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KR102501800B1 - 천연물 복합 발효 추출물을 포함하는 항염증, 피부탄력 증진 효능을 갖는 조성물 - Google Patents

천연물 복합 발효 추출물을 포함하는 항염증, 피부탄력 증진 효능을 갖는 조성물 Download PDF

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KR102501800B1
KR102501800B1 KR1020210000628A KR20210000628A KR102501800B1 KR 102501800 B1 KR102501800 B1 KR 102501800B1 KR 1020210000628 A KR1020210000628 A KR 1020210000628A KR 20210000628 A KR20210000628 A KR 20210000628A KR 102501800 B1 KR102501800 B1 KR 102501800B1
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조재훈
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Abstract

천연물 복합 발효 추출물을 포함하는 항염증, 피부탄력 증진 효능을 갖는 조성물에 관한 것이다. 일 양상에 따른 조성물은 녹차, 생강 및 편백 혼합 추출물을 발효시킨 복합 발효 추출물을 유효성분으로 포함하며, 염증 관련 단백질의 발현 억제를 통한 항염증 효과가 우수하고, 피부탄력을 유지시키는 단백질인 엘라스틴을 분해하는 엘라스타제 활성을 효과적으로 억제하여 피부탄력 증진 및 피부주름 개선 효과를 제공할 수 있다.

Description

천연물 복합 발효 추출물을 포함하는 항염증, 피부탄력 증진 효능을 갖는 조성물{A composition with anti-inflammation activity and skin elasticity improvement efficacy comprising mixed ferment extracts of natural products}
천연물 복합 발효 추출물을 포함하는 항염증, 피부탄력 증진 효능을 갖는 조성물에 관한 것이다.
최근 생활습관의 변화, 화학물질에 대한 빈번한 노출, 환경오염의 증가 및 현대인의 정신적 스트레스 등으로 인하여 아토피 피부염과 같은 피부 염증 질환의 발병이 늘어나고 있다. 피부는 물리적 또는 화학적 자극으로부터 신체를 보호하는 물리적 장벽으로서 항상성을 유지하고, 가장 표면층에 해당하는 표피는 외부 환경적 요인에 따라 사이토카인 및 염증성 인자를 생산하여 염증반응과 면역반응을 조절한다. 이러한 피부 염증 질환의 치료에는 면역계 염증반응 조절을 위해 스테로이드 제제가 주로 사용되지만, 사용에 따라 내성이 생기고 피부장벽을 약화시켜 장기간 치료가 어렵고, 혈관을 확장시켜 이차 감염 등의 심각한 부작용이 있다. 이에, 부작용이나 역효과가 없는 천연물을 이용한, 안전하고 효과적인 피부 상태 개선용 제제에 대한 요구가 어느 때보다도 증가하고 있다.
한편, 천연물로부터 유용생리활성 성분을 추출하기 위해서는 유산균 등의 유익 미생물들의 대사작용을 이용한 천연물 발효 공정이 효과적일 수 있다. 발효(fermentation)란, 학문적인 원래의 뜻은 미생물이 탄수화물을 에너지원으로 할 때 그 탄소결합을 끊어서 알코올, 유기산, 탄산가스 등이 생성되는 현상을 말한다. 유산균은 탄수화물 발효를 통해 최종 대사산물로 유산을 생산하는 균으로, 유산균 발효를 통한 천연 추출물 함유 활성 성분 및 생리활성의 증가를 목적으로 다양한 연구가 활발하게 진행되고 있다.
본 발명자들은 천연물인 녹차, 생강 및 편백 복합 추출물을 유산균을 이용하여 발효시키고, 상기 천연물 복합 발효 추출물은 비발효 추출물에 비해 항염 효과가 현저히 높을 뿐만 아니라, 피부탄력을 증진시켜 항염증 용도, 피부탄력 증진 용도 또는 피부주름 개선 용도로 사용할 수 있음을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.
일 양상은 녹차, 생강 및 편백 혼합 추출물을 발효시킨 복합 발효 추출물을 포함하는 피부 상태 개선용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
다른 양상은 녹차, 생강 및 편백 혼합 추출물을 발효시킨 복합 발효 추출물을 포함하는 피부 상태 개선용 식품 조성물을 제공하는 것이다.
또 다른 양상은 녹차, 생강 및 편백 혼합 추출물을 발효시킨 복합 발효 추출물을 포함하는 항염증용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.
이하, 본 발명에 대해 상세히 설명한다.
일 양상은 녹차, 생강 및 편백 혼합 추출물을 발효시킨 복합 발효 추출물을 포함하는 피부 상태 개선용 화장료 조성물을 제공한다.
상기 피부 상태 개선은 항염증, 피부탄력 증진 및 피부주름 개선으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상일 수 있다.
상기 녹차, 생강 및 편백 혼합 추출물을 발효시킨 복합 발효 추출물은 높은 NO 생성 저해능을 보이고, 세포의 염증을 촉진시키는 사이토카인인 TNF-α 및 IL-6의 발현을 감소시켜 항염증 효과가 우수하다. 뿐만 아니라, 엘라스타제(elastase) 활성을 억제하여 피부탄력 및 주름을 효과적으로 예방 또는 개선할 수 있다.
따라서, 상기 복합 발효 추출물을 포함하는 조성물은 항염증, 피부탄력 증진 또는 피부주름 개선용 조성물로 사용될 수 있다.
용어 "항염증"은 염증을 억제하는 작용을 의미하는 것으로, 염증반응의 조절은 대단히 복잡한 것으로 알려져 있는데, 이는 생체 내 복구체계의 증강 및 손상을 감소시키기 위한 것으로 알려져 있다. 그러나 반복되는 조직의 손상이나 재생에 의해 염증반응이 지속되면, 염증관련 세포에서 ROS와 RNS가 과다 생성되고 그 결과로 영구적인 유전자의 변형이 야기된다. 이처럼 ROS와 RNS는 생체 내 여러 가지 세포의 작용을 조절하는 염증 반응과 깊이 관련되어 있다. 주요한 염증성 사이토카인으로는 TNF-α(tumor necrosis factor-α), IL-1(interleukin-1), IL-6 및 IL-8 등이 있다.
일 구체예에서, 일 양상에 따른 조성물은 NO 생성을 억제하고, 염증관련인자인 TNF-α 및 IL-6의 발현을 현저히 억제하여 높은 항염증 활성을 가짐을 확인하였다.
