KR102810105B1

KR102810105B1 - 치료 화합물

Info

Publication number: KR102810105B1
Application number: KR1020187024851A
Authority: KR
Inventors: 배리 마틴
Original assignee: 인디비어 유케이 리미티드
Priority date: 2016-01-29
Filing date: 2017-01-30
Publication date: 2025-05-21
Anticipated expiration: 2037-01-30
Also published as: US20240076282A1; ZA201805046B; SG11201806424TA; IL260720B; NZ744982A; US20200255404A1; CN108779098A; US11753398B2; NZ783506A; GB201601703D0; DK3408265T3; US20190040041A1; IL260720A; US10696654B2; KR20250073547A; AU2017213177A1; EP3408265A1; CA3012408A1; CA3012408C; CN108779098B

Abstract

본 발명은 오렉신-1 수용체의 길항제인 화합물에 관한 것이다. 이 화합물은 본원에 정의된 하기 구조 화학식 I:
[화학식 I]

Description

치료 화합물

본 발명은 치료 화합물에 관한 것이다. 더 구체적으로, 본 발명은 오렉신-1 수용체의 억제제인 화합물에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 이러한 화합물의 제조 방법, 이를 포함하는 제약 조성물, 및 오렉신-1 수용체 활성과 연관된 질환 또는 장애의 치료에 있어서의 이의 용도에 관한 것이다.

신경펩티드 (neuropeptide)인 오렉신-A (OxA) 및 오렉신-B (OxB) (하이포크레틴 (Hypocretin)-1 및 하이포크레틴-2로도 공지됨)는 배타적으로 시상하부에서 발현되는 이의 프리프로-펩티드 (prepro-peptide)로부터 유래된다 (1). 상기 프리프로-펩티드 (프리프로-오렉신)의 절단은 33개 아미노산 폴리펩티드인 OxA를 생성하며, 이는 광범위하게 번역 후 변형된다 (C-말단 아미드화, 파이로글루타밀 잔기에 의한 N-말단 환화). OxA는 나선형 이차 구조를 형성할 가능성이 있는 28개 아미노산의 C-말단 아미드화 선형 폴리펩티드인 OxB와 46%의 서열 동일성을 공유한다 (3).

완전 기능성 성숙 펩티드 신경 전달 물질은 오렉신 신경 펩티드와 같이 종 전체에 걸쳐 고 서열 상동성을 공유하는 오렉신-1 (OX₁) 및 오렉신-2 (OX₂) 7-막관통 G-단백질 커플링 수용체 (HCRTR1 및 HCRTR2로도 공지됨)에서 작용제로서 작용한다 (2, 6). OX₁은, 비록 차등적인 친화도로 결합하기는 하지만, OxA 및 OxB 둘 모두에 결합한다 (OxA는 OxB보다 10배 초과의 더 높은 친화도를 갖는다). 이와는 대조적으로, OX₁과 64%의 서열 동일성을 공유하는 OX₂는 상기 둘 모두의 폴리펩티드에 거의 동등한 친화도로 결합한다 (2). 상기 둘 모두의 수용체가 작용하는 일차적인 G-단백질 매개 기작은 이노시톨-1,4,5-트리포스페이트 (IP₃)의 유리를 촉매하는 포스포리파아제 C의 G_q _/11 활성화인데, 이는 다시 IP₃ 수용체에 작용하여 세포내 저장소 (intracellular store)로부터 칼슘을 방출시킨다. OX₂는 또한 G_s 및 G_i의 활성화를 통하여 cAMP 수준을 조절하는 것으로 보고되었으며, OX₁은 G_i _/o를 통한 시그널링에 의해 cAMP 수준을 또한 조절하는 것이 가능하다 (5, 8). 종간의 상기 펩티드 및 수용체의 고도의 서열 유사성은 유사한 시험관 내에서의 약리학적 특성이 된다 (7).

오렉신이 주로 발현되는 시상하부는 광범위한 생리 활동 및 행동 활동을 조절한다. 이러한 뇌 구조에서의 오렉신의 발현은 뇌궁주위 (50%), 외측 (lateral) 및 배내측 (dorsomedial) 영역에 특이적으로 있는 매우 한정된 수의 뉴런에만 면역조직화학적으로 맵핑되었다 (mapped) (4). 이러한 뉴런의 돌출 필드 (projection field)는 피질, 시상, 시상하부, 뇌간 및 척수를 포함하는 다수의 뇌 영역에서 확인되었지만, 소뇌에서는 그렇지 않았다 (9). 뇌의 이러한 광범위한 커버리지 (coverage)는 오렉신 리간드/수용체 시스템이 직접적으로 또는 간접적으로 다수의 뇌기능의 조절에 연루되어 있음을 시사한다. 특히, 마우스에서의 넉아웃 (knockout) 실험은 오렉신 시스템이 행동 각성 (behavioural arousal), 수면 및 각성 (wakefulness)의 핵심 조절자임을 시사한다. 실제로, 오렉신 넉아웃 마우스에서의 관찰된 표현형은 인간에서의 발작성 수면의 것과 매우 유사하였다 (10, 11). 인간에서의 발작성 수면은 과도한 주간 졸림증, 분절 수면 및 탈력 발작을 특징으로 하는 만성적이고 장애 유발성인 장애이다. 개에서의 연구에 의하면 상기 장애의 원인이 OX₂ 유전자의 파괴 또는 오렉신 펩티드 발현의 손실과 관련되었다 (12). OX₂ 기능의 파괴 및/또는 성숙 OxB 리간드의 부재가 특히 발작성 수면과 연관된다는 추가의 보강 증거가 넉아웃 마우스에서의 연구에서 나왔다 (17). 발작성 수면 환자의 뇌척수액 중 OxA의 수준을 정상 개체와 비교하는 후속적인 임상 연구에 의하면, 오렉신 시스템의 붕괴가 인간에서의 발작성 수면의 발생과 인과 관계를 나타낸다는 것이 확인되었다 (13). 이례적 조기 발병형 인간 발작성 수면의 추가의 연구에 의하면, 오렉신 유전자의 돌연변이가 확인되었으며, 이는 인간에서의 발작성 수면과 오렉신 시스템 사이의 관련성을 추가로 강화시켰다 (14). 더 최근에는, CNS 장애에서의 오렉신의 약리학적 관련성을 입증하는 임상 데이터가 나타났다. 가장 특히는, 소분자형 이중 OX₁ 및 OX₂ 길항제 (dual OX1 and OX2 antagonist; DORA), 예컨대 벨솜라 (BELSOMRA)^® (수보렉산트 (Suvorexant))를 이용한 임상 시험에서 수면 장애의 치료에서의 그러한 에이전트 (agent)들의 잠재적인 유용성이 명백하게 입증되었다 (15, 16, 18). 이러한 데이터는 전임상 증거와 함께, 수면 조절에서의 OX₂의 상기의 명백한 연루를 나타냈다.

오렉신에 기인하는 신경생물학적 효과의 다양성과 커플링된 OX₁ 및 OX₂의 차등적인 뇌 발현은 OX₁ 또는 OX₂를 조절하는 약물이 상이한 생물학적 효과들을 야기할 것임을 강하게 시사한다. 이것 때문에, OX₁/OxA 시스템을 특정적으로 섭식 및 행동 장애와 관련시키는 최근의 보고서가 중요하다.

프리프로-오렉신 mRNA 수준이, 식품 섭취 및 에너지 균형/체중의 조절에 고전적으로 연루된 뇌 영역인 외측 및 후측 시상하부에서 주로 발견된다면, 오렉신 시스템과 섭식 행동 사이의 관련성은 예기치 못한 것이 아니다 (19). 그러한 기능에서의 OX₁/OxA 시스템의 역할은 일련의 전임상 연구에 의해 강화되었다. 이와 같이, OxA의 뇌실내 (intracerebroventricular; i.c.v.) 투여 (20)는 섭식을 유도하는 것으로 밝혀졌으며, 특이적 항-오렉신 항체는 식품 섭취를 용량-의존적으로 억제한다 (21). 특히, 후자의 연구는 오렉신 수용체 길항제가 오렉신 자극된 섭식에 대하여 유익한 영향을 줄 것임을 나타낸다. 이러한 가설은 독립적인 생체 내 연구에 의해 뒷받침되는데, 이는 OX₁을 식품 섭취 및 에너지 균형의 조절에서의 오렉신 시스템의 우성 수용체로서 명백하게 확인해 준다. 이와 같이, 선택성 OX₁ 및 OX₂ 수용체 길항체를 이용하여 행해진 실험은 OX₁ 선택성 화합물이 스트레스에의 동시 노출의 상황에서 식품 섭취 및 에너지 균형을 변경시킴을 보여주었다 (22, 23). 섭식 행동 및 에너지 균형의 조절에 대한 OX₁의 우성 효과는 OX₁ 발현이 단식에 응답하여 선택적으로 상향조절되고 반면에 OX₂의 발현은 영향을 받지 않음을 보여주는 관찰에 의해 추가로 뒷받침된다 (24). 마지막으로, OX₁ 특이 항체를 이용한 연구는, 선택성 OX₁ 길항제가 식품 섭취를 억제하며 따라서 섭식 관련된 장애, 예컨대 폭식 또는 비만의 치료에 있어서 잠재적인 치료적 유용성을 가짐을 강하게 시사한다.

상승된 OX₁ 수준은 또한 조현병, 불안 및 기분 장애, 공황 발작, 보상 추구 행동 (reward seeking behaviour) 및 중독을 포함하는 정신 질환과 연관되었다 (25, 26, 27). 선택성 OX₁ 길항제 (SB334867, SB408124)를 이용한 연구는 공황의 임상적 관련 동물 모델에서의 유익한 효과를 명백하게 입증하였으며, 따라서 이는 OX₁ 길항제가 공황 장애의 치료에 있어서의 신규한 치료적 접근법을 제공할 수 있음을 시사하는 것이다 (27).

보상 추구 행동에의 오렉신 시스템의 연루의 간접적인 증거는 오렉신성 뉴런 (orexinergic neuron)이 보상 연관된 뇌 영역, 예컨대 측좌핵 및 복측 피개 영역으로 돌출됨을 보여주는 연구에서 나온다 (28). 직접적인 실험적 증거는 오렉신의 뇌실내 (icv) 주입을 포함하는 연구에서 나오는데, 이는 코카인 탐색의 용량-의존적 회귀 (reinstatement)를 초래하였다. 부트렐 (Boutrel) 등에 의한 연구는 또한 스트레스 경로를 중독 및 보상에 대한 오렉신의 영향과 관련시킨다 (29). 특히, 스트레스는 금욕적 중독자에서의 재발의 두드러진 자극으로 간주된다 (31). 스트레스, 중독 및 오렉신 사이의 관련성은 사지 충격 (foot-shock) 모델에서의 약리학적 연구에 의해 추가로 강화되었다. 이것은 특히 스트레스와 연관된 후측 및 배내측 시상하부의 특정 영역에서의 오렉신 뉴런의 활성화를 보여주었지만, 보상과 강한 관련성을 갖는 외측 시상하부에서는 그렇지 않았다 (32). 게다가, 중독 행동의 스트레스-유도된 회귀의 매개자로서의 오렉신이 알코올 추구에 대하여 또한 예시되었다 (30). 중요하게는, 동물 모델에서의 알코올 및 코카인 탐색의 스트레스-유도된 회귀의 효과는 선택성 OX₁ 길항제 SB334867에 의해 약화될 수 있으며, 이는 이러한 병태에서의 OX₁ 선택성 길항제의 치료적 용도를 뒷받침한다 (29, 30).

마지막으로, 오렉신/OX₁ 경로는 니코틴 자가-투여 (33, 34) 및 니코틴 추구의 회귀 (35, 36)에 연루되었다. 그러한 데이터는 OX₁ 길항제가 금연 요법으로서 그 유용성을 찾을 수 있음을 시사한다.

종합해 보면, 오렉신 시스템, 그리고 특히 OX₁ 경로는 보상 추구 행동, 중독 및 관련 장애의 치료의 표적으로 간주될 수 있다.

국제 공개 제2003/051872호에는 오렉신-1 (OX₁) 및 오렉신-2 (OX₂) 수용체의 길항제로 작용하는 특정한 헤테로시클릭-치환 에틸렌 디아민 유도체가 개시되어 있다.

그러나, 오렉신-1 (OX₁) 활성의 효력 있는 억제제이고 오렉신-2 (OX₂) 수용체에 비하여 오렉신-1 (OX₁) 수용체를 억제하는 데 있어서 선택성을 나타내는 화합물이 필요하다. 이러한 프로파일은 수면-각성 주기에 대한 활성의 부재 하에서 중독 장애의 치료에 있어서 효과적인 치료적 유익성을 제공한다. 오렉신-1 (OX₁) 수용체에서 증가된 체류 시간을 나타내는 화합물, 그리고 특히 오렉신-2 (OX₂) 수용체에서의 체류 시간에 비하여 증가된 오렉신-1 (OX₁) 수용체에서의 체류 시간을 갖는 화합물이 또한 필요하다. 분자가 그의 세포 표적에 있는 시간이 그의 임상 수행능력의 중요한 지표를 제공할 수 있고 (37) 수용체로부터의 느린 해리를 나타내는 화합물을 확인하는 것이 G 단백질 커플링된 수용체의 길항제를 개발할 때 잠재적으로 유리하다 (38)는 것을 시사하는 증거가 증가하고 있다. 더욱이, 수용체에서의 이러한 증가된 체류 시간은 임상 현장에서 연장된 작용 지속 기간을 제공할 수 있다. 따라서 오렉신-2 수용체의 장기적인 차단의 부재 하에서의 장기적인 오렉신-1 길항제 수용체 차단은 중독 장애의 치료를 위한 새롭고도 잠재적으로 강력한 접근법을 나타낸다.

게다가, 화합물이 약물 후보로서 추가 개발에 적합해지게 하는 하나 이상의 유리한 제약적 특성 (예를 들어, 유리한 용해성, 높은 대사 안정성, 낮은 약물-약물 상호작용 성향, 낮은 정확하지 않은 (off-target) 약리학적 활성 성향, 충분한 약동학적 프로파일, 양호한 경구적 생체 이용성, 높은 치료 지수, 유전독성의 결여)을 갖는 화합물이 필요하다. 더 구체적으로, CNS 장애, 예컨대 본원에 기술된 장애의 치료를 위하여, 경구 투여 후 뇌에서 유의한 오렉신-1 수용체 점유를 성취하는 화합물 및 유리한 혈액-뇌 장벽 침투성을 갖는 화합물이 필요하다. 뇌에서 이러한 수준의 유의한 표적 결합 (target engagement)을 보여주는 화합물은 오렉신-1 수용체 매개된 CNS 장애에서 유의한 효능을 나타내게 될 것이다.

일 측면에서, 본 발명은 본원에 정의된 화합물, 또는 이의 제약상 허용가능한 염 또는 용매화물을 제공한다.

또 다른 측면에서, 본 발명은 본원에 정의된 본 발명의 화합물, 또는 이의 제약상 허용가능한 염 또는 용매화물, 및 하나 이상의 제약상 허용가능한 부형제를 포함하는 제약 조성물을 제공한다.

또 다른 측면에서, 본 발명은 치료법에서 사용하기 위한, 본원에 정의된 본 발명의 화합물, 또는 이의 제약상 허용가능한 염 또는 용매화물, 또는 본원에 정의된 제약 조성물에 관한 것이다.

또 다른 측면에서, 본 발명은 오렉신-1 (OX₁) 활성이 연루된 질환 또는 병태의 치료에서 사용하기 위한, 본원에 정의된 본 발명의 화합물, 또는 이의 제약상 허용가능한 염 또는 용매화물, 또는 본원에 정의된 제약 조성물에 관한 것이다.

또 다른 측면에서, 본 발명은 오렉신-1 (OX₁) 활성이 연루된 질환 또는 병태의 치료에서 사용하기 위한 의약의 제조에 있어서의 본원에 정의된 본 발명의 화합물, 또는 이의 제약상 허용가능한 염 또는 용매화물의 용도에 관한 것이다.

또 다른 측면에서, 본 발명은 오렉신-1 (OX₁) 활성이 연루된 질환 또는 병태의 치료 방법에 관한 것이며, 상기 방법은 그러한 치료를 필요로 하는 대상체에게 치료적 유효량의 본원에 정의된 본 발명의 화합물, 또는 이의 제약상 허용가능한 염 또는 용매화물, 또는 본원에 정의된 제약 조성물을 투여하는 단계를 포함한다.

오렉신-1 (OX₁) 활성이 연루된 병태의 예는 행동 각성, 식이 장애 (예를 들어 폭식, 비만), 정신 질환 (예를 들어 조현병, 불안, 기분 장애, 보상 추구 행동, 알코올 또는 약물 (예를 들어 니코틴) 중독, 공황 장애 (예컨대 공황 발작) 및/또는 불안)을 포함한다.

