JPS60208925A - ガン診断と治療のためのモノクロ−ナル抗体の生産法 - Google Patents
ガン診断と治療のためのモノクロ−ナル抗体の生産法Info
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Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/30—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants from tumour cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
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- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
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- Health & Medical Sciences (AREA)
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- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
この発明は以下に述べる免疫原の強い抗原成分を一掃し
てしまうような強い免疫原性のヒト抗原に対するモノク
ローナル抗体を用意することによってより弱い抗原性の
ヒト細胞成分に対するモノクローナル抗体を生産する方
法に関する。すなわちこれらのよｐ弱く発現される抗原
成分の発現を高める。そのようなモノクローナル抗体は
ガンの診断や治療において他の細胞の変調と同様に使わ
れてきた。
てしまうような強い免疫原性のヒト抗原に対するモノク
ローナル抗体を用意することによってより弱い抗原性の
ヒト細胞成分に対するモノクローナル抗体を生産する方
法に関する。すなわちこれらのよｐ弱く発現される抗原
成分の発現を高める。そのようなモノクローナル抗体は
ガンの診断や治療において他の細胞の変調と同様に使わ
れてきた。
背 景
腫瘍細胞や他の抗原で動物を免疫することで作られる従
来の抗血清はその４？異性や特性の異なるいろいろな多
数の抗体を含んでいる。１９７５年にに６ｈｌ＊ｒとＭ
ｌｌｓｔ＠ｉｎ （Ｎａｔｕｒｅ ＋ ２５６ ＋４９
５）は確実で再現性のある特異性をもった抗体を多量に
生産するに至った。このＫｂｈｌ・ｒ−］Ｖｌ１ｇｔｖ
ｌｎ法は腫細胞（免疫された動物からとった）ｔ−継代
培養可能のミエローマ細胞株と融合することを含んでい
る。融合細胞（バイブリド−ｉ）の抗体をテストするこ
とによってハイブリドーマのクローンが望ましい特異性
をもった抗体全生産するものとして選択される。クロー
ンごとに一つの抗体（＝モノクローナル抗体）のみを生
産しつづける。バイブリド−ｉ細胞は未達に培養される
（あるいは液体窒素中に凍結保存される）から、一定の
十分な量の均質な性＊１もった抗体の供給が保証される
。
来の抗血清はその４？異性や特性の異なるいろいろな多
数の抗体を含んでいる。１９７５年にに６ｈｌ＊ｒとＭ
ｌｌｓｔ＠ｉｎ （Ｎａｔｕｒｅ ＋ ２５６ ＋４９
５）は確実で再現性のある特異性をもった抗体を多量に
生産するに至った。このＫｂｈｌ・ｒ−］Ｖｌ１ｇｔｖ
ｌｎ法は腫細胞（免疫された動物からとった）ｔ−継代
培養可能のミエローマ細胞株と融合することを含んでい
る。融合細胞（バイブリド−ｉ）の抗体をテストするこ
とによってハイブリドーマのクローンが望ましい特異性
をもった抗体全生産するものとして選択される。クロー
ンごとに一つの抗体（＝モノクローナル抗体）のみを生
産しつづける。バイブリド−ｉ細胞は未達に培養される
（あるいは液体窒素中に凍結保存される）から、一定の
十分な量の均質な性＊１もった抗体の供給が保証される
。
抗体は抗原として知られる他の分子と結合し′ｄ！７１
識しうる能力をもつタンツクである。モノクローナル抗
体はその特性が非常に均質で鴫−の抗原または決定基と
して知られる抗原の一部しか詔シＩしない以外は他の抗
体と違わない◎細胞の場合、認識される決定基は抗体、
と反応する細胞の上または中に６る抗原である。特定の
抗体が特定の種間の細胞を認識する、すなわちそれと反
応するのはこれら細胞の抗ＪＩＩＣｔ−通してである。
識しうる能力をもつタンツクである。モノクローナル抗
体はその特性が非常に均質で鴫−の抗原または決定基と
して知られる抗原の一部しか詔シＩしない以外は他の抗
体と違わない◎細胞の場合、認識される決定基は抗体、
と反応する細胞の上または中に６る抗原である。特定の
抗体が特定の種間の細胞を認識する、すなわちそれと反
応するのはこれら細胞の抗ＪＩＩＣｔ−通してである。
すなわち、細胞抗原はそれによって細胞が同定されるマ
ーカーなのである。
ーカーなのである。
これらの抗原マーカーは正常な細胞分化の過程を観京し
、与えられた細胞系の中でのｙ◆當の位ｒｉ？示すため
に使われる。分化の過程は細記表面の抗１ｊＸ Ｑ現型
における変化が伴っていて、明らかに異なる一連の分化
に属する細胞を区別する。あるいは同じ一連の分化にお
ける異った相にあるｉｔ！ｉｆ Ｉ抱を区別する４：ｒ
’（、ハ；ζがもし適切な抗体が得られれば観察しうる
たろう。
、与えられた細胞系の中でのｙ◆當の位ｒｉ？示すため
に使われる。分化の過程は細記表面の抗１ｊＸ Ｑ現型
における変化が伴っていて、明らかに異なる一連の分化
に属する細胞を区別する。あるいは同じ一連の分化にお
ける異った相にあるｉｔ！ｉｆ Ｉ抱を区別する４：ｒ
’（、ハ；ζがもし適切な抗体が得られれば観察しうる
たろう。
ハイプリドーマ１１１胞株のｉ！５１製は、はじめの細
胞の性質、細胞の生育条件、融合条件などの実験上の要
因によらずうまくやれるだろう◎しかるにある他の細胞
株で達成されたとしてもその他の細胞株のハイブリドー
マ調製が必ずしもうまく行くと予測できることはない。
胞の性質、細胞の生育条件、融合条件などの実験上の要
因によらずうまくやれるだろう◎しかるにある他の細胞
株で達成されたとしてもその他の細胞株のハイブリドー
マ調製が必ずしもうまく行くと予測できることはない。
細胞表層抗原の限定をすすめることは分化や正常と病気
になった細胞に対するマーカーとして病気やさらＫその
後の診断や治療において非常に重要である。すなわちメ
ラノサイト（＋：＝メラニン形成細胞）に関する研究成
果は正常な皮膚からとったメラノサイトを培養する最近
開発された技法によって可能となつ７５ （Ｅｌｓｉｎ
ｇ＊ｒ＋ａｔ ａｌ、＋Ｐｒｏｃ、 Ｎａｔ １． Ａ
ｃａｄ、 ８ｅｌ、 Ｕ８Ａ 、 ７９ 。
になった細胞に対するマーカーとして病気やさらＫその
後の診断や治療において非常に重要である。すなわちメ
ラノサイト（＋：＝メラニン形成細胞）に関する研究成
果は正常な皮膚からとったメラノサイトを培養する最近
開発された技法によって可能となつ７５ （Ｅｌｓｉｎ
ｇ＊ｒ＋ａｔ ａｌ、＋Ｐｒｏｃ、 Ｎａｔ １． Ａ
ｃａｄ、 ８ｅｌ、 Ｕ８Ａ 、 ７９ 。
２０１８ １９８２年３月）。この方法はメラノサイト
の分化抗原の分析のために増殖する細胞の再生源を提供
する。同様に黒色腫（−メラノサイトが悪性化した細胞
）から得た多量の細胞株が今日確立されておシ、これら
は黒色腫の表層抗原の分析を可能にしている。モノクロ
ーナル抗体の出現は悪性の黒色腫の表面抗原についての
知顔を大きく増加させている。黒色腫細胞とメラニン形
成細胞における細胞マーカーが同定されている。メラニ
ン形成細胞と黒色腫の発生の各段階における分化抗原の
特徴を認識するモノクローナル抗体をタイプ分類する表
が選択されている。これらの分化抗原はメラニン形成細
胞と悪性化したメラノーマを区別するのに使われ、また
それらｔ−特徴的なサブ−セットに群分けするのに使わ
れる［ １）ｉｐｐｏｌｄ ＠ｔ ａｔ、 Ｐｒｏｃ。
の分化抗原の分析のために増殖する細胞の再生源を提供
する。同様に黒色腫（−メラノサイトが悪性化した細胞
）から得た多量の細胞株が今日確立されておシ、これら
は黒色腫の表層抗原の分析を可能にしている。モノクロ
ーナル抗体の出現は悪性の黒色腫の表面抗原についての
知顔を大きく増加させている。黒色腫細胞とメラニン形
成細胞における細胞マーカーが同定されている。メラニ
ン形成細胞と黒色腫の発生の各段階における分化抗原の
特徴を認識するモノクローナル抗体をタイプ分類する表
が選択されている。これらの分化抗原はメラニン形成細
胞と悪性化したメラノーマを区別するのに使われ、また
それらｔ−特徴的なサブ−セットに群分けするのに使わ
れる［ １）ｉｐｐｏｌｄ ＠ｔ ａｔ、 Ｐｒｏｃ。
Ｎａｔ’１． Ａｅａｄ、８ｅ１． Ｕ、Ｓ、Ａ、７７
．６１１４（１９８Ｇ）とＨｏｕｇｈｔｏｎ＋ ａｔ
ｍｌ、 Ｊ、 Ｅｘｐ、 Ｍ＠ｄ、 １５Ｌ１７５５（
１９８２））。サブ−セットの中でメラニン形成細胞と
メラノーマを免疫的分析することが可能とされた。
．６１１４（１９８Ｇ）とＨｏｕｇｈｔｏｎ＋ ａｔ
ｍｌ、 Ｊ、 Ｅｘｐ、 Ｍ＠ｄ、 １５Ｌ１７５５（
１９８２））。サブ−セットの中でメラニン形成細胞と
メラノーマを免疫的分析することが可能とされた。
分化抗原の最初の認識はマウスのＴ−細胞白血病の表面
抗原の分析とその抗原がＴＬ、 Ｔｈ７−１゜Ｌｙｔ系
列と記載されたことで現われた（Ｏｌｄ。
抗原の分析とその抗原がＴＬ、 Ｔｈ７−１゜Ｌｙｔ系
列と記載されたことで現われた（Ｏｌｄ。
Ｌｌｏｙｄ Ｊ、、０ａｎｅ＠ｒ 几５ｓｅａｒｃｈ、
４１ ．３６１−３７５２月１９８１年）。これらＴｉ
１０１胞の分化抗原の分析はマウスとヒトの正常なＴ＃
ｌＩＩ胞とＢ細胞を利用することで非？ｔｆに簡素化さ
れた（パテント＃４．３６１，５４９−５５９ ； ＃
４．３６４，９３２−３７１＃４．３６３，７９９の
と）ＴＩＩＩＩ胞抗原に対するモノクローナル抗体に関
するものを見よ）。
４１ ．３６１−３７５２月１９８１年）。これらＴｉ
１０１胞の分化抗原の分析はマウスとヒトの正常なＴ＃
ｌＩＩ胞とＢ細胞を利用することで非？ｔｆに簡素化さ
れた（パテント＃４．３６１，５４９−５５９ ； ＃
４．３６４，９３２−３７１＃４．３６３，７９９の
と）ＴＩＩＩＩ胞抗原に対するモノクローナル抗体に関
するものを見よ）。
ヒトの白血病細胞の特異抗原の存在はヒトの白血病細胞
で免疫することによって得られる不均質な抗体を使って
の研究（Ｇｒａｍマ・ｓ ＋ Ｍ、 Ｆ。
で免疫することによって得られる不均質な抗体を使って
の研究（Ｇｒａｍマ・ｓ ＋ Ｍ、 Ｆ。
ａｔ ａｌ、 ０１ｌｎ、 Ｉｍｍｕｎｏｌ、 ａｎｄ
Ｉｍｍｕｎｏｐａｔｈｏｌ、土：６７． （１９７５
）ｉ Ｍｌｎｏｗａｄａ＋ Ｊ、＊ ＠ｔ ｍｌ、 Ｊ
。
Ｉｍｍｕｎｏｐａｔｈｏｌ、土：６７． （１９７５
）ｉ Ｍｌｎｏｗａｄａ＋ Ｊ、＊ ＠ｔ ｍｌ、 Ｊ
。
Ｎａｔ’１．０ａｎｅｓｒ Ｉｎｍｔｉ、 ６０ ：
１２６９ ｍ （１９７ｇ）； ＴａｎＩｇａｋｌ＋
Ｎ、 ａｔ ａｌ、Ｊ、 Ｉｍｍｕｎｏｌ、 １ ２
３ ；２９０６、（１９７９））によっであるいは白血
病の患者からとった自家抗血清を使った研究（Ｇａｒｒ
＠ｔ。
１２６９ ｍ （１９７ｇ）； ＴａｎＩｇａｋｌ＋
Ｎ、 ａｔ ａｌ、Ｊ、 Ｉｍｍｕｎｏｌ、 １ ２
３ ；２９０６、（１９７９））によっであるいは白血
病の患者からとった自家抗血清を使った研究（Ｇａｒｒ
＠ｔ。
Ｔ、Ｊ、、ａｔ ａｌ、ｅ Ｐｒｏｃ、Ｎａｔ’１．
Ａｅａｄ、８ｅ１．１Ｊ８Ａ７４．４５８７ 、 （１
９７７） ； Ｎａ１ｔｏ、 Ｋ、、 ａｔ ａｔｌＰ
ｒｏｅ、 Ｎｍｔ’ｌ、 Ａｅａｄ、 ８ｅ１． Ｕ８
Ａ、 ８０ 、２３４１゜（１９８３））によって示さ
れた６ ｎｏｎ−Ｔ 、 ｎｏｎ−Ｂ。
Ａｅａｄ、８ｅ１．１Ｊ８Ａ７４．４５８７ 、 （１
９７７） ； Ｎａ１ｔｏ、 Ｋ、、 ａｔ ａｔｌＰ
ｒｏｅ、 Ｎｍｔ’ｌ、 Ａｅａｄ、 ８ｅ１． Ｕ８
Ａ、 ８０ 、２３４１゜（１９８３））によって示さ
れた６ ｎｏｎ−Ｔ 、 ｎｏｎ−Ｂ。
急性リンＡ芽球白血病（Ｎ−ＡＬＬ）の患者からの白血
病細胞に存在する通常の急性リンパ芽球白血病細胞抗原
（ＯＡＬＬＡ）や芽球の危期におけるある慢性の骨すい
細胞性白血病（ＯＭＬ）や急性のＴ−リンパ芽球白血病
（Ｔ−ＡＬＬ）などはもともとは従来法のウサギの不均
質抗血清で述べられた（ Ｏｒ＠ａｒｅａ＋ Ｍ、 Ｆ
、 ｅｔ ａｌ、＋同上〕。自家性血清による分類法（
Ｇａｒｒ＠ｔ＋ ’ｌ’、 Ｊｇ ｅｔ ａｌ、同上：
Ｎａ１ｔ０１ Ｋ、ｌ ａｔ ｍｌ同上１９８３ ；
Ｏｌｄ、 Ｌ。
病細胞に存在する通常の急性リンパ芽球白血病細胞抗原
（ＯＡＬＬＡ）や芽球の危期におけるある慢性の骨すい
細胞性白血病（ＯＭＬ）や急性のＴ−リンパ芽球白血病
（Ｔ−ＡＬＬ）などはもともとは従来法のウサギの不均
質抗血清で述べられた（ Ｏｒ＠ａｒｅａ＋ Ｍ、 Ｆ
、 ｅｔ ａｌ、＋同上〕。自家性血清による分類法（
Ｇａｒｒ＠ｔ＋ ’ｌ’、 Ｊｇ ｅｔ ａｌ、同上：
Ｎａ１ｔ０１ Ｋ、ｌ ａｔ ｍｌ同上１９８３ ；
Ｏｌｄ、 Ｌ。
Ｊ、 ０ａｎｃｅｒ几ｏｓ、４１：３６１．（１９８１
））によってＡＬＬ細胞と特異的に反応する抗体がＡＬ
Ｌ患名から得られた血ｉ’＋’Ｊにみつけられて０ＡＬ
ＬＡＫ非常によく似た抗原を認識するようにみえた（
Ｇａｒｒ＠ｔ、’ｌ’、Ｊ、、ｅｔ ａｌ、同上 ；
Ｎａ１ｔｏ、Ｋ 、ｒｓｔ ａｌ、同上）。不ｊり質抗
血清で検出されるもう一つの白血病関連抗原はヒ） １
１４１腺白血病（ＴＬ）様抗原で白血病細胞と同様胸腺
細ＩＩ？■二にも存在している（ Ｔａｎｉｇａｋｉ、
Ｎ、 ＠ｔ ｍｌ、同上）。この抗原はそれ故に正常
な分化抗原でありクシス１のＩＩ Ｌ Ａ抗原（’Ｉ’
ａｎｉｇａｋｌ 、 Ｎ、 ＊ ＠ｔ ａｌ同上）と類
似の爪鎧（分子量４４，０００〜４９，０００）と軽鎖
（分子量１２，０００〜１４．０００）から成っている
。
））によってＡＬＬ細胞と特異的に反応する抗体がＡＬ
Ｌ患名から得られた血ｉ’＋’Ｊにみつけられて０ＡＬ
ＬＡＫ非常によく似た抗原を認識するようにみえた（
Ｇａｒｒ＠ｔ、’ｌ’、Ｊ、、ｅｔ ａｌ、同上 ；
Ｎａ１ｔｏ、Ｋ 、ｒｓｔ ａｌ、同上）。不ｊり質抗
血清で検出されるもう一つの白血病関連抗原はヒ） １
１４１腺白血病（ＴＬ）様抗原で白血病細胞と同様胸腺
細ＩＩ？■二にも存在している（ Ｔａｎｉｇａｋｉ、
Ｎ、 ＠ｔ ｍｌ、同上）。この抗原はそれ故に正常
な分化抗原でありクシス１のＩＩ Ｌ Ａ抗原（’Ｉ’
ａｎｉｇａｋｌ 、 Ｎ、 ＊ ＠ｔ ａｌ同上）と類
似の爪鎧（分子量４４，０００〜４９，０００）と軽鎖
（分子量１２，０００〜１４．０００）から成っている
。
しかしながらこの研究は比較的少址で低い抗体価の抗血
清と同様に正常な組織で十分に吸収することを必要とす
るために制約をうけてきた・ＫｌｊｈｌｅｒとＭ１１ｓ
ｔ＠ｌＨの方法によるモノクローナル抗体のｉｎ ｖｉ
ｔｙｏ 生産において上記文献は白血病ＯｉＡ抗原の同
定と検出によシ良い系を提供してきている。ヒトの末梢
血リン、ｅ球やその前駆細胞の細胞表面抗ｆｆｉを検出
する一連のモノクローナル抗体が詳細に研究されている
（４１ｎｈｓｒｓ＋Ｅ、 Ｌ、＋ ａｔ ａｔ、 Ｐｒ
ｏｅ、 Ｎａｔ’１． Ａｃａｄ、 Ｓｃ１． ＵＳＡ
７７１５８Ｂ、（１９８０））。異ったリンノゼ球株に
特徴的な抗原を検出するモノクローナル抗体はヒトのリ
ン／４球白血病の分類に使われる（Ｓｃｂｒｏｆｆ＋Ｒ
，Ｗ、、 ａｔ ａｌ、 Ｂｌｏｏｄ ５９：２０７．
（１９８２））けれども、そのような抗体は限られた
治療にしか応用されない。ヒトの白血病関連抗原を検出
するモノクローナル抗体も作られている。これらはネズ
ミのＴＬ抗原に相当するヒトの抗ｉｔ−検出するいくつ
かの抗体が含まれている。１つのＴＬ様抗原はＮＡ １
／ ３４ （ＭｃＭｉｃｈａｅｌ 、 Ａ、 Ｊ、。
清と同様に正常な組織で十分に吸収することを必要とす
るために制約をうけてきた・ＫｌｊｈｌｅｒとＭ１１ｓ
ｔ＠ｌＨの方法によるモノクローナル抗体のｉｎ ｖｉ
ｔｙｏ 生産において上記文献は白血病ＯｉＡ抗原の同
定と検出によシ良い系を提供してきている。ヒトの末梢
血リン、ｅ球やその前駆細胞の細胞表面抗ｆｆｉを検出
する一連のモノクローナル抗体が詳細に研究されている
（４１ｎｈｓｒｓ＋Ｅ、 Ｌ、＋ ａｔ ａｔ、 Ｐｒ
ｏｅ、 Ｎａｔ’１． Ａｃａｄ、 Ｓｃ１． ＵＳＡ
７７１５８Ｂ、（１９８０））。異ったリンノゼ球株に
特徴的な抗原を検出するモノクローナル抗体はヒトのリ
ン／４球白血病の分類に使われる（Ｓｃｂｒｏｆｆ＋Ｒ
，Ｗ、、 ａｔ ａｌ、 Ｂｌｏｏｄ ５９：２０７．
（１９８２））けれども、そのような抗体は限られた
治療にしか応用されない。ヒトの白血病関連抗原を検出
するモノクローナル抗体も作られている。これらはネズ
ミのＴＬ抗原に相当するヒトの抗ｉｔ−検出するいくつ
