[go: up one dir, main page]

KR20080037883A - 메디컬 키트 및 이의 사용방법 - Google Patents

메디컬 키트 및 이의 사용방법 Download PDF

Info

Publication number
KR20080037883A
KR20080037883A KR1020060105127A KR20060105127A KR20080037883A KR 20080037883 A KR20080037883 A KR 20080037883A KR 1020060105127 A KR1020060105127 A KR 1020060105127A KR 20060105127 A KR20060105127 A KR 20060105127A KR 20080037883 A KR20080037883 A KR 20080037883A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
kit
tube
cell
cells
pipettete
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Ceased
Application number
KR1020060105127A
Other languages
English (en)
Inventor
장정호
장재덕
서동삼
고창권
장동일
박영현
Original Assignee
세원셀론텍(주)
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 세원셀론텍(주) filed Critical 세원셀론텍(주)
Priority to KR1020060105127A priority Critical patent/KR20080037883A/ko
Priority to CN200680056211.0A priority patent/CN101528157B/zh
Priority to CN2012101693380A priority patent/CN102697583A/zh
Priority to JP2009534467A priority patent/JP2010507389A/ja
Priority to EP06812388A priority patent/EP2083755A4/en
Priority to PCT/KR2006/004549 priority patent/WO2008050922A1/en
Priority to US12/311,783 priority patent/US20100034783A1/en
Publication of KR20080037883A publication Critical patent/KR20080037883A/ko
Ceased legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61F—FILTERS IMPLANTABLE INTO BLOOD VESSELS; PROSTHESES; DEVICES PROVIDING PATENCY TO, OR PREVENTING COLLAPSING OF, TUBULAR STRUCTURES OF THE BODY, e.g. STENTS; ORTHOPAEDIC, NURSING OR CONTRACEPTIVE DEVICES; FOMENTATION; TREATMENT OR PROTECTION OF EYES OR EARS; BANDAGES, DRESSINGS OR ABSORBENT PADS; FIRST-AID KITS
    • A61F2/00—Filters implantable into blood vessels; Prostheses, i.e. artificial substitutes or replacements for parts of the body; Appliances for connecting them with the body; Devices providing patency to, or preventing collapsing of, tubular structures of the body, e.g. stents
    • A61F2/02—Prostheses implantable into the body
    • A61F2/30—Joints
    • A61F2/30756—Cartilage endoprostheses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/36—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix
    • A61L27/38—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix containing added animal cells
    • A61L27/3804—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix containing added animal cells characterised by specific cells or progenitors thereof, e.g. fibroblasts, connective tissue cells, kidney cells
    • A61L27/3817—Cartilage-forming cells, e.g. pre-chondrocytes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/36—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix
    • A61L27/38—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix containing added animal cells
    • A61L27/3804—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix containing added animal cells characterised by specific cells or progenitors thereof, e.g. fibroblasts, connective tissue cells, kidney cells
    • A61L27/3821—Bone-forming cells, e.g. osteoblasts, osteocytes, osteoprogenitor cells
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/36—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix
    • A61L27/38—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix containing added animal cells
    • A61L27/3804—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix containing added animal cells characterised by specific cells or progenitors thereof, e.g. fibroblasts, connective tissue cells, kidney cells
    • A61L27/3834—Cells able to produce different cell types, e.g. hematopoietic stem cells, mesenchymal stem cells, marrow stromal cells, embryonic stem cells
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/36—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix
    • A61L27/38—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix containing added animal cells
    • A61L27/3839—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix containing added animal cells characterised by the site of application in the body
    • A61L27/3843—Connective tissue
    • A61L27/3847—Bones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/36—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix
    • A61L27/38—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix containing added animal cells
    • A61L27/3839—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix containing added animal cells characterised by the site of application in the body
    • A61L27/3843—Connective tissue
    • A61L27/3852—Cartilage, e.g. meniscus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61F—FILTERS IMPLANTABLE INTO BLOOD VESSELS; PROSTHESES; DEVICES PROVIDING PATENCY TO, OR PREVENTING COLLAPSING OF, TUBULAR STRUCTURES OF THE BODY, e.g. STENTS; ORTHOPAEDIC, NURSING OR CONTRACEPTIVE DEVICES; FOMENTATION; TREATMENT OR PROTECTION OF EYES OR EARS; BANDAGES, DRESSINGS OR ABSORBENT PADS; FIRST-AID KITS
    • A61F2/00—Filters implantable into blood vessels; Prostheses, i.e. artificial substitutes or replacements for parts of the body; Appliances for connecting them with the body; Devices providing patency to, or preventing collapsing of, tubular structures of the body, e.g. stents
    • A61F2/02—Prostheses implantable into the body
    • A61F2/28—Bones

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Oral & Maxillofacial Surgery (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Developmental Biology & Embryology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Materials For Medical Uses (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

본 발명은 메디컬 키트 및 이의 사용방법에 관한 것이다.
본 발명은 이를 위해 무균 및 멸균 처리된 키트로서, 세포를 분리, 배양, 수집, 보관하여 체내로 이식할 수 있도록 전 과정을 단계별로 나누어 그 단계에 대한 세트화된 키트별로 프로세싱이 이루어질 수 있도록 연골재생키트(10)와 뼈재생키트(20) 그리고 제대혈보관키트(30)를 구비한 것이다. 그리고 상기 연골재생키트(10)를 이용하여 연골조직 채취공정; 연골세포 분리공정; 연골세포 배지교환 및 계대배양공정; 연골세포치료제 제조공정; 세포분리/배양/제조/동결보관에 사용되는 배지; 세포분리/배양/동결보관에 사용되는 배지;에 의해 연골을 재생하고, 또한 상기 뼈재생키트(20)를 이용하여 골수채취공정; 뼈세포분리공정; 뼈세포배지교환 및 계대배양공정; 뼈세포치료제 제조공정;에 의해 뼈를 재생하며, 또한 상기 제대혈보관키트(30)를 이용하여 탯줄혈액채취공정; 조혈모세포 분리공정; 조혈모세포 동결보관공정;에 의해 제대혈을 보관하게 된다.
상기와 같이 구성된 본 발명은 연골과 뼈 재생 및 제대혈 보관을 목적으로 하는 세포치료제 제조와 이식, 제대혈 처리에 관련된 키트의 사용방법에 관한 것이며, 특히 세포를 분리, 배양, 수집, 이식, 보관하는 각 프로세싱에 필요한 기자재와 각종 배양배지 및 용액을 쉽고 간편하게 하나의 키트로 제작하여 공급함으로써 기존의 세포치료제 제조와 제대혈 보관에 있어서 발생하는 비용 및 시간, 인력의 절감효과를 가져올 수 있도록 한 것이고, 이로 인해 제품의 품질과 신뢰성을 대폭 향상시켜 소비자로 하여금 좋은 이미지를 심어줄 수 있도록 한 것이다.
연골재생키트, 뼈 재생키트, 제대혈보관키트, 메디컬키트.