용어 "피부탄력"은 진피층에 존재하는 엘라스틴(elastin)으로 구성된 탄력 섬유에 의해 나타나는 탄성을 말하며, 이러한 탄력 섬유는 고무와 같이 매우 낮은 탄성 계수를 가지고 있어서 작은 힘에 의해서도 쉽게 변형되고, 그 힘이 제거되었을 때는 쉽게 원형으로 되돌아 온다. 또한, 탄력 섬유는 엘라스틴이라는 무정형의 기질에 미원섬유(microfibrils)들이 박혀 있는 형태를 띠고 있으며, 엘라스틴은 라이신에서 유래한 데스모신(desmosine)과 아이소데스모신(isodesmosine)이라는 탄력 섬유에서만 발견되는 아주 독특한 아미노산으로 구성된 단백질이다. 이러한 데스모신과 아이소데스모신 등은 긴 펩타이드 사슬 안에서 가교(cross-links)를 형성하고 있는데, 이러한 구조가 엘라스틴으로 하여금 고무와 같은 성질을 갖게 한다.
용어 "피부탄력 개선"이란 엘라스틴으로 구성된 탄력 섬유가 콜라겐이라고 하는 교원섬유와 함께 존재하는데, 엘라스틴과 콜라겐이 충분히 존재하는 상태에서 피부 탄력이 유지되는 것을 의미한다.
용어 "피부주름"이란 피부가 쇠하여 생긴 잔줄을 의미하는데, 유전자에 의한 원인, 피부 진피에 존재하는 콜라겐과 엘라스틴의 감소, 외부환경 등에 의해 유발될 수 있다.
용어 "피부주름 개선"이란 피부에 주름이 생성되는 것을 억제 또는 저해하거나, 이미 생성된 주름을 완화시키는 것을 의미한다.
녹차용 차나무(학명 Camellia sinensis)는 상록의 활엽관목으로서, 폴리페놀류, 다당류, 비타민 등 다양한 영양 성분들을 함유하고 있을 뿐 아니라 여러 질병의 위험을 경감시키는 효과가 있다고 알려져 있다. 녹차 중에 존재하는 폴리페놀은 녹차의 주요 활성성분으로 주목받고 있으며, 특히 이 중 카테킨류는 체내 활성산소를 제거하는 항산화 효과가 비타민 E의 50배, 비타민 C의 100배나 높은 것으로 알려져 있다.
상기 녹차는 녹차잎, 줄기 및 씨로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상, 바람직하게는 녹차잎을 이용하여 추출물을 제조할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 예를 들어, 녹차잎을 세척 및 건조시킨 것 또는 건조된 녹차잎을 잘게 분쇄하여 분말 형태로 만든 것을 추출에 사용할 수 있다. 상기 녹차잎은 녹차 유효성분의 함량을 증가시킬 수 있도록 100 내지 300℃로 가열하여 덖은 후 건조하고, 잘게 분쇄하여 분말 형태로 만든 것일 수 있다.
생강(학명 Zingiber officinale)은 생강과에 속하는 아열대 및 열대성 다년생 식물로서, 우리나라뿐만 아니라 세계적으로 널리 이용되고 있는 향신료의 하나이다. 생강은 인체에 유익한 여러 가지 성분이 함유되어 있어 차(tea)나 약재로 널리 사용되어오고 있다. 한방에서는 생강의 뿌리줄기 말린 것을 건강(乾薑)이라는 약재로 사용하고 있는데, 소화불량, 구토설사 등에 효과가 있고, 혈액 순환을 촉진하며, 항염증과 진통 효과를 지니고 있다고 알려져 있다.
상기 생강은 세척하여 절편의 형태가 되도록 소정 크기로 절단한 것을 추출에 사용할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 추출에는 절단된 원물뿐만 아니라, 상기 절단한 생강을 압착하여 생강 원액으로 추출한 것을 사용할 수 있다. 생강 원액을 사용하는 경우, 절단된 생강의 압착은 공지의 착즙기를 사용하여 수행될 수 있다.
편백(학명 Chamaecyparis obtusa)은 상록 침엽 교목에 속하고 내한성과 내염성에 약하지만 내공해성에 강한 측백나무과에 속하는 식물이다. 편백은 피톤치드라는 천연 항균물질을 다량 함유하여 알레르기를 포함하는 피부 질환 개선, 항균, 항스트레스, 탈취와 정화 기능 및 면역 기능을 가지는 것으로 알려져 있다.
상기 편백은 편백의 잎, 줄기 및 가지로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상, 바람직하게는 편백잎을 이용하여 추출물을 제조할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 예를 들어, 편백잎을 세척 및 건조시킨 것 또는 건조된 편백잎을 잘게 분쇄하여 분말 형태로 만든 것을 추출에 사용할 수 있다.
상기 녹차, 생강 및 편백 혼합 추출물을 발효시킨 복합 발효 추출물은 녹차, 생강 및 편백 원물을 특정 비율로 혼합하여 혼합 추출물을 제조한 이후, 상기 혼합 추출물을 발효시켜 제조하는 것일 수 있다.
용어 "추출물"은 천연물로부터 분리된 활성성분 즉, 목적하는 활성을 보이는 물질을 의미하며, 물, 유기용매 또는 이들의 혼합용매를 이용하는 추출과정으로 제조될 수 있고, 물, 유기용매 또는 이들의 혼합용매의 추출액, 상기 추출액의 희석액이나 농축액, 상기 추출액을 건조하여 얻어지는 건조물, 상기 추출액의 조정제물이나 정제물, 또는 이들의 혼합물 등, 추출액 자체 및 추출액을 이용하여 형성 가능한 모든 제형을 포함한다. 또한, 상기 추출물은 상기 추출액을 분획한 것도 포함된다.
상기 추출은 열수 추출, 침지 추출, 초임계 추출, 아임계 추출, 환류냉각 추출, 수증기 증류, 고압효소분해, 초음파 추출, 용출, 압착 등의 방법을 사용할 수 있으며, 바람직하게는 초음파 추출 방법을 사용할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 초음파 추출은 녹차, 생강 및 편백 원물을 각 원물의 1-15 중량배의 추출용매(예를 들어, 물, 유기용매 또는 이들의 혼합용매)와 혼합하여 15 내지 25℃에서 30분 내지 3시간 동안 20 내지 30 kHz의 주파수로 저온 초음파 처리하여 수행할 수 있다. 바람직하게는, 상기 저온 초음파 처리는 17 내지 22℃에서 30분 내지 2시간 동안 22 내지 38 kHz의 주파수로 처리하여 수행할 수 있고, 보다 바람직하게는 20℃에서 1시간 동안 25 내지 27 kHz의 주파수로 처리하여 수행할 수 있다. 상기 초음파 추출은 초음파 에너지 변화의 세기를 조절하여 추출시간은 단축하면서도 추출수율을 높일 수 있으며, 원물 변성 및 파괴 가능성을 최소화할 수 있다.