かの抗体が含まれている。１つのＴＬ様抗原はＮＡ １
／ ３４ （ＭｃＭｉｃｈａｅｌ 、 Ａ、 Ｊ、。
０ＫＴ６（几ｅｉｎｈｅｒｚ、 Ｅ、 Ｌ、、 ａｔ
ａｌ、上記）Ｌｅｕ６（几、 ＥＹａｆｌｌｌ＋私信）
等によって認識される。第２のＴＬ様抗原はＭ２４１（
Ｋｎｏｗｌｅｍ＋几、Ｗ、。
ａｌ、上記）Ｌｅｕ６（几、 ＥＹａｆｌｌｌ＋私信）
等によって認識される。第２のＴＬ様抗原はＭ２４１（
Ｋｎｏｗｌｅｍ＋几、Ｗ、。
ａｔ ａｌ、 Ｅｕｒ、 Ｊ、 Ｉｍｍｕｎｏｌ、 １
２；６７６ ＋ １９８２）によって認識される。通常
急性リン、ｅ芽球白血病細胞抗原に特異性金もつモノク
ローナル抗体のＪ−５（几１ｔｇ＋ Ｊ、＋ 会ｔ ａ
ｌ、 Ｎａｔｕｒ＠２８Ｌ５Ｂ３゜１９８０）、ＮＬ−
１とＮＬ−２（Ｕ＠ｄａ、几＋ｌ ａｔ ｍｌ。
２；６７６ ＋ １９８２）によって認識される。通常
急性リン、ｅ芽球白血病細胞抗原に特異性金もつモノク
ローナル抗体のＪ−５（几１ｔｇ＋ Ｊ、＋ 会ｔ ａ
ｌ、 Ｎａｔｕｒ＠２８Ｌ５Ｂ３゜１９８０）、ＮＬ−
１とＮＬ−２（Ｕ＠ｄａ、几＋ｌ ａｔ ｍｌ。
Ｆｒｅｅ、 Ｎａｔ’１． Ａｃａｄ、 Ｓｅｔ、 Ｕ
、８．Ａ ７９ 、４３８６ 。
、８．Ａ ７９ 、４３８６ 。
１９８２）も作られている。最近には、Ｄ・２１ｇ＋０
−Ｔ、＊ｊ ｍｌ、 Ｌａｎｅ＠ｔ、 ｌ＋１０．１９
８２ ）が大抵の培養ヒ） Ｔ−ＡＬＬ細胞株と反応し
、また大抵の新鮮なＴ−ＡＬＬ細胞とも反応するモノク
ローナル抗体（ＯＡＬＬ人−２）を固定している補体を
報告している＠ ヒトの腫瘍細胞表面抗原に対するマウスのモノクローナ
ル抗体は多くの研究室で作られている（ Ｌｌｏｙｄ、
Ｋ、 Ｏ，（１９８３）、「基礎及び臨床腫瘍免疫学
」第１巻（Ｒ，Ｂ、 Ｈ＠ｒｂ＠ｒｍａｎ編）Ｎｉｊｈ
ｏｆｆ、 Ｔｈ＠１１ｓｇｕ＊ （印刷中））。この研
究の目的は多くの場合腫瘍の治療や診断に有効な腫瘍関
連抗原を同定することにあった。この研究方向に潜在す
る困難は細胞表面上の抗原が多様なことである。非常に
限られた範囲に分布する抗原を同定することは可能であ
ろうが非常に弱い免疫応答しか出せない抗原に対する抗
体はそれが弱いがために見そこなうだろう。また亀腫瘍
細胞のような抗原の複雑な混合体で免疫することは似た
ような抗原の競合で比較的弱い免疫原性の分子に対する
抗体応答を抑制する。
−Ｔ、＊ｊ ｍｌ、 Ｌａｎｅ＠ｔ、 ｌ＋１０．１９
８２ ）が大抵の培養ヒ） Ｔ−ＡＬＬ細胞株と反応し
、また大抵の新鮮なＴ−ＡＬＬ細胞とも反応するモノク
ローナル抗体（ＯＡＬＬ人−２）を固定している補体を
報告している＠ ヒトの腫瘍細胞表面抗原に対するマウスのモノクローナ
ル抗体は多くの研究室で作られている（ Ｌｌｏｙｄ、
Ｋ、 Ｏ，（１９８３）、「基礎及び臨床腫瘍免疫学
」第１巻（Ｒ，Ｂ、 Ｈ＠ｒｂ＠ｒｍａｎ編）Ｎｉｊｈ
ｏｆｆ、 Ｔｈ＠１１ｓｇｕ＊ （印刷中））。この研
究の目的は多くの場合腫瘍の治療や診断に有効な腫瘍関
連抗原を同定することにあった。この研究方向に潜在す
る困難は細胞表面上の抗原が多様なことである。非常に
限られた範囲に分布する抗原を同定することは可能であ
ろうが非常に弱い免疫応答しか出せない抗原に対する抗
体はそれが弱いがために見そこなうだろう。また亀腫瘍
細胞のような抗原の複雑な混合体で免疫することは似た
ような抗原の競合で比較的弱い免疫原性の分子に対する
抗体応答を抑制する。
（Ｔａｕｍｓ１ｇ＋ Ｍ、Ｊ、（１９７３）６ ０ｕｒ
ｒ、 ＴｏｐｌＭｌｅｒｏ。
ｒ、 ＴｏｐｌＭｌｅｒｏ。
Ｉｍｍｕｎｏ、 ６０ 、１２５ ）ｏこの困難を回避
する一つのアプローチは免疫原性の強い抗原に対する抗
体を調製し、その抗原をあとで問題となる免疫原から取
シのそくためにそれを使用することである０このアプロ
ーチはそれが前に得られたものと具なる新しい抗体を産
生させるので１カスケード法と命名されている（ ８ｐ
ｒｉｎｇ＊ｒ、 Ｔ、Ａ。
する一つのアプローチは免疫原性の強い抗原に対する抗
体を調製し、その抗原をあとで問題となる免疫原から取
シのそくためにそれを使用することである０このアプロ
ーチはそれが前に得られたものと具なる新しい抗体を産
生させるので１カスケード法と命名されている（ ８ｐ
ｒｉｎｇ＊ｒ、 Ｔ、Ａ。
（１９８１） Ｊ、Ｂｌｏｌ、Ｏｈｅｍ、 ２５６；３
８３３）。この発明はガンの診断と治療のためになされ
、これまでの技法で遭遇する問題を克服するものである
。
８３３）。この発明はガンの診断と治療のためになされ
、これまでの技法で遭遇する問題を克服するものである
。
要約
この発明において殆んどのちるい娘全てのヒトの細Ｉｌ
ｌに存在するごく一般的な糖タン／々り抗原に対するマ
ウスのモノクローナル抗体が作られる。この抗体はガン
に特異的なモノクローナル抗体を診１’Ｊ＋と治療のた
めに生産するのに有用でｔｔ２）り、またこれらヒト細
胞中の個々の抗原の／Ｉ？性や機能を分析するのにも有
用である。
ｌに存在するごく一般的な糖タン／々り抗原に対するマ
ウスのモノクローナル抗体が作られる。この抗体はガン
に特異的なモノクローナル抗体を診１’Ｊ＋と治療のた
めに生産するのに有用でｔｔ２）り、またこれらヒト細
胞中の個々の抗原の／Ｉ？性や機能を分析するのにも有
用である。
ざらにこれら広く分布しているモノクローナル抗体は、
より抗原性の低い他の細胞のＰ１気に特異的な細胞抗原
を認識し、それによって特ゲ４的な細胞抗原に対するモ
ノクローナル抗体で上述のｊ’、’ｉ気不二４ゑ１１封
シたり治療したシすることのできる別のモノクローナル
抗体を生産するのに使われる。これらの病気に特異的な
あるいはガンに特異的なあるいは弱い抗原に特異的なモ
ノクローナル抗体は強い抗原がその抗原決定基に対する
モノクローナル抗体によって除かれた免疫原で免疫した
後には発現が高まることがわかる。
より抗原性の低い他の細胞のＰ１気に特異的な細胞抗原
を認識し、それによって特ゲ４的な細胞抗原に対するモ
ノクローナル抗体で上述のｊ’、’ｉ気不二４ゑ１１封
シたり治療したシすることのできる別のモノクローナル
抗体を生産するのに使われる。これらの病気に特異的な
あるいはガンに特異的なあるいは弱い抗原に特異的なモ
ノクローナル抗体は強い抗原がその抗原決定基に対する
モノクローナル抗体によって除かれた免疫原で免疫した
後には発現が高まることがわかる。
明細説明
以下に述べる技術は全てのヒトの細胞株をテストしたわ
けでないが大多数に存在する抗原を認識する特異的な七
ツクローナル抗体の分離することにある。下記の例に述
べられる特異的なモノクローナル抗体は、この発明の方
法によって生産され単離される同じような特徴をもった
一群のモノクローナル抗体それぞれの代表的なものであ
る。このことはこの方法が普遍的に使えることを示して
いる。発明の方法は非’？ｉＩＫ抗原性の弱い成分に限
らず細胞内または上に低濃度に存在する抗原成分のモノ
クローナル抗体を発現させるために他のモノクローナル
抗体を分離するために容易に使われる。これら抗原性の
弱い成分はその抗原性金全ての細胞株でないにしても大
多数の細胞に存在するそれらの抗原によってブスクされ
ているかも知れない。細胞タイプや細胞の不調または異
常に特異的な弱い抗原に対するモノクローナル抗体を増
加させることは診断の目的のために弱い抗原に対してモ
ノクローナル抗体を使わせうる◇それらは特異的な抗原
部位とのみ反応するし、従って診断のために有効である
。治療のｌｃめにはそのような抗原性のより弱い部位に
対するモノクローナル抗体がネル１に特異的なあるいは
異常細胞例えればガン細胞金膜すために放射性分子また
は細胞毒に結合される。
けでないが大多数に存在する抗原を認識する特異的な七
ツクローナル抗体の分離することにある。下記の例に述
べられる特異的なモノクローナル抗体は、この発明の方
法によって生産され単離される同じような特徴をもった
一群のモノクローナル抗体それぞれの代表的なものであ
る。このことはこの方法が普遍的に使えることを示して
いる。発明の方法は非’？ｉＩＫ抗原性の弱い成分に限
らず細胞内または上に低濃度に存在する抗原成分のモノ
クローナル抗体を発現させるために他のモノクローナル
抗体を分離するために容易に使われる。これら抗原性の
弱い成分はその抗原性金全ての細胞株でないにしても大
多数の細胞に存在するそれらの抗原によってブスクされ
ているかも知れない。細胞タイプや細胞の不調または異
常に特異的な弱い抗原に対するモノクローナル抗体を増
加させることは診断の目的のために弱い抗原に対してモ
ノクローナル抗体を使わせうる◇それらは特異的な抗原
部位とのみ反応するし、従って診断のために有効である
。治療のｌｃめにはそのような抗原性のより弱い部位に
対するモノクローナル抗体がネル１に特異的なあるいは
異常細胞例えればガン細胞金膜すために放射性分子また
は細胞毒に結合される。
広範囲に分布し、または強い抗原に対するモノクローナ
ル抗体はその抗原を不活性にしたり除くために使われる
。例えば広く分布するモノクローナル抗体は界面活性剤
で可溶化された細胞の抽出液から夫々の広く分布する抗
原に除いたりあるいは不活性化するためにセファロース
ピーズまたはスタフィロコッカスアウレウスに結合され
る。かくして広範囲に分布し、あるいは強い抗原の除去
はアフイニテイカラムを使う免疫学の標準法によって効
果が上げられる。上記の８ｐｒｌｎｇ＠ｒの記述をみよ
。それで除かれない残った不活化された免疫原物質は、
強い抗原部位が不活性化されているので新しいモノクル
ーナル抗体ｖＩ−産生ずるのに他の動物を免疫するのに
使われる。そのようなステップは免疫原において継続的
あるいはだんだんと弱い抗原成分からさらに新しいモノ
クローナル抗体を産生ずるのに必要な回数くりかえされ
る。そのような抗原の除去は、いくつかの異なる免疫１
ｉＸＫよって同じ広く分布している抗原を含んでいるも
のに実施される。強い抗原に対するモノクローナル抗体
の混合物がよく使われる。かくして、この発明のモノク
ローナル抗体の例は説明の目的のためでありＳこの発明
を記述例のモノクローナル抗体に限定するつもシはない
。特殊例の記載は＠３つの広く分布するヒト細胞表面抗
原に対するモノクローナル抗体”と題する論文の中にあ
るハイブリドーマの１９８３年１１月のＩａ＜印刷中）
に見られるがその論文は参考文献として出されている。
ル抗体はその抗原を不活性にしたり除くために使われる
。例えば広く分布するモノクローナル抗体は界面活性剤
で可溶化された細胞の抽出液から夫々の広く分布する抗
原に除いたりあるいは不活性化するためにセファロース
ピーズまたはスタフィロコッカスアウレウスに結合され
る。かくして広範囲に分布し、あるいは強い抗原の除去
はアフイニテイカラムを使う免疫学の標準法によって効
果が上げられる。上記の８ｐｒｌｎｇ＠ｒの記述をみよ
。それで除かれない残った不活化された免疫原物質は、
強い抗原部位が不活性化されているので新しいモノクル
ーナル抗体ｖＩ−産生ずるのに他の動物を免疫するのに
使われる。そのようなステップは免疫原において継続的
あるいはだんだんと弱い抗原成分からさらに新しいモノ
クローナル抗体を産生ずるのに必要な回数くりかえされ
る。そのような抗原の除去は、いくつかの異なる免疫１
ｉＸＫよって同じ広く分布している抗原を含んでいるも
のに実施される。強い抗原に対するモノクローナル抗体
の混合物がよく使われる。かくして、この発明のモノク
ローナル抗体の例は説明の目的のためでありＳこの発明
を記述例のモノクローナル抗体に限定するつもシはない
。特殊例の記載は＠３つの広く分布するヒト細胞表面抗
原に対するモノクローナル抗体”と題する論文の中にあ
るハイブリドーマの１９８３年１１月のＩａ＜印刷中）
に見られるがその論文は参考文献として出されている。
標的細胞
使用された細胞株は下記の第１表にあげられている。正
常なヒトの繊維芽細胞、腎上皮細胞、メラニン形成細胞
の培養株の＃ｌ製は記載されている（ ０ａｒｅｙ＋
Ｔ、 Ｌ、 ａｔ ａｌ、 Ｐｒｏｅ、 Ｎａｔ’ｌ
＊Ａｃａｄ、 ８ｃｉ、 ＬＩＳＡ ７３：３２７８；
Ｕ＊ｄａ、 Ｒ，。
常なヒトの繊維芽細胞、腎上皮細胞、メラニン形成細胞
の培養株の＃ｌ製は記載されている（ ０ａｒｅｙ＋
Ｔ、 Ｌ、 ａｔ ａｌ、 Ｐｒｏｅ、 Ｎａｔ’ｌ
＊Ａｃａｄ、 ８ｃｉ、 ＬＩＳＡ ７３：３２７８；
Ｕ＊ｄａ、 Ｒ，。
ａｔ ａｌｍ （１９７９） Ｊ、 ＢＸＰＩ Ｍ＠ｄ
、 １５Ｇ＋５６４；Ｒ１ｓｌｎｇｅｒ＋ Ｍ、、 ａ
ｔ ＆１． （１９８２） Ｆｒｏｃ、 Ｎａｔ’ｌ。
、 １５Ｇ＋５６４；Ｒ１ｓｌｎｇｅｒ＋ Ｍ、、 ａ
ｔ ＆１． （１９８２） Ｆｒｏｃ、 Ｎａｔ’ｌ。
Ａｃａｄ、 ８ａｉ、 ＵＳＡ ７９：２０１８）。付
着細胞は２．５％子ウシ胎児血清、５％新生ウシ血清、
１００単位／４の（ニジリン、１勢−のストレプトマイ
シン金加え九Ｆｉａｇｌ・の最少必須培地（ＧＩＢＯＯ
。
着細胞は２．５％子ウシ胎児血清、５％新生ウシ血清、
１００単位／４の（ニジリン、１勢−のストレプトマイ
シン金加え九Ｆｉａｇｌ・の最少必須培地（ＧＩＢＯＯ
。
Ｇｒａｕｄ ｌ５ｌａｎｄ、 ＮＹ ）中で維持されｆ
Ｌｏ移しかえには細胞は二価の陽イオンを含まないＨａ
ｎｋの塩溶液に０．１％トリズシンと０．０２％のエチ
レンジアミン四酢酸を加えた液（ＧＩＢＯＯ）でひきは
がした。非付着細胞は７，５％の子ウシ胎児血清を使う
以外同保に淳加物を加えたＲＰＭＩ １６４０中で培養
し念。培養は必らずマイコプラズマをテストして汚染し
た培養は陥棄した。
Ｌｏ移しかえには細胞は二価の陽イオンを含まないＨａ
ｎｋの塩溶液に０．１％トリズシンと０．０２％のエチ
レンジアミン四酢酸を加えた液（ＧＩＢＯＯ）でひきは
がした。非付着細胞は７，５％の子ウシ胎児血清を使う
以外同保に淳加物を加えたＲＰＭＩ １６４０中で培養
し念。培養は必らずマイコプラズマをテストして汚染し
た培養は陥棄した。
正？Ｈな血液単核細胞はＦｌａｏｌｌ−Ｐａｑｕ＋ｓ液
（Ｐｈａｒ＋ｕａｃｉａ、 Ｐｉｓｅａｔａｗａｙ、
Ｎ Ｊ）の層の上にペノ々リンを加えた血液をのせ遠心
分離することによって得た。全血液白血球はｉｏｏμｊ
のキャピラリーチューブ中でｅｔｏｏ ｙで１０分間遠
沈したのち１沈殿物を集めて得九〇 第１表 標的細胞株 卵巣癌腫 腎臓癌腫 肺癌腫 ８に一０Ｖ−８’ ８に−ＲＯ−４’ ８に−ＬＯ−１
’８に一０Ｖ−４’ ８に−ＲＯ−６襲 ５Ｋ−ＬＯ−
２’８に一０Ｖ−６” ８に−８０−７” ８に−ＬＯ
−３’０ｓｌｏ ３１６ ” ８に一几０−９’ ５Ｋ
−ＬＯ−４’２７７４’ ５Ｋ−ＲＯ−１２’ ８に−
ＬＯ−ＩＳａＡＴａ ８に−ＲＯ−１６” ８に−ＬＯ
−６’ＡＩＯ’ ８に−８０−２８’ ５Ｋ−ＬＯ−７
’５Ｗ６２６’ ５Ｋ−ＲＯ−２９’ ８に−ＬＯ−８
’乳癌腫 ８に−ＲＯ−３５’ ５Ｋ−ＬＯ−９亀第１
表 標的細胞株（つづき） 膀胱筋腫 片間癌腫 アストロガ上崎 ８ｅ＊ｂｅｒ’ ０ＡＰＡＮ−Ｉ ＳＫ−ＭＧ−ＩＲＴ
４ ０ＡＰＡＮ−２８に−ＭＯ−ＩＶＭ−Ｏ１ＪＢ−１
’ ＡＳＰＯ−１’ ＳＫ−！ｔ４Ｇ−２大腸陥肺 。
（Ｐｈａｒ＋ｕａｃｉａ、 Ｐｉｓｅａｔａｗａｙ、
Ｎ Ｊ）の層の上にペノ々リンを加えた血液をのせ遠心
分離することによって得た。全血液白血球はｉｏｏμｊ
のキャピラリーチューブ中でｅｔｏｏ ｙで１０分間遠
沈したのち１沈殿物を集めて得九〇 第１表 標的細胞株 卵巣癌腫 腎臓癌腫 肺癌腫 ８に一０Ｖ−８’ ８に−ＲＯ−４’ ８に−ＬＯ−１
’８に一０Ｖ−４’ ８に−ＲＯ−６襲 ５Ｋ−ＬＯ−
２’８に一０Ｖ−６” ８に−８０−７” ８に−ＬＯ
−３’０ｓｌｏ ３１６ ” ８に一几０−９’ ５Ｋ
−ＬＯ−４’２７７４’ ５Ｋ−ＲＯ−１２’ ８に−
ＬＯ−ＩＳａＡＴａ ８に−ＲＯ−１６” ８に−ＬＯ
−６’ＡＩＯ’ ８に−８０−２８’ ５Ｋ−ＬＯ−７
’５Ｗ６２６’ ５Ｋ−ＲＯ−２９’ ８に−ＬＯ−８
’乳癌腫 ８に−ＲＯ−３５’ ５Ｋ−ＬＯ−９亀第１
表 標的細胞株（つづき） 膀胱筋腫 片間癌腫 アストロガ上崎 ８ｅ＊ｂｅｒ’ ０ＡＰＡＮ−Ｉ ＳＫ−ＭＧ−ＩＲＴ
４ ０ＡＰＡＮ−２８に−ＭＯ−ＩＶＭ−Ｏ１ＪＢ−１
’ ＡＳＰＯ−１’ ＳＫ−！ｔ４Ｇ−２大腸陥肺 。
Ｋ−Ｍ、、−３、８に−ＭＧ−１４８に−００−１８に
−ＭＢＬ−３７８に″Ｍ（１−１６８Ｗ４０３ ８に−
ＭＢＬ−７５ ＡＥ８Ｗ４８Ｇ” ８に−ＭＢＬ−９３
−２ 。Ｊ８Ｗ６２０’ ８に−ＭｇＬ−９３−３ ”
３８ＭＧ８Ｗ１２２２’ ８に−ＭＲＩ、−１２７ ０
２”ＭＧＨＴ２９ ８に−ＭＨＩ、−１３０ ０３４３
ＭＧ３に−００−１０’ ８に−ＭＥＬ−１＋５３ Ｕ
３７３ＭＧ３゜ッ。 Ａ−３８２ マウスモノクローナル抗体の生産 ＢＡＬＢｌｏまたは（１３ＡＬＢ１０Ｘ ０５７ＢＬ／
６）Ｆｔマウスｒアストウサイトーマ８に−ＭＧ−１か
卵巣癌細胞８１（−０Ｖ−３か子宮癌細胞８に−ＵＴ−
１のいずれかで免疫した。約１００μｌの遠沈した細胞
の腹腔内投与１１−２週間の間隔で２〜５回行なった。
−ＭＢＬ−３７８に″Ｍ（１−１６８Ｗ４０３ ８に−
