[go: up one dir, main page]

KR20000016700A - 뎁시 펩티드 및 이를 유효 성분으로 하는 의약 - Google Patents

뎁시 펩티드 및 이를 유효 성분으로 하는 의약 Download PDF

Info

Publication number
KR20000016700A
KR20000016700A KR1019980710303A KR19980710303A KR20000016700A KR 20000016700 A KR20000016700 A KR 20000016700A KR 1019980710303 A KR1019980710303 A KR 1019980710303A KR 19980710303 A KR19980710303 A KR 19980710303A KR 20000016700 A KR20000016700 A KR 20000016700A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
compound
alanine
leucine
acid
group
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Withdrawn
Application number
KR1019980710303A
Other languages
English (en)
Inventor
마꼬또 야나이
마사시 스즈끼
노리오 오시다
고지 가와무라
시게루 히라모또
오리에 야스다
노부히로 기노시따
아끼꼬 신가이
마사꼬 가나이
Original Assignee
쇼다 오사무
닛신 세이훈 가부시키가이샤
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 쇼다 오사무, 닛신 세이훈 가부시키가이샤 filed Critical 쇼다 오사무
Publication of KR20000016700A publication Critical patent/KR20000016700A/ko
Withdrawn legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/10—Tetrapeptides
    • C07K5/1021—Tetrapeptides with the first amino acid being acidic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/02—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/06—Antihyperlipidemics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K11/00—Depsipeptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06017—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/06034—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 2 to 4 carbon atoms
    • C07K5/06043—Leu-amino acid
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06017—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/06034—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 2 to 4 carbon atoms
    • C07K5/06052—Val-amino acid
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06104—Dipeptides with the first amino acid being acidic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/10—Tetrapeptides
    • C07K5/1002—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/1005—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/101—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 2 to 4 carbon atoms, e.g. Val, Ile, Leu
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
    • C07K7/06—Linear peptides containing only normal peptide links having 5 to 11 amino acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Abstract

본 발명은, 화학식 1로 나타내어지는 뎁시 펩티드 또는 그의 약리학적으로 허용되는 염에 관한 것이다.
[화학식 1]
[식중, R1은 탄소수 5 ∼ 20 의 직쇄상 또는 분지쇄상의 알킬기 또는 탄소수 5 ∼ 15 의 직쇄상 또는 분지쇄상의 알콕시메틸기를 나타내고, R2는 -A-B, -A-B-W, -A-B-W-D 또는 -A-B-W-D-E를 나타내며, R3이 수산기, 저급알콕시기, 벤질옥시기, -Z, -Z-G, -Z-G-J를 나타내고, 상기 A, B, D, E, G 및 J 는, 각각 독립하여 알라닌, 바린, 로이신, 이소로이신, 세린, 트레오닌, 리신, 히드록시리신, 알기닌, 시스테인, 메티오닌, 페닐알라닌, 티로신, 아스파르트산, 아스파라긴, 글루탐산 및 글루타민 등에서 선택되는 아미노산잔기 또는 이들 아미노산잔기의 N-C1∼ C4알킬 유도체를 나타내고, 상기 W 및 Z 는 각각 독립하여 아스파르트산, 아스파라긴, 글루탐산, 글루타민, 알라닌, 세린 또는 리신으로 이루어지는 아미노산 잔기를 나타낸다].
상기 뎁시 펩티드는 아폴리포프로테인 E 생산 촉진 작용을 가지며, 신경 손상 치료약, 특히 치매증 치료약으로서 유용하며, 또한 고지혈증 치료약으로서도 유용하다.