또 다른 측면에서, 본 발명은 행동 각성, 식이 장애 (예를 들어 폭식, 비만), 정신 질환 (예를 들어 조현병, 불안, 기분 장애, 보상 추구 행동, 알코올 또는 약물 (예를 들어 니코틴) 중독, 공황 장애 (예컨대 공황 발작) 및/또는 불안)의 치료에서 사용하기 위한, 본원에 정의된 화합물, 또는 이의 제약상 허용가능한 염 또는 용매화물, 또는 제약 조성물을 제공한다.

또 다른 측면에서, 본 발명은 행동 각성, 식이 장애 (예를 들어 폭식, 비만), 정신 질환 (예를 들어 조현병, 불안, 기분 장애, 보상 추구 행동, 알코올 또는 약물 (예를 들어 니코틴) 중독, 공황 장애 (예컨대 공황 발작) 및/또는 불안)의 치료에서 사용하기 위한 의약의 제조에 있어서의 화합물, 또는 이의 제약상 허용가능한 염 또는 용매화물의 용도를 제공한다.

또 다른 측면에서, 본 발명은 행동 각성, 식이 장애 (예를 들어 폭식, 비만), 정신 질환 (예를 들어 조현병, 불안, 기분 장애, 보상 추구 행동, 알코올 또는 약물 (예를 들어 니코틴) 중독, 공황 장애 (예컨대 공황 발작) 및/또는 불안)의 치료 방법을 제공하며, 상기 방법은 그러한 치료를 필요로 하는 대상체에게 치료적 유효량의 본원에 정의된 화합물, 또는 이의 제약상 허용가능한 염 또는 용매화물, 또는 제약 조성물을 투여하는 단계를 포함한다.

또 다른 측면에서, 본 발명은 오렉신-1 억제 효과의 생성에서 사용하기 위한, 본원에 정의된 화합물, 또는 이의 제약상 허용가능한 염 또는 용매화물, 또는 제약 조성물을 제공한다.

또 다른 측면에서, 본 발명은 오렉신-1 억제 효과의 생성에서 사용하기 위한 의약의 제조에 있어서의 화합물, 또는 이의 제약상 허용가능한 염 또는 용매화물의 용도를 제공한다.

또 다른 측면에서, 본 발명은 시험관 내에서의 오렉신-1 억제 효과의 생성 방법을 제공하며, 상기 방법은 유효량의 화합물, 또는 이의 제약상 허용가능한 염 또는 용매화물을 투여하는 단계를 포함한다.

또 다른 측면에서, 본 발명은 생체 내에서의 오렉신-1 억제 효과의 생성 방법을 제공하며, 상기 방법은 유효량의 화합물, 또는 이의 제약상 허용가능한 염 또는 용매화물을 투여하는 단계를 포함한다.

또 다른 측면에서, 본 발명은 시험관 내 또는 생체 내에서의 오렉신-1 (OX₁)의 억제 방법을 제공하며, 상기 방법은 세포를 유효량의 본원에 정의된 화합물, 또는 이의 제약상 허용가능한 염 또는 용매화물과 접촉시키는 단계를 포함한다.

추가로 본 발명은 본원에 정의된 바와 같은 화합물, 또는 이의 제약상 허용가능한 염 또는 용매화물의 합성 방법을 제공한다.

또 다른 측면에서, 본 발명은 본원에 정의된 합성 방법에 의해 수득가능하거나, 수득되거나, 직접적으로 수득된 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염 또는 용매화물을 제공한다.

또 다른 측면에서, 본 발명은 본원에 개시된 합성 방법들 중 어느 하나에서 사용하기에 적합한 본원에 정의된 신규한 중간체를 제공한다.

본 발명의 어느 하나의 특정 측면의 바람직한, 적합한, 그리고 임의적인 특징은 임의의 다른 측면의 바람직한, 적합한, 그리고 임의적인 특징이기도 하다.

본 발명의 화합물

제1 측면에서, 본 발명은 하기로부터 선택되는 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염 또는 용매화물을 제공한다:

N,6-디메틸-3-(2H-1,2,3-트리아졸-2-일)-N-[(2S)-1-{[5-(트리플루오로 메틸)피라진-2-일]아미노}프로판-2-일]피리딘-2-카르복스아미드;

N,6-디메틸-3-(2H-1,2,3-트리아졸-2-일)-N-[(2S)-1-{[5-(트리플루오로 메틸)피리미딘-2-일]아미노}프로판-2-일]피리딘-2-카르복스아미드.

이러한 화합물은 하기에 나타낸 화학식 I 또는 이의 제약상 허용가능한 염 또는 용매화물을 갖는다:

[화학식 I]

여기서, X₁은 -CH-이고 X₂는 -N-이거나, 또는 X₁은 -N-이고 X₂는 -CH-이다.

일 실시 양태에서, X₁은 -CH-이고, X₂는 -N-이며, 즉, 화합물은

N,6-디메틸-3-(2H-1,2,3-트리아졸-2-일)-N-[(2S)-1-{[5-(트리플루오로 메틸)피라진-2-일]아미노}프로판-2-일]피리딘-2-카르복스아미드; 또는 이의 제약상 허용가능한 염 또는 용매화물이다.

일 실시 양태에서, X₁은 -N-이고, X₂는 -CH-이며, 즉, 화합물은

N,6-디메틸-3-(2H-1,2,3-트리아졸-2-일)-N-[(2S)-1-{[5-(트리플루오로 메틸)피리미딘-2-일]아미노}프로판-2-일]피리딘-2-카르복스아미드; 또는 이의 제약상 허용가능한 염 또는 용매화물이다.

본 발명의 화합물의 적합한 제약상 허용가능한 염으로는 예를 들어 충분히 염기성인 본 발명의 화합물의 산-부가염, 예를 들어, 예컨대 무기 또는 유기 산, 예를 들어 염산, 브롬화수소산, 황산, 인산, 트리플루오로아세트산, 포름산, 시트르산 또는 말레산과의 산-부가염이 있다.

동일한 분자식을 갖지만 그의 원자의 결합 시퀀스 (sequence) 또는 성질 또는 공간에서의 그의 원자의 배열이 상이한 화합물은 "이성질체"로 칭해진다. 공간에서의 그의 원자의 배열이 상이한 이성질체는 "입체 이성질체"로 칭해진다. 서로의 거울상이 아닌 입체 이성질체는 "부분 입체 이성질체"로 칭해지며, 서로 중첩될 수 없는 거울상인 것은 "거울상 이성질체"로 칭해진다. 화합물이 비대칭 중심을 가질 때, 예를 들어, 이것이 4개의 상이한 기에 결합될 때, 한 쌍의 거울상 이성질체가 가능하다. 거울상 이성질체는 그의 비대칭 중심의 절대 배열 (absolute configuration)에 의해 특성화될 수 있으며, 칸과 프레로그 (Cahn and Prelog)의 R- 및 S-시퀀싱 (sequencing) 규칙에 의해 설명되거나, 또는 분자가 편광면을 회전시키는 방식에 의해 우선성 또는 좌선성으로 (즉, 각각 (+) 또는 (-)-이성질체로) 표기된다. 키랄 화합물은 개별 거울상 이성질체로서 또는 이들의 혼합물로서 존재할 수 있다. 동일한 비율의 거울상 이성질체들을 포함하는 혼합물은 "라세미 혼합물"로 불린다.

본 발명의 화합물은 1개 이상의 비대칭 중심을 보유할 수 있으며; 따라서 그러한 화합물은 개별 (R)- 또는 (S)-입체 이성질체로서 또는 이들의 혼합물로서 생성될 수 있다. 달리 나타내지 않으면, 본 명세서 및 청구범위에서의 특정 화합물의 설명 또는 명명은 개별 거울상 이성질체 및 이의 혼합물, 또는 달리 라세미체를 포함하고자 한다. 예를 들어 광학 활성 출발 재료로부터의 합성에 의한 또는 라세미 형태의 분할에 의한 입체 이성질체의 분리 및 입체화학적 특성의 결정을 위한 방법이 본 기술 분야에 잘 알려져 있다 (문헌["Advanced Organic Chemistry", 4th edition J. March, John Wiley and Sons, New York, 2001]의 제4장에서의 토론을 참조). 본 발명은 오렉신-1 억제 활성을 보유하는 모든 광학, 부분입체 이성질체 및 기하 이성질체와 이들의 혼합물을 포함함이 이해되어야 한다.

또한 본 발명은 1개 이상의 동위원소 치환체를 포함하는 본원에 정의된 본 발명의 화합물을 포함한다. 예를 들어, H는 ¹H, ²H (D) 및 ³H (T)를 포함하는 임의의 동위원소 형태로 존재할 수 있으며; C는 ¹²C, ¹³C, 및 ¹⁴C를 포함하는 임의의 동위원소 형태로 존재할 수 있으며; O는 ¹⁶O 및 ¹⁸O을 포함하는 임의의 동위원소 형태로 존재할 수 있으며; 다른 것도 마찬가지이다.

본 발명의 특정한 화합물은 용매화된 형태와, 비용매화된 형태, 예를 들어 수화된 형태로 존재할 수 있음이 또한 이해되어야 한다. 본 발명은 오렉신-1 억제 활성을 보유하는 모든 그러한 용매화된 형태를 포함함이 이해되어야 한다.

본 발명의 특정한 화합물은 다형성을 나타낼 수 있으며, 본 발명은 오렉신-1 억제 활성을 보유하는 모든 그러한 형태를 포함함이 또한 이해되어야 한다.

본 발명의 화합물은 다수의 상이한 호변이성질체 형태로 존재할 수 있으며, 본 발명의 화합물의 언급은 모든 그러한 형태를 포함한다. 의심의 여지를 없애기 위하여, 화합물이 몇몇 호변이성질체 형태들 중 하나로 존재할 수 있고 단지 하나가 특정적으로 기술되거나 예시되어 있을 경우, 그럼에도 불구하고 모든 기타의 형태들이 본 발명의 화합물에 포함된다.

아민 작용체를 포함하는 본 발명의 화합물은 또한 N-옥시드를 형성할 수 있다. 아민 작용체를 포함하는 본 발명의 화합물의 본원에서의 언급은 또한 N-옥시드를 포함한다. 화합물이 몇몇 아민 작용체를 포함할 경우, 하나 이상의 질소 원자는 산화되어 N-옥시드를 형성할 수 있다. N-옥시드의 특정 예로는 질소-함유 복소환의 질소 원자 또는 삼차 아민의 N-옥시드가 있다. N-옥시드는 상응하는 아민을 산화제, 예컨대 과산화수소 또는 과산 (예를 들어 퍼옥시카르복실산)으로 처리함으로써 형성될 수 있으며, 예를 들어 문헌[Advanced Organic Chemistry, by Jerry March, 4^th Edition, Wiley Interscience, pages]을 참조한다. 더욱 구체적으로, N-옥시드는 문헌[L. W. Deady (Syn. Comm. 1977, 7, 509-514)]의 절차에 의해 만들어질 수 있으며, 여기서, 아민 화합물을 예를 들어 불활성 용매, 예컨대 디클로로메탄에서 m-클로로퍼옥시벤조산 (MCPBA)과 반응시킨다.

본 발명의 화합물은 인체 또는 동물체에서 분해되어 본 발명의 화합물을 방출하는 프로드러그 (pro-drug)의 형태로 투여될 수 있다. 프로드러그는 본 발명의 화합물의 물리적 특성 및/또는 약동학적 특성을 변경하는 데 사용될 수 있다. 프로드러그는 특성-변경 기가 부착될 수 있는 적합한 기 또는 치환체를 본 발명의 화합물이 포함할 때 형성될 수 있다. 프로드러그의 예는 본 발명의 화합물에서의 카르복시 기 또는 히드록시 기에서 형성될 수 있는 생체 내 절단성 에스테르 유도체 및 본 발명의 화합물에서의 카르복시 기 또는 아미노 기에서 형성될 수 있는 생체 내 절단성 아미드 유도체를 포함한다.

따라서, 본 발명은 이상에서 정의된 본 발명의 화합물의 프로드러그의 절단에 의해 인체 또는 동물체 내에서 이용가능하게 될 때의, 그리고 유기 합성에 의해 이용가능해지게 될 때의 이상에서 정의된 본 발명의 화합물을 포함한다. 따라서, 본 발명은 유기 합성 수단에 의해 생성되는 본 발명의 화합물 및 또한, 전구체 화합물의 대사에 의해 인체 또는 동물체에서 생성되는 그러한 화합물을 포함하며, 즉, 본 발명의 화합물은 합성에 의해 생성된 화합물 또는 대사에 의해 생성된 화합물일 수 있다.

본 발명의 화합물의 적합한 제약상 허용가능한 프로드러그는 바람직하지 않은 약리학적 활성 없이, 그리고 과도한 독성 없이 인체 또는 동물체에의 투여에 적합한 것이라는 합리적인 의학적 판단을 기반으로 한 것이다.

다양한 형태의 프로드러그가 예를 들어 하기 문헌에 기술되었다:

a) Methods in Enzymology, Vol. 42, p. 309-396, edited by K. Widder, et al. (Academic Press, 1985);

b) Design of Pro-drugs, edited by H. Bundgaard, (Elsevier, 1985);

c) A Textbook of Drug Design and Development, edited by Krogsgaard-Larsen and H. Bundgaard, Chapter 5 "Design and Application of Pro-drugs", by H. Bundgaard p. 113-191 (1991);

d) H. Bundgaard, Advanced Drug Delivery Reviews, 8, 1-38 (1992);

e) H. Bundgaard, et al., Journal of Pharmaceutical Sciences, 77, 285 (1988);

f) N. Kakeya, et al., Chem. Pharm. Bull., 32, 692 (1984);

g) T. Higuchi and V. Stella, "Pro-Drugs as Novel Delivery Systems", A.C.S. Symposium Series, Volume 14; 및

h) E. Roche (editor), "Bioreversible Carriers in Drug Design", Pergamon Press, 1987.

본 발명의 화합물의 생체 내 효과는 부분적으로는 본 발명의 화합물의 투여 후 인체 또는 동물체 내에서 형성되는 1가지 이상의 대사산물에 의해 발휘될 수 있다. 이상에서 진술된 바와 같이, 본 발명의 화합물의 생체 내 효과는 또한 전구체 화합물 (프로드러그)의 대사에 의해 발휘될 수 있다.

본 발명의 화합물은 또한 예를 들어 가용화 모이어티 (moiety) (예를 들어, PEG 중합체), 고체 지지체에 이것이 결합되게 할 수 있는 모이어티 (예를 들어, 바이오틴-함유 모이어티), 및 표적화 리간드 (예컨대 항체 또는 항체 단편)와 같은 다른 기에 (임의의 적합한 위치에서) 공유 결합될 수 있음이 또한 인정된다.

합성

하기에 기술된 합성 방법의 설명에서 그리고 출발 재료의 제조에 사용되는 참조된 합성 방법에서, 용매, 반응 분위기, 반응 온도, 실험 지속 시간 및 워크업 (workup) 절차의 선택을 포함하는 모든 제안된 반응 조건은 당업자에 의해 선택될 수 있음이 이해되어야 한다.

분자의 다양한 부분 상에 존재하는 작용체는 이용되는 시약 및 반응 조건과 양립가능해야 한다는 것이 유기 합성 분야의 숙련자에 의해 이해된다.

필요한 출발 재료는 표준 유기 화학 절차에 의해 수득될 수 있다. 그러한 출발 재료의 제조는 하기의 대표적인 공정 변화와 함께 그리고 첨부된 실시예 내에 설명되어 있다. 대안적으로, 필요한 출발 재료는 유기 화학자의 보통의 기술 이내에 있는 예시된 것과 유사한 절차에 의해 수득가능하다.

하기에 정의된 공정에서의 본 발명의 화합물의 합성 동안, 또는 특정한 출발 재료의 합성 동안, 특정 치환기를 보호하여 그의 요망되지 않는 반응을 방지하는 것이 바람직할 수 있음이 인정된다. 숙련된 화학자라면 언제 그러한 보호가 요구되는지와, 어떻게 그러한 보호기가 적소에 두어지고 이후에 제거될 수 있는지를 알 것이다.

보호기의 예에 대해서는, 이 주제에 대한 많은 일반 교재 중 하나, 예컨대 문헌['Protective Groups in Organic Synthesis' by Theodora Green (publisher: John Wiley & Sons)]을 참조한다. 보호기는 당해 보호기의 제거에 적절한 것으로 숙련된 화학자에게 공지되거나 상기 문헌에 기술된 임의의 편리한 방법에 의해 제거될 수 있으며, 그러한 방법은 당해 분자에서의 다른 곳의 기를 최소로 건드리면서 보호기의 제거를 초래하도록 선택된다.