Description

메디컬 키트 및 이의 사용방법{USING METHOD AND MEDICAL Kit}
도 1 은 본 발명에 적용된 연골재생키트의 간략 구성도.
도 2 는 본 발명에 적용된 뼈 재생키트의 간략 구성도.
도 3 은 본 발명에 적용된 제대혈보관키트의 간략 구성도.
도 4 는 본 발명에 적용된 연골조직 채취키트의 사진.
도 5 는 본 발명에 적용된 연골세포 분리키트의 사진.
도 6 은 본 발명에 적용된 연골세포 배지 교환 키트에 적용된 CRM-P1 Medium
Change Kit의 사진.
도 7 은 본 발명에 적용된 연골세포 배지 교환 키트에 적용된 CRM-P2 Medium
Change Kit의 사진.
도 8 은 본 발명에 적용된 연골세포 배지 교환 키트에 적용된 CRM-P3 Medium
Change Kit의 사진.
도 9 는 본 발명에 적용된 연골세포 계대배양 키트에 적용된 CRM-P1
Subculture Kit의 사진.
도 10 은 본 발명에 적용된 연골세포 계대배양 키트에 적용된 CRM-P2
Subculture Kit의 사진.
도 11 은 본 발명에 적용된 연골세포 치료제 제조키트중 세포수집 키트에 적
용된 CRM-Collection Kit의 사진.
도 12 는 본 발명에 적용된 연골세포 치료제 제조키트중 운반키트에 적용된
CRM-Delivery Kit의 사진.
도 13 은 본 발명에 적용된 연골세포 치료제 제조키트중 이식 키트에 적용된
CRM-Implantation Kit의 사진.
도 14 는 본 발명에 적용된 세포분리, 배양, 제조, 동결보관에 사용되는 배
지키트의 사진.
도 15 는 본 발명에 적용된 세포분리, 배양, 동결보관에 사용되는 배지키트
의 사진.
도 16 은 본 발명에 적용된 탯줄혈액 채취키트의 사진.
도 17 은 본 발명에 적용된 조혈모세분리키트의 사진.
도 18 은 본 발명에 적용된 조혈모세포분리, 동결보관에 사용되는 배지키트
의 사진.
<도면의 주요 부분에 대한 부호의 설명>
10: 연골재생키트
20: 뼈 재생키트
30: 제대혈보관키트
본 발명은 메디컬 키트 및 이의 사용방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 연골과 뼈 재생 및 제대혈 보관을 목적으로 하는 세포치료제 제조와 이식, 제대혈 처리에 관련된 키트의 사용방법에 관한 것이며, 특히 세포를 분리, 배양, 수집, 이식, 보관하는 각 프로세싱에 필요한 기자재와 각종 배양배지 및 용액을 쉽고 간편하게 하나의 키트로 제작하여 공급함으로써 기존의 세포치료제 제조와 제대혈 보관에 있어서 발생하는 비용 및 시간, 인력의 절감효과를 가져올 수 있도록 한 것이고, 이로 인해 제품의 품질과 신뢰성을 대폭 향상시켜 소비자로 하여금 좋은 이미지를 심어줄 수 있도록 한 것이다.
주지하다시피 현재 장기의 부족으로 인하여 조직 재생에 대한 관심은 날로 높아져 가고 있으나, 이를 위한 대체법으로 세포치료제를 개발하는 길은 매우 힘들고 어려운 과정이 아닐 수 없으며 또한 제대혈보관법을 확립하는 것도 쉬운 일은 아니다. 특히, 세포치료제는 현 의학 분야에 있어서 널리 상용화되어 있는 치료법은 아니며 또한 세포치료제를 손쉽고 간편하게 제조하여 이식할 수 있도록 무균 및 멸균 처리된 기구와 배양 배지를 키트화 한 사례도 역시나 없다.
또한 조직 공학은 손상된 조직이나 장기를 복원, 재건, 재생, 또는 대체하여 정상적인 기능을 하게 하는데 그 목적이 있다. 조직 공학은 불과 몇 년 전만 해도 과학자들에게 생소한 학문이었으나 이제는 너무나 잘 알려진 학문으로 발전하였다. Time지(2000년 5월호)는 2000년대 가장 유망한 직종의 하나로 조직공학을 꼽았을 정도로 인정받는 분야로 성장하였다. 이는 여러 분야에 종사는 전문가들의 끊임없는 노력의 결과로 생각된다. 현재 우리나라에서도 조직공학은 관심도가 높은 학문으로 부상하고 있다.
조직공학의 초기 연구는 해부학적 또는 조직학적으로 인체의 조직과 유사한 조직 또는 장기 만들기에 급급하였으나 시간이 경과 함에 따라 형성된 조직의 기능에 중점을 두게 되었다. 그동안 끊임없는 연구결과로 인공피부를 시작으로 여러 분야에서 조직공학을 이용하여 임상에 적용하려고 노력해 왔다. 최근에는 조직의 재건과 더불어 재생에도 중점을 두고 있다.
조직 공학의 기본적 구성의 하나는 세포이며 동종, 이종 또는 자가세포 등이 조직공학의 연구에 이용되어 왔다. 동종이나 이종세포들은 면역학적 거부반응을 피하기 위하여 세포로부터 인체에 필요한 물질을 분비하도록 유도하여 체내 조직의 기능을 향상시키는데 그 목적이 있다. 그러나 동종이나 이종 세포의 사용은 현실적으로 이용에 한계가 있어 면역학적 거부반응이 없는 자가세포를 선호하게 되었다. 자가세포를 이용한 많은 연구들이 진행되어 왔으며 현재 다수의 영역에서는 동물실험을 거친 후 임상실험이 진행되고 있으며, 결과 또한 만족스럽다고 한다. 이러한 자가세포를 이용한 주사요법은 인공적인 생체재료와 달리 이물반응이 없다는 장점 때문에 선호되고 있다. 주사요법을 통한 조직의 형성은 이미 여러 부위의 조직에서 임상적으로 시도되고 있다. 특히 내시경의 보조역할이 사용범위를 확장시킨 결과라 할 수 있다.
그러나, 이러한 자가세포를 이용한 세포치료제를 제조하는 전반에 걸친 과정은 다소 복잡하여 쉽지 않다. 세포치료제를 제조함에 있어서 사용되는 각종 플라스틱 웨어와 배지를 비롯한 용액들을 다루다 보면 인체의 결손 부위에 이식할 세포에 오염이 발생할 수도 있고, 또한 배양기간이 길어져 환자의 이식날짜를 맞출 수 없는 상황이 발생하기도 한다.
본 발명은 상기와 같은 종래 기술의 제반 문제점을 해소하기 위하여 안출한 것으로, 연골과 뼈 재생 및 제대혈 보관을 목적으로 하는 세포치료제 제조와 이식, 제대혈 처리에 관련된 키트의 사용방법에 관한 것이며, 특히 세포를 분리, 배양, 수집, 이식, 보관하는 각 프로세싱에 필요한 기자재와 각종 배양배지 및 용액을 쉽고 간편하게 하나의 키트로 제작하여 공급함으로써 기존의 세포치료제 제조와 제대혈 보관에 있어서 발생하는 비용 및 시간, 인력의 절감효과를 가져올 수 있도록 함을 제1목적으로 한 것이고, 제2목적은 본 발명에 사용되는 키트는 무균 및 멸균 처리된 키트로서 채취된 연골과 골수조직 및 탯줄 혈액으로부터 안전하게 세포를 분리, 배양, 수집, 보관하여 체내로 이식할 수 있도록 전 과정을 단계별로 나누어 그 단계에 대한 세트화된 키트별로 프로세싱이 이루어질 수 있도록 한 것이며, 제3목적은 연골과 뼈 재생을 목적으로 하는 세포치료제 제조에 따른 모든 프로세싱을 단계별로 표준화하고, 표준화된 과정에 적합하도록 키트를 제작함으로 한 번에 손쉽고, 간편하게 사용하게 함으로 세포치료제 제조를 보다 활성화하고 나아가 조직공 학을 이용한 새로운 치료법을 상용화하고자 하는데 그 목적과 효용이 있도록 한 것이며, 제4목적은 제대혈 보관에 있어서 이와 동일한 표준화된 프로토콜을 만들어 각 프로세싱별 키트를 제작하여 간편하게 한 번에 사용할 수 있도록 하여 기존의 보관 처리 방법에 비해 비용, 시간, 인력의 절감 효과를 기대하게 하는데 그 목적과 효용이 있도록 한 것이며, 제5목적은 이로 인해 제품의 품질과 신뢰성을 대폭 향상시켜 소비자로 하여금 좋은 이미지를 심어줄 수 있도록 한 메디컬 키트 및 이의 사용방법을 제공한다.
이러한 목적 달성을 위하여 본 발명은 무균 및 멸균 처리된 키트로서, 세포를 분리, 배양, 수집, 보관하여 체내로 이식할 수 있도록 전 과정을 단계별로 나누어 그 단계에 대한 세트화된 키트별로 프로세싱이 이루어질 수 있도록 연골재생키트를 구비하되, 이 연골재생키트에는 연골조직 채취키트, 연골세포 분리키트, 연골세포 배지교환 및 계대배양키트, 연골세포치료제 제조키트가 구비되고, 상기 연골재생키트(10)를 이용하여 연골조직 채취공정; 연골세포 분리공정; 연골세포 배지교환 및 계대배양공정; 연골세포치료제 제조공정; 세포분리/배양/제조/동결보관에 사용되는 배지; 세포분리/배양/동결보관에 사용되는 배지;에 의해 연골을 재생하게 된다.
또한 본 발명은 무균 및 멸균 처리된 키트로서, 세포를 분리, 배양, 수집, 보관하여 체내로 이식할 수 있도록 전 과정을 단계별로 나누어 그 단계에 대한 세트화된 키트별로 프로세싱이 이루어질 수 있도록 뼈 재생키트를 구비하되, 이 뼈 재생키트에는 골수채취키트, 뼈세포분리키트, 뼈세포배지교환 및 계대배양키트, 뼈 세포치료제 제조키트가 구비되고, 상기 뼈재생키트를 이용하여 골수채취공정; 뼈세포분리공정; 뼈세포배지교환 및 계대배양공정; 뼈세포치료제 제조공정;에 의해 뼈를 재생하게 된다.
더하여 본 발명은 무균 및 멸균 처리된 키트로서, 세포를 분리, 배양, 수집, 보관하여 체내로 이식할 수 있도록 전 과정을 단계별로 나누어 그 단계에 대한 세트화된 키트별로 프로세싱이 이루어질 수 있도록 제대혈보관키트를 구비하되, 이 제대혈보관키트에는 탯줄혈액채취키트와 조혈모세포분리키트 그리고 조혈모세포 동결보관키트가 구비되고, 상기 제대혈보관키트를 이용하여 탯줄혈액채취공정; 조혈모세포 분리공정; 조혈모세포 동결보관공정;에 의해 제대혈을 보관함을 특징으로 하는 메디컬 키트 및 이의 사용방법을 제공한다.
이하에서는 이러한 목적 달성을 위한 본 발명의 바람직한 실시예를 첨부된 도면에 따라 상세히 설명하면 다음과 같다.
본 발명에 적용된 메디컬 키트 및 이의 사용방법은 도 1 내지 도 18 에 도시된 바와 같이 구성되는 것이다.
하기에서 본 발명을 설명함에 있어, 관련된 공지 기능 또는 구성에 대한 구체적인 설명이 본 발명의 요지를 불필요하게 흐릴 수 있다고 판단되는 경우에는 그 상세한 설명은 생략할 것이다.
그리고 후술되는 용어들은 본 발명에서의 기능을 고려하여 설정된 용어들로 서 이는 생산자의 의도 또는 관례에 따라 달라질 수 있으므로 그 정의는 본 명세서 전반에 걸친 내용을 토대로 내려져야 할 것이다.
먼저, 본원발명의 기술적 구성은 연골재생을 목적으로 하는 키트와, 뼈 재생을 목적으로 하는 키트 그리고 제대혈을 목적으로 하는 키트로 크게 3가지로 나누어 구성된다.
즉, 상기 연골 재생을 목적으로 하는 키트(10) 구성의 경우, 플라스틱 웨어 키트로,
1. 연골조직 채취키트(CRM-Transport Kit)
2. 연골세포 분리키트(CRM-Initiation Kit[CRM-Isolation Kit, CRM-Primary Kit]),
3. 연골세포 배지교환 및 계대배양키트(CRM-Processing Kit[CRM-P1 Subculture Kit, CRM-P2 Subculture Kit, CRM-P1 Medium Change Kit, CRM-P2 Medium Change Kit, CRM-P3 Medium Change Kit]),
4. 연골세포 치료제 제조키트(CRM-Product Kit[CRM-Collection Kit, CRM-Delivery Kit, CRM-Medium Packaging Kit, CRM-Implantation Kit]) 4가지로 구성되며, 또한 그 안에 각종 써브 키트들로 다시 세분화되어 구성되어져 있고, 여기에는,
세포분리, 배양, 제조, 동결보관에 사용되는 배지키트(CRM-RF Kit[CSB-I, CSB-II, CSM, CPM, CCM, CCB]),
세포분리, 배양, 동결보관에 사용되는 배지키트(CRM-FZ Kit[Cartisepor, STA, PCF, Pass solution, Cell stock solution, CSM AD solution, CPM AD solution, Neutro solution])가 추가로 구성되어 세포 분리, 배양, 수집과 이식을 돕는다.
또한, 상기 뼈 재생을 목적으로 하는 키트(20)의 경우는 플라스틱 웨어 키트로,
1. 골수채취키트(BRM-Transport Kit)
2. 뼈세포분리키트(BRM-Initiation Kit[BRM-Isolation Kit, BRM-Primary Kit])
