-{4,5}-데크-2-엔-일}카르보닐아미노}프로피온산을 포함한다. 일부 구체예에서, 상기 화합물은 SJ749이고, 이는 화학 구조: (S)-2-{(2,4,6-트리메틸페닐) 설포닐}아미노-3-{7-벤질옥시카르보닐-8-(2-피리디닐 아미노메틸)-1-옥사-2,7-디아자스피로-{4,4}-논-2-엔-3-일}카르보닐아미노}프로피온산을 갖는다. 이들 화합물, 이들의 합성 방법 및 이들의 용도는 U.S. 특허 제5,760,029호에 개시되어 있고, 이를 전체로 참조하여 본 발명에 포함시킨다.

본 명세서에서 사용되는 용어 "약학적으로 허용되는 염"은 모화합물의 약리 효능 및 특성을 보유하는 염을 의미한다. 이러한 염은 무기 산과 모화합물의 유리 염기의 반응으로 얻어지는 산부가 염, 또는 모화합물에 존재하는 산성 양자가 금속 이온으로 치환되거나 또는 유기 염기와 배위결합시에 형성되는 염 등을 포함한다. 약학적으로 허용되는 염의 예는 히드로클로라이드, 설페이트, 포스페이트, 아세테이트, 푸마레이트, 말레이트, 타르타레이트, 카보네이트, 락테이트, 말레에이트, 숙시네이트, 나트륨 염, 칼슘 염, 칼륨 염 및 마그네슘 염 등이다.

티로신 키나제 억제제

상기 약학 조합물은 티로신 키나제 억제제, 이의 약학적으로 허용되는 염 또는 이의 항원 결합 단편을 포함한다. 그러나, 약학 조합물은 다수의 티로신 키나제 억제제를 포함할 수 있다. 본 명세서에서 사용되는 용어 "티로신 키나제 억제제"는 세포 성장, 증식, 분화 및 아폽토시스 신호전달을 억제하는 작용을 하는, 단백질의 티로신 잔기 상의 히드록실 기의 인산화를 억제하는 화합물을 의미한다. 티로신 키나제 억제제 부류의 예는 이에 제한되는 것은 아니고, 항체, 펩티드 및 소형 분자 유기 화합물을 포함한다. 티로신 키나제 억제는 기전을 제한하는 것이 아니며, 본 발명의 티로신 키나제 억제제는 예를 들어 티로신 키나제 수용체의 기능 및/또는 수용체에 대한 리간드를 길항하여서 작용할 수 있다.

티로신 키나제 억제제는 수많은 종류의 세포 수용체를 길항할 수 있다. 예를 들어, 티로신 키나제 억제제가 길항할 수 있는 수용체 중 일부는 이에 제한되는 것은 아니고, 혈소판 유래 성장 인자 수용체(PDGFRα 및 PDGFRβ), 혈관 내피세포 성장 인자 수용체(VEGFR1, VEGFR2 및 VEGFR3), 상피 성장 인자 수용체(EGFR), 줄기 세포 인자 수용체(KIT), Fms-유사 티로신 키나제-3(FLT3), 1형 콜로니 자극 인자 수용체(CSF-1R), Raf 키나제, Src 패밀리 키나제, 및 아교세포주 유래 신경성장 인자 수용체(RET) 등을 포함한다. 티로신 키나제 억제제는 이들 수용체 중 1 이상을 억제하게 된다.

일부 구체예에서, 티로신 키나제 억제제는 소형 분자 유기 화합물이다. 티로신 키나제를 억제하는 소형 분자 유기 화합물의 예는 비스-단환식, 이환식 및 복소환식 아릴 화합물, 비닐렌아자인돌 유도체, 1-시클로프로필-4-피리딜퀴놀론, 스티릴 화합물, 스티릴-치환된 피리딜 화합물, 퀴나졸린 유도체, 셀레나인돌 및 셀레나이드, 삼환식 폴리히드록시 화합물, 벤질포스폰산 화합물 및 피롤 치환된 2-인돌리논 등이다. 이들 화합물, 이들의 제조 및 용도는 예를 들어, 국제 공개 특허 출원 WO 92/20642, WO 94/14808, WO 94/03427, WO 92/21660, WO 91/15495; U.S. 특허 제5,330,992호, 제5,217,999호, 제5,302,606호, 제6,573,293호, 제7,125,905호; 및 유럽 공개 특허 출원 EP 0 566 266에 개시되어 있으며, 이를 전체로 참조하여 본 발명에 포함시킨다.

티로신 키나제를 억제하는 소형 분자 유기 화합물의 추가 예는 상품명 NEXAVAR^®로 시판되는 것으로 알려진 소라페닙; 상품명 SPRYCEL^®로 시판되는 다사티닙; 상품명 TARCEVA^®로 시판되는 엘로티닙; 상품명 IRESSA^®로 시판되는 제피티닙; 상품명 GLEEVAC^® 및 상품명 GLIVEC^®로 시판되는 이마티닙; 상품명 TYKERB^® 및 TYCERB^®로 시판되는 라파티닙; 닐로티닙; 상품명 SUTENT^®로 시판되는 수니티닙; 및 ZACTIMA^®로 시판되는 반데타닙 등이 있다.

일부 구체예에서, 티로신 키나제 억제제는 피롤 치환된 2-인돌리논이다. 피롤 치환된 2-인돌리논 및 이의 약학적으로 허용되는 염, 이의 제조 및 이의 용도는 당분야에 공지되어 있다. 예를 들어, 이들은 U.S. 특허 제6,573,293호 및 제7,125,905호에 개시되어 있고, 이들을 각각 참조하여 본 발명에 포함시킨다. 피롤 치환된 2-인돌리논의 약학적으로 허용되는 염의 예는 이에 제한되는 것은 아니고, 히드로클로라이드, 설페이트, 포스페이트, 아세테이트, 푸마레이트, 말레이트, 타르타레이트, 카보네이트, 락테이트, 말레에이트, 숙시네이트, 나트륨염, 칼슘염, 칼륨염 및 마그네슘염 등을 포함한다.

