JPH11507032A - 結合組織の付着の治癒および修復のための方法および組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 骨への結合組織（例えば、腱または靭帯）の機能的付着を包含する欠損および疾病の治療のための方法および組成物が提供される。好ましい方法は、骨形態形成蛋白および適当な担体を含有する組成物を投与することを特徴とする。該方法は、結合組織と骨との間の機能的付着の再生を引き起こし、その結果、再生した骨と結合組織との間の界面に最小の線維組織および肉芽組織を生じる。該方法よおび組成物は、再形成外科手術における組織移植片の増加に有用である。該方法および組成物は、初期の時点において結合組織と近接して並んだ骨を生じ、初期の時点で固定強度を増大させる。

Description

【発明の詳細な説明】 結合組織の付着の治癒および修復のための方法および組成物 発明の分野 本発明は、組織の修復、詳細には、腱、軟骨または靭帯のごとき結合組織と骨 との間の機能的付着の再生に関する。この機能的付着は、外傷またはストレスに よって、あるいは変性的もしくは先天的疾患により破壊されうる。よって、本発 明は、結合組織と骨との間の機能的付着の再生のための再形成外科手術または他 の方法において有用でありうる。 発明の背景 本発明の背景および必要な病理学： いくつかの再形成外科手術法は、結合組織、詳細には腱または靭帯の治癒ある いは骨への堅い結合に依存するものであるが、骨に対する腱の界面における治癒 プロセスについてはほとんどわかっていない。移植後間もないうちは骨への移植 片固定部位は最も弱い部位であるので、初期の移植片固定強度を改善する方法を 適用することは臨床的に重要である。このことは、膝、肩、臀部、足首および肘 における手術において特に重要である。 腱または靭帯の骨への付着の進展についてはほとんど理解されていない。着点 はコラーゲン線維（「Sharpeyの線維」として知られる）により媒介され、該線 維は腱から骨中へと続く。Sharpeyの線維は、増殖中の骨を発達させることによ る靭帯または骨周囲コラーゲン線維の進行的無機質化によって発達中の骨格にお いて形成されると考えられている。最初に腱と骨との間に形成される線維血管界 面組織中への骨の増殖により、骨は腱を治癒するということが研究により示され ている。引き続いて起こる外側の腱の中への骨の増殖を伴う界面組織の進行的無 機質化が存在する。骨はコラーゲン性組織中へと増殖するという証拠にもかかわ らず、かかる骨の内方増殖の機構、ならびに付着の有効性および強度については 不確かなままである。骨への腱の付着の治癒に関する以前の研究により、腱と骨 との間の線維組織界面の形成が示されている。Rodeo et al.,J.Bone and Joint Surgery,75-A:1795〜1803(1993)。 したがって、この分野における多くの努力にもかかわらず、腱または靭帯のご とき結合組織と骨との間の機能的付着の修復のための有効な方法に対する必要性 が存在し続けている。 発明の概要 本発明は、結合組織と骨との間の機能的付着を再生させるための方法および組 成物を提供する。詳細には、本発明は、腱または靭帯の骨への付着が脱離または 変性した患者の治療方法を含む。いくつかの例は、膝、肩、手、足首および肘に 対する再形成外科手術を含む。本発明が有用であるとわかる特別な部分は、前方 十字形靭帯（ＡＣＬ）または回旋筋カフの再形成を包含する。本発明方法および 組成物は、それらが骨形成蛋白を用いるという点で有利であり、骨形成蛋白は組 み換えＤＮＡ法により製造され、それゆえ潜在的に供給が制限されることはない 。