KR20080087029A - 세포 배양 및 수송 장치 - Google Patents

Abstract

일회용 장치는 멤브레인, 겔 또는 미세 다공성 기판 상에 배양된 사용할 준비가 되어 있는 실현가능한 세포를 배양 및/또는 포장 및 수송하기 위해 제공된다. 장치는 세포를 배양하기 위한 내부를 한정하는 하우징 기부(1)를 포함한다. 세포 배양에 사용되는 멤브레인은 하우징 기부 내부에 위치하여 고리(2)로 고정된다. 기부는 뚜껑(4)으로 폐쇄되는데, 이것은 수송시 뿐만 아니라 배양시 사용되는 배지의 체적을 최소로 할 뿐만 아니라 수송시 밑에 놓인 세포를 보호할 수 있다. 배지 누설은 장치에 구비된 스냅 뿐만 아니라 실리콘 개스킷(3)에 의해서 방지된다.

세포 배양 및 수송 장치

Description

세포 배양 및 수송 장치{DEVICE FOR CULTURING AND TRANSPORTING CELLS}

본 발명은 생물학 분야 및 보다 구체적으로 세포 배양의 분야에 관한 것이다. 본 발명은 세포의 배양 및 수송을 위한 일회용 장치에 관한 것이다. 본 발명은 신규의 일회용 장치를 포함하며, 이것은 세포의 분리, 증식, 수송 및/또는 이식을 목적으로 필름, 멤브레인 또는 스폰지를 지지하는데 사용할 수 있다.

세포 배양은 실험실 조건하에서 세포의 성장 및 유지의 과정이다. 이 과정은 동물 또는 식물로부터 세포를 분리하는 것을 포함하고, 그 다음 그들의 기본적인 생물학적 기능을 지원할 수 있는 인공 배양 배지를 사용하는 실험 장치에서 생존 상태로 성장 및 유지된다. 세포 배양물은 1차 조직 외식물 또는 세포 현탁물 중 어느 하나로부터 유래한다. 분리된 세포의 성질에 따라서, 세포는 부착 또는 현탁 타입 중 어느 하나가 될 수 있다. 세포를 배지에서 성장시키기 위해서 대규모 및 소규모의 여러가지 방법이 그 분야에 알려져 있다.

세포 배양물의 유지 및 수송의 요구에 대한 순응을 위해서 많은 배양 장치가 디자인 또는 제조되었다.

세포 배양 장치는 여러 형상 및 디자인으로 시판되고, 종래의 형태는 배양 플라스크 및 접시이다. 플라스크는 캡이 구비되어 있고, 한편 접시는 개별 또는 다 수의 웰 접시로서 이용가능한데, 이들은 뚜껑이 구비되어 있다.

통상적으로 이용가능한 개별 배양 접시는 배양물을 수용하는 기부와 이것을 덮는 뚜껑을 포함한다. 배양 접시의 본래 목적은 세포 성장을 지지하는 것이다. 세포 성장 용도에서, 조직으로부터 분리한 세포를 영양 배지와 함께 배양 장치에 파종하여 세포를 기른 후, 제어된 환경에서 배양한다. 세포 배양 접시의 제조에 폴리스티렌과 같은 투명한 재료를 사용하여 현미경하에서 배양된 세포의 시각화를 가능하게 한다.

성공적인 세포 및 조직 배양 기술을 위한 기본 과제 중 하나는 오염이다. 세포 배양 접시는 미생물 오염에 대한 보호를 제공하는 것이 요청된다. 배양 접시의 경우 통상적으로 멸균 접시를 사용함으로써 오염을 최소화한다. 뚜껑이 미생물에 대한 장벽으로서 기능하고, 배지의 증발을 방지한다. 세포는 이들의 생존력을 지지하는 액체 배지에서 유지된다. 시판의 접시 내의 생존 세포의 수송은 접시에서 기밀한 밀봉 없이는 불가능하고 오염의 위험이 높아질 수 있고, 또한 배지 유출은 세포 죽음을 초래할 수 있다. 특정 세포는 멸균 조건하에서 의학, 과학 또는 산업상 요청의 경우와 같은 구체적인 목적을 위해 원하는 성장 상태로 접시에서 배양된다. 그러나, 성장 후, 이들 세포는 그들의 성장 환경으로부터 이동하여 액체 질소에서 냉동 보존되어 요청되는 센터로 운송되어야 한다. 센터에서, 세포는 소생하고 재배양되어야 한다. 또한, 세포 재배양에 요청되는 시간 및 자원은 상당한 지연을 초래한다. 불리한 수송 조건은 세포의 생존력의 상당한 손실 뿐만 아니라 높은 운송 비용을 초래한다.