3. 뼈세포 배지교환 및 계대배양키트(BRM-Processing Kit[BRM-P1 Subculture Kit, BRM-P2 Subculture Kit, BRM-P1 4. Medium Change Kit, BRM-P2 Medium Change Kit, BRM-P3 Medium Change Kit]),
4. 뼈세포치료제 제조키트(BRM-Product Kit[BRM-Collection Kit, BRM-Delivery Kit, BRM-Medium Packaging Kit, BRM-Implantation Kit])와
5. 뼈세포 분리, 배양, 제조, 동결보관에 사용되는 배지키트(BRM-RF Kit[OSB, BSB, BSM, BPM, BCM, BCB, BDB, BNB])
6. 뼈세포 분리, 배양, 동결보관에 사용되는 배지키트(BRM-FZ Kit[STA, PCF, Pass solution, Cell stock solution, OSM AD solution, OPM AD solution, Neutro solution])이 세트로 구성된다.
마지막으로, 제대혈 보관을 목적으로 하는 키트(30)의 경우는,
1. 탯줄혈액 채취키트(USC RM-Transport Kit)
2. 조혈모세포 분리키트(USC RM-Processing Kit)
3. 조혈모세포 동결보관키트(USC RM-Storage Kit) 3가지로 구성되며,
조혈모세포분리, 동결보관에 사용되는 배지(USC RM-RF Kit)
조혈모세포분리, 동결보관에 사용되는 배지(USC RM-FZ Kit)로 구성되어 있다.
이하 본 발명을 보다 구체적으로 설명하면 다음과 같다.
도 1 에 도시된 바와 같이 무균 및 멸균 처리된 키트로서, 세포를 분리, 배양, 수집, 보관하여 체내로 이식할 수 있도록 전 과정을 단계별로 나누어 그 단계에 대한 세트화된 키트별로 프로세싱이 이루어질 수 있도록 연골재생키트(10)를 구비하되, 이 연골재생키트에는 연골조직 채취키트(11), 연골세포 분리키트(12), 연골세포 배지교환 및 계대배양키트(13), 연골세포치료제 제조키트(14)가 구비된다.
이때 상기 연골조직 채취키트(11)에는, 연골조직 채취를 위해 사용하는 경성조직 채취키트, 조직 운반을 위한 내부 용기인 Universal container, 조직 운반을 위한 외부 용기인 Transport bottle, 1mL의 용액을 취하는데 사용하는 blue tip(1mL), 냉장 상태에서 조직을 운반하기 위한 내부 박스인 Styrofoam box, 스티로폼박스에 transport bottle을 넣기 위해 사용하는 Sponge, 차가운 상태를 유지하기 위한 냉각제인 Koolit가 구비된다.
또한 상기 연골세포 분리키트(12)에는, 용액 제거를 위해 사용는 pasteur pipettete, 입구가 막힌 세포 배양 도구 (단위면적 25㎠ 플라스크)인 T25(plug seal), 50mL 원심분리튜브에 걸쳐 놓은 후 세포와 배양액이 혼합된 현탁액을 부어 세포와 혼합되어 있는 용액을 분리하는 Cell strainer, 세포를 수세하기 위해 원심분리하는데 사용하는 tube, trypanblue와 세포가 든 배지 혼합시 사용하는 E-tube, 1ml의 용액을 취하는데 사용하는 blue tip, 용액이동시 사용하는 pipettete, 용액을 필터하기 위해 사용하는 Syringe filter, 세포 배양 도구인 T25, 세포를 냉동보관시 사용하는 도구인 cryo tube가 구비된다.
또한 본 발명에 적용된 상기 연골세포 배지교환 및 계대배양키트(13)에는, 용액 제거를 위해 사용하는 pasteur pipettete, 세포를 수세하기 위해 원심분리하는데 사용하는 tube, 용액 이동시 사용하는 pipettete, 큰 부피의 용액 이동시 사용하는 pipettete, 적은 부피의 용액을 취하는데 사용하는 Yellow tip, trypanblue와 세포가 든 배지 혼합시 사용하는 E-tube, 세포배양도구인 T75, 세포를 냉동보관시 사용하는 도구인 cryo tube가 구비된다.
그리고 본 발명 상기 연골세포치료제 제조키트((14)에는, 용액 제거를 위해 사용하는 pasteur pipettete, 세포를 냉동보관시 사용하는 도구인 cryo tube, trypanblue와 세포가 든 배지 혼합시 사용하는 E-tube, 세포를 수세하기 위해 원심분리하는데 사용하는 tube, 용액 이동시 사용하는 pipettete, 큰 부피의 용액 이동시 사용하는 pipettete, 50ml 원심분리튜브에 걸쳐 놓은 후 세포와 배양액이 혼합된 현탁액을 부어 세포와 혼합되어 있는 용액을 분리하는 Cell strainer, 용액을 취하는데 사용하는 filter blue tip, trypanblue와 세포가 든 배지 혼합시 사용하는 E-tube, 바이알에 씌우는 고무마개인 rubber cap과 알루미늄 마개인 aluminum cap, 연골세포 치료제 제조를 위해 세포를 담는데 사용하는 1mL V-vial, 냉장 상태 에서 연골세포치료제를 운반하기 위한 내부 박스인 Styrofoam box, 스티로폼박스에 연골세포치료제 바이알을 넣기 위해 사용하는 Sponge, 차가운 상태를 유지하기 위한 냉각제인 koolit결손 부위에 세포를 이식시키는데 사용하는 device 2 sets가 구비된다.
더하여 본 발명에 적용된 상기 연골재생키트(10)에는 세포분리/배양/제조/동결보관에 사용되는 배지키트(15)과 세포분리/배양/동결보관에 사용되는 배지키트(16)가 구비된다.
상기와 같이 구성된 본 발명은 연골재생키트(10)를 이용하여 연골조직 채취공정; 연골세포 분리공정; 연골세포 배지교환 및 계대배양공정; 연골세포치료제 제조공정; 세포분리/배양/제조/동결보관에 사용되는 배지; 세포분리/배양/동결보관에 사용되는 배지;에 의해 연골을 재생하게 되는 것으로, 이의 실시예를 보다 상세히 설명하면 다음과 같다.
<실시예 1>
상기 연골조직 채취공정에는,
1. Cartilage RM Kit내에 포함되어 있는 CRM-Transport Kit의 외부 종이 박스 포장을 개봉하는 공정;
2. 개봉된 외부 포장은 수술실 밖에 두고, 수술실 내부로는 내부 포장의 스티로폼 박스만을 운반하는 공정;
3. 스티로폼 박스 내부에 있는 멸균 처리된 경성조직 채취기를 이용해 연골조직을 수집하고, 수집 되어진 연골조직은 붉은색의 배지가 들어있는 연골조직 운 반용기에 담아 다시 스티로폼 박스와 외부 종이 박스 포장으로 이중 포장하여 세포배양실로 옮기는 공정;으로 이루어진다.
또한 상기 연골세포 분리공정의 CRM-Initiation Kit에는,
1. CRM-Isolation Kit을 끄집어 내어 70% 알코올을 충분히 뿌린 후, 무균 작업대로 옮기는 공정;
2. 무균 작업대 내에서 CRM-Transport Kit에 운반되어 온 연골조직을 50mL 튜브를 이용하여 연골 자체 무게를 측정하는 공정;
3. 연골조직을 50mL tube에 옮긴 후 CSB-Ⅰ을 25mL pipettete을 이용하여 분주한 후, 연골조직을 수세하는 공정;
4. Pasteur pipettete으로 연골조직 수세한 용액을 제거 한 후 “3”의 순서를 반복하는 공정;
5. 수세된 연골조직을 dish에 옮긴 후 10, 11번 blade를 이용하여 잘게 조각 내는 공정;
6. 조각난 연골 조직을 15mL tube로 옮기는 공정;
7. 10mL pipettete으로 CSB-Ⅰ을 tube에 분주하는 공정;
8. 연골조직이 있는 tube를 1200rpm에서 1분간 처리하는 공정;
9. 수세 후, pasteur pipettete으로 상층액을 제거하는 공정;
10. 상기“8”,“9”의 순서를 3회 반복하는 공정;
11. 2개의 T25 flask(plug seal)를 준비한 뒤, 한 개의 T25 플라스크에는 Cartisepor를 나머지 플라스크에는 Cartisepor에 항생제를 혼합하여 10mL pipettete으로 분주하는 공정;
12. 수세된 연골조직의 1/3은 CSB-Ⅰ이 있는 플라스크에, 나머지 2/3는 CSB-Ⅱ가 있는 플라스크로 옮기는 공정;
13. 플라스크로 옮긴 후, 37℃, CO2 항온기에서 12~16시간을 지난 후 37℃ 100rpm에서 30분간 교반하는 공정;
14. Cell strainer를 50mL tube에 장착 한 후, 플라스크내의 부유액을 필터하는 공정; 및
상기 연골세포 분리공정의 CRM-Primary Kit에는,
1. Cartilage RM Kit의 비닐 포장된 CRM-Primary Kit를 끄집어 내어 70% 알코올을 충분히 뿌린 후, 무균 작업대로 옮기는 공정;
2. CSM을 10mL pipettete으로 50mL 튜브에 분주하는 공정;
3. 이를 원심분리하여 수세한 후, pasteur pipettete으로 상층액을 제거, 다시 CSM을 분주하여 수세하는 공정;
4. 1/20에 해당하는 세포를 cryo tube에 PCF와 혼합하여 동결 보관하는 공정;
5. 다음 날 T25 플라스크에 부착 되지 않은 부유 세포를 15mL tube로 회수하여 T25 플라스크에 접종하는 공정;으로 이루어진다.
또한 본 발명의 상기 연골세포 배지교환 및 계대배양공정의 CRM-P1 Medium Change Kit에는,
1. Cartilage RM Kit의 비닐 포장된 CRM-P1 Medium change Kit를 끄집어 내어 70% 알코올을 충분히 뿌린 후, 무균 작업대로 옮기는 공정;
2. Pasteur pipettete을 이용하여 플라스크 내부의 배양배지를 제거하는 공정;
3. 25mL pipettete를 사용하여 50mL tube에 CSM을 분주하는 공정;
4. 분주된 튜브에서 일정량을 플라스크로 다시 분주하는 공정; 및
상기 연골세포 배지교환 및 계대배양공정의 CRM-P1 Subculture Kit에는,
1. Cartilage RM Kit의 비닐 포장된 CRM-P1 Subculture Kit를 끄집어 내어 70% 알코올을 충분히 뿌린 후, 무균 작업대로 옮기는 공정;
2. T25 플라스크의 배양배지를 50mL tube에 모은 뒤 혼합하는 공정;
3. 이중 일부를 50mL tube와 E-tube에 샘플링하는 공정;
4. Pasteur pipettete으로 남아있는 배양배지를 제거하는 공정;
5. CSB-Ⅱ를 플라스크에 분주하여 흔들어 수세한 후, pasteur pipettete으로 상층액을 제거하는 공정;
6. 상기“5”를 3회 반복하는 공정;
7. Pass solution을 10mL pipettete으로 플라스크로 분주한 후, 약 3분간 항온기에 두는 공정;
8. Neutro solution을 10mL pipettete으로 분주하는 공정;
9. 15mL tube에 세포를 수집하는 공정;
10. CSM으로 플라스크를 수세하는 공정;
11. CCB에 yellow tip을 사용하여 세포를 일정량 분주 후, 세포수를 측정하는 공정;
12. 세포수를 측정한 뒤, T75 플라스크에 접종하는 공정;
13. Cryo tube에 여분의 세포와 cell stock solution을 혼합하여 동결 보관하는 공정; 및
상기 연골세포 배지교환 및 계대배양공정의 CRM-P2 Medium Change Kit에는,
1. Cartilage RM Kit의 비닐 포장된 CRM-P2 Medium Change Kit를 끄집어 내어 70% 알코올을 충분히 뿌린 후, 무균 작업대로 옮기는 공정;
2. Pasteur pipettete으로 배양배지를 플라스크에서 제거하는 공정;
3. 25mL pipettete을 사용하여 50mL tube에 CPM을 분주하는 공정;
4. 분주된 tube에서 일정량을 플라스크로 다시 분주하는 공정; 및
상기 연골세포 배지교환 및 계대배양공정의 CRM-P2 subculture Kit에는,
1. Cartilage RM Kit의 비닐 포장된 CRM-P2 Subculture Kit를 끄집어 내어 70% 알코올을 충분히 뿌린 후, 무균 작업대로 옮기는 공정;
2. T75 플라스크의 배양배지를 50mL tube에 모은 뒤 혼합하는 공정;
3. 이중 일부를 50mL tube와 E-tube에 샘플링하는 공정;
4. Pasteur pipettete을 이용하여 남아있는 배양배지를 제거하는 공정;