따라서, 반응물이 예를 들어 아미노, 카르복시 또는 히드록시와 같은 기를 포함할 경우, 본원에서 언급되는 반응들 중 일부에서 기를 보호하는 것이 바람직할 수 있다.

예로서, 아미노 또는 알킬아미노 기에 적합한 보호기는 예를 들어 아실 기, 예를 들어 알카노일 기, 예컨대 아세틸, 알콕시카르보닐 기, 예를 들어 메톡시카르보닐, 에톡시카르보닐 또는 tert -부톡시카르보닐 기, 아릴메톡시카르보닐 기, 예를 들어 벤질옥시카르보닐, 또는 아로일 기, 예를 들어 벤조일이다. 상기 보호기의 탈보호 조건은 반드시 보호기의 선택에 따라 달라질 필요가 있다. 따라서, 예를 들어, 아실 기, 예컨대 알카노일 또는 알콕시카르보닐 기 또는 아로일 기는 예를 들어 적합한 염기, 예컨대 알칼리 금속 수산화물, 예를 들어 수산화리튬 또는 수산화나트륨을 이용한 가수분해에 의해 제거될 수 있다. 대안적으로, 아실 기, 예컨대 tert-부톡시카르보닐 기는 예를 들어 염산, 황산 또는 인산 또는 트리플루오로아세트산으로서의 적합한 산을 이용한 처리에 의해 제거될 수 있으며, 아릴메톡시카르보닐 기, 예컨대 벤질옥시카르보닐 기는 예를 들어 촉매, 예컨대 탄소 상의 팔라듐에서의 수소화에 의해, 또는 루이스산 (Lewis acid), 예를 들어 BF₃.OEt₂를 이용한 처리에 의해 제거될 수 있다. 일차 아미노 기에 적합한 대안적인 보호기는 예를 들어 프탈로일 기이며, 이는 알킬아민, 예를 들어 디메틸아미노프로필아민을 이용한, 또는 히드라진을 이용한 처리에 의해 제거될 수 있다.

당업자라면 본 발명의 화합물이 공지된 방식으로, 다양한 방법으로 제조될 수 있음을 인식할 것이다. 본 발명의 화합물은 하기에 주어진 방법에 의해, 실험에 주어진 방법에 의해 또는 유사한 방법에 의해 제조될 수 있다. 기술된 경로는 본 발명의 화합물의 합성에 이용될 수 있는 방법 중 일부를 단지 예시하는 것이며, 당업자라면 반응 단계들의 순서가 기술된 것에 한정되지 않음을 알 것이다. 친핵체 및 친전자체의 배치가 본원에 기술된 것에 한정되지 않으며 일부의 경우에 상기 배치는 역전되는 것이 적절할 수 있음이 또한 인정될 것이다. 합성 화학 전략에의 상이한 접근법은 문헌["Organic Synthesis: The Disconnection Approach", 2^nd edition, S. Warren and P. Wyatt (2008)]에 기술되어 있다.

본 발명의 화합물, 또는 이의 제약상 허용가능한 염은 화학식 II의 산 또는 산 유도체를 화학식 III의 아민과 반응시킴으로써 제조될 수 있으며, 여기서, X₁ 및 X₂는 화학식 I에서 이전에 정의된 바와 같다 (반응식 A, 단계 i).

화학식 II의 카르복실산의 적합하게 반응성인 유도체로는 예를 들어 하기가 있다: 상기 산과 무기 산 클로라이드, 예컨대 티오닐 클로라이드의 반응에 의해 형성된 아실 할라이드; 상기 산과 클로로포르메이트, 예컨대 이소부틸 클로로포르메이트의 반응에 의해 형성된 혼합 무수물; 산 또는 염기의 존재 하에서의 알코올과의 반응에 의해 형성된 에스테르; 상기 산과 페놀, 예컨대 펜타플루오로페닐 트리플루오로아세테이트와의 또는 알코올, 예컨대 N-히드록시벤조트리아졸과의 반응에 의해 형성된 활성화 에스테르; 또는 상기 산과 아미드-커플링제, 예컨대 디시클로헥실카르보디이미드의 반응의 생성물. 화학식 II의 카르복실산이 예를 들어 아실 클로라이드와 유기 알코올, 예컨대 메탄올의 반응에 의해 에스테르로 전환될 경우, 이것을 유기금속 활성화제, 예를 들어 그리냐르 (Grignard) 시약, 예컨대 이소프로필마그네슘 브로마이드의 존재 하에 화학식 III의 아민과 반응시킬 수 있다. 전형적으로, 비-친핵성 염기, 예컨대 DIPEA의 존재 하에 적합한 용매, 예컨대 DMF 중의 화학식 II의 카르복실산 및 화학식 III의 아민은 아미드-커플링제, 예컨대 HATU로 처리된다.

[반응식 A]

화학식 II의 화합물은 구매가능하거나, 당업자에게 자명하거나 공지된 기술에 의해 제조될 수 있다. 화학식 II의 화합물은 하기에 의해 제조될 수 있다: 에스테르, 아미드 또는 니트릴의 산 또는 염기 촉매된 가수분해, 예컨대 수산화나트륨을 이용한 메틸 에스테르의 가수분해; 알데히드 또는 알코올의 전이 금속 촉매된 산화; 이산화탄소를 이용한 유기리튬 또는 그리냐르 시약의 처리; 물의 존재 하에서의 아릴 할라이드의 전이 금속 촉매된 카르보닐화. 화학식 III의 아민의 존재 하에서의 아릴 할라이드의 전이 금속 촉매된 카르보닐화는 화학식 I의 화합물을 직접적으로 형성할 수 있다.

화학식 I 및 화학식 III (여기서, X₁ 및 X₂는 화학식 I에서 이전에 정의된 바와 같음)의 화합물은 반응식 B (여기서, X₁ 및 X₂는 화학식 I에서 이전에 정의된 바와 같으며, Y는 H;

;

또는 아민 보호기, 예컨대 벤질, 3,4-디메톡시벤질 p-메톡시벤질, 카르보벤질옥시, tert-부틸옥시카르보닐, 9-플루오레닐메틸옥시카르보닐, 아세틸, 벤조일, p-메톡시페닐, 토실, 노실 또는 트리플루오로아세틸임)에 기술된 일반 합성 화학 방법에 적합한 보호기 및 경로 선택 전략을 포함시킴으로써 제조될 수 있음을 당업자라면 알 것이다.

화학식 IV의 화합물, 또는 이의 제약상 허용가능한 염 (여기서, X₁ 및 X₂는 화학식 I에서 이전에 정의된 바와 같음)은 화학식 V (여기서, Ar은

이며,

X₁ 및 X₂는 화학식 I에서 이전에 정의된 바와 같으며, Z는 전이 금속 촉매된 아미노화 화학에 영향을 받기 쉬운 치환체임)의 화합물과 반응시킴으로써 제조될 수 있다 (반응식 B, 단계 ii). 화학식 ZAr (여기서, Z는 할라이드, 예컨대 브로마이드 또는 클로라이드, 보론산 또는 보로네이트 에스테르, 또는 활성화된 알코올, 예컨대 트리플레이트임)의 화합물은 염기, 예컨대 탄산칼륨 또는 소듐 tert-부톡시드 및 적합한 리간드, 예컨대 트리페닐포스핀 또는 4,5-비스(디페닐포스피노)-9,9-디메틸잔텐의 존재 하에 전이 금속 촉매, 예컨대 [1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센]디클로로팔라듐(II) 또는 Pd₂(dba)₃의 존재 하에 화학식 V의 아민과의 반응에 의해 화학식 IV의 화합물로 전환될 수 있다. 전형적으로 상기 반응은 BINAP 및 소듐 tert-부톡시드의 존재 하에 촉매로서 Pd₂(dba)₃을 사용하여 환류에서 톨루엔에서 실시된다.

대안적으로, 화학식 IV의 화합물은 비친핵성 염기, 예컨대 DBU, 소듐 tert-부톡시드, 탄산칼륨, 삼차 아민, 예를 들어 DIPEA, 또는 복소환식 염기, 예를 들어 피리딘의 존재 하에, 화학식 V의 아민을 화학식 ZAr의 화합물과 반응시킴으로써 제조될 수 있고, 여기서, Ar은 이며, X₁ 및 X₂는 화학식 I에서 이전에 정의된 바와 같고, Z는 이탈기, 예컨대 할라이드, 예를 들어 요오다이드 또는 브로마이드, 또는 활성화된 알코올, 예를 들어 토실레이트 또는 메실레이트이다 (반응식 B, 단계 ii). 전형적으로, 상기 반응은 130℃에서 NMP에서 염기로서 DIPEA를 사용하여 실시된다.

화학식 IV의 화합물, 또는 이의 제약상 허용가능한 염 (여기서, X₁ 및 X₂는 화학식 I에서 이전에 정의된 바와 같음)은 화학식 H₂NAr (여기서, Ar은 이며, X₁ 및 X₂는 화학식 I에서 이전에 기술된 바와 같음)의 아민을 화학식 VI의 알데히드와 반응시킴으로써 제조될 수 있다 (반응식 B, 단계 iii). 화학식 IV의 화합물은 단독의, 또는 산, 예컨대 AcOH와 조합된 메탄올, 에탄올, THF, DCE 또는 DCM과 같은 극성 용매에서, 적합한 환원제, 예컨대 소듐 시아노보로히드라이드, NaBH(OAc)₃ 또는 붕수소화나트륨의 존재 하에 화학식 H₂NAr의 아민을 이용한 화학식 VI의 화합물의 환원적 아미노화에 의해 제조될 수 있다. 전형적으로 상기 반응은 주위 온도에서 DCE 중 NaBH(OAc)₃을 사용하여 실시된다.

화학식 V의 아민은 화학식 VI의 알데히드와 아민, 아민 등가물 또는 적합하게 보호된 아민 사이의, 반응식 B, 단계 iii에 대하여 이전에 설명된 환원적 아미노화에 의해 제조될 수 있다 (반응식 B, 단계 iv).

[반응식 B]

당업자라면 화학식 VI의 알데히드가 다양한 방법으로 제조될 수 있음을 인식할 것이다. 전형적으로, 화학식 VI의 알데히드는 데스-마틴 (Dess-Martin) 퍼요오디난 및 NaHCO₃을 이용하여 DCM 중 화학식 VII의 알코올의 산화에 의해 제조된다 (반응식 B, 단계 v).

또한 화학식 V의 화합물은 수소화물 시약, 예컨대 LiAlH₄를 이용한 화학식 VIII의 아미드의 환원에 의해, 또는 촉매적 수소화에 의해 제조될 수 있다 (반응식 B, 단계 vi). 전형적으로, 상기 반응은 0℃에서 LiAlH₄를 사용하여 THF 또는 디에틸 에테르에서 실시된다. 당업자라면 화학식 V의 아민의 제조가 본원에 기술된 방법에 한정되지 않으며 공지된 방식으로, 다양한 방법으로 달성될 수 있음을 인식할 것이다.

당업자라면 화학식 VII의 알데히드가 다양한 공지된 방법으로 제조될 수 있음을 인식할 것이다. 예를 들어, 화학식 VII의 알코올은 적합한 환원제, 예컨대 붕수소화나트륨, LiAlH₄, 디이소부틸 알루미늄 히드라이드 또는 LiBH₄를 이용한 카르보닐 함유 화합물, 예컨대 화학식 IX의 알데히드, 카르복실산 또는 카르복실산 등가물, 예컨대 카르복실산 에스테르 (반응식 B, 단계 vii)의 환원에 의해 제조될 수 있다. 전형적으로 화학식 VII의 알코올은 주위 온도에서 THF 중 LiBH₄를 이용하여 화학식 IX의 카르복실산의 카르복실산 에스테르 등가물을 환원시킴으로써 제조된다. 당업자라면 화학식 IX의 카르복실산의 카르복실산 에스테르 등가물이 다양한 공지된 방법으로 제조될 수 있음을 알 것이다.

화학식 IX의 화합물은 화학식 X의 아미노산의 적합하게 보호된/활성화된 유도체로부터 제조될 수 있다 (반응식 B, 단계 ix). 당업자라면 보호/활성화의 합성적 전략을 통한 화학식 IX의 화합물로의 화학식 X의 아미노산의 전환이 다수의 반응 단계를 요구할 수 있으며 다양한 공지된 방식의 방법으로 달성될 수 있음을 알 것이다. 예를 들어, 화학식 IX의 화합물은 하기에 의해 제조될 수 있다: 트리플루오르아세트산 무수물과의 반응, 이어서 염기, 예컨대 수소화나트륨을 이용한 탈양성자화, 화학식 CH₃Z (여기서, Z는 이탈기, 예컨대 할라이드 또는 활성화된 알코올, 예를 들어 메틸 요오다이드임)의 알킬 할라이드를 이용한 알킬화, 및 적합한 염기, 예컨대 수산화나트륨을 이용한 가수분해에 의한 화학식 X의 아미노산의 활성화된 아미드, 예컨대 트리플루오로아세트아미드로의 전환; 화학식 X의 아미노산과 적합한 알데히드 또는 알데히드 등가물, 예컨대 벤즈알데히드의 반응, 이어서 적합한 알데히드 또는 알데히드 등가물, 예컨대 포름알데히드 또는 파라포름알데히드를 이용한 환원적 아미노화, 이어서 전이 금속 촉매, 예컨대 팔라듐을 이용한 촉매적 수소화 (수소 분위기 하에서)에 의한 벤질 보호; 무수물 또는 산 클로라이드, 예컨대 디-tert-부틸 디카르보네이트와의 반응, 이어서 금속 수소화물, 예컨대 LiAlH₄를 이용한 환원에 의한 화학식 X의 아미노산의 카르바메이트로의 전환.

화학식 X의 천연 및 비천연 아미노산 및 그의 유도체는 구매가능하거나 당업자에게 공지된 방법에 의해 제조될 수 있다. 아미노산 합성의 개관에 대해서는 (a) 문헌[C. Najera and J. M. Sansano, Chem. Rev ., 2007, 107, 4584]; (b) 문헌[R. M. Williams and J. A. Hendrix, Chem. Rev ., 1992, 92, 889]; (c) 문헌[R. O. Duthaler, Tetrahedron, 1994, 50, 1539]을 참조한다.

제약 조성물

본 발명의 추가의 측면에 따르면, 이상에서 정의된 본 발명의 화합물, 또는 이의 제약상 허용가능한 염 또는 용매화물을 제약상 허용가능한 희석제 또는 담체와 공동으로 포함하는 제약 조성물이 제공된다.

본 발명의 조성물은 경구 용도 (예를 들어 정제, 로젠지, 경질 또는 연질 캡슐, 수성 또는 유성 현탁액, 에멀젼, 분산성 산제 또는 과립, 시럽 또는 엘릭시르로서), 국소 용도 (예를 들어 크림, 연고, 겔, 또는 수성 또는 유성 용액 또는 현탁액으로서), 흡입에 의한 투여 (예를 들어 미분화된 산제 또는 리퀴드 에어로졸 (liquid aerosol)로서), 취입에 의한 투여 (예를 들어 미분화된 산제) 또는 비경구 투여 (예를 들어 정맥내, 피하, 근육내, 복강내 또는 근육내 투약용의 살균 수성 또는 유성 용액으로서 또는 직장 투약용 좌약으로서)에 적합한 형태로 존재할 수 있다.

본 발명의 조성물은 본 기술 분야에 잘 알려진 통상적인 제약 부형제를 이용하여 통상적인 절차에 의해 수득될 수 있다. 따라서, 경구 사용용으로 의도된 조성물은 예를 들어 1가지 이상의 착색제, 감미제, 착향제 및/또는 방부제를 함유할 수 있다.

증식성 질환의 치료법에서 사용하기 위한 본 발명의 화합물의 유효량은 온혈 동물, 특히 인간에서 감염의 증상을 완화시키거나, 감염의 진행을 늦추거나, 감염 증상을 갖는 환자에서 악화의 위험을 감소시키기에 충분한 양이다.

단일 투여 형태를 생성하기 위하여 1가지 이상의 부형제와 조합되는 활성 성분의 양은 반드시, 치료받는 숙주 및 특정 투여 경로에 따라 달라질 필요가 있다. 예를 들어, 인간에게의 경구 투여용으로 의도된 제형은 일반적으로, 예를 들어 0.5 mg 내지 0.5 g의 활성제 (더 적합하게는 0.5 내지 100 mg, 예를 들어 1 내지 30 mg)가 적절하고 편리한 양의 부형제 (이는 전체 조성물의 약 5 중량%로부터 약 98 중량%까지 변할 수 있음)와 배합된 것을 포함할 것이다.

화학식 I의 화합물의 치료 또는 예방 목적을 위한 용량의 크기는 잘 알려진 의학의 원리에 따라, 병태의 성질 및 중증도, 동물 또는 환자의 연령 및 성별과, 투여 경로에 따라 자연스럽게 달라질 것이다.