ＭＢＬ−７５ ＡＥ８Ｗ４８Ｇ” ８に−ＭＢＬ−９３
−２ 。Ｊ８Ｗ６２０’ ８に−ＭｇＬ−９３−３ ”
３８ＭＧ８Ｗ１２２２’ ８に−ＭＲＩ、−１２７ ０
２”ＭＧＨＴ２９ ８に−ＭＨＩ、−１３０ ０３４３
ＭＧ３に−００−１０’ ８に−ＭＥＬ−１＋５３ Ｕ
３７３ＭＧ３゜ッ。 Ａ−３８２ マウスモノクローナル抗体の生産 ＢＡＬＢｌｏまたは（１３ＡＬＢ１０Ｘ ０５７ＢＬ／
６）Ｆｔマウスｒアストウサイトーマ８に−ＭＧ−１か
卵巣癌細胞８１（−０Ｖ−３か子宮癌細胞８に−ＵＴ−
１のいずれかで免疫した。約１００μｌの遠沈した細胞
の腹腔内投与１１−２週間の間隔で２〜５回行なった。
Ｑ終投与の３日後、免疫され７’Ｃ牌細胞とマウスのミ
エローマＭｏｒｅ−２１ＮＳ／１細胞との融合が既述の
方法で行なわれた（ Ｄｉｐｐｏｌｄ、 Ｗ。
エローマＭｏｒｅ−２１ＮＳ／１細胞との融合が既述の
方法で行なわれた（ Ｄｉｐｐｏｌｄ、 Ｗ。
Ｇ、、 ａｔ ａｌ、 （１９８０） Ｐｒｏｅ、 Ｎ
ａｔ’１． Ａｅａｄ、８ｅ１゜ＵＳＡ ？？＋６６１
４）。ハイプリドーマ培養株は正？イなマウスの牌細胞
をフィーダ一層として９６ウエルプレートで限界希釈す
ることによって少くとも２回サブクローン化しンｈ。培
養上清について免疫に使った細胞株と他のタイプのヒト
腫瘍細胞から成る一連の培養細胞上で抗マウスＩｇＭＨ
Ａ法によル抗体活性全追跡した。クローン化したハイブ
リドーマ細胞ｔｎｕ／ｒｓｕマウスに皮下投与した。次
第に生長する腫ノリをもつマウスからとった血清を集め
、血清学的および生化学的なキャラクタリゼーション（
＝特徴の解明）に使った。抗体のサブクラスを抗ＩｇＨ
Ｅｆに特異的な試薬（Ｂｌｏｎ＠ｔｌｅｓ＋ Ｋ＠ｎｓ
ｌｎｇｔｏｎ＋ＭＤ）で二重拡散によって測定した。
ａｔ’１． Ａｅａｄ、８ｅ１゜ＵＳＡ ？？＋６６１
４）。ハイプリドーマ培養株は正？イなマウスの牌細胞
をフィーダ一層として９６ウエルプレートで限界希釈す
ることによって少くとも２回サブクローン化しンｈ。培
養上清について免疫に使った細胞株と他のタイプのヒト
腫瘍細胞から成る一連の培養細胞上で抗マウスＩｇＭＨ
Ａ法によル抗体活性全追跡した。クローン化したハイブ
リドーマ細胞ｔｎｕ／ｒｓｕマウスに皮下投与した。次
第に生長する腫ノリをもつマウスからとった血清を集め
、血清学的および生化学的なキャラクタリゼーション（
＝特徴の解明）に使った。抗体のサブクラスを抗ＩｇＨ
Ｅｆに特異的な試薬（Ｂｌｏｎ＠ｔｌｅｓ＋ Ｋ＠ｎｓ
ｌｎｇｔｏｎ＋ＭＤ）で二重拡散によって測定した。
マウスからとった七ツクローナル抗体はこの方法を説明
するのに役に立つ。この分野に通じたものにとっては、
この方法はマウスに特異的なものでなく、ハイプリドー
マ法が適用できるどんな種からのモノクローナル抗体を
作り出すためにも使いうる。
するのに役に立つ。この分野に通じたものにとっては、
この方法はマウスに特異的なものでなく、ハイプリドー
マ法が適用できるどんな種からのモノクローナル抗体を
作り出すためにも使いうる。
付着性の標的細胞にとっては、２０ｏ〜５００のトリゾ
シン処理した細胞ｆ ＴＩｒａｓａｋｌ プレー） （
Ｆａｌａｏｎ−ｒイクロテストプレート３０３４）のウ
ェルにｌＯμｌずつ播き、−晩で付着させる。
シン処理した細胞ｆ ＴＩｒａｓａｋｌ プレー） （
Ｆａｌａｏｎ−ｒイクロテストプレート３０３４）のウ
ェルにｌＯμｌずつ播き、−晩で付着させる。
非付着性の標的細胞はウェルを４５分間室温でＤｕｌｂ
＠ｅｃ（１のリン酸緩衝塩溶液（ＰＢＳ）（ＤＰＢ８゜
ＧＩＢＯＯ）中１．０＋１９／ｄにとがしたコンヵナノ
々リンＡ （０ＯＩＩＡ 、グレードＷ 、 ８１ｇｍ
ａ Ｃｈｅｍｉｃｍｌ＠。
＠ｅｃ（１のリン酸緩衝塩溶液（ＰＢＳ）（ＤＰＢ８゜
ＧＩＢＯＯ）中１．０＋１９／ｄにとがしたコンヵナノ
々リンＡ （０ＯＩＩＡ 、グレードＷ 、 ８１ｇｍ
ａ Ｃｈｅｍｉｃｍｌ＠。
８ｔ、 Ｌｏｕｌｓ＃Ｍｏ）の１０μ！で前処理するこ
とによってウェルに接触させた。プレートを２回洗い残
液を吸いとった後ＤＰＢ８中に標的細胞金加え４５分間
室温でインキュベートした。
とによってウェルに接触させた。プレートを２回洗い残
液を吸いとった後ＤＰＢ８中に標的細胞金加え４５分間
室温でインキュベートした。
免疫のロゼツト形成（抗マウスＩｇ ＭＨＡ）はすでに
述べられている（Ｕ・ｄ畠＋ＴＬ−＋ （１９７９）
＊上記） ＯｒＯＪｇ結合法についても希釈しないウサ
ギの抗マウスＩｇＧ （ＤＡＫＯ＋ Ａｃｅｕｒａｔ＊
Ｏｈ＊ｍ１ｃａｌｓ＋Ｗ＊５ｔｂｔ＋ｒｙ＋ ＮＹ
）がプロティンＡ（Ｄ代！ＤＫ用いられた以外は既述の
とお少である（ Ｋ（ＩＯ，Ｇ、Ｏ，。
述べられている（Ｕ・ｄ畠＋ＴＬ−＋ （１９７９）
＊上記） ＯｒＯＪｇ結合法についても希釈しないウサ
ギの抗マウスＩｇＧ （ＤＡＫＯ＋ Ａｃｅｕｒａｔ＊
Ｏｈ＊ｍ１ｃａｌｓ＋Ｗ＊５ｔｂｔ＋ｒｙ＋ ＮＹ
）がプロティンＡ（Ｄ代！ＤＫ用いられた以外は既述の
とお少である（ Ｋ（ＩＯ，Ｇ、Ｏ，。
ａｔ ｍｌ、 （１９７８）Ｊ、 Ｉｍｍｕｎｏｌ、Ｍ
＠ｔｈ、２３＋１９７）。
＠ｔｈ、２３＋１９７）。
モノクローナルな血清は１０″″Ｉｔ、スタートとして
滴定された口吸収操作法も既述のとおりである（ Ｏａ
ｒ＠ｙ、 Ｔ、Ｅ、、 ａｔ ｍｌ、 （１９７６）上
記）。
滴定された口吸収操作法も既述のとおりである（ Ｏａ
ｒ＠ｙ、 Ｔ、Ｅ、、 ａｔ ｍｌ、 （１９７６）上
記）。
組織切片の免疫的ペルオキシダーゼ染色には５μｍ７１
の棟結切片が使われた。風乾した切片全２％のり箔化し
たホルムアルデヒドで室温で１０分間固定した（ Ｆａ
ｒｒ、 Ａ、Ｇ、、 ａｔ ａｔ、（１９８１）Ｊ、
ＩｍｍｕｎｏｌｏＭｏｔｈ、 ４７ ： １２９ ）６
切片は正常なヒトの肝、腎、肺、膵、脳、皮ハ１、大腸
、甲状腺、こう丸、子宮、卵巣、牌、９７７９節及び卵
巣癌腫から得られた。通常は１１５００希釈のモノクロ
ーナル血清、ビオチン化したウマ抗マウスＩｇＧ及びア
ビジンとビオチン化した西洋ワサビのペルオキシダーゼ
（Ｖｅｃｔａｓｔａｌｎ試錦、 ＶｅｃｔｏｒＬａｂｏ
ｒａｔｏｒｌｅｓ、 Ｂｕｒｌｉｎｇａｍｅ＋ ＯＡ）
の混合液からなる三重サンドイツチ法をメーカーの推奨
する方法に従って用いた。この方法で過剰のパックグラ
ウンドを示す特殊な組織すなわち腎、肝、及び膵では１
７２００希釈のモノクローナル血清と１１５０希釈のペ
ルオキシダーゼ結合ウサギ抗マウスｘｇ（ｐＡＫｏｐｔ
ｓｔ）からなる二重サンドイツチ法が用いられた。
の棟結切片が使われた。風乾した切片全２％のり箔化し
たホルムアルデヒドで室温で１０分間固定した（ Ｆａ
ｒｒ、 Ａ、Ｇ、、 ａｔ ａｔ、（１９８１）Ｊ、
ＩｍｍｕｎｏｌｏＭｏｔｈ、 ４７ ： １２９ ）６
切片は正常なヒトの肝、腎、肺、膵、脳、皮ハ１、大腸
、甲状腺、こう丸、子宮、卵巣、牌、９７７９節及び卵
巣癌腫から得られた。通常は１１５００希釈のモノクロ
ーナル血清、ビオチン化したウマ抗マウスＩｇＧ及びア
ビジンとビオチン化した西洋ワサビのペルオキシダーゼ
（Ｖｅｃｔａｓｔａｌｎ試錦、 ＶｅｃｔｏｒＬａｂｏ
ｒａｔｏｒｌｅｓ、 Ｂｕｒｌｉｎｇａｍｅ＋ ＯＡ）
の混合液からなる三重サンドイツチ法をメーカーの推奨
する方法に従って用いた。この方法で過剰のパックグラ
ウンドを示す特殊な組織すなわち腎、肝、及び膵では１
７２００希釈のモノクローナル血清と１１５０希釈のペ
ルオキシダーゼ結合ウサギ抗マウスｘｇ（ｐＡＫｏｐｔ
ｓｔ）からなる二重サンドイツチ法が用いられた。
懸濁状態の血液の白血球の免疫的蛍光染色は既述の方法
（Ｍａｔｔ＠ｓ、 Ｍ、Ｊ、＃ ａｔ ａｌ、 （１９
７９）Ｊ、 Ｉｍｍｕｎｏｌ、１２３．２８５１）のよ
りにして行なったが１／４０希釈でのフルオレセイン結
合ヤギ抗マクスＩｇ （０ＩＩＩＩＰ＠Ｉ Ｌａｂｏｒ
ａｔｏｒｉ＠ｓ、 ０ｏｅｈｒａｎｖｉｌｌｓ。
（Ｍａｔｔ＠ｓ、 Ｍ、Ｊ、＃ ａｔ ａｌ、 （１９
７９）Ｊ、 Ｉｍｍｕｎｏｌ、１２３．２８５１）のよ
りにして行なったが１／４０希釈でのフルオレセイン結
合ヤギ抗マクスＩｇ （０ＩＩＩＩＰ＠Ｉ Ｌａｂｏｒ
ａｔｏｒｉ＠ｓ、 ０ｏｅｈｒａｎｖｉｌｌｓ。
ＦＡ）と１１５０希釈のモノクローナル血清が使われた
。リンパ球と顆粒球は形態学的に区別された。
。リンパ球と顆粒球は形態学的に区別された。
免疫的沈殿法
各々の抗体が免疫した細胞を次の３つの方法でラベルし
７た後界面活性剤で可溶化した抽出物から抗ｊζ（を沈
殿させる能力全テストされた、すなわち、（”ｉｌ）グ
ルコサミンの代謝的とシ込み（Ｏｇａｔａ、Ｓ−夏、ａ
ｔ ａｌ、 （１９８１） Ｐｒｏｅ、Ｎａｔ’ｌ。
７た後界面活性剤で可溶化した抽出物から抗ｊζ（を沈
殿させる能力全テストされた、すなわち、（”ｉｌ）グ
ルコサミンの代謝的とシ込み（Ｏｇａｔａ、Ｓ−夏、ａ
ｔ ａｌ、 （１９８１） Ｐｒｏｅ、Ｎａｔ’ｌ。
Ａｃａｄ、 Ｓｃｉ、 ＵＳＡ ７８ 、７７０ ）、
［８１Ｓ］−メチ、にコンの代謝的取り込み（０ａｌｒ
ｎｅｒｏａｓ、 Ｊ、Ｇ、＋ ＠ｔ ａｔ。
［８１Ｓ］−メチ、にコンの代謝的取り込み（０ａｌｒ
ｎｅｒｏａｓ、 Ｊ、Ｇ、＋ ＠ｔ ａｔ。
（１９８２） Ｐｒｏｅ、 Ｎａｔ’１． Ａｃａｄ、
８ｅｉ、 ＵＳＡユ且：ｆｉ６４１）、または可溶化
した細胞膜のクロラミンＴ１！ｌｌＩジベル化（０ａｌ
ｒｎｃｒｏｓｓ Ｊ、 Ｇ、、 （１９８２）上記）の
３つでちる。いくつかの実験で用いられたラベル化した
細胞のＮＰ４０可溶化とラベル化した抽出液のコンカナ
バリンＡ （０ｏｎＡ）＋ファロース分画社既述のとお
りである（ ０ａｉｒｎｅｒｏｓｓ。
８ｅｉ、 ＵＳＡユ且：ｆｉ６４１）、または可溶化
した細胞膜のクロラミンＴ１！ｌｌＩジベル化（０ａｌ
ｒｎｃｒｏｓｓ Ｊ、 Ｇ、、 （１９８２）上記）の
３つでちる。いくつかの実験で用いられたラベル化した
細胞のＮＰ４０可溶化とラベル化した抽出液のコンカナ
バリンＡ （０ｏｎＡ）＋ファロース分画社既述のとお
りである（ ０ａｉｒｎｅｒｏｓｓ。
Ｊ、Ｇ、、（１９８２）上記と同じ： Ｌ１ｏｙｄ＋
Ｋ、ｏ、。
Ｋ、ｏ、。
ａｉ ａｌ、（１９８１） Ｊ、 Ｉｍｍｕｎｏｌ、４
２６：２４０８）。
２６：２４０８）。
５ｔａｐｈｙｌｏａｏｅｅｕｅ ａｕｒ＠ｕｓ （スタ
フィロコッカスアウレウス）全使った１”■でラベルし
た試料の免疫的沈降法は既述のとおシである（ ０ａｌ
ｒｎｅｒｏ＠ＬＪ、 Ｇ、、 ａｔ ａｌ、 （１９８
２）上記と同じ）。分画されてない細胞抽出液から２Ｘ
１０＠ｅｐｍ ”Ｓの試料は予め清浄化することが省れ
た以外同様に操作された。ａ１８ラベルした抽出液の０
ｏｎＡ力２ム溶出液画分やｌ Ｈ２ベルの抽出液に対し
ては２×１０”ｅｐｍの試料及び別の洗浄緩衝液（Ｌｌ
ｏｙｄ ＋に、 Ｏ，、ａｔ ａｌ、 （１９８１）上
記と同じ）が使われ九〇 沈殿した分子会２．０％ドデシル硫酸す） ＩＪクム（
８Ｄ８）、１２■７／ｌｘｔのジチオスレイトール（Ｄ
ＴＴ）、１５％（Ｗ／マ）シュフロース、０．０１％ビ
μ二ンＹを含むｏ、ＯｔＭ）リス塩酸（ｐｉ（ｙ、 ２
）の６０μ！と１００Ｃ５分間加熱することによって
抽出し、ポリアクリルアミドゲル電気泳動（ＰＡＧＥ）
（Ｌａ＊ｍｍ１ｉ、 Ｕ、に、 （１９７Ｇ ）Ｎａ
ｔｕｒｅ２２７：６８Ｇ）ｔ−９％ゲルによって分析し
た。二次元電気泳動（焦点電気泳動と８Ｄ８電気泳動）
には、免疫沈降物全既述の方法（Ｏｇａｔｍ、 ８−Ｉ
。
フィロコッカスアウレウス）全使った１”■でラベルし
た試料の免疫的沈降法は既述のとおシである（ ０ａｌ
ｒｎｅｒｏ＠ＬＪ、 Ｇ、、 ａｔ ａｌ、 （１９８
２）上記と同じ）。分画されてない細胞抽出液から２Ｘ
１０＠ｅｐｍ ”Ｓの試料は予め清浄化することが省れ
た以外同様に操作された。ａ１８ラベルした抽出液の０
ｏｎＡ力２ム溶出液画分やｌ Ｈ２ベルの抽出液に対し
ては２×１０”ｅｐｍの試料及び別の洗浄緩衝液（Ｌｌ
ｏｙｄ ＋に、 Ｏ，、ａｔ ａｌ、 （１９８１）上
記と同じ）が使われ九〇 沈殿した分子会２．０％ドデシル硫酸す） ＩＪクム（
８Ｄ８）、１２■７／ｌｘｔのジチオスレイトール（Ｄ
ＴＴ）、１５％（Ｗ／マ）シュフロース、０．０１％ビ
μ二ンＹを含むｏ、ＯｔＭ）リス塩酸（ｐｉ（ｙ、 ２
）の６０μ！と１００Ｃ５分間加熱することによって
抽出し、ポリアクリルアミドゲル電気泳動（ＰＡＧＥ）
（Ｌａ＊ｍｍ１ｉ、 Ｕ、に、 （１９７Ｇ ）Ｎａ
ｔｕｒｅ２２７：６８Ｇ）ｔ−９％ゲルによって分析し
た。二次元電気泳動（焦点電気泳動と８Ｄ８電気泳動）
には、免疫沈降物全既述の方法（Ｏｇａｔｍ、 ８−Ｉ
。
ａｔ ａｌ、 （１９８１）上記と同じ： Ｏ’Ｆａｒ
ｒ＊１１． Ｐ。
ｒ＊１１． Ｐ。
Ｈ，、ａｔ ａｌ、 （１９７７） Ｍ＠ｔｈｏｄｓ
ｌｎ Ｏ＊１１ Ｂｌｏｌｏｇｙ（Ｐｒ１ｌｌｅＯｔｔ
＋ Ｄ、 Ｍ、 ｌｄＪ ） Ａｅａｅｌｅｍｉｅ Ｐ
ｒｅｓｓ、 ＮＹ ＋ＮＳ１６巻４０７〜４２０頁）で
抽出し取扱った。還元しない試料にはＤＴＴが省略され
１４． Ｏｍｔ２／ｍｌのヨードアセトアミドが試料に
加えられた。
ｌｎ Ｏ＊１１ Ｂｌｏｌｏｇｙ（Ｐｒ１ｌｌｅＯｔｔ
＋ Ｄ、 Ｍ、 ｌｄＪ ） Ａｅａｅｌｅｍｉｅ Ｐ
ｒｅｓｓ、 ＮＹ ＋ＮＳ１６巻４０７〜４２０頁）で
抽出し取扱った。還元しない試料にはＤＴＴが省略され
１４． Ｏｍｔ２／ｍｌのヨードアセトアミドが試料に
加えられた。
ハイプリドーマの選別一実施例
Ｍ人１０３と？ｖｌＡ９９で代表される群のモノクロー
ナル抗体は５Ｋ−ＯＶ−２１（卵巣癌細胞）で免疫され
たマウスの牌細胞金融合することで得られた。ＭＨ９９
によって代表される群のモノクローナル抗体は８に−Ｕ
Ｔ−１（子宮癌細胞）で免疫することで得られた。アス
トロサイトーマの細胞株ＳＫ−ＭＯ−１で免疫されたマ
ウスからモノクローナル抗体ＡＪ ２ｆｔ得たことはす
でに記載されている（ ０ａｌｒｎ＠ｒｏｍｓ＋ Ｊ、
Ｇ、、 （Ｉ Ｑ ８２ ）上記に同じ）。１１ ｆ
ｉｔのサブクラスはモノクローナル抗体ＭＡ１０３では
ガンマサブ２ａであり、ＭＡ９９ではガンマザブ１、Ｍ
Ｉ１９９ではガンマサブ２＆、ＡＪ２ではガンマサブ１
であることがきめられた。
ナル抗体は５Ｋ−ＯＶ−２１（卵巣癌細胞）で免疫され
たマウスの牌細胞金融合することで得られた。ＭＨ９９
によって代表される群のモノクローナル抗体は８に−Ｕ
Ｔ−１（子宮癌細胞）で免疫することで得られた。アス
トロサイトーマの細胞株ＳＫ−ＭＯ−１で免疫されたマ
ウスからモノクローナル抗体ＡＪ ２ｆｔ得たことはす
でに記載されている（ ０ａｌｒｎ＠ｒｏｍｓ＋ Ｊ、
Ｇ、、 （Ｉ Ｑ ８２ ）上記に同じ）。１１ ｆ
ｉｔのサブクラスはモノクローナル抗体ＭＡ１０３では
ガンマサブ２ａであり、ＭＡ９９ではガンマザブ１、Ｍ
Ｉ１９９ではガンマサブ２＆、ＡＪ２ではガンマサブ１
であることがきめられた。
モノクローナル抗体ＡＪ２とＭＡ１０３は一連のヒト腫
瘍細胞を一次スクリーニングでテストした全ての標的細
胞と反応することが判った。モノクローナル抗体ＭＨ９
９は免疫した船細胞およびその他いろいろのタイプの細
胞とは反１ａしたが黒色ｍとアストロサイトーマとは反
応しなかった。
瘍細胞を一次スクリーニングでテストした全ての標的細
胞と反応することが判った。モノクローナル抗体ＭＨ９
９は免疫した船細胞およびその他いろいろのタイプの細
胞とは反１ａしたが黒色ｍとアストロサイトーマとは反
応しなかった。
上記のモノクローナル抗体の例で検出される抗原の例実
施例１：ＡＪ２ モノクローナル抗体ＡＪ２によって検出される人Ｊ２抗
原は正常細胞および悪性化した細胞（第１表）ｔ−含む
免疫的ロゼツト形成でテストされた全ての１４０１ｆｆ
ｌの細胞株に仔在したＯｖＢ′ＲＯサル細胞にも陽性で
あったがＯＨＯノ・ムスター細胞は陰性であった。ロゼ
ツト形成試験でのタイターは通フ１ｔｌＯ””〜１０−
６であった。ＡＪ２抗原は吸収分析によって赤血球には
検出されなかった。免疫蛍光法によってその抗原はヒト
の正常抽液単核細胞の少くとも７０〜８０％に検出され
たが染色はかなり弱かったのではつきシした陰性細胞群
があるかどうかは不明確である。その抗原はまた免疫的
ペルオキシダーゼ法で試験した１３の正常ヒト組織全て
の切片に検出された。
施例１：ＡＪ２ モノクローナル抗体ＡＪ２によって検出される人Ｊ２抗
原は正常細胞および悪性化した細胞（第１表）ｔ−含む
免疫的ロゼツト形成でテストされた全ての１４０１ｆｆ
ｌの細胞株に仔在したＯｖＢ′ＲＯサル細胞にも陽性で
あったがＯＨＯノ・ムスター細胞は陰性であった。ロゼ
ツト形成試験でのタイターは通フ１ｔｌＯ””〜１０−
６であった。ＡＪ２抗原は吸収分析によって赤血球には
検出されなかった。免疫蛍光法によってその抗原はヒト
の正常抽液単核細胞の少くとも７０〜８０％に検出され
たが染色はかなり弱かったのではつきシした陰性細胞群
があるかどうかは不明確である。その抗原はまた免疫的
ペルオキシダーゼ法で試験した１３の正常ヒト組織全て
の切片に検出された。
ＡＪ２抗原ｅ（”ＩＩ）ｆル＊ザミｙ、〔ｓＩＳ〕メチ