Description

뎁시 펩티드 및 이를 유효 성분으로 하는 의약
노인성 치매증의 치료약으로, 뇌순환대사 개선약이 주로 사용되고 있는데, 이들의 약물은, 노인성 치매증의 원인으로 생각되고 있는 중추신경계의 붕괴에는 아무런 개선작용을 나타내지 않는다. 그 결과 치매의 중핵적 증상이라고 할만한 기억장해나 계산능력장해에 대해서도 아무런 개선작용을 나타내지 않는다. 따라서, 새로운 타입의 노인성 치매증의 치료약으로서, 신경계의 수복, 성장을 촉진하여, 중추신경의 붕괴를 억제하는 약물이 요구되고 있다.
한편, 아폴리포프로테인 E는, 손상되어 회복되고 있는 신경계부위에서 높은 레벨로 발현되는 것이 보고되고 있어 (예를 들면, M.J.Igunalius et. al., Pro. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 83:1125(1986)참조), 신경계의 수복에 중요한 역할을 할 것이라고 시사되어 있다.
또한 최근, 아폴리포프로테인 E 를 인간의 가족성 고콜레스테롤혈증 호모 접합체의 모델동물인 WHHL 토끼에게 정맥 투여하면, 혈장 콜레스테롤농도의 현저한 감소를 볼 수 있는 것이 보고되고 (Yamada, et.al., Proceeding of National Academy Science USA, Vol.86, pp665-669, 1989), 또, 마우스 간장에 래트의 아폴리로프로테인E 의 유전자를 도입하여 아폴리포프로테인 E를 대량으로 발현시키면, 혈장콜레스테롤과 트리글리세리드가 현저하게 저하되는 것이 보고되었다 (Shimano, H. et. al., Journal of Clinical Investigation, Vol.90, pp2084-2091, 1992).
이들 보고에서 명확한 바와 같이, 혈장 아폴리포프로테인 E 농도를 상승시키는 것은, 고지혈증, 특히 지금까지의 약제로는 치료가 곤란하였던 가족성 고콜레스테롤혈증 호모접합체의 치료법으로서 매우 유효하다고 되어 있다.
본 발명은 신규한 뎁시 펩티드 및 이를 유효 성분으로 하는 의약에 관한 것으로, 본 발명의 뎁시 펩티드는 아폴리포프로테인 E 의 생산촉진작용을 갖고, 신경 손상 치료약, 특히 치매증 치료약으로 유용하며, 또한 고지혈증의 치료약으로도 유용하다.
본 발명은, 화학식 1로 나타내어지는 뎁시 펩티드 또는 그의 약리학적으로 허용되는 염에 관한 것이다.
[식중, R1은 탄소수 5 ∼ 20 의 직쇄상 또는 분지쇄상의 알킬기 또는 탄소수 5 ∼ 15 의 직쇄상 또는 분지쇄상의 알콕시메틸기를 나타내고, R2는 -A-B, -A-B-W, -A-B-W-D 또는 -A-B-W-D-E를 나타내며, R3이 수산기, 저급알콕시기, 벤질옥시기, -Z, -Z-G, -Z-G-J를 나타내고, 상기 A, B, D, E, G 및 J 는, 각각 독립하여 알라닌, 바린, 로이신, 이소로이신, 세린, 트레오닌, 리신, 히드록시리신, 알기닌, 시스테인, 메티오닌, 페닐알라닌, 티로신, 트립토판, 히스티딘, 프롤린, 4-히드록시프롤린, 피페리딘-4-카르복실산, 호모프롤린, 옥타히드로인돌-2-카르복실산, 노르발린, 노르로이신, α-t-부틸글리신, 시클로헥실글리신, 아제티딘-2-카르복실산, 3-(3-피리딜)알라닌, (3-N-메틸)피페리딜알라닌, 3-(2-나프틸)알라닌, β-시클로헥실알라닌, β-t-부틸알라닌, 9-안트라세닐알라닌, α-메틸알라닌, 2-아미노부탄산, 아스파르트산, 아스파라긴, 글루탐산 및 글루타민에서 선택되는 아미노산잔기 또는 이들 아미노산잔기의 N-C1∼ C4알킬 유도체를 나타내고, 상기 W 및 Z 는 각각 독립하여 아스파르트산, 아스파라긴, 글루탐산, 글루타민, 알라닌, 세린 또는 리신으로 이루어지는 아미노산 잔기를 나타내며, 상기 A, B, D, E, G, J, W 및 Z 에서의 아미노산잔기의 유리 아미노기, 유리 카르복실기 또는 유리 ω-카르바미드기 및/또는 N-말단아미노기는 이들의 보호기로서 펩티드화학에서 통상 이용되는 보호기로 각각 보호되어 있어도 되며, 그리고 상기 A, B, D, E, G, J, W 및 Z 에서의 아미노산잔기가 리신, 히드록시리신, 글루탐산 또는 아스파르트산인 경우에는, 인접하는 아미노산과 펩티드결합하는 아미노기 또는 카르복실기는 α-위치이어도 ω-위치이어도 된다].
또한 본 발명은, 상기 화학식 1을 갖는 뎁시 펩티드 또는 그의 약리학적으로 허용되는 염을 유효 성분으로 하는 의약 조성물, 아폴리포프로테인 E 생산 촉진약, 신경 손상 치료약, 치매증 치료약 및 고지혈증 치료약에 관한다.
본 발명은, 또, 상기 화학식 1을 갖는 뎁시 펩티드 또는 그의 약리학적으로 허용되는 염을 투여하는 것으로 이루어지는 아폴리포프로테인 E 생산 촉진 방법, 신경손상 치료 방법 및 치매증 치료 방법에 관한다.
또한 본 발명은, 상기 화학식 1을 갖는 뎁시 펩티드 또는 그의 약리학적으로 허용되는 염을 투여하는 것으로 이루어지는 고지혈증 치료 방법에 관한 것이다.
상기 화학식 1에서, 바람직하게는 A, B, D, E, G 및 J 는, 각각 독립하여, 알라닌, 바린, 로이신, 이소로이신, 페닐알라닌, 티로신, 프롤린, β-t-부틸알라닌 또는 아스파르트산으로, 그리고 W 및 Z 는 각각 독립하여 아스파르트산, 아스파라긴, 글루탐산, 글루타민, 알라닌, 세린 또는 리신이다.
보다 바람직하게는, A 는 이소로이신, 알라닌 또는 아스파르트산, B 는 로이신, 페닐알라닌, β-t-부틸알라닌 또는 아스파르트산, D 는 바린, 페닐알라닌, 알라닌 또는 아스파르트산, E 는 로이신 또는 알라닌, G 는 로이신 또는 알라닌, J 는 로이신 또는 알라닌, W 는 아스파르트산, 글루탐산, 아스파라긴, 글루타민 또는 세린, Z 는 아스파르트산, 글루탐산, 아스파라긴, 글루타민 또는 리신이다.
더욱 바람직하게는, A 는 이소로이신 또는 알라닌, B 는 로이신 또는 알라닌, D 는 바린 또는 알라닌, E 는 로이신, 알라닌 또는 글루탐산, G 는 로이신 또는 알라닌, J 는 로이신 또는 알라닌, W 는 아스파라긴 또는 글루탐산, 그리고 Z 는 글루타민, 아스파라긴, 글루탐산, 아스파르트산 또는 리신이다.
그리고 특히 바람직하게는, A 는 이소로이신, B 는 로이신, D 는 바린, E 는 로이신, G 는 로이신, J 는 로이신, W 는 아스파르트산 또는 글루탐산, 그리고 Z 는 글루타민, 아스파라긴, 글루탐산, 아스파르트산 또는 리신이다.
상기 화학식 1에서, R1은 바람직하게는 탄소수 6 ∼ 12 의 직쇄상의 알킬 또는 알콕시메틸기이다.
상기의 본 발명의 화학식 1을 갖는 뎁시 펩티드를 구성하는 상기 아미노산은 L-체 또는 D-체의 어느 것이어도 되지만, A, D, G, J, W 및 Z 의 아미노산은 L-체가 바람직하고, B 및 E 의 아미노산은 D-체인 것이 바람직하다. 아미노산잔기에서의 유리아미노기의 보호기로서는 t-부톡시카르보닐 (이하 "Boc" 라 함) 기, 벤질옥시카르보닐 (이하, "Cbz" 라 함) 기, p-메톡시-벤질옥시카르보닐기 또는 9-플루오레닐메톡시카르보닐 (이하 "Fmoc" 라 함) 기 등이, 또, 아미노산잔기에서의 유리카르복실기의 보호기로서는 벤질옥시 (이하 "OBzl" 이라 함) 기 또는 t-부톡시 (이하 "OtBu" 라 함) 기 등이, Gln 또는 Asn 의 ω-카르바미드기의 보호기로서는 4,4'-디메톡시벤즈히드릴 (이하 "Mbh" 라 함) 기 등을 들 수 있다.
상기 뎁시 펩티드의 N-말단아미노기의 보호기로서는, Boc 기, Cbz기, p-메톡시벤질옥시카르보닐기 및 Fmoc 기 등의 펩티드화학에서 통상 사용되는 보호기가 이용된다.
상기 뎁시 펩티드의 C-말단카르복실기의 보호기로서는, OBzl 기, OtBu 기 등이 이용된다.
본 발명의 상기 화학식 1을 갖는 뎁시 펩티드는, 간장의 모든 기능을 구비한 Hep G2 세포의 아폴리포프로테인 E 생산을 촉진하는 작용을 갖는다. 아폴리포프로테인 E는 신경손상의 수복작용을 갖고, 또한 콜레스테롤과 트리글리세리드의 혈중농도를 저하시키는 작용을 가지므로, 아폴리포프로테인 E의 생산촉진작용을 갖는 본 발명의 뎁시 펩티드는, 신경 손상 치료약, 특히 치매증 치료약 및 고지혈증 치료약으로 유용하다.