치료 또는 예방 목적에 본 발명의 화합물을 사용함에 있어서, 이것은 일반적으로, 분할된 용량으로 요구된다면 예를 들어 체중 1 kg당 0.1 mg 내지 체중 1 kg당 75 mg의 범위의 일일 용량을 받도록 투여될 것이다. 일반적으로, 비경구 경로가 이용될 경우 더 적은 용량이 투여될 것이다. 따라서, 예를 들어, 정맥내 또는 복강내 투여의 경우, 예를 들어 체중 1 kg당 0.1 mg 내지 체중 1 kg당 30 mg의 범위의 용량이 일반적으로 이용될 것이다. 이와 유사하게, 흡입에 의한 투여의 경우, 예를 들어 체중 1 kg당 0.05 mg 내지 체중 1 kg당 25 mg의 범위의 용량이 사용될 것이다. 경구 투여, 특히 정제 형태의 것이 또한 적합할 수 있다. 전형적으로, 단위 투여 형태는 약 0.5 mg 내지 0.5 g의 본 발명의 화합물을 함유할 것이다.

치료적 용도 및 응용

본 발명의 화합물은 오렉신-1 활성의 선택적 억제제이다. 그 결과, 본 화합물은 오렉신-1 수용체 활성이 연루된 질환 또는 병태의 치료에 잠재적으로 유용한 치료제이다.

따라서, 일 측면에서, 본 발명은 치료법에서 사용하기 위한, 본원에 정의된 본 발명의 화합물, 또는 이의 제약상 허용가능한 염 또는 용매화물, 또는 본원에 정의된 제약 조성물에 관한 것이다.

화학식 I의 화합물 및 그의 제약상 허용가능한 염을 이용하여 치료할 수 있는 특정 질환 또는 병태의 예는 하기 중 어느 하나를 포함하지만, 이에 한정되는 것은 아니다: 조현병 및 기타 정신병적 장애 (예를 들어, 정신병적 장애, 정신병 또는 조현정동 장애); 치매 및 기타 인지 장애; 불안 장애 (예를 들어, 범 불안 장애, 외상 후 스트레스 장애, 공황 장애, 급성 스트레스 장애, 사회 불안 장애, 광장 공포증을 포함하는 공포증, 강박 장애, 트리클로피일로매니아 (trichlofiilomania) 또는 신체 이형 장애); 기분 장애 (예를 들어, 우울 장애, 주요 우울 장애, 제I형 및 제II형 양극성 장애를 포함하는 양극성 장애, 양극성 조병, 양극성 우울증); 물질 의존성 (예를 들어 코카인, 아편제, 대마초 또는 처방약 의존성), 알코올 의존성, 니코틴 의존성 또는 도박 장애를 포함하는 중독; 식이 장애 (예를 들어 폭식, 신경성 폭식증, 신경성 식욕부진 또는 비만); 수면 장애 (예를 들어 급속 안구 운동 수면 장애); 일반적으로 유아기, 아동기 또는 청소년기에서 처음 진단되는 장애 (예를 들어, 주의력 결핍 장애, 자폐 스펙트럼 장애, 레트 증후군 (Rett syndrome), 취약 X 증후군 (Fragile X syndrome), 아스퍼거 증후군 (Asperger syndrome) 및 파괴적 행동 장애); 하지 불안 증후군; 통증 (예를 들어 화학요법 유발성 통증 또는 편두통을 포함하는 신경병증성 통증); 골다공증 및 신경퇴행성 질환 (neurodegenerative disorder) (예를 들어 파킨슨병 (Parkinson's disease) 또는 알츠하이머병 (Alzheimer's disease)).

특히, 본 발명의 화합물 (제약상 허용가능한 염을 포함함)은 조현병, 정신분열형 장애 또는 조현정동 장애 (예를 들어 음성 또는 환각), 인지 장애 (예컨대 치매 및 학습 장애), 불안 장애 (예컨대 외상 후 스트레스 장애 또는 공황 장애), 또는 중독의 양성 증상의 치료에서 사용될 수 있다.

또한 본 발명은 하기: 조현병 및 기타 정신병적 장애 (예를 들어, 정신병적 장애, 정신병 또는 조현정동 장애); 치매 및 기타 인지 장애; 불안 장애 (예를 들어, 범 불안 장애, 외상 후 스트레스 장애, 공황 장애, 급성 스트레스 장애, 사회 불안 장애, 광장 공포증을 포함하는 공포증, 강박 장애, 발모벽 또는 신체 이형 장애); 기분 장애 (예를 들어, 우울 장애, 주요 우울 장애, 제I형 및 제II형 양극성 장애를 포함하는 양극성 장애, 양극성 조병, 양극성 우울증); 물질 의존성 (예를 들어 코카인, 아편제, 대마초 또는 처방약 의존성), 알코올 의존성, 니코틴 의존성 또는 도박 장애를 포함하는 중독; 식이 장애 (예를 들어 폭식, 신경성 폭식증, 신경성 식욕부진 또는 비만); 수면 장애 (예를 들어 급속 안구 운동 수면 장애); 일반적으로 유아기, 아동기 또는 청소년기에서 처음 진단되는 장애 (예를 들어, 주의력 결핍 장애, 자폐 스펙트럼 장애, 레트 증후군, 취약 X 증후군, 아스퍼거 증후군 및 파괴적 행동 장애); 하지 불안 증후군; 통증 (예를 들어 화학요법 유발성 통증 또는 편두통을 포함하는 신경병증성 통증); 골다공증 및 신경퇴행성 질환 (예를 들어 파킨슨병 또는 알츠하이머병) 중 어느 하나의 치료와 연관된 적어도 하나의 증상 또는 병태의 치료에서 사용하기 위한 본원에 정의된 화학식 I의 화합물을 제공하는데, 이것은 이를 필요로 하는 환자에게 이상에서 정의된 화학식 I의 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염의 치료적 유효량을 투여하는 것을 포함한다.

그러한 증상 및 병태는 불안, 초조, 적개심, 공황, 식이 장애, 정동 증상, 기분 증상, 일반적으로 정신병 및 신경퇴행성 질환과 연관된 음성 및 양성 정신병 증상을 포함하지만, 이에 한정되는 것은 아니다.

오렉신-1 (OX₁) 활성이 연루된 병태의 추가의 특정 예는 행동 각성, 식이 장애 (예를 들어 폭식, 비만), 정신 질환 (예를 들어 조현병, 불안, 기분 장애, 보상 추구 행동, 알코올 또는 약물 (예를 들어 니코틴) 중독, 공황 장애 (예컨대 공황 발작) 및/또는 불안)을 포함한다.

또 다른 측면에서, 본 발명은 조현병 및 기타 정신병적 장애 (예를 들어, 정신병적 장애, 정신병 또는 조현정동 장애); 치매 및 기타 인지 장애; 불안 장애 (예를 들어, 범 불안 장애, 외상 후 스트레스 장애, 공황 장애, 급성 스트레스 장애, 사회 불안 장애, 광장 공포증을 포함하는 공포증, 강박 장애, 발모벽 또는 신체 이형 장애); 기분 장애 (예를 들어, 우울 장애, 주요 우울 장애, 제I형 및 제II형 양극성 장애를 포함하는 양극성 장애, 양극성 조병, 양극성 우울증); 물질 의존성 (예를 들어 코카인, 아편제, 대마초 또는 처방약 의존성), 알코올 의존성, 니코틴 의존성 또는 도박 장애를 포함하는 중독; 식이 장애 (예를 들어 폭식, 신경성 폭식증, 신경성 식욕부진 또는 비만); 수면 장애 (예를 들어 급속 안구 운동 수면 장애); 일반적으로 유아기, 아동기 또는 청소년기에서 처음 진단되는 장애 (예를 들어, 주의력 결핍 장애, 자폐 스펙트럼 장애, 레트 증후군, 취약 X 증후군, 아스퍼거 증후군 및 파괴적 행동 장애); 하지 불안 증후군; 통증 (예를 들어 화학요법 유발성 통증 또는 편두통을 포함하는 신경병증성 통증); 골다공증 및 신경퇴행성 질환 (예를 들어 파킨슨병 또는 알츠하이머병)의 치료에서 사용하기 위한, 본원에 정의된 화합물, 또는 이의 제약상 허용가능한 염 또는 용매화물, 또는 제약 조성물을 제공한다.

또 다른 측면에서, 본 발명은 조현병 및 기타 정신병적 장애 (예를 들어, 정신병적 장애, 정신병 또는 조현정동 장애); 치매 및 기타 인지 장애; 불안 장애 (예를 들어, 범 불안 장애, 외상 후 스트레스 장애, 공황 장애, 급성 스트레스 장애, 사회 불안 장애, 광장 공포증을 포함하는 공포증, 강박 장애, 발모벽 또는 신체 이형 장애); 기분 장애 (예를 들어, 우울 장애, 주요 우울 장애, 제I형 및 제II형 양극성 장애를 포함하는 양극성 장애, 양극성 조병, 양극성 우울증); 물질 의존성 (예를 들어 코카인, 아편제, 대마초 또는 처방약 의존성), 알코올 의존성, 니코틴 의존성 또는 도박 장애를 포함하는 중독; 식이 장애 (예를 들어 폭식, 신경성 폭식증, 신경성 식욕부진 또는 비만); 수면 장애 (예를 들어 급속 안구 운동 수면 장애); 일반적으로 유아기, 아동기 또는 청소년기에서 처음 진단되는 장애 (예를 들어, 주의력 결핍 장애, 자폐 스펙트럼 장애, 레트 증후군, 취약 X 증후군, 아스퍼거 증후군 및 파괴적 행동 장애); 하지 불안 증후군; 통증 (예를 들어 화학요법 유발성 통증 또는 편두통을 포함하는 신경병증성 통증); 골다공증 및 신경퇴행성 질환 (예를 들어 파킨슨병 또는 알츠하이머병)의 치료에서 사용하기 위한 의약의 제조에 있어서의 화합물, 또는 이의 제약상 허용가능한 염 또는 용매화물의 용도를 제공한다.

또 다른 측면에서, 본 발명은 조현병 및 기타 정신병적 장애 (예를 들어, 정신병적 장애, 정신병 또는 조현정동 장애); 치매 및 기타 인지 장애; 불안 장애 (예를 들어, 범 불안 장애, 외상 후 스트레스 장애, 공황 장애, 급성 스트레스 장애, 사회 불안 장애, 광장 공포증을 포함하는 공포증, 강박 장애, 발모벽 또는 신체 이형 장애); 기분 장애 (예를 들어, 우울 장애, 주요 우울 장애, 제I형 및 제II형 양극성 장애를 포함하는 양극성 장애, 양극성 조병, 양극성 우울증); 물질 의존성 (예를 들어 코카인, 아편제, 대마초 또는 처방약 의존성), 알코올 의존성, 니코틴 의존성 또는 도박 장애를 포함하는 중독; 식이 장애 (예를 들어 폭식, 신경성 폭식증, 신경성 식욕부진 또는 비만); 수면 장애 (예를 들어 급속 안구 운동 수면 장애); 일반적으로 유아기, 아동기 또는 청소년기에서 처음 진단되는 장애 (예를 들어, 주의력 결핍 장애, 자폐 스펙트럼 장애, 레트 증후군, 취약 X 증후군, 아스퍼거 증후군 및 파괴적 행동 장애); 하지 불안 증후군; 통증 (예를 들어 화학요법 유발성 통증 또는 편두통을 포함하는 신경병증성 통증); 골다공증 및 신경퇴행성 질환 (예를 들어 파킨슨병 또는 알츠하이머병)의 치료 방법을 제공하며, 상기 방법은 그러한 치료를 필요로 하는 대상체에게 치료적 유효량의 본원에 정의된 화합물, 또는 이의 제약상 허용가능한 염 또는 용매화물, 또는 제약 조성물을 투여하는 단계를 포함한다.

또 다른 측면에서, 본 발명은 시험관 내 및/또는 생체 내에서의 오렉신-1 (OX₁)의 억제 방법을 제공하며, 상기 방법은 세포를 유효량의 본원에 정의된 화합물, 또는 이의 제약상 허용가능한 염 또는 용매화물과 접촉시키는 단계를 포함한다.

투여 경로

본 발명의 화합물 또는 활성 화합물을 포함하는 제약 조성물은 전신적/말초적이든지 국소적 (즉, 요망되는 작용 부위에서)이든지 간에 임의의 편리한 투여 경로에 의해 대상체에게 투여될 수 있다.

투여 경로는 경구 투여 경로 (예를 들어 섭취에 의한 것임); 협측 투여 경로; 설하 투여 경로; 경피 투여 경로 (예를 들어 패치, 반창고 등에 의한 것을 포함함); 경점막 투여 경로 (예를 들어 패치, 반창고 등에 의한 것을 포함함); 비강내 투여 경로 (예를 들어 비강 스프레이에 의한 것임); 눈 투여 경로 (예를 들어 점안액에 의한 것임); 폐 투여 경로 (예를 들어, 예컨대 입 또는 코를 통하여 예를 들어 에어로졸을 통하여 사용하는 흡입 또는 취입 치료법에 의한 것임); 직장 투여 경로 (예를 들어 좌약 또는 관장제에 의한 것임); 질 투여 경로 (예를 들어 페서리 (pessary)에 의한 것임); 예를 들어, 피하, 피내, 근육내, 정맥내, 동맥내, 심장내, 경막내, 척추강내, 관절낭내, 피막하, 안와내, 복강내, 기관내, 표피하, 관절내, 지주막하, 및 흉골내 주사를 포함하는 주사에 의한 비경구 투여 경로; 예를 들어 피하 또는 근육내의 데포 (depot) 또는 저장소 (reservoir)의 이식에 의한 투여 경로를 포함하지만, 이에 한정되는 것은 아니다.

병용 요법

본 발명의 화합물은 단일요법제로서 단독으로 투여될 수 있거나 1가지 이상의 추가의 치료제와 조합되어 투여될 수 있다. 상기 1가지 이상의 추가의 치료제의 선택은 물론 치료될 질환 또는 병태 및 그의 중증도에 따라 달라질 것이다.

특정한 의학적 병태를 치료하기 위하여 병용 요법을 이용하는 것이 다반사다.

따라서, 이상에서 정의된 치료는 단일 요법으로서 적용되거나, 본 발명의 화합물에 더하여 1가지 이상의 추가의 치료제를 이용한 치료를 포함할 수 있다.

그러한 연합/병용 치료는 치료의 개별 구성 요소들의 동시적, 순차적 또는 개별적 투약에 의해 달성될 수 있다. 그러한 병용 제품은 이상에서 기술된 투여량 범위 내의 본 발명의 화합물 및 승인된 투여량 범위 내의 기타 제약 활성제를 이용한다.

본 발명의 특정 측면에 따르면, 오렉신-1 수용체 활성이 연루된 질환 또는 병태의 치료에서 사용하기에 적합한 조합물이 제공되며, 이는 이상에서 정의된 본 발명의 화합물, 또는 이의 제약상 허용가능한 염 또는 용매화물, 및 또 다른 치료제를 포함한다.

본 발명의 이러한 측면에 따르면, 행동 각성, 식이 장애 (예를 들어 폭식, 비만), 정신 질환 (예를 들어 조현병, 불안, 기분 장애, 보상 추구 행동, 알코올 또는 약물 (예를 들어 니코틴) 중독 및/또는 불안)의 치료에서 사용하기에 적합한 조합물이 제공되며, 이 조합물은 이상에서 정의된 본 발명의 화합물, 또는 이의 제약상 허용가능한 염 또는 용매화물, 및 1가지 이상의 추가의 치료제를 포함한다.

본 발명의 추가의 측면에서, 1가지 이상의 추가의 치료제와 조합된 본 발명의 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염 또는 용매화물이 제공된다.

본원에서, "병용"이라는 용어가 사용되는 경우, 이것은 동시 투여, 개별적 투여 또는 순차적 투여를 나타낸다는 것이 이해되어야 한다. 본 발명의 일 측면에서, "병용"은 동시 투여를 나타낸다. 본 발명의 또 다른 측면에서, "병용"은 개별적 투여를 나타낸다. 본 발명의 추가의 측면에서, "병용"은 순차적 투여를 나타낸다. 투여가 순차적 투여 또는 개별적 투여인 경우, 제2 성분의 투여의 지연이 병용의 유익한 효과를 손실시키는 것과 같은 것이어서는 안 된다.

본 발명의 추가의 측면에 따르면, 제약상 허용가능한 희석제 또는 담체와 결부된 1가지 이상의 추가의 치료제와 조합된 본 발명의 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염 또는 용매화물을 포함하는 제약 조성물이 제공된다.