本発明方法および組成物は、付着機構の再生が加速され、あるいはその最終強 度が大きくなりうるという点、さらに外科手術または修復を施した場合すぐに結 合組織と骨との間に形成される付着が機能的強度に到達しうるという点で有利で ある。さらに本発明方法および組成物は、それらが結合組織と骨との間の機能的 付着の再生を誘導するが、タイプの異なる組織間の界面における線維組織または 肉芽組織の形成を回避するするという点で有利である。 特に本発明方法は、骨トンネル中における円型の腱または骨表面上への偏平な 腱の固定に適用可能である。いくつかの臨床例にも適する。通常の臨床例は前方 十字形靭帯（ＡＣＬ）の再形成である。けい骨および膝蓋の両方からの付着した 骨ブロックを伴う中心の三番目の膝蓋腱を用いて、あるいは半腱様の腱および薄 い腱を用いて再形成を行うことができる。膝蓋腱を用いることの利益は、直接的 な骨の固定を包含し、術後のきついリハビリテーションおよび強度の増大を可能 にする。しかしながら、中心の三番目の膝蓋腱の使用は、膝蓋骨折、膝蓋靭帯断 裂、および膝蓋大腿骨関節の変性を包含する有害な続発症が伴っていた。半腱様 の腱および薄い腱を用いることの利益は、移植片が取りやすいこと、膝の伸筋機 構の破壊がないこと、術後１年後の四頭筋強度が大きいこと、および膝屈曲筋強 度損失が最小であることを包含する。大きな落とし穴は、骨トンネル中の腱の固 定強度ならびに固定部位における移植片破壊の危険に関するものである。 骨と腱との付着の治癒改善へのＢＭＰの使用は、ＡＣＬ再形成については半腱 様の腱および薄い腱を使用するためのより良い方法となる可能性があり、よって 、膝蓋靭帯取得物に固有の膝蓋欠損および同時に起こる伸筋機構の破壊を未然に 防止しうる。組織学的および生体力学的評価により示されるように、発症前現前 の評価は、ｒｈＢＭＰ−２が腱移植片への骨の付着についての初期治癒を改善す ることを示している。骨への腱の付着強度の増大は、初期のリハビリテーション およびよりきついリハビリテーションを可能にし、正常な活動、仕事、またはス ポーツへの早期復帰を可能にする。 本発明の適用が指向される他の通常の臨床例は以下のものを包含する：上腕骨 の大きな粗面への回旋筋カフ腱の修復、肩甲骨ネックへの関節唇の再付着、骨ト ンネルを通して配置された腱移植片を用いる側方の足首の腱の再形成、骨表面に 固定された腱移植片または骨トンネルを通して固定された腱移植片を用いる肘ま たは膝の内側の副行靭帯の再形成、骨トンネル中に置かれた腱移植片を用いる親 指の尺骨副行靭帯の再構築、ならびに指の屈筋および伸筋の骨中または指節骨の 表面への修復。本発明は、結合組織（腱、靭帯、関節唇、筋膜、または関節嚢） の骨（骨表面または骨トンネル中への）への再付着におけるいずれの状況にも適 用可能である。 発明の詳細な説明 本発明によれば、結合組織と骨との間の機能的付着の修復のための再形成外科 手術を必要とする患者の治療のための方法および組成物が提供される。本発明方 法および組成物は、すべての付着機構（腱または靭帯、隣接する骨、ならびに機 能的付着機構）の修復または改善が行われうるという点で有利である。本発明方 法は、再形成外科手術が必要な部位、または骨に対する結合組織の欠損、裂傷も しくは脱離の部位に、結合組織の骨への機能的付着を再生させるのに効果的な１ 種またはそれ以上の骨形成蛋白を含んでなる一定量の組成物を適用することを特 徴とする。さらに本発明方法は、適当な担体中の精製または組み換え骨形成蛋白 を含んでなる組成物を、骨への結合組織の付着の再生を必要とする部位に投与し て、付着部位における線維状または顆粒状組織の発生を抑制しつつ結合組織、骨 、および機能的付着機構が再生されるようにすることを特徴とする。