상기 초음파 추출은 바람직하게는 저온 초음파 처리를 1 내지 5회, 바람직하게는 2 내지 4회, 보다 바람직하게는 3회 반복하여 수행하는 것일 수 있다.
용어 "발효"는 미생물이 탄수화물을 에너지원으로 할 때 탄수화물의 탄소결합을 끊어서 알코올, 유기산, 탄산가스 등이 생성되는 현상을 의미한다.
용어 "유산균"은 장에 도달해 젖산을 생성하고 유익균이 증가할 수 있도록 산성으로 변화시켜 주는 살아있는 균을 의미한다. 상기 유산균은, 예를 들어 락토바실러스 플랜타룸(Lactobacillus plantarum), 엔테로코커스 페시움(Enterococcus faecium), 락토바실러스 펜토서스(Lactobacillus pentosus), 락토바실러스 에시도필러스(Lactobacillus acidophilus), 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri), 락토바실러스 부크네리(Lactobacillus buchneri) 및 바실러스 코아귤란스(Bacillus coagulans)로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상일 수 있고, 바람직하게는 락토바실러스 플랜타룸(Lactobacillus plantarum)일 수 있고, 가장 바람직하게는 KCTC 3108로 기탁된 락토바실러스 플랜타룸일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 유산균은 활성화된 균주를 사용할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 상기 균주의 활성화는 활성 배지에 균주를 접종하고 배양하여 수행할 수 있으며, 바람직하게는 식물성 배지에 균주를 접종하고, 37℃에서 24시간 동안 배양할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 일 구체예에서는, 식물성 배지(dextrose 2%, yeast extract 2%)에 접종하여 1.9 x 109 CFU/mL까지 1차 배양 후, 상기 1차 배양액을 식물성 배지(dextrose 2%, yeast extract 2%)접종하여 2차 배양한 락토바실러스 플랜타룸을 발효에 사용하였다.
녹차, 생강 및 편백의 단독 발효 추출물 제조 시에는, 녹차 추출물, 생강 추출물 또는 편백 추출물 총 중량에 대하여 락토바실러스 플랜타룸을 1 중량% 내지 10 중량%, 바람직하게는 2 중량% 내지 6 중량%, 보다 바람직하게는 2.5 중량% 내지 5.5 중량%, 가장 바람직하게는 3 중량% 내지 5 중량%로 접종하여 녹차 단독 발효 추출물, 생강 단독 발효 추출물 또는 편백 단독 발효 추출물을 제조할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
발효 공정은 예를 들어 온도 5℃이상, 6℃이상 또는 7℃이상, 8℃이상, 9℃이상, 또는 10℃이상이고, 55℃이하, 54℃이하, 53℃이하, 52℃이하, 51℃이하, 50℃이하, 49℃이하, 48℃이하, 47℃이하, 46℃이하, 45℃이하, 44℃이하, 43℃이하, 42℃이하, 41℃이하, 40℃이하, 39℃이하, 38℃이하, 37℃이하, 36℃이하 또는 35℃이하, 예컨대, 5℃, 6℃, 7℃, 8℃, 9℃, 10℃, 11℃, 12℃, 13℃, 14℃, 15℃, 16℃, 17℃, 18℃, 19℃, 20℃, 21℃, 22℃, 23℃, 24℃, 25℃, 26℃, 27℃, 28℃, 29℃, 30℃, 31℃, 32℃, 33℃, 34℃, 35℃, 36℃, 37℃, 38℃, 39℃, 40℃, 41℃, 42℃, 43℃, 44℃, 45℃, 46℃, 47℃, 48℃, 49℃, 50℃, 51℃, 52℃, 53℃, 54℃ 또는 55℃, 예컨대 7℃~55℃에서 수행될 수 있고, 바람직하게는 20℃~40℃에서 수행될 수 있고, 보다 바람직하게는 25℃~35℃에서 수행될 수 있다. 온도가 상기 범위를 초과하여 고온이면 유효성분이 파괴될 수 있고, 온도가 상기 범위 미만의 저온이면 반응 시간이 길어지거나 발효가 일어나지 않을 수 있다.
또한, 발효 공정은 예를 들어 15시간 이상, 16시간 이상, 17시간 이상, 18시간 이상, 19시간 이상, 20시간 이상, 21시간 이상, 22시간 이상, 23시간 이상 또는 24시간 이상, 1000시간 이하, 990시간 이하 980시간 이하, 970시간 이하, 960시간 이하, 950시간 이하, 940시간 이하, 930시간 이하, 920시간 이하, 910시간 이하 또는 900시간 이하, 예컨대 15시간 내지 15일 동안 수행할 수 있고, 바람직하게는 20시간 내지 2일 동안 수행할 수 있고, 보다 바람직하게는 24시간 동안 수행할 수 있다.
일 구체예에서는, 락토바실러스 플랜타룸을 녹차 추출물에 대하여 3 중량% 내지 5 중량%, 생강 추출물에 대하여 3 중량% 내지 5 중량%, 편백 추출물에 대하여 3 중량% 내지 5 중량%로 접종하고 30℃에서 24시간 동안 발효시켜 단독 발효 추출물을 제조하였다.
본 명세서에서, 용어 “복합 발효 추출물”은 녹차, 생강 및 편백 원물을 특정 비율로 혼합하여 혼합 추출물을 제조한 이후, 상기 혼합 추출물을 발효시켜 제조한 것을 의미한다.