オニンまたは１”■で放射う（ルした後細ｎａ；抽出液
から沈Ｇ−Ｊせた。黒色腫、アストロザイトーマ、カル
シノーマ、白面病細鞄全含む試験した１４細飽株全てに
ついて１つまたはそれ以上のラベル化法でテストした時
にし唖性であった。
オニンまたは１”■で放射う（ルした後細ｎａ；抽出液
から沈Ｇ−Ｊせた。黒色腫、アストロザイトーマ、カル
シノーマ、白面病細鞄全含む試験した１４細飽株全てに
ついて１つまたはそれ以上のラベル化法でテストした時
にし唖性であった。
話的に多い成分は細胞株によシ分子ＪＱ １２５ Ｋか
ら１４０にのものであ夛、これは（”ＩＩ）−グルコサ
ミンでラベルされる噌−の成分であった。他のサブユニ
ットも存在したがその数や大きさは細胞株で異なってい
た。ＡＪ２抗原ｉｊ、Ｃ０ｎＡ−セファロースに結合し
、α−メチルマンノシドで溶出され７と。ＡＪ２抗原の
サブユニット借造は免疫に用いた細胞株のＳＫ−ＭＯ−
１にｊ？いて１１“Ｉでラベルした細胞抽出液を用いて
殆んど完全に調べられた。二次元電気泳動によりその抗
Ｋ＜は分子１：１が１７０に％１４０Ｋ、１４ＱＫ、２
８にで等１′、Ｌ点が夫々ｐ＋１５．２．５．５．４７
．５．７〜６．２をもつ４つの鎖からなることが示され
た。還元していない試料’１８Ｄ８−ＰＡＧＥで泳動さ
せるとＬ鎖はみられず一つまたはそれ以上のＨａと結合
していることが示唆される。サブユニット間のジスルフ
ィド結合は焦点電気泳動（はじめの方向の泳動分１１１
１１）の前後で、還元をする、しない試料ｔ２次元電気
泳動をすることで明らかにされた。その結果り鎮は恐う
（１４０に分子量のサブユニットのうちの１つ、ｐＢ
５． ！ｉの等電点をもつものと結合していると思われ
る。それは１）還元しない試料においてこのサブユニッ
トだけが泳動が遅く２）還元せずに焦点電気泳動方向に
泳動しそれから還元して８Ｄ８−ＰＡＧＥ分離したとき
より塩基性の１４０にサブユニットの下にＬ鎖の殆んど
が移動することで示されている。人Ｊ２の免疫沈降を大
抵は（１１１５）メチオニンで２ベルした後１３の別の
細胞株について行なった。２５〜２８にの分子量のＬ鎮
はこのアイソトープで非常にわずかしかみられない ｌ
ｆｉ １で標識した試料を使わなければ認められないだ
ろう。これら細胞株のうち１１がその成分の分子量にわ
ずかに差がある以外８に−ＭＧ−１と類似した結果を与
えた０１７０にのバンドは全ての試験でみられなかった
が常にうすい／々ンドであったのでみられなかったこと
は有意であることはない。しかし２種の細胞株では標準
的な）ｅターンからかなりの差がみられた。すなわち、
アストロサイトーマＡ０２では１０５Ｋにもう１つのノ
饗ンドがみられたＯＴ−細胞白血病細胞ＭＯＬＴ−４で
は１１５にと１００Ｋに２つの濃い／々ンドがあった。
ら１４０にのものであ夛、これは（”ＩＩ）−グルコサ
ミンでラベルされる噌−の成分であった。他のサブユニ
ットも存在したがその数や大きさは細胞株で異なってい
た。ＡＪ２抗原ｉｊ、Ｃ０ｎＡ−セファロースに結合し
、α−メチルマンノシドで溶出され７と。ＡＪ２抗原の
サブユニット借造は免疫に用いた細胞株のＳＫ−ＭＯ−
１にｊ？いて１１“Ｉでラベルした細胞抽出液を用いて
殆んど完全に調べられた。二次元電気泳動によりその抗
Ｋ＜は分子１：１が１７０に％１４０Ｋ、１４ＱＫ、２
８にで等１′、Ｌ点が夫々ｐ＋１５．２．５．５．４７
．５．７〜６．２をもつ４つの鎖からなることが示され
た。還元していない試料’１８Ｄ８−ＰＡＧＥで泳動さ
せるとＬ鎖はみられず一つまたはそれ以上のＨａと結合
していることが示唆される。サブユニット間のジスルフ
ィド結合は焦点電気泳動（はじめの方向の泳動分１１１
１１）の前後で、還元をする、しない試料ｔ２次元電気
泳動をすることで明らかにされた。その結果り鎮は恐う
（１４０に分子量のサブユニットのうちの１つ、ｐＢ
５． ！ｉの等電点をもつものと結合していると思われ
る。それは１）還元しない試料においてこのサブユニッ
トだけが泳動が遅く２）還元せずに焦点電気泳動方向に
泳動しそれから還元して８Ｄ８−ＰＡＧＥ分離したとき
より塩基性の１４０にサブユニットの下にＬ鎖の殆んど
が移動することで示されている。人Ｊ２の免疫沈降を大
抵は（１１１５）メチオニンで２ベルした後１３の別の
細胞株について行なった。２５〜２８にの分子量のＬ鎮
はこのアイソトープで非常にわずかしかみられない ｌ
ｆｉ １で標識した試料を使わなければ認められないだ
ろう。これら細胞株のうち１１がその成分の分子量にわ
ずかに差がある以外８に−ＭＧ−１と類似した結果を与
えた０１７０にのバンドは全ての試験でみられなかった
が常にうすい／々ンドであったのでみられなかったこと
は有意であることはない。しかし２種の細胞株では標準
的な）ｅターンからかなりの差がみられた。すなわち、
アストロサイトーマＡ０２では１０５Ｋにもう１つのノ
饗ンドがみられたＯＴ−細胞白血病細胞ＭＯＬＴ−４で
は１１５にと１００Ｋに２つの濃い／々ンドがあった。
別のアストロサイトーマと別のリンフ９腫細胞は８に−
ＭＧ−１のそれらと同じ結果を示し喪。従ってこの種の
変化は細胞のタイプの機能ではないようである。
ＭＧ−１のそれらと同じ結果を示し喪。従ってこの種の
変化は細胞のタイプの機能ではないようである。
ＡＪ２抗原はヒト細胞で免疫したマウスで最も多い抗原
である。いろいろなヒト腫瘍細胞または正常な繊維芽細
胞で免疫したマウスからとった１１の血清試料全てが（
１１ｇ）−メチオニン標識した細胞抽出液のＰＡＧＥ上
で主要な成分としてのこの抗原を沈殿した。ＡＪ２抗原
として沈殿した成分の同定は２つの呉った細胞株からと
った標識抽出液で順次行なわれる沈殿によって確定され
た。モノクローナル抗体ＡＪ２で予めクリーニングして
おくことは１４０にの／々ンドを除くが同じＩｇサブク
ラスの関連のない抗原に対する別のモノクローナル抗体
で予洗することは影響を与えなかった。いくつかの細胞
株（例えば卵嶌癌細胞２７７４）の（’８）−メチオニ
ンでラベルした抽出液を使うと人Ｊ２のバンドはマウス
の抗ヒト細胞血清によって沈殿される最も濃い／饗ンド
であった。その他の観察でもＡＪ２抗原がマウスにおい
て高い抗原性があることが確められた・すなわちヒトの
卵巣癌細胞で免疫したマウスの肺細胞を融合した後免疫
した細胞株との強い反応をもとに１５の培養上清全選択
した。
である。いろいろなヒト腫瘍細胞または正常な繊維芽細
胞で免疫したマウスからとった１１の血清試料全てが（
１１ｇ）−メチオニン標識した細胞抽出液のＰＡＧＥ上
で主要な成分としてのこの抗原を沈殿した。ＡＪ２抗原
として沈殿した成分の同定は２つの呉った細胞株からと
った標識抽出液で順次行なわれる沈殿によって確定され
た。モノクローナル抗体ＡＪ２で予めクリーニングして
おくことは１４０にの／々ンドを除くが同じＩｇサブク
ラスの関連のない抗原に対する別のモノクローナル抗体
で予洗することは影響を与えなかった。いくつかの細胞
株（例えば卵嶌癌細胞２７７４）の（’８）−メチオニ
ンでラベルした抽出液を使うと人Ｊ２のバンドはマウス
の抗ヒト細胞血清によって沈殿される最も濃い／饗ンド
であった。その他の観察でもＡＪ２抗原がマウスにおい
て高い抗原性があることが確められた・すなわちヒトの
卵巣癌細胞で免疫したマウスの肺細胞を融合した後免疫
した細胞株との強い反応をもとに１５の培養上清全選択
した。
これら上清の中の６個は３つの特徴的な１！３Ｉでラベ
ルされた成分で同定されるＡＪ２抗ｆｆ１ｆｉ−免疫沈
降させることがわかった。
ルされた成分で同定されるＡＪ２抗ｆｆ１ｆｉ−免疫沈
降させることがわかった。
２つ目の七ツクローナル抗体ＭＡ９９は卵巣癌細胞でマ
ウスを免疫することで得られＡＪ２と同じ抗原を免疫沈
降したがある標的細胞に対する反応性に大きなちがいを
示した。Ｍ人９９は少くとも６を数えるモノクローナル
抗体群の代表である。モノクローナル抗体ＡＪ２による
沈殿でＭＡ９９によって沈殿される抗原が除かれる、す
なわち、同じ抗原と反１１６シていることが示されてい
る。モノクローナル抗体Ｍ人９９はテストした全ての付
着性の標的細胞と反応したがＡＪ２と異なシ殆んどのリ
ンノｅ腫および白血病細胞とは反Ｊ＋ｂ＋ Ｌｔないか
弱い反応性であった。付着性標的細胞に対するモノタ日
−ナル抗体ＭＡ９９＋７）０ゼット形成抗体価はＡＪ２
の抗体価と同じ程度（通常１０″″〜１ｏ−” ）であ
った。さらにＡＪ２のリンノに腫や白血病細胞に幻する
抗体価は付着性の標的細胞に対する抗体価と同じ程度で
あシ、このことはＭＡ９９がリンノＲ肺や白血病細胞に
反応しないことがこれら細胞の抗原の発現が低レベルに
あるためでないこと全示唆している。免持沈降において
はモノクローナル抗体ＭＡ９９ｉｔＡＪ２よりかなり低
い活性で最適の沈降には０．１μ！よりもｌＯμＩｔ要
し、沈殿させる抗原もずつと少ない。モノクローナル抗
体ＭＡ９９で組織切片を免疫ペルオキシダーゼ染色をす
るとＡＪ２でそれを染色するより弱くしか染色されず１
しかし大抵の組織で弱くではあるが陽性でおりまたある
組織ではある細胞型のみが染色された。
ウスを免疫することで得られＡＪ２と同じ抗原を免疫沈
降したがある標的細胞に対する反応性に大きなちがいを
示した。Ｍ人９９は少くとも６を数えるモノクローナル
抗体群の代表である。モノクローナル抗体ＡＪ２による
沈殿でＭＡ９９によって沈殿される抗原が除かれる、す
なわち、同じ抗原と反１１６シていることが示されてい
る。モノクローナル抗体Ｍ人９９はテストした全ての付
着性の標的細胞と反応したがＡＪ２と異なシ殆んどのリ
ンノｅ腫および白血病細胞とは反Ｊ＋ｂ＋ Ｌｔないか
弱い反応性であった。付着性標的細胞に対するモノタ日
−ナル抗体ＭＡ９９＋７）０ゼット形成抗体価はＡＪ２
の抗体価と同じ程度（通常１０″″〜１ｏ−” ）であ
った。さらにＡＪ２のリンノに腫や白血病細胞に幻する
抗体価は付着性の標的細胞に対する抗体価と同じ程度で
あシ、このことはＭＡ９９がリンノＲ肺や白血病細胞に
反応しないことがこれら細胞の抗原の発現が低レベルに
あるためでないこと全示唆している。免持沈降において
はモノクローナル抗体ＭＡ９９ｉｔＡＪ２よりかなり低
い活性で最適の沈降には０．１μ！よりもｌＯμＩｔ要
し、沈殿させる抗原もずつと少ない。モノクローナル抗
体ＭＡ９９で組織切片を免疫ペルオキシダーゼ染色をす
るとＡＪ２でそれを染色するより弱くしか染色されず１
しかし大抵の組織で弱くではあるが陽性でおりまたある
組織ではある細胞型のみが染色された。
注目すべきことは腎においては腎糸球体のみ染色される
ことであった。それに対してＡＪ２は腎切片の全ての細
胞を染色した。ＡＪ２とＭＡ９９の差は親和性の差によ
るものであろうがサブユニット構造のちがいかまたは分
子の異った部位の発現のちがいによるものと思われる。
ことであった。それに対してＡＪ２は腎切片の全ての細
胞を染色した。ＡＪ２とＭＡ９９の差は親和性の差によ
るものであろうがサブユニット構造のちがいかまたは分
子の異った部位の発現のちがいによるものと思われる。
モノクローナル抗体１０３によって検出される抗原はＡ
Ｊ２抗原と同様に全てのヒト細胞株（２ｔＴ１表）およ
び全てのヒト組織の切片上でみられる。ロゼツト形成試
験におけるこの抗体の力価は１０″″１〜１〇−丁の範
囲にあシ、リンノぞ腫や白血病細胞に対して特に高い。
Ｊ２抗原と同様に全てのヒト細胞株（２ｔＴ１表）およ
び全てのヒト組織の切片上でみられる。ロゼツト形成試
験におけるこの抗体の力価は１０″″１〜１〇−丁の範
囲にあシ、リンノぞ腫や白血病細胞に対して特に高い。
ＹｇＲＯサル腎細胞は陰性であった。免疫蛍光法によっ
てＭＡ１０３抗原も全ての正常面白血球にみられるが赤
血球では検出されない。この抗原はしかしながら定量的
な吸収操作によってヒト赤血球で検出されたが他のタイ
プの細胞上より非常に低濃度である。
てＭＡ１０３抗原も全ての正常面白血球にみられるが赤
血球では検出されない。この抗原はしかしながら定量的
な吸収操作によってヒト赤血球で検出されたが他のタイ
プの細胞上より非常に低濃度である。
マウス、ラット、ウサギ、ネコ、ヒツジ、ウマ、） Ｉ
Ｊ 、ＩＪ−サスザル、ヒヒ、シナモルガスザルチノパ
ンツーの赤血球で検出されなかった◎モノクローナル抗
体ＭＡ１０３は５Ｋ−ＲＯ−４腎癌細胞からの分子量５
０〜６５にの幅のあるバンドを沈殿させた。この成分は
（”Ｉｔ）グルコサミンで標識したときのみ検出され（
８１Ｂ）メチオニン（” ＩＩ ）−ロイシン １！ｌ
１で２ベルした場合には検出されなかった。このこと
はそれが糖鎖のたくさんついた糖タンノｑりであること
を示唆している。還元していない試料はアクリルアミド
ゲルでわずかに早く泳動した。この抗原の等電点はｐ［
１４，２〜４．５であった。ＭＡｌｏＢで検出される抗
原の決定基は定量的吸収操作で調べられるように１００
Ｃで少くとも５分間安定で、加熱された１＋Ｊ溶化され
た抗原はなお免疫的に沈殿させることができる。この性
質は決定基が炭水化物であることを示しているが、しか
しこの点を解明する実験は結論に至っていない。トリプ
シン処理によって〔３Ｈ〕プルコサミンでラベルされた
細胞から靜された抗原はＭＡ１０３によつ゛Ｃ沈殿させ
うる。その抗原はアクリルアミドゲルで色紫先端を泳動
し、もとの分子の断片であることを示した。この実験で
その分子がトリプシンによって大きさが減少するので朝
夕／バクであることを示しているがトリプシン処理断片
のペプチド部分も関係していると思われるので認識され
た決定基が炭水化物の性質全もつことを証明するもので
ない。トリプシン処理した試料をプロナーゼで消化する
と、高濃度の試料でも免疫沈降やロゼツト形成金阻害す
る力をテストしても抗原活性は全て失われた。いろいろ
な糖でモノクローナル抗体ＭＡ１０３ｔ−阻害する試み
やいろいろな炭水化物分解酵素（ノイラミニダーゼ、β
−ガ２クトシダーゼ、α−ガラクトシダーゼ、フコシダ
ーゼ、ヘキソサミニダーゼ、ガラクトースオキシダーゼ
）でＭＡ１０３抗原を壊す試みは何の影響もなかった。
Ｊ 、ＩＪ−サスザル、ヒヒ、シナモルガスザルチノパ
ンツーの赤血球で検出されなかった◎モノクローナル抗
体ＭＡ１０３は５Ｋ−ＲＯ−４腎癌細胞からの分子量５
０〜６５にの幅のあるバンドを沈殿させた。この成分は
（”Ｉｔ）グルコサミンで標識したときのみ検出され（
８１Ｂ）メチオニン（” ＩＩ ）−ロイシン １！ｌ
１で２ベルした場合には検出されなかった。このこと
はそれが糖鎖のたくさんついた糖タンノｑりであること
を示唆している。還元していない試料はアクリルアミド
ゲルでわずかに早く泳動した。この抗原の等電点はｐ［
１４，２〜４．５であった。ＭＡｌｏＢで検出される抗
原の決定基は定量的吸収操作で調べられるように１００
Ｃで少くとも５分間安定で、加熱された１＋Ｊ溶化され
た抗原はなお免疫的に沈殿させることができる。この性
質は決定基が炭水化物であることを示しているが、しか
しこの点を解明する実験は結論に至っていない。トリプ
シン処理によって〔３Ｈ〕プルコサミンでラベルされた
細胞から靜された抗原はＭＡ１０３によつ゛Ｃ沈殿させ
うる。その抗原はアクリルアミドゲルで色紫先端を泳動
し、もとの分子の断片であることを示した。この実験で
その分子がトリプシンによって大きさが減少するので朝
夕／バクであることを示しているがトリプシン処理断片
のペプチド部分も関係していると思われるので認識され
た決定基が炭水化物の性質全もつことを証明するもので
ない。トリプシン処理した試料をプロナーゼで消化する
と、高濃度の試料でも免疫沈降やロゼツト形成金阻害す
る力をテストしても抗原活性は全て失われた。いろいろ
な糖でモノクローナル抗体ＭＡ１０３ｔ−阻害する試み
やいろいろな炭水化物分解酵素（ノイラミニダーゼ、β
−ガ２クトシダーゼ、α−ガラクトシダーゼ、フコシダ
ーゼ、ヘキソサミニダーゼ、ガラクトースオキシダーゼ
）でＭＡ１０３抗原を壊す試みは何の影響もなかった。
この結果は決定基が分子の炭水化物部分とタンノ９り質
の部分両方必要としていることを示唆しているＯ ＭＨ９Ｇ抗原に対する抗体は卵巣または子宮癌細胞を免
疫されたマウスから、６回の別々の融合から作られた。
の部分両方必要としていることを示唆しているＯ ＭＨ９Ｇ抗原に対する抗体は卵巣または子宮癌細胞を免
疫されたマウスから、６回の別々の融合から作られた。
モノクローナル抗体ＭＨ９９ｔｉ少くとも５つのモノク
ローナル抗体群の原型となる抗体であるが、黒色腫（１
６株テストした）、アストロサイトーマ（１８１テスト
した）あるいは正常のメラニン形成細胞とはロ玉ット形
成で反応しなかった。それは卵巣癌細胞の８／８、子宮
癌細胞のｌ／１、胃癌細胞の９／１６、大島癌細胞（Ｄ
７／’ｌ 、乳癌１１１ｊｌ 肥）８／１０ 、膀胱
（ｆｈ ｍ Ｈａ ）５／１０、腫瘍細胞の１７／１Ｂ
、テラトカルシノーマの３７３、子宮頚癌細胞のｌ／
１、膵臓癌の３／３、漿膜癌のｌ／１、神経芽腫細胞の
４７６、正常繊維芽細胞株の３１５、正當腎上皮細胞株