5. CSB-Ⅱ를 플라스크에 분주하여 흔들어 수세한 후, pasteur pipettete으로 상층액을 제거하는 공정;
6. 상기“5”를 3회 반복하는 공정;
7. Pass solution을 10mL pipettete으로 플라스크에 분주한 후, 약 3~5분간 항온기에 두는 공정;
8. Neutro solution을 10mL pipettete으로 분주하는 공정;
9. 15mL tube에 세포를 수집하는 공정;
10. CSM으로 플라스크를 가볍게 흔들며 수세하는 공정;
11. CCB에 yellow tip을 사용하여 세포를 일정량 분주한 후, 세포수를 측정하는 공정;
12. 세포수를 측정한 후, T150 플라스크에 접종하는 공정;
13. Cryo tube에 여분의 세포와 cell stock solution을 혼합하여 동결 보관하는 공정; 및
상기 연골세포 배지교환 및 계대배양공정의 CRM-P3 Medium Change Kit에는,
1. Cartilage RM Kit의 비닐 포장된 CRM-P2 Medium change Kit를 끄집어 내어 70% 알코올을 충분히 뿌린 후, 무균 작업대로 옮기는 공정;
2. Pasteur pipettete으로 배양배지를 플라스크에서 제거하는 공정;
3. 25mL pipettete을 사용하여 50mL tube에 CPM을 분주하는 공정;
4. 분주된 tube에서 일정량을 플라스크로 다시 분주하는 공정;으로 이루어진다.
더하여 본 발명에 적용된 상기 연골세포치료제 제조공정의 CRM-Collection Kit에는,
1. Cartilage RM Kit의 비닐 포장된 CRM-Collection Kit를 끄집어 내어 70% 알코올을 충분히 뿌린 후, 무균 작업대로 옮기는 공정;
2. 완제품 출고 3일전, 50mL tube에 배양배지 일부를 25mL pipettete으로 샘플링하는 공정;
3. 제품 출고 당일, T150 플라스크내의 배양배지를 50mL tube에 모은 뒤 혼합하는 공정;
4. 이중 일부를 50mL tube와 E-tube에 샘플링하는 공정;
5. Pasteur pipettete을 이용하여 플라스크 내부에 남아 있는 배양배지를 제거하는 공정;
6. CSB-Ⅱ을 25mL pipettete으로 플라스크에 분주한 후, 수세하는 공정;
7. 상기“6”를 3회 반복하는 공정;
8. Pass solution을 10mL pipettete으로 플라스크에 분주한 후, 약 4~5분간 항온기에 두는 공정;
9. Neutro solution을 10mL pipettete으로 분주하는 공정;
10. Cell strainer를 50mL tube 2개에 각각 올려두는 공정;
11. Pass solution을 처리한 플라스크내의 부유액을 25mL pipettete을 사용하여 cell strainer가 올려져 있는 튜브에 분주하는 공정;
12. CCB에 yellow tip으로 세포를 분주한 후, 세포수를 총 3번 측정하는 공정;
13. 1mL vial에 CCM을 분주한 후, filter blue tip을 이용하여 세포와 혼합하는 공정;
14. Rubber cap, aluminum cap을 1mL vial에 조립하는 공정; 및
상기 연골세포치료제 제조공정의 CRM-Delivery Kit & CRM-Medium Packaging Kit에는,
1. Cartilage RM Kit내에 포함되어 있는 CRM-Delivery Kit와 CRM-Medium Packaging Kit의 외부 종이 박스 포장을 개봉하는 공정;
2. 개봉된 외부 포장은 수술실 밖에 두고, 수술실 내부로는 내부 포장의 스티로폼 박스만을 운반하는 공정;
3. 수술실로 운반되어진 박스 내부에서 1, 4번이라고 명기되어 있는 바이알을 꺼내어 CRM-Implantation Kit와 혼합하여 사용할 수 있도록 준비하는 공정;
상기 연골세포치료제 제조공정의 CRM-Implantation Kit에는,
1. CRM-Implantation Kit 내부에 있는 mixing tip을 이용하여 device 2 set에 있는 연골세포 치료제와 혼합하여 사용하는 기질에 배지를 혼합하는 공정;
2. 혼합된 기질과 배지 조성물이 잘 용해된 것을 확인한 후, 18 게이지의 주사침을 주사기에 장착하여, 환자의 연골 결손부위에 주입하는 공정;으로 이루어진다.
한편, 본 발명은 도 2 에 도시된 바와 같이 구성할 수 있음은 물론이다.
즉, 무균 및 멸균 처리된 키트로서, 세포를 분리, 배양, 수집, 보관하여 체내로 이식할 수 있도록 전 과정을 단계별로 나누어 그 단계에 대한 세트화된 키트별로 프로세싱이 이루어질 수 있도록 뼈 재생키트(20)를 구비하되, 이 뼈 재생키트에는 골수채취키트(21), 뼈세포분리키트(22), 뼈세포배지교환 및 계대배양키 트(23), 뼈세포치료제 제조키트(24)가 구비된다.
이때 상기 골수채취키트(21)에는, 조직 운반을 위한 내부 용기인 Universal container, 1ml의 용액을 취하는데 사용하는 blue tip, 냉장 상태에서 조직을 운반하기 위한 내부 박스인 Styrofoam box, 스티로폼박스에 transport bottle을 넣기 위해 사용하는 Sponge, 차가운 상태를 유지하기 위한 냉각제인 Koolit가 구비된다.
또한 상기 뼈세포분리키트(22)에는, 용액 제거를 위해 사용하는 pasteur pipettete, 원심분리튜브에 걸쳐 놓은 후 세포와 배양액이 혼합된 현탁액을 부어 세포와 혼합되어 있는 용액을 분리하는 Cell strainer, 세포를 수세하기 위해 원심분리하는데 사용하는 tube, trypanblue와 세포 계수를 위한 세포가 든 배지를 혼합시 사용하는 E-tube, 1mL의 용액을 취하는데 사용하는 blue tip, 용액 이동시 사용하는 pipettete, 세포 배양 도구인 T75, 세포를 냉동보관시 사용하는 도구인 cryo tube가 구비된다.
본 발명은 또한 상기 뼈세포배지교환 및 계대배양키트(23)에는, 용액 제거를 위해 사용하는 pasteur pipettete, 세포를 수세하기 위해 원심분리하는데 사용하는 tube, 용액 이동시 사용하는 pipettete, 큰 부피의 용액 이동시 사용하는 pipettete, 적은 부피의 용액을 취하는데 사용하는 Yellow tip, trypanblue와 세포가 든 배지 혼합시 사용하는 E-tube, 세포 배양 도구인 T75, 세포를 냉동보관시 사용하는 도구인 cryo tube가 구비된다.
그리고 본 발명의 상기 뼈세포치료제 제조키트(24)에는, 용액 제거를 위해 사용하는 pasteur pipettete, 세포를 냉동시키는데 사용하는 cryo tube, trypanblue와 세포 계수를 위한 세포가 든 배지를 혼합시 사용하는 E-tube, 세포를 수세하기 위해 원심분리하는데 사용하는 tube, 용액 이동시 사용하는 pipettete, 원심분리튜브에 걸쳐 놓은 후 세포와 배양액이 혼합된 현탁액을 부어 세포와 혼합되어 있는 용액을 분리하는 Cell strainer, 용액을 취하는데 사용하는 Filter blue tip, 바이알에 씌우는 고무마개인 rubber cap과 알루미늄 마개인 aluminum cap, 뼈세포 치료제 제조를 위해 세포를 담는데 사용하는 1mL V-vial, 냉장 상태에서 뼈세포 치료제를 운반하기 위한 내부 박스인 Styrofoam box, 스티로폼박스에 뼈세포 치료제 바이알을 넣기 위해 사용하는 Sponge, 차가운 상태를 유지하기 위한 냉각제인 koolit가 구비된다.
더하여 본 발명의 상기 뼈재생키트(20)에는 뼈세포분리, 배양, 제조, 동결보관에 사용되는 배지키트(25)와 뼈세포분리, 배양, 동결보관에 사용되는 배지키트(26)가 구비된다.
상기와 같이 구성된 본 발명은 뼈재생키트(20)를 이용하여 골수채취공정; 뼈세포분리공정; 뼈세포배지교환 및 계대배양공정; 뼈세포치료제 제조공정;에 의해 뼈를 재생하게 되는 것으로, 이의 실시예를 보다 상세히 설명하면 다음과 같다.
<실시예 2>
상기 골수채취공정에는,
1. Bone RM Kit내에 포함되어 있는 BRM-Transport Kit의 외부 종이 박스 포장을 개봉하는 공정;
2. 개봉된 외부 포장은 수술실 밖에 두고, 수술실 내부로는 내부 포장의 스 티로폼 박스만을 운반하는 공정;
3. 스티로폼 박스 내부에 있는 붉은색의 배지가 들어있는 골수 조직 운반용기에 골수를 담아 다시 스티로폼 박스와 외부 종이 박스 포장으로 이중 포장하여 세포배양실로 옮기는 공정;으로 이루어진다.
또한 상기 뼈세포분리공정의 BRM-Initiation Kit에는,
1. BRM-Isolation Kit을 끄집어 내어 70% 알코올을 충분히 뿌린 후, 무균 작업대로 옮기는 공정;
2. 무균 작업대 내에서 BRM-Transport Kit에 운반되어 온 골수조직을 50mL 튜브를 이용하여 골수 자체 무게를 측정하는 공정;
3. 골수를 50mL tube에 옮긴 후 BSB-Ⅰ을 25mL pipettete을 이용하여 분주한 후, 골수를 수세하는 공정;
4. Pasteur pipettete으로 골수조직 수세한 용액을 제거한 후 상기“3”의 순서를 반복하는 공정;
5. 수세된 골수조직에 25mL pipettete으로 BDB 용액을 넣는 공정;
6. 일정 시간이 지난 후, 10mL pipettete으로 BMB 용액을 일정량 취하여 중화하는 공정;
7. 중화 후, BSM 용액으로 다시 한번 수세하는 공정;
8. T75 플라스크로 수세된 유핵세포를 옮겨 37℃, CO2 항온기에 두는 공정; 및
상기 뼈세포분리공정의 BRM-Primary Kit에는,
1. Bone RM Kit내의 비닐 포장된 BRM-Primary Kit를 끄집어 내어 70% 알코올을 충분히 뿌린 후, 무균 작업대로 옮기는 공정;
2. 37℃, CO2 항온기에 두었던 T75 플라스크의 부유 세포층을 10mL pipettete을 이용하여 50mL tube로 옮기는 공정;
3. 50mL tube를 원심분리한 후, 25mL pipettete으로 BSM 용액을 혼합하여 T75 플라스크에 접종하는 공정;으로 이루어진다.
또한 본 발명의 상기 뼈세포배지교환 및 계대배양공정의 BRM-P1 Medium Change Kit에는,
1. Bone RM Kit의 비닐 포장된 BRM-P1 Medium Change Kit를 끄집어 내어 70% 알코올을 충분히 뿌린 후, 무균 작업대로 옮기는 공정;
2. Pasteur pipettete을 이용하여 플라스크 내부의 배양배지를 제거하는 공정;
3. 25mL pipette를 사용하여 50mL tube에 BSM을 분주하는 공정;
4. 분주된 튜브에서 일정량을 플라스크로 다시 분주하는 공정; 및
상기 뼈세포배지교환 및 계대배양공정의 BRM-P1 Subculture Kit에는,
1. Bone RM Kit의 비닐 포장된 BRM-P1 Subculture Kit를 끄집어 내어 70% 알코올을 충분히 뿌린 후, 무균 작업대로 옮기는 공정;
2. T25 플라스크의 배양배지를 50mL tube에 모은 뒤 혼합하는 공정;
3. 이중 일부를 50mL tube와 E-tube에 샘플링하는 공정;
4. Pasteur pipettete으로 남아있는 배양배지를 제거하는 공정;
5. BSM-Ⅱ를 플라스크에 분주하여 흔들어 수세한 후, pasteur pipettete으로 상층액을 제거하는 공정;
6. 상기“5”를 3회 반복하는 공정;
7. Pass solution을 10mL pipettete으로 플라스크로 분주한 후, 약 3분간 항온기에 두는 공정;
8. Neutro solution을 10mL pipettete으로 분주하는 공정;
9. 15mL tube에 세포를 수집하는 공정;
10. BSM으로 플라스크를 수세하는 공정;
11. BCB에 yellow tip을 사용하여 세포를 일정량 분주 후, 살아있는 세포수를 측정하는 공정;
12. 살아있는 세포수를 측정한 뒤, T75 플라스크에 접종하는 공정;
13. Cryo tube에 여분의 세포와 cell stock solution을 혼합하여 동결 보관하는 공정; 및