本発明方法 の重要な利点は、結合組織、骨および機能的付着機構の制御された迅速再生を可 能にして、骨形成蛋白を添加しない場合に同様の処置を行った場合よりも初期の 付着の機能的強度を大きくすることができるという点である。 骨形成蛋白 好ましくは、骨形成蛋白は、骨形態形成蛋白（ＢＭＰ）として広く知られた蛋 白のサブクラスから選択され、それらは骨形成活性および他の増殖および分化活 性を有することが開示されている。これらのＢＭＰは、ＢＭＰ−２、ＢＭＰ−４ 、ＢＭＰ−５、ＢＭＰ−６、ＢＭＰ−７、ＢＭＰ−８、ＢＭＰ−９、ＢＭＰ−１ ０、ＢＭＰ−１１、ＢＭＰ−１２およびＢＭＰ−１３を包含し、蛋白のＴＧＦ− βスーパーファミリーの他のメンバー、例えば、増殖および分化因子またはＧＤ ＦおよびＭＰ５２を包含する。米国特許第４８７７８６４号、第５１０８９２２ 号、第５０１３６４９号、第５１１６７３８号、第５１０６７４８号、第５１８ ７０７６号、第５１４１９０５号；ならびにＰＣＴ出願公開ＷＯ９１／１８０９ ８、ＷＯ９３／００４３２、ＷＯ９４／２６８９３およびＷＯ９４／２６８９２ ；ならびに同時係属特許出願第０８／３６２６７０号（１９９４年１２月２２日 出願）において多くのＢＭＰ蛋白の構造が開示されている。ＷＯ９４／１５９６ ５、ＷＯ９４／１５９４９、ＷＯ９５／０１８０１、ＷＯ９５／０１８０２、Ｗ Ｏ９４／２１６８２、ＷＯ９４／１５９６６において多くのＧＤＦの構造が開示 されている。ＭＰ５２の構造はＷＯ９３／１６０９９に開示されている。上記出 願の開示を参照により本明細書に記載されているもの とみなす。好ましくは、ＢＭＰはＢＭＰ−２であり、その配列は米国特許第５０ １３６４９号に開示されており、その開示を参照により本明細書に開示されてい るものとみなす。当該分野において知られた他のＢＭＰを用いることもできる。 本発明において最も好ましいＢＭＰはＢＭＰ−２である。 ＢＭＰを組み換え的に製造してもよく、あるいは蛋白組成物から精製してもよ い。ＢＭＰはホモダイマーであってもよく、あるいは他のＢＭＰとのヘテロダイ マー（例えば、ＢＭＰ−２およびＢＭＰ−６の各モノマーからなるヘテロダイマ ー）、あるいはアクチビン、インヒビンおよびＴＧＦ−β１のごとき他のＴＧＦ −βスーパーファミリーとのヘテロダイマー（例えば、ＢＭＰおよびＴＧＦ−β スーパーファミリーの関連メンバーの各モノマーからなるヘテロダイマー）であ ってもよい。かかるヘテロダイマーの例は、例えば、公開されたＰＣＴ特許出願 ＷＯ９３／０９２２９に開示されており、参照によりその明細書を本明細書に一 体化させる。 本発明において有用な骨形成蛋白の量は、浸潤しつつある前駆細胞の骨形成活 性増大を剌激するのに有効な量であり、処置すべき欠損のサイズおよび性質なら びに使用担体によるであろう。一般的には、送達すべき蛋白量は約０.０５ない し約１.５ｍｇの範囲である。 好ましい具体例において、腱または靭帯様組織の形成を誘導しうる有効量の蛋 白と一緒に骨形成蛋白を投与する。かかる蛋白は、ＢＭＰ−１２、ＢＭＰ−１３ 、およびＢＭＰ−１２スーパーファミリーの他のメンバー、ならびにＭＰ５２を 包含する。これらの蛋白および腱および靭帯様組織再生のためのそれらの使用は 、１９９４年１２月２２日出願の米国特許出願第０８／３６２６７０号に開示さ れており、その開示を参照により本明細書に記載されているものとみなす。もう １つの好ましい具体例において、一方のモノマーユニットがＢＭＰ−２のごとき 骨形成蛋白であり、他方のモノマーサブユニットがＢＭＰ−１２のごとき腱誘導 性蛋白であるヘテロダイマーを後で説明する方法に従って投与して、結合組織と 骨との間の機能的付着の形成を誘導する。 