상기 복합 발효 추출물은 녹차, 생강 및 편백 혼합 추출물 총 중량에 대하여 락토바실러스 플랜타룸을 1 중량% 내지 10 중량%, 바람직하게는 2 중량% 내지 6 중량%, 보다 바람직하게는 2.5 중량% 내지 5.5 중량%, 가장 바람직하게는 3 중량% 내지 5 중량%로 접종하여 제조할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 녹차, 생강 및 편백 원물은 2 내지 4:1.5 내지 2.5:1.5 내지 2.5의 중량비로 혼합되는 것일 수 있고, 바람직하게는 2.5 내지 3.5: 1.5 내지 2.5:1.5 내지 2.5의 중량비로 혼합되는 것일 수 있고, 보다 바람직하게는 3:1:1의 중량비로 혼합되는 것일 수 있다. 일 구체예에서는, 녹차, 생강 및 편백 원물을 3:1:1의 중량비로 혼합하여 복합물(복합물 3)을 제조하고, 상기 복합물을 초음파 추출한 혼합 추출물(복합 추출물 3)에 락토바실러스 플랜타룸을 접종하여 복합 발효 추출물(복합 발효 추출물 3)을 제조하였다. 또한, 단독 발효 추출물과 비교할 때, 상기 복합 발효 추출물의 우수한 항염증 활성, 피부탄력 증진 및 피부주름 개선 효과를 확인하였다.
각 원물의 혼합비가 상기 기재된 범위를 벗어날 경우 각 원물의 혼합에 따른 시너지 효과가 저하되어 항염증 활성, 피부탄력 증진 또는 피부주름 개선 효과가 저하될 수 있다.
상기 녹차, 생강 및 편백 혼합 추출물을 발효시킨 복합 발효 추출물은 전체로서, 화장료 조성물 전체 중량에 대하여 0.001 내지 20중량%으로 포함될 수 있다. 만약 상기 화장료 조성물 총 중량에 대하여 상기 복합 발효 추출물을 0.001중량% 미만으로 포함시킬 경우에는 함량이 적기 때문에 충분한 피부상태 개선 효과를 얻지 못할 수 있고, 20중량%를 초과하는 경우에는 그 이상의 함량을 첨가하지 않아도 충분한 효과를 구현할 수 있기 때문에 비경제적이다.
상기 녹차, 생강 및 편백 혼합 추출물을 발효시킨 복합 발효 추출물을 화장료로 사용하는 경우, 상기 발효 추출물 이외에 통상적인 화장료 베이스 성분들을 포함할 수 있고, 예를 들면, 안정화제, 용해화제, 안료 및 향료와 같은 통상적인 함유제, 그리고 담체를 포함할 수 있다. 또한, 화장료 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 특별히 한정하는 것은 아니지만, 예를 들어, 화장수, 에센스, 로션, 페이스트, 계면활성제 함유 클렌징, 크림, 팩, 젤, 연고, 파우더, 패취 또는 분무제(스프레이)의 제형을 가질 수 있다.
상기 화장료 조성물의 제형이 페이스트, 크림 또는 젤인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 및 산화아연 등으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상이 이용될 수 있고, 제형이 화장수, 에센스인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되며, 예를 들어, 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜, 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌글리콜, 및 소르비탄의 지방산 에스테르 등으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상이 이용될 수 있다.
또한, 상기 화장료 조성물의 제형이 파우더 또는 스프레인 경우에는 담체 성분으로서 락토오스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 및 폴리아미드 파우더 등으로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상이 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진제를 포함할 수 있다. 또한, 상기 화장료 조성물의 제형이 계면활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성유, 라놀린 유도체 및 에톡실화글리세롤지방산 에스테르 등으로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상이 이용될 수 있다.
다른 양상은 녹차, 생강 및 편백 혼합 추출물을 발효시킨 복합 발효 추출물을 포함하는 피부 상태 개선용 식품 조성물을 제공한다.
상기 녹차, 생강 및 편백 혼합 추출물을 발효시킨 복합 발효 추출물을 식품 첨가물로 사용할 경우, 상기 복합 발효 추출물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효성분의 혼합양은 사용 목적(예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 식품 또는 음료의 제조 시에 본 발명의 복합 발효 추출물은 원료에 대하여 15 중량% 이하, 바람직하게는 10 중량% 이하의 양으로 첨가된다. 그러나, 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 범위 이하일 수 있으며, 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 유효성분은 상기 범위 이상의 양으로도 사용될 수 있다.
상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 물질을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소시지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 수프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강식품을 모두 포함한다.
본 발명의 건강음료 조성물은 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 포함할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드, 말토오스, 수크로오스와 같은 디사카라이드, 및 덱스트린, 사이클로덱스트린과 같은 천연 감미제나, 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 ml 당 일반적으로 약 0.01 내지 10 g, 바람직하게는 약 0.01 내지 0.1 g 이다.
상기 외에 본 발명의 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 포함할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 조성물은 천연 과일주스, 과일주스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 포함할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 크게 중요하진 않지만 본 발명의 조성물 100 중량부 당 0.01 내지 0.1 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.
또 다른 양상은 녹차, 생강 및 편백 혼합 추출물을 발효시킨 복합 발효 추출물을 포함하는 항염증용 약학적 조성물을 제공한다.
상기 약학적 조성물은 염증과 관련된 피부 질환을 예방 또는 치료하기 위한 것일 수 있다. 상기 피부 질환은 피부 염증으로 인한 질환일 수 있고, 예를 들어, 피부염, 아토피 피부염, 알레르기성 피부염, 지루성 피부염, 건선, 여드름 등을 포함할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
용어 “예방”은 질병의 발생을 억제하는 것을 포함한다.
용어 “치료”는 질병의 발전의 억제, 경감 또는 제거를 포함한다.
일 구체예에 따른 약학적 조성물은 NO의 생성을 억제하고, 염증관련인자인 TNF-α 및 IL-6의 발현을 억제하여 피부 염증 질환을 예방 또는 치료할 수 있다.
상기 약학적 조성물은, 추가로 약학적으로 허용 가능한 담체를 1종 이상 포함하여 제조할 수 있다. 약학적으로 허용 가능한 담체는 식염수, 멸균수, 링거액, 완충 식염수, 덱스트로오스 용액, 말토덱스트린 용액, 글리세롤, 에탄올 및 이들 성분 중 1 성분 이상을 혼합하여 사용할 수 있으며, 필요에 따라 항산화제, 완충액, 정균제 등 다른 통상의 첨가제를 첨가할 수 있다. 또한, 희석제, 분산제, 계면활성제, 결합제 및 윤활제를 부가적으로 첨가하여 수용액, 현탁액, 유탁액 등과 같은 주사용 제형, 환약, 캡슐, 과립 또는 정제로 제제화할 수 있다. 더 나아가 당 분야의 적정한 방법으로, 각 질환에 따라 또는 성분에 따라 바람직하게 제제화할 수 있다.
상기 약학적 조성물은 녹차, 생강 및 편백 혼합 추출물을 발효시킨 복합 발효 추출물과 함께 항염증 효과를 갖는 공지의 유효성분을 1종 이상 함유할 수 있다.