の２／２と反応した。
ローナル抗体群の原型となる抗体であるが、黒色腫（１
６株テストした）、アストロサイトーマ（１８１テスト
した）あるいは正常のメラニン形成細胞とはロ玉ット形
成で反応しなかった。それは卵巣癌細胞の８／８、子宮
癌細胞のｌ／１、胃癌細胞の９／１６、大島癌細胞（Ｄ
７／’ｌ 、乳癌１１１ｊｌ 肥）８／１０ 、膀胱
（ｆｈ ｍ Ｈａ ）５／１０、腫瘍細胞の１７／１Ｂ
、テラトカルシノーマの３７３、子宮頚癌細胞のｌ／
１、膵臓癌の３／３、漿膜癌のｌ／１、神経芽腫細胞の
４７６、正常繊維芽細胞株の３１５、正當腎上皮細胞株
の２／２と反応した。
８種のＴリンパ腫、白血病細胞のうち５株と３種のミニ
ロイド白血病細胞のうち１株は陽性であったが、テスト
したＢリンパ球種、ヌルリンパ球皿、骨髄腫の全ては陰
性であった。アフリカミドリザルの腎細胞株ＹＩＲＯは
陽性であったがハムスターの卵巣細胞株ＯＨＯは陰性で
あった（第１表）。
ロイド白血病細胞のうち１株は陽性であったが、テスト
したＢリンパ球種、ヌルリンパ球皿、骨髄腫の全ては陰
性であった。アフリカミドリザルの腎細胞株ＹＩＲＯは
陽性であったがハムスターの卵巣細胞株ＯＨＯは陰性で
あった（第１表）。
吸収試験によればある黒色腫とアストロサイ）−−ｒは
ＭＨ９９抗原を表現しなかった。従ってロゼツト形成試
験が陰性のことはおそらく認識される抗原が低濃度なの
か抗原決定基の露出がわずかであることを示している。
ＭＨ９９抗原を表現しなかった。従ってロゼツト形成試
験が陰性のことはおそらく認識される抗原が低濃度なの
か抗原決定基の露出がわずかであることを示している。
吸収試験によってもヒトの赤血球紘陰性であった・免疫
蛍光法では末梢血白血球は陰性であった。
蛍光法では末梢血白血球は陰性であった。
組織切片を用いてはＭＨ９Ｇは脳、牌、リン、ｅ節、肝
などは陰性であったが甲状腺、コラ丸、肺、膵、皮膚、
大腸、卵巣、子宮、腎でははシ性であった。いくつかの
組織ではある上皮細胞のみ染色され、子宮や腎では非常
に顕著で集合管やｌ１ｔａｌ管のみが染色される。卵巣
癌の切片では腫瘍細胞は黒く染まシ、基質細胞は陰性の
ようであった。
などは陰性であったが甲状腺、コラ丸、肺、膵、皮膚、
大腸、卵巣、子宮、腎でははシ性であった。いくつかの
組織ではある上皮細胞のみ染色され、子宮や腎では非常
に顕著で集合管やｌ１ｔａｌ管のみが染色される。卵巣
癌の切片では腫瘍細胞は黒く染まシ、基質細胞は陰性の
ようであった。
分子ｉ ２９ Ｋと３８にの２つのザブユニットは（８
６８）メチオニン、［”Ｈ）グルコサミンまたは１！Ｉ
Ｉでジ（ルされた細胞から由来するがＭｎＯ２で免疫
沈降された。等電点は夫々ｐＨ６，２〜６．７とｐＨ５
，９〜６２であり、夫々のサブユニットは一連の２ない
し３つの離接したスポットｔｌ−もっている。還元され
てない試料は普通でない様子で泳動した。すなわち約３
５にの分子量に相当する単一のノセンドが見られた。こ
のノマンドを解析するのに二次元のＰＡＧＥ’ｒ行った
が、その中で一次元は還元せずに８Ｄ８−ＰＡＧＥであ
シ、次いで還元しての第２方向の電気泳動を行なった・
この実験で還元していない成分が相方のサブユニットを
含むことが示され、サブユニットがジスルフィド結合で
結合していること全示唆している。８Ｄ８−ＰＡＧＥで
、この分子が異常な行動をとる理由ははつきシしていな
い。Ｍ）１９９の抗原決定基は１００Ｕ、５分間加熱す
ることによって破坊されたが吸収試験によって示される
。
６８）メチオニン、［”Ｈ）グルコサミンまたは１！Ｉ
Ｉでジ（ルされた細胞から由来するがＭｎＯ２で免疫
沈降された。等電点は夫々ｐＨ６，２〜６．７とｐＨ５
，９〜６２であり、夫々のサブユニットは一連の２ない
し３つの離接したスポットｔｌ−もっている。還元され
てない試料は普通でない様子で泳動した。すなわち約３
５にの分子量に相当する単一のノセンドが見られた。こ
のノマンドを解析するのに二次元のＰＡＧＥ’ｒ行った
が、その中で一次元は還元せずに８Ｄ８−ＰＡＧＥであ
シ、次いで還元しての第２方向の電気泳動を行なった・
この実験で還元していない成分が相方のサブユニットを
含むことが示され、サブユニットがジスルフィド結合で
結合していること全示唆している。８Ｄ８−ＰＡＧＥで
、この分子が異常な行動をとる理由ははつきシしていな
い。Ｍ）１９９の抗原決定基は１００Ｕ、５分間加熱す
ることによって破坊されたが吸収試験によって示される
。
広く分布しているヒトの抗原に対する強く沈降するマウ
スのモノクローナル抗体について既に記載されている。
スのモノクローナル抗体について既に記載されている。
上述の特異的なモノクローナル抗体の各々一つ一つは初
発材料を与えられたに６ｈｌ＊ｒ−Ｍ１１ｍｔｅｉｎ法
で作られる一群のモノクローナル抗体の代表的なもので
ある。同じクラスがこの発明に用いられるものと同じよ
うな初発制料で生産される。それによってできる抗体は
マウスへの免疫に先立って可溶化された細胞抽出液のよ
うなヒト細胞試料からｌ特異的な抗原を除くのに有効で
ある。このようにし１さきにｖＪ議したようにそれほど
強くない、すなわち弱いあるいは量的に多くない抗原に
苅する抗体反応を高める。ＡＪ２抗体はｉＪＪ ｍ化し
た細胞抽出液からＡＪ２抗Ｗ、を除く力を調べられ非猟
に効果的である。ＡＪ２抗原はマウスにおいて最も優力
なヒト抗原でいろいろなヒト細胞で免疫したマウス全て
がこの成分に対するかなりの量の抗体を作ることが見い
だされている。
発材料を与えられたに６ｈｌ＊ｒ−Ｍ１１ｍｔｅｉｎ法
で作られる一群のモノクローナル抗体の代表的なもので
ある。同じクラスがこの発明に用いられるものと同じよ
うな初発制料で生産される。それによってできる抗体は
マウスへの免疫に先立って可溶化された細胞抽出液のよ
うなヒト細胞試料からｌ特異的な抗原を除くのに有効で
ある。このようにし１さきにｖＪ議したようにそれほど
強くない、すなわち弱いあるいは量的に多くない抗原に
苅する抗体反応を高める。ＡＪ２抗体はｉＪＪ ｍ化し
た細胞抽出液からＡＪ２抗Ｗ、を除く力を調べられ非猟
に効果的である。ＡＪ２抗原はマウスにおいて最も優力
なヒト抗原でいろいろなヒト細胞で免疫したマウス全て
がこの成分に対するかなりの量の抗体を作ることが見い
だされている。
免疫されたマウスのもう一つの主要なヒト抗原はＨＬＡ
−ＤＲすなわちＸａ様の抗原でわる。
−ＤＲすなわちＸａ様の抗原でわる。
この抗原をもつ細胞株での免疫はそれに対するモノクロ
ーナル抗体全数多く誘導する。また検出しにくい量のＨ
Ｌ Ａ −Ｄ Ｂ抗原を含む可溶化したヒト黒色腫抗原
標品でマウスを免疫すると１１ＬＡ−ＤＲに対する強い
抗体反応をもたらす（Ｊ。
ーナル抗体全数多く誘導する。また検出しにくい量のＨ
Ｌ Ａ −Ｄ Ｂ抗原を含む可溶化したヒト黒色腫抗原
標品でマウスを免疫すると１１ＬＡ−ＤＲに対する強い
抗体反応をもたらす（Ｊ。
Ｎｇ ａｎｄ Ｋ、０． Ｌｌｏｙｄ、未発表の知見）
。それ故そのような免疫原性の強い成分を除くことが強
くない（より弱い）抗原成分を含む試料で免疫する前に
重要である。
。それ故そのような免疫原性の強い成分を除くことが強
くない（より弱い）抗原成分を含む試料で免疫する前に
重要である。
他の抗原性の強い成分はこの発明全実施するのに有用で
ある。
ある。
別の例としてはヒトの膀胱の免疫原から由来するＴ１６
、Ｔ４３、Ｔ８７、Ｊ１４３のモノクローナル抗体−抗
原系（Ｙｖ＊ｓ Ｆｒａｄ＠ｔ、 ａｔ ａｔ、ＰＮＡ
８（印刷中）と最近の特鼾申請Ｓ、Ｎ、 ４７４．２２
９（１９８３年３月１１日出願）〕、腎組織から得られ
る８１７ ＋ ■１ ｒ ８！ｌのモノク四−ナル抗体
−抗原系（Ｕ＊ｄａ ａｔ ａｔ、（１９８１） Ｐｒ
ｏｅ、 Ｎａｔ’ｌ 。
、Ｔ４３、Ｔ８７、Ｊ１４３のモノクローナル抗体−抗
原系（Ｙｖ＊ｓ Ｆｒａｄ＠ｔ、 ａｔ ａｔ、ＰＮＡ
８（印刷中）と最近の特鼾申請Ｓ、Ｎ、 ４７４．２２
９（１９８３年３月１１日出願）〕、腎組織から得られ
る８１７ ＋ ■１ ｒ ８！ｌのモノク四−ナル抗体
−抗原系（Ｕ＊ｄａ ａｔ ａｔ、（１９８１） Ｐｒ
ｏｅ、 Ｎａｔ’ｌ 。
Ａａａｄ、８ｅ１．ＵＳＡ ７８ （５１２２−５１２
６）と１９８１年８月３１日出願の８．Ｎ、２９７．８
１４と１９８３年３月１１日出願の８．Ｎ、 ４７４，
２２４の補正出願中の特許〕およびヒト肺からとったＦ
−１０とＦ−１７のモノクローナル抗体−抗原系と１９
８３年３月１１日中精の補正出願ＳＮ ４７４，２２５
が含まれている。
６）と１９８１年８月３１日出願の８．Ｎ、２９７．８
１４と１９８３年３月１１日出願の８．Ｎ、 ４７４，
２２４の補正出願中の特許〕およびヒト肺からとったＦ
−１０とＦ−１７のモノクローナル抗体−抗原系と１９
８３年３月１１日中精の補正出願ＳＮ ４７４，２２５
が含まれている。
ＡＪ２抗原のサブユニットの多様性は複雑で、その状況
を完全に説明するためにはもつと研究が必要である。８
に−ＭＧ−１にある人Ｊ２抗原は４つのきわだったサブ
ユニットヲ含み、その２つは分子量１４０にである。１
２５〜１４０にの主要成分は糖鎖がついておシ、全ての
タイプの細胞に常にみられる特色である。細胞株の間に
みられる多様性は（１）糖鎖のちがいによるがそれは細
胞のタイプにみられる差をごく一般的にもたらすもとに
なっているＣ Ｍｏｒｌｓｈｉｍｍ、 Ｙ、、 ａｔ
ａｔ。
を完全に説明するためにはもつと研究が必要である。８
に−ＭＧ−１にある人Ｊ２抗原は４つのきわだったサブ
ユニットヲ含み、その２つは分子量１４０にである。１
２５〜１４０にの主要成分は糖鎖がついておシ、全ての
タイプの細胞に常にみられる特色である。細胞株の間に
みられる多様性は（１）糖鎖のちがいによるがそれは細
胞のタイプにみられる差をごく一般的にもたらすもとに
なっているＣ Ｍｏｒｌｓｈｉｍｍ、 Ｙ、、 ａｔ
ａｔ。
（１９８２） Ｉｍｍｕｎｏｇｅｅｎｔｌｅｓ上５ ：
５２９ ； Ｏｇａｔａ＋Ｓ−Ｉ ｒ ＠ｔ ａｌ、
（１９ａ２） Ａｒｃｈ、Ｂｌｏｅｈ＠ｍ ｒＢｉｏ
ｐｈｙｓｉｅｓ ２１７ｇ６６５； ｌＩｏ＊５ｓｌｉ
、Ｄ、、ａｔ ｍｌ。
５２９ ； Ｏｇａｔａ＋Ｓ−Ｉ ｒ ＠ｔ ａｌ、
（１９ａ２） Ａｒｃｈ、Ｂｌｏｅｈ＠ｍ ｒＢｉｏ
ｐｈｙｓｉｅｓ ２１７ｇ６６５； ｌＩｏ＊５ｓｌｉ
、Ｄ、、ａｔ ｍｌ。
（１９８Ｇ）Ｎａｔｕｒｅ ２８３：５７６）（２）１
つまたはそれ以上の一定の鎖のついた異なるサブユニッ
トをもったサブユニット組成のちがい（３）異った大き
さの断片を示すもとの分子の分解程度が具なる〜の３つ
に左右されるものと思われる。モノクローナル抗体ＭＡ
９９はＡＪ２と同じ抗原化合物を認識するが、いろいろ
な細胞や組織でその反応性に大きなちがいはある。この
差はこの２つの抗体がその成分の異ったサブユニットに
向けられ、そのサブユニットがいろいろなタイ゛プの細
胞で異った発現をするとすれば説明されるだろう。すな
わち、強い抗原部位に完全に反応し、その部位を不活性
化するような１つ以上のモノクローナル抗体をもつこと
は有用である。
つまたはそれ以上の一定の鎖のついた異なるサブユニッ
トをもったサブユニット組成のちがい（３）異った大き
さの断片を示すもとの分子の分解程度が具なる〜の３つ
に左右されるものと思われる。モノクローナル抗体ＭＡ
９９はＡＪ２と同じ抗原化合物を認識するが、いろいろ
な細胞や組織でその反応性に大きなちがいはある。この
差はこの２つの抗体がその成分の異ったサブユニットに
向けられ、そのサブユニットがいろいろなタイ゛プの細
胞で異った発現をするとすれば説明されるだろう。すな
わち、強い抗原部位に完全に反応し、その部位を不活性
化するような１つ以上のモノクローナル抗体をもつこと
は有用である。
ＭＡ１０３抗原は決定基が１００ｔｌｌ’５分間処理す
ることによって変性しない糖タン／ｅり抗原であること
で一般的でない。熱に安定な抗原が通常糖脂質であるの
で、兵へ安定性はその決定基が糖タンパクの炭水化物部
分であることを示している（ Ｐｕｋｅｌ、 ０．８．
、 ａｔ ａｌ、 （１９８２） Ｊ、 Ｅｘｐ。
ることによって変性しない糖タン／ｅり抗原であること
で一般的でない。熱に安定な抗原が通常糖脂質であるの
で、兵へ安定性はその決定基が糖タンパクの炭水化物部
分であることを示している（ Ｐｕｋｅｌ、 ０．８．
、 ａｔ ａｌ、 （１９８２） Ｊ、 Ｅｘｐ。
Ｍ＠ｄ、１５５０１３３ ： Ｓｔ＠ｒｎ＋ Ｐ、 Ｌ
、、 ｓｔ ａｔ。
、、 ｓｔ ａｔ。
（１９７８）Ｏ・１１ １４ニア７Ｂ）。を椎動吻の糖
タンノ々りの炭水化物部分に対する抗体は稀であるが、
これまでに記述はある（ Ｍｏｍｏｌ ＋ Ｍ、＋ ａ
ｔ ａｌ 。
タンノ々りの炭水化物部分に対する抗体は稀であるが、
これまでに記述はある（ Ｍｏｍｏｌ ＋ Ｍ、＋ ａ
ｔ ａｌ 。
（１９８０）Ｊ、Ｂｉｏｌ、Ｏｈ＊ｍ、２５Ｂ：１１９
１４ ；０１Ｂｍ＠ｎＬ Ｌ、 Ｔｏｌ ａｔ ａｌ、
（１９８１）Ｊ、 Ｉｍｍｕｎｏｌ。
１４ ；０１Ｂｍ＠ｎＬ Ｌ、 Ｔｏｌ ａｔ ａｌ、
（１９８１）Ｊ、 Ｉｍｍｕｎｏｌ。
１２７＋１２２０：Ｍ＠ｒｌ＊ｒ＋Ｅ、＋ ａｔ ａｌ
、（１９７４）Ｎａｔｕｒｅ ２５１ ！ ６１５２
：Ｍａｔｔ＠ｌ Ｍ、 ＋Ｌｔ ａｔ ｍｌ。
、（１９７４）Ｎａｔｕｒｅ ２５１ ！ ６１５２
：Ｍａｔｔ＠ｌ Ｍ、 ＋Ｌｔ ａｔ ｍｌ。
（１１１８１） Ｎａｔｕｒｅ ２７３ ： ７６１
）。しかしながらプロナーゼ消化で作られる朝ペプチド
はＭＡ １０３と反応しないことが示さハた。この理由
は完全には理解されていない。しかしながら、一つの説
明はその抗原が多数の類似の炭水化物ｋｌ造を含むかど
うかまた抗体の二価の接着が免疫的沈殿を起させるのに
必要かどうかである。もう一つの説明はＭＡ１０３の決
定基が熱に安定な方法で相互作用している炭水化物部分
とタン、ｅり部分の両方から成っているということであ
る。この抗原はその分子ｆｆｉ、８ＤＳ−ＰＡＧＥでみ
られる幅広いノ々ンド、糖鎖部分が大きい広爾・１１囲
に分布しているなどの点でヘキソース輸送タンノ９り（
ＧｏｒｇＩＬ、 Ｆ、Ｒ，、ａｔ ａｌ、 （１９７９
） Ｂｌｏｃｈ＠ｍ。
）。しかしながらプロナーゼ消化で作られる朝ペプチド
はＭＡ １０３と反応しないことが示さハた。この理由
は完全には理解されていない。しかしながら、一つの説
明はその抗原が多数の類似の炭水化物ｋｌ造を含むかど
うかまた抗体の二価の接着が免疫的沈殿を起させるのに
必要かどうかである。もう一つの説明はＭＡ１０３の決
定基が熱に安定な方法で相互作用している炭水化物部分
とタン、ｅり部分の両方から成っているということであ
る。この抗原はその分子ｆｆｉ、８ＤＳ−ＰＡＧＥでみ
られる幅広いノ々ンド、糖鎖部分が大きい広爾・１１囲
に分布しているなどの点でヘキソース輸送タンノ９り（
ＧｏｒｇＩＬ、 Ｆ、Ｒ，、ａｔ ａｌ、 （１９７９
） Ｂｌｏｃｈ＠ｍ。
Ｂｌｏｐｈｙｓ、 ＩＬｅｓ、 Ｏｏｍｍｕｎ、 ９１
ｓ ９５５ ）に類似し−Ｃいる。またヘキソースｆ
―送タンノ９りのようにＭＡ１０３抗原はＥｓｅｈｅｒ
ｉｅｈｌａ ｆｒ＠ｕｎｄｉｌ由来のエンド−β−ガラ
クトシダーゼ（Ｍｌｌｅｓ Ｌ ａｂｏｒａｔｏｒｌ＠
ｓ＋ｇｌｋｈａｒｔ、 Ｉ Ｎ ）によって分解されＭ
Ｂ３５〜４０にの産物を生ずる。ヌクレオシド輸送タン
パクはある点では似ておｔ） （Ｙｏｕｎｇ＋ Ｊ、Ｄ
、＋ ＠ｔ ａｌ。
ｓ ９５５ ）に類似し−Ｃいる。またヘキソースｆ
―送タンノ９りのようにＭＡ１０３抗原はＥｓｅｈｅｒ
ｉｅｈｌａ ｆｒ＠ｕｎｄｉｌ由来のエンド−β−ガラ
クトシダーゼ（Ｍｌｌｅｓ Ｌ ａｂｏｒａｔｏｒｌ＠
ｓ＋ｇｌｋｈａｒｔ、 Ｉ Ｎ ）によって分解されＭ
Ｂ３５〜４０にの産物を生ずる。ヌクレオシド輸送タン
パクはある点では似ておｔ） （Ｙｏｕｎｇ＋ Ｊ、Ｄ
、＋ ＠ｔ ａｌ。
（１９８２）Ｊ、Ｂｌｏｌ、Ｏｈ＠ｍ、２５８＋２２０
２）ＭＡ１０３にとって別の同一性の可能性をもつ。
２）ＭＡ１０３にとって別の同一性の可能性をもつ。
ＭＩＩ９９抗原は全部ではないが多くのタイプの細胞に
みられる。そしてその分布は組織学的タイプに関連して
いる。そのサブユニットも甫造はその鎖がジスルフィド
で結合している以外ヒトの）Ｉ Ｌ Ａ −Ｄ几抗原（
Ｌｌｏｙｄ、 Ｋ、 ０．、 ａｔ ａｌ、（１９８１
）上記と同じ）のそれと類似している。それがあるＴ細
胞リンノ）重やミニロイド白血病細胞に存在し、Ｂリン
ノ臂腫細胞にはないという事実は興味深い。なぜならＩ
ＩＬＡ−Ｄ几抗原は一般に逆の分布合しているからであ
る。ＭＨ９９抗原の普通でない特徴は還元せずに行なっ
た８１）８−ＰＡＧＥでの泳動度であり、それはその分
子量から予想されるよシも約２倍早く泳動する。ＭｎＯ
２の発現が殆んどのタイプの癌細胞を更に細分類するの
でＭｎＯ２は予後と治療の選択に価値のある腫瘍細胞の
分類に有用である。以下のモノクローナル抗体が反応す
る抗原が大多数のヒト細胞標品上に存在するけれどもモ
ノクローナル抗体ＭＨ９９、ＭＡ１０３ 、ＭＡ９９は