일부 구체예에서, 피롤 치환된 2-인돌리논은 수니티닙이다. 수니티닙의 바람직한 약학적으로 허용되는 염은 수니티닙 말레이트이다. 수니티닙은 수 개의 수용체 티로신 키나제를 표적으로 하는 다중-키나제 억제제이다. SUTENT^®로 판매되는 수니티닙 말레이트는 화학적으로 N-[2-(디에틸아미노)에틸]-5-[(Z)-(5-플루오로-1,2-디히드로-2-옥소-3H-인돌-3-일리딘)메틸]-2,4-디메틸-lH-피롤-3-카르복사미드(1:1)를 갖는 부탄디오산, 히드록시-, (2S)- 화합물로 설명된다. 수니티닙 말레이트는 다수의 수용체 티로신 키나제를 억제하는 소형 분자 유기 화합물로서, 이들 중 일부는 종양 성장, 병원성 혈광생성 및 암의 전이성 진행에 연루되어 있다. 예를 들어, 수니티닙은 혈소판 유래 성장 인자(PDGFRα 및 PDGFRβ), 혈관 내피세포 성장 인자 수용체(VEGFR1, VEGFR2 및 VEGFR3), 줄기 세포 인자 수용체(KIT), Fms-유사 티로신 키나제-3 (FLT3), 제1형 콜로니 자극 인자 수용체(CSF-IR) 및 아교세포주 유래 신경성장 인자 수용체의 억제제이다. Pfizer(New York, NY)에서 판매하는 SUTENT^®는 이마티닙 메실레이트에 대해 과민증이거나 또는 질병 진행 이후에, 진행성 세포 암종 및 위장 기질 종양 둘 모두를 치료하기 위한 것으로 제안되었다.

다른 구체예에서, 티로신 키나제 억제제는 아릴 우레아 화합물이다. 아릴 우레아 화합물 및 이의 약학적으로 허용되는 염, 이의 제조 및 용도는 당분야에 공지이다. 예를 들어, 이들은 다른 참고 문헌 중에서도 특히 U.S. 공개 특허 출원 제2003/0216446호, 제2003/0232765호 및 제2004/0023961호에 개시되어 있으며, 이들 각각을 전체로 참조하여 본 발명에 포함시킨다. 아릴 우레아 화합물의 약학적으로 허용되는 염의 예에는 이에 제한되는 것은 아니고 히드로클로라이드, 설페이트, 포스페이트, 아세테이트, 푸마레이트, 말레이트, 타르타레이트, 카보네이트, 락테이트, 말레에이트, 숙시네이트, 나트륨염, 칼슘염, 칼륨염 및 마그네슘염 등이 포함된다.

일부 구체예에서, 아릴 우레아 화합물은 소라페닙이다. 소라페닙의 바람직한 약학적으로 허용되는 염은 소라페닙 토실레이트이다. 상품명 NEXAVAR^®로 알려진 소라페닙 토실레이트는 화학명이 4-(4-{3-[4-클로로-3-(트리플루오로메틸)페닐]우레이도}페녹시)N ²-메틸피리딘-2-카르복사미드 4-메틸벤젠설포네이트이다. 소라페닙은 다수의 수용체 티로신 키나제를 억제하는 소형 분자 유기 화합물로서, 이들 수용체 중 일부는 종양 성장, 병원성 혈관생성 및 암의 전이성 진행에 관여하는 것들이다. 예를 들어, 소라페닙은 CRAF, BRAF, KIT, FLT-3, VEGFR-2, VEGFR-3 및 PDGFR-β의 억제제이다. NEXAVAR^®는 Onyx Pharmaceuticals(Emeryville, CA)에서 판매하고, 신장 세포 암종의 치료용으로 제안되었다.

추가 구체예에서, 티로신 키나제 억제제는 티로신 키나제의 기능을 길항하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편이다. 티로신 키나제 수용체 및/또는 이 수용체에 결합하는 리간드(예를 들어, 성장 인자)예 결합하는 항체는 기능 차단을 일으킬 수 있다. 일부 구체예에서, 티로신 키나제 억제제는 베바시주맙이다. 베바시주맙은 인간 혈관 내피세포 성장 인자(VEGF)에 결합하여 이의 생물학적 활성을 억제하는 재조합 인간화 단일클론 IgG1 항체이다. 베바시주맙, 이의 제조 및 이의 용도는 당분야에 공지이다. 예를 들어, 여러 문헌 중에 특히, 문헌 [Presta, et al, "Humanization of an Anti-Vascular Endothelial Growth Factor Monoclonal Antibody for the Therapy of Solid Tumors and Other Disorders", Cancer Research, vol. 57, pp. 4593-4599 (1997)]에 개시되어 있다. 베바시주맙은 상품명AVASTIN^®로 알려져 있으며, Genentech(South San Francisco, CA)에서 판매한다. 베바시주맙은 결장 또는 직장의 전이성 암종; 및 전이성 비편평, 비소세포 폐암의 치료를 위해 제안되었다.

제형 및 투여

약학 조합물의 각 약제는 단리 및 정제 형태로 투여되어, 암세포 또는 종양과 직접 접촉할 수 있다. α5β1 길항제 및 티로신 키나제 억제제의 제조 및 정제 방법은 본 명세서에서 인용하는 참고 문헌에 개시되어 있다. 순도 및 균질성은 표준 분석 화학법, 예컨대 폴리아크릴아미드 겔 전기영동 및 고성능 액체 크로마토그래피 등을 사용하여 결정할 수 있다. 조제물 내 존재하는 우세한 종의 화합물을 실질적으로 정제된 것으로 간주한다. 예를 들어, 전기영동 겔에서 실질적으로 하나의 밴드를 나타내는 화합물이 실질적으로 정제된 것이다. 일부 구체예에서, 본 발명의 약학 조합물에 사용되는 각 약제는 순도가 85% 이상, 95% 이상 또는 99% 이상이다.

다르게는, 약학 조합물의 약제는 투여 전에 1 이상의 약학 조성물로 제형화될 수 있다. 본 명세서에서 사용하는 용어 "약학 조성물"은 약학적으로 허용되는 담체 또는 부형제에 제형화된 약제를 의미한다. 따라서, 약학 조성물은 약제는 개별 약학 조성물 또는 1 이상의 약학 조성물로 제형화될 수 있다. 이러한 약학 조성물은 통상 약학적으로 허용되는 담체 또는 약학적으로 허용되는 부형제로 제형화된 약제를 포함하는 적절한 제형은 선택된 투여 경로에 따라 좌우된다. 약물(약제)의 투여 및 제형화를 위한 방법은 문헌 ["Remington's Pharmacological Sciences," Mack Publishing Co., Easton, PA.]에 기술되어 있다.