본 발명의 상기 화학식 1 로 나타나는 뎁시 펩티드 또는 그의 약리학적으로 허용되는 염은, 펩티드합성에서 통상 사용되는 방법으로 제조할 수 있다. 예를 들면, 이즈미야 노부오 등의 편저 ["펩티드합성의 기초와 실험" 마루젠(주) 1985년] 등에 기재된 축합제법, 아지드법, 클로리드법, 산무수물법, 혼산무수물법, 활성에스테르법, 산화환원법, 산소법 등을 이용할 수 있다.
예를 들면, 본 발명의 뎁시 펩티드 또는 그의 약리학적으로 허용되는 염은, 화학식 2
(식중, R1은 상기한 것과 동일한 의미를 갖는다)를 갖는 3-히드록시카르복실산의 카르복실기 또는 히드록실기를 보호 또는 활성화한 후, 이것에 순차적으로 원하는 아미노산을 상용되는 법으로 축합시킴으로써 제조할 수 있다.
상기의 화학식 2 의 화합물의 카르복실기의 보호는, 에테르, 메탄올 등의 용매중, 빙냉하 내지 실온에서 디아조메탄과 반응시키는 메틸에스테르화반응이나, 디메틸포름아미드 (이하 "DMF" 라 함), 디메틸술폭시드 (이하, "DMSO" 라 함) 등의 용매중, 실온 ∼ 가열하에서, 염기성물질, 예를 들면 트리에틸아민의 존재하, 벤질브로미드를 반응시키는 벤질에스테르화 등으로 행할 수 있다.
카르복실기가 보호된 화합물의 히드록실기로의, 아미노산의 축합은, 에테르, 아세톤, 클로로포름, 디클로로메탄, 아세트산에틸, DMF, 테트라히드로푸란 (이하, "THF" 라 함), 아세토니트릴, DMSO 등의 용매중, 빙냉하 내지 실온에서, 바람직하게는 디메틸아미노피리딘 (이하 "DMAP" 라 함) 과 같은 아실화촉매의 존재하에서 축합시약으로서의 N,N'-디시클로헥실카르보디이미드(N,N' Dicyclohexylcarbodiimide) (이하 "DCC" 라 함) 이나 1-에틸-3-(3'-디메틸아미노프로필)카르보디이미드 (1-에틸-3-(3'-디메틸아미노프로필)카르보디이미드) 염산염, 즉. 수용성카르보디이미드 (이하 "WSCI" 라 함)을 이용하여 행해진다.
본 발명의 뎁시 펩티드의 출발원료가 되는 화학식 2 의 3-히드록시카르복실산의 구체예로서는, 3-히드록시-카프릴산, 3-히드록시-페랄곤산, 3-히드록시-카프린산, 3-히드록시-라우린산, 3-히드록시-미리스트산, 3-히드록시-팔미틴산, 3-히드록시-마아가린산 및 3-히드록시-스테아르산을 들 수 있다.
상기 화학식 1을 갖는 뎁시 펩티드를 제조하는데, 축합제법을 이용하는 경우는, DCC 또는 WSCI를 이용하는 것이 바람직하다. 또, 동시에, 라세미화를 억제하기 위해 통상 이용되는 첨가제, 예를 들면 N-히드록시숙신이미드, N-히드록시벤조트리아졸 (N-Hydroxybenzotriazole) (이하, "HOBt" 라 함), N-히드록시-5-노르보넨-2,3-디카르보디이미드벤조트리아졸 등을 첨가하는 것도 바람직하다.
또, 아지드법으로 이용되는 주된 축합제로서는, 디페닐렌산아지드 (이하 "DPPA" 라 함), 디에틸린산시아니드 등을 들 수 있다.
또한, 축합 반응을 행하기 전에, 통상 공지의 수단에 의해 당해 축합 반응에 관여하지 않은 카르복실기, 아미노기 및 ω-카르바미드기 등으로 보호수단을 실시하는 것이 바람직하다.
이 경우, 보호수단에 이용하는 보호기로서는, 상기의 각종 보호기를 이용할 수 있다.
본 발명의 뎁시 펩티드의 제조공정에서의 보호기의 탈리 반응은, 펩티드결합에 영향을 주지 않고 보호기를 탈리할 수 있는 것이 필요하고, 이용하는 보호기의 종류에 따라 적당히 선택하면 된다.
상기의 각 펩티드 합성에 이용하는 용매로서는, 예를 들면 무수 또는 함수의 클로로포름, 디클로로메탄, 아세트산에틸, DMF, DMSO, 피리딘, 디옥산, THF, 디메톡시에탄, 아세토니트릴 등을 들 수 있고, 필요에 따라 2 종 이상의 용매를 합하여 이용하여도 된다. 또, 이 축합 반응은 통상의 경우와 동일하게, 약 -20 ∼ 50 ℃ 의 범위에서 행해진다.
또, 펩티드합성은, 액상법 및 고상법의 어느 것으로나 제조할 수 있고, 또한 컬럼법, 배치법의 어느 것을 이용하여도 된다.
본 발명의 뎁시 펩티드가 염 형태의 화합물인 경우에는, 이것을 유리형태의 화합물로 변환하고, 또 이와 같이 하여 제조된 본 발명의 뎁시 펩티드가 유리형태의 화합물인 경우에는 이를 그의 약리학적으로 허용되는 염 형태의 화합물로 변환할 수 있다. 그리고 후자의 경우에서 이 뎁시 펩티드가 카르복실기의 존재에 의해 산성화합물인 때에는, 무기염기와의 염, 예를 들면 나트륨염, 칼륨염, 칼슘염, 암모늄염 등, 또는 유기염기와의 염, 예를 들면 트리에틸아민염 등의 염을, 또 이 펩티드유도체가 아미노기의 존재에 의해 염기성화합물인 때에는, 무기산과의 염, 예를 들면 염산염, 브롬화수소산염, 황산염, 인산염 등, 또는 유기산과의 염, 예를 들면 아세트산염, 숙신산염, 옥살산염, 사과산염, 타르타르산염 등의 약학적으로 허용되는 염을 형성시킬 수 있다.
본 발명의 뎁시 펩티드 또는 그의 약리학적으로 허용될 수 있는 염은 여러 가지 투여형태의 제제로 할 수 있다. 즉, 이 제제는 경구적으로 정제, 당의정, 경캡슐제, 연캡슐제, 과립제, 산제 등의 고형제제 및 용액, 에멀젼 또는 현탁액과 같은 액체제제의 형태로 투여할 수 있다. 또, 비경구 투여의 경우에는 주사제, 좌제의 형태로 투여된다.
이들 제제의 조제에 있어서는 제제화를 위한 관용의 첨가제, 예를 들면, 부형제, 안정제, 방부제, 용해제, 습윤제, 유화제, 활택제, 감미제, 착색제, 향미제, 장도조제제, 완충제, 산화방지제 등을 첨가하여 조제화할 수 있다.
첨가제로서는, 예를 들면 전분, 백당, 과당, 젖당, 포도당, 만니톨, 솔비톨, 침강성탄산칼슘, 결정셀룰로스, 카르복시메틸셀룰로스, 덱스트린, 젤라틴, 아라비아고무, 스테아르산마그네슘, 타르크, 히드록시프로필메틸셀룰로스 등을 들 수 있다.
본 발명의 뎁시 펩티드를 액제, 주사제로 이용할 때는 본 발명의 뎁시 펩티드를 관용의 희석제 중에 용해 또는 현탁하여 이용할 수 있다. 희석제로는, 생리식염수, 링겔액, 포도당 수용액, 알콜류, 지방산에스테르류, 글리콜류, 글리세린, 동식물 유래의 유지, 파라핀류 등이 함유된다.
또, 이들의 제제는 통상의 방법으로 제조할 수 있다.
그리고 통상의 임상투여량으로서, 성인 1 인당 경구의 경우 1 ∼ 2000 ㎎ 의 범위에서 이용된다. 더욱 바람직하게는 5 ∼ 1000 ㎎ 의 범위에서 이용된다.
다음에 본 발명의 뎁시 펩티드의 제조예를 참고예 및 실시예로서, 또 본 발명의 뎁시 펩티드의 아폴리포프로테인 E 생산능에 대한 시험예와, 제제예에 대하여 각각 서술하기로 한다.
이하에 본 발명 화합물의 합성예를 참고예 및 실시예로서 서술하는데, 본 발명은 이들에 한정되는 것은 아니다. 이하의 참고예 및 실시예에서, 뎁시 펩티드를 구성하는 아미노산이 D 체인 경우에 대해서는 그 취지를 특기하기로 하고, 이와 같은 특기가 없는 경우에는 아미노산은 L 체인 것으로 한다. 참고예 및 실시예에서의 반응식은 반응식 1 ∼ 40 에 의해 나타난다.
참고예 1 중간체화합물 (1) 의 제조
3-히드록시미리스트산 (3-Hydroxymyristic acid) 5.00 g을 DMF 50 ㎖ 에 용해하고, 트리에틸아민 (triethylamine) 2.85 ㎖ 와 브롬화벤질 (Benzylbromide) 2.43 ㎖을 실온에서 첨가하였다. 이 반응 혼합물을 실온에서 하룻밤 교반하였다. 용매를 감압 농축하여, 잔류물에 아세트산에틸과 물을 더하여, 유기층을 분리하고, 물로 두 번 세정하여 무수황산나트륨으로 건조하였다. 용매를 증류한 후, 조생성물을 실리카겔을 이용하는 컬럼크로마토그래피를 이용하여, 클로로포름:메탄올=100:0∼10 으로 용출하여, 중간체화합물 (1) 3.69 g을 얻었다.
참고예 2 중간체화합물 (2) 의 제조
중간체화합물 (1) 3.00 g을 디클로로메탄 25 ㎖ 에 용해하고, t-부톡시카르보닐-이소로이신 (tert-Butoxycarbonyl-L-isoleucine) 2.22 g 과 4-디메틸아미노피리딘 (4-Dimethylaminopyridine) 77 ㎎ 및 디클로로메탄 25 ㎖ 에 용해한 DCC 2.78 g을 빙냉하에서 순차적으로 더하였다. 이 반응 혼합물을 빙냉하에서 1 시간, 실온에서 2 시간 교반하였다. 석출물을 여과하여 제거하고, 여액을 순차적으로 0.5N 염산, 포화탄산수소나트륨수용액 및 식염수로 세정하고, 무수황산나트륨으로 건조하였다. 용매를 증류한 후, 조생성물을 실리카겔 (100 g)을 이용하는 컬럼크로마토그래피를 이용하여, 헥산:아세트산에틸=200 : 0 ∼ 15 로 용출하여, 무색유상의 중간체화합물 (2) 4.62 g을 얻었다.