또 다른 양상은 상기 항염증용 약학적 조성물을 개체에 투여하는 단계를 포함하는 염증을 치료하는 방법을 제공한다.
용어 “투여”는 임의의 적절한 방법으로 개체에게 약학적 조성물을 제공하는 것을 의미한다.
상기 개체는 인간 또는 비-인간을 포함하는 포유류이며, 비-인간 포유류는 마우스, 랫트, 개, 고양이, 말, 소, 양, 염소, 돼지, 토끼 등을 포함하나 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 약학적 조성물은 목적하는 방법에 따라 경구 투여하거나 비경구 투여(예를 들어, 정맥 내, 피하, 복강 내 또는 국소에 적용)할 수 있으며, 투여량은 환자의 체중, 연령, 성별, 건강상태, 식이, 투여시간, 투여방법, 배설율 및 질환의 중증도 등에 따라 그 범위가 다양하다. 상기 조성물의 일일 투여량은 약 0.0001~500 mg/kg, 바람직하게는 약 0.001~300 mg/kg이며, 하루 일회 내지 수회에 나누어 투여하는 것이 바람직하다.
일 양상에 따른 조성물은 녹차, 생강 및 편백 혼합 추출물을 발효시킨 복합 발효 추출물을 유효성분으로 포함하며, 염증 관련 단백질의 발현 억제를 통한 항염증 효과가 우수하고, 피부탄력을 유지시키는 단백질인 엘라스틴을 분해하는 엘라스타제 활성을 효과적으로 억제하여 피부탄력 증진 및 피부주름 개선 효과를 제공할 수 있다. 상기 조성물은 천연물을 이용하여 안전하고, 기존 의약품에 비해 장기간 사용이 용이하여 화장품, 식품 등 다양한 분야에서 유용하게 활용될 수 있다.
도 1 및 2는 단독 추출물의 항염 및 피부탄력 증진 효과를 확인한 결과를 나타낸 도이다.
도 3 및 4는 복합 추출물의 항염 및 피부탄력 증진 효과를 확인한 결과를 나타낸 도이다.
도 5 및 6은 단독 발효 추출물의 항염 및 피부탄력 증진 효과를 확인한 결과를 나타낸 도이다.
도 7 및 8은 복합 발효 추출물의 항염 및 피부탄력 증진 효과를 확인한 결과를 나타낸 도이다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것으로서, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지는 않는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.
제조예 1. 단독 추출물의 제조
녹차잎(제주자원식물연구소) 및 편백잎(자연초)은 물로 세척하여 이물질을 제거한 후 건조하였다. 생강(동광한방몰)은 뿌리줄기 말린 것을 세척 후 건조한 것을 절편 모양으로 잘라 준비하였다. 편백잎, 녹차잎 및 생강 절편을 각각 50g으로 준비하고, 각 원물을 30%(v/v) 부틸렌글리콜 수용액과 1:15의 중량 비율로 혼합하여 소니케이터(sonicator)에 넣은 다음, 25 KHz, 20℃ 조건에서 1시간 동안 3회 초음파 추출하였다. 추출 후 여과지(0.2 um, Millipore membrane filter, 미국)로 여과하여 얻은 단독 추출물을 이후 실험에 사용하였다.
제조예 2. 복합 추출물의 제조
각 원물을 다음과 같은 중량비로 혼합하여 준비하였다:
- 녹차:생강:편백 = 2:1.5:1.5 (복합물 1)
- 녹차:생강:편백 = 2:1:2 (복합물 2)
- 녹차:생강:편백 = 3:1:1 (복합물 3)
상기 원물 혼합물을 30%(v/v) 부틸렌글리콜 수용액과 1:15의 중량 비율로 혼합하여 소니케이터(sonicator)에 넣은 다음, 25 KHz, 20℃ 조건에서 1시간 동안 3회 초음파 추출하였다. 추출 후 여과지(0.2 um, Millipore membrane filter)로 여과하여 얻은 복합 추출물 1 내지 3을 이후 실험에 사용하였다.
제조예 3. 발효 추출물의 제조
3-1. 사용 균주
한국생명공학연구원 미생물자원센터(KCTC)에서 분양 받은 락토바실러스 플랜타룸(Lactobacillus plantarum) KCTC 3108 균주를 사용하였다. 냉장고에 있는 스탁(stock) 균주를 식물성 액체배지(dextrose 2%, yeast extract 2%) 또는 고체배지(dextrose 2%, yeast extract 2%, agar 1.5%)에 접종하여 배양하였다.
고체배지에서 배양한 단일 콜로니를 취하여 식물성 액체배지에 접종하여 37℃에서 24시간 동안 1.9 x 108 CFU/ml까지 1차 배양하였다(pH 3.80). 상기 1차 배양액(100ml)을 식물성 배지에 3%(v/v)로 접종하여 37℃에서 24시간 동안 2차 배양하였다(pH 3.82). 2차 배양이 끝난 후 121℃에서 15분간 멸균시킨 뒤, 여과지(0.2 um, Millipore membrane filter)로 여과하여 이후 실험에 사용하였다.
3-2. 발효 추출물의 제조
상기 제조한 락토바실러스 플랜타룸 배양 여과액을 이용하여, 제조예 1에서 제조한 단독 추출물의 유산균 발효물을 제조하였다. 구체적으로, 상기 락토바실러스 플랜타룸 배양 여과액을 녹차 단독 추출물에 대하여 3 - 5 중량%, 생강 단독 추출물에 대하여 3 - 5 중량%, 편백 단독 추출물에 대하여 3 - 5 중량%로 접종하고 30℃에서 24시간 동안 발효시켰다. 만들어진 각 발효 추출물을 여과지(0.2 um, Millipore membrane filter)로 여과하고, 잡균의 생장을 억제하기 위해 121℃ 이상에서 15분 내지 20분간 동안 가열하여 멸균하였다. 동일한 방법으로, 상기 락토바실러스 플랜타룸 배양 여과액을 제조예 2에서 제조한 복합 추출물 3에 대하여 3-5 중량%로 접종하여 복합 발효 추출물 3을 제조하였다.