본 발명의 특정 측면에 따르면, 조현병 및 기타 정신병적 장애 (예를 들어, 정신병적 장애, 정신병 또는 조현정동 장애); 치매 및 기타 인지 장애; 불안 장애 (예를 들어, 범 불안 장애, 외상 후 스트레스 장애, 공황 장애, 급성 스트레스 장애, 사회 불안 장애, 광장 공포증을 포함하는 공포증, 강박 장애, 발모벽 또는 신체 이형 장애); 기분 장애 (예를 들어, 우울 장애, 주요 우울 장애, 제I형 및 제II형 양극성 장애를 포함하는 양극성 장애, 양극성 조병, 양극성 우울증); 물질 의존성 (예를 들어 코카인, 아편제, 대마초 또는 처방약 의존성), 알코올 의존성, 니코틴 의존성 또는 도박 장애를 포함하는 중독; 식이 장애 (예를 들어 폭식, 신경성 폭식증, 신경성 식욕부진 또는 비만); 수면 장애 (예를 들어 급속 안구 운동 수면 장애); 일반적으로 유아기, 아동기 또는 청소년기에서 처음 진단되는 장애 (예를 들어, 주의력 결핍 장애, 자폐 스펙트럼 장애, 레트 증후군, 취약 X 증후군, 아스퍼거 증후군 및 파괴적 행동 장애); 하지 불안 증후군; 통증 (예를 들어 화학요법 유발성 통증 또는 편두통을 포함하는 신경병증성 통증); 골다공증 및 신경퇴행성 질환 (예를 들어 파킨슨병 또는 알츠하이머병)의 치료에서 사용하기에 적합한 조합물이 제공되며, 이 조합물은 이상에서 정의된 본 발명의 화합물, 또는 이의 제약상 허용가능한 염 또는 용매화물, 및 또 다른 치료제를 포함한다.

본 발명의 특정 측면에 따르면, 행동 각성, 식이 장애 (예를 들어 폭식, 비만), 정신 질환 (예를 들어 조현병, 불안, 기분 장애, 보상 추구 행동, 알코올 또는 약물 (예를 들어 니코틴) 중독, 공황 장애 (예컨대 공황 발작) 및/또는 불안)의 치료에서 사용하기에 적합한 조합물이 제공되며, 이는 이상에서 정의된 본 발명의 화합물, 또는 이의 제약상 허용가능한 염 또는 용매화물, 및 또 다른 치료제를 포함한다.

본 발명의 화합물을 포함하는 병용 요법제의 일부로서 (예를 들어 이중 또는 삼중 조합물의 일부로서의 2가지 이상의 활성제 중 하나로서) 사용될 수 있는 다른 치료제의 예는 하기를 포함하지만, 이에 한정되는 것은 아니다:

(i) 항우울제, 예를 들어 아미트립틸린 (amitriptyline), 아목사핀 (amoxapine), 부프로피온 (bupropion), 시탈로프람 (citalopram), 클로미프라민 (clomipramine), 데시프라민 (desipramine), 독세핀 (doxepin), 둘록세틴 (duloxetine), 엘자소난 (elzasonan), 에스시타이오프람 (escitaiopram), 플루복사민 (fluvoxamine), 플루옥세틴 (fluoxetine), 게피론 (gepirone), 이미프라민 (imipramine), 입사피론 (ipsapirone), 마프로틸린 (maprotiline), 노르트립틸린 (nortriptyline), 네파조돈 (nefazodone), 파록세틴 (paroxetine), 페넬진 (phenelzine), 프로트립틸린 (protriptyline), 레복세틴 (reboxetine), 로바이조탄 (robaizotan), 설트랄린 (sertraline), 시부트라민 (sibutramine), 티아넵틴 (tianeptine), 티오니속세틴 (thionisoxetine), 트라닐시프로마인 (tranylcypromaine), 트라조돈 (trazodone), 트리미프라민 (trimipramine), 벤라팍신 (venlafaxine), 보르티옥세틴 (vortioxetine) 및 이의 등가물 및 제약 활성 이성질체(들) 및/또는 대사산물(들);

(ii) 예를 들어, 아미술프리드 (amisulpride), 아리피프라졸 (aripiprazole), 아세나핀 (asenapine), 벤지속시딜 (benzisoxidil), 비페프루녹스 (bifeprunox), 브렉스피프라졸 (brexpiprazole), 카르바마제핀 (carbamazepine), 카리프라진 (cariprazine), 클로자핀 (clozapine), 클로르프로마진 (chlorpromazine), 데벤자핀 (debenzapine), 디발프로엑스 (divalproex), 둘록세틴, 에스조피클론 (eszopiclone), 할로페리돌 (haloperidol), 일로페리돈 (iloperidone), 라모트리진 (lamotrigine), 록사핀 (loxapine), 이우라시돈 (iurasidone), 메소리다진 (mesoridazine), 올란자핀 (olanzapine), 팔리페리돈 (paliperidone), 페를라핀 (perlapine), 페르페나진 (perphenazine), 페노티아진 (phenothiazine), 페니이부틀리피페리딘 (phenyibutlypiperidine), 피모지드 (pimozide), 프로클로르페라진 (prochlorperazine), 쿠에티아핀 (quetiapine), 리스페리돈 (risperidone), 세르틴돌 (sertindole), 술피리드 (sulpiride), 수프로클론 (suproclone), 수리 클론 (suri clone), 티오리다진 (thioridazine), 트리플루오페라진 (trifluoperazine), 트리메토진 (trimetozine), 발프로에이트 (valproate), 발프로익산 (valproic acid), 조피클론 (zopiclone), 조테핀 (zotepine), 지크로나핀 (zicronapine), 지프라시돈 (ziprasidone), 및 이의 등가물 및 제약 활성 이성질체(들) 및/또는 대사산물(들)을 포함하는 항정신병약;

(iii) 예를 들어, 알네스피론 (alnespirone), 아자피론류 (azapirones), 벤조디아제핀류 (benzodiazepines), 바르비투레이트류 (barbiturates), 및 이의 등가물 및 제약 활성 이성질체(들) 및/또는 대사산물(들)을 포함하는 항불안약. 예시적 항불안약은 아디나졸람 (adinazolam), 알프라졸람 (alprazolam), 발레제팜 (balezepam), 벤타제팜 (bentazepam), 브로마제팜 (bromazepam), 브로티졸람 (brotizolam), 부스피론 (buspirone), 클로나제팜 (clonazepam), 클로라제페이트 (clorazepate), 클로르디아제폭시드 (chlordiazepoxide), 시프라제파른 (cyprazeparn), 디아제팜 (diazepam), 디펜히드라민 (diphenhydramine), 에스타졸람 (estazolam), 페노밤 (fenobam), 플루니트라제팜 (flunitrazepam), 플루라제팜 (flurazepam), 포사제팜 (fosazepam), 로라제팜 (lorazepam), 로르메타제팜 (lormetazepam), 메프로바메이트 (meprobamate), 미다졸람 (midazolam), 니트라제팜 (nitrazepam), 옥사제팜 (oxazepam), 프라제팜 (prazepam), 쿠아제팜 (quazepam), 레클라제팜 (reclazepam), 트라카졸레이트 (tracazolate), 트레피팜 (trepipam), 테마제팜 (temazepam), 트리아졸람 (triazolam), 우이다제팜 (uidazepam), 및 졸라제팜 (zolazepam); 및 이의 등가물 및 제약 활성 이성질체(들) 및/또는 대사산물(들)을 포함한다;

(iv) 예를 들어, 카르바마제핀, 발프로에이트, 라모트리진, 에베티라세탐 (evetiracetam) 및 가바펜틴 (gabapentin), 및 이의 등가물 및 제약 활성 이성질체(들) 및/또는 대사산물(들)을 포함하는 항경련제;

(v) 예를 들어 도네페질 (donepezil), 가이안타민 (gaiantamine), 메만틴 (memantine), 리바스티그민 (rivastigmine), 타크린 (tacrine), 및 이의 등가물 및 제약 활성 이성질체(들) 및/또는 대사산물(들)을 포함하는 알츠하이머 요법제;

(vi) 예를 들어 L-도파 (dopa), 로피니롤 (ropinirole), 프라미펙소이에 (pramipexoie), 모노아민 옥시다아제 타입 B (monoamine oxidase type B; MAO-B) 억제제, 예컨대 데프레니이 (deprenyi), 셀레길린 (selegiline) 및 라사기인 (rasagiiine), 카테콜 O-메티S 트랜스퍼라아제 (catechol -O-methyS transferase; COMT) 억제제, 예컨대 엔타카폰 (entacapone) 또는 톨카폰 (tolcapone), 아데노신 A-2 억제제, 도파민 재흡수 억제제, NMDA 길항제, 니코틴 작용제, 및 도파민 작용제 및 뉴런 산화질소 신타아제 (neuronal nitric oxide synthase)의 억제제, 및 이의 등가물 및 제약 활성 이성질체(들) 및/또는 대사산물(들)을 포함하는 파킨슨 요법제;

(vii) 예를 들어 아이모트립탄 (aimotriptan), 아만타딘 (amantadine), 보툴리눔 독소 A (botulinum toxin A), 브로모크립틴 (bromocriptine), 부탈비탈 (butalbital), 카베르고이인 (cabergoiine), 디클로라이페나존 (dichloraiphenazone), 디히드로에르고타민 (dihydroergotamine), 에이에트립탄 (eietriptan), 프로바트립탄 (frovatriptan), 리수리드 (lisuride), 나라트립탄 (naratriptan), 페르골리드 (pergolide), 프라미펙소이에, 리자트립탄 (rizatriptan), 로피니롤, 수마트립탄 (sumatriptan), 토피라메이트 (topiramate), 졸미트립탄 (zolmitriptan), 및 조미트립탄 (zomitriptan), 및 이의 등가물 및 제약 활성 이성질체(들) 및/또는 대사산물(들)을 포함하는 편두통 요법제;

(viii) 예를 들어 압식시맙 (abciximab), 악티바제 (activase), 시티콜린 (citicoline), 데스모테플라제 (desmoteplase), 및 이의 등가물 및 제약 활성 이성질체(들) 및/또는 대사산물(들)을 포함하는 뇌졸중 요법제;

(ix) 예를 들어 다라페나신 (darafenacin), 둘록세틴, 팔복세이트 (falvoxate), 미라베그론 (mirabegron), 옥시부티닌 (oxybutynin), 프로피베린 (propiverine), 로발조탄 (robalzotan), 솔리페나신 (solifenacin), 및 톨테로딘 (tolterodine), 및 이의 등가물 및 제약 활성 이성질체(들) 및/또는 대사산물(들)을 포함하는 요실금 요법제;

(x) 예를 들어 캅사이신 (capsaicin), 가바펜틴, 이도덤 (iidoderm), 및 프레가발린 (pregabalin), 및 이의 등가물 및 제약 활성 이성질체(들) 및/또는 대사산물(들)을 포함하는 신경병증성 통증 요법제;

(xi) 예를 들어 셀레콕시브 (celecoxib), 에토리콕시브 (etoricoxib), 루미라콕시브 (lumiracoxib), 로페콕시브 (rofecoxib), 발데콕시브 (valdecoxib), 디클로페낙 (diclofenac), 록소프로펜 (loxoprofen), 나프록센 (naproxen), 및 파라세타몰 (paracetamol), 및 이의 등가물 및 제약 활성 이성질체(들) 및/또는 대사산물(들)을 포함하는 침해수용성 통증 요법제;

(xii) 예를 들어 알로바르비탈 (allobarbital), 아이오니미드 (aionimid), 아모바르비탈 (amobarbital), 벤족타민 (benzoctamine), 부타바르비탈 (butabarbital), 카푸리드 (capuride), 클로랄 (chloral), 클로페리돈 (cloperidone), 클로레테이트 (clorethate), 덱스클라몰 (dexclamol), 에트클로르비놀 (ethchlorvynol), 에스조피클론, 에토미데이트 (etomidate), 글루테티미드 (glutethimide), 할라제팜 (halazepam), 히드록시진 (hydroxyzine), 이오레디플론 (iorediplon), 메클로쿠알론 (mecloqualone), 멜라토닌 (melatonin), 메포바르비탈 (mephobarbital), 메타쿠알론 (methaqualone), 미다플루르 (midaflur), 니소바메이트 (nisobamate), 펜토바르비탈 (pentobarbital), 페노바르비탈 (phenobarbital), 프로포폴 (propofol), 라멜테온 (ralmeteon), 롤레타미드 (roletamide), 수보렉산트 (suvorexant), 트리클로포스 (triclofos), 세코바르비탈 (secobarbital), 잘레플론 (zaleplon), 및 졸피뎀 (Zolpidem), 조피클론 및 이의 등가물 및 제약 활성 이성질체(들) 및/또는 대사산물(들)을 포함하는 불면증 요법제;

(xiii) 예를 들어 카르바마제핀, 디발프로엑스, 가바펜틴, 라모트리진, 리튬, 올란자핀, 쿠에티아핀, 발프로에이트, 발프로익산, 및 베라파밀 (verapamil), 및 이의 등가물 및 제약 활성 이성질체(들) 및/또는 대사산물(들)을 포함하는 기분 안정제;

(xiv) 5HT1B 리간드, 예를 들어 국제 공개 제99/05134호 및 국제 공개 제02/08212호에 개시된 화합물;

(xv) mGluR2 작용제;

(xvi) 알파 7 니코틴 작용제, 예를 들어 국제 공개 제96/006098호, 국제 공개 제97/030998호, 국제 공개 제99/003859호, 국제 공개 제00/042044호, 국제 공개 제01/029034호, 국제 공개 제01/60821호, 국제 공개 제01/36417호, 국제 공개 제02/096912호, 국제 공개 제03/087102호, 국제 공개 제03/087103호, 국제 공개 제03/087104호, 국제 공개 제2004/016617호, 국제 공개 제2004/016616호, 및 국제 공개 제2004/019947호에 개시된 화합물; (xvii) 케모카인 수용체 CCR1 억제제;

(xviii) 델타 오피오이드 작용제, 예를 들어 국제 공개 제97/23466호 및 국제 공개 제02/094794호에 개시된 화합물; 및

(xviv) 골다공증 요법제, 예를 들어 비스포스포네이트, 데노수맙 (denosumab), 랄록시펜 (raloxifene), 칼시토닌 (calcitonin), 스트론튬 라넬레이트 (strontium ranelate), HRT, 칼슘 및 비타민 D.

(xvv) 중독 장애의 치료에서 유용한 기타 에이전트, 예컨대 부프레노르핀 (buprenorphine), 날록손 (naloxone), 메티라폰 (metyrapone), 날트렉손 (naltrexone), 날메펜 (nalmefene), 케토코나졸 (ketoconazole), 미르타자핀 (mirtazapine), 아토목세틴 (atomoxetine), 가바펜틴, 무시몰 (muscimol), 바클로펜 (baclofen), 프로가바이드 (progabide), 프레가발린, 릴루졸 (riluzole), 비가바트린 (vigabatrin), 발프로익산, 티아가빈 (tiagabine), 라모트리진, 페니토인 (phenytoin), 카르바마제핀, 토피라메이트, 바르비투레이트, 카리소프로돌 (carisoprodol), 클로랄 하이드레이트 (chloral hydrate), 글루테티미드, L-테아닌 (theanine), 카바 (kava), 메타쿠알론, 신경활성 스테로이드, z-약물 (z-drug), 프로포폴, 스컬캡 (scullcap), 발레리안 (valerian), 감마-부티로락톤, 감마-히드록시부티르산, 페니부트 (phenibut), 데람시클란 (deramciclane), 하이퍼포린 (hyperforin), 가바쿨린 (gabaculine), 페넬진, 발프로에이트, 비가바트린, 레몬 밤 (lemon balm) (멜리사 오피시날리스 (Melissa officinalis)), GABA, L-글루타민, 피카밀론 (picamilon), 및 테타노스파스민 (tetanospasmin).

이러한 병용 요법제는 본원에 기술된 투여량 범위 내의 본 발명의 화합물 및 참고 간행물에 기술된 것과 같은 승인된 투여량 범위 및/또는 투여량 내의 기타 제약 활성제를 이용한다.

실시예

화합물의 합성

일반 절차:

본 발명의 화합물의 제조 방법을 하기 실시예에서 예시한다. 출발 재료를 본 기술 분야에 공지된 절차에 따라 또는 본원에 예시된 바와 같이 제조하거나, 또는 이것은 구매가능하다. 상업적 시약을 추가의 정제 없이 사용하였다. 반응 온도가 포함되어 있지 않은 경우, 반응을 전형적으로 18 내지 27℃인 주위 온도에서 수행하였다.