본 명세서에서 사용하는 용어 "약학적으로 허용되는 담체" 및 "약학적으로 허용되는 부형제"는 약제의 투여를 용이하게 하지만, 피험체에게 상당한 염증을 유발하지 않으며, 투여되는 약제의 약리 활성 및 특성을 폐기시키지 않고, 또한 사용되는 약제의 용량 및 농도에 노출된 세포 또는 피험체에게 독성이 없는 담체, 부형제 또는 희석제를 의미한다. 약학적으로 허용되는 담체 및 부형제의 예는 이에 제한되는 것은 아니고, 완충제, 공용매, 삼투성 제제, pH 조정제, 산화방지제, 당류, 젤라틴, 검, 색소, 결합제, 윤활제, 충전제, 붕해제, 보존제, 향미제, 증점제, 착색제 및 유화제 등을 포함한다.

α5β1 길항제 또는 티로신 키나제 억제제를 포함하는 약학 조성물은 이에 제한되는 것은 아니고, 경구, 피하, 정맥 내, 유리체 내(intravitreally), 비내, 국소, 경피, 경점막, 복막내, 근육내, 폐내, 질, 직장, 안내, 심실내 또는 포막내를 포함하는 다양한 경로로 피험체에게 투여될 수 있다. 일부 구체예에서, 상기 조성물은 정맥 내 또는 경구 투여된다.

약학 조성물은 예를 들어, 통상의 혼합법, 용해법, 과립화, 당의정 제조법, 분말화, 유화, 캡슐화, 포괄화 또는 동결건조 등을 통한 당분야에 공지된 방법을 통해 제조할 수 있다. 약학 조성물은 선택된 투여 경로에 따라서, 환약, 용액제, 정제, 캡슐, 액상, 겔, 현탁제, 당의정 코어, 에어로졸 분무, 좌제 등으로 제조될 수 있다.

주사를 위해서, 약제는 수용액제로 제형화될 수 있다. 일부 구체예에서, 용액제는 수 중 5% 덱스트, 0.9% 염수 또는 생리적 적합 완충액, 예컨대 행크액 또는 링거액 등이다. 추가적으로, 활성 화합물(약제)의 현탁제를 친지성 비히클 또는 리포솜내로 하여 제조할 수 있다. 적절한 친지성 비히클은 지방유, 예컨대 참깨유; 합성 지방산 에스테르, 예컨대 에틸 올레에이트 및 트리글리세리드; 또는 리포솜 등의 재료를 포함한다. 수성 주사 현탁제는 또한 현탁제의 점도를 증가시키는 물질, 예컨대 나트륨 카르복시메틸 셀룰로스, 솔비톨 또는 덱스트란을 함유할 수도 있다. 경우에 따라서, 현탁제는 또한 고농축 용액제를 제조 가능하도록 화합물의 가용성을 증가시키는 제제 및/또는 적절한 안정화제를 함유할 수 있다. 대안적으로, 활성 성분(약제)은 사용전에 적절한 비히클, 예컨대 멸균된, 무발열원 수, 수중 5% 덱스트로스 또는 0.9% 염수와 재구성되는 분말 형태일 수 있다.

약제는 예를 들어 볼러스 주사 또는 연속 주입을 통한 비경구 투여용으로 제형화될 수 있다. 주사용 제형은 단위 제형, 예컨대 앰플, 바이알, 다중 용량 용기, 정맥 백 또는 보틀 등으로 존재할 수 있다.

경점막 투여를 위해서 침투하려는 장벽에 대해 적절한 침투제를 제형에 사용한다. 이러한 침투제는 대체로 당분야에 알려져 있다.

경구 투여를 위해서, 약제는 약학적으로 허용되는 담체와 배합되어 제형화될 수 있다. 이러한 담체는 경구 섭취를 위해서, 약제를 정제, 환약, 로젠지, 당의정, 캡슐, 액상, 겔, 시럽, 슬러리, 현탁제 등으로 제형화시킨다. 경구용 약학 조성물은 고체 부형제를 사용하고, 경우에 따라서 얻어진 혼합물을 분쇄하고, 필요에 따라 다른 적절한 보조제를 첨가한 후, 과립 혼합물을 처리하여 정제 또는 당의정 코어를 얻을 수 있다. 유용한 부형제는 충전제, 예컨대 락토스, 수크로스, 만니톨 또는 솔비톨을 포함하는 당류; 셀룰로스 조제물, 예컨대 옥수수 전분, 밀전분, 쌀전분 및 감자 전분; 및 다른 물질, 예컨대 젤라틴, 검 트라가칸트, 메틸 셀룰로스, 히드록시프로필메틸 셀룰로스, 나트륨 카르복시메틸셀룰로스 및/또는 폴리비닐-피롤리돈(PVP)을 포함한다. 필요하다면, 붕해제, 예컨대 가교결합된 폴리비닐 피롤리돈, 아가 또는 알긴산 등을 첨가할 수 있다. 나트륨 알기네이트 등의 염도 사용할 수 있다.

약제는 당의정 코어로 제형화될 수 있다. 이를 위해서, 경우에 따라서, 검 아라비카, 탈크, 폴리비닐 피롤리돈, 카보폴겔, 폴리에틸렌 글리콜 및/또는 이산화티타늄, 래커액 및 적절한 유기 용매 또는 용매 혼합물을 함유할 수 있는, 농축된 당용액을 사용할 수 있다. 활성 화합물 용량의 다양한 조합물을 특징짓거나 또는 구별하기 위하여 정제 또는 당의정 피복부에 염료 또는 색소를 첨가할 수 있다.

약제는 또한 젤라틴으로 제조된 압입 맞춤(push-fit) 캡슐을 비롯하여 젤라틴 및 가소제, 예컨대 글리세롤 또는 솔비톨로 제조된 연질, 밀폐 캡슐로 제형화될 수 있다. 압입 맞춤 캡슐은 충진제, 예컨대 락토스; 결합제, 예컨대 전분; 및/또는 윤활제, 예컨대 탈크 또는 마그네슘 스테아레이트; 및 경우에 따라 안정화제와 혼합된 약제를 함유할 수 있다. 연질 캡슐의 경우, 약제는 적절한 액체, 예컨대 지방유, 액체 파라핀 또는 액체 폴리에틸렌 글리콜에 용해 또는 현탁될 수 있다. 다르게, 약제는 경질 젤라틴 캡슐로 제형화될 수 있다.