동일하게 이하의 화합물을 제조하였다.
중간체화합물 (5)
중간체화합물 (11)
중간체화합물 (78)
중간체화합물 (83)
중간체화합물 (98)
중간체화합물 (101)
참고예 3 중간체화합물 (3) 의 제조
참고예 2에서 얻어진 중간체화합물 (2) 4.62 g 에 트리플루오로아세트산 (Tri-fluoroacetic acid) 9 ㎖를 더하였다. 이 반응 혼합물을 실온에서 15 분간 교반하였다. 용매를 증류한 후, 잔류물을 아세트산에틸에 용해하고, 포화탄산수소나트륨수용액으로 세정하여, 유기층을 무수황산나트륨으로 건조하고. 용매를 증류하여 중간체화합물 (3) 3.78 g을 얻었다.
동일하게 이하의 화합물을 제조하였다.
중간체화합물 (6)
중간체화합물 (70)
참고예 4 중간체화합물 (4) 의 제조
3-히드록시미리스트산 (3-Hydroxymyristic acid) 3.46 g을 에테르 50 ㎖ 와 메탄올 10 ㎖ 의 혼합용액에 용해하고, 빙욕에서 냉각하였다. 이 용액을 교반하면서 에테르에 용해한 디아조메탄 (Diazomethane)을 천천히 용액의 색이 약간 황색으로 변할 때까지 첨가하였다. 이어서, 아세트산을 이 용액의 색이 무색이 될 때까지 첨가하였다. 용매를 제거하여, 잔류물을 아세트산에틸로 용해하였다. 이 용액을 포화탄산수소나트륨수용액으로 세정하여, 무수황산나트륨으로 건조하고, 용매를 증류하여 중간체화합물 (4) 3.66 g을 얻었다.
참고예 5 중간체화합물 (7) 의 제조
아세트산 45 ㎖ 에 현탁한 N-카르보벤족시-L-글루타민 (N-Carbobenzoxy-L- glutamine) 5.00 g 과 4,4'-디메톡시벤즈히드롤 (4,4'-Dimethoxybenzhydrol) 4.36 g 에 농무수황산 0.1 ㎖를 적하하여, 하룻밤 실온에서 교반하였다. 반응액에 물 150 ㎖를 더하고, 형성된 결정을 여취하여, 아세트산에틸에 용해하였다. 이 용액을 물로 세정하고, 무수황산나트륨으로 건조하였다. 용매를 증류한 후, 잔류물을 THF 에 용해하여, 에테르를 첨가하여 결정을 형성시켰다. 결정을 여취하여, 감압하에 건조하여 중간체화합물 (7) 7.92 g을 얻었다.
참고예 6 중간체화합물 (8) 의 제조
참고예 5에서 얻어진 중간체화합물 (7) 17.90 g을 DMF 50 ㎖ 에 용해하여, 4-디메틸아미노피리딘 (4-Dimethylaminopyridine) 0.95 g 및 제 3 부틸알콜 (tert-Butylalcohol) 1.70 ㎖를 더하여, 빙냉하에서 교반하면서 WSCI 3.29 g을 첨가하였다. 이 반응 혼합물을 빙냉하에서 2 시간, 실온에서 하룻밤 교반하였다. 반응 혼합물을 농축하여, 얻어진 잔류물에 아세트산에틸과 물을 더하여, 유기층을 분리하고, 포화탄산수소나트륨수용액과 물로 세정하여 무수황산나트륨으로 건조하였다. 용매의 증류후, 조생성물을 실리카겔 50 g을 이용하는 컬럼크로마토그래피를 이용하여, 클로로포름:메탄올=200 : 0 ∼ 2 로 용출하여, 생성물을 얻었다. 이것을 헥산-아세트산에틸로부터 재결정하여, 감압하에 건조하여 중간체화합물 (8) 4.02 g 얻었다.
참고예 7 중간체화합물 (9) 의 제조
참고예 6에서 얻은 중간체화합물 (8) 4.00 g을 메탄올 75 ㎖ 에 용해하고, 5% 파라듐-카본 0.4 g을 실온에서 더하여 현탁하여, 얻어진 현탁액을 수소분위기하에 실온에서 3 시간 교반하였다. 촉매를 여과하여 제거하여, 여액에서 용매를 증류후, 중간체화합물 (9) 3.00 g을 얻었다.
동일하게 이하의 화합물을 제조하였다.
중간체화합물 (12)
중간체화합물 (14)
중간체화합물 (19)
중간체화합물 (22)
중간체화합물 (28)
중간체화합물 (38)
중간체화합물 (42)
중간체화합물 (46)
중간체화합물 (50)
중간체화합물 (54)
중간체화합물 (56)
중간체화합물 (66)
중간체화합물 (67)
중간체화합물 (86)
참고예 8 중간체화합물 (10) 의 제조
참고예 7에서 얻어진 중간체화합물 (9) 3.00 g을 DMF 50 ㎖ 에 용해하고, 3-히드록시미리스트산 (3-Hydroxymyristic) 1.74 g 과 HOBt 1.20 g을 더하여, 빙냉하에서 교반하면서 WSCI 1.50 g을 첨가하였다. 이 반응 혼합물을 빙냉하에서 2 시간, 그리고 실온에서 6 시간 교반하였다. 용매를 증류하여 잔류물에 아세트산에틸과 10% 구연산 수용액을 더하여, 분리하여 얻어진 유기층을 물, 5% 탄산수소나트륨수용액, 및 물로 세정하여, 무수황산나트륨으로 건조하였다. 용매의 증류후 조생성물을 실리카겔 (30g) 을 이용하는 컬럼크로마토그래피로 정제하여, 클로로포름:메탄올=200 : 0 ∼ 10 으로 용출하여 생성물을 얻었다. 이것을 클로로포름-에테르로부터 재결정하여 중간체화합물 (10) 3.90 g을 얻었다.
동일하게 이하의 화합물을 제조하였다.
중간체화합물 (13)
중간체화합물 (15)
중간체화합물 (18)
중간체화합물 (21)
중간체화합물 (23)
중간체화합물 (27)
중간체화합물 (29)
중간체화합물 (31)
중간체화합물 (33)
중간체화합물 (35)
중간체화합물 (37)
중간체화합물 (39)
중간체화합물 (41)
중간체화합물 (43)
중간체화합물 (45)
중간체화합물 (47)
중간체화합물 (49)
중간체화합물 (53)
중간체화합물 (55)
중간체화합물 (65)
중간체화합물 (71)
중간체화합물 (73)
중간체화합물 (75)
중간체화합물 (80)
중간체화합물 (85)
중간체화합물 (87)
중간체화합물 (89)
중간체화합물 (91)
중간체화합물 (94)
참고예 9 중간체화합물 (17) 의 제조
참고예 2 에 따라 얻은 중간체화합물 (16) 9.93 g을 DMF 130 ㎖ 에 용해하고, 디에틸아민 (Diethylamine) 10 ㎖을 더하여 실온에서 3 시간 교반하였다. 반응액을 증류하여 잔류물을 실리카겔컬럼크로마토그래피 (클로로포름:메탄올=90:10) 로 정제하여, 중간체화합물 (17) 7.23 g을 얻었다.
동일하게 이하의 화합물을 제조하였다.
중간체화합물 (26)
중간체화합물 (36)
중간체화합물 (52)
중간체화합물 (72)
중간체화합물 (74)
중간체화합물 (76)
중간체화합물 (79)
중간체화합물 (82)
중간체화합물 (84)
중간체화합물 (93)
참고예 10 중간체화합물 (20) 의 제조
D-tert-부틸알라닌 (D-tert-Butylalanine) 3.12 g을 벤젠 50 ㎖ 에 용해하고, 벤질알콜 10 ㎖ 및 p-톨루엔술폰산·일수화물 4.82 g을 더하여, 4 시간 30 분간 가열 환류하였다. 반응액을 실온까지 냉각하고, 헥산 50 ㎖를 더하였다. 석출한 결정을 여취하여 아세트산에틸과 물 5% 탄산수소나트륨수용액을 더하여, 심하게 교반한 후, 유기층을 분리하고, 무수황산나트륨으로 건조하였다. 용매를 증류하여, 중간체화합물 (20) 5.56 g을 얻었다.
참고예 11 중간체화합물 (77) 의 제조
아세트산 tert-부틸 (tert-Butyl acetate) 20 ㎖ 에 현탁한 3-히드록시미리스트산 (3-Hydroxymyristic acid) 1.00 g 에, 3불화붕소에틸에테르착물 (Boron trifluoride diethyl etherate) 2.0 ㎖를 실온에서 더하였다. 이 반응 혼합물을 실온에서 3 시간 교반한 후, 물에 쏟아, 아세트산에틸로 추출하였다. 유기층을 무수황산나트륨으로 건조하여, 용매의 증류후, 조생성물을 실리카겔을 이용하는 컬럼크로마토그래피를 이용하여 헥산:아세트산에틸=9:1 로 용출하여, 중간체화합물 (77) 0.71 g을 얻었다.
참고예 12 중간체화합물 (68) 의 제조
L-바린tert-부틸에스테르염산염 2.10 g을 DMF 20 ㎖ 에 현탁하고, 트리에틸아민 3.1 ㎖ 와 1-브로모도데칸 5.7 ㎖를 더하였다. 이 반응액을 실온에서 3 일간 교반한 후, 물을 더하여, 아세트산에틸로 추출하였다. 유기층을 무수황산나트륨으로 건조하고, 용매의 증류후, 조생성물을 실리카겔을 이용하는 컬럼크로마토그래피를 이용하여, 헥산:아세트산에틸=9:1 로 용출하여, 중간체화합물 (68) 2.03 g을 얻었다.
참고예 13 중간체화합물 (97) 의 제조