피부, 각막, 연골 등의 경우와 같은 통상의 세포 기초 치료는 이식의 부위로 세포의 운반이 필요하다. 이것은 이식 전에 미국 특허 제5,693,332호에 기재된 바와 같이 적합한 멤브레인 상에 단층으로서 및/또는 미국 특허 공보 2003/0208266A1에 공표된 바와 같이 다층으로 분화시켜서 세포를 성장시킴으로써 가능하거나, 또는 세포를 그 다음 이식될 수 있는 발포체 또는 스폰지 상에 배양할 수 있다. 멤브레인 기초 세포 운반 시스템에 포함되는 중요한 요인은 세포 부착, 세포 생존력, 세포 밀도 및 분화 제어를 포함한다. 세포층과 멤브레인 사이의 정교한 관계는 운송시 이동 절단, 파괴 및/또는 그 밖의 개별 세포에 대한 기계적 손상 및 서로의 접촉에 의해 교란되어, 융합을 파괴하고 이들을 무용하게 할 수 있다. 세포를 배양 접시에서 멤브레인 상에 배양할 수 있지만, 동일한 접시에서 이들의 수송은 접시의 디자인 때문에 가능하지 않다.

배양 접시의 오염을 극복하기 위해서, 배양 플라스크가 개발되었다. 이들 플라스크는 통상적으로 배양 챔버, 플라스크의 일단부에 위치한 작은 관식 개구부 및 대응하는 폐쇄부를 갖는다. 배양 플라스크의 여러가지 디자인의 주요 지침은 미국 특허 4,334,028, 4,851,351 및 5,398,837호에 기재되어 있다. 이들 배양 플라스크는 완전히 채워지기 위해서 비교적 다량의 고가의 배지를 필요로 하므로, 이들 플라스크는 비용 효과적이지 않다. 또한 이들 플라스크는 필름/멤브레인이 이식용 세포 성장을 위해 플라스크 내부에 위치할 수 없으므로 세포를 배양하는데 적합하지 않다.

이들 상기 접시 및 플라스크 이외에, 롤러 보틀(roller bottle)의 기술이 개 발되었다. 롤러 보틀은 세포 부착 및 성장을 위한 큰 표면적을 제공한다. 그러나, 이들 롤러 보틀과 연관된 높은 전단력의 존재 때문에, 이 기술은 롤러 보틀의 벽에 부착되어 잔존할 수 있는 세포에만 적합하였다. 또한 장시간 동안 롤러 보틀에서의 세포 배양의 유지는 일정한 높은 전단력 환경 및 가능한 오염 때문에 문제가 있다. 미국 특허 3,450,598호는 플라스틱 또는 유리 롤러 튜브 및 보틀의 내부 표면 상에 세포의 부착 및 성장을 포함한다. 롤러 보틀에 대한 특허는 미국 특허 5,527,705 및 4,962,033호를 포함한다. 표면이 증가된 롤러 보틀의 개선된 기술은 세포 부착을 위한 것이고 미국특허 5,010,013호에 기재되어 있는데, 여기서 주름진 채널은 롤러 보틀의 내부 표면적에 더해진다. 그러나, 롤러 보틀 기술은 세포에 충분한 폭기를 제공하지 않아서 이들의 생존력에 제한이 있다.