흡입에 의한 투여를 위해서, 약제는 가압팩 또는 흡입기 및 적절한 추진제 예컨대 디클로로디플루오로메탄, 트리클로로플루오로메탄, 디클로로테트라-플루오로에탄 또는 이산화탄소 등을 사용한 에어로졸 분무 형태로 전달될 수 있다. 가압 에어로졸의 경우, 용량 단위는 계량된 양을 전달하기 위한 밸브를 제공하여 제어할 수 있다. 예를 들어, 흡입기 또는 취입기에 사용하기 위한 젤라틴의 카트리지 및 캡슐은 약제 및 적절한 분말 베이스, 예컨대 락토스 또는 전분의 분말 혼합물을 혼합하여 제형화될 수 있다.

또한 약제는 예를 들어 통상의 좌제 베이스, 예컨대 코코아 버터 또는 다른 글리세리드를 사용하여, 예컨대 좌제 또는 체류 관장제 등의 직장 조성물로 제형화될 수 있다.

또한, 약제는 데포 조제물로 제형화될 수 있다. 이러한 장기 작용 조성물은 예를 들어, 피하 이식, 또는 근육 주사를 통해 투여될 수 있다. 약제는 이러한 투여 경로를 위해서, 적절한 중합체 또는 소수성 물질과 함께, 이온 교환 수지와 함께, 또는 난용성 염으로서 제형화될 수 있다.

추가적으로, 약제는 적절한 지속 방출 시스템, 예컨대 약제를 함유하는 고체 소수성 중합체의 반투과성 매트릭스로서 전달될 수 있다. 다양한 지속 방출 물질이 당분야의 당업자에게 공지되어 있다. 지속 방출 캡슐은 이들의 화학 특성에 따라서, 수 일 내지 최대 100일 동안 약제를 방출할 수 있다. 약제의 화학 성질 및 안정성에 따라서, 안정화를 위한 추가 전략을 채택할 수 있다.

일부 구체예에서, α5β1 길항제는 pH 5.5∼7.5인, 1.0 mg/㎖∼15.0 mg/㎖ α5β1 길항제, 22 mM∼28 mM 시트레이트, 135 mM∼165 mM 염화나트륨, 0.04%∼0.06% 폴리솔베이트(TWEEN^®) 80의 용액을 포함하는 약학 조성물로서 제형화된, 그 항원 결합 단편을 비롯한, 항-α5β1 항체이다. 일부 구체예에서, 상기 액상 제형의 pH 범위는 pH 6.0∼pH 7.0, pH 6.3∼pH 6.7, pH 6.4∼6.6, 또는 약 pH 6.5이다. 바람직하게, 상기 조성물은 안정하고 등장성이다. 특히 바람직한 구체예에서, 상기 약학 조성물은 pH 6.5인, 10.0 mg/㎖ α5β1 길항제, 25 mM 시트레이트, 150 mM 염화나트륨, 0.05% 폴리솔베이트(TWEEN^®) 80의 용액을 포함한다. 바람직하게, 상기 조성물은 2∼8℃에서 냉장보관한다.

본 발명의 약학 조합물에 유용한 항-α5β1 항체에 대한 예시적인 제형, 용량, 투여 방법 및 다른 치료 프로토콜은 U.S. 공개 특허 출원 제2005/0260210호에 기술되어 있으며, 이를 참조하여 본 발명에 포함시킨다.

일부 구체예에서, 그 약학적으로 허용되는 염을 포함하여, 수니티닙은 수니티닙 12.5 mg, 25 mg 또는 50 mg과 동등한 수니티닙 말레이트, 만니톨, 크로스카멜로스 나트륨, 포비돈 및 마그네슘 스테아레이트를 함유하는 캡슐을 포함하는 약학 조성물로서 제형화된다.

일부 구체예에서, 그 약학적으로 허용되는 염을 포함하여, 소라페닙은 200 mg 소라페닙과 동등한 소라페닙 토실레이트, 크로스카멜로스 나트륨, 미정질 셀룰로스, 히프로멜로스, 나트륨 라우릴 설페이트, 마그네슘 스테아레이트, 폴리에틸렌 글리콜, 이산화티타늄 및 적색 산화제2철을 함유하는 정제를 포함하는 약학 조성물로서 제형화된다.

일부 구체예에서, 그 항원 결합 단편을 포함하여, 베바시주맙은 각각 4 ㎖ 또는 16 ㎖ 단일 사용 바이알 중에 100 mg 또는 400 mg의 베바시주맙을 포함하는 약학 조성물로 제형화된다. 100 mg, 4 ㎖ 바이알은 240 mg α,α-트레할로스 2수화물, 23.2 mg 인산나트륨 (1염기, 1수화물), 4.8 mg 인산나트륨 (2염기, 무수), 1.6 mg 폴리솔베이트 20 및 물 중에 제형화된다. 400 mg, 16 ㎖ 바이알은 960 mg α,α-트레할로스 2수화물, 92.8 mg 인산나트륨(1염기, 1수화물), 19.2 mg 인산나트륨(2염기, 무수), 6.4 mg 폴리솔베이트 20, 및 물 중에 제형화된다. 바람직하게, 상기 조성물 각각은 2∼8℃에 냉장보관된다. 또한, 조성물을 빛으로부터 보호하는 것이 바람직하다. 또한, 피험체에게 투여하기 전에 베바시주맙의 필요량을 바이알로부터 취하여 100 ㎖의 0.9% 염수에 희석하는 것이 바람직하다.

약제는 투여 방법에 따라서 다양한 단위 용량 형태로 투여될 수 있다. 본 발명의 특정 구체예에서, 투여 빈도 및 사용되는 정확한 용량은 치료 목적에 따라 다를 수 있고, 공지된 기법을 사용하여 당분야의 당업자가 확인할 수 있다. 당분야에 공지된 바와 같이, 전신 대 국소 전달, 연령, 체중, 전반적인 건강, 성별, 식이법, 투여 시간, 약물 상호작용 및 병태의 중증도에 대한 조정이 필수적일 수 있다.

투여량 및 간격은 약리 효능을 유지하기에 충분하게 약제의 혈장 수준을 제공하도록 개별적으로 조정할 수 있다. 이러한 혈장 수준을 최소 유효 농도(MEC)라고 한다. MEC는 각 약제에 따라 다양하지만, 시험관 내 데이타로부터 추정할 수 있다. MEC를 얻는데 필요한 용량은 개별 특징 및 투여 경로에 따라 좌우된다. HPLC 분석 또는 생체분석법을 사용하여 혈장 농도를 측정할 수 있다. 투약 간격도 MEC 값을 사용하여 결정할 수 있다. 약제는 상기 시간의 10∼90% 동안, 바람직하게는 30∼90%, 가장 바람직하게는 50∼90% 동안 혈장 수준을 MEC 보다 높게 유지하는 치료 계획을 사용하여 투여되어야 한다.