상기 뼈세포배지교환 및 계대배양공정의 BRM-P2 Medium Change Kit에는,
1. Bone RM Kit내의 비닐 포장된 BRM-P2 Medium Change Kit를 끄집어 내어 70% 알코올을 충분히 뿌린 후, 무균 작업대로 옮기는 공정;
2. Pasteur pipettete으로 배양배지를 플라스크에서 제거하는 공정;
3. 25mL pipettete을 사용하여 50mL tube에 BPM을 분주하는 공정;
4. 분주된 tube에서 일정량을 플라스크로 다시 분주하는 공정; 및
상기 뼈세포배지교환 및 계대배양공정의 BRM-P2 subculture Kit에는,
1. Bone RM Kit의 비닐 포장된 BRM-P2 subculture Kit를 끄집어 내어 70% 알코올을 충분히 뿌린 후, 무균 작업대로 옮기는 공정;
2. T75 플라스크의 배양배지를 50mL tube에 모은 뒤 혼합하는 공정;
3. 이중 일부를 50mL tube와 E-tube에 샘플링하는 공정;
4. Pasteur pipettete을 이용하여 남아있는 배양배지를 제거하는 공정;
5. BSB-Ⅱ를 플라스크에 분주하여 흔들어 수세한 후, pasteur pipettete으로 상층액을 제거하는 공정;
6. 상기“5”를 3회 반복하는 공정;
7. Pass solution을 10mL pipettete으로 플라스크에 분주한 후, 약 3~5분간 항온기에 두는 공정;
8. Neutro solution을 10mL pipettete으로 분주하는 공정;
9. 15mL tube에 세포를 수집하는 공정;
10. BSM으로 플라스크를 가볍게 흔들며 수세하는 공정;
11. BCB 에 yellow tip을 사용하여 세포를 일정량 분주한 후, 세포수를 측정하는 공정;
12. 세포수를 측정한 후, T150 플라스크에 접종하는 공정;
13. Cryo tube에 여분의 세포와 cell stock solution을 혼합하여 동결 보관하는 공정; 및
상기 뼈세포배지교환 및 계대배양공정의 BRM-P3 Medium Change Kit에는,
1. Bone RM Kit의 비닐 포장된 BRM-P2 Medium Change Kit를 끄집어 내어 70% 알코올을 충분히 뿌린 후, 무균 작업대로 옮기는 공정;
2. Pasteur pipettete으로 배양배지를 플라스크에서 제거하는 공정;
3. 25mL pipettete을 사용하여 50mL tube에 BPM을 분주하는 공정;
4. 분주된 tube에서 일정량을 플라스크로 다시 분주하는 공정;으로 이루어 진다.
그리고 본 발명 상기 뼈세포치료제 제조공정의 BRM-Collection Kit에는,
1. Bone RM Kit의 비닐 포장된 BRM-Collection Kit를 끄집어 내어 70% 알코올을 충분히 뿌린 후, 무균 작업대로 옮기는 공정;
2. 완제품 출고 3일전, 50mL tube에 배양배지 일부를 25mL pipettete으로 샘플링하는 공정;
3. 제품 출고 당일, T150 플라스크내의 배양배지를 50mL tube에 모은 뒤 혼합하는 공정;
4. 이중 일부를 50mL tube와 E-tube에 샘플링하는 공정;
5. Pasteur pipettete을 이용하여 플라스크 내부에 남아 있는 배양배지를 제거하는 공정;
6. BSB-Ⅱ을 25mL pipettete으로 플라스크에 분주한 후, 수세하는 공정;
7. 상기“6”를 3회 반복하는 공정;
8. Pass solution을 10mL pipettete으로 플라스크에 분주한 후, 약 4~5분간 항온기에 두는 공정;
9. Neutro solution을 10mL pipettete으로 분주하는 공정;
10. Cell strainer를 50mL tube 2개에 각각 올려두는 공정;
11. Pass solution을 처리한 플라스크내의 부유액을 25mL pipettete을 사용하여 cell strainer가 올려져 있는 튜브에 분주하는 공정;
12. BCB에 yellow tip으로 세포를 분주한 후, 세포수를 총 3번 측정하는 공정;
13. 1mL vial에 BCM을 분주한 후, filter blue tip을 이용하여 세포와 혼합하는 공정;
14. Rubber cap, aluminum cap을 1mL vial에 조립하는 공정; 및
상기 뼈세포치료제 제조공정의 BRM-Delivery Kit & BRM-Medium Packaging Kit에는,
1. Bone RM Kit내에 포함되어 있는 BRM-Delivery Kit와 BRM-Medium Packaging Kit의 외부 종이 박스 포장을 개봉하는 공정;
2. 개봉된 외부 포장은 수술실 밖에 두고, 수술실 내부로는 내부 포장의 스티로폼 박스만을 운반하는 공정;
3. 수술실로 운반되어 진 박스 내부에서 1, 4번이라고 명기되어 있는 바이알을 꺼내어 BRM-Implantation Kit와 혼합하여 사용할 수 있도록 준비하는 공정; 및
상기 뼈세포치료제 제조공정의 BRM-Implantation Kit에는,
1. BRM-Implantation Kit 내부에 있는 mixing tip을 이용하여 device 2 set 에 있는 뼈세포 치료제와 혼합하여 사용하는 기질에 배지를 혼합하는 공정;
2. 혼합된 기질과 배지 조성물이 잘 용해된 것을 확인한 후, 주사침을 주사기에 장착하여, 환자의 뼈 결손부위에 주입하는 공정;으로 이루어진다.
한편, 본 발명은 도 3 에 도시된 바와 같이 구성할 수 있다.
즉, 무균 및 멸균 처리된 키트로서, 세포를 분리, 배양, 수집, 보관하여 체내로 이식할 수 있도록 전 과정을 단계별로 나누어 그 단계에 대한 세트화된 키트별로 프로세싱이 이루어질 수 있도록 제대혈보관키트(30)를 구비하되, 이 제대혈보관키트에는 탯줄혈액채취키트(31)와 조혈모세포분리키트(32) 그리고 조혈모세포 동결보관키트(33)가 구비된다.
이때 상기 탯줄혈액채취키트(31)에는, 많은 양의 혈액을 모을때 사용하는 Blood collection bag, 채혈bag을 운반할 때 사용하는 File case, 운송 전까지 채혈bag을 저장하는데 사용하는 Zipper bag, 파일 케이스 표면에 부착하는 스티커가 구비된다.
또한 상기 조혈모세포분리키트(32)에는, 적혈구 제거 후 조혈모세포를 농축시키는데 사용하는 Processing bag, 품질관리 목적으로 샘플 추출시 사용하는 Syringe, 원심분리튜브에 걸쳐 놓은 후 세포와 배양액이 혼합된 현탁액을 부어 세포와 혼합되어 있는 용액을 분리하는 Cell strainer, 세포를 수세하기 위해 원심분리하는데 사용하는 Tube, 무균 작업을 수행하기 위해 사용하는 Latex glove, 조혈모세포를 저장하기위해 세포를 바이알에 담는 CCZ vial, 바이알에 씌우는 알루미늄 마개인 Aluminum Seal, 용액을 취하는데 사용하는 blue tip, trypanblue와 세포가 든 배지 혼합시 사용하는 E-tube가 구비된다.
또한 본 발명에 적용된 상기 조혈모세포 동결보관키트(33)에는, 조혈모세포를 냉동시키는데 사용하는 도구인 Freezing bag, freezing bag을 보호하기 위해 사용하는 Cryowrap, Freezing bag과 Cryowrap을 보관하는 케니스터가 구비된다.
그리고 상기 본 발명에 적용된 상기 제대혈보관키트(30)에는 조혈모세포분리, 동결보관에 사용되는 배지키트(34), 조혈모세포분리, 동결보관에 사용되는 배지키트(35)가 구비된다.
상기와 같이 구성된 본 발명은 제대혈보관키트(30)를 이용하여 탯줄혈액채취공정; 조혈모세포 분리공정; 조혈모세포 동결보관공정;에 의해 제대혈을 보관하게 되는 것으로, 이의 실시예를 보다 상세히 설명하면 다음과 같다.
<실시예 3>
상기 탯줄혈액채취공정은,
1. USC RM Kit내에 포함되어 있는 USC RM-Transport Kit의 File case를 수술실로 운반하는 공정;
2. 운반된 file case의 zipper bag을 열고, 멸균 처리된 blood collection bag을 이용하여 탯줄혈액을 채취하는 공정;
3. 채취된 혈액은 다시 USC RM-Transport Kit의 file case에 담아 공정실로 옮기는 공정;으로 이루어진다.
또한 상기 조혈모세포 분리공정은,
1. 채혈백에서 10mL 주사기를 이용하여 일정량의 혈액을 채취하여 EPP tube 로 분주하는 공정;
2. 30mL 주사기를 이용하여 일정량의 UES 용액을 첨가하여 교반한 후, 방치하는 공정;
3. 일정시간 방치 후, 반자동 혈장분리기에서 1차 혈장층을 processing bag으로 분리하는 공정;
4. 상기“2”, “3”의 과정을 재반복 하는 공정;
5. Processing bag을 버켓에 고정한 후, 무게를 측정하고 원심분리하는 공정;
6. 원심분리 후, 버켓에서 processing bag을 분리하는 공정;
7. Processing bag을 자동 혈장 분리기에 고정시키는 공정;
8. 자동혈장분리기를 이용하여 혈장을 15mL 튜브에 분주하는 공정;
9. 자동혈장분리기를 이용하여 나머지 혈장을 50mL 튜브에 담는 공정;
10. 10mL 주사기를 이용하여 50mL 튜브에 담겨진 혈장을 채취하여 vacumtainer로 분주하는 공정;으로 이루어진다.
더하여 상기 조혈모세포 동결보관공정은,
1. Processing bag을 현탁 시킨 후, 현탁시킨 processing bag에서 10mL 주사기로 내용물을 채취하여 EPP 튜브에 분주하는 공정;
2. 10mL 주사기로 cell stock solution을, 얼음물에 담궈 현탁시킨 processing bag에 첨가한 뒤 잘 혼합되게 하는 공정;
3. Processing bag의 겉 표면을 70% 알코올로 소독하는 공정;
4. Freezing bag을 processing bag에 연결하여 유핵세포 농축층을 옮겨 담아 기포를 제거하는 공정;
5. Freezing bag을 이중 포장백에 넣어 압축 포장을 한 뒤, 소독하는 공정;
6. 이중 포장백에 포장되어진 freezing bag을 케니스터에 삽입하는 공정;으로 이루어진다.
본 발명은 상기의 구성부를 적용함에 있어 다양하게 변형될 수 있고 여러 가지 형태를 취할 수 있다.
그리고 본 발명은 상기의 상세한 설명에서 언급되는 특별한 형태로 한정되는 것이 아닌 것으로 이해되어야 하며, 오히려 첨부된 청구범위에 의해 정의되는 본 발명의 정신과 범위 내에 있는 모든 변형물과 균등물 및 대체물을 포함하는 것으로 이해되어야 한다.
상기에서 상세히 살펴본 바와 같이 본 발명은 연골과 뼈 재생 및 제대혈 보관을 목적으로 하는 세포치료제 제조와 이식, 제대혈 처리에 관련된 키트의 사용방법에 관한 것이며, 특히 세포를 분리, 배양, 수집, 이식, 보관하는 각 프로세싱에 필요한 기자재와 각종 배양배지 및 용액을 쉽고 간편하게 하나의 키트로 제작하여 공급함으로써 기존의 세포치료제 제조와 제대혈 보관에 있어서 발생하는 비용 및 시간, 인력의 절감효과를 가져올 수 있도록 한 것이다.
또한 본 발명에 사용되는 키트는 무균 및 멸균 처리된 키트로서 채취된 연골과 골수조직 및 탯줄 혈액으로부터 안전하게 세포를 분리, 배양, 수집, 보관하여 체내로 이식할 수 있도록 전 과정을 단계별로 나누어 그 단계에 대한 세트화된 키트별로 프로세싱이 이루어질 수 있도록 한 것이다.
그리고 연골과 뼈 재생을 목적으로 하는 세포치료제 제조에 따른 모든 프로세싱을 단계별로 표준화하고, 표준화된 과정에 적합하도록 키트를 제작함으로 한 번에 손쉽고, 간편하게 사용하게 함으로 세포치료제 제조를 보다 활성화하고 나아가 조직공학을 이용한 새로운 치료법을 상용화하고자 하는데 그 목적과 효용이 있도록 한 것이다.
더하여 제대혈 보관에 있어서 이와 동일한 표준화된 프로토콜을 만들어 각 프로세싱별 키트를 제작하여 간편하게 한 번에 사용할 수 있도록 하여 기존의 보관 처리 방법에 비해 비용, 시간, 인력의 절감 효과를 기대하게 하는데 그 목적과 효용이 있도록 한 것이다.
따라서 본 발명은 상기한 효과로 이로 인해 제품의 품질과 신뢰성을 대폭 향상시켜 소비자로 하여금 좋은 이미지를 심어줄 수 있도록 한 매우 유용한 발명인 것이다.