본 발명에서 설명된 화합물을 ¹H NMR 분광법에 의해 특성화할 경우, 스펙트럼을 500 MHz 브루커 (Bruker), 400 MHz 브루커 또는 400 MHz JEOL 기기에서 기록하였다. 온도가 포함되지 않는 경우, 스펙트럼을 주위 온도에서 기록하였다. 화학적 이동 값을 백만분율 (parts per million; ppm) 단위로 표현한다. NMR 스펙트럼이 상호전환 이성질체들의 존재로 인하여 복합적일 경우, 신호의 근사 부분 적분 (approximate partial integration)을 보고한다. 하기 약어를 다수의 NMR 신호에 대하여 사용한다: s=단일 피크 (singlet), b=브로드 (broad), t= 삼중 피크 (triplet), q=사중 피크 (quartet), m=다중 피크 (multiplet), d=이중 피크 (doublet).

본 발명에서 설명된 화합물을 LCMS 데이터에 의해 특성화할 경우, 체류 시간 및 분자량을 하기에 열거된 조건을 이용하여 결정한다. 본 발명의 화합물이 서서히 상호 전환되는 입체 이성질체들로서 나타날 경우, 다수의 체류 시간이 기록된다.

방법 A: MS 검출을 이용한 애질런트 (Agilent) 1260 LC (API 전기분무). 컬럼: 애질런트 포로쉘 (Poroshell) 120 EC-C18 (2.7 μm, 3.0 x 50 mm) 조건: 물 + 0.1% 포름산 [용출제 A]; MeCN [용출제 B]. 구배: 3.5분에 걸쳐 5%에서 95%까지, 5%까지의 B.

방법 B: 210 내지 420 nM (ESI)에서의 애질런트 1100 HPLC를 갖춘 워터스 (Waters) ZQ MS. 컬럼: 페노메넥스 제미니 (Phenomenex Gemini) - NXC18 (3 μm, 2.0 x 50 mm). 조건: pH 10까지 완충된 2 mM 중탄산암모늄 [용출제 A]; MeCN [용출제 B]. 구배: 3.5분에 걸쳐 1%에서 100%까지, 1%까지의 B.

방법 C: 210 내지 420 nM (ESI)에서의 애질런트 1100 HPLC를 갖춘 워터스 ZQ MS. 컬럼: 페노메넥스 제미니 - NXC18 (3 μm, 2.0 x 100 mm). 조건: pH 10까지 완충된 2 mM 중탄산암모늄 [용출제 A]; MeCN [용출제 B]. 구배: 7분에 걸쳐 5%에서 100%까지, 5%까지의 B.

약어:

DCE 디클로로에탄

DCM 디클로로메탄

DEAD 디에틸 아조디카르복실레이트

DIPEA N,N-디이소프로필에틸아민

DMF N,N-디메틸포름아미드

DMSO 디메틸술폭시드

EtOAc 에틸아세테이트

HATU N-[(디메틸아미노)-1H-1,2,3-트리아졸로-[4,5-b]피리딘-1-일메틸렌]-N-메틸메탄아미늄 헥사플루오로포스페이트 N-옥시드

HBTU N,N,N ',N'-테트라메틸-O-(1H-벤조트리아졸-1-일)우라늄 헥사플루오로포스페이트

HCl 염화수소

HPLC 고성능 액체 크로마토그래피

hr(s) 시간

IPA 이소프로필 알코올

LCMS 액체 크로마토그래피 질량 분광법

LiAlH₄ 리튬 알루미늄 히드라이드

LiOH 수산화리튬

MeCN 아세토니트릴

MgSO₄ 황산마그네슘

min(s) 분

NaBH(OAc)₃ 소듐 트리아세톡시보로히드라이드

NaHCO₃ 중탄산나트륨

Na₂SO₄ 황산나트륨

NMP N-메틸피롤리디논

NMR 핵 자기 공명

tBME tert -부틸 메틸 에테르

THF 테트라히드로푸란

TFA 트리플루오로아세트산

6- 메틸 -3-( 2H -1,2,3- 트리아졸 -2-일)피콜린산 리튬 염 (1:1) ( Int 4, 반응식 1)의 제조

[반응식 1]

2- 메틸 -5-(2 H -1,2,3- 트리아졸 -2-일)피리딘 ( Int 1)의 제조

5-브로모-2-메틸피리딘 (124 g, 720 mmol), 1H-1,2,3-트리아졸 (210 mL, 3600 mmol), Rac-트랜스-N,N'-디메틸시클로헥산-1,2-디아민 (26.0 g, 183 mmol), 구리 분말 (46 g, 720 mmol) 및 탄산칼륨 (200 g, 720 mmol)을 NMP (250 mL)에서 조합하였다. 상기 혼합물을 120℃까지 가열하고, 4시간 동안 교반시켰다. 상기 혼합물을 50 내지 90℃까지 냉각시키고, 물 (600 mL)로 희석시켰다. 그 후, 상기 혼합물을 물 (1900 mL) 및 진한 암모니아 용액 (124 mL)의 교반 혼합물에 첨가하였다. tBME (600 mL)를 첨가하고, 혼합물을 0.5시간 동안 교반시키고, 그 후 tBME (300 mL)로 세척하면서 여과시켰다. 2상 (biphasic) 여과액을 분리하였다. 수성의 것을 tBME (2 x 500 mL)로 추출하고, 유기물을 합하고, 다음 단계에서 직접적으로 사용하였다.

LCMS (방법 A): 1.67분, 161 [M+H]+

2- 메틸 -5-(2H-1,2,3- 트리아졸 -2-일)피리딘 1- 옥시드 ( Int 2)의 제조

Int 1의 tBME 용액에 3-클로로퍼벤조산 (≤77%, 156 g, 670 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 주위 온도에서 하룻밤 교반시켰다. 그 후, 상기 혼합물을 45 내지 50℃까지 가열하였다. 트리에틸아민 (4 mL)을 첨가하고, 혼합물을 15분 동안 교반시켰다. 그 후, 상기 혼합물을 tBME의 첨가에 의해 공비 건조 (azeotropic drying)시켰다. 그 후, 상기 혼합물을 10 내지 20℃까지 냉각시키고, 조 고체 생성물을 여과시키고, tBME (300 mL)로 세척하고, 건조시켰다. 조 생성물을 IPA (680 mL)에서 교반시키고, 가열 환류시켜 용해를 야기하였다. 그 후, 상기 혼합물을 주위 온도까지 냉각시키고, 하룻밤 교반시켰다. 그 후, 상기 혼합물을 대략 5℃까지 냉각시키고, 0.5시간 동안 교반시켰다. 상기 혼합물을 여과시키고, 냉 IPA (95 mL) 및 tBME (160 mL)로 세척하고, 건조시켜 표제 화합물을 고형물로서 생성하였다 (62.5 g).

LCMS (방법 A): 1.56분, 177 [M+H]+

6- 메틸 -3-(2H-1,2,3- 트리아졸 -2-일) 피콜리노니트릴 ( Int 3)의 제조

주위 온도에서 트리메틸실릴 시아나이드 (56.3 g, 568 mmol)를 DCM (250 mL) 중 Int 2 (50.0 g, 284 mmol)에 첨가하였다. 상기 혼합물을 1시간 동안 교반시키고, 그 후 10℃까지 냉각시켰다. 벤조일 클로라이드 (59.8 g, 425 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 40℃까지 가열하고, 하룻밤 교반시켰다. 그 후, 상기 혼합물을 포화 수성 NaHCO₃ (750 mL) 내에 부었다. 트리에틸아민 (7.5 mL)을 첨가하고, 혼합물을 40℃에서 하룻밤 교반시켰다. 수성 상을 분리하고, DCM (100 mL)으로 추출하였다. 합한 유기물을 물 (200 mL)로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 여과시키고, 농축시켜 조 생성물을 제공하였다. 이 물질을 헥산 (504 mL) 및 에틸 아세테이트 (56 mL)에서 하룻밤 교반시켰다. 생성물을 여과시키고, 헥산 (100 mL)으로 세척하고, 건조시켜 표제 화합물을 고형물로서 제공하였다 (48.7 g).

LCMS (방법 A): 1.99분, 186 [M+H]+

6- 메틸 -3-(2H-1,2,3- 트리아졸 -2-일)피콜린산 리튬 염 (1:1) ( Int 4)의 제조

물 (130 mL) 중 수산화리튬 일수화물 (16.5 g, 393 mmol)을 가온 IPA (460 mL) 중 Int 3 (66.1 g, 357 mmol)에 첨가하고, 혼합물을 80℃까지 가열하고, 하룻밤 교반시켰다. 그 후, 상기 혼합물을 IPA의 첨가에 의해 공비 건조시켰다. 생성된 현탁물을 주위 온도에서 하룻밤 교반시켰다. 생성물을 IPA로 세척하면서 여과시키고, 건조시켜 표제 화합물을 고형물로서 생성하였다 (67.8 g).

LCMS (방법 A): 1.42분, 205 [M+H]+

N -[( 2S )-1-아미노프로판-2-일]- N ,6 -디메틸-3-( 2H -1,2,3- 트리아졸 -2-일)피리딘-2-카르복스아미드 ( Int 11, 반응식 2)의 제조

[반응식 2]

( 2S )-1- 메톡시 -1- 옥소프로판 -2- 아미늄 클로라이드 ( Int 5)의 제조

-20℃에서 메탄올 (60 mL) 중 L-알라닌 (5.0 g, 56 mmol)의 용액에 티오닐 클로라이드 (6.1 mL, 84 mmol)를 적가하고, 혼합물을 주위 온도에서 하룻밤 교반시켰다. 용매를 진공에서 제거하였다.　고형물 잔사를 디에틸 에테르로 세척하고, 여과시키고, 진공 하에 건조시켜 표제 화합물을 백색 고형물로서 생성하였다 (7.7 g). 조 생성물을 후속 반응에서 추가의 정제 없이 사용하였다.　　　

1H NMR (500 MHz, d4-MeOH) δ 4.11 (q, 1H), 3.84 (s, 3H), 1.54 (d, 3H).

메틸 ( 2S )-2-(벤질아미노)-3-메틸부타노에이트 (Int 6)의 제조

벤즈알데히드 (2.9 mL, 28 mmol), Int 5 (5.9 g, 42 mmol), 분자 체 (5 g), 및 트리에틸아민 (6.0 mL, 42 mmol)의 혼합물을 주위 온도에서 6시간 동안 교반시켰다. NaBH(OAc)₃ (12 g, 56 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 질소 분위기 하에 주위 온도에서 16시간 동안 교반시켰다. 상기 혼합물을 DCM (100 mL)으로 희석시키고, 포화 수성 NaHCO₃으로 켄칭하고, 상들을 분리하였다. 수성 상을 DCM으로 추출하였다. 합한 유기 상을 물, 염수로 세척하고, MgSO₄로 건조시키고, 여과시키고, 진공에서 농축시켜 표제 화합물을 무색 오일로서 제공하였다 (3.2 g). 조 생성물을 후속 반응에서 추가의 정제 없이 사용하였다.　　　

LCMS (방법 B): 1.33분, 194 [M+H]+

1H NMR (500 MHz, CDCl₃) δ 7.35 - 7.30 (m, 4H), 7.26 (s, 1H), 3.80 (d, 1H), 3.73 (s, 3H), 3.67 (d, 1H), 3.40 (d, 1H), 1.32 (d, 3H).

메틸 ( 2S )-2-[ 벤질(메틸)아미노 ] 프로프로파노에이트 ( Int 7)의 제조

DCE (35 mL) 중 Int 6 (1.5 g, 6.8 mmol)의 용액에 분자 체 (1 g), 포름알데히드 수성 용액 (37%; 1.0 mL, 14 mmol) 및 NaBH(OAc)₃ (3.0 g, 14 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 주위 온도에서 1시간 동안 교반시켰다. 상기 용액을 경사시키고, 포화 수성 NaHCO₃으로 세척하였다. 유기 상을 MgSO₄로 건조시키고, 여과시키고, 진공에서 농축시켜 표제 화합물을 무색 오일로서 생성하였다 (1.3 g). 조 생성물을 후속 반응에서 추가의 정제 없이 사용하였다.　　　

LCMS (방법 B): 1.53분, 208 [M+H]⁺

1H NMR (500 MHz, CDCl₃) δ 7.37 - 7.28 (m, 4H), 7.27 - 7.21 (m, 1H), 3.73 (s, 3H), 3.71 (s, 1H), 3.62 (d, 1H), 3.48 (q, 1H), 2.29 (s, 3H), 1.34 (d, 3H).

( 2S )-2-[벤질(메틸)아미노]프로판-1-올 (Int 8)의 제조

무수 THF (12 mL) 중 Int 7 (1.3 g, 5.9 mmol)의 빙냉 용액에 LiAlH₄ (THF 중 1 M 용액; 12 mL, 12 mmol)를 적가하고, 혼합물을 빙조에서 2시간 동안 교반시켰다. 상기 혼합물을 디에틸 에테르로 희석시키고, 물 (0.45 mL), 이어서 2 M 수성 NaOH (0.45 mL) 및 물 (1.5 mL)의 순차적 첨가에 의해 켄칭하였다. 상들을 분리하고, 유기 상을 MgSO₄로 건조시키고, 여과시키고, 진공에서 농축시켜 표제 화합물을 무색 오일로서 제공하였다 (1.0 g). 조 생성물을 후속 반응에서 추가의 정제 없이 사용하였다.

LCMS (방법 B): 1.37분, 180 [M+H]⁺

1H NMR (500 MHz, CDCl₃) δ 7.35 - 7.28 (m, 4H), 7.28 - 7.23 (m, 1H), 3.68 (d, 1H), 3.46 (d, 1H), 3.44 - 3.35 (m, 2H), 2.98 (dt, 1H), 2.15 (s, 3H), 0.93 (d, 3H).

tert -부틸 N -[( 2S )-2-[ 벤질(메틸)아미노 ]프로필] 카르바메이트 ( Int 9)의 제조

무수 THF (20 mL) 중 Int 8 (0.61 g, 3.1 mmol), 에틸 2-{[(tert-부톡시)카르보닐]아미노}-2-옥소아세테이트 (630 μl, 3.1 mmol) 및 트리페닐포스핀 (0.88 g, 3.4 mmol)의 혼합물을 -10℃까지 냉각시키고, DEAD (0.48 mL, 3.1 mmol)로 처리하였다 (적가에 의해). 　상기 혼합물을 주위 온도에서 하룻밤 교반시켰다. 용매를 진공에서 제거하였다. 잔사를 염수 / 물 (1:1, 20 mL)에 붓고, 디에틸 에테르로 추출하였다. 합한 유기 상을 진공에서 농축시켰다. 잔사를 THF (10 mL)에 용해시키고, LiOH (0.32 g, 13 mmol) 및 물 (10 mL)을 첨가하고, 혼합물을 주위 온도에서 2시간 동안 교반시켰다. 용매를 진공에서 제거하였다. 잔사를 물 (50 mL)에 붓고, 디에틸 에테르로 추출하였다. 합한 유기 상을 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 바이오테이지 아이솔레라 포 (Biotage Isolera Four)™에서의 크로마토그래피 (25 g의 컬럼, 0%에서 100%까지의 헵탄 중 EtOAc)에 의해 정제하여 표제 화합물을 무색 오일로서 생성하였다 (0.57 g).

LCMS (방법 B): 1.88분, 279 [M+H]⁺

1H NMR (500 MHz, CDCl₃) δ 7.31 (d, 4H), 7.26 - 7.22 (m, 1H), 3.62 (d, 1H), 3.43 (d, 1H), 3.27 - 3.17 (m, 1H), 3.01 - 2.93 (m, 1H), 2.89-2.80 (m, 1H), 2.13 (s, 3H), 1.45 (s, 9H), 0.97 (d, 3H).

tert -부틸 N -[( 2S )-2-( 메틸아미노 )프로필] 카르바메이트 ( Int 10)의 제조

메탄올 (40 mL) 중 Int 9 (0.57 g, 1.6 mmol)의 용액을 H-큐브 (Cube)® 시스템에서의 펄만 촉매 (Pearlman's catalyst) 카트리지에 2회 통과시켰다 (1 mL/분의 유량, 20 bar의 수소 압력에서, 주위 온도에서). 상기 혼합물을 진공에서 농축시켜 표제 화합물을 무색 오일로서 생성하였다 (0.4 g). 조 생성물을 후속 반응에서 추가의 정제 없이 사용하였다.　　　

1H NMR (500 MHz, CDCl₃) δ 3.72 (d, 1H), 3.47 (d, 1H), 3.45 (s, 3H), 3.33 - 3.25 (m, 1H), 1.42 (s, 9H), 1.38 (d, 3H).