일부 구체예에서, 약제는 환자 체중(예컨대 kg 단위) 당 약제의 중량(예컨대 mg 단위)(즉, "mg/kg")을 기준으로 피험체에게 투여된다. 다른 구체예에서, 약제는 이 약제의 중량(예컨대 mg 단위)을 기준으로 피험체에게 투여된다. 추가 구체예에서, 약제는 혈액 부피량(예컨대 ㎖ 단위) 당 약물의 양(예컨대 mM 단위)을 기준으로 피험체에게 투여된다.

일반적으로, α5β1 길항제의 유효 용량은 1∼15 mg/kg 범위이다. 바람직하게, 상기 용량은 10∼15 mg/kg이다. 바람직하게, α5β1 항체 길항제 또는 이의 항원 결합 단편은 환자 체중(kg 단위) 당 항체의 중량(mg 단위)을 기준으로 피험체에게 투여되고 0.1∼15 mg/kg의 α5β1 길항제 항체, 예컨대 볼록시시맙, 또는 이의 항원 결합 단편, 예컨대 F200을 포함한다. 예를 들어, 항체 또는 이의 항원 결합 단편의 적절한 농도는 이에 제한되는 것은 아니고, 0.1∼15 mg/kg, 0.5 mg/kg, 1.0 mg/kg, 1.0∼5.0 mg/kg, 2.5 mg/kg, 5 mg/kg, 5∼10 mg/kg, 7.5 mg/kg, 10 mg/kg, 10∼15 mg/kg, 12.5 mg/kg 또는 15 mg/kg을 포함한다. 바람직하게, 상기 농도는 10 또는 15 mg/kg이다.

본 발명의 약학 조합물에 유용한 항-α5β1 항체에 대한 예시적인 용량 및 치료 계획은 U.S. 공개 특허 출원 제2005/0260210호에 개시되어 있으며, 이를 전체로 참조하여 본 발명에 포함시킨다.

바람직하게, α5β1 펩티드 및 소형 분자 유기 화합물 길항제는 혈액 부피 1㎖ 당 1∼100 피코몰의 농도로 투여된다. 바람직하게, 상기 용량은 1시간 동안 정맥 내 주입으로 피험체에게 투여된다. 추가 용량은 연장 시간 동안 투여하여, 피험체에서 정상 상태 혈청 농도를 수립하도록 한다. 예를 들어, 10 mg/kg의 주입물을 1년 기간 동안 주당 1회 투여할 수 있다.

대체로, 티로신 키나제 억제제의 유효량은 1∼1000 mg이다. 바람직하게, 상기 용량은 1∼600 mg이다.

바람직하게, 수니티닙은 약학 조성물이 0.1∼100 mg 수니티닙 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 포함하도록 약물 중량을 기준으로 피험체에게 투여된다. 예를 들어, 수니티닙 또는 이의 약학적으로 허용되는 염의 적절한 농도는 이에 제한되는 것은 아니고, 0.1∼100 mg, 12.5 mg, 0.1∼25 mg, 25 mg, 25∼50 mg, 37.5 mg, 50 mg, 50∼75 mg, 62.5 mg, 75 mg, 75∼100 mg, 87.5 mg 및 100 mg을 포함한다.

수니티닙 말레이트는 상품명 SUTENT^®로 알려져 있다. SUTENT^® 캡슐은 12.5, 25 또는 50 mg의 수니티닙과 동등한 수니티닙 말레이트를 함유하는 인쇄된 경질쉘 캡슐로서 제공된다. 위장 기질 종양 및 신장 세포 암종을 치료하기 위한 SUTENT^®의 권장량은 1일 1회 섭취되는 경구 용량이 50 mg으로서, 치료 4주 스케줄 이후 2주 휴지기가 후속된다. 개별 안전성 및 내약성에 따라서 12.5 mg 증량의 용량 증가 또는 감소를 권장한다.

바람직하게, 소라페닙은 약학 조성물이 1∼800 mg 소라페닙 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 포함하도록 약물의 중량을 기준으로 피험체에게 투여된다. 예를 들어 소라페닙 또는 이의 약학적으로 허용되는 염의 적절한 농도는 이에 제한되는 것은 아니고, 200 mg, 400 mg, 600 mg 및 800 mg을 포함한다.

소라페닙 토실레이트는 상품명 NEXAVAR^®로 알려져 있다. NEXAVAR^® 정제는 200 mg 소라페닙과 동등한 소라페닙 토실레이트를 함유하는 적색, 구형, 막코팅된 정제로서 제공된다. 신장 세포 암종을 치료하기 위한 NEXAVAR^®의 권장 용량은 400 mg(2개, 200 mg 정제)을 1일 2회 섭취하는 것이다.

바람직하게, 베바시주맙은 환자 체중(kg 단위) 당 항체 중량(mg)을 기준으로 피험체에게 투여되고 베바시주맙 또는 이의 항원 결합 단편을 0.1∼20 mg/kg 포함한다. 예를 들어, 항체 또는 이의 항원 결합 단편의 적절한 농도는 이에 제한되는 것은 아니고, 0.1∼20 mg/kg, 1.0∼5.0 mg/kg, 2.5 mg/kg, 5 mg/kg, 5∼10 mg/kg, 7.5 mg/kg, 10 mg/kg, 10∼15 mg/kg, 12.5 mg/kg , 15 mg/kg, 17.5 mg/kg 또는 20 mg/kg을 포함한다.

약학 조합물의 개별 약제를 개별적으로 투여하는 경우에, 하루당 주어지는 각 약제의 투약 횟수는 동일할 필요는 없다. 예를 들어, 한 약제가 활성 지속기간이 더 길어서 투여 빈도가 낮을 필요가 있을 수 있다.