시안화나트륨 (1.84 g) 의 40% 에탄올 (15 ㎖) 용액에, (R)-(＋)-1,2-에폭시-3-운데실옥시프로판 (2.71 g) 과 40% 에탄올용액을 더하였다. 반응액을 8 시간 가열 환류시킨 후, 에탄올을 증류하였다. 잔류물에 빙냉하 1N 염산수를 더하여 pH4 로 한 후, 클로로포름으로 추출하였다. 합한 클로포로름층을 무수황산나트륨으로 건조후 용매를 증류하였다. 얻어진 조생성물을 쇼트컬럼으로 정제하여 중간체의 카르복실산을 얻었다.
얻어진 카르복실산과 트리에틸아민 (0.89 ㎖) 및 브롬화벤질 (0.76 ㎖) 의 디메틸포름아미드 (15 ㎖) 용액을 실온에서 2 일간 교반하였다. 용매를 증류한 후, 잔류물에 아세트산에틸과 물을 더하였다. 분액한 아세트산에틸층을 물로 2 회 세정후, 무수황산나트륨으로 건조하였다. 아세트산에틸을 증류한 후, 실리카겔컬럼크로마토그래피 (실리카겔 30 g, 헥산 : 아세트산에틸 =200 :10 ∼ 40) 으로 정제하여 목적의 중간체화합물 (97)을 0.86 g 얻었다.
동일하게 이하의 화합물을 정제하였다.
중간체화합물 (100)
실시예 1 화합물 (1) 의 제조
참고예 3에서 얻어진 중간체화합물 (3) 3.78 g을 디클로로메탄 50 ㎖ 에 용해하고, t-부톡시카르보닐-D-로이신 1수화물(tert-Butoxycarbonyl-D-leucine monohydrate) 2.10 g, HOBt 1.25g을 더한 후, WSCI 1.78 g을 빙냉하 더하였다. 이 반응 혼합물을 빙냉하에서 1 시간, 그리고 실온에서 하룻밤 교반하였다. 용매를 증류후, 잔류물을 아세트산에틸에 용해하였다. 용액을 순차적으로 10% 구연산수용액, 물, 5% 탄산수소나트륨수용액 및 물로 세정하고 무수황산나트륨으로 건조하였다. 용매의 증류후, 잔류물을 실리카겔 (80 g)을 이용하는 컬럼크로마토그래피를 이용하여 헥산:아세트산에틸=200:10 ∼ 25 로 용출하여, 화합물 (1) 5.58 g을 얻었다.
동일하게 이하의 화합물을 제조하였다.
화합물 (4)
화합물 (8)
화합물 (12)
화합물 (16)
화합물 (22)
화합물 (28)
화합물 (30)
화합물 (32)
화합물 (34)
화합물 (36)
화합물 (38)
화합물 (40)
화합물 (43)
화합물 (45)
화합물 (48)
화합물 (50)
화합물 (53)
화합물 (55)
화합물 (58)
화합물 (60)
화합물 (62)
화합물 (72)
화합물 (74)
화합물 (76)
화합물 (78)
화합물 (80)
화합물 (82)
화합물 (95)
화합물 (98)
화합물 (100)
화합물 (102)
화합물 (108)
화합물 (110)
화합물 (112)
화합물 (115)
화합물 (117)
화합물 (119)
화합물 (121)
화합물 (123)
화합물 (125)
화합물 (127)
화합물 (133)
화합물 (135)
화합물 (137)
화합물 (139)
화합물 (141)
화합물 (143)
화합물 (145)
화합물 (147)
화합물 (150)
화합물 (152)
화합물 (155)
화합물 (157)
화합물 (160)
화합물 (162)
화합물 (165)
실시예 2 화합물 (2) 의 제조
실시예 1에서 얻어진 화합물 (1) 5.48 g 에 트리플루오로아세트산 (Trifluoroacetic acid) 9 ㎖를 더하였다. 이 반응 혼합물을 실온에서 15 분간 교반하였다. 용매의 제거후, 잔류물을 아세트산에틸에 용해하고, 포화탄산수소나트륨수용액으로 세정하며, 유기층을 무수황산나트륨으로 건조하여, 용매를 증류하여 화합물 (2) 4.64 g을 얻었다.
동일하게 이하의 화합물을 제조하였다.
화합물 (6)
화합물 (10)
화합물 (14)
화합물 (18)
실시예 3 화합물 (3) 의 제조
실시예 2에서 얻어진 화합물 (2) 0.50 g을 메탄올 70 ㎖ 에 용해하고, 5% 파라듐-카본 50 ㎎을 더하여 현탁하여, 얻어진 현탁액을 수소분위기하 (1 기압) 에 실온에서 3 시간 교반하였다. 촉매를 여과하여 제거하고, 여액에서 용매를 증류하여, 화합물 (3) 0.41 g을 얻었다.
동일하게 이하의 화합물을 제조하였다.
화합물 (5)
화합물 (7)
화합물 (9)
화합물 (11)
화합물 (13)
화합물 (15)
화합물 (17)
화합물 (19)
화합물 (23)
화합물 (25)
화합물 (27)
화합물 (29)
화합물 (31)
화합물 (35)
화합물 (37)
화합물 (96)
화합물 (103)
화합물 (107)
화합물 (113)
화합물 (148)
실시예 4 화합물 (33) 의 제조
트리플루오로아세트산 (Trifluoroacetic acid) 1 ㎖ 에 용해한 화합물 (32) 100 ㎎을 실온에서 3 시간 교반하였다. 용매를 제거한 후, 잔류물에 아세트산에틸과 5% 탄산수소나트륨수용액을 더하여, 유기층을 분리하고, 수층을 아세트산에틸로 세정하여 농염산으로 pH4 로 조정하였다. 이것을 클로로포름으로 추출하고, 얻어진 유기층을 무수황산나트륨으로 건조하였다. 용매를 증류하여 얻어진 잔류물에, 에테르와 헥산을 더하여, 석출된 침전물을 여취하고 건조하여 화합물 (33) 70 ㎎을 얻었다.
동일하게 이하의 화합물을 제조하였다.
화합물 (39)
화합물 (41)
화합물 (44)
화합물 (46)
화합물 (49)
화합물 (51)
화합물 (54)
화합물 (56)
화합물 (59)
화합물 (61)
화합물 (63)
화합물 (67)
화합물 (69)
화합물 (71)
화합물 (73)
화합물 (75)
화합물 (77)
화합물 (79)
화합물 (81)
화합물 (83)
화합물 (85)
화합물 (90)
FAB-MS 1200(MK+)
화합물 (94)
FAB-MS 1200(MK+)
화합물 (97)
화합물 (99)
화합물 (104)
화합물 (106)
FAB-MS 1354(MK+)
화합물 (111)
화합물 (114)
화합물 (116)
화합물 (118)
화합물 (120)
화합물 (122)
화합물 (126)
화합물 (131)
화합물 (132)
화합물 (134)
화합물 (140)
화합물 (142)
화합물 (149)
화합물 (151)
화합물 (154)
화합물 (156)
화합물 (158)
화합물 (161)
화합물 (164)
화합물 (167)
실시예 5 화합물 (42) 의 제조
화합물 (40) 1.41 g을 DMF 10 ㎖ 에 용해하고, 디에틸아민 (Diethylamine) 1.0 ㎖를 더하여 실온에서 3 시간 교반하였다. 용매를 증류한 후, 잔류물을 실리카겔을 이용하는 컬럼크로마토그래피를 이용하여, 클로로포름:메탄올=97:3 으로 용출하여, 화합물 (42) 1.17 g을 얻었다.
동일하게 이하의 화합물을 제조하였다.
화합물 (47)
화합물 (52)
화합물 (57)
화합물 (64)
화합물 (65)
화합물 (86)
화합물 (101)
화합물 (109)
화합물 (124)
화합물 (128)
화합물 (136)
화합물 (138)
화합물 (146)
화합물 (159)
실시예 6 화합물 (66) 의 제조
실시예 5 에 따라 얻은 화합물 (65) 1.07 g을 염화메틸렌 4 ㎖ 에 용해하고, 피리딘 0.08 g 및 무수아세트산 0.12 g을 더하여, 실온에서 16 시간 교반하였다. 용매를 증류한 후, 클로로포름-이소프로필에테르에서 결정화하여 화합물 (66) 0.91 g을 얻었다.
실시예 7 화합물 (68) 의 제조
실시예 5 에 따라 얻은 화합물 (65) 0.71 g을 메탄올 5 ㎖ 에 용해하고, 나트륨시아노보로히드리드 (Sodium cyanoborohydride) 0.07 g 및 벤즈알데히드 (Benzaldehyde) 0.11g을 더하여, 실온에서 3 시간 30 분간 교반하였다. 반응액을 클로로포름으로 희석하고, 탄산수소나트륨으로 세정하여, 무수황산나트륨으로 건조하였다. 용매를 증류한 후, 잔류물을 실리카겔 (50 g)을 이용하는 컬럼크로마토그래피를 이용하여, 클로로포름:메탄올 = 50:0 ∼ 1 로 용출하여, 화합물 (68) 0.39 g을 얻었다.
동일하게 이하의 화합물을 제조하였다.
화합물 (130)
실시예 8 화합물 (70) 의 제조
실시예 5 에 따라 얻은 화합물 (65) 0.55g을 피리딘 5 ㎖ 에 용해하고, 빙욕중에서 교반하면서 염화벤조일 (Benzoyl chloride) 0.08 ㎖를 더하여, 빙냉하에서 1 시간 교반하였다. 반응액을 아세트산에틸로 희석하고 물로 세척하여 무수황산나트륨으로 건조하고 용매를 증류하여 화합물 (70) 0.94 g을 얻었다.
동일하게 이하의 화합물을 제조하였다.