보다 최근에는, 중공섬유 또는 모세관의 사용이 세포의 증식을 위한 지지 매트릭스로서 개시되어 있다. 이 기술의 지침은 미국 특허 3,821,087, 3,883,393, 3,997,396, 4,184,822, 4,200,689, 4,206,015, 4,220,725, 8,391,912호에 기재되어 있는데, 여기에 반투과성 관식 멤브레인 또는 모세관 상의 세포의 시험관 내 성장을 위한 여러가지 기구 및 방법이 개시되어 있다. 세포는 초기에 영양 배지에서 모세관벽의 표면으로 정착할 수 있다. 영양소는 관류 배지로부터 모세관벽을 통해 확산되고 세포에 의해 사용된다. 세포 생성물은 세포로부터 모세관벽을 통해 세포 생성물을 회수할 수 있는 관류액으로 확산한다. 그러나, 영양 배지가 중공 모세관을 통해 유동하여 세포에 의한 모세관 다발의 완전한 관통을 방지하고, 얻어지는 원하지 않는 배지 성분의 흐름이 세포 부착을 위해서 이용가능한 모세관 표면의 불완전 한 사용을 초래하고, 세포가 결국 표면을 따라 분포되는 것이 발견되었다. 또한 이들 장치는 충분한 산소를 세포에 공급하기 위해서 높은 배지 순환속도를 필요로 한다. 또한 이들 장치는 기계적으로 복잡하고, 조립하기 어렵고 과도하게 크다고 하는 추가적인 단점을 갖는다.

선행 기술의 개시를 고려하여, 배양을 위한 효과적이고 경제적인 장치, 광범위하고 용이한 세포 배양의 수송에 대한 요구가 계속되고 있다.

따라서, 운반시 사용할 준비가 되어 있는 멤브레인, 스폰지/발포체에 부착된 세포를 배양 및 수송하기에 적합한 방법 및 일회용 장치를 제공하는 것이 바람직하다.

본 발명은 상기 단점을 해결하고, 손상된 조직의 재생에 도움을 주는 세포의 이식을 위해 세포를 배양하고 이것을 수용 위치로 수송할 목적으로, 선택한 멤브레인을 장치에 로드하기 위한 설비가 있는 컴팩트하고, 휴대가능하고, 상업적으로 실현가능하고 사용하기 용이한 구체적으로 디자인된 장치를 처음으로 제공한다.

발명의 목적

본 발명의 목적은 부착성 세포를 배양 및 수송하기 위한 일회용, 멸균 및 안전한 세포 배양용 장치를 디자인하는 것이다.

본 발명의 목적은 멤브레인 주름의 가능성을 피하는 방식으로 장치를 디자인하는 것이다.

본 발명의 장치의 고리는 배양시 멤브레인의 팽팽함을 유지하기 위한 방식으로 디자인된다.

접시 및 플라스크와 같은 선행 기술의 장치는 멸균 조건하에서 수송하기에 적합하지 않으므로, 본 발명의 주요 목적은 취급하기 편리하고 미생물 오염이 없는 세포의 수송을 확보하는 장치를 디자인하는 것이다.

본 발명의 장치는 저체적의 배지를 사용하는 것을 목적으로 한다. 그러므로 비용 효과적인 장치이고 유출 없이 세포의 수송에 유용하다.

본 발명의 장치는 세포의 수송시 누설을 방지하는 개스킷을 수용하여 세포의 생존력을 유지하는 방식으로 디자인된다. 따라서 본 발명의 장치는 세포 배양 및 세포 수송의 두가지 목적을 만족시킨다.

본 발명의 장치는 폴리에틸렌, 폴리스티렌, 폴리에틸렌 테레프탈레이트, 폴리카르보네이트제의 안전한, 비독성, 생체적합성 재료로 제조된다. 이들 의약 등급 재료는 투명하여 현미경하에서 세포의 시각화를 가능하게 할 수 있다.

본 발명의 장치는 용이하고 저렴한 수송을 위해 최소 공간 요건의 방식으로 디자인된다.

본 발명의 다른 목적은 세포 기초 치료에 있어서 세포의 이식에 적합하고 적응할 수 있는 장치를 제공하는 것이다.

본 발명의 장치는 생존력을 유지하는 세포를 수송하기 위한 상업적으로 실현가능한 수단이고, 이것은 수송 후 이식, 삽입 또는 융합으로서 유용하다.

발명의 개요

본 발명은 단층 또는 다층으로 세포를 배양 및/또는 수송하기 위한 일회용 장치를 제공한다. 본 발명의 한 예시 실시형태에 있어서, 사각형의 배양장치를 제공한다.