키트

본 발명의 일 구체예가 각 약제를 개별적으로 투여할 수 있는, 약제의 조합물을 투여하여 암을 예방 또는 치료하기 위한 것이기 때문에, 본 발명은 또한, 키트 형태로 개별 약제 또는 약학 조성물을 조합하는 것에 관한 것이다. 즉, 1 이상의 α5β1 길항제 약학 조성물 및 1 이상의 티로신 키나제 억제제 약학 조성물의, 2 이상의 개별 유닛을 조합한 키트를 고려한다. 상기 키트는 바람직하게 개별 성분들의 투여를 위한 지시서를 포함하게 된다. 이러한 키트 형태는 개별 성분이 상이한 투약 형태, 예를 들어 경구 및 비경구로 투여되어야 하거나, 또는 다른 투약 간격으로 투여되는 경우에 특히 이롭다.

조치( indications )

상기 약학 조합물은 이에 제한되는 것은 아니고, 신장 세포 암종, 흑색종, 췌장암, 위장 기질 종양, 방광암, 유방암, 결장암, 섬유육종, 폐암, 전이성 흑색종, 전립선암, 난소암 및 비장암을 포함하는 수많은 종류의 고형 종양을 치료하기 위한 치료적 접근법을 제공한다. 일부 구체예에서, 본 발명은 종양 세포의 표면 상에 α5β1 인테그린을 발현하는 임의의 암을 치료하기 위한 약학 조합물을 제공한다. 그 표면에 α5β1 인테그린을 발현하는 종양 세포는 당분야에 공지이고, U.S. 공개 특허 출원 제2005/0260210호에 개시되어 있으며, 이를 참조하여 본 발명에 포함시킨다.

본 발명을 수행하는 방식 및 방법은 하기 실시예를 참조하여 당분야의 당업자가 더 깊이 이해할 수 있을 것이나, 임의 방식으로 이들 실시예를 본 발명의 범주 또는 이의 청구항의 범주를 제한하려는 것은 아니다.

실시예

실시예 1

이 실시예는 볼록시시맙 유사체인 α5β1 인테그린 길항제, 339.1 항체와 조합한 티로신 키나제 억제제, SUTENT^®의 효능 실험을 기술한 것이다. 이 실험은 다음의 2종의 상이한 암의 전임상 마우스 이종이식 종양 모델을 사용하여 수행하였다: 횡문근육종(rhabdomysosarcoma)(A673), 신장암(SN-12C) 및 신장암(786-0).

볼록시시맙은 쥣과동물 α5β1 인테그린과 교차반응하지 않기 때문에, 이들 마우스 이종이식 실험에서는, 볼록시시맙 대신, 대용 항체, 339.1을 사용하였다. 339.1 항체는 인간 α5β1을 표적으로 하는 볼록시시맙과 유사한 특성으로, 쥣과동물 α5β1을 표적화한다. 339.1 중쇄 가변 영역(서열 번호 22) 및 339.1 경쇄 가변 영역(서열 번호 23)의 아미노산 서열을 첨부한 서열 목록에 도시하였다. 따라서, 볼록시시맙의 마우스 유사체의 사용은 쥣과동물 α5β1 인테그린에 기인하는 이종이식 종양 성장에 대한 혈관생성 효과를 표적화할 수 있기 때문에 보다 나은 효능 측정법을 제공하는 것으로 여겨졌다.

확립된 A673, SN-12C 또는 786-0 이종이식 종양을 보유하는 마우스를 비히클, 339.1, SUTENT^® 또는 339.1와 최대하(sub-maximal) 용량의 SUTENT^®의 조합물로 처리하였다. 상기 339.1 항체를 10 mg/kg으로 1주에 2회 복강내 투여하고, SUTENT^®를 1일 기준 20 mg/kg 경구 투약하였다.

종양 모델 A673, SN-12C 및 786-0을 갖는 실험에 대해서 처리 일수에 대한 이종이식 종양 성장 그래프를 각각 도 1, 2 및 3에 도시하였다. 이러한 결과는 항-α5β1 길항제를 티로신 키나제 억제제, SUTENT^®와 조합하여 사용시 종양이 상당하게 감소하는 경향이 있음을 보여주었다.

실시예 2

이 실시예는 암의 전임상 모델을 사용한, SUTENT^®, 볼록시시맙 및 볼록시시맙 유사체, 339.1의 조합 효과 실험을 기술하였다. 구체적으로, 이 실험은 신장암(786-0)의 마우스 이종이식 종양 모델을 사용하여 수행하였다.

볼록시시맙을 포함하는 약학 조성물을 사용하여 인간 암 환자의 치료에 대한 완전한 항종양 효능을 확인하기 위해서 볼록시시맙 대용 항체, 339.1 이외에도 볼록시시맙을 사용하였다. 339.1 항체가 종양 이종이식 모델을 지지하기 위해 발생된 쥣과동물 혈관구조를 표적화할 수 있는 반면 볼록시시맙은 인간 786.0 종양 세포의 인간 α5β1 인테그린을 표적화할 수 있다. 결과적으로, 이종이식 모델에서 볼록시시맙과 339.1의 조합물은 종양과 혈관구조 둘 모두를 표적화하여 인간에서 볼록시시맙의 임상 실험 결과를 보다 면밀하게 모델링하게 될 것으로 기대된다.

이들 실험에서, 확립된 이종이식 종양을 보유하는 마우스를 비히클과 비히클, 비히클과 SUTENT^®, 339.1 + 볼록시시맙 및 비히클, 또는 339.1 + 볼록시시맙 및 SUTENT^®로 처리하였다. 339.1 항체와 볼록시시맙은 제1회 339.1의 용량을 25 mg/kg으로 한 것을 제외하고는 10 mg/kg을 1주 2회 복강내 투여하였고, SUTENT^®를 1일 기준 20 mg/kg으로 경구 투약하였다.

실험 결과는 도 4에 그래프로 나타내었다. 신장암의 786-0 모델에서, 대조군 대비 SUTENT^®, 339.1 및 볼록시시맙의 조합물에서 통계적으로 유의한 효과가 관찰되었다.

이러한 결과는 암, 특히 신장세포 암종이 있는 환자에서 볼록시시맙과 SUTENT^®(수니티닙)의 약학 조합물의 용도를 뒷받침하는 것이다.

실시예 3

이 실시예는 신장암의 마우스 이종이식 종양 모델(786-0)을 사용한 NEXAVAR^®, 볼록시시맙 및 볼록시시맙 유사체, 339.1의 약학 조합물의 조합 효능 실험을 기술하였다.