실험예 1. 단독 추출물의 항염, 피부상태 개선 효과 확인
상기 제조예 1에서 제조한 단독 추출물의 항염 및 피부상태 개선(피부탄력 증진, 피부주름 개선) 효과를 평가하기 위해, 산화질소(NO) 생성 억제 효과 및 엘라스타제(elastase) 저해 활성을 측정하였다. NO의 양은 안정한 산화 산물인 아질산염의 양을 측정함으로써 확인하였다. 구체적으로, RAW 264.7 세포(1x104 cells/웰)를 96-웰 플레이트에서 12-18 시간 동안 배양한 후, 무혈청 상태에서 1 ㎍/㎖의 LPS를 처리하였다. 이후, 1%(w/v), 5%(w/v) 및 10%(w/v)의 단독 추출물을 함유하는 배지에서 24시간 동안 배양하였고, 세포 배양 상등액 100 ㎕를 새로운 96-웰 플레이트에서 그리스 시약(Sigma-Aldrich Co., St. Louis, MO, USA) 100 ㎕와 혼합한 후, 550 nm에서 흡광도를 측정하였다. 아질산염 농도는 아질산 나트륨 표준 곡선과 비교하여 결정하였다. 양성 대조군으로는 아스코르브산(ascorbic acid)을 사용하였다.
다음으로, 엘라스타제 저해 활성을 측정하기 위해 피부 섬유아세포인 HDF-N 세포에 0.1% triton X-100 이 함유된 0.2M Tris-HCl(pH 8.0)을 첨가한 후 초음파 분쇄기로 균질화시켰다. 이를 3,000rpm에서 20분 동안 원심분리하여 얻은 상층액을 엘라스타제 저해 활성 측정을 위한 시료로 사용하였다. 상기 시료 200 ㎍/ml, 0.2M Tris-HCl 완충액 및 1%(w/v), 5%(w/v) 및 10%(w/v)의 단독 추출물을 농도 별로 각각 혼합한 후, 50 mM N-STANA를 넣고 37℃에서 배양한 후 405 nm에서 흡광도를 측정하였다. 양성 대조군으로는 EGCG(epigallocatechin gallate)를 사용하였다. 그 결과를 도 1 내지 2 및 하기 표 1 내지 2에 나타내었다.
저해율% 1%(w/v) 5%(w/v) 10%(w/v)
녹차 5.2 15.8 31.4
생강 9.8 8.2 9.8
편백 12.7 13.2 26.6
아스코르브산 82.3 - -
저해율% 1%(w/v) 5%(w/v) 10%(w/v)
녹차 38.2 52.8 90.9
생강 - 0.5 3.6
편백 13.4 26.2 51.2
EGCG 95.8 - -
도 1 내지 2, 표 1 내지 2에 나타낸 바와 같이, 녹차, 생강 및 편백 단독 추출물은 농도의존적인 항염 활성을 나타내었고, 녹차 및 편백 단독 추출물은 농도의존적인 엘라스타제 저해 활성을 나타냄을 확인하였다.
실험예 2. 복합 추출물의 항염, 피부상태 개선 효과 확인
상기 제조예 2에서 제조한 복합 추출물의 항염 및 피부상태 개선 효과를 평가하기 위해, 산화질소(NO) 생성 억제 효과 및 엘라스타제(elastase) 저해 활성을 측정하였다. 실험은 상기 실험예 1에 기재한 방법과 동일한 방법으로 수행하였고, 그 결과를 도 3 내지 4 및 하기 표 3 내지 4에 나타내었다.
저해율% 1%(w/v) 5%(w/v) 10%(w/v)
복합 추출물1 5.5 8.3 14.8
복합 추출물2 6.6 10.3 16.2
복합 추출물3 10.2 28.2 35.5
아스코르브산 82.3 - -
저해율% 1%(w/v) 5%(w/v) 10%(w/v)
복합 추출물1 11.6 16.5 30.1
복합 추출물2 19.3 24.8 32.1
복합 추출물3 25.5 40.5 63.9
EGCG 95.8 - -
도 3 내지 4, 표 3 내지 4에 나타낸 바와 같이, 복합 추출물 1 내지 3 모두 농도의존적인 항염 및 엘라스타제 저해 활성을 나타냄을 확인하였다. 특히, 녹차:생강:편백=3:1:1의 중량비로 혼합하여 제조한 복합 추출물 3의 항염 및 엘라스타제 저해 활성이 복합 추출물 1 및 2와 비교할 때 2배 이상의 높은 활성을 보임을 확인하여, 추후 복합 발효 추출물 제조에 사용하였다.
실험예 3. 단독 발효 추출물의 항염, 피부상태 개선 효과 확인
상기 제조예 3-2에서 제조한 단독 발효 추출물의 항염 및 피부상태 개선 효과를 평가하였다. 실험은 상기 실험예 1에 기재한 방법과 동일한 방법으로 수행하였고, 그 결과를 도 5 내지 6 및 하기 표 5 내지 6에 나타내었다.
저해율% 1%(w/v) 5%(w/v) 10%(w/v)
녹차 7.8 28.3 42.6
생강 9.1 19.2 22.9
편백 14.2 16.5 30.2
아스코르브산 84.5 - -
저해율% 1%(w/v) 5%(w/v) 10%(w/v)
녹차 36.3 60.2 75.6
생강 - 6.7 14.0
편백 11.4 58.4 74.2
EGCG 95.5 - -
도 5 내지 6, 표 5 내지 6에 나타낸 바와 같이, 녹차, 생강 및 편백 단독 발효 추출물은 모두 농도의존적인 항염 활성을 나타내었고, 녹차 및 편백 단독 발효 추출물은 농도의존적인 엘라스타제 저해 활성을 나타냄을 확인하였다. 한편, 생강 단독 발효 추출물의 경우 엘라스타제 저해 활성 정도가 미미하였다.
실험예 4. 복합 발효 추출물의 항염, 피부상태 개선 효과 확인
상기 제조예 3-2에서 제조한 복합 발효 추출물 3의 항염 및 피부상태 개선 효과를 평가하였다. 실험은 상기 실험예 1에 기재한 방법과 동일한 방법으로 수행하였고, 그 결과를 도 7 내지 8 및 하기 표 7 내지 8에 나타내었다.
저해율% 1%(w/v) 5%(w/v) 10%(w/v)
복합 발효 추출물 3 23.5 42.1 59.6
아스코르브산 84.5 - -
저해율% 1%(w/v) 5%(w/v) 10%(w/v)
복합 발효 추출물 3 63.7 89.0 92.1
EGCG 95.5 - -
도 7 내지 8, 표 7 내지 8에 나타낸 바와 같이, 복합 발효 추출물 3은 농도의존적인 항염 및 엘라스타제 저해 활성을 나타내며, 단독 발효 추출물에 비해 항염 뿐만 아니라 엘라스타제 저해 활성도 현저히 우수함을 확인하였다.