Claims (31)

  1. 무균 및 멸균 처리된 키트로서, 세포를 분리, 배양, 수집, 보관하여 체내로 이식할 수 있도록 전 과정을 단계별로 나누어 그 단계에 대한 세트화된 키트별로 프로세싱이 이루어질 수 있도록 연골재생키트(10)를 구비하되, 이 연골재생키트에는 연골조직 채취키트(11), 연골세포 분리키트(12), 연골세포 배지교환 및 계대배양키트(13), 연골세포치료제 제조키트(14)가 구비됨을 특징으로 하는 메디컬 키트.
  2. 제 1 청구항에 있어서,
    상기 연골조직 채취키트(11)에는,
    연골조직 채취를 위해 사용하는 경성조직 채취키트, 조직 운반을 위한 내부 용기인 Universal container, 조직 운반을 위한 외부 용기인 Transport bottle, 1ml의 용액을 취하는데 사용하는 blue tip(1ml), 냉장 상태에서 조직을 운반하기 위한 내부 박스인 Styrofoam box, 스티로폼박스에 transport bottle을 넣기 위해 사용하는 Sponge, 차가운 상태를 유지하기 위한 냉각제인 Koolit가 구비됨을 특징으로 하는 메디컬 키트.
  3. 제 1 청구항에 있어서,
    상기 연골세포 분리키트(12)에는,
    용액 제거를 위해 사용는 pasteur pipette, 입구가 막힌 세포 배양 도구 (단위면적 25㎠ 플라스크)인 T25(plug seal), 50mL 원심분리튜브에 걸쳐 놓은 후 세포와 배양액이 혼합된 현탁액을 부어 세포와 혼합되어 있는 용액을 분리하는 Cell strainer, 세포를 수세하기 위해 원심분리하는데 사용하는 tube, trypanblue와 세포가 든 배지 혼합시 사용하는 E-tube, 1mL의 용액을 취하는데 사용하는 blue tip, 용액이동시 사용하는 pipette, 용액을 필터하기 위해 사용하는 Syringe filter, 세포 배양 도구인 T25, 세포를 냉동보관시 사용하는 도구인 cryo tube가 구비됨을 특징으로 하는 메디컬 키트.
  4. 제 1 청구항에 있어서,
    상기 연골세포 배지교환 및 계대배양키트(13)에는,
    용액 제거를 위해 사용하는 pasteur pipette, 세포를 수세하기 위해 원심분리하는데 사용하는 tube, 용액 이동시 사용하는 pipette, 큰 부피의 용액 이동시 사용하는 pipette, 적은 부피의 용액을 취하는데 사용하는 Yellow tip, trypanblue와 세포가 든 배지 혼합시 사용하는 E-tube, 세포배양도구인 T75, 세포를 냉동보관시 사용하는 도구인 cryo tube가 구비됨을 특징으로 하는 메디컬 키트.
  5. 제 1 청구항에 있어서,
    상기 연골세포치료제 제조키트((14)에는,
    용액 제거를 위해 사용하는 pasteur pipette, 세포를 냉동보관시 사용하는 도구인 cryo tube, trypanblue와 세포가 든 배지 혼합시 사용하는 E-tube, 세포를 수세하기 위해 원심분리하는데 사용하는 tube, 용액 이동시 사용하는 pipette, 큰 부피의 용액 이동시 사용하는 pipette, 50mL 원심분리튜브에 걸쳐 놓은 후 세포와 배양액이 혼합된 현탁액을 부어 세포와 혼합되어 있는 용액을 분리하는 Cell strainer, 용액을 취하는데 사용하는 filter blue tip, trypanblue와 세포가 든 배지 혼합시 사용하는 E-tube, 바이알에 씌우는 고무마개인 rubber cap과 알루미늄 마개인 aluminum cap, 연골세포 치료제 제조를 위해 세포를 담는데 사용하는 1ml V-vial, 냉장 상태에서 조직을 운반하기 위한 내부 박스인 Styrofoam box, 스티로폼박스에 연골세포 치료제 바이알을 넣기 위해 사용하는 Sponge, 차가운 상태를 유지하기 위한 냉각제인 koolit결손 부위에 세포를 이식시키는데 사용하는 device 2 sets가 구비됨을 특징으로 하는 메디컬 키트.
  6. 제 1 청구항에 있어서,
    상기 연골재생키트(10)에는 세포분리/배양/제조/동결보관에 사용되는 배지키트(15)과 세포분리/배양/동결보관에 사용되는 배지키트(16)가 더 구비됨을 특징으로 하는 메디컬 키트.
  7. 청구항 1 에 구비된 연골재생키트(10)를 이용하여 연골조직 채취공정; 연골세포 분리공정; 연골세포 배지교환 및 계대배양공정; 연골세포치료제 제조공정; 세포분리/배양/제조/동결보관에 사용되는 배지; 세포분리/배양/동결보관에 사용되는 배지;에 의해 연골을 재생함을 특징으로 하는 메디컬 키트의 사용방법.
  8. 제 7 청구항에 있어서,
    상기 연골조직 채취공정에는,
    1. Cartilage RM Kit내에 포함되어 있는 CRM-Transport Kit의 외부 종이 박스 포장을 개봉하는 공정;
    2. 개봉된 외부 포장은 수술실 밖에 두고, 수술실 내부로는 내부 포장의 스티로폼 박스만을 운반하는 공정;
    3. 스티로폼 박스 내부에 있는 멸균 처리된 경성조직 채취기를 이용해 연골조직을 수집하고, 수집 되어진 연골조직은 붉은색의 배지가 들어있는 연골조직 운반용기에 담아 다시 스티로폼 박스와 외부 종이 박스 포장으로 이중 포장하여 세포배양실로 옮기는 공정;이 포함됨을 특징으로 하는 메디컬 키트의 사용방법.
  9. 제 7 청구항에 있어서,
    상기 연골세포 분리공정의 CRM-Initiation Kit에는,
    1. CRM-Isolation Kit을 끄집어 내어 70% 알코올을 충분히 뿌린 후, 무균 작업대로 옮기는 공정;
    2. 무균 작업대 내에서 CRM-Transport Kit에 운반되어 온 연골조직을 50mL 튜브를 이용하여 연골 자체 무게를 측정하는 공정;
    3. 연골조직을 50mL tube에 옮긴 후 CSB-Ⅰ을 25mL pipettete을 이용하여 분주한 후, 연골조직을 수세하는 공정;
    4. Pasteur pipettete으로 연골조직 수세한 용액을 제거 한 후 “3”의 순서를 반복하는 공정;
    5. 수세된 연골조직을 dish에 옮긴 후 10, 11번 blade을 이용하여 잘게 조각 내는 공정;
    6. 조각난 연골 조직을 15mL tube로 옮기는 공정;
    7. 10mL pipettete으로 CSB-Ⅰ을 tube에 분주하는 공정;
    8. 연골조직이 있는 tube를 1200rpm에서 1분간 처리하는 공정;
    9. 수세 후, pasteur pipettete으로 상층액을 제거하는 공정;
    10. 상기“8”,“9”의 순서를 3회 반복하는 공정;
    11. 2개의 T25 flask(plug seal)를 준비한 뒤, 한 개의 T25 플라스크에는 Cartisepor를 나머지 플라스크에는 Cartispor에 항생제를 혼합하여 10mL pipettete으로 분주하는 공정;
    12. 수세된 연골조직의 1/3은 CSB-Ⅰ이 있는 플라스크에, 나머지 2/3는 CSB-Ⅱ가 있는 플라스크로 옮기는 공정;
    13. 플라스크로 옮긴 후, 37℃, CO2 항온기에서 12~16시간을 지난 후 37℃ 100rpm에서 30분간 교반하는 공정;
    14. Cell strainer를 50mL tube에 장착 한 후, 플라스크내의 부유액을 필터하는 공정; 및
    상기 연골세포 분리공정의 CRM-Primary Kit에는,
    1. Cartilage RM Kit의 비닐 포장된 CRM-Primary Kit를 끄집어 내어 70% 알코올을 충분히 뿌린 후, 무균 작업대로 옮기는 공정;
    2. CSM을 10mL pipettete으로 50mL 튜브에 분주하는 공정;
    3. 이를 원심분리하여 수세한 후, pasteur pipettete으로 상층액을 제거, 다시 CSM을 분주하여 수세하는 공정;
    4. 1/20에 해당하는 세포를 cryo tube에 PCF와 혼합하여 동결 보관하는 공정;
    5. 다음 날 25T 플라스크에 부착 되지 않은 부유 세포를 15mL tube로 회수하여 T25 플라스크에 접종하는 공정;이 포함됨을 특징으로 하는 메디컬 키트의 사용방법.
  10. 제 7 청구항에 있어서,
    상기 연골세포 배지교환 및 계대배양공정의 CRM-P1 Medium Change Kit에는,
    1. Cartilage RM Kit의 비닐 포장된 CRM-P1 Medium change Kit를 끄집어 내어 70% 알코올을 충분히 뿌린 후, 무균 작업대로 옮기는 공정;
    2. Pasteur pipettete을 이용하여 플라스크 내부의 배양배지를 제거하는 공정;
    3. 25mL pipette를 사용하여 50mL tube에 CSM을 분주하는 공정;
    4. 분주된 튜브에서 일정량을 플라스크로 다시 분주하는 공정; 및
    상기 연골세포 배지교환 및 계대배양공정의 CRM-P1 Subculture Kit에는,
    1. Cartilage RM Kit의 비닐 포장된 CRM-P1 Subculture Kit를 끄집어 내어 70% 알코올을 충분히 뿌린 후, 무균 작업대로 옮기는 공정;
    2. T25 플라스크의 배양배지를 50mL tube에 모은 뒤 혼합하는 공정;
    3. 이중 일부를 50mL tube와 E-tube에 샘플링하는 공정;
    4. Pasteur pipettete으로 남아있는 배양배지를 제거하는 공정;
    5. CSB-Ⅱ를 플라스크에 분주하여 흔들어 수세한 후, pasteur pipettete으로 상층액을 제거하는 공정;
    6. 상기“5”를 3회 반복하는 공정;
    7. Pass solution을 10mL pipettete으로 플라스크로 분주한 후, 약 3분간 항온기에 두는 공정;
    8. Neutro solution을 10mL pipettete으로 분주하는 공정;
    9. 15mL tube에 세포를 수집하는 공정;
    10. CSM으로 플라스크를 수세하는 공정;
    11. CCB에 yellow tip을 사용하여 세포를 일정량 분주 후, 세포수를 측정하는 공정;
    12. 세포수를 측정한 뒤, T75 플라스크에 접종하는 공정;
    13. Cryo tube에 여분의 세포와 cell stock solution을 혼합하여 동결 보관하는 공정; 및
    상기 연골세포 배지교환 및 계대배양공정의 CRM-P2 Medium change Kit에는,
    1. Cartilage RM Kit의 비닐 포장된 CRM-P2 Medium Change Kit를 끄집어 내어 70% 알코올을 충분히 뿌린 후, 무균 작업대로 옮기는 공정;
    2. Pasteur pipettete으로 배양배지를 플라스크에서 제거하는 공정;
    3. 25mL pipettete을 사용하여 50mL tube에 CPM을 분주하는 공정;
    4. 분주된 tube에서 일정량을 플라스크로 다시 분주하는 공정; 및
    상기 연골세포 배지교환 및 계대배양공정의 CRM-P2 Subculture Kit에는,
    1. Cartilage RM Kit의 비닐 포장된 CRM-P2 Subculture Kit를 끄집어 내어 70% 알코올을 충분히 뿌린 후, 무균 작업대로 옮기는 공정;
    2. T75 플라스크의 배양배지를 50mL tube에 모은 뒤 혼합하는 공정;
    3. 이중 일부를 50mL tube와 E-tube에 샘플링하는 공정;
    4. Pasteur pipettete을 이용하여 남아있는 배양배지를 제거하는 공정;
    5. CSB-Ⅱ를 플라스크에 분주하여 흔들어 수세한 후, pasteur pipettete으로 상층액을 제거하는 공정;
    6. 상기“5”를 3회 반복하는 공정;
    7. Pass solution을 10mL pipettete으로 플라스크에 분주한 후, 약 3~5분간 항온기에 두는 공정;
    8. Neutro solution을 10mL pipettete으로 분주하는 공정;
    9. 15mL tube에 세포를 수집하는 공정;
    10. CSM으로 플라스크를 가볍게 흔들며 수세하는 공정;
    11. CCB에 yellow tip을 사용하여 세포를 일정량 분주한 후, 세포수를 측정하는 공정;
    12. 세포수를 측정한 후, T150 플라스크에 접종하는 공정;
    13. Cryo tube에 여분의 세포와 cell stock solution을 혼합하여 동결 보관하는 공정; 및
    상기 연골세포 배지교환 및 계대배양공정의 CRM-P3 Medium Change Kit에는,
    1. Cartilage RM Kit의 비닐 포장된 CRM-P2 Medium Change Kit를 끄집어 내어 70% 알코올을 충분히 뿌린 후, 무균 작업대로 옮기는 공정;
    2. Pasteur pipettete으로 배양배지를 플라스크에서 제거하는 공정;
    3. 25mL pipettete을 사용하여 50mL tube에 CPM을 분주하는 공정;
    4. 분주된 tube에서 일정량을 플라스크로 다시 분주하는 공정;이 포함됨을 특징으로 하는 메디컬 키트의 사용방법.
  11. 제 7 청구항에 있어서,
    상기 연골세포치료제 제조공정의 CRM-Collection Kit에는,
    1. Cartilage RM Kit의 비닐 포장된 CRM-Collection Kit를 끄집어 내어 70% 알코올을 충분히 뿌린 후, 무균 작업대로 옮기는 공정;
    2. 완제품 출고 3일전, 50mL tube에 배양배지 일부를 25mL pipettete으로 샘플링하는 공정;
    3. 제품 출고 당일, T150 플라스크내의 배양배지를 50mL tube에 모은 뒤 혼합하는 공정;
    4. 이중 일부를 50mL tube와 E-tube에 샘플링하는 공정;
    5. Pasteur pipettete을 이용하여 플라스크 내부에 남아 있는 배양배지를 제거하는 공정;
    6. CSB-Ⅱ을 25mL pipettete으로 플라스크에 분주한 후, 수세하는 공정;
    7. 상기“6”을 3회 반복하는 공정;
    8. Pass solution을 10mL pipettete으로 플라스크에 분주한 후, 약 4~5분간 항온기에 두는 공정;
    9. Neutro solution을 10mL pipettete으로 분주하는 공정;
    10. Cell strainer를 50mL tube 2개에 각각 올려두는 공정;
    11. Pass solution을 처리한 플라스크내의 부유액을 25mL pipettete을 사용하여 cell strainer가 올려져 있는 튜브에 분주하는 공정;
    12. CCB에 yellow tip으로 세포를 분주한 후, 세포수를 총 3번 측정하는 공정;
    13. 1mL vial에 CCM을 분주한 후, filter blue tip을 이용하여 세포와 혼합하는 공정;
    14. Rubber cap, aluminum cap을 1mL vial에 조립하는 공정; 및
    상기 연골세포치료제 제조공정의 CRM-Delivery Kit & CRM-Medium Packaging Kit에는,
    1. Cartilage RM Kit내에 포함되어 있는 CRM-Delivery Kit와 CRM-Medium Packaging Kit의 외부 종이 박스 포장을 개봉하는 공정;
    2. 개봉된 외부 포장은 수술실 밖에 두고, 수술실 내부로는 내부 포장의 스티로폼 박스만을 운반하는 공정;
    3. 수술실로 운반되어진 박스 내부에서 1, 4번이라고 명기되어 있는 바이알을 꺼내어 CRM-Implantation Kit와 혼합하여 사용할 수 있도록 준비하는 공정;
    상기 연골세포치료제 제조공정의 CRM-Implantation Kit에는,
    1. CRM-Implantation Kit 내부에 있는 mixing tip을 이용하여 device 2 set에 있는 연골세포 치료제와 혼합하여 사용하는 기질에 배지를 혼합하는 공정;
    2. 혼합된 기질과 배지 조성물이 잘 용해된 것을 확인한 후, 18 게이지의 주사침을 주사기에 장착하여, 환자의 연골 결손부위에 주입하는 공정;이 포함됨을 특징으로 하는 메디컬 키트의 사용방법.
  12. 무균 및 멸균 처리된 키트로서, 세포를 분리, 배양, 수집, 보관하여 체내로 이식할 수 있도록 전 과정을 단계별로 나누어 그 단계에 대한 세트화된 키트별로 프로세싱이 이루어질 수 있도록 뼈 재생키트(20)를 구비하되, 이 뼈 재생키트에는 골수채취키트(21), 뼈세포분리키트(22), 뼈세포배지교환 및 계대배양키트(23), 뼈세포치료제 제조키트(24)가 구비됨을 특징으로 하는 메디컬 키트.
  13. 제 12 청구항에 있어서,
    상기 골수채취키트(21)에는,
    조직 운반을 위한 내부 용기인 Universal container, 1ml의 용액을 취하는데 사용하는 blue tip, 냉한 상태에서 조직을 운반하기 위한 내부 박스인 Styrofoam box, 스티로폼박스에 transport bottle을 넣기 위해 사용하는 Sponge, 차가운 상태를 유지하기 위한 냉각제인 Koolit가 구비됨을 특징으로 하는 메디컬 키트.
  14. 제 12 청구항에 있어서,
    상기 뼈세포분리키트(22)에는,
    용액 제거를 위해 사용하는 pasteur pipette, 원심분리튜브에 걸쳐 놓은 후 세포와 배양액이 혼합된 현탁액을 부어 세포와 혼합되어 있는 용액을 분리하는 Cell strainer, 세포를 수세하기 위해 원심분리하는데 사용하는 tube, trypanblue와 세포 계수를 위한 세포가 든 배지를 혼합시 사용하는 E-tube, 1ml의 용액을 취하는데 사용하는 blue tip, 용액 이동시 사용하는 pipette, 세포 배양 도구인 T75, 세포를 냉동보관시 사용하는 도구인 cryo tube가 구비됨을 특징으로 하는 메디컬 키트.
  15. 제 12 청구항에 있어서,
    상기 뼈세포배지교환 및 계대배양키트(23)에는,