실시예 2에서 상기에 설명한 바와 같이, 339.1 항체는 종양 이종이식 모델을 지지하기 위해 발생한 마우스 혈관구조를 표적으로 할 수 있지만 볼록시시맙은 인간 786.0 종양 세포에서 인간 α5β1 인테그린을 표적화할 수 있기 때문에, 대용 항체 339.1 이외에도, 볼록시시맙을 사용하였다. 결과적으로, 이종이식 모델에서 볼록시시맙과 339.1의 조합물은 종양과 혈관구조 둘 모두를 표적화하여 인간에서 볼록시시맙의 임상 실험 결과를 보다 면밀하게 모델링할 것으로 예측된다.

이들 실험에서, 확립된 이종이식 종양 모델을 보유한 마우스를 비히클과 비히클, 비히클과 NEXAVAR^®, 339.1 + 볼록시시맙과 비히클, 또는 339.1 + 볼록시시맙과 NEXAVAR^®로 처리하였다. 339.1 항체와 볼록시시맙은 제1회 339.1의 용량을 25 mg/kg으로 한 것을 제외하고는, 10 mg/kg으로 주당 1회 복강내 투여하였고, NEXAVAR^®는 1일 기준으로 12.5 mg/kg을 경구 투약하였다.

실험 결과는 도 5에 실험 일수에 따른 종양 부피의 그래프로 나타내었다. NEXAVAR^®, 339.1 및 볼록시시맙의 약학 조합물을 사용한 신장암의 786-0 모델에서 대조군 대비 통계적으로 유의한 효과가 관찰되었다.

이들 결과는 암, 특히 신장 세포 암종을 갖는 환자에서 볼록시시맙과 NEXAVAR^®(소라페닙)의 약학 조합물의 용도를 뒷받침해준다.

실시예 4

이 실험에서는 3종류의 상이한 함의 전임상 모델을 사용한, AVASTIN^®, 볼록시시맙 및 볼록시시맙 유사체, 339.1의 조합 효능 실험을 기술하였다, 구체적으로, 이 실험은 횡문근육종(A673), 흑색종(LOX) 및 폐암(H460)의 마우스 이종이식 종양 모델을 사용하여 수행하였다. AVASTIN^®(베바시주맙)은 VEGF 성장 인자 리간드에 결합하여 티로신 키나제 VEGE 수용체를 억제하도록 작용하는 시판되는 암 치료제이다.

실시예 2에 상기 기술한 바와 같이, 339.1 항체는 종양 이종이식 모델을 지지하기 위해 발생한 마우스 혈관구조를 표적으로 할 수 있지만 볼록시시맙은 인간 786.0 종양 세포에서 인간 α5β1 인테그린을 표적화할 수 있기 때문에, 대용 항체 339.1 이외에도, 볼록시시맙을 사용하였다. 결과적으로, 이종이식 모델에서 볼록시시맙과 339.1의 조합물은 종양과 혈관구조 둘 모두를 표적화하여 인간에서 볼록시시맙의 임상 실험 결과를 보다 면밀하게 모델링할 것으로 예측된다.

이들 실험에서, 확립된 이종이식 종양을 보유하는 마우스를 비히클과 비히클, 비히클과 AVASTIN^®, 339.1 + 볼록시시맙, 또는 339.1 + 볼록시시맙 및 AVASTIN^®으로 처리하였다. A673 이종이식을 사용한 실험에서, 339.1 항체와 볼록시시맙은 10 mg/kg으로 주당 2회 복강 투여하고, AVASTIN^®은 0.5 mg/kg으로 주당 2회 투여하였다. LOX와 H460 이종이식을 사용한 실험에서는, 339.1 항체와 볼록시시맙을 10 mg/kg으로 주당 2회 복강 투여하였는데, 단 일부 실험에서, 339.1의 제1회 투여 용량으로 25 mg/kg을 사용하였고, AVASTIN^®은 10 mg/kg으로 주당 2회 투여하였다.

실험 결과는 각각 도 6, 7 및 8에 도시한 실험 일수에 따른 종양 부피의 그래프로 나타내었다. 이러한 결과는 항-α5β1 길항제를 AVASTIN^®과 사용한 경우에 종양 감소가 더 큰 경향이 있음을 시사하는 것이다.

마우스 이종이식 모델에서 339.1을 사용한 결과는 볼록시시맙과 베파시주맙의 약학 조합물이 인간 암 환자, 특히 신장암, 폐암 및 흑색종 징후에 대한 치료제로서 가능하다는 것을 시사한다.

실시예 5

약학 조합물에 대한 임상 시험 모델

이 실시예는 암을 치료하기 위해 볼록시시맙과 SUTENT^®의 조합물을 입증하기 위해 수행할 수 있는 가능한 인간 임상 실험을 기술하였다.

전이성 신장 세포 암종을 가진 환자에게 질환 진행까지 정맥 내 위약과 조합하여 SUTENT^®(50 mg qd, 4주 투약, 2주 휴지)를 경구 투여하거나, 또는 정맥 내 볼록시시맙(10 또는 15 mg/kg q2w)과 조합하여 SUTENT^®(50 mg qd, 4주 투약, 2주 휴지)를 경구 투여하였다. 치료 후, 질환 진행까지의 시간을 측정하여 환자를 평가하였다. 또한 위약과 SUTENT^®를 치료한 환자에 비하여 볼록시시맙과 SUTENT^®를 치료한 환자의 반응 지속기간을 측정하여 환자를 평가하였다. 안정성과 효능 측정도 수행하였는데, 예컨대 질환 지정 방사선 사진 영상법, 신체 검사, 생명 징후 측정법 및 다른 표준 실험 측정법을 통해 수행하였다.

당분야의 당업자는 본 명세서에 내재된 것을 비롯하여 언급한 결과와 장점을 얻고 상기 목적들을 수행하도록 본 발명을 충분히 조정시키는 것을 쉽게 이해할 수 있다. 본 명세서에 기술한 조성물과 방법은 대표적이고, 예시적인 구체예이고, 본 발명의 범주를 한정하려는 의도가 아니다.

본 발명의 특정 구체예를 예시하고 설명하였지만, 당분야의 당업자는 본 발명의 범주와 의도를 벗어나지 않으면서 다양한 다른 변형 및 변화를 가할 수 있다는 것을 이해할 수 있다. 따라서, 본 발명의 범주에 속하는 이러한 모든 변화 및 변형을 첨부된 청구항에 포함시키고자 한다.