장치는 2개의 구성요소를 갖는다:

1) 기판 및

2) 상부 뚜껑

기판은 하방으로 연장된 외벽 및 마찬가지로 하방으로 연장된 원형 하우징 장치를 지닌 평탄한 상부가 구비되어 있다. 연장된 홈과 인접하는 기판 내의 하우징 장치는 저면벽, 테두리 및 기판의 평탄부로부터 하방으로 연장된 측벽을 갖는다. 하우징 장치의 깊이는 기판의 외벽과 동일한 면 내에 있다. 기판의 중간에서 각 벽의 기부는 스냅의 고정을 위한 노치(notch)가 구비되어 있다.

원하는 멤브레인/스폰지는 하우징 장치의 내부에 위치하여 고리로 적절히 고정되어 있다. 실리콘 개스킷을 위해 구비된 홈은 기본 구성요소에서 하우징 장치의 외부에만 이어진다.

본 발명의 장치의 고리는 하기와 같은 다목적 기능을 만족한다:

양막 멤브레인 또는 폴리머와 같은 생물학적 재료제의 멤브레인은 멤브레인 상에 세포의 불균일한 분포를 따라 주름지는 경향이 있다. 구비된 고리는 멤브레인이 세포의 파종시 팽팽함을 유지하는 것을 확보한다(배양이 장치가 의도한 목적의 일부인 경우).

키토산/PLA와 같은 일부 멤브레인은 접시에 부유하는 경향을 가져서 세포가 하우징 장치의 뚜껑과 직접 접촉되게 한다. 구비된 고리는 멤브레인이 하우징 장치의 저면에 고정되는 것을 확보한다.

이식 전에, 멤브레인/스폰지는 일반적으로 완충액으로 세정하여 수송 배지의 흔적을 제거한다. 고리의 존재는 멤브레인이 주름지지 않아서 세포를 손상하지 않는 것을 확보한다.

균일한 세포 부착이 가능한 매끄러운 표면을 유지하고 멤브레인의 주름을 피해서 성장시키기 위해서 이들 멤브레인이 팽팽함을 유지하는 것이, 이러한 주름은 비균일한 세포 부착을 초래하는 틈새에서의 세포 부착의 원인이 될 수 있으므로 임상 세팅에 있어서 일반적으로 유리하다.

예시 사각형 뚜껑 구성요소는 상부로부터 하방으로 연장된 외벽이 구비되어 있다. 뚜껑의 평탄부는 하방으로 연장된 웰이 구비되어 있다. 웰의 원형 기부는 홈과 인접하여 있다. 웰과 뚜껑에 구비된 홈은 기판 구성요소에 구비된 하우징 장치와 정확하게 맞고 하우징 장치의 뚜껑으로서 기능한다. 기판에서 노치에 맞는 뚜껑의 각 벽의 중앙에는 스냅이 구비되어 있다. 뚜껑의 내부측에는 웰 둘레에 이어진 돌출부가 구비되어 있는데, 이것은 장치의 폐쇄시 평탄한 기판에 존재하는 원형홈과 함께 정렬된다.

도 1은 멤브레인 상에 세포를 배양/수송하기 위한 본 발명의 투시 조립도를 나타낸다.

도 2는 기부의 상부도이다.

도 3은 기판의 측면도이다.

도 4는 고리의 도면이다.

도 5는 뚜껑의 측면도이다.

도 6은 뚜껑의 하부도이다.

도 7은 노치의 설명도이다.

도 8은 장치의 완전한 조립도이다.

본 발명에 사용되는 여러가지 용어를 하기와 같이 정의한다.

정의:

본원에서 사용되는 용어 "장치"는 세포 배양 성장 및 수송에 사용하려는 컨테이너, 기구 또는 용기를 말한다.

본 출원의 명세서를 통해서, "상부", "저면", "정상부", "하부", 대각선 등의 여러가지 용어가 사용된다. 이들 용어는 다른 요소 사이를 구별하기 위한 편의상 단어이다. 이러한 용어는 세포 배양 장치가 보통 사용될 수 있는 위치와 관련하여 세포 배양 장치를 설명하기 위해 제공되지만, 이러한 용어가 다른 요소가 어떻게 사용될 수 있는지를 제한하려는 것은 아니다.