상기 결과를 통해, 복합 발효 추출물 3은 단독 발효 추출물 중 항염 및 엘라스타제 저해 활성이 가장 우수한 녹차 원물을 가장 높은 비율로 포함하고, 생강 및 편백 원물을 최적 비율로 포함하는(녹차:생강:편백 = 3:1:1) 녹차, 생강 및 편백 혼합 추출물을 발효시켜 제조함으로써, 단독 발효 추출물에 비해 항염 및 엘라스타제 저해 활성이 현저히 증가되어 항염 용도, 피부탄력 증진 및 피부주름 개선 용도로 유용하게 사용할 수 있음을 확인하였다. 뿐만 아니라, 상기 복합 발효 추출물 3은 1%(w/v)의 낮은 농도에서도 현저히 높은 엘라스타제 저해 활성을 나타냄을 확인하였다.
실험예 5. 세포 독성 확인
가장 우수한 항염 및 엘라스타제 저해 활성을 나타낸 복합 발효 추출물 3(이하, 복합 발효 추출물이라 함)에 대하여 추가 실험을 수행하였다. 먼저, 세포 독성을 확인하기 위해, 섬유아세포(HS86)를 10% 소혈청을 첨가한 DMEM(Dulbecco's Modified Eagle's Medium) 배지에 1 x 104개로 접종하고 하루 동안 5% CO2, 37℃에서 배양하였다. 0.1%(w/v), 0.5%(w/v) 및 1%(w/v)의 복합 발효 추출물을 무혈청 배지에 희석하여 처리하였다. 1일간 배양 후 MTT(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5- diphenyltetrazolium bromide) 시약을 처리하고 4시간 동안 더 배양하였다. 형성된 포마르잔 결정(formazan crystal)을 DMSO에 녹인 후 96-웰 플레이트에 200㎕씩 넣고 540 ㎚에서 ELISA plate reader로 흡광도를 측정하였다. 대조군으로는 복합 발효 추출물을 처리하지 않은 배양액을 사용하였다.
[식 1]
세포생존율(%) = 100 - (복합 발효 추출물을 처리한 실험군의 흡광도)/(대조군의 흡광도) X 100
상기 식 1을 사용하여 세포생존율(%)을 계산하고, 대조군의 세포생존율(%)을 100이라고 할 때의 상대적인 세포증식효과를 하기 표 9에 나타내었다.
0.1%(w/v) 0.5%(w/v) 1%(w/v)
복합 발효 추출물 100 100 100
상기 표 9에 나타낸 바와 같이, 일 양상에 따른 복합 발효 추출물은 세포 독성을 보이지 않아, 피부에 안정적으로 사용할 수 있음을 확인하였다.
실험예 6. 염증인자 발현 확인
다음으로, 일 양상에 따른 복합 발효 추출물의 항염 활성을 추가적으로 검증하기 위해 염증인자인 TNF-α 및 IL-6의 발현 억제능을 평가하였다. 구체적으로, 섬유아세포(HS86)를 48-웰 플레이트에 접종하여 24시간 동안 배양하였다. 이후 배지를 교체하고 LPS를 처리한 후, 복합 추출물 3과 복합 발효 추출물을 각각 0.1%(w/v), 0.5%(w/v) 및 1%(w/v)의 농도로 처리한 후 48시간 동안 추가로 배양하였다. 양성대조군으로는 덱사메타손(dexamethasone)을 동일 농도로 처리하였다. 아무 처리도 하지 않은 배양액과 비교하여, 상기 복합 추출물 또는 복합 발효 추출물을 처리한 배양액의 TNF-α 및 IL-6 농도의 상대값을 계산하였다. 상기 TNF-α 및 IL-6의 농도는 ELISA 분석법으로 측정하였다. TNF-α 및 IL-6의 억제율(%)에 대한 결과값을 각각 하기 표 10 및 표 11에 나타내었다.
0.1%(w/v) 0.5%(w/v) 1%(w/v)
복합 추출물 3 28.5 35.4 42.8
복합 발효 추출물 3 68.1 72.6 84.9
덱사메타손 70.5 75.6 79.5
0.1%(w/v) 0.5%(w/v) 1%(w/v)
복합 추출물 3 36.4 40.2 60.1
복합 발효 추출물 3 74.5 76.8 81.2
덱사메타손 69.6 72.3 78.2
상기 표 10 및 표 11에 나타낸 바와 같이, 락토바실러스 플랜타룸으로 발효하지 않은 복합 추출물 3에 비해 복합 발효 추출물이 염증인자인 TNF-α 및 IL-6의 발현을 현저히 감소시키는 것을 확인하였다. 특히, 0.5%(w/v) 이상의 농도에서는 양성대조군인 덱사메타손보다 발현 억제율이 높음을 확인하였다. 상기 결과를 통해, 일 양상에 따른 복합 발효 추출물은 강한 항염증 활성을 가짐을 알 수 있었다.
상기 결과를 통해, 일 양상에 따른 복합 발효 추출물은 NO 생성을 억제하고, TNF-α 및 IL-6의 발현을 현저히 감소시켜 강력한 항염증 효과를 발휘하며, 높은 엘라스타제 저해 활성으로 피부탄력 및 피부주름을 개선할 수 있음을 확인하였다. 또한, 단독 발효 추출물과 복합 발효 추출물 간의 항염 활성, 피부탄력 증진 활성 비교를 통해 상기 효과는 녹차, 생강 및 편백의 최적 혼합비 및 유산균 발효에 따른 상승적 효과에 따른 것임을 알 수 있었다. 따라서, 일 양상에 따른 복합 발효 추출물은 피부 염증을 비롯한 염증성 질환의 예방, 개선 또는 치료를 위한 식품, 화장품 및 의약품 등에 다양하게 활용될 수 있고, 우수한 피부 보습 효과를 제공할 수 있다.
이하, 제형예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 제형예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것으로서, 본 발명의 범위가 제형예에 의해 제한되는 것으로 해석되지 않는다.
제형예 1. 보습 크림의 제조
일 양상에 따른 복합 발효 추출물을 포함하는 보습 크림을 하기 표 12에 나타낸 조성 성분 및 조성비에 따라 통상적인 방법으로 제조하였다.