화합물 (129)
시험예
다음으로 본 발명의 뎁시 펩티드가 Hep G2 세포에서 아폴리포프로테인 E 생산능에 부여하는 영향을 시험방법과 함께 기술한다.
먼저, Hep G2 세포 1 × 105개/㎖ (둘베코 개질 이글배지 (닛스이세이야꾸샤 제조; 이후 "D-MEM 배지" 라 함) 에 10% 의 소태아혈청을 더한 것에 현탁)을 24 구멍 조직배양용 플레이트에 1 ㎖ 씩 주입하여 37 ℃에서 탄산가스 5% 및 공기 95% 의 혼합 가스분위기하에서 배양하였다. 3 일 후에, 배지를 피페터로 제거하여, 새로 D-MEM 배지 1 ㎖를 더하고, 다시 표 1 에 나타낸 농도의, 본 발명의 뎁시 펩티드의 메탄올용액 10 ㎕를 더하였다. 18 시간 후, 배지를 다시 교환 (D-MEM 배지) 하여, 이 뎁시 펩티드의 메탄올용액 10 ㎕를 더하고, 다시 37 ℃에서 8 시간 배양하여, 그 상등액을 샘플 용액으로 하였다. 배지중에 생성된 아폴리포프로테인 E를 이하에 나타낸 효소 면역 검정법으로 정량하였다.
또한, 효소 면역 검정법으로 사용한 완충액의 조성을 이하에 나타낸다. 또한, PBS 란 인산완충액을, PBS-T 는 Tween 20 을 첨가한 인산완충액을, 블로킹액은 대일본제약사제의 젖단백질 유래의 면역용 블록제 "Block Ace"를 포함하는 인산완충액을 나타낸다.
PBS (pH 7.2)
KH2PO40.2 g
Na2HPO4·12H2O 2.9 g
NaCl 8.0 g
KCl 0.2 g
증류수 적량
전량 1000 ㎖
PBS-T (pH7.2)
KH2PO40.2 g
Na2HPO4·12H2O 2.9 g
NaCl 8.0 g
KCl 0.2 g
Tween 20 0.5 g
증류수 적량
전량 1000 ㎖
블로킹액 (pH 7.2)
Block Ace 250 ㎖
KH2PO40.2 g
Na2HPO4·12H2O 2.9 g
NaCl 8.0 g
KCl 0.2 g
증류수 적량
전량 1000 ㎖
1) 아폴리포프로테인 E의 측정
마우스 항인간 아폴리포프로테인 E 모노크로날항체 (프랑스 BYOSIS, S.A사제)를 0.05M 탄산수소나트륨수용액 (pH9.5) 에 5 ㎍/㎖ 의 농도로 용해하였다. 이 50 ㎕를 눙크 이뮤노플레이트에 나누어 쏟아, 4 ℃에서 16 시간 정치하였다. PBS 300 ㎕ 로 3 회 세정후, 블로킹액 300 ㎕을 더하여, 37 ℃에서 2 시간 정치하여, 그 후 4 ℃에서 16 시간 정치하였다.
다시 PBS 300 ㎕ 로 3 회 세정하여, 샘플용액 50 ㎕ (Hep G2 세포의 배지)를 더하여, 실온에서 2 시간 정치하였다. PBS-T 300 ㎕ 로 3 회 세정후, 양의 항아폴리포프로테인 E 폴리크로날항체 (미국 케미콘사제) 의 3000 배 희석액 (10% Block Ace 수용액) 50 ㎕를 더하여, 실온에서 2 시간 정치하였다. PBS-T 300 ㎕ 로 3 회 세정하고, 퍼옥시다제 표식의 항 양IgG 폴리크로날항체 (영국 바인딩사이트사제) 의 5000 배 희석액 (10% Block Ace 수용액)을 더하여, 실온에서 2 시간 정치하였다. PBS-T 300 ㎕ 로 5 회 세정후, 발색액 (조성 : 0.1 M 구연산칼륨 pH4.5 1 ㎖, 30% 과산화수소수 0.4 ㎕, 오르토페닐렌디아민 1 ㎎) 100 ㎕을 더하여, 그대로 2 분간 방치하였다. 2N 황산 100 ㎕을 더하여 반응을 중단하고, 650 ㎚을 대조로 한 때의 490 ㎚ 의 흡광도를 측정하였다. 시판의 아폴리포프로테인 E (미국 케미콘사제)를 표본품으로 한 경우의 검량선에서 본 발명의 뎁시 펩티드의 아폴리포프로테인 E의 절대량을 구하였다.
본 시험예에서, 본 발명의 뎁시 펩티드의 메탄올용액 대신에 단순히 메탄올을 더한 것 이외에는 본 시험예와 동일하게 실시하여, 아폴리포프로테인 E량을 측정하고, 이를 콘트롤하였다. 본 발명의 뎁시 펩티드의 상대 아폴리포프로테인 E량은 콘트롤을 100 으로 한 경우의 상대값 (%) 으로 나타냈다.
표 1 에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 뎁시 펩티드는, 1 내지 10 μM 의 농도로 아폴리포프로테인 E 의 생산능을 강력하게 촉진하는 것을 볼 수 있었다.
화합물 농도(μM) 상대아폴리포프로테인 E량(%)
화합물 5 10 168
화합물 7 10 168
화합물 9 5 306
화합물 11 5 364
화합물 13 5 458
화합물 15 5 390
화합물 33 10 288
화합물 39 10 665
화합물 41 1 192
화합물 44 1 194
화합물 46 1 130
화합물 49 1 277
화합물 56 1 185
화합물 59 1 135
화합물 61 1 144
화합물 63 1 370
화합물 64 1 155
화합물 67 1 132
화합물 69 1 173
화합물 71 1 196
화합물 75 1 221
화합물 77 1 216
화합물 농도(μM) 상대아폴리포프로테인 E량(%)
화합물 83 1 204
화합물 85 1 201
화합물 86 1 153
화합물 90 1 244
화합물 94 1 130
화합물 99 1 172
화합물 111 1 207
화합물 114 1 330
화합물 116 1 228
화합물 118 1 239
화합물 122 1 254
화합물 126 1 219
화합물 131 1 153
화합물 134 1 197
화합물 140 1 199
화합물 142 1 178
화합물 149 1 221
화합물 151 1 241
화합물 154 1 273
화합물 156 1 268
화합물 161 1 177
화합물 164 1 210
화합물 167 1 132
대조 0 100
제제예
다음으로 본 발명의 뎁시 펩티드를 유효 성분으로 하는 제제의 제제예를 나타낸다.
제제예 1 정제 (1 정)
화합물 (39) 20 ㎎
규산마그네슘 20 ㎎
젖당 98.5 ㎎
히드록시프로필셀룰로스 7.5 ㎎
스테아르산마그네슘 1 ㎎
식물경화유 3 ㎎
계 150 ㎎
화합물 (39), 규산마그네슘 및 젖당을 혼합하고, 이를 히드록시프로필셀룰로스를 용해한 알콜액으로 혼합하고, 이어서 적당한 입도로 조립하여, 건조, 정립후 다시 스테아르산마그네슘 및 식물경화유를 첨가 혼합하여 균일한 과립으로 한다. 이어서 로타리식 타정기로 직경 7.0 ㎜, 중량 150 ㎎ 및 경도 6 ㎏ 의 정제를 조제하였다.
제제예 2 과립제
화합물 (39) 10 ㎎
산화마그네슘 40 ㎎
인산수소칼슘 38 ㎎
젖당 10 ㎎
히드록시프로필셀룰로스 20 ㎎
상기 처방예중 히드록시프로필셀룰로스를 제외한 각 원료를 균일하게 혼합하여, 이것에 히드록시프로필셀룰로스를 용해한 알콜용액을 더하여 혼합한 후 압출조립기로 조립하고 건조하여 과립을 얻었다. 이 과립을 정립하여 12 메시의 체를 통과하여 48 메시의 체 위에 잔류하는 것을 과립제로 하였다.
제제예 3 시럽제
화합물 (39) 1.000 g
백당 30.000 g
D-솔비톨 70 w/v% 25.000 g
파라옥시벤조산에틸 0.030 g
파라옥시벤조산프로필 0.015 g
향미료 0.200 g
글리세린 0.150 g
96% 에탄올 0.500 g
정제수 적량
전량 100 ㎖
백당, D-솔비톨, 파라옥시벤조산에틸, 파라옥시벤조산프로필 및 화합물 (39)을 정제수 (온수) 60 g 에 용해한다. 냉각후 향미료를 용해한 글리세린 및 에탄올의 용액을 더한다. 다음에 이 혼합물에 정제수를 더하여 100 ㎖ 로 한다.
제제예 4 주사액
화합물 (13) 의 나트륨염 10.0 ㎎
염화나트륨 81.0 ㎎
탄산수소나트륨 8.40 ㎎
주사용 증류수 적량
전량 10.0 ㎖
탄산수소나트륨, 염화나트륨 및 화합물 (13) 의 나트륨염을 증류수에 더하여 용해하고, 전량을 10.0 ㎖ 로 한다.
제제예 5 좌제
화합물 (39) 2 g
마크로골 4000 20 g
글리세린 78 g
전량 100 g
화합물 (39) 에 글리세린을 더하여 용해한다. 여기에, 마크로골 4000을 더하여 가온하여 용해후, 좌제형에 주입하여 냉각 고화하여 1 개당 1.5 g 의 좌제를 제조한다.
본 발명의 뎁시 펩티드는, 아폴리포프로테인 E 생산촉진작용을 갖는다. 아폴리포프로테인 E는 신경손상의 수복작용을 가지므로, 본 발명의 뎁시 펩티드는, 신경 손상 치료약, 특히 항치매약으로 유용하다. 또, 아폴리포프로테인 E는 콜레스테롤 및 트리글리세리드의 혈중농도를 저하시키는 작용을 가지므로 본 발명의 뎁시 펩티드는 고지혈증의 치료약으로 유용하다.