명세서 및 청구항을 위해서, 본원에서 용어 "세포"는 당업자에게 명백하듯이 세포 집합체, 또는 조직을 형성하는 세포의 조직 구조 또는 네트워크를 포함하는 하나 이상의 생존 세포를 의미하는데 사용된다.

명세서 및 청구항을 위해서, 본원에서 용어 "배지" 또는 "배지들"은 생존 세포(또는 조직 내의 생존 세포)를 유지하고 그들의 성장을 지지하기 위해 충분한 영 양소(예컨대, 비타민, 아미노산, 필수 영양소, 염 등) 및 특성(예컨대, 삼투성, 완충)을 제공하기 위해 사용되는 액체 용액을 의미하는데 사용된다.

명세서 및 청구항을 위해서, 본원에서 용어 "멤브레인"은 시트, 필름, 발포체, 스폰지 등을 의미하기 위해서 사용된다. 본 발명에서 사용되는 멤브레인은 생물학적 재료, 반합성 재료 또는 합성 재료 중 어느 것이어도 좋다. 이들 멤브레인은 장치로부터 용이하게 분리하거나 제거할 수 있다.

용어 "생물학적 재료"는 인간 양막 멤브레인, 무세포 진피, 소장 점막하(SIS) 멤브레인 및/또는 그 조합을 포함하지만 여기에 제한되는 것은 아니다. 용어 "반합성 재료"는 폴리 락트산(PLA), 폴리 글리콜산(PGA), 히알루론산 및/또는 그 조합을 포함하지만 여기에 제한되는 것은 아니다.

본 개시는 이식에 사용할 수 있는 세포를 배양하기 위한 세포 배양 장치에 관한 것이다.

본 발명의 예시 실시형태는 사각형에만 제한되는 것이 아니고 원형, 육각형 또는 삼각형이 될 수도 있다. 장치는 폴리에틸렌, 폴리스티렌, 폴리에틸렌 테레프탈레이트, 폴리카르보네이트 등에서 선택되는 다양한 의약 등급 재료로 제조된 성형가능한 부분을 포함한다. 선택된 재료의 등급은 멤브레인 상에서 배양된 세포의 육안화를 가능하게 하는 투명하고, 하이-엔드 현미경을 사용하여 실험을 통해 세포의 검사 및 촬영을 가능하게 한다.

멤브레인 또는 스폰지/겔 상에 세포를 배양 및/또는 수송하기 위한 본 발명의 장치를 도 1에 나타낸다. 장치 조립품은 기판 구성요소(1), 고리(2), 실리콘 고 리(3) 및 뚜껑(4)의 구성성분을 포함한다. 세포(5)가 있는 멤브레인은 장치의 일부가 아니다.

도 2: 하우징 장치(6)를 포함하는 장치의 기판 구성요소의 상부도를 나타냄. 하우징 장치와 인접하여 보이는 블렙(bleb)형 영역(7)은 배지를 용이하게 변경하기 위한 설비이며, 여기서 세포를 교란하지 않고 배지를 하우징 장치에 드레인 또는 첨가하는데 피펫을 사용할 수 있다. 또한, 블렙부는 이식 전 수송 배지를 최종 멤브레인 또는 스폰지로부터 린스하는데 사용할 수 있다. 블렙형 지역(8)은 고리 상방 지역에 포획된 공기가 홈으로 이동하여 장치의 하우징부에 공기가 존재하지 않도록 하는 것을 확보한다. 하우징 장치 둘레에 이어진 홈(8)은 실리콘 개스킷을 고정하여 세포의 수송시 새지 않는 상태를 유지할 뿐만 아니라 기밀성을 확보하기 위해서 구비되어 있다. 테두리(9)는 기판의 외벽(10)을 둘러싸서 장치의 개폐시 지지체로서 기능한다. 각 벽의 중간에 보이는 노치(11)는 스냅(15)을 기판에 고정하기 위한 것이다.

기판의 측면도가 도 3에 설명되어 있고, 여기서 테두리(9)와 함께 기판의 외벽(10)이 나타나 있다. 하우징 장치(6)의 기부(12)는 장치 저면의 벽(13)의 기부와 동일한 면에 있지만 테두리(9) 보다 높다. 노치(11)는 뚜껑에 구비된 해당 스냅(15)을 잠그기 위해서 기본 장치의 각 벽의 중간에 구비되어 있다.