    용액 제거를 위해 사용하는 pasteur pipette, 세포를 수세하기 위해 원심분리하는데 사용하는 tube, 용액 이동시 사용하는 pipette, 큰 부피의 용액 이동시 사용하는 pipette, 적은 부피의 용액을 취하는데 사용하는 Yellow tip, trypanblue와 세포가 든 배지 혼합시 사용하는 E-tube, 세포 배양 도구인 T75, 세포를 냉동보관시 사용하는 도구인 cryo tube가 구비됨을 특징으로 하는 메디컬 키트.
  16. 제 12 청구항에 있어서,
    상기 뼈세포치료제 제조키트(24)에는,
    용액 제거를 위해 사용하는 pasteur pipette, 세포를 냉동시키는데 사용하는 cryo tube, trypanblue와 세포 계수를 위한 세포가 든 배지를 혼합시 사용하는 E- tube, 세포를 수세하기 위해 원심분리하는데 사용하는 tube, 용액 이동시 사용하는 pipette, 원심분리튜브에 걸쳐 놓은 후 세포와 배양액이 혼합된 현탁액을 부어 세포와 혼합되어 있는 용액을 분리하는 Cell strainer, 용액을 취하는데 사용하는 filter blue tip, 바이알에 씌우는 고무마개인 rubber cap과 알루미늄 마개인 aluminum cap, 뼈세포 치료제 제조를 위해 세포를 담는데 사용하는 1mL V-vial, 냉장 상태에서 뼈세포 치료제를 운반하기 위한 내부 박스인 Styrofoam box, 스티로폼박스에 뼈세포치료제 바이알을 넣기 위해 사용하는 Sponge, 차가운 상태를 유지하기 위한 냉각제인 koolit가 구비됨을 특징으로 하는 메디컬 키트.
  17. 제 12 청구항에 있어서,
    상기 뼈재생키트(20)에는 뼈세포분리, 배양, 제조, 동결보관에 사용되는 배지키트(25)과 뼈세포분리, 배양, 동결보관에 사용되는 배지키트(26)가 더 구비됨을 특징으로 하는 메디컬 키트.
  18. 청구항 12 에 구비된 뼈재생키트(20)를 이용하여 골수채취공정; 뼈세포분리공정; 뼈세포배지교환 및 계대배양공정; 뼈세포치료제 제조공정;에 의해 뼈를 재생함을 특징으로 하는 메디컬 키트의 사용방법.
  19. 제 18 청구항에 있어서,
    상기 골수채취공정에는,
    1. Bone RM Kit내에 포함되어 있는 BRM-Transport Kit의 외부 종이 박스 포장을 개봉하는 공정;
    2. 개봉된 외부 포장은 수술실 밖에 두고, 수술실 내부로는 내부 포장의 스티로폼 박스만을 운반하는 공정;
    3. 스티로폼 박스 내부에 있는 붉은색의 배지가 들어있는 골수 조직 운반용기에 골수를 담아 다시 스티로폼 박스와 외부 종이 박스 포장으로 이중 포장하여 세포배양실로 옮기는 공정;이 포함됨을 특징으로 하는 메디컬 키트의 사용방법.
  20. 제 18 청구항에 있어서,
    상기 뼈세포분리공정의 BRM-Initiation Kit에는,
    1. BRM-Isolation Kit을 끄집어 내어 70% 알코올을 충분히 뿌린 후, 무균 작업대로 옮기는 공정;
    2. 무균 작업대 내에서 BRM-Transport Kit에 운반되어 온 골수조직을 50mL 튜브를 이용하여 골수 자체 무게를 측정하는 공정;
    3. 골수를 50mL tube에 옮긴 후 BSB-Ⅰ을 25mL pipettete을 이용하여 분주한 후, 골수를 수세하는 공정;
    4. Pasteur pipettete으로 골수조직 수세한 용액을 제거한 후 상기“3”의 순서를 반복하는 공정;
    5. 수세된 골수조직에 25mL pipettete으로 BDB 용액을 넣는 공정;
    6. 일정 시간이 지난 후, 10mL pipettete으로 BMB 용액을 일정량 취하여 중화하는 공정;
    7. 중화 후, BSM 용액으로 다시 한번 수세하는 공정;
    8. T75 플라스크로 수세된 유핵세포를 옮겨 37℃, CO2 항온기에 두는 공정; 및
    상기 뼈세포분리공정의 BRM-Primary Kit에는,
    1. Bone RM Kit내의 비닐 포장된 BRM-Primary Kit를 끄집어 내어 70% 알코올을 충분히 뿌린 후, 무균 작업대로 옮기는 공정;
    2. 37℃, CO2 항온기에 두었던 T75 플라스크의 부유 세포층을 10mL pipettete을 이용하여 50mL tube로 옮기는 공정;
    3. 50mL tube를 원심분리한 후, 25mL pipettete으로 BSM 용액을 혼합하여 T75 플라스크에 접종하는 공정;이 포함됨을 특징으로 하는 메디컬 키트의 사용방법.
  21. 제 18 청구항에 있어서,
    상기 뼈세포배지교환 및 계대배양공정의 BRM-P1 Medium change Kit에는,
    1. Bone RM Kit의 비닐 포장된 BRM-P1 Medium change Kit를 끄집어 내어 70% 알코올을 충분히 뿌린 후, 무균 작업대로 옮기는 공정;
    2. Pasteur pipettete을 이용하여 플라스크 내부의 배양배지를 제거하는 공정;
    3. 25mL pipette를 사용하여 50mL tube에 BSM을 분주하는 공정;
    4. 분주된 튜브에서 일정량을 플라스크로 다시 분주하는 공정; 및
    상기 뼈세포배지교환 및 계대배양공정의 BRM-P1 Subculture Kit에는,
    1. Bone RM Kit의 비닐 포장된 BRM-P1 Subculture Kit를 끄집어 내어 70% 알코올을 충분히 뿌린 후, 무균 작업대로 옮기는 공정;
    2. T25 플라스크의 배양배지를 50mL tube에 모은 뒤 혼합하는 공정;
    3. 이중 일부를 50mL tube와 E-tube에 샘플링하는 공정;
    4. Pasteur pipettete으로 남아있는 배양배지를 제거하는 공정;
    5. BSM-Ⅱ를 플라스크에 분주하여 흔들어 수세한 후, pasteur pipettete으로 상층액을 제거하는 공정;
    6. 상기“5”를 3회 반복하는 공정;
    7. Pass solution을 10mL pipettete으로 플라스크로 분주한 후, 약 3분간 항온기에 두는 공정;
    8. Neutro solution을 10mL pipettete으로 분주하는 공정;
    9. 15mL tube에 세포를 수집하는 공정;
    10. BSM으로 플라스크를 수세하는 공정;
    11. BCB에 yellow tip을 사용하여 세포를 일정량 분주 후, 살아있는 세포수를 측정하는 공정;
    12. 살아있는 세포수를 측정한 뒤, T75 플라스크에 접종하는 공정;
    13. Cryo tube에 여분의 세포와 cell stock solution을 혼합하여 동결 보관하는 공정; 및
    상기 뼈세포배지교환 및 계대배양공정의 BRM-P2 Medium change Kit에는,
    1. Bone RM Kit내의 비닐 포장된 BRM-P2 Medium change Kit를 끄집어 내어 70% 알코올을 충분히 뿌린 후, 무균 작업대로 옮기는 공정;
    2. Pasteur pipettete으로 배양배지를 플라스크에서 제거하는 공정;
    3. 25mL pipettete을 사용하여 50mL tube에 BPM을 분주하는 공정;
    4. 분주된 tube에서 일정량을 플라스크로 다시 분주하는 공정; 및
    상기 뼈세포배지교환 및 계대배양공정의 BRM-P2 Subculture Kit에는,
    1. Bone RM Kit의 비닐 포장된 BRM-P2 Subculture Kit를 끄집어 내어 70% 알코올을 충분히 뿌린 후, 무균 작업대로 옮기는 공정;
    2. T75 플라스크의 배양배지를 50mL tube에 모은 뒤 혼합하는 공정;
    3. 이중 일부를 50mL tube와 E-tube에 샘플링하는 공정;
    4. Pasteur pipettete을 이용하여 남아있는 배양배지를 제거하는 공정;
    5. BSB-Ⅱ를 플라스크에 분주하여 흔들어 수세한 후, pasteur pipettete으로 상층액을 제거하는 공정;
    6. 상기“5”를 3회 반복하는 공정;
    7. Pass solution을 10mL pipettete으로 플라스크에 분주한 후, 약 3~5분간 항온기에 두는 공정;
    8. Neutro solution을 10mL pipettete으로 분주하는 공정;
    9. 15mL tube에 세포를 수집하는 공정;
    10. BSM으로 플라스크를 가볍게 흔들며 수세하는 공정;
    11. BCB 에 yellow tip을 사용하여 세포를 일정량 분주한 후, 세포수를 측정하는 공정;
    12. 세포수를 측정한 후, T150 플라스크에 접종하는 공정;
    13. Cryo tube에 여분의 세포와 cell stock solution을 혼합하여 동결 보관하는 공정; 및
    상기 뼈세포배지교환 및 계대배양공정의 BRM-P3 Medium Change Kit에는,
    1. Bone RM Kit의 비닐 포장된 BRM-P2 Medium Change Kit를 끄집어 내어 70% 알코올을 충분히 뿌린 후, 무균 작업대로 옮기는 공정;
    2. Pasteur pipettete으로 배양배지를 플라스크에서 제거하는 공정;
    3. 25mL pipettete을 사용하여 50mL tube에 BPM을 분주하는 공정;
    4. 분주된 tube에서 일정량을 플라스크로 다시 분주하는 공정;이 포함됨을 특징으로 하는 메디컬 키트의 사용방법.
  22. 제 18 청구항에 있어서,
    상기 뼈세포치료제 제조공정의 BRM-Collection Kit에는,
    1. Bone RM Kit의 비닐 포장된 BRM-Collection Kit를 끄집어 내어 70% 알코올을 충분히 뿌린 후, 무균 작업대로 옮기는 공정;
    2. 완제품 출고 3일전, 50mL tube에 배양배지 일부를 25mL pipettete으로 샘플링하는 공정;
    3. 제품 출고 당일, T150 플라스크내의 배양배지를 50mL tube에 모은 뒤 혼합하는 공정;
    4. 이중 일부를 50mL tube와 E-tube에 샘플링하는 공정;
    5. Pasteur pipettete을 이용하여 플라스크 내부에 남아 있는 배양배지를 제거하는 공정;
    6. BSB-Ⅱ을 25mL pipettete으로 플라스크에 분주한 후, 수세하는 공정;
    7. 상기“6”을 3회 반복하는 공정;
    8. Pass solution을 10mL pipettete으로 플라스크에 분주한 후, 약 4~5분간 항온기에 두는 공정;
    9. Neutro solution을 10mL pipettete으로 분주하는 공정;
    10. Cell strainer를 50mL tube 2개에 각각 올려두는 공정;
    11. Pass solution을 처리한 플라스크내의 부유액을 25mL pipettete을 사용하여 cell strainer가 올려져 있는 튜브에 분주하는 공정;
    12. BCB에 yellow tip으로 세포를 분주한 후, 세포수를 총 3번 측정하는 공 정;
    13. 1mL vial에 BCM을 분주한 후, filter blue tip을 이용하여 세포와 혼합하는 공정;
    14. Rubber cap, aluminum cap을 1mL vial에 조립하는 공정; 및
    상기 뼈세포치료제 제조공정의 BRM-Delivery Kit & BRM-Medium Packaging Kit에는,
    1. Bone RM Kit내에 포함되어 있는 BRM-Delivery Kit와 BRM-Medium Packaging Kit의 외부 종이 박스 포장을 개봉하는 공정;
    2. 개봉된 외부 포장은 수술실 밖에 두고, 수술실 내부로는 내부 포장의 스티로폼 박스만을 운반하는 공정;
    3. 수술실로 운반되어 진 박스 내부에서 1, 4번이라고 명기되어 있는 바이알을 꺼내어 BRM-Implantation Kit와 혼합하여 사용할 수 있도록 준비하는 공정; 및
    상기 뼈세포치료제 제조공정의 BRM-Implantation Kit에는,
    1. BRM-Implantation Kit 내부에 있는 mixing tip을 이용하여 device 2 set에 있는 뼈세포 치료제와 혼합하여 사용하는 기질에 배지를 혼합하는 공정;
    2. 혼합된 기질과 배지 조성물이 잘 용해된 것을 확인한 후, 주사침을 주사기에 장착하여, 환자의 뼈 결손부위에 주입하는 공정;이 포함됨을 특징으로 하는 메디컬 키트의 사용방법.
  23. 무균 및 멸균 처리된 키트로서, 세포를 분리, 배양, 수집, 보관하여 체내로 이식할 수 있도록 전 과정을 단계별로 나누어 그 단계에 대한 세트화된 키트별로 프로세싱이 이루어질 수 있도록 제대혈보관키트(30)를 구비하되, 이 제대혈보관키트에는 탯줄혈액채취키트(31)와 조혈모세포분리키트(32) 그리고 조혈모세포 동결보관키트(33)가 구비됨을 특징으로 하는 메디컬 키트.
  24. 제 23 청구항에 있어서,
    상기 탯줄혈액채취키트(31)에는,
    많은 양의 혈액을 모을 때 사용하는 Blood collection bag, 채혈 bag을 운반할때 사용하는 File case, 운송 전까지 채혈 bag을 저장하는데 사용하는 Zipper bag, 파일 케이스 표면에 부착하는 스티커가 구비됨을 특징으로 하는 메디컬 키트.
  25. 제 23 청구항에 있어서,
    상기 조혈모세포분리키트(32)에는,
    적혈구 제거 후 조혈모세포를 농축시키는데 사용하는 Processing bag, 품질관리 목적으로 샘플 추출시 사용하는 Syringe, 원심분리튜브에 걸쳐 놓은 후 세포와 배양액이 혼합된 현탁액을 부어 세포와 혼합되어 있는 용액을 분리하는 Cell strainer, 세포를 수세하기 위해 원심분리하는데 사용하는 Tube, 무균 작업을 수행 하기 위해 사용하는 Latex glove, 조혈모세포를 저장하기위해 세포를 바이알에 담는 CCZ vial, 바이알에 씌우는 알루미늄 마개인 Aluminum Seal, 용액을 취하는데 사용하는 blue tip, trypanblue와 세포가 든 배지 혼합시 사용하는 E-tube가 구비됨을 특징으로 하는 메디컬 키트.
  26. 제 23 청구항에 있어서,
    상기 조혈모세포 동결보관키트(33)에는,
    조혈모세포를 냉동시키는데 사용하는 도구인 Freezing bag, freezing bag을 보호하기 위해 사용하는 Cryowrap, Freezing bag과 Cryowrap을 보관하는 케니스터가 구비됨을 특징으로 하는 메디컬 키트.
  27. 제 23 청구항에 있어서,
    상기 제대혈보관키트(30)에는 조혈모세포분리, 동결보관에 사용되는 배지키트(34), 조혈모세포분리, 동결보관에 사용되는 배지키트(35)가 더 구비됨을 특징으로 하는 메디컬 키트.
  28. 청구항 23 에 구비된 제대혈보관키트(30)를 이용하여 탯줄혈액채취공정; 조 혈모세포 분리공정; 조혈모세포 동결보관공정;에 의해 제대혈을 보관함을 특징으로 하는 메디컬 키트의 사용방법.
  29. 제 28 청구항에 있어서,
    상기 탯줄혈액채취공정은,
    1. USC RM Kit내에 포함되어 있는 USC RM-Transport Kit의 File case를 수술실로 운반하는 공정;
    2. 운반된 file case의 zipper bag을 열고, 멸균 처리된 blood collection bag을 이용하여 탯줄혈액을 채취하는 공정;
    3. 채취된 혈액은 다시 USC RM-Transport Kit의 file case에 담아 공정실로 옮기는 공정;이 포함됨을 특징으로 하는 메디컬 키트의 사용방법.
  30. 제 28 청구항에 있어서,
    상기 조혈모세포 분리공정은,
    1. 채혈백에서 10mL 주사기를 이용하여 일정량의 혈액을 채취하여 EPP tube로 분주하는 공정;
    2. 30mL 주사기를 이용하여 일정량의 UES 용액을 첨가하여 교반한 후, 방치하는 공정;
    3. 일정시간 방치 후, 반자동 혈장분리기에서 1차 혈장층을 processing bag으로 분리하는 공정;
    4. 상기“2”, “3”의 과정을 재반복 하는 공정;
    5. Processing bag을 버켓에 고정한 후, 무게를 측정하고 원심분리하는 공정;
    6. 원심분리 후, 버켓에서 processing bag을 분리하는 공정;
    7. Processing bag을 자동 혈장 분리기에 고정시키는 공정;
    8. 자동혈장분리기를 이용하여 혈장을 15ml 튜브에 분주하는 공정;
    9. 자동혈장분리기를 이용하여 나머지 혈장을 50ml 튜브에 담는 공정;
    10. 10mL 주사기를 이용하여 50ml 튜브에 담겨진 혈장을 채취하여 vacumtainer로 분주하는 공정;이 포함됨을 특징으로 하는 메디컬 키트의 사용방법.
  31. 제 28 청구항에 있어서,
    상기 조혈모세포 동결보관공정은,
    1. Processing bag을 현탁 시킨 후, 현탁시킨 processing bag에서 10mL 주사기로 내용물을 채취하여 EPP 튜브에 분주하는 공정;
    2. 10mL 주사기로 cell stock solution을 채취하여 얼음물에 담궈 현탁시킨 processing bag에 첨가한 뒤 잘 혼합되게 하는 공정;
    3. Processing bag백의 겉 표면을 70% 알코올로 소독하는 공정;
    4. Freezing bag을 processing bag에 연결하여 유핵세포 농축층을 옮겨 담아 기포를 제거하는 공정;
    5. Freezing bag을 이중 포장백에 넣어 압축 포장을 한 뒤, 소독하는 공정;
    6. 이중 포장백에 포장되어진 freezing bag을 케니스터에 삽입하는 공정;이 포함됨을 특징으로 하는 메디컬 키트의 사용방법.
KR1020060105127A 2006-10-27 2006-10-27 메디컬 키트 및 이의 사용방법 Ceased KR20080037883A (ko)