Claims (14)

  1. 하기 화학식 1로 나타내어지는 뎁시 펩티드 또는 그의 약리학적으로 허용되는 염 :
    [화학식 1]
    [식중, R1은 탄소수 5 ∼ 20 의 직쇄상 또는 분지쇄상의 알킬기 또는 탄소수 5 ∼ 15 의 직쇄상 또는 분지쇄상의 알콕시메틸기를 나타내고, R2는 -A-B, -A-B-W, -A-B-W-D 또는 -A-B-W-D-E를 나타내며, R3이 수산기, 저급알콕시기, 벤질옥시기, -Z, -Z-G 또는 -Z-G-J를 나타내고, 상기 A, B, D, E, G 및 J 는, 각각 독립하여 알라닌, 바린, 로이신, 이소로이신, 세린, 트레오닌, 리신, 히드록시리신, 알기닌, 시스테인, 메티오닌, 페닐알라닌, 티로신, 트립토판, 히스티딘, 프롤린, 4-히드록시프롤린, 피페리딘-4-카르복실산, 호모프롤린, 옥타히드로인돌-2-카르복실산, 노르발린, 노르로이신, α-t-부틸글리신, 시클로헥실글리신, 아제티딘-2-카르복실산, 3-(3-피리딜)알라닌, (3-N-메틸)피페리딜알라닌, 3-(2-나프틸)알라닌, β-시클로헥실알라닌, β-t-부틸알라닌, 9-안트라세닐알라닌, α-메틸알라닌, 2-아미노부탄산, 아스파르트산, 아스파라긴, 글루탐산 및 글루타민에서 선택되는 아미노산잔기 또는 이들 아미노산잔기의 N-C1∼ C4알킬 유도체를 나타내고, 상기 W 및 Z 는 각각 독립하여 아스파르트산, 아스파라긴, 글루탐산, 글루타민, 알라닌, 세린 또는 리신으로 이루어지는 아미노산 잔기를 나타내며, 상기 A, B, D, E, G, J, W 및 Z 에서의 아미노산잔기의 유리 아미노기, 유리 카르복실기 또는 유리 ω-카르바미드기 및/또는 N-말단아미노기는 이들의 보호기로서 펩티드화학에서 통상 이용되는 보호기로 각각 보호되어 있어도 되며, 그리고 상기 A, B, D, E, G, J, W 및 Z 에서의 아미노산잔기가 리신, 히드록시리신, 글루탐산 또는 아스파르트산인 경우에는, 인접하는 아미노산과 펩티드 결합하는 아미노기 또는 카르복실기는 α-위치이어도 ω-위치이어도 된다].
  2. 제 1 항에 있어서, 상기 화학식 1에서, A, B, D, E, G 및 J 가, 각각 독립하여, 알라닌, 바린, 로이신, 이소로이신, 페닐알라닌, 티로신, 프롤린, β-t-부틸알라닌 또는 아스파르트산으로, 그리고 W 및 Z 는 각각 독립하여 아스파르트산, 아스파라긴, 글루탐산, 글루타민, 알라닌, 세린 또는 리신인 뎁시 펩티드 또는 그의 약리학적으로 허용되는 염.
  3. 제 1 항에 있어서, 상기 화학식 1에서 A 가 이소로이신, 알라닌 또는 아스파르트산, B 가 로이신, 페닐알라닌, β-t-부틸알라닌 또는 아스파르트산, D 가 바린, 페닐알라닌, 알라닌 또는 아스파르트산, E 가 로이신 또는 알라닌, G 가 로이신 또는 알라닌, J 가 로이신 또는 알라닌, W 가 아스파르트산, 글루탐산, 아스파라긴, 글루타민 또는 세린, 그리고 Z 가 아스파르트산, 글루탐산, 아스파라긴, 글루타민 또는 리신인 뎁시 펩티드 또는 그의 약리학적으로 허용되는 염.
  4. 제 1 항에 있어서, 상기 화학식 1에서 A 가 이소로이신 또는 알라닌, B 가 로이신 또는 알라닌, D 가 바린 또는 알라닌, E 가 로이신, 알라닌 또는 글루탐산, G 가 로이신 또는 알라닌, J 가 로이신 또는 알라닌, W 가 아스파르트산 또는 글루탐산, 그리고 Z 가 글루타민, 아스파라긴, 글루탐산, 아스파르트산 또는 리신인 뎁시 펩티드 또는 그의 약리학적으로 허용되는 염.
  5. 제 1 항에 있어서, 상기 화학식 1에서 A 가 이소로이신, B 가 로이신, D 가 바린, E 가 로이신, G 가 로이신, J 가 로이신, W 가 아스파르트산 또는 글루탐산, 그리고 Z 는 글루타민, 아스파라긴, 글루탐산, 아스파르트산 또는 리신인 뎁시 펩티드 또는 그의 약리학적으로 허용되는 염.
  6. 제 1 항 내지 제 5 항의 뎁시 펩티드 또는 그의 약리학적으로 허용되는 염을 유효 성분으로 하는 의약조성물.
  7. 제 1 항 내지 제 5 항의 뎁시 펩티드 또는 그의 약리학적으로 허용되는 염을 유효 성분으로 하는 아폴리포프로테인 E 생산 촉진약.
  8. 제 1 항 내지 제 5 항의 뎁시 펩티드 또는 그의 약리학적으로 허용되는 염을 유효 성분으로 하는 신경 손상 치료약.
  9. 제 1 항 내지 제 5 항의 뎁시 펩티드 또는 그의 약리학적으로 허용되는 염을 유효 성분으로 하는 치매증 치료약.
  10. 제 1 항 내지 제 5 항의 뎁시 펩티드 또는 그의 약리학적으로 허용되는 염을 유효 성분으로 하는 고지혈증 치료약.
  11. 제 1 항 내지 제 5 항의 뎁시 펩티드 또는 그의 약리학적으로 허용되는 염을 투여하는 것으로 이루어지는 아폴리포프로테인 E 생산촉진방법.
  12. 제 1 항 내지 제 5 항의 뎁시 펩티드 또는 그의 약리학적으로 허용되는 염을 투여하는 것으로 이루어지는 신경손상의 치료 방법.
  13. 제 1 항 내지 제 5 항의 뎁시 펩티드 또는 그의 약리학적으로 허용되는 염을 투여하는 것으로 이루어지는 치매증의 치료 방법.
  14. 제 1 항 내지 제 5 항의 뎁시 펩티드 또는 그의 약리학적으로 허용되는 염을 투여하는 것으로 이루어지는 고지혈증의 치료 방법.
KR1019980710303A 1996-06-25 1997-06-25 뎁시 펩티드 및 이를 유효 성분으로 하는 의약 Withdrawn KR20000016700A (ko)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP96-183960 1996-06-25
JP18396096 1996-06-25