도 4는 고리의 설명도이다. 고리의 높이는 하우징 장치 내부에 고리를 놓고 뚜껑을 닫았을 때 뚜껑에 위치한 웰의 기부가 고리와 동일한 높이가 되도록 한다. 고리의 주요 목적은 세포 배양 및/또는 수송시 팽팽한 멤브레인을 유지하는 것이 다. 고리의 폭은 최소로 하여 멤브레인/스폰지 상에 큰 면적의 세포 범위를 확보한다.

도 5는 상부 뚜껑의 측면도를 나타낸다. 상부 뚜껑의 디자인은 뚜껑에서 웰(14)이 하우징 장치 내부의 고리와 동일한 높이가 되게 하기 위해서 기판 구성요소와 동일하다. 뚜껑의 각 벽의 중간은 스냅(15)이다. 이 스냅은 기판이 구비된 노치(11)로 단단히 잠기도록 디자인된다.

스냅의 도 6에 설명되어 보이는 앵글(16)은 그 용이한 잠금 및 풀림을 위한 것이다. 스냅(15)의 높이는 뚜껑의 상부로부터 기판의 기부로 연장되어 있다. 각 장치마다 구비된 스냅(15)의 수는 판의 기하학적 디자인에 따라 달라지고, 예컨대 삼각형 장치는 3개의 스냅을 가질 수 있다.

본 발명의 한 실시형태에 있어서, 기부 및 뚜껑은 뚜껑이 기부에 맞는 것을 확보하기 위해서 기부 상에 뚜껑을 배향시키는데 사용되는 배향 특징을 포함한다. 뚜껑에서 웰은 기부에 존재하는 블렙형 지역(8)에 맞는 연장부와 인접해 있다. 폐쇄시, 뚜껑은 뚜껑 내의 웰 상의 연장부가 하우징 장치 내의 블렙형 지역(8)과 정렬되도록 배향된다.

도 7은 상부 뚜껑의 내부도를 설명한다. 뚜껑에서 보이는 웰(14) 둘레를 둘러싸는 돌출부(17)는 실리콘 고리에 맞고, 이것은 기판의 홈(8)에 고정된다. 실리콘 고리 상의 이것에 의해 삽입된 압력은 기밀성 및 기판에 대한 뚜껑의 새지 않는 폐쇄를 확보한다.

장치의 완전한 조립도는 도 8에 나타나 있다. 사용자에 의한 표시를 목적으 로 무광택 지역(18)이 뚜껑의 외부 표면 상에 구비되어 있다.

기부, 뚜껑 및 고리는 그 분야에서 일반적으로 알려진 표준 성형 기술(예컨대, 사출 성형)을 사용하여 성형할 수 있다. 장치의 멸균은 표준 감마선 조사 또는 오토클레이빙 중 어느 하나에 의해 행할 수 있다. 실험실 연구의 경우와 같이 일부 경우 장치는 완전한 세정 및 멸균 후 재사용할 수 있다.

세포 배양 장치의 사용

본 장치를 사용하여 세포를 배양하기 위해서, 목적하는 세포의 현탁물을 하우징 장치 내부의 고리에 의해 지지되는 멤브레인/스폰지에 첨가한다. 또한, 겔화 용액 내의 세포의 현탁물을 배양 장치에 첨가할 수 있다. 장치에 겔을 세팅한 후, 세포를 하기 방법으로 배양할 수 있다.

장치에 첨가되는 배지의 양은 고리 내부에 구비된 공간을 채우도록 한다. 뚜껑은 기판을 느슨히 덮도록 놓고 환경적으로 제어된 조건하에서 장치를 배양한다. 배지를 변경하기 위해서, 뚜껑을 들어올리고 기판을 서서히 기울이고, 하우징 장치에 구비된 블렙형 지역으로 도입된 피펫의 팁으로 배지를 드레인한다. 새로운 배지를 상술한 바와 같이 하우징 장치에 동일하게 첨가할 수 있다.