Priority Applications (7)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020060105127A KR20080037883A (ko) 2006-10-27 2006-10-27 메디컬 키트 및 이의 사용방법
CN200680056211.0A CN101528157B (zh) 2006-10-27 2006-11-03 医疗试剂盒和使用该试剂盒的方法
CN2012101693380A CN102697583A (zh) 2006-10-27 2006-11-03 医疗试剂盒和使用该试剂盒的方法
JP2009534467A JP2010507389A (ja) 2006-10-27 2006-11-03 メディカルキット及びその使用方法
EP06812388A EP2083755A4 (en) 2006-10-27 2006-11-03 MEDICAL KIT AND METHOD THEREFOR
PCT/KR2006/004549 WO2008050922A1 (en) 2006-10-27 2006-11-03 Medical kit and using method thereof
US12/311,783 US20100034783A1 (en) 2006-10-27 2006-11-03 Medical kit and using method thereof

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020060105127A KR20080037883A (ko) 2006-10-27 2006-10-27 메디컬 키트 및 이의 사용방법

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20080037883A true KR20080037883A (ko) 2008-05-02

Family

ID=39324697

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020060105127A Ceased KR20080037883A (ko) 2006-10-27 2006-10-27 메디컬 키트 및 이의 사용방법

Country Status (6)

Country Link
US (1) US20100034783A1 (ko)
EP (1) EP2083755A4 (ko)
JP (1) JP2010507389A (ko)
KR (1) KR20080037883A (ko)
CN (2) CN102697583A (ko)
WO (1) WO2008050922A1 (ko)

Families Citing this family (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7494811B2 (en) 2003-05-01 2009-02-24 Lifenet Health In vitro growth of tissues suitable to the formation of bone and bone forming tissue formed thereby
PL2775928T3 (pl) 2011-11-08 2019-09-30 Auxocell Laboratories Inc. Systemy i metody przetwarzania komórek
US10932464B2 (en) 2013-02-22 2021-03-02 Lifenet Health Packaging assembly for storing tissue and cellular material
EP3177302A4 (en) * 2014-08-07 2018-04-11 Duke University Compositions and methods for the reprogramming of cells into cardiomyocytes
USD748462S1 (en) 2014-08-11 2016-02-02 Auxocell Laboratories, Inc. Centrifuge clip
US9993748B2 (en) 2014-08-11 2018-06-12 Auxocell Laboratories, Inc. Centrifuge clip and method
FR3035407B1 (fr) 2015-04-23 2022-06-17 Francais Du Sang Ets Procede de conservation de cellules, tissus ou organes en hypothermie
CN106473757A (zh) * 2016-09-26 2017-03-08 北京华为应运科技发展有限公司 身体健康检测系统
JP6380868B1 (ja) * 2017-06-05 2018-08-29 オーソセル・リミテッド 医療処置キットおよび関連の方法
CN108482793A (zh) * 2018-03-20 2018-09-04 周戈 一种改进型医疗箱装置
CN108263732A (zh) * 2018-03-20 2018-07-10 陈柯 一种新型医疗箱装置
CN112061600A (zh) * 2020-08-25 2020-12-11 中晶生物技术股份有限公司 一种人软骨组织运输装置及使用方法
JP7763389B2 (ja) * 2023-10-26 2025-10-31 公益財団法人京都大学ｉＰＳ細胞研究財団 細胞製造装置の包装体、細胞製造方法およびそのための管理システム

Family Cites Families (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU702179B2 (en) * 1994-03-07 1999-02-18 Immunex Corporation Extracorporeal cell culture and transplantation kits
US5989269A (en) * 1996-08-30 1999-11-23 Vts Holdings L.L.C. Method, instruments and kit for autologous transplantation
CN1280611A (zh) * 1997-09-25 2001-01-17 糖技术公司 结合造血干细胞的方法和组合物
US6197061B1 (en) * 1999-03-01 2001-03-06 Koichi Masuda In vitro production of transplantable cartilage tissue cohesive cartilage produced thereby, and method for the surgical repair of cartilage damage
JP2002000699A (ja) * 2000-06-23 2002-01-08 Jms Co Ltd 医療用具のための包装材料
CA2460539C (en) * 2001-09-15 2013-10-29 Rush-Presbyterian-St. Luke's Medical Center Stratified cartilage tissue and methods to engineer same
US7931687B2 (en) * 2002-05-13 2011-04-26 Articular Engineering, Llc Tissue engineered osteochondral implant
AU2002337479A1 (en) * 2002-09-04 2004-03-29 Hadasit Medical Research Services & Development Ltd. Compositions comprising bone marrow cells, demineralized bone matrix and rtg polymers for use in the induction of bone and cartilage formation
JP2004187518A (ja) * 2002-12-09 2004-07-08 Japan Tissue Engineering:Kk 培養細胞シート包装体及びシート挟持部材
US20070025961A1 (en) * 2003-06-03 2007-02-01 Kenzo Bamba Composition for stabilizing survival of transplanted hematopoietic stem cell, kit for obtaining the composition, method of stabilizing survival of transplanted hematopoietic stem cell, human monoclonal antibody or human polyclonal antibody and method of producing the same, gene encoding human monoclonal antibody and transf
DE602006014399D1 (de) * 2005-03-23 2010-07-01 Biosafe Sa Integriertes system zum sammeln, bearbeiten und transplantieren von zell-subsets, einschliesslich adulter stammzellen, für die regenerative medizin

Also Published As

Publication number Publication date
CN101528157A (zh) 2009-09-09
EP2083755A1 (en) 2009-08-05
WO2008050922A1 (en) 2008-05-02
CN101528157B (zh) 2014-09-03
CN102697583A (zh) 2012-10-03
EP2083755A4 (en) 2012-06-13
JP2010507389A (ja) 2010-03-11
US20100034783A1 (en) 2010-02-11

Similar Documents

Publication Publication Date Title
AU2002326901B2 (en) Preservation of non embryonic cells from non hematopoietic tissues
ES3009517T3 (en) A method of isolating mesenchymal stem cells from umbilical cord amniotic membrane using a cell culture medium
US20200332261A1 (en) Native wharton&#39;s jelly stem cells and their purification
AU2002326901A1 (en) Preservation of non embryonic cells from non hematopoietic tissues
CN106465710B (zh) 脂肪组织冻存液及脂肪组织冻存方法
KR20080037883A (ko) 메디컬 키트 및 이의 사용방법
US20080318317A1 (en) Kit for Preparing a Composition Comprising Fat Cells
CN103667187A (zh) 一种人脂肪干细胞的分离培养方法和干细胞库的构建方法
JP6745449B2 (ja) 臍帯組織の凍結保存方法
CN110079498B (zh) 一种人胎盘间充质干细胞及其制备方法和应用
JPWO2016076428A1 (ja) 臍帯血および末梢血の凍結保存方法および凍結保存用溶液
AU2008296864A1 (en) Cell composition for tissue regeneration
CN108486050A (zh) 从犬的脐带制备间充质干细胞的方法
CN110791477A (zh) 一种脂肪细胞冻存及复苏后间充质干细胞的培养方法
CN109294979A (zh) 一种高效分离脐带胎盘间充质干细胞的方法及应用
US20240301354A1 (en) System and method for converting adipose derived mesenchymal stems cells to hematopoietic stem/progenitor cells and differentiating into blood cells and applications of same
CN114107189A (zh) 一种大鼠间充质干细胞的分离培养方法
ES2525273T3 (es) Proceso de alta seguridad para la preparación de fracciones de células madre purificadas
US20190357524A1 (en) Preservative solution for human stem cells, human stem cell suspension, and method for preserving human stem cells
CN104845931A (zh) 人乳干细胞的获取方法及人乳干细胞库的构建方法
US20200100775A1 (en) A medical procedure kit and a related method
CN112111450A (zh) 一种脐带间充质干细胞的培养方法及其应用
CN115521906A (zh) 一种制备高品质人源牙髓干细胞的方法
Linetsky et al. Human Vertebral Body Marrow Processing: Standard Operating Procedure from the cGMP Human Cell Processing Facility of the Cell Transplant Center and Diabetes Research Institute at the University of Miami
CN107849532A (zh) 冷冻间充质细胞的制备方法和移植用治疗材料的制备方法

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
PA0109 Patent application

Patent event code: PA01091R01D

Comment text: Patent Application

Patent event date: 20061027

PA0201 Request for examination
E902 Notification of reason for refusal
PE0902 Notice of grounds for rejection

Comment text: Notification of reason for refusal

Patent event date: 20071012

Patent event code: PE09021S01D

AMND Amendment
E601 Decision to refuse application
PE0601 Decision on rejection of patent

Patent event date: 20080416

Comment text: Decision to Refuse Application

Patent event code: PE06012S01D

Patent event date: 20071012

Comment text: Notification of reason for refusal

Patent event code: PE06011S01I

PG1501 Laying open of application
J201 Request for trial against refusal decision
PJ0201 Trial against decision of rejection

Patent event date: 20080514

Comment text: Request for Trial against Decision on Refusal

Patent event code: PJ02012R01D

Patent event date: 20080416

Comment text: Decision to Refuse Application

Patent event code: PJ02011S01I

Appeal kind category: Appeal against decision to decline refusal

Decision date: 20080804

Appeal identifier: 2008101004338

Request date: 20080514

AMND Amendment
PB0901 Examination by re-examination before a trial

Comment text: Amendment to Specification, etc.

Patent event date: 20080603

Patent event code: PB09011R02I

Comment text: Request for Trial against Decision on Refusal

Patent event date: 20080514

Patent event code: PB09011R01I

Comment text: Amendment to Specification, etc.

Patent event date: 20071211

Patent event code: PB09011R02I

B601 Maintenance of original decision after re-examination before a trial
E801 Decision on dismissal of amendment
PB0601 Maintenance of original decision after re-examination before a trial

Comment text: Report of Result of Re-examination before a Trial

Patent event code: PB06011S01D

Patent event date: 20080625

PE0801 Dismissal of amendment

Patent event code: PE08012E01D

Comment text: Decision on Dismissal of Amendment

Patent event date: 20080625

Patent event code: PE08011R01I

Comment text: Amendment to Specification, etc.

Patent event date: 20080603

Patent event code: PE08011R01I

Comment text: Amendment to Specification, etc.

Patent event date: 20071211

J801 Dismissal of trial

Free format text: REJECTION OF TRIAL FOR APPEAL AGAINST DECISION TO DECLINE REFUSAL REQUESTED 20080514

Effective date: 20080804

PJ0801 Rejection of trial

Patent event date: 20080804

Patent event code: PJ08011S01D

Comment text: Decision on Dismissal of Request for Trial (Dismissal of Decision)

Decision date: 20080804

Appeal kind category: Appeal against decision to decline refusal

Appeal identifier: 2008101004338

Request date: 20080514