N -[( 2S )-1-아미노프로판-2-일]- N ,6 -디메틸-3-( 2H -1,2,3- 트리아졸 -2-일)피리딘-2-카르복스아미드 ( Int 11)의 제조

무수 DMF (7 mL) 중 Int 10 (0.40 g, 1.6 mmol), Int 4 (0.39 g, 1.9 mmol) 및 DIPEA (0.83 mL, 4.8 mmol)의 용액에 HATU (0.73 g, 1.9 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 주위 온도에서 16시간 동안 교반시켰다. 상기 혼합물을 물 (30 mL)에 붓고, EtOAc로 추출하였다. 합한 유기 상을 MgSO₄로 건조시키고, 여과시키고, 진공에서 농축시켰다. 조 중간체를 바이오테이지 아이솔레라 포™에서의 크로마토그래피 (25 g의 컬럼, 0%에서 100%까지의 헵탄 중 EtOAc)에 의해 정제하였다. 생성된 중간체를 HCl (디옥산 중 4 M; 10 mL, 40 mmol)에 용해시키고, 주위 온도에서 1시간 동안 교반시켰다. 용매를 진공에서 제거하였다. 2 M 수성 수산화나트륨을 첨가하고, 혼합물을 EtOAc로 추출하였다. 합한 유기 상을 MgSO₄로 건조시키고, 여과시키고, 진공에서 농축시켜 표제 화합물을 황색 유리로서 생성하였다 (0.37 g). 조 생성물을 후속 반응에서 추가의 정제 없이 사용하였다.　　　

LCMS (방법 B): 1.19분, 275 [M+H]⁺

1H NMR (500 MHz, d6-DMSO) δ 8.24 (dd, 1H), 8.12 (d, 2H), 7.54 - 7.51 (m, 1H), 3.68 - 3.61 (m, 1H), 2.82 (s, 1H), 2.69 (s, 6H), 2.65 (s, 1H), 2.56 (d, 3H).

N ,6 -디메틸-3-( 2H -1,2,3- 트리아졸 -2-일)- N -[(2S)-1-{[5-( 트리플루오로 메틸 )피라진-2-일]아미노}프로판-2-일]피리딘-2-카르복스아미드의 제조 ( 실시예 1, 반응식 3)

[반응식 3]

THF (2 mL) 중 Int 11 (0.58 g, 2.1 mmol)의 교반 용액에 DIPEA (1.0 mL, 5.8 mmol), 이어서 2-클로로-5-(트리플루오로메틸)피라진 (0.39 g, 2.1 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 70℃에서 4시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 주위 온도까지 냉각시키고, 주말에 걸쳐 정치시켰다. 반응 혼합물을 교반하면서 추가 4시간 동안 70℃에서 가열하고, 주위 온도까지 냉각시켰다. 반응 혼합물을 진공에서 증발시켰다. 잔사를 분취용 HPLC (컬럼: 워터스 엑스브리지 (Xbridge) C18 (10 μm, 30 x 100 mm). 조건: 물 + 0.2% 수산화암모늄 [용출제 A]; MeCN + 0.2% 수산화암모늄 [용출제 B]. 구배: 10%에서 95%까지의 B)에 의해 정제하고, 그 후 동결건조시켜 표제 화합물을 백색 고형물로서 제공하였다 (0.32 g).

LCMS (방법 C): 4.20 및 4.39분에서 2개의 피크, 421 [M+H]⁺　　

1H NMR (500 MHz, d4-MeOH) δ 8.38 (d, 0.15 H), 8.34 (bs, 0.15 H), 8.24 (d, 0.85 H), 8.03 (bs, 0.85 H), 7.99 (s, 0.30 H), 7.97 (s, 1.70 H), 7.85 (bs, 1.00 H), 7.57 (d, 0.15 H), 7.41 (d, 0.85 H), 4.98 (m, 0.15 H), 4.06 (bm, 0.85 H), 3.50 (d, 0.15 H), 3.47 (d, 0.85 H), 3.42 (d, 0.85 H), 3.39 (d, 0.15 H), 3.05 (s, 2.55 H), 2.83 (s, 0.45 H), 2.65 (s, 0.45 H), 2.45 (bs, 2.55 H), 1.38 (d, 0.45 H), 1.07 (bs, 2.55 H).

N ,6 -디메틸-3-( 2H -1,2,3- 트리아졸 -2-일)- N -[( 2S )-1-{[5-( 트리플루오로 메틸 )피리미딘-2-일]아미노}프로판-2-일]피리딘-2-카르복스아미드 ( 실시예 2, 반응식 4)의 제조

[반응식 4]

THF (10 mL) 중 Int 11 (0.72 g, 2.5 mmol)의 교반 현탁물에 2-클로로-5-(트리플루오로메틸)피리미딘 (0.69 g, 3.8 mmol), 이어서 DIPEA (860 μl, 5.1 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 주위 온도에서 2시간 동안, 그리고 그 후 30℃에서 추가 3시간 동안 교반시키고, 그 후 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 DMSO (9 mL)에서 용해시키고, 분취용 HPLC (컬럼: 워터스 선파이어 (Sunfire) C18 (10 μm, 30 x 100 mm). 조건: 물 + 0.1% 포름산 [용출제 A]; MeCN + 0.1% 포름산 [용출제 B]. 구배: 10%에서 95%까지의 B)에 의해 정제하였다. 생성물을 물 (10 mL) 및 아세토니트릴 (2 mL)로부터 동결건조시켜 표제 생성물을 백색 고형물로서 제공하였다 (0.51 g). EtOAc (2 mL)를 상기 고형물에 첨가하고, 교반하면서 80℃에서 가열하였다. 헵탄 (6 mL)을 이 환류 용액에 서서히 첨가하고, 교반하면서 주위 온도까지 냉각시켰다 (2시간에 걸쳐). 백색 고형물을 여과시키고, 헵탄 (2 mL) 중 EtOAc의 20% 용액으로 세척하고, 건조시켜 표제 화합물을 백색 고형물로서 제공하였다 (0.42 g).

LCMS (방법 C): 3.07 및 3.18분에서 2개의 피크, 421 [M+H]+　　

1H NMR (500 MHz, CDCl₃) δ 8.50 (bd, 0.60 H), 8.46 (s, 1.40 H), 8.26 (d, 0.30 H), 8.17 (d, 0.70 H), 8.07 (s, 1.00 H), 7.93 (bs, 1.40 H), 7.87 (bs, 0.60 H), 7.32 (d, 0.70 H), 7.30 (d, 0.30 H), 5.11 (bm, 0.30 H), 4.13 (m, 0.70 H), 3.82 (m, 0.30 H), 3.64 (m, 0.70 H), 3.54 (m, 0.30 H), 3.29 (dt, 0.70 H), 2.98 (s, 2.10 H), 2.80 (s, 0.90 H), 2.66 (s, 2.10 H), 2.61 (s, 0.90 H), 1.36 (m, 3.00 H).

실시예 1의 대안적인 제조 방법

(2 S )- N ² - 메틸 - N ¹ -(5-( 트리플루오로메틸 ) 피라진 -2-일)프로판-1,2- 디아민 1,3,5-벤젠트리카르복실산 염 ( Int 15, 반응식 5)의 제조

[반응식 5]

(2 S )-2-(벤질(메틸)아미노)프로판아미드 (Int 12)의 제조

에탄올 (7000 mL) 중 (S)-2-아미노프로판아미드 히드로클로라이드 (1000 g, 8028 mmol)의 교반 현탁물에 수산화나트륨 (321 g, 8028 mmol), 이어서 물 (2000 mL) 및 벤즈알데히드 (854 mL, 8429 mmol)를 첨가하였다. 5%의 탄소 상의 팔라듐 (J-M 타입 58, 150 g)을 에탄올 (500 mL) 중 슬러리로서 첨가하고, 추가 에탄올 (500 mL)을 이용하여 세척하였다. 상기 혼합물을 3 내지 3.5 bar의 압력의 수소 분위기 하에 24시간 동안 격렬하게 교반시켰다. 파라포름알데히드 (603 g, 2014 mmol), 이어서 5%의 탄소 상의 팔라듐 (J-M 타입 58, 50 g)을 첨가하고, 혼합물을 3 내지 3.5 bar의 압력의 수소 분위기 하에 17시간 동안 격렬하게 교반시켰다. 반응 혼합물을 셀라이트 패드를 통하여 여과시키고, 에탄올 (2 x 2000 mL)로 세척하였다. 여과액을 2000 mL의 대략적인 부피까지 농축시키고, 농축된 용액을 물 (20000 mL)과 tBME (20000 mL) 사이에 분배시켰다. 유기 상을 수집하고, 수성의 것을 추가의 tBME (10000 mL)로 추출하였다. 유기물을 합하고, 대략 3000 mL의 부피까지 농축시키고, 헵탄 (12000 mL)으로 처리하였다. 상기 혼합물을 70℃까지 가열하고, 용액이 투명해질 때까지 tBME (2000 mL)를 일부씩 첨가하였다. 상기 용액을 냉각시키고 정치시켰다 (0 내지 5℃에서 20시간 동안). 생성된 고형물을 여과에 의해 수집하고, 냉 헵탄 (5000 mL)으로 세척하여 표제 화합물 (835 g)을 생성하였다.

1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 7.35 - 7.31 (m, 4H), 7.27 - 7.23 (m, 1H), 3.60 (s, 2H), 3.24 (q, 1H), 2.20 (s, 3H), 1.27 (d, 3H).

(2 S )- N ² - 벤질 - N ² - 메틸프로판 -1,2- 디아민 D-타르타르산 염 ( Int 13)의 제조

질소 하에 0℃에서 무수 THF (6400 mL) 중 Int 12 (800 g, 4161 mmol)의 교반 용액에 LiAlH₄ (THF 중 1 M; 6242 mL, 6242 mmol)를 첨가하였다 (첨가 동안 반응 혼합물을 15℃ 미만의 온도에서 유지하면서). 상기 반응 혼합물을 30℃까지 가온시키고, 24시간 동안 교반시킨 후 0℃까지 냉각시켰다. 물 (224 mL), 이어서 물 (224 mL) 중 수산화나트륨의 15% 용액, 그리고 그 후 물 (672 mL)을 조심스럽게 첨가하였다 (반응 혼합물을 15℃ 미만의 온도에서 유지하면서). 상기 반응 혼합물을 주위 온도까지 가온하고, tBME (2000 mL)를 첨가하고, 1시간 동안 교반시킨 후, 혼합물을 THF (2x1600 mL)로 세척하면서 셀라이트 패드를 통하여 여과시켰다. 여과액을 대략 2400 mL의 부피까지 농축시키고, 그 후 THF (13600 mL)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 55℃까지 가열하고, 메탄올 (2000 mL) 중 D-타르타르산 (625 g, 4100 mmol)의 용액을 첨가하였다. 생성된 현탁물을 60 내지 65℃에서 3시간 동안 교반시키고, 그 후 주위 온도까지 냉각시키고, 추가 10시간 동안 교반시켰다. 생성된 고형물을 여과에 의해 수집하고, THF (2 x 6400 mL)로 세척하여 표제 화합물을 고형물로서 생성하였다 (1068 g).

1H NMR (500 MHz, d6-DMSO) δ 7.39 (d, 2H), 7.33 (t, 2H), 7.24 (t, 1H), 3.88 (s, 2H), 3.60 (d, 1H), 3.48 (d, 1H), 3.02 - 2.98 (m, 1H), 2.90 - 2.85 (m, 1H), 2.78 - 2.75 (m, 1H), 2.01 (s, 3H), 0.95 (d, 3H).

(2 S )- N ² - 메틸 - N ¹ -(5-( 트리플루오로메틸 ) 피라진 -2-일)프로판-1,2- 디아민 (Int 14)의 제조

탄산칼륨 (1326 g, 9593 mmol)을 함유하는 물 (7000 mL) 및 tBME (6000 mL)의 교반 혼합물에 Int 13 (1050 g, 3198 mmol) 및 물 (1400 mL), 이어서 2-클로로-5-(트리플루오로메틸)피라진 (584 g, 3198 mmol) 및 tBME (2400 mL)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 50℃까지 가열하고, 24시간 동안 격렬하게 교반시키고, 그 후 주위 온도까지 냉각시켰다. 유기 상을 분리하고, 물 (4200 mL)로 세척하였다. 에탄올 (3000 mL)을 상기 유기물에 첨가하고, 용액을 대략 3000 mL의 부피까지 농축시켰다. 이 공정을 에탄올 (2100 mL 및 5200 mL)을 이용하여 2회 더 반복하고, 생성된 농축된 용액을 에탄올 (1000 mL) 중 슬러리로서의 10%의 탄소 상의 팔라듐 (J-M 타입 487, 260 g)으로 처리하고, 이를 추가의 에탄올 (6500 mL)을 이용하여 세척하였다. 상기 혼합물을 3 내지 3.5 bar의 압력의 수소 분위기 하에 40℃의 온도에서 16시간 동안 격렬하게 교반시켰다. 그 후 상기 용액을 주위 온도까지 냉각시키고, 에탄올 (2100 mL)로 세척하면서 셀라이트 패드를 통하여 여과시키고, 여과액을 건조 상태까지 농축시켜 표제 화합물을 오일로서 생성하였다 (684 g).

1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.29 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 3.52 (dd, 1H), 3.43 (dd, 1H), 2.96 - 2.90 (m, 1H), 2.44 (s, 3H), 1.16 (d, 3H).

(2 S )- N ² - 메틸 - N ¹ -(5-( 트리플루오로메틸 ) 피라진 -2-일)프로판-1,2- 디아민 1,3,5-벤젠트리카르복실산 염 ( Int 15)의 제조

50℃에서 에탄올 (1600 mL) 중 벤젠-1,3,5-트리카르복실산 (71 g, 342 mmol)의 교반 용액에 에탄올 (800 mL) 중 Int 14 (80 g, 342 mmol)의 용액을 첨가하였다. 생성된 용액을 65 내지 70℃까지 가온시키고, 그 후 이 온도에서 3시간 동안, 그리고 주위 온도에서 16시간 동안 교반시켰다. 상기 혼합물을 대략 800 mL의 부피까지 농축시키고, tBME (2000 mL)를 첨가하고, 생성된 현탁물을 16시간 동안 격렬하게 교반시켰다. 고형물을 여과에 의해 수집하고, tBME (2x800 mL)로 세척하여 표제 화합물을 고형물로서 생성하였다 (123 g).

1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.78 (s, 3H), 8.34 (s, 1H), 8.05 (s, 1H), 3.81 (dd, 1H), 3.69 (dd, 1H), 3.57 - 3.49 (m, 1H), 2.76 (s, 3H), 1.39 (d, 3H).

(2 S )- N ² - 메틸 - N ¹ -(5-( 트리플루오로메틸 ) 피라진 -2-일)프로판-1,2- 디아민 (Int 14, 반응식 6)의 제조

[반응식 6]

EtOAc (50 mL) 중 Int 15 (10.6 g, 23.8 mmol)의 백색 교반 현탁물에 물 (75 mL) 중 탄산칼륨 (9.9 g, 71 mmol)의 용액을 첨가하였다. 생성된 2상 혼합물을 주위 온도에서 3시간 동안 격렬하게 교반시켰다. 유기 상을 수집하고, 수성의 것을 EtOAc (2x50 mL)로 세척하였다. 합한 유기 추출물을 건조 상태까지 농축시켜 표제 화합물을 오일로서 생성하였다 (4.69 g).

2-메틸-5-(2 H -1,2,3-트리아졸-2-일)피리딘 (Int 1, 반응식 1)의 제조

0.5 당량의 구리 분말을 이용하는 것을 제외하고는 반응식 1에서 설명한 방법을 이용하여 Int 1을 제조할 수 있다.

2 당량의 탄산칼륨을 이용하는 것을 제외하고는 반응식 1에서 설명한 방법을 이용하여 Int 1을 제조할 수 있다.

N ,6 -디메틸-3-( 2H -1,2,3- 트리아졸 -2-일)- N -[(2 S )-1-{[5-( 트리플루오로 메틸 )피라진-2-일]아미노}프로판-2-일]피리딘-2-카르복스아미드 ( 실시예 1, 반응식 7)의 제조

[반응식 7]

질소 분위기 하에 EtOAc (4200 mL) 중 Int 4 (420 g, 1999 mmol)의 교반 현탁물에 티오닐 클로라이드 (438 mL, 5997 mmol)를 5분에 걸쳐 첨가하였다.