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20000016700A true KR20000016700A (ko) 2000-03-25

Family

ID=16144837

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1019980710303A Withdrawn KR20000016700A (ko) 1996-06-25 1997-06-25 뎁시 펩티드 및 이를 유효 성분으로 하는 의약

Country Status (6)

Country Link
US (1) US6255286B1 (ko)
EP (1) EP0960885A4 (ko)
JP (1) JP3947229B2 (ko)
KR (1) KR20000016700A (ko)
CA (1) CA2259159A1 (ko)
WO (1) WO1997049722A1 (ko)

Families Citing this family (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6001815A (en) * 1997-12-25 1999-12-14 Nisshin Flour Milling Co., Ltd. Depsipeptides containing N-substituted glycine residue
US6252041B1 (en) * 1998-01-27 2001-06-26 Nisshin Flour Milling Co., Ltd. Depsipeptides containing non-natural amino acids
US6288038B1 (en) 1998-08-04 2001-09-11 Nisshin Seifun Group Inc. Depsipeptide derivatives bearing piperazinone rings
US7781396B2 (en) * 2002-01-31 2010-08-24 Tel Aviv University Future Technology Development L.P. Peptides directed for diagnosis and treatment of amyloid-associated disease
US20040052928A1 (en) * 2002-09-06 2004-03-18 Ehud Gazit Peptides and methods using same for diagnosing and treating amyloid-associated diseases
US7491699B2 (en) 2002-12-09 2009-02-17 Ramot At Tel Aviv University Ltd. Peptide nanostructures and methods of generating and using the same
DE602004020179D1 (de) 2003-01-07 2009-05-07 Univ Ramot Peptidenanostrukturen die fremdmaterial enthalten, und verfahren zur herstellung derselben
KR101215821B1 (ko) 2003-06-30 2012-12-28 텔 아비브 유니버시티 퓨쳐 테크놀로지 디벨롭먼트 엘.피. 아밀로이드 관련 질환을 진단 및 처치하기 위한 펩타이드, 그것에 대한 항체, 및 그 사용방법
WO2005027901A1 (en) 2003-09-25 2005-03-31 Tel Aviv University Future Technology Development L.P. Compositions and methods using same for treating amyloid-associated diseases
US7625707B2 (en) * 2003-10-02 2009-12-01 Ramot At Tel Aviv University Ltd. Antibacterial agents and methods of identifying and utilizing same
WO2006006172A2 (en) * 2004-07-15 2006-01-19 Ramot At Tel Aviv University Ltd. Use of anti-amyloid agents for treating and typing pathogen infections
WO2006013552A2 (en) 2004-08-02 2006-02-09 Ramot At Tel Aviv University Ltd. Articles of peptide nanostructures and method of forming the same
WO2006018850A2 (en) 2004-08-19 2006-02-23 Tel Aviv University Future Technology Development L.P. Compositions for treating amyloid associated diseases
WO2006027780A2 (en) 2004-09-08 2006-03-16 Ramot At Tel Aviv University Ltd. Peptide nanostructures containing end-capping modified peptides and methods of generating and using the same
EP1973928A2 (en) * 2005-10-11 2008-10-01 Ramot at Tel-Aviv University Ltd. Self-assembled fmoc-ff hydrogels
US7879212B2 (en) * 2005-11-03 2011-02-01 Ramot At Tel-Aviv University Ltd. Peptide nanostructure-coated electrodes
AU2011349022B2 (en) * 2010-12-21 2017-04-13 The Medicines Company (Leipzig) Gmbh Trypsin-like serine protease inhibitors, their preparation and use as selective inhibitors of the clotting factors IIa and Xa

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0136879A3 (en) * 1983-09-30 1987-01-07 Yamanouchi Pharmaceutical Co., Ltd. Fatty acid derivatives and processes of producing them
JP3718226B2 (ja) 1994-05-26 2005-11-24 株式会社日清製粉グループ本社 環状デプシペプチド

Also Published As

Publication number Publication date
US6255286B1 (en) 2001-07-03
CA2259159A1 (en) 1997-12-31
EP0960885A1 (en) 1999-12-01
EP0960885A4 (en) 2002-08-28
WO1997049722A1 (en) 1997-12-31
JP3947229B2 (ja) 2007-07-18

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR20000016700A (ko) 뎁시 펩티드 및 이를 유효 성분으로 하는 의약
US5710129A (en) Inhibitors of SH2-mediated processes
US5550131A (en) 2-piperazinone compounds and their use
HU221629B1 (hu) Béta-amiloid fehérje képződést gátló peptidek, eljárás előállításukra és ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények
JP2000501382A (ja) 新規アミノ酸誘導体、それらの調製方法及びこれらの化合物を含む医薬組成物
JPH05504336A (ja) ペプチド誘導体，その製法，これを含む医薬品及び緑内障の治療法
JPH04208299A (ja) プロリルエンドペプチターゼ阻害ペプチド
JPH02212434A (ja) レトロウイルスプロテアーゼインヒビターとしてのペプチドアイソスターの使用
JPWO1997049722A1 (ja) デプシペプチドおよびこれを有効成分とする医薬
EP1309613B1 (en) Pharmaceutical composition comprising an analgesic peptide
DE69614392T2 (de) Thrombin inhibitor
DE69810513T2 (de) Mimetika von beta-faltblatt und verfahren zur verwendung davon
JP3032297B2 (ja) 抗血栓性アザシクロアルキルアルカノイルペプチド及びプソイドペプチド
JPH0331298A (ja) プロリルエンドペプチターゼ阻害ペプチド
DE60010711T2 (de) Amido-spiropiperidine promovieren die freisetzung von wachstumshormonen
US6316406B1 (en) Depsipeptides containing N-substituted glycine residue
JPS62169730A (ja) トリプトフアンを含有するオリゴペプチドを用いる神経障害の治療方法
WO2021200259A1 (ja) Ｖｉｐｒ２アンタゴニストペプチド
US6211145B1 (en) Bicyclic depsipeptides
RU2380371C2 (ru) Низкомолекулярные производные пептидов как ингибиторы взаимодействия ламинина/нидогена
US4587250A (en) Thiazaspirane derivatives, process for their preparation, and medicaments
KR101264934B1 (ko) 아미도메틸-치환1-(카르복시알킬)-시클로펜틸카보닐아미노-벤자제핀-ｎ-아세트산 유도체, 그것의 제조를 위한 공정 및 중간체 생성물및 이들 화합물을 포함하는 의약품
WO2024224089A1 (en) Desmuramylpeptide monoesters as nod2 agonists and use thereof
JPH0892282A (ja) シクロペプチド
KR20040081182A (ko) 엘라스타제-저해 활성을 가진 이종고리 화합물 및 그 중간체

Legal Events

Date Code Title Description
PA0105 International application

Patent event date: 19981215

Patent event code: PA01051R01D

Comment text: International Patent Application

PG1501 Laying open of application
PC1203 Withdrawal of no request for examination
WITN Application deemed withdrawn, e.g. because no request for examination was filed or no examination fee was paid