Ａ ＩＢ ＋ Ｈ＊ Ｌ＠ ＋Ｌ・＋ Ｘ ＋ ｙ 、
Ｉ といった白液グループの抗原とは反応しない。
みられる。そしてその分布は組織学的タイプに関連して
いる。そのサブユニットも甫造はその鎖がジスルフィド
で結合している以外ヒトの）Ｉ Ｌ Ａ −Ｄ几抗原（
Ｌｌｏｙｄ、 Ｋ、 ０．、 ａｔ ａｌ、（１９８１
）上記と同じ）のそれと類似している。それがあるＴ細
胞リンノ）重やミニロイド白血病細胞に存在し、Ｂリン
ノ臂腫細胞にはないという事実は興味深い。なぜならＩ
ＩＬＡ−Ｄ几抗原は一般に逆の分布合しているからであ
る。ＭＨ９９抗原の普通でない特徴は還元せずに行なっ
た８１）８−ＰＡＧＥでの泳動度であり、それはその分
子量から予想されるよシも約２倍早く泳動する。ＭｎＯ
２の発現が殆んどのタイプの癌細胞を更に細分類するの
でＭｎＯ２は予後と治療の選択に価値のある腫瘍細胞の
分類に有用である。以下のモノクローナル抗体が反応す
る抗原が大多数のヒト細胞標品上に存在するけれどもモ
ノクローナル抗体ＭＨ９９、ＭＡ１０３ 、ＭＡ９９は
Ａ ＩＢ ＋ Ｈ＊ Ｌ＠ ＋Ｌ・＋ Ｘ ＋ ｙ 、
Ｉ といった白液グループの抗原とは反応しない。
ＭＡ１０３．ＭｎＯ２，ＭＡ９９．ＡＪ２．Ｊ１４３
。
。
Ｔ １６ ＋ Ｔ４３ ｒ Ｔ８７ ｙ ＨＬＡ”ＤＲ
＋ ８１７ ＊ ｓ、 ｌ Ｖｊの七ツクローナル抗体
は寄託されておＩ） ５ｌｏａｎ−に＊ｔｔ＠ｒ１ｎｇ
Ｉｎｍｔｌｔｕｔ＠、 １２７５ Ｙｏｒｋ Ａｖ＊
ｎｕ＠＋Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、 ＮＹ、 １００２１で利
用できる。
＋ ８１７ ＊ ｓ、 ｌ Ｖｊの七ツクローナル抗体
は寄託されておＩ） ５ｌｏａｎ−に＊ｔｔ＠ｒ１ｎｇ
Ｉｎｍｔｌｔｕｔ＠、 １２７５ Ｙｏｒｋ Ａｖ＊
ｎｕ＠＋Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、 ＮＹ、 １００２１で利
用できる。
モノクローナル抗体ＭＡ９９ 、 ＭＢ２９． ＭＡ１
０３は認定された寄託機関のＡｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐ
＠０ｕｌｔｕｒ＊０ｏ１１＊ｅｔｌｏｎ （ＡＴＯＯ）
（登録商標）、１２３０１Ｐａｒｋｌａｖｎ Ｄｒｌ
ｖｅ、 Ｒｏｅｋｖｉｌｌｅ、 Ｍａｒｙｌａｎｄ２０
８５２に１９８３年ｔｏ月２８日に寄託され、ＭＡ９９
に対してＨＢ８４０７．Ｍｌ（９９に鉤してＨＢ８４０
６．ＭＡ１０３に対してＨＢ８４０８のＡＴＯＯ承紹番
・Ｗｔ与えられている。
０３は認定された寄託機関のＡｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐ
＠０ｕｌｔｕｒ＊０ｏ１１＊ｅｔｌｏｎ （ＡＴＯＯ）
（登録商標）、１２３０１Ｐａｒｋｌａｖｎ Ｄｒｌ
ｖｅ、 Ｒｏｅｋｖｉｌｌｅ、 Ｍａｒｙｌａｎｄ２０
８５２に１９８３年ｔｏ月２８日に寄託され、ＭＡ９９
に対してＨＢ８４０７．Ｍｌ（９９に鉤してＨＢ８４０
６．ＭＡ１０３に対してＨＢ８４０８のＡＴＯＯ承紹番
・Ｗｔ与えられている。
モノクローナル抗体Ｓ訂＋ ａｌｌ及び■１はＡＴＯＯ
に１９８３年１１月１５日に寄託され８ｇ７には）（Ｂ
８４２８．Ｓ、、にはＨＢ８４２７．Ｖｌに対してＨＢ
８４２９のＡＴＯＯ承詔番号金付されている。
に１９８３年１１月１５日に寄託され８ｇ７には）（Ｂ
８４２８．Ｓ、、にはＨＢ８４２７．Ｖｌに対してＨＢ
８４２９のＡＴＯＯ承詔番号金付されている。
モノクローナル抗体Ｊ１４３．Ｔ１６．Ｔ４３．Ｔ８７
は１９８３年３月１１日にＡＴＯＯに寄託されＪ１４３
には１ＩＢ８２７６、Ｔ１６にはＨＢｓ２７９゜Ｔ４３
には１（Ｂ８２７５．Ｔ８７にはＩＩＢ８２７４のＡＴ
ＯＯ承詔番号が付された。
は１９８３年３月１１日にＡＴＯＯに寄託されＪ１４３
には１ＩＢ８２７６、Ｔ１６にはＨＢｓ２７９゜Ｔ４３
には１（Ｂ８２７５．Ｔ８７にはＩＩＢ８２７４のＡＴ
ＯＯ承詔番号が付された。
モノクローナル抗体ＡＪ２は１９８３年８月１６日にＡ
ＴＯＯに寄託されＨＢ８３３８のＡＴＯＯ丞詔番号をも
っている。
ＴＯＯに寄託されＨＢ８３３８のＡＴＯＯ丞詔番号をも
っている。
モノクローナル抗体はＦ−１０とＦ−１７は１９８３年
３月１１日にＡＴＯＯに寄託されＦ−１０には１ｉＢ８
２６１のＦ−１７にはＨＢ８２６７のＡＴＯＯ承紹番号
を与えられた。
３月１１日にＡＴＯＯに寄託されＦ−１０には１ｉＢ８
２６１のＦ−１７にはＨＢ８２６７のＡＴＯＯ承紹番号
を与えられた。
第１頁の続き
■Ｉｎｔ、ＣＩ、４ 識別記号 庁内整理番号［相］発
明 者 ケネス オウ、ロイド アメリカ合衆国。
明 者 ケネス オウ、ロイド アメリカ合衆国。
ヘンリー ハドソ
１０４７１ ニュー ヨーク、ブロンクス。
ン パークウェイ ４５２幡地
手続補正書動刻
昭和６０年４月２５日
昭和５９年特許願第２５２７９４号
２、 発明の名称
ガン診断と治療のためのモノクローナル抗体の生産法３
、 補正をする者 事件との関係 特許出願人 住 所 アメリカ合衆国、 １００２１ ニュー ヨー
ク。
、 補正をする者 事件との関係 特許出願人 住 所 アメリカ合衆国、 １００２１ ニュー ヨー
ク。
ニュー ヨーク、ヨークアウエニュ
１２７５番地
名 ＠： スローンーケツタリング インステイテユー
トフオー キャンサー リサーチ 代表者 ジェームス ニス、クワーク 国 籍 アメリカ合衆国 ４、代理人 ５、補正指令の日付 昭和６０年３月２６日 ／ぐフゝ Ｘ−，べ、；て、７＜′ ６、補正の対象 明細書の［発明の詳細な説明」の欄 の内容 細書第１２頁第１２〜１４行のｒ （ＩＥｉｓｉｎｇｅ
ｒ 、 −中略・・・１９８２年３月）。」の記載を「
〔アイジンガーら［アメリカ国家科学アカデミ−協会会
報Ｊ （Ｅｉｓｉｎｇｅｒ、 ｅｔ ａｌ、、 Ｐｒｏ
ｃ、 ＮａＬ’ １．Ａｃａｄ。
トフオー キャンサー リサーチ 代表者 ジェームス ニス、クワーク 国 籍 アメリカ合衆国 ４、代理人 ５、補正指令の日付 昭和６０年３月２６日 ／ぐフゝ Ｘ−，べ、；て、７＜′ ６、補正の対象 明細書の［発明の詳細な説明」の欄 の内容 細書第１２頁第１２〜１４行のｒ （ＩＥｉｓｉｎｇｅ
ｒ 、 −中略・・・１９８２年３月）。」の記載を「
〔アイジンガーら［アメリカ国家科学アカデミ−協会会
報Ｊ （Ｅｉｓｉｎｇｅｒ、 ｅｔ ａｌ、、 Ｐｒｏ
ｃ、 ＮａＬ’ １．Ａｃａｄ。
Ｓｃｉ、 ＵＳＡ）７９，２０１８１９８２年３月 ］
。ｊと補正する。
。ｊと補正する。
（２） 回舎弟１３頁９〜１２行のｒ ［Ｄｉｐｐｏｌ
ｄ ａｔ＝ ａｌ。
ｄ ａｔ＝ ａｌ。
［’ｒｏｃ 、−中略・＝１７５５（１９８２）） 、
Ｊの記載を「（ディボールドら［アメリカ国家科学ア
カデミ−協会会報Ｊ （Ｄｉｐｐｏｌｄ ｅｔａｌ、
Ｐｒｏｃ。
Ｊの記載を「（ディボールドら［アメリカ国家科学ア
カデミ−協会会報Ｊ （Ｄｉｐｐｏｌｄ ｅｔａｌ、
Ｐｒｏｃ。
Ｎａｔ’ ｌ、 Ａｃａｄ、 Ｓｃｉ、 Ｕ、Ｓ、Ａ、
）７７．６１１４（１９８０）とホウ１−ンら［実験医
学誌Ｊ（ＩＩｏｕｇｈシｏｎ、 ｅｔ ａｌ。
）７７．６１１４（１９８０）とホウ１−ンら［実験医
学誌Ｊ（ＩＩｏｕｇｈシｏｎ、 ｅｔ ａｌ。
Ｊ、 ＩＥｘｐ、 Ｍｅｄ、）１５６．１７５５（１９
８２）） 、 Ｊｌと補正舎弟１３頁１７〜１９行のｒ
（Ｏｌｄ 、・・中略・・・２月ｈｏｕ１年）。」の
記載を「〔オールド、ロイドジェイ、［キャンサー リ
サーチＪ （Ｏｌｄ。
８２）） 、 Ｊｌと補正舎弟１３頁１７〜１９行のｒ
（Ｏｌｄ 、・・中略・・・２月ｈｏｕ１年）。」の
記載を「〔オールド、ロイドジェイ、［キャンサー リ
サーチＪ （Ｏｌｄ。
Ｌｌｏｙｄ Ｊ、、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅ５ｅａｒｃｈ、
）４１，３６１−３７５（１９８１年２月）〕。Ｊと補
正する。
）４１，３６１−３７５（１９８１年２月）〕。Ｊと補
正する。
（４） 同書第１４頁第７〜１７行のｒ （Ｇｒｅａｖ
ｅｓ、Ｍ、Ｆ。
ｅｓ、Ｍ、Ｆ。
ｅｔ ａｌ、−中略−８０，２３４１，（１９８３））
Ｊの記載を「〔グリーブズ、エム、エフ、ら「臨床免
疫学」と［免疫病理学Ｊ （Ｇｒｅａｖｅｓ、 Ｍ、
Ｆ、 ｅｔ ａｌ、Ｃ１１ｎ、 Ｉｍｍｕｎｏｌ、 ａ
ｎｄ Ｉｍｍｕｎｏｐａｔｈｏｌ、） ４ ： ６７゜
（１９７５） ；ミノワダ、ジェイ、ら「国家症研究誌
」（Ｍｉｎｏｗａｄａ、Ｊ、、ｅｔ、ａｌ、Ｊ、Ｎａｔ
’ １． ＣａｎｃｅｒＩｎｓｔｉ、）６０ ： １２
９６．（１９７８） ；タニガキ、エヌ、ら「免疫字詰
Ｊ （Ｔａｎｉｇａｋｉ、 Ｎ、、 ｅｔ ａｌ、 Ｊ
。
Ｊの記載を「〔グリーブズ、エム、エフ、ら「臨床免
疫学」と［免疫病理学Ｊ （Ｇｒｅａｖｅｓ、 Ｍ、
Ｆ、 ｅｔ ａｌ、Ｃ１１ｎ、 Ｉｍｍｕｎｏｌ、 ａ
ｎｄ Ｉｍｍｕｎｏｐａｔｈｏｌ、） ４ ： ６７゜
（１９７５） ；ミノワダ、ジェイ、ら「国家症研究誌
」（Ｍｉｎｏｗａｄａ、Ｊ、、ｅｔ、ａｌ、Ｊ、Ｎａｔ
’ １． ＣａｎｃｅｒＩｎｓｔｉ、）６０ ： １２
９６．（１９７８） ；タニガキ、エヌ、ら「免疫字詰
Ｊ （Ｔａｎｉｇａｋｉ、 Ｎ、、 ｅｔ ａｌ、 Ｊ
。
Ｉｍｍｕｎｏｌ、） １２３ ： ２９０６．（１９７
９））によっであるいは白血病の患者からとった自家抗
血清を使った研究〔ギヤレット、ティー、ジェイ、ら「
アメリカ国家科学アカデミ−協会会報」（Ｇａｒｒｅｊ
、Ｔ、Ｊ、、ｅｔ ａｌ、、Ｐｒｏｃ、Ｎａｔ’ ｌ。
９））によっであるいは白血病の患者からとった自家抗
血清を使った研究〔ギヤレット、ティー、ジェイ、ら「
アメリカ国家科学アカデミ−協会会報」（Ｇａｒｒｅｊ
、Ｔ、Ｊ、、ｅｔ ａｌ、、Ｐｒｏｃ、Ｎａｔ’ ｌ。
Ａｃａｄ、 Ｓｃｉ、 ＵＳＡ）７４．４５８７． （
１９７７） ；ナイトウ、ケイ、ら［アメリカ国家科学
アカデミ−協会会報Ｊ （Ｎａｉｔｏ、 Ｋ、、 ｅｔ
ａｌ、、Ｐｒｏｃ、 Ｎａｔ’ ｌ。
１９７７） ；ナイトウ、ケイ、ら［アメリカ国家科学
アカデミ−協会会報Ｊ （Ｎａｉｔｏ、 Ｋ、、 ｅｔ
ａｌ、、Ｐｒｏｃ、 Ｎａｔ’ ｌ。
Ａｃａｄ、 Ｓｃｉ、 ＵＳＡ、）８０ ： ２３４１
．（１９８３）） 」と補正する。
．（１９８３）） 」と補正する。
（５） 同書第１５頁第４行のｒ ［Ｇｒｅａｒｅｓ、
Ｍ、 Ｆ、 ｅＬａｌ、、同上］。」の記載を＋ｒ
ｃクリープズ。
Ｍ、 Ｆ、 ｅＬａｌ、、同上］。」の記載を＋ｒ
ｃクリープズ。
エム、エフ、ら（Ｇｒｅａｖｅｓ、 Ｍ、 Ｆ、 ｅｔ
ａｌ、、）同上］。Ｊと補正する。
ａｌ、、）同上］。Ｊと補正する。
（６） 回舎弟′１５頁第５〜７行のｒ （Ｇａｒｒｅ
ｔ、＝中略・・・４１ ： ３６１．（１９８１）］
Ｊの記載を「〔ギヤレット、ティー、ジェイ、ら（Ｇａ
ｒｒｅｔ、 Ｔ、 Ｊ、。
ｔ、＝中略・・・４１ ： ３６１．（１９８１）］
Ｊの記載を「〔ギヤレット、ティー、ジェイ、ら（Ｇａ
ｒｒｅｔ、 Ｔ、 Ｊ、。
ｅｔ ａｔ、）同上；ティ１−ウ、ケイ、ら（Ｎａｉｌ
；ｏ、 Ｋ、＋ｃ＋ｔ、ａｌ）同上１９８３ ；オール
ド、エル、ジェイ。
；ｏ、 Ｋ、＋ｃ＋ｔ、ａｌ）同上１９８３ ；オール
ド、エル、ジェイ。
「キャンサー リサーチＪ（Ｏｌｄ、 Ｌ、 Ｊ、 Ｃ
ａｎｃｅｒＨｅｓ、）４１ ： ３６１．（１９８１）
］ Ｊｌと補正する。
ａｎｃｅｒＨｅｓ、）４１ ： ３６１．（１９８１）
］ Ｊｌと補正する。
（７） 同書第１５頁第１１−１２行のｒ （Ｇａｒｒ
ｅＬ、 −ＩＩ月Ｉ１８・・・同上）。Ｊの記載をｂ′
〔ギヤレフ１−．テイー。
ｅＬ、 −ＩＩ月Ｉ１８・・・同上）。Ｊの記載をｂ′
〔ギヤレフ１−．テイー。
ジエイ・ら（Ｇａｒｒｅｔ、 ｌ’、 Ｊ、、 ｅｔ
ａｌ、）同上；ナイトウ、ケイ、ら（Ｎａｉｔｏ、 Ｋ
、、 ｅｔ： ａｌ、）同上〕。」と補正する。
ａｌ、）同上；ナイトウ、ケイ、ら（Ｎａｉｔｏ、 Ｋ
、、 ｅｔ： ａｌ、）同上〕。」と補正する。
（８） 同書第１５頁第１５行のｒ（Ｔａｎｉｇａｋｉ
、 Ｎ、 ｅｊ ａｌ。
、 Ｎ、 ｅｊ ａｌ。
同上）。」の記載を「〔タニガキ、エヌ、ら（Ｔａｎｉ
ｇａｋｉ、 Ｎ、 ｅｔ ａｌ、）同上〕。」と補正す
る。
ｇａｋｉ、 Ｎ、 ｅｔ ａｌ、）同上〕。」と補正す
る。
（９） 同書第１５頁第１７行のｒ（Ｔａｎｉｇａｋｉ
、 Ｎ、、 ｅｔａｌ）同上）」の記載を「〔タニガキ
、エヌ、ら（Ｔａｎｉｇａｋｉ、 Ｎ、、 ｅｔ ａｌ
）同上〕Ｊと補正する。
、 Ｎ、、 ｅｔａｌ）同上）」の記載を「〔タニガキ
、エヌ、ら（Ｔａｎｉｇａｋｉ、 Ｎ、、 ｅｔ ａｌ
）同上〕Ｊと補正する。
（１０）同書第１６頁第３〜４行のｒＫ９ｈｌｅｒとＭ
ｉｌｓｔｅｉｎの方法によるモノクローナル抗体のｉｎ
ｖｉｔｒ。
ｉｌｓｔｅｉｎの方法によるモノクローナル抗体のｉｎ
ｖｉｔｒ。
生産」の記載を「ケーラー（Ｋ９ｈｌｅｒ）とミルスタ
イン（Ｍｉｌｓｔｅｉｎ）の方法によるモノクローナル
抗体のイン ビトロ（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）生産ｊと補正
する。
イン（Ｍｉｌｓｔｅｉｎ）の方法によるモノクローナル
抗体のイン ビトロ（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）生産ｊと補正
する。
（ｔｇ 同書第１６頁第８〜１３行のｒ （Ｒｅｉｎｈ
ｅｒｚ、−中略・・・利： ２０７．（１９８２）］
Ｊの記載を「〔ラインヘルツ、イー、エル、ら［アメリ
カ国家科学アカデミ−協会会報Ｊ （Ｒｅｉｎｈｅｒｚ
、 Ｅ、 Ｌ、 ｒｅｔ ａｌ、Ｐｒｏｃ、Ｎａｔ’
１． Ａｃａｄ、Ｓｃｉ、ＬＩＳＡ） ７７ ：１５８
Ｂ、 （１９８０））。異なったリンパ球株に特徴的な
抗原を検出するモノクローナル抗体はヒトのリンパ球白
血病の分類に使われる〔ショロフ、アール、ダブリュ、
ら「血液Ｊ （Ｓｃｈｒｏｆｆ。
ｅｒｚ、−中略・・・利： ２０７．（１９８２）］
Ｊの記載を「〔ラインヘルツ、イー、エル、ら［アメリ
カ国家科学アカデミ−協会会報Ｊ （Ｒｅｉｎｈｅｒｚ
、 Ｅ、 Ｌ、 ｒｅｔ ａｌ、Ｐｒｏｃ、Ｎａｔ’
１． Ａｃａｄ、Ｓｃｉ、ＬＩＳＡ） ７７ ：１５８
Ｂ、 （１９８０））。異なったリンパ球株に特徴的な
抗原を検出するモノクローナル抗体はヒトのリンパ球白
血病の分類に使われる〔ショロフ、アール、ダブリュ、
ら「血液Ｊ （Ｓｃｈｒｏｆｆ。
Ｒ，Ｗ、、ｅｔ−ａｌ、ロ１ｏａｄ） ５９ ： ２０
７．（１９８２）） Ｊｌと補正する。
７．（１９８２）） Ｊｌと補正する。
（１２）回舎弟１６頁下か６２行１１〜第１７頁第１１
行のｒＭｃＭｉｃｈａｅｌ、Ａ、Ｊ、＊−中略−１，８
ｎｃｃｔ、ｉ ： １０゜１９８２） Ｊの記載を「〔
マツクマイケル、エイ。
行のｒＭｃＭｉｃｈａｅｌ、Ａ、Ｊ、＊−中略−１，８
ｎｃｃｔ、ｉ ： １０゜１９８２） Ｊの記載を「〔
マツクマイケル、エイ。
ジェイ、ら［ヨーロッパ免疫字詰Ｊ （ＭｃＭｉｃｈａ
ｅｌ 。
ｅｌ 。
Ａ、 Ｊ、、 ｅｔ ａｌ、 Ｅｕｒ、 Ｊ、 Ｉｍｍ
ｕｎｏｌ、）Ｏ： ２０５゜（１９７９）］ 、０ＫＴ
６ （ラインヘルツ、イー。
ｕｎｏｌ、）Ｏ： ２０５゜（１９７９）］ 、０ＫＴ
６ （ラインヘルツ、イー。
エル、ら（Ｒｅｉｎｈｅｒｚ、 Ｅ、 ｌ５．、 ｅｔ
ａｌ、）上記）〕Ｌｅｕ６［アール、エバンス（Ｒ，
１Ｅｖａｎｓ、 ）私信〕等によって認識される。第２
の′Ｉ″Ｌ様抗原はＭ２４１ （ノウレス、アール、ダ
ブリュ、ら「ヨーロッパ免疫字詰Ｊ （Ｋｎｏｗｌｅｓ
、 Ｉｔ、 Ｌ、 ｅｌ−ａｔ。
ａｌ、）上記）〕Ｌｅｕ６［アール、エバンス（Ｒ，
１Ｅｖａｎｓ、 ）私信〕等によって認識される。第２
の′Ｉ″Ｌ様抗原はＭ２４１ （ノウレス、アール、ダ
ブリュ、ら「ヨーロッパ免疫字詰Ｊ （Ｋｎｏｗｌｅｓ
、 Ｉｔ、 Ｌ、 ｅｌ−ａｔ。
Ｅｕｒ、 Ｊ、 Ｉｍｍｕｎｏｌ、）１２ ： ６７６
．１！］８２）によってｉ！５識される。通゛に（急性
リンパ芽球白血病細胞抗原に特異性をもつモノクローナ
ル抗体のＪ−５〔リッツ、ジェイ、ら「ネイチャー」（
Ｒｉｔｚ、Ｊ、、ｅｔ ａｌ、Ｎａｔｕｒｅ）ｇ８３−
、 ５８３．１９８０） 。
．１！］８２）によってｉ！５識される。通゛に（急性
リンパ芽球白血病細胞抗原に特異性をもつモノクローナ
ル抗体のＪ−５〔リッツ、ジェイ、ら「ネイチャー」（
Ｒｉｔｚ、Ｊ、、ｅｔ ａｌ、Ｎａｔｕｒｅ）ｇ８３−
、 ５８３．１９８０） 。
ＮＬ−１とＮＬ−２（ウエダ、アール、ら［アメリカ国
家科学アカデミ−協会会報」（Ｕｅｄａ、Ｒ，、ｅｔ
ａｌ、Ｐｒｏｃ、Ｎａｔ’ ］、＾ｃａｄ、ｓｃｉ。
家科学アカデミ−協会会報」（Ｕｅｄａ、Ｒ，、ｅｔ
ａｌ、Ｐｒｏｃ、Ｎａｔ’ ］、＾ｃａｄ、ｓｃｉ。
Ｕ、Ｓ、Ａ）互、４３８６．１９８２）も作られている
。最近には、〔デング、シー−ティーら「ランセット」
（Ｄｅ＋＋ｇ、Ｃ−Ｔ、ｅｊ ａｌ、Ｌａｎｃｅｔ、）
ｉ ： １０．１９８２） 」と補正する。