성분 함량(중량%)
복합 발효 추출물 2.0
잔탄검 0.1
부틸렌글라이콜 3.0
글리세린 5.0
솔비탄올리베이트 2.0
카보머 미량
폴리솔베이트 80 1.5
세틸알코올 1.0
피이지-60글리세릴스테아레이트 0.5
디메치콘 3.0
포도씨오일 4.0
시어버터 0.05
알지닌 미량
1,2-헥산다이올 2.0
정제수 To 100
제형예 2. 영양 세럼의 제조
일 양상에 따른 복합 발효 추출물을 포함하는 영양 세럼을 하기 표 13에 나타낸 조성 성분 및 조성비에 따라 통상적인 방법으로 제조하였다.
성분 함량(중량%)
복합 발효 추출물 2.0
글리세린 0.1
하이드록시에틸셀룰로오스 미량
소듐시트레이트 미량
비즈왁스 0.5
폴리솔베이트80 1.5
카보머 미량
알지닌 미량
알코올 5.0
피이지-40하이드로제네이티드캐스터오일 0.4
1,2-헥산다이올 2.0
정제수 To 100
실시예 1. 보습감 및 피부상태 개선 효과 평가
일 양상에 따른 복합 발효 추출물을 포함하는 화장료 조성물의 보습감 및 피부상태 개선 효과를 평가하기 위하여, 상기 제형예에서 제조한 보습 크림 및 영양 세럼을 이용하여 관능시험을 실시하였다.
먼저, 발효 과정을 거치지 않은 혼합 추출물을 이용하여, 제형예 1 및 2와 동일한 방법으로 보습 크림 및 영양 세럼을 제조하였다(비교제형예 1 및 2). 25~35세의 여성 40명을 두 그룹으로 나누어, 그룹 1은 제형예 1 및 2에 따른 보습 크림 및 영양 세럼을, 또는 그룹 2는 비교제형예 1 및 2에 따른 보습 크림 및 영양 세럼을 1일 1회 6주간 지속적으로 사용하게 하였다. 관능평가는 피부 도포 후 느껴지는 보습감, 피부탄력 증진 및 피부주름 개선 등의 피부상태 개선 효과에 대하여 매우 우수(5점), 우수(4점), 보통(3점), 나쁨(2점), 매우 나쁨(1점)의 기준으로 수행하였고, 그 결과를 하기 표 14 및 15에 각각 나타내었다.
보습감
번호 보습 크림 영양 세럼
비교제형예 1
(혼합 추출물)
제형예 1
(복합 발효 추출물)
비교제형예 2
(혼합 추출물)
제형예 2
(복합 발효 추출물)
1 3 4 3 3
2 3 4 2 3
3 3 5 3 5
4 3 3 3 4
5 3 4 2 3
6 3 4 3 4
7 3 4 3 4
8 4 5 3 4
9 3 4 3 4
10 3 4 3 4
11 4 5 4 5
12 4 5 4 5
13 3 5 3 5
14 3 4 4 5
15 4 5 4 5
16 4 4 4 5
17 3 5 3 5
18 3 4 3 4
19 4 5 4 5
20 2 3 3 4
합계 65 86 64 86
피부상태 개선 효과
번호 보습 크림 영양 세럼
비교제형예 1
(혼합 추출물)
제형예 1
(복합 발효 추출물)
비교제형예 2
(혼합 추출물)
제형예 2
(복합 발효 추출물)
1 3 5 2 3
2 3 4 2 3
3 3 5 2 5
4 3 4 2 4
5 3 4 3 3
6 3 4 3 3
7 3 4 2 3
8 4 5 2 3
9 3 4 3 4
10 3 4 3 4
11 4 5 3 4
12 3 5 4 5
13 3 5 3 4
14 3 4 4 4
15 3 5 2 3
16 4 4 2 3
17 3 5 3 5
18 3 4 3 4
19 4 5 4 5
20 3 5 3 4
합계 64 90 55 76
상기 표 14 및 15에 나타낸 바와 같이, 혼합 추출물로 제조한 비교제형예 1 및 2에 비해 상기 혼합 추출물을 락토바실러스 플랜타룸으로 발효시킨 복합 발효 추출물로 제조한 제형예 1 및 2의 보습감, 피부상태 개선 효과에 대한 관능평가 점수가 현저히 높아, 일 양상에 따른 복합 발효 추출물로 제조한 화장료 조성물의 피부탄력 증진 및 피부주름 개선 정도가 매우 우수함을 알 수 있었다.
전술한 설명은 예시를 위한 것이며, 본 발명이 속하는 기술분야의 통상의 지식을 가진 자는 본 발명의 기술적 사상이나 필수적인 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 쉽게 변형이 가능하다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적이 아닌 것으로 이해해야만 한다.

Claims (10)

  1. 녹차, 생강 및 편백의 혼합 추출물을 발효시킨 복합 발효 추출물을 포함하는 피부 상태 개선용 화장료 조성물로서,
    상기 피부 상태 개선은 항염증, 피부탄력 증진 및 피부주름 개선으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상인 것인 화장료 조성물.
  2. 청구항 1에 있어서, 상기 녹차, 생강 및 편백은 3:1:1의 중량비로 혼합되는 것인, 화장료 조성물.
  3. 청구항 1에 있어서, 상기 복합 발효 추출물은 락토바실러스 플랜타룸(Lactobacillus plantarum)으로 발효시킨 것인, 화장료 조성물.
  4. 청구항 1에 있어서, 상기 복합 발효 추출물은 추출물 총 중량에 대하여 락토바실러스 플랜타룸을 3 중량% 내지 5 중량% 접종하여 발효시킨 것인, 화장료 조성물.
  5. 청구항 1에 있어서, 상기 발효 추출물은 20 내지 40℃에서 20 내지 48시간 동안 발효시킨 것인, 화장료 조성물.
  6. 삭제
  7. 청구항 1에 있어서, 상기 조성물은 NO 생성, TNF-α 발현 및 IL-6 발현을 억제하는 것인, 화장료 조성물.
  8. 청구항 1에 있어서, 상기 조성물은 엘라스타제 저해 활성을 갖는 것인, 화장료 조성물.
  9. 녹차, 생강 및 편백의 혼합 추출물을 발효시킨 복합 발효 추출물을 포함하는 피부 상태 개선용 식품 조성물로서,
    상기 피부 상태 개선은 항염증, 피부탄력 증진 및 피부주름 개선으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상인 것인 식품 조성물.
  10. 녹차, 생강 및 편백의 혼합 추출물을 발효시킨 복합 발효 추출물을 포함하는 항염증용 약학적 조성물.
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