担体 本発明の実施の際に担体として有用でありうる医薬上許容される材料は、骨形 態形成蛋白に添加された場合、結合組織への骨の付着の再形成部位への適用に適 した取り扱い特性（すなわち、流動性がありすぎて欠損部位に残存しないもので あってはならない）を有するような粘度および極性を有するものである。骨形態 形成蛋白への担体の添加は、浸潤しつつある哺乳動物の前駆細胞の再生的骨形成 活性を通常またはそれ以上に増大させ、新たな組織が増殖しうるスペースを形成 し、細胞の内方増殖を可能にするのに十分な時間、疾病または傷害部位に蛋白を 残留させておくことを可能にする。また担体は、前駆細胞の再生的骨形成活性を 増加させるための適当な時間、骨形態形成蛋白の欠損または傷害部位からの放出 を可能にしうる。 最も好ましい担体のファミリーは、コラーゲン性材料を含む。好ましいコラー ゲン材料は、Collastat^RおよびHelistat^Rコラーゲンスポンジ（Integra LifeSci ences Corp.,Plainsboro,N.J.）を包含する。本発明における使用に適する他の コラーゲン材料は米国特許第５２０６０２８号、米国特許第５０２４８４１号、 米国特許５２５６４１８号に記載されている。好ましくは、コラーゲン担体はス ポンジ形態である。スポンジを所望体積および濃度の蛋白に適当時間浸すことに より投与前にコラーゲンスポンジを蛋白とともに装填してもよい。好ましくは、 約１０％ないし約１５０％（ｖ／ｖ）［蛋白ｍｌ／乾燥スポンジｃｃ］の範囲、 より好ましくは約１０ないし約６０％（ｖ／ｖ）の蛋白にコラーゲンスポンジを 浸す。別法として、製造途中において蛋白をコラーゲンスポンジに吸収させても よい。この場合、好ましくは、製造および凍結乾燥途中において骨形態形成蛋白 をコラーゲンスポンジに添加して均質な製品を得る。好ましくは、約１０ないし 約１５０％（ｖ／ｖ）、より好ましくは約６０ないし約８０％（ｖ／ｖ）の範囲 の割合で蛋白を添加する。本発明に使用してもよい他の形態のコラーゲンはコラ ーゲンゲルおよび架橋ポリマー性コラーゲンである。 骨形態形成蛋白の投与について好ましいもう１つの担体のファミリーは多孔性 粒子状ポリマーであり、米国特許第５１７１５７９号に詳細に記載されており、 その全開示を参照により本明細書に記載されているものとみなす。好ましくは、 多孔性粒子状ポリマーはポリ乳酸とポリグリコール酸とのコポリマーである。好 ましくは、蛋白およびポリマーは、自己由来の血液のごとき隔絶剤により隔絶さ れる。本発明に有用なもう１つの担体は、骨形成蛋白、多孔性粒子状ポリマーお よび別の隔絶剤（例えばセルロース性材料）からなる処方である。他の好ましい 隔絶剤は、ヒアウロン酸、アルギン酸ナトリウム、ポリ（エチレングリコール） 、ポリオキシエチレンオキシド、カルボキシビニルポリマーおよびポリ（ビニル アルコール）を包含する。この具体例について隔絶剤として最も好ましい剤はカ ルボキシメチルセルロースである。これらの組成物は公開されたＰＣＴ出願ＷＯ ９３／０００５０に記載されており、その全開示を参照により本明細書に記載さ れているものとみなす。好ましくは、セルロース性蛋白隔離剤を約１ないし約１ ０％（ｗ／ｖインプラント）の濃度で提供する。多孔性粒子状ポリマー／セルロ ース性隔絶剤をさらに希釈剤としての水性グリセロールと混合してもよく、好ま しくはグリセロール濃度は約１０ないし約８０％（ｖ／ｖ）であり、隔絶剤／液 状溶液：多孔性粒子状ポリマーの割合は好ましくは約０.１ないし約０.９（ｖ／ ｖ）である。あるいはまた、１９９４年９月１９日出願の同時係属出願第０８／ ３０８７８７号（その開示を参照により本明細書に記載されているものとみなす ）に記載のように、多孔性粒子状ポリマーを融合スポンジ中に形成してもよい。 