본 장치를 사용하여 세포를 수송하기 위해서, 직접 장치에서 배양되거나 다른 장치에서 배양된 세포를 적절한 수송 배지를 세포에 첨가한 후 운송할 수 있다. 실리콘 개스킷을 홈의 내부에 놓고 뚜껑을 단단히 기부에 스냅하여 공기 방울이 포획되지 않도록 한다. 본 발명의 장치는 새지 않고 기밀하다. 세포가 있는 이 장치는 수용자에게 적합한 운송 조건하에서 운송될 수 있다.

세포를 수용함에 있어서, 의사는 스냅을 파괴하고 수송 배지를 드레인한다(배지 변경에서 상술한 바와 같이). 멤브레인/스폰지를 완충액으로 린스하고, 고리를 들어올리고, 그 밑의 멤브레인/스폰지를 환자에게 직접 이식한다.

본 발명의 장치는 하기 특징으로 갖는다:

일회용이고 사용할 준비가 되어 있는 세포의 배양 및 수송을 위한 단일 장치를 제공하는 것을 목적으로 한다. 이것은 종래의 오토클래이빙 및 감마선 조사 기술에 의해 멸균될 수 있다.

이 장치에 요청되는 배지는 종래의 세포 배양 플라스크 또는 접시에 요청되는 25ml에 비하여 10ml 적다. 그러므로, 본 장치는 비용 효과적이다.

본 발명의 뚜껑은 최적의 세포 성장을 위한 폭기를 제공할 뿐만 아니라 미생물 오염을 방지한다.

이 장치에 구비된 실리콘 개스킷은 기밀한 밀봉을 확보하여 세포의 수송시 누설을 방지하여 세포의 생존력을 유지한다.

배양을 위해서, 실리콘 개스킷이 없는 접시 내의 세포는 통상의 이산화탄소 배양기에서 배양할 수 있다. 이것은 발생할 수 있는 가스 교환을 위해 제공할 수 있다. 또한 이 장치의 구성물은 투명한 재료이어서, 실험을 통해 현미경하에서 세포의 검사가 가능하다.

이 장치가 세포의 세정 후 이식을 위해 세포를 사용할 준비가 되어 있으면 이식이 지연되지 않는다.

본 장치의 디자인은 단순하고 공간을 덜 차지하여 운송 비용을 저감한다.

이렇게 설명한 본 발명의 여러가지 예시 실시형태에 있어서, 여러가지 변경, 개조 및 개선은 당업자에게 발생할 수 있다. 이러한 변경, 개조 및 개선은 본 발명의 본질 및 범위 내에 있도록 의도된다.

Claims (22)

1. ⅰ) a) 측면 및 저면에 벽이 있는 세포-하우징 장치,

   b) 하우징 장치와 인접해 있는 배지 교환 지역,

   c) 하우징 장치에 대하여 외부에 이어진 실리콘 개스킷을 위한 홈,

   d) 기부의 각 벽 내의 하나 이상의 노치

   를 포함하는 외벽이 있는 기부,

   ⅱ) 팽팽한 멤브레인을 유지하기 위한 링,

   ⅲ) 기부 내의 노치의 수에 해당하는 스냅이 구비된 기부와 동일한 외부 치 수를 갖는 뚜껑

   을 포함하는 치료 목적을 위한 세포의 배양 및 수송 장치.
2. 제1항에 있어서, 원형, 육각형, 사각형, 삼각형 또는 기타 형상 등의 형상인 장치.
3. 제1항에 있어서, 폴리에틸렌, 폴리스티렌, 폴리에틸렌 테레프탈레이트, 폴리카르보네이트, 폴리프로필렌 및/또는 그 조합의 군에서 선택된 투명, 비독성, 불활성 및 생체적합성 재료를 포함하는 사출 성형 기술에 의해 제조된 성형가능한 부분으로 이루어진 장치.
4. 제1항에 있어서, 장치가 감마선 조사 및/또는 오토클레이빙에 의해 멸균된 장치.
5. 제1항에 있어서, 장치가 감소된 설치 부속품을 갖는 컴팩트하고, 휴대가능하고, 상업적으로 실현가능하고, 또한 사용하기 용이한 장치.
6. 제1항에 있어서, 세포의 배양이

   a) 장치의 스냅을 들어올려 뚜껑을 분리하는 단계,

   b) 세포를 하우징 장치의 고리에 의해 지지된 장치 위에 로딩하는 단계,

   c) 고리 내부에 구비된 공간에 배양 배지를 충분해 채우는 단계, 및

   d) 뚜껑을 느슨하게 놓는 단계,

   e) 세포를 배양하기 위해 제어된 조건하에서 장치를 인큐베이트하여 세포를 배양하는 단계

   를 포함하는 장치.
7. 제6항에 있어서, 세포가 겔화 용액 내의 현탁물로서 하우징 장치에 로딩될 수 있으며, 겔로 경화되는 세포 배양 장치.
8. 제6항에 있어서, 세포가 멤브레인 또는 스폰지 상에 현탁물로서 로딩될 수 있으며, 그 다음 고리에 의해 지지된 하우징 장치 위에 고정되는 세포 배양 장치.
9. 제1항에 있어서, 세포의 수송이

   a) 장치의 스냅을 들어올려 뚜껑을 분리하는 단계,

   b) 세포를 하우징 장치의 고리에 의해 지지된 장치 위에 로딩하는 단계,

   c) 접시 내부에 공기 방울의 형성을 방지하기 위해서 수송 배지를 충분히 채우는 단계,

   d) 실리콘 개스킷을 홈에 위치시킴으로써 뚜껑의 기밀한 밀봉을 확보하는 단계,

   e) 뚜껑을 단단히 고정하는 단계,

   f) 장치를 수용자에 운송하는 단계

   를 포함하는 장치.
10. 제9항에 있어서, 세포가 있는 멤브레인을 고리 및 실리콘 개스킷으로 단단히 안정된 하우징 장치에 위치시킨 다음 뚜껑을 기부에 단단히 스냅하여 수송시 세포의 손상을 최소화한 세포의 수송을 위한 장치.
11. 제1항에 있어서, 멤브레인이 팽팽하게 고정되는 것을 확보하는 탈착가능한 고리를 포함하는 장치.
12. 제1항에 있어서, 장치가 손상된 조직의 재생을 돕는 세포의 이식을 위해 세 포를 수용자의 위치에 배양 및 수송할 목적으로 선택한 멤브레인을 로딩하는 설비를 갖는 장치.
13. 제1항에 있어서, 세포가 세포 집합체 또는 조직을 형성하는 세포의 조직 구조 또는 네트워크를 포함하는 하나 이상의 생존 세포에서 선택된 장치.
14. 제1항에 있어서, 멤브레인이 시트, 필름, 발포체, 스폰지 또는 그 조합으로 이루어진 군에서 선택된 장치.
15. 제14항에 있어서, 멤브레인이 생물학적, 반합성 또는 합성 재료로 이루어진 군에서 선택된 장치.
16. 제15항에 있어서, 생물학적 멤브레인은 인간 양막 멤브레인, 무세포 진피, 소장 점막하(SIS) 멤브레인 및/또는 그 조합으로 이루어진 군에서 선택된 장치.
17. 제15항에 있어서, 반합성 재료는 폴리락트산(PLA), 폴리글리콜산(PGA), 히알루론산 및/또는 그 조합으로 이루어진 군에서 선택된 장치.
18. 제15항에 있어서, 합성 재료는 폴리에틸렌, 폴리프로필렌, 폴리부틸렌, 폴리스티렌, 폴리카르보네이트, 폴리에틸렌-테레프탈레이트 및/또는 그 조합으로 이루 어진 군에서 선택된 장치.
19. 제15항에 있어서, 멤브레인은 투명, 반투명 또는 불투명일 수 있으며, 선택적으로 코팅될 수 있는 장치.
20. 제1항에 있어서, 고리는 두께가 약 1-4mm인 장치.
21. 제1항에 있어서, 실리콘 개스킷은 두께가 약 1-2mm인 장치.
22. 제1항에 있어서, 본원에 첨부한 도면의 도 1 내지 8과 관련하여 설명되어 있는 바와 같이 실질적으로 치료 목적을 위해 선택된 멤브레인 상에서 세포를 배양, 유지 및 수송하기 위한 장치.

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