상기 반응물의 온도를 65℃까지 증가시키고, 혼합물을 이 온도에서 3시간 동안 교반시켰다. 추가의 티오닐 클로라이드 (73 mL, 999 mmol)를 첨가하고, 교반을 1시간 동안 계속하였다. 추가의 티오닐 클로라이드 (73 mL, 1000 mmol)를 첨가하고, 반응물을 70℃에서 1시간 동안, 그리고 그 후 주위 온도에서 16시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 건조 상태까지 농축시키고, EtOAc (4200 mL)를 첨가하고, 이 공정을 반복하였다. 잔사를 EtOAc (8000 mL)로 처리하고, 0 내지 5℃까지 냉각시켰다 (질소 하에). EtOAc (800 mL) 중 트리에틸아민 (557 mL, 3998 mmol)의 용액을 적가하고, 이어서 EtOAc (3200 mL) 중 Int 14 (468 g, 1999 mmol)의 용액을 일부씩 첨가하였다 (반응물 온도를 0℃에서 유지하면서). 상기 반응물을 주위 온도까지 가온하고, 16시간 동안 교반시켰다. 물 (6300 mL)을 첨가하고, 2상 혼합물을 셀라이트 패드를 통하여 여과시켰다. 유기 상을 수집하고, 포화 NaHCO₃ 수용액 (6300 mL) 및 물 (3000 mL)로 세척하였다. 차콜 (43 g)을 상기 유기 추출물에 첨가하고, 생성된 흑색 현탁물을 50℃에서 24시간 동안 교반시켰다. 차콜을 셀라이트 패드를 통한 여과에 의해 제거하고, 여과액을 대략 2100 mL의 부피까지 농축시켰다. 농축된 용액을 EtOAc (2100 mL), 물 (1100 mL) 및 헵탄 (11000 mL)으로 처리하고, 생성된 현탁물을 70℃까지 가열하였다. 완전한 용해가 달성될 때까지 추가의 EtOAc (1600 mL)를 첨가하였다. 상기 반응물을 주위 온도까지 냉각시키고, 16시간 동안 교반시켰다. 생성된 침전물을 여과에 의해 수집하고, 헵탄 (4200 mL)으로 2회 세척하고, 건조시켜 표제 화합물을 고형물 (480 g)로서 생성하였다.

생물학적 분석법

오렉신 수용체에 대한 길항 작용을 하기 절차 중 적어도 하나를 이용하여 각각의 실시예 화합물에 대하여 측정하였다. 길항 작용은 pIC₅₀으로 보고되며, 여기서, pIC₅₀ = -log₁₀(IC₅₀)이고, IC₅₀은 작용제 응답의 50%를 억제하는 데 필요한 실시예 화합물의 농도이다. 이러한 값은 일일 세포 분석 성능에 따라 변동될 수 있다. 이러한 종류의 변동은 당업자에게 공지되어 있다. 모든 보고된 값은 적어도 4회의 반복 실험의 결과이다. Ox2 값을 단지 용량 응답 곡선으로부터 보고하는데, 이것에 있어서 최고 농도는 적어도 10 μM이다.

Ox1 및 Ox2 길항제의 FLIPR 분석:

테스트 화합물을 DMSO 중 20 mM 스톡 용액으로 제조하고, 그 후, DMSO를 이용하여 반치 로그 농도로 연속 희석시키고, 이어서 20 mM HEPES (깁코 (Gibco), 15630-56), 2,5 mM 프로베네시드; 0.1% (w/v) 플루로닉 (pluronic) F127 (시그마 (Sigma), P2443)를 함유하며 pH 7.4까지 조정된 분석 완충액 (HBSS 깁코, 14065-049)을 이용하여, 주어진 인간 OX 수용체에서의 효력에 따라 1 μM 또는 10 μM의 최고 최종 분석 농도까지 희석시킨다.

인간 OX₁ 또는 인간 OX₂ 수용체 발현 CHO 세포를 성장 배지 75 μL당 10,000개의 세포의 접종 밀도로 384웰 블랙, 투명 기저부, 셀바인드 (CellBIND) 플레이트에 도말한다. 접종된 플레이트를 5% CO₂가 보충된 공기 중에서 37℃에서 하룻밤 인큐베이션한다.

다음 날, 배지를 제거하고, 웰당 30 μL의 세포 로딩 완충액 (칼슘 5의 바이알을 20 mL의 분석 완충액에 가용화시킴)으로 바꾸고, 세포를 37℃에서 1시간 동안 인큐베이션한다. 연속 희석한 테스트 화합물 (10 μL/웰)을 FLIPR 테트라 (Tetra)에 의해 상기 세포 플레이트에 첨가하고, 상기 첨가를 기기에 의해 5분 동안 모니터링하였다. 그 후, 상기 세포 플레이트를 꺼내고, 가습 인큐베이터에서 37℃에서 추가 25분 동안 인큐베이션한 후 FLIPR 테트라에 다시 넣는다. 마지막으로, 분석 완충액 + 0.1% (w/v) 소 혈청 알부민 중 오렉신 A 10 μL를 분석일에 각각의 수용체에 대하여 결정된 EC₇₅ 농도로 FLIPR 테트라에 의해 분배한다. 형광을 각각 485 nm 및 525 nm의 여기 및 방사 파장에서 측정하고, 데이터를 오렉신 A의 EC₇₅ 값을 위해서는 그래프패드 프리즘 (GraphPad Prism)을 이용하여, 그리고 각각의 테스트 화합물의 pIC₅₀ 값의 결정을 위해서는 에이플러스 (Aplus)를 이용하여 분석한다. 확립된 QC 기준 (z'값 및 약리학적 기준 화합물의 효력)을 적용하여, 플레이트를 데이터베이스 업로드용으로 승인된 것 또는 불합격된 것으로 선언한다.

모든 보고된 값은 적어도 4회의 반복의 결과이다.

Ox2 값을 단지 용량 응답 곡선으로부터 보고하는데, 이것에 있어서 최고 농도는 적어도 10 μM이다.

오렉신 1 수용체 방사성 리간드 결합 분석:

인간 OX₁ 수용체 발현 CHO 세포주로부터 세포막을 준비하였다. 수확된 세포 펠렛을 빙냉 완충제 (15 mM 트리스HCl (pH 7.5), 2 mM MgCl₂, 0.3 mM EDTA, 1 mM EGTA, 시그마 프로테아제 억제제 칵테일)에서 균질화하고, 4℃에서 41,000 g에서 20분 동안 원심분리하였다. 상청액을 버린 후, 펠렛을 전술한 완충제에 재현탁시키고, 이어서 균질화하고, 추가로 원심분리하였다. 수득된 펠렛을 75 mM 트리스HCl (pH 7.5), 12.5 mM MgCl₂, 0.3 mM EDTA, 1 mM EGTA, 250 mM 수크로스 및 프로테아제 억제제 칵테일 (시그마)을 함유하는 빙냉 완충제에 재현탁시켰다. BSA를 표준물로서 사용하여, 피어스 프로테인 어세이 키트 (Pierce Protein Assay Kit)를 이용하여 단백질을 정량화한 후, 막 균질물을 분취하고, 80℃에서 냉동시켰다 (추가 사용할 때까지).

Ox1 수용체의 발현 수준 (Bmax)을 포화 결합에 의해 결정하고, 방사성 리간드 [³H]SB674042의 Kd를 회합 및 해리 동특성에 의해 결정하였다. 데이터를 방사성 리간드 결합 분석을 사용하여 그래프 패드 프리즘을 이용하여 정교하게 만들었다. 정상 상태 결합은 실온에서의 90분의 인큐베이션 후 도달하였다.

경쟁 결합 실험에서, 1 nM의 [3H]-SB674042를 200 μl의 전체 분석 부피의, 결합 완충제 (25 mM HEPES pH7.3, 1 mM CaCl2, 5 mM MgCl2, 0.1% (w/v) BSA 및 0.02% (w/v) 플루론산) 중 증가하는 농도의 대체 화합물들 및 1.5 μg의 막 단백질과 함께 실온에서 90분 동안 인큐베이션하였다. 0.5% PEI로 사전 침지된 GF/B 필터에서의 빠른 여과에 의해 반응을 중단시켰다. 필터 건조 후, 30 μl/웰의 마이크로신트 (Microscint) 0을 첨가하고, 방사능을 마이크로베타 카운터 (Microbeta counter) (퍼킨-엘머 (Perkin-Elmer))에서 측정하였다. 데이터를 그래프 패드 프리즘을 사용하여 정교하게 만들었다. 일-부위 모델 (one-site model)에 피팅시킨 비-선형 회귀의 분석을 이용하여, 경쟁 결합 실험에서 수득한 50% 억제 농도 (IC50)를 쳉-프루소프 (Cheng-Prusoff) 방정식에 의해 Ki로 환산하였다: Ki=IC50/[1+([L]/Kd)] (여기서, [L]은 리간드 농도이며, Kd는 평형 해리 상수임) (문헌[Cheng and Prusoff, 1973]).

오렉신 2 수용체 방사성 리간드 결합 분석:

인간 Ox2 수용체 발현 CHO 세포주로부터 세포막을 준비하였다. 수확된 세포 펠렛을 빙냉 완충제 (15 mM 트리스HCl (pH 7.4), 2 mM MgCl₂, 0.3 mM EDTA, 1 mM EGTA, 시그마 FAST TM 프로테아제 억제제 칵테일)에서 균질화하고, 4℃에서 45,000 rpm에서 30분 동안 원심분리하였다. 상청액을 버린 후, 펠렛을 전술한 완충제에 재현탁시키고, 이어서 균질화하고, 추가로 원심분리하였다. 수득된 펠렛을 75 mM 트리스HCl (pH 7.5), 12.5 mM MgCl₂, 0.3 mM EDTA, 1 mM EGTA, 250 mM 수크로스 및 시그마 FAST TM 프로테아제 억제제 칵테일을 함유하는 빙냉 완충제에 재현탁시켰다. BSA를 표준물로서 사용하여, 피어스 프로테인 어세이 키트를 이용하여 단백질을 정량화한 후, 막 균질물을 분취하고, 80℃에서 냉동시켰다 (추가 사용할 때까지).

Ox2 수용체의 발현 수준 (Bmax)을 포화 결합에 의해 결정하고, 방사성 리간드 [³H]EMPA의 Kd를 회합 및 해리 동특성에 의해 결정하였다. 데이터를 방사성 리간드 결합 분석을 사용하여 그래프 패드 프리즘을 이용하여 정교하게 만들었다. 정상 상태 결합은 실온에서의 60분의 인큐베이션 후 도달하였다.

경쟁 결합 실험에서, 2 nM의 [3H]-EMPA를 200 μl의 전체 분석 부피의, 결합 완충제 (25 mM HEPES pH7.4, 1 mM CaCl2, 5 mM MgCl2, 0.5% (w/v) BSA 및 0.05% (w/v) 플루론산) 중 증가하는 농도의 대체 화합물들 및 4 μg의 막 단백질과 함께 실온에서 60분 동안 인큐베이션하였다. 0.5% PEI로 사전 침지된 GF/B 필터에서의 빠른 여과에 의해 반응을 중단시켰다. 필터 건조 후, 30 μl/웰의 마이크로신트 0을 첨가하고, 방사능을 마이크로베타 카운터 (퍼킨-엘머)에서 측정하였다. 데이터를 그래프 패드 프리즘을 사용하여 정교하게 만들었다. 일-부위 모델에 피팅시킨 비-선형 회귀의 분석을 이용하여, 경쟁 결합 실험에서 수득한 50% 억제 농도 (IC50)를 쳉-프루소프 방정식에 의해 Ki로 환산하였다: Ki=IC50/[1+([L]/Kd)] (여기서, [L]은 리간드 농도이며, Kd는 평형 해리 상수임) (문헌[Cheng and Prusoff, 1973]).

경쟁 결합의 동특성 ( 모툴스키 및 마한 분석 ( Motulski and Mahan' s analysis):

실시예의 모툴스키 및 마한 특성화를 문헌[Faedo et al., European Journal of Pharmacology 692(2012), p.1-9]에 설명된 바와 같이 수행하였으며, 이때 다음과 같이 변경하였다:

인간 오렉신 1 수용체를 발현하는 막을 1 nM의 [³H] SB674042를 함유하는 인큐베이션 완충제에 상이한 시점들에 첨가함으로써 회합 결합 실험을 개시하였다. 　비-특이적 결합을 10 μM의 SB674042의 존재 하에 측정하였다.　오렉신 수용체에의 방사성 리간드의 회합을 경쟁 테스트 화합물의 존재 하에 동특성 실험에 대하여 설명된 바와 같이 수행하였다. 경쟁 테스트 화합물을 결정된 Ki의 3배, 10배 및 30배에 상응하는 3가지 농도에서 분석하였다. 인간 오렉신 2 수용체의 동역학적 결합 연구에 있어서, 인간 오렉신 2 수용체를 발현하는 막을 1 nM의 [3H] EMPA를 함유하는 완충제에서 인큐베이션하고 비-특이적 결합을 10 μM ACT-078573의 존재 하에 결정한다는 변경을 가지고서 오렉신 1 수용체에 대하여 설명된 방법을 이용하였다.

오렉신 1 수용체의 결과

^a 실시예 1 및 실시예 2의 화합물을 이용한 처음 결과들로부터 수득한 평균 (n=2)

^b 실시예 1의 화합물을 이용하여 수득한 추가 테스트 결과들로부터 수득한 평균 (n=3)

^c 실시예 1의 화합물을 이용하여 수득한 모든 결과들의 평균 (n=5)

^d 실시예 2의 화합물을 이용하여 수득한 추가 테스트 결과 (n=1)

^e 실시예 2의 화합물을 이용하여 수득한 모든 결과들의 평균 (n=3)

오렉신 2 수용체의 결과

오렉신-2 수용체 연구의 결과는 상기 둘 다의 실시예 화합물에 있어서 3회 연구 (n=3)로부터의 결과들의 평균이다.

참고 문헌:

Claims

N,6-디메틸-3-(2H-1,2,3-트리아졸-2-일)-N-[(2S)-1-{[5-(트리플루오로메틸)피라진-2-일]아미노}프로판-2-일]피리딘-2-카르복스아미드, 및
N,6-디메틸-3-(2H-1,2,3-트리아졸-2-일)-N-[(2S)-1-{[5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일]아미노}프로판-2-일]피리딘-2-카르복스아미드
로부터 선택된 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염 또는 용매화물.
제1항에 있어서, N,6-디메틸-3-(2H-1,2,3-트리아졸-2-일)-N-[(2S)-1-{[5-(트리플루오로메틸)피라진-2-일]아미노}프로판-2-일]피리딘-2-카르복스아미드인 화합물, 또는 이의 제약상 허용가능한 염 또는 용매화물.
제1항에 있어서, N,6-디메틸-3-(2H-1,2,3-트리아졸-2-일)-N-[(2S)-1-{[5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일]아미노}프로판-2-일]피리딘-2-카르복스아미드인 화합물 또는 이의 제약상 허용가능한 염 또는 용매화물.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 따른 화합물, 또는 이의 제약상 허용가능한 염 또는 용매화물을 포함하며,
정신병적 장애; 인지 장애; 불안 장애; 기분 장애; 중독; 식이 장애; 수면 장애; 주의력 결핍 장애, 자폐 스펙트럼 장애, 레트 증후군 (Rett syndrome), 취약 X 증후군 (Fragile X syndrome), 아스퍼거 증후군 (Asperger syndrome) 및 파괴적 행동 장애로부터 선택된, 일반적으로 유아기, 아동기 또는 청소년기에서 처음 진단되는 장애; 하지 불안 증후군; 통증; 골다공증 및 신경퇴행성 질환으로부터 선택된 질환 또는 장애의 치료에 사용하기 위한 제약 조성물.
제4항에 있어서, 조현병, 정신병 및 조현정동 장애로부터 선택된 정신병적 장애의 치료에 사용하기 위한 제약 조성물.
제4항에 있어서, 치매의 치료에 사용하기 위한 제약 조성물.
제4항에 있어서, 범 불안 장애, 외상 후 스트레스 장애, 공황 장애, 급성 스트레스 장애, 사회 불안 장애, 광장 공포증을 포함하는 공포증, 강박 장애, 발모벽 및 신체 이형 장애로부터 선택된 불안 장애의 치료에 사용하기 위한 제약 조성물.
제4항에 있어서, 우울 장애, 주요 우울 장애, 양극성 장애, 양극성 조병, 및 양극성 우울증으로부터 선택된 기분 장애의 치료에 사용하기 위한 제약 조성물.
제4항에 있어서, 코카인 의존성, 아편제 의존성, 대마초 의존성, 처방약 의존성, 알코올 의존성, 니코틴 의존성, 및 도박 장애로부터 선택된 중독 또는 물질 의존성의 치료에 사용하기 위한 제약 조성물.
제4항에 있어서, 폭식, 신경성 폭식증, 신경성 식욕부진 및 비만으로부터 선택된 식이 장애의 치료에 사용하기 위한 제약 조성물.
제4항에 있어서, 신경병증성 통증, 화학요법 유발성 통증, 및 편두통으로부터 선택된 통증의 치료에 사용하기 위한 제약 조성물.
제4항에 있어서, 파킨슨병 (Parkinson's disease) 또는 알츠하이머병 (Alzheimer's disease)으로부터 선택된 신경퇴행성 질환의 치료에 사용하기 위한 제약 조성물.
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