。最近には、〔デング、シー−ティーら「ランセット」
（Ｄｅ＋＋ｇ、Ｃ−Ｔ、ｅｊ ａｌ、Ｌａｎｃｅｔ、）
ｉ ： １０．１９８２） 」と補正する。
（１３）同書第１７頁第１８〜２０行の’ （Ｌｌｏｙ
ｄ、・・・中略・・・（印刷中））。」の記載をｒ〔ロ
イド、ケイ。
ｄ、・・・中略・・・（印刷中））。」の記載をｒ〔ロ
イド、ケイ。
オウ、（Ｌｌｏｙｄ、 Ｋ、 ０．）（１９８３）、
ｒ基礎及び臨床腫瘍免疫学」第１巻アール、ビー、ハー
バ−マン（Ｒ，Ｂ、 ｌｌｅｒｂｅｒｍａｎＨ扁ナイジ
ェフ、「ザ ハーグＪ （Ｎｉｊｈｏｆｆ、Ｔｈｅ ｌ
ｌａｇｕｅ）（印刷中）〕。」と補正する。
ｒ基礎及び臨床腫瘍免疫学」第１巻アール、ビー、ハー
バ−マン（Ｒ，Ｂ、 ｌｌｅｒｂｅｒｍａｎＨ扁ナイジ
ェフ、「ザ ハーグＪ （Ｎｉｊｈｏｆｆ、Ｔｈｅ ｌ
ｌａｇｕｅ）（印刷中）〕。」と補正する。
（１４）同書第１８頁第１１〜１２行のｒ （Ｔａｕｓ
ｓｉｒ＋ｇ 、 −中略・・・６０ ： １２５）。」
の記載を「〔タウジグ。
ｓｉｒ＋ｇ 、 −中略・・・６０ ： １２５）。」
の記載を「〔タウジグ。
エム、ジェイ、（Ｔａｕｓｓｉｇ、 Ｍ、 Ｊ、）（１
９７３）。［シーニーアールアール、ティーオウピー、
エムアイシーアールオウ、アイエムエムユーエヌオウ、
Ｊ（Ｃｕｒｒ、 Ｔｏｐ、 Ｍｉｃｒｏ、 Ｉｍｍｕｎ
ｏ、） ６０．１２５］ ｏ Ｊｌと補正する。
９７３）。［シーニーアールアール、ティーオウピー、
エムアイシーアールオウ、アイエムエムユーエヌオウ、
Ｊ（Ｃｕｒｒ、 Ｔｏｐ、 Ｍｉｃｒｏ、 Ｉｍｍｕｎ
ｏ、） ６０．１２５］ ｏ Ｊｌと補正する。
（１５）同書第１８頁第１８〜１９行の’ （Ｓｐｒｉ
ｎｇｅｒ、−中略・・・２５６ ： ３８３３）。」の
記載を「〔スプリンジャー、ティー、エイ、 （Ｓｐｒ
ｉｎｇｅｒ、 ’ｌ’、Ａ、）（１９８１）ｒ生物化学
誌Ｊ（Ｊ、 Ｂｉｏｌ、 Ｃｈｅｍ、）２５６ ；３８
３３）。Ｊと補正する。
ｎｇｅｒ、−中略・・・２５６ ： ３８３３）。」の
記載を「〔スプリンジャー、ティー、エイ、 （Ｓｐｒ
ｉｎｇｅｒ、 ’ｌ’、Ａ、）（１９８１）ｒ生物化学
誌Ｊ（Ｊ、 Ｂｉｏｌ、 Ｃｈｅｍ、）２５６ ；３８
３３）。Ｊと補正する。
（１６）同書第２３頁第３〜７行のｒ（Ｃａｒｅｙ、’
Ｔ、［Ｅ、、−中１１１８・・・７９ ： ２０１８）
。」の記載をＣ〔ケアリー。
Ｔ、［Ｅ、、−中１１１８・・・７９ ： ２０１８）
。」の記載をＣ〔ケアリー。
ティー、イー、ら「アメリカ国家イ・［学アカデミー協
会会報Ｊ （Ｃａｒｅｙ、 Ｔ、 Ｈ，、ｅｔ ａｌ、
Ｐｒｏｃ。
会会報Ｊ （Ｃａｒｅｙ、 Ｔ、 Ｈ，、ｅｔ ａｌ、
Ｐｒｏｃ。
Ｎａｔ’ １． Ａｃａｄ、 Ｓｃｉ、 ＵＳＡ） ７
３ ： ３２７８ ；ウェブ。
３ ： ３２７８ ；ウェブ。
アール、ら（Ｕｅｄａ、 Ｒ，、ｅｊ ａｌ、）（１９
７９）ｒ実験医学誌Ｊ（Ｊ、 Ｅｘｐ、 Ｍｅｄ、）１
５旧５６／ｌ ；アイジンガーｐエム、ら（ｌＥｉｓｉ
ｎｇｅｒ、 Ｍ、、 ｅＬ ａｌ、）（１り８２）ｒア
メリカ国家科学アカデミ−協会会報Ｊ（Ｐｒｏｃ。
７９）ｒ実験医学誌Ｊ（Ｊ、 Ｅｘｐ、 Ｍｅｄ、）１
５旧５６／ｌ ；アイジンガーｐエム、ら（ｌＥｉｓｉ
ｎｇｅｒ、 Ｍ、、 ｅＬ ａｌ、）（１り８２）ｒア
メリカ国家科学アカデミ−協会会報Ｊ（Ｐｒｏｃ。
Ｎａｔ’ １． Ａｃａｄ、 Ｓｃｉ、ＵＳＡ） ７９
： ２０１８） 。ｊと補正する。
： ２０１８） 。ｊと補正する。
（１７）同書第２３頁第１０〜１２行のｒｌＥａＢｌｅ
−中略・・・１１ａｎｋＪの記載を「イーグル（ＩＥａ
ｇｌｅ）の最小必須培地〔ジーアイビーシーオウ、ニュ
ー ヨーク、グランド アイスランド（ＧＩＢＧＯ。
−中略・・・１１ａｎｋＪの記載を「イーグル（ＩＥａ
ｇｌｅ）の最小必須培地〔ジーアイビーシーオウ、ニュ
ー ヨーク、グランド アイスランド（ＧＩＢＧＯ。
Ｇｒａｎｄ ｌ５ｌａｎｄ、 ’ＮＹ）中で維持された
。移しがえには細胞は二価の陽イオンを含まないバンク
（ｆｌａｎｋ）Ｊｌと補正する。
。移しがえには細胞は二価の陽イオンを含まないバンク
（ｆｌａｎｋ）Ｊｌと補正する。
（１８）回舎弟２３頁１９−２０行のｒＦｉｃｏｌｌ−
Ｐａｑｕｅ液（Ｐｈａｒｍａｃｉａ、 Ｐｉｓｃａｔａ
ｗａＹ、ＮＪ）Ｊの記載を「フィコルーパクエ（Ｆｉｃ
ｏｌｌ−Ｐａｑｕｅ）液〔ニューシャーシー、ビス力タ
ウェイ、ファーマシア（Ｐｂａｒｍａｃｉａ、 Ｐｉｓ
ｃａｔａｗａｙ、 ＮＪ）） ｊと補正する。
Ｐａｑｕｅ液（Ｐｈａｒｍａｃｉａ、 Ｐｉｓｃａｔａ
ｗａＹ、ＮＪ）Ｊの記載を「フィコルーパクエ（Ｆｉｃ
ｏｌｌ−Ｐａｑｕｅ）液〔ニューシャーシー、ビス力タ
ウェイ、ファーマシア（Ｐｂａｒｍａｃｉａ、 Ｐｉｓ
ｃａｔａｗａｙ、 ＮＪ）） ｊと補正する。
（１９）同書第２７頁第９〜１１行（７）ｒ（Ｄｉｐｐ
ｏｌｄＪ、Ｇ、。
ｏｌｄＪ、Ｇ、。
・・・中略・・・７７ ： ６１１４）。」の記載をＷ
（ディボールド、ダブリュ、ジー、ら（Ｄｉｐｐｏｌｄ
、Ｗ、 Ｇ、。
（ディボールド、ダブリュ、ジー、ら（Ｄｉｐｐｏｌｄ
、Ｗ、 Ｇ、。
ｅＬａｌ、）（１９８０）ｒアメリカ国家科学アカデミ
−協会会報Ｊ （Ｐｒｏｃ、 Ｎａｔ’ １． Ａｃａ
ｄ、Ｓｃｉ、、 ＵＳＡ）７７ ： ６１１４）。Ｊと
補正する。
−協会会報Ｊ （Ｐｒｏｃ、 Ｎａｔ’ １． Ａｃａ
ｄ、Ｓｃｉ、、 ＵＳＡ）７７ ： ６１１４）。Ｊと
補正する。
（２０）同書第２９頁第５〜６行のｒ （Ｕｅｄａ ｒ
Ｒ、ｒ（１９７９） 、上記）」の記載を「〔ウエダ
、アール。
Ｒ、ｒ（１９７９） 、上記）」の記載を「〔ウエダ
、アール。
（Ｕｅｄａ、 Ｒ，、）（１９７９）、上記１．、ＪＩ
と補正する。
と補正する。
（２１）同書第２９頁第７〜８行のｒ（ＤＡＫＯ，・・
・中略・・−Ｗｅｓｔｂｕｒｙ、 ＮＹ）Ｊの記載を「
〔ディーエイケイオウ、アキュレイト ケミカルズ、ニ
ューヨーク、ウェストパリ （Ｄ Ａ Ｋ Ｏ、Ａｃｃ
ｕｒａｔｅＣｈｅｍｉｃａｌｓ、 Ｗｅｓｔｂｕｒｙ、
ＮＶ）） ｊｌと補正する。
・中略・・−Ｗｅｓｔｂｕｒｙ、 ＮＹ）Ｊの記載を「
〔ディーエイケイオウ、アキュレイト ケミカルズ、ニ
ューヨーク、ウェストパリ （Ｄ Ａ Ｋ Ｏ、Ａｃｃ
ｕｒａｔｅＣｈｅｍｉｃａｌｓ、 Ｗｅｓｔｂｕｒｙ、
ＮＶ）） ｊｌと補正する。
（２２）同−北第２９頁第９〜ｌＯ行の［（にｏｏ ＋
（Ｊ −Ｃ０ｒ ”’中略・・・ハ： １９７）。」
の記載を１１〔グー、ジー。
（Ｊ −Ｃ０ｒ ”’中略・・・ハ： １９７）。」
の記載を１１〔グー、ジー。
シー・ら（Ｋｏｏ、 Ｇ、 Ｃ，、ｅｔ ａｌ、）（１
９７８）ｒジエイ。
９７８）ｒジエイ。
アイエムエムユーエヌオウエル、エムイーティーエイチ
、Ｊ（Ｊ、 Ｉｍｍｕｎｏｌ、 Ｍｅｔｈ、）２３ ：
１９７） 、 Ｊｌと補正する。
、Ｊ（Ｊ、 Ｉｍｍｕｎｏｌ、 Ｍｅｔｈ、）２３ ：
１９７） 、 Ｊｌと補正する。
（２３）回舎弟２９頁第１３ｆｊのｒ（Ｃａｒｅｙ、
ｌ’、 ＩＥ、、 ｅｔａｌ、 （１９７６）上記）。
ｌ’、 ＩＥ、、 ｅｔａｌ、 （１９７６）上記）。
」の記載を「〔ケアリー。
ティー、イー、ら（Ｃａｒｃｙ、 ｌ’、 ＩＥ、、
ｅｌ： ａＪ、）（１９７（ｉ）Ｊ二記〕。ｊと補正す
る。
ｅｌ： ａＪ、）（１９７（ｉ）Ｊ二記〕。ｊと補正す
る。
（２４）同書第２９頁第７〜８行のｒＦａｒｒ、 Ａ、
に、、−中略・・・４．７． ： ｌ ２９）。」の
記載を「〔ファール。
に、、−中略・・・４．７． ： ｌ ２９）。」の
記載を「〔ファール。
ニー／、ジー、ら（Ｆａｒｒ、 Ａ、 Ｇ、、 ｅｔ；
ａｌ、、）（１！１８１）「シエイ、アイエムエムユ
ーエヌオウエル、工１１イーティーエイチ、Ｊ（Ｊ、
Ｉｍｍｕｎｏ１． Ｍｅｔ；ｈ、）４７ ： １２９）
。ｊと補正する。
ａｌ、、）（１！１８１）「シエイ、アイエムエムユ
ーエヌオウエル、工１１イーティーエイチ、Ｊ（Ｊ、
Ｉｍｍｕｎｏ１． Ｍｅｔ；ｈ、）４７ ： １２９）
。ｊと補正する。
（２５）同書第３０頁第４〜５行のｒ （Ｖｅｃｔａｓ
ｔａｉｎ−中略−Ｂｕｒｌｉｎｇａｍｅ、 ＣＡ）Ｊの
記載を「〔ベクタスタイン（Ｖｅｃｔａｓｔａｉｎ）試
薬、ベクターラボラ１−リーズ、カリフォルニア、バー
リンゲーム（ＶｅｃＬｏｒ Ｌａｂｏｒａｊｏｒｉｅｓ
、 Ｂｕｒｌｉｎｇａｍｅ。
ｔａｉｎ−中略−Ｂｕｒｌｉｎｇａｍｅ、 ＣＡ）Ｊの
記載を「〔ベクタスタイン（Ｖｅｃｔａｓｔａｉｎ）試
薬、ベクターラボラ１−リーズ、カリフォルニア、バー
リンゲーム（ＶｅｃＬｏｒ Ｌａｂｏｒａｊｏｒｉｅｓ
、 Ｂｕｒｌｉｎｇａｍｅ。
ＣＡ））、０と補正する。
（２６）同書第３０頁第１４〜１５行のｒ （Ｍａｔｔ
ｅｓ、−中略・・・１２３．２８５１）Ｊの記載を「〔
マテス、エム、ジェイら（Ｍａｊｔｅｓ、 Ｍ、 Ｊ、
、 ｅｔ ａＬ、）（１９７９）ｒ免疫学誌Ｊ（Ｊ、
Ｉｍｍｕｎｏｌ、）１２３．２８５１） Ｊｌと補正す
る。
ｅｓ、−中略・・・１２３．２８５１）Ｊの記載を「〔
マテス、エム、ジェイら（Ｍａｊｔｅｓ、 Ｍ、 Ｊ、
、 ｅｔ ａＬ、）（１９７９）ｒ免疫学誌Ｊ（Ｊ、
Ｉｍｍｕｎｏｌ、）１２３．２８５１） Ｊｌと補正す
る。
（２７）同書第３０頁第１７〜１８行のｒ （Ｃａｐｐ
ｅｌ−中略・・・ＰＡ） Ｊの記載を「〔カッペル ラ
ボラトリーズ、ペンシルバニア、コツチランビル（Ｃａ
ｐｐｅｌＬａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、 Ｃｏｃｈｒａｎ
ｖｉｌｌｅ、 ＰＡ） 」と補正する。
ｅｌ−中略・・・ＰＡ） Ｊの記載を「〔カッペル ラ
ボラトリーズ、ペンシルバニア、コツチランビル（Ｃａ
ｐｐｅｌＬａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、 Ｃｏｃｈｒａｎ
ｖｉｌｌｅ、 ＰＡ） 」と補正する。
（２８）同書第３１頁第６〜７行のｒ （Ｏｇａｔａ
＋−中略・・・７８，７７０）、」の記載を「〔オガタ
、ニス−アイ、ら（Ｏｇａｔａ、Ｓ−Ｉ、 ｅｔ ａｌ
、）（１１Ｊ８１）ｒアメリカ国家科学アカデミ−協会
会報Ｊ （Ｐｒｏｃ、 Ｎａｔ、’ ｌ。
＋−中略・・・７８，７７０）、」の記載を「〔オガタ
、ニス−アイ、ら（Ｏｇａｔａ、Ｓ−Ｉ、 ｅｔ ａｌ
、）（１１Ｊ８１）ｒアメリカ国家科学アカデミ−協会
会報Ｊ （Ｐｒｏｃ、 Ｎａｔ、’ ｌ。
Ａｃａｄ、 Ｓｃｉ、 ＵＳＡ） ７８，７７０） 、
Ｊｌと補正する。
Ｊｌと補正する。
（２９）回舎弟３１頁第８−１０行のｒ （Ｃａｉｒ＋
＋ｃｒｏｓｓ 、 −中略・・・μじ５６４１）、」の
記載を「〔カイルンクロスｔジエイ・ジーら（Ｃａｉｒ
ｎｃｒｏｓｓ、 Ｊ、 Ｇ、＋ ｅｔａｌ、） （１９
８２）ｒアメリカ国家科学アカデミ−協会会報Ｊ （Ｐ
ｒｏｃ、Ｎａｔ’ １．Ａｃａｄ、 Ｓｃｉ、 ＵＳＡ
）７９ ：５６４１） 、 Ｊｌと補正する。
＋ｃｒｏｓｓ 、 −中略・・・μじ５６４１）、」の
記載を「〔カイルンクロスｔジエイ・ジーら（Ｃａｉｒ
ｎｃｒｏｓｓ、 Ｊ、 Ｇ、＋ ｅｔａｌ、） （１９
８２）ｒアメリカ国家科学アカデミ−協会会報Ｊ （Ｐ
ｒｏｃ、Ｎａｔ’ １．Ａｃａｄ、 Ｓｃｉ、 ＵＳＡ
）７９ ：５６４１） 、 Ｊｌと補正する。
（３０）同書第３１頁第１１〜１２行のｒ（Ｃａｊ、ｒ
ｎｃｒｏｓｓ Ｊ。
ｎｃｒｏｓｓ Ｊ。
Ｇ、、 （１９８２）上ｇｉ４）Ｊ（７）記載をＩｉ’
（７’Ｊイルンクロス ジェイ、ジー、、（Ｃａｉｒｎ
ｃｒｏｓｓ Ｊ、 Ｇ、＋）（１９８２）上記）」と補
正する。
（７’Ｊイルンクロス ジェイ、ジー、、（Ｃａｉｒｎ
ｃｒｏｓｓ Ｊ、 Ｇ、＋）（１９８２）上記）」と補
正する。
（３１）同書第３１頁第１５〜１７行のｒ （Ｃａｉｒ
ｎｃｒｏｓｓ 、 −中略・・・１２６ ： ２４０８
）。」の記載を「〔カイルンクロス、ジエイ、ジー、、
（Ｃａｊｒｎｃｒｏｓｓ、 Ｊ Ｇ、、）（１９８２）
上記と同じ；ロイド、ケイ、オウら（Ｌｌｏｙｄ、 Ｋ
、 ０．、 ｅＬ ａｌ、、）（１９８１）ｒ免疫字詰
」（Ｊ。
ｎｃｒｏｓｓ 、 −中略・・・１２６ ： ２４０８
）。」の記載を「〔カイルンクロス、ジエイ、ジー、、
（Ｃａｊｒｎｃｒｏｓｓ、 Ｊ Ｇ、、）（１９８２）
上記と同じ；ロイド、ケイ、オウら（Ｌｌｏｙｄ、 Ｋ
、 ０．、 ｅＬ ａｌ、、）（１９８１）ｒ免疫字詰
」（Ｊ。
１ｖｎｕｎｏ１．、）３２６ ： ２４０８） 、 Ａ
と補正する。
と補正する。
（３２）回舎弟３１真下から１行目〜第３２頁第１行の
ｒ（Ｃａｉｒｎｃｒｏｓｓ、 Ｊ、−Ｇ、、 ｅｔ ａ
ｌ、、 （１９８２）上記と同し）。」の記載をＩ“〔
カイルクロス、ジェイ、ジーら（Ｃａｉｒ＋＋ｃｒｏｓ
ｓ、 Ｊ、 ｔｉ、、 ｅＬ： ａｌ、）（１９８２）
上記と同じ〕。Ｊと補正する。
ｒ（Ｃａｉｒｎｃｒｏｓｓ、 Ｊ、−Ｇ、、 ｅｔ ａ
ｌ、、 （１９８２）上記と同し）。」の記載をＩ“〔
カイルクロス、ジェイ、ジーら（Ｃａｉｒ＋＋ｃｒｏｓ
ｓ、 Ｊ、 ｔｉ、、 ｅＬ： ａｌ、）（１９８２）
上記と同じ〕。Ｊと補正する。
（３３）同書第３２頁第６〜７行のｒ （Ｌｌｏｙｄ、
に、０．。
に、０．。
ｅｔ ａｌ、（１９８１）上記と同じ」の記載をｒ〔ロ
イド、ケイ、オウら（Ｌｌｏｙｄ、に、 ０．、 ｅ七
ａ１．）（１９８１）Ｊ１記と同じ〕ｊと補正する。
イド、ケイ、オウら（Ｌｌｏｙｄ、に、 ０．、 ｅ七
ａ１．）（１９８１）Ｊ１記と同じ〕ｊと補正する。
（３４）同書第３２頁第１５〜１６行のｒ（ＰＡＧＥ）
・・・中略・・・ηユニ ６８０）Ｊの記載をｌｉ’（
ＰＡＧＥ）［ラエムリイ、ニー、ケイ、（Ｌａｅｍｍｌ
ｉ、 Ｕ、 Ｋ、）（１９７０）「ネイチャーＪ（Ｎａ
ｔｕｒｅ）２２７ ： ６８０） ｊと補正する。
・・・中略・・・ηユニ ６８０）Ｊの記載をｌｉ’（
ＰＡＧＥ）［ラエムリイ、ニー、ケイ、（Ｌａｅｍｍｌ
ｉ、 Ｕ、 Ｋ、）（１９７０）「ネイチャーＪ（Ｎａ
ｔｕｒｅ）２２７ ： ６８０） ｊと補正する。
（３５）同書第３２頁第１８行〜第３３頁第２行のｒ
（Ｏｇａｔａ ＋・・・中略・・・第１６巻１０７〜４
２０頁）」の記載を「（オガタ、ニス−アイら（Ｏｇａ
Ｌａ、 Ｓ−Ｔ、 ｅｔ ａｌ、）（１９８１１１記と
同じ；オツファレル、ピー、エイチら（０’ Ｆａｒｒ
ｅｌｌ、、 Ｐ、 Ｉｌ、、 ｅｔ ａｌ、）（１９７
７）ｒメソッズインセルバイオロジーＪ （Ｎｅｔ、ｈ
ｏｄｓｉｎＣｅｌｌ ｎｊｏｌｏｇｙ）プレスコツト、
ディー、エム。
（Ｏｇａｔａ ＋・・・中略・・・第１６巻１０７〜４
２０頁）」の記載を「（オガタ、ニス−アイら（Ｏｇａ
Ｌａ、 Ｓ−Ｔ、 ｅｔ ａｌ、）（１９８１１１記と
同じ；オツファレル、ピー、エイチら（０’ Ｆａｒｒ
ｅｌｌ、、 Ｐ、 Ｉｌ、、 ｅｔ ａｌ、）（１９７
７）ｒメソッズインセルバイオロジーＪ （Ｎｅｔ、ｈ
ｏｄｓｉｎＣｅｌｌ ｎｊｏｌｏｇｙ）プレスコツト、
ディー、エム。
（Ｐｒｅｓｃｏｔｔ、 Ｄ、 Ｍ、）ｍアカデミツク
出版、ニュー ヨーク（Ａｃａｃｌｃｍｉｃ Ｐｒｅｓ
ｓ、 ＮＹ、）第１６巻１０７〜４２０頁〕ｊと補正す
る。
出版、ニュー ヨーク（Ａｃａｃｌｃｍｉｃ Ｐｒｅｓ
ｓ、 ＮＹ、）第１６巻１０７〜４２０頁〕ｊと補正す
る。
（３６）同書第３３頁第１４〜１５行のｒ（Ｃａｉｒｎ
ｅｒｏｓｓ、 Ｊ。
ｅｒｏｓｓ、 Ｊ。
Ｇ、、 （１９８２）上記に同じ）。」の記載を「〔カ
イルンクロス、ジェイ、ジー、、（Ｃａｉｒｎｃｒｏｓ
ｓ、 Ｊ。
イルンクロス、ジェイ、ジー、、（Ｃａｉｒｎｃｒｏｓ
ｓ、 Ｊ。
Ｇ、、 （１９８２）、１−、記に同じ〕。１とｈｌｉ
ｉｔミする。
ｉｔミする。
（３７）同１１１・第４７頁第５〜６行のｒ（Ｊ、 Ｎ
ｇ ａｎｄ ＬＯ，Ｌｌ、ｏｙｄ、未発表の知見）。」
の記載を「〔ジェイ、エヌジーとケイ、オウ、ロイド（
，１，ｔｌＨａｔ＋ｄＫ、 ０． Ｌｌｏｙｄ、）未発
表の知見〕。」と補１１：、する。
ｇ ａｎｄ ＬＯ，Ｌｌ、ｏｙｄ、未発表の知見）。」
の記載を「〔ジェイ、エヌジーとケイ、オウ、ロイド（
，１，ｔｌＨａｔ＋ｄＫ、 ０． Ｌｌｏｙｄ、）未発
表の知見〕。」と補１１：、する。
（３８）同書第４７頁第１４〜１６行のｒ ［Ｙｖａｓ
ＦｒａｄｃＪ・・・中略・・・（１９８３年３Ｊ１１
１日出願）］、」の記載を「〔イーブ フラデッｌ−、
ら ビーエヌエイエス（Ｙｖｅｓ Ｆｒａｄｅｊ：、
ｅＬ、 ａｔ、ｌ’ Ｎ Ａ Ｓ ）（印刷中）と最近
の特許申請Ｓ 、 Ｎ 、 ４７４，２２９（１９８３
年３月１１日出願））、ｊｌと補正１−る。
ＦｒａｄｃＪ・・・中略・・・（１９８３年３Ｊ１１
１日出願）］、」の記載を「〔イーブ フラデッｌ−、
ら ビーエヌエイエス（Ｙｖｅｓ Ｆｒａｄｅｊ：、
ｅＬ、 ａｔ、ｌ’ Ｎ Ａ Ｓ ）（印刷中）と最近
の特許申請Ｓ 、 Ｎ 、 ４７４，２２９（１９８３
年３月１１日出願））、ｊｌと補正１−る。
（３９）同書第４７頁第１８〜１９行のｌ’Ｕｅｃｌ＋
（！Ｌ ｔ＋１．、−中略・・胆（５１２２−５１２
６）Ｊの記載を１１°【ウエダら（Ｕｅｄａ ｅＬ：
ａｌ、）（１９８１）ｒアメリカ国家科学アカデミ−協