多孔性粒子状ポリマーとともに使用する骨形成蛋白の量は、一般的には、使用組 成物１立法センチメーターあたり蛋白０.０１ないし１ｍｇの範囲、好ましくは 蛋白０.０５ないし０.６ｍｇの範囲である。 もう１つの好ましい担体のファミリーは、メチルセルロース、エチルセルロー ス、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシ プロピルメチルセルロースを包含するアルキルセルロース（ヒドロキシアルキル セルロースを包含）のごときセルロース性材料であり、カルボキシメチルセルロ ース（ＣＭＣ）のカチオン塩が最も好ましい。 セルロース性担体およびコラーゲンゲルの場合、担体が水和セルロース性粘性 ゲルの形態であるのが好ましい。適当時間激しく撹拌することのような機械的手 段の後にオートクレーブすることにより、あるいは化学的に粘度を増大させても よい。好ましくは、ＢＭＰおよびセルロース性担体は適当なバッファー中の溶液 となっている。１の好ましいバッファー溶液は、骨形成蛋白に加えて約１.０な いし約１０.０％（ｗ／ｖ）のグリシン、約０.１ないし約５.０％（ｗ／ｖ）の 糖類、好ましくは蔗糖、約１ないし約２０ｍＭのグルタミン酸塩酸塩、および所 望により約０.０１ないし約０.１％のポリソルベート８０のごとき非イオン性界 面活性剤を含んでなる組成物である。好ましい溶液は約１％ないし約２０％（ｗ ／ｖ）のセルロース性担体／バッファーである。所望ならば、塩類を添加しても よい。好ましい粘性ゲルは下記実施例２に記載されている。粘性ゲル担体ととも に使用する骨形成蛋白の量は、一般的には、必要なインプラント材料１立法セン チメーターあたり約０.０５ないし約１.５ｍｇ、好ましくは約０.１ないし約１. ０ｍｇである。 本発明方法および組成物におけるＢＭＰのための担体として適当である他の材 料は、ヒアルロン酸、外科用メッシュおよび縫合糸、ポリグリコネート、温度感 受性ポリマー、脱無機質化された骨、リン酸カルシウム、ヒドロキシアパタイト 等のごとき無機質およびセラミックス、ならびに上記材料の混合物を包含する。 しかしながら、本発明の１の好ましい具体例においては担体を使用しない。そ のかわり、上記のごとき適当なバッファー中の本発明蛋白を組織修復を要する部 位に直接適用する。例えば、ブラシ、または注射用シリンジのごとき適当なアプ リケーターを用いて蛋白を適用してもよい。別法として、組織修復を要する部位 に蛋白を直接適用してもよい。 以下の実施例は、コラーゲンスポンジ担体中のＢＭＰ−２を用いる本発明具体 例の実施をさらに説明する。実施例は限定的なものではなく、上記説明に従って 当業者により適宜変更されうることが理解されよう。 実施例 実施例１：外科的に作成された骨に対する腱の脱離におけるＢＭＰ−２およびコ ラーゲンスポンジポリマー担体 ２０匹の成体雑種犬を用いた。両膝関節の長い指の伸筋腱をそれらの大腿骨着 点からはずし、ドリル穴を通して近位のけい骨骨幹端に移植した。後ろ足の両膝 関節の長い指の伸筋腱をその大腿骨着点からはずし、骨トンネルを通して近位の けい骨骨幹端に移植した。担体としてタイプＩコラーゲンスポンジを用いて組み 換えヒト・ＢＭＰ−２（ｒｈＢＭＰ−２）を一方の足の腱−骨界面に適用した［ 図１］。対側の足にはｒｈＢＭＰ−２を含まないタイプＩコラーゲンスポンジを 適用した［対照］。 手術中、動物を麻酔した。側方から膝蓋の傍らを切開することにより膝関節に 到達した。長い指の伸筋腱を同定し、次いで、するどく離断することによりその 側方大腿骨関節丘上の着点からはずした。次いで、前のけい骨筋上の筋膜を切開 し、筋肉を横に開いた。直径４.８ｍｍのドリル穴を近位のけい骨骨幹端に骨の 長軸に対して４５°の角度であけた。