본 명세서에 예시적으로 적절히 기술한 발명은 본 명세서에 구체적으로 개시하지 않은 임의의 성분(들) 또는 제한(들) 없이 실시할 수 있다. 사용된 용어와 표현들은 설명 용어로서 사용되는 것이고 제한하려는 것이 아니며, 도시하고 기술한 특징들의 임의 균등물 또는 이의 일부를 이러한 용어 및 표현에서 제외시키려는 의도가 없다

본 발명을 광범위하고 일반적으로 기술하였다. 일반적 개시 내용에 속하는 협의 종 및 하위속 그룹 각각도 본 발명의 일부를 형성한다. 이는 삭제된 물질을 특히 본 명세서에 언급한 것과는 무관하게, 상기 속에서 임의의 대상을 제게하는 음성적 제한 또는 조건을 갖는 본 발명의 총괄적인 설명을 포함한다.

모든 특허 및 공개물은 이들 각 공개물을 참조하여 포함시키는 것으로 구체적이고 개별적으로 나타낸 것과 동일한 정도로 참조하여 포함시킨다.

SEQUENCE LISTING <110> PDL BioPharma, Inc. Ramakrishnan, Vanitha Bhaskar, Vinay <120> Pharmaceutical Combinations <130> 05882.0237.00PC00 <150> 60/952,328 <151> 2007-07-27 <160> 23 <170> PatentIn version 3.4 <210> 1 <211> 1353 <212> DNA <213> Artificial <220> <223> volociximab complete heavy chain DNA sequence <400> 1 caggtgcagc tgaaggagtc aggacctggc ctggtggcgc cctcacagag cctgtccatc 60 acatgcacca tctcagggtt ctcattaacc gactatggtg ttcactgggt tcgccagcct 120 ccaggaaagg gtctggagtg gctggtagtg atttggagtg atggaagctc aacctataat 180 tcagctctca aatccagaat gaccatcagg aaggacaact ccaagagcca agttttctta 240 ataatgaaca gtctccaaac tgatgactca gccatgtact actgtgccag acatggaact 300 tactacggaa tgactacgac gggggatgct ttggactact ggggtcaagg aacctcagtc 360 accgtctcct cagcttccac caagggccca tccgtcttcc ccctggcgcc ctgctccagg 420 agcacctccg agagcacagc cgccctgggc tgcctggtca aggactactt ccccgaaccg 480 gtgacggtgt cgtggaactc aggcgccctg accagcggcg tgcacacctt cccggctgtc 540 ctacagtcct caggactcta ctccctcagc agcgtggtga ccgtgccctc cagcagcttg 600 ggcacgaaga cctacacctg 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Claims

α5β1 길항제 및 티로신 키나제 억제제를 포함하는 암 치료를 위한 약학 조합물.
제1항에 있어서, 암은 신장 세포 암종, 흑색종, 췌장암, 위장 기질 종양, 방광암, 유방암, 결장암, 섬유육종, 폐암, 전이성 흑색종, 전립선암, 난소암 및 비장암으로 이루어진 군에서 선택되는 것인 약학 조합물.
제1항에 있어서, α5β1 길항제는 항체 또는 이의 항원 결합 단편인 약학 조합물.
제3항에 있어서, 항체는 서열 번호 2를 포함하는 중쇄 및 서열 번호 4를 포함하는 경쇄를 포함하는 것인 약학 조합물.
제3항에 있어서, 항체는 서열 번호 5를 포함하는 중쇄 가변 영역, 서열 번호 6을 포함하는 경쇄 가변 영역 및 인간 불변 영역을 포함하는 것인 약학 조합물.
제1항에 있어서, 티로신 키나제 억제제는 비스-단환식, 이환식 및 복소환식 아릴 화합물, 비닐렌아자인돌 유도체, 1-시클로프로필-4-피리딜퀴놀론, 스티릴 화합물, 스티릴-치환된 피리딜 화합물, 퀴나졸린 유도체, 셀레나인돌 및 셀레나이드, 삼환식 폴리히드록시 화합물, 벤질포스폰산 화합물, 피롤 치환된 2-인돌리논, 아릴 우레아 화합물, 소라페닙, 소라페닙 토실레이트, 다사티닙, 엘로티닙, 제피티닙, 이마티닙, 라파티닙, 닐로티닙, 수니티닙, 수니티닙 말레이트, 반데타닙 및 베바시주맙으로 이루어진 군에서 선택된 것인 약학 조합물.
제6항에 있어서, 피롤 치환된 2-인돌리논은 수니티닙 또는 이의 약학적으로 허용되는 염인 약학 조합물.
제7항에 있어서, 피롤 치환된 2-인돌리논은 수니티닙 말레이트인 약학 조합물.
제8항에 있어서, 볼록시시맙 및 수니티닙 말레이트를 포함하는 것인 약학 조합물.
제6항에 있어서, 볼록시시맙 및 소라페닙 토실레이트를 포함하는 것인 약학 조합물.
제6항에 있어서, 볼록시시맙 및 베바시주맙을 포함하는 것인 약학 조합물.
제1항에 있어서, α5β1 길항제는 정맥 내 투여를 위해 제형화된 볼록시시맙인 약학 조합물.
제12항에 있어서, 볼록시시맙 제형은 pH 5.5∼7.5에서, 1.0 mg/㎖∼15.0 mg/㎖ 볼록시시맙, 22 mM∼28 mM 시트레이트, 135 mM∼165 mM 염화나트륨, 0.04%∼0.06% 폴리솔베이트(TWEEN^®) 80을 포함하는 것인 약학 조합물.
제13항에 있어서, 상기 용액은 pH 6.5에서, 10.0 mg/㎖ 볼록시시맙, 25 mM 시트레이트, 150 mM 염화나트륨, 0.05% 폴리솔베이트(TWEEN^®) 80을 포함하는 것인 약학 조합물.
제8항에 있어서, 티로신 키나제 억제제는 캡슐로 제형화된 수니티닙 말레이트인 약학 조합물.
제6항에 있어서, 티로신 키나제 억제제는 정제로 제형화된 소라페닙 토실레이트인 약학 조합물.
제6항에 있어서, 티로신 키나제 억제제는 정맥 내 투여용으로 제형화된 베바시주맙인 약학 조합물.
제9항의 약학 조합물을 투여하는 단계를 포함하는 암을 치료 또는 예방하는 방법.
제10항의 약학 조합물을 투여하는 단계를 포함하는 암을 치료 또는 예방하는 방법.
제11항의 약학 조합물을 투여하는 단계를 포함하는 암을 치료 또는 예방하는 방법.