会会報Ｊ（［’ｒｏｃ、 ＮａＬ’ Ｊ、 Ａｃ；＋ｄ
、 Ｓｃｉ。
（！Ｌ ｔ＋１．、−中略・・胆（５１２２−５１２
６）Ｊの記載を１１°【ウエダら（Ｕｅｄａ ｅＬ：
ａｌ、）（１９８１）ｒアメリカ国家科学アカデミ−協
会会報Ｊ（［’ｒｏｃ、 ＮａＬ’ Ｊ、 Ａｃ；＋ｄ
、 Ｓｃｉ。
ＵＳＡ） ７則（５１２２−５１２６） 、０と補正す
る。
る。
（４０）同書第４８頁第１５〜１９行のｒ（Ｍｏｒｉｓ
ｈｉ＋ｎｒｓ、 ・・・中略・・・２８３ ： ５７６
）Ｊの記載を「〔モリシマ、ワイ。
ｈｉ＋ｎｒｓ、 ・・・中略・・・２８３ ： ５７６
）Ｊの記載を「〔モリシマ、ワイ。
ら（Ｍｏｒｉｓｈｉｍａ、 ’！、、 ｅｔ ａｌ、）
（１９８２）ｒ免疫遺伝学Ｊ（Ｉｍｍｕｎｏｇｅ＋＋ｅ
ｌ；ｊ、ｃｓ）１５ ： ５２９ ；オガタ、ニス−ア
イ、ら（０１Ｈａｔ、ａ、 Ｓ−１，ａｔ ａｌ、）（
１９８２） ｒエイアールシーエイチ、バイオケム、バ
イオフィジクスＪ（Ａｒｃｈ、 Ｂｉｏｃｈｅｍ、 ［
３ｉｏｐｈｙｓｉｃｓ）刀−７： ６６５ ：ホースリ
ー、ディー、ら（ｌｌｏｅｓｓｌｉ、 Ｄ、、 ｅｔ
ａｌ、）（１９８０）ｒネイチャー（Ｎａｔｕｒｅ）２
８３ ： ５７６） 、０と補正する。
（１９８２）ｒ免疫遺伝学Ｊ（Ｉｍｍｕｎｏｇｅ＋＋ｅ
ｌ；ｊ、ｃｓ）１５ ： ５２９ ；オガタ、ニス−ア
イ、ら（０１Ｈａｔ、ａ、 Ｓ−１，ａｔ ａｌ、）（
１９８２） ｒエイアールシーエイチ、バイオケム、バ
イオフィジクスＪ（Ａｒｃｈ、 Ｂｉｏｃｈｅｍ、 ［
３ｉｏｐｈｙｓｉｃｓ）刀−７： ６６５ ：ホースリ
ー、ディー、ら（ｌｌｏｅｓｓｌｉ、 Ｄ、、 ｅｔ
ａｌ、）（１９８０）ｒネイチャー（Ｎａｔｕｒｅ）２
８３ ： ５７６） 、０と補正する。
（４１）同書第４９頁第１８−２０行のｒ （Ｐｕｋｅ
ｌ 、−中略・・・１４ ： ７７５）。」の記載を「
〔パケル、シー、ニス０．ら（Ｐｕｋｅｌ、乙Ｓ、、
ｅｔ ａｌ、）（１８３２）ｒ実験医学誌Ｊ（Ｊ、 Ｅ
ｘｐ、 Ｍｅｄ、）１５５ ： １１３３ ；スターン
。
ｌ 、−中略・・・１４ ： ７７５）。」の記載を「
〔パケル、シー、ニス０．ら（Ｐｕｋｅｌ、乙Ｓ、、
ｅｔ ａｌ、）（１８３２）ｒ実験医学誌Ｊ（Ｊ、 Ｅ
ｘｐ、 Ｍｅｄ、）１５５ ： １１３３ ；スターン
。
ピー、エル０．ら（Ｓｔｅｒｎ、 Ｐ、 Ｌ、、 ｅｔ
ａｌ、）（１９７８）［細胞Ｊ（Ｃｅｌｌ）１４ ：
７７５） 、 Ｊｌと補正する。
ａｌ、）（１９７８）［細胞Ｊ（Ｃｅｌｌ）１４ ：
７７５） 、 Ｊｌと補正する。
（４２）同書第５０頁第２〜７行の区Ｍｏｍｏｉ、・・
・中略・−・γ７３ ： ７６１）。」の記載を「〔モ
モイ、エム、。
・中略・−・γ７３ ： ７６１）。」の記載を「〔モ
モイ、エム、。
ら（Ｍｏｍｏｘ、 Ｍ、、 ｅｔ ａｌ、）（１９８０
） ｒ生化字詰」（Ｊ、 １ｌｉｏ１． Ｃｈｅｍ、）
２５５ ： １１９１４ ；フレメン１−。
） ｒ生化字詰」（Ｊ、 １ｌｉｏ１． Ｃｈｅｍ、）
２５５ ： １１９１４ ；フレメン１−。
エル、ティー、ら （Ｃｌｅｍｃ＋＋Ｊ Ｌ、 Ｔ、、
ｅｔ ａｌ、）（１９８１）ｒ免疫学誌ＪＵ、 Ｉｍ
ｍｕｎｏｌ、）１２７ ： １２２０ ：マーラー、イ
ー０．ら（Ｍｅｒｌｅｒ、 Ｅ、、 ｅｔ ａｌ、）（
１９７４）［ネ・ＣチャーＪ（Ｎａｔｕｒｅ）郡−１：
６ｆｉ２ ；マテス。
ｅｔ ａｌ、）（１９８１）ｒ免疫学誌ＪＵ、 Ｉｍ
ｍｕｎｏｌ、）１２７ ： １２２０ ：マーラー、イ
ー０．ら（Ｍｅｒｌｅｒ、 Ｅ、、 ｅｔ ａｌ、）（
１９７４）［ネ・ＣチャーＪ（Ｎａｔｕｒｅ）郡−１：
６ｆｉ２ ；マテス。
工Ａｓ、ジエ仁、ら（Ｍａｕｌ；ａｓ、Ｍ、、１．、ｃ
ｌ、 ａｌ−、）（１９８１）ｒネイチャーＪ（ＮａＬ
；ｕｒｅ）２７３ ： ７（ｉｔ） 、 Ｊｌと補正す
る。
ｌ、 ａｌ−、）（１９８１）ｒネイチャーＪ（ＮａＬ
；ｕｒｅ）２７３ ： ７（ｉｔ） 、 Ｊｌと補正す
る。
（４３）同舎弟５０頁下から１行目〜第５１頁第１行の
ｒ （Ｇｏｒｇａ 、−中ＷＩ８−９１ ： ９５５）
Ｊの記載をｒ〔ゴーガ、エフ、アール８．ら（Ｇｏｒｇ
ａ、 Ｆ、 Ｌ、 ａｔ ａｌ、）（１９７９） ｒバ
イオケミストリー バイオフィジクス、アールイーニス
、シーオウエムエムユーエヌ、Ｊ（Ｉｌｉｏｃｈｅｎ＋
、Ｂｉｏｐｈｙｓ、１ｉｅｓ、Ｃｏｍｍｕｎ、）其：９
５５）Ｊｌと補正する。
ｒ （Ｇｏｒｇａ 、−中ＷＩ８−９１ ： ９５５）
Ｊの記載をｒ〔ゴーガ、エフ、アール８．ら（Ｇｏｒｇ
ａ、 Ｆ、 Ｌ、 ａｔ ａｌ、）（１９７９） ｒバ
イオケミストリー バイオフィジクス、アールイーニス
、シーオウエムエムユーエヌ、Ｊ（Ｉｌｉｏｃｈｅｎ＋
、Ｂｉｏｐｈｙｓ、１ｉｅｓ、Ｃｏｍｍｕｎ、）其：９
５５）Ｊｌと補正する。
（４４）同書第５１頁第３行のｒｒＥｓｃｈｃｒｊｃｌ
＋ｊａ ｆｒｅｕｎｄｉｊＪの記載を口゛エシェリヒア
フレウンディイ（Ｅｓｃｈｅｒｊｃｌ＋ｉａ ｆｒｅ
ｕｎｄｉｉ）Ｊｌど補１１：、する・（４５）同書第５
１頁第４〜５行のｒ （ＭｉＪｅｓ−中略・・ＩＮ）Ｊ
の記載を「〔マイルズ ラボラ１−リーズ。
＋ｊａ ｆｒｅｕｎｄｉｊＪの記載を口゛エシェリヒア
フレウンディイ（Ｅｓｃｈｅｒｊｃｌ＋ｉａ ｆｒｅ
ｕｎｄｉｉ）Ｊｌど補１１：、する・（４５）同書第５
１頁第４〜５行のｒ （ＭｉＪｅｓ−中略・・ＩＮ）Ｊ
の記載を「〔マイルズ ラボラ１−リーズ。
エルクハルト、インジアナ（旧Ｌｃｓ
ＬａｂｏｒａＬｏｒｉｅｓ、 Ｅｌｋｔ＋ａｒＪ ＩＮ
） ） Ｊｌど油圧する。
） ） Ｊｌど油圧する。
（４Ｇ）同書第５１頁第７〜８行の’ ＣＶｏｕｎｇ、
・＝中略・・・２５８ ： ２２０２）Ｊの記載を「
〔ヤング、ジェイ。
・＝中略・・・２５８ ： ２２０２）Ｊの記載を「
〔ヤング、ジェイ。
ディー・１ら（Ｙｏｕｎｇ、 Ｊ、 Ｄ、、 ｅｔ ａ
ｌ、）（１９８２）「生化字詰」０． Ｂｉｏｌ、 Ｃ
ｈｅｍ、）２５８ ： ２２０２） Ｊｌと補正する。
ｌ、）（１９８２）「生化字詰」０． Ｂｉｏｌ、 Ｃ
ｈｅｍ、）２５８ ： ２２０２） Ｊｌと補正する。
（４７）同書第５１頁第１４行のｒ （Ｌｌｏｙｄ 、
に、 Ｏ，、ｅｔａｌ、）（１り８１）上記と同じ）」
の記載を「〔ロイド。
に、 Ｏ，、ｅｔａｌ、）（１り８１）上記と同じ）」
の記載を「〔ロイド。
グー。オー１．ら（Ｌｌｏｙｄ、 Ｋ、 Ｏ，、ｅｔ
ａｌ、）（１９８１）上記と同じ〕Ｊと補正する。
ａｌ、）（１９８１）上記と同じ〕Ｊと補正する。
以上
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ 次のようなことに関するヒトの異常細胞標本の診断
と治療のための方法Ｏ ａ）免疫原が免疫的に強いものから弱いものまでの活性
をもつ抗原決定基の存在によって特徴づけられる正常及
び、または異常なヒト細胞標本からなる免疫ＩＪｊ＜で
哺乳動物を免疫すること。 ｂ） ＫＩＳｈｌｅｒ−Ｍｌｌｓｔ會１ｎ法全１ｎ法免
疫原中の強い抗原決定基に対するモノクローナル抗体を
増やすこと。 Ｃ）ヒト細１１う標本のもつ強い抗原決定基に対するモ
ノクローナル抗体を産生ずるバイブ、リドーマを選択す
ること。 ｄ）上記のステップＣ）からの強い抗原決定基に対する
モノクローナル抗体を、免疫原がステップａ）における
ものと同じかまたは異なる免疫原と結合させること。 ・） ヒトの細ｆｆ１標本免疫原にある強い抗原決定基
を決定基に対して高めたモノクローナル抗体に決定基を
結合することによって不活性化すること。 ｆ）上記のステップ・）から得た不活性化したヒト細胞
標品に関する免疫原で哺乳動物を免疫すること。 ｇ） Ｋ８ｈｌｅｒ−ＭｉｌｓｌＩｉｎ法を使って強く
はない抗原決定基に対するモノクローナル抗体を高める
こと。 ｈ）強く紘ない抗原決定基に対するモノクローナル抗体
を生産するハイブリドーマを選択すること。 ｌ）抗原決定基が特別な正常ま九は異常な細胞に対して
特異的である強くはない抗原決定基に対するモノクロー
ナル抗体を選択すること。 ｊ）ヒトの細胞標本全異常性またはそれが欠けているこ
とに特異的なモノクローナル抗体と接触させ応答を観察
することによって特別なｌへ常を鯛べること。 ２、 異常なヒトの細胞標本が悪性化したヒト細胞標本
である特許請求の範囲第１項記載の方法。 ３、 異常なヒト細胞標本を異常に対して特異的なモノ
クローナル抗体と接触させることによってその細胞標本
全処理することからなる特許請求の範囲第１項記載の方
法。 ４、Ｑ常なヒト細胞標本に特異的なモノクローナル抗体
が放射線核種や特異的な細胞畠物またはそれらの混合物
から選ばれる異常ヒト細胞標本を破りする成分金倉む特
１ｒｌ−請求の範囲第３項記載の方法。 ５、異常なヒト細胞標本が悪性化した細胞標本である特
許請求の範囲第３項記載の方法。 ６、 ステップ・）の不活性化され九強い抗原成分が免
疫原から除かれる特許請求の範囲第１項記載の方法。 ７、 上記ステップａ）のヒト細胞標本の免疫原が細胞
全体、壊された細Ｈａ全体、可溶化された細胞抽出液１
細胞膜、可溶化された細胞膜、またはそれらからの混合
物の群から選ばれるＩＦＦＩ許請求の範囲ａＸ項記載の
方法・８、 ステップａ）からｈ）までが次々に弱くな
る抗原成分で順次免疫原を得るためにくり返される特許
請求の範囲第１項記載の方法。 ９、 ステップａ）からｈ）までが次々に弱くなるヒト
抗原性の細胞性決定基に対するモノクローナル抗体を得
る丸めにくり返される特許請求の範囲第１項記載の方法
＠ １０、弱い抗原性のヒト細胞決定基を認識するモノクロ
ーナル抗体がＡＪ２、ＭＡ９９、ＭＡ１０３、ＭｎＯ２
、Ｊ１４３、Ｔ１６、Ｔ４３、Ｔ８７、Ｉ（ＬＡ−Ｄ几
、８ｓ７ ｓ Ｖｌ、Ｓ！１、Ｆ−１０，Ｆ−１７オｊ
ヒソｔＬらの混合の群から選ばれその中で個々のモノ
クローナル抗体の名称が同じような特徴音もったモノク
ローナル抗体群の代表である特許請求の範囲第１項記載
の方法。 １１、強い抗原決定基が大多数のヒト細胞標本に存在す
る特ｄ１□ｉ青求の範囲第１項記載の方法◎１２、強い
抗原決定基が血液型決定基でない特許請求の範囲第１項
記載の方法・ １３、強くはない抗原決定基が大多数のヒト細胞標本に
は存在しない特許請求の範囲第１項記載の方法。 １４ ヒト細胞標本にある強くはない抗原決定基１を認
識するモノクローナル抗体が腫瘍の診断及び／ｌたは治
療に有用である特ｌ１Ｔ−請求の範囲第１項記載の方法
。 １５、ヒト細胞標本にある強くはない抗原決定基を認識
するモノクローナル抗体が特別な細胞株に特徴的な抗原
ｔ−認識する特許請求の範囲第１項記載の方法。 １６ ヒト細胞標本にある強くはない抗原決定基ｔ Ｍ
ｍ１ｌＡするモノクローナル抗体が特定の細胞の不ｉ
ｔ！、ｍ Ｋ特徴的な抗原を認識する特許請求の範囲ｆ
Ｑ １項記載の方法。 １７、モノクローナル抗体−抗原産物を除去することを
特徴とする特許請求の範囲第６項記載のヒト細胞標本免
疫原。 １８ 大多数のヒト細胞性免疫原標本に存在するヒト細
胞性抗原ｔ−ｉ識するモノクローナル抗体。 １９、抗原が１２５〜１４０に１５０〜５５に、 ３８
Ｋ。 ２９Ｋ から成る群から選ばれる分子量をもつ特許請求
の範囲第１８項記載のモノクローナル抗体。 ２０、上述のヒト細胞性抗原が強い免疫原性金もつ特許
請求の範囲第１８項記載のモノクローナル抗体。 ２１、ＡＪ２、ＭＡ９９、ＭＡ １０３、！１ｉＨＩ９
９、Ｊ１４３、Ｔ１６、Ｔ４３、Ｔ８７、ＨＬ Ａ −
Ｄ Ｒ％ Ｓｒ！、ＶＢ 、Ｓｔｔおよびそれらから混
合されたものの群から選ばれ夫々のモノクローナル抗体
の名称が同じような特徴をもった一群のモノクローナル
抗体の代表である特許請求の範囲第１８項記載のモノク
ローナル抗体。 ２２、モノクローナル抗体ＡＪ２がアストロサイ） −
７ｇ′ｌ １１１株８に−Ｍｇ−１で１３ａｌｂ／ｅ
ｔたは（ＢＡＬＢ／ｃ ｘ ０５７ＢＬ／６）Ｆｓ”ク
スを免疫し、得られるＢａ１ｂ／ｅマウスの腫細胞をマ
ウスのミエローマＮＳ／１細胞と融合する結果として作
られる特許請求の範囲第２１項記載のモノクローナル抗
体０ ２３、モノクローナル抗体ＭＡ９９とＭＡ１０３がＢａ
１ｂ／ｅまたは（ＢＡＬＢ／ｃ ｘ ０５７ＢＬ／６）
ｐｓマウスを卵巣ガン細胞８に一０Ｖ−３で免疫し、得
られるＢａｔｈ／ｅマウスの詳細Ｈ，！ｌをマウスミエ
ローマＮＳ／１細胞と融合する結果として作られる特許
請求の範囲第２１項記載のモノクローナル抗体Ｌ体。 ２４、モノクローナル抗体ＭＨ９９がＢａ１ｂ／ｅ マ
ウスケ子宮ガン細胞５Ｋ−ＵＴ−１で免疫し、得られる
１３ａｌｂ／ｅの１１％細胞をマウスミエローマＮ８／
１細胞と融合する結果として作られる特８１′ｍｌ求の
ねり■ｊ第２１ｇ４記載のモノクローナル抗体。 ２５、大多数のヒト細胞タイプに存在する細Ｈ３性抗原
ｔｕｇするモノクローナル抗体を産生ずるハイブリドー
マ細胞株。 ２６、生産されるモノクローナル抗体がＡＪ２、ＭＡ９
９、ＭＡ１０３、ＭｎＯ２、Ｊ１４３、Ｔ１６、Ｔ８？
、Ｔ４３、ＨＬＡ−ＤＲｓ ｓｒｒ ｓ ｓｍ ｓ Ｖ
ｔ及びそれらの混合されたものの群から選ばれその各々
のモノクローナル抗体の名称は同様な特ａｔ−もつ九一
群のモノクローナル抗体の代衆である特許請求の範囲第
２５項記載のハイブリドーマ細胞株。 ２７、認識される細胞性抗原が１２１５〜１４０に％５
０〜５５ＫＮ ３８ＫＮ ２９Ｋからなる群から選ばれ
る分子量金もつ特許請求の範囲第２５項記載のハイブリ
ドーマ細胞株。 ２８、細胞性抗原が２８〜１７０にの分子量範囲をもつ
特許請求の範囲第２５項記載のハイプリドーマ細胞株。 ２９、−）ヒトのガン標本をモノクローナル抗体Ｍ１１
９９と反応させｂ）抗原−モツクローナル抗体反応が一
般にＴ ＩＪンノ９腫細胞やミニロイド白血病細胞には
陽性でＢリン、ｅ腫細胞、ヌルリン、！腫細胞および骨
ずい腫細胞には陰性であるところの抗原−モノクローナ
ル抗体を観察することから成るヒトのガンを診断する方
法。 ３０、上述のガン細胞標本がＨＬ Ａ −Ｄ几抗原に対
するモノクローナル抗体と反応し、その結果の抗原−モ
ツクローナル抗体反応が一般にはＢリン、ｅ腫細胞、ヌ
ルリン、ｅ腫細胞及び骨ずい原綿Ｈａに対して陽性でＴ
リンノｅ肝細胞や骨ずい性白血病細胞に対しては一般に
陰性である特ハ１：請求の範囲第２９項記載の方法。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US55657983A | 1983-11-30 | 1983-11-30 | |
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Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS60208925A true JPS60208925A (ja) | 1985-10-21 |
Family
ID=24221938
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP59252794A Pending JPS60208925A (ja) | 1983-11-30 | 1984-11-29 | ガン診断と治療のためのモノクロ−ナル抗体の生産法 |
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| Country | Link |
|---|---|
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| JP (1) | JPS60208925A (ja) |
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Family Cites Families (1)
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|---|---|---|---|---|
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-
1984
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- 1984-11-29 JP JP59252794A patent/JPS60208925A/ja active Pending
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| PROC.NATL.ACAD.SCI=1981 * |
| PROC.NATL.ACAD.SCI=1982 * |
| TISSUE ANTIGENS=1980 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0143367A2 (en) | 1985-06-05 |
| EP0143367A3 (en) | 1987-11-25 |
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