組み換えヒト・ＢＭＰ−２（ｒｈＢＭＰ− ２）を伴ったHelistat^Rコラーゲンスポンジを装填し、次いではずした腱のまわ りをスポンジで包んだ。ドリル穴から腱の端を手で引っ張り、４−０ステンレス 縫合糸を用いて近位のけい骨中間部の内側の面上に固定した。腱は骨トンネル中 にうまくフィットし、トンネルの全長にわたって骨と接触した。関節嚢、筋膜、 および皮下組織を３−０クロミック糸で縫合し、３−０ステンレス糸で皮膚を縫 合した。次いで、対側の膝について上記手順を行った。足は固定せず、各イヌに 室内を走らせて自由に運動させた。 ２週間目および４週間目に８匹のイヌを屠殺した。８週間目に４匹を屠殺した 。高分解能ラジオグラフを行い、腱−骨界面の顕微鏡切片を工学顕微鏡および偏 光顕微鏡下で試験した。蛍光顕微鏡下でテトラサイクリン標識切片を試験した。 破損に至る最終負荷量についての生体力学的試験を、２週間目および４週間目の 標本について５０.８ｍｍ／秒の引っ張り速度のＭＴＳ材料試験機器により行っ た。破損負荷量を平均し、Studentのｔ試験を用いてｒｈＢＭＰ−２処置側を対 照側と比較した。 結果：一連の組織学的分析により、コラーゲン担体のみを装填された足と比較し て、ｒｈＢＭＰ−２処置した足の腱−骨界面における線維芽細胞のさらなる増殖 、 大きな骨芽細胞様細胞、および新たな骨の柱状構造が明らかとなった。治癒が進 行するにつれ、ｒｈＢＭＰ−２処置した足の界面における新たな骨柱状構造が成 熟し、腱に近接したが、ｒｈＢＭＰ−２を用いない足においては腱と骨トンネル を分離する線維状および顆粒状組織のゾーンが存在した。Von Kossa染色切片お よび蛍光発色標識標本の蛍光顕微鏡により、腱−骨界面において新たに形成され た骨の進行的無機質化が示された。高分解能ラジオグラフにより、４週間目およ び８週間目のｒｈＢＭＰ−２標本において、骨誘導プロセス中にすでに存在して いた層板状の骨が吸収され、新たな骨の進行的無機質化が観察された。コラーゲ ンインプラントに対する宿主の免疫学的応答の証拠はなかった。 最終破壊強度（Ｎ）をペアーで比較することにより、ｒｈＢＭＰ−２処置した 足は、２週間目の標本（ｐ＝０.０３５）および４週間目の標本（ｐ＝０.０５） の両方において有意に強いことが示された。ｒｈＢＭＰ−２処置した足（ｐ＝０ .０２）および対照の足（ｐ＝０.００５）において２週間目から４週間目までの 統計学的に有意な強度の増加が見られた［図２］。 議論：骨形態形成蛋白は、骨トンネル中の腱移植片の治癒を促進する。骨に対す る腱の付着の治癒についての以前の研究により、腱と骨との間の線維状組織界面 が示された。本研究において、ｒｈＢＭＰ−２はこの界面組織においてさらなる 新たな骨の吸収を誘導し、初期の時点において腱と近接して並んだ骨を生じ、ｒ ｈＢＭＰ−２処置した足における腱と骨との間にSharpeyの線維がより規則的に 確立された。固定強度増大は、ｒｈＢＭＰ−２処置した足において見られる骨の 内方増殖の組織学的程度と相関関係がある。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ， ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，Ｌ Ｕ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ， ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＵ，ＣＡ，ＣＮ，ＦＩ，ＨＵ， ＪＰ，ＫＲ，ＮＯ，ＲＵ (71)出願人 ニューヨーク・ソサイアティ・フォー・ ザ・リリーフ・オブ・ザ・ラプチャード・ アンド・クリップルド・メインテイニン グ・ザ・ホスピタル・フォー・スペシャ ル・サージェリー アメリカ合衆国10021ニューヨーク州 ニ ューヨーク、イースト・セブンティース・ ストリート535番 (72)発明者 ウォズニー，ジョン・エム アメリカ合衆国01749マサチューセッツ州 ハドソン、オールド・ボルトン・ロード 59番 (72)発明者 ウォーレン，ラッセル・エフ アメリカ合衆国06831コネチカット州 グ リーンウィッチ、ジョン・ストリート215 番 (72)発明者 ロデオ，スコット・エイ アメリカ合衆国10021ニューヨーク州 ニ ューヨーク、イースト・セブンティファー スト・ストリート310番 (72)発明者 ハナフィン，ジョー・エイ アメリカ合衆国10801ニューヨーク州 ニ ュー・ロチェール、クリントン・アベニュ ー200番

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．結合組織と骨との間の機能的付着の再生方法であって、骨への結合組織の 機能的付着の再生を引き起こすに十分な量の精製骨形態形成蛋白（ＢＭＰ）を含 有する医薬上許容される組成物を機能的付着の再生を必要とする部位に投与する ことを特徴とする方法。 ２．組成物が適当な担体中の組み換えヒト・ＢＭＰ−２を含んでなるものであ る請求項１記載の方法。 ３．担体がコラーゲンスポンジを含んでなるものである請求項２記載の方法。 ４．担体が、 ａ）コラーゲンスポンジ； ｂ）セルロース性粘性ゲル；および ｃ）多孔性粒子状ポリマーおよび隔絶剤 からなる群より選択されるものである請求項２記載の方法。 ５．担体が多孔性粒子状ポリマーを含んでなるものであり、隔絶剤がセルロー ス性材料および自己由来の血液からなる群より選択されるものである請求項４記 載の方法。 ６．該部位における腱または靭帯様組織の形成を誘導しうる蛋白を投与するこ とをさらに特徴とする請求項１記載の方法。 ７．組成物が適当な担体中のＢＭＰ−２およびＢＭＰ−１２を含んでなるもの である請求項６記載の方法。 ８．結合組織と骨との間の機能的付着の再生方法であって、 ａ）ＢＭＰ−２； ｂ）ＢＭＰ−１２；および ｃ）ＢＭＰ−２およびＢＭＰ−１２からなるヘテロダイマー からなる群より選択される１種またはそれ以上のＢＭＰを含有する医薬上許容さ れる組成物を機能的付着の再生を必要とする部位に投与することを特徴とする方 法。 ９．腱と骨との間の機能的付着の再生方法であって、かかる付着の再生を必要 とする部位に有効量の骨形態形成蛋白を含有する医薬上許容される組成物を適用 することを特徴とする方法。 １０．組成物が適当な担体中の組み換えヒト・ＢＭＰ−２を含んでなるもので ある請求項９記載の方法。 １１．担体がコラーゲンスポンジを含んでなるものである請求項１０記載の方 法。 １２．担体が、 ａ）コラーゲンスポンジ； ｂ）セルロース性粘性ゲル；および ｃ）多孔性粒子状ポリマーおよび隔絶剤 からなる群より選択されるものである請求項１０記載の方法。 １３．担体が多孔性粒子状ポリマーを含んでなるものであり、隔絶剤がセルロ ース性材料および自己由来の血液からなる群より選択されるものである請求項１ ２記載の方法。 １４．該部位における腱または靭帯様組織の形成を誘導しうる蛋白を投与する ことをさらに特徴とする請求項９記載の方法。 １５．組成物が適当な担体中のＢＭＰ−２およびＢＭＰ−１２を含んでなるも のである請求項１４記載の方法。 １６．腱と骨との間の機能的付着の再生方法であって、 ａ）ＢＭＰ−２； ｂ）ＢＭＰ−１２；および ｃ）ＢＭＰ−２およびＢＭＰ−１２からなるヘテロダイマー からなる群より選択される１種またはそれ以上のＢＭＰを含有する医薬上許容さ れる組成物をかかる付着の再生を必要とする部位に適用することを特徴とする方 法。